ITMI20080316A1 - Impiego di estratti di hypericum perforatum nel trattamento del dolore neuropatico - Google Patents

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ITMI20080316A1
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hypericum
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Anna Rita Bilia
Nicoletta Galeotti
Carla Ghelardini
Valentino Mercati
Franco Francesco Vincieri
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Aboca Spa
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Description

Descrizione del brevetto per invenzione industriale avente per titolo:
“IMPIEGO DI ESTRATTI DI HYPERICUM PERFORATUM NEL TRATTAMENTO DEL DOLORE NEUROPATICO”
La presente invenzione ha per oggetto l’impiego di estratti di sommità di iperico (Hypericum perforatum L.) e di suoi componenti per la realizzazione di preparati farmaceutici e/o integratori per il trattamento di varie forme di dolore neuropatico (da chemioterapici, da mononeuropatia, da osteoartrite).
SFONDO DELL’INVENZIONE
Il dolore è stato definito dall’Associazione Internazionale per lo Studio del Dolore (International Association for the Study of Pain - IASP) come “una spiacevole esperienza sensoriale ed emozionale associata ad un danno attuale o potenziale dei tessuti o descritta in termini di tale danno”.
All’interno di questa definizione sta assumendo sempre più rilievo, per la significativa e crescente prevalenza a livello mondiale, una particolare tipologia di dolore, legato ad anomalie neurologiche e denominato dolore neuropatico, definito come un “dolore iniziato o causato da una lesione primaria o da una disfunzione del sistema nervoso”, che può manifestarsi come disestesia, allodinia, iperpatia, dolore urente o lancinante.
Il dolore neuropatico è distinto da altri tipi di dolore (nocicettivo) comunemente riportati, tra cui condizioni di cefalea, dolore alla schiena, e da altri tipi di dolore muscolo-scheletrico, e comprende un gruppo eterogeneo di condizioni che non possono essere spiegate da una singola eziologia o da una particolare lesione anatomica.
Queste affezioni delle strutture del sistema nervoso centrale o periferico includono varie neuropatie (neuropatia diabetica, neuropatia post-erpetica, neuropatie infiammatorie, neuropatia da abuso di alcool, neuropatia associata all’infezione con HIV/AIDS) e può derivare da varie tossine (ad esempio, neurotossine), da traumi acuti (compresa la chirurgia), da trauma cronici (ad esempio, ripetitivi disturbi motori) come la sindrome del tunnel carpale, (la più comune delle mononeuropatie, che colpisce 2,8% al 4,6% della popolazione adulta), da malattie del sistema nervoso centrale (come ictus, sclerosi multipla, ischemie cerebrali, morbo di Parkinson, lesioni del midollo spinale traumi cranici).
La diagnosi non è facile in quanto il nervo pur producendo scariche continue dolorose spesso è anatomicamente integro.
Il dolore neuropatico copre una varietà di stati patologici e si presenta con una varietà di sintomi, che sono accomunati dalla seguenti caratteristiche:
• il dolore è percepito in assenza di un processo o di lesione tissutale permanente ed identificabile;
• sono presenti sensazioni sgradevoli, anormali o insolite (disestesie), frequentemente riferite come bruciore o scossa elettrica;
• sono presenti brevi episodi di dolore parossistico a carattere lancinante o trafittivo;
• il dolore compare in ritardo rispetto alla lesione scatenante;
• il dolore è percepito in una regione di deficit sensitivo;
• anche stimoli leggeri sono dolorosi (allodinia);
• c’è sommazione marcata ed attività persistente dopo l’applicazione di stimoli ripetuti.
Si stima che il dolore neuropatico, arrivi ad incidere fino al 3% della popolazione e che circa da 1 a 5 europei adulti siano soggetti a dolore cronico.
La letteratura riporta che negli Stati Uniti, il problema del dolore neuropatico sui pazienti è potenzialmente gravoso anche per i sistemi di assistenza nazionale, con una prevalenza dell’1,5%.
