JP2002000193A

JP2002000193A - 乳塩基性シスタチン高含有画分及びその分解物の製造法

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Publication number: JP2002000193A
Application number: JP2000184349A
Authority: JP
Inventors: Yukihiro Takada; 幸宏高田; Atsushi Serizawa; 篤芹澤; Yasuhiro Matsuoka; 康浩松岡; Yasuhiro Toba; 保宏鳥羽; Hiroshi Kawakami; 浩川上
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 2000-06-20
Filing date: 2000-06-20
Publication date: 2002-01-08
Anticipated expiration: 2020-06-20
Also published as: JP4647750B2

Abstract

(57)【要約】【課題】骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等
の骨関節疾患並びに歯周病等の予防及び改善のための飲
食品、医薬及び飼料への使用に適する乳塩基性シスタチ
ン高含有画分及びその分解物の提供。【解決手段】乳由来の塩基性タンパク質画分を、必要
に応じて、加熱し、生じた沈殿を除去して得られる上清
を回収し、この上清にアルコールを添加し、生じた沈殿
を除去して乳塩基性シスタチン高含有画分を回収し、ヘ
パリン等の含硫酸基担体と接触させて担体に吸着しない
画分を回収し、この画分を分画分子量10〜50kDa の限外
濾過膜で処理して透過液を回収して乳塩基性シスタチン
高含有画分を製造する。また、この乳塩基性シスタチン
高含有画分をプロテアーゼで分解してシスタチン高含有
画分分解物を製造する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、乳由来の塩基性タ
ンパク質画分より乳塩基性シスタチン高含有画分を製造
する方法に関する。また、本発明は、得られた乳塩基性
シスタチン高含有画分をプロテアーゼで分解することに
よって乳塩基性シスタチン高含有画分分解物を製造する
方法に関する。さらに、本発明は、これらの乳塩基性シ
スタチン高含有画分及び／又は乳塩基性シスタチン高含
有画分分解物を配合し、必要に応じてカルシウム及び／
又はビタミンを配合した骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリ
ウマチ等の骨関節疾患並びに歯周病の予防及び改善のた
めの飲食品、医薬又は飼料に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、高齢化に伴い、骨粗鬆症、骨折及
び腰痛等の各種骨疾患が増加している。骨組織において
は、絶えず骨形成と骨吸収が営まれており、若い時には
骨形成と骨吸収のバランスがとれているが、加齢に伴い
種々の原因でそのバランスが骨吸収に傾く。これが、長
期間続くと骨組織が脆くなり、骨粗鬆症、骨折及び腰痛
等の各種骨疾患を生じることになる。この骨吸収に傾く
アンカップリングを防ぐことができれば、各種骨疾患を
予防できると考えられている。従来より、各種骨疾患の
予防及び治療の方法として、1)食事によるカルシウムの
補給、2)軽い運動、3)日光浴、4)薬物投与等が行われて
きた。食事によるカルシウムの補給には、炭酸カルシウ
ム及びリン酸カルシウム等のカルシウム塩や牛骨粉、卵
殻及び魚骨粉等の天然カルシウムが用いられている。軽
い運動については、軽いランニングや散歩等が良いとさ
れているが、体が弱っていると軽い運動もやっかいなも
のとなり、ましてや寝たきりの老人になると殆ど運動す
ることができなくなる。３番目の日光浴は、活性化ビタ
ミンＤ₃の補給という点では良いとされているが、これ
だけでは不十分である。最後の薬物投与においては、１
α−ヒドロキシビタミンＤ₃、カルシトニン製剤等が骨
粗鬆症の治療及び改善に有効であることが知られてい
る。なお、リウマチ等の骨関節疾患や歯周病も、最終的
には骨吸収が起こることから、骨吸収を抑えることによ
りこれらの改善ができるものと考えられている。

