ES2712086T3 - Agente para tratar la fibrosis renal - Google Patents

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Yasunobu Tanaka
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Abstract

Composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de nefritis diabética, comprendiendo la composición un portador que comprende un retinoide que estimula la administración de una sustancia a las células productoras de matriz extracelular en el riñón y un fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de células productoras de matriz extracelular en el riñón, en la que el portador tiene la forma de un liposoma, y la razón molar de retinoide y lípido contenidos en el liposoma es de 8:1 a 1:4.

Description

DESCRIPCION
Agente para tratar la fibrosis renal
[Campo tecnico]
La presente invencion se refiere a una composicion para tratar la nefritis diabetica utilizando un portador dirigido a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon.
[Antecedentes de la tecnica]
En los ultimos anos, debido a grandes cambios en el estilo de vida, principalmente con respecto a los habitos alimenticios, ha aumentado la prevalencia de enfermedades relacionadas con el estilo de vida como hipertension arterial y diabetes, y acompanando a esto, ha ido aumentando el riesgo de enfermedad renal y, por consiguiente, insuficiencia renal.
El rinon es un organo importante para mantener la homeostasis del medio interno mediante excrecion de productos de desecho o regulacion de lfquidos corporales / electrolitos / equilibrio acido-base, etc. El rinon controla las concentraciones de diversos compuestos en la sangre, tales como las de hidrogeno, sodio, potasio y silicio, y excreta los productos de desecho en forma de orina. Cualquier deterioro de la funcion renal da lugar a la posibilidad de interferencia en la capacidad del cuerpo para eliminar suficientemente metabolitos de la sangre y tambien la posibilidad de destruccion del equilibrio hidroelectrolttico en el cuerpo. En su forma mas grave, el deterioro o fallo de la funcion renal puede ser mortal.
Ademas, aparte de las funciones mencionadas anteriormente, el rinon tiene otras funciones tales como inmunidad celular, secrecion endocrina y metabolismo. El rinon como organo endocrino lleva a cabo la produccion de eritropoyetina, que regula la produccion de globulos rojos o de 1,25-dihidroxivitamina D3, que es una forma activa de la vitamina D3, la secrecion de renina y eritropoyetina, que son factores de regulacion de la presion sangumea, y la secrecion de cinina, calicrema, prostaglandina, etc.
La insuficiencia renal cronica significa un estado en el que las funciones renales anteriores gradualmente se deterioran irreversiblemente y no puede mantenerse la homeostasis de un organismo vivo. Se sabe que la insuficiencia renal cronica esta provocada por nefropatfa diabetica, glomerulonefritis cronica, nefroesclerosis maligna, poliquistosis renal, etc. Todas las enfermedades renales estan acompanadas de fibrosis del rinon y conducen finalmente a la insuficiencia renal terminal. En particular, ya que el deterioro cronico de la funcion renal depende fuertemente de la evolucion de la fibrosis del rinon, se piensa que inhibir la evolucion de la fibrosis puede dar como resultado la supresion de la evolucion de la insuficiencia renal cronica.
En general, la fibrosis renal esta acompanada de una respuesta inflamatoria debido a disfuncion de celulas endoteliales, y la matriz extracelular que finalmente se produce en exceso provoca fibrosis. Por ejemplo, en la glomeruloesclerosis, debido a la disfuncion de celulas endoteliales glomerulares, se secreta una citocina tal como una quimiocina o un factor de crecimiento, y monocitos o macrofagos migran para realizar una mejora de la respuesta inflamatoria. Por consiguiente, se produce activacion, proliferacion y transformacion de celulas mesangiales, se produce una cantidad en exceso de matriz extracelular a partir de celulas productoras de matriz extracelular tales como celulas mesangiales, se produce fibrosis, y esto conduce a glomeruloesclerosis.
En particular, la nefropatfa diabetica es el mayor factor que conduce a insuficiencia renal cronica, y una de las complicaciones de la diabetes. La nefropatfa diabetica se caracteriza por hiperplasia e hipertrofia del mesangio glomerular, y esto se debe principalmente a un aumento de la acumulacion de una protema ECM tal como colageno tipo I o tipo IV, fibronectina o laminina.
Una vez que se produce un grado grave de insuficiencia renal cronica, es imposible la recuperacion, y se producira uremia a no ser que se lleve a cabo un tratamiento tal como dialisis. Como terapia contra la insuficiencia renal cronica, se lleva a cabo una dieta tal como una dieta baja en protemas o un dieta con restriccion de sal, la administracion de un farmaco antihipertensor con el fin de aliviar la carga en el glomerulo, etc.
Ademas, para la insuficiencia renal cronica, segun sea necesario, se lleva a cabo un tratamiento de complementacion con 1,25-dihidroxivitamina D3 o eritropoyetina, que secreta el rinon, o un tratamiento para mantener apropiadamente la regulacion de la presion sangumea, que es una funcion importante del rinon.
Como quimioterapia, con el fin de suprimir la evolucion de la insuficiencia renal, se usa un inhibidor de la enzima convertidora de la angiotensina o un antagonista del receptor de la angiotensina II. Se supone que tienen un efecto protector renal per se ademas de suprimir la evolucion de la insuficiencia renal disminuyendo la presion sangumea glomerular. Sin embargo, es necesario cuidar su administracion ya que cuando desciende demasiado la presion sangumea glomerular, la cantidad de flujo sangumeo glomerular en cambio disminuye y se produce insuficiencia renal prerrenal.
Como inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina existen captoril, enalapril, delapril, imidapril, quinapril, temocapril, perindopril erbumina, lisinopril, etc., y como antagonistas del receptor de la angiotensina II existen losartan, valsartan, candesartan cilexetilo, telmisartan, olmesartan medoxomilo, irbesartan, etc.
Distinto de lo anterior, con el fin de mejorar los smtomas de uremia y retrasar el comienzo de la dialisis, se usa Kremezin como carbono adsorbente que adsorbe sustancias daninas en el intestino. Ademas, con el fin de evitar la disnea, entumecimiento en las extremidades, arritmia, etc. debido a un aumento de potasio en la sangre, se usa poliestirensulfonato de calcio como resina de intercambio ionico que adsorbe potasio en el intestino y se excreta en las heces.
Cuando la concentracion en suero de creatinina, que es un metabolito derivado de musculo esqueletico, supera de 5 a 7 mg/dl, puede considerarse una terapia de dialisis artificial tal como dialisis peritoneal, hemofiltracion, o dialisis sangumea, o un trasplante de rinon. Sin embargo, la dialisis sangumea impone una gran carga en la vida de una persona debido a tener que visitar un hospital tres veces a la semana y estar allf confinado durante de 4 a 5 horas por tratamiento, y con respecto al trasplante de rinon, ya que hay pocos donantes de rinon, solo un numero muy reducido de los pacientes que desean uno pueden recibir un trasplante de rinon. Ademas, el promedio de esperanza de vida de pacientes con insuficiencia renal despues de comenzar la dialisis es aproximadamente solo la mitad de la poblacion normal.
En estas circunstancias, se ha puesto gran cantidad de esfuerzo en investigacion en el desarrollo de un agente para tratar la fibrosis renal. Como resultado, se ha informado que, por ejemplo, un agente medicinal que actua sobre el sistema renina-angiotensina-aldosterona tal como un inhibidor de la enzima convertidora de la angiotensina, un antagonista del receptor de la angiotensina II AT1, un antagonista de aldosterona, o un inhibidor de renina, un agente medicinal que actua sobre el sistema oxido mtrico tal como un antagonista del receptor de endotelina, un bloqueantea, un bloqueante p, un agente inmunosupresor, un inhibidor del metabolismo de matriz extracelular, un inhibidor del sistema de complemento, un inhibidor de quimiocina, o un inhibidor de fosfodiesterasa 5, y un agente medicinal tal como un inhibidor de NFkB, un inhibidor de Rho, un inhibidor de p38 MAPK, un inhibidor de PI3Ky, un inhibidor del factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), calicrema, relaxina, un antagonista del receptor de interleucina 1, factor morfogenetico de hueso 7 (BMP- 7), anticuerpo anti-factor de necrosis tumoral a (anticuerpo anti-TNFa), o anticuerpo anti-factor de crecimiento derivado de las plaquetas D (anticuerpo anti-PDGF-D) tienen un cierto grado de exito en un ensayo clmico o en un animal modelo de fibrosis renal (Documento distinto a patente 1).
