ES2563458T3

ES2563458T3 - Compuestos heterocíclicos y sus usos

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Publication number: ES2563458T3
Application number: ES08727163.1T
Authority: ES
Inventors: Yi Chen; Timothy D. Cushing; Jason A. Duquette; Felix Gonzalez Lopez De Turiso; Xiaolin Hao; Xiao He; Brian Lucas; Lawrence R. Mcgee; Andreas Reichelt; Robert M. Rzasa; Jennifer Seganish; Youngsook Shin; Dawei Zhang
Original assignee: Amgen Inc
Current assignee: Amgen Inc
Priority date: 2007-03-23
Filing date: 2008-03-24
Publication date: 2016-03-15
Anticipated expiration: 2028-03-24
Also published as: CA2681136A1; BRPI0809141A2; CR11053A; JP2010522179A; JP2014058526A; AU2008231304B2; IL200867A; JP5819382B2; US20120220586A1; EP2137186A1; US20180105532A1; US20200048265A1; KR20100015795A; JP5527761B2; US8901135B2; AU2008231304A1; WO2008118468A1; HUE028954T2; CN101715453B; US20090137581A1

Abstract

Compuesto que tiene la estructura:**Fórmula** o cualquier sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: X1 es C(R9); X2 es N; Y es N(R11), O o S; Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 ó 3; R1 es un anillo monocíclico de 5, 6 ó 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a través de oxígeno o por enlace directo, que contiene 0, 1, 2, 3 ó 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene más de un O o S, en el que los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos con 0, 1 ó 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo está sustituido con 0 ó 1 sustituyentes R2, y el anillo está sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4; R2 se selecciona de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(>=O)Ra, -OC(>=O)NRaRa, -OC(>=O)N(Ra)S(>=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(>=O)Ra, -N(Ra)C(>=O)ORa, -N(Ra)C(>=O)NRaRa, -N(Ra)C(>=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(>=O)2Ra, -N(Ra)S(>=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; o R2 se selecciona de alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo, heterociclo, -(alquil C1-3)heteroarilo, -(alquil C1-3)heterociclo, -O(alquil C1-3)heteroarilo, -O(alquil C1-3)heterociclo, -NRa(alquil C1-3)heteroarilo, -NRa(alquil C1-3)heterociclo, -(alquil C1-3)fenilo, -O(alquil C1-3)fenilo y -NRa(alquil C1-3)fenilo, todos los cuales están sustituidos con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1-4, Br, Cl, F, I y alquilo C1-4; R3 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(>=O)Ra, -OC(>=O)NRaRa, -OC(>=O)N(Ra)S(>=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(>=O)Ra, -N(Ra)C(>=O)ORa, -N(Ra)C(>=O)NRaRa, -N(Ra)C(>=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(>=O)2Ra, -N(Ra)S(>=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo están sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6; R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4; R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4 o alquilo C1-6 sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, Oalquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; R6 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa; R7 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa; R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo están sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6; R9 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(>=O)Ra, -OC(>=O)NRaRa, -OC(>=O)N(Ra)S(>=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(>=O)Ra, -N(Ra)C(>=O)ORa, -N(Ra)C(>=O)NRaRa, -N(Ra)C(>=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(>=O)2Ra, -N(Ra)S(>=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo están sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(>=O)Ra, -OC(>=O)NRaRa, -OC(>=O)N(Ra)S(>=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(>=O)Ra, -N(Ra)C(>=O)ORa, -N(Ra)C(>=O)NRaRa, -N(Ra)C(>=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(>=O)2Ra, -N(Ra)S(>=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa; o R9 es un anillo monocíclico de 5, 6 ó 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 ó 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene más de un O o S, en el que los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos con 0, 1 ó 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo está sustituido con 0, 1, 2, 3 ó 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(>=O)Ra, -C(>=O)ORa, -C(>=O)NRaRa, -C(>=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(>=O)Ra, -OC(>=O)NRaRa, -OC(>=O)N(Ra)S(>=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(>=O)Ra, -S(>=O)2Ra, -S(>=O)2NRaRa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)Ra, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)ORa, -S(>=O)2N(Ra)C(>=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(>=O)Ra, -N(Ra)C(>=O)ORa, -N(Ra)C(>=O)NRaRa, -N(Ra)C(>=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(>=O)2Ra, -N(Ra)S(>=O)2NRaRa, -NRa-alquil 2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; R11 es H o alquilo C1-4; Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1-4.

Description

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DESCRIPCION

Compuestos heterodclicos y sus usos

La presente invencion se refiere en general a enzimas fosfatidilinositol 3-cinasas (PI3K), y mas particularmente a inhibidores selectivos de la actividad de PI3K y a metodos de uso de tales materiales.

Antecedentes de la invencion

La senalizacion celular por medio de fosfoinosftidos fosforilados en 3’ se ha implicado en una variedad de procesos celulares, por ejemplo, transformacion maligna, senalizacion por factores de crecimiento, inflamacion e inmunidad (vease Rameh et al., J. Biol Chem, 274:8347-8350 (1999) para una revision). La enzima responsable de la generacion de estos productos de senalizacion fosforilados, la fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3-cinasa; PI3K), se identifico originalmente como una actividad asociada con oncoprotemas virales y tirosina cinasas receptoras de factores de crecimiento que fosforila fosfatidilinositol (PI) y sus derivados fosforilados en el hidroxilo 3’ del anillo de inositol (Panayotou et al., Trends Cell Biol 2:358-60 (1992)).

Los niveles de fosfatidilinositol-3,4,5-trifosfato (PIP3), el producto principal de la activacion de PI3-cinasa, aumenta tras el tratamiento de celulas con una variedad de estfmulos. Esto incluye senalizacion a traves de receptores para la mayona de los factores de crecimiento y muchos estfmulos inflamatorios, hormonas, neurotransmisores y antfgenos, y por tanto la activacion de PI3K representa uno, si no el mas prevalente, de los acontecimientos de transduccion de senales asociados con la activacion de receptores de la superficie celular de mairnferos (Cantley, Science 296:1655-1657 (2002); Vanhaesebroeck et al. Annu.Rev.Biochem, 70: 535-602 (2001)). La activacion de PI3-cinasa, por tanto, esta implicada en una amplia gama de respuestas celulares incluyendo crecimiento, migracion, diferenciacion y apoptosis celulares (Parker et al., Current Biology, 5:577-99 (1995); Yao et al., Science, 267:2003-05 (1995)). Aunque las dianas aguas abajo de los lfpidos fosforilados generados tras la activacion de PI3- cinasa no se han caracterizado completamente, se sabe que se activan protemas que contienen dominios de homologfa a pleckstrina (PH) y dominios de dedos FYVE cuando se unen a diversos lfpidos de fosfatidilinositol (Sternmark et al., J Cell Sci, 112:4175-83 (1999); Lemmon et al., Trends Cell Biol, 7:237-42 (1997)). Se han estudiado dos grupos de efectores de PI3K que contienen dominios de PH en el contexto de senalizacion de celulas inmunitarias, miembros de la familia TEC de tirosina cinasas y las serina/treonina cinasas de la familia AGC. Los miembros de la familia Tec que contienen dominios de PH con selectividad aparente por Ptdlns (3,4,5)P3 incluyen Tec, Btk, Itk y Etk. La union de PH a PIP3 es cntica para la actividad tirosina cinasa de los miembros de la familia Tec (Schaeffer y Schwartzberg, Curr.Opin.Immunol. 12: 282-288 (2000)). Los miembros de la familia AGC que estan regulados por Pl3K incluyen la cinasa dependiente de fosfoinosftido (PDK1), AKT (tambien denominada PKB) y determinadas isoformas de protema cinasa C (PKC) y cinasa S6. Hay tres isoformas de AKT y la activacion de AKT esta fuertemente asociada con senales de supervivencia y proliferacion dependientes de PI3K. La activacion de AKT depende de la fosforilacion por PDK1, que tambien tiene un dominio de PH selectivo de 3-fosfoinosttido para reclutarlo a la membrana donde interacciona con AKT. Otros sustratos de PDK1 importantes son PKC y cinasa S6 (Deane y Fruman, Annu.Rev.Immunol. 22_563-598 (2004)). In vitro, algunas isoformas de protema cinasa C (PKC) se activan directamente por PIP3. (Burgering et al., Nature, 376:599-602 (1995)).

En la actualidad, la familia de enzimas PI3-cinasa se ha dividido en tres clases basandose en sus especificidades de sustrato. Las PI3K de clase I pueden fosforilar fosfatidilinositol (PI), fosfatidilinositol-4-fosfato y fosfatidilinositol-4,5- bifosfato (PIP2) para producir fosfatidilinositol-3-fosfato (PIP), fosfatidilinositol-3,4-bifosfato y fosfatidilinositol-3,4,5- trifosfato, respectivamente. Las PI3K de clase II fosforilan PI y fosfatidilinositol-4-fosfato, mientras que las PI3K de clase II solo pueden fosforilar PI.

La purificacion inicial y clonacion molecular de PI3-cinasa revelo que era un heterodfmero que consistfa en las subunidades p85 y p110 (Otsu et al., Cell, 65:91-104 (1991); Hiles et al., Cell, 70:419-29 (1992)). Desde entonces, se han identificado cuatro PI3K de clase I distintas, designadas PI3K a, p, 8 y y, consistiendo cada una en una subunidad catalftica de 110 kDa distinta y una subunidad reguladora. Mas espedficamente, tres de las subunidades catalfticas, es decir, p110a, p110p y p1108, interaccionan cada una con la misma subunidad reguladora, p85; mientras que p110y interacciona con una subunidad reguladora distinta, p101. Tal como se describe a continuacion, los patrones de expresion de cada una de estas PI3K en celulas y tejidos humanos son tambien distintos. Aunque se ha acumulado informacion en abundancia en el pasado reciente sobre las funciones celulares de PI3-cinasas en general, los papeles desempenados por las isoformas individuales no se entienden completamente.

Se ha descrito la clonacion de p110a bovina. Se identifico que esta protema estaba relacionada con la protema de Saccharomyces cerevisiae: Vps34p, una protema implicada en el procesamiento vacuolar de protemas. Se mostro tambien que el producto de p110a recombinante se asociaba con p85a, para producir una actividad de PI3K en celulas cOs-1 transfectadas. Vease Hiles et al., Cell, 70, 419-29 (1992).

La clonacion de una segunda isoforma de p110 humana, designada p110p, se describe en Hu et al., MoI Cell Biol, 13:7677-88 (1993). Se dice que esta isoforma se asocia con p85 en celulas, y que se expresa de manera ubicua, ya que se ha encontrado ARNm de p110p en numerosos tejidos humanos y de raton asf como en celulas endoteliales de vena umbilical humana, celulas T leucemicas humanas Jurkat, celulas de rinon embrionario humano 293,

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fibroblastos 3T3 de raton, celulas HeLa y celulas de carcinoma de vejiga de rata NBT2. Tal amplia expresion sugiere que esta isoforma es ampliamente importante en rutas de senalizacion.

Identificacion de la isoforma p110S de PI3-cinasa se describe en Chantry et al., J Biol Chem, 272:19236-41 (1997). Se observo que la isoforma p110S humana se expresa de una forma restringida a tejido. Se expresa a altos niveles en linfocitos y tejidos linfoides y se ha mostrado que desempena un papel clave en la senalizacion mediada por PI3- cinasa en el sistema inmunitario (Al-Alwan et al. JI 178: 2328-2335 (2007); Okkenhaug et al JI, 177: 5l22-5128 (2006); Lee et al. PNAS, 103: 1289-1294 (2006)). Tambien se ha mostrado que p1105 se expresa a niveles inferiores en celulas de mama, melanocitos y celulas endoteliales (Vogt et al. Virology, 344: 131-138 (2006) y desde entonces se ha implicado que confiere propiedades migratorias selectivas a celulas de cancer de mama (Sawyer et al. Cancer Res. 63:1667-1675 (2003)). Tambien pueden encontrarse detalles referentes a la isoforma p1105 en las patentes estadounidenses n.os 5.858.753; 5.822.910; y 5.985.589. Veanse tambien, Vanhaesebroeck et al., Proc Nat. Acad Sci USA, 94:4330-5 (1997), y la publicacion internacional WO 97/46688.

En cada uno de los subtipos PI3Ka, p y 5, la subunidad p85 actua localizando PI3-cinasa en la membrana plasmatica mediante la interaccion de su dominio SH2 con residuos de tirosina fosforilados (presentes en un contexto de secuencia apropiado) en protemas diana (Rameh et al., Cell, 83:821-30 (1995)). Se han identificado cinco isoformas de p85 (p85a, p85p, p55y, p55a y p50a) codificadas por tres genes. Transcritos alternativos del gen Pik3r1 codifican para las protemas p85a, p55a y p50a (Deane y Fruman, Annu.Rev.Immunol. 22: 563-598 (2004)). p85a se expresa de manera ubicua mientras que p85p se encuentra principalmente en el cerebro y tejidos linfoides (Volinia et al., Oncogene, 7:789-93 (1992)). Parece requerirse la asociacion de la subunidad p85 con las subunidades catalfticas p110a, p o 5 de PI3-cinasa para la actividad catalftica y estabilidad de estas enzimas. Ademas, la union de protemas Ras tambien regula por incremento la actividad PI3-cinasa.

La clonacion de p110y revelo una complejidad todavfa adicional dentro de la familia de enzimas PI3K (Stoyanov et al., Science, 269:690-93 (1995)). La isoforma p110y esta estrechamente relacionada con p110a y p110p (identidad del 45-48% en el dominio catalftico), pero tal como se indica no hace uso de p85 como subunidad de direccionamiento. En su lugar, p110y se une a una subunidad reguladora p101 que tambien se une a las subunidades Py de protemas G heterotrimericas. La subunidad reguladora p101 para PI3Kgamma se clono originalmente en cerdos, y posteriormente se identifico el ortologo humano (Krugmann et al., J Biol Chem, 274:17152-8 (1999)). Se sabe que la interaccion entre la region N-terminal de p101 con la region N-terminal de p110y activa PI3Ky a traves de GPy. Recientemente, se ha identificado un homologo de p101, p84 o p87PIKAP (protema adaptadora de PI3Ky de 87 kDa) que se une a p110y (Voigt et al. JBC, 281: 9977-9986 (2006), Suire et al. Curr. Biol. 15: 566-570 (2005)). p87PIKAP es homologa a p101 en zonas que se unen a p110y y GPy y tambien media en la activacion de p110y aguas abajo de receptores acoplados a protemas G. A diferencia de p101, p87PIKAP se expresa altamente en el corazon y puede ser crucial para la funcion cardiaca de PI3Ky.

Se describe un polipeptido de PI3K activo de manera constitutiva en la publicacion internacional WO 96/25488. Esta publicacion da a conocer la preparacion de una protema de fusion quimerica en la que se fusiona un fragmento de 102 residuos de p85 conocido como region inter-SH2 (iSH2) a traves de una region de ligador con el extremo N- terminal de p110 murina. El dominio iSH2 de p85 aparentemente puede activar la actividad de PI3K de una manera comparable a p85 intacta (Klippel et al., Mol Cell Biol, 14:2675-85 (1994)).

Por tanto, las PI3-cinasas pueden definirse por su identidad de aminoacidos o por su actividad. Los miembros adicionales de esta familia genica en crecimiento incluyen ftpido y protema cinasas relacionadas de manera mas distante incluyendo Vps34 TOR1 y TOR2 de Saccharomyces cerevisiae (y sus homologos de mairftferos tales como FRAP y mTOR), el producto genico de ataxia telangiectasia (ATR) y la subunidad catalftica de protema cinasa dependiente de ADN (DNA-PK). Vease generalmente, Hunter, Cell, 83:1-4 (1995).

PI3-cinasa tambien esta implicada en varios aspectos de la activacion de leucocitos. Se ha mostrado que la actividad de PI3-cinasa asociada a p85 se asocia ffsicamente con el dominio citoplasmatico de CD28, que es una molecula coestimuladora importante para la activacion de celulas T en respuesta a un antfgeno (Pages et al., Nature, 369:327-29 (1994); Rudd, Immunity, 4:527-34 (1996)). La activacion de celulas T a traves de CD28 reduce el umbral para la activacion por el antfgeno y aumenta la magnitud y duracion de la respuesta proliferativa. Estos efectos estan vinculados con aumentos en la transcripcion de varios genes incluyendo interleucina-2 (IL2), un factor de crecimiento de celulas T importante (Fraser et al., Science, 251:313-16 (1991)). La mutacion de CD28 de manera que ya no pueda interaccionar con PI3-cinasa conduce a una incapacidad para iniciar la produccion de IL2, lo que sugiere un papel crftico para PI3-cinasa en la activacion de celulas T.

Inhibidores espedficos frente a miembros individuales de una familia de enzimas proporcionan herramientas inestimables para descifrar las funciones de cada enzima. Dos compuestos, LY294002 y wortmanina, se han usado ampliamente como inhibidores de PI3-cinasa. Sin embargo, estos compuestos son inhibidores de PI3K no espedficos, ya que no distinguen entre los cuatro miembros de PI3-cinasas de clase I. Por ejemplo, los valores de CI 50 de la wortmanina frente a cada una de las diversas clases de PI3-cinasas de clase I estan en el intervalo de 110 nM. De manera similar, los valores de CI50 para LY294002 frente a cada una de estas PI3-cinasas son de aproximadamente 1 |iM (Fruman et al., Ann Rev Biochem, 67:481-507 (1998)). Por tanto, la utilidad de estos

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compuestos en el estudio de los papeles de PI3-cinasas de clase I individuales es limitada.

Basandose en estudios que usan wortmanina, hay pruebas de que la funcion de PI3-cinasa se requiere tambien para algunos aspectos de la senalizacion de leucocitos a traves de receptores acoplados a protemas G (Thelen et al., Proc Natl Acad Sci USA, 91: 4960-64 (1994)). Ademas, se ha mostrado que la wortmanina y LY294002 bloquean la migracion de neutrofilos y la liberacion de superoxido. Sin embargo, puesto que estos compuestos no distinguen entre las diversas isoformas de PI3K, sigue estando poco claro a partir de estos estudios que isoforma o isoformas de PI3K particulares estan implicadas en estos fenomenos y que funciones realizan las diferentes enzimas PI3K de clase I en tejidos tanto normales como enfermos en general. La expresion conjunta de varias isoformas de PI3K en la mayona de los tejidos ha confundido los esfuerzos por segregar las actividades de cada enzima hasta hace poco.

La separacion de las actividades de las diversas isozimas de PI3K ha avanzado recientemente con el desarrollo de ratones manipulados geneticamente que permitieron el estudio de ratones con activacion de cinasa inactiva y deficientes en isoforma espedfica y el desarrollo de inhibidores mas selectivos para algunas de las diferentes isoformas. Se han generado ratones deficientes en P110a y p110p y ambos mueren en la fase embrionaria y puede obtenerse poca informacion de estos ratones referente a la expresion y funcion de p110 alfa y beta (Bi et al. Mamm. Genome, 13:169-172 (2002); Bi et al. J. Biol. Chem. 274:10963-10968 (1999)). Mas recientemente, se generaron ratones con activacion de cinasa p110a inactiva con una unica mutacion puntual en el motivo DFG del bolsillo de union a ATP (p110aD933A) que altera la actividad cinasa pero preserva la expresion de la cinasa p110a mutante. En contraposicion a los ratones deficientes, el enfoque de activacion preserva la estequiometna del complejo de senalizacion, las funciones de armazon e imita enfoques de molecula pequena de manera mas realista que los ratones deficientes. De manera similar a los ratones deficientes en p110a, los ratones homocigotos para p110aD933A mueren en la fase embrionaria. Sin embargo, los ratones heterocigotos son viables y fertiles pero presentan una senalizacion gravemente alterada por medio de protemas de sustrato de receptor de insulina (IRS), mediadores clave de la accion de insulina, factor de crecimiento similar a la insulina-1 y leptinas. La capacidad de respuesta defectuosa a estas hormonas conduce a hiperinsulinemia, intolerancia a la glucosa, hiperfagia, aumento de la adiposidad y crecimiento global reducido en heterocigotos (Foukas, et al. Nature, 441: 366-370 (2006)). Estos estudios revelaron un papel definido, no redundante para p110a como producto intermedio en la senalizacion por IGF-1, insulina y leptina que no sustituyen otras isoformas. Se tendra que esperar a la descripcion de los ratones con activacion de cinasa p110p inactiva para entender adicionalmente la funcion de esta isoforma (se han producido ratones pero aun no se ha publicado; Vanhaesebroeck).

Se han generado ratones tanto con activacion de cinasa inactiva como deficientes en p110y y muestran globalmente fenotipos similares y leves con defectos primarios en la migracion de celulas del sistema inmunitario innato y un defecto en el desarrollo tfmico de celulas T (Li et al. Science, 287: 1046-1049 (2000), Sasaki et al. Science, 287: 1040-1046 (2000), Patrucco et al. Cell, 118: 375-387 (2004)).

De manera similar a p110y, se han producido ratones con activacion de cinasa inactiva y deficientes en PI3K delta y son viables con fenotipos leves y similares. Los ratones con activacion de p1108D910A mutantes demostraron un papel importante de delta en el desarrollo y la funcion de celulas B, con celulas CD5+ B1 y celulas B de zona marginal casi indetectables, y senalizacion mediante el receptor de antfgenos de celulas T y B (Clayton et al. J. Exp. Med. 196:753-763 (2002); Okkenhaug et al. Science, 297: 1031-1034 (2002)). Los ratones p110SD910A se han estudiado extensamente y se ha dilucidado el papel diverso que desempena delta en el sistema inmunitario. Las respuestas inmunitarias independientes de celulas T y dependientes de celulas T estan gravemente atenuadas en p110SD910A y la secrecion de las citocinas TH1 (INF-y) y TH2 (IL-4, IL-5) esta alterada (Okkenhaug et al. J.Immunol. 177: 5122-5128 (2006)). Se ha descrito tambien recientemente un paciente humano con una mutacion en p1105. Un nino taiwanes con una inmunodeficiencia de celulas B primaria y una gamma-hipoglobulinemia de etiologfa previamente desconocida presentaba una sustitucion de un unico par de bases, m.3256G a A en el codon 1021 en el exon 24 de p1105. Esta mutacion dio como resultado una sustitucion de aminoacidos de cambio de sentido (E a K) en el codon 1021, que se ubica en el dominio catalftico altamente conservado de la protema p1105. El paciente no tiene otras mutaciones identificadas y su fenotipo concuerda con la deficiencia en p1105 en ratones hasta donde se ha estudiado. (Jou et al. Int. J. Immunogenet. 33: 361-369 (2006)).

Se han desarrollado compuestos de molecula pequena selectivos de isoforma con exito variable para todas las isoformas de PI3 cinasa de clase I (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut, 321: 1-8 (2007)). Son deseables inhibidores para alfa porque se han identificado mutaciones en p110a en varios tumores solidos; por ejemplo, una mutacion de amplificacion de alfa esta asociada con el 50% de los canceres de ovario, de cuello uterino, de pulmon y de mama y se ha descrito una mutacion de activacion en mas del 50% de los canceres de intestino y el 25% de los canceres de mama (Hennessy et al. Nature Reviews, 4: 988-1004 (2005)). Yamanouchi ha desarrollado un compuesto, YM-024, que inhibe alfa y delta de manera equipotente y es 8 y 28 veces selectivo con respecto a beta y gamma respectivamente (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321: 1-8 (2007)).

P110p esta implicada en la formacion de trombos (Jackson et al. Nature Med. 11: 507-514 (2005)) y se pensaron despues inhibidores de molecula pequena espedficos para esta isoforma para la indicacion que implica trastornos de la coagulacion (TGX-221: 0,007 uM sobre beta; 14 veces selectivo con respecto a delta, y mas de 500 veces selectivo con respecto a gamma y alfa) (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321:1-8 (2007)).

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Estan desarrollandose compuestos selectivos para pi 10y por varios grupos como agentes inmunosupresores para enfermedad autoinmunitaria (Rueckle et al. Nature Reviews, 5: 903-918 (2006)). De interes, se ha mostrado que AS 605240 es eficaz en un modelo de raton de artritis reumatoide (Camps et al. Nature Medicine, 11: 936-943 2005)) y para retrasar la aparicion de la enfermedad en un modelo de lupus eritematoso sistemico (Barber et al. Nature Medicine, 11: 933-935 (205)).

Tambien se han descrito recientemente inhibidores selectivos de delta. Los compuestos mas selectivos incluyen los inhibidores de quinazolinona-purina (PIK39 e IC87114). IC87114 inhibe p110S en el intervalo nanomolar alto (triple dfgito) y tiene una selectividad de mas de 100 veces frente a p110a, es 52 veces selectivo frente a p110p pero carece de selectividad frente a p110y (aproximadamente 8 veces). No muestra actividad frente a ninguna de las protema cinasas sometidas a prueba (Knight et al. Cell, 125: 733-747 (2006)). Usando compuestos selectivos para delta o ratones manipulados geneticamente (p1108D910A) se ha mostrado que ademas de desempenar un papel clave en la activacion de celulas T y B, delta tambien esta parcialmente implicada en la migracion de neutrofilos y el estallido respiratorio de neutrofilos sensibilizados y conduce a un bloqueo parcial de la desgranulacion de mastocitos mediada por antfgeno-IgE (Condliffe et al. Blood, 106: 1432-1440 (2005); Ali et al. Nature, 431: 1007-1011 (2002)). Por tanto, p1105 se esta revelando como un mediador importante de muchas respuestas inflamatorias clave que tambien se sabe que participan en estados inflamatorios aberrantes, incluyendo pero sin limitarse a enfermedad autoinmunitaria y alergia. Para apoyar esta nocion, hay un conjunto creciente de datos de validacion de la diana p1105 derivados de estudios usando tanto herramientas geneticas como agentes farmacologicos. Por tanto, usando el compuesto selectivo para delta IC87114 y los ratones p1105D910A, Ali et al. (Nature, 431: 1007-1011 (2002)) han demostrado que delta desempena un papel cntico en un modelo murino de enfermedad alergica. En ausencia de delta funcional, la anafilaxia cutanea pasiva (PCA) se reduce significativamente y puede atribuirse a una reduccion en la activacion y desgranulacion de mastocitos inducida por alergenos-IgE. Ademas, se ha mostrado que la inhibicion de delta con IC87114 mejora significativamente la inflamacion y la enfermedad en un modelo murino de asma usando inflamacion de las vfas respiratorias inducida por ovoalbumina (Lee et al. FASEB, 20: 455-465 (2006). Estos datos utilizando el compuesto se corroboraron en ratones mutantes p1105D910A usando el mismo modelo de inflamacion alergica de las vfas respiratorias por un grupo diferente (Nashed et al. Eur. J. Immunol. 37:416-424 (2007)).

El documento US 2005/1053989 da a conocer composiciones para modificar la actividad cinasa que implican una formula estructural diferente de la de los compuestos de la presente invencion.

El documento WO 2006/114180 da a conocer inhibidores de cinasas de una formula estructural diferente de la de la presente invencion.

El documento WO 2005/117909 da a conocer moduladores de cinasas diferentes de los de la presente invencion. Show et al. da a conocer la smtesis de purinas 2,6,9-sustituidas.

Existe una necesidad de una caracterizacion adicional de la funcion de PI3K5 en entornos inflamatorios y autoinmunitarios. Ademas, la comprension de PI3K5 requiere una elaboracion adicional de las interacciones estructurales de p1105, tanto con su subunidad reguladora como con otras protemas en la celula. Sigue habiendo tambien una necesidad de inhibidores mas potentes y selectivos o espedficos de PI3K delta, con el fin de evitar la posible toxicologfa asociada con la actividad de isozimas p110 alfa (senalizacion de insulina) y beta (activacion de plaquetas). En particular, son deseables inhibidores selectivos o espedficos de PI3K5 para explorar el papel de esta isozima adicionalmente y para el desarrollo de productos farmaceuticos superiores para modular la actividad de la isozima.

Sumario

La presente invencion comprende una nueva clase de compuestos que tienen la formula general

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que son utiles para inhibir la actividad biologica de PI3K8 humana. Otro aspecto de la invencion es proporcionar compuestos que inhiben PI3K8 selectivamente mientras que tienen una potencia inhibidora relativamente baja frente a las otras isoformas de PI3K. Otro aspecto de la invencion es proporcionar metodos de caracterizacion de la funcion de PI3K8 humana. Otro aspecto de la invencion es proporcionar metodos de modulacion selectiva de la actividad de PI3K8 humana, y promoviendo de ese modo el tratamiento medico de enfermedades mediadas por disfuncion de PI3K8. Otros aspectos y ventajas de la invencion resultaran facilmente evidentes para el experto con experiencia habitual en la tecnica.

Son realizaciones de la invencion:

1. Compuesto que tiene la estructura:

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o cualquier sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que:

X1 es C(R9);

X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de oxfgeno o por enlace directo, que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4;

R2 se selecciona de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

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-N(Ra)C(=NRa)NRaRa o R2 se selecciona de alquilo Ci-a.

N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(

O)2NRaRa,

-NRa-alquil C2-a-NRaRa y -NRa-alquil C2-a-ORa;

fenilo, bencilo, heteroarilo, heterociclo, -(alquil Ci-3)heteroarilo, -(alquil Ci-3)heterociclo, -O(alquil C1-3)heteroarilo, -O(alquil C1-3)heterociclo, -NRa(alquil C1-3)heteroarilo, -NRa(alquil Ci-3)heterociclo, -(alquil Ci-3)fenilo, -O(alquil Ci-3)fenilo y -NRa(alquil Ci-3)fenilo, todos los cuales estan sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1-4, Br, Cl, F, I y alquilo

C1-4;

R3 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-a-NRaRa, -O-alquil C2-a-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-a-NRaRa, -NRa-alquil C2-a-ORa, alquilo Ci-a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo Ci-a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo Ci-a, O-alquilo C1-a, Br, Cl, F, I y alquilo C1-a;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-a, haloalquilo C1-4 o alquilo C1-a sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O- alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-a sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

Ra se selecciona de H, halo, alquilo C1-a, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R7 se selecciona de H, halo, alquilo C1-a, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-a, Br, Cl, F, I, ORa, -NRaRa, alquilo C1-a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C%a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-a, O-alquilo C1-a, Br, Cl, F, I y alquilo C1-a;

R9 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-a-NRaRa, -O-alquil C2-a-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-a-NRaRa, -NRa-alquil C2-a-ORa, alquilo C1-a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C%a, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-a-NRaRa, -O-alquil C2-a-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

-S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa,

-N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra,

-N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-a-NRaRa, -NRa-alquil C2-a-ORa; o R9 es un anillo monodclico de 5, a o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-a-NRaRa, -O-alquil C2-a-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil 2-a-NRaRa y -NRa-alquil C2-a-ORa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-a, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-a sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1-4.

Compuesto segun la realizacion 1, que tiene la estructura:

imagen3

3.

4.

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Compuesto segun la realizacion 1, que tiene la estructura:

imagen4

Compuesto segun la realizacion 1, que tiene la estructura:

imagen5

5. Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R3 es F, Cl o Br; y n es O.

6. Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R1 es fenilo sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el fenilo

esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y

10 haloalquilo C1.4.

7. Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de ox^geno o por enlace directo, que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta

15 sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes

seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH- alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1.4.

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8. Compuesto segun la reivindicacion 1, que tiene la estructura:

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o cualquier sal farmaceuticamente aceptable de cualquiera de a) a c).

9. Compuesto segun la reivindicacion 8, como base libre.

10. Composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.

11. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios oculares, trastornos de vejiga inestable o inflamatoria, afecciones cutaneas con componentes inflamatorias, estados inflamatorios cronicos, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistemico (LES), miastenia grave, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, purpura trombocitopenica idiopatica, esclerosis multiple, smdrome de Sjoegren y anemia hemolttica autoinmunitaria, estados alergicos e hipersensibilidad.

12. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de canceres, que estan mediados, son dependientes de o estan asociados con la actividad de p1105.

13. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de cancer de colon, glioblastoma, carcinoma endometrial, cancer hepatocelular, cancer de pulmon, melanoma, carcinoma de celulas renales, carcinoma de tiroides, linfoma celular, trastornos linfoproliferativos, cancer de pulmon de celulas pequenas, carcinoma de pulmon de celulas escamosas, glioma, cancer de mama, cancer de prostata, cancer de ovarios, cancer de cuello uterino, leucemia, leucemia mieloide aguda, smdrome mielodisplasico, enfermedades mieloproliferativas, leucemia mieloide cronica, leucemia linfoblastica aguda de celulas T, leucemia linfoblastica aguda de celulas B, linfoma no Hodgkin, linfoma de celulas B, tumores solidos.

Descripcion detallada

Un aspecto de la presente invencion se refiere a compuestos que tienen la estructura

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o cualquier sal farmaceuticamente aceptable de los mismos, en la que:

X1 es C(R9)

X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de ox^geno o por enlace directo, que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4;

R2 se selecciona de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; o R2 se selecciona de alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo, heterociclo, -(alquil C1-3)heteroarilo, -(alquil C1-3)heterociclo, -O(alquil C1-3)heteroarilo, -O(alquil C1-3)heterociclo, -NRa(alquil C1-3)heteroarilo, -NRa(alquil C1-3)heterociclo, -(alquil C1-3)fenilo, -O(alquil C1-3)fenilo y -NRa(alquil C1-3)fenilo, todos los cuales estan sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1-4, Br, Cl, F, I y alquilo C1-4;

R3 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1.6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1.4, O-haloalquilo C1.4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 o haloalquilo C1.4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4 o alquilo C1-6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1-3, O- alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

R6 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

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R7 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, -NRaRa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo Ci-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R9 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo Ci-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo Ci-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa,

-N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa; o R9 es un anillo monodclico de 5, 6 0 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 0 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 0 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 0 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil 2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa;

R10 es H, alquilo C1.3, haloalquilo C1.3, ciano, nitro, CO2Ra, C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, S(=O)Rb, S(=O)2Rb o

S(=O)2NRaRa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1.4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

Otro aspecto de la presente invenci6n se refiere a compuestos que tienen la estructura:

imagen9

o cualquier sal farmaceuticamente aceptable de los mismos, en la que: X1 es C(R9);

X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

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Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; o R2 se selecciona de alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo, heterociclo, -(alquil C1-3)heteroarilo, -(alquil C1-3)heterociclo, -O(alquil C1-3)heteroarilo, -O(alquil C1-3)heterociclo, -NRa(alquil C1-3)heteroarilo, -NRa(alquil C1-3)heterociclo, -(alquil C1-3)fenilo, -O(alquil C1-3)fenilo y -NRa(alquil C1-3)fenilo, todos los cuales estan sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1.4, Br, Cl, F, I y alquilo C1-4;

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil CM-ORa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1.4, O-haloalquilo C1.4, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 o haloalquilo C1.4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4 o alquilo C1.6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, O- alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4: o ambos grupos R5 forman juntos un

espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

R7 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R9 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

-N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa; o R9 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo

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estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

S(=O)2NRaRa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1.4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

Otro aspecto de la presente invencion se refiere a compuestos que tienen la estructura:

imagen10

o cualquier sal farmaceuticamente aceptable de los mismos, en la que:

X1 es C(R9);

X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

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R3 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo Ci-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1.4, O-haloalquilo C1.4, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 o haloalquilo C1-4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4 o alquilo C1.6 sustituido con 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1.3, O- alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

S(=O)2NRaRa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, -O-alquilo C1.4, -NH2, -NH-alquilo C1.4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

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X1 es C(R9); X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4 o alquilo C1.6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, O- alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

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-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo Ci-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa,

S(=O)2NRaRa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Un aspecto de la invenci6n se refiere a compuestos que tienen la estructura:

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X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N;

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n es 0, 1, 2 o 3;

R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O- haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4;

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; o R2 se selecciona de alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, todos los cuales estan sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1-4, Br, Cl, F, I y alquilo C1-4;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1.4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 o haloalquilo C1.4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4 o alquilo C1.6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1-3, O- alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

-N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa; o R9 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

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R10 es H, alquilo C1-3, haloalquilo C1-3, ciano, nitro, CO2Ra, C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, S(=O)Rb, S(=O)2Rb o

S(=O)2NRaRa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1.4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, X1 es C(R9) y X2 es N.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, X1 es C(R9) y X2 es C(R10).

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es fenilo sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el fenilo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 y haloalquilo C1.4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es fenilo.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es fenilo sustituido con R2, y el fenilo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 se selecciona de 2-metilfenilo, 2-clorofenilo, 2-trifluorometilfenilo, 2-fluorofenilo y 2-metoxifenilo.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de oxfgeno o por enlace directo, que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es un anillo monodclico de 5 o 6 miembros insaturado que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O- alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 y haloalquilo C1-4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es un anillo monodclico de 5 o 6 miembros insaturado que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O- alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 es un anillo monodclico de 5 o 6 miembros insaturado que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R1 se selecciona de piridilo y pirimidinilo.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R3 se selecciona de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6- NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de

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haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R3 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R3 se selecciona de F, Cl, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4 o alquilo C1-6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH- alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, O-alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R5 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, un R5 es S- metilo, el otro es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, al menos un R5 es halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4 o alquilo C1-6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1.3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R6 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R6 es F, Cl, ciano

o nitro.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R7 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R7 es F, Cl, ciano

o nitro.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R8 se selecciona de H, CF3, alquilo C1-3, Br, Cl y F.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R8 se selecciona de H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R8 se selecciona de CF3, alquilo C1-3, Br, Cl y F.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R9 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R9 se selecciona de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

-S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6- NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

-S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6- NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R9 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6- ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa.

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En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R10 es H.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R10 es ciano, nitro, CO2Ra, C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, S(=O)Rb, S(=O)2Rb o S(=O)2NRaRa.

En otra realizacion, conjuntamente con cualquiera de las realizaciones anteriores o a continuacion, R11 es H.

Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de estados o trastornos mediados por PI3K.

En determinadas realizaciones, el estado o trastorno mediado por PI3K se selecciona de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias. En otras realizaciones, el estado o trastorno mediado por PI3K se selecciona de enfermedades cardiovasculares, aterosclerosis, hipertension, trombosis venosa profunda, accidente cerebrovascular, infarto de miocardio, angina inestable, tromboembolia, embolia pulmonar, enfermedades trombolfticas, isquemia arterial aguda, oclusiones tromboticas perifericas y arteriopatfa coronaria. Todavfa en otras realizaciones, el estado o trastorno mediado por PI3K se selecciona de cancer, cancer de colon, glioblastoma, carcinoma endometrial, cancer hepatocelular, cancer de pulmon, melanoma, carcinoma de celulas renales, carcinoma de tiroides, linfoma celular, trastornos linfoproliferativos, cancer de pulmon de celulas pequenas, carcinoma de pulmon de celulas escamosas, glioma, cancer de mama, cancer de prostata, cancer de ovarios, cancer de cuello uterino y leucemia. Aun en otra realizacion, el estado o trastorno mediado por PI3K se selecciona de diabetes tipo II. Todavfa en otras realizaciones, el estado o trastorno mediado por PI3K se selecciona de enfermedades respiratorias, bronquitis, asma y enfermedad pulmonar obstructiva cronica. En determinadas realizaciones, el sujeto es un ser humano.

Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias o enfermedades autoinmunitarias.

Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios oculares, trastornos de vejiga inestable o inflamatoria, afecciones cutaneas con componentes inflamatorias, estados inflamatorios cronicos, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistemico (LES), miastenia grave, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, purpura trombocitopenica idiopatica, esclerosis multiple, smdrome de Sjoegren y anemia hemolttica autoinmunitaria, estados alergicos e hipersensibilidad.

Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de canceres que estan mediados, son dependientes de o estan asociados con actividad de p110S.

Otro aspecto de la invencion se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de canceres que se seleccionan de leucemia mieloide aguda, smdrome mielodisplasico, enfermedades mieloproliferativas, leucemia mieloide cronica, leucemia linfoblastica aguda de celulas T, leucemia linfoblastica aguda de celulas B, linfoma no Hodgkin, linfoma de celulas B, tumores solidos y cancer de mama.

Otro aspecto de la invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun cualquiera de las realizaciones anteriores y un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.

Otro aspecto de la invencion se refiere al uso de un compuesto segun cualquiera de las realizaciones anteriores para preparar un medicamento.

Otro aspecto de la invencion se refiere al uso de un compuesto segun cualquiera de las realizaciones anteriores en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias.

Los compuestos de esta invencion pueden tener en general varios centros asimetricos y se representan normalmente en forma de mezclas racemicas. Esta invencion pretende abarcar mezclas racemicas, mezclas parcialmente racemicas y enantiomeros y diastereomeros separados.

A menos que se especifique lo contrario, las siguientes definiciones se aplican a terminos encontrados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones:

“Alquilo Ca.p” significa un grupo alquilo que comprende un mmimo de a y un maximo de p atomos de carbono en una relacion ramificada, dclica o lineal o cualquier combinacion de las tres, en el que a y p representan numeros enteros. Los grupos alquilo descritos en esta seccion tambien pueden contener uno o dos dobles o triples enlaces. Los ejemplos de alquilo C1-6 incluyen los siguientes:

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“Grupo benzo”, solo o en combinacion, significa el radical divalente C4H4=, una representacion del cual es -CH=CH- CH=CH-, que cuando se une de manera vecinal a otro anillo forma un anillo similar a benceno, por ejemplo tetrahidronaftileno, indol y similares.

5 Los terminos “oxo” y “tioxo” representan los grupos =O (como en carbonilo) y =S (como en tiocarbonilo), respectivamente.

“Halo” o “halogeno” significa un atomo de halogeno seleccionado de F, Cl, Br y I.

“Haloalquilo Cv-w” significa un grupo alquilo, tal como se describio anteriormente, en el que cualquier numero (al menos uno) de los atomos de hidrogeno unidos a la cadena de alquilo se reemplazan por F, Cl, Br o I.

10 “Heterociclo” significa un anillo que comprende al menos un atomo de carbono y al menos otro atomo seleccionado de N, O y S. Los ejemplos de heterociclos que pueden encontrarse en las reivindicaciones incluyen, pero no se limitan a, los siguientes:

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“Atomos de nitrogeno disponibles” son los atomos de nitrogeno que forman parte de un heterociclo y estan unidos por dos enlaces sencillos (por ejemplo piperidina), dejando un enlace externo disponible para la sustitucion, por ejemplo, con H o CH3.

“Sal farmaceuticamente aceptable” significa una sal preparada por medios convencionales, y se conocen bien por 20 los expertos en la tecnica. Las “sales farmacologicamente aceptables” incluyen sales basicas de acidos organicos e inorganicos, incluyendo pero sin limitarse a acido clortndrico, acido bromtndrico, acido sulfurico, acido fosforico, acido metanosulfonico, acido etanosulfonico, acido malico, acido acetico, acido oxalico, acido tartarico, acido citrico,

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acido lactico, acido fumarico, acido succrnico, acido maleico, acido salidlico, acido benzoico, acido fenilacetico, acido mandelico y similares. Cuando los compuestos de la invencion incluyen una funcion acida tal como un grupo carboxilo, entonces los expertos en la tecnica conocen bien los pares de cationes farmaceuticamente aceptables adecuados para el grupo carboxilo e incluyen cationes alcalinos, alcalinoterreos, de amonio, de amonio cuaternario y similares. Para ejemplos adicionales de “sales farmacologicamente aceptables”, vease a continuacion y Berge et al., J. Pharm. Sci. 66:1 (1977).

“Saturado, parcialmente saturado o insaturado” incluye sustituyentes saturados con hidrogenos, sustituyentes completamente insaturados con hidrogenos y sustituyentes parcialmente saturados con hidrogenos.

“Grupo saliente” se refiere generalmente a grupos facilmente desplazables por un nucleofilo, tal como un nucleofilo de amina, de tiol o de alcohol. Tales grupos salientes se conocen bien en la tecnica. Los ejemplos de tales grupos salientes incluyen, pero no se limitan a, N-hidroxisuccinimida, N-hidroxibenzotriazol, haluros, triflatos, tosilatos y similares. Se indican grupos salientes preferidos en el presente documento cuando sea apropiado. “Grupo protector” se refiere generalmente a grupos bien conocidos en la tecnica que se usan para impedir que grupos reactivos seleccionados, tales como carboxilo, amino, hidroxilo, mercapto y similares, experimenten reacciones no deseadas, tales como nucleofilas, electrofilas, de oxidacion, de reduccion y similares. Se indican grupos protectores preferidos en el presente documento cuando sea apropiado. Los ejemplos de grupos protectores de amino incluyen, pero no se limitan a, aralquilo, aralquilo sustituido, cicloalquenilalquilo y cicloalquenilalquilo sustituido, alilo, alilo sustituido, acilo, alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, sililo y similares. Los ejemplos de aralquilo incluyen, pero no se limitan a, bencilo, orto-metilbencilo, tritilo y benzhidrilo, que pueden estar sustituidos opcionalmente con halogeno, alquilo, alcoxilo, hidroxilo, nitro, acilamino, acilo y similares, y sales, tales como sales de fosfonio y amonio. Los ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo, indanilo, antracenilo, 9-(9-fenilfluorenilo), fenantrenilo, durenilo y similares. Los ejemplos de radicales cicloalquenilalquilo o cicloalquilenilalquilo sustituido, que tienen preferiblemente 6-10 atomos de carbono, incluyen, pero no se limitan a, ciclohexenilmetilo y similares. Los grupos acilo, alcoxicarbonilo y aralcoxicarbonilo adecuados incluyen benciloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, iso-butoxicarbonilo, benzoflo, benzoflo sustituido, butirilo, acetilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, ftaloflo y similares. Puede usarse una mezcla de grupos protectores para proteger el mismo grupo amino, de manera que un grupo amino primario puede protegerse mediante tanto un grupo aralquilo como un grupo aralcoxicarbonilo. Los grupos protectores de amino tambien pueden formar un anillo heterodclico con el nitrogeno al que estan unidos, por ejemplo, 1, 2-bis(metilen)benceno, ftalimidilo, succinimidilo, maleimidilo y similares y en el que estos grupos heterodclicos pueden incluir ademas anillos de arilo y cicloalquilo adjuntos. Ademas, los grupos heterodclicos pueden estar mono, di o trisustituidos, tales como nitroftalimidilo. Tambien pueden protegerse grupos amino frente a reacciones no deseadas, tales como oxidacion, a traves de la formacion de una sal de adicion, tal como clorhidrato, de acido toluenosulfonico, acido trifluoroacetico y similares. Muchos de estos grupos protectores de amino tambien son adecuados para proteger grupos carboxilo, hidroxilo y mercapto. Por ejemplo, grupos aralquilo. Grupos alquilo tambien son grupos adecuados para proteger grupos hidroxilo y mercapto, tales como terc-butilo.

Grupos protectores de sililo son atomos de silicio opcionalmente sustituidos con uno o mas grupos alquilo, arilo y aralquilo. Los grupos protectores de sililo adecuados incluyen, pero no se limitan a, trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, terc-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1,2-bis(dimetilsilil)benceno, 1,2-bis(dimetilsilil)etano y difenilmetilsililo. La sililacion de un grupo amino proporciona grupos mono o disililamino. La sililacion de compuestos de aminoalcohol puede conducir a un derivado de N,N,O-trisililo. La eliminacion de la funcion sililo de una funcion silil eter se logra facilmente mediante tratamiento con, por ejemplo, un reactivo de hidroxido de metal o fluoruro de amonio, o bien como una etapa de reaccion diferenciada o bien in situ durante una reaccion con el grupo alcohol. Agentes de sililacion adecuados son, por ejemplo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de terc-butil-dimetilsililo, cloruro de fenildimetilsililo, cloruro de difenilmetilsililo o sus productos de combinacion con imidazol o DMF. Los expertos en la tecnica conocen bien metodos para la sililacion de aminas y la eliminacion de grupos protectores de sililo. Los expertos en la tecnica de la qmmica organica tambien conocen bien metodos de preparacion de estos derivados de amina a partir de los correspondientes aminoacidos, amidas de aminoacido o esteres de aminoacido incluyendo qmmica de aminoacido/ester de aminoacido o de aminoalcohol.

