ES2326976T3 - Aparato y procedimiento para ensayar muestras liquidas. - Google Patents

Aparato y procedimiento para ensayar muestras liquidas. Download PDF

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ES2326976T3 ES04759878T ES04759878T ES2326976T3 ES 2326976 T3 ES2326976 T3 ES 2326976T3 ES 04759878 T ES04759878 T ES 04759878T ES 04759878 T ES04759878 T ES 04759878T ES 2326976 T3 ES2326976 T3 ES 2326976T3
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Ross Bryan Goldman
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Kenneth E. Smith
Kathleen R. Mccarthy
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Abstract

Un artículo (100, 200) adaptado para contener una muestra licuada para la cuantificación de material biológico en la muestra, que comprende un dispositivo (110, 210) que tiene una cámara de reacción (112) que encierra un volumen en la misma, dicha cámara de reacción (112) tiene una abertura superior a través de la cual se puede verter una muestra licuada y una pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226), teniendo cada uno de dichos compartimentos (126, 126a-c, 226) un borde superior y estando configurado y dimensionado para contener partes alícuotas separadas de una muestra licuada en el mismo, y una tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) sujeta de forma que se puede quitar a la parte superior de dicho dispositivo (110, 210), estando configurada y dimensionada dicha tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) para sellar el borde superior de cada compartimento (126, 126a-c, 226) para evitar la comunicación líquida entre dichos compartimentos (126, 126a-c, 226), caracterizado porque la cámara de reacción (112) define un eje central a través de la misma y la pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226) están formados radialmente alrededor de dicho eje central, y por un distribuidor de carga (116) sujeto a la cámara de reacción (112) de modo que dicho distribuidor de carga (116) distribuye una muestra líquida a cada uno de los compartimentos (126, 126a-c, 226) mediante dicho distribuidor de carga (116).

Description

Aparato y procedimiento para ensayar muestras líquidas.
La presente invención se refiere a procedimientos para cuantificar material biológico en una muestra licuada, y a artículos para repartir y contener el material biológico durante la cuantificación, que comprende un dispositivo que tiene una cámara de reacción que encierra un volumen en la misma, dicha cámara de reacción tiene una abertura superior a través de la cual se puede verter una muestra licuada, y una pluralidad de compartimentos discretos no permeables, y cada uno de dichos compartimentos tiene un borde superior y está configurado y dimensionado para contener partes alícuotas separadas de una muestra licuada en el mismo, y una tapa con junta de estanqueidad sujeta de forma que se puede quitar a la parte superior de dicho dispositivo, y dicha tapa con junta de estanqueidad está configurada dimensionada para sellar el borde superior de cada compartimento para evitar la comunicación líquida entre dichos compartimentos.
La determinación y recuento de la concentración microbiana es una parte esencial de los análisis microbiológicos en muchas industrias, incluyendo industrias del agua, alimentarias, cosméticas y farmacéuticas. Por ejemplo, la determinación de la concentración bacteriana en el agua es una parte esencial del ensayo de calidad del agua. En Estados Unidos, las normas de la USEPA (Agencia de protección medioambiental de EE.UU.) requieren que no haya presentes bacterias coliformes o Escherichia coli (E. coli) en una muestra de agua potable de 100 ml. El formato de "presencia/ausencia" de un medio de ensayo, tal como las mezclas químicas COLILERT® y/o COLILERT-18® (disponibles en IDEXX Laboratories, Westbrook, Maine), cualquiera de las cuales se usa como un medio de ensayo para detectar E. coli y bacterias coliformes, es muy útil para hacer esta determinación. La mezcla química Colilert0 se basa en la Defined Substrate Technology® (Tecnología de sustrato definido) descrita por Edberg, "Method and Medium for use in Detecting Target Microbes In Situ in A Specimen Sample of a Possibly Contaminated Material". Véanse las patentes de EE.UU. n° 4.925.789, 5.429.933 y 5.780.259.
Sin embargo, hay campos en los que es importante la cuantificación, no sólo la detección, de la concentración bacteriana. Los ejemplos de dichos campos incluyen ensayos de aguas residuales, agua entrante en los sistemas de purificación de agua, aguas superficiales, agua para uso recreativo y de alimentos.
