FI119811B - 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imino-asetyylikloridihydroksikloridin syn-isomeeri ja menetelmä sen valmistamiseksi - Google Patents

Description

i 119811 2" (2~aminotia.tsol~4~yyli) -2-metok$i“iminp-asetyYiikloridi-hydroksiklorxdin svn-isomeeri ja menetelmä sen valmistamiseksi 5 Esillä; olevan keksinnön avulla saadaan patentti vaatimuksessa 7 määritelty tiatsolyylivälltuotteen svn-isomeerin pysyvä, kiteinen suola sekä patenttivaatimuksessa 1 määritelty menetelmä sen valmistamiseksi. Tätä suolaa voidaan käyttää käyttökelpoisten laajakir jöisten antibak-10 teeristen aineiden valmistamiseen, esimerkiksi kantaha- kemuksen FI-924D31 mukaisella kemiallisella asylointimene-telmällä, jolla valmistetaan antibioottia, kefepiimidihyd-rokloridihydraatt. la, joka tunnetaan myös 7-[2-{2-amino-tiatsol-4—yyli)-2-(Z)-met o ks i-iminoa s etamido]-3-[(1-metyy 15 li-l-pyrrolidinio)metyyli] kef-3-eemi-4-karboksy.taat-tina.

Tunnetaan paljon sellaisia kefalosporiiniantibi-ootteja, joissa on 2-(2~aminotiatsöl-4-yyli)-(Z)-2-metok-si-iminoetikkahapposivuketjtU, joka liitetään kefalospo-raanihapon 7-aminoryhmään hyvin tunnetuilla asylointimene-20 telmi]1ä. Useimmissa tapauksissa on välttämätöntä suojata amino-osa ja aktivoida sivuketjun k a rbo k s y y1i happo osana asylointimenetelmää. Tästä syystä kemiassa tuodaan esille • m useita arninoryhmän suojaryhmiä tiatsolirenkaan 2-amino-:T: ryhmälle ja useita aktivointiryhmiä karboksyylihapolle.

·;··· 25 Uudempien suojaryhmien ja aktivointiryhmien, joj.l- la saadaan haluttu antibiootti, etsiminen on edelleen lu- • · .···, kuisten julkaisujen aiheena, ja niissä tarkastellaan tiet- • · tyihin aktivointiryhmiin liittyviä kustannuksia ja niiden . . myrkyllisyyksiä . Siten käyttökelpoisten laaj akirjöisten * · · *·[·* 30 antibioottien valmistamiseksi tarvitaan yhä yksinkertai. · • · *·..* nen, pysyvä, kiteinen, taloudellinen ja myrkytön sivuket- ♦*·.: ju, jolla on haluttu geometrinen (Z) -isomeeri, joka voi- • · daan helposti liittää kefaiosporiiniytimen 7-äminoryhmään.

„· Seuraavassa annetaan esimerkkejä joistakin tiatsolisivu- • * : “ 35 ketjuista.

• · 119811 2 US-patentissa nro 4 203 899, Ochiai et ai., joka on julkaistu 20. toukokuuta 1980, tuodaan esille yhdisteitä, joiden kaava on NR5 o jossa R1 on amino, suojattu amino, hydroksyyli tai suojattu hydroksyyli; R5 on hydroksyyli tai suojattu hyd-10 roksyyli ja W on hydroksyyli, Ci^-alkoksi, halogeeni tai OM, jossa M on aikaIlmetalli.

GB-patenttihakemuksessa 2 144 424, joka on julkaistu 6. maaliskuuta 1985, tuodaan esille pyridiniumkefa losporiinijohdannaisten sarjan valmistus erilaisilla mene-15 telmillä, kuten käyttäen yhdistettä, jonka kaava on m1 u'

R4HN—|T II

20 ' **'1· tai sen suolaa, jossa R1 on vety- tai halogeeniatomi; R2 * 1 λ !,'·· on vety atomi tai Ci-s-alkyyliradikaali, ja R on vety tai :T: aminoryhmän suojaryhmä, tai käyttäen tämän yhdisteen akti- ····· 25 voitua johdannaista.

EP-patcnttihakemuksessa 160 54 6, joka on julkaistu .··1. 6. marraskuuta 198$, tuodaan myös esille kefalosporiiniyh- distesarjän vaimitus erilaisilla menetelmillä, kuten käyt-. . täen subst i. tuo itu ja oksi-iminotd atsolyylietikkahappoyh- il' 30 di s teitä, joiden kaava on **··1 .0R1

.·! : N

V IJ 8 • ·· * 35 f 3 119811 tai niiden reaktiivista johdannaista, jossa RB on vetyatomi tai aminoryhmän suojaryhmä. Sopivia esimerkkejä tällaisista reaktiivisista johdannaisista, joita tuodaan esille, 5 ovat seoshappoanhydridit, happoanhydridit, happohalogeni-dit, aktiiviset esterit, aktiiviset amidit ja happoatsi-dit.

US-patentissa nro 4 385 181, Farge et ai., joka on julkaistu 24. toukokuuta 1983, tuodaan esille tioloeste-10 teitä, joiden kaava Ori tr r’nh—jj y s·^ 15 jossa R' on vety tai .suojaradikaali, R° on vety, alkyyli, vinyyli, syanometyyli tai suojaradikaali, ja R on alkyyli, L-2-amino-2-karboksietyyli, fenyyli tai jokin lukuisista erilaisista heterosyklisistä radikaaleista, jotka on lue-20 teitä sarakkeissa 4 - 8, kuin myös hiiden s γη- ja anti-isomeereistä ja seoksista.

*:··; Edellä esitettyjen viitteiden lisäksi on olemassa ·*·,· suuri määrä viitteitä, joissa tuodaan esille erilaisia • · suoja ryhmiä 2-aminosubstituentille ja jopa suurempi määrä 25 karboksyylihappo-osan aktivointiryhmiä/poistuvia ryhmiä, • · (m , joita voidaan käyttää 7-aminokefalosporiiniyhdisteen asy - • · ... loinnissa.

• · *··** Asiaan läheisimmin liittyvä viite on kuiten kin CS-patentti nro 238 950, joka on julkaistu 16. maa1is- :.V 30 kuuta 1987, [Chemical Abstracts, Voi, 110, s. 544 (1989)], ··· jossa tuodaan esille esillä olevan keksinnön mukainen yh-: diste, jonka kaava on • «a .OCHg • · 14 • 11 : *·· 35 1 ·:·: NHr-r N y -hci ϋ 119811 4 jossa yhdisteellä on esitetty olevan syn-konfiguraatio. Ainoa todiste, joka on esitetty tuotteelle patentissa on se, että klooripitoisuus on 99 - 100,5 % teoreettisesta arvosta.

5 Kehittäessään Uusia synteettisiä menetelmiä anti bioottien valmistamiseksi, esillä olevat keksijät, kuin myös muut alan tutkijat, ovat etsineet yksinkertaisia, tarkoituksenmukaisia, taloudellisia, kiteisiä, pysyviä ja myrkyttömiä lähtöaineita, joita voidaan käyttää antibiootit) tien valmistamiseksi. Ensimmäiset yritykset valmistaa ja käyttää 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoetikka-hapon happo-kloridia ilman suojaryhmien käyttöä epäonnistuivat, Esillä olevat keksijät ovat kuitenkin nyt todenneet, että keksinnön mukainen yhdiste voidaan valmistaa 15 erityisesti määritellyissä reaktio-olosuhteissa. Tämän löydön esillä olevat keksijät vahvistivat myöhemmin, kun he eivät pystyneet toistamaan edellä esitetyn CS-patentin opetusta. Haluttua happokloridihydrokloridin syn-isomeeriä, joka on välttämätön halutun antibiootin tuotta-20 miseksi, ei pystytty valmistamaan uudelleen. Edelleen, lisätutkimukset vahvistivat, että keksinnön oppien avulla ei * * saatu happokloridi n haluttua syn-isomeerin hydrokloridi- • ♦ *.*·· suolaa siten, että siinä ei olisi ollut juurikaan anti- • · · Y* : isomeeriä ja että sillä olisi ollut jäljempänä kuviossa 1 *;**: 25 kuvattu protoniydinmag-neettiresonanssispektri ('h-NMR) .

····· Laajakirj öisen kefepiimiantibioptin tuo esille .···. Aburaki et ai. US-patentissa nro 4 406 899, joka on jul kaistu 27. syyskuuta 1983, ja sen valmistusta kuvataan <( . kahdella reaktionkulkukaavioila, joissa reagoivat aineet • · i M 30 ja tuotteet edellyttävät salpaus- ja salpauksen poistoryh- • · *·“’ mien käyttöä. Esimerkkinä annetussa reaktionkulkukaaviossa tuote vaatii kromatografisen puhdistus vai been Λ?- js *:··· a3-isomeerien seoksen erottamiseksi, ja näin saatu, kefepii- ..* mituote on kahtaisionirnuodossa. Kefepiimin kahtaisionimuo- * . 35 to ei ole pysyvä huoneenlämpötilassa ja kohotetuissa läm pötiloissa.

119811 5

Murray A. Kaplan et al. tuo US-patentissa nro 4 910 301, joka on julkaistu 20. maaliskuuta 1990, esille lämpötilastabiileja kiteisiä kefepiimin suoloja kuivajau · hemuodossa, ja niillä on erinomainen pysyvyys huoneenläm-5 pötilassa ja parempi pysyvyys kohotetussa lämpötilassa verrattuna kefepiimin kahtaisionimuotoon, jonka on kuvannut Aburaki et ai. US-patentti nro 4 406 899.

US-patentissa nro 4 868 294, joka on julkaistu 19. syyskuuta 1989, Brundidge et ai, kuvataan sella is-10 ten 7-amino-3- [ {1 -metyyli-1-pyrro.lidinio) metyyli] kef-3-eemi-4-karboksylaattisuolojen valmistus, joissa ei juurikaan ole A2-isömeeria, sekä niiden käyttö vesipitoisessa asylointimenetelmässä, jolla valmistetaan kefepiimiantibi-oottia sulfaattisuolana.

15 US-patentissa nro 4 754 031, joka on julkaistu 28. kesäkuuta 1988, Angerbauer et ai., kuvataan menetelmä, jolla valmistetaan useita kefalosporiiniantibiootteja, mukaan lukien kefepiimiä kahtaisionimuodossa. Vaikka tässä menetelmässä ei käytetä suojaryhmiä, siinä käytetään an-20 hybridiä aktivointiin vesipitoisessa asylointireaktiossa, joka edellyttää kromatografisia puhdistusvaiheita, jotta * ' saadaan kefepiimin kahtaisionimuoto.

i · ·.*·: US-patentissa nro 4 943 631, joka on julkaistu ϊ,ί ! 24. heinäkuuta 1990, Brian E. Looker kuvaa parannetun me- ·:··: 25 netelmän kefeplimiantibiootin valmistamiseksi hydrojodidi- ·;··· suolana. Menetelmässä kontrolloidaan ei-toivotun .***. A2-isomeerih muodostumista käyttämällä kefalosporiinisulf- »·· oksidivälituotetta. Patentissa kuvattu menetelmä on kui- . . tenkin kallis ja tehoton, sillä siinä on kaksi lisävaihet- • · · l.l 3Ό ta sinänsä tunnettuun menetelmään verrattuna ja siinä käy- • · ···* Letään edelleen suojaryhmiä, jolloin salpaus- ja salpauk- ! *.j sen poistomenetelmät ovat välttämättömiä. Lisäksi menetel- *:··· mässä täytyy käyttää puhdistusmenetelmänä pylväskromato- g ra ti aa, mikä on epäkäytännöllistä teolli suusmittakaavas- : " 35 sa.

• · 119811 6

Kefepiimin kiteisen sulfaattisuolen ja kahtais-ionimuodon valmistuksissa, jotka kuvataan kemiassa, käytetään suurin piirtein samaa vesipitoista asylointimenetei-rnää ja erilaisia salpaus- ja salpauksen po.i storyhmiä ja 5 aktiivisia, estereitä. Kaikissa tapauksissa haluttu kiteinen kef epiim.i dihydrokloridihydraattimuoto täytyy valmistaa kefepiimin puhdistetun kahtaisLonimuodon kautta. Siten on tarpeen kehittää yksinkertainen, suora ja kustannuksiltaan tehokas asyloi ntimenetelmä, jolla vältetään reaktiovai-10 heet, joissa lisätään ja poistetaan suojaryhitiiä, stereoke-mian seuxantavaiheet ja kromatografointimenetelmat, ja vielä tärkeämpänä, asylointimenetelmä, jolla valmistetaan haluttu kefepiimidihydrokloridihydraattianti-biootti, jos- 2 sa ei juurikaan ole anti-isomeeriä eikä A -isomeeriä.

15 Esillä olevan keksinnön avulla saadaan 2 — < 2— aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi- iminoasetyylikloridihydrokloridin pysyvä kiteinen syn-isomeeri, jossa ei juurikaan ole anti.-isomeeriä ja jota käytetään asylointimenetelmässä laajakirjöisen antibioo-20 tin, kefepiimin, valmistamiseksi, sekä menetelmä kyseisen syn-isomeerin valmistamiseksi.

* ' Kuvaus piirroksista • · ·.*·: Kuvio 1 esittää esimerkin 10 mukaisen syn-2~ (2- ·,· ί aminotiatsol-4-yyli) -2--met oksi- *:**: 25 iminoase tyyli kloridihydroklor idin protoniydinmagneetti- ····· resonanssi spektrin etikkahappo-d^: ssä (100 MHz).

.*··. Kuvio 2 esittää esimerkin 12 tuotteen protoniydin- ·· · * magneettiresonanssispektrin etikkahappo-φ: ssä (lÖO MHz).

Kuvio 3 esittää esimerkin 13 tuotteen protoniydin- • * · 1,1 30 magneettiresonanssispektrin etikkahappo-d4:ssä (100 MHz) .

: : 7 Kuvio 4 esittää esimerkin 14 tuotteen protoniydin- • f t !/.: magneettiresonanssispektrin etikkahappo-d^: ssä (100 MHz) .

*:**· Kantahnkemuksen ΕΊ-924 031 avulla saadaan vedettö- ./ mässä ympäristössä tapahtuva asylointimenetelmä 7-amino~3- • · · * , 35 [ .(1-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli] kef ~3-eemi-4“karboksy- laatln asyloimiseksi 2-(2-aminotiatsol~4-yylj.)-2-metoksi- 119811 7 iminoasetyylikloridihydroklortdin syn-isomeerin kanssa, jossa isomeerissä ei juurikaan ole anti-isomeeriä, jolloin saadaan lämpötilastabiilia kiteistä kefepiimidihydroklori-dihydraattia, jossa ei juurikaan ole anti-isomeeriä ei-S ka A2-is°meeria ja jonka kaava on V, jossa z on 1 tai 2.

^0CH3 n H

2HCI zH30 V

0 e0f chs 10

Esillä olevan vedettömässä ympäristössä tapahtuvan asylointimenetelmän edut käyvät selviksi alan asiantuntijoille, kun kaikki edut yhdistetään ja niitä katsotaan kokonaisuutena. Muodollisten aminoryhmän ja karbokäyyliryh- 15 män suojaryhmien eliminointi sekä vastaava kemiallisten lisävaiheiden, jotka ovat •välttämättömiä' suojaukseen ja suojauksen poistoon, eliminoiminen tarjoaa huomattavan edun koko menetelmän tehokkuuteen ja materiaalikustannuksiin nähden sinänsä tunnettuihin menetelmiin verrattuna.

