FR2942720A1 - Utilisation cosmetique d'hesperidine. - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés à titre d'actif pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique.

Description

La présente invention concerne le domaine des produits topiques, des compléments alimentaires ou des aliments fonctionnels destinés au soin de la peau. Elle concerne plus particulièrement l'utilisation cosmétique d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés, comme agent pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique. De nos jours, il existe de très nombreux traitements, relevant ou non de la chirurgie esthétique, qui permettent d'embellir l'apparence des êtres humains. Ces traitements, qualifiés par la suite de traitements à finalité esthétique, peuvent agir selon de multiples façons, et par exemple consister à faire disparaître ou masquer certaines imperfections cutanées, à affiner la silhouette ou encore à atténuer, voire à faire disparaître, les signes du vieillissement. A titre illustratif et non limitatif de tels traitements, on peut notamment citer les peelings chimiques, les traitements au laser, les injections de comblement, ou encore 15 les actes de chirurgie esthétique. Au cours de ces traitements, la peau est généralement altérée et un processus de renouvellement cellulaire épidermique est naturellement initié afin de régénérer la matrice endommagée. Pour des raisons évidentes, il serait avantageux d'initier le plus rapidement 20 possible ce processus naturel de renouvellement cellulaire épidermique, afin que la matrice soit restructurée dans un délai le plus bref possible. Il serait donc particulièrement avantageux de disposer d'agents permettant de favoriser, voire de stimuler le processus naturel de renouvellement cellulaire épidermique. De même, au cours de ces traitements, un endommagement plus ou moins 25 profond de l'épiderme, voire une altération de la fonction barrière cutanée peut être constaté. Il demeure donc également un besoin de nouveaux agents favorisant parallèlement, si nécessaire, une reconstitution de l'épiderme, voire de la fonction barrière cutanée. 30 La présente invention a précisément pour objet de suppléer à ces besoins.

L'utilisation de flavonoïdes, dont l'hespéridine, pour traiter notamment les cicatrices postérieurement à un dommage, est déjà connue de WO 03/057210. WO 2005/058255 décrit, par ailleurs, l'action de flavanones particuliers, dont l'hespéridine, pour traiter les désordres de la peau et des cheveux, en particulier via les propriétés cytoprotectrices et anti-inflammatoires de ceux-ci. Le document EP 0 774 249 tire profit d'un effet synergique constaté d'une combinaison de flavanones spécifiques, d'une part, ou d'une combinaison de flavanones spécifiques avec un céramide particulier, d'autre part, sur la différenciation des kératinocytes.

Enfin, DE 198 06 890 décrit des compositions associant à la carnitine ou l'un de ses dérivés, un antioxydant pouvant être par exemple un dérivé hespéridine, et la mise en oeuvre de cette association, notamment pour traiter une peau abîmée. De manière inattendue, les inventeurs ont constaté que l'utilisation, à titre d'actif, d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés s'avère tout particulièrement efficace pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique. Ils ont notamment mis en évidence que l'hespéridine ou dérivé permettait d'obtenir une augmentation du taux de renouvellement cellulaire au niveau épidermique (action retinol-like) avec une augmentation de l'expression du Ki67 au niveau des kératinocytes de la couche basale. Les inventeurs ont également pu mettre en évidence que l'utilisation considérée selon l'invention permet aussi de favoriser la restauration de l'homéostasie d'un tissu cutané voire accélérer la récupération d'une fonction barrière efficace si nécessaire. Ainsi, la présente invention concerne, selon un premier de ses aspects, l'utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés à titre d'actif pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique. Il est à noter que les blessures et les cicatrices pouvant être notamment directement liées à la mise en oeuvre du traitement à finalité esthétique, par exemple du type incision, lacération, perforation, abrasion, brûlure, et qui relèvent de traitements thérapeutiques et non cosmétiques, ne sont pas assimilées au traitement cutané considéré selon l'invention. Ainsi, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés considérés selon l'invention agit comme agent stimulateur à l'égard de la restauration des propriétés biomécaniques de la peau, chez un sujet devant subir au moins un traitement cutané de surface et/ou au moins un traitement invasif, à finalité esthétique. L'invention concerne également, selon un autre de ses aspects, l'utilisation d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés à titre d'actif pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique pour la préparation d'une composition, notamment cosmétique et/ou thérapeutique, destinée à être administrée à un sujet devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique. Elle concerne en outre l'utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés pour accélérer la récupération d'une fonction barrière cutanée efficace au niveau d'un épiderme devant être altéré par un traitement cutané de surface ou un traitement invasif, à finalité esthétique. Ainsi, selon un mode de réalisation, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour accélérer la récupération d'une fonction barrière 20 cutanée efficace. Selon un autre mode de réalisation, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour stimuler le renouvellement des kératinocytes. Selon un autre mode de réalisation, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour augmenter le taux de renouvellement cellulaire au 25 niveau épidermique. Selon encore un autre mode de réalisation, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour augmenter l'expression du Ki67 au niveau des kératinocytes de la couche basale. La présente invention concerne également, selon un autre de ses aspects, un 30 procédé de traitement cosmétique comprenant au moins une étape d'administration à un sujet d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés, ledit procédé étant destiné à être mis en oeuvre avant l'application audit sujet d'au moins un traitement cutané de surface et/ou au moins un traitement invasif, à finalité esthétique. Selon un mode de réalisation, il peut s'agir d'un procédé cosmétique pour préparer la peau d'un sujet destiné à subir au moins un traitement cutané de surface et/ou au moins un traitement invasif, à finalité esthétique comprenant au moins une étape d'administration audit sujet d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un des ses dérivés. En ce cas, l'administration considérée selon l'invention s'avère tout particulièrement utile pour favoriser, voire accélérer le processus de renouvellement 10 cellulaire épidermique en l'initiant antérieurement au traitement. Sauf indication contraire, dans le cadre de l'invention, par peau, on entend toute surface cutanée du corps incluant la peau et élargie au cuir chevelu et aux muqueuses et semi-muqueuses. Par quantité efficace , on entend au sens de la présente invention une 15 quantité suffisante pour obtenir l'effet attendu. L'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être formulé(e) dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Selon un mode de réalisation, l'utilisation ou le procédé selon l'invention peut comprendre l'administration d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses 20 dérivés par voie topique, orale ou parentérale, de préférence par voie topique ou orale. Par voie topique, on entend une administration de l'association selon l'invention ou des compositions qui la comprennent par application sur la peau. Selon un autre mode de réalisation, l'utilisation ou le procédé selon l'invention peut comprendre l'administration d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses 25 dérivés par voie aérienne ou en sous cutanée. L'administration en sous cutanée peut notamment être effectuée au moyen d'une seringue ou d'un pistolet injecteur à compression hydropneumatique à haute fréquence d'injection. Les voies topiques et orales sont envisageables pour la mise en oeuvre de 30 l'invention. Les produits topiques agissent néanmoins, par définition, localement sur les zones à traiter, zones sur lesquelles ils peuvent être inégalement répartis, et nécessitent des applications soignées et répétées. Ils peuvent être en outre dans certains cas à l'origine de réactions secondaires cutanées, voire d'inconfort. Par opposition, la voie orale présente l'avantage d'agir de façon globale sur l'ensemble de la peau et ce dans ses couches profondes (derme, hypoderme), suivant un mode d'administration rapide et peu contraignant. En effet, les métabolites et autres nutriments actifs sont en particulier distribués au sein de la matrice dermique par le biais de la circulation sanguine. La voie orale ou l'administration par patch présente également l'avantage d'un mode d'administration rapide et peu contraignant. Selon un mode de réalisation préféré, l'utilisation cosmétique selon l'invention 10 est donc effectuée par voie orale et le procédé selon l'invention comprend l'administration par voie orale de ladite quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés.