Los procedimientos clásicos para la cuantificación de material biológico son la técnica de filtración por membrana (FM) y la técnica de fermentación en tubos múltiples (FTM) que usan los procedimientos de número más probable (NMP). En la filtración por membrana, el volumen de muestra requerido se filtra a través de una membrana con un tamaño de poro muy pequeño para atrapar bacterias de forma no específica. Después, la membrana se pone en un medio, que soporta el crecimiento de las bacterias objetivo. El medio después se incuba a una temperatura específica durante un tiempo específico y se cuentan todas las colonias resultantes. La técnica de FM es muy trabajosa y requiere expertos en microbiología para realizar el ensayo. Además, una muestra que pueda contener otras partículas distintas de bacterias (p. ej., muestras de aguas residuales o de agua para uso recreativo) pueden atascar la membrana y dejarla inutilizable.
El procedimiento del NMP para la técnica de FTM se describe en Recles y col., "Most Probable Number Techniques" publicado en "Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods", 3ª ed. 1992, en las páginas 105-199, y en Greenberg y col., "Standard Methods For the Examination of Water and Wastewater" (8ª ed. 1992). En este procedimiento, se dispensa un volumen de muestra de agua en varios tubos (p. ej., 10x10, 10 tubos que contienen cada uno 10 ml) y se deja que las bacterias crezcan en todos los tubos. Después de incubación a una temperatura específica durante un tiempo específico, se cuenta el número de tubos positivos. Los dispositivos y procedimientos de cuantificación microbiológica que usan el procedimiento de NMP están disponibles en el comercio. Se usan dispositivos y procedimientos tales como Quanti-Tray® y Quanti-Tray® 2000 (IDEXX Corporation, Westbrook, Maine) para la cuantificación bacteriana de muestras de agua potable, aguas superficiales, agua para uso recreativo y aguas residuales. Dan una descripción detallada de estos procedimientos y dispositivos Naqui y col. en las patentes de EE.UU. n° 5.518.892; 5.620.895 y 5.753.456. Para llevar a cabo estos ensayos, se requieren las etapas separadas de adición de la muestra/reactivo al dispositivo y después sellado del dispositivo con un aparato de sellado separado, antes del periodo de incubación. Estos procedimientos y dispositivos ofrecen una mejora significativa frente a las técnicas de FTM tradicionales en términos de su facilidad de uso y también permiten la cuantificación precisa de microorganismos en la muestra. Sin embargo, los dispositivos de este tipo pueden requerir el uso de un instrumento para distribuir la mezcla de muestra/medio en cada compartimento individual.
Además de lo anterior, también se describen dispositivos conocidos de la técnica anterior en los documentos EP 1192995 y EP 1046912. El documento EP 1192995 desvela una cubierta y montaje de placa de pocillos múltiples que comprende una tapa y una junta de estanqueidad. La tapa tiene un medio de muelle integral para aplicar fuerza uniformemente sobre la superficie de una junta de estanqueidad para sellar una placa de pocillos múltiples. La tapa tiene componentes para la manipulación mecánica y para la unión a una placa de pocillos múltiples.
El documento EP 1046912 describe un dispositivo de ensayo para detectar la presencia o cantidad de material biológico, analito(s) o microorganismo(s) en una muestra. El dispositivo puede comprender una placa de incubación, un dispositivo de tira reactiva u otros dispositivos. Los dispositivos tienen una superficie en general horizontal y plana que está dividida en una pluralidad de pocillos rebajados. Cada pocillo o isla de reactivo está adaptado para contener una parte alícuota de líquido. Los pocillos o islas de reactivo tienen un tamaño y forma y están formados de un material adecuado, para contener la parte alícuota en el interior del pocillo o isla de reactivo por tensión superficial. Cualquier exceso de líquido de la muestra licuada se drena desde la superficie del dispositivo.
La presente invención se caracteriza porque la cámara de reacción define un eje central a través de la misma y la pluralidad de compartimentos discretos no permeables está formada radialmente alrededor de dicho eje central, y por un distribuidor de carga sujeto a la cámara de reacción de modo que dicho distribuidor de carga distribuye la muestra de líquido a cada uno de los compartimentos por dicha abertura superior.