L’80% dei pazienti neoplastici in fase avanzata manifesta sintomi di colore neuropatico.
Il dolore neuropatico cronico è un problema importante in neurologia in quanto è frequente e spesso invalidante per il suo carattere fastidioso e cronico.
È inoltre un dolore che non risponde bene ai più comuni analgesici come acido acetilsalicilico, paracetamolo oppure ai più comuni farmaci antinfiammatori non steroidei.
Il goal dei trattamenti farmacologici dovrebbe essere la prevenzione del dolore, ma in realtà ciò che si ottiene è al massimo una riduzione del dolore ad un livello tollerabile.
Ad oggi, nessuna classe di farmaci è stata provata come universalmente efficace per i pazienti con dolore neuropatico.
Si usano in genere dei farmaci “off label” appartenenti alle seguenti categorie, che però a lungo termine presentano importanti effetti collaterali:
- antidepressivi
- anticonvulsivanti (gabapentin)
- opioidi (metadone - oxicodone)
- tramadolo
- lidocaina
- antinfiammatori inibitori delle citochine.
Quando questi farmaci risultano efficaci, riducono il dolore del 25-40% nel 40-60% dei pazienti.
Numerosi inoltre sono gli effetti collaterali indesiderati provocati dall’impiego continuo di questi farmaci.
Il dolore neuropatico, a causa della sua gravità, cronicità, resistenza alla terapia abituale e gravi conseguenze sulla qualità della vita, rappresenta pertanto una vera sfida clinica.
La ricerca fondamentale su questa patologia utilizza modelli sperimentali metabolici, farmacologici o traumatici nei roditori, che riproducono le caratteristiche dei sintomi del dolore umano (Ref 1-7).
L’iperico, noto anche come Erba di San Giovanni, è costituito dalle sommità fiorite Hypericum perforatum. Contiene un consistente numero di differenti classi di sostanze: derivati naftodiantronici quali ipericina, pseudoipericina e isoipericina, derivati floroglucinolici quali iperforine; contiene inoltre flavonoidi quali iperoside, rutina, I3,II8 biapigenina, quercitina, quercitrina e isoquercitrina, procianidine, olio essenziale, xantoni.
È ampiamente utilizzato nella fitoterapia moderna per il trattamento di alcune forme di depressione lieve o moderata e di problemi psicovegetativi con risultati efficaci alla posologia di 500-1050 mg di estratto/die suddiviso in 2-3 dosi, per 2-4 settimane ed effetti collaterali minori rispetto al trattamento con farmaci antidepressivi sintetici.
Gli estratti di Hypericum perforatum sono stati testati in molti studi sperimentali farmacologici e clinici, che supportano ampiamente il suo impiego per la depressione, ma molte domande sulle sue caratteristiche rimangono aperte. Per spiegare gli effetti antidepressivi sono stati proposti svariati meccanismi d’azione: 1)- blocco non selettivo del reuptake della serotonina, della noradrenalina e della dopamina; 2) - aumento della densità dei recettori serotoninergici, dopaminergici e GABA 3) - aumento dell’affinità per i recettori GABA, 4) - inibizione dell’enzima monoaminossidasi (MAO). L’identità dei principi attivi è ancora discussa e sembra che l’attività farmacologica sia complessa e sia determinata dagli effetti concomitanti di più sostanze attive. L’ipericina era stata identificata come “il” principio attivo, ma recentemente è stato identificato un nuovo costituente, l’iperforina, che sembra giocare un ruolo importante nell’efficacia della droga, mentre i flavonoidi, in particolare la rutina, sono stati identificati come composti che possono condizionarne l’attività (Ref. 8- 15).
Uno studio clinico (16), pubblicato nel 2000, descrive la mancanza di efficacia nel trattamento delle neuropatie di un estratto di iperico.