Los grupos protectores se eliminan en condiciones que no afectaran a la parte restante de la molecula. Estos

metodos se conocen bien en la tecnica e incluyen hidrolisis acida e hidrogenolisis. Un metodo preferido implica la

eliminacion de un grupo protector, tal como la eliminacion de un grupo benciloxicarbonilo mediante hidrogenolisis utilizando paladio sobre carbono en un sistema de disolventes adecuado tal como un alcohol, acido acetico, y similares o mezclas de los mismos. Un grupo protector de t-butoxicarbonilo puede eliminarse utilizando un acido

organico o inorganico, tal como HCl o acido trifluoroacetico, en un sistema de disolventes adecuado, tal como

dioxano o cloruro de metileno. La sal de amino resultante puede neutralizarse facilmente para producir la amina libre. Puede eliminarse un grupo protector de carboxilo, tal como metilo, etilo, bencilo, terc-butilo, 4-metoxifenilmetilo y similares, en condiciones de hidrolisis e hidrogenolisis bien conocidas por los expertos en la tecnica.

Debe indicarse que los compuestos de la invencion pueden contener grupos que pueden existir en formas tautomericas, tales como grupos amidina y guanidina dclicos y adclicos y grupos heteroarilo sustituidos con heteroatomos (Y’ = O, S, NR) que se ilustran en los siguientes ejemplos:

5

10

15

20

25

30

35

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y aunque se nombre, describa, presente y/o reivindique una forma en el presente documento, se pretende que todas las formas tautomericas esten incluidas de manera inherente en tal nombre, descripcion, presentacion y/o reivindicacion.

Tambien se contemplan por esta invencion profarmacos de los compuestos de esta invencion. Un profarmaco es un compuesto activo o inactivo que se modifica qmmicamente a traves de accion fisiologica in vivo, tal como hidrolisis, metabolismo y similares, para dar un compuesto de esta invencion tras la administracion del profarmaco a un paciente. Los expertos en la tecnica conocen bien la idoneidad y las tecnicas implicadas en la preparacion y el uso de profarmacos. Para un comentario general de profarmacos que implican esteres, vease Svensson y Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Los ejemplos de un anion carboxilato enmascarado incluyen una variedad de esteres, tales como alquilicos (por ejemplo, metilico, etilico), cicloalquilicos (por ejemplo, ciclohexflico), aralqmlicos (por ejemplo, bendlico, p-metoxibendlico) y

alquilcarboniloxialqmlicos (por ejemplo, pivaloiloximetilico). Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos con arilcarboniloximetilo que se escinden por esterasas in vivo liberando el farmaco libre y formaldeddo (Bundgaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). Ademas, se han enmascarado farmacos que contienen un grupo NH acido, tal como imidazol, imida, indol y similares, con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Se han enmascarado grupos hidroxilo como esteres y eteres. El documento EP 039.051 (Sloan y Little, 11/4/81) da a conocer profarmacos de acido hidroxamico de base de Mannich, su preparacion y uso.

La memoria descriptiva y las reivindicaciones contienen listas de especies que usan la expresion “seleccionado de... y...” y “es... o...” (denominados algunas veces grupos de Markush). Cuando se usa esta expresion en la solicitud, a menos que se establezca lo contrario pretende incluir el grupo en su totalidad, o cualquier miembro individual del mismo, o cualquier subgrupo del mismo. El uso de esta expresion es meramente para fines de abreviatura y no pretende limitar de ningun modo la eliminacion de subgrupos o elementos individuales segun sea necesario.

Parte experimental

Se usan las siguientes abreviaturas:

ac. -: acuoso

BINAP -: 2,2’-bis(difenilfosfino)-1, 1 ’-binaftilo

conc. -: concentrado

DCM
DCM

DMF -: DMF

Et2O -: dietil eter

EtOAc -: acetato de etilo

EtOH -: alcohol etflico

h -: hora(s)

min -: minutos

5

10

15

20

25

30

MeOH -: alcohol mefflico

t.a.: temperatura ambiente

sat. -: saturado

THF -: tetrahidrofurano

General

Pueden obtenerse reactivos y disolventes usados a continuacion a partir de fuentes comerciales. Se registraron espectros de 1H-RMN en un espectrometro de RMN Bruker 400 MHz y 500 MHz. Se tabulan picos significativos en el orden: multiplicidad (s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuartete; m, multiplete; s a, singlete ancho), constante(s) de acoplamiento en hercios (Hz) y numero de protones. Se notifican los resultados de espectrometna de masas como la razon de la masa con respecto a la carga, seguida por la abundancia relativa de cada ion (entre parentesis), se realizo un analisis de espectrometna de masas de ionizacion por electropulverizacion (ESI) en un espectrometro de masas de electropulverizacion CL/EMD de Agilent serie 1100. Pudieron analizarse todos los compuestos en el modo ESI positivo usando acetonitrilo:agua con acido formico al 0,1% como disolvente de suministro. Se llevo a cabo HPLC anafftica de fase inversa usando un instrumento Agilent serie 1200 en una columna Eclipse XDB-C18 de 5 |im (4,6 x 150 mm) de Agilent como fase estacionaria y eluyendo con acetonitrilo:H2O con TFA al 0,1%. Se llevo a cabo HPLC semi-preparativa de fase inversa usando un instrumento Agilent serie 1100 en una columna C18 de 10 |im (250 x 21,20 mm) Gemini™ de Phenomenex como fase estacionaria y eluyendo con acetonitrilo:H2O con TFA al 0,1%.

Procedimiento A

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Se calento una mezcla de 2-cloro-quinolin-3-carbaldel'ffdo (1 eq.), acido arilboronico (1,1 eq.),

tetrakis(trifenilfosfina)paladio (5% molar) y carbonato de sodio (disol. ac. 2 M, 5,0 eq.) en CHaCN-agua (3:1, 0,1 M) a 100°C bajo N2 durante varias horas. Se repartio la mezcla entre EtOAc y H2O, se separo la fase organica y se extrajo la fase acuosa con EtOAc. Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron a presion reducida y se purificaron mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice usando un gradiente de EtOAc del 0% al 25% en hexano para proporcionar 2-arilquinolin-3-carbaldel'ffdos.

Procedimiento B

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Se anadio borohidruro de sodio solido (1,5 eq.) a una disolucion de 2-arilquinolin-3-carbaldel'ffdo (1 eq.) en THF (0,5 M) a 0°C y se agito la mezcla a 0°C durante 2 h. Se extinguio la reaccion mediante adicion de agua. Se extrajo la fase acuosa con EtOAc (3 veces). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de sflice usando el 50% de EtOAc en hexano para proporcionar (2-arilquinolin-3-il)metanoles.

Procedimiento C

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Se trato (2-arilquinolin-3-il) metanol (1 eq.) en CHCI3 (0,25 M) con SOCI2 (5 eq.) a t.a. durante 2 h. Se eliminaron los disolventes a presion reducida y se repartio el residuo entre EtOAc y disolucion ac. saturada de NaHCO3. Se separo la fase organica, se lavo con agua y salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Se 5 purifico el producto en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM usando un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano para proporcionar 3-(clorometil)-2-arilquinolinas.

Procedimiento D

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A una disolucion de 3-(clorometil)-2-arilquinolina (1 eq.) en DMSO (0,25 M) se le anadio NaN3 (3 eq.) a t.a. y se agito 10 la mezcla durante 4 h a t.a. Se diluyo la mezcla con agua, se extrajo con EtOAc (2 veces) y se lavaron las fases organicas combinadas con agua (2 veces), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se disolvio el residuo en MeOH y se trato con Pd-C al 10% (5% en peso) y entonces se agito la mezcla bajo un globo de H2 durante la noche. Se filtro la mezcla a traves de un lecho de Celite™ seguido por eliminacion de disolventes para dar (2-arilquinolin-3-il)metanaminas.

15 Procedimiento E

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A una disolucion con agitacion de 3-(clorometil)-2-arilquinolina (1 eq.) en 16 ml de DMF se le anadio NaN3 (2 eq.) a t.a. Se agito la mezcla a t.a. durante 1 h. Se repartio la mezcla entre EtOAc y H2O. Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar 3-(azidometil)-2-arilquinolinas. Se siguio con el 20 producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa. A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-2- arilquinolina en THF-H2O (4:1, 0,21 M) se le anadio gota a gota PMe3 (disolucion 1,0 M en THF, 1,2 eq.) a t.a. y se agito la mezcla a t.a. durante 1 h. A la mezcla se le anadio EtOAc y se extrajo la mezcla con HCl 1 N (2 veces). Se neutralizaron los extractos combinados con bicarbonato de sodio solido, y se extrajeron con EtOAc (2 veces). Se secaron los extractos organicos combinados sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar 25 un jarabe oscuro. Se purifico el producto en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para proporcionar (2-arilquinolin-3-il)metanaminas.

Procedimiento F

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30 Se agito una mezcla de 2-arilquinolin-3-carbaldel'ndo (1 eq.), DCE (0,2 M) y PMBNH2 (1,5 eq.) a t.a. Tras 1 h, a la

mezcla se le anadio NaBH(OAc)3 (3 eq.) y se agito la mezcla a 50°C durante 2 h. A la mezcla se le anadio NaHCO3 ac. saturado y se agito la mezcla durante 15 min. Se separo la fase organica y se extrajo la fase acuosa con CH2Cl2 (2 veces). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna 5 RediSep™ usado un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano para proporcionar N-(4-metoxibencil)(2- arilquinolin-3-il)metanaminas.

Procedimiento G

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Se agito una mezcla de N-(4-metoxibencil)(2-arilquinolin-3-il)metanamina (1 eq.) y nitrato de amonio-cerio (IV) 10 (3,5 eq.) en CH3CN-H2O (2:1, 0,22 M) a t.a. durante 24 h. A la mezcla se le anadio HCl 0,5 M (12 eq.) y se lavo la

mezcla con CH2Cl2 (3 veces) para eliminar el 4-metoxibenzaldehido producido. Entonces se extrajo la fraction organica con HCl 0,5 M (2 veces). Se basifico la fase acuosa acida combinada hasta pH 9,0 con NaOH 2 N. Se recogio el precipitado resultante mediante filtration. Se purifico el producto en bruto mediante cromatograffa columna en una columna Redi-SepTM usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como 15 eluyente para proporcionar (2-arilquinolin-3-il)metanaminas.

Procedimiento H

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Se trato una mezcla de (2-arilquinolin-3-il)metanamina (1 eq.) en EtOH (0,16 M) con iPr2Net (1,2 eq.) seguido por 6- cloropurina (1 eq.) a 80°C durante 8 h. Se concentro la mezcla de reaction y se purifico mediante cromatograffa en 20 columna en una columna Redi-Sep™ usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para proporcionar N-((2-arilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-aminas.

Procedimiento K

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A una mezcla de 2-fenilquinolin-3-carbaldehido (1,0 eq) en THF (0,28 M) a 0°C se le anadio gota a gota una 25 disolucion de un reactivo de Grignard (3 M, 2 eq.) y se agito la reaccion durante la noche antes de extinguirse con disolucion saturada de NH4CL Se extrajo la mezcla con EtOAc (2 x 10 ml) y se secaron las fases organicas combinadas (Na2SO4) y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (eluyente: EtOAc/hexano, 1/1) para proporcionar 1-(2-fenilquinolin-3-il) alcoholes.

Procedimiento L

5

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25

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Se agito una mezcla de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (2,0 eq.) y 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (4,0 eq.) en DMSO anhidro (0,69 M) a t.a. durante 5 h y luego se anadio a traves de una canula a una mezcla de 1-(2- fenilquinolin-3-M)alcohol (1 eq.) e hidruro de sodio, una dispersion al 60% en aceite mineral (3 eq.) en DMSO (0,5 M) que se habfa agitado durante 30 min a t.a. y 30 min a 50°C antes de la adicion. Se agito la mezcla a t.a. durante 6 h antes de la adicion de agua, y se extrajo la mezcla con EtOAc (4x). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (eluyente: CH2Ch/MeOH, 50/1) para proporcionar el producto deseado.

Ejemplo 1: Preparacion de N-((8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-carbaldel'Hdo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2-cloro-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (2,1 g, 10 mmol), acido o- tolilboronico (1,5 g, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (575 mg, 0,05 eq.) y carbonato de sodio (5,5 g, 5 eq.) en MeCN (75 ml) y agua (25 ml). Tras purificacion, se obtuvo 8-metil-2-o-tolilquinolin-3-carbaldel'ndo como un solido blanco. 1H-RMN (CDCla) 9,96 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 7,88 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,55 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36-7,46 (m, 4H), 2,84 (s, 3H), 8 2,30 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 262 (M + 1).

(8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanol

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Preparado segun el procedimiento B usando 8-metil-2-o-tolilquinolin-3-carbaldehido (1,28 g, 4,9 mmol) y NaBH4 solido (278 mg, 1,5 eq.) en THF (10 ml). Tras purificacion, se obtuvo (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il) metanol como un solido blanco.

3-(Clorometil)-8-metil-2-o-tolilquinolina

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Preparado segun el procedimiento C usando (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)-metanol (670 mg, 2,5 mmol) y SOCh (0,91 ml, 5 eq.) en CHCh (10 ml). Tras aislamiento, se continuo con el aceite resultante en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanamina

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Preparado segun el procedimiento D usando 3-(clorometil)-8-metil-2-o-tolil-quinolina (667 mg, 2,4 mmol) en DMSO (10 ml) se le anadio NaN3 (500 mg, 3 eq.). Tras purificacion, se obtuvo (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanamina como un aceite de color amarillo palido.

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Preparado segun el procedimiento H. Se trato una mezcla de (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanamina (80 mg, 0,31 mmol) en EtOH (2 ml) con iPr2NEt (65 |il, 1,2 eq.) seguido por 6-cloropurina (46,4 mg, 0,3 mmol) a 80°C durante 8 h. Se concentro la mezcla de reaccion y se purifico mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (eluyente: DCM/MeOH, 25/1) para proporcionar un solido blanco [CI50 de PI3K8 = 84 nM]. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 8,24 (s, 1H), 8,19 (s, a, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,81 (d, J - 8,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,39- 7,42 (m, 4H), 4,62(s, a, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,16 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 381 (M + 1).

Ejemplo 2: Preparacion de N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)-metil)-9H-purin-6-amina

2,8-Dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo

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Se agito una disolucion de LDA (14,8 ml, 1,5 M en ciclohexeno, 22,2 mmol, 1,1 eq.) en THF (30 ml) a -78°C a medida que se anadfa gota a gota una disolucion de 2,8-dicloroquinolina (4,0 g, 20,2 mmol) en THF (15 ml). Se agito la mezcla durante dos horas, momento en el cual se le anadio lentamente una disolucion de formiato de etilo (6,5 ml, 80,8 mmol, 4 eq.) en THF (10 ml), y se continuo agitando la mezcla a -78°C durante cuatro horas. Se anadio THF humedo (1 ml de H2O en 5 ml d THF) para extinguir la reaccion y se calento hasta temperatura ambiente. Tras reparto entre Et2O y agua, se extrajo adicionalmente la fase acuosa con Et2O, y se secaron las fases organicas combinadas sobre MgSO4, se filtraron y se condensaron a presion reducida. Se cromatografio el residuo en una columna de silice usando un gradiente del 0-50% de EtOAc en hexano. Se obtuvo 2,3-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo como un solido amarillo. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,25 (1 H, s), 8,93 (1 H, s), 8,14 (1 H, d, J=8,6 Hz), 8,03 (1 H, d, J=9,0 Hz), 7,55 - 7,64 (1 H, t, J=8,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 226,0 y 227,9 (M+1)

8-Cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (1,70 g, 7,5 mmol), acido 2- clorofenilboronico (1,29 g, 8,25 mmol, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,430 g, 0,375 mmol, 0,05 eq.) y carbonato de sodio (3,97 g, 37,5 mmol, 5 eq.) en acetonitrilo (57 ml) y agua (19 ml). Tras purificacion, se obtuvo 8- cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo como un solido amarillo. Yl-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,25 (1 H, s), 8,93 (1 H, s), 8,14 (1 H, d, J=8,6 Hz), 8,03 (1 H, d, J=9,0 Hz), 7,55 - 7,64 (1 H, t, J=8,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 302,0 y 304,0 (M+1)

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(8-Cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metanol

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Preparado segun el procedimiento B usando 2-(2-dorofenN)-8-doroquinoNn-3-carbaldel'ndo (1,18 g, 3,9 mmol) y borohidruro de sodio (0,222 g, 5,86 mmol, 1,5 eq.) en THF (20 ml). Se obtuvo (2-(2-dorofenN)-8-doroquinoNn-3- il)metanol como un solido amarillo. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,56 (1 H, s), 8,10 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,94 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,63 (2 H, t, J=7,8 Hz), 7,44 - 7,59 (3 H, m), 5,54 (1 H, t, J=5,3 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 304,0 y 306,1 (M+1)

8-Cloro-3-(clorometil)-2-(2-clorofenil)quinolina

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Preparado segun el procedimiento C usando (2-(2-clorofenil)-8-cloroquinolin-3-il)metanol (0,675 g, 2,22 mmol) y SoCl2 (0,81 ml). Se obtuvo 8-doro-3-(doro-metN)-2-(2-dorofenN)quinolina como una espuma de color amarillo. 1H- RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,53 (1 H, s), 7,88 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,81 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,48 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,42 - 7,46 (1 H, m), 7,27 - 7,41 (3 H, m), 4,63 (1 H, d, J=9,8 Hz), 4,33 - 4,45 (1 H, m). Espectro de masas (ESI) m/e = 322,0 y 324,0 (M+1)

(8-Cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metanamina

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Preparado segun el procedimiento E usando 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2-cloro-fenil)quinolina (0,685 g, 2,12 mmol) y azida de sodio (1,10 g, 17 mmol, 8 eq.) en DMF (10 ml). Se sometio el producto intermedio resultante a trimetilfosfina (1,0 M) en THF (2,5 ml, 2,5 mmol, 1,2 eq.) en THF (8 ml) y agua (2 ml). Se obtuvo (8-cloro-2-(2- clorofenil)quinolin-3-il)metanamina como un solido de color amarillo claro. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (1 H, s), 8,05 (1 H, dd, J=8,6, 1,2 Hz), 8,00 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,63 - 7,73 (2 H, m), 7,47 - 7,62 (3 H, m), 3,90 (1 H, s), 3,75 (1 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 303,1 y 305,0 (M+1)

N-((8-Cloro-2-(2-clorofenil)quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metanamina (0,100 g, 0,33 mmol), 6-cloropurina (0,051 g, 0,33 mmol, 1 eq.) y DIEA (0,07 ml, 0,4 mmol, 1,2 eq.) en etanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro- 2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 68 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,37 (1 H, s), 8,11 (1 H, s), 8,08 (1 H, s), 8,00 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,42 - 7,67 (5 H, m). Espectro de masas (ESI) m/e = 421,0 y 423,1 (M+1)

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Ejemplo 3: Preparacion de 2-cloro-N-((8-doro-2-(2-dorofenil)-quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(2-dorofenil)quinolin-3-il)metanamina (0,100 g, 0,33 mmol), 2,6-dicloropurina (0,062 g, 0,33 mmol, 1 eq.) y DIEA (0,07 ml, 0,4 mmol, 1,2 eq.) en etanol (5 ml). Se obtuvo 2-cloro- N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 615 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,44 (1 H, s), 8,15 (1 H, s), 8,04 (1 H, dd, J=8,5, 1,2 Hz), 7,96 (1 H, d, J=6,7 Hz), 7,60 (1 H, d, J=7,3 Hz), 7,61 (1 H, 1, J=7,9 Hz), 7,54 (1 H, d, J=6,7 Hz), 7,50 (1 H, t, J=6,7 Hz), 7,44 (1 H, 1, J=7,3 Hz), 4,62 (2 H, d, J=26,9 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 455,0 y 457,0 (M+1)

Ejemplo 4: Preparacion de N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)-metil)-2-metoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metanamina (0,100 g, 0,33 mmol), 4-cloro-2-metoxi-pirrolo[2,3-d]pirimidina (0,061 g, 0,33 mmol, 1 eq.) y DIEA (0,07 ml, 0,4 mmol, 1,2 eq.) en etanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metil)-2-metoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina [CI50 de PI3K8 = 5420 nM], tras purificacion, como un solido de color tostado. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,28 (1 H, s), 8,37 (1 H, s), 8,03 (1 H, dd, J=8,4, 1,0 Hz), 7,94 - 7,99 (1 H, m), 7,94 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,40 - 7,65 (5 H, m), 6,88 (1 H, dd, J=3,3, 2,2 Hz), 6,47 (1 H, s), 4,59 (2 H, s), 3,67 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 450,1 y 452,0 (M+1)

Ejemplo 5: Preparacion de 3-(1-(9H-purin-6-iloxi)etil)-8-metil-2-o-tolilquinolina

1-(8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-il)etanol

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Preparado segun el procedimiento K. A una mezcla de 8-metil-2-o-tolilquinolin-3-carbaldel'ndo (434 mg, 1,7 mmol) en THF (6 ml) a 0°C se le anadio gota a gota una disolucion de MeMgCl (3 M, 2 eq., 1,1 ml) y se agito la reaccion durante la noche antes de extinguirse con disolucion saturada de NH4CL Se extrajo la mezcla con EtOAc (2 x 10 ml) y se secaron las fases organicas combinadas (Na2SO4) y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (eluyente: EtOAc/hexano, 1/1) para proporcionar 1-(8-metil-2-

o-tolilquinolin-3-il)etanol como un solido blanco. 1H-RMN (CDCla) 8 8,34 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,39 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19- 7,27 (m, 4H), 2,69 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,30 (m, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 278 (M + 1).

3-(1-(9H-Purin-6-iloxi)etil)-8-metil-2-o-tolilquinolina

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Preparado segun el procedimiento K usando 1 -(8-metil-2-o-toMlquinolin-3-il)-etanol, 3-( 1 -(9H-purin-6-iloxi)etil)-8-metil-

2-o-tolilquinolina [CI50 de PI3K8 = 12 nM]. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 13,3 (s, 1H), 8,60 (s, a, 1H), 8,36 (s, a, 1H), 7,88 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J - 7,2 Hz, 1H), 7,02-7,21 (m, 4H), 6,28-6,41 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,74 (s, a, 3H, mayoritario), 1,62 (s, a, 3H, minoritario). Espectro de masas (ESI) m/e = 396 (M + 1).

Ejemplo 6: Preparacion de N-(1-(2-(2-clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)-etil)-9H-purin-6-amina

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Preparado mediante los procedimientos K, C y E: 1-(2-(2-clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)etanamina. 1H-RMN (CDCI3) 8 8,47 (s, mayoritario, 1H), 8,38 (s, minoritario, 1H), 7,40-7,74 (m, 7H), 4,19-4,21 (m, 1H), 2,78 (s, 3H), 1,49 (d, J = 6,3 Hz, minoritario, 3H), 1,22 (d, J = 6,7 Hz, mayoritario, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 297 (M + 1).

N-(1-(2-(2-Clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H [CI50 de PI3K8 = 31 nM]. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 10,21-10,32 (m, 1H), 8,40-8,78 (m, 2H), 7,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,19-7,56 (m, 6H), 5,46-5,58 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 1,66 (d, J = 6,6 Hz, 3H). Espectro de masas (ESl) m/e = 415 (M + 1).

Ejemplo 7: Preparacion de 3-((9H-purin-6-iloxi)metil)-2-(2-metoxi-fenil)-8-metilquinolina 2-(2-Metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2-cloro-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,206 g, 1 mmol), acido 2- metoxifenilboronico (0,167 g, 1,1 mmol, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,058 g, 0,05 mmol, 0,05 eq.) y carbonato de sodio (0,530 g, 5 mmol, 5 eq.) en acetonitrilo (7,5 ml) y agua (2,5 ml). Tras purificacion, se obtuvo 2-(2- metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,250 g, 90%) como un solido blanco. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,86 (1 H, s), 8,88 (1 H, s), 8,13 (1 H, d, J=8,1 Hz), 7,85 (1 H, d, 3=7,1 Hz), 7,56 - 7,74 (3 H, m), 7,22 - 7,30 (2 H, m), 3,78 (3 H, s), 2,80 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 278,0 (M+1)

(2-(2-Metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanoI

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Preparado segun el procedimiento B usando 2-(2-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,250 g, 0,9 mmol) y borohidruro de sodio (0,0378 g, 1,35 mmol, 1,5 eq.), en THF (5 ml). Se obtuvo (2-(2-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)- metanol como un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,41 (1 H, s), 7,92 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,64 (1 5 H, d, J=7,0 Hz), 7,50 - 7,59 (2 H, m), 7,33 (1 H, dd, J=7,4, 1,6 Hz), 7,22 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,16 (1 H, t, J=7,2 Hz), 5,37 (1 H, t, J=5,5 Hz), 3,79 (3 H, s), 2,72 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 280,1 (M+1)

3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-2-(2-metoxifenil)-8-metilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L modificado. Se agitaron 6-cloropurina (0,077 g, 0,5 mmol, 2 eq.) y DABCO 10 (0,112 g, 1 mmol, 4 eq.) en DMSO (0,7 ml) a temperatura ambiente durante 5 h. En un matraz independiente, se le

anadio hidruro de sodio (0,040 g, 1 mmol, 4 eq.) en porciones a una disolucion con agitacion de (2-(2-metoxifenil)-8- metil-quinolin-3-il)metanol (0,070 g, 0,25 mmol) en DMSO (0,5 ml) y tras 30 minutos, se le anadio la sal de purina- DABCO a esta mezcla. Se agito la reaccion a temperatura ambiente durante 18 h. Se aislo 3-((9H-purin-6- iloxi)metil)-2-(2-metoxifenil)-8-metilquinolina [CI50 de PI3K8 = 38 nM] como un solido blanco, tras purificacion, en una 15 columna de sflice. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d8) 8 ppm 13,41 (1 H, s), 8,51 (1 H, s), 8,39 (1 H, s), 7,87 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,65 (1 H, d, J=7,0 Hz), 7,49 - 7,56 (1 H, m), 7,34 - 7,46 (2 H, m), 7,12 (1 H, d, J=8,2 Hz), 7,03 (1 H, t, J=7,2 Hz), 5,58 (2 H, s), 3,72 (3 H, s), 2,69 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 398,2 (M+1)

Ejemplo 8: Preparacion de 3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-2-(bifenil)-8-metilquinolina:

2-(Bifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2-cloro-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,206 g, 1 mmol), acido 2- fenilbencenoboronico (0,218 g, 1,1 mmol, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,058 g, 0,05 mmol, 0,05 eq.) y carbonato de sodio (0,530 g, 5 mmol, 5 eq.) en acetonitrilo (7,5 ml) y agua (2,5 ml). Tras purificacion, se obtuvo 2-(2- bifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,312 g, 97%) como un solido blanco. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 25 9,71 (1 H, s), 8,66 (1 H, s), 8,01 (1 H, d, J=8,1 Hz), 7,79 (1 H, d, J=6,8 Hz), 7,65 - 7,72 (2 H, m), 7,53 - 7,65 (3 H, m),

7,11 - 7,19 (3 H, m), 7,00 - 7,09 (2 H, m), 2,66 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 324,1 (M+1)

(2-(Bifenil)-8-metilquinoIin-3-il)metanol

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Preparado segun el procedimiento B usando 2-(bifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (0,312 g, 0,96 mmol) y 30 borohidruro de sodio (0,055 g, 1,44 mmol, 1,5 eq.) en THF (5 ml). Se obtuvo (2-(bifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanol

como un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,19 (1 H, s), 7,77 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,55 - 7,62 (1 H, m), 7,48 - 7,55 (3 H, m), 7,44 (2 H, d, J=8,2 Hz), 7,11 (5 H, s), 5,24 (1 H, t, J=5,3 Hz), 2,57 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 326,2 (M+1)

3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-2-(bifenil)-8-metilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L modificado: 6-Cloropurina (0,077 g, 0,5 mmol, 2 eq.) y DABCO (0,112 g, 1 mmol, 4 eq.) Se agitaron en DMSO (0,7 ml) a temperatura ambiente durante 5 h. En un matraz independiente, se anadio en porciones hidruro de sodio (0,040 g, 1 mmol, 4 eq.) a una disolucion con agitacion de (2-(bifenil)-8- metilquinolin-3-il)metanol (0,081 g, 0,25 mmol) en DMSO (0,5 ml) y tras 30 minutos, se anadio a esta mezcla la sal

10 de purina-DABCO. Se agito la reaccion a temperatura ambiente 18 h. Se aislo 3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-2-(bifenil)-8- metilquinolina [CI50 de PI3K8 = 22 nM] como un solido blanco, tras purificacion, en una columna de silice. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 13,39 (1 H, s), 8,37 (2 H, d, J=9,8 Hz), 7,77 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,54 - 7,63 (2 H, m), 7,37 - 7,54 (4 H, m), 7,14 - 7,21 (2 H, m), 7,07 - 7,14 (3 H, m), 5,51 (1 H, d, J=12,5 Hz), 5,29 (1 H, d, J=9,4 Hz), 2,54 (3 H, s). Espectro de masas (ESl) m/e = 444,2 (M+1)

15 Ejemplo 9: Preparacion de 3-(1-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)but-3-enil)-2-(2-clorofenil)-8-metilquinolina

1-(2-(2-Clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)but-3-en-1-ol

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Preparado segun el procedimiento K: A una disolucion de 2-(2-clorofenil)-8-metilqumolin-3-carbaldemdo (1,4 g, 5 mmol) en THF (20 ml) a 0°C bajo N2 se le anadio gota a gota una disolucion de bromuro de alilmagnesio (1 M, 1,1 20 eq., 5,5 ml) en THF y se agito la mezcla a 0°C durante 2 h. Se repartio la mezcla entre EtOAc (50 ml) y H2O (30 ml), se separaron las fases, y se extrajo la fase acuosa con EtOAc (2 x 30 ml). Se secaron las fases organicas combinadas (Na2SO4), se concentraron y se purificaron mediante cromatograffa ultrarrapida (EtOAc a del 0% al 25%/hexano) para proporcionar 1-(2-(2-clorofenil)-8-metil-quinolin-3-il)but-3-en-1-ol como un aceite incoloro. 1H-RMN (CDCla) 8 8,45 (s, mayoritario, 1H), 8,40 (s, minoritario, 1H), 7,77 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,43-7,60 (m, 6H), 5,56-5,73 25 (m, 1H), 4,96-5,17 (m, 2H), 4,80-4,84 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,34-2,59 (m, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 324

(M + 1).

3-(1-(7H-Pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)but-3-enil)-2-(2-clorofenil)-8-metilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L. Se agito una mezcla de 4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (474 mg, 3,1 mmol) 30 y 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (694 mg, 6,2 mmol) en DMSO anhidro (4,5 ml) a t.a. durante 5 h y luego se anadio mediante una canula a una mezcla de 1-(2-(2-clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)but-3-en-1-ol (500 mg, 1,5 mmol) e hidruro de sodio, dispersion al 60% en aceite mineral (180 mg, 4,5 mmol) en DMSO (3 ml) que se habfa agitado durante 30 min a t.a. y 30 min a 50°C antes de la adicion. Se agito la mezcla a t.a. durante 6 h antes de la adicion de

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agua (10 ml) y se extrajo la mezcla con EtOAc (4 x 20 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de s^lice (eluyente: DCM/MeOH, 50/1) para proporcionar 3-(1-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4- iloxi)but-3-enil)-2-(2-clorofenil)-8-metil-quinolina [CI50 de PI3K8 = 28 nM] como un solido blanco. 1H-RMN (CDCh) 8 10,20 (s, a, 1H), 8,22 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,15-7,64 (m, 8H), 6,59-6,62 (m, 1H), 6,34-6,37 (m, 1H), 5,64-5,79 (m, 1H), 4,93-5,01 (m, 2H), 2,74 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 2,70 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 441 (M + 1).

Ejemplo 10: 3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-2-(2-clorofenil)-8-metilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L. Se agito una mezcla de 6-cloropurina (75 mg, 0,49 mmol) y 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (109 mg, 0,97 mmol) en DMSO (0,5 ml) a t.a. durante 5 h y luego se anadio mediante una canula a una mezcla de (2-(2-clorofenil)-8-metilquinolin-3-il)metanol (69 mg, 0,24 mmol) e hidruro de sodio, dispersion al 60% en aceite mineral (39 mg, 0,97 mmol) en DMSO (0,5 ml) que se habfa agitado a t.a. durante 15 min antes de la adicion. Se agito la mezcla a t.a. durante 3,5 h, se enfrio hasta 0°C, y se le anadio H2O (5 ml) cuidadosamente. Se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 10 ml) y se secaron las fases organicas combinadas (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se disolvio el aceite de color amarillo resultante en CH2Cl2, se evaporo sobre gel de silice (desactivada con NH3 2 M en MeOH) y se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (Biotage Si 25+M) eluyendo con NH3 2 M en MeOH/CH2Cl2 (5%) para proporcionar un solido blanco [CI50 de PI3K8 = 25 nM]. EM (ESI+) m/z = 402,0 (M+1).

Ejemplo 11: 3-((9H-Purin-6-iloxi)metil)-8-metil-2-o-tolilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L Se agito una mezcla de 6-cloropurina (110 mg, 0,71 mmol) y 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (160 mg, 1,43 mmol) en DMSO (0,7 ml) a t.a. durante 4 h y luego se anadio mediante una canula a una mezcla de (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanol (94 mg, 0,36 mmol) e hidruro de sodio, dispersion al 60% en aceite mineral (57 mg, 1,43 mmol) en DMSO (1 ml) que se habfa agitado a t.a. durante 15 min antes de la adicion. Se agito la mezcla a t.a. durante 3,5 h, se neutralizo mediante la adicion de acido acetico glacial, se diluyo con salmuera (15 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Se secaron las fases organicas combinadas (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se disolvio el aceite de color amarillo resultante en CH2Ch, se evaporo sobre gel de sflice (desactivada con NH3 2 M en MeOH) y se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (Biotage Si 25+M) eluyendo con NH3 2 M en MeOH/CH2Ch (5%) para proporcionar un solido blanco [CI50 de PI3K8= 27 nM]. EM (APCI+) m/z = 282,3 (M+1).

Ejemplo 12: 3-((9H-Purin-6-iltio)metil)-8-metil-2-o-tolilquinolina

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Se le anadio tetrabromuro de carbono solido (429 mg, 1,29 mmol) a una mezcla de (8-metil-2-o-tolilquinolin-3- il)metanol (227 mg, 0,86 mmol) y trifenilfosfina (339 mg, 1,29 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) a 0°C, y se agito la mezcla a 0°C durante 0,5 h. Se concentro la mezcla en bruto a presion reducida, se evaporo sobre gel de s^lice, y se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (Biotage Si 25+M) eluyendo con EtOAc/hexano (a del 0% al 10%) para proporcionar un solido blanquecino; se uso sin purificacion adicional, EM (ESI+) m/z = 326,0 (M). Se le anadio una disolucion acuosa 2,0 M de hidroxido de sodio (0,86 ml, 1,72 mmol) a una mezcla de 3-(bromometil)-8-metil-2-o- tolilquinolina (140 mg, 0,43 mmol) y 6-mercaptopurina monohidratada (146 mg, 0,86 mmol) en THF (1,6 ml) y se calento la mezcla bifasica a reflujo durante 5 h. Se enfrio la mezcla de reaccion hasta 0°C, se neutralizo mediante la adicion de HCl acuoso 1 N, se diluyo con salmuera (10 ml) y se extrajo con THF (3 x 15 ml). Se secaron las fases organicas combinadas (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se disolvio el solido de color amarillo resultante en THF/DMSO, se evaporo sobre gel de s^lice, y se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (Biotage Si 25+M) eluyendo con acetona/hexano (a del 20% al 50%). Se recristalizo el solido blanquecino resultante en THF/MeOH para proporcionar un solido blanco [CI50 de PI3K8 = 889 nM]. EM (ESI+) m/z = 398,1 (M+1).

Ejemplo 13: N6-((8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-y l)metil)-9H-purin-2,6-diamina.

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Se calento una mezcla de (8-metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metanamina (40 mg, 0,15 mmol), 2-amino-6-cloropurina (52 mg, 0,30 mmol) y trietilamina (42 |il, 0,30 mmol) en i-PrOH (0,8 ml) en un reactor de microondas a 150°C cuatro veces durante 20 min. Se repartio la mezcla entre NaHCO3 acuoso saturado (15 ml) y EtOAc (15 ml), se separaron las fases, y se extrajo la fase acuosa con EtOAc (2 x 15 ml). Se secaron las fases organicas combinadas (MgSO4) y se concentraron a presion reducida. Se disolvio el aceite de color amarillo resultante en CH2Cl2, se evaporo sobre gel de s^lice, y se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (Biotage Si 25+M) eluyendo con MeOH/CH2Ch (a del 5% al 10%) para proporcionar un solido blanco. Se purifico el compuesto adicionalmente mediante HPLC de fase inversa (Gilson) eluyendo con H2O/MeCN/TFA para proporcionar un solido blanco [CI50 de PI3K8 - 82 nM]. EM (ESI+) m/z = 396,2 (M+1).

Ejemplo 14: Preparacion de 3-(1-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)but-3-enil)-2-(2-clorofenil)-8-metilquinoIina

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Preparado segun el procedimiento L [CI50 de PI3K8 = 56 nM]. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 12,0 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,90 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,54 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,22-7,37 (m, 5H), 6,50 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 5,45 (s, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,11 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 381 (M + 1).

Ejemplo 15: Preparacion de 3-((7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)metil)-8-metil-2-fenilquinolina

(8-Metil-2-fenilquinolin-3-il)metanol

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Preparado segun los procedimientos A y B. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 8,45 (s, 1H), 7,86-7,88 (d, 1H), 7,71-7,72 (m, 2H),

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7,61-7,62 (d, 1H), 7,49-7,53 (m, 4H), 5,47- 5,48 (t, 1H), 4,64-4,65 (d, J=5 Hz, 2H), 2,72 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e- 250 (M+1).

3-((7H-Pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)metil)-8-metil-2-fenilquinolina

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Preparado segun el procedimiento L [CI50 de PI3K8 = 68 nM]. 1H-RMN (DMSO-d6)- 8 8,65 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,897,01 (d, 1H), 7,74-7,75 (m, 2H), 7,67-7,68 (d, 1H), 7,47-7,55 (m, 5H), 7,37-7,38 (d, J=5 Hz, 1H), 6,53-6,54 (d, J=5 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 2,74 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e= 367 (M+1).

Ejemplo 16: Preparacion de N-((8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)-quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina: 8-Metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2-cloro-8-metilquinolin-3-carbaldel'Hdo (2,0 g, 9,73 mmol), acido 2- (trifluorometilfenilboronico (2,032 g, 10,7 mmol, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (562 mg, 5% mmol) y carbonato de sodio (5,15 g, 48,6 mol, 5 eq.) en MeCN (75 ml) y agua (25 ml). Tras purificacion, se obtuvo 8-metil-2- (2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo como un solido blanco. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 9,93 (1 H, s), 9,04 (1 H, s), 8,13 (1 H, d, J=8,1 Hz), 7,93 (1 H, d, J=7,3 Hz), 7,85 (1 H, d, J=7,1 Hz), 7,72 - 7,82 (2 H, m), 7,64 - 7,71 (1 H, m), 7,59 (1 H, d, J=7,3 Hz), 2,67 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 316,1 (M + 1).

N-(4-Metoxibencil)(8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)-metanamina

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Preparado segun el procedimiento F usando 8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)-quinolin-3-carbaldel'ndo (1 g, 3,17 mmol), DCE (16 ml), PMBNH2 (0,62 ml, 4,75 mmol, 1,5 eq.) y NaBH(OAc)a (2,0166 g, 9,52 mmol, 3 eq.). Tras purificacion, se obtuvo N-(4-metoxibencil)(8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)-quinolin-3-il)metanamina como un jarabe de color amarillo claro. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,48 (1 H, s), 7,87 (2 H, t, J=7,2 Hz), 7,64 - 7,77 (2 H, m), 7,48 - 7,62 (3 H, m), 7,14 (2 H, d, J=8,6 Hz), 6,81 (2 H, d, J=8,6 Hz), 3,71 (3 H, s), 3,44 - 3,62 (4 H, m), 2,61 (3 H, s), 2,54 (1 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 437,2 (M + 1).

(8-Metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metanamina

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Preparado segun el procedimiento G usando N-(4-metoxibencil)(8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3- il)metanamina (1,1427 g, 2,62 mmol, 1 eq.) y nitrato de amonio-cerio (IV) (3,59 g, 6,55 mmol, 2,5 eq.) en CH3CN-

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H2O (2:1, 12 ml). Tras purificacion, se obtuvo (8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metanamina como un jarabe de color marron. 1H-RMN (DMSO-da) 8 ppm 8,47 (1 H, s), 7,91 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,84 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,67 - 7,81 (2 H, m), 7,47 - 7,62 (3 H, m), 3,46 - 3,70 (2 H, m), 2,61 (3 H, s), 1,86 (2 H, s. a.). Espectro de masas (ESI) m/e = 317,0 (M + 1)

N-((8-Metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (8-metil-2-(2-(trifluorometil)-fenil)quinolin-3-il)metanamina (0,1 g, 0,316 mmol, 1 eq.) en EtOH (2 ml) que se trato con iPr2NEt (0,07 ml, 0,4 mmol, 1,2 eq.) seguido por 6-cloropurina (0,049 g, 0,317 mmol, 1 eq.). Tras purificacion, N-((8-metil-2-(2-(trifluoro-metil)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un jarabe de color amarillo. Se trituro el jarabe de color amarillo con CH2Ch y se filtro para proporcionar N-((8-metil-

2-(2-(triifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 91 nM] como un jarabe de color amarillo. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 7,98 - 8,31 (4 H, m), 7,90 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,74 - 7,82 (2 H, m), 7,69 (2 H, t, J=6,5 Hz), 7,59 (1 H, d, J=7,0 Hz), 7,42 - 7,52 (1 H, m), 4,42 - 4,77 (2 H, m), 2,62 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 435,1 (M + 1).

Ejemplo 17: Preparacion de N-((2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina: 2-(2-Fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'Hdo

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Preparado segun el procedimiento A usando 2-cloro-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (1,07 g, 5,21 mmol), acido 2- fluoro-6-metoxifenilboronico (0,9738 g, 5,73 mmol, 1,1 eq.), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,3011 g, 5% en mmol) y carbonato de sodio (2,76 g, 26,1 mol, 5 eq.) en MeCN (37,5 ml) y agua (12,5 ml). Tras purificacion, se obtuvo 2-(2- fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo como un solido blanco. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 9,88 (1 H, s), 8,95 (1 H, s), 8,10 (1 H, d, J=8,1 Hz), 7,82 (1 H, d, J=7,1 Hz), 7,62 - 7,69 (1 H, m), 7,49 - 7,59 (1 H, m), 6,96 - 7,10 (2 H, m), 3,71 (3 H, s), 2,70 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 296,0 (M + 1).

N-(4-Metoxibencil)(2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)-metanamina

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Preparado segun el procedimiento F usando 2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-carbaldel'ndo (1,086 g, 3,68 mmol), DCE (18 ml), PMBNH2 (0,95 ml, 7,36 mmol, 2,0 eq.) y NaBH(OAc)a (2,3387 g, 11,03 mmol, 3 eq ) Tras purificacion, se obtuvo N-(4-metoxibencil)(2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanamina como un jarabe de color amarillo. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,42 (1 H, s), 7,84 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,55 - 7,62 (1 H, m), 7,43 - 7,54 (2 H, m), 7,13 (2 H, d, J=8,6 Hz), 6,90 - 7,01 (2 H, m), 6,77 - 6,85 (2 H, m), 3,71 (3 H, s), 3,65 (3 H, s), 3,47 - 3,62 (4 H, m), 2,64 (3 H, s), 2,43 (1 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 417,3 (M + 1).

(2-(2-Fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanamina

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Preparado segun el procedimiento G usando N-(4-metoxibencil)(2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3- il)metanamina (1,1795 g, 2,8320 mmol, 1 eq.) y nitrato de amonio-cerio (IV) (5,434 g, 9,912 mmol, 3,5 eq.) en CH3CN-H2O (2:1, 13 ml). Tras purificacion, se obtuvo (2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanamina como un solido pegajoso de color amarillo. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,41 (1 H, s), 7,82 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,55 - 7,60 (1 H, m), 7,45 - 7,54 (2 H, m), 7,03 (1 H, d, J=8,2 Hz), 6,92 - 7,00 (1 H, m), 3,71 (3 H, s), 3,59 (2 H, q, J=16,6 Hz), 2,64 (3 H, s), 1,88 (2 H, s. a.). Espectro de masas (ESI) m/e = 297,1 (M + 1).

N-((2-(2-Fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metanamina (0,1000 g, 0,337 mmol, 1 eq.) en EtOH (2 ml) que se trato con iPr2NEt (0,0764 ml, 0,439 mmol, 1,3 eq.) seguido por 6-cloro- purina (0,0522 g, 0,337 mmol, 1 eq.). Tras purificacion, se obtuvo N-((8-metil-2-(2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3- il)metil)-9H-purin-6-amina como un jarabe de color amarillo. Se trituro el jarabe de color amarillo con CH2Ch y se filtro para proporcionar N-((2-(2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un jarabe de color amarillo. Se trituro el jarabe de color amarillo con CH2Ch y se filtro el solido resultante para proporcionar N-((2- (2-fluoro-6-metoxifenil)-8-metilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 651 nM] como un solido blanco. 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 12,87 (1 H, s), 8,19 (1 H, s), 8,11 (1 H, s), 8,07 (1 H, s), 8,00 (1 H, s), 7,77 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,58 (1 H, d, J=7,0 Hz), 7,40 <-> 7,51 (2 H, m), 6,87 - 7,02 (2 H, m), 4,64 (2 H, s. a.), 3,74 (3 H, s), 2,64 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 415,1 (M + 1).

Ejemplos 18 y 19: N-((3-(2-clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)-metil)-9H-purin-6-amina y N-((3-(2-clorofenil)-5- metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina:

1-(2-Clorofenil)propano-1,2-diona

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A una disolucion de 2-clorofenilacetona (7,14 g, 42 mmol) en CH2Cl2 (184 ml), se le anadieron PCC (27 g, 127 mmol, 3 eq.) y piridina (10 ml, 127 mmol, 3 eq.) en tres porciones a lo largo de cinco horas a reflujo con agitacion vigorosa. Tras completarse la adicion, se puso la mezcla a reflujo adicionalmente con agitacion vigorosa durante 21,5 h. Se filtro la mezcla a traves de un lecho de gel de silice, se lavo el lecho con CH2Cl2, y se concentro a presion reducida para proporcionar un jarabe de color rojo oscuro. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 120 g usando un gradiente del 0-15% de EtOAc en hexano a lo largo de 40 min como eluyente para proporcionar 1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona como un lfquido de color amarillo. 1H-RMN (cloroformo- d) 8 ppm 7,66 (1 H, dd, J=7,6, 1,8 Hz), 7,48 - 7,54 (1 H, m), 7,37 - 7,46 (2 H, m), 2,58 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 182,9 (M + 1).

