ES2608787T3 - Derivados de 1H-indol-3-carboxamida y sus usos como antagonistas de P2Y12 - Google Patents

Abstract

Compuesto que responde a la fórmula (I)**Fórmula** en la que: A representa un radical bivalente elegido entre:**Fórmula** R1 representa un alquilo (C1-C4); R2 representa un alquilo (C1-C3); R3 representa un grupo -NR7R8, R7 y R8, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos constituyen un heterociclo saturado, que comprende de 4 a 6 miembros de anillo y que puede contener otro átomo de nitrógeno: estando sustituido dicho heterociclo con al menos un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido con al menos uno de los grupos siguientes: * uno, dos o tres átomos de halógeno o, * un alcoxi (C1-C3) no sustituido o sustituido con uno, dos o tres átomos de halógeno; R4 representa un átomo de halógeno, en forma de base o de sal de adición a un ácido o a una base así como sus enantiómeros y diastereoisómeros, incluidas sus mezclas racémicas.

Description

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DESCRIPCION

Derivados de 1H-indol-3-carboxamida y sus usos como antagonistas de P2Y12

La presente invencion tiene por objeto nuevos derivados de N-[(1H-pirazol-1-il)aril]-1H-indol o 1H-indazol-3- carboxamida, su preparacion y su aplicacion en terapeutica.

Los compuestos segun la presente invencion son antagonistas reversibles del receptor purinergico P2Y12. Estos compuestos son anti-agregantes plaquetarios, que ejercen un efecto anti-trombotico potente. Pueden ser utilizados para el tratamiento y la profilaxis de trastornos cardiovasculares tales como las enfermedades tromboembolicas o las reestenosis.

En el mundo industrializado, las complicaciones medicas relacionadas con la aparicion de una trombosis representan una de las causas principales de mortalidad. Algunos ejemplos de patologfas asociadas al desarrollo de una trombosis incluyen el infarto agudo de miocardio, la angina (de pecho) inestable y la angina estable cronica, los ataques isquemicos pasajeros, los accidentes vasculares cerebrales, la enfermedad vascular periferica, la preeclampsia y la eclampsia, la trombosis venosa profunda, las embolias (cerebral, pulmonar, coronaria, renal, etc.), la coagulacion intra-vascular diseminada, o la purpura trombotica trombocitopenica. Existen tambien riesgos de complicaciones tromboticas y reestenoticas durante y despues de los procedimientos quirurgicos invasivos, tales como la angioplastia, la endarterectoirna carotida, el by-pass aorto-coronario por injerto, o tambien la colocacion de stents o de protesis endovasculares.

Las trombosis arteriales pueden aparecer despues de una lesion de la pared de un vaso o de una ruptura de una placa de aterosclerosis. Las plaquetas tienen una funcion esencial en la formacion de estas trombosis. Las plaquetas pueden ser activadas bien por mediadores liberados en la circulacion sangumea por las celulas circulantes o por celulas endoteliales danadas presentes a lo largo de la pared del vaso, o bien por moleculas trombogenicas de la matriz sub-endotelial - como el colageno - expuestas durante las lesiones vasculares. Ademas, las plaquetas pueden tambien ser activadas en condiciones de flujo sangumeo con tension de cizallamiento elevada que se encuentran en los vasos estenosados. Despues de la activacion, las plaquetas circulantes se adhieren y se acumulan a nivel de la lesion vascular para formar un trombo. Durante este proceso, los trombos generados pueden ser suficientemente voluminosos para bloquear en parte o completamente la circulacion sangumea en el vaso.

En las venas, los trombos tambien pueden formarse a nivel de zonas de estasis o de circulacion sangumea ralentizada. Debido a su naturaleza, estos trombos venosos pueden producir embolias que se desplazan en el sistema vascular. Estas embolias son capaces entonces de bloquear la circulacion sangumea en los vasos mas distantes, tales como las arterias pulmonar o coronaria.

Numerosos estudios han demostrado que el adenosina 5'-difosfato (ADP) es un mediador capital de la activacion y de la agregacion plaquetaria, teniendo una funcion clave en el inicio y la progresion de la formacion de un trombo (Maffrand et al., Thromb. Haemostas. (1988) 59, 225-230; Herbert et al., Arterioscl. Thromb. (1993) 13, 1171-1179).

El ADP se libera en la circulacion por los globulos rojos danados y las celulas endoteliales de la pared aterosclerotica, y mas espedficamente se segrega por las plaquetas activadas en las que el ADP se almacena en los granulos densos a una concentracion muy elevada. La agregacion plaquetaria inducida por el ADP se activa por su union a dos receptores purinergicos espedficos, expresados sobre la membrana celular de las plaquetas humanas: P2Y1 y P2Y12. El receptor P2Y1, acoplado a la estimulacion de la PLCp via Gaq, es responsable de la movilizacion de almacenados internos de calcio, del cambio de forma de las plaquetas, y de una agregacion transitoria con ADP. El receptor P2Y12, acoplado a la inhibicion de la adenilciclasa via Gai2 y a la activacion de la PI-3 quinasa, es responsable de la amplificacion de las respuestas y de la estabilizacion de la agregacion (Gachet, Thromb. Haemost. (2001) 86, 222-232; Andre et al., J. Clin. Invest. (2003) 112, 398-406). La utilizacion de ratones transgenicos P2Y1 -/- (Gachet et al., J Clin Invest (1999) 104, 1731-1737; Gachet et al., Circulation (2001) 103, 718723; Gachet et al., Haematologia (2002) 87, 23) y P2Y12-/- (Conley et al., Nature (2001) 409, 202-207) ha permitido poner en evidencia la importancia de estos dos receptores en el desarrollo de trombosis in vivo. En el ser humano, se han descrito unas deficiencias geneticas de P2Y12 como siendo asociadas a un fenotipo hemorragico y a una alteracion pronunciada de la agregacion plaquetaria inducida por el ADP (Kanakura et al., J Thromb Haemost.

(2005) 3, 2315-2323).

La utilizacion de Clopidogrel en clmica humana ha proporcionado la prueba de que el bloqueo del receptor P2Y12 por un antagonista representa una estrategia terapeutica clave en el tratamiento de las enfermedades cardiovasculares. El Clopidogrel es un pro-farmaco de la familia de las tienopiridinas cuyo metabolito activo se relaciona de forma covalente con el receptor P2Y12, dando lugar a una inhibicion irreversible de la actividad plaquetaria in vivo. (Savi et al., Biochem Biophys Res Commun (2001) 283, 379-383; Savi et al., Proc Nati Acad Sci

(2006) 103, 11069-11074). Esta molecula habfa mostrado inicialmente su eficacia en varios ensayos clmicos reduciendo el riesgo de accidentes cardiovasculares en pacientes con riesgo (“A randomised, blinded, trial of clopidogrel versus aspirin in patients at risk of ischaemic events (CAPRIE)” CAPRIE steering committee Lancet (1996) 348, 1329-1339; “The Clopidogrel in Unstable Angina to Prevent Recurrent Events (CURE). Effects of

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Clopidogrel in Addition to Aspirin in Patients with Acute Coronary Syndromes without ST-Segment Elevation” CURE steering committee N Engl J Med (2001) 345, 7, 494-502).

Se han descrito unos antagonistas sinteticos del receptor P2Y12 que presentan una actividad anti-plaquetaria y anti- trombotica, por ejemplo en el documento WO 2009/080227. Sin embargo, subsiste la necesidad de nuevos antagonistas que poseen propiedades superiores, en particular la necesidad de antagonistas reversibles que presentan una mejor relacion beneficio a riesgo.

La presente invencion tiene por objeto los compuestos que responden a la formula (I):

imagen1

en la que:

A representa un radical bivalente elegido entre:

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R1 representa un alquilo (C1-C4);

R2 representa un alquilo (C1-C3);

R3 representa un grupo -NR7R8, R7 y Rs, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, constituyen un heterociclo saturado, que comprende de 4 a 6 miembros y que puede contener otro atomo de nitrogeno; estando sustituido dicho heterociclo con al menos un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido con al menos uno de los grupos siguientes:

• uno, dos o tres atomos de halogeno, o

• un alcoxi (C1-C3) no sustituido o sustituido con uno, dos o tres atomos de halogeno;

R4 representa un atomo de halogeno.

Los compuestos de formula (I) pueden contener uno o mas atomos de carbono asimetricos. Pueden existir, por lo tanto, en forma de enantiomeros o de diastereoisomeros. Estos enantiomeros, diastereoisomeros asf como sus mezclas, incluidas las mezclas racemicas, forman parte de la invencion.

Los compuestos de formula (I) pueden existir en forma de bases o salificados por acidos o bases, en particular acidos o bases farmaceuticamente aceptables. Dichas sales de adicion forman parte de la invencion.

Estas sales se preparan ventajosamente con acidos o bases farmaceuticamente aceptables, pero las sales de otros acidos o bases utiles, por ejemplo, para la purificacion o el aislamiento de los compuestos de formula (I), forman parte tambien de la invencion.

Por atomo de halogeno, se entiende un atomo de bromo, de cloro, de fluor o de yodo.

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Por alquilo, se entiende un radical alquilo lineal o ramificado de uno a cuatro atomos de carbono, tal como el radical metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo.

Por alcoxi, se entiende un radical alcoxi lineal o ramificado de uno a tres atomos de carbono, tal como el radical metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi.

Por heterociclo, se entiende un grupo alquilo dclico que comprende de 4 a 6 atomos que forman este anillo, y en el que uno o dos son heteroatomos seleccionados. Se pueden citar en particular los grupos pirolidina, imidazolina, piperidina, pirazolidina y piperazina.

Entre los compuestos de formula (I) segun la invencion, se puede citar un sub-grupo de compuestos en el que A representa:

imagen3

Otro sub-grupo de compuestos de formula (I) es tal que A representa:

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Otro sub-grupo de compuestos de formula (I) es tal que Ri representa un grupo n-propilo.

Otro sub-grupo de compuestos de formula (I) es tal que R3 representa un grupo piperazina sustituido con al menos un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido con al menos uno de los grupos siguientes:

• uno, dos o tres atomos de halogeno, o

• un alcoxi (C1-C3) no sustituido o sustituido con uno, dos o tres atomos de halogeno Otro sub-grupo de compuestos de formula (I) es tal que R4 representa un atomo de cloro.

Los sub-grupos anteriores tomados separadamente o en combinacion forman parte tambien de la invencion.

Entre los compuestos de formula (I), objetos de la invencion, se pueden citar principalmente los compuestos siguientes:

- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H-indol-3- carboxflico

- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H- indol-3-carboxflico

- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(3,3,3-trifluoro-propil)-piperazin-1-il]- etil}-1H-indol-3-carboxflico

- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}- 1H-indol-3- carboxflico

- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo- etil}-1H-indol-3-carboxflico

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- [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5- cloro-1-{2-oxo-2-[4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazin- 1 -il]-etil}-1H-indol-3-carbox^lico

en estado de base o de sal de adicion a un acido o a una base.

Se senala que los compuestos anteriores se han denominado en nomenclature IUPAC mediante el programa informatico AutoNom (Beilstein Informations system).

En lo que sigue, se entiende por grupo protector Pg un grupo que permite, por un lado, proteger una funcion reactiva tal como un hidroxi o una amina durante una smtesis y, por otro lado, regenerar la funcion reactiva intacta al final de la smtesis. Los ejemplos de grupos protectores asf como los metodos de proteccion y de desproteccion se dan en "Protective Group in Organic Synthesis", Green et al., 4a edicion, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 2007.

Se entiende por grupo saliente, en lo que sigue, un grupo que puede ser facilmente escindido de una molecula por ruptura de un enlace heterolftico, con salida de un par electronico. Este grupo puede ser reemplazado asf facilmente por otro grupo durante una reaccion de sustitucion, por ejemplo. Tales grupos salientes son, por ejemplo, los halogenos o un grupo hidroxi activado tal como un metanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato, triflato, acetato, etc. Los ejemplos de grupos salientes asf como las referencias para su preparacion se dan en "Advanced Organic Chemistry", M.B. Smith y J. March, 6a edicion, Wiley Interscience, 2007, p. 496-501.

De acuerdo con la invencion, se pueden preparar los compuestos de formula (I) segun un procedimiento que se caracteriza porque:

se hace reaccionar un compuesto de formula (IIB):

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en la que A, Ri, R2 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) con una amina de formula (III):

HR3 (III)

en la que R3 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I).

Eventualmente, se transforma el compuesto de formula (I) en una de sus sales con acidos minerales u organicos.

