JP2001512447A

JP2001512447A - アミホスチンの投与方法

Info

Publication number: JP2001512447A
Application number: JP53511398A
Authority: JP
Inventors: ストッグニュー，マーティン; シェイン，フィリップ，エス．
Original assignee: メドイミューンオンコロジー，インコーポレーテッド
Priority date: 1997-02-12
Filing date: 1998-02-11
Publication date: 2001-08-21
Also published as: US6218377B1; AU6184998A; DE69821498T2; ES2216271T3; CA2625727A1; PT1007055E; US6127351A; DK1007055T3; DE69821498D1; EP1007055A1; CA2280773A1; US6051563A; ATE258797T1; AU750591B2; WO1998034622A1; CA2280773C; EP1007055A4; EP1007055B1

Abstract

(57)【要約】この発明は、アミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を、該化合物の有害なもしくは望ましくない副作用を慣用の静脈内投与と比べて有意に低減または減少するように、患者にに投与する方法を提供する

Description

【発明の詳細な説明】アミホスチンの投与方法関連出願のクロスリファレンス本願は、1997年２月12日出願の同時係属出願第08/798,840号の一部継続出願であり、その全体を参考として本明細書中に取り込むものとする。１．緒言本発明は、アミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を、該化合物の望ましくない副作用を低減あるいは減少させる仕方で、被験者に投与する方法に関する。本発明の一態様は、アミホスチン(amifo stine)および/またはその活性代謝物を患者に皮下投与することに関し、この皮下投与が有害な副作用を低減する。本発明の別の態様は、特徴的な薬物速度論的プロフィールが得られるような仕方で患者にアミホスチンおよび/またはその活性代謝物を投与する方法に関する。該薬物速度論的プロフィールに従って投与する場合、患者は有害な副作用をほとんど経験しない。２．発明の背景アミホスチン（WR-2721としても公知である。）は、放射線療法を受ける癌患者において放射線保護剤として有用であることが示されている(Constine et al. ，1986，“Protection by WR-2721 of Human Bone Marrow Function Following Irradiation（照射後のWR-2721によるヒト骨髄機能の保護）”Int ．J．Radia．O ncol．Biol．Phys. 12:1505-8;Liu et al.，1992，“Use of Radiation with or without WR-2721 in Advanced Rectal Cancer（進行性直腸癌におけるWR-2721 を用いるまたは用いない放射線の使用）”Cancer 69(11):2820-5;Wadler et al. ，1993，“Pilot Trial of Cisplatin，Radiation and WR-2721 in Carcinoma o f the Uterine Cervix（子宮頸部癌におけるシスプラチン、放射線およびWR-272 1のパイロット試験）：A New York Gynecologic Oncology Group Study”J ．Cli n．Oncol． Amifostine in Simultaneous Radiochemotherapy of Head Neck Cancer（頭頚部癌の同時放射線化学療法におけるアミホスチンを用いる選択的細胞保護）”Ann ．Oncol．7(Suppl．5) :81(38lP))。アミホスチンは、組織部位でアルカリホスファターゼによって遊離チオールに脱リン酸化されるプロドラックであり、その遊離チオールが（WR-1065としても知られる）活性代謝物である。一旦細胞内部に入ると、活性な遊離チオールは、放射線がイオン化されて生成される酸素遊離ラジカルのスカベンジャーとして作用することによって放射線に関連する毒性から保護することができる(Yuhas，1977，“On the Potential Application of Radi oprotective Drugs in Solid Tumor Radiotherapy(固形癌放射線療法における放射線保護薬剤の可能な応用について)”，In:Radiation-Drug Interactions in C ancer Management pp．303-52;Yuhas，1973，“Radiotherapy of Experimental Lung Tumors in the Presence and Absence of a Radioprotective Drug S-2-（ 3-Aminopropylamino）thylphosphorothioc Acid（WR-2721）(放射線保護薬剤S-2 −(3-アミノプロピルアミノ)チルホスホロチオン酸の有無における実験肺癌の放射線療法)”J ．Natl．Cancer Inst. 50:69-78;Philips et al.，1984，“Promis e of Radiosensitizers and Radioprotectors in the Treatment of Human Canc er（ヒト癌の治療における放射線増感剤と放射線保護剤の展望）”Cancer Treat ．Rep. 68:291-302)。正常組織を選択的に保護するアミホスチンの能力は正常組織vs腫瘍組織へのアミホスチンの取り込みと示差的代謝に基いている。アミホスチンは正常組織に迅速に取り込まれてそこに保持される。正常組織と腫瘍組織の間のキャピラリィーおよび膜結合アルカリホスファターゼ濃度およびｐＨの違いが該プロドラッグの変換とアミホスチンの活性形である遊離チオールの正常組織への取り込みとを支援することが示されている。正常細胞が腫瘍よりも速い速度で遊離チオールを濃縮し長期間に亘って遊離チオールを保持するという事実と組み合わせると、アミホスチンは抗腫瘍反応に悪影響を及ぼさずに放射線と関連する毒性から正常組織を選択的に保護することができる。正常組織と腫瘍組織の間での組織取り込みと保持の顕著な差により、正常組織において先天的薬剤耐性の一時的状態が生じ、このような状態は過剰の内因性グルタチオンによって生じるものと類似している。放射線療法で有用な細胞保護剤について、その化合物は、慣用の線量を送達する前に、日基準で、１週間につき最高４または５日で数週間に亘り耐容性でなければならない。McDonaldら(McDonald，1994，“Preliminary Results of a Pilo t Study Using WR-2721 Before Fractionated Irradiation of Head and Neck t o Reduce Salivary Gland Dysfunction（唾液腺の機能不全を低減するための頭頚部に分別照射する前のWR-2721を用いたパイロット試験の予備結果）”Int ．J ．Radiat．Oncol．Biol．Phys. 29(4):747-54；McDonald et al.，1995，“Amif ostine Preserves the Salivary Gland Function During Irradiation of the H ead and Neck（アミホスチンは頭頚部の照射の間に唾液腺機能を保護する）”Eu r ．J．Cancer 31a(Supp．5) :415)は、頭頚部癌をもつ患者においてアミホスチンと放射線の用量増加研究をを行なった。その結果、照射前に毎日アミホスチンを投与（6分間の静脈内注入を介して200mg/m²)すると放射線毒性から唾液腺を保護することが示唆された。アミホスチンはまた、骨髄成長を刺激することが示されており、現在、骨髄形成不全症候群を患った患者において骨髄刺激剤としてフェーズII臨床試験の段階にある(Listetal.，1996，“Amifostine Promotes Multilineage Hematopoiesis in Patients with Myelodysplastic Syndrome(MDS):Results of a Phase I/II Clinical Trial（アミホスチンは骨髄形成不全（MDS）をもつ患者において多系統造血を促進する：フェーズI/II臨床試験結果）”Am ．J．Hem. 1(Abstract);Li st et al.，1996，“Amifostine Promotes in vitro and in vivo Hematopoiesi s in Myelodysplastic Syndromes(アミホスチンは骨髄形成不全症候群においてインビトロおよびインビボ造血を促進する)”Chem ．Found Sympos.(Abstract);L ist et al.，1996，“Amifostine Promotes Multilineage Hematopoiesis in Pa tients with Myelodysplastic Syndrome(MDS):Results of a Phase I/II Clinic al Trial（アミホスチンは骨髄形成不全（MDS）をもつ患者において多系統造血を促進する：フェーズI/II臨床試験結果）”，Abstract，8th Annual Meeting， American Society of Hematology，Orlando，FL)。この研究において、アミホスチンは静脈内注入を介して投与されている。アミホスチンの静脈内投与はいくつかの重大な欠点を受けている。第一に、化合物を静脈内投与することはかなり不便である。特に、数週間の、あるいはMDS の場合には数ヶ月の可能性もある、毎日投与スケジュールが必要であるときには、薬剤用量を投与するのに熟練した医師（practitioner）が必要である。第二に、静脈内投与するときには、患者は、むかつき、吐き気、嘔吐および低血圧、ならびに、ほてりまたは熱っぽさ、悪寒または寒気、めまい、眠気、しゃっくりおよびくしゃみを患う。血清カルシウム濃度の減少は静脈内投与されたアミホスチンの公知の薬理学的作用である。また、軽い皮膚の発疹から硬直までの範囲のアレルギー反応は静脈内投与されたアミホスチンとの関連ではめったに起こらなかった。現在、抗嘔吐剤のような同時投与剤を除いて、これらの望ましくない副作用を低減または避ける方法は知られていない。第三に、副作用を抑えるための人員、設備および医学的測定器（medical measures）を含む静脈内投与に関わる関連費用がかかる。アミホスチンのヒト薬物速度論的プロフィールは、癌患者において静脈内ボーラス薬（150mg/kg）の単回投与(Shawetal.，1986，“Human Pharmacokinetics o f WR-2721(WR-2721のヒト薬物動態)”Int ．J．Radiat．Oncol．Biol．Phys．12: 1501-4)、単回の15分間の静脈内注入（最高910mg/m²）(Shaw et al.，1988，“P harmacokinetics of WR-2721(WR-2721のヒト薬物動態)”Pharmac ．Ther．39:195 -201;Shaw et al.，1994，“Pharmacokinetics of Amifostine in Cancer Patie nts:Evidence for Saturable Metabolism（癌患者におけるアミホスチンの薬物動態：飽和性代謝の証拠）”Proc ．Amer．Cos．Clin．Oncol. 13:144;U.S．Bios cience，1994，“Pharmacokinetics of Single Dose Amifostine(WR-2721;Ethyo l)”ETHPK3)、および反復注入(投与あたり最高910mg/m²)(U.S．