Traitements à finalité esthétique Au sens de la présente invention, on entend par traitement à finalité 15 esthétique tout traitement destiné à pallier une imperfection jugée disgracieuse et, de manière plus générale, tout traitement destiner à embellir, c'est-à-dire à rendre plus beau, le sujet subissant un tel traitement. Les traitements à finalité esthétique considérés selon l'invention peuvent être plus particulièrement des traitements cutanés de surface ou des traitements invasifs, à 20 finalité esthétique. Par traitement cutané de surface à finalité esthétique, on entend au sens de l'invention des traitements susceptibles de manifester un caractère agressif à l'égard de l'épiderme et notamment susceptibles de provoquer une irritation de la peau. Il peut s'agir notamment de peelings chimiques et de traitements au laser. 25 A titre de traitement cutané de surface à finalité esthétique, on peut par exemple citer les peelings chimiques et les traitements au laser. Le terme peeling est la francisation du mot anglais de racine latine to peel qui signifie peler . Un peeling désigne ainsi classiquement une action contrôlée d'irritation de la surface de la peau par une substance chimique ou via un 30 procédé physique. Une opération de type peeling peut par exemple consister à appliquer sur la peau une substance chimique dans le but de provoquer une destruction limitée et contrôlée de l'épiderme et des couches superficielles du derme, afin d'améliorer certains désordres de l'apparence cutanée. En quelques années, la panoplie des peelings a considérablement été modifiée. On peut y distinguer : - les peelings superficiels qui sont depuis longtemps dominés par les acides de fruits : les alpha-hydroxy acides (AHAs) et parmi eux, l'acide glycolique ; - le peeling à l'acide trichloracétique qui reste la panacée des peelings moyens ; et - les peelings profonds réalisés au phénol en particulier pour le traitement des lésions profondes. L'avantage des peelings superficiels est qu'ils sont d'une grande facilité d'utilisation et qu'ils n'entraînent aucune désocialisation par leurs suites simples, rendant compatible la poursuite de l'activité socio-professionnelle. Ils sont adaptés à des procédures esthétiques : rides et ridules superficielles, teint, imperfections cutanées de l'acné rétentionnelle. Le peeling superficiel vise l'épiderme et est basé sur une atteinte superficielle de la peau. Il touche l'épiderme soit partiellement, soit dans sa totalité. Il peut ne concerner que le stratum corneum (SC) ou aller jusqu'au stratum granulosum ou à la couche basale en fonction du type d'agent utilisé, de sa concentration, du nombre d'applications, du dégraissage de la peau préalable. Ce type de peeling n'a que peu d'efficacité lorsqu'il est appliqué une seule fois. En général, il nécessite plusieurs applications et la procédure complète peut prendre de plusieurs semaines à des mois. En particulier, les AHAs, mis en oeuvre pour le peeling superficiel, sont kératolytiques mais ne modifient pas la kératine des cornéocytes, ils altèrent la membrane des cornéocytes en lui donnant un contour en dent de scie, ils provoquent des ruptures de l'enveloppe lipidique des cornéocytes et ciblent les cornéodesmosomes et les desmosomes : ils provoquent ainsi une desquamation par larges plaques. Dans un peeling, ils nécessitent un pH acide pour avoir une activité optimale. Ils sont également utilisés à des doses supérieures dans les peelings. L'acide glycolique ou acide hydroxyacétique est le plus connu d'entre eux. L'acide glycolique est le plus petit membre des AHAs (chaîne à deux atomes de carbone), sa taille lui permet donc de pénétrer facilement dans la couche cornée. Au même titre que l'acide citrique (agrumes), l'acide malique (pomme verte), l'acide tartrique (raisin) ou l'acide lactique (lait, fruits rouges), l'acide glycolique est présent à l'état naturel. Les propriétés de l'acide glycolique sont liées à l'activation de la desquamation. Il va donc favoriser l'exfoliation des cellules mortes de surface qui se fait moins bien avec l'âge afin de restaurer les qualités de la surface cutanée (clarté, luminosité, uniformité du teint, douceur, lissage du relief cutané et action sur les imperfections cutanées). De plus, il va aider à agir contre l'hyperkératinisation des imperfections cutanées et ainsi contribuer à les réduire.

Plus la concentration en acide glycolique est importante plus l'efficacité est grande. Un tel peeling doit être neutralisé pour éviter une irritation de la peau trop importante. La neutralisation se fait avec l'hydroxyde de sodium ou le bicarbonate de soude. Parallèlement aux peelings précités que l'on pourrait qualifier de chimiques au regard des produits chimiques qu'ils mettent en oeuvre, s'est également développée une technologie qualifiée ci-après de peeling physique, impliquant la mise en oeuvre de lasers ablatifs et non ablatifs. Les premiers lasers ablatifs, réalisés avec des lasers CO2 pulsés ou scannés, ont pour effet immédiat la vaporisation (ou ablation) de l'épiderme et souvent de la partie supérieure du derme. Une bande du derme sous jacent est généralement également le siège d'une lésion thermique avec dénaturation et contraction du collagène. Pendant la phase de cicatrisation, il se produit une réepithélisation à partir des follicules pileux et d'autres annexes en plus d'une bande dermique supérieure ( remodelage du collagène ). La dernière génération de lasers utilise un système de transformation du faisceau laser en multitude de faisceaux espacés entre eux afin de produire sur la peau des impacts espacés entre eux, maintenant ainsi des zones de peau saine non altérée entre les zones touchées. Par traitement au laser s'entend au sens de l'invention tout traitement à finalité esthétique mettant en oeuvre un laser, dont les peelings physiques décrits 30 précédemment. A titre de traitement au laser, on peut ainsi par exemple également citer l'épilation laser ; le traitement des angiomes au laser ; le traitement des rougeurs, notamment de l'érythrose et de la couperose, au laser ; le traitement des lentigos, notamment actiniques, au laser ; le traitement des tatouages au laser ; ou encore le traitement des rides au laser. Les différents lasers utilisables pour ces traitements ne font pas l'objet ici d'une description détaillée.