La reaccion se efectua en presencia de una base como, por ejemplo, la trietilamina, la 4-dimetilaminopiridina, la N,N- diisopropiletilamina, la N-metilmorfolina, la N-etilmorfolina o la piridina y en presencia de un agente de acoplamiento como, por ejemplo, el cloruro de bis(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)fosfmico, el cloroformato de isobutilo, el 1,1'- carbonildiimidazol, el hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, el N-hidroxibenzotriazol, el 2-ciano- 2-(hidroxiimino)acetato de etilo. El disolvente utilizado es, por ejemplo, DCM, 1,2-dicloroetano o N,N- dimetilformamida. La temperatura de reaccion esta comprendida entre -10°C y la temperatura de reflujo del disolvente.

Los compuestos de formula (I) se pueden preparar tambien por reaccion de un acido o de un derivado funcional activado de este acido de formula:

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en la que R3 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I), con un compuesto de formula:

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en la que A, R1 y R2 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I).

Cuando se trata un compuesto de formula (V) con el acido de formula (IV-B) en sf mismo, se trabaja en presencia de un agente de acoplamiento utilizado en qmmica peptidica tal como la 1,3-diciclohexilcarbodiimida o el hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida o el hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitris(dimetilamino)fosfonio o el N-hidroxibenzotriazol o el hexafluorofosfato de benzotriazol-1 -il-oxitris(pirrolidino)fosfonio o el tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio o el hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, en presencia de una base tal como la trietilamina, la N,N-diisopropiletilamina o la 4-dimetilaminopiridina, en un disolvente tal como el DCM, el 1,2-dicloroetano, la N-N-dimetilformamida o el tetrahidrofurano a una temperatura comprendida entre -10°C y la temperatura de reflujo del disolvente.

Como derivado funcional activado del acido (IV-B) se puede utilizar el cloruro de acido, el antudrido, un antudrido mixto, un ester alqrnlico de C1-C4 en el que el alquilo es lineal o ramificado, un ester activado, por ejemplo ester de p-nitrofenilo.

Asf, se puede, por ejemplo, hacer reaccionar el cloruro de acido obtenido por reaccion del cloruro de tionilo o del cloruro de oxalilo sobre el acido de formula (IV-B), con el compuesto de formula (V), en un disolvente, tal como un disolvente clorado (el DCM, el 1,2-dicloroetano, el cloroformo por ejemplo), un eter (tetrahidrofurano, dioxano por ejemplo), una amida (N,N-dimetilformamida por ejemplo) o piridina, bajo una atmosfera inerte, a una temperatura comprendida entre 0°C y la temperatura de reflujo del disolvente, en presencia de una amina terciaria tal como la trietilamina, la N-metilmorfolina, la piridina, la 4-dimetilaminopiridina o el 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno.

De manera particular, se pueden preparar ciertos compuestos de formula (I) a partir de otros compuestos de formula (I).

Los compuestos de formula (I) asf obtenidos se pueden separar ulteriormente del medio de reaccion y ser purificados segun los metodos clasicos, por ejemplo, por cristalizacion o cromatograffa en columna de sflice.

Los compuestos de formula (I) asf obtenidos son aislados en forma de base libre o de sal, segun tecnicas clasicas.

Los compuestos de formula (IIB) se pueden preparar segun un procedimiento en el que se hidroliza, en medio acido o basico, un compuesto de formula (IIA):

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en la que A, Ri, R2 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) y Z representa un alquilo (C1-C4).

Eventualmente, se transforma el compuesto de formula (IIA) en una de sus sales con bases minerales u organicas.

La reaccion se efectua en medio acido por accion de un acido fuerte, como, por ejemplo, acido clorhudrico o acido sulfurico, en un disolvente, en particular un disolvente polar, tal como, por ejemplo, el dioxano o el agua y a una temperatura comprendida entre -10°C y 110°C.

La reaccion se efectua en medio basico por accion de una base alcalina, como, por ejemplo, el hidroxido de potasio, el hidroxido de litio o el hidroxido de sodio, en un disolvente, en particular un disolvente polar, tal como, por ejemplo, el dioxano, el tetrahidrofurano, el agua, el metanol, el etanol o una mezcla de estos disolventes y a una temperatura comprendida entre -10°C y la temperatura de reflujo del disolvente.

Los compuestos de formula (IIA) se pueden preparar por reaccion de un acido o de un derivado funcional activado de este acido de formula:

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en la que R4 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I) y Z representa un alquilo (C1-C4), con un compuesto de formula:

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en la que A, R1 y R2 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I).

Cuando se trata un compuesto de formula (V) con el acido de formula (IV-A) en sf mismo, se trabaja en presencia de un agente de acoplamiento utilizado en qrnmica peptfdica tal como la 1,3-diciclohexilcarbodiimida o el hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida o el hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitris(dimetilamino)fosfonio o el hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitris(pirrolidino)fosfonio o el tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-

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Como derivado funcional activado del acido (IV-A) se puede utilizar el cloruro de acido, el anhudrido, un anhudrido mixto, un ester alqmlico de C1-C4 en el que el alquilo es lineal o ramificado, un ester activado, por ejemplo ester de p-nitrofenilo.

Asf, se puede, por ejemplo, hacer reaccionar el cloruro del acido obtenido por reaccion de cloruro de tionilo o de cloruro de oxalilo sobre el acido de formula (IV-A), con el compuesto de formula (V), en un disolvente, tal como un disolvente clorado (el DCM, el 1,2-dicloroetano, el cloroformo por ejemplo), un eter (tetrahidrofurano, dioxano por ejemplo), una amida (la N,N-dimetilformamida por ejemplo) o la piridina, bajo una atmosfera inerte, a una temperatura comprendida entre 0°C y la temperatura de reflujo del disolvente, en presencia de una amina terciaria tal como la trietilamina, la N-metilmorfolina, la piridina, la 4-dimetilaminopiridina o el 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7- eno.

Los compuestos de formula (III) pueden ser conocidos, comercializados o preparados segun metodos conocidos para el experto en la tecnica.

Los compuestos de formula (V) se preparan por reaccion de desproteccion de un compuesto de formula:

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en la que A y R2 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I), R'1 representa un atomo de hidrogeno o un alquilo (C1-C3), R”1 representa un atomo de hidrogeno o un grupo -COOZ. Z representa un alquilo (C1-C4) y Pg representa un grupo protector, preferentemente un grupo ferc-butoxicarbonilo o benciloxicarbonilo.

La reaccion se efectua por accion de un acido como, por ejemplo, el acido clorhudrico o el acido trifluoroacetico en presencia o no de un disolvente, por ejemplo agua o dioxano, y a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y la temperatura de reflujo del medio de reaccion.

Los compuestos de formula (VI) para los que R”1 = H, se preparan por reaccion de un compuesto de formula:

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en la que R1 y R2 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I), con un compuesto de formula:

Y-A-NHPg (X)

en la que A es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I), Y representa un grupo saliente tal como un atomo de halogeno, un metanosulfonato, un benceno sulfonato, un p-toluenosulfonato, un triflato o un acetato y Pg representa un grupo protector, preferentemente un grupo ferc-butoxicarbonilo o benciloxicarbonilo.

La reaccion se efectua en presencia de una base como, por ejemplo, el carbonato de potasio, el carbonato de cesio o el ferc-butilato de potasio. La reaccion se efectua en un disolvente tal como, por ejemplo, el dimetilsulfoxido, la N,N-dimetilformamida, el dioxano o el tetrahidrofurano y a una temperatura comprendida entre 0°C y 150°C.

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Los compuestos de formula (VI) para los que R”i = COOZ pueden prepararse segun el ESQUEMA 1 siguiente, en el que R2 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I), Z representa un alquilo (C1-C4) y Pg representa un grupo protector, preferentemente un grupo ferc-butoxicarbonilo o benciloxicarbonilo.

ESQUEMA I

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En la etapa a1 del ESQUEMA I, se condensa una 4-amino-ciclohexanona protegida con carbazato de ferc-butilo para obtener el compuesto (XI).

En la etapa b1, se reduce el compuesto (XI) con la ayuda de cianoborohidruro de sodio en el metanol, y despues se separa el isomero de conformacion trans (XII) por cristalizacion en acetato de etilo en presencia de una cantidad estequiometrica de acido clorhudrico.

En la etapa C1, se desprotege la funcion hidrazina en presencia de acido clorhudrico en exceso en el dioxano para obtener el compuesto (XIII).

En la etapa d1 se condensa el derivado hidrazina (XIII) con ester etflico del acido 2-[1-dimetilamino-metiliden]-3-oxo- butrnco en presencia de trietilamina en etanol a reflujo con el fin de generar el derivado pirazol (XIV).

En la etapa e1 se hidroliza el compuesto de formula (XIV) en presencia de hidroxido de sodio acuoso en una mezcla de tetrahidrofurano y de etanol para obtener el acido carboxflico correspondiente (XV).

En la etapa f-i, se hace reaccionar el compuesto de formula (XV) con 1,1-carbonildiimidazol y despues, sin aislar, se trata el compuesto intermedio asf obtenido con una sal de magnesio de un hemi-ester del acido malonico segun el metodo descrito en Angew. Chem. Inf. Ed. Engl (1979) 18(1), 72-74.

En la etapa g-i, se alquila el compuesto de formula (XVI) asf obtenido por reaccion de un halogenuro, de un mesilato o de un tosilato de alquilo (C1-C3), en presencia de una base tal como, por ejemplo, el carbonato de potasio, de un catalizador de transferencia de fase tal como, por ejemplo, el bromuro de tetrabutilamonio en un disolvente como, por ejemplo, el tetrahidrofurano y a una temperatura comprendida entre 0°C y la temperatura de reflujo del disolvente.

Los compuestos de formula (IX) en la que R1 = alquilo (C1-C4) pueden prepararse segun el ESQUEMA II siguiente en el que R2 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I), Pg representa un grupo protector, preferentemente un grupo tritilo.

ESQUEMA II

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5 En la etapa a2 del ESQUEMA II, se protege el atomo de nitrogeno del compuesto de formula (IX) para el que Ri = OMe, en particular con un grupo trifilo, y despues se hidroliza en medio basico el compuesto intermedio obtenido.

En la etapa b2, el compuesto de formula (XX) asf obtenido se hace reaccionar con N-metoximetanamina, en presencia de un agente de acoplamiento tal como, por ejemplo, cloruro de bis(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)fosfmico y en 10 presencia de una base tal como, por ejemplo, 4-dimetilaminopiridina. La reaccion se efectua en un disolvente como, por ejemplo, diclorometano y a una temperatura comprendida entre 0°C y la temperatura ambiente.

El compuesto de formula (XXI) asf obtenido se hace reaccionar en la etapa C2 con un compuesto organometalico tal como un halogenuro de alquil (Ci-C4)-magnesio, en un disolvente tal como eter dietflico o tetrahidrofurano y a una 15 temperatura comprendida entre -70°C y la temperatura ambiente.

El compuesto de formula (XXII) asf obtenido se desprotege en la etapa d2 segun los metodos clasicos (Protective Group in Organic Synthesis, Green et al., 4a edicion, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 2007).

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Los compuestos de formula (X) en los que A = I pueden prepararse segun el ESQUEMA III siguiente en el que Y representa un mesilato y Pg representa un grupo protector, preferentemente un grupo terc-butoxicarbonilo.

ESQUEMA III

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En la etapa a3 del ESQUEMA III, se protege el alcohol secundario del 3-hidroxiglutarato de dimetilo con un grupo ferc-butildimetilsililo.

En la etapa b3, se reduce el compuesto (XXIII) as^ obtenido en presencia de borohidruro de litio en dietileter a 0°C para generar el compuesto (XXIV).

En la etapa c3, se oxidan las dos funciones alcoholes en aldetndo por una oxidacion de Swern y despues se genera el compuesto (XXV) por doble aminacion reductora de ciclacion con carbazato de ferc-butilo en presencia de triacetoxiborohidruro de sodio.

En la etapa d3, se desprotege la funcion sililada con el fin de regenerar el alcohol secundario del compuesto (XXVI).

En la etapa e3, se activa el alcohol en presencia de cloruro de metanosulfonilo, de trietilamina y de 4- dimetilaminopiridina, en el diclorometano para obtener el mesilato (X).

Los compuestos de formula (IV-A) para los que R3 = OZ se preparan por reaccion de un compuesto de formula:

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con un compuesto de formula (VII):

O

II

Y-CH2-C-OZ (VII)

en la que Y representa un grupo saliente tal como un atomo de halogeno, un metanosulfonato, un bencenosulfonato, un p-toluenosulfonato o un triflato y Z representa un alquilo (C1-C4).