【０００３】本発明者らは、このような各種骨疾患及び
骨関節疾患並びに歯周病の予防及び治療に有効な物質を
得るために、乳清タンパク質中の骨芽細胞増殖因子及び
骨吸収防止因子並びに骨強化作用を有する画分の探索を
続けてきた。すなわち、乳、特に乳清タンパク質を分画
し、破骨細胞の骨吸収を抑制する作用を有する画分を分
画することを試みた。その結果、乳清タンパク質中の水
溶性画分を逆浸透膜や電気透析膜等で処理して脱塩する
ことにより得られるタンパク質及びペプチド混合物に骨
強化作用があることを見出した（特開平4-183371号公
報) 。そして、このタンパク質及びペプチド混合物の水
溶液をエタノール処理、加熱処理、加塩処理、限外濾過
膜処理等をして得られる画分に骨強化作用があることを
見出した (特開平5-176715号公報、特開平5-320066号公
報) 。また、本発明者らは、乳中に微量存在する塩基性
タンパク質に骨芽細胞におけるコラーゲン合成促進作用
及び骨吸収防止作用があることを見出した（特開平7-20
7509号公報) 。

【０００４】一方、シスタチンは、システインプロテア
ーゼインヒビターとして、活性中心にＳＨ基を持つシス
テインプロテアーゼのタンパク質分解活性を阻害する物
質であり、動物組織、細胞、血液及び尿中に見出されて
いる。また、シスタチンの有用な作用として、ウイルス
の増殖阻害作用が確認されている(Biochem. Biophys.Re
s. Commun., vol.127, p.1072, 1985) 。近年、高齢化
の進行に伴い、破骨細胞の骨吸収に起因する骨粗鬆症が
急増している。現在、破骨細胞の骨吸収を抑える医薬と
して、カルシトニン製剤が知られている。しかし、この
カルシトニン製剤は、医薬品として使用されるホルモン
製剤であり、食品素材として使用することができる安全
な物質については、検討がなされていないのが現状であ
る。なお、動物組織、細胞、血液及び尿からは、食品素
材として使用することができるシスタチンを大量に得る
には至っていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、骨吸収
抑制作用を有する塩基性タンパク質について、骨吸収抑
制作用を有する活性本体の分離精製を試み、分離精製し
た物質を同定したところ、この物質が乳塩基性シスタチ
ンであることを確認した。また、この乳塩基性シスタチ
ンが、乳以外に由来する他の種やタイプのシスタチンに
比べて、特異的に破骨細胞の骨吸収を抑制する作用があ
ることも見出した（特願平11-89946号）。このような現
状から、食品素材として使用することができる乳塩基性
シスタチンを大量に、しかも安価に製造する方法が求め
られている。そこで、本発明では、乳由来の塩基性タン
パク質画分から塩基性シスタチン高含有画分を製造する
方法を提供することを課題とする。また、乳塩基性シス
タチン高含有画分のプロテア−ゼ分解物にも骨吸収抑制
作用があることが判っているので、本発明では、乳塩基
性シスタチン高含有画分分解物を製造する方法を提供す
ることも課題とする。さらに、本発明では、乳塩基性シ
スタチン高含有画分や乳塩基性シスタチン高含有画分分
解物を配合した、骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ
等の骨関節疾患並びに歯周病の予防及び改善のための飲
食品、医薬又は飼料を提供することを課題とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、乳由来の塩基
性タンパク質画分を、必要に応じて、好ましくは80℃以
上に加熱し、生じた沈殿を除去して上清を回収し、この
上清にアルコールを好ましくは濃度70％となるように添
加し、生じた沈殿を除去して乳塩基性シスタチン高含有
画分を回収し、ヘパリン等の含硫酸基担体と接触させて
担体に吸着しない画分を回収し、この画分を分画分子量
10〜50kDa の限外濾過膜で処理して透過液を回収して、
乳塩基性シスタチン高含有画分を製造することを特徴と
する。また、本発明は、上記の方法で製造された乳塩基
性シスタチン高含有画分をさらにプロテアーゼで分解し
た乳塩基性シスタチン高含有画分分解物を製造すること
を特徴とする。さらに、本発明は、上記の方法で製造さ
れた乳塩基性シスタチン高含有画分及び／又は乳塩基性
シスタチン高含有画分分解物を配合し、さらに必要に応
じてカルシウム及び／又はビタミンを配合した、骨粗鬆
症等の各種骨疾患及びリウマチ等の骨関節疾患並びに歯
周病の予防及び改善のための飲食品、医薬又は飼料を特
徴とする。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明では、乳から安全で、しか
も大量に、乳塩基性シスタチン高含有画分を製造するこ
とができる。乳としては、生乳、粉乳、脱脂粉乳及び還
元乳等が用いられる。また、本発明の乳塩基性シスタチ
ン高含有画分分解物は、乳塩基性シスタチン高含有画分
をトリプシン、キモトリプシン、ペプシン、パパイン、
カリクレイン、カテプシン、サーモライシン、Ｖ８プロ
テアーゼ等のプロテアーゼで限定分解したペプチド混合
物である。さらに、本発明は、このような乳塩基性シス
タチン高含有画分及び／又は乳塩基性シスタチン高含有
画分分解物を飲食品、医薬、飼料等に配合したものであ
る。すなわち、牛乳、乳飲料、ジュース、ゼリー、ビス
ケット、パン、麺、ソーセージ等の飲食品に配合すれば
良く、錠剤や粉末、あるいは歯磨き剤やうがい薬等の医
薬としても良く、飼料に配合しても良い。