A titre de traitement invasif à finalité esthétique, on peut par exemple citer les injections de comblement et les actes de chirurgie esthétique. Par injection de comblement , on entend désigner, au sens de l'invention, 10 toute injection de composés destinés à procurer un effet esthétique. Les méthodes d'injection peuvent être de type traçante rétrograde ou multi-poncture. Il peut notamment s'agir d'une injection de collagène, d'une injection d'acide hyaluronique ou encore d'une injection de toxine botulique de type A (commercialisée 15 sous le nom Botox ). Ces composés peuvent être injectés dans la peau, et créer ainsi du volume en donnant une apparence de vitalité et de bonne santé. Injectés sous une ride, ils permettent en particulier de réaliser un lifting de la peau en regonflant les tissus et en redonnant à la peau son aspect lisse, naturel et tendu. 20 Le terme lifting désigne de façon générale toutes les opérations destinées à corriger l'affaissement de la peau, et par exemple l'affaissement des pommettes et des creux au milieu des joues. Un lifting peut ainsi être également réalisé, le cas échéant, par un acte de chirurgie esthétique. 25 Par chirurgie esthétique , on entend désigner, au sens de l'invention, la chirurgie visant notamment à corriger les disgrâces physiques congénitales (nez, oreilles, menton) ou acquises à la puberté (hypotrophie mammaire, surcharges graisseuses localisées), dans les suites de grossesses (déformation de la paroi abdominale) ou du fait du vieillissement (visage, paupières, cou, seins) 30 A titre d'acte de chirurgie esthétique, on peut ainsi également citer, de façon non limitative, la blépharoplastie, la plastie abdominale (ou abdominoplastie), la rhinoplastie, la plastie mammaire, la lipoaspiration ou encore la lipostructure.

Hespéridine L'hespéridine appartient à la famille des flavanones, qui sont des composés glucosides naturels retrouvés principalement dans les agrumes, c'est-à-dire les fruits du genre Citrus, tels que par exemple les oranges, les citrons, les oranges amères ou encore les raisins. Elles sont présentes majoritairement dans la peau des agrumes mais sont également retrouvées en grandes quantités dans la pulpe, et donc dans le jus des agrumes. L'hespéridine est un composé glycosylé comprenant un noyau flavanone d'hespéritine (3',5',5-trihydroxy-4'-méthoxyflavanone) auquel est liée de manière covalente une partie glucosidique de rutinose L-rhamnosyl-(a 1-*6)-glucose) fixée sur le groupe hydroxyle présent sur le carbone en position 7 de l'hespéritine. Par hespéridine, on entend ainsi le composé (S)-7[[6-0-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-(3-D-glucopyranosyl]oxy]-2, 3-dihydro-5-hydroxy-2-(3-hydroxy-4- méthoxyphenyl) -4H- 1 -benzopyran-4-one.

Les dérivés de l'hespéridine peuvent être choisis parmi ses formes aglycones, ses formes chalcones, ses formes glycolysées et ses formes méthylées, ainsi que ses formes sulfatées ou glucuronidées qui sont retrouvées comme produits du métabolisme dans la circulation sanguine. Les dérivés d'hespéridine peuvent être obtenus par divers procédés connus de l'homme du métier, à l'image par exemple des traitements enzymatiques ou encore être obtenus par synthèse. Le glucose-7-hespéritine peut ainsi être préparé par un traitement par la rhamnosidase ou l'hespéridinase. A titre de dérivé de l'hespéridine, on peut notamment citer les composés suivants: - le composé hespérétine, constitué du noyau flavanone non glycosylé de l'hespéridine, qui a la formule suivante: (S)-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2- (3 -hydroxy-4-méthoxyphényl)-4H- 1 -b enzopyran-4 -one ;3 ',5 ,7-trihydroxy- 4'-méthoxy flavanone; - l'a-glucosyl-hespéridine, qui comporte une chaîne de 1 à 20 résidus de glucose liés entre eux par une liaison 1,4, la chaîne de résidus glucose étant liée elle-même par une liaison de type 1,4 en position 4 du résidu glucose de l'hespéridine; ces dérivés de l'hespéridine et leur procédé de préparation sont décrits notamment dans la demande de brevet EP 0 825 196 et dans le brevet US 6,048,712; - les composés méthyl-hespéridine, notamment le composé 3'-méthyl-7-(rhamnosyl-2-méthyl-glucosyl) hespéridine et le composé 3'-méthylhespéridine, ces composés, ainsi que leur procédé de préparation étant décrits dans le brevet US 858 784; - les conjugués d'hespérétine et de sulfate ou de glucuronide, qui sont retrouvés, avec 1' hespérétine, comme produits de la métabolisation de l'hespéridine dans la circulation sanguine.

Selon un mode de réalisation, on utilise l'hespéridine et ses dérivés choisis parmi l'hespéritine et le glucuronide d'hespéritine. D'une manière générale, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être mis(e) en oeuvre à raison de 0,00001 à 20 % en poids, par exemple de 0,001 à 10 % en poids par rapport au poids total d'une composition en contenant.

Selon un mode de réalisation, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés considérés selon l'invention peut être associé(e) à au moins une quantité efficace d'au moins un microorganisme, notamment probiotique, de l'une de ses fractions ou de l'un de ses métabolites, tels que décrits ci-après.

Microorganismes, et notamment microorganismes probiotiques Les microorganismes convenant à l'invention sont des microorganismes qui peuvent être administrés sans risques à l'animal ou l'homme. En particulier, on peut utiliser dans la présente invention au moins un microorganisme dit de type probiotique.

Au sens de la présente invention, on entend par microorganisme probiotique , un microorganisme vivant qui, lorsqu'il est consommé en quantité adéquate, a un effet positif sur la santé de son hôte ( Joint FAO/WHO Expert Consultation on Evaluation of Health and Nutritional Properties of Probiotic in Food Including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria, 6 octobre 2001 ), et qui peut en particulier améliorer l'équilibre microbien intestinal.