La reaccion se efectua en presencia de dos equivalentes de una base fuerte como, por ejemplo, hidruro de sodio, en un disolvente, en particular un disolvente polar aprotico, como, por ejemplo, N,N-dimetilformamida y a una temperatura comprendida entre -30°C y la temperatura de reflujo del disolvente.

5

10

15

20

25

30

35

Los compuestos de formula (IV-B) se preparan segun el ESQUEMA IV siguiente en la que R4 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I):

ESQUEMA IV

imagen18

En la etapa a4 del ESQUEMA IV, se protege el acido carboxflico del derivado 3-carboxiindol (VIII) en presencia de N,N-dimetilformamida di-terc-butilacetal en el benceno con el fin de generar el ester terc-butilico (XXVIII) correspondiente.

En la etapa b4, se alquila el compuesto (XXVIII) asf obtenido con la ayuda de un compuesto de formula (VII) siguiente,

0

II

Y-CH2-C-OZ (VII)

en la que Y representa un grupo saliente tal como un atomo de halogeno, un metanosulfonato, un bencenosulfonato, un p-toluenosulfonato o un triflato y Z representa un alquilo (C1-C4) o un grupo bencilo, en presencia de una base tal como carbonato de cesio y de un disolvente, tal como dimetilformamida.

En la etapa c4, se hidroliza el ester del compuesto (XXIX) en presencia de hidroxido de litio a 0°C para obtener el compuesto (XXX).

En la etapa d4, se genera la union carboxamida en condiciones de activacion con la pareja 1-(3-dimetilaminopropil)- 3-etilcarbodiimida/pentafluorofenol en presencia de N-etilmorfolina y de la amina HR3 deseada para dar lugar al compuesto (XXXI).

En la etapa e4, se desprotege el ester terc-butttico con la ayuda del acido trifluoroacetico en diclorometano lo que permite generar el compuesto (IV-B).

Los compuestos de formula (VIl) son conocidos, se comercializan o se preparan segun metodos conocidos.

Los compuestos de formula (VIII) pueden ser comerciales o prepararse segun adaptaciones de metodos descritos en la bibliograffa tales como, por ejemplo, los representados en el ESQUEMA V en el que R4 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I):

5

10

15

20

25

30

35

40

45

ESQUEMAV

imagen19

Los compuestos de formula (IX) en la que Ri = alcoxi (C1-C4) son conocidos, comercializados o preparados segun metodos conocidos (Synlett (2004) 4, 703-707).

La invencion, segun otro de sus aspectos, tiene tambien por objeto los compuestos nuevos de formula (IIA). Estos compuestos son utiles como intermediarios de smtesis de los compuestos de formula (I).

La invencion tiene tambien por objeto los compuestos nuevos de formula (IIB). Estos compuestos son utiles como intermediarios de smtesis de los compuestos de formula (I).

La invencion, segun otro de sus aspectos, tiene tambien por objeto la utilizacion de los compuestos de formula (I), tales cuales o en forma radiomarcada como herramientas farmacologicas en el hombre o en animales, para la deteccion y el marcaje del receptor purinergico P2Y12.

Los ejemplos siguientes describen la preparacion de determinados compuestos de acuerdo con la invencion. Estos ejemplos no son limitativos y no hacen mas que ilustrar la presente invencion.

En las Preparaciones y en los Ejemplos se utilizan las abreviaturas siguientes:

Me: metilo

Et: etilo

n-Pr: n-propilo

Ph: fenilo

eter: eter dietflico

eter iso: eter diisopropflico

DMSO: dimetilsulfoxido

DMF: N,N-dimetilformamida

THF: tetrahidrofurano

DCM: diclorometano

EtOAc: acetato de etilo

DMAP: 4-dimetilaminopiridina

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

DIPEA: diisopropiletilamina HOAT: 1-hidroxi-7-azabenzotriazol HOBT: 1-hidroxibenzotriazol TFA: acido trifluoroacetico

BOP-CI: cloruro de bis-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)fosfmico

EDC: hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida

NaOH: hidroxido de sodio

KOH: hidroxido de potasio

HCL: acido clortndrico

i-PrOH: isopropanol

MeCN: acetonitrilo

NaBH4: borohidruro de sodio

NaHCOa: hidrogenocarbonato de sodio

NaH: hidruro de sodio

Na2SO4: sulfato de sodio

TBAF: fluoruro de tetra-n-butilamonio

UV: ultravioleta

Eter clortndrico 1N o 2N: disolucion 1N o 2N de acido clortndrico en eter dietflico

HCI 1N (o 2N) en eter: disolucion 1N o 2N de acido clortndrico en eter dietflico

HCI 4N en el dioxano: disolucion 4N de acido clortndrico en dioxano

F: punto de fusion

TA: temperature ambiente

HPLC: cromatograffa lfquida de alta rendimiento

Salmuera: disolucion saturada de cloruro de sodio en agua.

Los espectros de resonancia magnetica nuclear de proton (NMR 1H) se registran en espectrometros Bruker (250, 400 y 500 MHz) en DMSO-d6. Los desplazamientos qmmicos 8 se expresan en partes por millon (ppm). Para la interpretacion de los espectros, se utilizan las abreviaturas siguientes: s: singlete, d: doblete, t: triplete, c: cuadruplete: m: masivo, mt: multiplete, s a: singlete ancho, dd: doblete desdoblado, br: pico ancho.

Los compuestos segun la invencion se analizan por acoplamiento HPLC-UV-MS (cromatograffa lfquida /deteccion UV/deteccion de masa).

El aparato utilizado esta compuesto por un equipo cromatografico equipado con un detector de red de diodos y un espectrometro de masa cuadrupolar. Se mide el pico molecular (MH+) y el tiempo de retencion (tR) en minutos.

Metodo A: columna Phenomenex Luna C18(2) 10x2 mm, 3 pm

Disolvente A: agua + 0,05% TFA

Disolvente B: MeCN

1,1 ml/min, 30°C; Agilent serie 1100 MSD

Gradiente (minutos)

A B

0

93 7

1,2

5 95

1,4

5 95

Metodo B: Waters XBridge C18 4,6 x 50 mm, 2,5 |im, 5 Disolvente A: agua + 0,1% de acido formico Disolvente B: MeCN + 0,08% de acido formico 1,3 ml/min; 20 °C; Waters Ultima Triple Quad MS

10

Gradiente (minutos)

A B

0

97 3

3,5

40 60

4

2 98

5

2 98

5,2

97 3

6,5

97 3

Metodo C: Merck Chromolith C18 2x50 mm; 2,5 |im.

Disolvente A: agua + 0,05% TFA 15

Disolvente B: MeCN + 0,05% TFA 2,4 ml/min; 20 °C; Tecan LCT

Gradiente (minutos)

A B

0

98 2

0,2

98 2

2,4

2 98

3,2

2 98

4

98 2

Metodo D: Agilent 1100 serie. Symmetry C18 3,5 |im (2,1 x 50 mm, Waters) Disolvente A: agua + 0,005% TFA

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Disolvente B: MeCN + 0,005% TFA 0,4 ml/mm, 25°C; MSD SL (Agilent) ESI+.

Gradiente (minutos)

A B

0

100

0

10

0 100

15

0 100

El registro de los espectros de masa se efectua en modo electropulverizacion (ESI) positivo, con el fin de observar los iones resultantes de la protonacion de los compuestos analizados (MH+), o de la formacion de aductos con otros cationes tales como Na+, K+, etc.

Preparaciones

1. Preparaciones de los compuestos de formula (IX)

imagen20

1-(5-metil-1H-pirazol-4-il)butan-1-ona.

(IX): Ri = n-Pr; R2 = Me.

Etapa 1: acido 3-metil-1-tritil-1H-pirazol-4-carboxflico (XX).

A una solucion de 6,60 g de 5-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de metilo en 50 ml de DMF, se anaden 8,46 g de carbonato de potasio y 15,8 g de cloruro de tritilo. Despues de 5 dfas a TA, se anade AcOEt, se lava con agua, con salmuera, se seca sobre Na2SO4 y se evapora hasta sequedad. El residuo oleoso se pone en suspension en 100 ml de una mezcla (50/50; v/v) de etanol y de agua. Se anaden 9,95 g de hidroxido de potasio y se calienta a reflujo durante 6 horas. Se filtra el medio de reaccion en caliente, se concentra el filtrado y se acidifica con una solucion de HCI 1N. Se filtra el precipitado formado, se lava con una mezcla (50/50; v/v) de eter iso y de AcOEt y se seca a vado. Se obtienen 9,70 g del compuesto esperado en forma de un polvo blanco.

RMN 1H : DMSO-da (250 MHz) : 6 (ppm) : 2,33 (3H, s) ; 7,03-7,09 (6H, m) ; 7,34-7,43 (9H, m) ; 7,61 (1H, s).

Etapa 2: N-metoxi-N,3-dimetil-1-tritil-1H-pirazol-4-carboxamida (XXI).

A una solucion de 9,70 g del compuesto obtenido en la etapa anterior, en 100 ml de DCM, se anaden 10,3 g de DMAP y 10,3 g de BOP-CI. Se anaden despues por partes 3,85 g de hidrocloruro de N-metoximetanamina y se agita durante 1 hora a TA. Se evapora y despues se recoge el residuo con acetato de etilo, se lava con agua, con salmuera, se seca sobre Na2SO4 y despues se evapora hasta sequedad. Se tritura con eter iso, se filtra y se seca en estufa al vado. Se obtienen 10,4 g del compuesto esperado en forma de un polvo blanco.

RMN 1H : DMSO-d6 (250 MHz) : 6 (ppm) : 2,34 (3H, s) ; 3,13(3H, s) ; 3,39 (3H, s) ; 7,05-7,15 (6H, m) ; 7,33-7,44 (9H, m) ; 7,71 (1H, s).

Etapa 3: 1-(3-metil-1-tritil-1H-pirazol-4-il)butan-1-ona (XXII).

A una solucion de 10,4 g del compuesto obtenido en la etapa anterior, en 130 ml de THF a -30°C, se anaden gota a gota, 32,7 ml de una solucion 2M de cloruro de n-propilmagnesio en eter. Se vuelve a TA y despues se agita durante 4 horas. Se coloca el medio de reaccion a -30°C y despues se anaden (gota a gota al principio) 50 ml de agua. Se

5

10

15

20

25

30

35

vuelve a TA, se anaden 250 ml de una solucion de HCI 1N y despues se extrae con AcOEt. Se lava con agua, con salmuera, se seca sobre Na2SO4 y despues se evapora hasta sequedad. Se tritura en eter iso, se filtra y se seca en estufa al vado. Se obtienen 8,4 g del compuesto esperado en forma de un polvo blanco.

RMN 1H : DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 0,84 (3H, t) ; 1,52 (2H, sext) ; 2,34 (3H, s) ; 2,62 (2H, t) ; 7,04-7,12 (6H, m) ; 7,33-7,45 (9H, m) ; 7,93 (1H, s).

Etapa 4: 1-(5-metil-1H-pirazol-4-il)butan-1-ona.

Se agitan 8,4 g del compuesto obtenido en la etapa anterior en suspension, en 50 ml de HCI 4N en dioxano durante 6 horas. Se evapora hasta sequedad, se tritura con eter iso, se filtra y se seca en estufa al vado. Se obtienen 3,1 g del compuesto esperado en forma de una goma incolora.

RMN 1H: DMSO-da (250 MHz) : 6 (ppm) : 0,90 (3H, t) ; 1,58 (2H, sext) ; 2,39 (3H, s) ; 2,71 (2H, t) ; 8,15 (1H, s).

2. Preparaciones de los compuestos de formula (V)

imagen21

Preparacion 2.1

1-[1-(4-Amino-frans-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona

imagen22

Etapa 1: Ester terc-butflico del acido N'-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexiliden)-hidrazinacarboxflico (XI)

imagen23

Se agitan 11,3 g (44,3 mmoles) de (4-Oxo-ciclohexil)-carbamato de bencilo y 6,6 g (48,7 mmoles) de carbazato de terc-butilo en 140 ml de metanol a TA durante 4h. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad. El residuo solido se tritura en eter iso, el precipitado se filtra y despues se seca en estufa al vado para dar 16,4 g de producto esperado en forma de un polvo rosado.

Rendimiento cuantitativo.

5

10

15

20

25

30

35

40

RMN 1H: DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 9,54 (1H, a) ; 7,43-7,24 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 3,60 (2H, m) ; 2,74 (1H, m) ; 2,35-2,11 (2H, m) ; 2,01-1,76 (2H, m) ; 1,47-1,25 (11H, m).

