ES2587883A1 - Procedimiento para el diagnóstico de procesos de desmineralización dental - Google Patents

Procedimiento para el diagnóstico de procesos de desmineralización dental Download PDF

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Abstract

La presente invención se refiere a un procedimiento cuantitativo "ex vivo" para el diagnóstico complementario del grado de desmineralización dental mediante el uso de la espectrocopia Raman, que comprende la cuantificación de las intensidades y áreas de una diversidad de las bandas Stokes del espectro y la definición y cálculo de índices que resultan de dividir las áreas de ciertas bandas de interés. El diagnóstico se determina por proximidad de los valores de estos índices con los valores previamente obtenidos para el patrón de normalidad de mineralización dental establecido a partir del análisis de piezas dentales sanas. Este procedimiento proporciona una técnica biomédica complementaria para análisis cuantitativo "ex vivo", en restos de tejidos dentales extraídos por prescripción médica, del grado de desmineralización dental y cuya información facilitará la prescripción del tratamiento acorde para su remisión o prevención.

Description

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DESCRIPCIÓN

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métodos de diagnóstico, menos convencionales, como la trans-iluminación mediante fibra óptica, medidas de conductividad eléctrica y metodologías de fluorescencia láser (Medina J. c., Salgo N., Acevedo A. M. Evaluación de los métodos de diagnóstico en la detección de la caries dental por odontólogos venezolanos. Acta Odontológica Venezolana, 2, Caracas, 2006). Estas técnicas presentan algunas mejoras respecto a las radiografías convencionales pero todavía no pueden sustituirlas. Por ejemplo, en el caso de la trans-iluminación, no es posible tomar imágenes bajo la línea del margen gingival ni tampoco medidas precisas de la profundidad de la lesión proximal. En el caso de las medidas de conductividad eléctrica, existe un gran número de variables de las que va a depender el valor final de resistencia a la conductividad eléctrica de cada diente como son la porosidad, el volumen de saliva en la zona de concentración, la temperatura y la concentración de iones. Se trata, por tanto, de una técnica con una alta variabilidad y menor especificidad que la inspección visual en la que, además, todavía no se ha optimizado el tiempo de exploración clínica. Por último, en cuanto a las metodologías de fluorescencia láser, se ha demostrado que el tamaño de la lesión altera el nivel de fluorescencia, lo que detennina el valor cuantificado dando lugar a un alto número de falsos positivos con casos diagnosticados como de hipo-mineralización debida a caries dental en casos de dientes en desarrollo. Finalmente, existen también las llamadas técnicas de imagen multi-fotón, tem10grafía por infrarrojos o la tomografía de coherencia óptica que constituyen otros métodos de diagnóstico en investigación hoy en día (Lizmar D. Veitía E., Acevedo A. M, Rojas Sánchez

F. Revisiones Bibliográficas: Métodos convencionales y no convencionales para la detección de lesión inicial de caries. Acta Odontológica Venezolana 201149(2) 1-14).

A pesar de todos estos avances, es importante destacar, que la inspección visual seguida de una radiografia es todavía considerada como el método más eficaz para el diagnóstico "in vivo'" (Lizmar el al 20 11 , vide supra). Sin embargo, a falta de mejoras en cuanto a especificidad, también sería de interés ser capaz de detem1inar la extensión del tejido afectado y el grado de actividad de la lesión así como un mayor grado de sensibilidad para detectar la desmineralización dental en las primeras etapas, y no sólo proporcionar respuestas dicotómicas (presencia/ausencia de la enfermedad) como ocurre actualmente (Takany Basting R and Campos SelTa M. OcJusal caries: Diagnosis and noninvasive treatments. Quintessence In!. 30, pp 174-178, 1999; Nigel B. Pitts. Clinical Diagnosis of Dental Caries: An European Perspective. Joumal of Dental Education, 10, pp 972-979, 200 1). Por otra parte, el desarrollo de tecnologías biomédicas complementarias que pennitan el estudio ""ex vivo'" de la composición de tejidos dentales ya extraídos al paciente por prescripción médica, es también de gran interés para complementar el diagnóstico de la salud bucodental del paciente y así poder promover tratamientos preventivos o de remisión en consonancia.

