FR3067939A1 - Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau - Google Patents

Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau Download PDF

Info

Publication number
FR3067939A1
FR3067939A1 FR1755840A FR1755840A FR3067939A1 FR 3067939 A1 FR3067939 A1 FR 3067939A1 FR 1755840 A FR1755840 A FR 1755840A FR 1755840 A FR1755840 A FR 1755840A FR 3067939 A1 FR3067939 A1 FR 3067939A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
extract
alias
aka
genes
screens
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
FR1755840A
Other languages
English (en)
Other versions
FR3067939B1 (fr
Inventor
Nicolas Bechetoille
Sandrine Lopis-Presle
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Gattefosse SA
Original Assignee
Gattefosse SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gattefosse SA filed Critical Gattefosse SA
Priority to FR1755840A priority Critical patent/FR3067939B1/fr
Publication of FR3067939A1 publication Critical patent/FR3067939A1/fr
Application granted granted Critical
Publication of FR3067939B1 publication Critical patent/FR3067939B1/fr
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/81—Solanaceae (Potato family), e.g. tobacco, nightshade, tomato, belladonna, capsicum or jimsonweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Agent de protection du génome des cellules de la peau pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau.

Description

L’invention concerne un agent de protection du génome des cellules de la peau pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les appareils électroniques sur la peau, un extrait de Withania somnifera et son utilisation comme agent de protection du génome contre lesdits effets nocifs. L’invention vise également une composition cosmétique comprenant ledit extrait.
La peau est un organe composé de plusieurs couches de tissus. Le tissu cutané est la première barrière de protection de l'organisme des animaux vertébrés. Chez l’Homme, la peau est histologiquement caractérisée par 3 structures : la partie superficielle, la plus mince, nommée épiderme ; la partie interne, le derme et une couche plus profonde, l'hypoderme.
Dans le derme, les cellules de la peau sont représentées en majorité par les fibroblastes, cependant le tissu cutané est aussi constitué de kératinocytes, de mélanocytes ou encore de cellules dendritiques.
Le spectre solaire qui atteint la surface de la Terre peut être divisé en trois catégories : les rayons ultraviolets (280 à 400 nm), la lumière visible (400 et 700 nm) et la lumière infrarouge (700 nm à 1 mm). La lumière visible, qui est moins énergétique que les rayons ultraviolets, représente 39% du spectre solaire et pénètre très fortement dans la peau pour atteindre l'hypoderme.
L'utilisation de sources lumineuses polychromatiques a mis en évidence les effets bénéfiques et nocifs de la lumière visible sur la peau tels que l’augmentation de la pigmentation et de l'inflammation ou encore la suppression de la réponse immune.
La lumière visible est également responsable de dommages oxydatifs dans les cellules de la peau par la production d'espèces réactives à l'oxygène. De ce fait, et de la même manière que les rayons ultraviolets, la lumière visible induit des dommages sur le génome des cellules, tels que l'oxydation de bases nucléiques de l'ADN.
Le développement de nouvelles sources lumineuses, par exemple les lasers ou les LED (light-emitting diode) a permis de caractériser précisément, mais de façon isolée, les effets biologiques des différentes longueurs d’onde monochromatiques de la lumière visible (bleu : 400-495 nm ; vert : 495-590 nm ; rouge : 590-700 nm).
Il est ainsi connu de l’art antérieur que le spectre « rouge » de la lumière visible améliore l'état de la peau (prolifération cellulaire, production d'ATP) et la cicatrisation cutanée (migration cellulaire et synthèse de matrice extracellulaire), active les mécanismes de protection de la peau (synthèse d'ADN et gènes de la réparation) et présente des effets anti-inflammatoires.
Le spectre « vert » de la lumière visible présente également des effets bénéfiques cutanés proches de ceux induits par la lumière « rouge ».
Au contraire, le spectre « bleu » de la lumière visible, qui est proche des rayons ultraviolets, est plus énergétique que les lumières « vert » et « rouge » et présente des effets néfastes sur la peau (diminution de la prolifération et migration cellulaire, perturbation de la fonction barrière cutanée, production d'espèces réactives à l'oxygène).
De nos jours, les appareils électroniques (ordinateur, téléphone, téléviseur, tablette) utilisent la technologie de rétroéclairage LED pour améliorer la luminosité et la clarté des écrans. Ces écrans émettent donc une lumière qui est composée de longueurs d'onde appartenant au spectre de la lumière visible. Les quantités de lumière émises par les appareils électroniques sont relativement faibles et apparemment sans risque pour la peau. Cependant, on peut s’interroger sur la question de savoir si la proximité de ces sources lumineuses avec l'utilisateur et les temps d'exposition quotidienne de plus en plus longs présentent ou non un réel danger pour la peau (vieillissement prématuré et taches brunes).
La lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques ne se restreint pas à une longueur d'onde monochromatique appartenant au spectre de la lumière visible, et plus particulièrement au spectre « bleu ». En effet, il s’agit d’une combinaison de trois longueurs d’onde monochromatiques appartenant aux spectres bleu, vert et rouge, émise par les écrans des appareils électroniques. Or, la puissance énergétique lumineuse (ou irradiance spectrale), qui est réellement émise par les écrans des appareils électroniques, n'est pas correctement modélisée dans les études décrites aujourd'hui.
Dans la suite de la description, par « longueur d’onde monochromatique », on désigne une longueur d’onde dominante d’une spectre donné.
Pour résoudre ce problème, le Demandeur a caractérisé les rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques. Il a ainsi été déterminé que ledit rayonnement visible correspond à trois longueurs d’onde monochromatiques appartenant à la lumière bleue, la lumière verte et la lumière rouge. La longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière bleue est comprise entre 400-495 nm, et avantageusement entre 430-460 nm et plus précisément égale à 450 nm ; la longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière verte est comprise entre 495-590 nm, et avantageusement entre 520-550 nm et plus précisément égale à 525 nm ; la longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière rouge est comprise entre 590-700 nm, et avantageusement entre 600-640 nm et plus précisément égale à 625 nm. Ces caractéristiques précises permettent alors de traduire la lumière émise par les écrans en un modèle pour les expérimentations.
De manière inattendue, le Demandeur a constaté que l’exposition au rayonnement visible émis par les appareils électroniques caractérisé ci-avant induit une perte de l’intégrité de l’ADN et donc des effets génotoxiques, sur les cellules de la peau, notamment sur les fibroblastes.
A la connaissance du Demandeur, aucune solution de protection n’existe pour protéger l'expression des gènes contre les effets délétères de la lumière visible complète (combinaison des longueurs d’onde monochromatiques issues des spectres bleu, vert et rouge) émise par les appareils électroniques.
Par conséquent, l’invention a pour objet un agent de protection du génome des cellules de la peau pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques.
Selon la première caractéristique de l’invention, un moyen pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau consiste en un agent de protection du génome des cellules de la peau, notamment les fibroblastes.
Plus particulièrement, l’agent de protection permet de lutter contre les rayonnements visibles émis par les appareils électroniques, qui correspondent à la combinaison :