Bioscience，199 4，“Pharmacokinetics of Double Dose Amifostine（WR-2721;Ethyol）with Co rresponding Measurements of WR-1065 in Plasma and Bone Marrow Cells（血漿および骨髄細胞におけるWR-1065の対応測定を伴う二重投与アミホスチン(WR-2 721;Ethyol)の薬物動態）”ETHou PK 4）の後に研究された。これらの研究は、アミホスチンが、１分未満の分布半減期と約９分の排除半減期をもって血漿から迅速に清浄化されることを示している。静脈内投与して６分後に10％未満のアミホスチンが血漿中に残留した。これまでのヒト臨床薬理学研究では、経口投与または皮下投与されるアミホスチンを用いる研究はまったく行なわれていなかった。 Tabachnikは、アミホスチンの経口投与は嚢胞性線維症患者において痰の粘度を減少させたと報告している(Tabachnik et al.,1980，“Studies on the Reduc tion of Sputum Viscosity in Cystic Fibrosis Using an Orally Absorbed Pro tected Thiol．（経口的に吸収される保護チオールを用いる嚢胞性線維症における痰粘度の低減に関する研究）“J ．Pharm．Exp．Ther. 214:246-9;Tabachnik e t al.，1982，“Protein Binding of N-2-Mercaptoethyl-1 3-Diaminopropane v ia Mixed Disulfide Formation After Oral Administration of WR-2721（WR-27 21の経口投与後の混合ジスルフィド形成を介するN-2−メルカプトエチル-1 3-ジアミノプロパンのタンパク結合）”J ．PharmExp．Ther. 220:243-6)。しかしながら、これらの研究は、この投与法が静脈内投与されるアミホスチンと一般に関連する有害な副作用を低減することを示さなかった。さらに、投与される化合物の薬物速度論的プロフィールの研究が上記の患者で行なわれなかった。３．発明の概要本発明は、アミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を、該化合物の望ましくない副作用を減少または低減する仕方で、ヒトを含む被験者に投与する方法を提供する。本発明の一態様は、ヒト被験者にアミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を皮下投与することに関する。本発明の別の態様は、特徴的な薬物速度論的プロフィールが得られるような仕方で患者に対しアミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を投与することに関する。一般に薬物速度論的プロフィールは、投与化合物の血漿および/または全血濃度、その活性代謝物、あるいはその両方が最大濃度まで徐々に増加する第１領域、最大血漿および/または全血濃度が実質的に維持されるかあるいはプラトーになる第２領域、ならびに、血漿および/または全血濃度が基線レベルまで徐々に減少する第３領域によって特徴付けられる。該投与化合物（および/またはその活性代謝物）の血漿および/または全血濃度が最大レベルまで増加する速度は、通常の静脈内投与で達成される速度と比べて著しく遅い。本発明の方法によりアミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を投与すると、施用される用量の効能に実質的に影響を及ぼさずに、患者が受ける有害なまたは望ましくない副作用が慣用の静脈内投与と比べて有意に低減または減少される。したがって本発明の方法は、吐き気、むかつき、嘔吐、低血圧、あるいは、以下のものに限定されないが、ほてりもしくは熱っぽさ、悪寒もしくは寒気、めまい、眠気、しゃっくり、くしゃやみ、血清カルシウムレベルの低下、および通常慣用の静脈内投与で経験されるアレルギー反応、を含む他の望ましくない副作用を誘発することなく、患者にアミノアルキルホスホロチオエートおよび/またはアミノアルキルチオール化合物を送達するための治療戦略に関連して有利に使用できる。４．図面の簡単な説明図１は、12名の被験者に500mg皮下注射、500mg経口溶液および200mg/m²静脈内注入(7.5分に及ぶ。)した後の、薬剤投与して０〜240分後のアミホスチン（親薬剤WR-2721プラス活性代謝物WR-1065）の平均全血濃度−時間曲線のグラフである (−はiv(静脈内投与)、…はsc(皮下投与)、−−は経口投与を示す。)。図２は、12名の被験者に500mg皮下注射および200mg/m²静脈内注入(7.5分に及ぶ。)した後の、薬剤投与して０〜240分後のアミホスチン（親薬剤WR-2721）の平均血漿濃度−時間曲線のグラフである(−はiv、…はscを示す。)。図３は、12名の被験者に500mg皮下注射、500mg経口溶液および200mg/m²静脈内注入(7.5分に及ぶ。)した後の、薬剤投与して０〜240分後の活性代謝物（WR-106 5）の平均血清濃度−時間曲線のグラフである(―はiv、…はsc、−−は経口投与を示す。)。図4Aおよび4Bは、アミホスチンまたは食塩水と単回の16.5Gyの線量とで治療された動物の体重に関する２つのグラフである。アミホスチンと食塩水はi.p.およびs.c.投与経路で投与された。対照動物は照射なしで食塩水を受けた。アミホスチンを0.9％NaCl 9.7ml中に500mgで溶解し、これにより終濃度50mg/mlとなった。約0.1〜0.2mlのアミホスチンを各動物に体重に基き注射した。アミホスチンは 400mg/kg体重の用量（図4A）および200mg/kg体重の用量（図4B）で投与された。図5Aおよび５Bは、アミホスチンまたは食塩水と単回の16.5Gyの線量とで治療された動物の粘膜紅斑評点に関する２つのグラフである。アミホスチンと食塩水はi.p.およびs.c.投与経路で投与された。対照動物は照射なしで食塩水を受けた。アミホスチンを0.9％NaCl 9.7ml中に500mgで溶解し、これにより終濃度50mg/m lとなった。約0.1〜0.2mlのアミホスチンを各動物に体重に基き注射した。アミホスチンは400mg/kg体重の用量（図５A）および200mg/kg体重の用量（図５B）で投与された。図６Aおよび６Bは、アミホスチンまたは食塩水と単回の16.5Gyの線量とで治療された動物の粘膜浮腫評点に関する２つのグラフである。アミホスチンと食塩水はi.p.およびs.c.投与経路で投与された。対照動物は照射なしで食塩水を受けた。アミホスチンを0.9％NaCl 9.7ml中に500mgで溶解し、これにより終濃度50mg/m lとなった。約0.1〜0.2mlのアミホスチンを各動物に体重に基き注射した。アミホスチンは400mg/kg体重の用量（図６A）および200mg/kg体重の用量（図６B）で投与された。図7A〜7Cは、アミホスチンを皮下投与した後のMDS患者から得た骨髄前駆細胞によるコロニー形成に関する３つのグラフである。図7AはCFU-GEMMコロニーの形成を示し、図7BはBFU-Eコロニーの形成を示し、また図7CはCFU-GMコロニーの形成を示す。５．発明の詳細な説明本発明は、アミノアルキルホスホロチオエートおよび／またはアミノアルキルチオール化合物を、患者に、従来の静脈内投与と比べて化合物の望ましくない副作用を低減する様式で投与する方法を提供する。本発明は、アミホスチンを皮下投与されたヒト患者は、一部、アミホスチンを皮下投与されたヒト患者は、アミホスチンの従来の静脈内投与に一般に関連した悪心、嘔吐、頭痛、低血圧、意識のもうろう(lightheadness)、傾眠およびその他の望ましくない副作用の発生率が従来の静脈内注入によりアミホスチンを投与された患者よりも有意に小さいという全く予期しなかった発見に基づくものである。これらの副作用は、静脈内投与された薬物の薬物速度論的プロフィールの「スパイク」または「バースト」期と同時に起こる。本発明は、さらに、一部、静脈内および皮下投与されたアミホスチンについてのアミホスチンおよびその活性代謝物WR-1065の薬物速度論的プロフィールが有意に異なるという所見に基づくものである。アミホスチンの静脈内投与後最初の 10分以内にアミホスチンおよびその活性代謝物WR-1065の全血濃度はピークに達し、急速に減衰するが、これらの両化合物の全血濃度は、皮下アミホスチン投与後は著しく緩慢な相度で減少し、投与の約15〜45分後に最大且つ持続濃度に到達した。理論に縛られるつもりはないが、静脈内投与されたアミホスチンと比較した場合に皮下投与されたアミホスチンについて観察された望ましくない副作用の減少は、一部、皮下投与に関連した特徴的な薬物速度論的プロフィールによるものであると考えられる。したがって、本発明の方法においては、治療上有効な量のアミノアルキルホスホロチオエートおよび／またはアミノアルキルチオール化合物が、患者に、投与された化合物および／またはその活性産物のいずれかに特徴的な薬物速度論的プロフィールが得られるように投与され、それによってそのような治療を受ける患者がこうむる望ましくない副作用は従来の静脈内投与と比べて有意に低減される。５．１．化合物本明細書に記載された方法にしたがって都合よく投与され得る化合物は、正常な組織の選択的放射線防護または化学防護、および／または骨髄刺激または治癒活性を示し、毒性が最小限であるためにヒト使用に適しているアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物である。そのようなアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物、ならびにその薬学的に許容できる付加(addition)塩および／または水和物は、当業者には公知であるか、当技術分野で用いられる確立した試験をルーチン的に用いて過度の実験をすることなく同定することができる。一の例示的な実施態様においては、本発明の方法によって都合よく投与され得る化合物は、式：（Ｉ）R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ （式中、R₁は水素、C₁〜C₇アリール、C₁〜C₇アシルまたはC₁〜C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、ｎは２〜６の整数であり、そしてｍは２〜６の整数である）で示される化合物またはその薬学的に許容できる付加塩もしくは水和物である。式（Ｉ）の化合物は全て、当技術分野で公知の方法によって調製され得る(例えば、Cortese，1943，Orgaic Synthesis pp.91-93，Coll．Voll．II，Blatt編，John Wiley & Sons社，ニューヨーク，NY;Akerfeldt，1960，Acta Chem．Scan d．14:1980;Piperら，1966，Chem．Ind．(ロンドン):2010を参照されたい)。式（Ｉ）による一定のアミノアルキルホスホロチオエート化合物、ならびにかかる化合物の合成方法は、米国特許第3,892,824号およびWO96/25045に詳細に記載されており、それぞれ参照により本明細書に含まれるものである。本発明の方法において有用なアミノアルキルホスホロチオエートおよび／またはアミノアルキルチオール化合物は、遊離酸、遊離塩基、またはその薬学的に許容できる付加塩の状態であり得る。そのような塩は、アミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を適当な酸で処理することによって容易に調製することができる。そのような酸としては、例えば、限定するものではないが、ハロゲン化水素酸(hydrohalic acids)(塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸など)、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、および酢酸、プロパン酸、2- ヒドロキシ酢酸、2-ヒドロキシプロパン酸、2-オキソプロパン酸、プロパン二酸、ブタン二酸などの有機酸が挙げられる。逆に、塩は、アルカリで処理することによって遊離塩基体に変換することができる。本発明の方法において有用なアミノアルキルホスホロチオエートおよび／またはアミノアルキルチオール化合物、ならびにその薬学的に許容できる付加塩は、水和体または非水和体であり得る。