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La espectroscopia Raman es una técnica analítica fotónica de alta resolución espacial cuyo principio fundamental se basa en la excitación de un tejido diana con un láser monocromático y el posterior registro de la luz dispersada inelástica, la cual constituye la radiación Raman. Esta dispersión inelástica permite la obtención de información acerca de las vibraciones moleculares mediante la medición de las diferencias entre la energía de los fotones incidentes y de los fotones dispersados. Así, por ejemplo, dado que las enfemledades y otras anomalías patológicas conducen a cambios químicos y estructurales, se observan cambios en los espectros Raman de vibración que pueden ser utilizados como marcadores fenotípicos, sensibles de la enfermedad.

De hecho, los picos del espectro Raman de 400 a 1800 cm-I, se han correlacionado con las vibraciones moleculares consideradas como bioquímicamente relevantes para cie11as enfermedades u otras anomalías patológicas donde se producen cambios químicos y estructurales; dichos cambios pueden ser, entonces, cuantificados en el espectro Raman y ser utilizado como un marcador fenotípico, sensible a cada enfennedad como una huella dactilar molecular del tejido objetivo, detemlinado por el tipo de vibraciones moleculares específicas de los enlaces químicos de los ácidos nucleicos, lípidos y proteínas biológicas. Estos enlaces químicos evaluados por espectroscopia Raman constituirán picos de vibración estrechos en ciertas regiones espectrales, en contraste con los amplios perfiles en gran medida inespecíficos de emisión y de baja resolución obtenidos, por ejemplo, mediante los métodos de fluorescencia (Hughes O. R., N. Stone, M. Kraft, C. Arens, M. A. Birchall, Head Neck 2010; 32(11),1544; Li Y., Z. N. Wen, L. J. Li, M. L. Li, N. Gao, Y. Z. Guo, J. Raman Speclrosc. 2010; 41(2), 142; Stone N., C. Kendall, N. Shepherd, P. Crow, H. Barr, J. Ramal1 Speclrosc. 2002; 33(7), 564).

La recolección o toma de espectros Raman no perturba el entorno celular y esta espectroscopia es capaz de dctcctar alteraciones mínimas en la composición bioquímica de células vivas y dar lugar a una huella digital molecular de diagnóstico del tejido diana (Valdés R, Stefanov S, Chiussi S, López-Álvarez M, González P. Pilot research on the evaluation and detection of head and neck squamous cell carcinoma by Raman spectroscopy. loumal of Raman Spectroscopy 45(7), 2014, 550-557). Al mismo tiempo esta metodología no requiere de una preparación especial de la muestra ni marcadores, la presencia de agua no distorsiona el análisis, la adquisición del espectro es rápida y la intensidad de banda Raman es directamente proporcional a la concentración. Dadas todas estas ventajas en la última década se han dado importantes avances tecnológicos tanto en espectrometría como en técnicas de computación que han permitido avanzar de forma significativa en la espectroscopia Raman aplicada a las ciencias biológicas y de la vida (OC de Veld OC, Bakker Schut TC, Skurichina M, Witjes MJ, Van der Wal lE, Roodenburg JL, Sterenborg HJ. Lasers Med Sci 2005, 19(4):203-9], [N Stone, MSc Barr, MD (Dist.). Laryngoscope, \1 O: 1756 -\763, 2000] [Harris AT, Garg M, Yang XB, Fisher SE, Kirkham J, Sll1ith DA, Martin-Hirsch DP, High AS: Raman spectroscopy and advanced ll1athematical 1l10delling in the discrimination of human thyroid cell lines. Head Neck Oncol 2009,1(\): 38).

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Espectroscopia Raman en Odontología

La espectroscopia Raman se ha investigado durante décadas como una hen'all1ienta de diagnóstico para la caracterización de los cambios malignos tempranos que ocurren en el tracto gastrointestinal superior, así como en una gama de otros tejidos incluyendo la vejiga, mama, hueso, pulmón, sangre, ganglios linfáticos, laringe y estómago (Jerjes W., B. Swinson, D. Pickard, G. J. Thomas, C. Hopper, Oral Oncol. 2004; 40(7), 673; Almond L. M., J. Hutchings,