d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière bleue compris entre 400 nm à 495 nm, avantageusement entre 430 nm à 460 nm, de préférence égale à 450 nm ; -d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière verte compris entre 495 nm à 590 nm, avantageusement entre 520 nm à 550 nm, de préférence égale à 525 nm ; - et d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière rouge compris entre 590 nm à 700 nm, avantageusement entre 600 nm à 640 nm, de préférence égale à 625 nm.
Ainsi, selon l’invention l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau par une protection de la dérégulation de l’expression des gènes dans les cellules de la peau.
De manière particulière, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau par une diminution de la sous-expression des gènes dans les cellules de la peau.
De préférence, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau et consiste en une diminution de la sous-expression des gènes impliqués dans les voies métaboliques choisies parmi l’ubiquitinylation/la dégradation des protéines, l’activité mitochondriale, le cytosquelette cellulaire, la signalisation des intégrines et la matrice extracellulaire.
Avantageusement, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau et consiste en une diminution de la sous-expression des gènes :
UBA1 alias Enzyme 1 modificatrice de l’activité semblable à l’ubiquitine ;
ATP5G1 alias Synthase ATP, Transporteur H+, Complexe mitochondrial F0, Sousunité Cl ;
20 25 ATP5H alias Synthase ATP, Transporteur H+, Complexe mitochondrial FO, Sous-unité D;
COX5B alias Cytochrome c Oxidase sous-unité Vb (complexe mitochondrial I), ; COX7A1 alias Cytochrome C Oxidase sous-unité 7A1 ;
NDUFA3 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Sous-complexe 3 (complexe mitochondrial I) ;
NDUFA10 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Sous-complexe 10 (complexe mitochondrial I) ;
NDUFA11 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Sous-complexe 11 (complexe mitochondrial I) ;
NDUFB5 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Beta Sous-complexe 5 (complexe mitochondrial I);
UQCRQ alias Réductase Ubiquinol-Cytochrome c (complexe mitochondrial III) ; PRDX5 alias Peroxiredoxine 5 ;
SDHC alias Complexe Déhydrogénase Succinate, Sous-unité C (complexe mitochondrial II) ;
TXNRD2 alias Réductase Thiorédoxine 2 ;
ACTA2 alias Actine, alpha 2, muscle lisse ;
ARPC1B alias Complexe protéine 2/3 relié à l’actine ;
CAPN1 alias Sous-unité large de la Calpaïne-1 ;
CAPNS1 alias Petite-unité 1 large Calpaïne-1 ;
DOCK1 alias Dedicator à la Cytokinèse 1 ;
FYN alias Proto-Oncogène FYN, Famille Src Tyrosine kinase ;
GSN alias Facteur de Dépolymerisation de Gélosine ou Actine ;
PARVA alias Parvine, Alpha ;
PPP1CB alias Protéine Phosphatase 1, sous-unité catalytique ;
RHOC alias Membre C de la Famille Homologue Ras ;
RRAS alias Famille Ras des protéines R-Ras de liaison au petites protéines GTP ;
VCL alias Vinculine ;
WIPF1 alias Famille de Protéine d’interaction WAS-WASL, Membre 1 ;
COLI Al alias Chaîne Alpha 1 du Collagène de type 1 ;
COL1A2 alias Chaîne Alpha 2 du Collagène de type 1.
6
De manière tout aussi particulière, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau par une diminution de la surexpression des gènes dans les cellules de la peau.
De préférence, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau et consiste en une diminution de la surexpression des gènes impliqués dans les voies métaboliques choisies parmi la réponse au stress oxydatif et la sénescence cellulaire.
Avantageusement, l’agent de protection permet la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau et consiste en une diminution de la surexpression des gènes :
KEAP1 alias Protéine 1 semblable à KELCH associée à ECH ;
HSPH1 alias Protéine 1 de choc thermique 105kDA / 1 lOkDa ;
DNAJB6 alias Homologue DnaJ (Hsp 40), Sous-famille B, Membre 6 DNAJC2 alias Homologue DnaJ (Hsp 40), Sous-famille C, Membre 2.
Dans un mode de réalisation particulier, l’agent de protection est un extrait de Withania somnifera.
L'espèce Withania somnifera Dunal. a été décrite par le naturaliste suédois Cari von Linné, puis reclassée en 1852 par le botaniste français Michel Félix Dunal. Son aire de répartition va du pourtour méditerranéen jusqu'à la Chine, en passant par l'Afrique, l’Australie, le Proche-Orient, l'Inde et le Sri Lanka.
Massivement cultivée sur le territoire indien, l’espèce comporte différents cultivars et variétés sélectionnés et produits dans différents pays, comme l’Afrique du Sud, ou les Etats-Unis.
Appartenant à la famille des Solanaceae, Withania somnifera est un arbuste de petite taille, avec une hauteur ne dépassant généralement pas les 170 cm. Les racines sont trapues, charnues avec une écorce d'un brun pâle ; la tige est ligneuse à la base, et abondamment ramifiée. Ses feuilles sont ovales, subaiguës et hispides à leur face inférieure. Les fleurs autofertiles sont groupées par 3 à 6 en petits glomérules axillaires et leurs calices, accrescents après la floraison, persistent autour du fruit sous la forme de languettes. Le fruit est une petite baie pisiforme rouge brillant.
Withania somnifera est considérée comme une plante adaptogène, c’est-à-dire comme une plante qui augmente la capacité du corps à s’adapter aux différents stress. On prête aussi à cet extrait des vertus narcotiques, hypnotiques, aphrodisiaques, hépatotoniques, purgatives et diurétiques.
Employée dans la médecine traditionnelle africaine, la racine de Withania somnifera a de nombreux usages. Du Cap-Vert à Madagascar, en passant par la Somalie ou l’Ethiopie, les racines sont utilisées pour leurs vertus purgatives, abortives et pour traiter les affections cutanées.
En médecine ayurvédique indienne, l'extrait alcoolique de racine dénommé « Ashwagandha » est utilisé depuis des siècles comme ingrédient dans des remèdes qui améliorent l'état général tant physique que mental et augmentent la longévité et la vitalité de l'organisme.
Au-delà de la médecine traditionnelle, les analyses pharmaco-chimiques de Withania somnifera ont révélé la présence d'un très grand nombre de composés bioactifs dénommés withanolides. Les effets immuno-modulateurs de ces composés ont fait l'objet d'études approfondies et les propriétés des extraits de racine de Withania somnifera sont très prometteuses notamment dans les traitements anti cancéreux.
L'utilisation d'extraits hydro-alcooliques de Withania somnifera est aussi connue en cosmétique, notamment pour régulariser les fonctions naturelles cutanées (FR2902656B1). Des compositions cosmétiques contenant un extrait de Withania somnifera seul et/ou en association avec d'autres ingrédients sont également décrites pour leurs propriétés blanchissantes, dépigmentantes ou encore anti-inflammatoires.
Le Demandeur a observé qu’un extrait de Withania somnifera est particulièrement efficace pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles, notamment ceux émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau.
En effet, dans ce contexte d’exposition à un rayonnement génotoxique pour les cellules de la peau, l’utilisation dudit extrait de Withania somnifera permet un maintien de l’intégrité du génome des cellules de la peau, notamment des fibroblastes.
Selon l’invention, toute ou partie de la plante Withania somnifera peut être utilisée comme extrait pour lutter contre le stress génotoxique induit par la lumière visible. En pratique, la partie de la plante utilisée comme extrait est choisie dans le groupe comprenant la racine, le fruit, la fleur, la graine, la feuille, la tige.
De manière particulièrement préférée, la partie de la plante mise en œuvre est la racine. Il peut s’agir de racine fraîche, congelée, séchée, entière, coupée et/ou broyée.
Avantageusement, il s’agit de racine séchée et broyée.
L’invention concerne également un extrait de Withania somnifera susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction comprenant une étape d’extraction solide/liquide d’au moins une partie de la plante, suivie d’une seconde étape de séparation solide/liquide et enfin d’une troisième étape de récupération de la phase liquide, le solvant utilisé par ce procédé est un mélange de fructose, de glycérine et éventuellement d’eau.