Selon une variante de l'invention, ce microorganisme est mis en oeuvre sous une forme isolée, c'est-à-dire non mélangée à un ou des composé(s) susceptible(s) de lui être associé(s) dans son milieu d'origine. Au sens de l'invention, le terme métabolite désigne toute substance issue 5 du métabolisme des microorganismes considérés selon l'invention et dotée également d'une efficacité pour le traitement des peaux sèches. Au sens de l'invention, le terme fraction désigne plus particulièrement un fragment dudit microorganisme doté d'une efficacité pour le traitement des peaux sèches par analogie audit microorganisme entier. 10 Les microorganismes convenant à l'invention peuvent être choisis notamment parmi les ascomycètes telles que Saccharomyces, Yarrowia, Kluyveromyces, Torulaspora, Schizosaccharomyces pombe, Debaromyces, Candida, Pichia, Aspergillus et Penicillium, des bactéries du genre Bifidobacterium, Bacteroides, Fusobacterium, Melissococcus, Propionibacterium, Enterococcus, Lactococcus, Staphylococcus, Peptostrepococcus, 15 Bacillus, Pediococcus, Micrococcus, Leuconostoc, Weissella, Aerococcus, Oenococcus, Lactobacillus et leurs mélanges. Comme ascomycètes convenant tout particulièrement à la présente invention, on peut en particulier citer Yarrowia lipolitica et Kluyveromyces lactis, de même que Saccharomyces cereviseae, Torulaspora, Schizosaccharamyces pombe, Candida et Pichia. 20 En ce qui concerne les microorganismes probiotiques, ce sont les genres bactériens et de levure suivants qui sont généralement utilisés : - les bactéries lactiques : qui produisent par fermentation du sucre de l'acide lactique. Suivant leur morphologie on les divise en deux groupes : • Lactobacillus species : Lactobacillus acidophilus ; amylovorus, casei, rhamnosus, brevis, crispatus, delbrueckii (subsp bulgaricus, lactis), fermentum, helveticus, gallinarum, gasseri johnsonii, paracasei, plantarum, reuteri, salivarius, alimentarius, curvatus, casei subsp. casei, sake • Cocci : Enterococcus (faecalis, faecium), Lactococcus lactis (subsp lactis ou cremoris), Leuconstoc mesenteroides subsp dextranicum, Pediococcus acidilactici, Sporolactobacillus inulinus, Streptococcus 25 30 salvarius subsp. Thermophilus, Streptococcus thermophilus, Staphylococccus carnosus, Staphylococcus xylosus. - les bifidobactéries ou Bifidobacterium species : Bifidobacterium adolescentis, animalis, bifidum, breve, lactis, longum, infantis, pseudocatenulatum ; - les levures : Saccharomyces (cerevisiae ou encore boulardii) ; - les autres bactéries sporulées : Bacillus (cereus var toyo ou subtilis), Bacillus coagulans, Bacillus licheniformis, Escherichia coli strain nissle, Propionibacterium freudenreichii ; - et leurs mélanges.

Les bactéries lactiques et les bifidobactéries sont les probiotiques le plus souvent utilisés. Des exemples spécifiques de microorganismes probiotiques sont Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Lactobacillus acidophilus (NCFB 1748) ; Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus casei (Shirota), Lactobacillus rhamnosus (souche GG), Lactobacillus brevis, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus delbrueckii (subsp bulgaricus, lactis), Lactobacillus fermentum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus gallinarum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225), Lactobacillus paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus alimentarius, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus casei subsp. casei, Lactobacillus sake, Lactococcus lactis, Enterococcus (faecalis, faecium), Lactococcus lactis (subspp lactis ou cremoris), Leuconostoc mesenteroides subsp dextranicum, Pediococcus acidilactici, Sporolactobacillus inulinus, Streptococcus salvarius subsp. Thermophilus, Streptococcus thermophilus, Staphylococccus carnosus, Staphylococcus xylosus, Saccharomyces (cerevisiae ou encore boulardii), Bacillus (cereus var toyo ou subtilis), Bacillus coagulans, Bacillus licheniformis, Escherichia coli strain nissle, Propionibacterium freudenreichii, et leurs mélanges. De préférence, le microorganisme probiotique peut être choisi parmi : Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus alimentarius, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbruckii (subsp bulgaricus lactis), Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus (souche GG), Lactobacillus sake, Lactococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Staphylococccus carnosus et Staphylococcus xylosus, et leurs mélanges. Ces microorganismes peuvent être formulés à l'état de poudres, c'est-à-dire sous une forme sèche, ou sous forme de suspensions ou de solutions.

Plus particulièrement, il s'agit de microorganismes probiotiques issus du groupe des bactéries lactiques, comme notamment les Lactobacillus et/ou les Bifidobacterium. A titre illustratif de ces bactéries lactiques, on peut plus particulièrement citer les Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus casei ou Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis ou Bifidobacterium pseudocatenulatum et leurs mélanges, et de préférence les Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, et leurs mélanges.

Les espèces convenant tout particulièrement sont les Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus paracasei, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum et Bifidobacterum lactis et plus particulièrement des souches correspondantes respectivement déposées suivant le traité de Budapest avec l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) les 30/06/92, 12/01/99, 15/04/99, 15/04/99, 07/06/05 sous les désignations suivantes CNCM I-1225, CNCM I-2116, CNCM I-2168 et CNCM I-2170 et CNCM I-3446, et le genre Bifidobacterium longum (BB536) et leurs mélanges. Selon un mode de réalisation particulier, l'hespéritine ou avec l'un des ses dérivés est mise en oeuvre avec au moins un microorganisme probiotique du genre Lactobacillus species, et plus particulièrement de l'espèce Lactobacillus paracasei, l'une de ses fractions ou l'un de ses métabolites. Selon un mode de réalisation, le microorganisme probiotique est la souche de Lactobacillus paracasei déposée suivant le traité de Budapest avec l'Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) le 12/01/99 sous la désignation CNCM I-2116.

Selon un mode de réalisation particulier, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être associée à au moins deux microorganismes, notamment probiotiques et/ou métabolites et/ou fractions de ceux-ci, différents.