3-Bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona

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Se calento una mezcla de 1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (1,2592 g, 6,9 mmol), acido acetico glacial (0,20 ml, 3,4 mmol, 0,5 eq.) y bromo (0,35 ml, 6,8 mmol, 1 eq.) en CHCh (17 ml) a 60°C durante 12 h. Se concentro la mezcla a presion reducida para proporcionar 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona como un Kquido de color amarillo. Se 5 continuo con el l^quido de color amarillo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa. 1H-RMN (CDCh) 8 ppm 7,71 (1 H, dd J=7,8, 1,6 Hz), 7,53 - 7,59 (1 H, m), 7,40 - 7,49 (2 H, m), 4,52 (2 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e =

261,0 [M+1 (79Br)] y 262,9 [M+1 (81Br)].

3-(Bromometil)-2-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxaIina

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10 A una disolucion de 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (1,8030 g, 6,895 mmol) en EtOAc (46 ml) se le anadio 2,3-diaminotolueno (0,8423 g, 6,895 mmol, 1,0 eq.) como un solido y la mezcla estuvo a t.a. durante 62 h. Se concentro la mezcla a presion reducida para proporcionar una mezcla de 3-(bromometil)-2-(2-cloro-fenil)-5- metilquinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-metil-quinoxalina como un jarabe de color rojo (2,3845 g, 99,48%). Se continuo con el jarabe de color rojo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa. Espectro de masas 15 (ESI) m/e = 347,0 [M+1 (79Br)] y 349,0 [M+1 (81Br)].

(3-(2-Clorofenil)-8-metilquinoxaIin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metanamina

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A una disolucion con agitacion de 3-(bromometil)-2-(2-clorofenil)-5-metil-quinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)- 5-metilquinoxalina (1,1204 g, 3,223 mmol) en dMf (16 ml) se le anadio azida de sodio (0,4190 g, 6,446 mmol, 2 eq.) 20 y se agito la mezcla a t.a. durante 1 h. Se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para proporcionar una mezcla de 3-(azidometil)-2- (2-clorofenil)-5-metilquinoxalina y 2-(azidometil)-3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalina. Se continuo en bruto con la mezcla en bruto sin purificacion para la siguiente etapa. Espectro de masas (ESI) m/e = 310,0 (M+1).

A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-2-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalina y 2-(azidometil)-3-(2-clorofenil)-5- 25 metilquinoxalina (0,9983 g, 3,22 mmol) en THF-H2O (4: 1, 15 ml) se le anadio gota a gota trimetilfosfina, disolucion

1,0 M en THF (3,8700 ml, 3,87 mmol, 1,2 eq.) y se agito la mezcla a t.a. durante 1 h. A la mezcla se le anadio EtOAc (100 ml) y se extrajo la mezcla con HCl 1 N (2 x 50 ml). Se neutralizaron los extractos combinados con bicarbonato de sodio solido, y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Se secaron los extractos organicos combinados sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar un jarabe oscuro. Se purifico el producto en bruto 30 mediante cromatograffa en columna una columna Redi-Sep de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min como eluyente para proporcionar una mezcla de (3-(2-

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clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metanamina. Espectro de masas (ESI) m/e = 284,0 (M+1).

N-((3-(2-Clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina y N-((3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metil)- 9H-purin-6-amina

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Se agito una mezcla de la 6-cloropurina (0,126 g, 0,813 mmol, 1 eq.), (3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2- il)metanamina (0,2308 g, 0,813 mmol, 1 eq.) y N,N-diisopropiletilamina (0,184 ml, 1,06 mmol, 1,3 eq.) en EtOH (5 ml) a 75°C durante 15 h. Se concentro la mezcla a presion reducida para proporcionar un jarabe de color verde. Se purifico el jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9: 1) en CH2Ch a lo largo de 14 min como eluyente para proporcionar una mezcla de N-((3-(2-clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina y N-((3-(2-clorofenil)-5- metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido de color naranja. Se suspendio el solido de color naranja en CH2Cl2 y se filtro para proporcionar una mezcla de N-((3-(2-clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6- amina y N-((3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino. Se disolvio el solido blanco en DMSO (3 ml) y se purifico mediante HPLC semiprep. en una columna C18 usando un gradiente del 20-70% de CH3CN (TFA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente para proporcionar N- ((3-(2-clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 325 nM] como un solido blanquecino como una sal de TFA y N-((3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 66 nM] como un solido blanquecino como una sal de TFA. Ejemplo 18: 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,50 (1 H, s), 8,27 (2 H, s), 7,95 (1 H, d, J=7,9 Hz), 7,75 - 7,80 (1 H, m), 7,72 - 7,75 (1 H, m), 7,61 - 7,66 (2 H, m), 7,53 - 7,58 (1 H, m), 7,47 - 7,53 (1 H, m), 4,89 (2 H, s), 3,17 (1 H, s), 2,61 (3 H, s); Espectro de masas (ESI) m/e = 402,1 (M+1); HPLC: un pico a 6,439 min. Ejemplo 19: 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,42 (1 H, s. a.), 8,18 - 8,31 (2 H, m), 7,94 (1 H, d, J=7,9 Hz), 7,76 - 7,82 (1 H, m), 7,71 - 7,75 (1 H, m), 7,67 (1 H, dd, J=7,3, 1,8 Hz), 7,63 (1 H, d, J=7,9 Hz), 7,52 - 7,57 (1 H, m), 7,48 - 7,52 (1 H, m), 4,87 (2 H, s. a.), 2,70 (3 H, s); Espectro de masas (ESI) m/e = 402,1 (M+1); HPLC: un pico a 6,758 min.

Ejemplo 20: 4-((8-Metil-2-o-tolilquinolin-3-il)metoxi)-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6(7H)-ona

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A una disolucion de 3-((7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)metil)-8-metil-2-o-tolilquinolina (120 mg, 0,316 mmol) en AcOH (4 ml) y t-BuOH (2,43 ml) bajo N2 se le anadio bromuro-perbromuro de piridinio (303 mg, 0,947 mmol) en una porcion. Tras agitacion a temperatura ambiente durante 5 h se eliminaron los disolventes, y se suspendieron los solidos restantes en H2O y se extrajo con acetato de etilo, tras secar con salmuera y MgSO4, se disolvio el solido seco en bruto en THF (8 ml) seguido por 5 ml de una disolucion saturada de NH4Cl, esto estuvo seguido a su vez por polvo de Zn (528 mg, 26 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 24 h. Entonces se extrajo la mezcla con acetato de etilo y se cromatografio {elucion en gradiente con DCM/(DCM/MeOH/NH4OH) 89:9:1 }. Se recristalizo el solido en DCM para proporcionar el producto puro [CI50 de PI3K8 = 349 nM]. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,29 (1 H, s), 8,52 (1 H, s), 8,30 (1 H, s), 7,89 (1 H, d, J =7,8 Hz), 7,65 (1 H, d, J =7,0 Hz), 7,51 - 7,57 (1 H, m), 7,30 - 7,35 (3 H, m), 7,22 - 7,29 (1 H, m), 3,47 (2 H, s), 2,67 (3 H, s), 2,09 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e =397,1 [M+1].

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Ejemplo 21:

2,5-DicloroquinoIin-3-carbaldehffdo (1)

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A una disolucion fna de diisopropilamina (6,6 ml, 1,1 eq.) en THF (100 ml) se le anadio gota a gota una disolucion de BunLi (1,1 eq., 2,5 M, 18,7 ml) en hexano a -20°C. Se mantuvo la disolucion de LDA resultante en 0°C durante 30 min y se enfrio hasta -78°C antes de la adicion de una disolucion de 1 (8,4 g, 42,4 mmol) en THF (44 ml) gota a gota. Se controlo la temperature por debajo de -72°C mediante el ajuste de la velocidad de adicion (15 min). La reaccion era una disolucion transparente al comienzo pero se convirtio en una suspencion tras 25 min. Tras otros 5 min, se anadio DMF (5,0 ml) gota a gota. Tras 30 min, se extinguio la reaccion con NH4Cl y se repartio entre EtOAc (150 ml) y agua (100 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4. La eliminacion del disolvente dio un solido blanco que se lavo con hexano (3 x 50 ml). Se obtuvo un solido blanco (7,47 g). Se concentraron los lavados de hexano combinados y se purificaron mediante cromatograffa en columna sobre gel de sflice (DCM/hexano, 3/2) para dar 500 mg adicionales. En global, 7,97 g, 83%. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 10,60 (1 H, s), 9,17 (1 H, s), 8,02 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,82 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,73 (1 H, d, J=8,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 226,0 y 228 (M+1).

N-((5-Cloro-2-(2-clorofenil)quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina (2)

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Se preparo el compuesto 2 a partir de 1 segun los procedimientos A, B, C, D, E, y H. 1H-RMN (400 Hz, DMSO-d6) 8 9,68 (s, a, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,53 (s, a, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,87 (d, J - 8,0 Hz, 1H), 7,81 (t, J =

8,0 Hz, 1H), 7,51-7,28 (m, 5H), 4,91 (s, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 422 (M + 1).

3-(Azidometil)-8-cloro-2-(piperidin-1-il)quinolina

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Se trato una disolucion de (2,8-dicloroquinolin-3-il)metanol (228 mg, 1 mmol) en CHCh (4 ml) con SOCh (0,36 ml, 5 eq.) gota a gota, y se agito la reaccion a t.a. durante 2 h antes de la eliminacion de los disolventes y se repartio el residuo entre EtOAc y NaHCO3 Se separo la fase organica y se seco sobre Na2SO4. Se eliminaron los disolventes a presion reducida y se seco el residuo a vacfo. Se disolvio el residuo en DMSO (2 ml) y se trato con NaN3 (72 mg, 1,1 eq.) a t.a. CL-EM mostro que se completo tras 4 h. Se repartio la mezcla de reaccion entre EtOAc (2 ml) y agua (1 ml) y se extrajo la fase acuosa con EtOAc (5 ml) una vez y se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un solido de color amarillo palido como 3- (azidometil)-2,8-dicloroquinolina (215 mg, 85%, 2 etapas). Este solido (50 mg, 0,2 mmol) en DCM (2 ml) se trato con piperidina (143 |il, 7,3 eq.) en EtOH (2 ml) a reflujo durante la noche. Se sometio la reaccion a tratamiento final y se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de sflice (eluyente: EtOAc/hexano, 1/5) para dar un solido de color amarillo (30 mg, 50%). 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,01 (1 H, s), 7,62 (1 H, t, J-8,0 Hz), 7,53 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,49 (1H, d, J=8,0 Hz), 4,02 (2H, s), 3,26-3,23 (m, 4H), 1,74-1,58 (m, 6H). Espectro de masas (ESI) m/e = 302 (M+1).

5

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N-((8-Cloro-2-(piperidin-1-il)quinolin-3-M)metil)-9H-purin-6-amina

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Se disolvio 3-(azidometil)-8-cloro-2-(piperidin-1 -il)quinolina (30 mg, 0,1 mmol) en MeOH (1 ml) y se trato con Pd-C al 10% (5% en peso) y entonces se agito la mezcla bajo globo de H2 durante la noche. Se filtro la mezcla a traves de un lecho de CeliteTM seguido por la eliminacion de los disolventes para dar (8-cloro-2-(piperidin-1 -il)-quinolin-3- il)metanamina como un aceite incoloro. Se preparo N-((8-cloro-2-(piperidin-1 -il)-quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina segun el procedimiento H. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,29 (s, 1H), 7,79 (m, 3H), 7,45 (m, 2H), 5,43 (2H, s), 3,90 (m, 4H), 2,23 (m, 4H), 1,84 (m, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 394 (M+1).

N-((8-Bromo-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se preparo 8-bromo-2-cloroquinolin-3-carbaldel'ndo de manera similar a 1 a partir de 8-bromo-2-cloroquinolina. Se preparo N-((8-bromo-2-(3-fiuorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina segun los procedimientos A, B, C, D, E y H. 1H-RMN (400 Hz, DMSO-d6) 8 8,43 (s, 1H), 8,27 (s, a, 2H), 8,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,597,56 (m, 3H), 7,51 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,37-7,32 (m, 1H), 4,95 (s, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 449, 451 (M + 1).

Ejemplo 22:

2-((8-Bromo-2-(3-fluorofenil)quinoIin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona

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Se preparo 8-Bromo-3-(clorometil)-2-(3-fluorofenil)quinolina segun los procedimientos A, B y C. Se trato una disolucion de 8-bromo-3-(clorometil)-2-(3-fluoro-fenil)-quinolina (1,15 g, 3,3 mmol) en DMF (10 ml) con sal de potasio de ftalimida (1,52 g, 2,5 eq.) a t.a. Tras pasar la noche, se diluyo la reaccion con agua. La filtracion dio un solido que se lavo con agua y MeOH caliente y se seco para dar un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, DMSO-d6) 8 8,43 (s, 1H), 8,15-7,84 (m, 7H), 7,62-7,49 (m, 3H), 7,39-7,35 (m, 1H), 4,98 (s, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 461, 463 (M + 1).

N-((2-(3-Fluorofenil)-8-morfolinoquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se calento hasta 120°C una mezcla de 2-((8-bromo-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona (100 mg, 0,22 mmol), BINAP racemico (16,2 mg, 0,12 eq.), Pd2(dba)3 (10 mg, 0,05 eq.), NaOBu4 (29,2 mg, 1,4 eq.) y morfolina (38 mg, 2 eq.) en dioxano (2 ml) bajo N2 durante 8 h. CL-EM mostro una mezcla de material de partida y producto. A 5 la reaccion se le anadieron los reactantes de nuevo. Se calento adicionalmente la reaccion durante 2 h antes de repartirse entre agua y EtOAc. Se extrajo la fase acuosa una vez con EtOAc y se acidifico hasta pH 2 mediante HCl 3 N y se extrajo con DCM (5 ml x 3). La eliminacion del disolvente dio una espuma, que se trato con NH2NH2 (0,5 ml) en EtOH (2 ml) a reflujo. Se eliminaron los disolventes y se sometio el residuo a tratamiento final y se purifico mediante el sistema Combiflash (DCM/MeOH/Et3N, 20/1/0,1). Se obtuvo un solido blanco como (2-(3-fluorofenil)-8- 10 morfolinoquinolin-3-il)metanamina. Se preparo N-((2-(3-fluorofenil)-8-morfolinoquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

segun los procedimientos H. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 8,77 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,25 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,85 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,61-7,54 (m, 3H), 7,24 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,20 (s, 4H), 4,02 (s, 4H). Espectro de masas (ESI) m/e = 456 (M + 1).

Ejemplo 23:

15 (2-(3-Fluorofenil)-8-(metilsulfonil)quinolin-3-il)metil-carbamato de terc-butilo

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Se trato 2-((8-Bromo-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona (1,1 g, 2,4 mmol) en EtOH (10 ml) con NH2NH2 (0,75 ml, 10 eq.) a reflujo durante 30 min. Tras enfriar hasta t.a., se filtro el subproducto y se lavo con MeOH. Se concentro el filtrado y se purifico mediante el sistema Combiflash (DCM/MeOH, 20/1) para dar un solido 20 blanquecino como amina (720 mg, 91%). Se calento hasta 80°C una mezcla de amina (500 mg, 1,5 mmol), BoC2O (362 mg, 1,1 eq.) y Et3N (0,25 ml, 1,2 eq.) en THF (10 ml) durante 2 h antes de enfriar hasta t.a. y se separo mediante el sistema Combiflash (EtOAc/hexano, 1/4). Se obtuvo un solido blanco como (8-bromo-2-(3- fluorofenil)quinolin-3-il)metilcarbamato de terc-butilo (640 mg, 98%). Se purgo con N2 una mezcla de (8-bromo-2-(3- fluorofenil)quinolin-3-il)metilcarbamato de terc-butilo (184 mg, 0,43 mmol), MeSNa (29 mg, 1 eq.) y Pd(PPh3)4 (25 25 mg, 5% en mmol) en BuOH (3 ml) durante 5 min antes de calentar hasta 110°C. Tras pasar la noche, se purifico la mezcla de reaccion mediante el sistema Combiflash para dar un sulfuro impuro (65 mg) que se trato con Oxone (200 mg, 2 eq.) en THF (1 ml) y agua (1 ml) a t.a. durante 8 h. Tratamiento final, se purifico el residuo en columna (EtOAc/hexano, de 1/9 a 9/1) para dar (2-(3-fluorofenil)-8-(metilsulfonil)quinolin-3-il)-metilcarbamato de terc-butilo como un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,54 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,05 (d, J 30 = 8,0 Hz, 1H), 7,62 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,43-7,36 (m, 2H), 7,30 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,53-4,47 (m,

2H), 4,01 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,49 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 431 (M+1).

N-((2-(3-Fluorofenil)-8-(metilsulfonil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se trato (2-(3-fluorofenil)-8-(metilsulfonil)quinolin-3-il)metilcarbamato de terc-butilo (18 mg, 0,042 mmol) con TFA al 35 50% en DCM (1 ml) durante 30 min a t.a. y se concentro la mezcla de reaccion hasta sequedad. Se trato el solido

que resulto con 6-cloropurina (7,1 mg, 1,1 eq.) y base de Hunig (0,04 ml, 4 eq.) en BunOH (1 ml) a 90°C. HPLC de fase inversa dio un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 8,47 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 8,0, 4,0 Hz, 1H), 8,24 (s,

5

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1H), 8,18 (dd, J = 8,0, 4,0 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50-7,39 (m, 3H), 7,11 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 3,45 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 449 (M + 1).

Ejemplo 24:

(8-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)metanamina

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Se preparo 2-((2,8-Dicloroquinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona de manera similar a 2-((8-bromo-2-(3- fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-isoindolin-1,3-diona a partir de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo. Se purgo con N2 una mezcla de 2-((2,8-dicloroquinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona (71 mg, 0,2 mmol), bromuro de 2-piridilzinc (0,5 M, 0,8 ml, 2,0 eq.) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (11 mg, 5%) en dioxano (3 ml) y se calento hasta 65°C. Tras 12 h, se enfrio la reaccion hasta t.a. y se extinguio con disolucion de NH4CL Tras el tratamiento final, se trato el residuo que contema una mezcla de 2-((8-cloro-2-(piridin-2-il)-quinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona y acido 2-(((8-cloro-2-(piridin- 2-il)-quinolin-3-il)metil)carbamoil)benzoico con NH2NH2 (31 |il) en EtOH (1 ml) a reflujo. Tras el tratamiento final habitual, se purifico el residuo en cromatograffa en columna sobre gel de silice (DCM/MeOH/Et3N, 20/1/0,1) para dar un solido de color amarillo palido como (8-cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)metanamina. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 8 ppm 8,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,3 l(d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,84 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,66 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (t, J=8,0 Hz, 1H), 4,13 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 270 (M+ 1).

2-((8-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona

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Se trato (8-cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)metanamina (20 mg, 0,074 mmol) con 6-cloropurina (13 mg, 1,1 eq.) y base de Hunig (0,053 ml, 4 eq.) en BunOH (1 ml) a 120°C. (Modificacion del procedimiento H), HPLC de fase inversa dio un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 8,72 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,54 - 8,28 (m, 4H), 8,04 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53-7,44 (m, 2H), 5,27 (s, a, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 388 (M+1).

Ejemplo 25:

1-(2,8-DicloroquinoIin-3-il)etanol

imagen83

A una disolucion fria de diisopropilamina (6,6 ml, 1,1 eq.) en THF (100 ml) se le anadio gota a gota una disolucion de BunLi (1,1 eq., 2,5 M, 18,7 ml) en hexano a -20°C. Se mantuvo la disolucion de LDA resultante en 0°C durante 30 min y se enfrio hasta -78°C antes de la adicion de una disolucion de 2,8-dicloroquinolina (8,4 g, 42,4 mmol) en THF (44 ml) gota a gota. Se controlo la temperatura por debajo de -72°C mediante el ajuste de la velocidad de adicion (15 min). Tras 45 min, se le anadio MeCHO (3,6 ml, 1,5 eq.) gota a gota. Tras 30 min, se extinguio la reaccion con NH4Cl y se repartio entre EtOAc (150 ml) y agua (100 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4. La eliminacion del disolvente dio un aceite incoloro que se purifico mediante

cromatograffa en columna sobre gel de silice (DCM/hexano, 3/2) para dar un aceite. Se anadio hexano (80 ml) y se dejo la mezcla durante la noche. La filtracion dio un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,43 (s, 1H), 7,84 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,40 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 1,63 (d, J = 8,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 242 (M+1).

5 (R)-1-(2,8-Dicloroquinolin-3-il)etanol

imagen84

Se calentaron una mezcla de 1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etanol (5,0 g, 21 mmol) y MnO2 (18 g, 10 eq.) en tolueno (200 ml) hasta reflujo durante 2 h. La filtracion seguida por la eliminacion del disolvente dio un solido blanco como 1-(2,8- dicloroquinolin-3-il)-etanona (4,5 g, 91%). Se le anadio una disolucion de este solido (5,0 g, 21 mmol) en THF (50 ml) 10 a una disolucion de (+)-DIP-Cl (14,7 g, 2,2 eq.) en THF (150 ml) a -78°C gota a gota. Se calento lentamente la reaccion hasta t.a. durante la noche. Entonces se extinguio la reaccion con acetona (23 ml) y se agito a 0°C durante 1 h antes de la adicion de EtOAc. Se calento la reaccion hasta t.a. y se lavo con Na2CO3 al 10% y agua. HPLC quiral en columna IA (isopropanol en hexano, al 10%) mostro una razon de 19:1 para los dos enantiomeros. E concentraron los productos en bruto combinados a alto vacfo y se purificaron mediante cromatograffa en columna 15 sobre gel de silice (EtOAc/hexano, 1/3) para dar un solido blanco que se recristaliza en una mezcla de EtOAc (30 ml) y hexano (210 ml). Se obtuvo una aguja blanca. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,43 (s, 1H), 7,84 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,40 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 1,63 (d, J = 8,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 242 (M+1).

(S)-2-( 1 -(2,8-Dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

20

A una disolucion de (R)-1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etanol (22,00 g, 91 mmol) en THF (500 ml) se le anadieron PPh3 (28,60 g, 1,2 eq.), ftalimida (16,04 g, 1,2 eq.) y DiAd (21,47 ml, 1,2 eq.) gota a gota. Se agito la mezcla de reaccion a t.a. durante 6 h y CCF (EtOAc/hexano, 1/4) mostro una pequena cantidad de 1. A la mezcla de reaccion se le anadieron PPh3 (2,86 g, 0,12 eq.), ftalimida (1,60 g, 0,12 eq.) y DIAD (2,15 ml, 0,12 eq.) y se agito la mezcla durante 25 la noche. Se concentro la mezcla de reaccion y se purifico mediante cromatograffa en columna sobre gel de sflice (EtOAc/hexano, 1/4) para dar unos ~ 50 g de producto semisolido. Al producto solido se le anadio hexano y EtOAc (10/1, 200 ml), se lavo el solido que resulto con hexano. Se concentro el filtrado y se purifico mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (DCM/hexano, 2/1) para dar una espuma blanca. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,49 (s, 1H), 7,77-7,73 (m, 4H), 7,66-7,63 (m, 2H), 7,43 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,89 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 1,91 (d, J = 8,0 30 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 372 (M+1).

imagen85

2-((S)-1-(8-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

imagen86

Se calento hasta 100°C una mezcla de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (22,7 g, 61 mmol), Pd(PPh3)4 (3,53 g, 0,05 eq) y 2-(tributilestannil)piridina (33,8 g, 80%, 1,2 eq.) en dioxano (840 ml) bajo N2. Tras 35 pasar la noche, CL-EM mostro que quedaba aproximadamente el 50% de material de partida. Se calento la mezcla de reaccion hasta 110°C durante 2 dfas adicionales. CL-EM mostro que quedaba menos del 10% material de partida. Se calento la reaccion hasta 120°C durante 5 h antes de enfriar hasta t.a. La eliminacion del disolvente seguida por cromatograffa en columna sobre gel de silice (EtOAc/hexano, 0/1 to 1/3) dio una espuma blanquecina, 14,2 g y se combinaron las porciones impuras y se purificaron de manera similar para dar una espuma blanca. 1H-

RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 8,69 (s, 1H), 8,66 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,85 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,75 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,70-7,65 (m, 4H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,33-7,29 (m, 1H), 6,58 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 2,02 (d, J = 8,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 414 (M+1).

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

5

Se trato una disolucion de 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindoMn-1,3-diona (16,8 g, 41 mmol) en EtOH (350 ml) con NH2NH2 (29 ml) gota a gota a t.a. (formacion de un solido blanco tras la adicion) antes de calentar a 90°C durante 30 min (la reaccion se volvio homogenea durante 5 min y se formo un nuevo solido blanco) y enfriar hasta t.a. Se filtro la mezcla de reaccion. Se lavo la torta de filtracion con EtOAc. Se concentraron las fases 10 organicas combinadas y se repartieron entre EtOAc (200 ml) y agua (100 ml). Se extrajo la fase acuosa con EtOAc (100 ml x 2). Se lavaron las fases organicas con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un aceite de color amarillo (16 g). Se calento el material en bruto hasta 90°C/2 mmHg para retirar un subproducto lfquido incoloro para dar un aceite de color tostado pesado. Se calento hasta 130°C una mezcla de este aceite (11 g, 38,8 mmol), 6-cloro-9H-purina (6,6 g, 1,1 eq.) y base de Hunig (8,2 ml, 1,2 eq.) en n-BuOH (200 ml). 15 Tras pasar la noche, se repartio la mezcla de reaccion concentrada entre EtOAc (500 ml) y agua (300 ml). Se extrajo la fase acuosa con EtOAc (200 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua, salmuera, se secaron, se concentraron y se purificaron en columna (DCM/MeOH, 15/1) para dar una espuma de color amarillo (15,7 g, 96%) con una pureza del 96%. Se purifico la espuma adicionalmente mediante cromatograffa en columna cuidadosa sobre gel de sflice (DCM/MeOH, 1/0 to 20/1) y se comprobaron las fracciones del frente mediante HPLC inversa (15 20 min, MeCN/agua). Se combinaron las fracciones posteriores y se concentraron para dar una espuma blanca, que se trato con hexano caliente para dar un polvo fino. 1H-RMN (400 Hz, DMSO-d6) 8 12,66 (s, a, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,92-7,84 (m, 2H), 7,77-7,74 (m, 3H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,91 (s, 1H), 1,48 (d, J = 4,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 402 (M + 1).

Ejemplo 26:

25 3-((S)-1-(9H-Purin-6-ilamino)etil)-2-(piridin-2-il)quinolin-8-carbonitrilo

imagen87

imagen88

Se purgo con N2 una mezcla de N-((S)-1-(8-cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina (80 mg, 0,2 mmol), Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,1 eq.) y Zn(CN)2 (117 mg, 5,0 eq.) en DMF (5 ml) durante 5 min antes de calentar hasta 130°C. Tras 3 h, CL-EM mostro formacion de cantidades traza de 2. Entonces se calento la reaccion hasta 165°C durante la 30 noche. Tras enfriar hasta t.a., se filtro la reaccion a traves de Celite™ y se purifico mediante HPLC inversa (MeCN/H2O, TFA al 0,1%) para dar un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, DMSO-d6) 8 8,83 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,42-8,37 (m, 3H), 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,08 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,79 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,24 (s, 1H), 1,72 (d, J = 8,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 393 (M + 1).

35

Ejemplo 27:

N-((S)-1-(2-(Piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen89

Se trato una mezcla de 1 (53 mg, 0,13 mmol) en EtOH (1 ml) con PdVC (al 10%, 10 mg) y NH2NH2 (21 |il, 5,0 eq.) durante 2 h a reflujo. Tras enfriar hasta t.a., se repartio la mezcla de reaccion entre agua y EtOAc. Se separo la fase organica, se lavo con agua, salmuera, se seco y se concentro para dar un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 9,25 (s, 1H), 9,06 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,55- 8,47 (m, 4H), 8,27 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 8,07-8,02 (m, 2H), 7,88 (t, J = 8,0 5 Hz, 1), 5,56-5,55 (m, 1H), 1,93 (d, J = 8,0 Hz, 3H). EM (ESI) m/e = 368 (M+1).

Ejemplo 28:

1-(2-Cloro-7-fluoroquinolin-3-il)etanol

imagen90

A una suspension de 2-cloro-7-fluoroquinolin-3-carbaldel'ffdo (44,7 g, 213 mmol) en THF (600 ml) se trato con 10 MeMgBr (78 ml, 1,1 eq.) gota a gota a -20°C. Tras pasar la noche, se extinguio la reaccion con disolucion de NH4Cl y se extrajo con eter (300 ml y 100 ml). Se lavaron las fases organicas con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se recristalizaron en EtOAc (100 ml) y hexano (1 l). Se obtuvo un solido de color amarillo palido (41 g, 85%). 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,41 (s, 1H), 7,87 (dd, J=8,0, 4,0 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 7,38 (td, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 5,38 (q, J = 4,0 Hz, 1H), 1,63 (d, J = 4,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 15 226 (M+1).

(S)-2-( 1 -(2-Cloro-7-fluoroquinolino-il)etil)isoindolin-1, 3-diona

imagen91

Se preparo (S)-2-(1-(2-cloro-7-fluoroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona segun el analogo de 8-Cl correspondiente. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,48 (s, 1H), 7,85 (dd, J=8,0, 4,0 Hz, 1H), 7,75-7,73 (m, 2H), 7,65-7,63 (m, 2H), 20 7,55 (dd, J = 8,0 Hz, 1H), 7,30 (td, J - 8,0, 4,0 Hz, 1H), 5,88 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 1,90 (d, J = 8,0 Hz, 3H). Espectro de

masas (ESI) m/e = 355 (M+1).

N-((S)-1-(7-Fluoro-2-(2-(metilsulfonil)fenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen92

Se calento hasta 85°C una mezcla de (R)-N-((S)-1-(2-cloro-7-fluoroquinolin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida 25 (164 mg, 0,4 mmol), acido 2-(metiltio)fenilboronico (92 mg, 1,1 eq.), Na2CO3 (214 mg, 5,0 eq.), Pd(PPh3)4 (31 mg,

5%), MeCN (3 ml) y agua (1 ml) bajo N2 durante la noche. Tras enfriar hasta t.a., se repartio la reaccion entre EtOAc (10 ml) y agua (5 ml). Se separo la fase organica, se lavo, se seco y se concentro. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice para dar un solido blanco. Se trato una disolucion de este solido (140 mg, 0,34 mmol) en MeOH (2 ml) con HCl 4 N en dioxano (1 ml) durante 2 h a t.a. antes de la eliminacion de los 30 disolventes. Se disolvio el residuo en THF (3 ml) y se trato con Et3N (2 eq., 93 |il) seguido por Boc2O (1,1 eq., 81 mg) a 70°C. Tras pasar la noche, se sometio la mezcla de reaccion a tratamiento final y se purifico en cromatograffa en columna sobre gel de silice (EtOAc/hexano, 1/9) para dar una espuma blanca (100 mg, 72%) como (S)-1-(7-fluoro-2- (2-(metilsulfonil)-fenil)-quinolin-3-il)etilcarbamato de terc-butilo. Este material (100 mg, 0,24 mmol) en CHCh (3 ml) se trato con mCPBA (174 mg, 72%, 3,0 eq.) a t.a. durante 2 h. CL-EM mostro el MW + 16 deseado. Tratamiento final. 35 Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (EtOAc/hexano, 1/1) para dar dos fracciones, 1a (50 mg) y 2a (20 mg) con la misma M + 1 = 461 en CL-EM. Se disolvieron los compuestos en MeOH (2 ml) y agua (1 ml) y se trataron con TiCh en agua (30%, 10 gotas) a t.a. durante 2 h. Se repartio la mezcla de reaccion entre EtOAc y agua. Se separo la fase organica y se lavo con agua, salmuera, se seco y se concentro para dar un solido blanco (83 mg), que se trato con TFA (1 ml) en DCM (1 ml) a t.a. durante 2 h. El residuo tras la 40 eliminacion de los disolventes se trato con 6-cloro-9H-purina (32 mg, 1,1 eq.) y base de Hunig (104 |il, 1,2 eq.) en

BuOH (2 ml) a 130°C durante la noche. Tras enfriar hasta t.a., se purifico la mezcla de reaccion mediante HPLC inversa (MeCN/agua/TFA al 0,1, a del 10% al 60%) para dar un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 9,35 (s, 1H), 8,53-8,47 (m, 2H), 8,25 (s, 1H), 7,98-7,76 (m, 6H), 5,85 (s, a, 0,4 H), 5,58-5,56 (m, 0,6H), 3,19 (s, 3H), 1,88-1,81 (m, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 463 (M + 1).

5 Ejemplo 29:

(S)-N-(1-(7-Fluoro-1-[0]-2-fenilquinoIin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen93

Se agito a t.a. una mezcla de (S)-2-(1-(7-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (33 mg, 83 |imol) y mCPBA (19 mg, 1,3 eq.) en CHCh (1 ml) durante 2 h. Se repartio la reaccion entre CHCh y NaHCO3. Se aislo la fase 10 organica y se purifico mediante cromatograffa en columna sobre gel de silice (EtOAc/hexano, 3/1) para dar un solido blanco, que se trato con hidrazina (0,1 ml) en EtOH (1 ml) a 35°C durante 2 h. El tratamiento final habitual dio un aceite incoloro (25 mg). Este aceite se trato con 6-cloro-9H-purina (15 mg, 1,1 eq.) y base de Hunig (49 |il, 1,2 eq.) en BuOH (1 ml) a 130°C durante la noche. Tras enfriar hasta t.a., se purifico la mezcla de reaccion mediante HPLC inversa (MeCN/agua/TFA al 0,1, a del 10% al 60%) para dar un solido blanco. 1H-RMN (400 Hz, CD3OD) 8 8,67 (s, 15 1H), 8,48 (s, 2H), 8,30-8,28 (m, 2H), 7,75-7,41 (m, 7H), 5,42 (q, J = 4,0 Hz, 1H), 1,71 (d, J = 4,0 Hz, 3H). Espectro de

masas (ESl) m/e = 401 (M + 1).

Ejemplo 30:

Preparacion de N-((8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina 8-Cloro-2-fenoxiquinolin-3-carbaldel'ffdo

20

A una disolucion de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ffdo (1 eq.) en DMF (0,25 M) se le anadio fenol (1,5 eq.) y K2CO3 (2,0 eq.) a t.a. y se agito la mezcla durante 3 h a t.a. Se diluyo la mezcla con agua, se extrajo con EtOAc (2 veces) y se lavaron las fases organicas combinadas con agua (2 veces), se seco sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el producto en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ 25 usando un gradiente del 0 al 40% de EtOAc en hexano para proporcionar 8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-carbaldel'ffdo.

(8-Cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)metanol

imagen94

Preparado segun el procedimiento B usando 8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-carbaldel'ffdo (1,0 eq.) y borohidruro de sodio solido (1,5 eq.) en THF (0,5 M) a 0°C. Se obtuvo (8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)metanol, tras purificacion, como un 30 solido amarillo.

imagen95

8-Cloro-3-(clorometil)-2-fenoxiquinolina

imagen96

Preparado segun el procedimiento C usando (8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)-metanol (1,0 eq.) y SOCI2 (5 eq.) en CHCI3 (0,25 M) a t.a. Se obtuvo 8-cloro-3-(clorometil)-2-fenoxiquinolina, tras purificacion, como un aceite de color amarillo.

5 (8-Cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)metanamina

imagen97

A una disolucion de 8-cloro-3-(clorometil)-2-fenoxiquinolina (1 eq.) en DMSO (0,25 M) se le anadio NaN3 (3 eq.) a t.a. y se agito la mezcla durante 4 h a t.a. Se diluyo la mezcla con agua, se extrajo con EtOAc (2 veces) y se lavaron las fases organicas combinadas con agua (2 veces), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion 10 reducida. Se disolvio el residuo en MeOH y se trato con Pd-C al 10% (5% en peso) y entonces se agito la mezcla bajo globo de H2 durante la noche. Se filtro la mezcla a traves de un lecho de Celite™ seguido por la eliminacion de los disolventes para dar (8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)metanamina.

N-((8-Cloro-2-fenoxiquinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen98

15 Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-fenoxiquinolin-3-il)-metanamina (0,110 g, 0,360 mmol), 6- cloropurina (0,072 g, 0,46 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,72 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro-2- fenoxiquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 125 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H- RMN (MeOD) 8 ppm 8,18 - 8,24 (s, 1 H), 8,14 - 8,20 (s, 1 H), 7,85 - 7,91 (d, J= 7,58, 1 H), 7,72 - 7,79 (d, J= 7,34, 1 H), 7,47 - 7,55 (m, 3 H), 7,42 - 7,47 (m, 3 H), 7,35 - 7,42 (m, 1 H), 4,01 - 4,14 (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e 20 = 403 (M + 1)

Ejemplo 31:

N-((8-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinoIin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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5

10

15

20

25

30

Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)metanamina (0,030 g, 0,11 mmol), 6-cloropurina (0,019 g, 0,13 mmol, 1,2 eq.) y DIEA en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro-2-(3- fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [PI3K8 IC5O = 74 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H- RMN (MeOD) 8 ppm 8,41 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,88 - 8,02 (m, 4 H), 7,59 (dd, J=4,40, 2,20 Hz, 4 H), 4,80 - 4,98 (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 405 (M + 1).

Ejemplo 32:

N-((8-Cloro-2-fenilquinolin-3-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina

imagen100

Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-fenilquinolin-3-il)metanamina (0,050 g, 0,186 mmol), 4-cloro- 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (0,034 g, 0,22 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,38 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro-2-fenilquinolin-3-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina [CI50 de PI3K8 = 270 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,65 - 8,76 (m, 1 H), 8,53 (s, 1 H), 8,11 - 8,20 (m, 4 H), 8,07 (d, J=1,96 Hz, 1 H), 7,91 - 8,00 (m, 2 H), 7,86 (s, 1 H), 7,51 - 7,58 (m, 2 H), 4,73 - 4,85 (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 386 (M + 1).

Ejemplo 33:

N-((8-Cloro-2-(3,5-difluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen101

Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(3,5-difluorofenil)-quinolin-3-il)metanamina (0,105 g, 0,345 mmol), 6-cloropurina (0,064 g, 0,41 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,70 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). N-((8-cloro-2- (3,5-difluorofenil)quinolin-3-il)memil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 76 nM] Se obtuvo, tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,48 (s, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,86 - 7,94 (m, 2 H), 7,52 - 7,61 (m, 1 H), 7,27 - 7,35 (m, 2 H), 6,96 - 7,06 (m, 1 H), 4,73 (d, J=5,71, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 423 (M + 1).

Ejemplo 34:

N-((8-Cloro-2-(2-cloro-5-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen102

Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(2-cloro-5-fluorofenil)-quinolin-3-il)metanamina (0,050 g, 0,156 mmol), 6-cloropurina (0,027 g, 0,17 mmol, 1,2 eq.) y DiEA (0,70 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-cloro-2-(2-cloro-5-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 71 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,30 (s, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,80 (dd, J=7,58, 0,49 Hz, 2 H), 7,69 - 7,75 (m, 1 H), 7,42 - 7,47 (m, 1 H), 7,31 - 7,37 (m, 1 H), 7,11 - 7,16 (m, 1 H), 6,99 - 7,06 (m, 1 H), 4,90-497. (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 440 (M + 1)

5

10

15

20

25

Ejemplo 35:

imagen103

Preparado segun el procedimiento H usando (8-cloro-2-(2-(metilsulfonil)fenil)quinolin-3-il)metanamina (0,060 g, 0,173 mmol), 6-cloropurina (0,032 g, 0,21 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,34 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((8-doro-2-(2-(metilsulfonil)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 222 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,29 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 8,01 - 8,09 (m, 2 H), 7,78 - 7,81 (m, 1H), 7,66 - 7,76 (m, 1 H), 7,57 - 7,65 (m, 1 H), 7,46 (d, J=7,83 Hz, 2 H), 4,87 - 4,98 (m, 2 H), 3,28 (s, 3H), Espectro de masas (ESI) m/e = 465 (M + 1).

Ejemplo 36

N-((2-(2-Clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen104

Preparado segun el procedimiento H usando (2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)metanamina (0,080 g, 0,279 mmol), 6-cloropurina (0,065 g, 0,42 mmol, 1,5 eq.) y DlEA (0,56 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((2-(2- clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 225 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,49 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 8,03 - 8,10 (m, 2 H), 7,66 - 7,73 (m, 2 H), 7,47 - 7,56 (m, 2 H), 7,43. 7,44 (m, 1 H), 7,33 - 7,40 (m, 1 H), 4,10- 4,18 (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 405 (M + 1).

Ejemplo 37

N-((2-(2-Clorofenil)-6-fluoroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen105

Preparado segun el procedimiento H usando (2-(2-clorofenil)-6-fluoroquinolin-3-il)metanamina (0,080 g, 0,279 mmol), 6-cloropurina (0,065 g, 0,42 mmol, 1,5 eq.) y DlEA (0,56 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((2-(2- clorofenil)-6-fluoroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 1683 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,44 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 8,07 - 8,11 (m, 2 H), 7,66 - 7,71 (m, 1 H), 7,59 - 7,66 (m, 1 H), 7,49 - 7,55 (m, 2 H), 7,40 - 7,46 (m, 1 H), 7,34 - 7,40 (m, 1 H), 4,05 - 4,17 (m, 2 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 405 (M + 1).

Ejemplo 38

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15

20

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Preparado segun el procedimiento H usando (2-(2-clorofenil)-6,7-difluoro-quinolin-3-il)metanamina (0,080 g, 0,279 mmol), 6-cloropurina (0,065 g, 0,42 mmol, 1,5 eq.) y DIEA (0,56 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((2- (2-clorofenil)-6,7-difluoroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 551 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,46 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,83 - 7,94 (m, 3 H), 7,49 - 7,55 (m, 2 H), 7,41 - 7,48 (m, 1 H), 7,35 - 7,41 (m, 1 H), 4,89-4,85 (m, 2H), Espectro de masas (ESI) m/e = 423 (M + 1).

Ejemplo 39

N-((2-(2-(Benciloxi)-5-fluorofenil)-8-cloroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (2-(2-(benciloxi)-5-fluorofenil)-8-cloroquinolin-3-il)metanamina (0,021 g, 0,053 mmol), 6-cloropurina (0,012 g, 0,06 mmol, 1,5 eq.) y DIEA (0,1 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((2-(2-(benciloxi)-5-fluorofenil)-8-cloroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 31 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,38 (s, 1 H),8,12 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,52 - 7,59 (t, 1 H), 7,21 - 7,25 (m, 2 H), 7,19 (m, 4 H), 7,06 - 7,12 (m, 2 H), 5,05-5,10 (m, 2H), 4,904,96 (s, 2H), Espectro de masas (ESI) m/e - 511 (M + 1).

Ejemplo 40

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinoIin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3- il)etil)-9H-purin-6-amina

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Se trato una mezcla de (2-(2-(benciloxi)-5-fluorofenil)-8-cloroquinolin-3-il)-metanamina (0,120 g, 0,40 mmol) en n- butanol (5 ml) con DIEA (0,80 mmol, 2,0 eq.) seguido por 6-cloropurina (0,075 g, 0,48 mmol, 1,2 eq.) a 100°C durante 8 h. Se concentro la mezcla de reaccion y se purifico mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM usando un gradiente del 0 al 100% de cH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para proporcionar la mezcla de N-((S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(8-cloro-2- (3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina. La separacion adicional mediante HPLC quiral con columna IA a IPA/hexano (al 10%) proporciona N-((S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 6 nM] como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,43 (s, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,73 - 7,80 (m, 2 H), 7,48 - 7,53 (m, 1 H), 7,44 - 7,49 (m, 1 H), 7,35 - 7,44 (m, 2 H), 7,04 - 7,11 (m, 1 H), 1,44-1,47 (d, 3H), Espectro de masas (ESI) m/e = 419 (M + 1) y N-((R)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 424 nM] como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm, 8,56 (s, 1 H), 8,17 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,84 - 7,93 (m, 2 H), 7,45 - 7,66 (m, 4 H), 7,14 - 7,23 (m, 1 H), 3,89 - 3,98 (m, 1 H), 1,57- 1,60 (d, 3H) Espectro de masas (ESI) m/e = 419 (M + 1).

Ejemplo 41

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Preparado segun el procedimiento H usando (1S)-1-(8-cloro-2-(2-cloro-5-fluoro-fenil)quinolin-3-il)etanamina (0,072 g, 5 0,215 mmol), 6-cloropurina (0,040 g, 0,26 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,42 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo

N-((S)-1-(8-cloro-2-(2-doro-5-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 8 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,68 (s, 1 H), 8,60 (s, 1 H), 8,02 - 8,10 (m, 2 H), 7,92 - 7,99 (m, 1 H), 7,85 - 7,93 (m, 1 H), 7,54 - 7,63 (m, 1 H), 7,50 (dd, J=8,80, 4,89 Hz, 1 H), 7,07 (td, J=8,61, 3,13 Hz, 1 H), 5,48-5,65 (m, 1H), 1,71 (d, J= 7,04 Hz, 3H), Espectro de masas (ESI) m/e = 454 (M + 1).

10 Ejemplo 42

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)propil)-9H-purin-6-amina

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Se trato una mezcla de 1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)propan-1-amina (0,060 g, 0,19 mmol) en n-butanol (5 ml) con DIEA (0,38 mmol, 2,0 eq.) seguido por 6-cloropurina (0,029 g, 0,19 mmol, 1,0 eq.) a 100°C durante 8 h. Se 15 concentro la mezcla de reaccion y se purifico mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch como eluyente para proporcionar la mezcla de N-((S)-1-(8-cloro-2-(3-fluoro-fenil)quinolin-3-il)propil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(8-cloro-2-(3- fluorofenil)quinolin-3-il)propil)-9H-purin-6-amina. La separacion adicional mediante HPLC quiral con columna IA a IPA/hexano (al 10%) proporciona N-((S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)propil)-9H-purin-6-amina [CI50 de 20 PI3K8 = 13 nM] como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,39 (s, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,72 - 7,78 (m, 2 H), 7,51 - 7,60 (m, 2 H), 7,38 -7,47 (m, 2 H), 7,10 - 7,16 (m, 1 H), 3,82 (m, 1H), 1,74 - 1,84 (m, 2 H), 1,03 - 1,11 (t, 3 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 433 (M + 1)

Ejemplo 43

N-((S)-1-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoIin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina

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imagen111

Preparado segun el procedimiento H usando (1S)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-quinolin-2-il)etanamina (0,050 g, 0,166 mmol), 6-cloropurina (0,031 g, 0,20 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,33 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((S)-

1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinolin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina [PI3K8 IC5O = 5 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 9,22 (s, 1 H), 8,63 (s, 1 H), 8,44 - 8,47 (m, 3 H), 8,42 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,87 - 30 7,94 (m, 2 H), 7,56 (t, 1 H), 1,79 (d, 3H), Espectro de masas (ESI) m/e = 419 (M + 1).

5

10

15

20

25

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Preparado segun el procedimiento H usando (1S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-4-il)-quinolin-3-il)etanamina (0,045 g, 0,155 mmol), 6-cloropurina (0,029 g, 0,19 mmol; 1,2 eq.) y DiEa (0,33 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N-((S)- 1 -(8-cloro-2-(tiazol-4-il)quinolin-3-il)etM)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 16 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 9,22 (s, 1 H), 8,63 (s, 1 H), 8,44 - 8,46 (m, 1 H), 8,42 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,88 7,93 (m, 2 H), 7,56 (t, 1 H), 1,77 (d, 3H), Espectro de masas (ESI) m/e = 408 (M + 1).

Ejemplo 45

N-((S)-1-(7-Fluoro-2-(piridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Preparado segun el procedimiento H usando (1S)-1 -(7-fluoro-2-(piridin-3-il)-quinolin-3-il)etanamina (0,067 g, 0,236 mmol), 6-cloropurina (0,044 g, 0,283 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,48 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N- ((S)-1-(7-fluoro-2-(piridm-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 23 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,99 (s, 1 H), 8,57 - 8,65 (m, 2 H), 8,33 (d, J=7,83 Hz, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 7,85 - 7,96 (m, 2 H), 1,62 (d, 3 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 402 (M + 1).