20 Esillä olevan menetelmän avulla saadaan lisäksi ja pidetään yllä me to k s i-iminoisomeerin ja kefalosporiiniytimen ***** A3~kaksoissidoksen stereokemiallista konfiguraatiota il- • · ϊ/.ϊ man, että ei-toivottuja kefalosporiinisivutuotteita tar- :Τϊ vitsee erottaa kromatograafisesti ja ilman, että tarvitsee ····· 25 käyttää stereokemiallisia sääteleviä sulfoksidivälituot- teitä, kuten on kuvattu US-patentissa nro 4 043 631. Ky- ,···, seisen keksinnön toisena etuna on se, että valmistetaan ja • · käytetään kaavan III mukaista 2-(2-aminotiatsol-4“yyli)-2- . , metofcsi-iminoaseLyylikloridin svn-isomeerin suojaamatonta • · » **]·1 30 kiteistä hydrokloridisuolaa, jolloin vältytään kemiassa • · *···1 kuvatuilta epätavallisilta ja joskus monimutkaisilta or- gaanisilta poistuvilta ryhmiltä. Käytettäessä yksinker- • · ···.· täistä kloridi-ionia poistuvana ryhmänä, ei tarvitse käyt- ,,· tää mahdollisesti myrkyllisiä poistuvia ryhmiä, kuten 2~ • · • 35 merkaptobentsotiatsolia. Esillä olevan vedettömässä ympä- 1 ristössä tapahtuvan asylointimenetelmän edullisen suori- 119811 8 tusmuodon lisäetuna on edelleen se, että sen avulla saa -da a n haluttu lämpötilastabiili kiteinen ketepiimidi hydro-kloridihydraatti suoraan asyloint imenet e Iinan reaktioseok-sesta ilman, että tarvitsee valmistaa ja eristää kefepii-5 min sulfaattisuolaa tai kahtaisionia. Esillä olevan menetelmän avulla saadaan lisäksi vesi1iuokoinen kiteinen ke-fepiimidihydrokloridimpnohydraatti tai -dihydraatti, jossa ei juurikaan ole anti-isomeeriä eikä A2-isomeeria, suurella saannolla suoraan kaksifaasisen liuoksen vesifaasista.

10 Esillä olevan keksinnön avulla saadaan stabiili, kiteinen 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-imj noasetyy-likloridihydrokloridin syn-isomeeri, jossa ei juurikaan o J. e an ti-isomeeriä, ja sen kaava on III.

IS N

n^J-L^ci m T «ci

Koska kaavan III mukaisessa yhdisteessä ei juuri- 20 kaan ole anti-isomeeriä, se voidaan muuttaa laajakirjöisiksi kefalosporiineiksi, joissa itsessään ei juurikaan ole anti-isomeeri a, ilman, että syh- ja anti-isomeereia • · !,’<· tarvitsee erottaa kromatografisesti. Parantuneen pysyvyy·- iT: tensä vuoksi yhdiste ΙΓΙ voidaan eristää ja varastoida, ja ·:··· 25 tarvittaessa yhdiste III voidaan muuttaa lopputuotteiksi ·...! eri liuottimessa, mikä on edullista halutun antibiootin • · ............

.···. valmistamisessa, jossa ei juurikaan ole Ä2”isoraeeria. Kaa- • · van III mukaisella välituotteella on lisäksi se etu, että ., sen aminoryhmää ei tarvitse salvata (suojata) ennen asy- • · · 30 lointia, eikä aminoryhmälle tarvitse suorittaa salpauksen • ♦ *···* poistoa (suojauksen poistoa) asyloinnin jälkeen, mistä syystä menetelmä on tehokas. Kaavan III mukaisen happoklo-····· ridiin lisäetuna on se, että sitä käytetään asylointimene- „* telmässä laajakirjoisten kefalosporilnien valmistamiseksi.

• " 35 Päinvastoin kuin muissa menetelmissä, kuten menetelmässä, jonka on kuvannut Aburaki et ai. US-patentissa nro 9 119811 A 406 899,, kaavan 'III mukaisessa välituotteessa on kloridi-ioni yksinkertaisena ja myrkyttömänä poistuvana ryhmänä, jota ei tarvitse välttämättä poistaa halutusta antibiootista kuten useimpien muiden kemiassa tunnettujen pois-5 tavien ryhmien tapauksessa. Lisäksi jotkut kemiassa tunnetut välituotteet, joissa on muita poistuvia ryhmiä, on vaikea valmistaa, kun taas joidenkin välituotteiden, joissa on poistuvia ryhmiä, kuten 2-merkaptobentsotiatsoli, on todettu olevan myrkyllisiä [Chem. Abstracts, 1989, Voi.

10 111 ¢..3-.)., 1924.3p] .

Reaktiokulkukaavio 1 och3 J)CH3 n 15 HC1 -Hu HSN—(x |J | -' H2N—( JJ f

II

20 ·:··: c2o2c12 + onr—co3 + co - r (CH3>£nchgi rcr • « • · · • ·· i « f »*· • · * • · · 25 /0CH3 if ,HCi

HjN—]T

S; - : V: 111 30 • « **;·* Kaavan III mukaisen happokloridihydrokloridin syn i/.| isomeeri voidaan valmistaa kaavan I mukaisen hapon syn- ·:··· isomeeristä reaktionkulkukaaviossa 1 esitetyllä tavalla.

Kaavan I mukainen happo muutetaan ensin vastaavaksi kaavan • ·* * . 35 II mukaiseksi hydrokloridisuolaksi kemiassa tunnetuilla menetelmillä ja sitten haluttaessa se eristetään vedettö- 119811 10 mänä, kiteisenä kaavan II mukaisena yhdisteenä. Hydroklo-ridisuolan muodostus suoritetaan edullisesti vähintään yhdellä mooli ekvivalentilla kaasumaista vetykloridia iner-tissä orgaanisessa liuottimessa, kuten toiueenissa, ase-5 tonitriilissä, dikloorimetäänissä, asetonissa, bentseenis-sä, ksyleenissä, sykloheksaanissa, heksaaneissa, dioksaa-nissa tai dietyylieetterissä, lämpötilassa, joka on noin -10 - noin 50 °C. Reaktio suoritetaan edullisesti toin- eenissa, dikloorimetäänissä tai asetonitriilissä ja näin 10 muodostettu hydrokloridi, jonka kaava on II, voidaan eristää tai käyttää sellaisenaan. Kun reaktio suoritetaan asetonitriilissä, syntyneellä kaavan II mukaisella hydroklo-ridilla on taipumus sitoa hei kosti liuotinta itseensä. Tästä syystä on edullista käyttää kaavan II mukaista hap-15 pohydrokloridia asetonitriilistä järkevänä ajanjaksona seuraavansa vaiheessa, jotta vältetään solvaatin korvautuminen ympäristön kosteudella. Edullisimmin reaktio suoristetaan tolueenissa tai dikloorimetaanissa, lämpötilassa, joka on noin 0 °C:sta huoneenlämpötilaan.

20 Kaavan II mukaista happoa käsitellään sitten edul lisesti klooraavalla aineella, ja edullisimmin oksalyyli-’ kloridilla yhdessä dimetyyliformamidin kanssa, jotta saa- \*·ί daan pysyvä, kiteinen yhdisteen III syn~isomeeri. Kuten ··· V * tässä on osoitettu, muiden tunnettujen klooraavien ainei- *:*·; 25 den käyttö voi johtaa isomerisaatioon, jolloin saadaan ei- *:·*: toivottu anti-isomeeri tai syn- ja anti-isomeerien seos.

Lisäksi klooraavat aineet, kuten fosforipentakloridi, voi ·»· johtaa tiatsolirenkaan 5-aseman kloorautumiseen, mikä voi sitten johtaa ei-toivottuun antibiootin epäpuhtauteen.

• * · I.I 30 Esillä olevat keksijät ovat havainneet, että kaavan II mu- *;* kaisen happohydroklor.idin valmistuksen lisäksi klooraavan • · V*i aineen ja reaktio-olosuhteiden, kuten liuottimen ja lämpö- *:*·: tilan, sopiva valinta on kriittisen tärkeää menetelmässä, «/ jolla valmistetaan yhdisteen III syn-isomeerla, jossa ei · · ] . .35 juurikaan ole antti-isomeeriä.

• « 119811 n

Kloorauomenetelmät, joita käytetään yleisesti happojen aktivointiin, ovat kemiassa hyvin tunnettuja. Fosfo-ripentakloridi, joka on laajimmin käytetty klooraava aine, ei ole sopiva yhdisteen II klooramiseen, sillä myös se 5 johtaa metoksi-iminoryhmän isomerisaatioon, jolloin muodostuu ei~toivottu yhdisteen III anti-isomeeri. Tämä osoitetaan selvästi tässä kuvattavissa esimerkeissä 12, 13, 14 ja 16. Toisessa tunnetussa kloorausmenete bnässä käytetään oksalyylikloridia yhdessä dimetyyliformamidin kanssa. 10 Esillä olevat keksijät ovat kuitenkin havainneet, että. ok-salyylikloridim.enetelmä, jossa käytetään katalyyttinä di-metyyliformamidia, ei tuota suurta määrää haluttua yhdisteen III syn-isomeeriä. Myös tämä esitetään selvästi tässä kuvattavassa esimerkissä 15. Laajojen tutkimusten jälkeen 15 esillä olevat keksijät ovat havainneet, että dimetyylifor-rnamidin käyttö määränä, joka. on vähemmän kuin ekvimolaari-nen määrä suhteessa oksalyylikloridiin, on haitallista halutun kaavan III mukaisen happokloridihydrokloridin syn-isomeerin tuotannolle. Edullisimmin dimetyyliformamidin 20 moolimäärä tulisi olla suurempi kuin oksalyylikloridin moolimäärän. Keksijät ovat myös todenneet, että dimetyyli- * ' formamidin käyttö mooliylimääränä on myös haitallista sekä • · :.*·· reaktiolle että halutun tuotteen pysyvyydelle. Siten kek- 5^ · sijät ovat keksineet menetelmän, jolla säädellään reaktio- ····: 25 aineiden pysymättömyyttä joko kloridi-ioni ylimäärää, joka ····· on johdettu oksalyylikloridista, tai dimetyyliformami- .···. diylimäärää kohtaan, jotka kummatkin ovat kriittisen tär keitä valmistettaessa pysyvää, kiteistä yhdisteen lii syn-..i isomeeriä, jossa ei juurikaan ole anti-isomeeria. Tapauk- • t · I.; 30 sessa, jossa kaavan II mukaisen yhdisteen muuttuminen kaa- • · *···* van XII mukaiseksi yhdisteeksi ei tapahdu täydellisesti, kaavan XXI mukaiseen eristettyyn tuotteeseen jää pieni ·;··· määrä kaavan II mukaisen hapon s yn - i some eriä. Sillä, että ..* yhdisteessä III on mukana jonkin verran reagoimatonta yh- * . 35 distettä XI ja pieniä määriä yhdisteen III anti-isomeeria, ei ole vaikutusta seuraavassa asylointireaktiossa, jossa 119811 12 saadaan onnistuneesti haluttu antibiootti, jossa ei juurikaan ole mainitun antibiootin anti-isomeeria.

Esillä olevat keksijät ovat myös havainneet, että kloorausreaktion lämpötila ja reaktioiluotin ovat myös 5 kriittisen tärkeitä. Edullisesti reaktio suoritetaan iner-Lissä orgaanisessa liuottimessa, kuten dikloorimetäänissä, kloroformissa tai asetonitrillissä, lämpötilassa, joka on vähemmän kuin -10 °C. Edullisimmin reaktio suoritetaan di-kloorimetaanissa noin -15 °C - noin -40 °C: ssa.

10 Kaavan II;I mukaisen happokloridlhydrokloridin svn- isomeerin käyttö käyttökelpoisten laajakirjoisten antibioottien valmistamiseksi yleisellä asylointireaktiolla esitetään reaktionkulkukaaviossa 2, Tarkemmin reäktionkulku-kaaviossa 2 valaistaan kaavan III mukaisen happoklori-15 din käyttöä, valmistettaessa laajakirjoista kefepiimiantibioottia, j ossa ei j uurikaan ole anti-isomeeri a ja Δ2-i someeria. Edelleen kaavan IIΪ mukaista happokloridihydro-klöfidia voidaan käyttää sellaisten kefalosporiiniäntibi-oottien valmistamiseksi, joissa 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-20 2-metoksi-iminoasetyylin syn-isomeeri on kiinnittynyt ke-falosporiin.iytimen 7-aminoryhmään, ja tällaisia ovat kefo- "**: ditsiimi, kefmenoksiimi, kefotaksiimi, kefpiromi, kefpo- • · :,1·· doksiimi, kefkinomi, kefteraami, keftiofuuri, kefetamet ja kefutsonaami.

• ·;··· 25 Edelleen, varmistaakseen, että sinänsä tunnettu happokloridihydro kloridi tuo te on anti-isomeerina eikä ha- .···, luttuna s γη-i some er inä, esillä olevat keksi j ä t korva si vat • · kaavan III mukaisen yhdisteen syn-isomeerin sinänsä tunne- . . tulla tuotteella, kuten esimerkissä 14 valmistetulla tuot- • · · 30 teella, asylointireaktioissa, jotka on kuvattu reaktion- • · *···1 kulkukaavioSSä 2 ja esimerkissä 4. Syntynyttä kefalospo- riinituotetta, joka valmistettiin esimerkeissä 17, 18 ja • · ...tj 23 kuvatuilla, tavoilla, verrattiin kefepiimiantibioottiin, ..· joka oli valmistettu kantahakemuksen FI-924031 mukaisesti.

· • ** 35 Kuten on nähtävissä vertailusta esimerkissä 19, anti- ♦ ' ' 1 kefepiimi, joka on valmistettu sinänsä tunnettujen oppien 119811 13 mukaisesti, ei ole sama kuin käyttökelpoinen laajakirjäinen syn-kefepiimi, joka on valmistettu esillä olevaa keksintöä käyttäen.

Tässä ja patenttivaatimuksissa määritellyllä ter-5 millä "ei juurikaan sisällä" tarkoitetaan sitä, että yhdiste sisältää vähemmän kuin noin 5 % ei-toivottua isomeeriä. Edullisesti yhdiste sisältää vähemmän kuin noin 1 % ei-toivottua isomeeriä.

Kantahakeinukeen FI-924031 mukaisesti laajakirjoi- 10 nen kefepiimiantibioottidihydrokloridihyduaatti, jossa ei juurikaan ole anti-Isomeeriä; eikä A2~is°meeria, valmistetaan N-asyloimalla kaavan IV mukainen yhdiste kaavan III mukaisen happokloridihydrokloridin syn-isomeerln kanssa reaktionkulkukaaviossa 2 kuvatulla tavalla.

15 Reaktiokulkukaavio 2 H2N. + ___ hx 0 cor ch3

20 IV

····· • · ^CH3 s mn s. +r_ • I l l • ·

*" VI

• t · · • · · 30 β ch3

\ * H

h z® -< To ‘2hci zH?0 v Γ··; 35 S 0 cof • · · · · * · 119811 14 7-amino-3~[(l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef- 3-eemi-4-karboksylaattisuola, jossa ei juurikaan ole Δ ~ isomeeriä ja jonka kaava on IV, jossa HX on HC.L, HI tai H2SO4, voidaan valmistaa yleisillä menetemillä, jotka on 5 kuvannut S. P. Brundidge et ai. US-patentissa nro 4 B 68 294.