【０００８】なお、本発明の骨粗鬆症等の各種骨疾患及
びリウマチ等の骨関節疾患並びに歯周病の予防及び改善
のための飲食品、医薬又は飼料には、吸収性の良好なカ
ルシウムを配合することが望ましい。このような吸収性
の良好なカルシウムとしては、塩化カルシウム、炭酸カ
ルシウム、乳酸カルシウム、卵殻、あるいは、乳由来の
カルシウムを例示することができる。また、ビタミンＤ
やビタミンＫ等の骨形成に有効なビタミンを配合するこ
とが望ましい。これらのカルシウム及びビタミンは、乳
塩基性シスタチンと作用機作が異なるため、骨形成に関
して相乗的に効果がある。そして、乳塩基性シスタチン
は、熱安定性が高く、食品加工上、極めて優れた性質を
有するものである。本発明においては、成人の場合、１
日当たり１μg から100mg の乳塩基性シスタチン高含有
画分及び／又は乳塩基性シスタチン高含有画分分解物を
数回に分けて摂取すれば良い。このようにすることによ
り、骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等の骨関節疾
患並びに歯周病を予防及び改善することができる。次
に、実施例を挙げて、本発明を詳しく説明する。

【０００９】

【実施例１】スルホン化キトパール3,000gを充填し、脱
イオン水で充分洗浄したカラムに脱脂乳10,000ｌを通液
し、脱イオン水で充分カラムを洗浄した後、0.1 〜1.0M
塩化ナトリウムの直線濃度勾配で溶出し、凍結乾燥し
て、乳由来の塩基性タンパク質画分の粉末を得た。この
乳由来の塩基性タンパク質画分の粉末200gを濃度１％と
なるように酢酸緩衝液（pH５）で溶解してヘパリン固定
化カラムに通液し、さらに酢酸緩衝液（pH５）20 lを通
液して素通り画分40 lを得た。この画分を限外濾過膜処
理（50kDa カット）して20倍に濃縮し、その際に得られ
た透過液を限外濾過膜処理（10kDa カット）して10倍に
濃縮し、乳塩基性シスタチン高含有画分を得、これを凍
結乾燥して乳塩基性シスタチン高含有画分の粉末60g を
得た。なお、この画分中の乳塩基性シスタチン含量は1.
8 ％であった。

【００１０】

【実施例２】スルホン化キトパール3,000gを充填し、脱
イオン水で充分洗浄したカラムに脱脂乳10,000ｌを通液
し、脱イオン水で充分カラムを洗浄した後、0.1 〜1.0M
塩化ナトリウムの直線濃度勾配で溶出し、凍結乾燥し
て、乳由来の塩基性タンパク質画分の粉末を得た。この
乳由来の塩基性タンパク質画分の粉末２kgを５％濃度で
溶解し、80℃、15分間加熱して遠心分離により上清を得
た。この上清38kgを５℃に冷却した後、最終濃度40％と
なるようにエタノールを添加し、５℃で６時間後に遠心
分離して沈殿を除去した。さらに、この上清に最終濃度
70％となるようにエタノールを添加し、５℃で12時間後
に遠心分離して乳塩基性シスタチン高含有画分240g（サ
ンプルＡ）を得た。なお、この画分中の乳塩基性シスタ
チン含量は0.7 ％であった。この乳塩基性シスタチン高
含有画分200gを濃度１％となるように酢酸緩衝液（pH
５）で溶解してヘパリン固定化カラムに通液し、さらに
酢酸緩衝液（pH５）20lを通液して素通り画分40 lを得
た。この画分を限外濾過膜処理（50kDa カット）して20
倍に濃縮し、その際に得られた透過液を限外濾過膜処理
（10kDa カット）して10倍に濃縮し、乳塩基性シスタチ
ン高含有画分を得、これを凍結乾燥して乳塩基性シスタ
チン高含有画分の粉末65g （サンプルＢ）を得た。な
お、この画分中の乳塩基性シスタチン含量は2.2 ％であ
った。