Etapa 2: Hidrocloruro del ester terc-butilico del acido N'-(4-benciloxicarbonilamino-trans-ciclohexil)-hidrazina- carboxflico (XII)

imagen24

Se ponen en suspension 16,3 g (45,1 mmoles) de ester terc-butilico del acido N'-(4-benciloxicarbonilamino- ddohexiliden)-hidrazinacarbox^lico preparado en la etapa anterior en 270 ml de una solucion de acido acetico/H2O (1/1; v/v). Se anaden 2,78 g (44,2 mmoles) de cianoborohidruro de sodio por partes y la mezcla de reaccion se agita a TA durante la noche. Se anaden lentamente 140 ml de NaOH al 35% (pH final = 6-7). El precipitado formado se filtra, se lava con agua (3x) y despues se seca en estufa al vado a 60°C (mezcla que contiene, segun un analisis RMN con el 66% de compuesto de conformacion trans esperado y el 34% de compuesto de conformacion cis).

El polvo blanco obtenido (16,3 g) se solubiliza en 370 ml de acetato de etilo. Se anaden gota a gota 24,7 ml (49,3 mmoles) de una solucion de HCI 2N en dietileter. Despues de agitar durante la noche, el precipitado se filtra, se lava con acetona y despues se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 11,4 g de un polvo blanco (RMN 1H: 100% del derivado de conformacion trans).

Rendimiento = 63%

RMN 1H : DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 10,90 (1H, a) ; 10,18 (1H, a) ; 7,43-7,19 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 3,23 (1H, m) ; 3,06 (1H, m) ; 1,96 (2H, m) ; 1,88 (2H, m) ; 1,49-1,31 (11H, m) ; 1,18 (2H, m).

Etapa 3: Hidrocloruro del ester bendlico del acido (4-hidrazino-frans-ciclohexil)-carbamico (XIII)

imagen25

Se solubilizan 11,3 g (28,3 mmoles) del hidrocloruro del ester terc-butflico del acido N'-(4-benciloxicarbonilamino- frans-ciclohexil)-hidrazina-carboxflico preparado en la etapa anterior en 250 ml de dioxano. Se anaden gota a gota 93,3 ml de una solucion de HCI 4N en dioxano (373 mmoles) y la agitacion se mantiene durante 60 h a TA. El precipitado formado se filtra y se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 7,61 g de cristales blancos.

Rendimiento = 90%

RMN 1H : DMSO-d6 + TFA (250 MHz) : 6 (ppm) : 7,34 (5H, m) ; 5,00 (2H, s) ; 3,24 (1H, m) ; 2,84 (1H, m) ; 2,10-1,79 (4H, m) ; 1,22 (4H, m).

Etapa 4: Ester etflico del acido 1-(4-benciloxicarbonilamino-frans-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-carboxflico (XIV)

5

10

15

20

25

30

35

imagen26

A 6,78 g (22,2 mmoles) de hidrocloruro del ester bendlico del acido (4-hidrazino-frans-ciclohexil)-carbamico preparado en la etapa anterior en 45 ml de etanol, se anaden 8,83 ml (63,3 mmoles) de trietilamina. Se anaden 4,6 g de ester etflico del acido 2-[1-dimetilamino-metiliden]-3-oxo-butmco y el medio de reaccion se lleva a reflujo durante 4h. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad. El residuo se recoge con una mezcla H2O/AcOEt. La fase organica se recoge y la fase acuosa se extrae con acetato de etilo (3x). Las fases organicas reunidas se lavan con agua (3x), con salmuera (1x), se secan sobre Na2SO4 y despues se evaporan hasta sequedad. El residuo se tritura con eter iso, se filtra y despues se seca en estufa a 60°C para obtener 6,0 g de producto esperado en forma de un polvo beige.

Rendimiento = 74%.

RMN 1H : DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 7,77 (1H, s) ; 7,39-7,27 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 4,24-4,10 (3H, m) ; 3,35 (1H, a) ; 2,52 (3H, s) ; 1,97-1,80 (6H, m) ; 1,40 (2H, m) ; 1,26 (3H, t, J = 6,3 Hz).

Etapa 5: Acido 1-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-carboxflico (XV)

imagen27

A 4,5 g (11,7 mmoles) de ester etflico del acido 1-(4-benciloxicarbonilamino-frans-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4- carboxflico preparado en la etapa anterior en 20 ml de una mezcla THF/etanol (1/1; v/v), se anade una solucion de 3,27 g (58,4 mmoles) de hidroxido de potasio en agua. El medio de reaccion se calienta a 50°C durante la noche. Despues de enfriar, se anade agua y los insaponificables se extraen con eter iso. La fase acuosa se acidifica a pH 5 mediante una solucion acuosa de acido clorhfdrico. El precipitado blanco formado se filtra, se lava con eter iso y despues se seca en estufa al vado a 60°C para obtener el producto esperado en la forma de un polvo beige.

Rendimiento = 90%.

RMN 1H : DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 12,11 (1H, a) ; 7,73 (1H, s) ; 7,39-7,27 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 4,14 (1H, m) ; 3,33 (1H, a) ; 2,50 (3H, s) ; 1,98-1,81 (6H, m) ; 1,40 (2H, m).

Etapa 6: Ester etflico del acido 3-[1-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-3-oxo-propionico (XVI)

5

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20

25

30

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imagen28

A 3,8 g (10,6 mmoles) de acido 1-(4-bendloxicarbomlamino-cidohexil)-5-metiMH-pirazol-4-carboxflico en 110 ml de THF, se anaden 1,97 g (15,9 mmoles) de 1,1'-carbonildiimidazol. El medio de reaccion se agita a TA durante 2h. Se anaden 4,6 g de bis (3-etoxi-3-oxopropanoato) de magnesio (sintetizado segun el metodo descrito en Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1979, 18, 72-74) y el medio de reaccion se calienta a 50°C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se evapora al vado y se recoge con AcOEt. La fase organica se lava sucesivamente con una solucion saturada de Na2CO3, con agua y con salmuera y despues se seca sobre Na2SO4. El disolvente se evapora al vado. El residuo solido se tritura con eter iso, se filtra y se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 2,7 g de un polvo rosa.

Rendimiento = 59%.

RMN 1H : DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 8,02 (1H, s) ; 7,39-7,27 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 4,18 (1H, m) ; 4,09 (2H, c, J = 7 Hz) ; 3,87 (2H, s) ; 3,35 (1H, m) ; 2,53 (3H, s) ; 1,97-1,79 (6H, m) ; 1,41 (2H, m); 1,18 (3H, t, J = 7 Hz).

Etapa 7: Ester etflico del acido 2-[1-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-carbonil]-butmco (VI)

imagen29

En un tubo sellado se colocan 2,4 g (5,2 inmoles) de ester etflico del acido 3-[1-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexil)- 5-metil-1H-pirazol-4-il]-3-oxo-propionico preparado en la etapa anterior en 40 ml de THF. Se anaden 3,36 g (10,4 mmoles) de bromuro de tetrabutilamonio, 2,85 g (20,7 mmoles) de K2CO3 y 3,75 ml (38,7 mmoles) de yodoetano y el medio de reaccion se calienta a 50°C durante la noche. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad y despues se recoge con AcOEt. La fase organica se lava con agua (1x), con una solucion de NaHCO3 saturada (2x) y con salmuera (1x), despues se seca sobre Na2SO4 y se evapora al vado.

El residuo solido se tritura con eter iso, se filtra y despues se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 3,1 g de un polvo beige que contiene el producto esperado y un mol de una impureza correspondiente a un derivado de tetrabutilamonio. El producto bruto de la reaccion se aplica en la etapa siguiente (Rendimiento aproximado de producto esperado = 82%).

RMN 1H : DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 8,09 (1H, s) ; 7,39-7,27 (6H, m) ; 5,01 (2H, s) ; 4,24-4,02 (4H, m) ; 3,35 (1H, m) ; 2,53 (3H, s) ; 1,97-1,72 (8H, m) ; 1,40 (2H, m) ; 1,12 (3H, t, J = 7 Hz) ; 0,87 (3H, t, J = 7 Hz).

Etapa 7: 1 -[1 -(4-Amino-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona

5

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Se calientan 0,6 g del producto bruto de la reaccion obtenido en la etapa anterior (que contiene ~ 0,37 g, es decir 0,81 mmoles de ester etilico del acido 2-[1-(4-benciloxicarbonilamino-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-carbonil]- butmco a reflujo en HCI 6N durante 4h. Despues de enfriar, se anaden 10 ml de una solucion acuosa de sosa al 35% (el pH final debe ser basico). La fase acuosa se extrae con DCM (3x). Las fases organicas reunidas se lavan sucesivamente con agua (1x), mediante una solucion de NaHCO3 saturada (1x) y con salmuera, despues se secan sobre Na2SO4 y se evaporan hasta sequedad. El residuo solido se tritura con eter iso, se filtra y despues se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 0,6 g de un polvo beige que contiene el producto esperado y un mol de una impureza correspondiente a un derivado de tetrabutilamonio (RMN diffcil de desconvoluar). El producto bruto de la reaccion se aplica tal cual en la etapa siguiente.

Preparacion 2.2

1-[1-(1-Amino-piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona

imagen31

imagen32

Etapa 1: Ester dimetflico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-pentanodioico (XXIII)

imagen33

A una solucion que contiene 28,2 g (0,19 moles) de ferc-butil-cloro-dimetilsilano 30,2 g (0,44 moles) de imidazol en 225 ml de DCM, se anade lentamente una solucion que contiene 30 g (0,17 moles) de 3-hidroxiglutarato de dimetilo en 225 ml de DCM. Despues de agitar durante la noche, se anade agua, las fases se separan y la fase acuosa se extrae con DCM (2x). Las fases organicas combinadas se secan sobre MgSO4 y despues se evaporan hasta sequedad. El residuo se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo/heptano. Se obtienen 40,3 g del compuesto esperado en forma de polvo.

Rendimiento = 82%.

LC-MS tR(MetodoA): 1,10 min; MS (ES) m/z: 291,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,00 (6H, s) ; 0,70 (9H, s) ; 3,62 (4H, 2 x d) ; 4,50 (1H, pent).

Etapa 2: 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-pentano-1,5-diol (XXIV)

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A una solucion que contiene 13,5 g (47 mmoles) de ester dimetilico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)- pentanodioico en 750 ml de dietileter a 0°C, se anaden por partes 6,0 g (275 mmoles) de borohidruro de litio. Despues de agitar durante la noche, se anade una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase acuosa se extrae con DCM (2x) y despues las fases organicas se reunen y evaporan hasta sequedad para proporcionar 11,9 g de producto bruto.

Rendimiento ~ cuantitativo.

LC-MS tR(Metodo A): 0,81 min; MS (ES) m/z: 235,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,00 (6H, s) ; 0,82 (9H, s) ; 1,52 (4H, m) ; 3,41 (4H, m) ; 3,86 (1H, pent) ; 4,28 (2H, t).

Etapa 3: Ester terc-butilico del acido [4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-carbamico (XXV)

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A una solucion que contiene 13,3 ml (155 mmoles) de cloruro de oxalilo en 700 ml de DCM se anade gota a gota, a -78°C, una solucion que contiene 14,4 ml de dimetilsulfoxido (203 mmoles) en 160 ml de DCM. Despues de 30 minutos de agitacion, se anade una solucion que contiene 11,9 g (51 mmoles) de 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)- pentano-1,5-diol en 160 ml DCM a -78°C. Despues de 30 minutos de agitacion adicionales, se anaden 70,7 ml (51 mmoles) de trietilamina. El medio de reaccion se agita a -78°C durante 1h, y despues la temperatura se lleva a 0°C durante 30 minutos de agitacion adicionales. Se anaden 92 ml de tolueno, y despues se filtra la mezcla. El filtrado se concentra, despues se resuspende en pentano y se filtra sobre Celite® para proporcionar 13,5 g de producto bruto despues de evaporar el disolvente.

Se mezclan 12 g del producto bruto de la reaccion obtenido anteriormente con 7,6 g (58 mmoles) de carbazato de terc-butilo en 350 ml de DCM. Se anaden 26,5 g (125 mmoles) de triacetoxiborohidruro de sodio a 0°C y despues el medio de reaccion se agita durante la noche. Se anade una solucion acuosa saturada de NaHCO3 y las fases se separan. La fase acuosa se extrae con DCM (2x) y despues las fases organicas reunidas se evaporan hasta sequedad. El residuo se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / heptano para obtener 8,6 g de producto esperado.

Rendimiento = 51%.

LC-MS tR(Metodo A): 1,03 min; MS (ES) m/z: 331,3 (MH+).