Le solvant peut contenir de l’eau, ou en être dépourvu. La présence d’eau dans le solvant a toutefois pour avantage de fluidifier le solvant, et ainsi de faciliter l’extraction.
Avantageusement, le solvant consiste en un mélange de fructose, de glycérine et d’eau. Les extraits de plantes étant souvent destinés à être formulés dans des compositions cosmétiques, il importe d’éviter les solvants d’extraction comprenant des sels ou des acides, dont on retrouvera nécessairement au moins des traces dans l’extrait. En effet, il est bien connu que la formulation, en gel ou en émulsion, d’ingrédients à base de sels audelà d’une dose de 0,1% est particulièrement complexe. En outre, les acides, en abaissant le pH des extraits obtenus, ont pour effet de rendre la formulation en gel ou en émulsion difficile. En particulier, les produits cosmétiques destinés à l’application cutanée doivent avoir un pH adapté, de préférence proche de celui de la peau (environ pH 6,5), ou neutre. Dans ces conditions, l’utilisation de solvants contenant des acides requiert par conséquent l’ajout d’excipients, notamment des régulateurs de pH.
En outre, lorsque les composants de ce solvant sont présents dans certains rapports molaires, le solvant possède les propriétés d’un solvant eutectique ou NaDES.
Par « solvant eutectique » ou « Natural Deep Eutectic Solvent (NaDES) », on entend au sens de l’invention un mélange de composés d’origine naturelle susceptible d’être utilisé comme solvant et possédant une superstructure basée sur des interactions hydrogènes. Brièvement, il est possible de déterminer qu’un mélange donné possède effectivement la superstructure d’un NaDES par spectroscopie RMN à deux dimensions, en particulier par séquence NOESY (pour Nuclear Overhauser Effect SpectroscopY). La présence de taches de corrélations (pics hors diagonaux) traduit une certaine proximité spatiale entre les spins considérés, et permet de détecter la superstructure du NaDES. Cette superstructure ainsi que les méthodes permettant de la détecter sont bien connues de l’Homme de l’art, et ont été précisément décrites dans Dai et al., 2013 (Analytica Chimica Acta, vol. 766 p. 61-68), auquel l’Homme de l’art pourra se référer.
Le solvant est notamment liquide à température ambiante, ce qui facilite la mise en œuvre du procédé conduisant à l’extrait de l’invention.
Dans un mode de réalisation particulier, le solvant consiste en un mélange de fructose, de glycérine et d’eau dans des proportions molaires préférentiellement d’environ 1:1:5.
En pratique, le solvant utilisé peut être produit en mélangeant le fructose et la glycérine, ou le fructose, la glycérine et l’eau, dans un réacteur agité, jusqu'à l'obtention d'un mélange limpide incolore. Ce mélange peut être réalisé à une température comprise entre 2°C et 100°C et pendant 30 minutes à 6 heures, préférentiellement 40°C à 70°C pendant 1 heure à 2 heures.
L’extrait selon l’invention est susceptible d’être obtenu par un procédé mettant en œuvre une étape d’extraction solide/liquide.
De manière particulière, il s’agit d’un extrait de racine de Withania somnifera, avantageusement séchée et broyée.
Selon l’invention, l’extrait de racine de Withania somnifera décrit précédemment est compris dans une composition cosmétique.
Cette composition permet de lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau, de préférence une dérégulation de l’expression du génome des cellules de la peau, notamment les fibroblastes.
L’extraction solide/liquide peut être effectuée par différentes techniques bien connues de l’Homme du métier, telles que macération, re-macération, digestion, macération dynamique, décoction, extraction en lit fluide, extraction assistée par micro-ondes, extraction assistée par ultra-sons, extraction à contre-courant, percolation, re-percolation, lixiviation, extraction sous pression réduite, diacolation.
En pratique le rapport massique plante/solvant appliqué pour l’étape d’extraction est compris entre 1/99 et 50/50. L’étape d’extraction est effectuée de préférence à une température comprise entre 2°C et 100°C, plus préférentiellement entre 20°C et 80°C. L’étape d’extraction peut être maintenue pendant quelques minutes à plusieurs jours.
De manière à optimiser l’extraction des composés actifs tout en protégeant ces composés de l’oxydation par l’oxygène de l’air, l’étape d’extraction solide/liquide est avantageusement réalisée sous agitation et/ou sous atmosphère d’azote.
L’étape d’extraction solide/liquide est suivie d’une étape de séparation solide/liquide, l’objectif étant de récupérer la phase liquide, aussi appelée filtrat de séparation solide/liquide, contenant la matière active. Cette séparation peut être effectuée par toute technique connue de l’Homme du métier, en particulier l’égouttage, le pressage, l’essorage, la centrifugation ou la filtration.
De manière optionnelle, l’étape de séparation solide/liquide peut aussi être suivie d’une étape de fractionnement de l’extrait brut, laquelle permet d’obtenir une fraction enrichie en une ou plusieurs familles de molécules extraites de la plante. En pratique, l’étape de fractionnement peut être effectuée par des techniques connues de l’Homme du métier, en particulier la chromatographie basse pression ou la filtration membranaire tangentielle.
De manière optionnelle, l’étape de séparation liquide/solide ou l’étape de fractionnement peut être suivie d’une étape de concentration de l’extrait brut ou de la fraction, laquelle permet d’obtenir un concentré, sous forme liquide ou semi-solide selon le facteur de concentration. En pratique, l’étape de concentration peut être effectuée par évaporation sous pression réduite ou osmose inverse.
De préférence, le filtrat de séparation solide/liquide ou le concentré subissent en outre une ou plusieurs étapes de clarification. Pour réaliser cette étape de clarification, l’Homme du métier pourra utiliser tout type de filtration connue dans le domaine considéré.
Enfin, en vue d’un conditionnement, le procédé permettant l’obtention de l’extrait selon l’invention peut comprendre une étape de stérilisation par filtration stérilisante ou pasteurisation par exemple. La filtration stérilisante est classiquement réalisée en filtrant le produit à travers un filtre comprenant des pores d’un diamètre d’environ 0,22 pm. De préférence, l’étape de filtration stérilisante est l’étape finale du procédé. En outre un conservateur microbiologique peut-être ajouté à l’extrait préalablement à l’étape de stérilisation, préférentiellement un mélange d’acide citrique et de sorbate de potassium.
L’invention vise aussi des compositions comprenant l’extrait de l’invention, de préférence des compositions cosmétiques, c’est-à-dire adaptées à l’application topique sur la peau et/ou les muqueuses, et/ou les phanères.
La composition selon l’invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées pour une application topique sur la peau et/ou les muqueuses, et/ou les phanères, par exemple sous forme anhydre, sous forme d’une émulsion huile-danseau, d’une émulsion eau-dans-huile, d’une émulsion multiple, d’une émulsion siliconée, d’une microémulsion, d’une nanoémulsion, d’un gel, d’une solution aqueuse ou d’une solution hydro-alcoolique.
Cette composition peut être plus ou moins fluide et se présenter sous forme d’une crème blanche ou colorée, d’une pommade, d’un lait, d’une lotion, d’un sérum, ou d’un gel.
La composition cosmétique et/ou dermatologique peut contenir les excipients habituellement utilisés dans les domaines cosmétique et dermatologique, tels que les matières grasses, les tensioactifs détergents et/ou conditionnants, les émulsionnants et co12 émulsionnants, les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les agents exfoliants, les parfums, les charges, les filtres hydrophiles et lipophiles, les matières colorantes, les neutralisants, les agents propénétrants, et les polymères. Ces types d’excipients sont tous bien connus de l’Homme du métier.
