JP2002505742A - 中間統計データに基づいて試料を特徴付けする方法 - Google Patents
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- 【特許請求の範囲】 1. ユニットを含む試料を特徴づける方法であって、 a)少なくとも1つの測定容積内の前記ユニットによって発光され、散乱され 、および/または反射された放射の強度揺らぎを前記ユニットによって発光され 、散乱され、および/または反射された放射を検出することができる検出手段に よってモニターし、 b)前記強度揺らぎから少なくとも2次元同時統計関数からなる中間統計デー タを求め、 c)前記中間統計データからユニットの同時分布に関する情報を決定するステ ップを含む方法。 2. 前記ステップc)において、少なくとも2つの物理的性質の特定の組み合 わせを有する、少なくとも1つのユニットまたはユニットの種の存在、または欠 如、または濃度が求められる請求項1の方法。 3. 前記ステップc)において、少なくとも2つの特定の物理的性質の関数と してユニットの同時分布が前記中間統計データから求められる請求項1および/ または請求項2の方法。 4. 前記ステップc)において、前記同時分布の関数が求められる請求項1乃 至請求項3のうちの少なくとも1つの方法。 5. ステップb)における前記中間統計データは強度揺らぎから直接、若しく は強度の局所的な統計関数の揺らぎから導かれるものである請求項1乃至請求項 4のうちの少なくとも1つの方法。 6. 前記強度揺らぎは、与えられた長さにおける、好ましくは連続したところ の、時間間隔での光子計数の数を決めることについてモニターされる請求項1乃 至請求項5のうちの少なくとも1つの方法。 7. 前記強度揺らぎは光子の到着時間および/または連続した光子計数の所定 数の間の時間間隔の長さを決めることについてモニターされる請求項1乃至請求 項6のうちの少なくとも1つの方法。 8. 前記中間統計データはさらに1次元統計関数を含む請求項1乃至請求項7 のうちの少なくとも1つの方法。 9.少なくとも前記同時統計関数の1つの独立変数(arguments)は時間である請 求項1乃至請求項8のうちの少なくとも1つの方法。 10.前記同時統計関数の少なくとも1つの独立変数は、所定長さの時間間隔ま たは連続した光子計数の所定数の間の時間間隔の長さにおける光子計数の数であ る請求項1乃至請求項9のうちの少なくとも1つの方法。 11.前記同時統計関数の少なくとも1つの独立変数は、確率関数若しくは相関 関数の数学的変換の独立変数のクラスに帰属する請求項1乃至請求項10のうち の少なくとも1つの方法。 12.前記中間統計データは、光子計数の数の無条件分布および条件分布、光子 計数の間の時間間隔の長さの分布、自己相関関数、相互相関関数、及びそれらの 組合せからなる群の1つから選択されるものである請求項1乃至請求項11のう ちの少なくとも1つの方法。 13.前記ユニットは固体、液体、気体中における粒子、分子、集合、小胞、細 胞、ウイルス、バクテリア、ビーズ、中心、またはそれらの混合物である請求項 1乃至請求項12のうちの少なくとも1つの方法。 14.前記ユニットは少なくとも1つの特定の物理的性質によって区別できる種 にグループ化される請求項1乃至請求項13のうちの少なくとも1つの方法。 15.少なくとも1つの種は発光、好ましくは蛍光である、および/または発光 ラベルされており、かつ少なくとも1つの検出手段が発光強度の揺らぎをモニタ ーする請求項1乃至請求項14のうちの少なくとも1つの方法。 16.前記ユニットを特徴づける特定の物理的性質の少なくとも1つは、拡散係 数、放射強度揺らぎの相関時間、または前記拡散係数に直接関する他の性質であ る請求項1乃至請求項15のうちの少なくとも1つの方法。 17.前記ユニットを特徴づける特定の物理的性質の少なくとも1つは、比明度 である請求項1乃至請求項16のうちの少なくとも1つの方法。 18.前記蛍光ユニットを特徴づける特定の物理的性質の少なくとも1つは、そ れらの蛍光の極性率、蛍光異方性、蛍光の極性の程度を示す他の性質である請求 項1乃至請求項17のうちの少なくとも1つの方法。 19.前記蛍光ユニットを特徴づける特定の物理的性質の少なくとも1つは、異 なる励起波長および/若しくは蛍光検出における異なる分光感度に対応した蛍光 強度の比率、または励起および/若しくは検出の波長における蛍光強度の依存性 を示す他の性質である請求項1乃至請求項18のうちの少なくとも1つの方法。 20.前記蛍光ユニットを特徴づける特定の物理的性質の少なくとも1つは、蛍 光の寿命である請求項1乃至請求項19のうちの少なくとも1つの方法。 21.前記ユニットの特定の物理的性質、特に蛍光寿命若しくは蛍光異方性の如 き発光性質は、それらを、異なるリンカー分子を介して特定の発光物質とコンジ ュゲートさせることで変化させられる請求項1乃至請求項20のうちの少なくと も1つの方法。 22.前記ユニットの発光性質は、それらを、発光ラベルされた第2の分子、特 に、発光ラベルされたアビジン若しくはストレプトアビジンと結合する第1の分 子、特にビオチンとコンジュゲートさせることで変化させられる請求項1乃至請 求項21のうちの少なくとも1つの方法。 23.ユニットの発光性質は、前記ユニットに吸収されるエネルギーがアクセプ ターユニットの発光物質近くに接触して転送され、続いて発光するエネルギー転 送によって変化する請求項1乃至請求項22のうちの少なくとも1つの方法。 24.ハイ・スループットのスクリーニング、診断、高分子化のモニター、凝集 および分解処理、粒子分級、核酸配列決定に使用される請求項1乃至請求項23 のうちの少なくとも1つの方法。 25.前記中間統計データは前記試料の前情報を用いて合わせられる請求項1乃 至請求項24のうちの少なくとも1つの方法。 26.前記統計データは、線型正則化および/または拘束をもった多次元逆変換 を適用して処理される請求項1乃至請求項25のうちの少なくとも1つの方法。 27.前記測定容積は前記試料の全容積の一部にすぎず、かつ10-12リットル 以下、好ましくは10-14リットル以下の体積を有する請求項1乃至請求項26 のうちの少なくとも1つの方法。
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