Etapa 4: Ester terc-butflico del acido (4-hidroxi-piperidin-1 -il)-carbamico (XXVI)

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A una solucion que contiene 8,6 g (26 mmoles) de ester terc-butflico del acido [4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)- piperidin-1-il]-carbamico en 400 ml de THF, se anaden 28,6 ml (28,6 mmoles) de TBAF (1 M en THF) a 0°C. Despues de 12h de agitacion, se anaden 28,6 ml de TBAF y el medio de reaccion se agita durante 12h suplementarias. Despues de concentrar hasta sequedad, el residuo se redisuelve en DCM y se extrae con agua (3x). Las fases acuosas combinadas se vuelven a extraer con la ayuda de una mezcla DCM/i-PrOH (3:1) y las fases

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organicas combinadas se evaporan hasta sequedad. El residuo se purifica por cromatograffa en gel de s^lice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / heptano para obtener 4,4 g de producto esperado.

Rendimiento = 78%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,25 min; MS (ES) m/z: 217,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 1,37 (9H, s) ; 1,43 (2H, m) ; 1,69 (2H, m) ; 2,53 (2H, m) ; 2,82 (2H, m) ; 3,47 (1H, m) ; 4,62 (1H, d) ; 7,97 (1H, d).

Etapa 5: Ester 1-terc-butoxicarbonilamino-piperidin-44lico del acido metanosulfonico

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A una solucion que contiene 4,3 g (20 mmoles) de ester terc-butnico del acido (4-hidroxi-piperidin-1-il)-carbamico en 100 ml de DCM, se anaden 0,24 g (2,0 mmoles) de DMAP, 2,8 ml (20 mmoles) de trietilamina y 1,5 ml (20 mmoles) de cloruro de metanosulfonilo. Despues de agitar durante la noche, el medio de reaccion se diluye con DCM y se lava con la ayuda de una solucion acuosa de HCI 0,1 M. La fase acuosa se extrae con DCM y las fases organicas se reunen para dar 6,0 g de un aceite incoloro.

Rendimiento = cuantitativo.

LC-MS tR(Metodo A): 0,61 min; MS (ES) m/z: 239,2 (M-tBu+H+).

RMN 1H : DMSO-d6 (500 MHz) : 6 (ppm) : 1,40 (9H, s) ; 1,83 (2H, m) ; 1,95 (2H, m) ; 2,78 (2H, m) ; 2,92 (2H, m) ; 3,24 (3H, s) ; 4,76 (1H, m) ; 8,39 (1H, d).

Etapa 6: Ester terc-butflico del acido [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-carbamico

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A una solucion que contiene 1,55 g (10 mmoles) de 1-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-butan-1-ona en 15 ml de DMF, se anaden 1,20 g (11 mmoles) de terc-butoxido de potasio y la mezcla de reaccion se agita a 50°C durante 30 minutos. Se anade una solucion que contiene 3,00 g (10 mmoles) de ester 1-terc-butoxicarbonilamino-piperidin-44lico del acido metanosulfonico en 5 ml de DMF. Con el fin de aumentar la conversion, se anaden 0,9 g de terc-butoxido de potasio a razon de 0,3 g cada 12h. El medio se concentra, se diluye con DCM y se extrae con agua (3x). El producto bruto asf obtenido se purifica por HPLC preparativa (columna C18 fase inversa con elucion mediante un gradiente agua/MeCN en presencia de un 0,1% de TFA) para obtener, despues de liofilizar, 960 mg de una mezcla que contiene el producto esperado y su isomero de posicion. Una purificacion adicional por HPLC en fase estacionaria quiral ha permitido aislar 360 mg del producto esperado.

Rendimiento = 10%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,82 min; MS (ES) m/z: 351,2 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,87 (3H, t) ; 1,39 (9H, s) ; 1,57 (2H, m) ; 1,82 (2H, d a) ; 2,13 (2H, m) ; 2,54 (3H, s) ; 2,73 (2H, t) ; 2,83 (2H, t a) ; 3,08 (2H, d a) ; 4,26 (1H, m) ; 8,14 (1H, s) ; 8,61 (1H, s a).

Etapa 7: Hidrocloruro de 1-[1-(1-amino-piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona

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(V; R1 = n-Pr ; R2 = Me ; A =

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A una solucion que contiene 536 mg (1,53 mmoles) de ester terc-butflico del acido [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)- piperidin-1-il]-carbamico en 12 ml de DCM se anaden 3,3 ml de acido trifluoroacetico. Despues de agitar durante 3h, el medio de reaccion se concentra y despues se codestila dos veces con tolueno. El residuo asf obtenido se disuelve en una mezcla MeCN/agua (1:1) y despues se liofiliza despues de anadir 2,0 ml (4 mmoles) de HCL 2N. Este procedimiento se repite una vez para dar 350 mg de producto esperado en la forma de un hidrocloruro.

Rendimiento = 80%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,47 min; MS (ES) m/z: 251,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-d6 (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,87 (3H, t), 1,55 (2H, m), 1,94 (2H, d a), 2,15 (2H, m) ; 2,55 (3H, s) ; 2,72 (2H, t) ; 2,90 (2H, s a) ; 3,33 (2H, d a) ; 4,43 (1H, m) ; 8,10 (1H, s).

3. Preparaciones de los compuestos de formula (IV).

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Preparacion 3.1

Acido 5-cloro-1 -(2-metoxi-2-oxoetil)-1H-indol-3-carboxflico. (IV-A): R3 = OMe; R4 = Cl

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A una mezcla de 4,50 g (112 mmoles) de NaH (60% en aceite) en 400 ml de DMF a -10°C, se anaden, gota a gota, 110 ml de una solucion que contiene 10 g (51 mmoles) de acido 5-cloro-1H-indol-3- carboxflico (comercial) en DMF y se deja con agitacion durante 1h. La mezcla de reaccion se enfna a -20°C y despues se anaden gota a gota 4,86 ml (51 mmoles) de bromoacetato de metilo. La vuelta a TA se efectua durante un periodo de 5 horas y el medio de reaccion se agita a TA durante 15h. El medio de reaccion se anade a 1l de una mezcla AcOEt/HCl 1N, la fase organica se recoge y la fase acuosa se extrae con AcOEt. Las fases organicas se reunen, se lavan con agua, con salmuera, se secan sobre Na2SO4 y se evaporan hasta sequedad para obtener 8,9 g del compuesto esperado en forma de un polvo blanco.

Rendimiento = 65%

RNLN 1H: DMSO-da (250 MHz) : 6 (ppm) : 3,70 (3H, s) ; 7,26 (1H, d) ; 7,57 (1H, d) ; 7,98 (1H,s) ; 8,12 (1H, s) ; 12,3 (1H, a).

Preparacion 3.2

Acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H-indol-3-carboxflico N N—

(IV-B): R3 = ^^ R4 = Cl

Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 5-cloro-1H-indol-3-carboxflico (XXVIII)

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A una solucion que contiene 5,0 g (26 mmoles) de acido 5-cloro-1H-indol-3-carboxflico en 200 ml de benceno, se anaden 25 ml (104 mmoles) N,N-dimetilformamida di-terc-butilacetal. El medio de reaccion se agita durante 12h, y despues se anade otra parte del acetal (25 ml). Despues de 12h suplementarias de agitacion, el medio se concentra, se diluye con DCM y despues se lava con una solucion saturada de NaHCO3 (3x). Se obtienen 5,7 g de producto esperado despues de evaporar los disolventes.

Rendimiento = 87%.

LC-MS tR(Metodo A): 1,05 min; MS (ES) m/z: 196,1 (M-tBu+H+).

Etapa 2: Ester terc-butflico del acido 1-benciloxicarbonilmetil-5-cloro-1H-indol-3-carboxflico (XXIX)

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A una solucion que contiene 5,7 g (22 mmoles) de ester terc-butflico del acido 5-cloro-1H-indol-3-carboxflico y 3,5 ml (22 mmoles) de bromoacetato de bencilo en 150 ml de DMF, se anaden 11,1 g (34 mmoles) de carbonato de cesio. Despues de 12h de agitacion, el medio de reaccion se diluye con DCM y despues se lava 3x con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre MgSO4 y el residuo obtenido despues de evaporar se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo I metanol para obtener 5,8 g de producto esperado.

Rendimiento = 66%

LC-MS tR(Metodo A): 1,22 min; MS (ES) m/z: 344,2 (M-tBu+H+).

Etapa 3: Ester terc-butilico del acido 1-carboximetil-5-cloro-1H-indol-3-carboxflico (XXX)

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A una solucion que contiene 9,8 g (24 mmoles) de ester terc-butflico del acido 5-cloro-1H-indol-3-carboxflico en una mezcla 140 ml de THF/Agua (4:1), se anaden 12,2 ml (24 mmoles) de una solucion de LiOH 2M a 0°C. Despues de 3h de agitacion, el pH del medio de reaccion se ajusta a 6 por la adicion de HCI 1N. Durante la evaporacion de los disolventes, se forma un solido que se recoge por filtracion para dar 4,3 g de un polvo blanco. La extraccion del filtrado ha permitido la obtencion de 4 g suplementarios de producto esperado.

Rendimiento = cuantitativo.

LC-MS tR(Metodo A): 0,96 min; MS (ES) m/z: 254,2 (M-tBu+H+).

Etapa 4: Ester terc-butflico del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H-indol-3-carboxflico

(XXXI: R3 =

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; R4 = ci)

A una solucion que contiene 3,15 g (10 mmoles) de ester terc-butflico del acido 1-carboximetil-5-cloro-1H-indol-3- carboxflico en 70 ml de DMF, se anaden 2,93 g (20 mmoles) de EDC y 2,81 g (15 mmoles) de pentafluorofenol. Despues de 20 minutos de agitacion, se anaden 3,8 ml (30 mmoles) de N-etilmorfolina y 1,1 ml (10 mmoles) de 1- metil- piperazina y el medio de reaccion se agita durante 12h a TA. Despues de evaporar el disolvente, el residuo se recoge con DCM y se lava 2x con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre MgSO4, se evapora hasta sequedad y despues el producto bruto obtenido se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / metanol para obtener 2,26 g de producto esperado.

Rendimiento = 58%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,73 min; MS (ES) m/z: 336,2 (M-tBu+H+).

RMN 1H : DMSO-d6 (500 MHz) : 6 (ppm) : 1,58 (9H, s) ; 2,24 (3H, s) ; 2,31 (2H, m) ; 2,44 (2H, m) ; 3,47 (2H, m) ; 3,58 (2H, m) ; 5,34 (2H, s) ; 7,28 (1H, dd) ; 7,54 (1H, d) ; 7,99 (1H, d) ; 8,05 (1H, s).

Etapa 5: Acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H-indol-3-carboxflico

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A una solucion que contiene 2,26 g (5,8 mmoles) de ester terc-butilico del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)- 2-oxo-etil]-1H-indol-3-carbox^lico en 30 ml de DCM, se anaden 4,3 ml de acido trifluoroacetico. Despues de agitar durante 3h, el medio de reaccion se concentra y despues se codestila con tolueno (2x). El residuo asf obtenido se 5 disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 7,3 ml de HCI 2N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 2,33 g del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = cuantitativo.

10 LC-MS tR(Metodo A): 0,51 min; MS (ES) m/z: 336,2 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 2,79 (3H, s) ; 2,96 (1H, m) ; 3,13 (2H, m) ; 3,43 (1H, d) ; 3,52 (1H, d) ; 3,62 (1H, t) ; 4,15 (1H, d) ; 4,37 (1H, d) ; 5,34 (1H, d) ; 5,50 (1H, d) ; 7,31 (1H, dd) ; 7,61 (1H, d) ; 8,04 (1H, d) ; 8,06 (1H, s) ; 11,25 (1H, s a).

15 Preparacion 3.3

Acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carboxflico

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— N' —\

(IV-B): R3 = N ; R4 = Cl

Etapa 1: Ester terc-butilico del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carboxflico

\ .

(XXXI; R3 =

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O

x ; R4 = ci)

25 A una solucion que contiene 4,3 g (14 mmoles) de ester terc-butilico del acido 1-carboximetil-5-cloro-1H-indol-3- carboxflico en 95 ml de DMF, se anaden 3,99 g (28 mmoles) de EDC y 3,83 g (21 mmoles) de pentafluorofenol. Despues de 20 minutos de agitacion, se anaden 5,5 ml (42 mmoles) de N-etilmorfolina y 2,1 ml (14 mmoles) de 1-(2- metoxietil)piperazina y el medio de reaccion se agita durante 12h a TA. Despues de evaporar el disolvente, el residuo se recoge con DCM y se lava 2x con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre 30 MgSO4, se evapora hasta sequedad y despues el producto bruto obtenido se purifica por cromatograffa en gel de

sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / metanol para obtener 5,4 g de producto esperado.