En pratique, les quantités de ces différents excipients sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés, et la somme des excipients représente de préférence 0,01% à 30% du poids total de la composition.
Comme matières grasses appropriées, on peut citer les huiles minérales, les huiles d’origine animale (telle la lanoline), les huiles végétales, les huiles de synthèse (comme par exemple l’isopropyl myristate, l’octyldodecyl myristate, l’isostearyl isostearate, le decyl oleate, l’isopropyl palmitate), les huiles siliconées (la cyclomethicone, la dimethicone) et les huiles fluorées. On peut utiliser comme matières grasses des alcools gras, des acides gras, des cires et des gommes, et en particulier des élastomères de silicone.
Comme tensioactifs détergents et/ou conditionnants appropriés, on peut citer les tensioactifs non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères, et leurs mélanges, tels que par exemple les alkyl sulfates, les alkyléthersulfates tels que le lauryl éther sulfate de sodium, les alkyl bétaïnes telles que la cocamidopropylbetaïne, ou les sels d’ammonium quaternaires.
Comme émulsionnants et co-émulsionnants appropriés, on peut citer par exemple les esters de polyglycérol et d’acides gras, les esters de sucrose et d’acides gras, les esters de sorbitane et d’acides gras, les esters d’acides gras et de sorbitane polyoxyéthylénés, les alcools gras polyoxyéthylénés et de PEG, les esters de glycérol et d’acides gras, les alkyl sulfates, les alkyl ether sulfates, les alkyl phosphates, les alkyl polyglucosides, les diméthicone copolyols.
Comme gélifiants hydrophiles appropriés, on peut citer par exemple les polymères carboxyvinyliques (carbomers), les copolymères acryliques tels que les copolymères d’acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides, les polysaccharides tels que la gomme xanthane, la gomme de guar, les gommes naturelles telles que la gomme de cellulose et dérivés, les amidons et leurs dérivés, les argiles et les copolymères d’acide 2-acrylamido2-méthylpropane.
Comme gélifiants lipophiles appropriés, on peut citer par exemple les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d’acides gras, la silice hydrophobe et l’éthylcellulose.
Comme conservateurs appropriés, on peut citer par exemple les acides benzoïque, sorbique, propionique, salicylique, déhydroacétique et leurs sels, l’alcool benzylique, l’éthylhexylglycérine, les parabens, leurs sels et esters, le triclosan, l’imidazolidinyl urée, le 5 phénoxyéthanol, la DMDM hydantoïne, le diazolidinyl urée, la chlorphenesine.
Comme antioxydants appropriés, on peut citer par exemple les agents chélatants tels que l’EDTA et ses sels, le métabisulfite de sodium, les acides salicylique, ascorbique et citrique et leurs sels, le tartrate de sodium, le gluconate de sodium, les caroténoïdes et les tocophérols.
Comme solvants utilisables dans la composition cosmétique (distinct du solvant d’extraction), on peut citer l’eau, l’éthanol, la glycérine, le propylène glycol, le propanediol, le butylène glycol, le sorbitol.
Comme agents exfoliants appropriés, on peut citer par exemple les exfoliants chimiques tels que les AHA, et les exfoliants physiques tels que les poudres naturelles ou synthétiques.
Comme charges appropriées, on peut citer par exemple le talc, le kaolin, le mica, la séricite, le carbonate, l’aluminium silicate, le magnésium silicate, les poudres organiques comme celles de polyamide.
Comme colorants appropriés, on peut citer par exemple les colorants lipophiles, les colorants hydrophiles, les pigments et les nacres habituellement utilisés dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques, et leurs mélanges.
Comme neutralisants appropriés, on peut citer par exemple la soude, la triéthanolamine, l’aminométhyl propanol, l’hydroxyde de potassium.
Comme agents pro-pénétrants appropriés, on peut citer par exemple les alcools et glycols (éthanol, propylène glycol), l’éthoxy di glycol, les alcools et acides gras (acide oléique), les esters d’acides gras, le diméthyl isosorbide.
La composition de l’invention peut également contenir en outre d’autres actifs que l’extrait selon l’invention. Comme actifs appropriés, on peut citer par exemple les antiradicalaires ou plus généralement les antioxydants, les blanchissants, les pigmentants, les émollients, les hydratants, les anti-séborrhéiques, les anti-inflammatoires, les antiacnéiques, les agents kératolytiques et/ou desquamants, les agents anti-rides et tenseurs, les agents drainants, les agents anti-irritants, les agents apaisants, les vitamines et leurs mélanges, les agents matifiants, les actifs anti-âge tel que le rétinol, les cicatrisants, les antiseptiques et les huiles essentielles.
L'invention et les avantages qui en découlent ressortiront bien des exemples de réalisation suivants.
Figure 1 : Représentation du spectre de la lumière visible émise par un écran de téléphone (iPhone 5S).
Figure 2 : Modulation de l’expression de 12 gènes de la mitochondrie dans des fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques et traités (ou non) par un extrait NaDES de Withania somnifera (racine) à 0,1%.
Figure 3 : Modulation de l’expression de 13 gènes du cytosquelette dans des fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques et traités (ou non) par un extrait NaDES de Withania somnifera (racine) à 0,1%.
Exemple n°l : Fabrication de l'extrait NaDES racine de Withania somnifera
On mélange 1 partie de racine séchée et broyée de Withania somnifera et 19 parties d'un mélange fructose/glycérine/eau en ratio molaire 1:1:5 (solvant NaDES). Le mélange est extrait à 70°C pendant 3h dans un réacteur agité. La séparation solide/liquide est réalisée par centrifugation (centrifugeuse à godets 4600 rotations par minute (rpm) - 20 min). Le jus brut est ensuite filtré dans un filtre frontal sous pression (2 bars) sur membrane en acétate de cellulose jusqu’au seuil final de 0,22pm.
On obtient ainsi un extrait NaDES de Withania somnifera (racine) qui est limpide et de couleur jaune.
Exemple n°2 : Mesure des caractéristiques physiques de la lumière visible émise par les écrans d’appareils électroniques
Les longueurs d’onde dominantes et monochromatiques du spectre de la lumière visible émises par 8 écrans d'appareils électroniques sont mesurées sur un banc d'essai composé d'un spectrophotomètre à haute résolution spectrale (Océan Optics USB 650 redtide, 1 nm de résolution de 360 à 1000 nm), d'une fibre optique de 600 pm (200 mm de longueur), d'une lentille correctrice cosinus pour recueillir le signal (champ de vision à 180°), d'une source étalonnée radiométrique VIS-NIR (OceanOptics HL-2000-CAL) pour l'irradiance absolue et d'un ordinateur pour le pilotage de l'acquisition des données.
Protocole :
Chaque écran (Apple iPhone 4S, iPhone 5S et iPAD 2 ; Samsung Galaxy S4, Galaxy Tab et Galaxy Note2 ; écran DELL U2312MHT et E7440) est positionné sur le banc d'essai. Les valeurs des longueurs d’onde dominantes du spectre de la lumière visible et la densité de puissance (ou irradiance spectrale) sont calculées pour chaque longueur d'onde entre 360 nm et 1000 nm pour un éclairage à 50% et à 100% de luminosité.
Résultats :
Les résultats sont exprimés en représentation du spectre (360 nm-1000 nm) de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques. A titre d'exemple, la figure 1 représente le spectre de la lumière visible émis par l'écran de l'iPhone 5S.
Le spectre de la lumière visible émis par l'iPhone 5S révèle une longueur d’onde dominante à 450 nm (issue du spectre bleu), une longueur d’onde dominante à 537 nm (issue du spectre vert) et une longueur d’onde dominante à 600 nm (issue du spectre rouge).
Le tableau 1 répertorie toutes les longueurs d'onde monochromatiques et dominantes du spectre de la lumière visible émis par les 8 écrans des appareils électroniques.
Les données du tableau 1 révèlent que tous les écrans des appareils électroniques émettent 10 une lumière visible composée d’une longueur d’onde dominante du spectre bleu (400-495 nm), d’une longueur d’onde dominante du spectre vert (495-590 nm) et d’une longueur d’onde dominante de spectre rouge (590-700 nm).
