【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、スルフォスチン関連化合物またはその薬理学上許容される塩を有効成分とする２型糖尿病に対する治療剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
血中のインスリン分泌刺激因子ＧＬＰ−１が減少し、膵臓におけるインスリン分泌の減少を来し、生命を脅かす危険に陥ることが知られている。これら血中におけるＧＬＰ−１量減少症状の病態としては２型糖尿病が知られている。
【０００３】
血中におけるＧＬＰ−１量減少の機序は、ＧＬＰ−１がジペプチジルペプチダーゼＩＶ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｖｏｌ．４７，ｐ１２５３，１９９８）によって不活化されることが知られている。
【０００４】
ＧＬＰ−１量減少症の治療剤として既存のものはなく、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤であるＰ３２／９８（２（Ｓ）−Ａｍｉｎｏ−３（Ｓ）−ｍｅｔｈｙｌ−１−（３−ｔｈｉａｚｏｌｉｄｉｎｙｌ）ｐｅｎｔａｎ−１−ｏｎｅ ｆｕｍａｒａｔｅ； Ｄｒｕｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｕｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．２６，ｐ８５９，２００１）およびＮＶＰ−ＤＰＰ７２８（Ｓ）−１−｛２−［２−（４−Ｃｙａｎｏ−ｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ］−ａｃｅｔｙｌ｝−ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２−ｃａｒｂｏｎｉｔｒｉｌｅ； Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ Ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．３６，ｐ１９１，２００１）などが応用されつつある。
【０００５】
スルフォスチンはストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｓｅｓ）属に属す微生物を培養することにより得られ、また類縁化合物も化学的合成によって得られ、これらスルフォスチン関連化合物はジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害活性作用を有したことにより、例えば免疫調節剤、ホルモン調節剤、抗ＨＩＶ薬、抗アレルギー薬、抗炎症薬、抗リウマチ薬などとしての生理活性物質として期待されている（ＷＯ ９９／２５７１９、特開２０００−３２７６８９）。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、新たな２型糖尿病に対する治療剤の提供を目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは鋭意研究を行った結果、イン・ビトロにおいて、一般式（１）で表されるスルフォスチン関連化合物が、ジペプチジルペプチダーゼＩＶによるヒトＧＬＰ−１の分解を阻害したことおよび対照剤Ｐ３２／９８に比べ約１０倍強く阻害したことを確認し、ＧＬＰ−１減少阻害剤となること、さらには２型糖尿病治療剤の有効成分となることを見出した。なお、前記のスルフォスチン関連の公報（ＷＯ ９９／２５７１９、特開２０００−３２７６８９）には、２型糖尿病に対して治療効果を有する旨の示唆はなく、本発明者らによって初めて２型糖尿病治療剤としての有用性を見出したものである。
【０００８】
すなわち、本発明は次の（１）〜（３）に関するものである。
（１）．一般式（１）
【０００９】
【化２】
〔式中、ｎは０〜３の整数を示す。〕
で表わされるスルフォスチン関連化合物またはその薬理学上許容される塩を有効成分とする２型糖尿病治療剤。
（２）． 一般式（１）に於いてｎ＝１〜３を示す化合物である、前記１項に記載の治療剤。
（３）． ２型糖尿病がゴルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）減少症である、１または２項記載の治療剤。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明に於いて２型糖尿病治療剤とは、該薬剤を人体や動物に投与することにより、血中におけるジペプチジルペプチダーゼＩＶを阻害し、インスリン刺激因子ＧＬＰ−１分解を阻害し、ＧＬＰ−１量の減少を抑制して、インスリン分泌刺激活性を維持することにより２型糖尿病を治療する薬剤を示す。
【００１１】
本発明で使用する一般式（１）で表されるスルフォスチン関連化合物はＷＯ９９／２５７１９公報 ないしは特開２０００−３２７６８９公報に記載の製造方法に従って製造して得ることが出来る。
【００１２】
一般式（１）で表される化合物に於いて、ｎは０〜３の整数を示し、好ましくは１〜３を示す化合物が好ましい。また、一般式（１）で表される化合物は、光学活性部位をアミノ基の付け根の環構成炭素（Ｃ）および燐（Ｐ）に有しており、各々の光学異性体およびラセミ体も本願発明の化合物として含まれる。
【００１３】
例えば、一般式（１）で表される化合物の具体例は次のようなものである。
１． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｓ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン
２． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン
（スルフォスチンと命名されている）
３． ３（Ｒ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン
４． ３（Ｒ）−アミノ−１−（（Ｓ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン
【００１４】
５． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−カプロラクタム
６． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｓ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−カプロラクタム
７． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｓ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピロリドン
８． ３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピロリドン
【００１５】
また、本発明に於いて、一般式（１）で表される化合物を２型糖尿病治療剤として用いる際は、薬理学上許容される塩として投与しても良く、かかる塩としては、例えば塩酸、硫酸、燐酸等との無機酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸塩及びＮａ， Ｋ， Ｃａ等の無機金属塩、メチルアミン、エチルアミン、ジエタノールアミン等の有機アミン塩が挙げられる。
【００１６】
上記のスルフォスチン関連化合物またはその薬理学上許容される塩を本発明の２型糖尿病治療剤として適用する場合、製剤化及び投与方法としては従来公知の種々の方法を利用できる。投与方法としては注射、経口、直腸投与などが可能である。製剤形態としては注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤などの形態を採りえる。
【００１７】
製剤化の際にはスルフォスチン関連化合物に悪影響を与えない限り、医薬用に用いられる種々の補助剤、すなわち、担体やその他の助剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等を必要に応じて使用することが出来る。製剤中のスルフォスチン関連化合物またはその薬理学上許容される塩の含量は製剤形態等により広範囲に変えることが可能であり、一般的には製剤はスルフォスチンまたはその塩を０．０１〜１００重量％、好ましくは０．１〜７０重量％含み、残りとしては通常医薬用に使用される担体、その他の補助剤を含む。
【００１８】
スルフォスチン関連化合物またはその塩の投与量は症状により異なるが、成人１人１日当たり０．０１〜８００ｍｇ程度である。連投を必要とする場合には、１日当たりの使用量を抑えることが望ましい。
【００１９】
【実施例】
次に、実施例として本願発明による薬理実験例及び製剤例を示すが本願発明ではこれらに限定されるものではない。
【００２０】
実験例１（ＧＬＰ−１分解阻害試験）
実験方法及び結果：
イン・ビトロにおけるジペプチジルペプチダーゼＩＶによるヒトＧＬＰ−１分解に対するスルフォスチン［３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］ （化合物２）および［３（Ｒ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］ （化合物３）の阻害効果を、Ｏ‘ａｒｔｅらの方法（Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．１４７４，ｐ１３，２０００）に準じて行った。
対照薬としてジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤Ｐ３２／９８（（２（Ｓ）−Ａｍｉｎｏ−３（Ｓ）−ｍｅｔｈｙｌ−１−（３−ｔｈｉａｚｏｌｉｄｉｎｙｌ）ｐｅｎｔａｎ−１−ｏｎｅ ｆｕｍａｒａｔｅ）を用いた。Ｐ３２／９８は文献（Ｄｒｕｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｕｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．２６，ｐ８５９，２００１）記載の製造方法に準じて合成して得ることができる。
【００２１】
検体はあらかじめ精製水に溶解した後、測定した。
アッセイはヘペス緩衝液０．０１５ｍｌに０．５ｍＭヒトＧＬＰ−１（７−３６ Ａｍｉｄｅ、ペプチド研）０．００６ｍｌとジペプチジルペプチダーゼＩＶを含む水溶液０．００３ｍｌを加え、３７℃、１０分間アルミ高温槽で加温し、検体０．００６ｍｌを加え、３７℃で２０分間反応させた。酵素反応後、直ちにあらかじめ３０％アセトニトリル−トリフルオロ酢酸水溶液（ｐＨ２．０）で平衡化したＨＰＬＣ用の逆相ＯＤＳカラム（ＰＥＧＡＳＩＬ、４．６×２５０ｍｍ、センシュー科学製）に吸着させ、アセトニトリルの濃度を直線勾配的に４５％まで上昇させた。ＧＬＰ−１（７−３６アミド）およびその分解産物ＧＬＰ−１（９−３６アミド）の検出は２１０ｎｍで測定した。ＧＬＰ−１分解阻害率は分解産物ＧＬＰ−１（９−３６アミド）のピーク面積の減少率から算出し、各検体につき独立した３回の測定から得られた阻害率を平均した。
その結果を表１に示した。