Le ou les microorganisme(s) peu(ven)t être inclus dans une composition selon l'invention sous une forme vivante, semi-active ou inactivée, morte. I1(s) peu(ven)t également être inclus sous forme de fractions de composants cellulaires ou sous la forme de métabolites. Le ou le(s) microorganisme(s), métabolite(s) ou fraction(s) peu(ven)t également être introduit(s) sous la forme d'une poudre lyophilisée, d'un surnageant de culture et/ou le cas échéant sous une forme concentrée. D'une manière générale, le microorganisme, notamment probiotique, peut être mis en oeuvre à raison de 0,0001 à 20 % en poids, en particulier de 0,001 à 20 % en poids, et plus particulièrement à raison de 0,01 à 10 % en poids par rapport au poids total de la composition le contenant. Il peut être avantageux de mettre en oeuvre ces microorganismes sous forme inactivée, voire morte, et plus particulièrement sous forme d'un lysat. Un tel lysat peut être obtenu à partir de la lyse cellulaire du microorganisme concerné, selon une méthode conventionnelle.

Le(s) microorganisme(s) probiotique(s) sous forme de lysat en suspension désintégré peu(ven)t être formulé(s) dans un support approprié à raison de moins de 20 % en poids, en particulier à raison de 0,0001 à 20 % en poids, et plus particulièrement à raison de 0,01 à 10 % en poids par rapport au poids total dudit support. Lorsqu'ils sont vivants, les microorganismes et/ou leurs fractions et/ou métabolites peuvent être formulés dans un support approprié en une quantité équivalente à au moins 103 ufc/g, en particulier à des doses variant de 105 à 1015 ufc/g, et plus particulièrement de l0' à 1012 ufc/g de support. Aussi, des compositions selon l'invention comprennent généralement de 103 à 1012 ufc, en particulier de 105 à 1010 ufc et plus particulièrement de 10' à 109 ufc de 25 microorganismes vivants notamment probiotiques par gramme de support. Lorsque la composition comprend des métabolites, les teneurs en métabolites dans les compositions correspondent sensiblement aux teneurs susceptibles d'être produites par 103 à 1015 ufc, en particulier 105 à 1015 ufc, et plus particulièrement 10' à 1012 ufc de microorganismes vivants par gramme de support. 30 Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toutes les formes galéniques normalement disponibles pour le mode d'administration retenu.

Le support peut être de nature diverse selon le type de composition considérée. En ce qui concerne plus particulièrement les compositions destinées à une administration par voie topique, il peut s'agir de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type des solutions ou dispersions du type lotion ou sérum, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, de suspensions ou émulsions, du type crème, de gel aqueux ou anhydre, de microémulsions, de microcapsules, de microparticules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.

De façon connue, les formes galéniques dédiées à une administration topique peuvent contenir également des adjuvants habituels dans le domaine cosmétique, pharmaceutique et/ou dermatologique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les bactéricides, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans le domaine considéré, et par exemple de 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse et/ou dans la phase aqueuse. Comme matières grasses utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales comme par exemple le polyisobutène hydrogéné et l'huile de vaseline, les huiles végétales comme par exemple une fraction liquide du beurre de karité, huile de tournesol et d'amandes d'abricot, les huiles animales comme par exemple le perhydrosqualène, les huiles de synthèse notamment l'huile de Purcellin, le myristate d'isopropyle et le palmitate d'éthyl hexyle, les acides gras insaturés et les huiles fluorées comme par exemple les perfluoropolyéthers. On peut aussi utiliser des alcools gras, des acides gras comme par exemple l'acide stéarique et comme par exemple des cires notamment de paraffine, carnauba et la cire d'abeilles. On peut aussi utiliser des composés siliconés comme les huiles siliconées et par exemple les cyclométhicone et diméthicone, les cires, les résines et les gommes siliconées.

Comme émulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60, le mélange alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné à 33 moles d'oxyde d'éthylène vendu sous la dénomination Sinnowax AO par la société HENKEL, le mélange de PEG-6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de Tefosé 63 par société GATTEFOSSE, le PPG-3 myristyl éther, les émulsionnants siliconés tels que le cétyldiméthicone copolyol et le mono- ou tristéarate de sorbitane, le stéarate de PEG-40, le monostéarate de sorbitane oxyéthyléné (200E). Comme solvants utilisables dans l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol. La composition de l'invention peut également contenir de façon avantageuse une eau thermale et/ou minérale, notamment choisie parmi l'eau de Vittel, les eaux du 10 bassin de Vichy et l'eau de la Roche Posay.

Dans le cas d'une utilisation conforme à l'invention par voie orale, on privilégie l'utilisation d'un support ingérable. Le support ingérable peut être de nature diverse selon le type de composition 15 considérée. Conviennent ainsi notamment comme supports alimentaires ou pharmaceutiques des comprimés ou des tablettes, des suppléments oraux sous forme sèche et des suppléments oraux sous forme liquide. Il peut par exemple s'agir de compléments alimentaires, dont la formulation 20 peut être réalisée par les procédés usuels pour produire notamment des dragées, gélules, gels, émulsions, comprimés, capsules et hydrogels permettant une libération contrôlée. En particulier, l'hespéridine ou l'un de ses dérivés selon l'invention, peut être incorporée dans toutes autres formes de compléments alimentaires ou d'aliments enrichis, par exemple des barres alimentaires ou des poudres, compactées ou non. Les poudres 25 peuvent être diluées dans de l'eau, du soda, des produits laitiers ou dérivés du soja, ou être incorporées dans des barres alimentaires. Dans le cas de prises par voie orale, les doses journalières peuvent, pour l'hespéridine ou l'un de ses dérivés aller de 0,5 à 2500 mg/j, notamment de 5 à 500 mg/j. L'hespéridine ou l'un de ses dérivés peut être par ailleurs formulé(e) avec les 30 excipients et composants usuels pour de telles compositions orales ou compléments alimentaires, à savoir notamment composants gras et/ou aqueux, agents humectants, épaississants, conservateurs, agents de texture, de saveur et/ou d'enrobage, antioxydants, conservateurs et colorants usuels dans le domaine de l'alimentaire. Les agents de formulation et excipients pour composition orale, et notamment pour compléments alimentaires, sont connus dans ce domaine et ne font pas ici l'objet d'une description détaillée. Conviennent notamment comme supports alimentaires ou pharmaceutiques, le lait, le yaourt, le fromage, les laits fermentés, les produits fermentés à base de lait, des glaces, des produits à base de céréales ou des produits à base de céréales fermentées, des poudres à base de lait, des formules pour enfants et nourrissons, des produits alimentaires de type confiserie, chocolat, céréales, des aliments pour animaux en particulier domestiques, des comprimés, gélules ou tablettes, des suspensions de bactéries liquides, des suppléments oraux sous forme sèche et des suppléments oraux sous forme liquide.