Ecrans Longueurs d’onde dominantes (nm)
Bleu Vert Rouge
Apple iPhone 4 S 448 529 588
Apple iPhone 5 S 450 537 600
Samsung Galaxy S4 450 520 613
Apple iPAD 2 446 537 604
Samsung Galaxy Tab 449 535 592
Samsung Galaxy Note2 448 532 592
Ecran DELL U2312MHT 447 539 600
Ecran DELL E7440 448 548 599
Tableau 1 : Longueurs d’onde dominantes de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Les mesures d'irradiance spectrale (pW/cm2) de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques sont répertoriées dans le tableau 2.
Les données du tableau 2 révèlent que les irradiances spectrales des lumières visibles émises par les 8 écrans des appareils électroniques sont sensiblement les mêmes et proportionnelles à la luminosité des écrans. De plus, les irradiances spectrales émises dans les spectres bleu, vert et rouge de la lumière visible sont équivalentes.
Irradiance spectrale (tiW/cni2)
Appareils électroniques Lumière bleue (400-490 nm) Lumière verte (490-577 nm) Lumière rouge (577-700 nm) TOTAL (400-700 nm)
Luminosité 50% Luminosité 100% Luminosité 50% Luminosité 100% Luminosité 50% Luminosité 100% Luminosité 50% Luminosité 100%
Apple iPhone 4S 14,54 38,66 15,06 44,15 13,63 35,80 43,24 118,61
Apple iPhone 5 S 15,30 40,82 13,98 43,22 14,49 39,72 43,76 123,76
Samsung Galaxy S4 13,56 38,24 14,32 44,14 14,69 41,63 42,58 124,01
Apple iPAD 2 15,63 47,40 15,01 56,21 14,21 44,63 44,85 148,24
Samsung Galaxy Tab 21,25 39,69 23,24 46,48 21,45 40,69 65,95 126,86
Samsung Galaxy Note2 19,78 29,39 20,79 32,89 19,27 28,95 59,84 91,23
Ecran DELL U2312MHT 20,52 29,61 22,26 33,41 22,23 32,31 65,01 95,33
Ecran DELL E7440 15,29 25,51 17,51 30,42 15,04 25,15 47,84 81,09
Moyenne 16,98 36,17 17,77 41,37 16,88 36,11 51,63 113,64
Tableau 2 : Irradiance spectrale de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Conclusion :
Les caractéristiques physiques de la lumière visible émise par les écrans de 8 appareils ont été mesurées et identifiées.
Sur la base de ces éléments, un équipement qui reproduit la lumière visible émise par les 10 écrans des appareils électroniques a été développé. La lumière visible émise par cet équipement est caractérisée par une longueur d’onde dominante à 450 nm (issue du spectre bleu), une longueur d’onde dominante à 525 nm (issue du spectre vert), et une longueur d’onde dominante à 625 nm (issue du spectre rouge) et calibrée à une irradiance spectrale de 99 J/cm2 (33 J/cm2 bleu + 33 J/cm2 vert + 33 J/cm2 rouge), ce qui correspond à une quantité de lumière équivalent à 1952 h en face d'un écran avec une luminosité à 100%.
Exemple n°3 : Effets nocifs de la lumière visible émise par les écrans d'appareils électroniques sur le génome des fibroblastes humains normaux.
La puce pangénomique d'Illumina (HumanHT-12v4 expression BeadChip, Illumina) a été utilisée pour mesurer l'expression des gènes dans des fibroblastes humains normaux, illuminés ou non, par de la lumière visible émise par les écrans d'appareils électroniques. L'expression d'environ 35.000 gènes est analysée, par fluorescence, dans les cellules illuminées par rapport à des cellules contrôle (non illuminées).
L'expression d'un gène est significativement modulée (p < 0,05) si son expression est modulée de 50% à la hausse (surexpression) ou à la baisse (sous-expression).
Protocole :
Des fibroblastes humains normaux issus de 3 donneurs différents (21 ans ± 3) sont utilisés dans cette étude. Les cellules sont illuminées par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques (99 J/cm2). Les cellules non illuminées sont utilisées comme contrôle.
Les fibroblastes humains normaux sont lavés avec un tampon phosphate salin. Les ARN totaux sont extraits (RNeasy mini kit, Qiagen) puis quantifiés par spectrophotométrie. Les ARN totaux (500 ng) sont amplifiés et marqués à la biotine (Illumina TotalPrepTM RNA Amplification kit, Ambion). Les ARNc biotinylés (750 ng) sont hybridés sur la puce pangénomique (HumanHT-12v4 expression BeadChip, Illumina). Le protocole standard d'analyse Illumina (iScan System, Illumina) est utilisé pour analyser la puce. Les données sont normalisées par une normalisation quantile sur le logiciel GenomeStudio 2010 (Illumina). Les données sont analysées avec des outils dans Partek Genomic Suite 6.6 (Partek Inc.). Une analyse de la variance (ANOVA) à sens unique est effectuée pour comparer les fibroblastes humains normaux illuminés par rapport aux contrôles.
Résultats :
Les résultats sont exprimés en nombre de gènes dont l'expression est significativement modulée dans les fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques. Les résultats sont résumés dans le tableau 3.
Fibroblastes humains normaux (n=3 donneurs ; 21 ans±3) Nombre de gènes modulés (P-value < 5E-02) Nombre de gènes sur-régulés Nombre de gènes sous-régulés
Lumière visible vs. Contrôle 2984 1519 1465
Tableau 3 : Nombre de gènes dont l'expression est significativement modulée dans les fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Conclusion :
Les données du tableau 3 révèlent que la lumière visible, émise par les écrans des appareils électroniques, influence fortement le profil d'expression des gènes dans les fibroblastes humains normaux. Plus de 8% des gènes (2984 gènes sur 35000 gènes) du génome entier des fibroblastes humains normaux ont une expression dérégulée après une exposition à la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Exemple n°4 : Effets nocifs de la lumière visible émise par les écrans d'appareils électroniques sur l'expression de 32 gènes dans des fibroblastes humains normaux.
Protocole :
Le protocole mis en place est identique à celui de l’exemple 3.
Une analyse bio-informatique avec le logiciel IP A® (Ingenuity Pathway, Qiagen) est menée pour l'interprétation des données.
Résultats :
Une liste de 32 gènes dont l'expression est fortement dérégulée par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques est présentée dans le tableau 4.
Nom des gènes / Voies métaboliaues Description des gènes Modulation P-value
Rénonse au stress oxvdatif induit nar NRF2 KEAP1 Protéine 1 semblable à KELCH associée à ECH 98% 2,83E-03
Voie de rubiauitination/dégradation des Enzyme 1 modificatrice de l’activité -164% 3,02E-03
nrotéines UBA1 semblable à l’ubiquitine
Sénescence
HSPH1 Protéine 1 de choc thermique 105kDA / llOkDa 502% l,45E-03
DNAJB6 Homologue DnaJ (Hsp 40) 167% 8,85E-03
DNAJC2 Homologue DnaJ (Hsp 40) 199% 8,67E-07
Dysfonction mitochondriale ATP5G1 synthase ATP, Transporteur H+, complexe mitochondrial Fl (complexe -197% 4,77E-05
ATP5H mitochondrial IV) -211% 3,04E-05
COX5B Cytochrome c Oxidase sous-unité Vb -202% 8,74E-05
COX7A1 (complexe mitochondrial I) -202% 5,52E-04
NDUFA3 -209% 5,98E-04
NDUFA10 déhydrogénase NADH (Ubiquinone) -230% 2,63E-03
NDUFA11 (complexe mitochondrial I) -224% 9,43E-04
NDUFB5 -204% 8,35E-04
UQCRQ Reductase Ubiquinol-Cytochrome c (complexe mitochondrial III) -227% 5,21E-05
PRDX5 Peroxiredoxine 5 -201% l,55E-02
SDHC Complexe Déhydrogénase Succinate, Sous-unité C (complexe mitochondrial Π) Réductase Thiorédoxine 2 -170% 2,25E-02
TXNRD2 -177% l,83E-03
Voie de signalisation des intégrines / cvtosauelette d’actine ACTA2 Actine, alpha 2, muscle lisse -218% l,01E-03
ARPC1B Complexe protéine 2/3 reliée à l’actine -218% l,39E-04
CAPN1 Sous-unité large de la Calpaine-1 -219% 3,95E-03
CAPNS1 petite-unité 1 large Calpaine-1 -166% 4,60E-03
DOCK1 Dedicator à la Cytokinèse 1 -191% 9,55E-04
FYN Proto-Oncogène FYN, Famille Src Tyrosine kinase -157% 2,18E-03
GSN Facteur de Dépolymerisation de Gélosine ou Actine -162% 2,61E-03
PARVA Parvine, Alpha -169% 4,55E-05
PPP1CB Protéine Phosphatase 1, sous-unité catalytique -161% 6,72E-04
RHOC Membre C de la Famille Homologue Ras -170% 2,41E-04
RRAS Famille Ras des proteins R-Ras de liaison au petites protéines GTP -313% 8,26E-05
VCL Vinculine -154% 2,85E-03
WIPF1 Famille de Protéine d’intéraction WAS-WASL, Membre 1 -176% 4,44E-03
Matrice extracellulaire COL1A1 Chaîne Alpha 1 du Collagène de type 1 -360% l,30E-05