Ademas, ha habido muchas solicitudes de patente y, por ejemplo, se han solicitado como farmacos para tratar la fibrosis renal patentes referidas a un inhibidor de la enzima convertidora de la angiotensina (Documento de patente 1), un antagonista del receptor de la angiotensina II (Documento de patente 2), un inhibidor del factor de crecimiento p (TGF-P) transformador (Documento de patente 3), un inhibidor de la produccion de inhibidor del activador del plasminogeno 1 (PAI-1) (Documento de patente 4), un agonista selectivo del receptor de prostaglandina 4 (Documento de patente 5), un inhibidor de la smtesis de colageno tipo I (Documento de patente 6), un inhibidor de sulfotransferasa de proteoglucano de sulfato de condroitina (Documento de patente 7), un inhibidor de reductasa de epoxido de vitamina K (Documento de patente 8), un inhibidor de la formacion de productos finales de glicacion (Documento de patente 9), un agonista del receptor 2A de adenosina A2A (Documento de patente 10), un antagonista del receptor de endotelina (Documento de patente 11), un inhibidor del VEGF (Documento de patente 12), etc. Sin embargo, ninguno de estos agentes medicinales es satisfactorio, y se necesita un desarrollo adicional de agentes para tratar la fibrosis renal. Los documentos de patente 16 y 17 describen composiciones que pueden incluir un portador, agente seleccionador de dianas y agente terapeutico. El agente terapeutico puede tener una actividad terapeutica tal como inhibir fibrosis dentro de un organo o tejido seleccionados como diana o inhibir el crecimiento de una celula cancerosa. El documento de patente 18 describe un portador de farmaco espedfico para astrocitos que contiene un derivado retinoide y/o un analogo de vitamina A como constituyente; un metodo de suministro de farmacos con el uso de los mismos; un farmaco que contiene los mismos; y un metodo terapeutico con el uso del farmaco. Uniendo un portador de farmaco a un derivado retinoide tal como vitamina A o un analogo de vitamina A o encapsulando el mismo en el portador de farmaco, puede suministrarse un farmaco para uso terapeutico espedficamente para astrocitos. Como resultado, una enfermedad relacionada con astrocitos puede prevenirse o inhibirse de manera eficiente y eficaz al tiempo que se minimizan los efectos secundarios. Como farmaco que inhibe la actividad o el crecimiento de astrocitos, por ejemplo, puede encapsularse en el portador de farmaco un ARNip contra HSP47, que es una chaperona molecular espedfica para colageno. Por tanto, la secrecion de colagenos de tipo I a tipo IV puede inhibirse al mismo tiempo y, a su vez, puede inhibirse eficazmente la fibrosis. El documento de patente 19 proporciona composiciones, metodos y kits para modular la expresion de genes diana, particularmente protema de choque termico 47 (hsp47). Las composiciones, metodos y kits pueden incluir moleculas de acido nucleico (por ejemplo, acido nucleico interferente pequeno (ANip), ARN interferente pequeno (ARNip), ARN bicatenario (ARNbc), micro-ARN (miARN) o ARN en horquilla corto (ARNhc)) que modulan un gen que codifica hsp47, por ejemplo, el gen que codifica hsp47 humana. La composicion y metodos divulgados a este respecto tambien pueden usarse en trastornos y condiciones de tratamiento asociados con hsp47 tal como fibrosis hepatica, fibrosis pulmonar, fibrosis peritoneal y fibrosis renal.
[Documentos relacionados con la tecnica]
[Documento de patentes]
[Documento de patente 1] Patente estadounidense n.° 5238924
[Documento de patente 2] Documento JP, A, 07-002667
[Documento de patente 3] Documento JP, A, 2004-043459
[Documento de patente 4] Documento JP, A, 2009-007258
[Documento de patente 5] Documento JP, A, 2001-233792
[Documento de patente 6] Documento JP, A (PCT) 2004-534760
[Documento de patente 7] Documento JP, A, 2009-292725
[Documento de patente 8] Documento JP, A, 2010-077101
[Documento de patente 9] Documento JP, A, 2009-029750
[Documento de patente 10] Documento JP, A (PCT) 2007-536241
[Documento de patente 11] Documento JP, A (PCT) 2006-519817
[Documento de patente 12] Documento JP, A, 2007-099641
[Documento de patente 13] Solicitud de patente internacional WO 2006/068232
[Documento de patente 14] Documento JP, A, 2009-221164
[Documento de patente 15] Documento JP, A, 2010-59124
[Documento de patente 16] Documento WO 2010/014117 A1
[Documento de patente 17] Documento WO 2009/036368 A2
[Documento de patente 18] Documento EP 1842557 A1
[Documento de patente 19] Documento WO 2011/072082 A2
[Documento distinto a patentes]
[Documento distinto a patente 1] Nephrology, dialysis, transplantation 2007; 22(12): 3391-407
[Sumario de la invencion]
[Problemas a resolver por la invencion]
Un objeto de la presente invencion es proporcionar un agente para tratar la nefritis diabetica utilizando un portador que pueda suministrar espedficamente una sustancia tal como un farmaco a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon.
[Medios para solucionar los problemas]
Los inventores han descubierto, durante una investigacion de un agente novedoso para tratar la fibrosis renal, que la fibrosis renal y especialmente la nefritis diabetica puede tratarse eficazmente administrando una composicion en la que un inhibidor de produccion de matriz extracelular se transporta mediante un portador que incluye un retinoide como agente que estimula el suministro de una sustancia a las celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, completando asf la invencion.
Se sabe que un portador que incluye vitamina A puede suministrar un farmaco a celulas estrelladas que almacenan vitamina A (Documento de patente 13), y que una composicion en la que se soporta ARNip para HSP47 en el portador anterior puede mejorar la fibrosis hepatica (Documento de patente 13), fibrosis pulmonar (Documento de patente 14), y mielofibrosis (Documento de patente 15), pero cualquier relacion con fibrosis renal, tejido intersticial renal o el mesangio es hasta la fecha completamente desconocido.
Es decir, la presente invencion se refiere a lo siguiente.
(1) Una composicion farmaceutica para su uso en el tratamiento de nefritis diabetica, comprendiendo la composicion un portador que comprende un retinoide que estimula el suministro de una sustancia a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon y un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, en la que el portador tiene la forma de un liposoma, y la razon molar de retinoide y lfpido contenidos en el liposoma es de 8:1 a 1:4.
(2) La composicion farmaceutica para su uso segun el (1) anterior, en el que el retinoide incluye retinol.
(3) La composicion farmaceutica para su uso segun uno cualquiera de los (1) o (2) anteriores , en la que el farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor de actividad o produccion de PAI-1, un inhibidor de actividad celular, un inhibidor de crecimiento, un inductor de apoptosis, y una molecula de iARN, ribozima, acido nucleico antisentido, o polinucleotido quimerico de ADN/ARN que seleccionan como diana al menos una de las moleculas constituyentes de la matriz extracelular o moleculas involucradas en la produccion o secrecion de las moleculas constituyentes de la matriz extracelular o un vector que expresa las mismas.
(4) La composicion farmaceutica para su uso segun los (1) o (2) anteriores, en la que el farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular es un inhibidor de HSP47.
(5) La composicion farmaceutica para su uso segun uno cualquiera de los (1) a (4) anteriores, en la que el farmaco y el portador se mezclan en un lugar de tratamiento medico o en sus alrededores.
[Efectos de la invencion]
Mientras que el modo de accion exacto de la composicion para tratar la nefritis diabetica de la presente invencion todavfa no se ha clarificado completamente, se cree que el retinoide funciona como un agente que selecciona como diana celulas productoras de matriz extracelular en el rinon tal como fibroblastos o miofibroblastos, y administra un principio activo, concretamente un farmaco que controla la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon a dichas celulas, mostrando asf un efecto contra fibrosis renal y especialmente nefritis diabetica.
Por tanto, ya que puede administrarse eficazmente un principio activo al sitio de accion y, ademas, a las celulas diana, usando la composicion farmaceutica de la presente invencion, se hace posible el tratamiento, la supresion de evolucion, y la prevencion de aparicion de nefritis diabetica, cuyo tratamiento ha sido diffcil hasta la fecha, y la presente composicion farmaceutica contribuye por tanto significativamente a la medicina humana y medicina veterinaria.
Ademas, la composicion farmaceutica de la presente invencion puede combinarse con cualquier agente farmaceutico (por ejemplo, un agente terapeutico existente contra fibrosis renal) para aumentar su eficacia de accion; por tanto tambien es ventajosa para su amplia gama de aplicaciones en terminos de formulacion, permitiendo facilitar la produccion de agentes terapeuticos eficaces.
[Breve descripcion de dibujos]
[Figura 1] La figura 1 es una imagen microscopica representativa del glomerulo mediante tincion con rojo sirio de una seccion del cortex renal de un raton de cada grupo. Las imagenes se tomaron con un aumento de 800x usando un lente de inmersion en aceite.
[Figura 2] La figura 2 es un grafico que muestra la proporcion de la region fibrotica del cortex renal determinada cuantitativamente mediante tincion con rojo sirio. Se tomaron aleatoriamente 20 campos de vision en la region de cortex renal por raton individual, y se calculo la proporcion de la region fibrotica ((%) de area de fibrosis) (*p <0,05, **p <0,01).
[Figura 3] La figura 3 es un grafico que muestra silenciamiento genico mediante de union a VA, que contiene ARNip, en celulas productoras de matriz extracelular renal de raton. El nivel de expresion genica de HSP47 en las celulas productoras de matriz extracelular recogidas del rinon de raton se corrigio con el nivel de expresion de GAPDH, que es un gen de control interno, y la proporcion de expresion genica de HSP47 ((%) de expresion genica de HSP47) se represento graficamente mientras que se definio “Sin tratamiento” (no tratado) como el 100 %. VA-lip indica liposoma de union a VA-ARNip de Hsp47C, lip significa liposoma-ARNip de Hsp47C, VA ARNip significa VA ARNip de Hsp47C, y NT significa sin tratamiento.