Altri lavori descrivono un’attività analgesica dell’iperico ma sono stati realizzati su specie diverse dall’Hypericum perforatum, gli estratti non sono caratterizzati chimicamente, la via di somministrazione spesso non è orale, ma soprattutto sono stati valutati su modelli di dolore non neuropatico (hot plate test Writhing test, Ref. 16-22).
DESCRIZIONE DELL’INVENZIONE
Estratti liofilizzati di sommità fiorite di iperico (Hypericum perforatum) ed uno dei suoi componenti, l’ipericina, sono risultati efficaci nel ridurre la sintomatologia del dolore neuropatico in vari modelli sperimentali, in seguito a somministrazione per via orale.
Gli studi sono stati condotti nel roditore, che costituisce da sempre un buon modello animale per la riproduzione delle caratteristiche delle manifestazioni del dolore umano e per la predizione di possibili rimedi.
Gli estratti liofilizzati possono derivare sia dalla liofilizzazione dell’estrazione della droga totale con solvente idroetanolico, sia dalla liofilizzazione della componente più idrofila dalla droga.
Le dosi attive degli estratti liofilizzati di iperico sono comprese in un range da 10 mg/kg a 100 mg/kg.
Gli estratti liofilizzati derivano preferibilmente dall’estrazione della droga totale con solventi idroalcolici (0-100% di etanolo, metanolo, isopropanolo, ecc.) o idroacetonici (0-100%) e dalla separazione e liofilizzazione di una componente più idrofila dalla droga.
Gli estratti liofilizzati di iperico hanno preferibilmente un contenuto di derivati naftodiantronici (ipericina pseudoipericina) non inferiore allo 0,25% valutato mediante metodo HPLC (minimo 0,025 mg per kg di peso corporeo).
Tra i derivati naftodiantronici, l’ipericina è risultata attiva ad una posologia corrispondente alla sua concentrazione negli estratti liofilizzati.
I derivati floroglucinoli isolati (iperforina ed adiiperforina) non sono risultati in grado di ridurre il dolore neuropatico.
L’estratto liofilizzato fino alla dose di 3000 mg/kg per os non altera il comportamento dell’animale, come dimostrato dal fatto che il numero di cadute dall’asta rotante va progressivamente riducendosi al ripetersi delle sessioni, dimostrando che gli animali hanno una coordinazione motoria completamente paragonabile a quella del controlli (Ref. 29 Rota Rod test). Gli estratti analizzati in numerosi parametri comportamentali, movimento, tono muscolare, segni autonomici, non hanno provocato alcuna alterazione. Il punteggio degli animali in trattamento non era diverso rispetto al controllo. (Ref. 28 Irwin test).
L’invenzione è descritta in maggior dettaglio nei seguenti Esempi e Preparazioni.
Preparazione 1. Estratto liofilizzato totale
La Figura 1 riporta lo schema del metodo di preparazione.
L’estratto liofilizzato delle sommità di iperico (Hypericum perforatum) è preparato a partire dalle sommità fiorite dell’iperico. Dopo essiccazione e selezione delle sommità si procede all’estrazione con soluzione idroetanoliche al 50 - 80% di alcool, con un rapporto droga: solvente pari a 1:13.
Si concentra a pressione ridotta la soluzione per rimuovere l’etanolo e si procede all’essiccazione della soluzione tramite processo di liofilizzazione in appositi liofilizzatori.
Preparazione 2. Estratto liofilizzato della frazione idrofila
La Figura 2 riporta lo schema del metodo di preparazione.
L’estratto liofilizzato della frazione idrofila di iperico, contenente le sostanze polari solubili in acqua viene preparato mediante un processo di separazione fisico delle sostanze non idrofile, la centrifugazione mediante decanter. Si procede poi alla liofilizzazione delle due frazioni separatamente.
L’estratto liofilizzato è stato caratterizzato chimicamente mediante l’analisi HPLC che ha rilevato una concentrazione di ipericine totali (ipericina pseudoipericina) da 0,27 a 0,37%.
