FR2763599A1 - Procede de production d'acide l-aspartique - Google Patents

Procede de production d'acide l-aspartique Download PDF

Info

Publication number
FR2763599A1
FR2763599A1 FR9806455A FR9806455A FR2763599A1 FR 2763599 A1 FR2763599 A1 FR 2763599A1 FR 9806455 A FR9806455 A FR 9806455A FR 9806455 A FR9806455 A FR 9806455A FR 2763599 A1 FR2763599 A1 FR 2763599A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
rhodococcus
rhodochrous atcc
atcc
aspartic acid
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
FR9806455A
Other languages
English (en)
Other versions
FR2763599B1 (fr
Inventor
Fumiaki Watanabe
Fujio Yu
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nitto Chemical Industry Co Ltd
Original Assignee
Nitto Chemical Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nitto Chemical Industry Co Ltd filed Critical Nitto Chemical Industry Co Ltd
Publication of FR2763599A1 publication Critical patent/FR2763599A1/fr
Application granted granted Critical
Publication of FR2763599B1 publication Critical patent/FR2763599B1/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/20—Aspartic acid; Asparagine

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

L'invention concerne un procédé de production d'acide L-aspartique à partir d'acide fumarique et d'ammoniac par action d'un micro-organisme ayant une activité d'aspartase qui appartient au genre Rhodococcus.