N. Shepherd, H. Barr, . Stone, C. Kendall, 1. BiopholOIl. 2011; 4(\0), 685; Barman l., N. C. Dingari, G. P. Singh, R. Kumar, S. Lang, G. Nabi, Alla/. Bioalla/. Chem. 20\2; 404(\0), 3091; Hanlon E. B., R. Manoharan, T. W. Koo, K. E. Shafer, J. T. Motz, M. Fitzmaurice, J. R. Kramer, 1. Itzkan, R. R. Dasari, M. S. Feld, Phys. Med. Bio/. 2000; 45(2), 1; Tu Q., C. Chang, Nanomedicine 20\2; 8(5), 545). Sin embargo, los estudios clínicos en tejido mineralizado duro siguen siendo escasos, aún así debido al alto grado de sensibilidad, en términos de detección de los cambios estructurales a nivel molecular en los tejidos mineralizados, como marcadores fenotípicos de una enfennedad determinada química específica, la espectroscopia Raman emerge como una herramienta de diagnóstico potente para la detección y evaluación del grado de desmineralización dental.

Así, dentro de los escasos trabajos orientados a los tejidos mineralizados, Ko el al (2005) (Ko ACT, Choo-Smith LP, Hewko M, Leonardi L, Sowa MG, Dong CCS, Williams P, Cleghom B. Ex vivodetection and characterization of early denta! calies by optica! coherence tomography and Raman spectroscopy. Jouma! of Biomedica! Optics 2005, 10(3), Artiele number 031\ \8) publicaron una detección ex vivo y caracterización de caries dentales incipientes mediante la combinación de tomografía de coherencia óptica (OCT) con espectroscopia Rall1an proporcionando imágenes para la detección de caries y la determinación de la profundidad de la lesión y, mediante la espectroscopia Raman, obtuvieron la confinnación bioquímica de esa calies. Los mismos autores, Ko el al (Ko ACT, Choo-Smith, LP, Hewko M, Sowa MG , Dong CCS, Cleghom B. Detection of early dental caries using polarized Raman spectroscopy. Optics Express 2006, 14( 1), 203-215) publicaron la detección de caries dentales incipientes en dientes humanos extraídos utilizando espectroscopia Raman polarizada para discriminar entre la caries dental incipiente y esmalte sano. Finalmente, de nuevo Ko el al (Ko ACT, Choo-Smith LP, Zhu R, Hewko M, Dong C, Cleghom B, Sowa MG. Application of NIR Raman spectroscopy for Proceedings of SPIE 2006, 6093, Article number 60930L) publicaron la aplicación de espectroscopia Raman NIR para detectar y caracterizar caries dentales incipientes en dientes humanos extraídos donde la excitación laser del IR cercano proporcionó el contraste bioquímico.

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Mohanty el al (Mohanty B, Dadlani D, Mahoney D, Mann AB. Characterizing and identifying incipient carious lesions in dental enamel using micro-Raman spectroscopy. Caries Research 2013, 47(1), 27-33) caracterizaron e identificaron "ex vivo" casos de caries incipientes (crecidas sobre molares humanos bajo exposición controlada a ácido láctico) en esmalte dental utilizando espectroscopia de micro-Raman para concluir que dicha espectroscopia presenta ambos requisitos de sensibilidad y selectividad para identificar lesiones de caries incipientes, sin embargo la presencia de una capa superficial con un contenido mineral relativamente alto podría complicar el análisis. Carvalho el al (Carvalho F B, Barbosa AFS, Zanin FAA, Brugnera Júnior A, Silveira Júnior L, Pinheiro ALB. Use of laser fluorescence in dental caries diagnosis: A fluorescence x biomolecular vibrational spectroscopic comparative study. Brazilian Dental Joumal 2013, 24(1), 59-63) investigaron "ex vivo" el uso de la fluorescencia láser en diagnóstico de caries dental para verificar la existencia de una correlación entre las lecturas de la espectroscopia Raman de los niveles de grupos fosfato de apatitas (-960 cm·I), apatitas fluoradas (-575 cm·l) y matriz orgánica (-1450 cm·l) en diferentes fases de la caries dental en dientes humanos extraídos. Finalmente, Salehi el al (Salehi H, Terrer E, Panayotov 1, Levallois B, Jacquot B, Tassery H, Cuisinier F Functional mapping of human sound and carious enamel and dentin with Raman spectroscopy. Joumal of Biophotonics 2013, 6(10), 765-774) llevaron a cabo un mapeado funcional "ex vivo" de dientes humanos extraídos, en concreto del esmalte humano y de esmalte y dentina con caries, mediante espectroscopia Raman a través de un análisis preciso de las variaciones del espectro de la banda Raman de mineral y de los componentes orgánicos.

