JP2002515590A5

JP2002515590A5 -

Info

Publication number: JP2002515590A5
Application number: JP2000549763A
Authority: JP
Filing date: 1999-05-20
Publication date: 2006-06-22
Anticipated expiration: 2019-05-20

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】試料核酸中の標的核酸配列の存在または非存在を決定する方法であって、該方法は以下の工程：
（a）表面増強共鳴ラマン散乱ＳＥＲ（Ｒ）Ｓ活性種（ＳＡＳ）及び標的結合種（ＴＢＳ）と結合した金属表面を含む検出剤に、試料をさらす工程（ＴＢＳは標的配列の全部または一部と相補する核酸または核酸アナログを含むものであり、本工程で検出剤は、各々異なるＴＢＳを有する第１の薬剤と第２の薬剤を含み、各ＴＢＳは標的配列に結合することができるものであり、第１と第２のＴＢＳの標的配列への結合により、各ＴＢＳに結合した金属表面を近接させ、それにより金属表面の一方または両方と結合したＳＡＳの表面増強をもたらす）、
（b）標識の何らかの表面増強を検出するために、ＳＥＲ（Ｒ）Ｓを用いて試料／薬剤混合物を観察する工程、
を含む方法。
【請求項２】工程（a）の検出剤中に存在するとき、金属表面自体では表面増強が可能でない、請求項１記載の方法。
【請求項３】検出剤が、２以上の別の成分として工程（a）中の試料にさらされるものである、請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】検出剤がＴＢＳと結合したモノ分散非凝集コロイド金属粒子を含み、ＴＢＳは標的配列の全部または一部と相補する核酸または核酸アナログを含むものである、請求項１ないし３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】ＴＢＳがプロパルギルアミノ修飾核酸またはペプチド核酸を含むものである、請求項４記載の方法。
【請求項６】金属コロイド粒子あたり１、２、３、４、５、１０、または２０を超えるＴＢＳが存在する、請求項４または５記載の方法。
【請求項７】金属表面に対するＳＡＳ及び／又はＴＢＳの化学吸着を促進するために、表面探査基（ＳＳＧ）が用いられるものである、請求項１ないし６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】ＳＳＧがトリアゾール基、より好ましくはベンゾトリアゾール基を含むものである、請求項７記載の方法。
【請求項９】ＳＳＧが、ＳＡＳである染料により修飾されている請求項７又は８記載の方法。
【請求項１０】修飾ＳＳＧがアゾベンゾトリアゾールである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】修飾ＳＳＧが、金属表面にＴＢＳを結合させるために用いられる請求項９又は１０記載の方法。
【請求項１２】修飾ＳＳＧが連結基を介してＴＢＳに接合している請求項１１記載の方法。
【請求項１３】ＳＡＳがＴＢＳよりも２、５、１０、２０、３０、４０、５０又は１００倍過剰を上回って存在する、請求項１ないし１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】識別可能なＳＡＳを有する複合結合薬剤を用いて１つを上回る標的配列が決定されるものである、請求項１ないし１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】標的配列が配列同一性を共有し、かつ共通の第１の薬剤が、残りの標的配列を識別することができる特異的識別可能な第２の薬剤とともに用いられる、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】生物の存在検出、選択、又は同定、又は系統的分類の方法であって、該方法は請求項１ないし１５のいずれか１項記載の方法の使用を含み、標的核酸配列はその生物に関連している方法。
【請求項１７】請求項１ないし１６のいずれか１項記載の方法の使用を含み、標的核酸配列はその疾患に関連している、疾患の診断方法。
【請求項１８】請求項１ないし１７のいずれか１項記載の方法の使用を含み、標的核酸配列はその遺伝子に関連しているかその内部にある配列に相当するものである、特定の遺伝子をコードする核酸を単離する方法。
【請求項１９】非凝集金属粒子を表面増強共鳴ラマン散乱ＳＥＲ（Ｒ）Ｓ活性種（ＳＡＳ）及びＴＢＳと配合する工程（各ＴＢＳは標的配列の全部または一部と相補する核酸または核酸アナログを含むものである）を含み、それにより上記ＳＡＳとＴＢＳは金属表面に対する化学吸着を促進するために用いられる表面探査基（ＳＳＧ）を介して上記金属粒子に結合するものである、検出剤（検出剤は、各々異なる標的結合種（ＴＢＳ）を有する第１の薬剤と第２の薬剤を含み、各ＴＢＳは標的配列の全部又は一部に結合することができるものである）を生産する方法。
【請求項２０】金属表面に対する化学吸着を促進するために用いられる表面探査基（ＳＳＧ）を介してＳＥＲ（Ｒ）Ｓ活性種（ＳＡＳ）と標的結合種（ＴＢＳ）に結合している非凝集金属粒子を含む（ＴＢＳは、標的配列の全部または一部と相補する核酸または核酸アナログを含むものであり、本工程で検出剤は、各々異なるＴＢＳを有する第１の薬剤と第２の薬剤を含み、それにより上記ＳＡＳとＴＢＳは金属表面に対する化学吸着を促進するために用いられる表面探査基（ＳＳＧ）を介して上記金属粒子に結合するものである）、検出剤。
【請求項２１】各々が識別可能なＳＡＳを有する、請求項２０記載の２つ以上の検出剤を含む組成物。
【請求項２２】請求項２０又は２１記載の薬剤又は組成物に加えて核酸試料を含むシステム。
【請求項２３】ＳＥＲＲＳ分析器に加え、請求項２０ないし２２のいずれか１項記載の薬剤、組成物又はシステムを含む装置。
【請求項２４】含む請求項１ないし１８のいずれか１項記載の方法における請求項２３記載の装置の使用。
【請求項２５】請求項２０又は２１記載の薬剤又は組成物と、請求項１ないし１８のいずれか１項記載の方法を実施するための１つの付加的な材料を含むキット。