La presente invención proporciona un procedimiento mejorado y sencillo para repartir y contener las muestras licuadas y para la cuantificación de microorganismos en una muestra licuada sin la necesidad de usar un instrumento para ayudar a la distribución de muestra. La invención en general usa un artículo nuevo, que está diseñado para contener una muestra licuada a la que se proporcionan reactivos químicos y/o microbiológicos. Por ejemplo, dichos reactivos químicos pueden ser un medio de crecimiento específico para detectar la presencia de bacterias coliformes y E. coli, tal como la mezcla química Colilert® descrita anteriormente u otros reactivos químicos/microbiológicos que no se basan en la Defined Substrate Technology®. También puede ser un medio de crecimiento específico para enterococos, tal como la mezcla química Enterolert^{TM} (IDEXX Laboratories, Inc.). El dispositivo está diseñado para aceptar la muestra licuada que se va a ensayar y permitir que la muestra licuada se distribuya por todo su volumen interno, y poner partes alícuotas en compartimentos separados dentro del dispositivo. En general, dichos compartimentos permitirán que se produzcan reacciones químicas o bioquímicas separadas en una pluralidad de partes alícuotas de la muestra licuada que se va a ensayar. Dichos compartimentos también evitarán que una parte alícuota del líquido afecte a las reacciones en otra parte alícuota. En una realización sencilla, la invención se caracteriza por un artículo que tiene una tapa con junta de estanqueidad puesta en la parte superior del dispositivo y una cámara de reacción en la parte inferior del dispositivo, dicha cámara de reacción contiene al menos dos compartimentos separados, en los que se introduce una muestra licuada y la muestra licuada se distribuye en los compartimentos individuales cerrando la tapa con junta de estanqueidad del dispositivo. Cada compartimento contiene entonces una parte alícuota de la muestra licuada original. En otra realización, la invención se caracteriza por un artículo que tiene una tapa con junta de estanqueidad puesta en la parte superior del dispositivo, una cámara de rebose de líquido y una cámara de reacción en la parte inferior del dispositivo, dicha cámara de reacción contiene al menos dos compartimentos separados, conteniendo cada compartimento una cantidad predeterminada de mezcla química, lo que permite la detección de la presencia de material biológico, en los que se introduce una muestra licuada, y porque la muestra licuada queda distribuida en los compartimentos individuales simplemente cerrando la tapa con junta de estanqueidad del dispositivo. Cada compartimento contiene entonces una parte alícuota de la muestra licuada original.
En general, el dispositivo tiene una forma circular con una tapa con junta de estanqueidad puesta en la parte superior y en una parte final más ancha del dispositivo. Tras el cierre del dispositivo, la fuerza de compresión hacia abajo permite que la muestra licuada se reparta en cada compartimento y que la junta de estanqueidad se acople en una acción de sellado con el borde superior de cada compartimento, aislando de esta forma la muestra licuada en cada compartimento. Esta junta de estanqueidad sola o combinada con otras características del dispositivo debe resistir cualquier presión interna, que es generada por la actividad del material biológico, durante hasta 5 días después de que se haya sellado el dispositivo. En una realización preferida, la tapa con junta de estanqueidad tiene cierres de tipo bayoneta tanto internos como externos, que se acoplan con un giro rotacional de 1/32 a 1/2; preferiblemente 1/16 a 1/8 de la tapa; esto crea la fuerza de compresión hacia abajo de la junta de estanqueidad en el borde superior de cada compartimento, sellándolo y aislándolo así de todos los demás compartimentos de ensayo. La cámara de rebose de líquido en el dispositivo está adaptada para acomodar cualquier exceso de volumen de muestra licuada; preferiblemente esta cámara de rebose permitirá retener de 0 a 50% del volumen total de
muestra.
En una realización preferida, la cámara de rebose es una zona de recolección de tipo foso o de tipo anillo anual que rodea el dispositivo. En otra realización, la cámara de rebose puede estar situada en el centro del dispositivo. En otra realización más, puede estar presente en el dispositivo tanto la cámara de rebose situada centralmente como la de tipo foso. Hay al menos dos compartimentos en la cámara de reacción. El número de compartimentos está configurado de forma que se alcance un intervalo de recuento del NMP conveniente. Normalmente, el número de compartimentos es entre 5 y 60 ambos incluidos, preferiblemente en el intervalo entre 12 y 36. En general, los compartimentos son de tamaño sustancialmente igual, para contener una parte alícuota de aproximadamente 0,1 a 100 ml, preferiblemente en el intervalo de 1,5 a 20 ml de parte alícuota; incluso más preferiblemente en el intervalo de 2,5 ml a 5,5 ml. Los compartimentos pueden tener cualquier forma tal como circular, triangular, rectangular, elíptica o trapezoidal, preferiblemente, forma trapezoidal. La forma trapezoidal puede promover la entrada de muestra licuada en el diámetro interior truncado menor, mientras que el extremo abierto mayor del trapezoide permite la salida sin restricción del aire desplazado de dentro de cada compartimento. Los compartimentos pueden estar dispuestos en cualquier formato en el dispositivo, preferiblemente en una forma circular.