そのような体の調製方法は、有機化学分野の当業者には明白であろう。本発明の好ましい実施態様においては、化合物は、式（Ｉ）において、 R₁は水素またはメチルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、ｎは３であり、そしてｍは２または３である化合物、またはその薬学的に許容できる付加塩もしくは水和物である。本発明の特に好ましい実施態様においては、化合物は、S-2-(3-アミノプロピル)エチル二水素ホスホロチオエート、N₂H(CH₂)₃NH(CH₂)₂SPO₃H₂(アミホスチンまたはWR-2721)、特にそのモノ−およびトリ−水和物；2-[3-アミノプロピルアミノ]エタンチオール、N₂H(CH₂)₃NH(CH₂)₂SH(アミホスチンまたはWR-1065の活性代謝物)；S-3-(3-メチルアミノ−プロピルアミノ)プロピル二水素ホスホロチオエート、CH₃NH(CH₂)₃NH(CH₂)₃SPO₃H₂(WR-151327)；またはS-3-(3-メチル−アミノプロピルアミノプロパンチオール、CH₃NH(CH₂)₃NH(CH₂)₃SH（WR-151326）である。５．２．薬物速度論的プロフィールアミホスチンの静脈内および皮下投与後のアミホスチンおよびその活性代謝物 WR-1065の薬物速度論的プロフィールの分析により、いくつかの著しい相違が明らかになる。ここで図１〜３を参照すると、アミホスチンの静脈内投与（7.5分にわたって200mg／m²の薬物を注入）後に得られたアミホスチン(図２)、アミホスチンの活性代謝物（WR-1065）(図３)およびアミホスチンとWR-1065の組み合わせ（図１）の薬物速度論的プロフィールは、臨床上観察された副作用と一致する時間帯である、投与後最初の20分以内の初期血漿濃度の「スパイク」または「バースト」によって特徴付けられ、注入された薬物および／またはその活性代謝物は、投与の最初の１分以内に急速に吸収され、投与の約８〜10分後には最大全血濃度に達し、投与の約10〜20分後には濃度が急速に（約５〜10倍）減少する。この初期濃度の「スパイク」または「バースト」の後、血液レベルは徐々にゼロまで減少する。同様の薬物速度論的プロフィールが、単回静脈内ボーラス投与（150mg／m²）後(Shawら,1986，"Human Pharmacokinetics of WR-2721"Int.J．Radiat．Oncol ．Biol．Phys．12:1501-4)、単回15分間静脈内注入（最大910mg／ｍ²まで）後（ Shawら，1988，"Pharmacokinetics of WR-2721"Pharmac．Ther．39:195-201;Sha wら，1994，"Pharmacokinetics of Amifostine in Cancer Patients:Evidence f or Saturable Metabolism"Proc．Amer．Cos．Clin．Oncol．13:144;U.S．Biosci ence，1994，"Pharmacokinetics of Single Dose Amifostine(WR-2721;Ethyol)" ETH PK 3）および繰り返し注入後（最大910mg／ｍ²／回）（U.S．Bioscience，1 994，"Pharmacokinetics of Double Dose Amifostine(WR-2721;Ethyol)with Cor responding Measurements of WR-1065 in Plasma and Bone Marrow Cells"ETH P K 4）の癌患者におけるアミホスチンに関して観察された。これらの研究において、アミホスチンは血液から急速に浄化され、１分未満の分布半減期および約９分の排出半減期を示した。アミホスチン（投与量500mg）の皮下投与後のアミホスチン、活性代謝物WR-10 65およびアミホスチンとWR-1065の組み合わせの薬物速度論的プロフィールは、静脈内投与により得られたものとは有意に異なる。まず、ここで、図１と図３を参照すると、初期濃度のスパイクまたはバーストによつて最大全血濃度に到達しない。それどころか、血液濃度は有意に遅い速度で上昇し、投与後５〜60分、好ましくは10〜40分のうちに最大に到達する。最大レベルの平坦域は、ベースラインレベルまで徐々に減少する前に、約10〜130分間、好ましくは約15〜120分間維持される。さらに、アミホスチンおよびWR-1065の両方の最大全血濃度は、静脈内投与よりも皮下投与後のほうが有意に低かった。例えば、静脈内投与については、アミホスチンおよびWR-1065のピークレベルはそれぞれ約100μＭおよび約23μＭであった。皮下投与については、アミホスチンおよびWR-1065の最大血液レベルはそれぞれ約12μＭおよび４μＭであった。これらの濃度は、細胞保護剤として、およびＭＤＳにおいて生物学的に有効である(Dorrら，1995，Eur．J．Cancer 31a( 補遺5):579，Listら，1995，Blood 86(19)補遺１:1327(摘要))。したがって、本発明の都合のよい薬物速度論的プロフィールは、一般的に、３つの主な特徴：（ｉ）投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の血漿および／または全血濃度が最大レベルまでゆっくりと上昇する第１の領域：(ii)投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の最大血漿および／または全血濃度が平坦である第２の領域；ならびに（iii）投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の最大血漿および／または全血濃度がベースラインレベルまでゆっくりと低下する第３の領域によって特性付けられる。薬物速度論的プロフィールの第１の領域においては、血漿および／または血液濃度は、通常、約0.1μＭ/分〜40μＭ/分、好ましくは約0.3μＭ/分〜20μＭ/分、最も好ましくは約0.5〜10μＭ/分の速度で上昇する。最大濃度に向かうこの上昇は、通常、約１分〜60分にわたって生じ、一般に約５分〜25分にわたって生じ、典型的には約10分〜20分にわたって生じ、好ましくは約15分にわたって生じる。最大血漿および／または血液濃度には、通常、投与の約５〜60分後に達し、好ましくは投与の約12〜18分後に達する。この第１の領域における血漿および／または血液濃度の上昇は、通常ゼロ次であり、すなわち上昇速度は、上昇中実質的に一定である。第１の領域の終わりに到達した投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の最大血漿および／または血液濃度は、薬物速度論的プロフィールの第２の領域においては相対的に一定、すなわち平坦のままである。好ましくは、血漿および／または血液濃度は、約±75％以上変動しない。より好ましくは、血漿および／または血液濃度は、±35％以上変動しない。平坦域は、通常、約10分〜13 0分、好ましくは約15分〜120分間維持され、投与の約15分〜80分後に生じる。第３の領域においては、投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の血漿および／または血液濃度は、ベースラインに向かってゆっくりと減少する。血漿および／または血液濃度の減少速度は、典型的には被験者の代謝に左右され、投与後の望ましくない副作用を縮小または減少させることに対して重大な特徴であるとは考えられない。投与された化合物（またはその活性代謝物）の血漿および／または血液濃度の減少の実際の速度は被験者間で変動するが、濃度は、通常、約0.001μＭ/分〜0.2μＭ/分の速度で、約30分〜220分にわたって減少する。第３の領域は、通常、投与の約60分〜180分後に生じる。特定の理論に縛られるつもりはないが、投与後の有害な副作用の縮小または減少は上記の薬物速度論的プロフィールの特性によるものであると考えられる。投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の血漿および／または血液濃度が最大まで上昇する速度の遅さ、ならびに一定期間の最大レベルの維持は、特に重要であると考えられる。したがって、本発明の薬物速度論的プロフィールは、化合物および／または代謝物血漿および／または血液濃度において、従来の静脈内投与に伴った効能には必要でないと思われる初期の「スパイク」または「バースト」を排除することによって化合物の有害な副作用を減少または縮小するものであると考えられる。投与された化合物（および／またはその活性代謝物）の実際の最大血漿および／または血液濃度が、有害な副作用の縮小または減少においてかなり重要であるとは考えられない。化合物が本明細書に記載された薬物速度論的プロフィールにしたがつて投与される限り、望ましくない副作用の縮小または減少は、到達した実際の最大血漿および／または血液濃度にかかわらず観察されるものである。したがって、後の節でより詳細に論じられるように、実質的には、投与された化合物および／またはその活性代謝物の治療上有効である血漿および／または全血／血液濃度が得られるような量の化合物を、本明細書に記載された薬物速度論的プロフィールにしたがって投与するのが都合よくあり得る。最大血漿および／または血液濃度は、通常、約１μＭ〜４０μＭの範囲である。５．３．方法の使用本発明の方法を用いることにより、本明細書に記載された化合物を患者に効果的に投与して現在知られているか、またはそのような化合物で治療可能であることが後に発見される任意の疾患を実質的に治療することができる。例えば、本明細書に記載された化合物は、正常な組織を、電離放射線に関連した毒性から腫瘍応答に有害に作用することなく選択的に保護することができるので(Constineら，1986,"Protection by WR-2721 of Human Bone Marrow Fu nction Following Irradiation"Int．J．Radia．Oncol．Biol．Phys．12:1505-8 ;Liuら，1992，"Use of Radiation with or Without WR-2721 in Advanced Rect al Cancer"Cancer 69(11):2820-5;Wadlerら，1993，"Pilot Trial of Cisplatin ，Radiation and WR-2721 in Carcinoma of the Uterine Cervix:A New York Gy necologic Oncology Group Study"J．Clin．Oncol．11(8):1511-6;Buntzelら，1 996，"Ethyol（Amifostine）Provides Mutilineage heatoprotection and Prote ction Against Nonhematologic Toxicities Reduced by Radiochemotherapy(RCT )of Head and Neck Cancer"，Blood 88(10)補遺１:448a(1781)(摘要))、本明細書に記載された方法を用いることにより、前記化合物を放射線治療を受けている癌患者に投与することができる。また、本明細書に記述する化合物は、アルキル化剤、白金剤、アントラサイクリンおよびタキサンを含むがそれらに限定されない癌化学療法剤に伴う毒性から正常な組織を選択的に保護することができる(Kempら，1996，「シクロホスファミドおよびシスプラチンによって誘導される毒性から保護するためのアミホスチン前処理：進行卵巣癌患者におけるランダム化対照つき試験の結果」，J．Clin ．Oncol．14:2101-12;Wassermanら，1981，「骨髄CFUへの細胞傷害性化学療法作用に対するWR-2721による示差的保護」，Cancer Clin．Trials 4:3-6;Gloverら，「WR-2721はシクロホスファミドの血液学的毒性から保護する：対照つきフェースII試験」，J．Clin．Oncol．4:584-8;Schillerら，「転移性非小細胞肺癌におけるアミホスチン、シスプラチンおよびビンブラスチン：高い応答率および延長される生存の報告」，J．Clin．Oncol．