[Modos para lleva a cabo la invencion]
En la presente invencion, las celulas productoras de matriz extracelular en el rinon no se limitan particularmente siempre que sean celulas presentes en el rinon que tienen la capacidad de producir matriz extracelular, y ejemplos de las mismas presentes en el rinon incluyen celulas mesangiales, celulas tubulointersticiales, pericitos, fibroblastos, fibrocitos, que son celulas precursoras de fibroblastos, y miofibroblastos. Las celulas productoras de matriz presentes en el rinon pueden incluir no solo aquellas derivadas de celulas presentes en el rinon sino tambien aquellas derivadas de fibrocitos en sangre circulante y aquellas transformadas de celulas endoteliales mediante transdiferenciacion endotelial-mesenquimatosa. Los miofibroblastos se caracterizan por la expresion de a-SMA (alfa actina del musculo liso). Los miofibroblastos en la presente invencion son aquellos identificados mediante por ejemplo inmunotincion usando anticuerpos anti-a-SMA marcados de manera detectable. Ademas, ya que los fibroblastos expresan vimentina, que es caractenstica de celulas mesenquimatosas, pero no expresan a-SMA, pueden identificarse mediante tincion doble de vimentina y a-SMA, etc. Ademas, las celulas productoras de matriz extracelular en el rinon pueden obtenerse tratando tejido renal con colagenasa y proteasa y luego llevando a cabo aislamiento mediante centrifugacion por gradiente de densidad (por ejemplo en Nycodenz® que tiene una concentracion final del 8 %).
El retinoide empleado en la presente invencion funciona como un agente de seleccion como diana (agente de seleccion como diana) a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, y estimula la administracion espedfica de una sustancia a estas celulas. El mecanismo de fomento de la administracion de sustancia por el retinoide todavfa no se ha clarificado completamente; sin embargo, por ejemplo, se piensa que un retinoide que se ha unido espedficamente a una protema de union a retinol (RBP) se lleva dentro de una celula productora de matriz extracelular en el rinon a traves de determinado receptor presente en la superficie de dicha celula.
Un retinoide es un miembro de una clase de compuestos que tienen una estructura principal en la que cuatro unidades isoprenoides se unen de manera cabeza con cola (vease G. P. Moss, “Biochemical Nomenclature and Related Documents”, 2.a Ed. Portland Press, pags. 247-251 (1992)). La vitamina A es un descriptor generico de un retinoide que muestra cualitativamente la actividad biologica de retinol. El retinoide que puede usarse en la presente invencion no esta limitado particularmente, y ejemplos del mismo incluyen retinol (que incluye retinol solo trans), retinal, acido retinoico (que incluye tretinoma), derivados retinoides tales como un ester de retinol y un acido graso, un ester de un alcohol alifatico y acido retinoico, etretinato, isotretinoma, adapaleno, acitretina, tazaroteno, y palmitato de retinilo, y analogos de vitamina A tales como fenretinida (4-HPR) y bexaroteno.
De estos, retinol, retinal, acido retinoico, un ester de retinol y un acido graso (tal como acetato de retinilo, palmitato de retinilo, estearato de retinilo y laurato de retinilo) y un ester de un alcohol alifatico y acido retinoico (tal como retinoato de etilo) son preferibles desde el punto de vista de la eficacia de la administracion espedfica de una sustancia a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon.
Todos los isomeros de retinoides incluyendo isomeros cis-trans estan incluidos en el alcance de la presente invencion. El retinoide puede sustituirse con uno o mas sustituyentes.
El portador que esta presente en la composicion farmaceutica de la presente invencion puede constituirse uniendo el retinoide a un componente constituyente del portador distinto al retinoide, o incluyendolos allf dentro. Por tanto, el portador empleado en la presente invencion incluye un componente constituyente del portador distinto al retinoide. Ejemplos de un componente de este tipo incluyen un lfpido, por ejemplo, un fosfolfpido tal como glicerofosfolfpido, un esfingolfpido tal como esfingomielina, un esterol tal como colesterol, un aceite vegetal tal como aceite de soja o aceite de semillas de amapola, un aceite mineral, una lecitina tal como lecitina de yema de huevo, y un polfmero, pero los ejemplos no se limitan a ello. Entre ellos, son adecuados aquellos que pueden formar un liposoma, por ejemplo, un fosfolfpido natural tal como lecitina, un fosfolfpido semisintetico tal como dimiristoilfosfatidilcolina (Dm Pc ), dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), o diestearoilfosfatidilcolina (DSPC), dioleilfosfatidiletanolamina (DOPE), dilauroilfosfatidilcolina (DLPC) y colesterol.
Un componente particularmente preferido es un componente que puede evitar la captura por el sistema reticuloendotelial sistema, incluyendo ejemplos de los mismos lfpidos cationicos tales como cloruro de N-(atrimetilamonioacetil)-didodecil-D-glutamato (TMAG), N,N'N''N'"-tetrametil-N,N'N''N''-tetrapalmitilespermina (TMTPS), trifluoroacetato de 2,3-dioleiloxi-N-[2-(espermincarboxamido)etil]-N,N-dimetil-1-propanaminio (DOSPA), cloruro de N-[1-(2,3-dioleiloxi)propil]-N,N,N-trimetilamonio (DOTMA), cloruro de dioctadecildimetilamonio (DODAC), bromuro de didodecilamonio (DDAB), 1,2-dioleiloxi-3-trimetilamoniopropano (DOTAP), 3p-[N-(N',N-dimetilaminoetano)carbamoil]colesterol (DC-Chol), 1,2-dimiristoiloxipropil-3-dimetilhidroxietilamonio (DMRIE), y cloruro de 0,0-ditetradecanoil-N-(a-trimetilamonioacetil)dietanolamino (DC-6-14).
El portador empleado en la presente invencion tiene la forma de un liposoma.
En la presente invencion, unir el retinoide al portador o incluirlo allf dentro se hace posible uniendo el retinoide a o incluirlo en un constituyente de portador distinto al retinoide mediante un metodo qrnmico y/o ffsico. Alternativamente, el retinoide puede unirse a o incluirse en el portador mezclando el retinoide y los constituyentes de portador distintos al retinoide durante la preparacion del portador. En la presente invencion, la cantidad del retinoide en el portador puede ser por ejemplo de 0,01 a 1000 nmol/ l^, y es preferiblemente de 0,1 a 100 nmol/ l^. El retinoide puede unirse a o incluirse en el portador antes de soportar un farmaco en el portador; o el portador, retinoide y farmaco pueden mezclarse simultaneamente; o el retinoide puede mezclarse con el portador que ya esta soportando el farmaco, etc. Esto puede hacerse mediante un procedimiento para producir una formulacion espedfica para celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, incluyendo el procedimiento una etapa de union de un retinoide a una formulacion liposomal tal como DaunoXome®, Doxil, Caelyx® o Myocet®.
El portador empleado en la presente invencion es un liposoma. En la presente invencion, se usa ventajosamente una forma liposomal desde el punto de vista de alta eficacia de administracion, amplia seleccion de sustancias a administrar, y facilidad de formulacion, etc., y un liposoma cationico que contiene un lfpido cationico es particularmente preferible. La razon molar del retinoide respecto a otros constituyentes del liposoma es de 8:1 a 1:4, y preferiblemente de 4:1 a 1:2, desde el punto de vista de eficacia de union del retinoide al portador o incluirlo allf dentro.
El empleado en la composicion farmaceutica de la presente invencion contiene una sustancia a transportar en su interior, puede unirse al exterior de una sustancia a transportar, o puede mezclarse con una sustancia a transportar, siempre que contenga un retinoide en una forma tal que el retinoide pueda funcionar como un agente de seleccion como diana. “Funcionar como un agente de seleccion como diana” en el presente documento significa que el portador que incluye un retinoide alcanza y/o es captado por las celulas diana, es decir, celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, mas rapidamente y/o en una cantidad mayor que con un portador que no incluye el retinoide, y esto puede confirmarse facilmente, por ejemplo, anadiendo un portador marcado o un portador que contiene marcador a un cultivo de celulas diana y analizando la distribucion del marcador despues de un penodo de tiempo predeterminado. Estructuralmente, puede satisfacerse este requisito, por ejemplo, si un retinoide se expone al menos parcialmente en el exterior de la formulacion que contiene el portador como muy tarde para cuando alcanza las celulas diana. La “formulacion” mencionada aqrn es un concepto que incluye la composicion de la presente invencion, que se describe mas adelante, y que ademas tiene una forma. Si el retinoide esta expuesto o no en el exterior de una formulacion puede evaluarse poniendo en contacto la formulacion con una sustancia que se une espedficamente a un retinoide, tal como por ejemplo una protema de union al retinol (RBP), y examinando su union a la formulacion.