Rendimiento = 87%.

35 LC-MS tR(Metodo A): 0,75 min; MS (ES) m/z: 436,4 (MH+).

Etapa 2: Acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carboxflico

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(IV-B; R3 =

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; R4 = Cl)

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A una solucion que contiene 2 g (4,6 mmoles) de ester terc-butflico del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin- 1-il]-2-oxo-etiI}-1H-indol-3-carboxflico en 25 ml de DCM, se anaden 3,4 ml de acido trifluoroacetico. Despues de 45 agitar durante 3h, el medio de reaccion se concentra y despues se codestila con tolueno (2x). El residuo asf obtenido

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se disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 6,5 ml de HCI 1 N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 1,92 g del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = cuantitativo.

LC-MS tR(Metodo A): 0,55 min; MS (ES) m/z: 380,3 (MH+).

Preparacion 3.4

Acido 5-cloro-1-(2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carbox^lico

/ \

— N N—\

(IV-B): R3 = \—/ V_0 ; R4 = Cl

F-)~F

F

Etapa 1: 1-Bencil-4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazina

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Una suspension de 0,77 g (4,7 mmoles) de hidrocloruro de 2-(trifluorometoxi)etilamina y 1,8 g (21 mmoles) de NaHCO3 en 100 ml de etanol se agitan a 80°C durante 6h. El medio de reaccion se filtra, se concentra. El residuo se recoge con DCM, se lava con agua (1x), y despues la fase acuosa se reextrae con DCM. Las fases organicas reunidas se evaporan y despues el producto bruto se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / heptano para obtener 419 mg de producto esperado en la forma de un aceite incoloro. Rendimiento = 31%.

LC-MS tR(metodo A): 0,46 min; MS (ES) m/z: 289,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 2,33 - 2,52 (8H, m) ; 2,65 (2H, t) ; 3,52 (2H, s); 4,21 (2H, t); 7,31 - 7,41 (5H, m).

Etapa 2: 1 -(2-Trifluorometoxi-etil)-piperazina

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F

Una solucion de 2,20 g (7,6 mmoles) de 1-bencil-4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazina en 50 ml de THF se transfiere a un autoclave Buchi y despues se hidrogena durante 9h a 3 bares en presencia de 200 mg (0,29 mmoles) de Pd(OH)2 al 20% sobre carbon. Al no ser completa la conversion, la suspension se filtra, se anade catalizador fno y el medio de reaccion se hidrogena durante 3 h suplementarias. Despues de filtrar sobre Celite®, lavar con etanol y evaporar hasta sequedad, se obtienen 973 mg de producto desbencilado en la forma de un aceite incoloro.

Rendimiento = 65%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,09 min; MS (ES) m/z: 199,2 (MH+).

RMN 1H : CDCl3 (400 MHz) : 6 (ppm) : 2,53 -2,65 (4H, m) ; 2,75 (2H, t) ; 3,02 (4H, m) ; 3,59 (1H, m) ; 4,15 (2H, t).

Etapa 3: Ester terc-butflico del acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazin-1-il]-etil}-1H-indol-3- carboxflico

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(XXXI): R3 =

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; R4 = Cl

A una solucion que contiene 600 mg (1,9 mmoles) de ester terc-butflico del acido 1-carboximetil-5-cloro-1H-indol-3- carboxflico en 30 ml de DMF, se anaden 557 mg (3,8 mmoles) de EDC y 534 mg (2,9 mmoles) de pentafluorofenol. Despues de 20 minutos de agitacion, se anaden 0,7 ml (5,7 mmoles) de N-etilmorfolina y 416 mg (2,0 mmoles) de 1- (2- Trifluorometoxi-etil)-piperazina y el medio de reaccion se agita durante 12h a TA. Despues de evaporar el disolvente, el residuo se recoge con DCM y se lava 2x con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre MgSO4, se evapora hasta sequedad y despues el producto bruto obtenido se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente acetato de etilo / heptano para obtener 634 mg de producto esperado.

Rendimiento = 68%.

LC-MS tR(Metodo A): 0,75 min; MS (ES) m/z: 436,4 (MH+).

Etapa 4: Acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazin-1-il]-etil}-1H-indol-3-carboxflico

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A una solucion que contiene 634 mg (1,4 mmoles) de ester terc-butflico del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)- piperazin-1-il]-2-oxo-etiI}-1H-indol-3-carboxflico en 10 ml de DCM, se anaden 0,9 ml de acido trifluoroacetico. Despues de agitar durante 3h, el medio de reaccion se concentra y despues se codestila con tolueno (2x). El residuo asf obtenido se disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 1,3 ml de HCI 2N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 567 mg del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = 94%.

LC-MS tR(metodo A): 0,55 min; MS (ES) m/z: 380,3 (MH+).

4 Preparacion del compuesto Acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol-1-il}- acetico

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Etapa 1: Ester metflico del acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol-1-il}- acetico

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A una solucion que contiene 600 mg (2,0 mmoles) de acido 5-cloro-1-metoxicarbonilmetil-1H-indol-3-carboxflico (preparacion 2.1), 528 mg (4,3 mmoles) de DMAP en 12 ml de DCM, se anaden 439 mg (2,2 mmoles) de EDC. Despues de algunos minutos de agitacion, el medio se vuelve homogeneo y se anaden 610 mg (2,45 mmoles) de 1-

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[1-(4-amino-frans-ciclohexil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona (preparacion 1.1). Despues de agitar a TA durante 48h, el medio de reaccion se lava con agua {1x), con HCI 1N (1x), con NaHCO3 (1x) y con salmuera. La fase organica se seca sobre Na2SO4 y despues se evapora hasta sequedad para obtener 1.1 g de aceite marron. El residuo oleoso se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente DCM / metanol. El aceite amarillo obtenido (550 mg) se recoge con acetona y despues se vierte gota a gota en eter iso. El precipitado blanco formado se filtra, se lava con eter iso y se seca al vado para obtener 300 mg de un polvo blanco.

Rendimiento = 30%.

RMN 1H : DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 8,15 (1H, d, J = 2,2 Hz) ; 8,08 (1H, s) ; 8,03 (1H, s) ; 7,93 (1H, d, J = 7,7 Hz) ; 7,52 (1H, d, J = 8,9 Hz) ; 7,21 (1H, dd, J = 8,9, 2,2 Hz) ; 5,25 (2H, s) ; 4,22 (1H, m) ; 3,85 (1H, m) ; 3,70 (3H, s) ; 2,73 (2H, t, J = 7,2 Hz) ; 2,56 (3H, s) ; 2,05 - 1,85 (6H, m) ; 1,59 (2H, sext, J = 7,2 Hz) ; 1,55 (2H, m) ; 0,91 (3H, t, J = 7,2 Hz).

Etapa 2: Acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol-1-il}-acetico

imagen60

A una solucion que contiene 300 mg (0,60 mmoles) Ester mefflico del acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-trans- ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol-1-il}-acetico (preparado en la etapa anterior) en 3 ml de metanol, se anaden 26 mg (0,66 mmoles) de NaOH. El medio de reaccion se agita durante 2 h y despues se evapora hasta sequedad. El residuo se recoge con agua y despues se anaden 0,7 ml de HCI 1N. El precipitado formado se filtra, se lava con agua y despues se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 260 mg de un polvo blanco.

Rendimiento = 89%.

RMN 1H : DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 8,15 (1H, d, J = 2,2 Hz) ; 8,09 (1H, s) ; 8,03 (1H, s) ; 7,90 (1H, d, J = 7,8 Hz) ; 7,49 (1H, d, J = 8,8 Hz) ; 7,19 (1H, dd, J = 8,8, 2,2 Hz) ; 5,03 (2H, s) ; 4,22 (1H, m) ; 3,85 (1H, m) ; 2,72 (2H, t, J = 7,2 Hz) ; 2,56 (3H, s) ; 2,05 - 1,85 (6H, m) ; 1,59 (2H, sextuplete, J = 7,2 Hz) ; 1,55 (2H, m) ; 0,91 (3H, t, J = 7,2 Hz).

Ejemplos

Ejemplo 1: Compuesto n°1

Hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo- etil]-1H-indol-3-carboxflico.

Se agitan 260 mg (0,54 mmoles) de acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol- 1-il}-acetico (preparacion 3), 136 mg (1,3 mmoles) de N-metilpiperazina y 211 mg (0,80 mmoles) de BOP-CI en 5 ml de DCM durante la noche. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad y el residuo solido se tritura con una solucion de NaHCO3 saturada. El precipitado blanco formado se filtra, se lava con agua, se seca en estufa al vado a 60°C y despues se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente DCM / metanol para obtener 290 mg de polvo blanco en forma de base. El producto se recoge en acetona y se anaden 0,7 ml de HCI 1N en dietileter. El medio se filtra y el precipitado se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 260 mg de un polvo blanco.

Rendimiento = 80%.

LC-MS tR(Metodo D): 6,1 min; MS (ES) m/z: 567 (MH+).

F = 214°C.

RMN 1H: DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 10,80 (1H, a) ; 8,15 (1H, d, J = 2,0 Hz) ; 8,03 (1H, s) ; 8,02 (1H, s) ; 7,92 (1H, d, J = 7,7 Hz) ; 7,49 (d, 1H, J = 8,9 Hz) ; 7,20 (1H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz) ; 5,41 (1H, sistema AB: J = 17 Hz) ; 5,27 (1H, sistema AB: J = 17 Hz) ; 4,37 (1H, m) ; 4,20 (2H, m) ; 3,85 (1H, m) ; 3,56 (2H, m) ; 3,45 (1H, m) ; 3,12 (2H, m) ; 2,97 (1H, m) ; 2,83 (3H, s) ; 2,73 (2H, t, J = 7,2 Hz) ; 2,56 (3H, s) ; 2,05 - 1,85 (6H, m) ; 1,59 (2H, sext, J = 7,2 Hz) ; 1,55 (2H, m) ; 0,90 (3H, t, J = 7,2 Hz).

Ejemplo 2: Compuesto n° 2

5

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15

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35

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45

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55

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Hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1- il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carboxflico.

Se agitan 250 mg (0,52 mmoles) de acido {3-[4-(4-butiril-5-metil- pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol- 1-il}-acetico (preparacion 3), 112 mg (0,77 mmoles) de 1-(2-Metoxi-etil)-piperazina, 191 mg (1,5 mmoles) de DMAP y 203 mg (0,77 mmoles) de BOP-CI en 3,4 ml de DCM durante la noche. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad y despues el residuo solido se tritura con una solucion de NaHCO3 saturada. El precipitado se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente DCM / metanol para obtener 240 mg de polvo blanco en forma de base. El producto se recoge en acetona y se anaden 0,5 ml de HCI 1N en dietileter. El medio se filtra y el precipitado se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 200 mg de un polvo blanco.

Rendimiento = 59%.

LC-MS tR(Metodo D): 6,2 min; MS (ES) m/z: 611 (MH+).

F = 263°C.

RMN 1H : DMSO-da (400 MHz) : 6 (ppm) : 10,56 (1H, a) ; 8,15 (1H, d, J = 2,0 Hz) ; 8,03 (1H, s) ; 8,02 (1H, s) ; 7,91 (1H, d, J = 7,7 Hz) ; 7,49 (d, 1H, J = 8,9 Hz) ; 7,20 (1H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz) ; 5,41 (1H, sistema AB: J = 17 Hz) ; 5,27 (1H, sistema AB: J = 17 Hz) ; 4,35 (1H, m) ; 4,20 (2H, m) ; 3,86 (1H, m) ; 3,74 (2H, m) ; 3,70 - 3,47 (3H, m) ; 3,38 (2H, m) ; 3,34 (3H, s) ; 3,18 (2H, m) ; 3,02 (1H, m) ; 2,73 (2H, t, J = 7,2 Hz) ; 2,56 (3H, s) ; 2,05 - 1,85 (6H, m) ; 1,651,49 (4H, m) ; 0,90 (3H, t, J = 7,2 Hz).

Ejemplo 3: Compuesto n° 3 hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2- oxo-2-[4-(3,3,3-trifluoro-propil)-piperazin-1-il]-etil}-1H-indol-3-carboxflico.