14:1913-21;Dorrら，1995，「DNAズターカレーティング(zutercalating)剤に暴露されたラット心臓筋細胞のアミホスチン(AMI)およびその脱リン酸化代謝物WR-1065を用いた選択的心臓保護」，Eur ．J．Cancer 31a(増刊5):579;Betticherら，1995，「非小細胞肺癌の治療における骨髄保護剤アミホスチンと組み合わせたカルボプラチン：ランダム化フェース II試験」，Br．J．Cancer 5:1551-5;Dipaolaら，1996，「進行悪性腫瘍患者におけるアミホスチンおよびパクリタキセル(paclitaxel)のフェースＩ試験」，Pr oc．Amer．Soc．Clin．Oncol．15:488（1556）抄録)。したがって本発明の方法は、化学療法を受けている癌患者に本明細書に記述する化合物を有利に投与するためにも用いることができる。本明細書に記述する化合物はまた、化学療法後に骨髄増殖を刺激し(ＷＯ 96/2 5045)、骨髄機能をより迅速に回復させることも可能である(Listら，「正常および骨髄形成不全骨髄におけるアミホスチンに刺激された多能性前駆細胞の形成および生成された肉眼的コロニー」，Proc．Amer．Soc．Clin．Oncol．15:449[1403 ][抄録];Listら，1996，「アミホスチンは化学療法による細胞傷害性から原始的な造血前駆細胞を保護する」，Semin．Oncol．23(4)増刊8:58-63)。したがって本発明の方法はさらに、骨髄増殖を必要とする疾患（骨髄形成不全症候群(MDS) 等）を患う患者および骨髄を化学療法に暴露した患者にこれらの化合物を投与する有用な手段を提供する。さらに、本発明の方法はまた癌患者およびヒト免疫不全ウイルスに感染した患者に上記化合物を投与する有用な手段を提供する。アミノアルキルホスホロチオエートおよび／またはアミノアルキルチオール化合物を本発明の方法にしたがって患者に投与すると、現在使用されている静脈内投与様式よりも有利な点が多数提供される。重大な利点は、化学療法を受けている患者がこうむる望ましくない副作用の減少または低下である。さらに、本発明の方法は静脈注射（これは患者が最も嫌う投与様式である）を必要としないので、本明細書に記載の方法は一般に患者のより良い応諾をもたらすであろう。さらに、本発明の方法は必ずしも熟練した医師による投与を必要としないので、患者にとって療法をより好都合なものにする。 5.4．組成物および投与経路本明細書に記述する化合物または製薬上許容されるそれらの付加塩もしくは水和物は、広範な投与経路および様式を用いて、本発明にしたがって望ましくない副作用を回避または減少させるように患者に送達することができる。ただ１つの要件は、上記化合物および／またはその活性代謝物が本明細書に記載の薬物速度論的プロフィールにしたがって患者に送達されることである。適切な投与経路は、吸入、経皮、経口、直腸、経粘膜、腸管投与、ならびに筋肉内、皮下および静脈注射を含む腸管外投与を含むが、これらだけに限定されない。いずれの投与様式についても、送達される化合物の実際の量および本明細書に記載の有利な薬物速度論的プロフィールを達成するのに必要な投与スケジュールは、当業者には明らかである上記化合物（および／またはその活性な代謝物）の生物学的利用能、治療すべき障害、望ましい治療用量、等の因子およびその他の因子に部分的に依存する。送達される化合物の実際の量および投与スケジュールは、投与された化合物および／またはその活性な代謝物の血漿レベルをモニターし、所望の薬物動態学を達成するのに必要な用量または投与スケジュールを調製することによって、過度の実験を行なうことなく当業者によって容易に決定されうる。例えば、静脈内投与については、常用されているものよりも大幅に遅い注入速度を用いることによって、または歩行を許す(ambulatory)ポンプを用いることによって、本発明の有利なプロフィールを獲得することができる。当業者には、特に本明細書が提供する詳細な開示に照らすならば、他の投与様式によって所望の薬物速度論的プロフィールを得る方法が明らかであろう。本明細書に記載の化合物、または製薬上許容されるそれらの塩および／または水和物は、単独で、本発明の他の化合物と組み合わせて、および／または癌化学療法剤を含む他の治療剤と組み合わせて投与することができる。活性な化合物を単独で、または活性化合物が１以上の製薬上許容される担体、賦形剤または希釈剤と混合されている医薬組成物の形で、投与することができる。本発明の方法にしたがって用いられる医薬組成物は、上記活性な化合物を医学的に使用可能な調製物に加工するの容易にする賦形剤および補助剤からなる１以上の生理学的に許容される担体を用いて、通常の方法で製剤化することができる。適切な組成物は選択された投与経路に依存する。注射用には、本発明の作用物質を水溶液に、好ましくはハンクス液、リンガー液または生理食塩緩衝液、等の生理学的に適合性の緩衝液に溶解した溶液に調製することができる。経粘膜投与用には、浸透すべき障壁に対して適切な浸透剤が組成物中に使用される。そのような浸透剤は当技術分野で一般に公知である。経口投与用には、活性な化合物を当技術分野で周知の製薬上許容される担体と組み合わせることにより、本発明の化合物を容易に製剤化することができる。そのような担体は、治療すべき患者による経口摂取のために、上記化合物を錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁物、等に製剤化するのを可能とする。経口用の医薬調製物は、本発明の化合物と固体賦形剤を混合し、場合により得られた混合物を粉砕し、所望であればこれに適切な補助剤を加えた後、粒子の混合物を加工して錠剤または糖衣錠のコア(core芯)を得ることによって作製することができる。適切な賦形剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む糖などの増量剤；トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース等のセルロース調製物および／またはポリビニルピロリドン(PVP)である。所望であれば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウム等のその塩、等の崩壊剤を加えることができる。糖衣錠のコアは、適切なコーティングをほどこして提供される。この目的のため、濃縮糖液を用いることができる。この糖液は場合によりアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポール(carbopol)ゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適切な有機溶剤または溶剤混合物を含んでいてもよい。識別のため、または活性化合物投与物の異なる組み合わせを特徴づけるため、錠剤または糖衣錠のコーティングに染料または色素を加えてもよい。経口的に使用できる医薬調製物は、ゼラチンで作られたプッシュフィット(pus h-fit押しに耐える)カプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（グリセリンまたはソルビトール等）で作られた、シールされたソフトカプセルを含む。プッシュフィットカプセルは、ラクトース等の増量剤、デンプン等の結合剤、および／またばタルクもしくはステアリン酸マグネシウム等の潤沢剤、および場合により安定剤と混合された活性成分を含むことができる。ソフトカプセル中では、活性化合物は脂肪油、液体パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール等の適切な液体中に溶解しているか、または懸濁されていてよい。さらに、安定剤を添加してもよい。経口投与用のすべての組成物は、そのような投与に適切な投与量に調製されていなければならない。頬粘膜への投与用には、医薬組成物は通常の方法で製剤化された錠剤または舐剤(lozenge)の形を取ることができる。吸入による投与のためには、本発明にしたがって用いる化合物は、適切な推進剤（例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切な気体）を用いて、圧縮パックまたは噴霧器からのエーロゾルスプレーの形で好都合に送達される。圧縮エーロゾルの場合、計量された量を送達するバルブを取り付けることによって、単位用量を測定することができる。吸入器または注入器で使用するためのゼラチンなどで作られたカプセルまたはカートリッジは、本発明の化合物と適切な粉末基剤（ラクトースまたはデンプン等）との粉末混合物を含むように製剤化することができる。本発明の化合物は注入（例えば、ボーラス注射または連続注入）による腸管外投与用に調製することができる。本発明の化合物を15分から24時間にわたって皮下に連続的に注入することが好ましい。注入用の組成物は、防腐剤を添加して単位剤形の形で提供することができる。例えば、アンプルまたは多投与容器(multi-dose container)の形である。組成物は、懸濁物、溶液、または油性もしくは水性ビヒクルを用いたエマルジョンの形をとることができる。そして、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤などの製剤用作用物質(for mulatory agent)を含むことができる。腸管外投与用の医薬組成物は、水溶性形態の活性化合物の水溶液を含む。さらに、適切な油性注入用懸濁物として活性化合物の懸濁物を調製することができる。適切な親油性溶媒またはビヒクルは、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリド等の合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。水性注入用懸濁物は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、またはデキストラン等の懸濁物の粘性を増大させる物質を含むことができる。場合により、該懸濁物は適切な安定化剤または化合物の溶解性を増大させて高度に濃縮された溶液の調製を可能とする作用物質をも含むことができる。または、活性成分は、使用前に適切なビヒクル（例えば、パイロジェンを含まない滅菌水）を用いて構成するための粉末形態であってもよい。本発明の化合物は、例えばカカオバターまたは他のグリセリドなどの通常の座薬基剤を含む座薬または保持浣腸剤などの直腸用組成物として製剤化することもできる。これまで記述した組成物に加えて、本明細書に記載の化合物をデボー製剤として調製することができる。そのように長期間作用する製剤は移植（例えば、皮下または筋肉内）によって、または筋肉内注射によって投与することができる。したがって、本明細書に記載の化合物は、例えば適切なポリマー性または疎水性物質と共に(例えば許容される油中のエマルジョンとして)、またはイオン交換樹脂と共に、または殆ど溶解しない誘導体、例えば殆ど溶解しない塩として製剤化することができる。上記医薬組成物はまた、適切な固相またはゲル相担体または賦形剤を含むことができる。そのような担体または賦形剤の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコール等のポリマーを含むが、これらだけに限定されない。 5.5 有効投与量本発明と共に用いるのに適切な医薬組成物は、活性成分が治療上有効量で、すなわち意図された目的を達成するのに有効な量で含有されている組成物を含む。当然ながら、活性成分の実際の量は特にその意図された目的に依存する。例えば、放射線または化学療法と関連して癌患者に細胞保護剤として投与する場合、そのような医薬組成物は、とりわけ、正常な組織に対する電離放射線または化学療法剤の有害作用を軽減するのに有効な量の活性成分を含む。骨髄増殖を必要とする疾患(MDS等)を患っている患者、または化学療法後の骨髄機能のより迅速な回復を必要とする患者に投与する場合、そのような医薬組成物は骨髄産生または骨髄機能を刺激し、治療を受けている患者の症状の進行を阻止し、または既存の症状を軽くし、またはその生存を延長するのに有効な量の活性成分を含む。有効量の決定は、特に本明細書の詳細な開示に照らすならば、十分に当業者の能力の範囲内にある。本明細書に記述するいずれの化合物についても、治療上の有効量は細胞培養アッセイから最初に推定することができる。例えば、動物モデルを用いて、細胞培養物中で測定した有効濃度を含む、化合物および／またはその活性代謝物の循環濃度範囲を達成する投与量を定式化することができる。