COL1A2 Chaîne Alpha 2 du Collagène de type 1 -208% 8,53E-06
Tableau 4 : Identification des voies métaboliques et des gènes associés qui sont dérégulés dans des fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Les données révèlent que la lumière visible, qui est émise par les écrans des appareils électroniques, dérégule très fortement le profil d'expression des 32 gènes listés dans le tableau 4. L'analyse IP A® par bio-informatique révèle les principales voies métaboliques (réponse au stress oxydant, ubiquitinylation/dégradation des protéines, sénescence cellulaire, mitochondrie, cytosquelette cellulaire, signalisation des intégrines et matrice extracellulaire) qui sont associées aux gènes dont l'expression est dérégulée.
Conclusion :
gènes ont leur expression génomique profondément perturbée dans des fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques. Le dysfonctionnement des voies métaboliques (réponse au stress oxydant, ubiquitinylation/dégradation des protéines, sénescence cellulaire, mitochondrie, cytosquelette cellulaire, signalisation des intégrines et matrice extracellulaire), associées aux gènes dont l'expression est dérégulée, est une des causes du vieillissement prématuré de la peau exposée à cette lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Exemple n°5 : Effet d'un extrait NaDES de Withania somnifera (racine) selon l'invention pour la protection du génome des fibroblastes humains normaux contre les effets nocifs de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Le système de PCR quantitative en temps réel (AriaMx real-time PCR System, Agitent) a été utilisé pour quantifier l'expression des gènes dans des fibroblastes humains normaux, traités avec l’extrait NaDES de Withania somnifera (racine) et/ou illuminés par de la lumière visible émise par les écrans d'appareils électroniques. L'expression de 25 gènes est ensuite analysée, par fluorescence, dans les cellules traitées et illuminées par rapport aux cellules contrôles (non traitées et illuminées).
Protocole :
Des fibroblastes humains normaux sont traités, pendant 24 h, avec l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine), obtenu selon le protocole de l'exemple 1, à la concentration finale de 0,1%. En présence d'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) à 0,1%, les cellules sont ensuite illuminées par de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques (99 J/cm2). Les cellules non traitées et illuminées sont utilisées comme contrôles.
Les fibroblastes humains normaux sont ensuite lavés avec un tampon phosphate salin. Les ARN totaux sont extraits (RNeasy mini kit, Qiagen) puis quantifiés par spectrophotométrie. Les ARN totaux sont reverse-transcrits en ADNc (PrimeScriptTM RT Reagent kit, Takara) puis analysés par qPCR (SYBR® Premix Ex TaqTm II, Takara).
Les résultats sont normalisés à l'expression de TBP (TATA-box binding protein). La quantification relative est effectuée avec la méthode de quantification 2AACq (Schmittgen etLivak, 2008, Nat. Protoc. 3(6) :1101-8). Les résultats sont obtenus à partir de 3 cultures indépendantes (n=3).
Résultats :
Les résultats sont exprimés en modulation de l'expression des gènes dans les fibroblastes humains normaux illuminés par de la lumière visible et traités avec l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) en comparaison aux fibroblastes illuminés et non traités.
Les modulations d'expression des 12 gènes associés à la mitochondrie sont présentées en figure 2. L'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) limite la sous-expression des gènes induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques dans les fibroblastes humains normaux.
Le facteur de protection apporté par l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine), pour l'expression des 12 gènes de la mitochondrie a été calculé et est présenté dans le tableau 5.
Gènes de la Non traité Illuminé Extrait NaDES Withania s. Illuminé Facteur de
mitochondrie Facteur de sous régulation de l’expression des gènes protection (%)
ATPG5G1 3,6 2,3 36
ATP5H 2,6 2,1 19
COX5B 2,8 2,2 21
COX7A1 3,9 2,8 28
NDUFA10 2,7 1,7 37
NDUFA11 1,4 0,8 100
NDUFA3 4,4 2,6 41
NDUFB5 5,3 2,4 55
UQCRQ 3,4 2,5 26
PRDX5 3,7 1,7 54
SDHC 3,7 2,1 43
TXNRD2 6,3 3,7 41
Tableau 5 : Facteur de protection apporté par l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) pour lutter contre la sous-expression des gènes induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Les données du tableau 5 révèlent que l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) protège le génome des fibroblastes humains normaux en limitant la sous-régulation de l’expression des gènes qui est induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Les modulations d'expression des 13 gènes associés au cytosquelette de la cellule sont présentées en figure 3. L'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) limite la sousexpression des gènes induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques dans les fibroblastes humains normaux.
Le facteur de protection apporté par l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine), pour l'expression des 13 gènes du cytosquelette a été calculé et est présenté dans le tableau 6.
Gènes du Non traité Illuminé Extrait NaDES Withania s. Illuminé Facteur de
cytosquelette Facteur de sous régulation de l’expression des gènes protection (%)
ACTA2 5,6 5,5 1,8
ARPC1B 3,7 1,5 59
CAPN1 6,1 2,5 59
CAPNS1 3,4 1,9 44
DOCK1 1,9 1,3 32
FYN 1,9 1,5 21
GSN 2,4 2,3 4
PARVA 2,3 1,4 39
PPP1CB 1,1 0,7 100
RIIOC 2,4 1,2 50
RRAS 3,2 1,2 63
VCL 2,7 1,4
WIPI1 5,2 3,2
Tableau 6 : Facteur de protection apporté par l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) pour lutter contre la sous-expression des gènes induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Les données du tableau 6 révèlent que l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) protège le génome des fibroblastes humains normaux en limitant la sous-régulation de l’expression des gènes qui est induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Conclusion :
L'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) protège efficacement le génome des fibroblastes humains normaux contre les effets nocifs de la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques. En effet, l'extrait NaDES de Withania somnifera (racine) limite la sous-expression des gènes qui est induite par la lumière visible émise par les écrans des appareils électroniques.
Exemple n°6 : Exemples de composition
Crème de jour
NlUII des lllül'édieills t uinpoMiiuii (n massique)
EAU DEMINERALISEE QS100
CARBOPOL ULTREZ 21 0,10
GLYCERINE 3,00
BUTYLENE GLYCOL 5,00
PENTYLENE GLYCOL 2,00
GOMME DE XANTHANE 0,20
EMULIUM® DELTA 3,00
PHÉNOXYÉTHANOL 0,30
HUILE DE SILICONE 4,00
EXTRAIT WITHANIA SOMNIFERA (RACINE) 2,00
HYDROXIDE DE SODIUM (solution aqueuse 10%) 0,25
Total 100,00
Gel crème naturel hydratant
Nom des inmedienls Composition massique)
EMULILML· mellifera 2,5
SQUALANE NATUREL 2,0
DICAPRYLYL CARBONATE 15,0
EAU DEMINERALISEE QS100
GLYCERINE 20,0
AMIDON DE TAPIOCA 5,0
EXTRAIT WITHANIA SOMNIFERA (RACINE) 2,0
ETHYLHEXYLGLYCERINE 0,1
PHENOXYETHANOL 0,9
PARFUM 0,2
Total 100,0
Spray nourrissant
Nom des iiimedienls ( ouiposii ion massique i
EMULIUM® MELLIFERA 2,00
LABRAFAC' CC 5,00
LIPOCIREIMA 3,00
MYRISTATE D'OCTYLDODECYL 5,00
HUILE DE SILICONE 2,00
EAU DEMINERALISEE QS100
STEAROYLE GLUTAMATE DE SODIUM 0,50
GLYCERINE 5,00
BUTYLÈNE GLYCOL 5,00
PEMULENTR-2 0,10
GOMME DE XANTHANE 0,15
EXTRAH WITHANIA SOMNIFERA (RACINE) 2,00
TEA STEARATE 0,10
PHENOXYETHANOL 0,45
ÉTHYLHEXYLGLYCÉRINE 0,05
PARFUM 0,05
Total 100,00
Emulsion eau dans huile
Nom des mgiedieiils ( (imposition (.i massique)
PLUROL® DIISOSTEARIQUE CG 4,0
HUILE DE RICIN HYDROGENEE 2,0
COMPRITOL 888 CG 1,0
SQUAL ANE NATUREL 3,0
ALKANE NATUREL 22,0
SILICATE DE MAGNESIUM 3,0
EAU DEMINERALISEE QS100
GLYCERINE 3,0
SULFATE DE MAGNESIUM 7H20 CODEX 1,5
CHLORURE DE SODIUM CODEX 1,5
PARFUM 0,3
EXTRAIT WTIHANIA SOMNIFERA (RACINE) 2,0
PHENOXYETHANOL 0,9
ETHYLHEXYLGLYCERINE 0,1
Total 100,0