En otras realizaciones adicionales, una primera pluralidad de compartimentos tiene un tamaño (p. ej., 3 ml) y se proporciona una segunda pluralidad y/o una tercera pluralidad de compartimentos de diferentes tamaños, p. ej., de tamaño menor (p. ej., 0,03 y 0,3 ml) que el de la primera pluralidad. Estas realizaciones tienen aplicación para uso cuando la concentración del material biológico que se va a cuantificar en la muestra es alta. Los diferentes tamaños de los compartimentos eliminan la necesidad de diluir la muestra, ahorrando así tiempo y posibles errores debidos a la dilución, y aumenta la precisión total de la cuantificación.
En un aspecto relacionado, la invención presenta un kit de ensayo para usar en la cuantificación de un material biológico en una muestra licuada. El kit de ensayo incluye un artículo como se ha descrito anteriormente y una mezcla química de detección biológica específica para detectar bacterias coliformes y E. coli u otra mezcla química para detectar enterococos. En otra realización más, el kit de ensayo incluye un artículo como se ha citado antes y una cantidad predeterminada adecuada de mezcla química de detección biológica específica en los compartimentos separados.
En un aspecto relacionado, la invención presenta un procedimiento para cuantificar un material biológico en una muestra licuada. El procedimiento incluye las etapas de proporcionar un artículo como se ha descrito antes y añadir un medio de ensayo a la muestra licuada, que después se añade al dispositivo. El procedimiento incluye además distribuir la mezcla en compartimentos individuales dentro del dispositivo de modo que la mezcla del medio de ensayo y la muestra licuada esté bien asegurada en una pluralidad de partes alícuotas separadas dentro de los compartimentos. Después, el procedimiento finalmente implica la detección de la presencia o ausencia de material biológico en cada compartimento por cualquiera de una serie de medios estándar, por ejemplo como se describe a continuación. En un aspecto adicional relacionado, la invención presenta un procedimiento para cuantificar un material biológico en una muestra licuada. El procedimiento incluye las etapas de proporcionar un artículo con la cantidad predeterminada de mezclas químicas en los compartimentos como se ha descrito antes, y añadir una muestra licuada en el dispositivo. El procedimiento incluye además distribuir la muestra licuada en cada compartimento individual dentro del dispositivo, de modo que la mezcla de medio de ensayo y la muestra licuada se cierre bien en una pluralidad de partes alícuotas separadas dentro de los compartimentos. Después, el procedimiento finalmente implica la detección de la presencia o ausencia de material biológico en cada compartimento por cualquiera de una serie de medios estándar. Los procedimientos de esta invención incluyen además incubar el dispositivo a la temperatura deseada durante un periodo de tiempo deseado para permitir el crecimiento y la detección de bacterias, o la reacción de cualquier entidad química, dentro de la muestra licuada y el medio de ensayo.
En realizaciones preferidas, el material biológico que se va a cuantificar es E. coli y bacterias coliformes. Sin embargo, estos aspectos de la invención se pueden aplicar a cualquier material biológico que se va a cuantificar, p. ej., enterococos, estafilococos, listerias, bacteriófagos (o virus), o proteína que está presente a cualquier nivel en la muestra, con la condición de que se pueda detectar una o una pluralidad de unidades del material. La elección de un medio de ensayo dependerá del material biológico que se vaya a detectar. El medio de ensayo preferiblemente es un medio que detectará la presencia del material biológico que se busca cuantificar, y no detecta sustancialmente la presencia de otro material biológico que pueda estar en la muestra. También podría ser un material que causara algún cambio visible o perceptible de otra forma, tal como cambios de color y/o fluorescencia, si el material biológico que se va a detectar y cuantificar está presente en la muestra.