Todos estos trabajos de investigación realizado "ex vivo" en tejidos dentales a modo de biopsia validan el interés de la presente invención en cuanto a la potencialidad de la espectroscopia Raman como herramienta clínica complementaria para el diagnóstico de la desmineralización dental. Sin embargo, todos ellos proponen el uso de esta tecnología con un enfoque cualitativo en cuanto a la identificación de los grupos funcionales de interés en tejidos mineralizados. Por lo que la implementación potencial de Raman en la clínica todavía requeriría de una gran cantidad de tiempo para evaluar los espectros y, una vez evaluados, no se obtendría un índice numérico del potencial grado de desmineralización de los restos de tejidos dentales analizados.

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El aspecto relevante de la presente invención se refiere a la propuesta de un procedimiento ""ex vivo"" para la evaluación cuantitativa del grado de desmineralización dental mediante espectroscopia Raman, caracterizado por:

5
1-Cuantificar en el espectro Raman, obtenido tras irradiar la pieza dental con luz láser, las áreas de las bandas de Stokes asociadas a los grupos: P04".l bending de hidroxiapatita (430 cnyl), P04"3 slrelching de hidroxiapatita (960 cnyl) y el grupo C-H. de lípidos y proteínas (2941 cnyl) y calcular los valores de los siguientes Índices relativos definidos para el diagnóstico:

lO
Índice de Mineralización bending (1Mb): área banda P04".l 2941 cm"l. a 430 cnyl/ área banda C-H. a

Índice de Mineralización slrelching (IMs): área banda P04".1 a 960 cnyl/ área banda C-H, a 2941 cm"l.

15
2-Determinar el diagnóstico por proximidad de los valores obtenidos con el patrón de n0n11alidad para los niveles de mineralización de la pieza dental sana, establecido en 1.351.75 para MIb y 4.01-5.19 para MIs.

20
Para la estimación de los índices se han analizado piezas dentales sanas y se ha tenido en cuenta tanto el error aleatorio derivado del propio proceso de medida como el en"or sistemático derivado de fluctuaciones inherentes al equipo debido a variaciones en la topografía de la muestra. Tanto las piezas dentales humanas sanas como las afectadas con diferentes grados de caries utilizadas para establecer los índices de la presente invención fueron extraídas por indicación médica tras diagnóstico de enfen11edad periodontal y cordal.

25 30
Otro aspecto de la invención se refiere a la diversidad de modos de toma de la muestra. La preparación de muestras ""ex vivo" pennite el examen en el laboratorio utilizando equipos de Raman convencionales. Entendiendo como '"ex vivo"" el análisis de muestras de tejido dental obtenidos, mediante prescripción médica por otras patologías, a modo de biopsia a través de técnicas actualmente estandarizadas en la práctica odontológica tales como microbiopsia dental mediante grabado ácido, por cortes mediante abrasión con discos s%~~/ex o bien fragmentos en caso de utilizar cortes de esmalte dental con instrumental o rotatorio y, por último, exodoncia dental (en este último caso no se trataría de una técnica generalizada por no ser inocua a diferencia del resto de las técnicas anteriores).

Este procedimiento puede utilizar una diversidad de tipos de láseres que emiten en el rango visible, tales como el láser de He-Ne (632 nm), láser de diodo (637 nm, 785 nm) o similar y los láseres emisores de radiación en los rangos ultravioleta (habitualmente 488 nm o 532 nm) o en el infrarrojo cercano, como el láser de Nd-Y AG (1064 nm).

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complementaria a diferentes tipos de enfennedades que afectan a tejidos duros del diente empezando por la caries dental pero incluyendo también la fluorosis o la amelogénesis imperfecta (Al), ya que las tres promueven cambios en la ultraestructura y en los ratios de los diferentes compuestos del diente (orgánicos frente a la parte mineral). Este procedimiento es especialmente aplicable al diagnóstico "ex vivo" de desmineralización dental incipiente, sin señales extemas que indiquen su presencia, de forma que facilitará su diagnóstico, actualmente dificil con las técnicas rutinarias "in vivo".

En otro aspecto de la invención el presente procedimiento puede ser implementado por ordenador u otros medios electrónicos además de software diseñados para el cálculo inmediato de los índices de mineralización establecidos y así facilitar y agilizar el tratamiento de la información diagnóstica.