Esempio 1: Neuropatia indotta da oxaliplatino
La riduzione della soglia algica viene indotta dalla somministrazione di
oxaliplatino 2,4 mg /kg per 5 giorni consecutivi per un totale di 3 settimane.
Al termine del trattamento la soglia di percezione al dolore dei ratti risulta
essere statisticamente ridotta rispetto ai controlli (Ref. 23).
L’estratto liofilizzato totale alla dose di 30 e 60 mg/kg di peso corporeo
è risultato attivo in maniera statisticamente significativa.
Tabella 1a
CURVA DOSE RISPOSTA DELL’ESTRATTO DI IPERICO
SULL’IPERALGESIA INDOTTA DA OSSALILPLATINO NEL TEST DI
PRESSIONE SULLA ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g)
TRATTAMENTO TRATTAMENTO 3<a>3<a>3<a>i.p.mg/kg.p.o.<Pre-test>settimana settimana settimana 15 min. 30 min 45 min
SALINA CMC 57,4 3,5 61,8 5,4 67,4 6,3 62,3 5,4
<OSSALILPLATINO>CMC 22,6 4,6 25,1 6,1 26,9 5,4 24,3 6,6
ESTRATTO OSSALILPLATINO DI IPERICO 21,7 1,2 58,1 3,5* 67,8 2,0* 29,1 2,0
30 mg/kg
ESTRATTO OSSALILPLATINO DI IPERICO 24,5 1,3 48,2 4,6* 25,7 2,4 21,5 0,0
60 mg/kg
Ossalilplatino 2,4 mg/kg-1 per 5 giorni consecutivi alla settimana (15 iniezioni i.p. - dose cumulativa 36 mg/kg)
^ P< 0,05 * p> 0,01
L’estratto liofilizzato della frazione idrofila alla dose di 30 mg/kg di peso corporeo è risultato attivo in maniera statisticamente significativa nel test del dolore neuropatico indotto da oxaliplatino
Tabella 1b
CURVA DOSE RISPOSTA DELLA FRAZIONE IDROFILA DI ESTRATTO DI IPERICO
SULL’IPERALGESIA INDOTTA DA OSSALILPLATINO NEL TEST DI PRESSIONE SULLA
ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g) TRATTAMENTO TRATTAMENTO 3<a>3<a>3<a>i.p.mg/kg.p.o.<Pre-test>settimana settimana settimana 15 min. 30 min 45 min
SALINA CMC 57,4 3,5 61,8 5,4 67,4 6,3 62,3 5,4
<OSSALILPLATINO>CMC 22,6 4,6 25,1 6,1 26,9 5,4 24,3 6,6
ESTRATTO OSSALILPLATINO IDROFILO DI IPERICO 21,0 2,0 42,0 1,9* 63,0 1,9* 14,5 1,0 30 mg/kg
Ossalilplatino 2,4 mg/kg-1 per 5 giorni consecutivi alla settimana (15 iniezioni i.p. - dose cumulativa 36 mg/kg) ^ P< 0,05 * p> 0,01
Esempio 2: Mononeuropatia indotta da legatura del nervo sciatico Il dolore neuropatico è caratterizzato dallo sviluppo di un’alterata percezione del dolore che si manifesta come dolore spontaneo continuo ed iperalgesia. In questo modello i ratti vengono anestetizzati con cloralio idrato 400 mg/kg i.p. o con pentobarbitale di sodio 40 mg/kg i.p.. Successivamente il nervo sciatico viene esposto a livello della coscia divaricando i bicipiti femorali. Prossimalmente alla triforcazione del nervo sciatico, circa 7 mm del nervo vengono liberati dalle membrane e 4 legature lasse vengono effettuate intorno al nervo, circa 1 mm l’una dall’altra. In un altro gruppo di animali viene effettuata un’incisione uguale, ma senza la legatura del nervo (sham operation). La neuropatia si sviluppa in 14 giorni. Le prove con le sostanze potenzialmente analgesiche vengono effettuate il 14° e 21 giorno dall’operazione usando il “paw pressure” (ref. 24).