Description

La présente invention concerne un procédé de production d'acide
L-aspartique à partir d'acide fumarique et d'ammoniac au moyen d'un microorganisme qui appartient au genre Rhodococcus et qui a une activité d'aspartase.
L'acide L-aspartique est utilisé notamment comme produit pharmaceutique et comme additif alimentaire. Récemment, il a également attiré l'attention comme matière première pour tensioactifs et pour agents chélatants biodégradables.
L'acide L-aspartique est produit principalement à partir d'acide fumarique et d'ammoniac par des procédés enzymatiques utilisant une aspartase.
Par exemple, on connaît un procédé utilisant la bactérie Escherichia coli (demande de brevet japonais publiée avant examen n" 60-133883), un procédé utilisant une bactérie appartenant au genre Serratia (demande de brevet japonais publiée avant examen n" 59-113887) et un procédé utilisant une bactérie appartenant au genre Brevibacterium (demande de brevet japonais publiée avant examen nO 56-26196).
La présente invention a pour but d'identifier d'autres micro-organismes ayant une activité d'aspartase et de produire de l'acide L-aspartique avec efficacité au moyen de ces micro-organismes.
A la suite de recherches approfondies pour atteindre ce but, le demandeur a identifié certains micro-organismes appartenant au genre
Rhodococcus qui ont une activité d'aspartase et qui peuvent produire de l'acide
L-aspartique efficacement. Jusqu'à présent, L'activité d'aspartase des bactéries du genre Rhodococcus n'était ni décrite ni connue.
Ainsi, la présente invention concerne un procédé de production d'acide
L-aspartique à partir d'acide flimarique et d'ammoniac par action d'un microorganisme ayant une activité d'aspartase qui appartient au genre Rhodococcus. Le micro-organisme à activité d'aspartase appartenant au genre Rhodococcus peut être notamment Rhodococcus sp. EA4 (FERM BP-6231), Rhodococcus rhodochrous ATCC 17041, Rhodococcus rhodochrous ATCC 17895,
Rhodococcus rhodochrous ATCC 19140 ou Rhodococcus rhodochrous ATCC 33258.
Parmi ces micro-organismes, la souche EA4 a été déposée sous le numéro d'accès mentionné ci-dessus auprès du National Institute ofBioscience and
Human-Technology, Agency of Indu striaI Science and Technology, Japon. Les propriétés bactériologiques de cette souche sont décrites dans la demande de brevet japonais publiée avant examen n" 4-304892. Les souches ATCC 17041,
ATCC 17895, ATCC 19140 et ATCC 33258 sont disponibles auprès de la
American Type Culture Collection (ATCC).
Un micro-organisme destiné à être utilisé dans le cadre de la présente invention est cultivé dans un milieu conventionnel contenant des sources de carbone assimilable (comme le glycérol, le glucose, le saccharose, le lactose, le fructose), des sources d'azote (comme un extrait de viande, un extrait de levure, un extrait de malt, un liquide de trempage, la polypeptone) et des sels inorganiques essentiels pour la croissance de chaque micro-organisme (comme le chlorure de magnésium, le sulfate de sodium, le chlorure de calcium, le sulfate de manganèse, le chlorure de fer, le sulfate de zinc). Dans le milieu décrit ci-dessus, L'acide
L-aspartique peut être utilisé comme source de carbone et d'azote, et l'acide fùmarique peut être utilisé comme source de carbone. Ces substances peuvent être ajoutées en des quantités respectives de 0,1 à 5 %.
Le pH de la solution de culture est compris entre 4 et 10. La culture est réalisée à une température de 5 à 50"C pendant 1 à 7 jours dans des conditions aérobies et elle est prolongée jusqu'à ce que l'activité d'aspartase atteigne son maximum.
On conduit la réaction de la manière suivante : tout d'abord, on met en suspension dans un milieu aqueux comme l'eau ou un tampon les cellules séparées de la solution de culture d'un micro-organisme cultivé comme décrit ci-dessus ou un produit obtenu en traitant de telles cellules (par exemple cellules séchées, cellules lysées, enzyme brute ou purifiée séparée, cellules immobilisées ou enzyme immobilisée). Puis, on met cette suspension en contact avec un substrat constitué par l'acide fumarique et l'ammoniac que l'on peut introduire dans le système réactionnel sous différentes formes. Par exemple, on peut utiliser le fumarate d'ammonium ou une combinaison d'acide flimarique ou d'un sel d'acide fumarique et d'un sel d'ammonium inorganique. Le fùmarate de sodium et le fumarate de potassium sont des flimarates appropriés. Comme sel d'ammonium inorganique, on peut utiliser le chlorure d'ammonium, le sulfate d'ammonium, le phosphate d'ammonium ou un mélange de ces sels.
De préférence, le rapport molaire de l'acide flimarique ou d'un sel d'acide fùmarique à un sel d'ammonium inorganique est compris entre 1:1,5 et 1:2.
La température de réaction est comprise entre 0 et 600C, de préférence entre 20 et 500C. On conduit la réaction pendant 0,1 à 100 h.
Pendant la réaction, on ajuste le pH entre 6 et 10, de préférence entre 8 et 10.
Habituellement, on ajoute à la solution réactionnelle des ions de métal divalent tels que le calcium ou le magnésium à raison de 0,1 à 100 mM, de préfé rencedel à 10 mM.
La présente invention sera mieux comprise à la lecture de l'exemple non limitatif suivant.
Exemple
On a inoculé séparément Rhodococcus sp. EA4, Rhodococcus rhodochrous ATCC 17041, Rhodococcus rhodochrous ATCC 17895,
Rhodococcus rhodochrous ATCC 19140 et Rhodococcus rhodochrous ATCC 33258 à 10 ml de milieu MYK (0,5 % de polypeptone, 0,3 % d'extrait de bactolevure, 0,3 % d'extrait de bacto-malt, 0,2 % de K2HPO4, 0,2 % de KH2PO4) et on a cultivé à 30"C pendant 3 jours. Puis, on a inoculé 0,5 ml de la solution de culture à 50 ml de milieu ASP (1 % d'acide L-aspartique, 1 % de polyptone, 1 % d'extrait de bacto-levure, 0,5 % de K2HPO4, pH 7,0) et on a cultivé à 30"C pendant 96 h.
Ensuite, on a récolté les cellules par centrifugation, on les a lavées avec du tampon phosphate 100 mM (pH 8,0) et, enfin, on les a mises en suspension dans une petite quantité de ce tampon. On a lysé la suspension de cellules résultante par sonication en refroidissant dans la glace, puis on a centrifugé pour obtenir une solution d'enzyme brute. On a soumis cette solution d'enzyme à une détermination de l'activité d'aspartase.
On a réalisé la détermination de l'activité d'aspartase en mettant en contact la solution d'enzyme brute avec du fumarate d'ammonium I M (pH 8,8, contenant du chlorure de magnésium 1 mM) et en déterminant quantitativement la production d'acide L-aspartique à 300C pendant 20 h par CLHP au moyen d'une colonne ODS. Les résultats sont présentés dans le tableau ci-dessous.
TABLEAU
Souche Acide L-aspartique (mM)
Rhodococcus sp. EA4 210
Rhodococcus rhodochrous ATCC 17041 140
Rhodococcus rhodochrous ATCC 17895 50
Rhodococcus rhodochrous ATCC 19140 170
Rhodococcus rhodochrous ATCC 33258 100