【００２２】
【００２３】
すなわち、スルフォスチン［３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］および［３（Ｒ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］はともに０．０００１ｍｇ／ｍｌにおいてジププチジルペプチダーゼＩＶによるＧＬＰ−１の分解を９０％以上強く阻害していた。０．００００１ｍｇ／ｍｌにおいてそれぞれ５５．６％および３１．８％の阻害がみられ、０．０００００１ｍｇ／ｍｌでは阻害は弱く、それぞれ２０％未満であった。対照薬であるＰ３２／９８は０．００１ｍｇ／ｍｌにおいて８４．９％と強く阻害し、０．０００１ｍｇ／ｍｌにおいて４２．８％の阻害がみられ、０．００００１ｍｇ／ｍｌでは１９．６％と弱いものであった。このことから、スルフォスチン［３（Ｓ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］および［３（Ｒ）−アミノ−１−（（Ｒ）−アミノ（スルホアミノ）ホスフィニル）−２−ピペリドン］はともに対照薬Ｐ３２／９８に比べ同程度の阻害を示す濃度が１０倍違い、１０倍強力にジペプチジルペプチダーゼＩＶによるＧＬＰ−１の分解を阻害することが明らかとなった。
【００２４】
製剤例１
本発明化合物スルフォスチンを３０％（Ｗ／Ｖ）ポリエチレングリコール４００を含む生理食塩水に溶解して該化合物の０．０５％溶液を調整し、滅菌濾過して、バイアル１個当たり１５ｍｇの化合物を含有する静脈注入用製剤を製造した。
【００２５】
製剤例２
スルフォスチン３０重量部、結晶乳糖１２０部、結晶セルロース１４７部及びステアリン酸マグネシウム３部をＶ型混合機で混合した後、打錠して１錠３００ｍｇの錠剤を得た。
【００２６】
【発明の効果】
本発明により、スルフォスチン関連化合物はジペプチジルペプチダーゼＩＶによるＧＬＰ−１の分解を阻害し、また対照薬Ｐ３２／９２よりも約１０倍強く阻害することが確認され、２型糖尿病治療剤として有用であることが判明した。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a therapeutic agent for type 2 diabetes comprising a sulfostine-related compound or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
[0002]
[Prior art]
It is known that the insulin secretion stimulating factor GLP-1 in the blood decreases, resulting in a decrease in insulin secretion in the pancreas, which poses a life-threatening danger. Type 2 diabetes is known as a pathological condition of the GLP-1 level decrease in blood.
[0003]
It is known that the mechanism of the decrease in the amount of GLP-1 in blood is that GLP-1 is inactivated by dipeptidyl peptidase IV (Diabetes, Vol. 47, p1253, 1998).
[0004]
There is no existing therapeutic agent for GLP-1 hypovolemia, and P32 / 98 (2 (S) -Amino-3 (S) -methyl-1- (3-thiazolidinyl) pentan, a dipeptidyl peptidase IV inhibitor. Drugs of the Future, Vol. 26, p859, 2001) and NVP-DPP728 (S) -1- {2- [2- (4-Cyano-phenylamino) -ethylamine] -pyrrolidine. -2-carbonitrile; Annual Reports In Medicinal Chemistry, Vol. 36, p191, 2001) and the like are being applied.
[0005]
Sulfostin can be obtained by culturing a microorganism belonging to the genus Streptomyces, and analogous compounds can also be obtained by chemical synthesis. These sulfostine-related compounds have a dipeptidyl peptidase IV inhibitory activity, for example, because of their immunity. It is expected as a physiologically active substance as a regulator, hormone regulator, anti-HIV drug, anti-allergic drug, anti-inflammatory drug, anti-rheumatic drug, etc. (WO 99/25719, JP-A-2000-327689).