L’estratto liofilizzato totale alla dose di 10, 30, 60 e 100 mg/kg di peso corporeo è risultato attivo in maniera statisticamente significativa.
Tabella 2a
EFFETTO DELL’ESTRATTO DI IPERICO IN UN MODELLO DI MONONEUROPATIA DX
NEL RATTO VALUTATO NEL TEST DI PRESSIONE SULLA ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g) TRATTAMENTO
i.p.ZAMPA<Prima del>
trattamento Dopo il trattamento
15 min 30 min 45 min CMC sn 60,5 3,8 61,8 3,7 64,6 3,3 59,8 3,2 CMC dx 22,8 2,2 21,6 3,5 23,0 2,6 21,9 3,7<ESTRATTO>sn 56,2 6,6 56,2 7,2 58,7 3,9 51,2 4,3 IPERICO
10 mg/kgdx 20,9 4,0 22,5 3,2 33,7 4,7^ 18,7 2,4<ESTRATTO>sn 63,3 5,7 68,8 4,4 73,3 6,7 51,7 7,5 IPERICO
30 mg/kg dx 20,3 4,4 59,8 3,1 * 65,5 1,7 * 31,3 1,7ESTRATTOsn 62,6 3,0 68,5 4,1 77,6 4,3 60,7 2,2 IPERICO
60 mg/kg dx 21,9 2,4 37,0 2,8 ^ 41,8 4,4 * 22,7 2,4
ESTRATTOsn 62,8 1,7 72,2 2,4 78,6 2,0 62,5 3,8 IPERICO
<100 mg/kg>dx 21,3 2,7 27,5 4,3 31,5 4,3* 20,5 2,9 ^ P< 0,05 * p> 0,01
L’estratto liofilizzato della frazione idrofila alle dosi di 10, 30, 60 e 100 mg/kg di peso corporeo è risultato attivo in maniera statisticamente significativa, come riportato nella seguente Tabella 2b.
Tabella 2b
EFFETTO DELLA FRAZIONE IDROFILA DI ESTRATTO DI IPERICO IN UN
MODELLO DI MONONEUROPATIA DX NEL RATTO VALUTATO NEL
TEST DI PRESSIONE SULLA ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g)
TRATTAMENTO
mg/kg.p.o.<ZAMPA>Prima del
trattamento Dopo il trattamento
15 min 30 min 45 min CMCsn60,5 3,8 61,8 3,7 64,6 3,3 59,8 3,2 CMC dx 22,8 2,2 21,6 3,5 23,0 2,6 21,9 3,7
<ESTRATTO>sn60,9 4,7 62,5 5,8 61,3 6,0 58,2 3,0 IDROFILO DI IPERICO
10 mg/kgdx<20,3 2,9 33,5 3,3 41,6 3,5* 19,8 6,0 ESTRATTO>sn 59,4 4,6 67,5 4,8 63,6 2,4 58,7 3,1IDROFILO DI IPERICO
30 mg/kg<dx 22,3 2,4 55,1 3,2 *>62,0 3,5
* 26,5 3,3<ESTRATTO>sn 60,4 3,6 65,8 2,0 71,2 3,7 57,7 4,8IDROFILO DI IPERICO
60 mg/kg<dx 20,2 2,3 52,4 3,7 * 59,7 3,0* 24,5 3,2>ESTRATTOsn 63,7 3,5 71,2 4,3 73,0 2,9 61,2 3,1 IDROFILO DI IPERICO
100 mg/kg<dx 23,5 3,9 30,2 3,4 35,8 2,5* 20,3 3,3>
^ P< 0,05 * p> 0,01
Esempio 3: Neuropatia indotta da paclitaxel
L’estratto liofilizzato totale alle dosi di 30 e 100 mg/kg di peso corporeo e l’estratto della frazione idrofila alla dose di 30 mg/kg sono risultati attivi in maniera statisticamente significativa nel test del dolore neuropatico indotto da paclitaxel (Ref. 25).