Por lo tanto, la presente invención es un procedimiento nuevo para cuantificar material biológico en una muestra licuada. Este procedimiento es mucho más fácil de usar comparado con los procedimientos de transición de FM y otros procedimientos basados en el NMP. Además, este procedimiento no requiere el uso de un instrumento para distribuir y aislar la muestra licuada en el dispositivo. Debido a que la presente invención es fácil de usar, esta invención tiene aplicación para servir simultáneamente como dispositivo de toma de muestra y cuantificación. Los dispositivos y procedimientos de esta invención no requieren personal de laboratorio formado para realizar el ensayo en el ámbito del laboratorio. En cambio, se puede usar como un dispositivo de toma de muestra directo y permite la cuantificación de material biológico, procedimiento que tiene lugar en el mismo sitio en el terreno. El procedimiento en general incluye las siguientes etapas: añadir la muestra licuada en un artículo diseñado para retener la muestra, permitir formar partes alícuotas en una serie de compartimentos separados, sellar el recipiente cerrando la tapa superior del recipiente y por lo tanto distribuir la muestra de forma sustancialmente igual entre una pluralidad de compartimentos discretos no permeables en el artículo, de modo que la mezcla del medio de ensayo y la muestra están bien cerradas dentro de los compartimentos sin el riesgo de contaminación cruzada; incubar el artículo; y recoger y analizar los resultados.
La presente invención también presenta un artículo nuevo para contener la muestra licuada durante el procedimiento de cuantificación. El artículo incluye una abertura por la cual se puede verter una muestra licuada en el artículo; una pluralidad de compartimentos impermeables al líquido configurados y dispuestos para separar la muestra licuada; y un paso que permite que la muestra licuada se distribuya de forma sustancialmente uniforme por los compartimentos individuales del artículo. El compartimento individual está formado de manera que la mezcla licuada quede repartida y asegurada en estos compartimentos discretos impermeables.
El artículo y su uso dependen de la presencia de una pluralidad de compartimentos, que pueden estar formados de modo que sean esencialmente impermeables a la muestra y el medio de ensayo usado y a cualquier producto(s)
de reacción resultante(s). El número de compartimentos puede variar, pero debe ser suficiente para que cualquier muestra pueda ser analizada con la precisión requerida. En realizaciones preferidas, la pluralidad de compartimentos se crea por la técnica de moldeo por inyección o la técnica de extrusión. Como se ha indicado antes, el artículo de esta invención puede estar hecho de cualquier material, que se pueda moldear en compartimentos impermeables a líquidos, tales como, por ejemplo, PVC, polipropileno o poliestireno. El material elegido puede variar dependiendo del sustrato o el producto de cualquier reacción química. Por ejemplo, si se indica la presencia de bacterias específicas por la producción de orto-nitrofenol (ONP), no debe poder pasar por el material del artículo o difundirse de un compartimento a los demás una cantidad significativa de este producto, durante el procedimiento de
cuantificación.
En realizaciones en las que se proporcionan compartimentos de diferentes tamaños, los artículos permiten la cuantificación más precisa sin dilución de la muestra licuada. Por lo tanto, las ventajas de dicho artículo son que elimina las etapas de dilución ahorrando tiempo y evitando cualquier potencial error debido a la dilución.
Otras características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción de sus realizaciones preferidas y a partir de las reivindicaciones.
Breve descripción de los dibujos
Las ventajas y características anteriores del aparato y los procedimientos que se están describiendo para el ensayo de una muestra licuada se harán evidentes más fácilmente y se entenderán en relación con la siguiente descripción detallada de realizaciones ilustrativas, tomadas en conjunto con los dibujos que acompañan, en los que:
la fig. 1 es una vista en perspectiva lateral de una realización ilustrativa de un aparato de ensayo de muestra líquida construido de acuerdo con la presente descripción;
la fig. 2 es vista de la sección transversal de la fig. 1, que muestra la orientación relativa de las diferentes características internas de la realización de la fig. 1;
la fig. 3 es una vista de la sección transversal con los componentes separados;
la fig. 4 es una vista en perspectiva con los componentes separados, desde una perspectiva orientada ligeramente en ángulo y hacia abajo de la realización de la fig. 1;
la fig. 5 es otra vista en perspectiva con los componentes separados, desde una perspectiva orientada ligeramente en ángulo y hacia arriba de la realización de la fig. 1;
la fig. 6 es una vista plana superior de un recipiente del aparato de ensayo de muestra líquida;
la fig. 7 es una vista plana superior que ilustra esquemáticamente una disposición alternada de compartimentos objetivo;
la fig. 8 es una vista plana superior que ilustra esquemáticamente una disposición alternada de los compartimentos objetivo con diferentes tamaños; y
la fig. 9 es una vista en perspectiva con los componentes separados desde una perspectiva orientada ligeramente en ángulo y desde arriba de un diseño alternativo de una pieza, que incorpora las características de componentes múltiples en una sola unidad; e incorpora las funciones de la realización de la fig. 1.