Exponer un retinoide al menos parcialmente al exterior de la formulacion como muy tarde para cuando alcanza las celulas diana puede conseguirse por ejemplo ajustando la razon de composicion del retinoide y componentes constituyentes del portador distinto al retinoide. Ademas, como el portador tiene la forma de un liposoma, si por ejemplo se forma un complejo a partir de un retinoide y un componente constituyente del portador distinto al retinoide, puede usarse un metodo en el que primero una estructura de lfpido formada a partir del componente constituyente del portador distinto al retinoide se diluye en una disolucion acuosa, y esto entonces se pone en contacto y se mezcla con el retinoide, etc. En este caso, el retinoide puede estar en un estado en el que se disuelve en un disolvente, por ejemplo, un disolvente organico tal como DMSO. La estructura de lfpido mencionada aqrn, significa una estructura de liposoma tridimensional que contiene un lfpido como componente constituyente. La aplicacion a otro portador de farmaco del mismo agente de seleccion como diana que el usado con un liposoma en seleccion como diana se describe por ejemplo en Zhao y Lee, Adv Drug Deliv Rev. 2004; 56(8): 1193-204, Temming et al., Drug Resist Updat. 2005; 8(6): 381-402.
La estructura de lfpidos puede estabilizarse por ejemplo ajustando la presion osmotica mediante el uso de un agente de ajuste de presion osmotica tal como una sal, un sacarido tal como sacarosa, glucosa o maltosa, o un alcohol polihidroxilado tal como glicerol o propilenglicol, y preferiblemente sacarosa o glucosa. Ademas, puede ajustarse el pH anadiendo una cantidad apropiada de un agente de ajuste tal como una sal o un tampon. Por tanto, es posible llevar a cabo la produccion, almacenamiento, etc. de una estructura de lfpido en un medio que contiene las sustancias anteriores. En este caso, la concentracion del agente de ajuste de presion osmotica se ajusta preferiblemente para que sea isotonico con la sangre. Por ejemplo, en el caso de sacarosa, la concentracion de la misma en un medio es, aunque no se limita a, del 3 al 15 % en peso, preferiblemente del 5 al 12 % en peso, mas preferiblemente del 8 al 10 % en peso, y particularmente el 9 % en peso, y en el caso de glucosa, la concentracion de la misma en un medio es, aunque no se limita a, del 1 al 10 % en peso, preferiblemente del 3 al 8 % en peso, mas preferiblemente del 4 al 6 % en peso, y particularmente el 5 % en peso.
Tambien se divulga un procedimiento para producir un portador para suministrar una sustancia a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, incluyendo el procedimiento una etapa de formular un retinoide como un agente de seleccion como diana a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon. El metodo de formular el retinoide no esta particularmente limitado siempre que, en el portador en el que se formula, el retinoide pueda funcionar como un agente que selecciona como diana celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, y por ejemplo pueden usarse diversos metodos descritos en la presente memoria descriptiva. Por tanto, puede llevarse a cabo la formulacion del retinoide uniendo el retinoide a o incluirlo en otro componente constituyente del portador mediante un metodo qmmico y/o ffsico o mezclando el retinoide con otro componente constituyente del portador cuando se prepara el portador. La cantidad de retinoide formulado, etc. es tal como se describio anteriormente.
La sustancia u objeto que suministra el portador descrito en el presente documento no esta particularmente limitado, y tiene preferiblemente un tamano de manera que pueda moverse ffsicamente dentro del cuerpo de un organismo desde el sitio de administracion hasta el sitio de una lesion donde estan presentes las celulas diana. Por tanto, el portador descrito en el presente documento puede transportar no solo una sustancia tal como un atomo, una molecula, un compuesto, una protema o un acido nucleico, sino tambien un objeto tal como un vector, un partmula de virus, una celula, un sistema de liberacion de farmacos que incluye uno o mas elementos, o una micromaquina. La sustancia u objeto tiene preferiblemente la propiedad de tener algun efecto sobre las celulas diana, y los ejemplos incluyen aquellos que marcan las celulas diana o controlan (por ejemplo aumentando o reduciendo) la actividad o el crecimiento de las celulas diana.
En la presente invencion, el portador suministra “un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon”. La actividad de las celulas productoras de matriz extracelular en el rinon en el presente documento se refiere a diversas actividades tales como secrecion, captacion o migracion mostrada por celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, y en la presente invencion, en particular, entre estas, normalmente significa una actividad involucrada en la aparicion, evolucion y/o recafda de fibrosis renal y especialmente nefritis diabetica. Ejemplos de tal actividad incluyen, pero no se limitan a, la produccion/secrecion de una sustancia biologicamente activa tal como PAI-1, y de un componente de matriz extracelular tal como colageno, proteoglucano, tenascina, fibronectina, trombospondina, osteopontina, osteonectina o elastina, y la supresion de la actividad de descomposicion de estos componentes de matriz extracelular.
Por tanto, el farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon mencionado en la presente memoria descriptiva puede ser cualquier farmaco que directamente o indirectamente suprime las acciones ffsicas, qmmicas y/o fisiologicas, etc. de dichas celulas relacionadas con la aparicion, evolucion y/o recafda de fibrosis renal, y ejemplos del mismo incluyen, pero no se limitan a, un farmaco que inhibe la actividad o produccion de la sustancia biologicamente activa anterior, anticuerpos y fragmentos de anticuerpo que neutralizan la sustancia biologicamente activa anterior, una sustancia que suprime la expresion de la sustancia biologicamente activa anterior, tal como una molecula de iARN (por ejemplo ARNip, ARNhc, ARNdd, miARN, piARN, ARNipar), una ribozima, un acido nucleico antisentido (incluyendo ARN, ADN, APN, o un material compuesto de los mismos), o una sustancia que tiene un efecto dominante negativo tal como un mutante dominante negativo, o un vector que los expresa, o un farmaco que inhibe la produccion y secrecion del componente de matriz extracelular anterior, por ejemplo, una sustancia que suprime la expresion del componente de matriz extracelular, tal como una molecula de iARN (por ejemplo ARNip, ARNhc, ARNdd, miARN, piARN, ARNipar), una ribozima, un acido nucleico antisentido (incluyendo ARN, ADN, ApN, o un material compuesto de los mismos), o una sustancia que tiene un efecto dominante negativo tal como a un mutante dominante negativo, o un vector que los expresa, un inhibidor de actividad celular tal como un bloqueante de canales de sodio, un inhibidor de crecimiento celular tal como un agente alquilante (tal como ifosfamida, nimustina, ciclofosfamida, dacarbazina, melfalan o ranimustina), un antibiotico antitumoral (tal como idarubicina, epirubicina, daunorubicina, doxorubicina, pirarubicina, bleomicina, peplomicina, mitoxantrona o mitomicina C), un antimetabolito (tal como gemcitabina, enocitabina, citarabina, tegafur/uracilo, una mezcla tegafur/gimeracilo/oteracilo potasico, doxifluridina, hidroxicarbamida, fluorouracilo, metotrexato o mercaptopurina), un alcaloide tal como etoposido, irinotecan, vinorelbina, docetaxel, paclitaxel, vincristina, vindesina o vinblastina, y un complejo de platino tal como carboplatino, cisplatino o nedaplatino, asf como un inductor de apoptosis tal como ciclosporina.
Ejemplos del farmaco para inhibir la produccion / secrecion de un componente de matriz extracelular incluyen, pero no se limitan a, HSP47, que es una chaperona molecular espedfica para colageno esencial para transporte intracelular y maduracion de moleculas, que son comunes a los procesos sinteticos de diversos tipos de colageno.
Ademas, el “farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon” en la presente invencion puede ser cualquier farmaco que directamente o indirectamente estimula las acciones ffsicas, qmmicas y/o fisiologicas de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon directamente o indirectamente relacionadas con la supresion de la aparicion, evolucion y/o recafda de fibrosis renal, por ejemplo, la produccion/secrecion de MMP (incluyendo MMP1, MMP2), activador del plasminogeno (PA). Ejemplos de farmaco de este tipo incluyen, pero no se limitan a, un activador o un potenciador de expresion de estas sustancias. La composicion farmaceutica de la presente invencion puede suministrar uno o mas tipos de los farmacos mencionados anteriormente.
El ARNip (ARN interferente pequeno) que puede usarse en la presente invencion incluye, ademas de ARNip en sentido estricto, ARN duplex y formas modificadas de los mismos tales como miARN (micro ARN), ARNhc (ARN en horquilla corto), piARN(ARN de interaccion con Piwi), y ARNipar (ARNip asociado a repeticion). Pueden usarse un ARNip como un ARN pequeno funcional en un sentido amplio y un vector que expresa el ARNip por ejemplo segun instrucciones en un texto convencional (Experimental Medicine Special Edition, Revised RNAi Experimental Protocol 2004, Yodosha, RNAi Experimental Frequently Asked Questions 2006, Yodosha).