Se presentan al final de este documento el espectro Raman de esmalte y dentina de dientes humanos sanos (Figura 1) Y la relación lineal probada entre las áreas de las bandas de interés respecto a la radiación láser incidente (Figura 2).

Descripción de los dibujos

Figura. l . Espectro Raman de esmalte y dentina de dientes humanos sanos. Extraídos por indicación médica tras diagnóstico de enfennedad periodontal por presentar alta movilidad.

Figura. 2. Relación lineal entre las áreas de las bandas Raman de interés (P04'3 bending (flexión) a 430 cn,-I, P04,3 stretching (extensión) a 960 cm,l y e-H. grupos de lípidos y proteínas a 2941 cn,-I) respecto a la radiación láser incidente.

Figura 3. Sección longitudinal de un molar superior (a) y premolar superior (b) afectados por caries dental obtenidos de dos pacientes para su evaluación por el presente método cuantitativo de espectroscopia Raman. Piezas dentales extraídas por indicación médica tras diagnóstico de enfennedad periodontal por presentar alta movilidad.

Figura 4. Resultados cuantitativos obtenidos para los casos de estudio, donde (a) presenta los valores de MIb para las zonas 1 (esmalte sano) y 3 (esmalte con caries o potencialmente afectado sin claras evidencias) del molar superior y del premolar superior, respectivamente. La zona sombreada en gris representa el patrón de nom1alidad. La gráfica (b) es el mismo estudio pero para el índice Mis. Piezas dentales extraídas por indicación médica tras diagnóstico de enfem1edad periodontal por presentar alta movilidad.

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5
En un modo de realización particular, dos piezas dentales con diferente apariencia externa de desmineralización: molar superior (Figura 3(a» y premolar superior (Figura 3(b» , extraídas de dos pacientes por indicación médica tras diagnóstico de enfernledad periodontal por presentar alta movilidad, fueron evaluadas por espectroscopia Raman. En ambas figuras se presentan las piezas dentales analizadas '"ex vivo'" desde distintos ángulos: bucal, oclusal y sección longitudinal en detalle.

l O 15
En las imágenes del molar superior (Figura 3(a» se observan señales externas claras de desmineralización dental.. En el caso del diente premolar (Figura 3(b» éste presenta una desmineralización interior sin claras señales externas de un desequilibrio en la desmineralización y caries dental, lo que permitirá evaluar la profundidad de detección de la señal Raman en el tejido,. Al presentar un corte longitudinal se puede observar la cal;es dental interna. Así, la zona 1 en la Figura 3 corresponde en ambos casos al esmalte sano, la zona 2 a la dentina afectada por caries y la zona 3 al área externa de interés para ser evaluada mediante la metodología Raman cuantitativa por índices.

Como un ejemplo de realización preferida se describe el siguiente procedimiento para el diagnóstico de la desmineralización dental en zonas sin evidencias externas:

20 25
l. Selección de aquellos restos de tejido dental extraídos por indicación médica tras el diagnóstico de diversas patologías y con ciertas sospechas de desequilibrio en la mineralización por el diagnóstico pero sin evidencias externas claras. 2. Análisis de la superficie de esas piezas dentales (Figura 3(a) y (b» utilizando espectroscopia Raman para la obtención de los espectros correspondientes. 3. Obtención, para cada espectro en las zonas externas (zona 1 y zona 3 para las dos piezas dentales) de las áreas de las bandas Raman a 430 cm·l, 960 cm-I y 2941 cm-l. 4. A partir de las áreas de las bandas Raman de interés se obtienen los índices de mineralización (Mlb y MIs) para cada zona; siendo estos índices para el caso práctico planteado los siguientes:

Molar superior
Premolar superior

Mlb
MIs Mlb MIs

Zona 1
1.571 4.735 1.651 4.069

Zona 3
0.369 1.039 0.312 1.030

imagen10

valores asignados al patrón de nonnalidad respecto a la mineralización obtenido a partir del estudio de piezas dentales sanas, y establecido en: \.35-\.75 para Mlb y 4.01-5.19 para Mls. Se elabora un diagnóstico por comparación de los valores de éstos índices con los

5 parámetros de normalidad.