Ejemplo 46

N-((S)-1-(7-Fluoro-2-(tiofen-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen114

Preparado segun el procedimiento H usando (1S)-1-(7-fluoro-2-(tiofen-2-il)-quinolin-3-il)etanamina (0,078 g, 0,286 mmol), 6-cloropurina (0,053 g, 0,344 mmol, 1,2 eq.) y DIEA (0,58 mmol, 2,0 eq.) en n-butanol (3 ml). Se obtuvo N- ((S)-1-(7-fluoro-2-(tiofen-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina [CI50 de PI3K8 = 8 nM], tras purificacion, como un solido blanco. 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,62 (s, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,37 (s, 1 H), 8,00 - 8,07 (m, 1 H), 7,62 - 7,73 (m, 3 H), 7,43 - 7,51 (m, 1 H), 7,18 (m 1H), 1,78 (d, J=7,04 Hz, 3 H), 1 H), Espectro de masas (ESI) m/e = 391 (M + 1).

Ejemplo 47

5

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imagen115

Se disolvio 2,5-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (2,46 g, 11 mmol) en THF (70 ml) y se sumergio en un bano de hielo. Se anadio bromuro de metilmagnesio (5,4 ml, 16 mmol) y se retiro el bano de hielo. Tras 10 min. Se vertio la mezcla de reaccion en HCl 1,0 N y se extrajo con EtOAc. Se seco la fase organica con sulfato de sodio, se filtro y se concentro. Se cromatografio el residuo en una columna de 80 g de gel de sflice con el 0-40% de EtOAc:Hex. Se combinaron las fracciones deseadas y se concentraron para producir un solido blanquecino, cristalino. 1H-RMN (400 MHz, DCM-d2) 8 ppm 1,60 (d, J=6,26 Hz, 3 H) 2,35 (s. a., 1 H) 5,36 (q, J=6,39 Hz, 1 H) 7,61 - 7,67 (m, 2 H) 7,87 - 7,94 (m, 1 H) 8,75 (s, 1 H). CL-EM (+esi, M+H+=242,1).

2-(1 -(2,5-Dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona.

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Se anadio DCM (2 ml) a 1-(2,5-dicloroquinolin-3-il)etanol (200 mg, 826 |imol). Se anadio cloruro de tionilo (301 |il, 4131 |imol). Se obtuvo una disolucion incolora transparente en el plazo de minutos. Se concentro la mezcla de reaccion hasta sequedad en el rotavapor para obtener un aceite, que se uso sin purificacion adicional. CL-EM (+esi, M+H+=260,0). Se disolvio 2,5-dicloro-3-(1-cloroetil)quinolina (215 mg, 825 |imol) en DMF (2 ml) y se anadio ftalimida (127 mg, 866 |imol) y K2CO3 (228 mg, 1650 |imol). Se sumergio en un bano de aceite y se comenzo a calentar hasta 55°C. Tras 10 min, se elevo la temperatura del bano de aceite hasta 80°C. Tras 30 minutos mas, se repartio la mezcla de reaccion entre EtOAc:H2O. Se lavo la fase organica con agua (3X), se seco con sulfato de sodio, se filtro y se concentro. Se cromatografio el solido en bruto en una columna de 12 g de gel de silice con el 0-20% de EtOAc:Hex. Se combinaron las fracciones deseadas y se concentraron para producir un solido blanco cristalino. 1H- RMN (400 MHz, diclorometano-d2) 8 ppm 1,99 (d, J=7,04 Hz, 3 H) 5,93 (q, J=7,17 Hz, 1 H) 7,64 - 7,70 (m, 2 H) 7,71 - 7,76 (m, 2 H) 7,77 - 7,83 (m, 2 H) 7,88 - 7,93 (m, 1 H) 8,95 (s, 1 H). CL-EM (+esi, M+H+=371,0).

2(1 -(5-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona.

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Se transfirio 2-(1 -(2,5-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (197 mg, 531 |imol) desde un matraz de 100 ml a un matraz de 10 ml mediante disolucion/formacion de suspension espesa en tolueno y concentracion. Se anadio Pd(Ph3P)4 (61 mg, 53 |imol) y 2-tri-n-butilestannilpiridina (955 |il, 2653 |imol). Se burbujeo argon a traves de la mezcla durante 30 s. Se equipo con condensador y entrada de nitrogeno. Se calento a 110°C durante ~ 16 h. Se concentro la mezcla de reaccion y se cromatografio en una columna de 12 g de gel de sflice con el 0-60% de EtOAc. Se combinaron las fracciones deseadas y se concentraron para producir un aceite. RMN indica EtOAc residual. CL. 1H-RMN (400 MHz, diclorometano-d2) 8 ppm 1,98 (d, J=7,04 Hz, 3 H) 6,38 (q, J=7,04 Hz, 1 H) 7,24 - 7,37 (m, 1 H) 7,62 - 7,76 (m, 8 H) 8,01 (dd, J=8,61, 1,96 Hz, 1 H) 8,56 - 8,66 (m, 1 H) 9,02 (s, 1 H). -EM (+esi, M+H+=414,1)

imagen118

Se le anadio 2-(1 -(5-cloro-2-(piridin-2-il)quinoMn-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (220 mg, 532 |imol) a EtOH. A la suspension espesa resultante se le anadio hidrato de hidrazina (133 |il, 2658 |imol) y se calento la mezcla en un bano de aceite a 80°C durante 3 h. Se enfrio la mezcla de reaccion hasta temperatura ambiente, se filtro y se 5 enjuago con EtOH (~10 ml). Se acidifico el filtrado con 1,0 N HCl (~5 ml) y se concentro en el rotavapor para eliminar el etanol. Precipito una cantidad minoritaria de solido y se retiro mediante filtracion. Se neutralizo el filtrado con carbonato de sodio solido y se extrajo (2X) con DCM:lpA (4:1). Se secaron los extractos organicos con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para obtener 103 mg (68%) de un solido/pelicula. CL-EM (+esi, M+H+=284,0). 1H-RMN (400 MHz, diclorometano-d2) 8 ppm 1,42 (d, J=6,65 Hz, 3 H) 4,71 (q, J=6,65 Hz, 1 H) 7,38 - 7,42 (m, 1 H) 10 7,60 - 7,68 (m, 2 H) 7,88 - 7,97 (m, 2 H) 8,02 (dq, J=7,78, 0,80 Hz, 1 H) 8,68 - 8,71 (m, 1 H) 8,82 (t, J=0,78 Hz, 1 H).

CL-EM (+esi, M+H+=284,0).

N-(1-(5-Cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina.

imagen119

Se anadio 1-(5-cloro-2-(piridin-2-il)quinolin-3-il)etanamina (103 mg, 363 |imol), 6-bromopurina (72 mg, 363 |imol), n- 15 butanol (2 ml) y DIPEA (190 |il, 1089 |imol) a un matraz de 10 ml. Se sumergio en un bano de aceite y se calento a 110°C durante 40 h. Se concentro la mezcla de reaccion en el rotavapor hasta ~ 0,5 ml de disolvente, se diluyo con DCM, y se cromatografio con el 0-15% de MeOH:DCM en una columna de 12 g de gel de silice. Se combinaron las fracciones deseadas y se concentraron para dar un aceite que se disolvio en ACN:H2O y se liofilizo para obtener 100 mg (69%) de un solido de color tostado claro. CL-EM (+esi, M+H+=402,1).

20 N-(1-(8-cloro-2-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Se le anadio hidrato de hidrazina (1,37 g, 27,4 mmol, 10 eq.) a una suspension espesa de 2-(1 -(2,8-dicloroquinolin-

3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (1,02 g, 2,74 mmol) en etanol (30 ml) a 70°C para formar una disolucion transparente. En un corto tiempo, comienza a formarse un precipitado. Se anadio etanol adicional (20 ml) para facilitar la agitacion. Se 25 aumento la temperatura hasta reflujo y se continuo durante la noche. Se retiraron los solidos mediante filtracion. Se concentro el filtrado para minimizar la cantidad de etanol y se redisolvio en DCM. Se lavo la fase organica con agua, luego se seco sobre MgSO4, y se concentro para proporcionar la arilhidrazina como un solido amarillo, p.f. 133°C, 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,2 (1H, s a), 7,854 (1H, s), 7,635 (1 H, dd, J=8, 1,5 Hz), 7,620 (1 H, dd, J=8, 1,5 Hz), 7,139 (1 H, t, J=8 Hz), 4,635 (2 H, s a), 4,164 (1 H, q, J=6,5 Hz), 2,167 (2 H, s a), 1,359 (3 H, d, J=6,5 Hz) 30 CL-EM-ESI (POS), M/Z, M+1: Hallado 237,1

Se trato la arilhidrazina intermedia (0,067 g, 0,66 mmol) con 2,4-pentanodiona (0,046 ml, 2 eq.) en etanol a una temperatura del bano de 75°C durante la noche. Se elimino el disolvente residual a vacfo para dar un aceite de color naranja (~ 0,1 g). Se anadio 6-bromopurina (66 mg, 1,5 eq.) junto con etanol (3 ml) y trietilamina (3 eq.). Se calento la suspension a 80°C durante la noche. La reaccion era incompleta de modo que se sustituyo el disolvente por n- 35 pentanol y trietilamina (3 eq.) y se calento a 130°C durante 4 h. Se elimino el disolvente a vacfo y se purifico el

residuo mediante cromatograffa ultrarrapida sobre gel de silice con DCM y cantidades crecientes de metanol hasta el 5%. Se combinaron las fracciones que conteman el producto deseado para proporcionar N-(1-(8-cloro-2-(3,5- dimetil-1 H-pirazol-1-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina. 1H-RMN a 125°C (500 MHz, DMSO-d6), 8 ppm 12,5 (1H, s a), 8,721 (1H, s), 8,046 (1H, s), 7,975 (1H, s a), 7,935 (1 H, d, J=7,5 Hz), 7,892 (1 H, d, J=7,5 Hz), 7,62 (1H, s a), 5 7,561 (1 H, t, J=7,5 Hz), 6,124 (1H, s), 5,860 (1H, a m), 2,453 (3 H, s), 2,264 (3 H, s), 1,619 (3 H, d, J=7 Hz) CL-EM-

ESI (POS), M/Z, M+1: Hallado 419,1

Ejemplo 48

N-(2-Fluorofenil)cinamamida

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10 A una disolucion de 2-fluoroanilina (25,0 g, 225 mmol) y carbonato de potasio (47 g, 337 mmol) en agua (112 ml) y acetona (45 ml) a 0°C se le anadio cloruro de cinamoflo (37 g, 225 mmol, 1 eq.) en acetona (45 ml) a lo largo de 2 h. Se agito la reaccion durante 1 h a 0°C, luego se extinguio en 200 ml de hielo-agua. Se filtro el solido blanco cristalino y se lavo con agua. Se seco el solido al aire durante 2 h, luego se lavo con 400 ml de hexanos. Se seco el solido a vado durante la noche para proporcionar el producto. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,49 (a t, J = 7,8Hz, 1H), 15 7,80 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 7,57 (m, 3H), 7,41 (m, 3H), 7,17 (m, 3H), 6,61 (d, J = 15,6 Hz, 1H). Espectro de masas

(ESI) m/e = 242,1 (M + 1).

2-Cloro-8-fluoroquinoIina

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Se disolvio N-(2-fluorofenil)cinamamida (10,5 g, 44 mmol) en clorobenceno (60 ml) y se le anadio tricloruro de 20 aluminio (29 g, 218 mmol, 5 eq.). Se calento la reaccion hasta 125°C durante 3 h y luego se enfrio hasta t.a. a lo largo de 45 minutos. Se vertio la reaccion sobre 300 g de hielo con agitacion, produciendo un solido de color tostado. Se filtro el solido y se lavo con 100 ml de agua y 3 x 100 ml de hexanos y se seco a alto vado. Se extrajo el solido con 1 l de DCM y se filtro para retirar los subproductos insolubles. Se elimino el disolvente a vado para proporcionar 8-fluoroquinolin-2(1 H)-ona. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 10,95 (s a, 1H), 7,77 (dd, J = 9,8, 1,6 Hz), 7,35 (d, J = 25 7,8 Hz, 1H), 7,27 (ddd, J = 10,2, 7,8, 1,2 Hz, 1H), 7,14 (td, J = 8,0, 5,1 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 9,4 Hz, 1H). Se formo

una suspension espesa de 8-fluoroquinolin-2(1H)-ona (26 g, 159 mmol) en tricloruro de fosforilo (163 ml, 1753 mmol, 11 eq.) y se calento hasta 125 durante 2 h. Se enfrio la reaccion hasta t.a. y se vertio sobre 1,2 l de hielo-agua con agitacion vigorosa. Cuando se hubo enfriado la mezcla hasta t.a., se filtro el solido de color naranja y se lavo con agua y se seco a vado durante la noche para proporcionar 27 g de material en bruto. Se recristalizo el material en 30 bruto en hexanos mediante disolucion en ~700 ml de hexanos a reflujo y decantacion del alquitran residual. Se enfrio la disolucion en hexano hasta 0°C y se filtro el precipitado de 2-cloro-8-fluoroquinolina. Se concentraron las aguas madre a vado y se recristalizaron en hexanos para obtener una segunda produccion de 1-cloro-8-fluoroquinolina. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,14 (dd, J = 8,6, 1,2 Hz, 1H), 7,62 (a d, 1H), 7,52 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,45 (m, 2H).

35 1-(2-Cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol

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Se disolvio 2-cloro-8-fluoroquinolina (182 mg, 1,0 mmol) en THF (2 ml) y se enfrio hasta -78°C. A esta disolucion se le anadio diisopropilamiduro de litio (disolucion 1 M en THF, 1,1 ml, 1,1 mmol, 1,1 eq.). Se permitio agitar la reaccion a - 78°C durante 20 min, tiempo tras el cual se anadio acetaldelddo (113 |il, 2,0 mmol, 2 eq.) mediante jeringa. Tras 40 30 minutos, se extinguio la reaccion con agua y se diluyo con acetato de etilo. Se separaron las fases y se lavo con

salmuera. Se purifico la mezcla de reaccion en bruto mediante cromatograffa en columna (hexanos:acetato de etilo 8:2) para proporcionar 1-(2-cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,43 (s a, 1H), 7,64 (td, J = 7,8, 5,1 Hz, 1H), 7,41 (ddd, J = 10,2, 7,4, 1,2 Hz, 1H), 5,39 (qdd, J = 6,3, 3,9, 0,8 Hz, 1H), 2,22 (d, J = 3,9 Hz,

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A un matraz de fondo redondo que contema tolueno (183 ml) se le anadio 1-(2-cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol (6,2 5 g, 27,5 mmol) y dioxido de manganeso (19,1 g, 219,8 mmol, 8 eq.). Se calento la reaccion hasta reflujo durante 2 h, se enfrio hasta t.a., se filtro y se concentro. Se diluyo el producto con hexanos y se filtro para dar como un solido blanco, 1-(2-cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanona. 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 8 ppm 8,40 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,71 (a d, J - 8,2 Hz, 1H), 7,56 (td, J = 7,8, 5,1 Hz, 1H), 7,54 (ddd, J = 9,8, 7,8, 1,6 Hz, 1H). Espectro de masas (ESI) m/e = 223,9 (M + 1).

10 (R)-1-(2-Cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol

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En un matraz de fondo redondo se disolvio (+)-dip-chlorideTM (4418 mg, 13773 |imol) en THF anhidro (50 ml) y se enfrio la disolucion hasta -55°C (usando un bano de hielo seco/MeCN). A esta disolucion se le anadio 1-(2-cloro-8- fluoroquinolin-3-il)etanona (1,4 g, 6,3 mmol) como una disolucion en THF (10 ml). Se permitio que se calentase la 15 reaccion hasta +10°C a lo largo de 5 h. Se extinguio la reaccion con 10 ml de acetona y 20 ml de Na2CO3 al 10% y se permitio agitar durante 1 h a t.a. Se le anadio acetato de etilo (200 ml) y se separaron las fases. Se lavo la fase organica tres veces con una disolucion saturada al 50% de bicarbonato de sodio y una vez con salmuera. Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro para proporcionar 5 g de material en bruto. Se purifico el material en bruto usando hexanos:acetato de etilo 7:3 en una columna de 120 g de gel de silice para proporcionar 20 (R)-1-(1-cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol. HPLC quiral (IPA al 10% en hexanos, Chiralcel AD) muestra que el producto esta en un e.e. del 96,0%. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,43 (s a), 7,64 (a d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,50 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,41 (ddd, J = 10,2, 7,8, 1,2 Hz, 1H), 5,40 (qd, J = 5,9, 0,8 Hz, 1H), 2,22 (s a, 1H), 1,62 (d, J = 6,3 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 226,0 (M + 1).

(S)-3-(1-Azidoetil)-2-cloro-8-fluoroquinolina

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Se disolvio trifenilfosfina (1,81 g, 6,9 mmol, 1,2 eq.) en THF anhidro (30 ml) y se enfrio hasta 0°C. A esta disolucion se le anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,36 ml, 6,9 mmol, 1,2 eq.). Se agito la reaccion durante 30 minutos a 0°C y se le anadio (R)-1-(2-cloro-8-fluoroquinolin-3-il)etanol (1,3 g, 5,7 mmol) en 30 ml de THF, seguido por difenilfosforilazida (1,37 ml, 6,3 mmol, 1,1 eq.). Se permitio que se calentase la reaccion hasta t.a. y agitase a t.a. 30 durante la noche. Se deposito la reaccion sobre gel de sflice y se concentro. La purificacion mediante cromatograffa en columna (etoac al 3% en hexanos) proporciono (S)-3-(1-azidoetil)-2-cloro-8-fluoro-quinolina 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 8 ppm 8,30 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,67 (a d, J = 8,22 Hz, 1H), 7,54 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,45 (ddd, J = 10,2,

7,8, 1,2 Hz) 5,22 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 1,68 (d5 J = 6,7 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 250,9 (M + 1).

Procedimientos generales para analogos de 8-fluoroquinolina:

35 Procedimiento BSL-1

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A un matraz de fondo redondo se le anadio (S)-3-(1-azidoetil)-2-cloro-8-fluoro-quinolina (1 eq.), tetrakistrifenilfosfina- paladio (0) (0,04 eq.), carbonato de sodio (5 eq.) y un acido arilboronico (1,5 eq.). Se purgo el matraz con nitrogeno y se le anadio una mezcla 3:1 de MeCN:H2O para dar una concentracion de 0,1 M con respecto a la azida de partida. Se calento la reaccion hasta 80°C hasta que se considero completa. Se elimino el disolvente y se redisolvio el residuo en acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y se lavo la fase organica con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Se purifico la reaccion en bruto en cromatograffa en columna (acetato de etilo en hexanos, gradiente) para proporcionar (S)-3-( 1 -azidoetil)-8-fluoro-2-arilquinolina.

Procedimiento BSL-2

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Se disolvio (S)-3-(1-azidoetil)-8-fluoro-2-arilquinolina en THF (para producir una disolucion 0,1 M) y se le anadieron trifenilfosfina (1,1 eq.) y agua (20 eq.). Se calento la reaccion hasta 60°C durante la noche. Tras enfriar hasta t.a., se elimino el disolvente a vado y se redisolvio el residuo en etil eter. Se extrajo la fase de eter tres veces con HCl 1 N. Se llevo la fase acuosa a un pH de 10-12 mediante la adicion de NaOH al 15% y se extrajo la fase acuosa basica dos veces con etil eter. Se lavaron las fases de eter con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar (S)-1-(8-fluoro-2-arillquinolin-3-il)-etanamina.

Procedimiento BSL-3

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A un matraz de fondo redondo se le anadio (S)-1-(8-fluoro-2-arillquinolin-3-il)-etanamina (1 eq.), 6-bromopurina (1,2 eq.) y diisopropiletilamina (3 eq.). Se anadio suficiente n-butanol para preparar una 0,1 disolucion M con respecto a la (S)-1-(8-fluoro-2-arillquinolin-3-il)etanamina. Se calento la mezcla hasta 100-115°C durante 24 h, se enfrio hasta t.a., y se elimino el disolvente a vado. La purificacion mediante HPLC de fase inversa proporciono (S)-N-(1-(8-fluoro- 2-ariiquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina. Se disolvieron los productos en DCM / NaHCO3 y se separo la fase organica, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro para proporcionar (S)-N-(1-(8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)etil)- 9H-purin-6-amina como bases libres.

Ejemplo 49

3-((S)-1-Azidoetil)-8-fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolina

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usando (S)-3-(1-

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azidoetil)-2-cloro-8-fluoroquinolina (50 mg, 0,199 mmol), tetrakistrifenilfosfina-paladio (0) (9 mg, 0,008 |imol, 0,04 eq.), carbonato de sodio (106 mg, 0,997 mmol, 5 eq.) y acido 3-fluoro-fenilboronico (42 mg, 0,299 mmol, 1,5 eq.). Se obtuvo 3-((S)-1-azidoetil)-8-fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolina tras purificacion. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,39 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,71 (a d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,54 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,52-7,42 (serie de m, 2H), 7,35 (dt, J =

7,8, 1,2 Hz), 7,31 (ddd, J = 9,0, 2,4, 1,6 Hz, 1H), 7,20 (tdd, J = 8,6, 2,7, 1,2 Hz, 1H), 4,94 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 310,9 (M + 1).

(1S)-1-(8-Fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina

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Se preparo (1S)-1-(8-fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina segun el procedimiento BSL-2 usando 3-((S)-1- azidoetil)-8-fluoro-2-(3-fluoro-fenil)quinolina (54 mg, 0,174 mmol), trifenilfosfina (50 mg, 0,191 mmol) y agua (63 |il, 3,480 mmol). Se obtuvo (1S)-1-(8-fluoro-2-(3-fluorofenil)-quinolin-3-il)etanamina. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,51 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,65 (a d, J = 8,21 Hz, 1H), 7,52-7,42 (serie de m, 2H), 7,39 (ddd, J = 10,5, 7,4, 1,2 Hz, 1H), 7,34 (dt, J = 7,5, 1,2 Hz, 1H), 7,30 (ddd, J = 9,4, 2,7, 1,6 Hz, 1H), 7,16 (tdd, J = 8,6, 2,4, 0,8 Hz, 1H), 4,48 (q, J = 6,2 Hz, 1H), 1,37 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 285,0 (M + 1).

N-((S)-1-(8-Fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Se preparo N-((S)-1-(8-fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina segun el procedimiento BSL-3 usando N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (27 |il, 155 |imol), 6-bromo-7H-purina (18 mg, 93 |imol) y (1S)-1-(8-fluoro-2- (3-fluorofenil)quinoIin-3-il)etanamina (22 mg, 77 |imol). Se aislo N-((S)-1-(8-fluoro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)- 7H-purin-6-amina. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,33 (s, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,65-7,61 (m, 2H), 7,52 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,47-7,39 (serie de m, 2H), 7,35 (ddd, J = 10,6, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 6,76 (s a, 1H), 5,80 (s a, 1H), 1,51 (d, J - 7,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESl) m/e = 403,0 (M + 1).

Se prepararon los siguientes compuestos segun la secuencia (BSL-1 ^ BSL-2 ^ BSL-3) descrita anteriormente. A continuacion se enumeran los datos para estos compuestos:

Ejemplo 50

(S)-N-(1-(8-Fluoro-2-fenilquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Datos para (S)-N-(1-(8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina:

1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,32 (s, 2H), 7,95 (s, 1H), 7,84 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 6,41 (s

a, 1H), 5,83 (s a, 1H), 1,50 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 385,0 (M + 1). Ejemplo 51

N-((S)-1-(2-(2-Clorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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5 Datos para N-((S)-1-(2-(2-clorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm (presentes rotomeros a temperatura ambiente) 8,42-8,35 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,71-7,23 (serie de m, 5H), 6,27 (s a, 1H), 5,60 (m a, 1H), 1,66 (m, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 418,9 (M + 1).

Ejemplo 52

(S)-N-(1-(2-(3,5-Difluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

10

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Datos para (S)-N-(1-(2-(3,5-difluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 8,35 (s, 2H), 8,00 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,46 (m, 3H), 7,38 (ddd, J = 10,6, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 6,90 (tt, J = 9,0, 2,4 Hz, 1H), 6,50 (s a, 1H), 5,80 (s a, 1H), 1,53 (d, J = 6,4 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 420,9 (M + 1).

15 Ejemplo 53

N-((S)-1-(8-Fluoro-2-(piridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Datos para N-((S)-1-(8-fluoro-2-(piridin-3-il)quinolin-3-il)etM)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 9,15 (s, 1H), 8,71 (dd, J = 4,7, 1,6 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,22 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,54 (d J 20 = 7,4 Hz, 1H), 7,46-7,41 (m, 2H), 7,36 (ddd J = 10,2, 7,4, 1,2 Hz, 1H), 6,67 (s a, 1H), 5,74 (s a, 1H), 1,53 (d, J = 6,7

Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 385,9 (M + 1).

Ejemplo 54

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Datos para N-((S)-1-(2-(2-cloro-5-fluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 8 5 ppm (presentes rotomeros a temperature ambiente) 8,43-8,37 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,69-7,39 (m, 3H), 7,16-7,01 (m, 2H), 6,39 (s a, 1H), 5,60 (m a, 1H), 1,68 (d, J = 5,9 Hz, 3H).

Espectro de masas (ESI) m/e = 436,9 (M + 1).

Ejemplo 55

N-((S)-1-(2-(2,5-Difluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Datos para N-((S)-1-(2-(2,5-difluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 8 ppm 8,37 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,49 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 7,40 (ddd, J = 10,6, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 7,08 (m, 2H), 6,40 (s a, 1H), 5,55 (s a, 1H), 1,67 (d, J = 7,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 420,9 (M + 1).

15 Ejemplo 56

N-((S)-1-(2-(3-cloro-5-fluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Datos para N-((S)-1-(2-(3-cloro-5-fluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,60 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (m, 2H), 7,21 (dt, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 20 5,70 (s a, 1H), 1,62 (d, J = 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 436,9 (M + 1).

Ejemplo 57

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Datos para N-((S)-1-(2-(5-cloro-2-fluorofenil)-8-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,36 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,73 (s a, 1H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,48 (td, J = 7,8, 4,7 Hz, 1H), 5 7,38 (ddd, J = 10,6, 7,8, 1,2 Hz, 1H), 7,31 (m, 1H), 7,08 (s a, 1H), 6,61 (s a, 1H), 5,55 (s a, 1H) 1,69 (d, J = 7,0 Hz,

3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 436,9 (M + 1).

Ejemplo 58

(S)-N-(1-(8-Fluoro-2-(4-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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10 Datos para (S)-N-(1-(8-fluoro-2-(4-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,37 (S, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,97 (m, 3H), 7,73 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,48 (td, J = 7,8, 5,1 Hz, 1H), 7,39 (ddd, J = 10,6, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 6,49 (s a, 1H), 5,77 (s a, 1H), 1,56 (d, J = 7,0 Hz, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 453,0 (M + 1).

Ejemplo 59

15 (E)-N-Benciliden-2-fluorobencenamina

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Se disolvio 2-fluoroamhna (2,0 ml, 20,8 mmol, 1,05 eq.) en 40 ml de eter anhidro. Se anadio sulfato de magnesio (7146 mg, 59,3 mmol, 4 eq.), 7 g de tamices mol. en polvo y benzaldehfdo (2,0 ml |il, 19,8 mmol). A esta mezcla se le anadiO pTsOH (18,8 mg, 98,9 |imol, 0,005 eq.) y se calento hasta reflujo durante la noche. Se enfriO la reacciOn, 20 se filtrO y se concentrO para producir (E)-N-benciliden-2-fluorobencenamina 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,55 (s, 1H), 7,95 (m, 2H), 7,52 (m, 5H), 7,18 (m, 4H).

N-((8-Fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metil)acetamida

imagen143

Se disolviO 1-(azet-1(2H)-il)etanona (22 mg, 227 |imol, 1 eq.), (E)-N-benciliden-2-fluorobencenamina (45 mg, 227

|imol, 1 eq.), 2-fluorobencenamina (22 |il, 227 |imol, 1 eq.) y trifluorometanosulfonato de itrio (6 mg, 11 |imol, 0,05 eq.) en 9 ml de acetonitrilo. Se agito la reaccion a t.a. durante la noche. Se calento la reaccion hasta 90°C durante 5 h. Se enfrio la reaccion hasta t.a. y se elimino el disolvente a vado. Se disolvio el residuo en 20 ml de DCM y se lavo con 1 x 5 ml de NaHCO3. Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro. La purificacion mediante 5 cromatograffa en columna (hexanos:acetato de etilo 7:3) proporciono N-((8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metil)acetamida.

1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 8 ppm 8,20 (s, 1H), 7,60 (d, J = 7,83, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,45 (m, 4H), 7,37 (ddd, J = 10,6,

7,8, 1,6 Hz, 1H), 5,92 (a t, J = 5,9 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 1,96 (s, 3H). Espectro de masas (ESI) m/e = 295,0 (M + 1).

(8-Fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metanamina

10

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A N-((8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metil)acetamida (28 mg, 95 |imol) se le anadio acido clorlddrico (disolucion 2 M en agua, 2 ml, 4000 |imol). Se calento la reaccion hasta 80°C durante 24 h. Se enfrio la reaccion hasta t.a. y se extinguio con NaOH al 15%. Se extrajo el producto en eter (2 x 10 ml) y se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar (8-fluo ro-2-fe nilquinoIin-3- 15 il)metanamina. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,34 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,61 (m, 2H), 7,48 (m, 4H), 7,39 (ddd, J= 10,6, 7,8, 1,6 Hz, 1H), 4,05 (s, 2H), 2,03 (s a, 2H). Espectro de masas (ESI) m/e = 253,0 (M + 1).

N-((8-Fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

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A un matraz de reaccion se le anadio 6-bromopurina (19 mg, 95 |imol, 1,2 eq.), diisopropiletilamina (42 |il, 238 |imol, 20 3 eq.), (8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)-metanamina (20 mg, 79 |imol, 1 eq.) y n-butanol (0,75 ml). Se calento la reaccion

hasta 110°C durante 8 h. Se enfrio la reaccion hasta t.a. y se elimino el disolvente a vado. Se purifico el compuesto mediante HPLC de fase inversa. Se concentraron las fracciones y se formaron las bases libres con NaHCO3 sat. Se extrajo la fase organica en DCM, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro para proporcionar un solido blanco N-((8-fluoro-2-fenilquinolin-3-il)metil)-7H-purin-6-amina. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,35 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 25 7,90 (s, 1H), 7,68 (m, 2H), 7,45 (m, 6H), 6,78 (s a, 1H), 5,07 (s a, 2 H). Espectro de masas (ESI) m/e = 370,9 (M + 1).

Ejemplo 60

(S)-2-( 1 -(8-Cloro-2-vinilquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion con agitacion de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (1 g, 2,7 mmol) en dioxano 30 (25 ml) bajo una atmosfera de nitrogeno se le anadio viniltributilestano (1,28 ml, 4,04 mmol) y

tetrakis(trifenilfosfina)paladio (156 mg, 0,13 mmol). Se calento la reaccion a 100°C durante 3 horas y luego se evaporo el disolvente a vado. Se purifico el residuo negro resultante mediante cromatograffa en columna (40 g de SiO2, hexanos:acetato de etilo, de 1:0 a 3:1) para dar (S)-2-(1-(8-cloro-2-vinilquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido blanco. 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 8 ppm 8,53 (1H, s), 7,76 - 7,81 (4 H, m), 7,68 - 7,72 (2H, m), 7,41

2-((S)-1-(8-Cloro-2-(1,2-dihidroxietN)quinoNn-3-N)etN)isoindoMn-1,3-diona

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5 A una disolucion con agitacion de (S)-2-(1-(8-cloro-2-vinilquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (200 mg, 0,55 mmol) en THF (5 ml) y agua (1,0 ml) se le anadio osmato de potasio (VI) dihidratado (10,2 mg, 27,6 |imol). Se agito la reaccion durante 5 minutos y luego se le anadio NMO (64,6 mg, 0,55 mmol). Se agito la reaccion durante 3 horas y luego se diluyo con acetato de etilo (80 ml) y acido citrico acuoso 1,0 M (40 ml). Se extrajo la fase acuosa separada con acetato de etilo (140 ml) y se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (40 ml), se secaron (MgSO4), se 10 filtraron y se evaporaron a vado para dar 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(1,2-dihidroxietil)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona. Se uso el producto sin purificacion adicional en la siguiente etapa. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,77 (1H, d, J=11,7 Hz), 7,61 - 7,88 (6H, m), 7,49 (1H, q, J=8,1 Hz), 5,95 - 6,17 (1H, m), 5,22 - 5,32 (1H, m), 4,02 - 4,26 (2H, m), 1,941,97 (3H, m). Espectro de masas (ESI) m/e = 396,9 (M + 1).

(S)-8-Cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)quinolin-2-carbaldel'ndo

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A una disolucion con agitacion de 2-((S)-1-(8-cloro-2-(1,2-dihidroxietil)quinolin-3-il)-etil)isoindolin-1,3-diona (170 mg, 0,43 mmol) en THF (4,0 ml) y agua (1,0 ml) se le anadio peryodato de sodio (91,6 mg, 0,43 mmol). Se agito la reaccion a temperatura ambiente durante 3 horas y luego se diluyo con agua (50 ml). Se extrajo la fase acuosa separada con DCM (2 x 50 ml) y se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml), se secaron 20 (MgSO4), se filtraron y se evaporaron a vado para dar (S)-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)-quinolin-2-

carbaldehfdo. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 10,36 (1H, s), 8,59 (1H, s), 7,89-7,91 (1H, m), 7,82-7,86 (3H, m), 7,71-7,73 (2H, m), 7,57-7,61 (1H, m), 6,67 (1H, q, J=7,0 Hz), 2,00 (3 H, d, J=7,0 Hz).

Acido (S)-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)quinolin-2-carboxflico

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25 A una disolucion con agitacion de (S)-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)-quinolin-2-carbaldel'ndo (110 mg, 0,30 mmol) y fosfato de potasio monobasico (41,0 mg, 0,30 mmol) en 2-metil-2-buteno (2 ml), tBuOH (2 ml), DCM (1,0 ml) y agua (2,0 ml) se le anadio clorito de sodio (27,3 mg, 0,30 mmol) en agua (2,0 ml). Se agito la reaccion a temperatura ambiente, durante 2 horas y luego se trato con fosfato de potasio monobasico adicional (41,0 mg, 0,30 mmol) y clorito de sodio (27,3 mg, 0,30 mmol) en agua (2,0 ml). Se agito la reaccion durante 2 horas y luego se 30 diluyo con acido citrico 1,0 M (40 ml) y acetato de etilo (60 ml). Se extrajo la fase acuosa separada con acetato de etilo (2 x 60 ml) y se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (40 ml), se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron a vado para dar acido (S)-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)quinolin-2-carboxflico. 1H-RMN

5

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(S)-N’-Acetil-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)quinolin-2-carbohidrazida

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A una disolucion con agitacion de acido (S)-8-doro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)-quinolin-2-carboxflico (100 mg, 0,26 mmol) en DMF (3,0 ml) se le anadio bicarbonato de sodio (66 mg, 0,79 mmol), HOAt (54 mg, 0/39 mmol), hidrazida acetica (23 mg, 0,31 mmol) y EDC (76 mg, 0,39 mmol). Se agito la reaccion a t.a. durante 2 horas y luego se diluyo con acetato de etilo (60 ml) y agua (20 ml). Se extrajo la fase acuosa separada con acetato de etilo (30 ml) y se lavaron las fases organicas combinadas con LiCl (disolucion acuosa 1,0 M, 30 ml), salmuera (30 ml) y luego se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron a vado para dar (S)-N’-acetil-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil)- quinolin-2-carbohidrazida. 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 8 ppm 10,45 (1H, s), 8,88 (1H, s), 8,64 (1H, s), 7,70 - 7,84 (4H, m), 7,64-7,66 (2H, m), 7,52 (1H, dd, J=5,3, 2,9 Hz), 6,87 (1H, q, J=7,0 Hz), 2,13 (3H, s), 1,98 (3H, d, J=7,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 437,0 (M + 1).

2-((S)-1-(8-Cloro-2-(5-metil-1-3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etil)- isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion con agitacion de (S)-N -acetil-8-cloro-3-(1-(1,3-dioxoisomdolin-2-il)-etil)quinolin-2-carbomdrazida (85 mg, 0,19 mmol) en THF (1,5 ml) y tolueno (3,0 ml) se le anadio reactivo de Lawesson (118 mg, 0,29 mmol). Se calento la reaccion en el microondas a 120°C durante 20 minutos y luego se enfrio hasta temperatura ambiente y se purifico mediante cromatograffa en columna (SiO2, 12 g, hexanos:acetato de etilo, de 1:0 a 1:1) para dar 2-((S)-1-(8- cloro-2-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona. 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,63 (1H, s), 7,77 - 7,84 (4H, m), 7,70 (2H, dd, J=5,3, 2,9 Hz), 7,46 - 7,51 (1H, m), 7,06 (1H, q, J=7,0 Hz), 2,85 (3H, s), 2,11 (3H, d, J=7,0 Hz).

(1S)-1-(8-Cloro-2-(5-metil-13,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etanamina

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A una disolucion con agitacion de 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (30 mg, 69 |imol) en THF (1,0 ml) y etanol (3,0 ml) se le anadio monohidrato de hidrazina (69 |il, 1380 |imol). Se calento la reaccion hasta 90°C durante 40 minutos y luego se enfrio hasta temperatura ambiente y se evaporo a vado. Se diluyo el residuo resultante con acetato de etilo (60 ml) y agua (40 ml) y se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo (30 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera y luego se secaron (MgSO4), se

filtraron y se evaporaron a vado para dar (1S)-1-(8-doro-2-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etanamina. 1H- RMN (500 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,62 (1H, s), 7,79 - 7,84 (2H, m), 7,49-7,52 (1H, m), 5,61 (1H, d, J=6,4 Hz), 2,86 (3H, s), 1,57 (3H, d, J=6,6 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 305,0 (M + 1).

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(5-metil-13,4-tiadiazol-2-M)quinoMn-3-il)etil)-9H- purin-6-amina

5

A una disolucion con agitacion de (1S)-1-(8-cloro-2-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)-quinolin-3-il)etanamina (9 mg, 30 |imol) en 1-butanol (1,5 ml) se le anadio base de Hunig (6 |il, 35 |imol) y 6-cloropurina (5 mg, 30 |imol). Se calento la reaccion hasta 130°C durante 16 horas y luego se enfrio hasta temperatura ambiente. Se purifico la mezcla de reaccion en bruto mediante HPLC de fase inversa (gradiente: de agua al 20% en acetonitrilo a agua al 85% en 10 acetonitrilo) para dar N-((S)-1-(8-cloro-2-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina. 1H-RMN (400 MHz, MeOH-d4) 8 ppm 8,62 (1H, s), 8,05 (1H, s), 7,83-7,89 (2H, m), 7,53-7,57 (1H, m), 2,89 (3H, s), 1,83 (3H, d, J=6,6 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e =423,1 (M + 1).

Ejemplo 61

8-Cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenilquinolin-3-carbaldel'ndo

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A una disolucion desgasificada con agitacion de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (305,8 mg, 1,353 mmol) en 12 ml de MeCN/H2O 3:1 se le anadio acido 5-fluoro-2-metoxifenilboronico (252,9 mg, 1,488 mmol) y carbonato de sodio (716,8 mg) y luego Pd-tetrakis (78,16 mg). Se calento la mezcla a 100°C durante 4 horas, se vertio en agua y se extrajo con EtOAc. Cromatograffa: gradiente Hex/EtOAc, 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 9,90 (1 H, s), 8,78 20 (1 H, s), 7,91 - 8,00 (2 H, m), 7,52 - 7,61 (2 H, m), 7,22 (1 H, td, J=8,4, 3,1 Hz), 6,96 (1 H, dd, J=9,0, 4,3 Hz), 3,74 (3

H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 343,1 (M + 1).

3-(Azidometil)-8-cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)quinoIina

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A una disolucion con agitacion de 8-cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)quinolin-3-carbaldel'ndo (385,4 mg, 1,221 mmol) 25 en THF (6,0 ml) se le anadio borohidruro de sodio (1,831 mmol) a t.a. Se agito la disolucion 1 hora luego se diluyo con agua, y se extrajo con EtOAc para proporcionar un solido en bruto tras la eliminacion del disolvente, que se uso sin purificacion adicional. Al alcohol en bruto en CHCI3 (6 ml) se le anadio cloruro de tionilo (0,445 ml, 6,103 mmol) a t.a. y se agito durante la noche. Tras 14 h, se eliminaron los disolventes (CCF indica completo). Se disolvio el solido en DMF (6 ml), luego se anadio de una vez azida de sodio (2,441 mmol), y se agito 1 hora, se vertio en agua y se 30 extrajo con EtOAc para dar un material en bruto: 373,3 mg. Cromatograffa, gradiente 89/9/1.

1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,28 (1 H, s), 7,86 (1 H, dd, J=7,4, 1,4 Hz), 7,83 (1 H, dd, J=8,2, 1,4 Hz),

imagen154

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7,51 (1 H, dd, J=8,1, 7,5 Hz), 7,22 (1 H, dd, J=8,2, 3,1 Hz), 7,13 - 7,19 (1 H, m), 6,95 (1 H, dd, J=9,0, 4,3 Hz), 4,48 (2 H, s), 3,76 (3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 343,1 (M + 1).

(8-Cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)quinoIin-3-il)metanamina

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5 A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-8-cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-quinolina (210,7 mg, 615 |imol) en 5 ml de THF y 12 ml de MeOH se le anadio paladio, al 10% en peso sobre carbono activado (0,329 mmol) y se puso bajo un globo medio que contema H2. Se completo la reaccion tras 2 h, se filtro (Celite™) y se eliminaron los disolventes.

Cromatograffa: Gradiente 89:9:1. 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,30 (1 H, s), 7,80 (2 H, ddd, J=7,9, 6,5, 10 1,3 Hz), 7,49 - 7,50 (1 H, m), 7,47 (1 H, dd), 7,09 - 7,18 (2 H, m), 6,93 (1 H, dd, J=8,9, 4,2 Hz), 3,89 (2 H, s. a.), 3,74

(3 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 317,0 (M + 1).

N-((8-Cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)quinolin-3il)metil)-9H-purin-6-amina

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A una mezcla con agitacion de (8-cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)quinolin-3-il)-metanamina (190,4 mg, 0,601 mmol) y 15 6-bromopurina (126 mg, 0,631 mmol) en 1-butanol (3,300 ml, 36,1 mmol) se le anadio N,N-etildiisopropilamina (0,209 ml, 1,20 mmol). Se calento la mezcla hasta 100°C durante la noche. Se eliminaron los disolventes y se sometio el residuo a cromatograffa: gradiente/isocratico 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s. a.), 8,28 (1 H, s. a.), 8,09 (2 H, s), 7,96 (1 H, d, J=8,1 Hz), 7,91 (1 H, d, J=7,3 Hz), 7,55 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,26 - 7,33 (1 H, m), 7,21 (1 H, dd, J=8,6, 3,2 Hz), 7,15 (1 H, s. a.), 3,77 (3 H, s), 3,32 (2 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 335,1 (M + 20 1).

Ejemplo 62

N6-((8-Cloro-1-Cl-clorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-2,6-diamina

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Se calento hasta reflujo una mezcla de (8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metanamina (144,8 mg, 0,478 mmol), 225 amino-6-cloropurina (89,1 mg, 0,525 mmol) y N,N-diisopropiletilamina, redestilado, 99,5% (0,166 ml, 0,955 mmol) en 1-butanol, anhidro, 99,8% (5,24 ml) y se agito durante la noche. Se enfrio la reaccion, se eliminaron los disolventes y se sometio a cromatograffa, gradiente de (DCM/MeOH:NH4OH) 89:9:1,

1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,08 (1 H, s. a.), 8,36 (1 H, s), 8,01 (1 H, d, J=8,2 Hz), 7,92 (1 H, d, J=6,3 Hz), 7,47 - 7,71 (8 H, m), 5,56 (2 H, s. a.), 4,59 (2 H, s. a.) Espectro de masas (ESI) m/e = 436,1 (M + 1).

30 Ejemplo 63

N-((8-Cloro-2-(3-isopropilfenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-diamina

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A una disolucion con agitacion de (8-cloro-2-(3-isopropilfenil)quinolin-3-il)-metanamina (181,7 mg, 585 |imol) en 1- butanol (3210 |il, 35075 |imol) se le anadio N,N-diisopropiletilamina (204 |il, 1169 |imol) y N,N-diisopropiletilamina (204 |il, 1169 |imol) y se calento lentamente hasta 100°C, se calento 24 h, se retiro del calor y se eliminaron los 5 disolventes. Se cromatografio: gradiente de (DCM/MeOH:NH4OH) 89:9:1: grad. al 0-20% (15 min) isocratico al 20%, (10 min) 20-50 grad, (10 min) luego isocratico al 50% 10 min para dar el producto deseado puro, 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,97 (1 H, s. a.), 8,34 (1 H, s), 8,12 (2 H, s), 7,94 (1 H, dd, J=8,3, 1,1 Hz), 7,91 (1 H, dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,62 (1 H, s), 7,46 - 7,55 (3 H, m), 7,39 (1 H, d, J=7,2 Hz), 4,84 (1 H, s. a.), 2,95 - 3,03 (1 H, m), 1,25 (6 H, d, J=7,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 429,2 (M + 1).

10 Ejemplo 64

2-((S)-1-(8-Cloro-2-(6-metilpiridin-2-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

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Se calento a 100°C una mezcla con agitacion de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (254,3 mg, 0,685 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (79,16 mg, 68,50 |imol), 2-metil-6-(tributilestannil)piridina (523,6 mg, 15 1,37 mmol) en dioxano (desgasificado) durante 28 h, se completo mediante CL-EM, se elimino el disolvente y se

cromatografio: gradiente de (DCM/MeOH:NH4OH) 89:9:1. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,78 (1 H, s), 8,15 (1 H, dd, J=8,3, 1,3 Hz), 7,98 (1 H, dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,73 - 7,78 (2 H, m), 7,58 - 7,69 (4 H, m), 7,36 (1 H, d, J=7,6 Hz), 7,16 (1 H, d, J=7,6 Hz), 6,11 - 6,19 (1 H, m), 2,33 (3 H, s), 1,82 (3 H, d, J=7,0 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 427,9 (M + 1).

20 (1S)-1-(8-Cloro-2-(6-metilpiridin-2-il)quinoIin-3-il)etil)etanamina

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En un matraz se cargo 2-((S)-1-(8-cloro-2-(6-metilpiridin-2-il)quinolin-3-il)-etil)isoindolin-1,3-diona (260,0 mg, 0,608 mmol) en etanol al 95% (12,2 ml) y se le anadio hidrato de hidrazina (0,189 ml, 6,076 mmol), seguido por reflujo. Tras 2 h se anadio unos 10 eq. de hidrazina adicionales, se continuo con el reflujo durante 3 h. Se eliminaron todos 25 los disolventes y se cromatografio el residuo, (DCM:MeOH:NH4OH) 89:9:1. 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,37 (1 H, s), 7,90 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,68 - 7,75 (3 H, m), 7,38 (1 H, dd, J=8,2, 7,4 Hz), 7,17 (1 H, d, J=7,4 Hz), 4,69

(1 H, q, J=6,7 Hz), 2,58 (3 H, s), 1,43 (3 H, d, J=6,8 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 298,0 (M + 1). N-((S)-1 -(8-Cloro-2-(6-metilpiridin-2-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen162

A una disolucion con agitacion de (1S)-1 -(8-cloro-2-(6-metilpiridin-2-il)quinolin-3-il)-etanamina (146 mg, 0,49 mmol) 5 en 1-butanol (5,4 ml, 59 mmol) se le anadio 6-bromopurina (0,107 g, 0,54 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,17 ml, 0,98 mmol) con calentamiento (110°C) durante la noche. Se eliminaron los disolventes y se sometio el residuo a cromatograffa, gradiente, (DCM:MeOH:NH4OH) 89:9:1. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,84 (1 H, s. a.), 8,67 (1 H, s), 8,38 (1 H, s. a.), 8,03 - 8,10 (1 H, m), 7,84 - 7,98 (5 H, m), 7,56 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,36 (1 H, d, J=5,5 Hz), 6,03 (1 H, s. a.), 2,58 (3 H, s. a.), 1,66 (3 H, d, J=6,3 Hz). Espectro de masas (ESI) m/e = 415,9 (M + 1).