【００１１】

【実施例３】実施例２で得られた乳塩基性シスタチン高
含有画分の粉末１g を水 100mlに懸濁し、最終濃度が１
重量％となるようにパンクレアチンを加えて、37℃で５
時間酵素処理した。そして、90℃で５分間加熱処理して
酵素を失活させた後、凍結乾燥し、乳塩基性シスタチン
高含有画分分解物0.91g （サンプルＣ）を得た。

【００１２】

【試験例１】生後10〜20日齢のＩＣＲ系マウスの長管骨
を摘出し、軟組織を除去した後、５％牛胎児血清を含む
α−ＭＥＭ溶液中で長管骨を機械的に細切し、破骨細胞
を含む全骨髄細胞を得た。この細胞について、約 200万
細胞を５％牛胎児血清を含むα−ＭＥＭ溶液で象牙片の
上にスポットした。数時間後、サンプルを添加した５％
牛胎児血清を含むα−ＭＥＭ溶液を加えて、３日間培養
し、破骨細胞の骨吸収活性を調べた。骨吸収活性の評価
は、培養後に象牙片上の細胞を剥がして、ヘマトキシリ
ン染色し、PIASLA-555により画像解析して、骨吸収窩(p
it) の数をカウントすることにより行った。この結果、
実施例２及び３で得られたサンプルＡ〜Ｃについて、そ
れぞれ500ng/mlの濃度のサンプル溶液を調製し、骨吸収
活性を調べた。すなわち、各サンプルを加えて細胞を培
養した時の骨吸収窩(pit) の数をカウントし、サンプル
を加えずに細胞を培養した時の骨吸収窩(pit) の数を10
0 ％として骨吸収活性を表し、表１に示した。

【００１３】

【表１】 ───────────────────── 試験試料骨吸収活性（％，±SD） ───────────────────── サンプルＡ 81.3±3.9 サンプルＢ 70.4±5.6 サンプルＣ 61.5±3.2 ─────────────────────

【００１４】表１からみると、乳塩基性シスタチン高含
有画分及び乳塩基性シスタチン高含有画分分解物に骨吸
収活性を抑制する効果があることが判った。但し、セタ
ノール処理したサンプルＡは本発明方法であるサンプル
Ｂ、Ｃほど骨吸収活性抑制効果はなかった。

【００１５】

【試験例２】実施例２で得られたサンプルＢ及び実施例
３で得られたサンプルＣについて、骨粗鬆症モデルラッ
トを用いた動物実験を行った。なお、ラットに投与した
飼料の基本組成を表２に示す。飼料中のカルシウム量と
リン量は共に全ての群で飼料100g当たり300mg になるよ
うに、カルシウム：リン比を１：１とした。

【００１６】

【表２】 ────────────────────────── 蔗糖 50.0 （重量％）カゼイン 20.0 コーンスターチ 15.0 セルロース 5.0 トウモロコシ油 5.0 ビタミン混合（コリン含む） 1.0 ミネラル混合（注１） 4.0 ────────────────────────── 1) 炭酸カルシウムをカルシウム源とした。

【００１７】表２に示した基本組成の飼料に、サンプル
Ｂ又はＣを添加し、以下の試験食を調製した。試験食１：表２に示した基本組成の飼料＋サンプルＢ
（0.01mg／100g）試験食２：表２に示した基本組成の飼料＋サンプルＣ
（0.01mg／100g）試験食３：表２に示した基本組成の飼料（ただし、カル
シウム源として、炭酸カルシウムに代えて乳由来のカル
シウム（特開平4-306622号公報）を使用）＋サンプルＢ
（0.01mg／100g）