Los resultados obtenidos para los casos de estudio utilizando los índices propuestos de mineralización, claramente validan la espectroscopia Raman junto con el patrón de nonnalidad establecido para los niveles de mineralización en esmalte sano como una técnica complementaria cuantitativa, fiable, objetiva y autosuficiente para diagnosticar la 10 desmineralización dental con altos niveles de especificidad y sensibilidad tanto a nivel superficial como en tej idos internos del diente. Esta metodología se puede transferir fácilmente a la clínica para su aplicación en piezas dentales extraídas de pacientes como complemento cuantitativo y objetivo en el diagnóstico para aplicar futuros tratamientos según el grado de desmineralización dental cuantificado .. De esta fOllna en tiempo casi real se obtienen los índices 15 de mineralización de las piezas dentales ""ex vivo" objeto de estudio y se comprueba su correspondencia con el intervalo de confianza o patrón de nonnalidad para estados saludables de mineralización dental. El diagnóstico precoz de los procesos de desmineralización es esencial para poder aplicar un tratamiento lo menos agresivo posible y garantizar una buena salud oral; esta metodología pennitirá categorizar el grado de desmineralización de piezas dentales en un

20 enfoque cuantitativo incluso en caries incipientes o no claramente manifiestas externamente para prescribir tratamientos preventivos al paciente en consonancia con el grado de desmineralización cuantificado.

imagen11

1-Procedimiento cuantitativo "ex vivo" para el diagnóstico de procesos de desmineralización dental por espectroscopia Raman caracterizado por:

-cuantificar en el espectro Raman obtenido tras irradiar la pieza dental con luz láser, las áreas

5 de las bandas de Stokes asociadas a P04,·1 bendillg de hidroxiapatita (430 cn,-I), P04,J stretching de hidroxiapatita (960 cm,l) y grupos e-H, de lípidos y proteínas (2941 cm,l) y calcular los siguientes índices relativos definidos para el diagnóstico:

Índice de Mineralización belldillg (Mlb, Mineralization Index bellding) = área banda 430 cm,1 / área banda 2941 cm,1 10 Índice de Mineralización stretc/¡illg (Mis, Mineralization Index stretching) = área banda 960 cn,-I / área banda 2941 cm,l.

-detenninar el diagnóstico por proximidad de los valores de dichos Índices con los valores previamente establecidos como patrón de normalidad respecto a la mineralización en piezas dentales sanas, establecido en: 1.35-1.75 para Mlb y 4.01-5.19 para Mis.

15 2-Procedimiento cuantitativo ex vivo para el diagnóstico de procesos de desmineralización dental por medio de espectroscopia Raman, según reivindicación 1, caracterizado por el hecho de que dicho procedimiento sea implementado por ordenador.

3-Uso del procedimiento según reivindicación 1-2 para el diagnóstico complementario de procesos de desmineralización dental asociados a caries dental.

20 4-Uso del procedimiento según reivindicaciones 1-3 para el diagnóstico complementario de procesos de desmineralización dental que alteran la fonnación y calcificación del diente, tales como la tluorosis o la amelogénesis imperfecta (Al).

Claims (3)