Descripción detallada de realizaciones preferidas
En relación ahora en detalle específico con los dibujos, en los que números de referencia iguales identifican elementos similares o idénticos a lo largo de las diversas vistas, la siguiente descripción detallada se centrará en las realizaciones de ejemplo específicas de aparato y procedimientos de ensayos de muestras de agua. Sin embargo, debe entenderse que el aparato y los procedimientos descritos en el presente documento se pueden adaptar para usar en el ensayo de la presencia/ausencia y la cuantificación de material biológico en diferentes tipos de muestras licuadas, según se desee o sea necesario para una aplicación dada. Por consiguiente, el aparato y los procedimientos ahora descritos se pueden aplicar a cualquier material biológico que esté presente con cualquier nivel en una muestra licuada (con la condición de que una o más unidades del material se puedan detectar), y a cualquier medio de ensayo aplicable.
En relación ahora con las figuras 1-5, se muestra de forma general una realización ilustrativa de un aparato de ensayo de agua configurado y adaptado específicamente para lograr la indicación de la presencia/ausencia de un microorganismo objetivo, por ejemplo, E. coli y bacterias coliformes, como el dispositivo de ensayo 100 en forma de una unidad independiente. Sin embargo, se contempla que el aparato y procedimiento de ensayo de líquido ahora descritos pueden adaptarse a ensayos para la cuantificación basada en procedimientos de NMP.
Algunos de los componentes del dispositivo de ensayo 100 pueden montarse como un submontaje antes del montaje de la unidad completa. Por ejemplo, un submontaje 110 del dispositivo de ensayo 100 puede consistir en un miembro de contención de múltiples compartimentos tal como el recipiente 112 sellado en un extremo inferior por un cierre sustancialmente transparente o translúcido, tal como una ventana transparente 114, un distribuidor de carga 116, un sellado adherente 118 y un anillo de carga 120. Alternativamente, un submontaje de la cámara de múltiples compartimentos 110 del dispositivo de ensayo 100 puede estar diseñado para incorporar las características de componentes múltiples en una sola unidad (como se muestra en la cámara 210 en la fig. 9); e incorpora las funciones de la realización de la fig. 1.
El recipiente 112 se forma con cualquier material impermeable a líquidos adecuado, por ejemplo PVC, polipropileno o poliestireno, por técnicas adecuadas tales como moldeo por inyección. Como se muestra en las figuras 3-6, el recipiente 112 tiene configuración cilíndrica con un conjunto circular de 36 compartimentos objetivo 126 individualmente aislados en forma radial alrededor de un hueco cilíndrico central definido por la pared interior 128. El extremo inferior del recipiente 112 puede estar sellado mediante un componente plano transparente tal como una ventana 114, que se sella en el extremo del recipiente 112 mediante técnicas adecuadas, por ejemplo, soldado con ultrasonidos, adhesivos u otras técnicas conocidas. Está previsto que la ventana 114 pueda proporcionar características de potenciación de la legibilidad, por ejemplo aumentos para proporcionar al usuario una vista aumentada del extremo de cada compartimento de ensayo 126. Alternativamente, el recipiente 112 puede formarse mediante una técnica de modelo por inyección (como se muestra por la cámara 210 en la fig. 9) con un extremo inferior cerrado transparente.
Cada uno de los compartimentos objetivo 126 se termina en un extremo en la pared interior 128, se extiende radialmente hacia el exterior y termina cerca de la periferia del recipiente 112. Los compartimentos objetivo 126 están configurados y dimensionados para contener una cantidad predeterminada de muestra para que se corresponda con una cantidad medida predeterminada de medio que se va a mezclar con la muestra e incubar en cada compartimento respectivo. Por ejemplo, el dispositivo de ensayo 100 puede estar configurado y dimensionado para recibir un volumen de muestra de aproximadamente 100 ml, que cuando se divide en cada uno de los 36 compartimentos dará como resultado 2,78 ml que están potencialmente disponibles para cada compartimento objetivo 126.
Como se muestra en las figuras 3-5, el distribuidor de carga 116 está sujeto al extremo superior abierto de la pared circular interior 128 mediante técnicas de unión adecuadas tales como ajustado por fricción, adhesivos, soldado con ultrasonidos o similares. El distribuidor de carga 116 está sujeto al recipiente 112 de modo que una superficie convexa del distribuidor 116 esté orientada hacia la parte superior del recipiente 112. La superficie convexa del distribuidor de carga 116 se puede seleccionar de diferentes configuraciones de superficie, tales como en forma cónica, troncocónica o de cúpula. Alternativamente, los distribuidores de carga 116, 116a y 116b (Figuras 7 y 8) pueden ir provistos de canales formados en los mismos para descargar, dividir y dirigir la muestra licuada y/o mezcla de muestra/medio hacia los compartimentos objetivo 126, 126a, 126b y/o 126c.