Kaavan IV mukainen kefalosporiinivälituote, jossa HX on edullisesti HI, voidaan edullisesti silyloida iner-tissä orgaanisessa liuottimessa, jolloin muodostuu in situ 10 liuos, jossa on silyloitu johdannainen, jonka kaava on VI, jossa R ja R1 ovat kumpikin toisistaan riippumatta H tai silyyliryhmä tai näiden seos* Eräässä tutkimuksessa määritettiin, että R1 on useimmiten silyloitu ja R on useimmiten vety. ftlan asiantuntijat ymmärtävät, 15 että erilaisten liuoksessa mukana Olevien ainesten jatkuvan tasapainomuutoksen takia on valkea identifioida erityistä kaavan VI mukaista yhdistettä, joka on johdettu in situ reaktioseoksessa tietyillä ajanhetklllä* On kuitenkin tärkeää lisätä riittävästi silylöivaa ainetta ja tar-20 vittaessa emästä soLubilisoimaan kaavan IV mukainen ke f a -losporiinivälituote, ennen kuin vedetöntä liuosta käsitel- ***** laän kaavan III mukaisella yhdisteellä* Silylointiaineet, ί,’.ί joita; voidaan käyttää, ovat alan asiantuntijoiden hyvin :*:’: tuntemia, ja sellaisia ovat esimerkiksi trimetyylikloo- ·;··· 25 risilaani, trimetyy.lx jodisilaani, heksametvylidisiiatsaa- ni, tert-butyylidimetyylikloorisilaanl, t rimetyylisilyy .···. liasetamidi, bis (triinetyylisilyyli) asetamidi, bis (t.rime- • · tyylisilyyli) urea tai vastaavat aineet. Edullisesti voi- , . tlaan käyttää asylointimenetelmässä trimetyylikloorisilaa- • · · *·’♦* 30 n ia tai seosta, jossa on trimetyylikloorisilaania ja hek- • · *···* sametyylidi siiat saan ia, ja edullisimmin seosta, jossa on trimetyylikloorisilaania ja heksametyylidisilatsaania.

• ·

Vaikka reaktiossa tarvitaan vähintää yksi moolie- ,,· kvivalentti silylöivaa ainetta ja vähintään yksi moolie- • * • " 35 kvivalentti emästä, käytännössä havaittiin, että oli edul- ’ * lista käyttää noin kahta mooliekvivalenttia silylöivaa ai- 119811 15 net ta ja noin kahta mooli-ekvivalenttia tai vähemmän emästä, jotta saadaan liuos, jossa on kaavan VI mukaista välituotetta. Kun silyloiva aine on kuitenkin seos, jossa on trimetyylikloorisilaania ja heksametyylidisilatsaania, on 5 edullista, ettei emästä lisätä lainkaan kaavan VI mukaisen liukenevan johdannaisen valmistukseen. Kuten alan asiantuntijat ymmärtävät, heksametyylidisilatsaanilla, kun se on silyloivana aineena, saadaan emässivutuotetta, joka on riittävä neutraloimaan jonkin verran syntyvästä haposta. 10 Koska ylimäärä emästä oh haitallista halutun antibiootin, jossa ei juurikaan ole Δ2"Isomeeriä, tuotannolle, seos, jossa on trimetyylikloorisilaania ja heksametyylidisilatsaania, on edullisin esillä Olevassa keksinnössä. Isomeri-soitumisen &3:sta A2’ksi määrä kefalospori iniytimessä on 15 herkkä reaktio-olosuhteille, joita käytetään valmistettaessa liukenevaa silyloitua johdannaista., jonka kaava on VI, sekä N-asyloitaessa sitä kaavan III mukaisen happoklo-ridihydrokloridillä, jolloin saadaan V mukainen yhdiste. Isomer!säätiön määrä riippu tekijöistä, kuten emäslisäyk-20 sen määrästä ja järjestyksestä, menetelmästä käytettävästä liuottimesta ja lämpötilasta. Tärkeintä on se, että emäk· ··*·· m * siset olosuhteet, jotka ovat seurausta siitä, että käyte- :.’*i tään ylimäärin emästä, tai siitä, että lisätään emästä en- ··· V * nen silyloivan aineen tai kaavan III mukaisen happoklori- *:*: 25 dihydrokloridin lisäämistä, lisää kefeemikaksoissidoksen ·:··; isome risoi tumista AJ: sta A2ieen. Siten on edullisinta pi- ;*’*· tää yllä ei^eiTiäksisiä olosuhteita vedettömässä ympäristos- • · · sä tapahtuvan asvlointimenetelinän ajan.

Sopivia emäksiä, joita voidaan käyttää menetelmäs- * · · 30 sä, ovat epäorgaaniset ja orgaaniset emäkset, jotka ovat ·" sopivia happoakseptoreja, kuten NaHCO-j, KHCO3, NasCOs, • ·

KsCOs, ammoniakki, primaarinen amiini, sekondaarinen amii-*!**: ni, tertiaarinen amiini tai vastaavat emäkset. Edullisim- min orgaanisia emäksiä, joita voidaan käyttää menetelmäs- • ·* 35 sä, ovat esimerkiksi 1,8-diatsabisyklo-[5.4.0}undek-7- »M*· eeni, N-me-yylimorfoliini, 2,G-lutidiini, 2-metyyli-6- 119811 16 etyylipyridiini, N, N-dimetyylianiliini, N,N-dietyyliani-liini, trietyyliamiini, di-isopropyylietyyliamiini tai vastaavat emäkset. Edullisesti ja tarvittaessa N-metyyli-morfoiiinia tai trietyyl. ί nmi inia tai näiden seosta voidaan 5 käyttää sily 1 oi nti- ja N~asyloint.i.reaktioissa. Edullisimmin N~metyylimorfoliinia tai trietyyliamiinia käytetään kaavan VI mukaisen yhdisteen N-asyloinnissa kaavan III mukaisella yhdisteellä.

Liukenevaa silyloitua kaavan VI mukaista yhdistet-10 tä> joka johdetaan in situ, käsitellään sitten kaavan III mukaisella happokloridihydrokloridilla ja edullisesti yhdellä mooliekvivalentilla, ja edullisimmin, pienellä ylimäärällä kaavan III mukaista happokloridihydrokloridia, sen jälkeen e kvimo1aar i s e11a määrällä, ja edullisesti pie-15 nemmällä kuin ekvimolaarisella määrällä emästä suhteessa kaavan III mukaisen yhdisteen määrään, ja näin saadaan seos, jossa on haluttua antibioottia. Edullisesti kaavan III mukaisen happokloridihydrokloridin ja emäsmäärät lisätään hitaasti vähitellen. Vaikka reagoivien aineiden lisä-20 ys voidaan suorittaa yhdellä kertaa, jos reaktion lämpötilaa ja ei-emäksisi ä olosuhteita voidaan säätää, on edu.l - * * lista lisätä reagoivat aineet kahdessa tai kolmessa erässä • · täydellisen reaktion varmistamiseksi .

·*· V · Sopivia liuottimia, joita voidaan käyttää menetel- *:**: 25 missä, ovat kaikki inert it orgaaniset liuottimet, joihin ·;··· kaavan VI mukainen silyloitu johdannainen liukenee ja jos- .***. sa 43-käkspissidoksen isomerisaati o minimoidaan, ja täi- • · · laisia ovat esimerkiksi tolueeni, tetrahydrofuraani, ase-töni, asetonitriili, dikloorimetaani, kloroformi, dimetyy- • · · M 30 liasetamidi tai vastaavat liuottimet tai näiden seoksen.

• t *" Edullisimmin menetelmässä voidaan käyttää asetonitriiliä • · tai dikloorimetaania. Esillä olevan keksinnön menetelmä ·;··: voidaan suorittaa lämpötilassa, joka on noin -60 °C - noin ·.[ +50 °C, ja edullisesti noin -40 °C: sta noin huoneenlämpö- • · · 35 tilaan. Kaavan VI mukaisen silyloidun yhdisteen valmistus suoritetaan edullisesti lämpötilassa, joka on 119811 π noin -10 “Cista noin huoneenlämpötilaan, kun taas N-asylointi suoritetaan edullisesti lämpötilassa, joka on noin -40 °C - noin 0 °C.

Kun kaavan VI mukaisen liukenevan silyloidun yh-5 disteen N-asylöinti on päättynyt kemiassa tunnetuilla ha-valtsemismenetelmillä vahvistaen, esimerkiksi ohutkerros-kromatograafisin, suuren erotuskyvyn omaavan nestekromato-graafisin ja spektroskooppisin menetelmin, niin tämän jälkeen kantahakemuksen edullisen menetelmän mukaisesti lisäin tään riittävästi vettä reaktiöseökseen näkyvien kiinteiden aineiden liuottamiseksi haluttaessa, ja näin saadaan kak-sifaasinen liuos, jossa on orgaaninen faasi ja vettä. Re-aktioseokseen lisättävän veden määrä määräytyy reaktiossa käytettävän inertin orgaanisen liuottimen valinnan ja mäa-15 rän mukaan ja sitä tulee olla riittävästi, jotta faasien erottuminen saadaan aikaan* Kun faasien erottuminen on tapahtunut, on edullista erottaa ja heittää orgaaninen faasi pois, jolloin saadaan liuos, jossa on runsaasti haluttua antibioottia. Runsaspitoista vesiliuosta käsitellään sit-20 ten riittävällä määrällä happoa tai sen liukenevaa myrkytöntä suolaa, kuten suolahapolla, natriumkloridilla, ammo- * * niumkloridilla, kaliumkloridilla, rikkihapolla, natrium- · ·.**: sulfaatilla, kaliumsulfaatilla, ammoniumsulfaatilla, fos- ···

Vi forihapolla, natriumfosfaatilla, kaliumfosfaatilla, ammo- ·:·*: 25 niumfosf aa tiliä, typpihapolla, natriumnitraatilla, kalium- ·;·♦· nitraatilla tai vastaavalla hapolla tai suolalla, jolloin .**·. säadaan riittävä määrä haluttua vastaionia halutun kefe- • ♦ * · · piimisuolan kiteytymisen varmistamiseksi, ja valinnaisesti laimennetaan se sopivalla veteen sekoittuvalla orgaanisel- • · 4 30 la .liuottimena, kuten metyyli ketoni 11a, ketonilla, ase- • · ’··** töni.l la, isopropanolilla, but anoi il la tai vastaavalla liu- • * : ottimellä täydellisen kiteytymisen aikaan saamiseksi.

·:··· Edullisesti runsaspitoista vesiliuosta käsitellään riittä- ./ väliä määrällä rikkihappoa kefepiimin suolan kiteyttämi- • · · ’ . 35 seksi, jossa suolassa ei juurikaan ole anti-isomeeria eikä A2-isomeeria. Kefepiimisulfaatti voidaan sitten muuttaa 119811 18 edulliseksi kiteiseksi kefepiimidihydrokloridimonohydraa-tiksi menetelmällä, jonka on kuvannut Kaplan et ai. US-patentissa nro 4 910 301. Esillä olevassa menetelmässä valmistettu kefepiimisulfaatti voidaan neutraloida emäk-5 sellä ja, edullisesti, heikosti emäksisellä kemiassa tun netulla ionivaihtohartsilla ja edullisesti kaupallisesti saatavalla ioninvaihtohartsilla, jollaisia ovat Amberlite LA-2, Dowex WGR, Bio-Rad AG3-X4A, Amberlite IRA 93, Amber-lite IRA 35 tai vastaavat hartsit, jolloin saadaan vesi-lo tai vesi-orgaaninen liuos, joka sisältää kefepiimin kah- taisionimuodon. Liuosta käsitellään sitten riittävällä määrällä suolahappoa ja valinnaisesti veteen sekoittuvalla orgaanisella liuottimena edullisen kefepiimidihydro-kloridihydraatin kiteytymisen aikaan saamiseksi. Edulli- 1.5 simmin kantahakemuksen mukaisesta vedettömässä ympäris tössä tapahtuneesta, asyloinnista saatua vesipitoista run-saspitoista liuosta käsitellään riittävällä määrällä kloo-rivetyhappoa, jotta mainitun antibiootin, kefepiimidihyd-rokloridihydraatin kiteytiminen saadaan alkamaan ja var-20 niistetään, kun lisätään veteen sekoittuvaa orgaanista liu-, otinta, kuten asetonia. Lisättävän veteen sekoittuvan or- * ' gaanisen liuottimen määrä tulee olla riittävä, jotta mai- *. *: nittu antibiootti saadaan kiteytymään täydellisesti, ja ··· *.· · edullisesti sen määrä on noin 2 - noin 9 vesifaasin tila- *:·*: 25 vuutta, jolloin saadaan lämpötilastabiili kiteinen kefe- *:·*: piimidihydrokloridimonohydraatti tai -dihydraatti, jossa z « · ·***; ei juurikaan ole anti-isomeeria eikä Δ -isomeeriä.

Kun halutaan valmistaa ainoastaan kefepiimiclihyd-rokloridlmonohydraatti, vedettömässä ympäristössä tapahtu- • · * 30 neesta asyloinnista saatua runsaspitöistä vesiliuosta kä- • · *" siteitään edullisesti riittävällä määrällä suolahappoa ja • · ·.*·· se laimennetaan sopivalla määrällä tässä kuvattua veteen "**: sekoittuvaa orgaanista liuotinta halutun monohydraattimuo- ;·) don kiteytymisen varmistamiseksi. Vaihtoehtoisesti, kun • · · 35 halutaan valmistaa pysyvä kefepiimidihydroklorididihyd- ♦ · ra at ti., runsaspitoista vesiliuosta käsitellään edullisesti 119811 19 suuremmalla suolahapon ekvivalenttikonsentraatiolla ja sellaisella määrällä veteen sekoittuvaa orgaanista liuotinta, jolla kiteytyminen pidetään samentumispisteessä, ennenkuin orgaanista liuotinta lisätään lisää kiteytymisen 5 saattamiseksi päätökseen. Asiantuntijat kuitenkin ymmärtävät sen, että j os menetelmän eri stysvaihetta runsaspa toisesta vesiiuoksesta ei kontrolloida tarkasti, on mahdollistä/ että muodostuu seos, jossa on kiteistä kefepiimidi-hydrokloridimonohydraatti- ja -dihydraattimuotoa. Joka talo pauksessa, ainoastaan toisen halutun hydraatin valmistaminen voidaan suorittaa joko hydraatista täi hydraattien seoksesta seuraamalla tässä kuvattuja uudelleenkiteytysme netelmiä.

Edellä kuvatulla tavalla valmistettua kiteistä kelo fepiimidihydrokloridimonohydraattia voidaan käyttää pysyvän kiteisen kefepiimidihydroklorididihydraatin valmistamiseksi, uudelleenkiteyttämällä säädetyissä liuottimen ja suolahapon konsentraatioissa, ja aika, kuinka kauan reaktiota pidetään sameutumispisteessä (alkukiteytyminen), kuli o vataan tässä. Vaihtoehtoisesti edellä kuvatulla tavalla valmistettua kiteistä dihydrokior ididihydraattia voidaan ****': käyttää myös pysyvän kiteisen kefepiimidihydrokloridi- t * monohydraatin valmistamiseen, uudelleen kiteyttäen tässä ··· f : kuvatuissa erilaisissa valvotuissa olosuhteissa. Siten ·;**: 25 kantahakeffiUksen menetelmää voidaan käyttää joko mainitun ·*·.; antibootin halutun monohydraatin tai dihydraatin valmis- tarniseen.

• φ Päinvastoin kuin labiili kefepiimidihydrokloridi- 1(. dihydraatti, joka on kuvattu US-patentissa nro 4 910 301 30 ja joka helposti menettää toisen vesimoolin, kiteisestä.