10 Ejemplo 65

imagen163

Se le anadio Mcpba (8,7 g, 50 mmol) a temperatura ambiente a 3H-imidazo[4,5-b]piridina (5,0 g, 42 mmol) en acido acetico (84 ml, 1469 mmol). Se agito la mezcla durante 3 horas. Se filtro el precipitado resultante y se enjuago con Et2O, dio N-oxido de 4-azabencimidazol. A N-oxido de 4-azabencimidazol (2,00 g, 14,8 mmol) se le anadio oxicloruro 15 de fosforo (25,00 ml, 266 mmol) a temperatura ambiente. Se calento la disolucion hasta 90°C durante 18 h. Se enfrio la disolucion y se elimino por destilacion el POCh restante a vado. Se disolvio el residuo en CH3CN y se extinguio con la adicion lenta de hielo-agua. Se basifico la mezcla hasta pH 9 con disolucion de NaOH al 50%. A temperatura ambiente se filtraron los precipitados resultantes. Se disolvio el solido recogido en MeOH y se retiro el solido insoluble mediante filtracion. Se concentraron los filtrados y se purifico el residuo mediante cromatograffa 20 ultrarrapida sobre gel de s^lice, usando EtOAc-hexano 3:7, dio 7-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina (1,20 g, 52,8%). A la mezcla de pirocarbonato de di-terc-butilo (1193 mg, 5465 |imol), 7-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina (0,763 g, 4968 limol) en acetonitrilo (15 ml), se le anadio 4-(dimetilamino)piridina (61 mg, 497 |imol). Se agito la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. La evaporacion del disolvente, cromatograffa ultrarrapida del residuo sobre gel de s^lice, usando EtOAc a del 0% al 25%/hexano, dio 7-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo, 25 Espectro de masas (ESI) m/e = 253,0 (M + 1).

imagen164

Se cargo un matraz sellado con (8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)-metanamina, preparado en el procedimiento E en A-1216 US PSP, 7-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo (109 mg, 429 |imol), diisopropiletilamina (0,075 ml, 429 |imol) y 1-butanol (2,0 ml, 21856 |imol). Se sometio la mezcla a microondas a 30 180°C durante 120 min. Tras enfriarse hasta temperatura ambiente, se concentro la mezcla, y se diluyo el residuo

con MeOH. Se purifico la disolucion mediante HPLC, 25%-45% de B en 35 min. Se disolvieron las fracciones recogidas en CH2Cl2 y se neutralizaron mediante lavado con NaHCO3 ac., se seco la fase de CH2Cl2, se concentro y dio N -((8-cloro-2-(2-clorofenil)-quinolin-3-il)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-amina (20,2 mg, 15%), 1H-RMN (DMSO- d6) 8 ppm 12,72 (1 H, s), 8,43 (1 H, s), 8,15 (1 H, s), 8,09 (1 H, d, J=8,0 Hz), 8,05 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,73-7,80 (2 H,

m), 7,63-7,70 (4H, m), 7,45 (1 H, s), 6,13 (1 H, d, J=8,0 Hz), 4,60 (2 H, a). Espectro de masas (ESI) m/e = 420,0 (M + 1).

Ejemplo 66

Usando las tecnicas de smtesis anteriores u otras analogas y sustituyendo por los reactivos apropiados se preparo 5 el siguiente compuesto:

imagen165

(1 H, a), 8,03 (1 H, d, J=8,5 Hz), 7,97 (1 H, d, J=8,5 Hz), 7,89 (1 H, d, J=8,5 Hz), 7,80 (1 H, t, J=8,5 Hz), 7,68-7,75 (4 H, m), Espectro de masas (ESI), m/e = 456,1 (M + 1).

10 Usando las mismas tecnicas de smtesis o analogas y sustituyendo por los reactivos apropiados como en el procedimiento H, se prepararon los siguientes compuestos:

Ejemplo 67

imagen166

2-(3-((9H-Purin-6-ilamino)metil)-8-cloroquinolin-2-il)-N,N-dimetilbenzamida, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,39 (1 H, s), 15 8,23 (1 H, s), 8,19 (1 H, s), 8,01 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,96 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,82 (1 H, a), 7,52-7,64 (4 H, m).

Espectro de masas (ESI) m/e = 458,2 (M + 1).

Ejemplo 68

imagen167

N-((8-Cloro-2-(2-isopropilfenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,30 (1 H, s), 8,14 (1 20 H, a), 8,09 (1 H, s), 7,97 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,90 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,45-7,57 (3 H, m), 7,31-7,36 (2 H, m), 2,62- 2,69 (1 H, m), 1,15-1,22 (6 H, m). Espectro de masas (ESI) m/e = 429,2 (M + 1).

imagen168

N-((8-Cloro-2-(2-fenilfenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,13 (1 H, s), 8,09 (1 H, a), 8,03 (1 H, s), 7,86 (2 H, t, J=8,0 Hz), 7,45-7,57 (4 H, m), 7,20-7,25 (2 H, m), 7,13-7,18 (2 H, m). Espectro de 5 masas (ESI) m/e = 463,1 (M + 1).

Ejemplo 70

imagen169

N-((2-(2-(2H-Tetrazol-5-il)fenil)-8-cloroquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,24 (1 H, s), 8,11 (2 H, a), 7,07 (2 H, t, J=8,0 Hz), 7,95 (1 H, 1, J=8,0 Hz), 7,86 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,50-7,63 (4 H, m), Espectro de 10 masas (ESI) m/e = 455,2(M + 1).

Ejemplo 71

imagen170

H, s), 8,01 (2 H, a), 7,97 (1 H, s), 7,55 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,41-7,50 (4 H, m), Espectro de masas (ESI) m/e = 457,0 15 (M + 1).

Ejemplo 72

imagen171

N-((7-Cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,35 (1 H, s), 8,13 (1 H, a), 8,09 (3 H, a), 8,07 (1 H, s), 7,59-7,66 (2 H, m), 7,43-7,55 (3 H, m), Espectro de masas (ESI) m/e = 421,1 (M + 1).

Ejemplo 73

5

imagen172

N-((8-Cloro-2-(1H-pirazol-4-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 13,30 (0,5 H, s), 13,02 (0,5 H, s), 8,47 (0,5 H, s), 8,10- 8,28 (3,5 H, m), 7,82-7,92 (2 H, m), 7,44 (1 H, t, J=8,0 Hz), 5,07 (1 H, s). Espectro de masas (ESI) m/e = 377,0 (M + 1).

Ejemplo 74

10

imagen173

N-((8-Cloro-2-(isotiazol-5-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 8,72 (1 H, s), 8,45 (1 H, a), 8,17 (2 H, a), 8,08 (1 H, s), 7,96-8,02 (2 H, m), 7,58 (1 H, t, J=8,0 Hz), Espectro de masas (ESI) m/e = 394,1 (M + 1).

Ejemplo 75

imagen174

(1 H, d, J=8,0 Hz), 8,09 (1 H, s), 8,08 (1 H, a), 7,90-7,98 (3 H, m), Hz), Espectro de masas (ESI) m/e = 422,0 (M + 1).

7,59 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,36 (1 H, dd, J=8,0, 8,0

5 Ejemplo 76

10

imagen175

N-((8-Cloro-2-(4-(trifluorometil)piridin-3-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,75 (1 H, s), 8,69 (1 H, d, J=8,0 Hz), 8,41 (1 H, s), 7,98 (1 H, s), 7,95 (1 H, a), 7,84 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,81 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,67 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,50 (1 H, t, J=8,0 Hz), Espectro de masas (ESI) m/e = 456,1 (M + 1).

Ejemplo 77

imagen176

N-((8-Cloro-2-(pirazin-2-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (DMSO-d6) 8 ppm 9,43 (1 H, s), 8,80-8,85 (2 H, m), 8,49 (1 H, s), 8,08 (2 H, a), 8,01 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,98 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,61 (1 H, t, J=8,0 Hz), Espectro de masas (ESI) m/e = 389,0 (M + 1).

15 Usando las mismas tecnicas de smtesis o analogas y sustituyendo por los reactivos apropiados como en el ejemplo 109, con dos etapas diferentes adicionales tal como se muestra a continuacion, se prepararon los siguientes compuestos:

Ejemplo 78

imagen177

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(2-etil-5-fluoropiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina, 1H-RMN (MeOD) 8 ppm 8,71 (1 H, s), 8,28-8,57 (3 H, m), 7,85- 8,07 (3 H, m), 7,64 (1 H, t, J=8,0 Hz), 1,84 (1,5 H, a), 1,69 (1,5 H, a), 1,28 (1,5 H, a), 1,16 (1,5 H, a), Espectro de masas (ESI) m/e = 448,1 (M + 1).

5 Ejemplo 79

imagen178

(1 H, s), 8,58 (1 H, a), 8,48 (1 H, a), 8,43 (1 H, a), 8,11 (1 H, a), 7,97 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,94 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,61 (1 H, t, J=8,0 Hz), 1,76 (3 H, d, J=8,0 Hz), Espectro de masas (ESI) m/e = 420,1 (M + 1).

10 Ejemplo 80

imagen179

Se sometio una mezcla de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (120,0 mg, 323 |imol), acido 2- cloro-5-fluoropmdin-3-ilbor6nico (57 mg, 323 |imol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (37 mg, 32 |imol), fluoruro de cesio (147 mg, 970 |imol) y yoduro de cobre (I) (12 mg, 65 |imol) en dimetil eter de 1,2-etanodiol (3,0 ml, 323 |imol) a 15 microondas a 100°C durante 1 h, se enfrio hasta temperatura ambiente. La filtracion de la mezcla resultante y se enjuago con EtOAc, se recogieron los filtrados y se concentraron. La purificacion del residuo mediante cromatograffa ultrarrapida sobre gel de s^lice, elucion en gradiente con EtOAc al 0-100% en hexano, dio 2-((S)-1-(8-cloro-2-(2- cloro-5-fluoropiridin-3-il)quinolin-3-il)-etil)isoindolin-1,3-diona, espectro de masas (ESI) m/e = 466,0 (M + 1).

imagen180

20 Se puso a reflujo una mezcla de 2-((S)-1-(8-cloro-2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)quinolin-3-il)-etil)isoindolin-1,3-diona (192,7 mg, 413 |imol), dioxano (15 ml, 175989 |imol), trietilaluminio (236 mg, 2066 |imol) y tetrakis(trifenilfosfina)- paladio (96 mg, 83 |imol) durante 4 h bajo N2, se enfrio hasta temperatura ambiente. Se acidifico la mezcla de reaccion con HCl (2 N) y se evaporo el disolvente. Se diluyo el residuo con agua, se basifico con NaOH (al 20%) y se extrajo la mezcla con EtOAc. Se lavaron los extractos combinados con agua, salmuera, se secaron y se

concentraron. La purificacion del residuo mediante cromatograffa ultrarrapida sobre gel de s^lice, elucion en gradiente con EtOAc al 0-100% en hexano, dio 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(2-etil-5-fluoropiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)isoindol- in-1,3-diona, espectro de masas (ESI) m/e = 460,1 (M + 1). Y 2-((S)-1-(8-cloro-2-(5-fluoropiridin-3-il)quinolin-3- il)etil)isoindolin-1,3-diona, espectro de masas (ESI) m/e = 432,1 (M + 1).

5 Ejemplo 81: Preparacion de N-((5-Cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina 3-Clorobenceno-1,2-diamina

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A una disolucion de 3-cloro-2-nitroanilina (10,00 g, 57,95 mmol), HCl ac. 3 N (96,58 ml, 289,7 mmol) y alcohol etflico (148,6 ml, 57,95 mmol) se le anadio cloruro de estano (II) dihidratado (65,96 g, 289,7 mmol) y se calento la mezcla a 10 reflujo con agitacion. Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para dar un jarabe de color marron. Se trato la mezcla con precaucion con un exceso de KOH 10 M (115,9 ml, 1159 mmol, 20 eqv.). Se diluyo la mezcla con EtOAc (200 ml), se filtro a traves de un lecho de Celite™, y se lavo el lecho bien con EtOAc (100 ml x 2). Se extrajo el filtrado con EtOAc (100 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (100 ml x 1), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para 15 dar 3-clorobenceno-1,2-diamina como un aceite de color rojo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 6,43 - 6,53 (2 H, m), 6,38 (1 H, t, J=7,8 Hz) 4,80 (2 H, s), 4,60 (2 H, s); CL- EM (ESI) m/z 142,9 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

1-(2-Clorofenil)propano-1,2-diona

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20 A una disolucion de 2-clorofenilacetona (10,800 g, 64,049 mmol) en 279 ml de CH2Ch, se le anadieron clorocromato de piridinio (41,418 g, 192,15 mmol) y piridina (16 ml) en tres porciones a lo largo de 2,5 horas y se puso la mezcla a reflujo con agitacion vigorosa. Tras 22 h, se retiro la mezcla del calor. Se concentro la mezcla a vacfo para dar un jarabe de color rojo oscuro. Se purifico la mezcla en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi- SepTM de 120 g usando un gradiente del 0-10% de EtOAc en hexano a lo largo de 28 min como eluyente para dar 125 (2-clorofenil)propano-1,2-diona como un ffquido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 7,66 (1 H, dd, J=7,6, 1,8 Hz), 7,49 - 7,54 (1 H, m), 7,38 - 7,45 (2 H, m), 2,58 (3 H, s); CL-EM: m/z 182,9 [M+H]+.

3-Bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona

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Se calento a 60°C una mezcla de 1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (4,2379 g, 23,208 mmol), bromo (1,1891 ml, 30 23,208 mmol) y acido acetico glacial (0,67005 ml, 11,604 mmol) en cloroformo (58,020 ml, 23,208 mmol). Tras 17 h

de agitacion a 60°C, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida para dar 3-bromo-1-(2- clorofenil)propano-1,2-diona como un ffquido de color naranja: CL-EM: un pico de m/z 261,0 [M+H(79Br)]+ y 262,9 [M+H (81Br)-]+. Se continuo con el ffquido de color naranja en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

3-(Bromometil)-5-cloro-2-(2-clorofenil)quinoxalina y 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxaIina

5

10

15

20

25

30

imagen184

Cl o

imagen185

Cl

{1 eqv.)

EtOAc (0,15 M) t.a.,62 h (12 h) se continuo en bruto

imagen186

Br

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A una disolucion de 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (6,0689 g, 23,208 mmol) en 100 ml de EtOAc se le anadio una disolucion de 3-clorobenceno-1,2-diamina (3,3091 g, 23,208 mmol) en 54,7 ml de EtOAc a temperature ambiente y se agito la mezcla de color rojo resultante a temperature ambiente. Tras 6 h de agitacion a temperatura ambiente, se concentro la mezcla a presion reducida para dar una mezcla de 3-(bromometil)-5-cloro-2-(2- clorofenil)quinoxalina y 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalina como un jarabe de color rojo: CL-EM (ESI) m/z 369,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(8-Cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metanamina y (5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metanamina

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A una disolucion con agitacion de una mezcla de 3-(bromometil)-5-cloro-2-(2-clorofenil)quinoxalina y 2-(bromometil)- 5-cloro-3-(2-clorofenil)-quinoxalina (8,5418 g, 23,21 mmol) en DMF (100,0 ml, 23,21 mmol) se le anadio azida de sodio (3,017 g, 46,42 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 40 min, se repartio la mezcla entre EtOAc (200 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar 2-(azidometil)-5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalina como un lfquido de color marron: CL-EM (ESI) pico mayoritario de m/z 330,1 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

A una disolucion con agitacion de 2-(azidometil)-5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalina (7,6630 g, 23,21 mmol) en 100 ml de THF-H2O (4:1) se le anadio gota a gota trimetilfosfina, disolucion 1,0 M en THF (27,85 ml, 27,85 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, se diluyo la mezcla con NaOH 1 N enfriado con hielo (100 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 3). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (100 ml x 3), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color verde. Se purifico el jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 120 g usando gradiente isocratico al 3% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 42 min, luego a del 3% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 27 min, y luego isocratico al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 5 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: (8- cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metanamina como un jarabe de color marron oscuro: rH-RMN (400 MHz, DMSO- d6) 8 ppm 8,07 - 8,15 (2 H, m), 7,81 - 7,90 (1 H, m), 7,65 - 7,71 (1 H, m), 7,52 - 7,66 (3 H, m), 3,85 (2 H, s), 2,23 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 304,0 y 306,0 [M+H]+ y (5-cloro-3-(2-clorofenil)-quinoxalin-2-il)metanamina como un solido siruposo de color marron rojizo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,15 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,05 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 7,85 - 7,93 (1 H, m), 7,67 - 7,72 (1 H, m), 7,53 - 7,66 (3 H, m), 3,83 (2 H, s), 2,07 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 304,0 y 306,0 [M+H]+. Se confirmaron las estructuras de los dos regioisomeros mediante un experimento de NOESY.

N-((5-Cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,4553 g, 2,288 mmol), (5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2- il)metanamina (0,6959 g, 2,288 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,7970 ml, 4,576 mmol) en 1-butanol (13,46 ml, 2,288 mmol). Tras 3,5 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna de gel de silice usando el 50% de 5 CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para dar un solido de color amarillo claro. Se suspendio el

solido de color amarillo claro en CH2Ch-hexano (1:1) y se filtro para dar N-((5-cloro-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2- il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 8,02 - 8,16 (4 H, m), 7,95 (1 H, s. a.), 7,83 - 7,90 (1 H, m), 7,61 - 7,72 (2 H, m), 7,53 - 7,59 (1 H, m), 7,47 - 7,53 (1 H, m), 4,72 - 4,98 (2 H, m), 89676-20-1 -1H-RMN; CL-EM (ESI) m/z 422,0 y 424,0 [M+H]+.

10 Ejemplo 82: Preparacion de N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3-il)-metil)morfoIin-4-amina:

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A una mezcla de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2-clorofenil)quinolina (preparado en el ejemplo 2), N,N-diisopropiletilamina (0,584 ml, 3,35 mmol) y yoduro de litio (0,00566 ml, 0,148 mmol) en 7 ml de dMf se le anadio 4-aminomorfolina (0,0647 ml, 0,670 mmol) y se agito la mezcla a 50°C. Tras 19 h, se concentro la mezcla a presion reducida para dar 15 un aceite de color amarillo. Se purifico la mezcla en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi- SepTM de 40 g usando un gradiente del 0-100% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar N-((8-cloro-2-(2-clorofenil)-quinolin-3-il)metil)morfolin-4-amina como una espuma (jarabe) de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,39 (1 H, s), 7,73 - 7,88 (2 H, m), 7,37 - 7,53 (5 H, m), 3,78 - 4,07 (2 H, m), 3,64 (4 H, t, J=4,7 Hz), 2,53 (4 H, s); CL-EM (ESI) m/z 388,0 y 20 390,1 [M+H]+.

Ejemplo 83: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina como una sal de TFA y N-((3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxaIin-2-il)metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina como una sal de TFA:

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Se agito a 75°C una mezcla de 4-clorotieno[3,2-d]pirimidina (0,1200 g, 0,7033 mmol), una mezcla de (3-(2- 25 clorofenil)-8-metilquinoxalin-2-il)metanamina y (3-(2-cloro-fenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metanamina (preparados en los ejemplos 18 y 19, 0,2276 g, 0,8018 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,2450 ml, 1,407 mmol) en 4 ml de EtOH. Tras 20,5 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a vacfo para dar un jarabe de color marron. Se purifico el jarabe de color marron mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 5 min como eluyente

para dar una mezcla de dos regioisomeros como un jarabe de tipo espuma de color marron. Se purifico el jarabe de tipo espuma de color marron (0,1333 g) mediante HPLC semiprep. en una columna Gemini™ 10 |i C18 (250 x 21,2 mm, 10 |im) usando un gradiente del 20-50% de CH3CN (TFA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: N-((3-(2-clorofenil)-8-metil-quinoxalin-2-il)metil)tieno[3,2- 5 d]pirimidin-4-amina como una sal de TFA como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-Cl6) 8 ppm 9,58 (1 H, s), 8,56 (1 H, s), 8,37 (1 H, d, J=5,5 Hz), 7,93 - 7,98 (1 H, m), 7,76 - 7,80 (1 H, m), 7,72 - 7,76 (1 H, m), 7,54 - 7,62 (2 H, m), 7,44 - 7,50 (2 H, m), 7,37 - 7,43 (1 H, m), 5,00 (2 H, s. a.), 2,59 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 418,0 [M+H]+ y N- ((3-(2-clorofenil)-5-metilquinoxalin-2-il)metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina como una sal de TFA como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,77 (1 H, s. a.), 8,55 (1 H, s), 8,37 (1 H, d, J=5,5 Hz), 7,89 - 7,95 10 (1 H, m), 7,77 - 7,82 (1 H, m), 7,73 - 7,76 (1 H, m), 7,63 (1 H, dd, J=7,4, 1,6 Hz), 7,54 - 7,58 (1 H, m), 7,43 - 7,49 (2

H, m), 7,37 - 7,42 (1 H, m), 4,99 (2 H, s. a.), 2,69 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 418,0 [M+H]+a 1,498 min, (Masa exacta de la forma neutra: 417,081).

Ejemplo 84: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-8-fluoroquinoxalin-2-il)-metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA y N-((3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA:

15 3-(Bromometil)-2-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina

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A una disolucion de 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (preparado en el ejemplo 81, 2,3832 g, 9,114 mmol) en 61 ml de EtOAc se le anadio una disolucion de 3-fluorobenceno-1,2-diamina (1,150 g, 9,114 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla roja resultante se agito a temperatura ambiente. Tras 3 h, se concentro la mezcla a vacfo para 20 dar una mezcla de dos regioisomeros como un jarabe negro. Se purifico el jarabe negro mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 4 min como eluyente para dar una mezcla de 3-(bromometil)-2- (2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina como un jarabe de color rojo; CL-EM (ESI) dos picos de m/z 351,0 [M+H (79Br)]+y 352,9 [M+H (81Br)]+. Se uso el producto en bruto sin purificacion 25 adicional en la siguiente etapa.

(3-(2-Clorofenil)-8-fluoroquinoxaIin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalin-2-il)metanamina)

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A una disolucion con agitacion de una mezcla de 3-(bromometil)-2-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina y 2-(bromometil)- 3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina (0,7617 g, 2,166 mmol) en 11 ml de DMF se le anadio azida de sodio (0,2113 g, 30 3,250 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 50 min, se repartio la

mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 1), se seco sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar una mezcla de 3-(azidometil)-2-(2-clorofenil)-5- fluoroquinoxalina y 2-(azidometil)-3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina como un jarabe de color rojo oscuro: CL-EM (ESI) m/z 314,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

35 A una disolucion con agitacion de una mezcla de 3-(azidometil)-2-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina y 2-(azidometil)-3- (2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalina (0,6796 g, 2,166 mmol) en 10 ml de THF-H2O (4:1) se le anadio gota a gota trimetilfosfina, disolucion 1,0 M en THF (2,600 ml, 2,600 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, a la mezcla se le anadio EtOAc (100 ml) se le anadio y se extrajo la mezcla con HCl 1 N (3 x 60 ml). Se neutralizaron los extractos combinados con bicarbonato de sodio solido, y se extrajeron con 40 EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron los extractos organicos combinados con salmuera (50 ml x 2), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a vacfo para dar el producto en bruto como un jarabe violeta (0,3319 g). Se purifico el jarabe violeta mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 15% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 2 min, isocratico al 15% de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2CI2 durante 5 min, luego un gradiente del 15% al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 3 min, isocratico al 30% de CH2Cfe:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2CI2 durante 5 min, y luego un gradiente del 30% al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 9 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 3 min como eluyente para dar una mezcla de 3-(2-clorofenil)-8-fiuoroquinoxalin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalin-2-il)metanamina como un jarabe de color verde oscuro: CL-EM (ES) m/z 288,1 [M+H]+. Se uso una mezcla de los dos regioisomeros sin purificacion adicional para la siguiente etapa.

N-((3-(2-Clorofenil)-8-fluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA y N-((3-(2-clorofenil)-5- fluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA

imagen194

Se agito a 75°C una mezcla de 6-cloropurina (0,171 g, 1,11 mmol), una mezcla de ((3-(2-clorofenil)-8- fluoroquinoxalin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalin-2-il)metanamina) (0,3186 g, 1,11 mmol) y N,N- diisopropiletilamina (0,386 ml, 2,21 mmol) en 6,5 ml de EtOH. Tras 19 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida para dar un jarabe de color naranja. Se cromatografio el jarabe de color naranja en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en C^Ch a lo largo de 14 min e isocratico al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 5 min como eluyente para dar una mezcla de dos regioisomeros como un solido de color marron. Se purifico el solido de color marron (0,0635 g) (1,0 ml (~ 20 mg) x 3 inyecciones) mediante HPLC semiprep. en una columna Gemini™ 10 |i C18 (250 x 21,2 mm, 10 |im) usando un gradiente del 20-50% de CH3CN (TFA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: N-((3-(2-clorofenil)-8-fluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,55 (1 H, s. a.), 8,25 (2 H, d, J=20,7 Hz), 7,99 (1 H, d, J=8,2 Hz), 7,84 - 7,92 (1 H, m), 7,72 - 7,80 (1 H, m), 7,67 (1 H, dd, J=7,2, 1,8 Hz), 7,63 (1 H, dd, J=8,0, 1,0 Hz), 7,51 - 7,57 (1 H, m), 7,46 - 7,51 (1 H, m), 4,90 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 406,0 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 405,09) y N-((3-(2-clorofenil)-5-fluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,44 (1 H, s. a.), 8,17 - 8,30 (2 H, m), 7,93 - 7,99 (1 H, m), 7,85 - 7,93 (1 H, m), 7,71 - 7,78 (1 H, m), 7,68 (1 H, dd, J=7,2, 1,8 Hz), 7,62 - 7,66 (1 H, m), 7,53 - 7,59 (1 H, m), 7,48 - 7,53 (1 H, m), 4,88 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 406,0 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 405,09).

Ejemplo 85: Preparacion de N-((5-Cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)-quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina:

8-Cloro-3-metilquinoxaIin-2(1 H)-ona y 5-cloro-3-metilquinoxaIin-2(1 H)-ona

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Se agito una mezcla de piruvato de etilo (11,523 ml, 103,70 mmol) y 3-clorobenceno-1,2-diamina (preparado en el ejemplo 81, 14,7866 g, 103,70 mmol) en acido polifosforico (100,00 g) y se calento a 115°C. Tras 6 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se mezclo meticulosamente con agua (500 ml) y se neutralizo con NaOH 10 N (180 ml). Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion y se lavo el solido con agua (1000 ml) y se seco para dar un solido de color marron oscuro como una mezcla de cloro-3-metilquinoxalin-2(1H)-ona y 5-cloro-3- metilquinoxalin-2(1H)-ona como un solido de color marron oscuro. Se purifico el solido de color marron oscuro mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 330 g usando 100% de hexano durante 5 min, luego un gradiente del 0 al 18% de EtOAc en hexano a lo largo de 9,5 min, luego isocratico al 18% de EtOAc en hexano durante 23,2 min, luego un gradiente del 18% al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 48 min, y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: 8-cloro-3- metilquinox-alin-2(1H)-ona como un solido de color naranja: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,88 (1 H, s), 7,68 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 7,58 - 7,63 (1 H, m), 7,28 (1 H, t, J=8,0 Hz), 2,43 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 195,1 [M+H]+y 5-cloro-3-metil-quinoxalin-2(l H)-ona como un solido de color naranja: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,48 (1 H, s), 7,37 - 7,47 (2 H, m), 7,23 (1 H, dd, J=7,8, 1,6 Hz), 2,44 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 195,1 [M+H]+.

3,5-Dicloro-2-metilquinoxalina

5

10

15

20

25

30

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Se agito a 100°C una mezcla de 8-cloro-3-metilquinoxalin-2-ol (1,0765 g, 5,5314 mmol) y oxicloruro de fosforo (10,127 ml, 110,63 mmol). Tras 3 h, se enfriO la mezcla hasta temperatura ambiente. Se vertiO la mezcla en hielo (~100 ml) con agitaciOn y se neutralizO con NH4OH (30 ml) y hielo con agitaciOn. Se recogiO el precipitado resultante mediante filtraciOn, se enjuagO con agua (200 ml) y se secO para dar 3,5-dicloro-2-metilquinoxalina como un sOlido de color rosa: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,98 - 8,07 (2 H, m), 7,84 (1 H, dd, J=8,3, 7,7 Hz), 2,79 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 213,0 [M+H]+. Se continuO con el sOlido de color rosa en bruto sin purificaciOn para la siguiente etapa.

5-Cloro-2-metil-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalina

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Se agitO a 100°C una mezcla de 3,5-dicloro-2-metilquinoxalina (1,1209 g, 5,261 mmol), acido 2- (trifluorometil)fenilborOnico (1,099 g, 5,787 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,3040 g, 0,2630 mmol) y carbonato de sodio anhidro (2,788 g, 26,30 mmol) en 53 ml de CH3CN-H2O (3:1). Tras 13,5 h, se enfriO la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartiO entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavO la fase organica con salmuera (50 ml x 3), se secO sobre Na2SO4, se filtrO, y se concentrO a presiOn reducida para dar un jarabe de color rojo. Se purificO el jarabe de color rojo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 20 min como eluyente para dar 5-cloro-2-metil-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalina como un sOlido de color rojo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,09 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,02 (1 H, dd, J=7,6, 1,2 Hz), 7,98 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,73 - 7,92 (4 H, m), 2,47 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 323,0 [M+H]+.

2-(Bromometil)-5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalina

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O

______(0,5 eqv.)______>

peroxido de benzoilo(0.1 eqv.) CCW (0,1 M) reflujo,

40,52%

Cl

Se suspendieron 5-cloro-2-metil-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalina (1,4455 g, 4,479 mmol) y 1,3-dibromo-5,5- dimetilhidantoma (0,6404 g, 2,240 mmol) en tetracloruro de carbono (44,79 ml, 4,479 mmol). A la mezcla se le anadiO perOxido de benzoflo (0,1447 g, 0,4479 mmol) y se calentO la mezcla a reflujo. Tras 21,5 h, se enfriO la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentrO a presiOn reducida. Se purificO el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de de 80 g usando un gradiente del 0 al 9% de EtOAc en hexano a lo largo de 2 min, luego 9% isocratico de EtOAc durante 13 min, luego un gradiente del 9 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 23 min, luego isocratico al 100% de EtOAc durante 4 min como eluyente para dar 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-(trifluorometil)-fenil)quinoxalina como un sOlido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,18 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,13 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 7,81 - 8,03 (5 H, m), 4,69 (2 H, dd, J=88,4, 10,2 Hz); CL-EM (ESI) m/z 400,9 y 403,0 [M+H]+.

5

10

15

20

25

30

35

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A una disolucion con agitacion de 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)-quinoxalina (0,7173 g, 1,786 mmol) en DMF (8,930 ml, 1,786 mmol) se le anadio azida de sodio (0,2322 g, 3,572 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 30 min, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un jarabe de color marron azulado. Se purifico el jarabe de color marron azulado mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min, luego isocratico al 50% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 2-(azidometil)-5-cloro- 3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,20 (1 H, dd, J=8,6, 1,2 Hz), 8,10 - 8,14 (1 H, m), 7,99 (1 H, d, J=7,8 Hz), 7,95 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,79 - 7,91 (3 H, m), 4,41 - 4,67 (2 H, m); CL-EM (ESI) pico mayoritario de m/z 364,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin pufrificacion para la siguiente etapa.

A una disolucion de 2-(azidometil)-5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)-quinoxalina (0,5736 g, 1,58 mmol) en metanol (17,500 ml, 1,58 mmol) se le anadio paladio, al 10% en peso sobre carbono activado (0,0839 g, 0,0789 mmol). Tras repetir tres veces la evacuacion de aire en el matraz mediante el sistema de vacfo interno y el llenado del matraz con H2, se agito la mezcla bajo H2. Tras 45 min, se filtro la mezcla a traves de un lecho de Celite™ y se enjuago el lecho con MeOH. Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un jarabe de color azul. Se purifico el jarabe de color azul mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 12% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 3 min, isocratico al 12% de CH2ChMeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 4 min, 12% to 100% gradiente de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 22 min como eluyente para dar (5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalin-2-il)metanamina como un solido siruposo de color azul: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,15 (1 H, dd, J=8,6, 1,2 Hz), 8,04 (1 H, dd, J=7,6, 1,2 Hz), 7,97 (1 H, d, J=7,6 Hz), 7,74 - 7,92 (4 H, m), 3,62 - 3,91 (2 H, m), 1,98 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 338,0 [M+H]+.

N-((5-Cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen201

Se agito a 75°C una mezcla de 6-cloropurina (0,147 g, 0,954 mmol), (5-cloro-3-(2-(trifluoro-metil)fenil)quinoxalin-2- il)metanamina (0,3223 g, 0,954 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,332 ml, 1,91 mmol) en etanol (5,61 ml, 0,954 mmol). Tras 19 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min, luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min, luego un gradiente del 0 al 65% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 10 min, luego isocratico al 65% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 10 min, luego un gradiente del 65% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 4 min, y luego isocratico al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 4 min como eluyente para dar el producto deseado como un solido de color marron. Se suspendio el solido de color marron en CH2Cl2, se filtro para dar N-((5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H- RMN (400 MHz, DMSO-d8) 8 ppm 12,94 (1 H, s), 7,57 - 8,34 (10 H, m), 4,76 (2 H, d, J=55,9 Hz); CL-EM (ESI) m/z 456,1 [M+H]+.

imagen202

B(OH}2

a

OCr

(1,1 eqv.)

Pd(PPh3)^ (0,05 eqv.)

Na2C03 (5 eqv.)

CH3CN-H20 (3:1,0,1 M)

100 °C, 15 h

70,9%

Se agito a 100°C una mezcla de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (preparado en el ejemplo 2, 0,5000 g, 2,212 mmol), acido 2-(trifluorometoxifenN)boronico (0,5010 g, 2,433 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,1278 g, 0,1106 5 mmol) y carbonato de sodio anhidro (1,172 g, 11,06 mmol) en 90 ml de CH3CN-H2O (3:1). Tras 15 h, se enfrio la mezcla hasta temperature ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida y se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 810 cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,98 (1 H, s), 9,14 (1 H,

s), 8,31 (1 H, dd, J=8,1, 1,0 Hz), 8,18 (1 H, dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,70 - 7,82 (3 H, m), 7,62 - 7,67 (1 H, m), 7,57 (1 H, d, J=8,3 Hz); CL-EM (ESI) m/z 352,0 [M+H]+.

(8-Cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3-il)metanol

imagen203

15 A una disolucion de 8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo (0,5427 g, 1,543 mmol) en tetrahidrofurano (7,715 ml, 1,543 mmol) a 0°C se le anadio borohidruro de sodio (0,08757 g, 2,315 mmol) y se agito la mezcla a 0°C y se permitio calentar hasta temperatura ambiente a lo largo de 1 hora. Tras 1 h de agitacion a 0°C, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml) y se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar (8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3- 20 il)metanol como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,58 (1 H, s), 8,10 (1 H, dd, J=8,3, 1,3 Hz), 7,95 (1 H, dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,51 - 7,72 (5 H, m), 5,54 (1 H, s), 4,44 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 354,0 [M+H]+. Se continuo con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

Clorhidrato de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolina

imagen204

25 Se trato una disolucion de (8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3-il)metanol (0,5470 g, 1,546 mmol) en cloroformo (5,155 ml, 1,546 mmol) con cloruro de tionilo (0,5626 ml, 7,732 mmol) gota a gota, y se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 2,5 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se evaporo conjuntamente tres veces con CH2Cl2 para dar clorhidrato de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,75 (1 H, s), 8,10 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,03 (1 H, 30 dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,64 - 7,74 (3 H, m), 7,53 - 7,63 (2 H, m), 4,75 (2 H, s. a.), 89676-3-1-1H-RMN; CL-EM (ESI) m/z 372,0 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 371,009). Se continuo con el jarabe de color amarillo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

5

10

15

20

25

30

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A una disolucion con agitacion de clorhidrato de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2-(trifluorometoxi)-fenil)quinolina (0,6319 g, 1,546 mmol) en DMF (7,732 ml, 1,546 mmol) se le anadio azida de sodio (0,2011 g, 3,093 mmol) a temperature ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min, luego isocratico al 50% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 3-(azidometil)-8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolina como un jarabe incoloro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,66 (1 H, s), 8,11 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,02 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,54 - 7,74 (5 H, m), 4,52 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 379,0 [M+H]+.

A una disolucion de 3-(azidometil)-8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)-quinolina (0,5374 g, 1,42 mmol) en metanol (14,2 ml, 1,42 mmol) se le anadio paladio, al 10% en peso sobre carbono activado (0,0755 g, 0,0709 mmol). Tras repetir tres veces la evacuacion de aire en el matraz mediante el sistema de vado interno y el llenado del matraz con H2, se agito la mezcla bajo H2. Tras 30 min, se filtro la mezcla a traves de un lecho de Celite™ y se enjuago el lecho con MeOH. Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un jarabe de color verde oscuro. Se purifico el jarabe de color verde oscuro mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep de 40 g usando un gradiente del 0% al 20% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 20% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 15 min como eluyente para dar (8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3- il)-metanamina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (1 H, s), 8,03 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,50 - 7,70 (5 H, m), 3,66 (2 H, s), 1,97 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 353,0 [M+H]+.

N-((8-Cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen206

Se agito a 75°C una mezcla de 6-cloropurina (0,1109 g, 0,7175 mmol), (8-cloro-2-(2-(trifluoro-metoxi)fenil)quinolin-3- il)metanamina (0,2531 g, 0,7175 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,2500 ml, 1,435 mmol) en etanol (4,221 ml, 0,7175 mmol). Tras 36 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna gel de sflice usando el 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch como eluyente para dar N-((8-cloro-2-(2-(trifluorometoxi)fenil)quinolin-3- il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,94 (1 H, s), 8,38 (1 H, s), 8,03 - 8,32 (3 H, m), 7,96 - 8,02 (1 H, m), 7,93 (1 H, dd, J=7,5, 0,9 Hz), 7,51 - 7,75 (5 H, m), 4,69 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 471,1 [M+H]+.

Ejemplo 87: Preparacion de N-((8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)-fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina: 8-Cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-carbaldel'ffdo

imagen207

Se agito a 100°C una mezcla de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (preparado en el ejemplo 2, 1,0000 g, 4,424 mmol), acido 5-fluoro-2-(trifluorometil)fenilboronico (1,012 g, 4,866 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,2556 g, 0,2212 mmol) y carbonato de sodio anhidro (2,344 g, 22,12 mmol) en 40 ml de CH3CN-H2O (3:1). Tras 14 h, se 5 enfrio la mezcla hasta temperature ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un solido de color marron. Se purifico el solido de color marron mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)- 10 fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,00 (1 H, s), 9,21 (1 H, s), 8,32 (1 H, dd, J=8,3, 1,1 Hz), 8,20 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 8,01 (1 H, dd, J=8,7, 5,4 Hz), 7,76 - 7,84 (1 H, m), 7,55 - 7,66 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 354,0 [M+H]+.

(8-Cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metanol

imagen208

15 A una disolucion de 8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-carbaldel'ndo (0,3036 g, 0,8584 mmol) en tetrahidrofurano (4,292 ml, 0,8584 mmol) a 0°C se le anadio borohidruro de sodio (0,04871 g, 1,288 mmol) y se agito la mezcla a 0°C. Tras 1 h de agitacion a 0°C, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml) y se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar (8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-quinolin-3-il)metanol como un solido siruposo de color amarillo claro: 1H- 20 RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,57 (1 H, s), 8,10 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,01 (1 H, dd, J=8,8, 5,3 Hz), 7,95 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,53 - 7,69 (3 H, m), 5,55 (1 H, s. a.), 4,25 - 4,56 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 356,0 [M+H]+. Se continuo con el solido siruposo de color amarillo claro en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

Clorhidrato de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolina

imagen209

25 Se trato una disolucion de (8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)-metanol (0,3016 g, 0,8479 mmol) en cloroformo (2,826 ml, 0,8479 mmol) con cloruro de tionilo (0,3085 ml, 4,239 mmol) gota a gota, y se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 3 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se evaporo conjuntamente tres veces con CH2Cl2 para dar clorhidrato de 8-cloro-3-(clorometil)-2-(5-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)quinolina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,76 (1 H, s), 30 8,11 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,99 - 8,07 (2 H, m), 7,60 - 7,75 (3 H, m), 4,63 - 4,90 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z [M+H]+

(Masa exacta de la forma neutra: 373,005). Se continuo con el jarabe de color amarillo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

5

10

15

20

25

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35

imagen210

A una disolucion con agitacion de clorhidrato de 8-doro-3-(clorometil)-2-(5-fluoro-2-(trifluoro-metil)fenil)quinolina (0,3482 g, 0,8480 mmol) en DMF (4,240 ml, 0,8480 mmol) se le anadio azida de sodio (0,1103 g, 1,696 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1,5 h, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min, luego isocratico al 50% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 3-(azidometil)-8-cloro-2-(5-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)quinolina como un jarabe incoloro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,65 (1 H, s), 8,12 (1 H, dd, J=8,3, 1,3 Hz), 7,99 - 8,06 (2 H, m), 7,69 (1 H, dd, J=8,1, 7,5 Hz), 7,58 - 7,66 (2 H, m), 4,44 - 4,59 (2 H, m); CLEM (ESI) m/z 381,1 [M+H]+. A una disolucion de 3-(azidometil)-8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)-quinolina (0,2573 g, 0,676 mmol) en metanol (6,76 ml, 0,676 mmol) se le anadio paladio, al 10% en peso sobre carbono activado (0,0360 g, 0,0338 mmol). Tras repetir tres veces la evacuacion de aire en el matraz mediante el sistema de vado interno y el llenado del matraz con H2, se agito la mezcla bajo H2. Tras 30 min, se filtro la mezcla a traves de un lecho de Celite™ y se enjuago el lecho con MeOH. Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un jarabe de color verde. Se purifico el jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 20% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 20% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 20 min como eluyente para dar (8-cloro-2-(5- fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metanamina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (1 H, s), 8,04 (1 H, dd, J=8,4, 1,2 Hz), 8,01 (1 H, dd, J=8,5, 5,4 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,4, 1,4 Hz), 7,54 - 7,67 (3 H, m), 3,48 - 3,74 (2 H, m), 1,96 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 355,1 [M+H]+.

N((8-Cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen211

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,09706 g, 0,4877 mmol), (8-cloro-2-(5-fluoro-2- (trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metanamina (0,1730 g, 0,4877 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,1699 ml, 0,9754 mmol) en 2,8 ml de 1-butanol. Tras 22 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida para dar un solido siruposo de color amarillo. Se purifico el solido siruposo de color amarillo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 20% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, luego isocratico al 20% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 10 min, luego un gradiente del 20 al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 10 min, y luego isocratico al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9: 1) en CH2Ch durante 10 min como eluyente para dar N-((8-cloro-2-(5-fluoro-2- (trifluorometil)-fenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: YS-89676-13-1. Se suspendio el solido blanquecino en CH2O2 y se filtro para dar N-((8-cloro-2-(5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil)quinolin-3-il)metil)-9H- purin-6-amina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 8,46 (1 H, s), 8,05 - 8,24 (3 H, m), 8,02 (1 H, d, J=8,0 Hz), 7,90 - 7,98 (2 H, m), 7,56 - 7,64 (2 H, m), 7,52 (1 H, t, J=8,7 Hz), 4,64 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 473,2 [M+H]+.

Ejemplo 88: Preparacion de N-((2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)-metil)-9H-purin-6-amina:

imagen212

A una disolucion enfriada de diisopropilamida de litio, disol. 1,5 M de mono(tetrahidrofurano) en ciclohexano (25,82 ml, 38,73 mmol) en 72 ml de THF a -75°C se le anadio una disolucion de 2-cloro-8-metoxiquinolina (5,0000 g, 25,82 5 mmol) en 26 ml de THF gota a gota a lo largo de 35 min (10:00 a.m. ~ 10:35 a.m.) con agitacion y manteniendo la temperatura por debajo de -65°C. Tras 40 min, a la mezcla enfriada se le anadio DMF (2,999 ml, 38,73 mmol) gota a gota y se agito la mezcla a -72°C durante 30 min. Tras 30 min, se extinguio la reaccion con NH4Cl (20 ml) y se repartio entre EtOAc (150 ml) y agua (100 ml). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (100 ml x 1), salmuera (100 ml x 2), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar un solido 10 de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna gel de silice usando el 20% de EtOAc en hexano como eluyente para dar 2-cloro-8-metoxiquinolin-3- carbaldehndo como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,38 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 7,79 (1 H, dd, J=8,4, 1,0 Hz), 7,67 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,44 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 4,00 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 222,1 [M+H]+.

15 2-(3-Fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-carbaldel'ndo

imagen213

Se agito a 100°C una mezcla de 2-cloro-8-metoxiquinolin-3-carbaldehndo (1,8583 g, 8,384 mmol), acido 3- fluorobencenoboronico (1,290 g, 9,223 mmol), tetrakis(tri-fenilfosfina)paladio (0,4844 g, 0,4192 mmol) y carbonato de sodio anhidro (4,443 g, 41,92 mmol) en 76 ml de CH3CN-H2O (3:1). Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura 20 ambiente y se repartio entre EtOAc (200 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un solido de color naranja. El solido de color naranja se purifico mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 25 min como eluyente para dar 2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-carbaldel'ndo como un solido de color amarillo claro: 25 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,09 (1 H, s), 8,94 (1 H, s), 7,80 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,66 (1 H, t, J=8,0

Hz), 7,53 - 7,64 (2 H, m), 7,47 - 7,53 (1 H, m), 7,36 - 7,44 (2 H, m), 4,00 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 282,1 [M+H]+.

Clorhidrato de 3-(clorometil)-2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolina

imagen214

A una disolucion de 2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-carbaldel'ndo (2,2967 g, 8,165 mmol) en tetrahidrofurano 30 (40,83 ml, 8,165 mmol) a 0°C se le anadio borohidruro de sodio (0,4634 g, 12,25 mmol) y se agito la mezcla a 0°C.