そのような情報を用いて、ヒトにおける有用な投与量をより正確に決定することができる。例えば、Wash burnら，1976，「種間組織分布試験によるヒトにおけるWR-2721の有効な放射線保護用量の予測」，Radiat．Res.，66:100-5を参照されたい。ヒトに用いる治療上有効量は動物モデルから推定することもできる。例えば、動物において有効であると判明した循環濃度を達成するようにヒトの投与量を定式化することができる。また、治療上有効量はヒトの薬物動態学データから推定することもできる。特定の理論に束縛されることを意図するものではないが、効果は投与した薬物および／またはその活性な代謝物の適用された用量に対する被験者の全暴露(total e xposure)に相関していると思われる。この全暴露は、薬物血中濃度-時間曲線下面積(AUC)を計算することによって決定される。したがって、治療すべき兆候に対して有効であることが公知の用量のAUCの約50％以内にある、投与した化合物（および／またはその活性な代謝物）のAUC値をもつ本発明の方法により投与される用量は、有効であると期待される。公知の有効用量のAUCの約70％以内、80 ％以内または90％以上という範囲にある、投与した化合物（および／またはその活性な代謝物）のAUC値をもつ用量が好ましい。上記の方法、特に血中濃度および投与された化合物および／またはその活性な代謝物の持続時間に基づいてヒトにおける最大の効果を達成するために投与量を調節することは、十分に当業者の能力の範囲内にある。電離放射線または化学療法剤の毒性から選択的に保護するための細胞保護剤としての使用には、約２μＭから100μＭという投与された化合物（および／またはその活性な代謝物）の循環濃度が有効であると期待される。好ましくは約５μ Ｍから50μＭである。または、あるいは更に、約４μＭから700μＭという投与された化合物（および／またはその活性な代謝物）の組織濃度が有効であると期待される。好ましくは約20μＭから350μＭである。アミホスチンおよびその活性な代謝物WR-1065を投与するための通常の患者用量は、通常は約50mg/日から6000mg/日、一般には約100mg/日から4000mg/日、そして典型的には約200mg/日から3 500mg/日である。患者の体重で表すならば、通常の用量は約0.6から100mg/kg/日、一般には約1.1から66mg/kg/日、そして典型的には約2.2から58mg/kg/日である。患者の体表面積で表すならば、通常の用量は約23から4000mg/m²/日、一般には約45から2666mg/m²/日、そして典型的には約90から2333mg/m²/日である。アミホスチンおよび／またはその有効代謝物WR-1065の皮下投与のためには、患者用量は、通常、約50mg/日から1500mg/日、一般には約100mg/日から1000mg/ 日、典型的には約200mg/日から750mg/日の範囲である。体重の点から言えば、通常の用量は0.5mg/kg/日から25mg/kg/日、一般には約1mg/kg/日から16mg/kg/日、典型的には約3.3mg/kg/日から12.5mg/kg/日の範囲である。患者の体表面積の点から言えば、通常の用量は約22mg/m²/日から1000mg/m²/日、一般には約45mg/m²/ 日から666mg/m²/日、典型的には約133mg/m²/日から500mg/m²/日の範囲である。電離線の有害性に対する放射線保護剤として、または癌治療の有害性に対する化学保護剤としての使用のためには、効果をもたらす放射線または化学療法に付す前に、この用量を十分に投与すべきである。静脈内投与については、放射線または化学療法の施用に先立ち30分以内にこの用量を投与することが好ましい。皮下投与のためには、放射線療法の施用に先立ち約20から90分にこの用量を投与することが好ましい。 MDSなどの骨髄増殖または骨髄機能の回復が必要な疾病を治療する際の使用のためには、約２μＭから100μＭの循環濃度の投与化合物（および／またはその有効な代謝物）が有効であろうと期待される。そうでなければ、または加えて、約0.1μＭから1000μＭの組織濃度の投与化合物（および／またはその有効な代謝物）が有効であろうと期待され、約10μＭから500μＭが好ましい。アミホスチンおよび／またはその有効代謝物WR-1065の投与のための通常の患者用量は、通常、約50mg/日から1000mg/日、一般には約100mg/日から900mg/日、典型的には約200mg/日から800mg/日の範囲である。患者体重の点から言えば、通常用量は約0.5から16mg/kg/日、一般には約1.1から15mg/kg/日、典型的には約2. 2から13.5mg/kg/日の範囲である。患者の体表面積の点から言えば、通常用量は約22から666mg/m²/日、一般には約45から600mg/m²/日、典型的には約 90から540mg/m²/日の範囲である。アミホスチンおよび／またはその有効代謝物WR-1065の皮下投与のためには、患者用量は通常、約50mg/日から1200mg/日、一般には約100mg/日から1100mg/日、典型的には約200mg/日から1000mg/日の範囲である。体重の点から言えば、通常用量は0.5mg/kg/日から20mg/kg/日、一般には約1.1mg/kg/日から18mg/kg/日、典型的には約2.2mg/kg/日から16.2mg/kg/日の範囲である。患者の体表面積の点から言えば、通常用量は約22mg/m²/日から800mg/m²/日、一般には約45mg/m²/日から720mg/m²/日、典型的には約90mg/m²/日から650mg/m²/日の範囲である。他の投与様式のためには、用量および間隔は、従前に記載したように、本明細書に記載した薬物速度論的プロフィールに従い、投与化合物および／またはその有効代謝物の有効な血漿および／または組織レベルをもたらすよう個々に調整できる。もちろん投与化合物の実際量は、治療される被験者、被験者の体重、苦痛の重篤度、投与様式および処方する医師の判断による。 6.実施例：アミホスチンの皮下投与はin vivo毒性を軽減する患者への皮下投与アミホスチンの有利な作用は、第Ｉ段階の無作為化された３種の交差実験で証明された。この研究は米国のある機関で行われた。正常な被験者を無作為に選び、表１に記載したように、連続３日間、静注用輸液(200mg/m²)、経口製剤(500mg)および皮下注射剤(500mg)としてアミホスチンを受容させた。この研究では全12名の被験者を処置した。表１処置スキーム（３種交差計画）処置Ａ：7.5分間にわたる連続静注用輸液としてのアミホスチン(200mg/m²) 処置Ｂ：１回の経口用量としての液体製剤中のアミホスチン(500mg) 処置Ｃ：２本の同時皮下注射剤としてのアミホスチン(500mg) すべての被験者は、研究薬の第１用量の投与前のタ刻から最後の全血サンプルを得るまで研究場所に隔離した。全血サンプルは各アミホスチン投与後４時間までに採取した。適格な被験者は、18から35歳（含む）の間の健常な男性ボランティアであった。研究に入れたすべての被験者は、完全血球数(CBC)、血清化学および尿検査に関して、対照実験室用の±10％の正常範囲内の処置前値を有しており、本発明らはこれらを臨床上無視できるものとみなした。さらに、すべての被験者は処置前、正常な心電図(EKG)を有していた。ヒト免疫不全ウイルス(HIV)陽性、活性物質濫用、または喫煙者（少なくとも過去６ヶ月以内）であることがわかった被験者は除外した。また、処置前に高血圧（心収縮圧＞140mmHg）であった被験者、心臓血管病であるとわかった被験者、インフォームド・コンセントを検討、サインを完了することから排除されるであろう、全般的または心理条件を有する被験者、ならびに研究開始前７日間および研究参加中３日間、アルコール飲料および処方薬や売薬、ビタミンを含むすべての医薬を断つことに賛同を示さないまたはそれができない被験者も除外した。 6.1 静脈用アミホスチンの調製静脈内注入用としては、各バイアルのアミホスチン(500mg/バイアル、U.S Bio science，ロット番号C3017C)を9.7mLの0.9％ Sodium Chloride Injection，USP で再構成した。さらに適当用量のアミホスチン(200mg/m²)を0.9％ Sodium Chloride Injection,USPで希釈し、投与用の50mL容量を作製した。 6.2 経口用アミホスチンの調製経口投与用としては、各バイアルのアミホスチン(500mg/バイアル、U.S Biosc ience，ロット番号C3017C)を5mLの通常の生理食塩水で再構成した。この再構成溶液を10mLの投与用シリンジに吸い取った。 6.3 皮下用アミホスチンの調製皮下注射用としては、各バイアルのアミホスチン(500mg/バイアル、U.S Biosc ience，ロット番号C3017C)を2.5mLの通常の生理食塩水で再構成した。この溶液を２本の投与用シリンジ(1.25mL/シリンジ)に分注した。 6.4 静脈用アミホスチンの投与午前8:00から始めて7.5分間の注入（注入用ポンプを通じて）として、患者に2 00mg/m²の用量で静脈用アミホスチンを受容させた。注入中被験者は仰臥位を維持した。アミホスチン投与後、すべての被験者に標準的な朝食を摂らせた。さらに正午に、すべての被験者に標準的な昼食を、午後6:00には標準的なタ食を、さらに午後10:00には標準的なスナックを与えた。アミホスチン注入直前、注入中2.5分毎に、また注入後５分の時点でベースライン収縮期血圧およびパルスを測定した。表２に概略を示したように、収縮期血圧が低下した場合、または患者が低血圧に関連する症状（めまい、発汗または胸部の痛み）を示した場合にはアミホスチン注入を中断した。低血圧になった場合は、その患者には通常の生理食塩水の迅速注入を受けさせ、血圧がベースラインに戻るまで仰臥またはトレンデレンブルク体位を維持させた。この間、血圧は３分間毎にモニターした。アミホスチン注入を停止して５分以内に血圧が表２に規定した値まで戻り、かつ、被験者にその他の症状がなければ、血圧の頻繁なモニターを続けつつアミホスチン注入を再開することができた。さらに低血圧のいずれの症状が起こっても、前記の指標を再び適用した。被験者の血圧がアミホスチン注入を停止して５分以内にアミホスチン注入を再開する閾値に戻らなかった場合は注入を止め、未使用の薬剤はいずれであっても廃棄した。表２アミホスチン中断および開始のための血圧指標 6.5 経口アミホスチンの投与経口アミホスチンを受ける被験者は、経口用量を受ける前夜の真夜中から標準昼食をとる次の日の正午まで（水を除いて）絶食した。被験者が経口アミホスチンを受ける日、アミホスチン投与開始１時間前にラニチジン（ranitidine）(50m g)を静脈注射により投与された。被験者は、液製剤で500mg用量の経口アミホスチンを受けた。この製剤は、被験者の咽頭のうしろに該溶液を静かに噴出して投与した。被験者はアミホスチンの経口溶液の投与後１時間仰向けに寝かせた。アミホスチン投与後、全被験者は経口アミホスチンの不快な昧を緩和するために４オンスの水を飲むことおよび硬いキャンディーを食べることが許された。全被験者は、正午に標準昼食、午後６時に標準夕食、そして午後10時に標準軽食が与えられた。生体徴候（血圧および脈拍）をアミホスチンの経口投与直前に測定し、これを１時間、５分ごとに繰り返した。もし、低血圧が起これば、被験者に500ml標準生理食塩水を急いで輸液し、血圧が基線に戻るまで、仰向けもしくはトレンデレンブルグ（Trendelenburg）体位に寝かせた。この時間の間、血圧を３分ごとに監視した。６．６皮下アミホスチンの投与皮下アミホスチンは、500mgの用量で（液体製剤として）投与した。アミホスチンの用量を２つの注射器に等しく分割し、腹壁の２個所に投与した。被験者はアミホスチンを２つ注射した後、仰向けに30分寝かせた。アミホスチン投与後、全被験者は標準朝食をとることが許された。全被験者は、正午に標準昼食、午後６時に標準タ食、そして午後10時に標準軽食が与えられた。生体徴候（血圧および脈拍）をアミホスチンの皮下投与直前に測定し、これを 30分間、５分ごとに繰り返した。もし、低血圧が起これば、被験者に500ml標準生理食塩水を急いで輸液し、血圧が基線に戻るまで、仰向けもしくはトレンデレンブルグ（Trendelenburg）体位に寝かせた。この時間の間、血圧を３分ごとに監視した。６．７事前および同時に行った投薬アミホスチンを経口投与した日に、ラニチジンを全被験者に投与した。