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a new therapeutic agent for type 2 diabetes.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors have conducted intensive studies and as a result, in vitro, found that the sulfostine-related compound represented by the general formula (1) inhibited the degradation of human GLP-1 by dipeptidyl peptidase IV and showed that the control agent P32 It was confirmed that the inhibition was about 10 times stronger than that of / 98, and it was found to be a GLP-1 decrease inhibitor and further to be an active ingredient of a therapeutic agent for type 2 diabetes. The above-mentioned publication relating to sulfostin (WO 99/25719, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-327689) does not suggest that it has a therapeutic effect on type 2 diabetes, and for the first time, the present inventors have proposed a therapeutic agent for type 2 diabetes. Was found to be useful.
[0008]
That is, the present invention relates to the following (1) to (3).
(1). General formula (1)
[0009]
Embedded image
A therapeutic agent for type 2 diabetes, comprising a sulfostine-related compound represented by the formula or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
(2). 2. The therapeutic agent according to the above item 1, which is a compound showing n = 1 to 3 in the general formula (1).
(3). 3. The therapeutic agent according to claim 1 or 2, wherein the type 2 diabetes is golcagon-like peptide-1 (GLP-1) decrease.
[0010]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
In the present invention, the therapeutic agent for type 2 diabetes refers to a dipeptidyl peptidase IV in blood, an insulin stimulating factor GLP-1 degradation, and a GLP-1 by administering the drug to a human body or an animal. [Fig. 4] Fig. 4 shows an agent for treating type 2 diabetes by suppressing a decrease in the amount and maintaining insulin secretion stimulating activity.
[0011]
The sulfostine-related compound represented by the general formula (1) used in the present invention can be obtained by producing according to the production method described in WO99 / 25719 or JP-A-2000-327689.
[0012]
In the compound represented by the general formula (1), n represents an integer of 0 to 3, preferably 1 to 3. Further, the compound represented by the general formula (1) has an optically active site at the ring-constituting carbon (C) and phosphorus (P) at the base of the amino group. Included as compounds of the invention.
[0013]
For example, specific examples of the compound represented by the general formula (1) are as follows.
1. 1. 3 (S) -amino-1-((S) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone 3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone (named sulfostine)
3. 3. 3 (R) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone 3 (R) -amino-1-((S) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone
5. 5. 3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-caprolactam 6. 3 (S) -amino-1-((S) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-caprolactam 7. 3 (S) -amino-1-((S) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-pyrrolidone 3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-pyrrolidone
In addition, in the present invention, when the compound represented by the general formula (1) is used as a therapeutic agent for type 2 diabetes, it may be administered as a pharmacologically acceptable salt. And inorganic acid salts such as p-toluenesulfonic acid, inorganic metal salts such as Na, K and Ca, and organic amine salts such as methylamine, ethylamine and diethanolamine.
[0016]
When the above-mentioned sulfostine-related compound or a pharmacologically acceptable salt thereof is applied as the therapeutic agent for type 2 diabetes of the present invention, conventionally known various methods can be used for preparation and administration. As an administration method, injection, oral administration, rectal administration and the like are possible. The preparation may take the form of injections, powders, granules, tablets, suppositories and the like.
[0017]
Various auxiliaries used in medicine, such as carriers and other auxiliaries, such as stabilizers, preservatives, soothing agents, emulsifiers, etc., are required as long as they do not adversely affect the sulfostine-related compounds during formulation. Can be used according to The content of the sulfostine-related compound or a pharmacologically acceptable salt thereof in the preparation can be widely varied depending on the preparation form and the like. Generally, the preparation contains 0.01 to 100% by weight of sulfostine or a salt thereof, It preferably contains 0.1 to 70% by weight, and the rest contains carriers and other auxiliaries usually used for medicine.