Tras 1 h de agitacion a 0°C, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml) y se lavo la fase organica con

salmuera (100 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar (2-(3-fluorofenil)- 8-metoxiquinolin-3-il)metanol como un solido de color marron: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,43 (1 H, s), 7,46 - 7,60 (5 H, m), 7,29 - 7,36 (1 H, m), 7,19 (1 H, dd, J=7,4, 1,6 Hz), 5,50 (1 H, t, J=5,3 Hz), 4,61 (2 H, dd, J=5,5, 0,8 Hz), 3,96 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 284,0 [M+H]+. Se continuo con el solido de color marron en bruto sin 5 purificacion para la siguiente etapa. Se trato una disolucion de (2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metanol (2,2330 g, 7,882 mmol) en cloroformo (26,27 ml, 7,882 mmol) con cloruro de tionilo (2,868 ml, 39,41 mmol) gota a gota, y se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 3 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se evaporo conjuntamente tres veces con CH2Ch para dar clorhidrato de 3-(clorometil)-2-(3-fluorofenil)-8- metoxiquinolina como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,59 (1 H, s), 7,55 - 7,65 (3 H, m), 10 7,44 - 7,52 (2 H, m), 7,33 - 7,41 (1 H, m), 7,23 - 7,30 (1 H, m), 4,91 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 302,0 [M+H]+ (Masa

exacta de la forma neutra: 301,067). Se continuo con el solido de color amarillo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(2-(3-Fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metanamina

imagen215

15 A una disolucion con agitacion de clorhidrato de 3-(clorometil)-2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolina (0,9601 g, 2,839 mmol) en DMF (14,19 ml, 2,839 mmol) se le anadio azida de sodio (0,3691 g, 5,678 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar 3-(azidometil)-2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolina como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 20 ppm 8,48 (1 H, s), 7,54 - 7,62 (3 H, m), 7,43 - 7,49 (2 H, m), 7,32 - 7,39 (1 H, m), 7,21 - 7,28 (1 H, m), 4,68 (2 H, s), 3,97 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 309,1 [M+H]+. Se continuo con el solido de color amarillo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolina (0,8163 g, 2,65 mmol) en 12 ml de THF-H2O (4:1) se le anadio gota a gota trimetil-fosfina, disolucion 1,0 M en THF (3,18 ml, 3,18 mmol) a 25 temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1,5 h, se diluyo la mezcla con NaOH 1 N

enfriado con hielo (100 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con

salmuera (100 ml x 3), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron a presion reducida para dar un solido de color amarillo (0,8054 g). Se purifico el solido de color amarillo (0,8054 g) mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0-100% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min, luego 30 isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min, luego un gradiente del 0% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en

CH2Cl2 a lo largo de 25 min, y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 10 min como

eluyente para dar (2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metanamina como un solido siruposo de color amarillo: 1H- RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,45 (1 H, s), 7,44 - 7,59 (5 H, m), 7,28 - 7,36 (1 H, m), 7,13 - 7,19 (1 H, m), 3,95 (3 H, s), 3,83 (2 H, d, J=0,8 Hz), 1,98 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 283,1 [M+H]+.

35 N-((2-(3-Fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen216

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1418 g, 0,7125 mmol), (2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-

il)metanamina (0,2213 g, 0,7838 mmol) y N,N-diiso-propiletilamina (0,2482 ml, 1,425 mmol) en 1-butanol (7,125 ml, 0,7125 mmol). Tras 24 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna gel de s^lice usando el 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para dar un solido blanquecino. Se suspendio el solido 5 blanquecino en EtOAc y se filtro para dar N-((2-(3-fluoro-fenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,95 (1 H, s), 8,18 - 8,30 (2 H, m), 8,11 (2 H, s), 7,42 - 7,61 (5 H, m), 7,28 - 7,36 (1 H, m), 7,16 (1 H, dd, J=7,1, 1,7 Hz), 4,71 - 4,95 (2 H, m), 3,95 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 401,2 [M+H]+.

Ejemplo 89: Preparacion de N-((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina:

10 Acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)carbamoil)benzoico

imagen217

Se agito a 85°C una mezcla de (S)-2-(1 -(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (0,5000 g, 1,347 mmol), acido 2-fluorobencenoboronico (0,2073 g, 1,482 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,07782 g, 0,06735 mmol) y carbonato de sodio anhidro (0,7138 g, 6,735 mmol) en acetonitrilo-agua (3:1) (12,00 ml, 1,346 mmol). Tras 28 h, se 15 enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida para eliminar el acetonitrilo. Se repartio la mezcla entre CH2Ch (50 ml) y agua (50 ml). Se lavo la fase acuosa (pH 10~11) con CH2Cl2 (50 ml x 2) para retirar los subproductos. Se trato la fase acuosa con HCl 2 N (50 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluoro-fenil)quinolin-3- 20 il)etil)carbamoil)benzoico como un solido: CL-EM (ESI) m/z 448,9 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(1S)-1-(8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina

imagen218

A una suspension de acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-carbamoil)benzoico (0,6046 g, 1,347 25 mmol) en etanol (5,000 ml, 1,347 mmol) se le anadio HCl 12 N (1,123 ml, 13,47 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 22 h, se vertio la mezcla en hielo-agua (100 ml). Se basifico la mezcla con NaOH 10 N (0,4 ml) hasta pH ~ 10 y se extrajo con CH2Ch (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 2) y salmuera (50 ml x 3), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar una mezcla de 2-((S)-1- (8-cloro-2-(2-fluoro-fenil)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona y (1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina 30 como un jarabe de color amarillo. A una mezcla de 2-((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)q[upsilon]inolin-3-il)etil)isoindolin- 1,3-diona y (1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina en etanol (12,50 ml, 1,347 mmol) se le anadio monohidrato de hidrazina (0,4183 ml, 13,47 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 1 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para dar un solido verde. Se purifico el solido verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de 35 CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH

(89:9:1) en CH2Ch durante 25 min como eluyente para dar (1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)-etanamina como un jarabe de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,74 (1 H, s), 8,03 (1 H, dd, J=8,3, 1,3 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,5, 1,3 Hz), 7,50 - 7,65 (3 H, m), 7,33 - 7,43 (2 H, m), 4,03 (1 H, q, J=6,3 Hz), 1,98 (2 H, s),

5

10

15

20

25

1,16 (3 H, d, J=5,5 Hz); CL-EM (ESI) m/z 301,0 [M+H]+. N-((S)-1-(8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen219

Se agito a 110°C una mezcla de 6-cloropurina (0,1680 g, 1,087 mmol), (1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3- il)etanamina (0,2972 g, 0,9882 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,5164 ml, 2,965 mmol) en 1-butanol (9,882 ml, 0,9882 mmol). Tras 26 h, se enfrio la mezcla hasta temperature ambiente y se concentro a presion reducida para dar un jarabe de color amarillo. Se disolvio el jarabe de color amarillo en CH2Cl2 (50 ml) y se lavo con agua (30 ml x 1). Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 35% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 35% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 25 min como eluyente para dar un solido de color tostado. Se suspendio el solido de color tostado en CH2Cl2 y se filtro para dar N-((S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,86 (1 H, s), 8,67 (1 H, s), 8,20 (1 H, s), 8,09 (1 H, s), 7,95 - 8,03 (2 H, m), 7,93 (1 H, dd, J=7,6, 1,0 Hz), 7,69 (1 H, s), 7,58 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,46 - 7,55 (1 H, m), 7,25 - 7,39 (2 H, m), 5,38 (1 H, s), 1,55 (3 H, d, J=7,0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 418,9 [M+H]+.

Ejemplo 90: Preparacion de N-((6-cloro-2-(2-clorofenil)quinoIin-3-il)-metil)-9H-purin-6-amina:

imagen220

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1000 g, 0,5025 mmol), (6-cloro-2-(2-clorofenil)quinolin-3- il)metanamina como una sal de TFA (0,2138 g, 0,5125 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,3501 ml, 2,010 mmol) en 1-butanol (1,005 ml, 0,5025 mmol). Tras 15,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 10 min como eluyente para dar un solido de color tostado (0,0939 g). Se suspendio el solido de color tostado en EtOAc y se filtro para dar N-((6-cloro-2-(2- clorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido de color tostado: fH-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,94 (1 H, s), 8,28 (1 H, s), 8,06 - 8,24 (4 H, m), 8,03 (1 H, d, J=9,0 Hz), 7,75 (1 H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 7,61 (1 H, d, J=7,4 Hz), 7,42 - 7,57 (3 H, m), 4,49 - 4,77 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 421,0 [M+H]+.

Ejemplo 91: Preparacion de N-((8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)-metil)-9H-purin-6-amina:

8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo

imagen221

Se agitaron 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (preparado en el ejemplo 2, 1,000 g, 4,42 mmol), acido 2- fluorofenilboronico (0,681 g, 4,87 mmol), tetrakis(trifenil-fosfina)paladio (0,256 g, 0,221 mmol) y carbonato de sodio (2,34 g, 22,1 mmol) en acetonitrilo-agua 3:1 (48 ml) a 100°C. Tras 1 h, se repartio la mezcla entre EtOAc y agua. Se 5 lavo la fase organica con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el producto en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de EtOAc en hexano como eluyente para dar 8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo: CL-EM (ESI) m/z 286,0 [M+H]+.

10

(8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinoIin-3-il)metanol

imagen222

Se anadio borohidruro de sodio (0,159 g, 4,20 mmol) en porciones a una disolucion con agitacion de 8-cloro-2-(2- fluorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo (0,800 g, 2,80 mmol) en 15 ml de THF. Se agito la reaccion a temperatura ambiente. Tras 1,5 h, se repartio la mezcla entre agua y EtOAc. Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida: CL-EM (ESI) m/z 288,1 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin 15 purificacion para la siguiente etapa.

8-Cloro-3-(clorometil)-2-(2-fluorofenil)quinolina

imagen223

Se anadio cloruro de tionilo (0,850 ml, 11,6 mmol) a una disolucion con agitacion de (8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin- 3-il)metanol (0,670 g, 2,33 mmol) en CH2Ch. Se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 2,5 h, se 20 purifico el producto en bruto mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch-MeOH-NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 para dar 8-cloro-3-(clorometil)-2-(2- fluorofenil)quinolina: CL-EM (ESI) m/z 306,0 [M+H]+.

3-(Azidometil)-8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolina

imagen224

5

10

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25

30

A una disolucion con agitacion de 8-doro-3-(clorometil)-2-(2-fluorofenil)quinolina (0,330 g, 1,08 mmol) en DMF se le anadio azida de sodio (0,561 g, 8,62 mmol) y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 3 horas, se repartio la mezcla entre CH2Cl2 y H2O. Se seco la fase organica sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida: CLEM (ESI) m/z 313,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)metanamina

imagen225

A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolina (0,3083 g, 0,9858 mmol) en THF- H2O (4:1) (12,000 ml) se le anadio gota a gota disolucion 1,0 M de trimetilfosfina en THF (1,183 ml, 1,183 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, se diluyo la mezcla con NaOH 1 N enfriado con hielo (60 ml) y se extrajo con EtoAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml x 2), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color amarillo. Se purifico el jarabe de color amarillo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0-100% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min, luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min, luego un gradiente del 0% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 10 min como eluyente para dar (8-cloro-2-(2- fluorofenil)quinolin-3-il)metanamina. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,62 (1 H, s), 8,03 (1 H, dd, J=8,2, 1,1 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,3, 1,2 Hz), 7,55 -7,66 (2 H, m), 7,49 - 7,55 (1 H, m), 7,34 - 7,43 (2 H, m), 3,72 (2 H, s), 1,94 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 287,2 [M+H]+.

N-((8-Cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen226

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1456 g, 0,7317 mmol), (8-cloro-2-(2-fluoro-fenil)quinolin-3- il)metanamina (0,2203 g, 0,7683 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,3824 ml, 2,195 mmol) en 1-butanol (2,000 ml, 0,7317 mmol). Tras 15 h, se retiro la mezcla del calor y se enfrio hasta temperatura ambiente. Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion y se lavo con MeOH para dar un solido de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 10 min como eluyente para dar un solido blanquecino. Se suspendio el solido blanquecino en EtOAc-hexano (1:1) y se filtro para dar N-((8-cloro-2-(2-fluorofenil)quinolin-3- il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,95 (1 H, s), 8,35 (1 H, s), 8,03 - 8,29 (3 H, m), 7,99 (1 H, dd, J=8,2, 1,1 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=7,5, 1,1 Hz), 7,53 - 7,65 (3 H, m), 7,36 - 7,44 (2 H, m), 4,63 - 4,82 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 405,1 [M+H]+.

Ejemplo 92: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina: 3-(Bromometil)-2-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina

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imagen227

A una disolucion de 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (preparado en el ejemplo 81, 1,4324 g, 5,4775 mmol) en acetato de etilo (36,517 ml, 5,4775 mmol) se le anadio 1,2-diamino-3,4-difluorobenceno (0,78943 g, 5,4775 mmol) a temperature ambiente y se agito la mezcla de color rojo resultante a temperature ambiente. Tras 26 h de agitacion a temperatura ambiente, se concentro la mezcla a presion reducida para dar una mezcla de 3-(bromometil)-2-(2- clorofenil)-5,6-difluoro-quinoxalina y 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina como un jarabe de color marron: CL-EM (ESI) m/z 369,0 y 370,9 [M+H]+. Se continuo con el producto en bruto como un jarabe de color marron en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(3-(2-Clorofenil)-7,8-difluoroquinoxalin-2-il)metanamina y (3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalin-2-il)metanamina

imagen228

A una disolucion con agitacion de una mezcla de 3-(bromometil)-2-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina y 2- (bromometil)-3-(2-clorofenil)-5,6-difluoro-quinoxalina (2,0244 g, 5,477 mmol) en DMF (20,00 ml, 5,477 mmol) se le anadio azida de sodio (0,7122 g, 10,95 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1,5 h, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar una mezcla de 3-(azidometil)-2-(2- clorofenil)-5,6-difluoro-quinoxalina y 2-(azidometil)-3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina como un jarabe de color rojo oscuro: CL-EM (ESl) m/z 332,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

A una disolucion con agitacion de 3-(azidometil)-2-(2-clorofenil)-5,6-difluoro-quinoxalina y 2-(azidometil)-3-(2- clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalina (1,8170 g, 5,478 mmol) en 25 ml de THF-H2O (4:1) se le anadio gota a gota trimetilfosfina, disolucion 1,0 M en THF (6,573 ml, 6,573 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 1 h, se diluyo la mezcla con NaOH 1 N enfriado con hielo (25 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 3). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml x 3), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color verde. Se purifico el jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 120 g usando un gradiente del 0% al 20% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 15 min, luego isocratico al 20% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 15 min, luego un gradiente del 20% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 5 min, y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 15 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: (3-(2-clorofenil)-7,8-difluoroquinoxaIin-2-il)metanamina como un solido siruposo de color verde pardo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,94 - 8,10 (2 H, m), 7,50 - 7,73 (4 H, m), 3,84 (2 H, s. a.), 2,03 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 306,1 [M+H]+ y (3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalin-2- il)metanamina como un solido siruposo de color azul: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,97 - 8,13 (2 H, m), 7,45 - 7,74 (4 H, m), 3,82 (2 H, s), 2,10 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 306,1 [M+H]+. Se confirmaron las estructuras de los dos isomeros separados mediante un experimento de HmBC de 1H-15N.

N-((3-(2-Clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1978 g, 0,9938 mmol), (3-(2-clorofenil)-5,6-difluoroquinoxalin-2- il)metanamina (0,3342 g, 1,093 mmol) y N,N-diiso-propiletilamina (0,5193 ml, 2,981 mmol) en 1-butanol (3,000 ml, 0,9938 mmol). Tras 3 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se suspendio el residuo en MeOH y se recogio el precipitado resultante mediante filtracion, y se lavo con MeOH para dar un solido de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo (0,1232 g) mediante cromatograffa en columna en una columna Redi- SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 14 min como eluyente para dar un solido blanquecino (0,1014 g). Se suspendio el solido blanquecino en CH2Ch y se filtro para dar N-((3-(2-clorofenil)- 5,6-difluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 7,81 - 8,16 (5 H, m), 7,61 - 7,72 (2 H, m), 7,53 - 7,58 (1 H, m), 7,46 - 7,52 (1 H, m), 4,71 - 4,97 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 424,0 [M+H]+.

Ejemplo 93: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-7,8-difluoroquinoxalin- 2-il)metil)-9H-purin-6-amina:

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1359 g, 0,6828 mmol), (3-(2-clorofenil)-7,8-difluoroquinoxalin-2- il)metanamina (preparado en el ejemplo 92, 0,2296 g, 0,7510 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,3568 ml, 2,048 mmol) en 1-butanol (3,000 ml, 0,6828 mmol). Tras 3 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se suspendio el residuo en MeOH y se retiro el solido insoluble solido mediante filtracion. Se concentro el filtrado a presion reducida y se purifico mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 14 min como eluyente para dar un solido de color amarillo. Se suspendio el solido de color amarillo en CH2Ch y se filtro para dar N-((3-(2-clorofenil)-7,8- difluoroquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,92 (1 H, s. a.), 7,93 - 8,15 (4 H, m), 7,60 - 7,69 (2 H, m), 7,51 - 7,57 (1 H, m), 7,45 - 7,50 (1 H, m), 4,83 (2 H, s. a.); CLEM (ESI) m/z 424,1 [M+H]+.

Ejemplo 94: Preparacion de 3-((9H-purin-6-ilamino)metil)-2-(3-fluoro-fenil)quinolin-8-ol:

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A una disolucion de N-((2-(3-fluorofenil)-8-metoxiquinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina (0,1500 g, 0,3746 mmol) en DCM (3,746 ml, 0,3746 mmol) a 0°C, se le anadio gota a gota disol. 1,0 M de tribromuro de boro en DCM (1,498 ml, 1,498 mmol) y se retiro la mezcla del bano de enfriamiento y se agito a temperatura ambiente. Tras 29 h, se enfrio la mezcla hasta 0°C y a la mezcla enfriada, se le anadio hielo-agua (50 ml) con agitacion. Se neutralizo la mezcla con NaOH 10 N (~ 5 ml) hasta pH 8 y se recogio el precipitado resultante mediante filtracion para dar un solido de color amarillo, se purifico el solido de color amarillo (YS-90942-4-1) mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 10 min como eluyente para dar un solido blanquecino. Se suspendio el solido blanquecino en CH2Ch y se filtro para dar 3-((9H-purin-6- ilamino)metil)-2-(3-fluorofenil)quinolin-8-ol como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,95 (1 H, s), 9,58 (1 H, s), 8,18 (4 H, d, J=50,5 Hz), 7,26 - 7,71 (6 H, m), 7,06 (1 H, d, J=6,7 Hz), 4,88 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 387,1 [M+H]+.

Ejemplo 95: Preparacion de N-((5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)-metil)-9H-purin-6-amina: 5-Cloro-3-(3-fluorofenil)-2-metilquinoxalina

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Se agito a 100°C una mezcla de 3,5-dicloro-2-metilquinoxalina (preparado en el ejemplo 85, 0,3361 g, 1,577 mmol), acido 3-fluorobencenoboronico (0,2428 g, 1,735 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,09114 g, 0,07887 mmol) y carbonato de sodio anhidro (0,8360 g, 7,887 mmol) en CH3CN-H2O (3:1) (16,00 ml). Tras 3,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar jarabe de color rojo. Se purifico el jarabe de color rojo mediante cromatograffa en columna de gel de silice una columna Redi-Sep de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-metilquinoxalina como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMF) 8 ppm 8,05 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,00 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,83 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,60 - 7,67 (3 H, m), 7,38 - 7,46 (1 H, m), 2,74 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 273,1 [M+H]+.

2-(Bromometil)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina

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Se suspendieron 5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-metilquinoxalina (0,3907 g, 1,433 mmol) y 1,3-dibromo-5,5- dimetilhidantoma (0,2458 g, 0,8596 mmol) en tetracloruro de carbono (14,33 ml, 1,433 mmol). A la mezcla se le anadio peroxido de benzoflo (0,04627 g, 0,1433 mmol) y se calento la mezcla a reflujo. Tras 24 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 9% de EtOAc en hexano a lo largo de 1,3 min, luego isocratico al 9% de EtOAc durante 7,6 min, luego un gradiente del 9 al 100% de EtOAc

en hexano a lo largo de 12,7 min, luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 2-

(bromometil)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,14 (1 H, dd, J=8,4, 1,2 Hz), 8,12 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,92 (1 H, dd, J=8,4, 7,8 Hz), 7,64 - 7,70 (3 H, m), 7,43 -

7,50 (1 H, m), 4,91 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 351,0 y 352,9 [M+H]+.

2-((5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona

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A una mezcla heterogenea de 2-(bromometil)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)-quinoxalina (0,2401 g, 0,6829 mmol) en DMF (5,003 ml, 0,6829 mmol) se le anadio ftalimida de potasio (0,3162 g, 1,707 mmol) y se agito a 100°C la mezcla heterogenea. Tras agitacion a 100°C durante 1 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se trituro con agua (30 ml). Se recogio el precipitado mediante filtracion. Se lavo el solido con agua (50 ml), luego MeOH (100 ml) y se seco para dar 2-((5-cloro-3-(3-fluorofenil)-quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona como un solido blanquecino: 1H- RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,04 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,84 - 7,92 (5 H, m), 7,60 - 7,81 (4 H, m), 7,38 - 7,46 (1 H, m), 5,22 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 418,1 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxaIin-2-il)metanamina

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A una suspension de 2-((5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona (0,2061 g, 0,493 mmol) en etanol (5,00 ml, 0,493 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,155 ml, 4,93 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 1 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se retiro el subproducto por filtracion y se lavo con MeOH. Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un solido de color amarillo (0,2012 a). Se purifico el solido de color amarillo (0,2012 g) mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 3 min como eluyente para dar (5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin- 2-il)-metanamina como un solido verde: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,12 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,03 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,86 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,59 - 7,71 (3 H, m), 7,39 - 7,47 (1 H, m), 4,06 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 288,1 [M+H]+.

N-((5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,05568 g, 0,2798 mmol), (5-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2- il)metanamina (0,09660 g, 0,3357 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,1462 ml, 0,8394 mmol) en 1-butanol (3,000 ml, 0,2798 mmol). Tras 5 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se suspendio el residuo en MeOH y se recogio el precipitado resultante mediante filtracion, y se lavo con MeOH para dar un solido verde. Se purifico el solido verde (0,0542 g) mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al

100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2CI2 durante 14 min como eluyente para dar N-((5-cloro-3-(3- fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido verde: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,94 (1 H, s), 7,93 - 8,20 (5 H, m), 7,83 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,57 - 7,73 (3 H, m), 7,34 - 7,45 (1 H, m), 5,04 (2 H, s. a.); CLEM (ESI) m/z 406,1 [M+H]+.

5 Ejemplo 96: Preparacion de N-((S)-1 -(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)-quinoMn-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(8- cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina:

8-Cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-carbaldel'ndo

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Se agito a 100°C una mezcla de 2,8-dicloroquinolin-3-carbaldel'ndo (preparado en el ejemplo 2, 1,0000 g, 4,424 10 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,2556 g, 0,2212 mmol) y carbonato de sodio anhidro (2,344 g, 22,12 mmol) en 90 ml de CH3CN-H2O (3:1). Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (150 ml) y agua (150 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un solido de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 100% 15 de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-carbaldehido como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,96 (1 H, s), 9,16 (1 H, s), 8,62 (1 H, dd, J=4,9, 1,8 Hz), 8,31 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,18 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,80 (1 H, dd, J=7,6, 1,8 Hz), 7,76 (1 H, dd, J=8,2, 7,4 Hz), 7,40 (1 H, dd, J=7,4, 4,7 Hz), 2,35 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 283,0 [M+H]+.

20 1-(8-Cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etanol

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A una mezcla heterogenea con agitacion de 8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)-quinolin-3-carbaldel'ndo (1,0741 g, 3,799 mmol) en THF (14,61 ml, 3,799 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (1,900 ml, 5,699 mmol) gota a gota a 0°C, y se permitio que se calentase la mezcla hasta temperatura ambiente a lo largo de 2 h. Se 25 extinguio la reaccion con NH4CI (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color naranja (1,4409 g). Se purifico el jarabe de color naranja (1,4409 g) mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 30 min como 30 eluyente para dar 1-(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etanol como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,68 (1 H, s), 8,59 (1 H, dd, J=4,9, 1,8 Hz), 8,10 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,94 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,74 (1 H, dd, J=7,8, 1,6 Hz), 7,58 - 7,65 (1 H, m), 7,39 (1 H, dd, J=7,6, 4,9 Hz), 5,47 (1 H, d, J=4,3 Hz), 4,64 (1 H, s. a.), 2,25 (3 H, s), 1,20 (3 H, d, J=7,4 Hz); CL-EM (ESI) m/z 299,0 [M+H]+.

Clorhidrato de 8-cloro-3-(1-cloroetil)-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolina

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Se trato una disolucion de 1 -(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-M)quinoMn-3-il)etanol (1,1090 g, 3,712 mmol) en cloroformo (12,37 ml, 3,712 mmol) con cloruro de tionilo (1,350 ml, 18,56 mmol) gota a gota, y se agito la mezcla de reaccion a temperature ambiente. Tras 3 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se evaporo conjuntamente tres veces con CH2Cl2 para dar clorhidrato de 8-cloro-3-(1 -cloroetil)-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolina como un solido siruposo blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,04 (1 H, s), 8,94 (1 H, dd, J=5,7, 1,4 Hz), 8,56 (1 H, d, J=7,4 Hz), 8,19 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,07 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 8,02 (1 H, dd, J=7,6, 5,7 Hz), 7,71 - 7,77 (1 H, m), 5,25 (1 H, d, J=6,3 Hz), 2,52 (3 H, s), 1,92 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 317,0 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 316,053). Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

2-(1-(8-Cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion con agitacion de clorhidrato de 8-cloro-3-(1 -cloroetil)-2-(2-metilpiridin-3-il)-quinolina (1,3130 g, 3,712 mmol) en DMF (18,56 ml, 3,712 mmol) a 100°C se le anadio ftalimida de potasio (1,719 g, 9,281 mmol) a 100°C y se agito la mezcla a 100°C. Tras 1,5 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se trituro con agua (50 ml). Se filtro el solido resultante y se lavo con NaOH 2 N (50 ml) y luego con agua (500 ml) y se seco al aire para dar 2-(1-(8- cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-isoindolin-1,3-diona como un solido de color tostado: CL-EM (ESI) m/z

428,0 [M+H]+. Se continuo con el producto en bruto impuro sin purificacion para la siguiente etapa.

1-(8-Cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinoIin-3-il)etanamina

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A una suspension de 2-(1 -(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-isoindolin-1,3-diona (1,5831 g, 3,700 mmol) en etanol (37,00 ml, 3,700 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (1,161 ml, 37,00 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 1,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se retiro el subproducto por filtracion y se lavo con MeOH (~ 100 ml). Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un solido de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 25 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 10 min como eluyente para dar 1-(8-cloro-2-(2-

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metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etanamina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,75 (1 H, s), 8,58 (1 H, dd, J=4,9, 1,8 Hz), 8,04 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,92 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz)3 7,77 (1 H, s), 7,60 (1 H, dd, J=8,2, 7,4 Hz), 7,34 - 7,44 (1 H, m), 4,09 (1 H, d, J=4,7 Hz), 2,25 (3 H, s), 2,05 (2 H, s. a.), 1,13 (3 H, d, J=6,7 Hz): CL-EM (ESI) m/z 298,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(8-doro-2-(2-metNpiridin-3-

il)quinoIin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

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Se calento a reflujo una mezcla de 6-bromopurina (0,4148 g, 2,084 mmol), 1-(8-cloro-2-(2-metNpiridin-3-N)quinoNn-3- il)etanamina (0,6827 g, 2,293 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,089 ml, 6,253 mmol) en 1-butanol (5,698 ml, 2,084 mmol) con agitacion. Tras 18 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 20 min, luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 20 min, luego un gradiente del 50 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 20 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 10 min como eluyente para dar un solido de color amarillo. Se suspendio el solido de color amarillo en MeOH y se filtro para dar N-(1-(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino. Se disolvieron los 0,1505 g de mezcla racemica en MeOH-CH2Cl2 (1:4, 5 ml), se filtro y separo en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando isocratico al 20% de isopropanol en hexano durante 40 min como eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(8-cloro-2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,90 (1 H, s), 8,59 (2 H, d, J=61,6 Hz), 7,70 - 8,37 (6 H, m), 7,58 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,32 (1 H, s), 5,34 (1 H, s. a.), 2,32 (3 H, s), 1,53 (3 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 416,2 [M+H]+ y N-((R)-1-(8-cloro- 2-(2-metilpiridin-3-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,90 (1 H, s), 8,59 (2 H, d, J=56,5 Hz), 7,69 - 8,34 (6 H, m), 7,58 (1 H, t, J=7,7 Hz), 7,32 (1 H, s), 5,32 (1 H, s), 2,32 (3 H, d, J=1,8 Hz), 1,54 (3 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 416,2 [M+H]+.

Ejemplo 97: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)-metil)-9H-purin-6-amina: 2-(Bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalina y 3-(bromometil)-2-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalina

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A una disolucion de 3-bromo-1-(2-clorofenil)propano-1,2-diona (preparado en el ejemplo 81, 4,2971 g, 16,4325 mmol) en acetato de etilo (109,55 ml, 16,433 mmol) se le anadio 3-nitro-1,2-fenilendiamina (2,5165 g, 16,433 mmol) a temperatura ambiente y se agito la mezcla de color rojo resultante a temperatura ambiente. Tras 26 h de agitacion

a temperature ambiente, se concentro la mezcla a presion reducida para dar 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5- nitroquinoxalina incluyendo su regioisomero como un jarabe de color rojo: CL-EM (ESI) m/z 378,0 y 379,9 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto como un jarabe de color rojo en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

2-((3-(2-Clorofenil)-5-nitroquinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona y 2-((3-(2-clorofenil)-8-nitroquinoxalin-2- 5 il)metil)isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion con agitacion de una mezcla de 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalina y 3-(bromometil)- 2-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalina (6,2215 g, 16,43 mmol) en DMF (82,16 ml, l6,43 mmol) se le anadio ftalimida de potasio (7,609 g, 41,08 mmol) y se agito la mezcla a 100°C. Tras 2 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se

10 trituro con agua (150 ml). Se filtro el solido resultante y se lavo con NaOH 2 N (150 ml) y luego con agua (500 ml) y se seco para dar una mezcla de 2-((3-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona y 2-((3-(2- clorofenil)-8-nitroquinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona como un solido de color marron oscuro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6); CL-EM (ESI) m/z 445,1 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

15 2-((5-Amino-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona y 2-((8-amino-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2- il)metil)isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion de 2-((3-(2-clorofenil)-5-nitroquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona y 2-((3-(2-clorofenil)-8- nitroquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona (5,9271 g, 13,32 mmol) en EtOAc (78,38 ml, 13,32 mmol) se le anadio 20 cloruro de estano (II) dihidratado (15,17 g, 66,62 mmol) y se calento la mezcla a reflujo. Tras 5 h, se concentro la mezcla a presion reducida para eliminar EtOAc. Al residuo se le anadio NaHCO3 acuoso saturado (300 ml). Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion y se lavo con agua (300 ml) para dar un solido de color marron. Se suspendio el solido de color marron en CH2Cl2 (200 ml) y se retiro por fi ltracion a traves de un lecho de Celite™ y se lavo el solido bien con CH2Ch (100 ml). Se concentro el filtrado a presion reducida para dar un jarabe de color 25 marron oscuro (0,7 g). Se purifico el jarabe de color marron oscuro (0,7 g) mediante cromatograffa en columna de

gel de silice en una columna Redi-SepTM de 120 g usando un gradiente del 0 al 26% de EtOAc en hexano a lo largo de 7 min, luego isocratico al 26% de EtOAc en hexano durante 10 min, luego un gradiente del 26 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, y luego isocratico al 100% de EtOAc en hexano durante 15 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: 2-((5-amino-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona como un 30 solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,83 - 7,91 (4 H, m), 7,62 - 7,68 (2 H, m), 7,45 - 7,59 (3 H, m), 6,97 (1

H, dd, J=8,4, 1,0 Hz), 6,91 (1 H, dd, J=7,6, 1,0 Hz), 6,11 (2 H, s), 4,87 (2 H, s. a.), 90942-16-2-1H-RMN; CL-EM (ESI) m/z 415,1 [M+H]+ y 2-((8-amino-3-(2-clorofenil)-quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,83 - 7,91 (4 H, m), 7,59 - 7,66 (2 H, m), 7,46 - 7,58 (3 H, m), 7,21 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 6,92 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 5,74 (2 H, s), 4,90 (2 H, d, J=31,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 415,1 [M+H]+. Se 35 confirmaron las estructuras de los dos regioisomeros mediante un experimento de HMBC de 1H-15N y NOE 1D.

2-((3-(2-Clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metil)isoindoIin-1,3-diona

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Se disolvio 2-((8-amino-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona (1,1337 g, 2,733 mmol) en acetona (39,04 ml, 2,733 mmol) y se enfrio hasta 0°C. Mientras se agitaba, se trato la disolucion en primer lugar con acido clorhffdrico 2 M (7,652 ml, 15,30 mmol) y luego gota a gota con nitrito de sodio ac. 1 M (5,466 ml, 5,466 mmol) mientras se mantema la temperatura de la mezcla a 0°C. Tras completarse las adiciones, se agito la mezcla durante 15 min y luego se trato con yoduro de potasio ac. 5 M (5,411 ml, 27,06 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de 5°C. Entonces se permitio que se calentase la mezcla hasta 15°C a lo largo de 3,5 h. Se elimino la acetona a presion reducida, y se repartio el residuo entre agua (100 ml) y acetato de etilo (100 ml). Se lavo la disolucion organica con bisulfito de sodio acuoso al 10% (100 ml x 1) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (100 ml x 1), salmuera (100 ml x 1), se seco sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un solido siruposo de color violeta oscuro. Se purifico el solido siruposo de color violeta oscuro mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 15 min y luego isocratico al 50% de EtOAc en hexano durante 25 min como eluyente para dar 2-((3-(2- clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona como un solido: CL-EM (ESI) m/z 526,0 [M+H]+.

(3-(2-Clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metanamina

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A una suspension de 2-((3-(2-clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona (0,5530 g, 1,052 mmol) en etanol (10,00 ml, 1,052 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,3301 ml, 10,52 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 20 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9: 1) en CH2Ch a lo largo de 25 min, y luego isocratico al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 5 min como eluyente para dar (3-(2-clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2- il)metanamina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,50 (1 H, dd, J=IA, 1,2 Hz), 8,14 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 7,52 - 7,71 (5 H, m), 3,84 (2 H, s), 2,15 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 396,0 [M+H]+.

N-((3-(2-Clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1119 g, 0,5622 mmol), (3-(2-clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2- il)metanamina (0,2669 g, 0,6746 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,2938 ml, 1,687 mmol) en 1-butanol (2,000 ml, 0,5622 mmol). Tras 3 h, se retiro la mezcla del calor y se recogio el precipitado verde mediante filtracion y se lavo el solido con MeOH para dar un solido verde. Se purifico el solido verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 5 min como eluyente para dar un solido de color amarillo. Se suspendio el solido de color amarillo en CH2Cl2 y se filtro para dar N-((3-(2-cloro- fenil)-8-yodoquinoxalm-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 8,48 (1 H, d, J=7,4 Hz), 8,03 - 8,20 (3 H, m), 7,43 - 7,88 (6 H, m), 4,84 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z

514,0 [M+H]+.

Ejemplo 98: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-8-(metilsulfonil)-quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA:

MeSOjNa (2 eqv )

(CuOTf)2PhH (0,05 eqv.)

N-N'-dimetilendiamina (0,1 eqv)

DMSO (0,1946 M) ‘

110°C, 20 h Purificado

mediante HPLC semi-prep B,5%

A un tubo de Schlenk con una barra de agitacion se le anadio N-((3-(2-clorofenil)-8-yodoquinoxalin-2-il)metil)-9H- purin-6-amina (preparada en el ejemplo 97, 0,1000 g, 0,19 mmol), complejo de trifluorometanosulfonato de cobre (I)- tolueno (2 a 1) (0,0050 g, 0,0097 mmol) y metanosulfinato de sodio (0,047 g, 0,39 mmol) bajo una atmosfera de argon. Entonces se cubrio la abertura del tubo con un septo de goma y se establecio una atmosfera de argon. Se anadio N,N’-dimetiletilendiamina (0,0021 ml, 0,019 mmol) y DMSO (1,0 ml, 0,19 mmol) mediante jeringa. Se sustituyo el septo por una tapa a rosca recubierta con teflon y se puso el recipiente de reaccion a 110°C. Tras agitacion durante 20 h, se enfrio la mezcla de reaccion hasta temperatura ambiente, se diluyo con CH2Cl2 (50 ml), se filtro a traves de un lecho de gel de s^lice, se lavo el lecho con cH2Cl2 (100 ml). Se lavo el filtrado con agua (50 ml x 2) y salmuera (50 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un jarabe de color verde. Se purifico el jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 3 min como eluyente para dar un solido siruposo de color rojo (0,0172 g). Se purifico el jarabe de color rojo oscuro (0,0172 g) mediante HPLC semiprep. en una columna C18 usando un gradiente del 20-70% de CH3CN (TFA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente para dar N-((3-(2-clorofenil)-8-(metilsulfonil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA como un solido de color amarillo claro: cL-EM (ESI) m/z 466,1 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 465,077).

Ejemplo 99: Preparacion de N-((3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2-il)-metil)-9H-purin-6-amina:

2-((3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxaIin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona

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Se disolvio 2-((5-amino-3-(2-clorofenil)quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona (preparado en el ejemplo 97, 0,8364 g, 2,016 mmol) en acetona (28,80 ml, 2,016 mmol) y se enfrio hasta 0°C. Mientras se agitaba, se trato la disolucion en primer lugar con acido ciorhffdrico 2 M (5,645 ml, 11,29 mmol) y luego gota a gota con nitrito de sodio ac. 1 M (6,049 ml, 6,049 mmol) mientras se mantema la temperatura de la mezcla a 0°C. Una vez completadas las adiciones, se agito la mezcla durante 15 min y luego se trato con yoduro de potasio ac. 5 M (4,839 ml, 24,19 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de 5°C. Entonces se permitio que se calentase la mezcla hasta 15°C a lo largo de 3 h. Se elimino la acetona a presion reducida, y se repartio el residuo entre agua (100 ml) y acetato de etilo (100 ml). Se lavo la disolucion organica con bisulfito de sodio acuoso al 10% (100 ml x 3) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (100 ml x 1), salmuera (100 ml x 1), se seco sobre MgSO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar un solido de color roio. Se purifico el solido de color rojo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc en hexano durante 25 min como eluyente para dar 2-((3-(2-clorofenil)- 5-yodoquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,48 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,97 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,83 - 7,91 (4 H, m), 7,51 - 7,75 (5 H, m), 4,96 (2 H, d, J=21,9 Hz); CLEM (ESI) m/z 526,0 [M+H]+.

(3-(2-Clorofenil)-5-yodoquinoxaIin-2-il)metanamina

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A una suspension de 2-((3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2-il)metil)-isoindolin-1,3-diona (0,7028 g, 1,337 mmol) en etanol (12,00 ml, 1,337 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,4196 ml, 13,37 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 25 min, y luego isocratico al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 5 min como eluyente para dar (3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2- il)metanamina como un solido siruposo de color verde: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,45 (1 H, dd, J=7,4,

1,0 Hz), 8,17 (1 H, dd, J=8,4, 1,2 Hz), 7,52 - 7,74 (5 H, m), 3,83 (2 H, s. a.), 1,97 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 396,0 [M+H]+.

N-((3-(2-Clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,1859 g, 0,9340 mmol), (3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2- il)metanamina (0,4434 g, 1,121 mmol) y N,N-diisopropil-etilamina (0,4880 ml, 2,802 mmol) en 1-butanol (5,000 ml, 0,9340 mmol). Tras 2 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna de gel de silice usando el 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch como eluyente para dar un solido de color amarillo (0,2120 g). Se suspendio el solido de color amarillo en CH2Cl2 y se filtro para dar N-((3-(2-clorofenil)-5-yodoquinoxalin-2-il)metil)-9H- purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,88 (1 H, s. a.), 8,46 (1

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H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 8,12 (2 H, d, J=7,2 Hz), 8,06 (1 H, s), 7,93 (1 H, s), 7,69 (1 H, dd, J=7,4, 1,8 Hz), 7,64 (2 H, t, J=8,0 Hz), 7,53 - 7,59 (1 H, m), 7,48 - 7,53 (1 H, m), 4,83 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 514,0 [M+H]+.

Ejemplo 100: Preparacion de N-((5-cloro-3-(2-doro-5-fluorofenil)-quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina:

5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-2-metilquinoxalina

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Se agito a 100°C una mezcla de 3,5-dicloro-2-metilquinoxalina (preparado en el ejemplo 85, 1,0000 g, 4,693 mmol), acido 2-cloro-5-fluorofenilboronico (0,9002 g, 5,163 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,2712 g, 0,2347 mmol) y carbonato de sodio anhidro (2,487 g, 23,47 mmol) en acetonitrilo-agua (3:1) (47,00 ml). Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-2-metilquinoxalina como un solido siruposo de color rojo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,09 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,03 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,88 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,75 (1 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,61 (1 H, dd, J=8,6, 3,1 Hz), 7,46 - 7,53 (1 H, m), 2,54 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 307,0 [M+H]+.

2-(Bromometil)-5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalina

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Se suspendieron 5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-2-metilquinoxalina (0,3013 g, 0,981 mmol) y 1,3-dibromo-5,5- dimetilhidantoma (0,280 g, 0,981 mmol) en tetracloruro de carbono (9,81 ml, 0,981 mmol). A la mezcla se le anadio peroxido de benzoflo (0,0317 g, 0,0981 mmol) y se calento la mezcla a reflujo. Tras 22 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 5% de EtOAc durante 25 min, luego un gradiente del 5 al 20% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 20% de EtOAc durante 4 min como eluyente para dar 2- (bromometil)-5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-quinoxalina como un solido siruposo de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,12 - 8,21 (2 H, m), 7,92 - 8,00 (1 H, m), 7,76 (1 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,71 (1 H, dd, J=8,6, 3,1 Hz), 7,49 - 7,58 (1 H, m), 4,74 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 387,0 [M+H]+.

2-((5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona

imagen256

A una mezcla heterogenea de 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-cloro-5-fluoro-fenil)quinoxalina (0,1815 g, 0,4702 mmol) en DMF (3,444 ml, 0,4702 mmol) se le anadio ftalimida de potasio (0,2177 g, 1,175 mmol) y se agito la mezcla heterogenea a 100°C. Tras agitacion a 100°C durante 30 min, se concentro la mezcla a presion reducida y se trituro con agua (30 ml). Se recogio el precipitado mediante filtracion. Se filtro el solido resultante y se lavo con NaOH 2 N

(30 ml) y luego con agua (100 ml) y se seco al aire para dar 2-((5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2- il)metil)isoindolin-1,3-diona como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,09 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,95 - 8,01 (1 H, m), 7,82 - 7,91 (5 H, m), 7,65 - 7,75 (2 H, m), 7,43 - 7,52 (1 H, m), 4,99 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 452,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

5 (5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxaIin-2-il)metanamina

imagen257

A una suspension de 2-((5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)-metil)isoindolin-1,3-diona (0,1607 g, 0,355 mmol) en etanol (3,60 ml, 0,355 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,112 ml, 3,55 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se retiro por filtracion el subproducto y se lavo 10 con MeOH. Se concentro el filtrado a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 10 min como eluyente para dar (5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metanamina como un solido siruposo de color verde: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,16 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,06 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 7,87 - 7,95 (1 H, m), 7,74 (1 15 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,61 (1 H, dd, J=8,6, 3,1 Hz), 7,46 - 7,54 (1 H, m), 3,85 (2 H, s), 2,11 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 322,0 [M+H]+.

N-((5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)metil)-9H-purin-6-amina

imagen258

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,07531 g, 0,3784 mmol), (5-cloro-3-(2-cloro-5- 20 fluorofenil)quinoxalin-2-il)metanamina (0,1016 g, 0,3154 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,1648 ml, 0,9461 mmol) en 1-butanol (3,000 ml, 0,3154 mmol). Tras 2 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 20% de CH2C^:MeO:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, luego isocratico al 20% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 14 min, luego un gradiente del 20 al 50% de 25 CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 10 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH

(89:9:1) en CH2Cl2 durante 10 min como eluyente para dar un solido de color amarillo claro (0,0622 g). Se suspendio el solido de color amarillo (0,0622 g) en MeOH y se filtro para dar N-((5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2- il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,92 (1 H, s), 8,03 - 8,19 (4 H, m), 7,82 - 8,01 (2 H, m), 7,63 (1 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,55 (1 H, dd, J=8,6, 3,1 Hz), 7,29 - 7,44 30 (1 H, m), 4,89 (2 H, s); CL-EM (ESI) m/z 440,0 [M+H]+.

Ejemplo 101: Preparacion de N-((S)-1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)- 1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina:

5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-carbaldel'ndo

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35 Se calento a 150°C una mezcla de 2-(bromometil)-5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalina (preparado en el ejemplo 100, 0,5625 g, 1,457 mmol) y metaperyodato de sodio (0,1613 ml, 2,914 mmol) en DMF (9,714 ml, 1,457

5

10

15

20

25

30

35

40

mmol) con agitacion. Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc (100 ml), se lavo con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 10% de EtOAc durante 20 min, luego un gradiente del 10 al 20% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 20% de EtOAc durante 3 min como eluyente para dar 5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-carbaldel'ffdo como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 10,16 (1 H, s), 8,35 - 8,41 (1 H, m), 8,29 - 8,34 (1 H, m), 8,07 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,68 (1 H, dd, J=8,8, 4,9 Hz), 7,44 - 7,58 (2 H, m); CL-EM (ESI) m/z 321,0 [M+H]+.

1-(5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol

imagen260

A una mezcla heterogenea con agitacion de 5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)-quinoxalin-2-carbaldehido (0,1650 g, 0,514 mmol) en THF (5,00 ml, 0,514 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (0,257 ml, 0,771 mmol) gota a gota a 0°C, y entonces se permitio que se calentase la mezcla hasta temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente. Tras 5,5 h, se extinguio la reaccion con NH4Cl (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1-(5-cloro-3-(2-cloro-5- fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,17 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,09 (1 H, dd, J=7,8, 1,2 Hz), 7,88 - 7,96 (1 H, m), 7,72 (1 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,61 (1 H, s. a.), 7,44 - 7,53 (1 H, m), 5,36 (1 H, d, J=6,3 Hz), 4,83 (1 H, s. a.), 1,49 (3 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 337,0 [M+H]+.

2-(1-(5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)isoindolin-1,3-diona

imagen261

A una disolucion de 1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol (0,08320 g, 0,2468 mmol) en tetrahidrofurano (2,468 ml, 0,2468 mmol) se le anadieron trifenilfosfina (0,07766 g, 0,2961 mmol), ftalimida (0,04357 g, 0,2961 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (0,05735 ml, 0,2961 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 6 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se repartio entre EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml). Se secaron las fases organicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi- Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 10% de EtOAc durante 20 min, luego un gradiente del 10 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 50% de EtOAc durante 3 min como eluyente para dar 2-(1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2- il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido de color tostado: CL-EM (ESI) m/z 466,0 [M+H]+.