**;·’ kefepiimidihydroklorididihydraatista, joka voidaan valmis- taa kantahakemuksen menetelmällä, on todettu, että sillä ····· on hyvin määritetty kiteinen rakenne, jossa toinen vesi- ,.* mooli pysyy. Uuden kiteisen dihydraattimuodon (kiteet neu- · * \ 35 lamaisiä) on todettu olevan erittäin pysyvä eikä sen kide- morfologia muutu erilaisissa olosuhteissa, esimerkiksi ol~ 119811 20 tuaan ilmassa lämpötilassa, joka on 70 °C, pidempään kuin kaksi kuukautta, tyhjössä. P2O5:n kanssa 50 °C:ssa 48 tuntia, kuivatusuuni ssa 70 °C:ssa 96 tuntia ja korkeissa ja alhaisissa suhteellisen kosteuden olosuhteissa. Kiteisellä 5 riihydraatiliä on ominaiset infrapuna-absorptiopiikit arvoilla 3574 cm"1 ja 3432 cm-1, jotka ilmenevät FT-IR- diffuusiheijastespektroskopiassa KBr:n ja 13 mm näytteen kanssa, käytettäessä Nicolet 20SX -spektrometriä. Tämä ke-fepiimin lämpötila- ja kosteusstabiili kiteinen dihydraat-10 timuoto karakterisoitiin myös röntgensädejauhedi f fraktio-kuviolla, joka esitetään taulukossa 1.

Taulukko 1

Pysyvä kefapiimidihydroklorididihydraatti 15 ---—-:- d i/x0 {%) 13f14 15 . 12 f 78 13 8,82 24 _ 6,62 18 6,41 100 4,94 17 *:·1: 4,79 10 . . 4,74 12 4,52 13 4,41 36 *** 1 4,1 63 ·:1·: 25 3,75 50 . 3,6 11 • · 3,53 16 .**·. 3,41 36 *·1·1 3,31 9 3,19 22 . . 2,84 30 2,67 16 ,··1. 30 2,62 6 *·;·’ 2,57 14 • · 2.5 4

m 1 1 I

*. 1: 2,48 9 2,27 15 • —' ............. .........1 1 11 'Iin m imi 1—n rm—i γττττΤγ·ι rrrrmrrm niin—...........f ·· • · • · · * 119811 21

Taulukossa X "d" kuvaa tasojen välistä etäisyyttä ja "I/Io" prosentuaalisia suhteellisia .intensiteettejä:,. Röntgensädekuvio otettiin talteen. Rigaku Geigerflex röntgensädediffeaktometrillä ja ni kkelisuodatetulla kupa-5 rilla (KQ) säteilyaallonp-i tuudella 1,5425 A;

Siten kantahakemuksen erään suoritusmuodon mukaisesti saadaan menetelmä, jolla valmistetaan antibioottia, kefcpiimidihydrokioridihydraattia, jossa ei juurikaan ole anti-isomeeriä eikä A2-isorrieeriä, ja menetelmässä saatele taan 7-amino-3-[(1-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef-3-eemi-4-karboksylaatin silyloitu johdannainen reagoimaan 2- (2-aminotiätsol-4-yyli)-2-metoksi-imi n o a set yy1iklorihyd-rokloridin syn-i somee rin kanssa, jossa isomeerissä ei juurikaan ole .anti-isomeeriä, iner-15 Lissa orgaanisessa liuottimessa.

Esillä olevan, keksinnön, edullinen suoritusmuoto käsittää lisäksi 2- (2-aminotiatsol-4-yyli) ••2~metoks.i-imi-noaset.yyiiklorihydroklciiridin syn-isomeerin, jossa ei juurikaan ole anti-isomeeriä, valmistuksen saattamalla 2--(2-20 aminotiätsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoetikkahapon syn-iso-meerin vedetön happohydrokloridisuola reagoimaan sellaisen * * seoksen kansaa, jossa on vähintään yksi mooliekvivalentti • · *,**: oksalyylikloridia ja vähintään yhdestä mooli ekvivalentista • ·· V* ί pieneen ylimäärään dimetyyliformamidia suhteessa mainitun *:*·: 25 oksalyylikloridin määrään, inertissä orgaanisessa liuotti- ···*· messa, lämpötilassa, joka ori vähemmän kuin 10 °C.

Toinen edullinen kantaha kemuksen suoritusmuot o kä- ··· sittää lisäksi silyloidun johdannaisen valmistuksen saat-tamalla 7-amino-3- [ (1-metyyli-l-pyrrolidinio) metyyli ] ket- • · · !.! 30 3-eerai-4-karboksylaattisuola reagoimaan inert issä liuotti- • * *1* messa silyloivan aineen kanssa.

* «

Kantana kemuksen vielä edullisemman suoritusmuodon *:**: avulla saadaan menetelmä, jolla valmistetaan antibioottia, ··] kefepiimidihydrokloridihydraattia, jossa ei juurikaan ole * ! 35 anti-isomeeria eikä A2"isomeeria, ja menetelmässä saate- ····· ....

• · taan 7-amino-3-[(1-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef-3- 119811 22 eemi-4~karboksylaatin silyloitu johdannainen reagoimaan 2-(2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyylikloridihyd ·· rokioridin syn-isomeerin kanssa, jossa isomeerissä ei juurikaan Ole anti-isomeeria, inertissä orgaanisessa liuotti-5 messa, ja menetelmässä lisätään lisäksi riittävä määrä vettä reaktioseokseen, jolloin saadaan kaksifaas.inen liuos, jossa on orgaaninen ja vesiosa; ja sitten lisätään riittävä määrä happoa tai liukenevaa myrkytöntä hapon suolaa ja valinnaisesti veteen sekoittuvaa orgaanista liuo-10 tinta erotettuun vesiliuokseen.

Edellä esitetyn edullisimman suoritusmuodon mukaisesti keksinnön avulla saadaan menetelmä, jolla valmisteta an antibiootteja, ke fepi imidih ydro klo r id imonohydnaattia ja kefepiimidihydroklorididihydraattia suoraan vedettömän-15 sä ympäristössä tapahtuvan a s y1o i nt imenetelmä n runsaspi-toisesta vesiliuoksesta.

Kefepiimin (yhdiste V) käyttökelpoisuus esitetään US-patentissä nro 4 406 899, Aburaki et ai. Esillä olevalla menetelmällä tuotetulla kefepiimin pysyvällä dihydraat-20 timuodolla ilmenee antibioottiominaisuuksia, joita on edellä mainitulla, US-patentin nro 4 406 899 kefepiimilla, * * ja se on käyttökelpoinen antibioottina vastaavalla tava i - • · • · · *. ·: la.

··· ί Tulee ymmärtää, että selostusosa ja esimerkit ovat •f! 25 valaisevia eikä niiden tarkoituksena ole rajoittaa keksin- ····· non suojapiiriä.

.···. Esimerkki 1 • ♦ ···

Syn-2-(2~aminotiatsol-4~yyli)-2-metoksi-iminoe tikkahappohydrok1 oridi suola 30 Suspensioon, jossa oli (25 g, 124,25 mmol) 2-(2- • · *···* aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi i.minoetikkahappoa toluee- nisää (250 ml), johdettiin HCl-kaasua 20 - 28 °C:ssa. HC1 ·;··· johdettiin pinnan päälle kahtena eränä, jotka olivat 8,1 g (222,2 mmol) ja 4,8 g (131,7 mmol), sekoittaen 30 minuut- • · * . 35 tia lisäysten välillä. Oltuaan tunnin 20 °C:ssa, tuote otettiin talteen suodattamalla typpiatmosfäärissä, pestiin 119811 23 t.olueenilla (50 ml) ja hek.saani.lla (250 ml) ja kuivattiin 20 - 25 °C:ssa tyhjössä, jolloin saatiin 28,68 g (97 %) otsikon yhdistettä.

Esimerkki 2 5 Syn-2-(2-aminotiatsQl-4-yyli)-2-metoksi-iminoas e- tyylikloridihydrokloridi

Liuokseen, jossa oli (0,77 ml, 10 mmol) dimetyyli-formamidia dikloorimetäänissä (40 ml) 5 °C:ssa, lisättiin (0,89 ml, 10 mmol) 98 % oksalyylikloridia, joka oli di-10 kloorimetäänissä (4,1 ml) . Koska lisäys suoritettiin ti-poittain, lämpötila pysyi 4-5 °C:ssa. Syntyneeseen suspensioon, joka oli jäähdytetty -27 «c: seen, lisättiin (2,37 g, 10 mmol) 2 - (2 - ami not i at s o 1 - 4 - y y 1 i) - 2 -me t oka i - iminoatikkahappohydrokloridia, joka oli valmistettu ©siis merkissä 1. Suspensiota sekoitettiin 2,5 tuntia -25 °C:ssa. Suodattamalla typpiatmosfäärissä ja pesemällä dikloorimetaanilla (50 ml) ja hoksaanilla (100 ml), saatiin 1,78 g (69,5 %) valkoista kiteistä otsikon yhdistettä sen jälkeen, kun se oli kuivattu 20 °C:ssa tyhjössä.

20 Otsikon happokloridi asyloitiin 7-aminodesase- toksikefalosporaanihappodi fenyyIimetyyliesterihydroklori- * ‘ diksi pyridiiniliuoksessa, jolloin saatiin yksivyöhykkei- ·.*·; nen (TLC) tuote, joka oli yhtenevä eikä ollut erottetta- ··· V* ' vissa halutun desasetoksikefalosporiiniesterin autentti- *:**: 25 se s ta· näytteestä, ·;··· Esimerkki 3 .***, Syn-2- (2“aittinotiatsol“4-yyli) -2-metoksi-iminoase- ··· tyylikioridihydrokloridi t.#.t Liuokseen, jossa oli (1,55 ml, 20 mmol) dime tyyli- • i · M 30 formamidia dikloörimetaanissa (80 ml) 5 °C:ssa, lisättiin • · (1,78 ml, 20 mmol) 98 % puhdasta oksalyylikloridia, jo- • · ί/.j ka oli dikloörimetaanissa (8,2 ml). Lisäysaika oli viisi *:**: minuuttia 5-8 °C: ssa. Syntynyttä suspensiota sekoitet- ./ tiin 10 minuuttia 5 °C:ssa ja sitten se jäähdytet- * . 35 tiin -30 °C:seen. Lisättiin esimerkin 1 2-- (2-aminotiat- sol-4-yyli)-2-metoksiiminoetikkahappohydrokloridia (4,75 119811 24 g, 20 mmol). Suspensiota sekoitettiin 2,5 tuntia -25 --30 °C:ssa. Suodattamalla typpiatmosfäärissä ja pesemällä dikloorimetaanilla (75 ml) ja heksaanilla (100 ml), saatiin 3,57 g (69,7 %) kiteistä otsikon yhdistettä tyhjössä 5 20 °C:ssa kuivaamisen jälkeen.

Tasamääxä kiinteää happokloridihydrokloridituotet-ta asyloitiin 7-aminodesasetoaksikefalosporaanihappodife-nyylimetyyliesterihydrokloridiksi pyridiiniliuoksessa, jolloin saatiin suurin piirtein yksivyöhykkeinen (TLC) 10 tuote, joka oli yhtenevä eikä ollut erotettavissa halutusta desasetoksikefalosporiiniesterin autenttista näytteestä.

Esimerkki 4 7-[2-{2-am±notiatsol-4~yyli)-2-(Z)-raetoksi-imixio-15 asetamido]-3-[(1-metyyli-1~pyrrolidinio)mefcyy1i]kef-3-ae-mi-4-karboksylaatin (kefepiimi) valmistus JDCHt

20 Haf'1—Ή01 + ^ -HI

C0e" CH3 • · « · · • «· * · :T: qch3 25 f h

*·*·: jlill JjTA

..... s· co2· ch3 • f • f · • « · .!.!( 30 7-amino-3- [ (1-metyyli-l-pyrrolidinio) metyyli] kef- • · 7 3-eemi-4-karboksylaattimonohydrojodid.ia (0,85 g, 2,0 mmol) • · :.*·· [valmistettu menetelmillä, jotka on kuvannut. S. F. Brundid- *:**: ge, et ai, US-patentissa nro 4 714 760] liuotettiin ··[ 9 ml:aan asetoni-vettä (2:1), jossa oli trietyyliamiinia,

• M

. 35 pH-arvossa 6,5 ja 20 °C: ssa. Lisättiin syn-2-(2~- *···· f aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetyylikloridihydro- 25 119811 kloridia (0,56 g, 2,2 mmol) [valmistettu esimerkissä 3], käyttäen tirietyyliamii nia pH:n säätämiseksi rajoihin 5 -7, Koe, joka suoritettiin syntyneelle liuokselle korkea-painenestekromatograafissa, osoitti, että halutun kefalp-5 sporiinin (kefepiimi) saanto oli 58 %> Tekemällä happamaksi pH-arvoon 2,2 rikkihapolla, saatiin 0,63 g otsikon antibioottia sen sulfaattisuolana (51 % aktiivinen saanto), kuten Aburaki et ai. on kuvannut US-patentissa nro 4 406 899, joka on julkaistu 27. syyskuuta 1983, ja io Kaplan et al_. ns-patentissa nro 4 910 301, joka on julkaistu 20. maaliskuuta 1990.

Esimerkki 5 syn-2-(2-aminotiatso1-4-yyli)-2-metaksi-iminoase-tyylifcloridihydrokloridi 15 Liuokseen, jossa oli (9,75 ml, 125,9 mmol) dime- lyyliformamidia dikloorimetaanissa (450 ml) 5 öC:ssa, lisättiin tipoittain liuos, jossa oli (11,21 ml, 125,9 mmol) oksalyylikloridia (98 %) dikloorimetaanissa (15 ml). Lisäys suoritettiin 10 minuutin aikana 5 - 7 °C:ssa. Syntynee-20 seen suspensioon, joka oli jäähdytetty -25 °C:seen, lisät- I04. tiin (28,5 g, 119,0 mmol) syn-2- (2-aminotiatsol- • · , , 4-yyli)-2-metoksi-iminoetikkahappohydrokloridisuolaa yhte- nä eränä. Suspensiota sekoitettiin 3,5 tuntia -25 °C - • · · *·* * -30 °C:ssa, se suodatettiin typpiatmosfäärissä, pestiin ***** 25 dikloorimetaanilla (100 ml) ja heksaanilla (400 ml) ja a *ϊ**ϊ kuivattiin 20 - 25 °C:ssa tyhjössä. Kiteisen otsikon yh- :***: disteen saanto oli 30,7 g (72,5 %) .

Otsikon happokloridi asyloitiin 7-aminodesase-•V. toksikefalosporaanihappodifenyyliinetyyliesterihydroklori- • m .···. 30 diksi pyridiiniliuoksessa, jolloin saatiin suurin piirtein • · *" yksi halutun desasetoksikefalosporiiniesterin vyöhyke • « :,**i (TLC) , joka viittasi autenttiseen näytteeseen.

"**! Otsikon happo kloridi (200 mg, 0,8 mmol) hydroiv- ·*. soitiin vedessä. Eristetyn tuotteen 'H-NMR oli vastaava • * * 35 kuin syh-happolähtPaineen.

• · 119811 26

Esimerkki 6

Syn-2-(2-aminotiatso1- 4-yyli)-2-metoksi-iminoase-tyylikioridihydrokloridi

Liuokseen, jossa oli {8,13 ml, 105 mmol) dimetyy-5 liformamidia di k] corimetaanissa (350 ml) 5 °C:ssa, lisättiin tipoittain (9,34 ml, 105 mmol) oksalyylikloridia (98 % puhdasta) , joka oli dikloorimetäänissä (5 ml). Maksimilämpötila, joka saavutettiin lisäyksen aikana, oli 7 °C. Syntynyttä suspensiota sekoitettiin 10 minuuttia 10 5 °C: ssa ja sitten se jäähdytettiin -27 °C:seen. 2-(2- aminotiatsoX-4-yyli) -2-metoksx-iminoetikkaliappohydroklO” ridia (23,8 g, 100 mmol) lisättiin yhtenä eränä. Suspensiota sekoitettiin 2,5 tuntia -25 °C - -30 °C:ssa, se suodatettiin t yppi a tmos fä är i s s a, pestiin dikloorimetaa-nilla 15 (25 ml) ja heksaanilla (125 ml) ja kuivattiin 20 °C:ssa tyhjössä. Kiteisen happokloridihydrokloridin saanto oli 21,39 g (83,5 %) .