Puede llevarse a cabo el diseno de estos ARNip apropiadamente por un experto en la tecnica segun instrucciones en un texto convencional (Experimental Medicine Special Edition, Revised RNAi Experimental Protocol 2004, Yodosha, RNAi Experimental Frequently Asked Questions 2006, Yodosha) mediante referencia a una secuencia de ARN mensajero de un gen diana y una secuencia de ARNip conocida.
La sustancia que suministra la composicion farmaceutica de la presente invencion puede ser, pero no se limita a, un farmaco para suprimir la aparicion, evolucion y/o recafda de fibrosis renal distinto a los farmacos mencionados anteriormente, y ejemplos de los mismos incluyen, pero no se limitan a, un agente medicinal que actua sobre el sistema de oxido mtrico tal como un inhibidor de la enzima convertidora de la angiotensina, un antagonista del receptor de la angiotensina II AT1, un antagonista de aldosterona, un antagonista del receptor de endotelina, un bloqueante a, un bloqueante p, un agente inmunosupresor, un inhibidor del metabolismo de matriz extracelular, un inhibidor del sistema de complemento, un inhibidor de quimiocina, un inhibidor de TGF-p, o un inhibidor de fosfodiesterasa 5, un inhibidor de NFkB, un inhibidor de Rho, un inhibidor de p38 MAPK, un inhibidor de PI3Ky, calicrema, un antagonista del receptor de interleucina 1, BMP-7, un anticuerpo anti-factor de necrosis tumoral a, un anticuerpo anti-factor de crecimiento derivado de las plaquetas D, un inhibidor de produccion del inhibidor-1 del activador del plasminogeno, un agonista selectivo del receptor de prostaglandina 4, un inhibidor de la smtesis de colageno tipo I, un inhibidor de sulfotransferasa de proteoglucano de sulfato de condroitina, un inhibidor de reductasa de epoxido de vitamina K, un inhibidor de la formacion de productos finales de glicacion, un agonista del receptor 2A de adenosina A2A, un antagonista del receptor de endotelina, un inhibidor del VEGF, un activador o un potenciador de expresion de proteasa ADAM (un dominio de metaloproteasa y desintegrina), un activador o un potenciador de expresion de proteasa ADAMTS (un metaloproteasa y desintegrina con motivos de trombospondina), y relaxina o un potenciador de expresion de la misma siempre que la composicion farmaceutica de la presente invencion contenga al menos un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon. En la presente memoria descriptiva, ejemplos del potenciador de expresion incluyen, pero no se limitan a, un agente de terapia genica tal como un vector que contiene un acido nucleico que codifica una protema que es una diana para la potenciacion de la expresion. Estos farmacos pueden usarse en combinacion con la composicion de la presente invencion, que se describe mas adelante. “Usada en combinacion” incluye sustancialmente la administracion simultanea de la composicion de la presente invencion y el farmaco mencionado anteriormente y la administracion del mismo en momentos espaciados dentro del mismo periodo de tratamiento. En el ultimo caso, la composicion de la presente invencion puede administrarse o bien antes o bien despues del farmaco.
En una realizacion de la presente invencion, como farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, puede citarse un inhibidor de HSP47, por ejemplo, un ARNip correspondiente a cada uno de los mismos.
La sustancia u objeto suministrado por el portador contenido en la composicion farmaceutica de la presente invencion puede estar marcado o sin marcar. El marcaje permite monitorizar el exito o el fracaso de administracion a celulas diana, o el aumento y la disminucion de celulas diana, etc., y es particularmente util no solo a nivel de investigacion / pruebas sino tambien a nivel clmico. Un marcador puede seleccionarse de cualquier marcador conocido por un experto en la tecnica tal como, por ejemplo, cualquier radioisotopo, material magnetico, sustancia que se une a un sustancia marcada (por ejemplo un anticuerpo), sustancia fluorescente, fluoroforo, sustancia quimioluminiscente, enzima. Un marcador puede adherirse a un componente constituyente de portador o puede soportarse en un portador como una sustancia independiente a suministrar.
En la presente invencion, “para celulas productoras de matriz extracelular en el rinon” o “para administracion a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon” significa que es adecuado para su uso para celulas productoras de matriz extracelular en el rinon como celulas diana, y esto incluye, por ejemplo, que sea posible suministrar una sustancia a esas celulas, mas rapidamente, eficazmente, y/o en mayor cantidad que a otras celulas, por ejemplo, celulas normales. Por ejemplo, el portador de la presente invencion puede suministrar una sustancia a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon en una tasa y/o eficacia de 1,1 veces o mas, 1,2 veces o mas, 1,3 veces o mas, 1,5 veces o mas, 2 veces o mas, o incluso 3 veces o mas comparado con otras celulas.
La presente invencion por tanto se refiere a una composicion farmaceutica para tratar la nefritis diabetica que contiene un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, incluyendo la composicion el portador mencionado anteriormente ademas del farmaco mencionado anteriormente para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, y se describe adicionalmente el uso del portador en la produccion de dicha composicion.
El termino fibrosis renal incluye cualquier nefritis intersticial, por ejemplo, nefritis estreptococica, nefritis estafilococica, nefritis neumococica, varicela, hepatitis B, hepatitis C, nefritis viral asociada a VlH, nefritis debida a una infeccion parasitaria tal como malaria, nefritis intersticial infecciosa asociada a nefritis fungica, nefritis por micoplasma, lupus eritematoso sistemico (nefritis lupica), esclerodermia sistemica (enfermedad del colageno renal), nefritis intersticial asociada a una enfermedad del colageno tal como smdrome de Sjogren, nefritis asociada a una enfermedad inmunitaria de los vasos sangumeos tal como nefritis purpura, poliarteritis, o glomerulonefritis rapidamente progresiva, nefritis intersticial asociada a exposicion a radiacion, nefritis intersticial inducida por farmacos debido a un farmaco con oro, un AINE, penicilamina, un agente antineoplasico tal como bleomicina, un antibiotico, Paraquat, nefritis alergica debida a picadura de insectos, polen, una planta de la familia de Anacardiaceae, nefritis por amiloidosis, nefropatfa diabetica, glomerulonefritis cronica, nefritis asociada a nefroesclerosis maligna, una poliquistosis renal, nefritis tubulointersticial, nefritis asociada a toxicosis gestacional o un cancer, glomerulonefritis membranoproliferativa, nefropatfa por IgA, nefritis crioglobulinemica mixta, nefritis por smdrome de Goodpasture, nefritis granulomatosa de Wegener, y una forma cronica de nefritis intersticial provocada por nefritis intersticial idiopatica tal como nefritis intersticial aguda. En la presente invencion se trata la nefritis diabetica.
En la composicion farmaceutica de la presente invencion, siempre que el retinoide contenido en el portador esta presente en un modo de manera que funcione como un agente de seleccion como diana, el portador puede contener una sustancia a suministrar en su interior, puede unirse al exterior de una sustancia a suministrar, o puede mezclarse con una sustancia a suministrar. Por tanto, dependiendo de la via de administracion y la manera en la que el farmaco se libera, etc., la composicion puede recubrirse con un material apropiado tal como, por ejemplo, un recubrimiento enterico o un material de desintegracion temporizada, o puede incorporarse en un sistema de lineracion de farmacos apropiado. Ademas, la composicion de la presente invencion puede estar en forma de un complejo de un principio activo y un liposoma de union a retinoide, es decir, un lipoplex.
La composicion de la presente invencion se usa como medicamento (es decir, una composicion farmaceutica) y puede administrarse mediante diversas vfas incluyendo vfas tanto oral como parenteral, y ejemplos de las mismas incluyen, pero no se limitan a, vfas oral, intravenosa, intramuscular, subcutanea, local, intrapulmonar, traqueobronquial, intratraqueal, intrabronquial, nasal, intrarrectal, intraarterial, intraportal, intraventricular, intramedular, intraganglios linfaticos, intralinfatica, intracerebral, intratecal, intracerebroventricular, transmucosa, percutanea, intranasal, intraperitoneal e intrauterina, y puede formularse en una forma farmaceutica adecuada para cada v^a de administracion. Una forma farmaceutica y metodo de formulacion de este tipo pueden seleccionarse como apropiados de cualquier forma farmaceutica y metodo conocidos (vease por ejemplo Hyojun Yakuzaigaku (Standard Pharmaceutics), Ed. porYoshiteru Watanabe et al., Nankodo, 2003).
Ejemplos de formas farmaceuticas adecuadas para administracion oral incluyen, pero no se limitan a, polvo, granulo, comprimido, capsula, lfquido, suspension, emulsion, gel y jarabe, y ejemplos de formas farmaceuticas adecuadas para administracion parenteral incluyen inyecciones tales como una disolucion inyectable, una suspension inyectable, una emulsion inyectable, y una inyeccion a preparar en el momento de su uso. Las formulaciones para administracion parenteral pueden estar en una forma tal como una disolucion o suspension esteril isotonica, acuosa o no acuosa.