【００１８】動物は、40週齢のＳＤ系雌性ラットを用い
た。骨粗鬆症モデルラットは、１週間予備飼育した後に
卵巣摘出手術を施し、低カルシウム食で２ケ月間飼育す
ることにより作成した。その時、疑似手術を施し、卵巣
を摘出しないラットも作成した。そして、１試験群７匹
で群分けし、各試験食を１ケ月間投与した。なお、擬似
手術を施し、卵巣を摘出しないラットを用いた群（シャ
ム群）及び対照群には、表２に示した基本組成の飼料を
投与した。試験食投与後、各試験群のラットの大腿骨を
摘出し、骨塩量測定装置で骨塩量を測定し、破断特性測
定装置で骨強度を測定した。試験結果を表３及び表４に
示す。

【００１９】

【表３】 ──────────────────────── 試験群骨塩量（mg，±SD） ──────────────────────── シャム群 120.2 ± 3.9 対照群 83.5 ± 4.9 試験食１投与群 104.7 ± 3.6 試験食２投与群 106.3 ± 4.1 試験食３投与群 111.3 ± 3.1 ────────────────────────

【００２０】表３に示したように、大腿骨の骨塩量は、
対照群に比べて試験食投与群で統計的に有意に高い値を
示した。このことから、サンプルＢ及びＣには骨吸収防
止作用があることが判った。また、吸収性の良い乳由来
のカルシウムを添加することにより、さらに作用が増強
することが判った。

【００２１】

【表４】 ────────────────────── 試験群骨破断力（10⁶dyn） ───────────────────── シャム群 13.3 ± 3.6 対照群 6.7 ± 2.3 試験食１投与群 10.4 ± 2.9 試験食２投与群 10.9 ± 2.4 試験食３投与群 11.9 ± 3.1 ──────────────────────

【００２２】表４に示したように、骨破断力は、対照群
に比べて試験食投与群で統計的に有意に高い値を示し
た。このことから、サンプルＢ及びＣには骨強化作用が
あることが判った。また、吸収性の良い乳由来のカルシ
ウムを添加することにより、さらに作用が増強すること
が判った。

【００２３】

【試験例３】表５に示した基本組成の水溶液に、サンプ
ルＢ（0.01mg／100g）及びビタミンＤ（200IU ）を添加
して混合し、容器に充填した後、加熱滅菌して飲料（試
験品）を製造した。なお、サンプルＢに代えてアルブミ
ン（0.01mg／100g）を添加した飲料（対照品）も同様に
製造した。

【００２４】

【表５】 ────────────────────── 結晶ブドウ糖 15.0 （重量％）カルシウム 0.5 水 74.5 ──────────────────────

【００２５】変形性関節症（関節の開裂の収縮）の患者
16人を８人ずつ２群に分け、上記各飲料を１ヶ月間飲用
してもらい、飲用前と飲用後の骨吸収の骨代謝マーカー
である尿中デオキシピリジノリン量を測定した。また、
問診により自覚症状を確認した。試験結果を表６及び表
７に示す。

【００２６】

【表６】 ────────────────────────────── デオキシピリジノリン減少量（mg, ±SD） ────────────────────────────── 対照品投与群 0.29 ± 0.2 試験品投与群 0.78 ± 0.2 ──────────────────────────────

【００２７】表６に示すように、カルシウム及びビタミ
ンを配合した対照品投与群でもデオキシピリジノリン量
が減少したものの、試験品投与群ではさらに大きく減少
した。このことから、サンプルＢにより、骨の破壊によ
る骨吸収が極めてよく抑制されていることが判った。

【００２８】

【表７】 ───────────────────────────────── 投与前後の各項目の関節痛患者数（人） ───────────────────── 対照品投与群試験品投与群前後前後 ──────────────────────────────── 物理的圧迫の関節痛 8 8 8 5 動作時の関節痛 6 5 6 3 就寝時の関節痛 5 4 5 2 疲労時の関節痛 8 7 8 6 脱力感 5 5 4 3 開裂全体の関節痛 6 6 7 6 ────────────────────────────────