Quelque soit le mode d'administration considéré, la quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés peut également être avantageusement associée à au moins un autre actif. A titre d'actifs utilisables, on peut citer, les vitamines A, B3, B5, B6, B8, C, D, E, ou PP, les curcuminoïdes, les caroténoïdes, les composés polyphénols et minéraux, les sucres, les acides aminés, les acides aminés soufrés, les acides gras polyinsaturés 3 et 6, la taurine et les phytostérols. En particulier, on peut utiliser un complexe anti-oxydant comprenant les vitamines C et E, et au moins un caroténoïde, notamment un caroténoïde choisi parmi le (3-carotène, le lycopène, l'astaxanthine, la zéaxanthine et la lutéine, des flavonoïdes telles que les catéchines, des proanthocyanidines, des anthocyanines, des ubiquinones, des extraites de café contenant des polyphénols et/ou des diterpènes, des extraits de chicorés, des extraits de ginkgo biloba, des extraits de raisins riches en proanthocyanidines, des extraits de piment, des extraits de soja, d'autres sources de flavonoïdes possédant des propriétés antioxydantes, des acides gras, des prébiotiques, la taurine, du resveratrol, des acides aminés du sélénium, des précurseurs de glutathion.

Parmi les flavonoïdes, on choisit de préférence les catéchines et les OPC (oligomères procyanidoliques).

Dans les formes galéniques topiques, on peut utiliser plus particulièrement comme actifs hydrophiles les protéines ou les hydrolysats de protéine, les acides aminés, les polyols notamment en C2 à C10 comme les glycérine, sorbitol, butylène glycol et polyéthylène glycol, l'urée, l'allantoïne, les sucres et les dérivés de sucre, les vitamines hydrosolubles, l'amidon, des extraits bactériens ou végétaux comme ceux d'Aloe Vera. Pour ce qui est des actifs lipophiles, on peut utiliser le rétinol (vitamine A) et ses dérivés, le tocophérol (vitamine E) et ses dérivés, les céramides, les huiles essentielles et les insaponifiables (tocotriènol, sésamine, gamma oryzanol, phytostérols, squalènes, cires, terpènes).

Comme actifs également susceptibles d'être associés à l'hespéridine ou à l'un de ses dérivés, convenants à la voie topique mais plus particulièrement adaptés à une formule galénique orale, on peut également considérer tous les ingrédients communément utilisés et/ou autorisés, notamment les agents actifs destinés à la prévention et/ou au traitement des affections cutanées.

A titre illustratif, on peut citer les vitamines, les minéraux, les lipides essentiels, les oligoéléments, les polyphénols, les flavonoïdes, les phytoestrogènes, les antioxydants tels que l'acide lipoïque et le coenzyme Q10, les caroténoïdes, les prébiotiques, les protéines et les acides aminés, les mono et polysaccharides, les amino-sucres, les phytostérols et alcools triterpéniques d'origine végétale.

Il s'agit, en particulier, des vitamines A, C, D, E, PP et du groupe B. Parmi les caroténoïdes, on choisit de préférence, le béta-carotène, le lycopène, la lutéine, la zéazanthine et l'astaxanthine. Les minéraux et oligo-éléments particulièrement mis en oeuvre sont le zinc, le calcium, le magnésium, le cuivre, le fer, l'iode, le manganèse, le sélénium, le chrome (III). Parmi les composés polyphénols, on retient aussi en particulier les polyphénols de raisin, de thé, d'olive, de cacao, de café, de pomme, de myrtille, de sureau, de fraise, de canneberge, et d'oignon. De préférence parmi les phytoestrogènes, on retient les isoflavones sous la forme libre ou glycosylée, telles que la génistéine, la daidzéine, la glycitéine ou encore les lignanes, en particulier ceux du lin et du schizandra chinensis. Les acides aminés ou les peptides et les protéines les contenant, tels que la taurine, la thréonine, la cystéine, le tryptophane, la méthionine. Les lipides appartiennent de préférence au groupe des huiles contenant des acides gras mono et polyinsaturés tels que les acides oléique, linoléique, alpha-linolénique, gamma-linolénique, stearidonique, les acides gras oméga-3 de poisson à longue chaîne tels que l'EPA et le DHA, les acides gras conjugués issus de végétaux ou d'animaux tels que les CLA (Conjugated Linoleic Acid). Ainsi, en particulier lorsque l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est destiné(e) à une administration par voie orale, il (elle) peut être associé(e) en outre à au moins un actif nutritionnel choisi parmi le lycopène, la vitamine C, la vitamine E et les composés polyphénols. L'hespéridine ou de l'un de ses dérivés peut également être associé(e) à d'autres actifs nutritionnels choisis parmi : - les actifs nutritionnels anti-âge, tels que les antioxydants alimentaires, les nutriments aux propriétés anti-radicalaires et les cofacteurs des enzymes endogènes antioxydants, les vitamines A, C, E, les caroténoïdes, les xantophyles, les isoflavones, certains minéraux tels que le zinc, le cuivre, le magnésium, le sélénium, l'acide lipoïque, le co-enzyme Q10, la superoxyde dismutase (SOD) ou encore la taurine. Parmi les actifs anti-âges, on peut notamment citer les fractions insaponifiables extraits de lipides d'origine végétale, aloe vera, le collagène marin natif ou hydrolysé, les huiles végétales ou marines riches en acides gras oméga-3, en oméga-6 (y compris l'acide gamma-lino lénique), - les actifs nutritionnels photoprotection tels que : les antioxydants et les antiradicalaires, les vitamines A, C, E, caroténoïdes, xantophyles, certains minéraux tels que le zinc, le cuivre, le magnésium, le sélénium, la co-enzyme Q10, la superoxyde dismultase (SOD), - les ingrédients nutritionnels présentant des propriétés d'hydratation ou encore immunomodulatrices tels que l'extrait de polypodium leucotomos, les huiles végétales ou marines riches en acides gras oméga-3, en oméga-6, y compris l'acide gamma-lino lénique, - les actifs nutritionnels actifs sur les signes cliniques de la ménopause (par exemple bouffées de chaleur, etc), tels que les isoflavones, les lignanes, la DHEA, les extraits de yam, de sauge, de houblon, le calcium, le magnésium, les hydrolysats de protéines, les huiles végétales ou marines riches en acides gras oméga-3, et - les ingrédients nutritionnels mis en oeuvre dans le domaine de la minceur, tels que les extraits de thé vert, maté, marron d'inde, kola, caféine, théobromine, synéphrine, bromelaïne, éphédra, citrus aurantium, calcium, hoodia, garcinia, chitosan, fibres végétales (cactus, pommes, ananas, etc), fenouil, cassis, reine des près, radis noir. Le procédé de traitement cosmétique de l'invention peut être mis en oeuvre notamment en administrant par voie orale et/ou topique au moins une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés. L'administration par voie topique consiste à l'application de compositions cosmétiques et/ou dermatologiques telles que définies ci-dessus, selon la technique d'utilisation habituelle de ces compositions. Le procédé cosmétique selon l'invention peut être mis en oeuvre par administration topique ou orale, de préférence orale, journalière par exemple, de compositions cosmétiques et/ou dermatologiques selon l'invention qui peuvent être par exemple formulées sous forme de gels, lotions, émulsions, ou supports ingérables. L'administration par voie orale consiste à ingérer en une ou plusieurs prises une composition orale telle définie ci-dessus.