Tabella 3
EFFETTO DELL’ESTRATTO DI IPERICO (30 e 100 mg kg<-1>p.o.) E DELLA
FRAZIONE IDROFILA SULL’IPERALGESIA INDOTTA DA PACLITAXEL NEL
TEST DI PRESSIONE SULLA ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g) TRATTAMENTO TRATTAMENTO
i.p.p.o.<Prima del trattamento>
Pre-test 15 min 30 min 45 min
SALINA SALINA 57,2 ± 3,9 62,6 ± 4,4 58,3 ± 4,7 56,9 ± 3,9
PACLITAXEL SALINA 43,7 ± 4,2 39,6 ± 3,8 41,9 ± 4,3 42,5 ± 4,9
ESTRATTO SALINA IPERICO
30 mg/kg 62,6 ± 3,3 59,8 ± 4,4 57,6 ± 4,7 60,1 ± 4,6 LOTTO 7I0525
ESTRATTO PACLITAXEL IPERICO
30 mg/kg 40,5 ± 3,8 50,3 ± 3,4* 48,0 ± 4,0 36,6 ± 4,2 LOTTO 7I0525
ESTRATTO PACLITAXEL IPERICO
100 mg/kg 39,6 ± 3,3 51,6 ± 3,1* 46,3 ± 3,9 39,5 ± 4,0 LOTTO 7I0525
FRAZIONE PACLITAXEL IDROCICLICA
30 mg/kg 38,3 ± 3,9 49,2 ± 3,8* 44,0 ± 3,5 33,8 ± 3,7 LOTTO 7I0660
Trattamento: Paclitaxel 0,5 mg kg<-1>fu iniettato i.p. quattro giorni (giorni 1, 3, 5 e 8). Le dosi cumulative di Paclitaxel erano 2,0 mg kg<-1>. Il test fu effettuato 14 - 15 giorni dopo l’ultima iniezione di paclitaxel Veicolo: Salina: etilenossido 9:1
8 ratti per gruppo (due esperimenti). ^ P<0,05; versus ratti trattati con paclitaxel.
Esempio 4: Iperalgesia indotta da Vincristina
L’abbassamento della soglia algica viene ottenuto nel ratto per somministrazione e.v. di vincristina (150 gamma/kg e.v. ogni 2 giorni per 5 giorni fino a raggiungere una dose cumulativa di 750 gamma/kg); il test (paw-pressure) viene condotto dopo 4 giorni dall’ultima iniezione (Ref. 26).
In alternativa, la vincristina viene applicata (spennellata) direttamente sul
nervo sciatico. L’estratto liofilizzato totale alle dosi di 30 e 100 mg/kg di peso
corporeo e l’estratto liofilizzato della frazione idrofila alla dose di 30 mg/kg
sono risultati attivi in maniera statisticamente significativa.
Tabella 4
EFFETTO DELL’ESTRATTO DI IPERICO (30 e 100 mg kg<-1>p.o.) E DELLA FRAZIONE
IDROFILA SULL’IPERALGESIA INDOTTA DA VINCRISTINA NEL TEST DI PRESSIONE
SULLA ZAMPA DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g)
TRATTAMENTO TRATTAMENTO
mg kg<-1>e.v.mg kg<-1>p.o.<Prima del trattamento>
Pre-test 15 min 30 min 45 min 60 min
SALINA SALINA 61,6 ± 3,3 57,2 ± 4,5 62,4 ± 4,0 58,3 ± 4,1 61,6 ± 5,3
VINCRISTINA SALINA 35,2 ± 3,4 33,8 ± 4,5 35,1 ± 3,6 36,2 ± 3,7 34,9 ± 2,8
ESTRATTO DI IPERICO SALINA 30 mg/kg 56,3 ± 3,3 63,4 ± 4,0 61,6 ± 3,8 57,3 ± 4,4 58,7 ± 3,3
Lotto 7I0525
ESTRATTO DI IPERICO VINCRISTINA 30 mg/kg 34,9 ± 3,1 52,6 ± 4,2* 51,9 ± 4,5* 38,3 ± 5,0 34,9 ± 5,2
LOTTO 7I0525
ESTRATTO DI IPERICO VINCRISTINA 100 mg/kg 33,90± 3,5 48,2 ± 4,1* 47,5 ± 4,7* 35,7 ± 4,1
LOTTO 7I0525
ESTRATTO DI IPERICO VINCRISTINA 30 mg/kg 31,5 ± 3,2 50,9 ± 3,7* 53,4 ± 4,2* 36,5 ± 4,9 31,3 ± 3,8
LOTTO 7I0660
Trattamento con vincristina: cinque iniezioni i.v. di 150 µg kg<-1>effettuate ogni 2 giorni fino a una dose cumulativa di 750 µg kg<-1>i.v.