1-(5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanamina

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A una suspension de 2-(1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)-etil)isoindolin-1,3-diona (0,0802 g, 0,172 mmol) en etanol (3,44 ml, 0,172 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,0540 ml, 1,72 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9: 1) durante 5 min como eluyente para dar 1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-

il)etanamina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,11 - 8,17 (1 H, m), 8,06 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,87 - 7,94 (1 H, m), 7,74 (1 H, dd, J=9,0, 5,1 Hz), 7,67 (1 H, dd, J=8,8, 2,9 Hz), 7,46 - 7,55 (1 H, m), 3,99 (1 H, q, J=6,7 Hz), 2,24 (2 H, s. a.), 1,12 - 1,43 (3 H, m); CL-EM (ESI) m/z 336,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(5-Cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(5-cloro-3-(2-cloro-5- 5 fluorofenil)-quinoxaIin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen263

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,0309 g, 0,155 mmol), 1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin- 2-il)etanamina (0,0522 g, 0,155 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,0811 ml, 0,466 mmol) en 1-butanol (2,00 ml, 0,155 mmol). Tras 50 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo 10 mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de

CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 20 min como eluyente para dar una mezcla racemica como un solido de color amarillo (0,0601 g, 85,2%). Se disolvio la mezcla racemica (0,0601 g) en MeOH-CH2Ch (1:3, 4 ml), se filtro y se separo en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando isocratico al 10% de isopropanol en hexano durante 40 min como 15 eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6- amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,87 (1 H, s), 7,12 - 8,29 (9 H, m), 5,59 (1 H, s. a.), 1,63 (3 H, d, J=5,9 Hz); CL-EM (ESI) m/z 454,1 [M+H]+ y N-((R)-1-(5-cloro-3-(2-cloro-5-fluorofenil)- quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,89 (1 H, s), 7,04 - 8,40 (9 H, m), 5,56 (1 H, s. a.), 1,63 (3 H, d, J=6,8 Hz); CL-EM (ESI) m/z 454,1 [M+H]+.

20 Ejemplo 102: Preparacion de clorhidrato de N-((8-cloro-2-(1-metil-1H-imidazol-5-il)-quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6- amina:

2-((8-Cloro-2-(1-metil-1 H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)metil)isoindoIin-1,3-diona

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Se agito a 100°C una disolucion de 2-((2,8-dicloroquinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3-diona (0,5000 g, 1,400 mmol), 125 metil-5-(tributilestannil)-1 H-imidazol (en bruto) (1,039 g, 2,800 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (0,1618 g, 0,1400 mmol) en 1,4-dioxano (11,67 ml, 1,400 mmol). Tras 22 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se mezclo el residuo con Et2O (20 ml) y se sonico, y se filtro. Se lavo el solido con Et2O (20 ml) y luego hexano (40 ml) para dar un solido blanquecino. Se purifico el solido blanquecino mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de 30 CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH

(89:9:1) durante 5 min como eluyente para dar 2-((8-cloro-2-( 1 -metil-1 H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)metil)isoindolin-1,3- diona como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,36 (1 H, s), 7,86 - 7,97 (7 H, m), 7,62 (1 H, d, J=1,2 Hz), 7,53 (1 H, t, J=8,0 Hz), 5,13 (2 H, s), 4,00 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 403,1 [M+H]+.

5

10

15

20

25

30

(8-Cloro-2-(1-metil-1 H-imidazol-5-M)quinolin-3-il)metanamina

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A una suspension de 2-((8-cloro-2-( 1 -metil-1 H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)-metil)isoindolin-1,3-diona (0,1841 g, 0,457 mmol) en etanol (10,0 ml, 0,457 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,143 ml, 4,57 mmol) y se agito la mezcla a reflujo durante 30 min. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 20 min como eluyente para dar (8-cloro-2-(1-metil-1H- imidazol-5-il)quinolin-3-il)-metanamina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,60 (1 H, s),

7.96 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,91 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,87 (1 H, s), 7,52 - 7,61 (2 H, m), 4,05 (2 H, d, J=0,8 Hz),

3.97 (3 H, s), 2,06 (2 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 273,1 [M+H]+.

Diclorhidrato de N-((8-cloro-2-(1-metil-1H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina:

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,07844 g, 0,3942 mmol), (8-cloro-2-(1-metil-1H-imidazol-5- il)quinolin-3-il)metanamina (0,1075 g, 0,3942 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,2060 ml, 1,182 mmol) en 1-butanol (3,942 ml, 0,3942 mmol). Tras 16 h, se retiro la mezcla del calor. Se filtro el precipitado y se lavo el solido con MeOH para dar un solido blanquecino y filtrado. Se purifico el solido blanquecino mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 20 min como eluyente para dar un solido blanquecino. Se suspendio el solido blanquecino en MeOH y se filtro para dar N-((8-cloro-2-(1-metil- 1H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco. Se trato una suspension de N-((8-cloro- 2-(1-metil-1H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)metil)-9H-purin-6-amina (0,10596 g) en etanol absoluto (7 ml) con patron volumetrico de acido clorhffdrico, disolucion 0,5004 N en agua (1,084 ml, 0,54322 mmol, 2 eqv.). Se agito la mezcla a 95°C, bano de aceite durante 5 min. Tras 5 min, la mezcla se convirtio en una disolucion transparente y se enfrio hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla enfriada a presion reducida para dar un solido de color amarillo claro. Se disolvio el solido de color amarillo claro en 3 ml de agua, se congelo, y se seco en un liofilizador para dar diclorhidrato de N-((8-cloro-2-(1-metil-1H-imidazol-5-il)quinolin-3-il)-metil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,99 (1 H, s. a.), 9,34 (1 H, s), 8,66 (1 H, s), 8,42 - 8,62 (2 H, m), 8,37 (1 H, s), 7,99 - 8,07 (2 H, m), 7,67 (1 H, t, J=8,0 Hz), 5,19 (2 H, s. a.), 4,08 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 391,1 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 390,111).

Ejemplo 103: Preparacion de N-(2-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-il)-9H-purin-6-amina: 5-Cloro-3-isopropilquinoxalin-2(1 H)-ona y 8-cloro-3-isopropil-quinoxalin-2(1H)-ona

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10

15

20

25

30

Se agito una mezcla de 3-clorobenceno-1,2-diamina (preparado en el ejemplo 81, 10,000 g, 70,13 mmol) y 3-metil-2- oxobutirato de etilo (10,22 ml, 70,13 mmol) en acido polifosforico (100,00 g) y se calento a 115°C. Tras 5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se mezclo meticulosamente con agua (300 ml) y se neutralizo con NaOH 10 N (100 ml). Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion, se lavo con agua (1 l) y se seco para dar una mezcla de dos regioisomeros como un solido de color marron. Se suspendio el solido de color marron en MeOH (100 ml), se filtro y se lavo con MeOH (150 ml) para dar una mezcla de 5-cloro-3-isopropilquinoxalin-2(1H)-ona y 8- cloro-3-isopropilquinoxalin-2(1H)-ona como un solido de color tostado: CL-EM (ESI) m/z 223,1 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

2,5-Dicloro-3-isopropilquinoxalina y 3,5-dicloro-2-isopropilquinoxalina

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Se agito a 100°C una mezcla de 5-cloro-3-isopropilquinoxalin-2(1H)-ona y 8-cloro-3-isopropilquinoxalin-2(1H)-ona (3,3933 g, 15,239 mmol) y tricloruro de fosforilo (27,900 ml, 304,78 mmol). Tras 1 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se vertio la mezcla en hielo (~ 200 ml) con agitacion y se neutralizo con NH4OH (100 ml) y hielo (~ 400 ml) con agitacion. Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion, se enjuago con agua (200 ml) y se seco para dar una mezcla de 2,5-dicloro-3-isopropilquinoxalina y 3,5-dicloro-2-isopropilquinoxalina como un solido de color rojo: CL-EM (ESI) m/z 241,0 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

5-Cloro-3-(3-fluorofenil)-2-isopropilquinoxalina y 5-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-isopropilquinoxalina

imagen269

Se agito a 100°C una mezcla de 2,5-dicloro-3-isopropilquinoxalina y 3,5-dicloro-2-isopropil-quinoxalina (2,7397 g, 11,36 mmol), acido 3-fluorofenilboronico (1,749 g, 12,50 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,6565 g, 0,5681 mmol) y carbonato de sodio anhidro (6,021 g, 56,81 mmol) en acetonitrilo-agua (3:1) (120,00 ml). Tras 2,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 20% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 20% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar una mezcla de 5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-isopropilquinoxalina y 5-cloro-2-(3-fluorofenil)-3- isopropilquinoxalina como un solido siruposo de color amarillo claro: CL-EM (ESI) m/z 301,1 [M+H]+. Se continuo con la mezcla de dos regioisomeros como una mezcla sin purificacion adicional para la siguiente etapa.

3-(2-Bromopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinoxalina y 2-(2-bromopropan-2-il)-5-cloro-3-(3-

fluorofenil)quinoxalina

imagen270

Se suspendieron una mezcla de 5-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-isopropilquinoxalina y 5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2- isopropilquinoxalina (3,3042 g, 10,99 mmol) y 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoma (4,712 g, 16,48 mmol) en tetracloruro de carbono (109,9 ml, 10,99 mmol). A la mezcla se le anadio peroxido de benzoMo (0,3548 g, 1,099 5 mmol) y se calento la mezcla a reflujo. Tras 20 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi- SepTM de 120 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo largo de 15 min y luego isocratico al 10% de EtOAc durante 30 min como eluyente para dar 3-(2-bromopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinoxalina y 2-(2-bromopropan-2-il)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina como un solido de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 379,0 y 10 381,0 [M+H]+. Se continuo con la mezcla de dos regioisomeros como una mezcla sin purificacion adicional para la

siguiente etapa.

2-(2-Azidopropan-2-il)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina y 3-(2-azidopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinoxalina

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A una disolucion de 3-(2-bromopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinoxalina y 2-(2-bromopropan-2-il)-5-cloro-3-(3- 15 fluorofenil)quinoxalina (1,0000 g, 2,634 mmol) en metilsulfoxido (17,56 ml, 2,634 mmol) se le anadio azida de sodio (0,3425 g, 5,268 mmol) y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 40 min, se repartio la mezcla entre EtOAc (100 ml) y H2O (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (100 ml x 1), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar una mezcla de 2-(2-azidopropan-2-il)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina y 3- (2-azidopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinoxalina como un solido de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 342,1 20 [M+H]+. Se continuo en bruto con el producto en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

2-(8-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-amina y 2-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxaIin-2-il)propan-2-amina

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A una disolucion con agitacion de una mezcla de 2-(2-azidopropan-2-il)-5-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalina y 3-(2- azidopropan-2-il)-5-cloro-2-(3-fluorofenil)-quinoxalina (0,9002 g, 2,634 mmol) en THF-H2O (4:1) (15,00 ml, 2,634

mmol) se le anadio gota a gota disolucion 1,0 M de trimetilfosfina en THF (5,268 ml, 5,268 mmol) a temperature ambiente y se agito la mezcla a temperatura ambiente. Tras 40 min, se diluyo la mezcla con NaOH 2 N enfriado con hielo (25 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 3). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml x 3), se secaron sobre MgSO4, y se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color verde. Se purifico el 5 jarabe de color verde mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 120 g usando un gradiente del 0% al 20% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 15 min, luego isocratico al 20% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 15 min, luego gradiente del 20% al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 15 min, y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 20 min como eluyente para dar dos regioisomeros separados: 2-(8-cloro-3-(3- 10 fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-amina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,01 - 8,08 (2 H, m), 7,79 - 7,85 (1 H, m), 7,47 - 7,58 (2 H, m), 7,31 - 7,46 (2 H, m), 1,99 (2 H, s. a.), 1,41 (6 H, s); CL-EM (ESI) m/z 316,1 [M+H]+ y 2-(5- cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2-il)propan-2-amina: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,08 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,02 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,85 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,48 - 7,59 (2 H, m), 7,40 - 7,44 (1 H, m), 7,33 - 7,39 (1 H, m), 1,93 (2 H, s), 1,39 (6 H, s); CL-EM (ESI) m/z 316,1 [M+H]+ a 1,100 min.

15 N-(2-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-il)-9H-purin-6-amina

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,2423 g, 1,218 mmol), 2-(5-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2- il)propan-2-amina (0,3845 g, 1,218 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,6363 ml, 3,653 mmol) en 1-butanol (7,000 ml, 1,218 mmol). Tras 62 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo

20 mediante cromatograffa ultrarrapida en una columna gel de silice usando el 30% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 como eluyente para dar N-(2-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-il)-9H-purin-6-amina como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,84 (1 H, s), 8,12 (1 H, dd, j=8,4, 1,0 Hz), 8,00 (2 H, dd, J=7,5, 1,1 Hz), 7,80 - 7,91 (1 H, m), 7,78 (1 H, s), 6,88 - 7,19 (3 H, m), 6,75 (1 H, s), 6,41 (1 H, s), 1,94 (6 H, s); CLEM (ESI) m/z 434,2 [M+H]+.

25 Ejemplo 104: Preparacion de N-(2-(8-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-il)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA:

imagen274

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,0195 g, 0,0982 mmol), 2-(8-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2- il)propan-2-amina (preparado en el ejemplo 103, 0,0310 g, 0,0982 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,0513 ml, 30 0,295 mmol) en 1-butanol (1,00 ml, 0,0982 mmol) durante 62 h y luego se irradio la mezcla a 300 W a 140°C en un

reactor de microondas. Se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se disolvio la mezcla en DMSO (1,5 ml) y se purifico mediante HPLC semiprep. en una columna Gemini™ 10 |i C18 (250 x 21,2 mm, 10 |im) usando un gradiente del 20-70% de CH3CN (tFa al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente para dar N-(2-(8-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)propan-2-il)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA 35 como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,26 (1 H, s), 7,99 - 8,12 (3 H, m), 7,76 - 7,96 (2 H, m), 6,94 - 7,08 (2 H, m), 6,76 (1 H, d, J=7,0 Hz), 6,64 (1 H, d, J=9,0 Hz), 2,01 (6 H, s); CL-EM (ESI) m/z 434,2 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 433,122).

5

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20

25

Ejemplo 105: Preparacion de N-((S)-1-(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA:

2-((S)-1 -(8-Cloro-2-(3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il)quinolin-3-il)-etil)isoindolin-1,3-diona

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Se agito a 100°C una mezcla de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (0,2000 g, 0,539 mmol), 3- (trifluorometil)pirazol (0,0733 g, 0,539 mmol), carbonato de cesio (0,351 g, 1,08 mmol) y en DMF (1,80 ml, 0,539 mmol). Tras 2 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. A la mezcla enfriada se le anadio agua (30 ml). Se extrajo la mezcla con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 10% de EtOAc durante 10 min, luego un gradiente del 10 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,05 (1 H, s), 8,51 (1 H, d, J=2,2 Hz), 8,25 (1 H, dd, J=8,4, 1,0 Hz), 8,08 (1 H, dd, J=7,7, 0,9 Hz), 7,63 - 7,85 (5 H, m), 6,92 (1 H, d, J=2,7 Hz), 5,94 - 6,05 (1 H, m), 1,83 (3 H, d, J=7,0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 471,1 [M+H]+.

(1S)-1-(8-Cloro-2-(3-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)quinolin-3-il)-etanamina

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A una suspension de 2-((S)-1-(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il)-quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (0,0435 g, 0,0924 mmol) en etanol (1,85 ml, 0,0924 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,0290 ml, 0,924 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 5 min como eluyente para dar (1S)-1-(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)- 1H-pirazol-1-il)quinolin-3-il)etanamina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,98 (1 H, s), 8,65 - 8,70 (1 H, m), 8,11 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,02 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,65 - 7,72 (1 H, m), 7,12 (1 H, d, J=2,7 Hz), 4,53 (1 H, q, J=6,8 Hz), 2,26 (2 H, s. a.), 1,24 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 341,0 [M+H]+.

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(3-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)quinolin-3-il)-etil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA

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Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,0107 g, 0,0540 mmol), (1S)-1-(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)-1H- pirazol-1 -il)quinolin-3-il)etanamina (0,0184 g, 0,0540 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,0282 ml, 0,162 mmol) en 1- butanol (1,00 ml, 0,0540 mmol). Tras 13 h a 100°C y luego 6 h a 140°C en reactor de microondas, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se disolvio la mezcla en bruto en DMSO (1,5 ml) y se purifico (1,5 ml (30,9 mg) x 1 inyeccion) mediante HPLC semiprep. en una columna Gemini™ 10 |i C18 (250 x 21,2 mm, 10 |im) usando un gradiente del 20-70% de CH3CN (TfA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente, y se seco en el liofilizador para dar N-((S)-1 -(8-cloro-2-(3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il)quinolin-3-il)etil)-9H- purin-6-amina como una sal de TFA como un solido blanco: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,73 - 8,93 (3 H, m), 8,15 - 8,41 (2 H, m), 7,98 - 8,09 (2 H, m), 7,60 - 7,71 (1 H, m), 7,11 (1 H, d, J=2,3 Hz), 5,85 (1 H, s. a.), 1,71 (3 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 459,1 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 458,098).

Ejemplo 106: Preparacion de N-((S)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(5- cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina:

5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-carbaldel'ffdo

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Se calento a 150°C una mezcla de 2-(bromometil)-5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalina (preparado en el ejemplo 95, 0,8089 g, 2,301 mmol) y metaperyodato de sodio (0,9842 g, 4,601 mmol) en DMF (15,34 ml, 2,301 mmol) con agitacion. Tras 5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc (100 ml), se lavo con Na2S2O3 sat. (50 ml x 1) y salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 10% de EtOAc durante 20 min, luego un gradiente del 0 al 20% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 20% de EtOAc durante 20 min como eluyente para dar 5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-carbaldel'ffdo como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,18 (1 H, s), 8,31 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 8,25 (1 H, dd, J=7,4, 1,2 Hz), 7,99 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,56 - 7,70 (3 H, m), 7,38 - 7,46 (1 H, m); CL-EM (ESI) m/z 287,0 [M+H]+.

1-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol

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A una mezcla heterogenea con agitacion de 5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-carbaldel'ffdo (0,4405 g, 1,537 mmol) en THF (14,95 ml, 1,537 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (1,024 ml, 3,073 mmol) gota a gota a 0°C y entonces se permitio que se calentase la mezcla hasta temperatura ambiente. Tras 3 h, se extinguio la reaccion con NH4Cl ac. saturado (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol

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como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 8,14 (1 H, dd, J=8,4, 1,2 Hz), 8,06 (1 H, dd, J=1,6, 1,4 Hz), 7,87 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,56 - 7,71 (3 H, m), 7,37 - 7,46 (1 H, m), 5,50 (1 H, d, J=6,1 Hz), 5,04 - 5,13 (1 H, m), 1,48 (3 H, d, J=6,3 Hz); CL-EM (ESI) m/z 303,1 [M+H]+.

2-(1-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxaIin-2-il)etil)isoindolin-1,3-diona

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A una disolucion de 1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanol (0,2875 g, 0,9497 mmol) en tetrahidrofurano (9,497 ml, 0,9497 mmol) se le anadieron trifenilfosfina (0,7473 g, 2,849 mmol), ftalimida (0,4192 g, 2,849 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (0,5518 ml, 2,849 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 1 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se repartio entre EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml). Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min e isocratico al 50% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 2-(1-(5- cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,19 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,09 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,91 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,73 - 7,80 (2 H, m), 7,60 - 7,68 (2 H, m), 7,31 - 7,38 (1 H, m), 7,14 - 7,24 (2 H, m), 7,00 - 7,09 (1 H, m), 6,04 - 6,13 (1 H, m), 1,77 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 432,1 [M+H]+.

1-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etanamina

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A una suspension de 2-(1 -(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)-isoindolin-1,3-diona (0,2272 g, 0,526 mmol) en etanol (10,5 ml, 0,526 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,165 ml, 5,26 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 3 min como eluyente para dar 1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2- il)etanamina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,11 (1 H, dd, J=8,4, 1,4 Hz), 8,00 - 8,05 (1 H, m), 7,86 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,57 - 7,69 (3 H, m), 7,38 - 7,47 (1 H, m), 4,32 (1 H, q, J=6,7 Hz), 2,12 (2 H, s. a.), 1,31 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 302,0 [M+H]+.

N-((S)-1-(5-Cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)quinoxalin- 2-il)etil)-9H-purin-6-amina

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30

imagen282

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,09794 g, 0,4921 mmol), 1-(5-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2- il)etanamina (0,1485 g, 0,4921 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,2572 ml, 1,476 mmol) en 1-butanol (6,340 ml, 0,4921 mmol). Tras 22 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 10 min como eluyente para dar el producto deseado como una mezcla racemica como un solido de color amarillo (0,2806 g). Se suspendio el solido de color amarillo en CH2Ch-MeOH (2:1) y se filtro para dar N-(1-(5- cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanco. Se separo la mezcla racemica (5 inyecciones de ~ 40 mg en 1 ml) en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando gradiente isocratico al 10% de isopropanol en hexano durante 40 min como eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(5-cloro-3- (3-fluoro-fenil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,90 (1 H, s), 7,92 - 8,28 (5 H, m), 7,78 - 7,88 (1 H, m), 7,61 - 7,75 (2 H, m), 7,55 (1 H, s), 7,32 (1 H, s), 5,72 (1 H, s), 1,55 (3 H, d, J=6,3 Hz); CL-EM (ESI) m/z 420,1 [M+H]+ y N-((R)-1-(5-cloro-3-(3-fluoro-fenil)quinoxaIin-2-il)etil)- 9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,91 (1 H, s), 7,96 - 8,30 (5 H, m), 7,82 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,62 - 7,75 (2 H, m), 7,54 (1 H, s), 7,32 (1 H, s), 5,72 (1 H, s), 1,55 (3 H, d, J=5,1 Hz); CL-EM (ESI) m/z 420,1 [M+H]+.

Ejemplo 107: Preparacion de N-((S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA: 2-((S)-1-(8-Cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

imagen283

Se agito a 100°C una disolucion de (S)-2-(1 -(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (0,2000 g, 0,5388 mmol), 5-(tributilestannil)tiazol (0,4032 g, 1,078 mmol) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (0,06226 g, 0,05388 mmol) en 1,4- dioxano (4,490 ml, 0,5388 mmol). Tras 94 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 100% de EtOAc en hexano a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de EtOAc durante 7 min como eluyente para dar 2-((S)-1 -(8-cloro-2-(tiazol-5-il)-quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (1 H, s), 8,83 (1 H, s), 8,30 (1 H, d, J=0,8 Hz), 8,13 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,99 (1 H, dd, J=7,6, 1,4 Hz), 7,71 - 7,82 (4 H, m), 7,60 - 7,69 (1 H, m), 6,03 (1 H, q, J=7,2 Hz), 1,88 (3 H, d, J=7,0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 420,1 [M+H]+.

(1S)-1-(8-Cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etanamina

5

10

15

20

25

imagen284

A una suspension de 2-((S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etil)-isoindolin-1,3-diona (0,1280 g, 0,3048 mmol) en etanol (6,097 ml, 0,3048 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,09568 ml, 3,048 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperature ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 100% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 durante 5 min como eluyente para dar (1S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-5- il)quinolin-3-il)etanamina como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,26 (1 H, s), 8,77 (1 H, s), 8,49 (1 H, s), 8,00 (1 H, dd, J=8,2, 1,2 Hz), 7,93 (1 H, dd, J=IA, 1,2 Hz), 7,58 (1 H, dd, J=8,2, 7,4 Hz), 4,63 (1 H, q, J=6,4 Hz), 1,42 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 290,0 [M+H]+.

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA

imagen285

DIE A

(3

eqv

BuOH

100 °C

luego

purificado

mediante HPLC

GO

19

Se agito a 100°C una mezcla de 6-bromopurina (0,01634 g, 0,08213 mmol), (1S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3- il)etanamina (0,02380 g, 0,08213 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,04292 ml, 0,2464 mmol) en 1-butanol (1,521

ml, 0,08213 mmol). Tras 68 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico la mezcla en bruto (1,5 ml (42,86 mg) x 1 inyeccion) mediante HPLC semiprep. en una columna Gemini™ 10 |i C18 (250 x 21,2

mm, 10 |im) usando un gradiente del 20-70% de CH3CN (TFA al 0,1%) en agua (TFA al 0,1%) a lo largo de 40 min como eluyente, y se seco en el liofilizador para dar N-((S)-1-(8-cloro-2-(tiazol-5-il)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como una sal de TFA como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,27 (1 H, s), 8,92 (1 H, s), 8,67 (1 H, s), 8,54 (1 H, s), 8,25 - 8,40 (2 H, m), 7,95 (2 H, d, J=7,8 Hz), 7,53 - 7,62 (1 H, m), 5,97 (1 H, s), 1,70 (3 H, d, J=5,5 Hz); CL-EM (ESI) m/z 408,1 [M+H]+ (Masa exacta de la forma neutra: 407,072).

Ejemplo 108: Preparacion de N-((S)-1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(5-cloro- 2-(3-fluorofenil)-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina:

5-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-carbaldel'ndo

imagen286

fluorofenilboronico (0,6808 g, 4,866 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)-paladio (0,2556 g, 0,2212 mmol) y carbonato de sodio anhidro (2,344 g, 22,12 mmol) en acetonitrilo-agua (3:1) (0,04000 ml). Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante 5 cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de

EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 5- cloro-2-(3-fluorofenil)-quinolin-3-carbaldel'ndo como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,14 (1 H, s), 9,06 (1 H, d, J=0,8 Hz), 8,13 - 8,18 (1 H, m), 7,92 - 8,00 (2 H, m), 7,59 - 7,67 (2 H, m), 7,53 - 7,58 (1 H, m), 7,39 - 7,47 (1 H, m); CL-EM (ESI) m/z 286,0 [M+H]+.

10 1-(5-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etanol

imagen287

A una mezcla heterogenea con agitacion de 5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-carbaldel'Hdo (1,0120 g, 3,542 mmol) en tetrahidrofurano (35,42 ml, 3,542 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (3,542 ml, 10,63 mmol) gota a gota a 0°C (comenzando a las 11:10 a.m.) y entonces se agito la mezcla a temperatura 15 ambiente. Tras 3 h, se extinguio la reaccion con NH4Cl ac. saturado (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3- 20 il)etanol como un solido de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,79 (1 H, s), 8,00 - 8,05 (1 H, m), 7,73 - 7,85 (2 H, m), 7,54 - 7,63 (1 H, m), 7,41 - 7,47 (2 H, m), 7,33 - 7,40 (1 H, m), 5,56 (1 H, d, J=4,3 Hz), 4,98 - 5,06 (1 H, m), 1,27 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 302,0 [M+H]+.

2-(1-(5-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

imagen288

25 A una disolucion de 1 -(5-cloro-2-(3-fiuorofenil)quinolin-3-il)etanol (0,9927 g, 3,290 mmol) en tetrahidrofurano (32,90 ml, 3,290 mmol) se le anadieron trifenilfosfina (2,589 g, 9,870 mmol), ftalimida (1,452 g, 9,870 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (1,943 ml, 9,870 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 1,5 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se repartio entre EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml). Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante 30 cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min e isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 2-(1-(5- cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,84 (1 H, s), 7,98 - 8,04 (1 H, m), 7,85 - 7,90 (1 H, m), 7,82 (1 H, s), 7,74 - 7,81 (2 H, m), 7,65 - 7,71 (2 H, m), 7,21 - 7,33 (2 H, m), 7,12 - 7,19 (2 H, m), 5,76 - 5,82 (1 H, m), 1,83 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) 35 m/z 431,0 [M+H]+.

1-(5-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina

5

10

15

20

25

30

imagen289

A una suspension de 2-(1 -(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-M)etil)-isoindoMn-1,3-diona (1,1115 g, 2,580 mmol) en etanol (51,59 ml, 2,580 mmol) se le anadio hidrazina anhidra (0,8097 ml, 25,80 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 1 h, se enfrio la mezcla hasta temperature ambiente. Se diluyo la mezcla con CH2Cl2 (50 ml), se filtro para retirar el subproducto precipitado, y se lavo el solido filtrado con CH2Ch (50 ml). Se concentro el filtrado que contema el producto deseado a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 25 min, y luego isocratico al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 4 min como eluyente para dar 1-(5- cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etanamina como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,87 (1 H, s), 7,97 - 8,02 (1 H, m), 7,78 - 7,82 (1 H, m), 7,73 (1 H, dd, J=8,4, 7,6 Hz), 7,52 - 7,61 (1 H, m), 7,41 - 7,50 (2 H, m), 7,31 - 7,39 (1 H, m), 4,29 (1 H, q, J=6,7 Hz), 2,10 (2 H, s. a.), 1,19 (3 H, d, J=6,7 Hz); CL-EM (ESI) m/z 301,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(5-Cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3- il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen290

Se agito a 110°C una mezcla de 6-bromopurina (0,4753 g, 2,388 mmol), 1-(5-cloro-2-(3-fluoro-fenil)quinolin-3- il)etanamina (0,7183 g, 2,388 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,248 ml, 7,165 mmol) en 1-butanol (20,00 ml, 2,388 mmol). Tras 59 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 20 min y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 20 min como eluyente para dar el producto deseado como una mezcla racemica como un solido de color tostado (0,7361 g). Se suspendio el solido de color tostado en MeOH, se sonico, y se filtro para dar N-(1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como una mezcla racemica como un solido blanco. Se separo la mezcla racemica (0,1486 g) (3 inyecciones de ~50 mg en 1,5 ml) en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando gradiente isocratico al 10% de isopropanol en hexano durante 40 min como eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMF) 8 ppm 12,92 (1 H, s. a.), 8,83 (1 H, s. a.), 8,63 (1 H, s. a.), 8,11 (2 H, d, J=18,4 Hz), 8,00 (1 H, d, J=8,2 Hz), 7,53 - 7,81 (5 H, m), 7,29 - 7,39 (1 H, m), 5,61 (1 H, s. a.), 1,47 (3 H, s. a.); CL-EM (ESI) m/z 419,2 [M+H]+ y N-((R)-1-(5-cloro-2-(3-fluoro-fenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,93 (1 H, s), 8,84 (1 H, s), 8,63 (1 H, s), 8,10 (2 H, d, J=18,0 Hz), 8,00 (1 H, d, J=8,2 Hz), 7,52 - 7,81 (5 H, m), 7,28 - 7,39 (1 H, m), 5,62 (1 H, s. a.), 1,47 (3 H, s. a.); CLEM (ESI) m/z 419,2 [M+H]+.

5

10

15

20

25

Ejemplo 109: Preparacion de N-((S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina: Acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinolin-3-il)etil)carbamoil)-benzoico

imagen291

Se agito a 85°C una mezcla de (S)-2-(1-(2,8-dicloroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona (0,2000 g, 0,5388 mmol), acido 2,3-difluorobencenoboronico (0,09358 g, 0,5926 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,03113 g, 0,02694 mmol) y carbonato de sodio anhidro (0,2855 g, 2,694 mmol) en acetonitrilo-agua (3:1) (5,200 ml, 0,5387 mmol). Tras 19 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre CH2Cl2 (30 ml) y HCl 2 N (30 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida para dar acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinolin-3-il)etil)carbamoil)benzoico como un solido de tipo espuma de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 467,0 [M+H]+.

(1S)-1-(8-Cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinolin-3-il)etanamina

imagen292

A una suspension de acido 2-(((S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinolin-3-il)etil)-carbamoil)benzoico (0,2515 g, 0,5387 mmol) en etanol (3,000 ml, 0,5387 mmol) se le anadio HCl 12 N (1,500 ml, 18,00 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 12 h, se vertio la mezcla en agua con hielo (50 ml). Se neutralizo la mezcla con NaHCO3 y se extrajo con CH2Cl2 (50 ml x 3). Se lavaron las fases organicas combinadas con salmuera (50 ml x 3), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 50% gradiente de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 5 min como eluyente para dar (1S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinolin-3-il)etanamina como un jarabe de color verde claro: CL-EM (ESI) m/z 319,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(8-Cloro-2-(2,3-difluorofenil)quinoIin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen293

Se agito a 110°C una mezcla de 6-bromopurina (0,07479 g, 0,3758 mmol), (1S)-1-(8-cloro-2-(2,3- difluorofenil)quinolin-3-il)etanamina (0,1089 g, 0,3416 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,1785 ml, 1,025 mmol) en

1-butanol (3,416 ml, 0,3416 mmol). Tras 14,5 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 20 min como eluyente para dar N-((S)-1-(8-cloro-2-(2,3- 5 difluorofenil)quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,86 (1 H, s), 8,71 (1 H, s), 7,91 - 8,28 (5 H, m), 7,61 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,47 (2 H, s. a.), 7,29 (1 H, s. a.), 5,42 (1 H, s. a.), 1,58 (3 H, d, J=7,0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 437,2 [M+H]+.

Ejemplo 110: Preparacion de N-((S)-1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluoro-metil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-

1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina:

10 3-Metil-8-(trifluorometil)quinoxalin-2-ol y 3-metil-5-(trifluoro-metil)quinoxalin-2-ol

O

H2N-: n -V*. X Ij * m'ynyS

h2h: PPA 0 K T 0-XNXJ H CF3 0 h

: CF3 115 °C, 5 h


: 32,77% (1,4:1) 23,56%

Se agito una mezcla de piruvato de etilo (1,262 ml, 11,35 mmol) y 3-(trifluorometil)-benceno-1,2-diamina (2,0000 g, 11,35 mmol) en acido polifosforico (16,000 g) y se calento a 115°C. Tras 5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se mezclo meticulosamente con agua (100 ml) y se neutralizo con NaOH 2 N (160 ml). Se recogio el 15 precipitado resultante mediante filtracion y se lavo el solido con agua (250 ml) y se seco para dar un solido de color marron oscuro como una mezcla de dos regioisomeros. Se purifico el solido de color marron oscuro mediante cromatograffa ultrarrapida en columna en una columna de gel de sflice (volumen de ~ 400 ml de SO2) usando el 30% de EtOAc en hexano y luego el 50% de EtOAc en hexano para dar dos regioisomeros separados: 3-metil-8- (trifluorometil)quinoxalin-2-ol como un solido de color naranja: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,73 (1 H, s), 20 8,00 (1 H, s), 7,86 (1 H, s), 7,45 (1 H, s), 2,45 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 229,0 [M+H]+y 3-metil-5-

(trifluorometil)quinoxaIin-2-ol como un solido de color naranja: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,58 (1 H, s), 7,58 - 7,64 (2 H, m), 7,51 - 7,57 (1 H, m), 2,44 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 229,0 [M+H]+.

3-Cloro-2-metil-5-(trifluorometil)quinoxalina

imagen294

POCI3 (20 eqv.)

100 °C, 1,5 h L II J

89,73%

Sin purificacion CF3

25 Se agito a 100°C una mezcla de 3-metil-8-(trifluorometil)quinoxalin-2-ol (0,8292 g, 3,634 mmol) y oxicloruro de fosforo (6,653 ml, 72,68 mmol). Tras 1,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se vertio la mezcla en hielo (~ 50 ml) con agitacion y se neutralizo con NH4OH (30 ml) y hielo con agitacion. Se recogio el precipitado resultante mediante filtracion, se enjuago con agua (100 ml) y se seco para dar 3-cloro-2-metil-5-(trifluorometil)- quinoxalina como un solido de color rosa: 1H-RMN (400 MHz, DMF) 8 ppm 8,35 (1 H, d, J=8,4 Hz), 8,25 (1 H, d, 30 J=7,4 Hz), 7,94 - 8,02 (1 H, m), 2,80 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 247,0 [M+H]+. Se continuo con el solido de color rosa

en bruto sin purificacion para la siguiente etapa.

3-(2-Clorofenil)-2-metil-5-(trifluorometil)quinoxalina

imagen295

B(OH)2

eqv

Pd(PPh3)4 (0

05

eqv

NajC03 (5

eqv

CH3CN-H2O (3

M)

L,C

100

97

24 A

Se agito a 100°C una mezcla de 3-cloro-2-metil-5-(trifluorometil)quinoxalina (0,7939 g, 3,219 mmol), [reactantes], 35 tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,1860 g, 0,1610 mmol) y carbonato de sodio anhidro (1,706 g, 16,10 mmol) en CH3CN-H2O (3:1) (32,00 ml). Tras 4 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). Se lavo la fase organica con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se

concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 15 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 4 min como eluyente para dar 3-(2-clorofenil)-2-metil-5-(trifluorometil)quinoxalina como un jarabe de color naranja: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,36 - 8,41 (1 H, m), 8,25 (1 H, d, J=7,4 Hz), 5 8,01 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,66 - 7,71 (1 H, m), 7,54 - 7,65 (3 H, m), 2,54 (3 H, s); CL-EM (ESI) m/z 323,0 [M+H]+.

2-(Bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalina

imagen296

Se suspendieron 3-(2-clorofenil)-2-metil-5-(trifluorometil)quinoxalina (0,9969 g, 3,089 mmol) y 1,3-dibromo-5,5- dimetilhidantoma (0,5299 g, 1,853 mmol) en tetracloruro de carbono (30,89 ml, 3,089 mmol). A la mezcla se le 10 anadio peroxido de benzoflo (0,09977 g, 0,3089 mmol) y se calento la mezcla a reflujo. Tras 20 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 5% de EtOAc en hexano a lo largo de 10 min, luego isocratico al 5% de EtOAc durante 30 min, luego un gradiente del 5 al 20% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 20% de EtOAc durante 4 min como eluyente para dar 215 (bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)-quinoxalina como un solido siruposo blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,48 (1 H, dd, J=8,6, 0,8 Hz), 8,37 (1 H, d, J=6,7 Hz), 8,09 (1 H, t, J=7,8 Hz), 7,55 - 7,77 (4 H, m), 4,73 (2 H, d, J=61,8 Hz); CL-EM (ESI) m/z 403,0 [M+H]+.

3-(2-Clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-carbaldel'Hdo

imagen297

20 Se calento a 150°C una mezcla de 2-(bromometil)-3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalina (0,5137 g, 1,279 mmol) y metaperyodato de sodio (0,1416 ml, 2,558 mmol) en DMF (8,527 ml, 1,279 mmol) con agitacion. Tras 3 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc (100 ml), se lavo con salmuera (50 ml x 2), se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 10% de EtOAc en hexano a lo 25 largo de 10 min, luego isocratico al 10% de EtOAc durante 20 min, luego un gradiente del 10 al 40% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min, luego isocratico al 40% de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 3-(2- clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-carbaldel'ndo como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO- d6) 8 ppm 10,15 (1 H, s), 8,66 (1 H, dd, J=8,6, 1,2 Hz), 8,52 (1 H, d, J=7,0 Hz), 8,18 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,53 - 7,67 (4 H, m); CL-EM (ESI) m/z 337,0 [M+H]+.

30 1-(3-(2-Clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etanol

imagen298

A una mezcla heterogenea con agitacion de 3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)-quinoxalin-2-carbaldel'ndo (0,2129 g,

0,632 mmol) en tetrahidrofurano (6,32 ml, 0,632 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (0,632 ml, 1,90 mmol) gota a gota a 0°C (comenzando a las 11:20 a.m.) y entonces se agito la mezcla a temperature ambiente. Tras 3 h, se extinguio la reaccion con NH4Cl ac. sat. (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y 5 se concentraron a presion reducida para dar un jarabe de color marron. Se purifico el jarabe de color marron mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etanol como un solido: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,47 (1 H, d, J=8,6 Hz), 8,31 (1 H, d, J=7,0 Hz), 8,05 (1 H, t, J=8,0 Hz), 7,48 - 7,71 (4 H, m), 5,33 (1 H, s. a.), 10 4,84 (1 H, s. a.), 1,28 - 1,55 (3 H, m); CL-EM (ESI) m/z 353,0 [M+H]+.

2-(1 -(3-(2-Clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-isoindolin-1,3-diona

imagen299

A una disolucion de 1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etanol (0,08980 g, 0,2546 mmol) en tetrahidrofurano (2,546 ml, 0,2546 mmol) se le anadieron trifenilfosfina (0,2003 g, 0,7637 mmol), ftalimida (0,1124 g, 15 0,7637 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (0,1504 ml, 0,7637 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a

temperatura ambiente. Tras 1 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se repartio entre EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml). Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de silice en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 20 min e isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como 20 eluyente para dar 2-( 1 -(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-isoindolin-1,3-diona como un solido de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 482,0 [M+H]+.

1-(3-(2-Clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etanamina

imagen300

A una suspension de 2-(1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)-etil)isoindolin-1,3-diona (0,07720 g, 0,160 25 mmol) en etanol (3,20 ml, 0,160 mmol) se le anadio hidrato de hidrazina (0,0499 ml, 1,60 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 30 min, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se concentro la mezcla a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-Sep™ de 40 g usando un gradiente del 0% al 100% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a lo largo de 14 min, y luego isocratico al 100% de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 3 min como eluyente para dar 1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2- 30 il)etanamina como un jarabe de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 352,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(3-(2-Clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(3-(2-clorofenil)-5- (trifIuorometil)-quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina

5

10

15

20

25

30

imagen301

Se agito a 110°C una mezcla de 6-bromopurina (0,0383 g, 0,192 mmol), 1-(3-(2-clorofenil)-5- (trifluorometil)quinoxalin-2-il)etanamina (0,0564 g, 0,160 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,0838 ml, 0,481 mmol) en 1-butanol (1,60 ml, 0,160 mmol). Tras 19 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 40 g usando un gradiente del 0 al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 14 min y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 20 min como eluyente para dar N-(1-(3-(2-clorofenil)-5- (trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido de color amarillo claro. Se separo la mezcla racemica (0,0372 g) en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando gradiente isocratico al 15% de isopropanol en hexano durante 40 min como eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(3-(2-clorofenil)-5- (trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,23 - 8,51 (2 H, m), 8,06 - 8,19 (1 H, m), 7,78 - 8,04 (2 H, m), 7,32 - 7,67 (4 H, m), 5,87 (1 H, s. a.), 1,57 (3 H, dd, J=67,4, 6,4 Hz); CL-EM (ESI) m/z 470,2 [M+H]+ y N-((R)-1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)quinoxalin-2-il)etil-9H- purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, cloroformo-d) 8 ppm 8,23 - 8,49 (2 H, m), 8,13 (1 H, t, J=8,6 Hz), 7,78 - 8,04 (2 H, m), 7,35 - 7,69 (4 H, m), 5,86 (1 H, s. a.), 1,44 - 1,70 (3 H, m); CL-EM (ESI) m/z 470,2 [M+H]+.

Ejemplo 111: Preparacion de N-((S)-1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(2-(2- clorofenil)-7-fluoro-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina:

2-(2-Clorofenil)-7-fluoroquinoIin-3-carbaldel'ndo

imagen302

A una disolucion de 2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-carbonitrilo (1,000 g, 3,537 mmol) en tolueno (3,537 ml, 3,537 mmol) a -78°C se le anadio con agitacion, disol. 1 M de DIBAL-H en tolueno (3,891 ml, 3,891 mmol) y se permitio que se calentase la mezcla hasta -15°C con agitacion a lo largo de 13 h. Se enfrio la mezcla en un bano de agua con hielo, se extinguio mediante la adicion de HCl ac. 1 N (14,15 ml, 14,15 mmol) y se agito durante 2 h. A la mezcla se le anadio acetato de potasio (3 g, 30,56 mmol, 8,6 eqv) y se extrajo la mezcla con acetato de etilo (50 ml x 2). Se lavaron las fases organicas combinadas con NaHCO3 saturado (50 ml x 1), salmuera (50 ml x), se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar un solido de color amarillo. Se purifico el solido de color amarillo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 2- (2-clorofenil)-7-fluoro-quinolin-3-carbaldel'ndo como un solido de color amarillo claro: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,88 (1 H, s), 9,11 (1 H, s), 8,44 (1 H, dd, J=9,1, 6,4 Hz), 7,92 (1 H, dd, J=10,3, 2,6 Hz), 7,72 - 7,78 (1 H, m), 7,50 - 7,66 (4 H, m); CL-EM (ESI) m/z 286,1 [M+H]+.

5

10

15

20

25

30

imagen303

A una mezcla con agitacion de 2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-carbaldel'ndo (0,7588 g, 2,656 mmol) en tetrahidrofurano (26,56 ml, 2,656 mmol) se le anadio bromuro de metilmagnesio 3 M en dietil eter (1,328 ml, 3,984 mmol) gota a gota a 0°C (comenzando a las 4:00 p.m.) y se permitio que se calentase la mezcla hasta temperatura ambiente con agitacion a lo largo de 19 h. Se extinguio la reaccion con NH4Cl ac. saturado (50 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml x 1). Se lavaron las fases organicas combinadas con agua (50 ml x 1), salmuera (50 ml x 1), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min y luego isocratico al 50% de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1- (2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etanol como un jarabe de color amarillo: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,63 (1 H, d, J=11,0 Hz), 8,20 (1 H, dd, J=8,6, 6,7 Hz), 7,75 (1 H, dd, J=10,6, 2,7 Hz), 7,42 - 7,66 (5 H, m), 5,39 (1 H, dd, J=57,5, 3,9 Hz), 4,59 - 4,69 (1 H, m), 1,20 (3 H, dd, J=58,7, 6,3 Hz); CL-EM (ESI) m/z 302,0 [M+H]+.

2-(1-(2-(2-Clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona

imagen304

A una disolucion de 1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etanol (0,7018 g, 2,326 mmol) en tetrahidrofurano (23,26 ml, 2,326 mmol) se le anadieron trifenilfosfina (1,220 g, 4,652 mmol), ftalimida (0,6844 g, 4,652 mmol) y azodicarboxilato de diisopropilo (0,9159 ml, 4,652 mmol). Se agito la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. Tras 2 h, se concentro la mezcla a presion reducida y se repartio entre EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml). Se seco la fase organica sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna de gel de sflice en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano a lo largo de 25 min e isocratico al 50% de EtOAc en hexano durante 10 min como eluyente para dar 2-(1 -(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)isoindolin-1,3-diona como un solido blanquecino: CL-EM (ESI) m/z 431,0 [M+H]+.

1-(2-(2-Clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etanamina

imagen305

A una suspension de 2-(1 -(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)-isoindolin-1,3-diona (impura) (0,9331 g, 2,166 mmol) en etanol (43,31 ml, 2,166 mmol) se le anadio hidrato de hidrazina (1,349 ml, 43,31 mmol) y se agito la mezcla a reflujo. Tras 2,5 h, se enfrio la mezcla hasta temperatura ambiente. Se diluyo la mezcla con cH2Cl2 (50 ml), se filtro para retirar el subproducto precipitado, y se lavo el solido filtrado con CH2Cl2 (50 ml). Se concentro el filtrado que contema el producto deseado a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Cl2 a

5

10

15

20

25

30

lo largo de 25 min, y luego isocratico al 50% de CH2Ch:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2CI2 durante 5 min como eluyente para dar 1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)-etanamina como un jarabe de color amarillo: CL-EM (ESI) m/z 301,1 [M+H]+.

N-((S)-1-(2-(2-Clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina y N-((R)-1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3- il)etil)-9H-purin-6-amina

imagen306

Se agito a 110°C una mezcla de 6-bromopurina (0,3221 g, 1,618 mmol), 1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3- il)etanamina (0,4056 g, 1,349 mmol) y N,N-diisopropil-etilamina (0,7047 ml, 4,046 mmol) en 1-butanol (4,495 ml, 1,349 mmol). Tras 37 h, se retiro la mezcla del calor y se concentro a presion reducida. Se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna en una columna Redi-SepTM de 80 g usando un gradiente del 0% al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch a lo largo de 20 min y luego isocratico al 50% de CH2C^:MeOH:NH4OH (89:9:1) en CH2Ch durante 20 min como eluyente para dar el producto deseado como una mezcla racemica como un solido. Se suspendio el solido en MeOH, se sonico, y se filtro para dar N-(1 -(2-(2-clorofenil)-7-fluoroquinolin-3-il)etil)- 9H-purin-6-amina como un solido siruposo de color amarillo. Se disolvio la mezcla racemica en CH2Cl2 (7,5 ml), se filtro y se separo en una columna Chiralpak™ IA (30 x 250 mm, 5 |im) usando gradiente isocratico al 30% de isopropanol en hexano durante 40 min como eluyente para dar dos isomeros separados: N-((S)-1-(2-(2-clorofenil)-7- fluoro-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,86 (1 H, s), 8,52 - 8,80 (1 H, m), 7,91 - 8,26 (4 H, m), 7,26 - 7,82 (6 H, m), 5,28 (1 H, d, J=47,7 Hz), 1,52 (3 H, d, J=6,7 Hz) CL-Em (ESI) m/z 419,2 [M+H]+ y N-((R)-1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoro-quinolin-3-il)etil)-9H-purin-6-amina como un solido blanquecino: 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,86 (1 H, s), 8,56 - 8,81 (1 H, m), 7,91 - 8,28 (4 H, m), 7,25 - 7,82 (6 H, m), 5,15 - 5,44 (1 H, m), 1,52 (3 H, d, J=6,8 Hz); CL-EM (ESI) m/z 419,2 [M+H]+.