Anal. Lasketut arvot yhdisteelle C6H7N3O2SCI2: C 28,14; H 2,76; M 16,41; S 12,52; 20 Saadut arvot: C 28,25; H 2,93; N 16,32; S, 12,67.

I \ lH-NMR (UMSO-de) δ: 3,93 (CH3) , 7,04 (H5) .

• · · *· *· Esimerkki 7 V * Syn-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-me-toksi-imino- ”**: 25 etikkahappohydrokloridisuola.

*J··: Suspensioon, jossa oli (87 g, 432,4 mmol) syn-2- :*’*· (2-aminot iatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoetikkahappoa tolu- ··· eenissa (870 ml) 22 °C:ssa, johdettiin HC1-kaasua kahdessa erässä; 17,5 g, 480 mmol 30 minuutin aikana ja 15,0 g, ,···, 30 410 mmol 20 minuutin aikana, sekoittaen 20 minuuttia lisä- • · ’** ysten välillä. Suspensiota sekoitettiin 1,5 tuntia • · ·.**: 25 °C:ssa, se suodatettiin typpiatmosfäärissä, pestiin to- *ί**ί lueeni. 1 la (100 ml) ja heksaanilla (400 ml) ja kuivattiin 20 - 25 °C:ssa tyhjössä. Otsikon yhdisteen saanto oli 35 100,2 g (97,5 %) .

Anal. Lasketut arvot yhdisteelle C6H8N3O3SCI: 27 119811 C 30,32; H 3,39; N 17,68; S 13,49; Cl 14,92;

Saadut arvot; C 30,51 H 3,39; N 17,54; S 13,37; Cl 14,90.

Esimerkki 8 5 Syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli}-2-metoksi- iminoasetyylikloridihydroklo r i d 1

Liuokseen, jossa oli (32,4 ml, 41,7 mmol') dimetyy-liformamidia dikloorimetäänissä (400 ml) 5 °C:ssa, lisättiin (37,4 ml, 419,7 mmol) 98 % oksalyylikloridia tipoit-lo tain. Syntynyt suspensio jäähdytettiin -25 °C:seen ja lisättiin -25 °C:iseen suspensioon, jossa oli (95 g, 399,7 mmol) syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi- iminoetikkahappohydrokloridia esimerkistä 7. Suspensiota sekoitettiin 2,5 tuntia -25 °C - -28 °C:ssa, suodatettiin 15 typpiatmosfäärissä, pestiin dikloorimetaani11a (100 ml) ja heksaanilla (500 ml) ja kuivattiin 20 2.5: °G:;ssa tyhjös sä. Kiteisen otsikon yhdisteen saanto oli 84,3 g {82,3 %).

Anal. Lasketut arvot yhdisteelle CeHiNaOsSCls: C 28,14; H 2,76; N 16,41; S 12,52;

20 Saadut arvot: C 27,90; H 3,10; N 16,14; S

, 12,,27.

*|**| id-NMR (DMSO-dg) δ: 3, 95 (CH3), 7,04 (H5) .

*· *· Esimerkki $ ·«· ·.· : 7- [2~ {2”aminotiat3ol-4~yyli) -2- (Z) -metoksi- f *!**: 25 iminoasetamido] -3- [ (1 -metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef- *;·*; 3-eemi -4-karbok sy1aatin (kefepiimi) valmistus

Liuokseen, jossa oli 240 ml asetonia ja 80 ml vet- ··· tä, lisättiin 20,0 g 7-amino-3“[(1-metyyli-l-pyrroli-dinio) metyyli] kef-3-eemi-4-karboksylaattihydrojodidia • · « 30 (0,047 mol) ja aloitettiin sekoittaminen. Käyttäen Radio- • · 7 meter ABU80 automaattista titrauslaitetta, jossa päätepis ·· \*·; te oli asetettu arvoon pH 6,5 ja joka oli täytetty N- •J**: metyylimorfoliinilla, syn-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-ino-

Loksi-iininoasetyylik l.oridihydroklor j di (20,0 g, 0,0785 35 mol) [valmistettu esimerkissä 5] lisättiin neljänä eränä viiden minuutin välein, pitäen pH arvossa 6,5. Kun lisäys • ·· 28 119811 oli suoritettu, ohutta suspensiota sekoitettiin vielä 20 minuuttia huoneenlämpötilassa. Reaktiaseoksen pH alennettiin arvoon pH 2,65 21 ml :11a 6 N H?.SO-i: a, Otsikon yhdiste alkoi saostua. Suspensio ympättiin ja sitä sekoitettiin 5 huoneenlämpötilassa 20 minuuttia. Suspension pH säädettiin uudelleen arvoon 1,8 16 ml :11a 6 N : a ja sekoittamis ta jatkettiin vielä 60 minuutin ajan. Suspensio suodatettiin tyhjössä ja pestiin 70 ml:11a vesi-asetonia (1:1) ja sitten 70 ml:11a asetonia, jolloin saatiin 24,09 g (88,5 % 10 stökiömetriseen painoon perustuva saanto) otsikon yhdistettä, joka vastasi esimerkin 4 yhdistettä ja kefepi imiä, jonka on kuvannut Aburaki, et ai. US-patentissa no 4 406 899, joka on julkaistu 27. syyskuuta 1983, ja Kaplan, et ai. US-patentissa no. 4 910 301, joka on julkaistu 15 20. maaliskuuta 1990.

Esimerkki 10 Sγη-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)~2-raetoks i-iminoase-tyylikloridihydrokloridin valmistus

Liuokseen, jossa on dimetyyliformamidia (8,76 ml, 20 0,113 mol) dikloorimetäänissä (375 ml) 5 °C:ssa, lisätään oksalyylikloridia (9,64 ml, 0,111 mol) tipoittäin, pitäen , , lämpötila 5 - 6 °C:ssa. Suspensiota sekoitetaan 10 minuut- • f ‘;t; tia ja sitten se jäähdytetään -25 °C:seen, Lisätään svn-2- * · · * · * * (2-aminoti at g oi - 4 - yyl il) - 2 -me to kis i - imi n oe t i k ka h appo h ydr o - *!**· 25 kloridisuoläa (25,0 g) tasamäärinä 11 minuutin aikana kui- *!“·* vasaa typpiatmosfäärissä.. Suspensiota sekoitetaan 2,5 tun- : tia -25 °C: s g a. Tuote suodatetaan kuivassa typpiatmosfää- rissä ja kakku pestään dikloorimetäänillä (80 ml). Tuote kuivataan 20 - 25 °C: ssa tyhjössä P2O5: ssa, jolloin saadaan 3C 23,88 g (88,6 %) otsikon yhdistettä haalean keltaisena, • · *·* kiteisenä kiinteänä aineena, • *· *i Anal. Lasketut arvot yhdisteelle GellNsO^SCla: C 28, 14; H 2,76; N 16,41; S 12,52; Cl 27,68;

Saadut arvot: • #♦ 35 C 28,06; H 2,71;· N 16,26; S 12,30; Cl 27,23.

• · 29: 119811

Edellä olevan kokeen tuote karakterisoitiin pro-toniydinmagneettiresonanssispektrin avulla etikkahappo-d«:ssä (^H-NMR) kuvassa 1 esitetyllä tavalla.

1H-NMR (CD4CO2D) δ: 4,.14 (CH3) , 7,10 (H5) . Jäljellä 5 olevan happohydrokloriditason CH3:sta (4,11) integraali on 5,1 %. Isomeerisen H5:n tunnustaso näkyy arvossa 7,67 ppm.

Esimerkki 11 syn-2-(2-arainotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoase-tyy 1iklocidihydrokloridi 10 Liuokseen, jossa oli dimetyyliformamidia (17,92 ml, 231,9 mmol) dikloorimetäänissä (375 ml) 5 °C:ssa, lisättiin oksalyyiikloridia (19,76 ml, 220,8 mmol). Lisäysaika oli 15 minuuttia 5-6 °C:ssa. Syntynyttä suspensiota sekoitettiin 10 minuuttia 5-6 °C:ssa ja 15 sitten se jäähdytettiin -25 °C:seen. 2-(2-aminotiatsol-4- yyli)-2-metoksi-iminoet ikkahappohydrokloridia (25,0 g, 105,2 mmol) lisättiin. Syntynyt liuos ympättiin otsikon yhdisteellä, jolloin muodostui tuotesuspensio. Suspensiota sekoitettiin 3,5 tuntia -25 °C;ssa, se suodatettiin kui-20 vasaa typpiatmosfäärissä, pestiin dikloorimetaanilla (150 ml) ja kuivattiin 20 - 25 °C:ssa tyhjössä. Kiteisen otsi-I * kon yhdisteen saanto oli 9,61 g (35,7 %).

*.*·: Erä kiinteää happokloridihydrokloridituotetta asy- ·*· V ; loitiin 7-aminodesasetoksikefalosporaanihappodifenyylime- *"*: 25 tyyliesterihydrokloridiksi pyridilniliuoksessa, jolloin •{••S saatiin suurin piirtein yksivyöhykkeinen (TLC) tuote, joka .***. oli yhtenevä eikä ollut erotettavissa halutun desasetoksi- kefalosporiinlesterin autenttisesta näytteestä.

Esimerkki 12 • · » t··^ 30 2- {2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metaksi-imxnoasetyyli- • · *1* kloridihydrokloridin valmistus • · V·· CS-patentissa nro. 238 950 esimerkissä 1 kuvattu *!**! koemenetelmä toistettiin seuraavasti: ··] Näyte syn-2- (2-aminotiatsol-4-vvli) -2-metoksi-imi- • ·· 35 noet i kkahappoa (4,0 g), jonka KF oli 0,06 %, suspensoitiin 30 ml:aan bentseeniä 21 DC:ssa. Lisättiin yksi tippa dime- • · 30 tyy1iformamidia, sen jälkeen 5,0 g jauhettua fosforipenta -kloridia yhtenä eränä. Lämpötila nousi 34 uC:seen noin kahdessa minuutissa ja sitten se nostettiin 40 °C:seen minuutin aikana, jotta liuos saatiin muodostumaan täydet-5 lisesti. Liuoksen annettiin jäähtyä ja 36 °C:ssa muodostui saostuma. Kun oli sekoitettu 30 minuuttia, lämpötila oli 22 °C. Vaaleankeltainen kiinteä aine otettiin talteen suodattamalla kuivassa typpiatmosfäärissä ja pestiin 30 ml:11a bentseeniä ja 20 ml:11a heptaania. Saanto oli 10 2,88 g sen jälkeen, kun tuotetta oli kuivattu tyhjössä P2O5:n kanssa 20 - 25 °C:ssa 18 tuntia.

Edellä olevan kokeen tuote karakterisoitiin protoniydinmagneettiresonanssi.spektrin avulla etikkahap-po-d4: ssä (1H-NMR), kuten kaaviossa. 2 esitetään, j ossa H5 1,5 näkyy arvossa 7,56 ppm ja CH3 arvossa 4,34 ppm. Tämä spektri vastasi sitä otsikon yhdisteen tuotetta, jolla on anti-isomeerikonfiguraatio eikä syn-isomeerikonfiguraatio, kuten tuodaan esille mainitussa CS-patentissa.

Esimerkki 13 20 2 - (2-aminotiatsol-4--yyli) -2“ffietoksi-iminoasetYyli- kloridihydrokloridin valmistus * * CS-patentissa nro 238 950, esimerkissä 2 kuvattu • · koemenetelmä toistettiin seuraavasti: • · · v : Näyte syn-2- (2-aminotiatsol-4-vvli) -2-metoksi-imi·· *:**: 25 noet i kkahappoa (4,0 g), jonka KF oli 0,06 %, suspensoitiin ·:*·· 20 ml: ääri asetonitriiliä, jonka KF oli säädetty arvoon 0,22 %. Lisättiin tippa dimetyyliformamidia ja lämpötila • 9 # oli 20 °C. Lisättäessä 6,0 grammaa jauhemaista fosforipen- · takloridia, lämpötila nousi 40 °C:seen ja saatiin täydel- • · · !.! 30 linen liuos. Liuos jäähdytettiin 20 °C:seen ja saostuma • · ·;·' muodostui 33 °C: ssa. Kun oli sekoitettu 30 minuuttia, tuo- • · te otettiin talteen kuivassa typpiatmosfäärissä ja pestiin ·:*·· 30 ml:11a bentseeniä ja 20 rnl:11a heptaania. Saanto oli ./ 1,86 g sen jälkeen, kun tuotetta oli kuivattu tyhjössä 18 * . 35 tuntia 20 - 25 °C:ssa PaOs'.n kanssa.

• · · · · • · . 31 119811

Edellä olevan kokeen tuote karakterisoitiin pro-toniydinmaqneettiresonanssispektrin avulla etikkahappo-CI4: ssä (1H-KMR), kuten esitetään kaaviossa 3, josta näkyy 5H arvossa 7,56 ppm ja CH.3 arvossa 4,31 ppm. XH-NMR oli 5 yhtenevä sen otsikon yhdisteen tuotteen kanssa, jolla on anti-isomeerikonfiguraatio eikä syn-isomeerikonfiguraatio, kuten tuodaan esille mainitussa CS-patentissa.

Esimerkki 14 2~(2-aminotiatsoi-4-yyli)-2-metok3i-iminoasetyyli-10 kloridihydrokloridin valmistus CS-patentin nro 238 950, esimerkin 3 koemenetelmä tois tett iin seuraavasti: Väkevää suolahappoa (0,16 ml) lisättiin 30 ml:aan dikloorimetaania. Kun tämä oli jäähdytetty -10 °C:seen, 15 lisättiin 6, 5 g fosforipentaklor i dia vähitellen. 0 °C: seen lämmittämisen jälkeen lisättiin syn -2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoetikkahappoa, jonka KF oli 0,06 % yhtenä annoksena. Lämpötila nousi 2 °C:seen. Oltuaan 9 minuuttia 0 °C:ssa, saatiin täydellinen liuos. 40 minuutin 20 kuluttua alkoi muodostua saostumaa. Tuotesuspensiota se koitettiin 2,8 tuntia 2 - 3 °C: ssn, se suodatettiin kui- • f ‘ 1 vassa typpiatmosfäärissä, pestiin 30 ml:11a bentseeniä • · :.2i ja 20 ml:lla heptaania ja sitä kuivattiin tyhjössä 20 - ί.ί ϊ 25 °C: ssa P2O5:n kanssa 18 tuntia. Saanto oli 3,42 g vaa- ·;·1: 25 leankeItäistä jauhetta.

·;··· Edellä mainitun kokeen tuote karakterisoitiin pro- .··1. toniydinmagneettiresonans s i spektrin avulla etikkanappo- d/j: ssä (^H-NMR), kuten esitetään kaaviossa 4, jossa näkyy .. H5 arvossa 7,56 ja CH3 arvossa 4,31 ppm. 1H-NMR vastasi • φ · 30 sen otsikon yhdisteen tuotetta, jolla on anti- • 1 ’·;·1 isomeerikonf iguraatio eikä syn-isomeerikonf iguraatio, ku- ten tuodaan esille mainitussa CS-patentissa.