【００２９】表７に示すように、関節痛についても、各
項目について痛みが軽減していることが判る。

【００３０】

【試験例４】６週齢のゴールデンハムスターを１週間予
備飼育した後、エーテル麻酔下でM1の歯頸部に滅菌した
手術用縫合絹糸No４を５重に巻き付け、Keyes らの飼料
（D#2000:Keyes,P.H. and Jordan:Archs. Oral.Biol,vo
l.9,pp.377-400,1964) で飼育することにより、歯周病
を発病させた。ハムスター18匹を１試験群とし、サンプ
ルＡ、Ｂ又はＣ10μｇを適当に希釈した試験液で、１日
２回、口腔内を約10分間絶えず浸す処置を行った。な
お、対照群は、蒸留水で処置を行った。処置開始４週間
後に、2.5 ％グルタルアルデヒド溶液（pH7.4 ）を用い
て約20分間固定灌流した後、下顎骨両側を摘出した。歯
槽骨減少量の評価は、2.5 ％グルタルアルデヒド溶液で
固定した後、軟Ｘ線撮影を行った写真を画像解析装置
（PIAS LA-555)で解析し、M1付近のエナメルセメント境
と歯槽骨頂間の面積を計測して、歯槽骨減少量を評価し
た。その試験結果を表８に示す。

【００３１】

【表８】 ──────────────────────────────────── 処置対照群試験群Ａ試験群Ｂ試験群Ｃ開始後（サンフ゜ルＡを使用）（サンフ゜ルＢを使用）（サンフ゜ルＣを使用） ──────────────────────────────────── 減少面積（mm²）５日 0.27 0.21^* 0.18^* 0.15^* ８日 0.84 0.61^* 0.53^* 0.44^* ──────────────────────────────────── ^*対照群に対して有意差あり（Ｐ＜0.05）

【００３２】表８によると、対照群に比べて試験群では
明らかに歯槽骨減少量が有意に低く、かつこの効果は濃
度依存的であった。このことから、乳塩基性シスタチン
高含有画分及びその分解物は、歯槽骨の減少を抑制し、
歯周病予防に効果的であることが判る。

【００３３】

【実施例４】表９に示した組成で各成分を混合し、容器
に充填した後、加熱滅菌して、骨粗鬆症等の各種骨疾患
及びリウマチ等の骨関節疾患の予防及び改善用の飲料を
製造した。

【００３４】

【表９】 ──────────────────────── 混合異性化糖 15.00 （重量％）果汁 10.00 クエン酸 0.50 サンプルＢ 0.01 香料 0.10 カルシウム 0.50 ビタミンＤ (200IU) 水 73.89 ───────────────────────

【００３５】

【実施例５】表１０に示した組成で各成分を混合し、加
圧成型して、骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等の
骨関節疾患の予防及び改善用の錠剤を製造した。

【００３６】

【表１０】 ──────────────────────── 含水結晶ブドウ糖 93.5（重量％）サンプルＢ 0.1 カルシウム 5.0 ビタミンＤ（200IU) シュガーエステル 1.0 香料 0.4 ────────────────────────

【００３７】

【実施例６】表１１に示した組成で各成分を混合し、容
器に充填した後、加熱殺菌して、骨粗鬆症等の各種骨疾
患及びリウマチ等の各種骨関節疾患の予防及び改善用の
ゼリーを製造した。

【００３８】

【表１１】 ──────────────────── 果糖 20.00 （重量％）グラニュー糖 15.00 水飴 5.00 寒天 1.00 サンプルＣ 0.01 香料 0.10 カルシウム 0.10 水 58.79 ────────────────────

【００３９】

【実施例７】表１２に示した組成で各成分を混合し、乳
化温度85℃で、骨粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等
の各種骨関節疾患の予防及び改善用のチーズを製造し
た。

【００４０】

【表１２】 ───────────────────── ゴーダチーズ 43.0（重量％）チェダーチーズ 43.5 クエン酸ナトリウム 2.0 サンプルＣ 0.1 乳由来のカルシウム 1.0 水 10.4 ─────────────────────

【００４１】

【実施例８】表１３に示した組成で各成分を混合し、骨
粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等の骨関節疾患の予
防及び改善用のイヌ飼育用飼料（ドッグフード）を製造
した。

【００４２】

【表１３】 ──────────────────── 大豆粕 12.0 （重量％）脱脂粉乳 14.0 大豆油 4.0 コーン油 2.0 パーム油 27.9 トウモロコシ澱粉 15.0 小麦粉 9.0 ふすま 2.0 ビタミン混合物 9.0 ミネラル混合物 2.0 セルロース 3.0 サンプルＢ 0.1 ────────────────────