Il test fu effettuato 4 giorni dopo l’ultima iniezione di vincristina. 7-8 Ratti per gruppo (due esperimenti). ^ P<0,05 * P< 0,01 versus ratti trattati con vincristina
14 ratti per gruppo (due esperimenti). * P<0,05 versus ratti trattati con vincristina.
Esempio 5: Ipericina nella neuropatia indotta da oxaliplatino Utilizzando lo stesso metodo dell’Esempio 1, si sono avuti i seguenti risultati somministrando ipericina alle dosi indicate nella successiva Tabella 5.
Tabella 5
EFFETTO DELL’IPERICINA (singola somministrazione) SULL’IPERALGESIA INDOTTA DA OSSALILPLATINO NEL TEST DI PRESSIONE SULLA ZAMPA
DI RATTO
Pressione sulla zampa nei ratti (g) TRATTAMENTO TRATTAMENT
i.p.O p.o.<Periodo di trattamento (settimane di ossalilplatino)>
Pre-test prima 3<a>3<a>3<a>3<a>3<a>di tutti i settimana settimana settimana settimana settimana trattamenti Pre test 15 min 30 min 45 min 60 min
SALINA SALINA60,1 ± 2,2<66,2 ±>65,0 ± 4,3 63,9 ± 3,8 66,5 ± 4,4 68,1 ±
4,54,1
29,1 ± OSSALILPLATINO<±>SALINA58,4 ± 4,6<30,5>
4,728,4 ± 4,1 25,8 ± 3,6 27,1 ± 4,1 2,8
IPERICINA OSSALILPLATINO 0,11 mg/kg 63,2 ± 3,5<32,4 ±>
2,044,1 ± 2,8* 55,0 ± 2,2* 53,3 ± 2,6* 31,3 ±
3,0 CMC
IPERICINA OSSALILPLATINO 0,11 mg/kg60,6 ± 3,8<31,7 ±>56,3 ± 2,6* 58,5 ± 2,7* 5233,0 ±
IPERISIDE2,5 ,5 ± 1,2*
2,8 3,118 mg/kg
Trattamento: Ossalilplatino 2,4 mg kg<-1>per 5 giorni consecutivi alla settimana (15 iniezioni i.p. - dose cumulativa 36 mg/kg)
8 ratti per gruppo (due esperimenti). *P<0,01
Esempio 6 - Ipericina nella neuropatia indotta da legatura del nervo sciatico
Utilizzando lo stesso metodo dell’Esempio 2, si sono avuti i seguenti risultati somministrando ipericina alle dosi indicate nella successiva Tabella 6.