Selon une variante, le procédé cosmétique comprend au moins une étape d'administration orale d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés, et au moins une étape d'administration topique d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés. Le procédé selon l'invention peut comprendre une administration unique.

Selon un autre mode de réalisation, l'administration est répétée par exemple 2 à 3 fois quotidiennement sur une journée ou plus et généralement sur une durée prolongée d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption.

Dans la description et dans les exemples suivants, sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages en poids et les plages de valeurs libellées sous la forme entre ... et ... incluent les bornes inférieure et supérieure précisées. Les ingrédients sont mélangés, avant leur mise en forme, dans l'ordre et dans des conditions facilement déterminées par l'homme de l'art.

Les exemples ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif du domaine de l'invention. 10 Exemple 1 : Gel unidose % pds Hespéridine 10 Lycopène 10 Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225) 1010 cfu Sirop de sucre 50 Maltodextrine 17 Gomme Xanthane 0,8 Benzoate de sodium 0,2 Eau qsp 100 On peut prendre une dose de 200 à 400 ml par jour. Exemple 2 : Capsule mg/capsule Hespéridine 0,5 Lactobacillus paracasei (CNCM I-2116) 1010 cfu Glycérine 150 stéarate de magnésium 0,02 arôme naturel qs On peut prendre une à trois de ces capsules par jour.

Exemple 3 On adjoint à la formulation de l'exemple 2 un complexe vitaminique comportant 60 mg de vitamine C, 100 g de vitamine E et 6 mg de (3-carotène. Exemple 4 On adjoint à la formulation de l'exemple 2 un complexe vitaminique comportant 100 mg de vitamine C, 100 g de vitamine E et 6 mg de lycopène par capsule. 21 Exemple 5 : Capsule mg/capsule Vitamine C 60 Hespéridine 1,0 Glycérine 150 stéarate de magnésium 0,02 arôme naturel qs On peut prendre une à trois de ces capsules par jour.

Exemple 6 On adjoint à la formulation de l'exemple 5 un complexe vitaminique comportant 60 mg de vitamine C, 100 g de vitamine E et 6 mg de (3-carotène.

Exemple 7 On adjoint à la formulation de l'exemple 5 un complexe vitaminique 10 comportant 100 mg de vitamine C, 100 g de vitamine E et 6 mg de lycopène par capsule.

Exemple 8 : Lotion pour le corps sous forme de spray 22 Extraits d'écorce d'orange 15 Antioxydant Isopropanol Conservateur Eau

20 Exemple 9 : Crème pour le soin du visage

Extraits d'écorce d'orange Antioxydant Isopropanol 25 Stéarate de glycérol Alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné(% en poids) 5,00 0,05 40,00 0,35 qsp 100,00 à 33 moles OE (Sinnowax A0 vendu par la société Henkel) Alcool cétylique Diméthicone (DC 200 Fluid vendu par la société Dow Corning) Huile de vaseline Myristate d'isopropyle (Estol IPM 1514 vendu par Unichema) Antioxydant Glycérine Conservateur Eau Exemple 10 : Gel pour le soin du visage

Extraits d'écorce d'orange Lactobacillus paracasei (CNCM I-2116) Antioxydant Vitamine C Antioxydant Isopropanol Conservateur Eau

Exemple 11 : Lotion en patch pour le soin du visage

Extraits d'écorce d'orange 25 Antioxydant Isopropanol Conservateur Eau(% en poids 5,00 0,05 40,00 0,30 qsp 100,00 3,00 1,00 1,00 6,00 3,00 0,05 20,00 0,30 qsp 100,00

(% en poids) 5,00 1010 cfu 0,05 2,50 0,05 40,00 0,30 qsp 100,00 30 Exemple 12 : Etude de l'effet de l'hespéridine sur le marquage Ki67 L'étude a été réalisée sur des sujets âgés et sains soumis, pendant 24 semaines, à un régime alimentaire comprenant ou non de l'hespéridine.

Le premier groupe de sujets (groupe A) est un groupe témoin soumis à un régime alimentaire standard dépourvu d'hespéridine. Le deuxième groupe de sujets (groupe B) est un groupe soumis à un régime alimentaire comprenant 0,1 % en poids d'hespéridine par rapport au régime alimentaire standard, ce qui correspond à 50 mg d'hespéridine par kg de poids corporel du sujet et par jour. Le troisième groupe de sujets (groupe C) est un groupe soumis à un régime alimentaire comprenant 0,5 % en poids d'hespéridine par rapport au régime alimentaire standard, ce qui correspond à 250 mg d'hespéridine par kg de poids corporel du sujet et par jour. Des échantillons de peau ont été prélevés et analysés afin d'étudier par immunofluorescence l'expression du marqueur de prolifération Ki67 au niveau des kératinocytes de la couche basale.

Protocole expérimental L'immunomarquage du Ki-67 est effectué par immunohistochimie avec un anticorps primaire anti Ki67 [M7248 (revendu par DakoCytomation), dilution 1/25] et un anticorps secondaire anti-souris Ig G1 FITC [I1904-75D (revendu par Euromedex), dilution 1/100].

Le marquage a été réalisé sur des coupes congelées de 5 m d'épaisseur issues de prélèvements cutanés. Les lames ont été récupérées dans du PBS pendant 5 minutes, incubées avec l'anticorps primaire pendant 1 heure à température ambiante dans l'obscurité, rincées dans du PBS à deux reprises pendant 5 minutes, puis incubées avec l'anticorps secondaire pendant 1 heure à température ambiante dans l'obscurité puis à nouveau rincées dans du PBS à deux reprises pendant 5 minutes. Les lames sont ensuite montées avec du Vectashield (Vector) contenant du DAPI (4,6-diamino-2-phénylindole), puis recouvertes d'une lamelle.