Se agitan 150 mg (0,31 mmoles) de acido {3-[4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-frans-ciclohexilcarbamoil]-5-cloro-indol- 1-il}-acetico (preparacion 3), 118 mg (0,46 mmoles) de dihidrocloruro de 1-(3,3,3-trifluoro-propil)-piperazina, 229 mg (1,9 mmoles) de DMAP y 122 mg (0,46 mmoles) de BOP-CI en 2 ml de DcM durante la noche. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad y despues el residuo solido se tritura con una solucion de NaHCO3 saturada. El precipitado se purifica por cromatograffa en gel de sflice eluyendo con un gradiente DCM / metanol para obtener 140 mg de polvo blanco en forma de base. El producto se recoge en DCM y se anaden 0,28 ml de HCI 1N en dietileter. El medio se filtra y el precipitado se seca en estufa al vado a 60°C para obtener 115 mg de un polvo blanco.

Rendimiento = 54%.

LC-MS tR(Metodo D): 6,98 min; MS (ES) m/z: 650 (MH+).

F = 249°C.

RMN 1H : DMSO-d6 (400 MHz) : 6 (ppm) : 11,41 (1H, a) ; 8,15 (1H, d, J = 2,0 Hz) ; 8,03 (1H, s) ; 8,02 (1H, s) ; 7,90 (1H, d, J = 7,7 Hz) ; 7,48 (d, 1H, J = 8,9 Hz) ; 7,20 (1H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz) ; 5,39 (1H, a) ; 5,30 (1H, a) ; 4,38 (1H, m) ; 4,21 (2H, m) ; 3,86 (1H, m) ; 3,65 (3H, m) ; 3,18 (2H, m) ; 2,98 (3H, m) ; 2,73 (2H, t, J = 7,2 Hz) ; 2,56 (3H, s) ; 2,05 - 1,85 (6H, m) ; 1,65 - 1,49 (4H, m) ; 0,90 (3H, t, J = 7,2 Hz).

Ejemplo 4: Compuesto n° 4

Hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2- oxo-etil]-1H-indol-3-carboxflico

A una solucion que contiene 337 mg (1,0 mmol) de acido 5-cloro-1-{2-[4-metil-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3- carboxflico (preparacion 2.2) en 45 ml de DMF, se anaden 152 mg (1,1 mmoles) de HOBt, 0,6 ml (3,5 mmoles) de DIPEA y 191 mg (1 mmol) de EDC. Despues de 10 minutos de agitacion, se anaden 330 mg (1,1 mmoles) de hidrocloruro de 1-[1-(1-amino-piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il]- butan-1-ona (preparacion 1.2) y el medio de reaccion se agita durante 24h. Se anaden 95 mg de EDC, 75 mg de HOBt y 0,3 ml de DIPEA y despues de 24h suplementarias, la conversion es completa. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad, y el residuo se purifica por HPLC preparativa (columna fase inversa C18 con elucion con la ayuda de un gradiente H2O/MeCN en presencia de 0,1% de TFA). El producto asf obtenido se disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 0,43 ml de HCI 1N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 186 mg del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = 33%.

LC-MS tR(metodo C): 1,26 min; MS (ES) m/z: 568,2 (MH+).

5

10

15

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50

55

60

65

RMN 1H : DMSO-da (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,88 (3H, t) ; 1,57 (2H, dt) ; 2,05 (2H, m) ; 2,42 (2H, m) ; 2,59 (3H, s) ; 2,75 (2H, t) ; 2,83 (3H, d) ; 3,00 (1H, m) ; 3,19 (2H, m) ; 3,45 -3,71 (6H, m) ; 4,22 (2H, d) ; 4,41 (2H, d) ; 4,57 (1H, s a) ; 5,43 (1H, d) ; 5,57 (1H, d) ; 7,36 (1H, d); 7,66 (1H, d) ; 8,18 (1H, s) ; 8,21 (1H, s) ; 8,32 (1H, s) ; 11,40 (1H, s a).

Ejemplo 5: Compuesto n° 5

Hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-iI]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin- 1-il]-2-oxo-etil}-1H-indol-3-carbox^lico

A una solucion que contiene 436 mg (1,3 mmoles) de acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}- 1H-indol-3-carboxflico (preparacion 2.3) en 60 ml de DMF, se anaden 200 mg (1,5 mmoles) de HOBt, 1,3 ml (7,5 mmoles) de DIPEA y 250 mg (1,3 mmoles) de EDC. Despues de 10 minutos de agitacion, se anaden 300 mg (1,2 mmoles) del hidrocloruro de 1-[1-(1-amino-piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona (preparacion 1.2) y el medio de reaccion se agita durante 24h. Se anaden 83 mg de EDC, 67 mg de HOBt y 0,4 ml de DIPEA y despues de 24h suplementarias, la conversion es completa. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad, y el residuo se disuelve en 250 ml de una mezcla DCM / iPrOH (3:1) y despues se lava con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre MgSO4, y el residuo se purifica por HPLC preparativa (columna fase inversa C18 con elucion con la ayuda de un gradiente H2O/MeCN en presencia de 0,1% de TFA). El producto asf obtenido se disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 1 ml de HCI 1N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 250 mg del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = 30%.

LC-MS tp(Metodo B): 3,24 min; MS (ES) m/z: 612,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-d6 (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,88 (3H, t) ; 1,57 (2H, dt) ; 2,06 (2H, m) ; 2,43 (2H, m) ; 2,59 (3H, s) ; 2,74 (2H, t) ; 3,06 (1H, m) ; 3,24 (2H, m) ; 3,35 (3H, s) ; 3,39 (2H, d) ; 3,50 -3,81 (8H, m) ; 4,21 (2H, d) ; 4,39 (2H, d) ; 4,59 (1H, s a) ; 5,43 (1H, d) ; 5,57 (1H, d) ; 7,36 (1H, d) ; 7,67 (1H, d) ; 8,18 (1H, s) ; 8,21 (1H, s) ; 8,35 (1H, s) ; 11,21 (1H, s a).

Ejemplo 6: Compuesto n° 6

Hidrocloruro de [4-(4-butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]- amida del acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(2-trifluorometoxi- etil)-piperazin-1-il]-etil}-1H-indol-3-carboxflico

A una solucion que contiene 492 mg (1,3 mmoles) de acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}- 1H-indol-3-carboxflico (preparacion 2.4) en 60 ml de DMF, se anaden 200 mg (1,5 mmoles) de HOBt, 1,3 ml (7,5 mmoles) de DIPEA y 250 mg (1,3 mmoles) de EDC. Despues de 10 minutos de agitacion, se anaden 300 mg (1,2 mmoles) del hidrocloruro de 1-[1-(1-amino-piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il]-butan-1-ona (preparacion 1.2) y el medio de reaccion se agita durante 24h. Se anaden 83 mg de EDC, 67 mg de HOBt y 0,4 ml de DIPEA y despues de 24h suplementarias, la conversion es completa. El medio de reaccion se evapora hasta sequedad, y el residuo se disuelve en 250 ml de una mezcla DCM / iPrOH (3:1) y despues se lava con una solucion acuosa de LiCI (4% p/p). La fase organica se seca sobre MgSO4, y el residuo se purifica por HPLC preparativa (columna fase inversa C18 con elucion con la ayuda de un gradiente MeCN / agua en presencia de 0,1% de TFA). El producto asf obtenido se disuelve en una mezcla MeCN / agua y se liofiliza despues de anadir 1 ml de HCI 1N. Este procedimiento se repite una vez para obtener 250 mg del hidrocloruro del producto esperado.

Rendimiento = 29%.

LC-MS tR(Metodo B): 3,62 min; MS (ES) m/z: 666,3 (MH+).

RMN 1H : DMSO-d6 (500 MHz) : 6 (ppm) : 0,88 (3H, t) ; 1,57 (2H, dt) ; 1,99 (2H, m) ; 2,34 (2H, m) ; 2,58 (3H, s) ; 2,74 (2H, t) ; 3,04 - 3,67 (12H, m) ; 4,25 (1H, d) ; 4,47 (2H, d) ; 4,67 (2H, s a) ; 5,42 (1H, s a) ; 5,53 (1H, s a) ; 7,32 (1H, d) ; 7,62 (1H, d) ; 8,16 (1H, s) ; 8,19 (2H, s) ; 11,52 (1H, s a).

Los compuestos segun la invencion han sido objeto de ensayos farmacologicos.

Inhibicion de la agregacion plaquetaria in vitro (sangre de rata)

La sangre se extrae de ratas macho de la cepa Sprague-Dawley, que pesan 250-300g. La extraccion sobre citrato de sodio al 3,8% (1 volumen para 9 volumenes de sangre) se efectua por puncion de la aorta abdominal despues de anestesia del animal con pentobarbital sodico.

El plasma rico en plaquetas (PRP) se obtiene por centrifugacion de la sangre a 300g durante 5 minutos, y las medidas de agregacion plaquetaria se realizan como se ha descrito anteriormente.

Los resultados se calculan utilizando el area bajo la curva de absorbancia medida durante 6 minutos, y se expresan por el porcentaje de inhibicion.

Los compuestos segun la invencion presentan IC50 (de inhibicion de la agregacion plaquetaria) comprendidas entre 5 0,02 y 1,5 pM.

Los resultados obtenidos para cada compuesto se indican en la tabla I.

10

Tabla I

Compuestos n1

Formula desarollada

Inhibicion de la agregacion plaquetaria in vitro (sangre de rata) CI50 en ___________________________pM___________________________

imagen61

0,091

0,080

0,294

1

2

3

imagen62

5

10

15

20

25

30

35

4

0 6 % MH JO 0,043

5

0 N-—N O N__/ ri) \__/ 0 k ji W Cl 0,017

6

-on ^ Cl 0,046

Inhibicion de la agregacion plaquetaria in vitro (sangre humana)

La sangre se extrae de voluntarios sanos, utilizando jeringas de 20 ml que contienen 2 ml de citrato de sodio tamponado. La sangre se transfiere en unos tubos de polipropileno, y se centrifuga durante 5 minutos (100 g) a temperatura ambiente (sin utilizar el freno de la centrifugadora). El sobrenadante de plasma rico en plaquetas (PRP) se extrae, se diluye, y se numera en plaquetas antes de ser utilizado en las medidas de agregacion.

Las medidas de agregacion plaquetaria se realizan a 37°C en unos tubos de vidrio (agregometro Chrono-Log - Kordia). Se mezclan 4 |al del compuesto a ensayar (solucion 100 veces mas concentrada que la concentration final deseada, en DMSO) con 392 ^l de PRP frio, y se incuban durante 1 minuto con agitation. Despues, se anaden 4 |al de una solucion de ADP a 250 |aM a la mezcla. Las medidas de agregacion se siguen durante 6 a 8 minutos, con agitacion permanente, por registro de las variaciones de la densidad optica segun el metodo de G.V.R. BORN (Born Nature (1962) 194, 927).

Los resultados se calculan utilizando la amplitud de la agregacion expresada en altura, y se expresan por el porcentaje de inhibicion.

Los compuestos segun la invention presentan IC50 (de inhibicion de la agregacion plaquetaria) comprendidas entre 0,1 y 2 |aM.

La tabla II siguiente indica los resultados obtenidos para los compuestos 1 y 4:

Tabla II

Compuestos n°

Inhibicion de la agregacion plaquetaria in vitro (sangre humana) CI50 en pM

1

0,27

4

0,025

Inhibicion de la agregacion plaquetaria ex vivo (sangre de rata)

Se utilizan ratas macho de la cepa Sprague-Dawley, que pesan 250-300g, a razon de 6 animales por lote. Cada compuesto a ensayar se diluye en una solucion de agua glucosada (glucosa 5%) que contiene 5% de cremoforo y 3% de glicofurol.

Los compuestos segun la invencion se administran por alimentation forzada o por infusion dos horas antes de la extraction.

5

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15

20

25

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35

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45

50

55

60

La extraccion sobre citrato de sodio al 3,8% (1 volumen para 9 volumenes de sangre) se efectua por puncion de la aorta abdominal despues de anestesia del animal con pentobarbital sodico.

El plasma rico en plaquetas (PRP) se obtiene por centrifugacion de la sangre a 300g durante 5 minutos, y las medidas de agregacion plaquetaria se realizan como se ha descrito anteriormente.

Los resultados se calculan utilizando el area bajo la curva de absorbancia medida durante 6 minutos, y se expresan por el porcentaje (%) de inhibicion.

La tabla III siguiente indica los resultados obtenidos para los compuestos 1 y 4:

Tabla III

Compuestos n°

Inhibicion de ia agregacion plaquetaria ex vivo (sangre de rata) Dosis = 3 mg/kg y t = 2 h despues de la administracion salvo especificacion

Infusion (Intravenosa)

Alimentacion forzada (oral)

1

79,0 ± 5,0% (30 min) 42,8 ± 10,7%

4

88,0 ± 5,0% (1 mg/kg) 72,0 ± 15,0%

Los compuestos de la presente invencion son principalmente principios activos compatibles con su utilizacion como medicamentos y/o composiciones farmaceuticas.