• 1 • · · • · 2 • · · 119811 32

Esimerkki IS

2-{2“aminotiatsol“4-yyli)“2-metoksi-iminoasetyyli-kloridihydrokloridin valmis tusyrifcys US-patentissa nro 4 203 899, esimerkissä 7 kuvat-5 tua yleistä menetelmää suojatun aminotiatsolietikkahapon muuttamiseksi vastaavaski happokloridiksi käytettiin suojaamattomalle aminotiatsolietikkahapolle, joka on kuvattu tässä seuraavasti: Näyte syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksl-10 iminoetikkahappohydrokloridisuolaa 12,38 g, 0,024 mmol) lisättiin, sen jälkeen dimetyyliformamldia (0,50 ml, 0,0065 mol). Lämpötila nousi 22 °C:seen ja ilmeni voimakasta kaasun kehitystä. 20 minuutissa 20 °C:ssa kaasun kehitys oli tyyntynyt ja suspensiota sekoitettiin 20 °C ± 15 2 °C: ssa kaksi tuntia* Suspensio väkevöitiIn tyhjössä liu ottimen poistamiseksi ja syntynyttä keltaista tuotetta kuivattiin tyhjössä P2O5:n päällä 20 - 25 °C:ssa 16 tuntia. Saanto oli 2,59 g.

Edellä olevan kokeen tuote karakterisoitiin pro-20 toniydinmagneet ti resonanssi, spektrin (iH-NMR) avulla etik-kahappo-di:ssä, jossa näkyi H5 arvossa 7,60 ppm ja CH3 ar- ttii· * * vossa 4,73 ppm. Tuotteen spektri vastasi otsikon yhdistet- aa tä, jolla on an tl-isomeeri konfiguraatio.

• · ·

V · Esimerkki IS

·:**: 25 2- (2-aminotiafc30l“4-yYll) -2-metoksi-iminoasetyyli-· *:·*; kloridihydrokloridin valmistusyritys US patentissa nro 4 203 899, esimerkissä 59 kuvat- aa· tua yleistä menetelmää suojatun aminotiatsolietikkahapon . muuttamiseksi vastaavaksi happokloridiksi käytettiin suo- • · · 30 jaamattcmalle aminotiatso.lietikkahapolle, joka on kuvattu • · '*;·* tässä seuraavasti: ϊ/.ί Näyte syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksl-imi- :··; noetikkahappohydr.okloridisuolaa (2,38 g, 0,01 mol) suspen- soitiin 25 ml: aan dikloorimetaania. Kun oli jäähdytetty aa : " 35 4 °C: seen, lisättiin 2,08 g (.0,01 mol) fosforipentaklori- dia. Jäissä jäähdyttäen lämpötila nousi 6 °C:seen, ja kun 119811 33 suspensio oli jäähdytetty takaisin 4 °C: seen, sitä sekoitettiin yksi tunti. Saostuma otettiin talteen suodattamalla kuivassa typpiätmosfäärissä, se pestiin dikloorime-taanilla (10 ml) ja kuivattiin tyhjössä 20 - 25 °C:ssa, 5 jolloin saatiin 1,4 g haalean keltaista kiinteää ainetta.

Edellä olevan kokeen tuote karakterisoitiin pro-toniydinmagneettiresonanssispektrin (1H-NMR) avulla eti k-kahappo-di: ssä, jossa näkyi H5 arvossa 7,61 ppm ja CH·, arvossa 4,34 ppm. Tuotteen spektri vastasi otsikon yhdistet-io ta, jolla on anti-isomeerikonfiguraatio. Lisäksi tuote kontaminoituu muuttumattomalla hapolla {^H-NMRissä H5 on arvossa 7,07 ppm ja CH3 arvossa 4,06 ppm}, mikä vahvistettiin edelleen pisteväkevöimällä lähtöainehapon kanssa. Esimerkki 17 15 7-amino-3-[(l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef- 3-eemi-4-karboksylaafcti-HI-s'uolaii asylointi käyttäen 2- (2-aminOtiatsol-4-yyli) -2-metoksi*“iminoasetyylikloridxhydro~ kloridia (anti-isomeeri esimerkistä 14)

Esijäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 9 ml asetp- 20 nia ja 3,4 ml vettä 10 °C:ssa, lisättiin 7-amino-3-[ (1- # metyyli-l-pyrrolidionio)metyyli] kef-3-eemi-4-karboksylaat ·· ] I ti-Hl-suolaa (1,13 g, 2,66 mmol). 2-{2-aminotiatsol- 4- *· *: yyli)-2-metoksi-iminoasetyyllkloridi:hydrpkIoridia (1,09 g, ··· ·.· · 4,21 mmol) [valmistettu esimerkissä 14] lisättiin viidessä 25 erässä 0 °C:ssa yhdessä trietyyliamiinln (0,37 ml, *:**: 2,66 mmol) kanssa, pitäen pH arvossa 6,0 - 7,0. Rea k - ;***; tioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 15 minuut- • · · tia. Kokeessa, joka suoritettiin syntyneelle liuokselle korkeapainenestekromatograafissa (grandientti Cie-pylväs, • · · 30 2 % - 2 % asetonitriili 0, 005 M NH4H2RO4:ssä), näkyi 72,4 • · *1* pint a-alaprosent tia ant i - ke f epi imi ä 13,08 minuutin kohdal- • · la, eikä siinä näkynyt havaittavaa svn-kefepiimiä, jota *:**: odotettiin noin 8,5 minuutin retentiöajan kohdalla. Tek.e- ••j mällä happamaksi rikkihapolla pH-arvoon 1,9, saatiin 1,48 • ·* 35 9 anti.-ke f epi imi M sultaattisuolana. Tuotteen identifiointi vahvistettiin ^-NMR-spektroskopian (DMSO-de) avulla, ja 119811 Ή sen mukaan tuote sisälsi 0,58 moolia trietyyliamiinisuo-laa.

Esimerkki 18 7-amino-3- [ (1 -metyy1 i-1 -pyrrolidinio)metyy 1 x]kef-5 3-eemi”4-karboksylaatti-HI-suolan asylointi käyttäen 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2—metoksi-iminoasetyylikloridihydro-kloridia {anti-isomeeri esimerkistä 14)

Esijäähdytettyyn liuokseen, jossa öli 108 ml asetonia ja 40,5 ml vettä 10 ®C:ssa, lisättiin 7-amino-L(1-10 metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef-3-eemi-4-karboksylaat-ti-HI-suolaa (13,5 g, 0,0317 mol). Suspension pH säädettiin arvoon 7,0, käyttäen 2,7 ml 14-%: is ta NH4OH: ta. Lämpötilan ollessa 10 °C, 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- metoksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (13,05 g, 0,015 15 mol) [valmistettu esimerkin 14 menetelmällä] lisättiin vähitellen 60 minuutin aikana, käyttäen samanaikaisesti 14-%: sta NH-jGHrta (27 ml) pH:n pitämiseksi arvossa 6,3 - 7,0 lisäyksen ensimmäisen puoliskon aikana ja arvossa pH 6,1 - 6,6 lisäyksen toisen puoliskon aikana. Reaktioseosta se-20 koitettiin ympäristön lämpötilassa 30 minuuttia. Reak-tioseos puhdistussuodatettiin ja pestiin 6 ml :11a 2:1 ase-

' * toni/vettä, sitten suodokseen lisättiin hitaasti 6 N

• · H2SO4:a (15 ml) pH:n säätämiseksi arvoon 1, 87 - 1,90. Kun · · V · oli sekoitettu yksi tunti, liukenemattomat aineet suoda- *:**: 25 tettiin pois ja suodoskakku pestiin 21 ml: 11a 2:1 aseto *:*·* ni/vettä ja sitten 30 ml: 11a asetonia. Suodokseen lisät- .**·. tiin yksi litra asetonia 30 minuutin aikana ja seosta se- • · · koitettiin 5 - 8 °C:ssa 40 minuuttia. Tuote otettiin tai - t»t*m teen suodattamalla, se pestiin kahdesti 24 ml :11a 4:1 ase- • · · I,! 30 toni/vettä, 60 ml: 11a asetonia ja kuivattiin tyhjössä, • · **;·* jolloin saatiin 20,64 g (116 % stökiömetrinen paino) anti- !/·· kefepiimiä sulfaattisuolana (95,4 % puhdasta HPLC:n mu- *:*·: kaan) . ‘H-NMR-spektri vastasi sellaisen anti-kefepiimin rakennetta, jossa on noin kolme moolia ammoniurnsuolaa.

t t r -J

• · · 35 • · 119811 35

Esimerkki 19

Esimerkin 9 tuotetta (kefepilmi-gvn--isomeeri) ja esimerkin 17 tuotetta (kefeoiimi-anti-isomeeri) vertailtaessa, havaittiin seuraavat erot fysikaalisissa ominaisuuk-S sissa.

Kefepiimi-isomeerien korkeapainenestekromatogra tointi suoritettiin Waters pBondapack Ce -pylväässä (3,9 x 300 mm), käyttäen liuotinsysteemiseosta, jossa oli 1 000 ml vettä, joka sisälsi 2,88 g (0,013 mol) heptaani-10 sulfonihapponatriumsuolaa, ja pH säädettiin arvoon 4,0 etikkahapolla ja 100 ml:11a asetönitriiliä virtausnopeudella 2,0 ml/minuutti. Tuotteet visualisoitiin Water Model 450 -detektorilla, jonka aallonpituus oli säädettävissä ja joka oli säädetty arvoon 254 lambda, jolloin saatiin seu-15 raavat tulokset,

Retentioaika (min,)

Kefepiimin syn-isomeeri (esimerkki ]9) 10,5

Kefepiimin anti-isomeeri (esimerkki 17) 37,8 20 , Kefepiimin svn- ja anti-metoksi-isomeerien, jotka [ [ olivat dihydrokloridisuoloina, NMR-spektrit suoritettiin *. " Bruker AMX-40Ö FT NMR-spektrometrillä, käyttäen deuteroi- itt '.· : tua dimetyylisul f oksidia liuottimena. Annetut kemialliset *!*" 25 siirtymät viittaavat DMSO:hon arvossa 2,49 ppm. Numeroin- *:··: tijärjestelmä, joka ilmenee alla kaavassa ja taulukossa, ·*"· esitetään ainoastaan mukavuussyistä.

·*«

Syn- ja anti-kefepiiml J0 * jqch3

o;*· N

ö 30 nh^jp π fi i \“/S-

*.‘•5 0 J

C02

• · JO

* . 35 * Aaltoviiva kuvaa syn- ja anti-metoksi- iminoisomeereja.

119811 36

Protoni-NMR-kemiallisten siirtymien vertailutaulukko (ppm)

Merkintä Syn-keiepiimi - Anti-kefgoiimi 5 C2-H2 4,04, 3,65 4.02, 3,65 C6-H 5,'33 5,31 C7-H 5,88 5,85 C11-H2 4,60·, 4,31 4,59, 4,30 C12-H3 2,93 2.93 C13-H4 .. 3,7, 3,4 3,6, 3,3 C14-H4 2,10 2,10 C18-H4 6,88 7,57 C20-H3 3,92 4,05 15 NH 9,83 9,56 NH2 S,60 8,70

Kefepiimin kahden edellä esitetyn metoksiimi- 20 isomeerin 'fl-NMR-spektrit ovat huomattavasti erilaisia. , Syn-(Z)-metoksiiml-isomeerln tiätsolirengas CH(18), arvps- * \ sa 6,88 ppm, osuu anti-(E)metoksiimi-isomeerin CH{18) ylä- • · * *· *J kenttään, arvossa 7,57.

·«» * Esimerkki 20 25 7-amino-3-[ (l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef~ *i**: 3 -eemi - 4 -karbok sy laat ti - Hl - suolan vedattömä s s ä ympäristös- ;***: sä tapahtuva asylointi 2-(2“aminotiatsol-4-yyli)-2- *·« metoksi-iminoasatyylikloridihydrokloridia (syn-isomeeria) käyttäen .···. 30 Typpiatmosfäärissä 7-amino-3-[ (1-metyyli-l-pyrrq- • · lidinid)metyyli]kef-3-eemi-~4-karboksylaatti-HI-suola 50 g, * · *.*·; 0,1176 mol) jäähdytettiin -20 °C: seen 500 ml: ssa asetonit- ""· rilliä. Lisättiin trimetyylikloorisilaania (39 ml, 2,5 :·. ekv.) ja trietyyliamiinia (38 ml, 2,3 ekv.), pitäen lämpö- • ** MM; 35 tila -10 °C:ssa tai sen alle. Kun silyyliseosta oli sekoi-• · tet-tu 1,5 tuntia -10 °C:ssa, 2-(2-aminotiatsol~4-yyli) -2- 37 119811 matoksi-imi noasetyylikloridihydro klori dia (syn-i s oroeer i, joka oli saatu esimerkistä 5) lisättiin kahdessa erässä {15 g, 0,05 ekv. kumpikin). LisäLtiin vielä 8 ml (0,5 ekv.) trietyyliamiinia ja 7,5 g {0,25 ekv.) 2-(2-5 aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi -iminoasetyyli kloririihydro-kloridia (syn-isomeeriä). Suspensiota sekoitettiin -10 oC:ssa 15 minuuttia ja sitten lisättiin 150 ml vettä ja sekoitettiin ympäristön lämpötilassa kaiken kiinteän aineen, liuottamiseksi. Äsetoriii.riilikerros erotettiin run-10 saspitoisesta vesiosasta ja vesikerrokseen lisättiin 6 N MCI:a (2,5 ekv.) yhdessä 400 ml:n kanssa asetonia. Liuos ympättiin ja sen annettiin kiteytyä 15 minuuttia.. Lisättiin vielä 1 000 ml asetonia täydellisen kiteytymisen aikaan saamiseksi. Suspensiota sekoitettiin yksi tunti ja 15 sitten se suodatettiin, pestiin 400 milliä asetonia ja kuivattiin noin 40 °C:ssa. Saanto oli 56,51 g (84,1 % stö-kiömetrinen paino) kefepiimiä (98,6 % puhdasta HPLC- analyysin mukaan kefepiimi.2HC1.H2O:na)., joka vastasi ke-tepiimi. 2HC. H2O: ta, jonka on kuvannut Kaplan et ai. 20 US—patentissa. nro 4 910 301, joka on julkaistu 20. maaliskuuta 1990.

, , Esimerkki 21 • « * *· ]· 7-ainino-3- [ {l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli] kef- • · · V * 3~eemi-4-karboksyl&atti-HI-suola» vedettömässä ympäris tö s - *"’· 25 sä tapahtuva asylointi 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-me- *i"! toksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (syn-isomeeri) ·***: käyttäen · ·

Typpiätmosfääpissä 7-amino-3-[(l-metyyli-l-pyrro-lidinio)metyyli] kef-3-eemi-4-karboksylaatti-Hl-suolaa 30 (5,0 g, 0,01176 mol) jäähdytettiin 0-5 °C:seen 50 ml:saa • · *** asetonitriiliä. Lisättiin trimetyylikloorisilaania (3,3 • · \**i ml, 2,2 ekv.) ja N-metyylimorfoliinia (2,7 ml, 2,1 ekv.), pitäen lämpötila < 5 °C:ssa. Silyyliseosta sekoitettiin •\ 1,5 tuntia 0-5 °C:ssa. 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- • ·« 35 metoksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (1,5 g, 0,5 ekv.

kumpikin) lisättiin kahdessa erässä, sitten sekoitat- • · 119811 38 tiin 10 min. Lisättiin vielä kaksi erää 2“(äminötiatsol- 4-yyli)-2-metoksi-iminoasetyyli klori dihydrokloridia (1,5 g, 0,5 e kv. kumpikin) sekä tr ie Ly yli amiini a {0,8 ml, 0,5. ekv. kumpikin)* Suspensiota sekoitettiin ympäristön lämpö- 5. tilassa kaiken kiinteän aineen liuottamiseksi. Orgaaninen kerros erotettiin runsaspi toi sest.a vesi kerroksesi a, johon lisättiin 5 N MCI:a (5 mi, 2,5 ekv.) ja 60 ml asetonia ja sekoitettiin 15 minuuttia kiteytymisen aloittamiseksi.