グレード２またはそれより高い吐き気および／または嘔吐を経験した被験者は、必要に応じて４時間ごとにプロクロルペルザイン（経口または座薬で10mg）を受けることが許された。６．８治療前アセスメント治療開始の７日以内に、次の事項を含む治療前評価を実施した：・履歴ならびに身長、体重および生体徴候（血圧、脈拍および体温）を含む身体検査；・識別を含む全血球算定（CBC）および血小板；・血中尿素窒素(BUN)、血清クレアチン、カルシウム、全ビリルビン、アルブミン、SGOT、SGPT、アルカリホスフェート、グルコースおよび全タンパク質を含む血液化学；・尿分析；および・心電図（EKG）もし被験者の研究室パラメータが異常であれば、研究室試験を繰り返した。もし再試験パラメーターが正常であれば、その被験者は研究に含めた。もし異常パラメーターが続くようであれば、被験者は研究から外した。６．９効能アセスメント本研究の主要到達目標は、静脈投与された200mg/m²のアミホスチンと比較して、皮下または経口投与された500mgのアミホスチンの相対的なバイオアベイラビリティ（bioavailability）であった。これはそれぞれの被験者が３つの全ての投与経路によりアミホスチンを受けるクロスオーバー（crossover）研究であったので、静脈アミホスチンと相対的な皮下および経口アミホスチンのバイオアベイラビリティを各被験者内で評価した。６．９．１血液サンプルの採取血液サンプル（各５〜７mL）は、静脈穿刺（venipuncture）または留置静脈カテーテル（IVC）ヘアピンロックにより採取した。もしIVCを使う場合は、注入側と反対の腕に挿入した。もし中心系（central line）を使う場合は、静脈アミホスチンは遠位静脈部位に投与した。どちらの系も、血液採取前に最初の3〜5ccの血液を廃棄した(空隙容積)。静脈アミホスチンを受ける被験者については、血液サンプルを、アミホスチン投与５分前（基線）ならびにアミホスチン投与後2.5、5、7.5、10、15、20、30 および60分、ならびに２および４時間に採取した。液製剤として経口アミホスチンを受ける被験者については、血液サンプルを、アミホスチン投与直前（基線）ならびにアミホスチン投与後5、10、15、30、45 および60分、ならびに２および４時間に採取した。皮下アミホスチンを受ける被験者については、血液サンプルを、アミホスチン投与直前（基線）ならびにアミホスチン投与後5、10、15、30、45および60分、ならびに２および４時間に採取した。６．９．２血液サンプルの調製血液サンプルは、アミホスチンのそれぞれの用量後４時間内、指定された回数、採取した。それぞれの血液サンプルは、表３に記載したように調製した。血液サンプルを分析目的によって分割した：一つのサンプルを使ってアミホスチンの存在を定量し、そして他のサンプルを使ってWR-1065（活性代謝物）の存在を定量した。表３アミホスチンおよびWR-1065濃度測定用血漿サンプルの調製EDTAはエチレンジアミン四酢酸である PCAは過塩素酸である表３に示されるように、薬物動態分析のためのアミホスチン（親医薬）とWR-106 5（活性代謝物）の調製は相異した。この相異はアミホスチンの代謝経路に基づいた。アミホスチンは、組織部位でアルカリホスファターゼにより脱ホスホリル化されて活性代謝物WR-1065になるプロドラッグである。WR-1065はさらに酸化されて対称（symmetrical）および混合ジスルフィドの両方を形成するか、または銅依存アミンオキシダーゼ経由でさらなる代謝を経てアクロレインおよびシステアミンを形成する可能性がある。WR-1065のさらなる酸化を防止するために、遠心分離の前にサンプルにPCA/EDTAを加えた。PCA/EDTAは血液の細胞含有分を破壊するので、サンプルは活性代謝物の汚染／代謝を防止するために長時間遠心分離した。その結果、WR-1065分析用には透明な上清（血清）のみを使用した。対照的に、親医薬分析用に定めた血液サンプルにはPCA/EDTAを加えなかった；それ故に、親医薬分析用には血漿サンプルを調製した。６．９．３薬物動態学分析アミホスチン（無変化医薬）およびWR-1065（活性代謝物）の濃度を、電気化学検出高圧液体クロマトグラフィー（HPLC）を使って、ショーらが記載した方法（Shaw et al. 1984，"A Liquid Chromatographic Electrochemical Assay for S-2-(3-Aminopropylamino)ethylphosphorothioate（WR-2721）in Human Plasma, "J ．Liq．Chromatog. 7:2447-2465;Shaw et al.，1986，"Measurement of S-2-( 3-Aminopropyl Amino)ethanethiol（WR-1065）in Blood and Tissue,"J ．Liq．C hromautog. 9:845-859）で測定した。投与の各経路に従って各被験者に対する薬物動態学パラメーターの決定には、PCNONLINのWINDOWSバージョンであるWINNONL INを使った。データのノンコンパートメントモデル化を実施した。６．10 安全アセスメントプロトコル治療の少なくとも１用量を受けた全被験者は安全について評価可能であるとみなした。（被験者が研究地を去る前に）有害な症状、身体検査および研究室試験の分析を通して、アミホスチン投与中および投与後の安全を評価した。アミホスチンのそれぞれの投与の後、毒性表記（toxicity notation）を行った。毒性は、National Cancer Institute(NCI)一般毒性判定基準（Common Toxic ity Criteria）に基づいた。次の安全評価を、アミホスチンの最後の投与後に(３日に)、被験者が研究地を去る前に実施した。・生体徴候（血圧、脈拍および体温）を含む身体検査；・識別を含む全血球算定（CBC）および血小板；・BUN、血清クレアチン、カルシウム、全ビリルビン、アルブミン、SGOT、SGPT 、アルカリホスファターゼ、グルコースおよび全タンパク質を含む血液化学；・尿分析；および・毒性表記退院時異常な研究値を有する被験者は、それらのパラメータを繰り返した。もしパラメーターが異常のまま残れば、被験者を彼の選択する医師に照会してフォローアップした。６．１１試料サイズ決定１２名の被験者に関して３×３ラテン方陣方法を用いると、アミホスチン（am ifostine）(親薬物)およびＷＲ−１０６５についての曲線下面積（ＡＵＣ）における３０％差異を検出する出力は８０％であった。この差異は１経路投与−対− 他の２つの投与経路についてのＡＵＣ値の変化として定義される(６７％を超えるまたは４０％未満)。出力計算は平均ＡＵＣ値の５０％の標準偏差および被験者に関して７０％補正を仮定した。６．１２統計的分析この実験の一次終点は、静脈内投与した２００ｍｇ／ｍのアミホスチンと比較した経口または皮下投与した５００ｍｇのアミホスチンの相対的生体内利用率であった。これは、各被験者に全ての３つの投与経路によってアミホスチンを摂取させる交差実験であるので、静脈内アミホスチンに対する皮下および経口投与の生体内利用率は各被験者内で評価した。生体内利用率は、０から４時間の血漿／血清濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）を用いて評価した。ＡＵＣは最後の非ゼロ点からの直線に従った外挿を用いて計算した。経口および皮下投与後のアミホスチン（親薬物＋活性代謝物）の生体内利用率は、これらの投与経路のＡＵＣと静脈内アミホスチンＡＵＣとの比率に基づくものであった。次いで、経路、期間および被験者を変数とした偏差分析（ＡＮＯＶＡ）モデルを用いてＡＵＣを分析した。この変数は経路および期間によって特異的に決定されるので、配列はモデルに含ませなかった。静脈内経路に対する皮下または経口経路の比率についての信頼区間は完全ＡＮＯＶＡモデルからの平均二乗誤差を用いて計算した。これは３日間連続で行うべき交差実験であるので、毒性は起こった日の投与経路に帰せられることとした。十分な非パラメーターモデル（比率テストの尤度）を用いて、期間および配列効果につき補正した毒性を評価した。ＳＡＳ＠のＰＲＯＣＣＡＴＭＯＤをこの分析で用いた。６．１３結果１９９６年４月２日および１９９６年７月２３日の間に、１２名の健康なボランティアを、静脈内、経口および皮下投与したアミホスチンに関する本フェーズＩの生体内利用率実験に登録した(プロトコールＷＲ−Ａ０５７)。この実験はは米国の１つの地域で行った。１２名の全被験者はプロトコール当たり実験を完了した。合計１２名の健康な男性がプロトコールＷＲ−Ａ０５７に登録した(表４)。これらの被験者のメジアン年齢は２５．５歳であり、１８から３４歳の範囲であった。メジアン体表面積（ＢＳＡ）は１．８４ｍであり、１．６９から２．１５ｍの範囲であった。全被験者は正常範囲の１０％内の正常な処理前実験値を有し、実験医薬を摂取するに前には重大な徴候異常性は有しなかった。さらに、全被験者は正常な処理前ＥＫＧを有した。表４静脈内、経口および皮下投与によりアミホスチンを摂取した１２名の被験者のベースライン人口統計学的特徴６．１３．１生体内利用率図１は、１２名の被験者におけるアミホスチンの経口、皮下および静脈内投与後の、アミホスチン（親薬物＋活性代謝物）についての血漿／血清濃度−時間曲線を示す。この図で分かるように、３つの投与経路の血漿／血清濃度−時間曲線の形状は顕著に異なった。（７．５分間にわたる）２００ｍｇ／ｍ²静脈内注入後、薬物投与から１分以内にアミホスチンの迅速な摂取があった。その後、アミホスチンの血漿／血清濃度は迅速に減少した。アミホスチンの最適濃度は静脈内投与の８から１０分後にほぼ１３０μＭであり、これは薬物投与の４５分後には１０μＭ未満に降下した。５００ｍｇの皮下注射後では、静脈内投与と比較して、アミホスチンの血漿／血清濃度の顕著でゆっくりとした上昇であった。アミホスチンの最大濃度（ほぼ１５μＭ）が皮下投与１５分後に観察され、ほぼ３０分間維持された。その後、アミホスチンの濃度は皮下投与のほぼ５０分後には１０μＭ未満に降下した。２００ｍｇ／ｍ²の静脈内アミホスチンおよび５００ｍｇの皮下アミホスチンの投与の３０分後では、アミホスチン（親薬物＋活性代謝物）の血漿／血清濃度−時間曲線は同一であった。経口投与（液体処方として５００ｍｇ）の後に、アミホスチンの最大濃度（ほぼ５μＭ）が薬物投与の５から８分後に観察された。アミホスチンの濃度は経口薬物投与の１０から１３分後に１．０μＭ未満に降下した。ほぼ４μＭの第２のピークが経口薬物投与の４５分後に観察され、これは薬物投与の６０分後にほぼ１μＭまで降下した。図２はアミホスチンの１２名の被験者への経口、皮下および静脈内投与後のアミホスチン（親薬物）についての平均血漿濃度−時間曲線を示す。アミホスチンの経口投与後では、被験者の血漿試料中の親薬物の検出可能な量はなかった。静脈内および皮下投与の血漿濃度−時間曲線の形状は図１で観察されたものと同様であった。２００ｍｇ²／ｍ静脈内投与後、薬物投与の１分以内にアミホスチンの迅速な摂取があった。その後、アミホスチンの血漿濃度は迅速に低下した。アミホスチンの最大濃度は静脈内投与の８から１０分後にほぼ１００μＭであり、これは薬物投与の３０分後に１０μＭ未満に降下した。５００ｍｇの皮下注射後、アミホスチンの血漿濃度のゆっくりとした上昇があった。アミホスチンの最大濃度（ほぼ１０μＭ）が皮下投与１５分後に観察され、ほぼ３０分間維持された。その後、アミホスチンの濃度は皮下注射のほぼ４５分後に１０μＭ未満に降下した。２００ｍｇ／ｍ²の静脈内アミホスチンおよび５００ｍｇの皮下アミホスチンの投与の３０分後では、親薬物の血漿濃度−時間曲線は同様であったが、皮下アミホスチン対−静脈内アミホスチンにつき観察された親薬物の濃度はより高かった。図３は、１２名の全被験者におけるアミホスチンの皮下、経口および静脈内投与後のＷＲ−１０６５（活性代謝物）についての平均血清濃度−時間曲線を示す。この図で分かるように、３つの投与経路の血清濃度−時間曲線の形状は図１で観察されたものと同様であった。事実、図１における経口アミホスチンについての血清濃度−時間曲線は図３と正確に同一の曲線であった；これは、アミホスチン経口投与後の被験者の血漿試料中に親薬物の検出可能な量はなかったという事実による。２００ｍｇ／ｍ²の静脈内注入後、薬物投与の１分以内にＷＲ−１０６５の迅速な摂取があった。