Claims (2)

REVENDICATIONS
1. Procédé de production d'acide L-aspartique à partir d'acide fumarique et d'ammoniac par action d'un micro-organisme ayant une activité d'aspartase, caractérisé en ce que le micro-organisme appartient au genre
Rhodococcus.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le microorganisme appartenant au genre Rhodococcus est Rhodococcus sp. EA4,
Rhodococcus rhodochrous ATCC 17041, Rhodococcus rhodochrous ATCC 17895, Rhodococcus rhodochrous ATCC 19140 ou Rhodococcus rhodochrous
ATCC 33258.
FR9806455A 1997-05-22 1998-05-22 Procede de production d'acide l-aspartique Expired - Fee Related FR2763599B1 (fr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP14706097A JPH10313888A (ja) 1997-05-22 1997-05-22 Ｌ−アスパラギン酸の製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FR2763599A1 true FR2763599A1 (fr) 1998-11-27
FR2763599B1 FR2763599B1 (fr) 2004-11-26

Family

ID=15421592

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FR9806455A Expired - Fee Related FR2763599B1 (fr) 1997-05-22 1998-05-22 Procede de production d'acide l-aspartique

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JPH10313888A (fr)
CN (1) CN1089807C (fr)
FR (1) FR2763599B1 (fr)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2764303A1 (fr) * 1997-06-06 1998-12-11 Nitto Chemical Industry Co Ltd Proteine a activite d'aspartase, adn la codant, plasmide contenant l'adn et procede de production de la proteine et d'acide l-aspartique

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3391059A (en) * 1964-02-19 1968-07-02 Sanraku Ocean Kabushiki Kaisha Process for producing l-aspartic acid
US4326029A (en) * 1979-08-10 1982-04-20 Mitsubishi Petrochemical Co., Ltd. Process for production of L-aspartic acid
FR2764303A1 (fr) * 1997-06-06 1998-12-11 Nitto Chemical Industry Co Ltd Proteine a activite d'aspartase, adn la codant, plasmide contenant l'adn et procede de production de la proteine et d'acide l-aspartique

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2719045B1 (fr) * 1994-04-20 1996-05-31 Rhone Poulenc Chimie Procédé de préparation d'acide L-aspartique à partir d'aspartate d'ammonium.

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3391059A (en) * 1964-02-19 1968-07-02 Sanraku Ocean Kabushiki Kaisha Process for producing l-aspartic acid
US4326029A (en) * 1979-08-10 1982-04-20 Mitsubishi Petrochemical Co., Ltd. Process for production of L-aspartic acid
FR2764303A1 (fr) * 1997-06-06 1998-12-11 Nitto Chemical Industry Co Ltd Proteine a activite d'aspartase, adn la codant, plasmide contenant l'adn et procede de production de la proteine et d'acide l-aspartique