【００４３】

【実施例９】表１４に示した組成で各成分を混合し、ク
リームを調製した。そして、このクリームを容器に充填
して、歯周病予防及び改善用の歯磨き剤を製造した。

【００４４】

【表１４】 ────────────────────────── グリセリン 70.49 （重量％）二酸化ケイ素 20.00 キサンタンガム 1.00 ミントフレーバー 1.00 二酸化チタン 0.70 フッ化ナトリウム 0.30 蒸留水 6.50 サンプルＣ 0.01 ──────────────────────────

【００４５】

【発明の効果】本発明で得られる乳塩基性シスタチン高
含有画分やこれをプロテアーゼで分解した乳塩基性シス
タチン高含有画分分解物は、骨形成促進及び骨吸収抑制
作用を有しているので、これらを飲食品、医薬及び飼料
等に配合することによって、骨粗鬆症等の各種骨疾患及
びリウマチ等の骨関節疾患並びに歯周病の予防及び改善
に有効に利用し得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ２３Ｋ 1/175 Ａ２３Ｋ 1/175 ４Ｃ０８６Ａ２３Ｌ 1/30 Ａ２３Ｌ 1/30 Ａ４Ｃ２０６ 2/52 2/38 Ｐ 2/38 Ａ６１Ｋ 33/06 Ａ６１Ｋ 33/06 Ａ６１Ｐ 3/02 38/55 Ａ６１Ｋ 31/12 Ａ６１Ｐ 3/02 31/575 // Ａ６１Ｋ 31/12 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｆ 31/575 Ａ６１Ｋ 37/64 (72)発明者川上浩埼玉県川越市藤間204−５Ｆターム(参考） 2B150 AA06 AA10 AB10 AB20 BB03 DC23 DD01 DE01 DE14 DE16 DH04 4B001 AC06 AC46 AC99 BC08 BC99 EC05 4B017 LC03 LK01 LK07 LK16 LK18 LK23 LP01 LP06 LP07 4B018 LB01 LB08 MD04 MD23 MD71 MD90 ME05 MF01 MF04 MF12 4C084 AA02 AA06 AA17 BA44 DC32 MA02 NA05 ZA671 ZA672 ZA961 ZA962 ZA971 ZA972 ZB151 ZB152 4C086 AA01 HA04 MA03 MA04 NA05 ZA67 ZA96 ZA97 ZB15 4C206 AA01 AA02 AA04 CA10 CB28 MA02 MA04 MA11 MA72 MA77 NA05 NA10 ZA67 ZA97 ZB15 ZC20

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】乳由来の塩基性タンパク質画分を含硫酸
基担体と接触させて担体に吸着しない画分を回収し、こ
の画分を分画分子量10〜50kDa の限外濾過膜で処理して
透過液を回収することを特徴とする乳塩基性シスタチン
高含有画分の製造法。
【請求項２】予め乳由来のタンパク質画分を加熱し、
生じた沈殿を除去して上清を回収し、この上清にアルコ
ールを添加し、生じた沈殿を除去して乳塩基性シスタチ
ン高含有画分を回収した後、含硫酸基担体と接触させる
請求項１の製造法。
【請求項３】請求項１又は２の製造法で製造された乳
塩基性シスタチン高含有画分をプロテアーゼで分解する
ことを特徴とする乳塩基性シスタチン高含有画分分解物
の製造法。
【請求項４】請求項１〜３のいずれかの製造法で製造
された乳塩基性シスタチン高含有画分又は乳塩基性シス
タチン高含有画分分解物を配合したことを特徴とする骨
粗鬆症等の各種骨疾患及びリウマチ等の骨関節疾患並び
に歯周病の予防及び改善のための飲食品、医薬又は飼
料。
【請求項５】請求項１〜３のいずれかの製造法で製造
された乳塩基性シスタチン高含有画分又は乳塩基性シス
タチン高含有画分分解物にカルシウム及び／又はビタミ
ンを配合したことを特徴とする骨粗鬆症等の各種骨疾患
及びリウマチ等の骨関節疾患並びに歯周病の予防及び改
善のための飲食品、医薬又は飼料。