La presente divulgacion tambien proporciona un procedimiento para producir una composicion farmaceutica para tratar la fibrosis renal, incluyendo el procedimiento una etapa de formular un retinoide como agente de seleccion como diana para celulas productoras de matriz extracelular en el rinon y un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon como un principio activo. El metodo para formular el retinoide no esta particularmente limitado siempre que el retinoide pueda funcionar como agente de seleccion como diana para celulas productoras de matriz extracelular en el rinon en la composicion en la que se formula, y por ejemplo pueden usarse diversos metodos descritos en la presente memoria descriptiva. Ademas, el metodo para formular el principio activo no se limita particularmente siempre que el principio activo pueda mostrar un efecto predeterminado, y puede usarse cualquier metodo conocido. La formulacion del principio activo puede llevarse a cabo al mismo tiempo que la formulacion del retinoide o puede llevarse a cabo antes o despues de formular el retinoide. Por ejemplo, si la composicion contiene un componente constituyente del portador distinto al retinoide, la formulacion del principio activo puede llevarse a cabo mezclando el principio activo con un portador en el que ya se ha formulado el retinoide como el agente de seleccion como diana, puede llevarse a cabo mezclando el retinoide, un componente constituyente del portador distinto al retinoide, y el principio activo al mismo tiempo, o puede llevarse a cabo formulando el principio activo con un componente constituyente del portador distinto al retinoide y luego mezclando esto con el retinoide.
La cantidad de retinoide formulado, etc. es tal como se describio anteriormente con respecto al portador tal como se emplea en la presente invencion. Ademas, la cantidad de principio activo es una cantidad que, cuando se administra como la composicion, puede suprimir la aparicion o recafda de fibrosis renal y especialmente nefritis diabetica, mejorar el estado clmico, aliviar sus smtomas, o retrasar o parar su evolucion, y preferiblemente puede ser una cantidad que puede prevenir la aparicion o recafda de fibrosis renal o curarla. Tambien es preferiblemente una cantidad que no provoca un efecto adverso que supera al beneficio de la administracion. Una cantidad de este tipo puede conocerse o determinarse apropiadamente mediante un ensayo in vitro usando celulas cultivadas o mediante un ensayo en un animal modelo tal como un raton, rata, perro o cerdo, y tales metodos de ensayo son bien conocidos para un experto en la tecnica. Ejemplos de un animal modelo con fibrosis renal incluyen uno descrito en el documento JP, A, 2009-178143. La cantidad de principio activo formulada puede variar segun la forma de administracion de la composicion. Por ejemplo, si una pluralidad de unidades de la composicion se usa en una administracion, la cantidad de principio activo formulada en una unidad de la composicion puede ser una obtenida dividiendo la cantidad de principio activo requerida para una administracion entre el numero de unidades. Tal ajuste de la cantidad formulada puede llevarse a cabo apropiadamente por un experto en la tecnica.
La composicion farmaceutica de la presente invencion puede proporcionarse en cualquier forma, pero desde el punto de vista de la estabilidad en almacenamiento, puede proporcionarse preferiblemente en una forma que pueda prepararse en el momento de su uso, por ejemplo en una forma de manera que pueda prepararse en un lugar de tratamiento medico o en los alrededores del mismo por un/a medico y/o farmaceutico/a, enfermero/a u otro/a paramedico. En este caso, la composicion farmaceutica de la presente invencion se proporciona como uno o mas envases que contienen al menos un constituyente esencial para la misma, y se prepara antes de usar, por ejemplo, en el plazo de 24 horas antes de usar, preferiblemente en el plazo de 3 horas antes de usar, y mas preferiblemente, inmediatamente antes de usar. Cuando se lleva a cabo la preparacion, puede usarse segun sea apropiado un reactivo, un disolvente, material de preparacion, etc. que estan normalmente disponibles en el lugar de preparacion.
Por consiguiente, la presente divulgacion tambien proporciona un kit para preparar un portador o composicion, incluyendo el kit uno o mas envases que contienen un retinoide solo o en combinacion, y/o una sustancia a suministrar, y/o una sustancia constituyente de portador distinta al retinoide, asf como un constituyente que es necesario para el portador o composicion proporcionada en la forma de un kit de este tipo. El kit descrito en el presente documento puede contener, ademas de lo anterior, instrucciones tales como por ejemplo una explicacion por escrito o un medio de registro electronico CD o DVD con metodos para preparar o administrar el portador y la composicion de la presente invencion. Ademas, el kit descrito en el presente documento puede contener todos los constituyentes para completar la composicion farmaceutica de la presente invencion, pero no necesita contener necesariamente todos los constituyentes. Por consiguiente, el kit descrito en el presente documento no necesita contener un reactivo o un disolvente que este normalmente disponible en un lugar de tratamiento medico, una instalacion experimental, etc., tal como, por ejemplo, agua esteril, solucion salina fisiologica o disolucion de glucosa.
La presente divulgacion proporciona ademas un metodo para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon o para tratar la fibrosis renal, incluyendo el metodo administrar una cantidad eficaz de la composicion anterior a un sujeto que lo necesite. Aqm, la cantidad eficaz, en por ejemplo un metodo para tratar la fibrosis renal, es una cantidad que suprime la aparicion o recafda de fibrosis renal, mejora el estado clmico, alivia sus smtomas, o retrasa o para su evolucion, y es preferiblemente una cantidad que evita la aparicion o recafda de fibrosis renal o la cura. Tambien es preferiblemente una cantidad que no provoca un efecto adverso que supera el beneficio de la administracion. Una cantidad de este tipo puede determinarse apropiadamente mediante un ensayo in vitro usando celulas cultivadas o mediante un ensayo en un animal modelo tal como un raton, rata, perro o cerdo, y tales metodos de ensayo son bien conocidos por un experto en la tecnica. Ademas, la dosis del retinoide contenido en el portador y la dosis del farmaco usada en el metodo descrito en el presente documento son conocidas por un experto en la tecnica, o pueden determinarse apropiadamente mediante el ensayo mencionado anteriormente, etc. Ejemplos de un animal modelo con fibrosis renal incluyen uno descrito en el documento JP, A, 2009-178143.
La dosis espedfica de la composicion administrada en el metodo descrito en el presente documento puede determinarse teniendo en cuenta diversas condiciones con respecto al sujeto que necesita el tratamiento, tal como la gravedad de los smtomas, el estado general de salud del sujeto, la edad, peso corporal y genero del sujeto, dieta, la via de administracion, el momento y frecuencia de administracion, medicacion concomitante, grado de respuesta al tratamiento, cumplimiento del tratamiento, etc.
La via de administracion incluye diversas vfas incluyendo vfas tanto oral como parenteral tales como, por ejemplo, oral, intravenosa, intramuscular, subcutanea, local, intrapulmonar, traqueobronquial, intratraqueal, intrabronquial, nasal, intrarrectal, intraarterial, intraportal, intraventricular, intramedular, intra ganglios linfaticos, intralinfatica, intracerebral, intratecal, intracerebroventricular, transmucosa, percutanea, intranasal, intraperitoneal e intrauterina. La frecuencia de administracion vana dependiendo de las propiedades de la composicion a usar y las condiciones mencionadas anteriormente del sujeto, y puede ser, por ejemplo, una pluralidad de veces al dfa (mas espedficamente 2, 3, 4, 5, o mas veces al dfa), una vez al dfa, cada pocos dfas (mas espedficamente, cada 2, 3, 4, 5, 6 o 7 dfas, etc.), varias veces a la semana (por ejemplo 2, 3, 4 veces, etc. a la semana), una vez a la semana o cada pocas semanas (mas espedficamente cada 2, 3, 4 semanas, etc.).
En el metodo descrito en el presente documento, el termino “sujeto” significa cualquier individuo vivo, preferiblemente un animal, mas preferiblemente un mairnfero, y aun mas preferiblemente un individuo humano. El sujeto puede estar sano o afectado por algun trastorno, y cuando esta previsto un tratamiento de fibrosis renal, normalmente significa un sujeto afectado por nefritis diabetica o fibrosis renal o en riesgo de ser afectado por eso. Cuando esta prevista la prevencion de fibrosis renal, por ejemplo, ejemplos normales incluyen, pero no se limitan a, un sujeto afectado por nefritis diabetica, en particular nefritis diabetica debido a diabetes tipo II.
Ademas, el termino “tratamiento” incluye todos los tipos de intervencion terapeutica y/o profilactica medicamente aceptable con el proposito de la cura, remision temporal o prevencion de un trastorno. Por ejemplo, el termino “tratamiento” incluye intervencion medicamente aceptable para diversos propositos, incluyendo retrasar o detener la evolucion de la fibrosis renal, la regresion o desaparicion de una lesion, y la prevencion de aparicion y prevencion de recafda de fibrosis renal.
La presente divulgacion tambien proporciona un metodo que utiliza el portador anterior para suministrar un farmaco a celulas productoras de matriz extracelular en el rinon. Este metodo incluye, pero no se limita a, por ejemplo, una etapa de soportar una sustancia a suministrar en el portador, y una etapa de administrar o anadir el portador que soporta la sustancia a suministrar a un organismo o un medio, por ejemplo un medio de cultivo, que contiene celulas productoras de matriz extracelular en el rinon. Estas etapas pueden alcanzarse apropiadamente segun cualquier metodo conocido o un metodo descrito en la presente memoria descriptiva. El metodo de administracion puede combinarse con otro metodo de administracion, por ejemplo, otro metodo de administracion para dirigirse al rinon. Ademas, el metodo incluye una realizacion realizada in vitro y una realizacion en la que se seleccionan como diana celulas productoras de matriz extracelular en el rinon dentro del cuerpo.