その後、ＷＲ−１０６５の血清濃度も迅速に低下したが、親薬物で観察されたものよりもゆっくりとした速度であった(図２参照)。ＷＲ−１０６５の最大濃度は静脈内投与の１０分後にほぼ３０μＭであり、これは薬物投与のほぼ４５分後には５μＭ未満に降下した。５００ｍｇの皮下注射後では、ＷＲ−１０６５の血清濃度のゆっくりとした上昇があった。ＷＲ−１０６５の最大濃度（ほぼ５μＭ）が皮下投与の１５分後に観察され、ほぼ３０分間維持された。その後、ＷＲ−１０６５の濃度は皮下投与のほぼ６０分後に５μＭ未満まで降下した。２００ｍｇ／ｍ²の静脈内アミホスチンおよび５００ｍｇの皮下アミホスチンの投与の４０分後に、活性代謝物の血清濃度−時間曲線は同一であった。この実験の一次終点は静脈内投与された２００ｍｇ／ｍ²アミホスチンに対する経口または皮下投与された５００ｍｇアミホスチンの相対的生体内利用率であった。表５は、アミホスチンの経口、皮下および静脈内投与後の各被験者についてのアミホスチン（組み合わせた親薬物および活性代謝物）のＡＵＣ値をリストする。ＡＵＣの比率に基づき、５００ｍｇ皮下投与後のアミホスチン（親薬物および活性代謝物）の相対的生体内利用率は２００ｍｇ／²ｍの静脈内投与の０．６７であった(０．３７から０．９８の９５％信頼区間)。５００ｍｇ経口投与後のアミホスチンの相対的生体内利用率は２００ｍｇ／ｍ²静脈内投与の０．１１（０．０４から０．１８の９５％信頼区間）であった。表５１２名の健康な男性被験者において静脈内投与された２００ｍｇ／ｍ²アミホスチンに対する経口または皮下投与された５００ｍｇアミホスチンの相対的生体内利用率（組み合わせた親薬物および活性代謝物）組合せのＡＵＣ（μＭ×分）生体内利用率ＣＩ：信頼区間＊ＡＮＶＡモデルからの平均二乗誤差を使用表６はアミホスチンの経口、皮下および静脈内投与後の各被験者についての親薬物のＡＵＣ値をリストする。ＡＵＣの比率に基づき、５００ｍｇの皮下投与後の親薬物の相対的生体内利用率は２００ｍｇ／ｍ静脈内投与の０．７２であった (０．２６から１．１８の９５％信頼区間)。５００ｍｇ経口投与後の親薬物の相対的生体内利用率は、親薬物はアミホスチンの経口投与後に被験者の血液試料中で検出できなかったので０．００であった(図２参照)。表６１２名の健康な男性被験者における静脈内投与された２００ｍｇ／ｍ²アミホスチンに対する経口または皮下投与された５００ｍｇアミホスチンの相対的生体内利用率（親薬物）親薬物のＡＵＣ（μＭ×分）生体内利用率ＣＩ：信頼区間＊ＡＮＯＶＡモデルからの平均二乗誤差を使用表７はアミホスチンの経口、皮下および静脈内投与後の各被験者についての活性代謝物（ＷＲ−１０６５）のＡＵＣ値をリストする。ＡＵＣの比率に基づき、５００ｍｇ皮下投与後の活性代謝物の相対的生体内利用率は２００ｍｇ／ｍ²の０．７１であった(０．５５から０．８６の９５％信頼区間)。５００ｍｇの経口投与後の活性代謝物の相対的生体内利用率は２００ｍｇ／ｍ²静脈内投与の０．３２であった(０．１６から０．４８の９５％信頼区間)。表７１２名の健康な男性被験者における静脈内投与された２００ｍｇ／ｍ²アミホスチンに対する経口または皮下投与された５００ｍｇアミホスチンの相対的生体内利用率（活性代謝物）活性代謝物のＡＵＣ（μＭ×分）生体内利用率ＣＩ：信頼区間＊ＡＮＯＶＡモデルからの平均二乗誤差を使用表５、６および７で提示した前記ＡＵＣデータを用いて、経口および皮下投与後のアミホスチンの絶対生体内利用率を計算した。１００％生体内利用率を表す用量としての２００ｍｇ／ｍ²静脈内投与を用い、経口および皮下アミホスチンについてのＡＵＣデータを用量につき調整し、静脈内アミホスチンについてのＡＵＣデータと比較した。ＡＵＣの比率に基づき、相対的生体内利用率とは対照的に、皮下投与後のアミホスチン（親薬物＋活性代謝物）の絶対生体内利用率は静脈内投与の０．５０であった(０．２７から０．７３の９５％信頼区間)。皮下投与後の親薬物および活性代謝物の絶対生体内利用率は静脈内投与の、各々、０．５３（０．１８から０．８８の９５％信頼区間）および０．５３（０．４１から０．６４の９５％信頼区間）であった。経口投与後のアミホスチン（親薬物＋活性代謝物）の絶対生体内利用率は静脈内投与の０．０８（０．０３から０．１３の９５％信頼区間）であった。 6.13.2 有効性アミホスチン（親薬物）の血漿中濃度およびWR-1065（活性代謝物）の血清中濃度を、500mg皮下注射液、500mg経口溶液および200mg/m²静脈内注射液(7.5分にわたる)としてアミホスチンを投与する前および投与後４時間まで、12名の健康な男性被験者から得た血液試料で測定した。これらのデータから、血漿／血清濃度−時間曲線を作成し、これを用いて、各投与経路によるアミホスチン（親薬物および活性代謝物の双方）の薬物速度論的プロフィールを決定した。図１に示すごとく、３つの投与経路のアミホスチン（親薬物＋活性代謝物）についての血漿／血清中濃度−時間曲線の形状は異なった。全ての３つの投与経路では、薬物投与の５分以内にアミホスチンが迅速に取り込まれた。静脈内経路は最も速い取り込み速度を呈し、皮下経路および経口経路がそれに続いた。その後、アミホスチンの血漿／血清中濃度は低下した。低下速度は静脈内経路につき最も速く、皮下経路につき最もゆっくりであった。静脈内投与後のアミホスチン（親薬物＋活性代謝物）の最大濃度はほぼ130μＭであった(およそ、親薬物について100μＭ、活性代謝物について30μＭ)。皮下および経口投与後のアミホスチン (親薬物＋活性代謝物)の最大濃度は、各々、ほぼ15μＭおよび５μＭであった。最大濃度には薬物投与後ほぼ15分で到達し、45分までにプラトーとなった。図２に示すごとく、経口アミホスチンを投与した被験者の血漿試料中には親薬物は検出可能な量では含まれなかった。 6.13.3 副作用表８に、アミホスチンの静脈内、経口および皮下投与後の副作用を報告した被験者を列挙する。副作用のためアミホスチンを中断した被験者はいなかった。全ての副作用は軽度の症状であり、一過性であって、アミホスチンに関係すると考えられた。５名の被験者は静脈内アミホスチンによる副作用を報告したのに対し、１名の被験者は経口および皮下アミホスチンによる副作用をそれぞれ報告した。吐き気が最も一般的な副作用であった。他の副作用としては、頭痛、低血圧、嘔吐、目眩および眠気が挙げられた。表８アミホスチンの静脈内、経口および皮下投与による副作用^* を報告した被験者のリスト（Ｎ＝12）＊全ての副作用は軽度の症状であり、アミホスチンに関連した。 6.13.3.1 低血圧軽度で一過性の症状の発現が、アミホスチンの静脈内および経口投与後に１名の被験者によって報告された(表10)。実験の２日目に、被験者1003は115／58mmH gの注射前血圧読みを有し、これは注射の完了の５分後に99／56mmHgまで低下した。５分後、彼の血圧はベースライン(114／56mmHg)まで回復した。被験者1003 は３日目のアミホスチンの経口投与後にも低血圧を２回発症した。121／70mmHg のベースライン血圧の読みにて、血圧の一過性減少(99/49および98／51mmHg)が、各々、アミホスチンの経口投与の５分および25分後に観察された。その後、他の血圧読みのいずれも低血圧の基準を満たさなかった。アミホスチンの皮下投与では低血圧は発症しなかった。 6.13.3.2 嘔吐６名の被験者は実験の間に吐き気を報告し、１名の被験者は嘔吐を報告した。吐き気は静脈内アミホスチン投与後に５名の被験者で報告され、皮下アミホスチン投与後に１名の被験者で報告された(表10)。嘔吐は静脈内アミホスチン投与後に１名の被験者で報告された。吐き気／嘔吐の発症は全て軽度の症状であり、一過性の性質であった。抗嘔吐療法は静脈内アミホスチン投与後に２名の被験者で処方された。被験者1007には吐き気につきプロクロルペラジン(10mg)を投与し、被験者1008には吐き気／嘔吐につきプロクロルペラジン(10mg)を投与した。 6.13.3.3 臨床評価体重および生存徴候（血圧、脈拍および体温）を含めた物理的調査は、アミホスチンの最終投与後、実験場所を被験者が去る前に行った。アミホスチンの最後の投与後にこれらのパラメーターで顕著な変化は認められなかった。 6.13.3.4 臨床的実験室試験血液学、血清化学および尿分析を含めた実験室試験は、アミホスチンの最終投与後、被験者が実験場所を去る前に行った。試験結果を試験参照範囲ならびにNC I通常毒性基準(NCI Common Toxicity Criteria)と比較した。１名の被験者(被験者1010)は参照範囲(0.70〜1.40mg/dL)の下方限界よりも＞10％低い血清クレアチニン値(0.60mg/dL)を有した；この被験者のベースライン値は0.90mg/dLであった。この低い値は、本発明者らは臨床的に有意であると考えた。加えて、被験者のいずれもNCI通常毒性基準に従ってグレード２以上の高い実験室的毒性を経験した。 6.13.3.5 安全性についての結論アミホスチンは投与経路に拘わらず充分に許容された。12名全ての被験者でプロトコール当たり所要の実験投薬を完了した。副作用によりアミホスチンを中断した被験者はいなかった。全ての副作用は軽度の症状であり、一過性であって、アミホスチンに関連すると考えられた。５名の被験者は静脈内アミホスチンによる副作用を報告し、それに対して、１名の被験者は、経口および皮下アミホスチンによる副作用をそれぞれ報告した(表８)。吐き気は最も一般的な副作用であった。他の副作用としては、頭痛、低血圧、嘔吐、目眩および眠気が挙げられた。低血圧の軽度で一過性の症状の発現が、アミホスチンの静脈内および経口投与の後に１名の被験者によって報告された。これらの症状の発現はアミホスチン投与の後に起こり、いずれも持続が５分を超えては継続しなかった。アミホスチンの皮下投与による低血圧の発生は認められなかった。臨床的評価または臨床的実験室試験のいずれについても顕著な知見はなかった。７．放射線誘発性粘膜炎に対するアミホスチン防御動物の皮下投与放射線治療に関連する主要な限定的急性毒性の１つは放射線誘発性粘膜炎である。急性の粘膜反応の持続期間と重篤度を低下させる能力は、頭部および頸部癌の放射線療法および／または化学療法で特に重要である。従って、アミホスチンの放射線防御効果を粘膜炎の実験モデルで調べた。特に、実験は皮下および腹腔内投与によるアミホスチンの放射線防御効果を比較した。Parkinらによって開発されたマウスモデルを用いて、照射後にマウスの下唇における粘膜反応を調べた。このモデルは当該分野において再現性のあるモデルとして確立されている(Par kinら、1983、Radiother，Oncol．1:159-165)。 7.1 実験デザイン 8〜10週齢のC57BL/6のメスのマウスを用い、半流体食物を与えた。合計40匹のマウスを各々５匹の８つの処理群に無作為に分割した。処理群は以下の通りとした：群１：生理食塩水(腹腔内)および照射群２：生理食塩水(皮下)および照射群３：アミホスチン(200mg/kg、腹腔内)および照射群４：アミホスチン(400mg/kg、腹腔内)および照射群５：アミホスチン(200mg/kg、皮下)および照射群６：アミホスチン(400mg/kg、皮下)および照射群７：生理食塩水(腹腔内) 群８：生理食塩水(皮下) 非麻酔マウスを仰臥位に維持し、専らそれらの口の頂部に照射した。Angら(19 82，Int．J．Radiat．Oncol．Biol．Phys．8:145-148)によって以前に使用されたものと匹敵するジグを用いて固定化した。照射は１分当たり1.98Gyを送達する RT250 Philips装置で行った(200Kv、20mA、0.2mmのCu膜)。照射の間、一定の常圧空気更新を維持した。16.5Gyの単一線量を用いてアミホスチンの効果を評価した。 7.2 アミホスチンの投与 200または400mg/kg体重にて注射を行う直前に、アミホスチンを生理食塩水（0 .9％NaCl）に溶解させ、最終濃度を50mg/mlとした。照射の30分前に腹腔内注射および皮下注射を行った。生理食塩水単独のプラセボ溶液を対照群で使用した。 7.3 粘膜炎スコアリング系唇粘膜への照射の効果を、Parkinsら(1983，Radiother.Oncol．1:159-165)によって記載されているスコアリング系を用いて評価した。処理したマウスの体重を処理後に毎日スコアリングした。体重の低下を、恐らくは動物の摂食不能によるものであるが、照射によって誘発された粘膜炎の症状の客観的な指標として使用した。このモデルにおいて、急性反応は照射後10〜11日付近でピークとなった。かかる粘膜紅斑および浮腫のごとき粘膜炎の他の徴候も記録した。