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ASAI Y ET AL: "Cloning and sequence determination of the aspartase-encoding gene from Brevibacterium flavum MJ233", GENE, ELSEVIER BIOMEDICAL PRESS. AMSTERDAM, NL, vol. 158, no. 1, 1995, pages 87 - 90, XP004206654, ISSN: 0378-1119 *
BHALLA T C ET AL: "ASYMMETRIC HYDROLYSIS OF ALPHA AMINONITRILES TO OPTICALLY ACTIVE AMINO ACIDS BY A NITRILASE OF RHODOCOCCUS-RHODOCHROUS PA-34", APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, vol. 37, no. 2, 1992, pages 184 - 190, XP008025241, ISSN: 0175-7598 *
KYRIACOU ADAMANTINI ET AL: "Improvement of lysine production by analog-sensitive and auxotroph mutants of the acetylene-utilizing bacterium Gordona bronchialis (Rhodococcus bronchialis)", APPLIED BIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGY, vol. 66, no. 3, 1997, pages 281 - 289, XP008025239, ISSN: 0273-2289 *
SANDANOV CH M ET AL: "SPECIAL FEATURES OF THE CENTRAL METABOLISM IN CORYNEFORM BACTERIA", MICROBIOLOGY (NEW YORK), vol. 52, no. 3, 1983, pages 282 - 286, XP008025249, ISSN: 0026-2617 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2764303A1 (fr) * 1997-06-06 1998-12-11 Nitto Chemical Industry Co Ltd Proteine a activite d'aspartase, adn la codant, plasmide contenant l'adn et procede de production de la proteine et d'acide l-aspartique

Also Published As

Publication number Publication date
FR2763599B1 (fr) 2004-11-26
CN1200405A (zh) 1998-12-02
JPH10313888A (ja) 1998-12-02
CN1089807C (zh) 2002-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yamamoto et al. Production of S-(+)-ibuprofen from a nitrile compound by Acinetobacter sp. strain AK226
FR2644178A1 (fr) Micro-organisme de l'espece bacillus coagulans et procede utilisant ce micro-organisme pour produire de l'acide l(+)lactique optiquement pur
EP0610049B1 (fr) Procédé de préparation d'acides alphahydroxy carboxyliques optiquement actifs contenant un groupe phénylique
Tsugawa et al. Production of l-Glutamic Acid from dl-Hydantoin-5-propionic Acid by Microoganisms: Part I. Screening of l-Glutamic Acid-Producing Microorganisms and Some Optimal Conditions for Production of l-Glutamic Acid
AU708588B2 (en) Process for producing aspartase and process for producing L-aspartic acid
US5200331A (en) Method of producing an amide utilizing a microorganism
US5783428A (en) Method of producing fumaric acid
Yoshida et al. Isolation and identification of a pyrogallol producing bacterium from soil
JP2696424B2 (ja) Ｒ（‐）―マンデル酸の製造法
IE920669A1 (en) Biotechnological process for the production of S-(+)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxamide and R-(-)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylic acid
FR2763599A1 (fr) Procede de production d'acide l-aspartique
JP2840134B2 (ja) 新規なアミノアシラーゼおよびその製造方法
JP2843596B2 (ja) 新規Ｄ―アミダーゼ及びＤ―α―アラニン及び／又はＬ―α―アラニンアミドの製造法
EP0455170B1 (fr) Procédé de culture de micro-organismes du genre Pseudomonas et procédé pour la préparation de L-alanine en utilisant ces micro-organismes
CA1302931C (fr) Preparation de l'acide pyruvique
JPS58201985A (ja) グルコ−ス脱水素酵素の生産方法
US5252470A (en) D-amidase and process for producing D-α-alanine and/or L-α-alanineamide
JPS61274690A (ja) Ｄ−α−アミノ酸の製造方法
JP3090761B2 (ja) 光学活性乳酸の製造法
JPH02100674A (ja) 細菌の培養法
EP0352846B1 (fr) Procédé de préparation de biocatalyseurs auparavant dépourvus d'activité enzymatique stéréoselective
Shilova et al. Biocatalytic potential of nitrile hydrolyzing bacteria isolated from alkaline technogenic environment
JP2674078B2 (ja) Ｄ−α−アミノ酸の製造法
JP2674076B2 (ja) Ｄ−α−アミノ酸の製造方法
JP3817725B2 (ja) ピルビン酸の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
TP Transmission of property
ST Notification of lapse

Effective date: 20110131