Résultats Le marquage Ki67 est localisé au niveau de l'assise basale de l'épiderme.

Des photos ont ensuite été prises avec un appareil photo El (Olympus) en manuel 200 ASA avec un temps d'exposition de 13 secondes, sur un champ représentatif de chaque coupe (microscope avec objectif x20). Le nombre de noyaux colorés par l'anticorps Ki67 (correspondant au nombre de noyaux fluorescents en vert) et le nombre total de noyaux sur la lame basale (correspondant au nombre de noyaux fluorescents en bleu, contre coloration DAPI) ont ensuite été comptés. Le pourcentage de prolifération est alors calculé comme étant le rapport entre le nombre de noyaux colorés par l'anticorps Ki67 sur le nombre total de noyaux de la lame 10 basale, pour un même champ. Nombre de coupe (n) Groupe Moyenne des pourcentages de prolifération des cellules de la lame basale 12 A 1 12 B 2,7 12 C 7,6 Une expression plus importante du marqueur de prolifération Ki67 est observée dans les deux groupes traités B et C, et plus particulièrement dans le groupe C, par rapport au témoin (contrôle) au niveau de la lame basale. L'hespéridine permet effectivement d'obtenir une augmentation du taux de renouvellement cellulaire au niveau épidermique (action retinol-like) par une augmentation de l'expression du Ki67 au niveau des kératinocytes de la couche basale. 15

Claims (19)

1. REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés à titre d'actif pour stimuler le processus de renouvellement cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un traitement invasif choisi parmi les injections de comblement, à finalité esthétique.
2. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le traitement cutané de surface à finalité esthétique est choisi parmi les peelings chimiques et les 10 traitements au laser.
3. 3. Utilisation d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés à titre d'actif pour stimuler le processus de renouvellement, cellulaire épidermique au niveau d'une matière kératinique pour la préparation d'une composition destinée à être administrée à un sujet devant consécutivement subir un traitement cutané de surface ou un 15 traitement invasif, à finalité esthétique.
4. 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour stimuler le renouvellement des kératinocytes.
5. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans 20 laquelle l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour augmenter le taux de renouvellement cellulaire au niveau épidermique.
6. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est mis(e) en oeuvre à titre d'actif pour augmenter l'expression du Ki67 au niveau des kératinocytes de la couche basale. 25
7. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les dérivés de l'hespéridine sont choisis parmi ses formes aglycones, ses formes chalcones, ses formes glycosylées et ses fermes méthylées, ainsi que ses formes sulfatées ou glucuronidées qui sont retrouvées comme produits du métabolisme dans la circulation sanguine. 30
8. 8. Utilisation selon la revendication précédente, dans laquelle les dérivés sont obtenus par des traitements enzymatiques ou encore sont obtenus par synthèse.
9. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'on utilise l'hespéridine et ses dérivés choisis parmi l'hespéritine et le glucuronide d'hespéritine.
10. 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est mis(e) en oeuvre à raison de 0,00001 à 20 % en poids, par exemple de 0,001 à 10 % en poids par rapport au poids total de la composition en contenant.
11. 11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant l'administration d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés 10 par voie topique ou orale.
12. 12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'hespéridine ou l'un de ses dérivés est associé(e) à au moins une quantité efficace d'au moins un microorganisme, notamment probiotique, de l'une de ses fractions ou de l'un de ses métabolites. 15
13. 13. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que ledit microorganisme est choisi parmi les ascomycètes telles que Saccharomyces, Yarrowia, Kluyveromyces, Torulaspora, Schizosaccharomyces pombe, Debaromyces, Candida, Pichia, Aspergillus et Penicillium, des bactéries du genre Bifidobacterium, Bacteroides, Fusobacterium, Melissococcus, Propionibacterium, Enterococcus, Lactococcus, 20 Staphylococcus, Peptostrepococcus, Bacillus, Pediococcus, Micrococcus, Leuconostoc, Weissella, Aerococcus, Oenococcus, Lactobacillus, et leurs mélanges.
14. 14. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 12 et 13, caractérisée en ce que le microorganisme est choisi parmi Bifidobacterium adolescentes, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, 25 Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Lactobacillus acidophilus (NCFB 1748) ; Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus casei (Shirota), Lactobacillus rhamnosus (souche GG), Lactobacillus brevis, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus delbrueckii (subsp bulgaricus, lactis), Lactobacillus fermentum, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus 30 gallinarum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225), Lactobacillus paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus alimentarius, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus casei subsp. casei,Lactobacillus sake, Lactococcus lactis, Enterococcus (faecalis, faecium), Lactococcus lactis (subspp lactis ou cremoris), Leuconostoc mesenteroides subsp dextranicum, Pediococcus acidilactici, Sporolactobacillus inulinus, Streptococcus salvarius subsp. Thermophilus, Streptococcus thermophilus, Staphylococccus carnosus, Staphylococcus xylosus, Saccharomyces (cerevisiae ou encore boulardii), Bacillus (cereus var toyo ou subtilis), Bacillus coagulons, Bacillus licheniformis, Escherichia coli strain nissle, Propionibacterium freudenreichii, et leurs mélanges.
15. 15. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 12 °à 14, caractérisée en ce que le microorganisme est un microorganisme probiotique issu du groupe des 10 bactéries lactiques.
16. 16. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 12 à 15, caractérisée en ce que le microorganisme est de l'espèce Lactobacillus paracasei, l'une de ses fractions ou l'un de ses métabolites, et de préférence la souche Lactobacillus paracasei déposée le 12/01/99 sous la désignation CNCM I-2116. 15
17. 17. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 12 à 16, caractérisée en ce que le microorganisme, notamment probiotique, est mis en oeuvre à raison de 0,0001 à 20 % en poids, en particulier de 0,001 à 20 % en poids, et plus particulièrement à raison de 0,01 à 10 % en poids par rapport au poids total de la composition le contenant.
18. 18. Procédé de traitement cosmétique comprenant au moins une étape 20 d'administration à un sujet d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un de ses dérivés, ledit procédé étant destiné à être mis en oeuvre avant l'application audit sujet d'au moins un traitement cutané de surface et/ou au moins un traitement invasif choisi parmi les injections de comblement, à finalité esthétique.
19. 19. Procédé cosmétique pour préparer la peau d'un sujet destiné à subir au 25 moins un traitement cutané de surface et/ou au moins un traitement invasif choisi parmi les injections de comblement, à finalité esthétique comprenant au moins une étape d'administration audit sujet d'une quantité efficace d'hespéridine ou de l'un des ses dérivés.