Lisättiin vielä 80 ml asetonia täydellisen kiteytymisen 10 aikaan saamiseksi. Suspensiota sekoitettiin yksi tunti ja Sitten se suodatettiin, pestiin 50 ml:11a asetonia ja kuivattiin noin 40 °C:ssa. Kefepiimidihydrokloridimonohydraa-tin saanto oli 5,78 g (86,0 % si.ök i ömetri sestä painosta). Esimerkki 22 15 7~amino~3-[(1-metyyli-1-pyrrolidiniojmetyyli]kef- 3-eemi-4-karboksylaatti-HI-suolan vedettömässä ympäristössä tapahtuva asylointi 2-(2-aminotiatsol'-4-yyli)-2- me toks x-iminoasetyy1ikloridihydrokloridia (syn-isoraeeri) käyttäen 20 Typpiatmosfäärissä 7-amino-3-[(1-metyyli-l-pyrro- , lidinio)metyyli]kef-3-eemi“4-karboksylaatti-HI-suolaa (5,0 [ * g, 0,01176 mol) jäähdytettiin 0-5 °C:seen 50 ml:ssa ase- • · « ** *! tonitriiliä. Lisättiin trlmetyylikloorxsilaania (1, 34 ml, *·· 0,90 ekv.) ja heksametyylidisilatsaania (1,8 ml, 0,7 5 *!1J 25 ekv.),, pitäen lämpötila < 5 ,JC:ssa. Silyyliseosta sekoi- *:1: te.tti.in yksi tunti 0-5 °C:ssa. 2- (2-aminotiatsol-4- yyli) -2-metoksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (1,8 g,

• M

0,59 ekv. kumpikin) lisättiin kahdessa erässä, sitten se-koitettiin 10 minuuttia. Lisättiin vielä kaksi erää *·" * ,··*, 30 2- (aininotiatsol-4-yyli) -2-met oksi -iminoasetyy li kloridi- • « "* hydrokloridia (1,5 g, 0,5 ekv. kumpikin) sekä trietyyli- \*·· amiinia (0,8 ml, 0,5 ekv. kumpikin). Suspensiota sekoitet·· « *·1: tiin 0-5 °C:ssa 1,5 tuntia, sitten lisättiin 15 ml vettä ja sekoitettiin ympäristön lämpötilassa kaiken kiinteän • ·· 35 aineen liuottamiseksi. Orgaaninen kerros erotettiin run- · saspitoisesta vesikerroksesta, johon lisättiin 6 N HCl:a 39 119811 (5 itil, 2,5 ekv.) ja 30 ml asetonia ja sekoitettiin 10 minuuttia tuotteen kiteyttämiseksi. Lisättiin vielä 110 ml asetonia täydellisen kiteytymisen aikaan saamiseksi. Suspensiota sekoitettiin yksi tunti ja sitten se suo-5 datettiin, pestiin 75 ml:11a asetonia ja kuivattiin noin 40 °C:ssa. Kefepiimidlhydroklocidimonohydraatin saanto oli 5,45 g (:81/8 % stökiömetrisestä painosta) .

Esimerkki 23 7-amino~3-[(1-raetyyli-1-pyrrolidinio)metyyli 3kef-.10 3-eemi~4-karboksylaatti~HI~suolan vedettömässä ympäristössä tapahtuva asylointi 2-(2-smihofciasöl“4-yyli) -2-mefcqksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (anti-isomeeri esimerkistä 12) käyttäen

Typpiatmosfäärissä 7-amino-3—[(1-metyyli-l-pyrro- 15 lidinio)metyyli]kef~3-eemi-4-karboksylaatti-HT suolaa (2 g, 4/70 mmol) jäähdytettiin -20 °C: seen 20 ml:ssa ase- tonitriiliä. Lisättiin trimetyylikloorisilaania (1,26 ml, 2/1 ekv.) ja trietyyliamiinia (1,32 ml, 2,05 ekv.), pitäen lämpötila -10 °C:ssa tai sen alle. Kun silyyliseosta oli 20 sekoitettu 1,5 tuntia -10 °C:ssa, lisättiin 2-(2- . aminotiat s oi-4-yyli)-2-meto ks i-iminoasetyylikloridihydro- [ ) kloria (anti-isomeeriä, joka oli saatu esimerkistä 12) « · « *· " (1,2 g, 1,49 ekv, ) ja reaktioseosta sekoitettiin yksi • •s V* tunti -10 °C: ssa.

f *"*· 25 Edellä olevan asylointiseoksen tuotetta verrattiin * "**: samanlaiseen vedettömään asylointiseokseen, käyttäen syn- 2- {2.-aminot ia tsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyylikloridi- *·· hydrokloridia, kuten esimerkissä 20. Edellä olevan asy~ Lointireaktion päätuotteen piikki HPLCrssa ei vastannut • · · so haluttua kefepiimiantibioottia. Näyte tuotteesta, joka • * '** saatiin edellä olevasta asylointi reaktiosta, eristettiin * · ·*,*·; krornatografoimalla, ja sen Ή-NMR- ja HPLC-tiedot vastasi- "**: vat esimerkissä 19 kuvatun kefepiimin anti-isomeerin tie- :·! to ja.

• ·· 35 • · 40 119811

Esimerkki 24 7-amino~3-f (1-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef- 3-eemi-4-karboksylaatti-HI-suolan vedettömäs sä ympäris tös-sä suoritettava asylointi 2- (2-aminofeiatsol-4“yyli)-2-5 metoksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia (syn-isomeeri) käyttäen

Typpiatmosfäärissä 7-amino-3-[(1-metyyli-l-pyrro- lidinio)metyylijkef-3-eemi-4-karboksylaatti-HI-suolaa (10,0 g, 0,02252 mol) sekoitettiin 100 ml:n. kanssa dikloo- 10 rimetaania 20 °C:ssa. Lisättiin t r ime t yy1i kloo ri s ilaan ia (2,35 ml, 0,82 ekv.) ja heksametyylidisilatsaania (3,85 ml, 1,62 ekv.) ja silyyliseoksen lämpötila nostettiin 25 °C: seen ja pidettiin 25 - 30 '’G; ssa 1, 5 tuntia. Sllyy- liseös jäähdytettiin -40 ?C:seen ja lisättiin 2- (2- 15 aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyyliklorid.ihydco- kloridia (6,04 g, 0,93 ekv.) 40 minuutin aikana -40 °C - -20 °C:ssa. Lisättiin trietyyliamiinia (1,65 ml, 0,5 ekv.) ja 2- (2-aminotiatsoi ---4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyyliklo- ridihydrokloridia (1,21 g, 0,19 ekv.) ja suspensiota pi- 20 .dettiin -20 °C - 25 °C:ssa 65 minuuttia. Suspensio lisät- . tiin sitten veteen (50 ml) 10 minuutin aikana ja sitä se- | ’ koitettiin ympäristön lämpötilassa yksi tunti kaiken kiin- *. " teän aineen liuottamiseksi. Lisättiin seliittiä (0,5 g) , »·· ·.· : seos suodatettiin ja suodoskakku pestiin dikloorimetaanil- « ’!*"· 25 la (10 ml) . Orgaaninen kerros erotettiin runsaspitoisesta *:·*: vesikerroksesta, johon lisättiin väkevää rikkihappoa ;***· (5, 9 ml, 0,111 mol) viiden minuutin aikana 20 °C - ··· 25 °C:ssa. Sitten lisättiin asetonia (320 ml) runsaspitoi-seen vesi kerrokseen 35 minuutin aikana tuotteen ki täyttä·- Φ · 30 miseksi. Suspensiota pidettiin 20 minuuttia ympäristön • f *** lämpötilassa ja sitten se jäähdytettiin 0-5 °C:seen tun- • · :,**i niksi. Suspensio suodatettiin, pestiin asetonilla (150 ml) ***** ja kiinteä aine kuivattiin noin 40 °C:ssa. Kefepiimisul- ·*] faatin saanto oli 11,54 g (84,9 % stökiömetrisestä painos- t ·· 35 ta) .

• · 41 119811

Esimerkki 25 7-amino-3"[(l-xnetyyli-l-pyrrolidinicOmetyylilkef-3-eemi~4-karbokaylaatti“HI“Suolan vedettömässä ympäristössä tapahtuva asylointi 2-(2-aminotiäfcsol-4-yyli)-2-5 raetoksi-iminoasetyylikloridihydrokloridia {syn-isomeeri) käyttäen

Typpi atmosfäärissä 7-amino-3- [ {1-metyyli-l~pyrro~ 1 i d iti i o} me t y y li) ke f ~3-eemi-4-karbokr>y 1 aatti-HI-suolaa (10,0 g, 0,,02:252: mol) sekoitettiin 100 ml:n kanssa dikloo- 10 rimetaania 20 °C:ssa. Lisättiin trimetyyiikloorisilaania (2,35 ml, 0,82 ekv.) ja heksametyylidisi 1 atsaarri a (3,85 ml, 1,62 ekv.) ja si.lyyliseoksen lämpötila nostettiin 25 °C:seen ja pidettiin 1,5 tuntia 25 - 30 °C:ssa. Silyy- liseos jäähdytettiin -40 °C: seen ja 2-(2-aminotiatsol-4- 15 yyli)-2-metoksi-iminoa s et yy1i k1or ί d ihydrokloridia (6,04 g, 0,93 ekv.) lisättiin 40 minuutin aikana -40 °C - "20 °C:ssa. Lisättiin trietyyliamiinia (1,65 ml, 0,5 ekv.) ja 2- (2-aminot.i atsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyyliklo- ridihydrokloridia (1,21 g, 0,19 ekv.) ja suspensiota pi- 20 dettiin -20 °C - 25 °C:ssa 45 minuuttia. Suspensio lisät- . ti in veteen (45 ml) 10 minuutin aikana ja sitä sekoitet- , t ti in ympäristön, lämpötilassa yksi tunti kaiken kiinteän • · · *· ** aineen liuottamiseksi. Lisättiin seliittiä (0,5 g) ja seos V * suodatettiin seliittikerroksen {1,0 g) läpi. Orgaaninen ***** 25 kerros erotettiin runsaspitoisesta vesi kerroksesta. Vesi- ”*'! kerrosta sekoitetiin kahdesti hiilen (1,0 g kummallakin :*’*: kerralla) kanssa ja se suodatettiin. Yhdistetty hii- ·»· lisuodoskakku pestiin liuoksella, jossa oli vettä (10,5 •V. ml), 12 N HCl:a (5 ml, 2,5 ekv.) ja asetonia (20,5 ml).

• · .···. 30 Sitten lisättiin asetonia (320 ml) yhdistettyyn suodokseen • f '1* ja pestiin 35 minuutin ajan tuotteen kiteyttämiseksi. Sus- *.**: pensiota pidettiin 30 minuuttia ympäristön lämpötilassa ja *"*: sitten se jäähdytetiin 0 °C:seen tunniksi. Suspensio suo- !*, datettiin, pestiin 80 ml:lla asetonia ja kiinteä aine kui- * ·φ 35 vattiin noin 4 0 °C:ssa. Kefeplimidihydrokloridimonohydraa" tin saanto oli 10,25 q (76,3 % stökiömetrisestä painosta).

• · 119811 A 2

Esimerkki 26

Syn-2- (2-3minotiatsOl^4-yyli) -2-metoksi-imino-etikkahappohydrokloridisuola

Syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-5 iminoetikkahappoa (85,3 g, 424 mmol) dikloorimetaanissa (570 ml) jauhettiin typpiatmosfäärissä 15 minuuttia se-koittimessa. Syntynyt hienojakoinen suspensio laimennettiin dikloorimetaaniIlo (100 ml) ja siirrettiin typpiatmosf äärissä 1 litran vaipalliseen Buchi-reaktioastiaan. Re-io aktioastia paineistettiin typeilä [34 kPa(5 psi)] ja seosta sekoitettiin kierrosnopeudeila 375 rpm ja se jäähdytettiin -2 °C:seen. Reaktioastian päätilaan johdettiin vety-kloridia (15, 4 g, 424 mtnol) 0,2 g minuutissa. Lämpötila nousi 2 °C. Seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia 15 0 °C: ssa, se suodatettiin ja pestiin: dikloorimetaani 1 La (350 ml) typpiatmosfäärissä. Kiinteää ainetta kuivattiin tyhjössä 45 °C:ssa 18 tuhtia. Otsikon yhdiste oli harmahtavan valkoista jauhetta (110,9 g, 111 % korjaamaton saanto) .

20 Anal. Lasketut arvot yhdisteelle GgHaNiQsSCl: . c 30,32; H 3,39; N 17,68; S 13,49; Cl 14,91;

Saadut arvot; * · :· ·ί C 29,37; H 3/17; N 16,34; S 12,70, Cl 16,99.

··· V : lH-NMR (DMSO-ds) δ: 4,05 (s, 3H, CH3) , 5,9 (s, ***" 25 15 mooli-% jäljellä olevaa CH2CI2: ta), 7,1 (s, 1H, C-5 H) , *ϊ**ϊ Signaaleja havaittiin myös arvossa 4,1,8 (s, 3H, CH3) ja ;***: 7,7 (s, 1H, C-5 H), vastaten noin 2-%; ista anti-isomeeria.

• · a ........

Esimerkki 27

Syn-2- (2-aminofciatsol-4-yyli) -2-raetoksx-irainoetik- ,···, 30 kahappohydrokloridisuola • · '!* Syn-2 - (2-aminotiatsol-4 yyli) -2-metcks.i- • m ·,**: iminoetikkahappo (25 g, 124 mmol), joka; oli asetonitrii- *·**· Iissä (125 ml) typpiatmosf äärissä, tiirattiin 1,39 M liu- :·. oksella, jossa oli HCl:a asetonitriilissä (89,2 ml, 123,9 • ·· 3.5 mmol) ja pidettiin 10 ÖC - 15 °C;ssa. Seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia 10 - 15 °C;ssa, se suodatettiin ja pes- 119811 43 tiin asetonitrillillä (20Ö ml) typpiatmosiäärissä. Kiinteää ainetta kuivattiin tyhjössä 45 °C:ssa kolme tuntia. Otsikon yhdiste oli harmahtavan valkoista jauhetta (29,5 g, 97/4 % korjaamaton saanto).

5 !H-NMR (CD3OD) 5: 2/05 (s, 13 paino-%, jäljelle jäänyt asetonitriili), 4/1 (s, 3H, CH3) , 7,1 (s, 1H, C-5 H) . Signaaleja nähtiin myös arvossa 4,2 {s, 3H, CH3) ja 7,8 (s, 1H, C-5 H), vastaten noin 0,5 % anti-isomeeriä. Esimerkki 28 10 Syn-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-mefcoksi-iminoase- tyy1ikloridihydrokloridi

Syn-2-(2-aminot iatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoetikkahappohydrokloridia {56, 25 g, 210 mmol), joka sisälsi noin 11 paino-% jäljelle jäänyttä asetonitrilliä) 15 dikloorimetaanissn {450 ml), jauhettiin typpiatmosiäärissä kolme minuuttia sekoittimessa, sitten se jäähdytettiin -35 °C:seen ja siirrettiin typpiatmosiäärissä viiden minuutin ajan hyvin sekoitettuun suspensioon, jossa oli Vilsmeierin reagenssia ja joka myös oli -35 °C:.ssa. Vils-20 meierin reagenssin suspensio valmistettiin siten, että li- . sättiin oksalyylikloridia (28,2 g, 221 mmol) vähitellen * · · · · liuokseen/ jossa oli dimetyyliformamidia (16,89 g, 231 mmol) dikloorimet.äänissä (300 ml) 0 °C: ssa, sen jälkeen ·** ·’ jäähdytettiin -35 °C:seen. Lisäyksen aikana reaktiolämpö- *"*: 25 tila nousi -28 öC:seen. Lisäyksen jälkeen reaktioseos ym- ·:**: pättiin tuotteella. Kun seos pii edelleen ollut 2,5 tuntia -28 °c - -35 °C:ssa, se suodatettiin ja suodoskakku pe s- ··· tiin dikloorimetaaniila (200 ml) typpiatmosfäärissä. Typ-peä johdettiin kakun läpi 30 minuutin ajan, sitten kiinte- • · · 30 ää ainetta kuivattiin tyhjössä huoneenlämpötilassa 12 tun- • * tia. Otsikon yhdiste saatiin harmahtavan valkoisena jau-V*i heena (42,9 g, 72 % saanto).