Opcionalmente, un sellado que se puede quitar tal como un sellado de lámina desprendible 118, se puede configurar y determinar las dimensiones para sellar los extremos superiores abiertos de los compartimentos objetivo 126 para asegurar la integridad de cada uno de los compartimentos objetivo individuales. Si es necesario, el sellado 118 preferiblemente se asegura al extremo abierto del recipiente 112 después de haber añadido las cantidades medidas de medio para proporcionar una barrera de fluido que evite la contaminación de los compartimentos y la pérdida de medio. El sellado 118 puede formarse como un sellado de lámina sensible a la presión con una parte de pestaña extendida 118a, que el usuario agarra fácilmente para quitar el sellado justo antes de introducir la muestra. Como se muestra en las figuras 3-5, el sellado 118 está configurado y dimensionado para ajustar encima del distribuidor de carga 116 y los compartimentos objetivo 126. Está previsto que el sellado 118 puede estar formado con una configuración de tipo arandela con una abertura en el medio para ajustar alrededor del perímetro del distribuidor de carga 116.
Los compartimentos objetivo 126 se muestran como de volumen uniforme y que tienen una forma de sección transversal trapezoidal, que es más estrecha más cerca del centro del recipiente 112 y más ancha hacia su periferia exterior. De esta forma, una muestra de fluido vertida en el dispositivo de ensayo 100 se dispensa de forma eficaz en cada uno de los compartimentos objetivo 126, como se describe con mayor detalle en el presente documento. También se contempla que los compartimentos objetivo 126 pueden estar formados con secciones transversales de otras geometrías, tener volúmenes diferentes entre sí, tal como 126b y 126c (mostrado en la fig. 8) o incluir varios grupos de compartimentos que tienen el mismo volumen, por ejemplo para realizar múltiples ensayos simultáneamente (ensayo multiplexado) cuando ensayos diferentes requieren volúmenes diferentes del compartimento objetivo.
Adicionalmente, está previsto que los compartimentos objetivo 126 pueden disponerse con diferentes patrones limitados sólo por los límites espaciales de la superficie transversal lateral del recipiente 112. Por ejemplo, como se muestra en la fig. 7, los compartimentos objetivo 126a que tienen una abertura con sección transversal lateral uniforme pueden formarse en un conjunto a lo largo de la superficie del recipiente 112 representado esquemáticamente mediante círculos que tienen centros indicados por un "+". Los compartimentos objetivo 126a pueden formarse en cualquier configuración geométrica deseada. Se contemplan diferentes configuraciones de recipiente en los que los compartimentos objetivo pueden formarse en diferente número y los diferentes tamaños que puedan desearse o sean necesarios para lograr los objetivos del ensayo particular especificado.
Preferiblemente se pone un medio para facilitar el crecimiento del microorganismo objetivo en cada uno de los compartimentos objetivo 126 antes del montaje final del dispositivo de ensayo 100. Dependiendo del ensayo que se va a realizar, se pueden usar diferentes medios para detectar diferentes microorganismos. También está previsto que el dispositivo de esta invención se puede usar o configurar para detectar cualquier analito detectable, por ejemplo analitos químicos, tales como cloro total, cloro libre, nitrato, fluoruro, fósforo, en la muestra licuada para el análisis químico de agua. Los reactivos químicos en polvo pueden dispensarse en cantidades medidas, directamente en cada uno de los compartimentos objetivo 126 de modo que el medio se disuelva inmediatamente en la muestra cuando la muestra se vierte en el dispositivo de ensayo 100. En algunos casos, puede ser conveniente realizar ensayos paralelos en diferentes compartimentos o grupos de compartimentos. Este procedimiento también se denomina ensayo multiplexado.