Claims (14)

  1. REVENDICATIONS
    1. Extrait de Withania somnifera, susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction solide/liquide, suivi d’une seconde étape de séparation solide/liquide et enfin d’une troisième étape de récupération de la phase liquide, caractérisée en ce que le solvant consiste en un mélange de fructose, glycérine et éventuellement d’eau.
  2. 2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce que le solvant consiste en un mélange de fructose, glycérine et d’eau.
  3. 3. Extrait selon l’une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le solvant consiste en un mélange de fructose, glycérine et d’eau, préférentiellement dans des proportions molaires d’environ 1:1:5.
  4. 4. Extrait selon l’une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l’extrait est un extrait de racine, avantageusement séché et broyé.
  5. 5. Composition cosmétique comprenant l’extrait selon l’une des revendications 1 à 4.
  6. 6. Extrait selon l’une des revendications 1 à 4, pour utilisation comme agent de protection du génome des cellules de la peau pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau.
  7. 7. Extrait pour son utilisation selon la revendication 6, caractérisé en ce que les rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques correspondent à la combinaison :
    - d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière bleue compris entre 400-495 nm, avantageusement entre 430-460 nm et de préférence égale à 450 nm ;
    - d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière verte compris entre 495-590 nm, avantageusement entre 520-550 nm et de préférence égale à 525 nm ;
    - d’une longueur d’onde choisie dans le spectre de la lumière rouge compris entre 590-700 nm, et avantageusement entre 600-640 nm et de préférence égale à
    625 nm.
  8. 8. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 ou 7, caractérisé en ce que la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau consiste en une protection de la dérégulation de l’expression des gènes dans les cellules de la peau.
  9. 9. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau consiste en une diminution de la sous-expression des gènes dans les cellules de la peau.
  10. 10. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 9, caractérisé en ce que la diminution de la sous-expression des gènes est celle des gènes impliqués dans les voies métaboliques choisies parmi l’ubiquitmylation/la dégradation des protéines, l’activité mitochondriale, le cytosquelette cellulaire, la signalisation des intégrines et la matrice extracellulaire.
  11. 11. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 10, caractérisé en ce que les gènes sont choisis parmi :
    UBA1 alias Enzyme 1 modificatrice de l’activité semblable à l’ubiquitine ; ATP5G1 alias Synthase ATP, Transporteur H+, Complexe mitochondrial
    F0, Sous-unité Cl ;
    ATP5H alias Synthase ATP, Transporteur H+, Complexe mitochondrial F0, Sous-unité D ;
    COX5B alias Cytochrome c Oxidase sous-unité Vb (complexe mitochondrial I) ;
    COX7A1 alias Cytochrome C Oxidase sous-unité 7A1 ;
    NDUFA3 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Souscomplexe 3 (complexe mitochondrial I) ;
    NDUFA10 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Souscomplexe 10 (complexe mitochondrial I) ;
    NDUFA11 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Alpha Souscomplexe 11 (complexe mitochondrial I) ;
    NDUFB5 alias déhydrogénase NADH (Ubiquinone) 1 Beta Souscomplexe 5 (complexe mitochondrial I) ;
    UQCRQ alias Reductase Ubiquinol-Cytochrome c (complexe mitochondrial III) ;
    PRDX5 alias Peroxiredoxine 5 ;
    SDHC alias Complexe Déhydrogénase Succinate,Sous-unité C (complexe mitochondrial II) ;
    TXNRD2 alias Réductase Thiorédoxine 2 ;
    ACTA2 alias Actine, alpha 2, muscle lisse ;
    ARPC1B alias Complexe protéine 2/3 reliée à l’actine ;
    CAPN1 alias Sous-unité large de la Calpaine-1 ;
    CAPNS1 alias Petite-unité 1 large Calpaine-1 ;
    D0CK1 alias Dedicator à la Cytokinèse 1 ;
    FYN alias Proto-Oncogène FYN, Famille Src Tyrosine kinase ;
    GSN alias Facteur de Dépolymerisation de Gélosine ou Actine ;
    PARVA alias Parvine, Alpha ;
    PPP1CB alias Protéine Phosphatase 1, sous-unité catalytique ;
    RHOC alias Membre C de la Famille Homologue Ras ;
    RRAS alias Famille Ras des protéines R-Ras de liaison au petites protéines
    GTP ;
    VCL alias Vinculine ;
    WIPF1 alias Famille de Protéine d’interaction WAS-WASL, Membre 1 ; COL 1 Al alias Chaîne Alpha 1 du Collagène de type 1 ;
    COL1A2 alias Chaîne Alpha 2 du Collagène de type 1.
  12. 12. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 11, caractérisé en ce que la lutte contre les effets nocifs des rayonnements visibles émis par les écrans des appareils électroniques, sur la peau consiste en une diminution de la surexpression des gènes dans les cellules de la peau.
  13. 13. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 12, caractérisé en ce que la diminution de la surexpression des gènes est celle des gènes impliqués dans les voies métaboliques choisies parmi la réponse au stress oxydatif et la sénescence cellulaire.
  14. 14. Extrait pour son utilisation selon l’une des revendications 6 à 13, caractérisé en ce que les gènes sont choisis parmi :
FR1755840A 2017-06-26 2017-06-26 Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau Active FR3067939B1 (fr)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1755840A FR3067939B1 (fr) 2017-06-26 2017-06-26 Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1755840 2017-06-26
FR1755840A FR3067939B1 (fr) 2017-06-26 2017-06-26 Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FR3067939A1 true FR3067939A1 (fr) 2018-12-28
FR3067939B1 FR3067939B1 (fr) 2020-05-22