[Ejemplos]
La presente invencion se explica con mayor detalle a continuacion haciendo referencia a los ejemplos, pero solo son ejemplos y no limitan en absoluto la presente invencion tal como se define por las reivindicaciones dependientes. Ejemplo 1 Preparacion de liposoma de union a VA que contiene ARNip
Como ARNip, se uso uno que tiene la siguiente secuencia.
Nombre de secuencia: Hsp47-C
5'-GGACAGGCCUGUACAACUA-dTdT-3' (sentido, SEQ ID NO: 1)
5'-UAGUUGUACAGGCCUGUCC-dTdT-3' (antisentido, SEQ ID NO: 2)
Como disoluciones antes de mezclar, se prepararon vitamina A 10 mM (retinol, Sigma; tambien denominado a continuacion en el presente documento VA, disuelto en dimetilsulfoxido), Lipotrust SR 1 mM (Hokkaido System Science Co., Ltd.; tambien denominado a continuacion en el presente documento un liposoma o un lfpido constituyente de liposomas, disuelto en agua libre de nucleasas), y se disolvio ARNip 10 |ig/ml (Hsp47-C en agua libre de nucleasas). Por consiguiente, se anadio VA disuelto en dimetilsulfoxido al Lipotrust SR disuelto en agua libre de nucleasas preparado anteriormente en una razon de 1:1 (mol/mol), y entonces se agito la mezcla mediante un vortex durante 15 segundos y se dejo que permaneciera en reposo a temperatura ambiente durante 5 minutos en estado protegido de la luz, formandose asf un complejo. Se mezclo este complejo con ARNip, dando asf una disolucion para administracion de liposoma de union a VA-ARNip de Hsp47C. Esta disolucion para administracion contema, por 100 |il, 75 nmol de VA, 75 nmol de lfpido constituyente de liposomas, y 112,5 |ig de ARNip, correspondiendo esto a 3,00 |imol/kg de peso corporal de VA, 3,00 |imol/kg de peso corporal del lfpido constituyente de liposomas, y 4,5 mg/kg de peso corporal de ARNip. VA se expuso sobre la superficie del liposoma.
Ejemplo 2 Estudio del efecto terapeutico en raton modelo de fibrosis renal
(1) Preparacion del animal modelo de fibrosis renal
La preparacion de ratones modelo de fibrosis renal se encomendo a Stelic Institute & Co. Espedficamente, a ratones macho C57BL6J/JcL de 2 dfas de edad (CLEA Japon, Inc.), despues de su nacimiento se les dio un inhibidor de N-acetil-p-D-glucosaminidasa, se criaron alimentandolos con pienso CE-2 (CLEA Japon, Inc.) y agua esteril hasta las 4 semanas de edad, se destetaron cuando alcanzaron una edad de 4 semanas, y entonces se criaron alimentandolos con High Fat Diet 32 (CLEA Japon, Inc.), que tiene un contenido bruto de grasa mayor que el de la dieta normal, y agua esteril hasta las 12 semanas de edad, preparando por tanto ratones STAM. Se sabe que estos ratones modelo se veran afectados por nefritis diabetica (vease JP, A, 2009-178143) y puede examinarse la fibrosis renal debida a nefritis diabetica.
Los ratones modelo mencionados anteriormente se dividieron en los cuatro grupos a continuacion, con 10 animales por grupo, a la edad de 12 semanas y 3 dfas.
(Primer grupo) ratones STAM sin tratamiento, grupo de control previo al tratamiento (a continuacion en el presente documento, grupo (Pre) NT-STAM)
(Segundo grupo) grupo de ratones STAM sin tratamiento (a continuacion en el presente documento, grupo NT-STAM)
(Tercer grupo) grupo tratado con glucosa al 5 % (a continuacion en el presente documento, grupo vehnculo) (Cuarto grupo) grupo tratado con liposoma de union a VA-ARNip de Hsp47C (a continuacion en el presente documento, grupo VL-Hsp47C)
(2) Administracion de disolucion para administracion
Para el grupo (Pre) NT-STAM, despues de dividir en grupos, se sacrificaron los ratones antes de empezar el tratamiento y se comprobo el estado clmico. Para los dos grupos mencionados anteriormente distintos al grupo NT-STAM, se administro la disolucion correspondiente para administracion a continuacion mediante inyeccion en vena de la cola un total de 10 veces cada dfa a partir del momento de 12 semanas y 5 dfas de edad.
(Tercer grupo) Como un control de disolvente, se uso una disolucion para administracion (vehnculo o glucosa al 5 %) en la que se mezclaron 0,75 ml/kg de peso corporal de agua libre de nucleasas y 3,250 ml/kg de peso corporal de glucosa al 5 % (Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.).
(Cuarto grupo) Se uso una disolucion para administracion (liposoma de union a VA- ARNip de Hsp47C o VL-Hsp47C) en la que se mezclaron 75 nmol de VA, 75 nmol de lfpido constituyente de liposomas, y 112,5 |ig de ARNip por 100 |il de disolucion para administracion y se llevo a cabo el ajuste final usando glucosa al 5 %.
El peso corporal en la fecha cuando empezo la administracion se definio como el peso corporal patron, y se administro 4 ml/kg de peso corporal de cada disolucion para administracion en la vena de la cola cuando el porcentaje de cambio de peso corporal en la fecha de administracion estaba dentro del 20 % del peso corporal patron. Cuando sobrepasaba el 20 %, ese peso corporal se definio despues como un nuevo peso corporal patron, y se restableda la dosis.
(3) Estudio del efecto de mejora en la fibrosis renal
Al 2° dfa despues de que se completo la administracion final (15 semanas, 4 d^as), los ratones fueron sacrificados extrayendo la sangre del corazon con anestesia de dietil eter, y se extrajeron los rinones.
Se fijaron los rinones extrafdos, usando un tampon de acido fosforico-paraformaldel'ndo al 4 % y se incrustaron en parafina, y se prepararon muestras de seccion delgada. Con el fin de examinar un efecto terapeutico en fibrosis renal, se llevo a cabo tincion con rojo sirio (tincion de fibras que tine espedficamente de rojo el colageno), y se tomo una imagen usando un microscopio de fluorescencia todo en uno BZ-9000 (Keyence Corporation) a 80x. Se llevo a cabo el analisis tomando aleatoriamente imagenes de 20 campos de vision en la region del cortex renal, y se cuantificaron usando software de analisis que vema con el BZ-9000.
La figura 1 muestra una imagen microscopica representativa del glomerulo de la region del cortex renal en cada grupo tratado. La tincion con rojo sirio es una tincion de fibras espedfica para colageno, y un sitio de fibrosis se tine con rojo hasta rosa. A partir de los resultados de microscopio, no se vieron diferencias entre cualquiera de los grupos con respecto a engrosamiento de la membrana basal glomerular, el grado de fibrosis en la region mesangial (estroma) y los alrededores de celulas tubulares fue leve para el grupo tratado con VL-Hsp47C comparado con los otros tres grupos, y hubo una mejora en la fibrosis renal (ampliacion de la region mesangial mostrada por una flecha). Ademas, se tomaron aleatoriamente 20 campos de vision en la region del cortex renal por raton individual, y se calculo la proporcion de la region fibrotica. A partir de los resultados mostrados en la figura 2, en el grupo tratado con VL-Hsp47C, la proporcion de una region positiva para rojo sirio fue significativamente menor que en los grupos NT-STAM y vedculo, y hubo una mejora en la fibrosis renal. Se llevo a cabo una evaluacion de diferencias estadfsticamente significativas usando la prueba de la t.
A partir del resultado anterior, se observo una tendencia de mejora de la fibrosis en el grupo tratado con VL-Hsp47C. Considerando que ARNip basicamente actua dentro del citoplasma, este resultado sugiere que el retinoide funciona como un agente que selecciona como diana celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, suministra eficazmente un farmaco a las mismas celulas, y por tanto puede suprimir la evolucion de la fibrosis renal.
Ejemplo 3 Silenciamiento genico en celulas productoras de matriz extracelular en rinon mediante liposoma de union a VA que contiene ARNip
(1) Aislamiento y recogida de celulas
Se aislaron celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, que tienen propiedades similares a las de las celulas estrelladas hepaticas, y se recogieron tal como sigue.
En primer lugar, se prepararon con antelacion los cinco tipos de disoluciones a continuacion. Se almacenaron todas las disoluciones a 4 °C.
Disolucion de EGTA: Se anadieron 1,19 g de HEPES y 0,1 g de EGTA a 500 ml de HBSS (Invitrogen 14170) y se mezclo.
Disolucion de colagenasa al 0,02 %: Se anadieron 1,19 g de HEPES, 0,235 g de CaCl22H2O y 0,1 g de colagenasa (Yakult Y K -102) a 500 ml de HBSS (Invitrogen 24020) y se mezclo.