Ensayos biologicos

Expresion recombinante de PI3K

Se expresaron conjuntamente con p85 subunidades p110 de longitud completa de PI3k a, p y 8, marcadas en el extremo N-terminal con etiqueta de poliHis, con vectores de expresion de baculovirus en celulas de insecto sf9. Se purificaron heterodfmeros P110/p85 mediante cromatograffa Ni-NTA, Q-HP, Superdex-100 secuenciales. Se almacenaron las isozimas a, p y 8 purificadas a -20°C en Tris 20 mM, pH 8, NaCl 0,2 M, glicerol al 50%, DTT 5 mM, colato de Na 2 mM. Se expreso PI3Ky truncada, residuos 114-1102, marcada en el extremo N-terminal con etiqueta de poliHis, con baculovirus en celulas de insecto Hi5. Se purifico la isozima y mediante cromatograffa Ni-NTA, Superdex-200, Q-HP secuenciales. Se almaceno la isozima y congelada a -80°C en NaH2PO4, pH 8, NaCl 0, 2 M, etilenglicol al 1%, p-mercaptoetanol 2 mM.

: Alfa Beta Delta Gamma

Tris 50 mM: pH 8 pH 7,5 pH 7,5 pH 8

MgCl2: 15 mM 10 mM 10 mM 15 mM

Colato de Na: 2 mM 1 mM 0, 5 mM 2 mM

DTT: 2 mM 1 mM 1 mM 1 mM

ATP: 1 uM 0,5 uM 0,5 uM 1 uM

PIP2: nada 2,5 uM 2,5 uM nada

Tiempo: 1 h 2 h 2 h 1 h

[Enzima]: 15 nM 40 nM 15 nM 50 nM

Ensayos enzimaticos in vitro.

Se realizaron los ensayos en 25 |il con las concentraciones finales anteriores de componentes en placas de polipropileno de color blanco (Costar 3355). El fosfoaceptor de fosfatidilinositol, PtdIns (4,5) P2 P4508, era de Echelon Biosciences. La actividad ATPasa de las isozimas alfa y gamma no se estimulo en gran medida mediante 5 PtdIns (4,5) P2 en estas condiciones y por tanto se omitio del ensayo de estas isozimas. Se disolvieron los compuestos de prueba en dimetilsulfoxido y se diluyeron con diluciones en serie de tres veces. Se anadio el compuesto en DMSO (1 |il) por pocillo de prueba, y se determino la inhibicion en relacion con reacciones que no conteman compuesto, con y sin enzima. Tras la incubacion del ensayo a temperatura ambiente, se detuvo la reaccion y se determino el ATP residual mediante la adicion de un volumen igual de kit de bioluminiscencia de ATP 10 comercial (Perkin Elmer EasyLite) segun las instrucciones del fabricante, y se detecto usando un luminometro AnalystGT.

Proliferacion de celulas B humanas estimulada por anticuerpos anti-IgM Celulas B humanas aisladas:

PBMC aisladas de Leukopac o de sangre reciente humana. Celulas B humanas aisladas usando el protocolo de 15 Miltenyi y el kit de aislamiento II de celulas B. Se purificaron celulas B humanas usando una columna AutoMacs.

Activacion de celulas B humanas

Usar una placa de fondo plano de 96 pocillos, sembrar en placa 50000 celulas B purificadas/pocillo en medio de proliferacion de celulas B (DMEM + FCS al 5%, Hepes 10 mM, 2-mercaptoetanol 50 |iM); 150 |il de medio contienen protema recombinante CD40L-LZ 250 ng/ml (Amgen) y anticuerpo anti-IgM humana 2 |ig/ml (Jackson 20 ImmunoReseach Lab. n.° 109-006-129), mezclados con 50 |il de medio de celulas B que contiene inhibidores de PI3K e incubar 72 h en un incubador a 37°C. Tras 72 h, marcar mediante pulso las celulas B con 3H timidina 0,5-

1 uCi/pocillo durante la noche, ~18 h, y recoger las celulas con un colector TOM.

Compuesto CI50

(3S)-3-(8-cloro-2-(2-clorofenil)-3-quinolinil)-3-(9H-purin-6-ilamino)-1-propanol 0,013138

1- (8-cloro-3-((9H-purin-6-ilamino)metil)-2-quinolinil)-3-piperidinol 0,098845

2- (3-fluorofenil)-3-((1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-8-quinolincarbonitrilo 0,003383

2-(3-fluorofenil)-3-((9H-purin-6-ilamino)metil)-8-quinolincarbonitrilo 0,300015

2-(8-cloro-3-((9H-purin-6-ilamino)metil)-2-quinolinil)-4-fluorofenol 0,818604

2- (8-cloro-3-((9H-purin-6-ilamino)metil)-2-quinolinil)benzonitrilo 0,055087

3- ((1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-(2-piridinil)-8-quinolincarbonitrilo 0,046694

3-(8-cloro-3-((1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil)-2-quinolinil)-4-piridincarboxamida 4,635

8-cloro-2-fenil-3-((1S)-1-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-iloxi)etil)quinolina 0,003035

8-cloro-2-fenil-3-((9H-purin-6-iloxi)metil)quinolina 0,081441

N-((1R)-1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)-2-quinoxalinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,053372

N-((1R)-1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,03363

N-((1R)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,02103

N-((1R)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinoxalinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,013869

N-((1R)-1-(8-cloro-2-(1,3-tiazol-2-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,181889

N-((1R)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)propil)-9H-purin-6-amina 0,003757

N-((1R)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)propil)-9H-purin-6-amina 1,243545

N-((1S)-1-(2-(2-(benciloxi)-5-fluorofenil)-8-cloro-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,016795

N-((1S)-1-(2-(2,5-difluorofenil)-8-fluoro-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina 0,012659

N-(1S)-1-(2-(2-cloro-5-fluorofenil)-7-fluoro-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,019962

N-(1S)-1-(2-(2-cloro-5-fluorofenil)-8-fluoro-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina 0,03373

N-((1S)-1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoro-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,028993

N-(1S)-1-(2-(2-clorofenil)-7-fluoro-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina 0,028993

N-(1S)-1-(2-(2-clorofenil)-8-fluoro-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(2-(2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(2-(3,5-difluorofenil)-7-fluoro-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(2-(3,5-difluorofenil)-8-fluoro-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(2-(3-cloro-5-fluorofenil)-8-fluoro-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(2,8-bis(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(2,8-di-2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(2,8-difenil-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(3-(2-clorofenil)-5-(trifluorometil)-2-quinoxalinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(5-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(5-cloro-3-(2-doro-5-fluorofenil)-2-quinoxalinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinoxalinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-1-oxido-2-fenil-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(2-(metiIsulfonil)fenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(3-(metilsulfonil)fenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-(6-fluoro-2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(7-fluoro-2-feniI-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(1,3-tiazol-2-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(1,3-tiazol-4-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(1,3-tiazol-5-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2,3-difluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2,4-difluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2-doro-5-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2-dorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(2-etiI-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(2-etiI-5-fluoro-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-cloro-2-(2-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(2-metoxi-1,3-tiazol-4-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(2-metil-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-2-fluoro-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(2-pirimidinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(3-(metilsulfonil)fenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(3-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(3,5-difluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(3-dorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)butil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)propil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(3-metil-2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-doro-2-(3-piridazinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

0,01137

0,005602

0,005149

0,00707

0,008089

0,001062

0,067391

0,018823

0,010401

0,014192

0,089326

0,008779

0,008554

0,004638

0,006821

0,009416

0,148274

0,011491

0,01221

0,00372

0,005114

0,001636

0,000537

0,0219

0,007589

0,014034

0,046566

0,003602

0,003312

0,00384

0,003557

0,017526

0,004344

0,013972

0,003236

0,090413

0,05577

0,449196

0,005039

0,00263

0,005516

0,006521

0,002416

0,0053

0,033221

0,018032

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(4-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(5-fluoro-2-(2-metilpropil)-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(5-fluoro-2-metil-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-doro-2-(5-fluoro-3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(6-fluoro-2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-(6-metil-2-piridinil)-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-cloro-2-fenoxi-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-cloro-2-fenil-3-quinolinil)etil)-9H-purin-6-amina

N-((1S)-1-(8-fluoro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-fluoro-2-(3-piridinil)-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-(1S)-1-(8-fluoro-2-fenil-3-quinolinil)etil)-7H-purin-6-amina

N-(2-(2-bifenilil)-8-cloro-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(2-(2-clorofenil)-7-fluoro-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(3-(2-clorofenil)-5-fluoro-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(3-(2-clorofenil)-5-yodo-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(3-(2-clorofenil)-5-metil-2-quinoxalinil)metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina

N-(3-(2-clorofenil)-8-(metilsulfonil)-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(3-(2-clorofenil)-8-fluoro-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(5-cloro-3-(2-(trifluorometil)fenil)-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(5-cloro-3-(2-doro-5-fluorofenil)-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(5-cloro-3-(2-dorofenil)-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-(5-cloro-3-(3-fluorofenil)-2-quinoxalinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-bromo-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(1,3-tiazol-2-il)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(1H-pirazoI-4-il)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2-(1-metiletil)-3-piridinil)-3-quinoliniI)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2-(1-metiletil)fenil)-3-quinoIinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(2-(2H-tetrazoI-5-il)fenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2-(metilsulfonil)fenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2,5-difluorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(2-doro-5-fluorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2-dorofenil)-3-quinolinil)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-amina

N-((8-doro-2-(2-metil-3-piridinil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(2-piridinil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(2-tiofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(3-(1-metiIetil)fenil)-3-quinoIiniI)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(3,5-difluorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(3-dorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(3-fluoro-1-piperidinil)-3-quinoIinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(3-fluorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(3-metil-2-piridinil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(4-(1-metiletil)-3-piridinil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(4-(1-metiletil)-5-pirimidinil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cIoro-2-(4-(trifluorometil)-3-piridinil)-3-quinoIinil)metil)-9H-purin-6-amina

N-((8-cloro-2-(4-fluorofenil)-3-quinolinil)metil)-7H-purin-6-amina

N-((8-doro-2-(5-fluoro-2-(1-feniletoxi)fenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina

0,003444

0,010478

0,015529

0,016946

0,003571

0,003099

0,10543

0,029313

0,002654

0,005152

0,015402

0,00142

0,164542

0,088655

0,299212

0,088387

0,194243

2,407455

0,176806

0,041805

0,165211

0,082543

0,130021

0,07192

0,068766

0,208949

0,157905

0,030614

0,017602

9,706546

0,150914

0,038235

0,03835

0,36145

0,013398

0,034112

0,103629

0,305301

0,055993

0,411098

0,09547

0,027542

0,07904

0,025841

0,078872

0,069518

0,265255

0,564971

5

10

15

20

25

30

35

40

N-((8-cloro-2-(5-fluoro-2-(3-piridinilmetoxi)fenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina 0,17832

N-((8-cloro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-amina 0,027381

N-((8-cloro-2-(5-isotiazolil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina 0,06556

N-((8-cloro-2-fenoxi-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina 0,026211

N-((8-cloro-2-fenil-3-quinolinil)metil)-9H-purin-6-amina 0,219179

N-((8-fluoro-2-fenil-3-quinolinil)metil)-7H-purin-6-amina 0,239808

N6-((8-cloro-2-(2-dorofenil)-3-quinolinil)metil)-9H-purin-2,6-diamina 0,008899

Proliferacion de celulas B humanas estimulada por IL-4 Celulas B humanas aisladas:

PBMC humanas aisladas de Leukopac o de sangre reciente humana. Celulas B humanas aisladas usando el protocolo de Miltenyi, kit de aislamiento de celulas B. Se purificaron celulas B humanas mediante una columna AutoMacs.

Activacion de celulas B humanas

Usar una placa de fondo plano de 96 pocillos, sembrar en placa 50000 celulas B purificadas/pocillo en medio de proliferacion de celulas B (DMEM + FCS al 5%, 2-mercaptoetanol 50 |iM, Hepes 10 mM). El medio (150 |il) contiene protema recombinante CD40L-LZ 250 ng/ml (Amgen) e IL-4 10 ng/ml (R&D system n.° 204-IL-025), mezclado con 50-150 |il de medio de celulas B que contiene compuestos e incubar 72 h en un incubador a 37°C. Tras 72 h, marcar mediante pulso las celulas B con 3H timidina 0,5-1 uCi/pocillo durante la noche, ~18 h, y recoger las celulas usando un colector TOM.

Ensayos de proliferacion de PBMC humanas inducida por antigeno T espedfico (toxoide del tetanos)

Se preparan PBMC humanas a partir de mezclas madre congeladas o se purifican a partir de sangre humana reciente usando un gradiente de Ficoll. Usar una placa de fondo redondo de 96 pocillos y sembrar en placa 2x105 PBMC/pocillo con medio de cultivo (RPMI1640 + FCS al 10%, 2-mercaptoetanol 50 uM, Hepes 10 mM). Para las determinaciones de CI50, se sometieron a prueba inhibidores de PI3K de desde 10 |iM hasta 0,001 |iM, en incrementos semilogantmicos y por triplicado. Se anadio toxoide del tetanos, un antfgeno espedfico de celulas T (University of Massachusetts Lab) a 1 |ig/ml y se incubo 6 dfas en un incubador a 37°C. Se recogen los sobrenadantes tras 6 dfas para el ensayo ELISA de IL2, entonces se pulsan las celulas con 3H-timidina durante ~18 h para medir la proliferacion.

Ensayos de GFP para detectar la inhibicion de PI3K de clase la y clase III

AKT1 (PKBa) esta regulada por PI3K de clase Ia activada por factores mitogenicos (IGF-1, PDGF, insulina, trombina, NGF, etc.). En respuesta a estfmulos mitogenicos, AKT1 se transloca desde el citosol hasta la membrana plasmatica. Forkhead (FKHRL1) es un sustrato para AKT1. Es citoplasmatica cuando se fosforila por AKT (supervivencia/crecimiento). Inhibicion de AKT (estasis/apoptosis) - translocacion de forkhead al nucleo. Los dominios FYVE se unen a PI(3)P. La mayona se genera mediante accion constitutiva de PI3K de clase III.

Ensayo de ondulamiento de membrana de AKT (celulas CHO-IR-AKTl-EGFP/GE Healthcare)

Lavar las celulas con tampon de ensayo. Tratarlas con compuestos en tampon de ensayo durante 1 h. Anadir insulina 10 ng/ml. Fijarlas tras 10 min a temperatura ambiente y obtener imagenes.

Ensayo de translocacion de Forkhead (celulas MDA MB468 Forkhead-DiversaGFP)

Tratar las celulas con compuesto en medio de crecimiento durante 1 h. Fijarlas y obtener imagenes.

Ensayo de PI(3)P de clase III (celulas U2OS EGFP-2XFYVE/GE Healthcare)

Lavar las celulas con tampon de ensayo. Tratarlas con compuestos en tampon de ensayo durante 1 h. Fijarlas y obtener imagenes.

El control para los 3 ensayos es wortmanina 10 uM:

AKT es citoplasmatica.

Forkhead es nuclear.

PI(3)P agotada de endosomas.

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Ensayo de biomarcador: Estimulacion por receptor de celulas B de la expresion de CD69 o B7.2 (CD86)

Se estimulo sangre completa humana heparinizada con anticuerpo anti-IgD 10 |ig/ml (Southern Biotech, n.° 903001). Entonces se alicuotaron 90 |il de la sangre estimulada por pocillo de una placa de 96 pocillos y se trataron con 10 |il de diversas concentraciones de compuesto de bloqueo (desde 10-0,0003 |iM) diluido en IMDM + FBS al 10% (Gibco). Se incubaron las muestras juntas durante de 4 h (para la expresion de CD69) a 6 h (para la expresion de B7.2) a 37°C. Se transfirio la sangre tratada (50 |il) a una placa de pocillos profundos, de 96 pocillos (Nunc) para la tincion con anticuerpo con 10 |il de cada uno de CD45-PerCP (BD Biosciences, n.° 347464), CD19-FITC (BD Biosciences, n.° 340719) y CD69-PE (BD Biosciences, n.° 341652). Se transfirieron los segundos 50 |il de la sangre tratada a una segunda placa de pocillos profundos, de 96 pocillos para la tincion con anticuerpo con 10 |il de cada uno de CD19-FITC (BD Biosciences, n.° 340719) y CD86-PeCy5 (Bd Biosciences, n.° 555666). Se realizaron todas las tinciones durante 15-30 minutos en la oscuridad a temperature ambiente. Entonces se liso la sangre y se fijo usando 450 |il de disolucion de lisado de FACS (BD Biosciences, n.° 349202) durante 15 minutos a temperatura ambiente. Entonces se lavaron las muestras 2X en PBS + FBS al 2% antes del analisis FACS. Se separaron las muestras en o bien celulas positivas dobles para CD45/CD19 para la tincion con CD69, o bien celulas positivas para CD19 para la tincion con cD86.

Contraseleccion de gamma: Estimulacion de monocitos humanos para la expresion de fosfo-AKT

Se mantuvo una lmea celular de monocitos humanos, THP-1, en RPMI + FBS al 10% (Gibco). Un dfa antes de la estimulacion, se contaron las celulas usando exclusion de azul tnpano en un hemocitometro y se suspendieron a una concentracion de 1 x 106 celulas por ml de medio. Entonces se alicuotaron 100 |il de celulas mas medio (1 x 105 celulas) por pocillo de placas de pocillos profundos, de 4-96 pocillos (Nunc) para someter a prueba ocho compuestos diferentes. Se dejaron reposar las celulas durante la noche antes del tratamiento con diversas concentraciones (desde 10-0,0003 |iM) de compuesto de bloqueo. Se anadio el compuesto diluido en medio (12 |il) a las celulas durante 10 minutos a 37°C. Se diluyo MCP-1 humana (12 |il, R&D Diagnostics, n.° 279-MC) en medio y se anadio a cada pocillo a una concentracion final de 50 ng/ml. La estimulacion duro 2 minutos a temperatura ambiente. Se anadio tampon de lisis/fijacion Phosflow de FACS precalentado (1 ml de 37°C) (BD Biosciences, n.° 558049) a cada pocillo. Entonces se incubaron las placas a 37°C durante 10-15 minutos adicionales. Se centrifugaron las placas a 1500 rpm durante 10 minutos, se elimino el sobrenadante por aspiracion, y se anadio 1 ml de MEOH al 90% enfriado con hielo a cada pocillo con agitacion vigorosa. Entonces se incubaron las placas o bien durante la noche a -70°C o bien sobre hielo durante 30 minutos antes de la tincion con anticuerpo. Se centrifugaron las placas y se lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco). Se aspiro el lavado y se suspendieron las celulas en el tampon restante. Se anadio pAKT de conejo (50 |il, Cell Signaling, n.° 4058L) a 1:100 a cada muestra durante 1 h a t.a. con agitacion. Se lavaron las celulas y se centrifugaron a 1500 rpm durante 10 minutos. Se aspiro el sobrenadante y se suspendieron las celulas en el tampon restante. Se anadio anticuerpo secundario, Alexa 647 de cabra anti-conejo (50 |il, Invitrogen, n.° A21245) a 1:500, durante 30 minutos a t.a. con agitacion. Entonces se lavaron las celulas 1X en tampon y se suspendieron en 150 |il de tampon para el analisis mediante FACS. Era necesario dispersar las celulas muy bien pipeteando antes de procesarlas en el citometro de flujo. Se procesaron las celulas en un instrumento LSR II (Becton Dickinson) y se separaron en dispersion frontal y lateral para determinar los niveles de expresion de pAKT en la poblacion de monocitos.

Contraseleccion de gamma: Estimulacion de monocitos para la expresion de fosfo-AKT en medula osea de raton

Se diseccionaron femures de raton de cinco ratones BALB/c hembra (Charles River Labs.) y se recogieron en medio RPMI + FBS al 10% (Gibco). Se extrajo medula osea de raton cortando los extremos del femur y lavando con 1 ml de medio usando una aguja de calibre 25. Entonces se disperso la medula osea en medio usando una aguja de calibre 21. Se aumento el volumen de medio hasta 20 ml y se contaron las celulas usando exclusion de azul tnpano en un hemocitometro. Entonces se aumento la suspension celular hasta 7, 5 x 106 celulas por 1 ml de medio y se alicuotaron 100 |il (7, 5 x 105 celulas) por pocillo en placas de pocillos profundos, de 4-96 pocillos (Nunc) para someter a prueba ocho compuestos diferentes. Se dejaron reposar las celulas a 37°C durante 2 h antes del tratamiento con diversas concentraciones (desde 10-0,0003 |iM) de compuesto de bloqueo. Se anadio el compuesto diluido en medio (12 |il) a celulas de medula osea durante 10 minutos a 37°C. Se diluyo MCP-1 de raton (12 |il, R&D Diagnostics, n.° 479-JE) en medio y se anadio a cada pocillo a una concentracion final de 50 ng/ml. La estimulacion duro 2 minutos a temperatura ambiente. Se anadio a cada pocillo 1 ml de tampon de lisis/fijacion Phosflow de FACS precalentado a 37°C (BD Biosciences, n.° 558049). Entonces se incubaron las placas a 37°C durante 10-15 minutos adicionales. Se centrifugaron las placas a 1500 rpm durante 10 minutos. Se elimino el sobrenadante mediante aspiracion y se anadio 1 ml de MEOH al 90% enfriado con hielo a cada pocillo con agitacion vigorosa. Entonces se incubaron las placas o bien durante la noche a -70°C o bien sobre hielo durante 30 minutos antes de la tincion con anticuerpo. Se centrifugaron las placas y se lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco). Se aspiro el lavado y se suspendieron las celulas en el tampon restante. Entonces se anadio bloqueo de Fc (2 |il, BD Pharmingen, n.° 553140) por pocillo durante 10 minutos a temperatura ambiente. Tras el bloqueo, se anadieron 50 |il de anticuerpos primarios diluidos en tampon; CD11b-Alexa488 (BD Biosciences, n.° 557672) a 1:50, CD64-PE (BD Biosciences, n.° 558455) a 1:50 y pAKT de conejo (Cell Signaling, n.° 4058L) a 1:100 a cada muestra durante 1 h a TA con agitacion. Se anadio tampon de lavado a las celulas y se centrifugaron a 1500 rpm durante 10 minutos. Se aspiro el

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sobrenadante y se suspendieron las celulas en el tampon restante. Se anadio anticuerpo secundario; Alexa 647 de cabra anti-conejo (50 |il, Invitrogen, n.° A21245) a 1:500, durante 30 minutos a t.a. con agitacion. Entonces se lavaron las celulas 1X en tampon y se suspendieron en 100 |il de tampon para el analisis de FACS. Se procesaron las celulas en un instrumento LSR II (Becton Dickinson) y se separaron en celulas positivas dobles para CD11b/CD64 para determinar los niveles de expresion de pAKT en la poblacion de monocitos.

Ensayo de pAKT in vivo

Se administran vehuculo y compuestos por v^a oral (0,2 ml) mediante sonda nasogastrica (Oral Gavage Needles Popper & Sons, New Hyde Park, NY) a ratones (lmea transgenica 3751, hembra, 10-12 semanas Amgen Inc, Thousand Oaks, CA) 15 min antes de la inyeccion i.v. (0,2 ml) de anticuerpos anti-IgM FITC (50 ug/raton) (Jackson Immuno Research, West Grove, PA). Tras 45 min., se sacrifican los ratones dentro de una camara de CO2. Se extrae sangre mediante puncion cardiaca (0,3 ml) (jeringuillas de 25 g de 1 cc, Sherwood, St. Louis, MO) y se transfiere a un vial conico de 15 ml (Nalge/Nunc International, Dinamarca). Se fija inmediatamente la sangre con 6,0 ml de tampon de lisis/fijacion Phosflow de BD (BD Bioscience, San Jose, CA), 3X invertido y se coloca en un bano de agua a 37°C. Se retira la mitad del bazo y se transfiere a un tubo eppendorf que contiene 0,5 ml de PBS (Invitrogen Corp, Grand Island, NY). Se tritura el bazo usando una trituradora de tejido (Pellet Pestle, Kimble/Kontes, Vineland, NJ) y se fija inmediatamente con 6,0 ml de tampon de lisis/fijacion Phosflow de BD, 3X invertido y se coloca en un bano de agua a 37°C. Una vez que se han recogido los tejidos se disloca cervicalmente el raton y se desecha el cadaver. Tras 15 min, se retiran los viales conicos de 15 ml del bano de agua a 37°C y se colocan sobre hielo hasta que los tejidos se procesan adicionalmente. Se filtran los bazos triturados a traves de un tamiz celular de 70 |im (BD Bioscience, Bedford, MA) al interior de otro vial conico de 15 ml y se lavan con 9 ml de PBS. Se centrifugan los esplenocitos y la sangre a 2.000 rpm durante 10 min (fno) y se aspira el tampon. Se resuspenden las celulas en 2,0 ml de alcohol metflico al 90% frio (-20°C) (Mallinckrodt Chemicals, Phillipsburg, NJ). Se anade lentamente el metanol mientras el tubo conico se agita con vortex rapidamente. Se almacenan entonces los tejidos a -20°C hasta que las celulas pueden tenirse para el analisis de FACS.

Inmunizacion con TNP de multiples dosis

Se recogio sangre mediante hemorragias oculares retroorbitales de ratones hembra BALB/c de 7-8 semanas de edad (Charles River Labs.) en el dfa 0 antes de la inmunizacion. Se dejo que la sangre coagulara durante 30 minutos y se centrifugo a 10.000 rpm en tubos Microtainer de suero (Becton Dickinson) durante 10 minutos. Se recogieron los sueros, se alicuotaron en tubos Matrix (Matrix Tech. Corp.) y se almacenaron a -70°C hasta que se realizo el ELISA. Se les administro a los ratones compuesto por via oral antes de la inmunizacion y a periodos de tiempo posteriores basandose en la vida de la molecula. Entonces se inmunizaron los ratones con o bien 50 |ig de TNP-LPS (Biosearch Tech., n.° T-5065), 50 |ig de TNP-Ficoll (Biosearch Tech., n.° F-1300) o bien 100 |ig de TNP- KLH (Biosearch Tech., n.° T-5060) mas alumbre al 1% (Brenntag, n.° 3501) en PBS. Se preparo la disolucion de TNP-KLH mas alumbre invirtiendo suavemente la mezcla 3-5 veces cada 10 minutos durante 1 hora antes de la inmunizacion. En el dfa 5, tras el ultimo tratamiento, se sacrificaron los ratones con CO2 y se realizo una puncion cardiaca. Se dejo que la sangre coagulara durante 30 minutos y se centrifugo a 10.000 rpm en tubos Microtainer de suero durante 10 minutos. Se recogieron los sueros, se alicuotaron en tubos Matrix y se almacenaron a -70°C hasta que se realizo el analisis adicional. Entonces se midieron los niveles de IgG1, IgG2a, IgG3 e IgM espedficos de TNP en los sueros mediante ELISA. Se uso TNP-BSA (Biosearch Tech., n.° T-5050) para capturar los anticuerpos espedficos de TNP. Se uso TNP-BSA (10 |ig/ml) para recubrir placas de ELISA de 384 pocillos (Corning Costar) durante la noche. Entonces se lavaron las placas y se bloquearon durante 1 h usando disolucion de bloqueo de ELISA de BSA al 10% (KPL). Tras el bloqueo, se lavaron las placas de ELISA y se diluyeron en serie las muestras de suero/patrones y se dejo que se unieran a las placas durante 1 h. Se lavaron las placas y se diluyeron anticuerpos secundarios conjugados con Ig-HRP (anticuerpo de cabra anti-IgG1 de raton, Southern Biotech n.° 1070-05, anticuerpo de cabra anti-IgG2a de raton, Southern Biotech n.° 1080-05, anticuerpo de cabra anti-IgM de raton, Southern Biotech n.° 1020-05, anticuerpo de cabra anti-IgG3 de raton, Southern Biotech n.° 1100-05) a 1:5000 y se incubaron en las placas durante 1 h. Se uso disolucion de peroxidasa TMB (SureBlue Reserve TMB de KPL) para visualizar los anticuerpos. Se lavaron las placas y se dejo que las muestras se revelaran en la disolucion de TMB aproximadamente 5-20 minutos dependiendo de la Ig analizada. Se detuvo la reaccion con acido sulfurico 2 M y se leyeron las placas a una DO de 450 nm.

Para el tratamiento de enfermedades mediadas por PI3K8, tales como artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, los compuestos de la presente invencion pueden administrarse por via oral, por via parenteral, mediante pulverizador de inhalacion, por via rectal o por via topica en formulaciones unitarias de dosificacion que contienen portadores, adyuvantes y vehfculos farmaceuticamente aceptables convencionales. El termino parenteral tal como se usa en el presente documento incluye subcutanea, intravenosa, intramuscular, intraesternal, tecnicas de infusion o por via intraperitoneal.

El tratamiento de enfermedades y trastornos en el presente documento tambien pretende incluir la administracion profilactica de un compuesto de la invencion, una sal farmaceutica del mismo o una composicion farmaceutica de cualquiera a un sujeto (es decir, un animal, preferiblemente un mairnfero, lo mas preferiblemente un ser humano)

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que se cree que necesita tratamiento preventivo, tal como, por ejemplo, artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias y similares.

El regimen de dosificacion para tratar enfermedades mediadas por PI3K8, cancer y/o hiperglucemia con los compuestos de esta invencion y/o composiciones de esta invencion se basa en una variedad de factores, incluyendo el tipo de enfermedad, la edad, el peso, el sexo, el estado medico del paciente, la gravedad del estado, la via de administracion y el compuesto particular empleado. Por tanto, el regimen de dosificacion puede variar ampliamente, aunque puede determinarse rutinariamente usando metodos convencionales. Niveles de dosificacion del orden de desde aproximadamente 0,01 mg hasta 30 mg por kilogramo de peso corporal al dfa, preferiblemente desde aproximadamente 0,1 mg hasta 10 mg/kg, mas preferiblemente desde aproximadamente 0,25 mg hasta 1 mg/kg son utiles para todos los metodos de uso dados a conocer en el presente documento.

Los compuestos farmaceuticamente activos de esta invencion pueden procesarse segun metodos convencionales de farmacia para producir agentes medicinales para su administracion a pacientes, incluyendo seres humanos y otros mairnferos.

Para la administracion oral, la composicion farmaceutica puede estar en forma de, por ejemplo, una capsula, un comprimido, una suspension o un lfquido. La composicion farmaceutica se produce preferiblemente en forma de una unidad de dosificacion que contiene una cantidad dada del principio activo. Por ejemplo, estas pueden contener una cantidad de principio activo de desde aproximadamente 1 hasta 2000 mg, preferiblemente desde aproximadamente 1 hasta 500 mg, mas preferiblemente desde aproximadamente 5 hasta 150 mg. Una dosis diaria adecuada para un ser humano u otro mai^ero puede variar ampliamente dependiendo del estado del paciente y otros factores, aunque, una vez mas, puede determinarse usando metodos de rutina.

El principio activo tambien puede administrarse mediante inyeccion como una composicion con portadores adecuados incluyendo solucion salina, dextrosa o agua. El regimen de dosificacion parenteral diario sera de desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal total, preferiblemente desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg/kg y mas preferiblemente desde aproximadamente 0,25 mg hasta 1 mg/kg.

Pueden formularse preparaciones inyectables, tales como suspensiones oleaginosas o acuosas inyectables esteriles segun lo conocido usando agentes de suspension y agentes humectantes o de dispersion adecuados. La preparacion inyectable esteril tambien puede ser una suspension o disolucion inyectable esteril en un diluyente o disolvente aceptable por via parenteral no toxico, por ejemplo, como una disolucion en 1,3-butanodiol. Entre los vehuculos y disolventes aceptables que pueden emplearse estan agua, disolucion de Ringer y disolucion de cloruro de sodio isotonica. Ademas, se emplean convencionalmente aceites fijos, esteriles como disolvente o medio de suspension. Para este fin, puede emplearse cualquier aceite fijo insfpido, incluyendo mono o digliceridos sinteticos. Ademas, acidos grasos tales como acido oleico encuentran uso en la preparacion de inyectables.

Pueden prepararse supositorios para administracion rectal del farmaco mezclando el farmaco con un excipiente no irritante adecuado tal como manteca de cacao y polietilenglicoles que son solidos a temperaturas habituales pero lfquidos a la temperatura rectal y por tanto se fundiran en el recto y liberaran el farmaco.

Una dosis topica adecuada de principio activo de un compuesto de la invencion es de 0,1 mg a 150 mg administrados de una a cuatro, preferiblemente una o dos veces al dfa. Para la administracion topica, el principio activo puede comprender desde el 0,001% hasta el 10% p/p, por ejemplo, desde el 1% hasta el 2% en peso de la formulacion, aunque puede comprender tanto como el 10% p/p, pero preferiblemente no mas del 5% p/p, y mas preferiblemente desde el 0,1% hasta el 1% de la formulacion.

Las formulaciones adecuadas para la administracion topica incluyen preparaciones lfquidas o semilfquidas adecuadas para la penetracion a traves de la piel (por ejemplo, linimentos, lociones, pomadas, cremas o pastas) u gotas adecuadas para su administracion al ojo, el ofdo o la nariz.

Para la administracion, los compuestos de esta invencion se combinan habitualmente con uno o mas adyuvantes apropiados para la via de administracion indicada. Los compuestos pueden mezclarse con lactosa, sacarosa, polvo de almidon, esteres de celulosa de acidos alcanoicos, acido estearico, talco, estearato de magnesio, oxido de magnesio, sales de sodio y calcio de acidos fosforico y sulfurico, goma arabiga, gelatina, alginato de sodio, polivinilpirrolidina y/o poli(alcohol vimlico), y comprimirse o encapsularse para su administracion convencional. Alternativamente, los compuestos de esta invencion pueden disolverse en solucion salina, agua, polietilenglicol, propilenglicol, etanol, aceite de mafz, aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodon, aceite de sesamo, goma tragacanto y/o diversos tampones. Otros adyuvantes y modos de administracion se conocen bien en la tecnica farmaceutica. El portador o diluyente puede incluir un material de retardo temporal, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera, u otros materiales bien conocidos en la tecnica.

Las composiciones farmaceuticas pueden constituirse en una forma solida (incluyendo granulos, polvos o supositorios) o en una forma lfquida (por ejemplo, disoluciones, suspensiones o emulsiones). Las composiciones farmaceuticas pueden someterse a operaciones farmaceuticas convencionales tales como esterilizacion y/o pueden contener adyuvantes convencionales, tales como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes,

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emulsionantes, tampones, etc.

Las formas farmaceuticas solidas para administracion oral pueden incluir capsulas, comprimidos, pfldoras, polvos y granulos. En tales formas farmaceuticas solidas, el compuesto activo puede mezclarse con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidon. Tales formas farmaceuticas pueden comprender tambien, como en la practica normal, sustancias adicionales distintas de diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de capsulas, comprimidos y pfldoras, las formas farmaceuticas pueden comprender tambien agentes de tamponamiento. Pueden prepararse adicionalmente comprimidos y capsulas con recubrimientos entericos.

Las formas farmaceuticas lfquidas para la administracion oral pueden incluir emulsiones, disoluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmaceuticamente aceptables que contienen diluyentes inertes comunmente usados en la tecnica, tales como agua. Tales composiciones tambien pueden comprender adyuvantes, tales como agentes humectantes, edulcorantes, aromatizantes y de perfume.

Los compuestos de la presente invencion pueden presentar uno o mas atomos de carbono asimetricos y por tanto pueden existir en forma de isomeros opticos asf como en forma de mezclas racemicas o no racemicas de los mismos. Los isomeros opticos pueden obtenerse mediante resolucion de las mezclas racemicas segun procedimientos convencionales, por ejemplo, mediante formacion de sales diastereoisomericas, mediante tratamiento con un acido o una base opticamente activo. Los ejemplos de acidos apropiados son acido tartarico, diacetiltartarico, dibenzoiltartarico, ditoluoiltartarico y canforsulfonico y luego separacion de la mezcla de diaestereoisomeros mediante cristalizacion seguido por liberacion de las bases opticamente activas de estas sales. Un procedimiento diferente para la separacion de isomeros opticos implica el uso de una columna de cromatograffa quiral elegida de manera optima para maximizar la separacion de los enantiomeros. Todavfa otro metodo disponible implica la smtesis de moleculas diastereoisomericas covalentes haciendo reaccionar compuestos de la invencion con un acido opticamente puro en una forma activada o un isocianato opticamente puro. Los diaestereoisomeros sintetizados pueden separarse por medios convencionales tales como cromatograffa, destilacion, cristalizacion o sublimacion, y luego hidrolizarse para suministrar el compuesto enantiomericamente puro. Los compuestos opticamente activos de la invencion pueden obtenerse asimismo usando materiales de partida activos. Estos isomeros pueden estar en forma de un acido libre, una base libre, un ester o una sal.

Asimismo, los compuestos de esta invencion pueden existir como isomeros, es decir, compuestos de la misma formula molecular pero en los que los atomos, en relacion entre sf, estan dispuestos de manera diferente. En particular, los sustituyentes de alquileno de los compuestos de esta invencion estan normal y preferiblemente dispuestos e insertados en las moleculas tal como se indica en las definiciones para cada uno de estos grupos, leyendose de izquierda a derecha. Sin embargo, en determinados casos, un experto en la tecnica apreciara que es posible preparar compuestos de esta invencion en los que estos sustituyentes estan invertidos en orientacion relativa con los otros atomos en la molecula. Es decir, el sustituyente que va a insertarse puede ser el mismo que se indico anteriormente excepto porque se inserta en la molecula en la orientacion inversa. Un experto en la tecnica apreciara que debe interpretarse que estas formas isomericas de los compuestos de esta invencion estan abarcadas dentro del alcance de la presente invencion.

Los compuestos de la presente invencion pueden usarse en forma de sales derivadas de acidos organicos e inorganicos. Las sales incluyen, pero no se limitan a, las siguientes: acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, etanosulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, nicotinato, 2- naftalenosulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 2-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, mesilato y undecanoato. Ademas, los grupos que contienen nitrogeno basico pueden cuaternizarse con agentes tales como haluros de alquilo inferior, tales como cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfatos de dialquilo como sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo y diamilo, haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo como bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Se obtienen de ese modo productos dispersables o solubles en agua o aceite.

Los ejemplos de acidos que pueden emplearse para formar sales de adicion de acido farmaceuticamente aceptables incluyen acidos inorganicos tales como acido clortffdrico, acido sulfurico y acido fosforico y acidos organicos tales como acido oxalico, acido maleico, acido succmico y acido cffrico. Otros ejemplos incluyen sales con metales alcalinos o metales alcalinoterreos, tales como sodio, potasio, calcio o magnesio o con bases organicas.

Tambien se abarcan en el alcance de la presente invencion esteres farmaceuticamente aceptables de un grupo que contiene hidroxilo o acido carboxflico, incluyendo un ester metabolicamente labil o una forma de profarmaco de un compuesto de esta invencion. Un ester metabolicamente labil es uno que puede producir, por ejemplo, un aumento en los niveles en sangre y prolongar la eficacia de la forma no esterificada correspondiente del compuesto. Una forma de profarmaco es una que no esta en una forma activa de la molecula tal como se administra pero que se vuelve terapeuticamente activa tras alguna biotransformacion o actividad in vivo, tal como metabolismo, por ejemplo, escision enzimatica o hidrolffica. Para una discusion general de profarmacos que implican esteres vease Svensson y

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Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Los ejemplos de un anion carboxilato enmascarado incluyen una variedad de esteres, tales como alquilo (por ejemplo, metilo, etilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo), aralquilo (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo) y alquilcarboniloxialquilo (por ejemplo, pivaloiloximetilo). Se han enmascarado aminas como derivados sustituidos con arilcarboniloximetilo que se escinden por esterasas in vivo liberando el farmaco libre y formaldel'ndo (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). Ademas, se han enmascarado farmacos que contienen un grupo NH acido, tal como imidazol, imida, indol y similares, con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Se han enmascarado grupos hidroxilo como esteres y eteres. El documento EP 039.051 (Sloan y Little, 4/11/81) da a conocer profarmacos de acido hidroxamico de base de Mannich, su preparacion y uso. Los esteres de un compuesto de esta invencion pueden incluir por ejemplo los esteres metflico, etflico, propflico y butflico, asf como otros esteres adecuados formados entre un resto acido y un resto que contiene hidroxilo. Los esteres metabolicamente labiles pueden incluir por ejemplo, metoximetilo, etoximetilo, iso-propoximetilo, a-metoxietilo, grupos tales como a-(alquil (C1-C4)-oxi)etilo, por ejemplo, metoxietilo, etoxietilo, propoxietilo, iso-propoxietilo, etc.; grupos 2-oxo-1, 3-dioxolen-4-ilmetilo, tales como 5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-ilmetilo, etc.; grupos alquiltiometilo C1-C3, por ejemplo, metiltiometilo, etiltiometilo, isopropiltiometilo, etc.; grupos aciloximetilo, por ejemplo, pivaloiloximetilo, a-acetoximetilo, etc.; etoxicarbonil-1- metilo; o grupos metilo sustituidos con a-aciloxi-a, por ejemplo a-acetoxietilo.

Ademas, los compuestos de la invencion pueden existir como solidos cristalinos que pueden cristalizarse en disolventes comunes tales como etanol, N,N-dimetil-formamida, agua, o similares. Por tanto, las formas cristalinas de los compuestos de la invencion pueden existir como polimorfos, solvatos y/o hidratos de los compuestos originales o sus sales farmaceuticamente aceptables. Asimismo, debe interpretarse que todas las formas de este tipo se encuentran dentro del alcance de la invencion.

Aunque los compuestos de la invencion pueden administrarse como el unico agente farmaceutico activo, tambien pueden usarse en combinacion con uno o mas compuestos de la invencion u otros agentes. Cuando se administran como una combinacion, los agentes terapeuticos pueden formularse como composiciones separadas que se administran al mismo tiempo o tiempos diferentes, o los agentes terapeuticos pueden administrarse como una unica composicion.

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Compuesto que tiene la estructura:

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o cualquier sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que:

X1 es C(R9);

X2 es N;

Y es N(R11), O o S;

Z es CR8 o N; n es 0, 1, 2 o 3;

R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de ox^geno o por enlace directo, que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1-4;

R2 se selecciona de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa; o R2 se selecciona de alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo, heterociclo, -(alquil C1-3)heteroarilo, -(alquil C1-3)heterociclo, -O(alquil C1-3)heteroarilo, -O(alquil C1-3)heterociclo, -NRa(alquil C1-3)heteroarilo, -NRa(alquil C1-3)heterociclo, -(alquil C1-3)fenilo, -O(alquil C1-3)fenilo y -NRa(alquil C1-3)fenilo, todos los cuales estan sustituidos con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-4, O-alquilo C1-4, Br, Cl, F, I y alquilo C1-4;

R3 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa,

-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo C1-6, O-alquilo C1.6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R4 es, independientemente, en cada caso, halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1.4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1.4 o haloalquilo C1.4;

R5 es, independientemente, en cada caso, H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4 o alquilo C1.6 sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1.4, haloalquilo C1-3, O- alquilo C1.4, NH2, NH-alquilo C1.4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4; o ambos grupos R5 forman juntos un espiroalquilo C3-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, O-alquilo C1-4, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, O-alquilo C1-4, NH2, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4;

5

10

15

20

25

30

35

R6 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R7 se selecciona de H, halo, alquilo C1-6, haloalquilo C1.4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa;

R8 se selecciona de H, haloalquilo C1-6, Br, Cl, F, I, ORa, NRaRa, alquilo C1.6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de haloalquilo Ci-6, O-alquilo C1-6, Br, Cl, F, I y alquilo C1-6;

R9 se selecciona de H, halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, alquilo Ci-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo, en el que el alquilo C1-6, fenilo, bencilo, heteroarilo y heterociclo estan sustituidos adicionalmente con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo Ci-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra,

-S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa,

-N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra,

-N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa; o R9 es un anillo monodclico de 5, 6 0 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 0 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 0 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0, 1, 2, 3 0 4 sustituyentes seleccionados de halo, haloalquilo C1-4, ciano, nitro, -C(=O)Ra, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=O)Ra, -OC(=O)NRaRa, -OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Ra, -S(=O)2Ra, -S(=O)2NRaRa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra, -S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa, -S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Ra, -N(Ra)C(=O)ORa, -N(Ra)C(=O)NRaRa,

-N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Ra, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil 2-6-NRaRa y -NRa-alquil C2-6-ORa;

R11 es H o alquilo C1-4;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, fenilo, bencilo o alquilo C1-6, estando el fenilo, bencilo y alquilo C1-6 sustituidos con 0, 1, 2 0 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1.3, -O-alquilo C1.4, -NH2, -NH-alquilo C1.4, -N(alquil C1-4)-alquilo C1.4.

Compuesto segun la reivindicaci6n 1, que tiene la estructura:

imagen2

Compuesto segun la reivindicaci0n 1, que tiene la estructura:

imagen3
4.
5.

5 6.
7.

10

15

Compuesto segun la reivindicacion 1, que tiene la estructura:

imagen4

Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R3 es F, Cl o Br; y n es O.

Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R1 es fenilo sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el fenilo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH-alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1.4.

Compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R1 es un anillo monodclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, unido a traves de ox^geno o por enlace directo, que contiene 1, 2, 3 o 4 atomos seleccionados de N, O y S, pero que no contiene mas de un O o S, en el que los atomos de carbono disponibles del anillo estan sustituidos con 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en el que el anillo esta sustituido con 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo esta sustituido adicionalmente con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alquilo C1-4, O-alquilo C1-4, O-haloalquilo C1-4, NH- alquilo C1-4, N(alquil C1-4)-alquilo C1-4 y haloalquilo C1.4.
8. Compuesto segun la reivindicacion 1, que tiene la estructura:

imagen5

5

10

15

20

imagen6

o cualquier sal farmaceuticamente aceptable de cualquiera de a) a c).
9. Compuesto segun la reivindicacion 8, como base libre.
10. Composicion farmaceutica que comprende un compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable.
11. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriasica, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios oculares, trastornos de vejiga inestable o inflamatoria, afecciones cutaneas con componentes inflamatorias, estados inflamatorios cronicos, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistemico (LES), miastenia grave, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, purpura trombocitopenica idiopatica, esclerosis multiple, smdrome de Sjoegren y anemia hemolttica autoinmunitaria, estados alergicos e hipersensibilidad.
12. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de canceres, que estan mediados, son dependientes de o estan asociados con la actividad de p1105.
13. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso en el tratamiento de cancer de colon, glioblastoma, carcinoma endometrial, cancer hepatocelular, cancer de pulmon, melanoma, carcinoma de celulas renales, carcinoma de tiroides, linfoma celular, trastornos linfoproliferativos, cancer de pulmon de celulas pequenas, carcinoma de pulmon de celulas escamosas, glioma, cancer de mama, cancer de prostata, cancer de ovarios, cancer de cuello uterino, leucemia, leucemia mieloide aguda, smdrome mielodisplasico, enfermedades mieloproliferativas, leucemia mieloide cronica, leucemia linfoblastica aguda de celulas T, leucemia linfoblastica aguda de celulas B, linfoma no Hodgkin, linfoma de celulas B, tumores solidos.