Family

ID=60138461

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FR1755840A Active FR3067939B1 (fr) 2017-06-26 2017-06-26 Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau

Country Status (1)

Country Link
FR (1) FR3067939B1 (fr)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110433092A (zh) * 2019-08-01 2019-11-12 广州市科能化妆品科研有限公司 一种防蓝光和修护蓝光损伤的组合物
FR3133539A1 (fr) 2022-03-21 2023-09-22 Gattefosse Sas Extrait végétal obtenu par un procédé mettant en œuvre un solvant supramoléculaire, l’extrait comprenant au moins un polysaccharide exogène

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6514538B1 (en) * 1999-06-15 2003-02-04 Shiseido Company, Ltd. External preparations for skin whitening
FR2902656A1 (fr) * 2006-06-23 2007-12-28 Limousine D Applic Biolog Dite Utilisation cosmetique d'un extrait de withania somnifera
WO2010055886A1 (fr) * 2008-11-14 2010-05-20 独立行政法人産業技術総合研究所 Agent de contrôle de la sensibilité à la lumière ultraviolette
FR3036618A1 (fr) * 2015-05-26 2016-12-02 Gattefosse S A S Extraits vegetaux destines a la cosmetique, solvants et procedes pour les obtenir

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6514538B1 (en) * 1999-06-15 2003-02-04 Shiseido Company, Ltd. External preparations for skin whitening
FR2902656A1 (fr) * 2006-06-23 2007-12-28 Limousine D Applic Biolog Dite Utilisation cosmetique d'un extrait de withania somnifera
WO2010055886A1 (fr) * 2008-11-14 2010-05-20 独立行政法人産業技術総合研究所 Agent de contrôle de la sensibilité à la lumière ultraviolette
FR3036618A1 (fr) * 2015-05-26 2016-12-02 Gattefosse S A S Extraits vegetaux destines a la cosmetique, solvants et procedes pour les obtenir

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Gatuline Link n Lift, an active ingredient extracted from Aesculus hippocastanum flowers, and associated cosmetic formulations", IP.COM JOURNAL, IP.COM INC., WEST HENRIETTA, NY, US, 16 March 2017 (2017-03-16), XP013174723, ISSN: 1533-0001 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110433092A (zh) * 2019-08-01 2019-11-12 广州市科能化妆品科研有限公司 一种防蓝光和修护蓝光损伤的组合物
CN110433092B (zh) * 2019-08-01 2022-05-13 广州市科能化妆品科研有限公司 一种防蓝光和修护蓝光损伤的组合物
FR3133539A1 (fr) 2022-03-21 2023-09-22 Gattefosse Sas Extrait végétal obtenu par un procédé mettant en œuvre un solvant supramoléculaire, l’extrait comprenant au moins un polysaccharide exogène

Also Published As

Publication number Publication date
FR3067939B1 (fr) 2020-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FR3076460A1 (fr) Utilisation cosmetique d&#39;un extrait proteique des graines de moringa oleifera
EP3113850B1 (fr) Composition cosmetique eclaircissante
CA3164351A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;un extrait aqueux de lavande, compositions comprenant un tel extrait et leurs utilisations cosmetiques
JPH06227960A (ja) メラニン生成抑制剤および皮膚化粧料
EP3269426B1 (fr) Extrait d&#39;aesculus hippocastanum
CA3173694C (fr) Extrait de graines de moringa peregrina riche en 2,5-diformylfuran, son procede d&#39;obtention et son utilisation dans des compositions cosmetiques
EP3253457B1 (fr) Utilisation cosmetique d&#39;un extrait de menthe poivrée
EP2763652B1 (fr) Utilisation de glucanes obtenus a partir de prunus persica comme agent cosmetique anti-age
FR3067939A1 (fr) Extrait de withania somnifera pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements visibles sur la peau
KR20220112447A (ko) 보리밥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물
EP3801778B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de bixa orellana
FR3051672A1 (fr) Composition cosmetique ou dermocasmetique comprenant un extrait de sureau et un derive organique de sillicium
WO2010007247A2 (fr) Utilisation d&#39;un extrait aqueux ou organique ou hydro-organique de microsorum
FR3066118A1 (fr) Extrait de sechium edule pour lutter contre les effets nocifs des rayonnements ultraviolets
FR3076461A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l’âge.
WO2019077268A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l&#39;âge
EP2811978B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;ecorce de pommier dans une composition cosmetique anti-age
EP2811977B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de feuille de pommier dans une composition cosmetique pour le raffermissement de la peau
JP3597521B2 (ja) 皮膚外用剤
FR2937545A1 (fr) Procede de traitement cosmetique et pharmaceutique destine a reduire a la fois la synthese endogene de sirtuine et de reduire les contractions musculaires et compositions pour sa mise en oeuvre
JP3429297B1 (ja) 皮膚外用剤
EP4312972A1 (fr) Composition cosmetique comprenant au moins un extrait de bouleau et au moins un extrait de bourgeon de hetre
EP4009940A1 (fr) Nouvelle utilisation cosmétique d&#39;un extrait d&#39;epilobium angustifolium
WO2021001332A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;une infusion thermale botanique
KR20220112446A (ko) 돌가시나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PLSC Publication of the preliminary search report

Effective date: 20181228

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 3

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 4

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 5

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 6

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 7

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 8