これらの徴候は照射後に体重喪失よりも遅れて生じた。粘膜紅斑および浮腫は別にスコアリングし、別々のスコアとしてまたは組合せスコアとして分析し、最大スコアを７とした。マウスの唇粘膜紅斑は表９に従ってスコアリングした。表９粘膜紅斑についてのスコアリング系唇の粘膜浮腫（腫脹）を表10に従ってスコアリングした。表１０粘膜浮腫についてのスコアリング系 7.4 結果照射マウスの体重減少は粘膜炎の客観的な指標として測定した(表11)。単一線量の照射は、特に処理の7〜13日後に動物の体重を大いに減少させた(図4Aおよび 4B)。非照射動物は実験を通じて安定した体重を維持した。体重の低下ば、アミホスチンの腹腔内または皮下注射のいずれかを投与した動物で防げた。アミホスチンの放射線防御効果は用量依存的であった。非照射マウスは実験の全期間において紅斑を有しなかった(表12)。対照的に、紅斑は全ての照射群で観察された(図5Aおよび5B)。アミホスチンの腹腔内および皮下投与は生理食塩水＋照射と比較して平均の紅斑スコアを減少させた。同様に、粘膜浮腫スコアはアミホスチンの両方の注射方法によって減少した(図6Aおよび6B、表13)。図4A、4B、5A、5B、6A、6Bおよび表11〜13に提示したデータは、皮下および腹腔内投与が共に、３つの粘膜炎指標、すなわち、体重、紅斑スコアおよび浮腫スコアによつて測定されたように、照射の有害作用を減少させるのに効果的であることを示している。さらに、200mg/kgのアミホスチンの皮下投与は有害作用が最大となる時点で最大の効果を生じた(すなわち、体重については９日目に、紅斑および浮腫については12日目に)。アミホスチンの用量を200mg/kgから400mg/kg へ増加させても、効果はわずかに上昇するにとどまった。従って、これらの結果は、皮下投与したアミホスチンが腹腔内のごとき他の投与経路に比べて有効性を向上させた可能性のあることを示している。表１１体重表１２紅斑治療後の日数表１３浮腫治療後の日数８．実施例：アミホスチン（amifostine）を皮下投与することにより、ヒトの骨骨髄細胞の増殖が刺激された８．１．MDS患者へのアミホスチンの皮下投与この実験において全ての患者はMDSを保有しており、以下のサブタイプのいずれかを有すると診断された：不応性貧血、環状鉄芽球性不応性貧血、芽細胞過剰による不応性貧血、または変換中の芽細胞過剰による不応性貧血。さらに、この患者らは、血小板減少(血小板＜100,000/μl)、好中球減少(ANCすなわち絶対好中球数＜15001μl)、または非輸注ヘモグロビン＜10g/dlを有しており、および/ またはエントリー前の10週間の間にRBCを少なくとも４ユニット必要とすることにより定義されるような輸血依存者であった。彼らは、この実験前30日以内にMD Sの輸血以外は何ら過去に治療を受けていなかった。皮下注射用に0.9％NaCl（2.5ml）の中に500mgバイアルのアミホスチンを溶解した。計算したアミホスチンの用量が溶解のために2ml体積よりも多くを必要とした場合、総体積を均等に分けて２回の皮下注射により投与した。治療する前および最初の投与後30分間隔で最大90分間にわたり、血圧をモニターした。アミホスチンの一回の用量は、500mgであった。少なくとも３名の患者に対して各用量で治療した。治療サイクル１回毎に、患者には所与のアミホスチン１回／１日( 月曜日〜金曜日)を３週間にわたって投与し、その後２週間休みを与えた。好中球の数(ANC)、血小板数、赤血球反応(ヘモグロビンレベルおよび網赤血球数を含む)、およびin vitroにおけるコロニー形成を測定することにより、治療に対する血液学的応答を評価した。８．２．結果アミホスチンの皮下投与を受けた患者のうち17名について、血液学的応答を評価した。評価したこれら17名の患者のうち４名が、過去この実験の前にアミホスチンの静脈内投与を受けていた。これらの患者の細胞遺伝パターンは、異なつていた。つまり、彼らのうち８名が正常な核型を示し、９名が異常な核型を示した。治療した患者において見られた悪影響はごく少なかった。つまり、１名の患者において悪心(グレードI/II)、４名の患者において疲労(グレードI/II)、６名の患者において発疹(グレードI/II)、１名の患者において嘔吐(グレードI/II) 、１名の患者において局所反応(グレードI/II)、および１名の患者において金属性味覚（グレードI/II)が観察された。表１４は、治療した患者の29％のANCレベルが治療前のレベルに比べて50％以上増加したことを示した。さらに、患者の33％の血小板レベルが治療前のレベルに比べて50％以上増加したことを示した。さらに、患者の71％の網赤血球数が治療前のレベルに比べて50％以上増加したことを示した。表１４治療した患者から骨髄前駆細胞を回収し、標準的なメチルセルロースアッセイにおいてこれらの細胞がCFU-GEMM、BFU-EおよびCFU-GMコロニーを形成する能力を測定した。図７Ａ〜７Ｃは、複数の患者から得た細胞が骨髄コロニーを生成したことを示す。これらの結果は、MDS患者に対するアミホスチンの皮下投与が骨髄細胞の増殖を誘導するのに有効であったことを示す。本発明の範囲は、例示した実施の形態により限定されるものではなく、これらの実施形態は本発明の個々の態様の実例として挙げられるものと意図される。実際、本明細書中に示し記載されたもの以外にも、これまでの記載および添付図面から、本発明の様々な変更が、当業者には自明であろう。このような変更は、添付した請求の範囲内とする。目的にかかわらず、本明細書に引用された全ての刊行物は全て参照として本明細書に組み込まれる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者シェイン，フィリップ，エス. アメリカ合衆国 19010 ペンシルバニア州，ブリンマウア，オールドグルフロード 605

Claims

【特許請求の範囲】 1. アミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、投与した前記化合物、その活性代謝物またはそれらの両方の血漿濃度または全血濃度が約0.1μM/分から40μM/分の速度で増加して、投与後約5分から60分で最大濃度に達する薬物速度論的プロフィールを得るような方法で、それを必要とする被験者に投与する、ステップを含んでなる上記方法。 2. 前記最大濃度が約10〜130分間プラトーに達している、請求項1に記載の方法。 3. 投与後約12〜18分で前記最大濃度に達する、請求項1に記載の方法。 4. 前記最大濃度が約1〜40μMである、請求項1に記載の方法。 5. 式(I)の化合物において、R₁が水素またはメチルであり、R₂が水素またはPO₃ H₂であり、mが2または3であり、そしてnが3である、請求項1に記載の方法。 6. 前記化合物がアミホスチン、WR-1065、WR-151326またはWR-151327である、請求項1に記載の方法。 7. 前記化合物がアミホスチンである、請求項6に記載の方法。 8. 前記化合物がWR-1065である、請求項6に記載の方法。 9. 前記化合物を医薬組成物の形で投与し、前記組成物が前記化合物と製薬上許容される賦形剤、担体または希釈剤を含有する、請求項1に記載の方法。 10．前記化合物を前記被験者に皮下投与する、請求項1に記載の方法。 11．前記化合物を前記被験者に皮下連続注入により投与する、請求項10に記載の方法。 12．アミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、それを必要とする被験者に皮下投与する、ステップを含んでなる上記方法。 13．1回につき約50〜1500mgの前記化合物を前記被験者に投与する、請求項12に記載の方法。 14．前記化合物がアミホスチン、WR-1065、WR-151326またはWR-151327である、請求項12に記載の方法。 15．前記化合物がアミホスチンである、請求項14に記載の方法。 16．前記化合物がWR-1065である、請求項14に記載の方法。 17．前記化合物を医薬組成物の形で投与し、前記組成物が前記化合物と製薬上許容される希釈剤を含有する、請求項12に記載の方法。 18．前記製薬上許容される希釈剤が生理食塩水である、請求項17に記載の方法。 19．皮下投与を連続注入により行う、請求項12に記載の方法。 20．皮下投与した化合物が向上した治療効力を示す、請求項12に記載の方法。 21．電離放射線に伴う毒性から防護するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、投与した前記化合物、その活性代謝物またはそれらの両方の血漿濃度または全血濃度が約0.1μM/分から40μM/分の速度で増加して、投与後約5分から60分で最大濃度に達する薬物速度論的プロフィールを得るような方法で、被験者に投与する、ステップを含んでなる上記方法。 22．電離放射線に伴う毒性から防護するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、それを必要とする被験者に皮下投与する、ステップを含んでなる上記方法。 23．皮下投与した化合物が向上した治療効力を示す、請求項22に記載の方法。 24．癌の化学療法に伴う毒性から防護するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、投与した前記化合物、その活性代謝物またはそれらの両方の血漿濃度または全血濃度が約0.1μM/分から40μM/分の速度で増加して、投与後約5分から60分で最大濃度に達する薬物速度論的プロフィールを得るような方法で、患者に投与する、ステップを含んでなる上記方法。 25．癌の化学療法に伴う毒性から防護するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、それを必要とする被験者に皮下投与する、ステップを含んでなる上記方法。 26．皮下投与した化合物が向上した治療効力を示す、請求項25に記載の方法。 27．骨髄の増殖を刺激するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、投与した前記化合物、その活性代謝物またはそれらの両方の血漿濃度または全血濃度が約0.1μM/分から40μM/分の速度で増加して、投与後約5分から60分で最大濃度に達する薬物速度論的プロフィールを得るような方法で、患者に投与する、ステップを含んでなる上記方法。 28．前記患者が骨髄形成不全症候群にかかっている、請求項27に記載の方法。 29．前記患者が癌にかかっている、請求項27に記載の方法。 30．前記患者がヒト免疫不全ウイルス感染症にかかっている、請求項27に記載の方法。 31．骨髄の増殖を刺激するためにアミノアルキルホスホロチオエートまたはアミノアルキルチオール化合物を被験者に投与する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、それを必要とする被験者に皮下投与する、ステップを含んでなる上記方法。 32．前記患者が骨髄形成不全症候群にかかっている、請求項31に記載の方法。 33．前記患者が癌にかかっている、請求項31に記載の方法。 34．前記患者がヒト免疫不全ウイルス感染症にかかっている、請求項31に記載の方法。 35．皮下投与した化合物が向上した治療効力を示す、請求項31に記載の方法。 36．骨髄形成不全症候群を治療する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、投与した前記化合物、その活性代謝物またはそれらの両方の血漿濃度または全血濃度が約0.1μM/分から40μM/分の速度で増加して、投与後約5分から60分で最大濃度に達する薬物速度論的プロフィールを得るような方法で、骨髄形成不全症候群にかかっている患者に投与する、ステップを含んでなる上記方法。 37．骨髄形成不全症候群を治療する方法であって、（a）治療に有効な量の式：（I） R₁NH(CH₂)_nNH(CH₂)_mSR₂ 〔式中、 R₁は水素、C₁-C₇アリール、C₁-C₇アシル、またはC₁-C₇アルキルであり、 R₂は水素またはPO₃H₂であり、 nは2〜6の整数であり、そして mは2〜6の整数である〕を有する化合物またはその製薬上許容される付加塩もしくは水和物を、骨髄形成不全症候群にかかっている患者に皮下投与する、ステップを含んでなる上記方法。 38．皮下投与した化合物が向上した治療効力を示す、請求項37に記載の方法。