·*.·*: lH-NMR (CD3OD) δ: 4,06 (s, 3H, CH3) , 7,12 (s, 1H, C-5 H). Signaaleja havaittiin myös arvossa 7,18, vastaten • · · 35 noin 5 % happohydrokloridisuolaa,, sekä arvossa 7,80 (s, * * · * · C-5 H), vastaten noin 0,5 % anti-isomeeriä. Kun oli muo- 119811 44 dostettu johdannainen dietyyliami inin kanssa asetonitrii-lissä, HPLC-analyysissä näkyi otsikon yhdiste (syn-isomeeri, sen dietyyliamidijohdoksena) ja sen retentioaika oli 9,6 minuuttia, happohydrokioridisuola, jonka retentio-5 aika oli 2,8 minuuttia ja anti-isomeeri (sen dietyylismiini johdoksena) , jonka retentioaika oli 16,4 minuuttia. Syn-isomeeri:happohydrokioridisuola:anti-isomeeri -suhde oli 90:5:<1.

Esimerkki 29 10 syn-2- (2-aminofciatsol-4-yylx) -Ä-metöksi-iminoase- tyylikloridihydrokloridi

Syn-2-(2-ami.notiatsol -4 -yyli) -2-metoksi-imino-etikkahappoa (84,7 g, 421 mmol) dikloorimetäänissä (570 ml), jauhettiin typpiatmosfäärissä 20 minuuttia sekoitti-15 messa. Syntynyt hienojakoinen suspensio laimennettiin di-kloorimetaanilla (100 ml) ja siirrettiin typpiatmosfäärissä 1 litran vaipaliiseen Buchi-reaktioastiaan. Reaktioas-tia paineistettiin typellä [34 kPa{5 psi)] ja seosta sekoitettiin nopeudella 375 rpm ja se jäähdytettiin 20 2 °C: seen. Vety kloridia (15,3 g, 421 mmol) johdettiin re- . aktioastian päätilaan 0,2 g minuutissa. Lämpötila nousi 2 °C. Seosta sekoitettiin, vielä 30 minuuttia 0 °C: ssa, sx- * * · *· " tä jauhettiin kolme minuuttia sekoittimessa, sitten se ··· V · jäähdytettiin -35 °C:seen ja siirrettiin typpiatmosfääris- ·:**: 25 sä viiden minuutin aikana hyvin sekoitettuun suspensioon/ *:**: jossa oli Vilsmeierln reagenssia, myös -35 °C: ssa. Vils- meierin reagenssisuspensio valmistettiin siten, että li- * · · sättiin oksalyylikloridia (56,1 g, 439 mmol) vähitellen liuokseen, jossa oli dimetyyliformamidia (33,8 g, 4 62 * · l.'.' 3Q mmol) dikloorimetaanissa (880 ml) 0 °C: ssa, sen jälkeen se • * 7 jäähdytettiin -35 °C:seen. Lisäyksen aikana reaktiolärnpö- • « tila nousi -28 °C:seen. Lisäyksen jälkeen reaktioseos ym-*i*’l pattiin tuotteella.. Kun seos oli edelleen. Ollut 2,5 tuntia • \ -28 QC - -35 °C:ssa, se suodatettiin ja suodoskakku pes- • ** 35 tiin dikloorimetaanilla (350 ml) typpiatmosf äärissä. Typ- * · peä johdettiin kakkuun 30 minuutin ajan, sitten kiinteää 45 119811 ainetta kuivattiin tyhjössä huoneenlämpötilassa 12 tuntia. Otsikon yhdiste saatiin harmahtavan valkoisena jauheena (95,2 g, 89 % korjaamaton saanto).

Anal. Lasketut arvot yhdisteelle C6H7N3O2SCI: 5 C 28,14; H 2,76; K) 16,41; S 12,52; Cl 27,68;

Saadut arvot: C 28,11; H 2,62; N 16,20; S 12,22; Cl 26,74. lH-NMR (CD3OD) δ: 4,06 (s, 3H, CH3) , 7,12 (s, 1H, C-5 H). Signaaleja oli nähtävissä myös aivossa 7,18 (s, 10 C-5 H), vastaten noin 4 % happohydrokloridisuolaa, ja ar vossa 7,80 (s, C-5 H), vastaten noin 2 % anLi-isomeeria, Sen jälkeen, kun oli muodostettu johdos dietyyliamiinin kanssa asetonitriilissa, HPLC-analyysissä näkyi otsikon yhdisteen (sen dietyyliamidijohdoksena), jonka retentio-15 aika oli S,6 minuuttia, lähtöainehapon, jonka retentioaika oli 2,8 minuuttia ja anti-isomeerin (sen dietyyliamidijohdoksena) , jonka retentioaika oli 16,4 minuuttia. Syn-isoineeri: lahtöainehappo:anti-isomeeri -suhde oli 90:4 :2. Esimerkki 30 20 Kefepiimidihydrokloridimonohydraatin muuttaminen , kefepiimidihydroklorididihydraatiksi I ] Kefepiimidihydrokloridimonohydraattia (300 g, puh- • · · *· *· taus HPLC:n mukaan 99,9 %, KP 3,8 %} liuotettiin deioni- *.* * soituun veteen (1 200 ml). Lisättiin 6 N kloorivetyhappoa *·**: 25 (132 ml, 1,5 ekvivalenttia). Liuos suodatettiin ja pestiin *:·*: deionisoidulla vedellä (300 ml) .

:***: Suodatettuun liuokseen lisättiin asetonia (1 500 • · · ml). Asetonia lisättiin vielä tipoittain (4 000 ml) 20 mi- .V. nuutin aikana. Liuosta pidettiin sameutumispisteessä, kun- .···, 30 nes muodostui raskaita dihydraattikiteitä (mikroskooppisen • ♦ *1* analyysin mukaan neulamaisia kiteitä; ymppääminen valin- • · naista sameutumispisteessä) . Asetonia lisättiin edelleen (8 000 ml) 25 minuutin aikana. Paksua suspensiota sekoi- tettiin 25 °C:ssa yksi tunti.

• ·« \tmm· 35 Kidemuoto vahvistettiin dihydraatiksi (neulamaisia ♦ · kiteitä) mikroskooppisella analyysillä vertailemalla ki- 46 119811 teitä autenttiseen näytteeseen. Suspensio suodatettiin ja pestiin asetonilla (2 x 1500 ml) . Kakkua kuivattiin 40 0C.:ssa tyhjössä 15 tuntia. Kefepiimidihydroklorididi^ hydraatin saanto oli 305,10 g (968,6 %), puhtaus oli S H.PLC:n mukaan 99,0 %, KF 6,5 %.

Esimerkki 31

Kefepiimidihydroklarididihydraatin muuttaminen ke-fepiimidihydrokloridimonohydraatiksi

Kefepiimidihydroklorididihydraattia (15,0 g, puh·· 10 taus HPLC: n mukaan 99,2 %, KF 6,4 %) liuotettiin de ionisoituun veteen (95 ml). Lisättiin 6 N suolahappoa (0,9 ml, 0,2 ekvivalenttia). Liuos suodatettiin 0,45 mikronin suodattimen: läpi.

Asetonia (200 ml) lisättiin tipoittain suodatet- 1.5 tuun liuokseen 20 minuutin aikana, jolloin saatiin samea liuos (valinnainen ymppäys tässä vaiheessa). Pitämättä liuosta tässä tilassa, lisättiin tipoittain asetonia (400 ml) 40 minuutin aikana. Suspensiota jäähdytettiin jäähauteella 0 °C - 5 °C:ssa yksi tunti.

20 Kidemuoto vahvistettiin inonohyd ra a t i ks i mikro- . skooppisella analyysillä, vertaamalla kiteitä autent- [ m tiseen näytteeseen. Suspensio suodatettiin ja pestiin ase- · · *· " tonj 11a (2 x 60 ml) . Kakkua kuivattiin 40 °C:ssa tyhjössä *.* * 15 tuntia. Kefepiimidihydrokloridimonohydraatin saanto ·' 25 oli 13,28 g (91,8 %), ja kiderakenne vahvistettiin samaksi "**: kuin rakenne, jonka on kuvannut Kaplan et ai. US- :[**: patentissa nro 4 910 301.

Esimerkki 32 7“ [2- (2“aminotiatsol-4-yyli) -2- (2) -matoksi- *·*·* .*··, 30 iminoasetamido] -3- [(l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli]kef- • · "·' 3-eemi-4-karboksylaattidihydrokloridihydraattien valmistus • · *,**: In.ertissä atmosfäärissä, ympäristön lämpötilassa, ’!*" 7-amino-3- [ (l-metyyli-l-pyrrolidinio)metyyli] kef-3-eemi-4- ·♦, karboksylaattihydrojodi dia (14, 67 g; 0,0345 mol) suspen- • · · 35 soitiin dikloorimet·ääniin (150 ml) . Suspensioon lisättiin trimetyylikloorisilaania (4,7 ml) ja heksametyylidisilat- • · 119811 47 saania (7,7 ml) ja seosta lämmitettiin 25 - 30 °C:seen

1,5 tuntia. Reaktio jäähdytettiin sitten noin -50 °C: seen ja syn-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyyJ. i-kloridihydrokloridia (7,24 g; 0,0283 mol) lisättiin koi-5 messa erässä 35 minuutin aikana, samalla kun lämpötila nousi vähitellen -30 °C:seen. Lisättiin trietyyliamiinia (1,47 ml) ja 1,78 g (0,0069 mol) syn-2- (2-am:i.notiatsol-4-yyli)-2~metoksi-iminoasetyylik]oridihydrokloridia ja asy-lointia jatkettiin -20 °C - -25 eC:ssa noin yhden tunnin 10 ajan. Kun reaktio oli päättynyt (HPLC:n mukaan), seos lämmitettiin -5 °C:seen ja sitten lisättiin 56 ml vettä ja 10 ml dimetyyli asetamidia. Reaktiosuspensiota sekoitettiin 25 °C:ssa, kunnes kiinteät aineet olivat liuenneet. Faasit erotettiin ja vesifaasi puhdistettiin suodattamalla. Vesi-15 faasista poistettiin väri aktiivihiilellä (3 g), se suodatettiin ja suodos jaettiin kahteen yhtäsuureen osaan. Menetelmä A

Toinen osa runsasp.it öistä vesisuodosta tehtiin happamaksi 12 N suolahapolla (11,7 ml, 0,14 mol). Suspen- 20 sio ympättiin kefepiimidihyriroklorididihydraatilla (0,5 g) . ja suspensiota kuumennettiin 40 °C:ssa yksi tuni, sitten [ | sitä pidettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Seos laimon- • » · *· *· nettiin asetonilla (126 ml) , sitä sekoitettiin huoneenläm- • Φ* • · · V* pötilassa 0,5 tuntia, sitten sitä jäähdytettiin 0 ·' 25 5 °C: ssa yksi tunti. Tuote otettiin talteen suodattamalla, "*’ϊ se pestiin asetonilla ja kuivattiin tyhjössä 45 «Crssa.

:***: Otsikon yhdisteen dihydroklorididihydraattimuoto (kiteet ··· neulamaisia) saatiin 96,3 % puhtaudella (9,11 g; 87,6 % stökiömetrinen painosaanto) . Vesipitoisuus Karl Fischerin ,···. 30 analyysin mukaan oli 6,3 % ja FT-IR- (diffuusiheijastusky- *1* ky KBr:n kanssa) analyysi osoitti absorbanttipiikit 3574 • i cm_1:ssä ja 3432 cm-1: ssa.

*

***’: Menetelmä B

Toinen osa runsaspitoista vesisuodosta tehtiin « · · tmft. 35 happamaksi 6 N suolahapolla (15 ml; 0,09 mol), se laimen-nettiin asetonilla (280 ml) 20 minuutin aikana, sitten si- 119811 48 tä jäähdytettiin O - 5 °C:ssa yksi tunti. Suspensio suodatettiin, pestiin asetonilla ja kuivattiin tyhjössä 4 5 °C:ssa. Otsikon yhdisteen dihydrokloridimonohydraatti-muoto (raemaisia kiteitä) saatiin 95,5 % puhtaudella {8,38 5 g; 83,1 % stökiömetrinen painosaanto). Vesipitoisuus oli Karl Fischerin analyysin mukaan 3,9 %.

• • · • » · • it • · M· • · * * · * 9 • · • • 9 9 9 9 9 9 9 9 999 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 999 9 9 9 · 99 9 9 9 • 9 9 9 · 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9999 9 9

Claims (8)

119811

1, Menetelmä, jolla valmistetaan 2-(2-amino-tiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoasetyyliklqpidihydrQklori- 5 din syn-isomeeri, joka sisältää vähemmän kuin noin 5 % anti "isomeeriä, tunnettu siitä, että saatetaan 2-(.2-sminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi - iminoetikkahapon s. vn-iso meerin vedetön happohydrokloridisuola reagoimaan seoksen kanssa, jossa on vähintään yksi mooliekvivalentti oksalyy-lö li kloridia ja vähintään, yhdestä mooliekvivalentista pieneen ylimäärään d ime t y y 1 i. f o r mami d i a suhteessa mainitun ok-salyylikloridin määrään, inertissä orgaanisessa liuotti-messa, lämpötilassa, joka on vähemmän kuin -10 «C.

2, Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 1.5 tunnettu siitä, että oksal yylikloridin määrä on 1,0 - noin 2,0 mooli e kvi va 1 ent t ia ja dimetyyliformamidin määrä on vähäinen ekvimolaarinen ylimäärä mainitun oksa-lyylikloridin määrän suhteen.

3, Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että oksalyylikloridin määrä on 1,05 mooliekvivalenttia ja dimetyyliformamidin määrä on 1,075 ekvivalenttia mainitun vedettömän happohydrokloridisuolan • · määrän suhteen. :T:

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, ····· 25 tunnettu siitä, että lämpötila on noin -15 °0 - -40 °C.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, .···. tunnettu siitä, että inertti Orgaaninen liuotin on • · asetonif.riili tai dikloorimetään!.

.. 6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-5 mukainen me- • « · if 30 netelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2- (2-• · *···* aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaseLyy 1 ikloridihydro- i\: kloridin syn-isomeeri, joka sisältää vähemmän kuin noin ····· 1 % anti-isomeeriä.

»,* 7. 2-(2-aminatiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoase~ • ” 35 tyylikloridihydrokloridin syn-isomeeri, tunnettu sii- t t 119811 tä, että se sisältää vähemmän kuin noin 5 % anti- isomeeriä.

8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen syn-lsomeeri, tunnettu siitä, että se sisältää vähemmän kuin noin 5 1 % anti-isomeeriä ·1··· • * · • · » * M • · ·«· ♦ · · • · · i • · ··»·· • · • · • · ··· • · * · · • « · • « ··# • 1 • · ·· • · t · · • ·1 • 1 ·**·· • · ·· • · • ·« 119811