  1. imagen1
    OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS
    imagen2N.º solicitud: 201500293
    ESPAÑA
    Fecha de presentación de la solicitud: 27.04.2015
    imagen3Fecha de prioridad:
    INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA
    imagen451 Int. Cl. : A61B5/00 (2006.01) G01J3/44 (2006.01)
    DOCUMENTOS RELEVANTES
    Categoría
    56 Documentos citados Reivindicaciones afectadas
    X A
    US 2005283058 A1 (LIN-PING CHOO-SMITH et al.) 22.12.2005, página 8, columna 1, línea 34 -página 14, columna 2, línea 7; WO 2009012222 A1 (PURDUE RESEARCH FOUNDATION) 22.01.2009, todo el documento 1-4 1-4
    Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud
    El presente informe ha sido realizado • para todas las reivindicaciones □ para las reivindicaciones nº:
    Fecha de realización del informe 02.08.2016
    Examinador M. Ybarra Fernandez Página 1/4
    INFORME DEL ESTADO DE LA TÉCNICA
    Nº de solicitud: 201500293
    Documentación mínima buscada (sistema de clasificación seguido de los símbolos de clasificación) G01J, A61B Bases de datos electrónicas consultadas durante la búsqueda (nombre de la base de datos y, si es posible, términos de
    búsqueda utilizados) INVENES, EPODOC
    Informe del Estado de la Técnica Página 2/4
    OPINIÓN ESCRITA
    Nº de solicitud: 201500293
    Fecha de Realización de la Opinión Escrita: 02.08.2016
    Declaración
    Novedad (Art. 6.1 LP 11/1986)
    Reivindicaciones Reivindicaciones 1-4 SI NO
    Actividad inventiva (Art. 8.1 LP11/1986)
    Reivindicaciones Reivindicaciones 1-4 SI NO
    Se considera que la solicitud cumple con el requisito de aplicación industrial. Este requisito fue evaluado durante la fase de examen formal y técnico de la solicitud (Artículo 31.2 Ley 11/1986).
    Base de la Opinión.-
    La presente opinión se ha realizado sobre la base de la solicitud de patente tal y como se publica.
    Informe del Estado de la Técnica Página 3/4
    OPINIÓN ESCRITA
    Nº de solicitud: 201500293
    1. Documentos considerados.-
    A continuación se relacionan los documentos pertenecientes al estado de la técnica tomados en consideración para la realización de esta opinión.
    Documento
    Número Publicación o Identificación Fecha Publicación
    D01
    US 2005283058 A1 (LIN-PING CHOO-SMITH et al.) 22.12.2005
    D02
    WO 2009012222 A1 (PURDUE RESEARCH FOUNDATION) 22.01.2009
  2. 2. Declaración motivada según los artículos 29.6 y 29.7 del Reglamento de ejecución de la Ley 11/1986, de 20 de marzo, de Patentes sobre la novedad y la actividad inventiva; citas y explicaciones en apoyo de esta declaración
    El objeto de la invención estudiada es un procedimiento cuantitativo "ex vivo" para el diagnóstico complementario del grado de desmineralización dental mediante el uso de la espectroscopia Raman, que comprende la cuantificación de las intensidades y áreas de una diversidad de las bandas Stokes del espectro y la definición y cálculo de índices que resultan de dividir las áreas de ciertas bandas de interés. Este procedimiento proporciona una técnica biomédica complementaria para análisis cuantitativo "ex vivo", en restos de tejidos dentales extraídos por prescripción médica, del grado de desmineralización dental y cuya información facilitará la prescripción del tratamiento acorde para su remisión o prevención. El documento D01 describe un procedimiento para la detección temprana de caries dentales se lleva a cabo mediante un método que combina la tomografía de coherencia óptica (OCT) y la espectroscopia Raman para proporcionar información morfológica y especificidad bioquímica para la detección y caracterización de lesiones incipientes de caries que presentan los dientes humanos extraídos. La tomografía OCT demostró una mayor luz de intensidad de retrodispersión en los sitios de lesiones de caries en comparación con el esmalte sano. La espectroscopia Raman se utiliza para caracterizar las caries aún más mediante la detección de alteraciones de desmineralización inducida de la morfología del esmalte de los cristalitos y / o la orientación. La tomografía OTC de imágenes es útil para la detección de caries y determinar los sitios profundidad de la lesión, con la espectroscopia Raman proporcionar la confirmación bioquímica de la caries. El documento D02 reivindica un sistema, método y aparato para determinar la composición de una muestra de material. En una realización, el método se refiere a la recuento de fotones que se dispersa de manera inelástica por la muestra, y para minimizar los efectos de los fotones fluorescentes o fosforescentes. En aún otra realización de la invención, una muestra es iluminada por un pulso repetitivo de luz monocromática, y los fotones resultantes dispersados desde las muestras se recogieron y contaron durante un periodo de integración predeterminado. Por lo tanto las características de las reivindicaciones 1-4 ya son conocidas en el documento D01-D02 y aplicadas en el mismo campo de trabajo. Aunque los patrones establecidos en la reivindicación 1 de la solicitud no aparecen de forma explícita en los documentos citados, es obvio para un experto en la materia deducir este patón de medida a partir de la información divulgada en los documentos mencionados en el informe. Por lo tanto las reivindicaciones 1-4 tendrían novedad (Articulo 6.1 Ley de Patentes 11/86), pero no tienen actividad inventiva a la vista del estado de la técnica conocido (Articulo
  3. 8.1 Ley de Patentes 11/86). Las reivindicaciones 1-4 de la solicitud cumplen el requisito de aplicación industrial en el campo del diagnóstico dental, según el articulo9 de la Ley de Patentes 11/86.
    Informe del Estado de la Técnica Página 4/4
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