Disolucion de colagenasa al 0,02% proteasa al 0,1 %: Se anadieron 40 mg de proteasa (Sigma P6911-1G) a 40 ml de colagenasa al 0,02 %y se mezclo.
Solucion de Hanks: Se anadieron 0,05 g de MgSO4 a 500 ml de HBSS (Invitrogen 24020) y se mezclo.
Disolucion de Nycodenz® al 10 % (Axis-Shield Prod. n.° 1114542-1): Se anadieron 50 g de Nycodenz® a 500 ml de agua destilada y se mezclo y se disolvio.
Se anestesio un raton (C57BL6/J macho, de 20 a 30 g, de 6 a 8 semanas de edad), se afeito el area abdominal y se realizo una incision a lo largo de la lmea media, y se extrajeron los rinones. Asf, se lavaron los rinones extrafdos con 30 ml de disolucion de EGTA tres veces, eliminando asf la sangre. Se colocaron los rinones en 5 ml de disolucion de EGTA, y se cortaron finamente usando tijeras. Se anadio disolucion de EGTA a los rinones cortados para producir un volumen total de 30 ml, y se llevo a cabo centrifugacion a 1300 rpm durante 5 minutos. Despues de la centrifugacion, se retiro el sobrenadante, se anadieron 30 ml de disolucion de colagenasa al 0,02 % proteasa al 0,1 %, y se transfirio la mezcla a un matraz Erlenmeyer y se agito a 37 °C durante 20 minutos. Se filtro la disolucion agitada usando un filtro de celulas (Falcon 352360), y se centrifugo el filtrado a 1300 rpm durante 5 minutos. Se suspendio el sedimento en solucion de Hanks, y se mezclo disolucion de Nycodenz® al 10% con la solucion de Hanks para dar una concentracion final de Nycodenz® al 8 %. Se centrifugo la mezcla de disolucion a 1400xg durante 20 minutos. Se recogio el sobrenadante y se centrifugo adicionalmente a 1300 rpm durante 5 minutos. Se retiro el sobrenadante, se resuspendio la muestra en FBS al 10 %-DMEM (Sigma D6546), y se sembro en un matraz

Claims (5)

REIVINDICACIONES
1. Composicion farmaceutica para su uso en el tratamiento de nefritis diabetica, comprendiendo la composicion un portador que comprende un retinoide que estimula la administracion de una sustancia a las celulas productoras de matriz extracelular en el rinon y un farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon, en la que el portador tiene la forma de un liposoma, y la razon molar de retinoide y lfpido contenidos en el liposoma es de 8:1 a 1:4.
2. Composicion farmaceutica para su uso segun la reivindicacion 1, en la que el retinoide comprende retinol.
3. Composicion farmaceutica para su uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en la que el farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular en el rinon se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor de actividad o produccion de PAI-1, un inhibidor de actividad celular, un inhibidor de crecimiento, un inductor de apoptosis, y una molecula de iARN, ribozima, acido nucleico antisentido, o polinucleotido quimerico de ADN/a Rn que seleccionan como diana al menos una de las moleculas constituyentes de la matriz extracelular o moleculas involucradas en la produccion o secrecion de las moleculas constituyentes de la matriz extracelular o un vector que expresa los mismos.
4. Composicion farmaceutica para su uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en la que el farmaco para controlar la actividad o el crecimiento de celulas productoras de matriz extracelular es un inhibidor de HSP47.
5. Composicion farmaceutica para su uso segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el farmaco y el portador se mezclan en un lugar de tratamiento medico o en sus alrededores.
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Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009221164A (ja) 2008-03-17 2009-10-01 Nitto Denko Corp 肺線維症処置剤
US9572886B2 (en) 2005-12-22 2017-02-21 Nitto Denko Corporation Agent for treating myelofibrosis
JP5950428B2 (ja) * 2010-08-05 2016-07-13 日東電工株式会社 線維化組織から正常組織を再生するための組成物
JP6340162B2 (ja) 2012-12-20 2018-06-06 日東電工株式会社 アポトーシス誘導剤
WO2014113695A1 (en) 2013-01-18 2014-07-24 Cornell University Methods of treating diseases associated with high fat diet and vitamin a deficiency using retinoic acid receptor agonists
JP6602034B2 (ja) 2014-04-02 2019-11-06 日東電工株式会社 標的化分子およびその使用
EP3129425B1 (en) 2014-04-07 2019-04-10 Nitto Denko Corporation Polymer-based hydrotropes for hydrophobic drug delivery
CN105597085A (zh) * 2015-12-17 2016-05-25 哈尔滨博翱生物医药技术开发有限公司 成纤维细胞生长因子-21在治疗肾纤维化中的应用
JP6833456B2 (ja) * 2016-11-02 2021-02-24 日東電工株式会社 皮膚線維症処置剤
KR102352489B1 (ko) 2019-12-09 2022-01-18 전남대학교산학협력단 소수성 개질된 글리콜 키토산 나노입자 및 이를 이용한 신장 표적화 약물 전달체

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5238924A (en) 1984-05-03 1993-08-24 Merck & Co., Inc. Treatment of renal diseases with ace inhibitors
JP3810020B2 (ja) 1993-04-22 2006-08-16 武田薬品工業株式会社 腎疾患の予防または治療剤
US6183774B1 (en) * 1996-01-31 2001-02-06 Collaborative Laboratories, Inc. Stabilizing vitamin A derivatives by encapsulation in lipid vesicles formed with alkylammonium fatty acid salts
US6334999B1 (en) * 1999-08-27 2002-01-01 Research Development Foundation Liposomal aerosols for delivery of chemotherapeutic retinoids to the lungs
ATE327751T1 (de) 2000-01-31 2006-06-15 Pfizer Prod Inc Verwendung von aktivatoren des prostaglandinrezeptores 4 zur behandlung von akuter oder chronischer niereninsuffizienz
BR0006556A (pt) * 2000-12-28 2002-09-17 Apsen Farmaceutica S A Composição farmacêutica para uso tópico à base de corticosteróide para tratamento de fimose
IL143366A0 (en) 2001-05-24 2002-04-21 Harasit Medical Res Services & Treatment of renal fibrosis
JP2004043459A (ja) 2002-05-24 2004-02-12 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd ＴＧＦ−β阻害活性を有する低分子化合物からなる医薬
EP1454625A1 (en) 2003-03-06 2004-09-08 Speedel Development AG Pyridylsulfonamidyl-pyrimidines for the treatment of diabetic nephropathies
JP2007536241A (ja) 2004-05-03 2007-12-13 ユニバーシティ オブ バージニア パテント ファウンデーション 糖尿病性腎症の処置のためのａ２ａアデノシンレセプターアゴニスト
KR100613342B1 (ko) 2004-12-16 2006-08-21 동부일렉트로닉스 주식회사 반도체 소자 및 그 제조방법
PT2730277T (pt) * 2004-12-22 2020-04-21 Nitto Denko Corp Veículo de fármaco e kit de veículo de fármaco para a inibição da fibrose
JP2009221164A (ja) * 2008-03-17 2009-10-01 Nitto Denko Corp 肺線維症処置剤
JP2007099641A (ja) 2005-09-30 2007-04-19 Tsumura & Co インドールキノキサリン類化合物、その製造方法およびそれを用いた医薬組成物
JP5342834B2 (ja) * 2008-09-05 2013-11-13 日東電工株式会社 骨髄線維症処置剤
JP2009292725A (ja) 2006-09-01 2009-12-17 Stelic Institute Of Regenerative Medicine 腎疾患改善剤
TWI407971B (zh) * 2007-03-30 2013-09-11 Nitto Denko Corp Cancer cells and tumor-related fibroblasts
JP2009007258A (ja) 2007-06-26 2009-01-15 Kowa Pharmaceutical Co Ltd Ｐａｉ−１産生抑制作用を有する３−アニリノ−２−シクロアルケノン誘導体
JP2009029750A (ja) 2007-07-27 2009-02-12 Kowa Co アリールプロパン誘導体を有効成分とする糖化最終産物形成阻害剤
CA2698812A1 (en) * 2007-09-14 2009-03-19 Nitto Denko Corporation Drug carriers
JP2009178143A (ja) 2008-02-01 2009-08-13 Stelic Institute Of Regenerative Medicine 脂肪性肝炎−肝癌モデル動物
CN102159247A (zh) * 2008-07-30 2011-08-17 日东电工株式会社 药物载体
AU2009290292A1 (en) * 2008-09-12 2010-03-18 Nitto Denko Corporation Imaging agents of fibrotic diseases
JP2010077101A (ja) 2008-09-29 2010-04-08 Toray Ind Inc 腎線維症の治療剤又は予防剤
WO2011072082A2 (en) * 2009-12-09 2011-06-16 Nitto Denko Corporation Modulation of hsp47 expression
PL2718261T3 (pl) * 2011-06-08 2016-08-31 Nitto Denko Corp Związki do nakierowywania dostarczania leku i podwyższające aktywność sirna

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