Segun uno de estos aspectos, la presente invencion se refiere a la utilizacion de un compuesto de formula (I) o de una de sus sales, farmaceuticamente aceptable para la preparacion de medicamentos destinados a prevenir o a tratar cualquier patologfa humana y/o para uso veterinario. Asf, los compuestos segun la invencion pueden utilizarse en el hombre o en animales (principalmente en marnfferos incluyendo de forma no limitativa los perros, los gatos, los caballos, los bovinos, ovejas) para la prevencion o el tratamiento de enfermedades que implican el receptor P2Y12.

Por lo tanto, estan indicados como inhibidores de la activacion plaquetaria, de la agregacion y de la desgranulacion plaquetaria, como promotores de la desagregacion plaquetaria, y como agentes anti-tromboticos. Estan indicados igualmente en el tratamiento o la profilaxis de la angina (angina de pecho) inestable, angioplastia coronaria percutanea (PTCA), infarto de miocardio, peri-trombolisis, complicaciones arteriales tromboticas de la aterosclerosis tales como los accidentes vasculares cerebrales embolicos o tromboticos, los accidentes isquemicos transitorios, la enfermedad vascular periferica, el infarto de miocardio con o sin trombolisis, las complicaciones arteriales de la aterosclerosis debidas a intervenciones quirurgicas como la angioplastia, la endarterectoirna, la colocacion de stent, los injertos vasculares coronarios y otros, las complicaciones tromboticas de la cirugfa o danos mecanicos como la recuperacion de tejidos despues de un traumatismo accidental o quirurgico, cirugfa reconstructiva (incluida la piel y los colgajos musculares), la coagulacion intravascular diseminada, la purpura trombotica trombocitopenica, el smdrome hemolttico y uremico, las complicaciones tromboticas de la septicemia, el smdrome de distress respiratorio, el smdrome de anti-fosfolfpidos, la trombocitopenia inducida por la heparina y la pre-eclampsia/eclampsia; o trombosis venosas tales como la trombosis venosa profunda, la enfermedad veno-oclusiva, las afecciones hematologicas tales como la enfermedad mielo-proliferativa (incluida la trombocitemia), la drepanocitosis; o en la prevencion de la activacion plaquetaria inducida mecanicamente in vivo, como durante el by-pass cardio-pulmonar y la oxigenacion extracorporal (prevencion de micro-trombo-embolismos), en la prevencion de la activacion plaquetaria inducida mecanicamente in vitro (utilizacion en la conservacion de los productos sangumeos - por ejemplo, los concentrados plaquetarios - utilizacion durante derivaciones tales como la dialisis renal y la plasmaferesis), trombosis secundaria a una lesion vascular / inflamacion tales como la angeftis, la arteritis, la glomerulonefritis, la enfermedad inflamatoria del intestino, y el rechazo de trasplante de organos, las afecciones tales como la migrana, el fenomeno de Raynaud, afecciones en las que las plaquetas pueden contribuir al proceso de la enfermedad inflamatoria subyacente en la pared vascular tal como la formacion / progresion de placas ateromatosas, estenosis / reestenosis, y en otras patologfas inflamatorias como el asma, en el que las plaquetas y los factores derivados de las plaquetas estan implicados en el proceso de la enfermedad inmunologica.

La utilizacion de los compuestos segun la invencion para la prevencion y/o el tratamiento de las enfermedades mencionadas anteriormente, asf como para la preparacion de medicamentos destinados a tratar estas enfermedades forma parte integrante de la invencion.

Los compuestos de formula (I) anteriores, o una de sus sales farmaceuticamente aceptables pueden utilizarse a dosis diarias de 0,01 a 100 mg por kilo de peso corporal del marnffero a tratar, preferentemente a dosis diarias de 0,1 a 50 mg/kg. En el ser humano, la dosis puede variar preferentemente de 0,1 a 4.000 mg por dfa, mas particularmente de 0,5 a 1.000 mg segun la edad del sujeto a tratar o el tipo de tratamiento: profilactico o curativo.

Asf, segun otro de sus aspectos, la presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que contienen, como principio activo, un compuesto de formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables asf como uno o varios excipientes farmaceuticamente aceptables.

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En las composiciones farmaceuticas de la presente invencion para la administracion por v^a oral, sublingual, inhalada, sub-cutanea, intramuscular, intravenosa, topica, local, intratraqueal, intranasal, transdermica, local o rectal, los principios activos pueden administrarse en formas unitarias de administracion, mezclados con soportes farmaceuticos clasicos, a los animales o a los seres humanos.

Las formas unitarias de administracion apropiadas comprenden las formas por via oral tales como los comprimidos, capsulas blandas o duras, polvos, granulos, disoluciones o suspensiones orales, las formas de administracion sublingual, bucal, intratraqueal, intraocular, intranasal, por inhalacion, los aerosoles, las formas de administracion topica, formas de administracion transdermica, los implantes, las formas de administracion subcutanea, intramuscular, intravenosa y las formas de administracion rectal.

Para la administracion topica se pueden utilizar los compuestos segun la invencion en cremas, pomadas, geles, o lociones.

A tftulo de ejemplo, una forma unitaria de administracion de un compuesto segun la invencion en forma de comprimido puede comprender los componentes siguientes:

Compuesto segun la invencion 50,0 mg

Manitol 223,75 mg

Croscarmelosa sodica 6,0 mg

Almidon de mafz 15,0 mg

Hidroxipropil-metilcelulosa 2,25 mg

Estearato de magnesio 3,0 mg

Por via oral, la dosis de principio activo administrada por dfa puede alcanzar 0,01 a 100 mg/kg, en una o varias tomas, preferiblemente 0,02 a 50 mgHkg.

Pueden haber casos particulares en los que son apropiadas dosificaciones mas elevadas o mas bajas; dichas dosificaciones no salen del marco de la invencion. Segun la practica habitual, la dosificacion apropiada para cada paciente la determina el medico segun el modo de administracion, el peso y la respuesta de dicho paciente.

La presente invencion, segun otro de sus aspectos, se refiere igualmente a un metodo de tratamiento de las patologfas indicadas anteriormente que comprende la administracion, a un paciente, de una dosis eficaz de un compuesto segun la invencion, o de una de sus sales farmaceuticamente aceptables.

Los compuestos segun la invencion podran utilizarse igualmente para la preparacion de composiciones para uso veterinario.

Claims (13)

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   REIVINDICACIONES

   1. Compuesto que responde a la formula (I)

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   en la que:

   A representa un radical bivalente elegido entre:

   imagen2

   R1 representa un alquilo (C1-C4);

   R2 representa un alquilo (C1-C3);

   R3 representa un grupo -NR7R8, R7 y R8, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos constituyen un heterociclo saturado, que comprende de 4 a 6 miembros de anillo y que puede contener otro atomo de nitrogeno: estando sustituido dicho heterociclo con al menos un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido con al menos uno de los grupos siguientes:

   • uno, dos o tres atomos de halogeno o,

   • un alcoxi (C1-C3) no sustituido o sustituido con uno, dos o tres atomos de halogeno;

   R4 representa un atomo de halogeno,

   en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base asf como sus enantiomeros y diastereoisomeros, incluidas sus mezclas racemicas.
2. 2. Compuesto de formula (I) segun la reivindicacion 1, caracterizado porque A representa:

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   en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.

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3. 3. Compuesto de formula (I) segun la reivindicacion 1, caracterizado porque A representa:

   imagen4

   en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.
4. 4. Compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque Ri representa un grupo n- propilo, en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.
5. 5. Compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque R3 representa un grupo piperazina sustituido con al menos un alquilo (C1-C3) no sustituido o sustituido con al menos uno de los grupos siguientes:

   • uno, dos o tres atomos de halogeno o,

   • un alcoxi (C1-C3) no sustituido o sustituido con uno, dos o tres atomos de halogeno en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.
6. 6. Compuesto de formula (I) segun una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque R4 representa un atomo de cloro, en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.
7. 7. Compuesto de formula (I) segun la reivindicacion 1, caracterizado porque se elige entre los compuestos siguientes:

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H-indol-3- carboxflico

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-2-oxo-etil]-1H- indol-3-carboxflico

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(3,3,3-trifluoro-propil)-piperazin-1-il]- etil}-1H-indol-3-carboxflico

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-ciclohexil]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo-etil}- 1H-indol-3-carboxflico

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazoI-1-il)-piperidin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-{2-[4-(2-metoxi-etil)-piperazin-1-il]-2-oxo- etil}-1H-indol-3-carboxflico

   - [4-(4-Butiril-5-metil-pirazol-1-il)-pipendin-1-il]-amida del acido 5-cloro-1-{2-oxo-2-[4-(2-trifluorometoxi-etil)-piperazin- 1 -il]-etil}-1H-indol-3-carboxflico

   en forma de base o de sal de adicion a un acido o a una base.
8. 8. Procedimiento de preparacion de un compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque se hace reaccionar un compuesto de formula (IIB):

   imagen5

   en la que A, Ri, R2 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1 con una amina de formula (III):

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   HR3 (III)

   en la que R3 es tal como se ha definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1.

   10 9. Procedimiento de preparacion de un compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7,

   caracterizado porque se hace reaccionar un acido o un derivado funcional activado de este acido de formula:

   imagen6

   15 en la que R3 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1, con un compuesto de formula:

   imagen7

   20 en la que A, R1 y R2 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1.
9. 10. Compuesto de formula (IIA):

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   en la que A, R1, R2 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1, y Z representa un alquilo (C1-C4).
10. 11. Compuesto de formula (IIB):

    imagen9

    en la que A, R1, R2 y R4 son tales como se han definido para un compuesto de formula (I) en la reivindicacion 1.
11. 12. Medicamento, caracterizado porque comprende un compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una sal farmaceuticamente aceptable del compuesto de formula (I).
12. 13. Composicion farmaceutica caracterizada porque comprende un compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una sal farmaceuticamente aceptable de este compuesto, asf como al menos un excipiente farmaceuticamente aceptable.
13. 14. Compuesto de formula (I) segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su utilizacion en el tratamiento o la profilaxis de la angina (angina de pecho) inestable, la angioplastia coronaria percutanea (PTCA), el infarto de miocardio, la peri-trombolisis, las complicaciones arteriales tromboticas de la aterosclerosis tales como accidentes vasculares cerebrales embolicos o tromboticos, los accidentes isquemicos transitorios, la enfermedad vascular periferica, el infarto de miocardio con o sin trombolisis, las complicaciones arteriales de la aterosclerosis debidas a intervenciones quirurgicas como la angioplastia, la endarterectoirna, la colocacion de stent, los injertos vasculares coronarios y otros, complicaciones tromboticas de la cirugfa o de danos mecanicos como la recuperacion de tejidos despues de un traumatismo accidental o quirurgico, cirugfa reconstructiva (incluida la piel y los colgajos musculares), la coagulacion intravascular diseminada, la purpura trombotica trombocitopenica, el smdrome hemolftico y uremico, las complicaciones tromboticas de la septicemia, el smdrome de distress respiratorio, el smdrome de anti-fosfolfpidos, la trombocitopenia inducida por la heparina y la pre-eclampsia/eclampsia; o las trombosis venosas tales como trombosis venosa profunda, la enfermedad veno-oclusiva, las afecciones hematologicas tales como la enfermedad mielo-proliferativa (incluida la trombocitemia), la drepanocitosis; o en la prevencion de la activacion plaquetaria inducida mecanicamente in vivo, como durante el by-pass cardio-pulmonar y la oxigenacion extracorporal (prevencion de micro-trombo-embolismos), en la prevencion de la activacion plaquetaria inducida mecanicamente in vitro (utilizacion en la conservacion de los productos sangumeos - por ejemplo, los concentrados plaquetarios - utilizacion durante derivaciones tales como la dialisis renal y la plasmaferesis), trombosis secundaria a una lesion vascular / inflamacion tales como la angeftis, la arteritis, la glomerulonefritis, la enfermedad inflamatoria del intestino, y el rechazo de trasplante de organos, afecciones tales como la migrana, el fenomeno de Raynaud, afecciones en las que las plaquetas pueden contribuir al proceso de la enfermedad inflamatoria subyacente en la pared vascular tal como la formacion / progresion de placas ateromatosas, estenosis / reestenosis, y en otras patologfas inflamatorias como el asma.