[0018]
The dosage of the sulfostine-related compound or a salt thereof varies depending on the condition, but is about 0.01 to 800 mg per adult per day. If continuous throwing is required, it is desirable to reduce the daily usage.
[0019]
【Example】
Next, pharmacological experimental examples and preparation examples according to the present invention will be described as examples, but the present invention is not limited thereto.
[0020]
Experimental Example 1 (GLP-1 degradation inhibition test)
Experimental method and results:
Sulfostin [3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone] for human GLP-1 degradation by dipeptidyl peptidase IV in vitro (compound 2) and [3 ( R) -Amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone] (Compound 3) was evaluated by the method of O'art et al. (Biophysica Biochemica et Acta, Vol. 1474, p13, p. 2000).
As a control, dipeptidyl peptidase IV inhibitor P32 / 98 ((2 (S) -Amino-3 (S) -methyl-1- (3-thiazolidinyl) pentan-1-one fumarate) was used. It can be obtained by synthesis according to the production method described in the literature (Drugs of the Future, Vol. 26, p859, 2001).
[0021]
The sample was previously dissolved in purified water and then measured.
In the assay, 0.006 ml of 0.5 mM human GLP-1 (7-36 Amide, Peptide Laboratories) and 0.003 ml of an aqueous solution containing dipeptidyl peptidase IV were added to 0.015 ml of Hepes buffer, and an aluminum high-temperature bath at 37 ° C. for 10 minutes. Then, 0.006 ml of the sample was added, and the mixture was reacted at 37 ° C for 20 minutes. Immediately after the enzymatic reaction, the mixture was immediately adsorbed to a reverse-phase ODS column for HPLC (PEGASIL, 4.6 × 250 mm, manufactured by Senshu Kagaku) equilibrated with a 30% acetonitrile-trifluoroacetic acid aqueous solution (pH 2.0), and the concentration of acetonitrile was measured. Was increased linearly to 45%. Detection of GLP-1 (7-36 amide) and its degradation product GLP-1 (9-36 amide) was measured at 210 nm. The GLP-1 degradation inhibition rate was calculated from the reduction rate of the peak area of the degradation product GLP-1 (9-36 amide), and the inhibition rates obtained from three independent measurements for each sample were averaged.
The results are shown in Table 1.
[0022]
That is, sulfostin [3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone] and [3 (R) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) ) -2-Piperidone] strongly inhibited the degradation of GLP-1 by dipeptidyl peptidase IV by 90% or more at 0.0001 mg / ml. At 0.00001 mg / ml there was 55.6% and 31.8% inhibition, respectively, and at 0.000001 mg / ml the inhibition was weak, each less than 20%. The control drug P32 / 98 strongly inhibited 84.9% at 0.001 mg / ml, showed 42.8% inhibition at 0.0001 mg / ml, and 19.6% at 0.00001 mg / ml. It was weak. This indicates that sulfostins [3 (S) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) phosphinyl) -2-piperidone] and [3 (R) -amino-1-((R) -amino (sulfoamino) ) Phosphinyl) -2-piperidone] showed a 10-fold difference in concentration showing the same level of inhibition as the control drug P32 / 98, and clearly inhibited GLP-1 degradation by dipeptidyl peptidase IV by 10-fold. became.
[0024]
Formulation Example 1
The compound of the present invention, sulfostine, is dissolved in physiological saline containing 30% (W / V) polyethylene glycol 400 to prepare a 0.05% solution of the compound, sterile filtered, and contains 15 mg of the compound per vial. A formulation for intravenous infusion was prepared.
[0025]
Formulation Example 2
30 parts by weight of sulfostine, 120 parts of crystalline lactose, 147 parts of crystalline cellulose, and 3 parts of magnesium stearate were mixed with a V-type mixer, and the mixture was tabletted to obtain a tablet of 300 mg per tablet.
[0026]
【The invention's effect】
According to the present invention, it has been confirmed that a sulfostine-related compound inhibits the degradation of GLP-1 by dipeptidyl peptidase IV and inhibits about 10 times more strongly than the control drug P32 / 92, and is useful as a therapeutic agent for type 2 diabetes. It has been found.