Tabella 6
EFFETTO DELL’IPERICINA IN UN MODELLO DI MONONEUROPATIA dx
NEL RATTO VALUTATO NEL TEST DI PRESSIONE SULLA ZAMPA DI
RATTO
Zampa
TRATTAMENTO<ZAMPA>Prima del
mg/kg. p.o.trattamento Dopo il trattamento
15 min 30 min 4 min 60 min
<CMC>sn<60,8 2,9 57,8 3,3 57,4 3,8 59,2 4,9 55,9 3,8>
CMC dx<23,2 2,2 24,7 3,5 22,9 2,8 23,6 3,7 20,7 3,5>
IPERICINA
0,11 mg/kg<sn 21,6 2,7 23,8 3,3 22,7 2,1 24,8 3,9 21,5 3,0>
IPERICINA
0,11 mg/kg<dx 24,3 4,6 28,1 1,2 43,7 2,0* 41,6 2,7* 25,9 2,2>
Le dosi di ipericina, iperoside e amentoflavone sono quelle corrispondenti a 30 mg/kg p.o. di frazione idrofila di estratto di iperico- lotto 070305/I)
^P< 0,05; *P< 0,01. Ogni valore rappresenta la media di 8 ratti.
Esempio 7. Effetto dell’estratto liofilizzato di iperico e della ipericina nel dolore indotto da osteoartrite indotta da monosodio iodioacetato L’abbassamento della soglia al dolore viene indotto mediante una singola somministrazione di monoiodioacetato (MIA) a livello dell’articolazione della zampa del ratto (Ref. 27).
Tabella 7
EFFETTO DELL’IPERICINA E DELL’ESTRATTO DI IPERICO SUL DOLORE
INDOTTO
DA OSTEOARTRITE DEL GINOCCHIO VALUTATO NEL TEST DI PRESSIONE
SULLA ZAMPA DI RATTO
TRATTAMEN TRATTAMENTO TOmg kg<-1>p.o.<Dopo il trattamento>
Pre-test 15 min 30 min 45 min 60 minSALINA CMC63,9 ± 3,3 64,6 ± 2,5 60,5 ± 3,8 62,6 ± 3,7 64,6 ± 4,0
MIA CMC 22,6 ± 2,9 20,3 ± 4,1 24,9 ± 2,7 23,2 ± 3,5 24,0 ± 2,7
MIA<IPERICINA>
0,11 mg/kg<23,4 ± 3,3 45,9 ± 2,7* 49,7 ± 3,8* 42,8 ± 3,9* 31,7 ± 3,5>ESTRATTO DI IPERICO MIA 60 mg/kg 21,1 ± 2,1 39,7 ± 3,1* 42,7 ± 2,1* 38,4 ± 3,3* 22,1 ± 3,0
LOTTO
7I0525
Trattamento: Mono Sodio Iodoacetato (MIA) 2 mg in un volume di 25 µl fu iniettato nell’anticamera del ginocchio sn di ratti non anestetizzati.
Ogni valore rappresenta la media di 2 esperimenti (11 ratti).
^P< 0,05; *P< 0,01 a confronto con ratti trattati con MIA/CMC.
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Claims (8)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Impiego di estratti di sommità di iperico (Hypericum perforatum L.) contenenti ipericina o di ipericina per la preparazione di medicamenti e/o integratori per il trattamento del dolore neuropatico.
  2. 2. Impiego secondo la rivendicazione 1 in cui il dolore neuropatico deriva da terapia con chemioterapici.
  3. 3. Impiego secondo la rivendicazione 2 in cui i chemioterapici sono complessi del platino, vincristina, paclitaxel.
  4. 4. Impiego secondo la rivendicazione 1 in cui il dolore neuropatico deriva da sciatalgia.
  5. 5. Impiego secondo la rivendicazione 1 in cui il dolore neuropatico deriva da osteoartrite.
  6. 6. Impiego secondo una qualunque delle rivendicazioni da 1 a 4 di estratti di iperico aventi un contenuto di derivati naftodantronici (ipericina e pseudoipericina) non inferiore a 0,25%.
  7. 7. Impiego secondo una qualunque delle rivendicazioni da 1 a 5 di un estratto liofilizzato.
  8. 8. Impiego secondo la rivendicazione 7 in cui l’estratto è un estratto idroalcolico o idroacetonico. Milano, 27 febbraio 2008
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