La elección del medio de ensayo dependerá del material biológico que se va a detectar. El medio de ensayo preferiblemente detecta la presencia/ausencia del material biológico y preferiblemente no detecta la presencia de otro material biológico que es probable que esté en el medio. Podría ser un material que causara algún cambio visible o perceptible de otra forma, tal como cambio de color o fluorescencia, si el material biológico que se va a detectar está presente en la muestra. En una realización, el medio está en una forma en polvo para simplificar el procedimiento de fabricación general. Además, el uso de un medio en polvo potencia mucho la estabilidad del medio y proporciona una mayor vida en anaquel para los dispositivos de ensayo montados 100. El polvo puede dispensarse en cantidades medidas directamente en cada uno de los compartimentos objetivo 126, de modo que el medio se disuelva inmediatamente en la muestra cuando la muestra se vierte en el dispositivo de ensayo 100. En una realización preferida, se añaden perlas tales como perlas de vidrio, perlas de gel de sílice, o perlas metálicas junto con el medio en polvo a los compartimentos objetivo 126, permitiendo la disolución rápida del polvo mediante agitación del dispositivo de ensayo montado 100 tras la introducción de la muestra en el dispositivo.
En realizaciones alternativas, se pueden usar otros procedimientos de dispersión del medio rápidos, por ejemplo, se puede usar un material de contención de sólido poroso para formar el medio de retención y bolsas de dispersión (no se muestra) que se pueden insertar individualmente en tantos compartimentos objetivo 126 como se desee. También está contemplado que se pueden poner las bolsas de dispersión que contienen diferentes medios para realizar diferentes ensayos en el mismo dispositivo de ensayo 100 en diferente compartimentos de ensayo 126, para facilitar el ensayo multiplexado. Las bolsas de dispersión de medio funcionan de una forma análoga a la de una bolsa de té, en las que el material de la bolsa es poroso para permitir el paso de flujo de fluidos a través del mismo. Sin embargo, el tamaño de los poros formados en el material que componen las bolsas preferiblemente se hace para retener el medio hasta que la muestra fluida lo disuelva. También están previstos otros dispositivos y técnicas más de dispersión del medio rápidos, por ejemplo, comprimidos de disolución rápida, sellados permutables con agua, etc. En cada una de las realizaciones de colocación de medio indicadas antes, el medio forma una parte integrada del dispositivo como se envía, eliminando por lo tanto la necesidad de un paquete de medio separado y la etapa separada de preparar el medio. Sin embargo, dicho empaquetamiento separado es una opción contemplada en el presente documento.
Se proporcionan una tapa sellable tal como la tapa con rosca 124 y junta de estanqueidad 122 para formar un sellado en el extremo abierto de cada cámara objetivo 126 con respecto al entorno exterior y con respecto a cada una de las otras cámaras objetivo 126. La junta de estanqueidad 122 preferiblemente es un material hidrófobo, tal como un material de junta de estanqueidad de espuma de células cerradas no absorbente. De esta forma, se proporciona un entorno de ensayo sellado. Además, se evita la contaminación cruzada (interferencia) entre los compartimentos objetivo 126 individuales. Alternativamente, si solo se desea la ventilación de gas, tal como descargar la presión acumulada de una reacción exotérmica, entonces se pueden configurar agujeros de ventilación como aberturas de válvulas de purga que permiten que la presión de gas acumulada escape, mientras que evitan la introducción del aire ambiente en las cámaras objetivo 126.
Se sujeta un collar anular de carga 200 opcional en el extremo superior del recipiente 112 mediante técnicas de unión adecuadas, por ejemplo, ajuste por fricción, soldado por ultrasonidos, pegado, adhesivos, etc. El collar anular de carga 120 incluye un canal de rebose formado alrededor de su periferia para recibir y contener el exceso de muestra que pueda desbordarse después de haberse llenado las cámaras objetivo 126.
En un procedimiento ilustrativo que usa el dispositivo 100, la tapa 124 y la junta de estanqueidad 122 retenidos en el mismo se quitan. El sellado 118 se desprende y se vierten 100 ml de muestra y se distribuyen a cada una de las cámaras mediante el distribuidor de carga 116. No se requiere tratamiento previo de la muestra para la realización en la que el medio activo se dispensa previamente y se seca dentro de las cámaras objetivo. La muestra llena, con medidas iguales, cada uno de los pocillos, donde rehidrata el medio y se mezcla con el mismo para lograr una mezcla de muestra/medio adecuada. Alternativamente, la muestra se puede mezclar con el medio de ensayo que forma una mezcla de muestra/medio antes de su introducción en el dispositivo.
La tapa roscada 124, que contiene una junta de estanqueidad 122 de espuma de células cerradas no absorbente, después se devuelve al recipiente exterior. La junta de estanqueidad 122 se comprime así para ponerse en contacto con la parte superior del recipiente 112. Esta acción sella cada cámara objetivo 126 del resto de los compartimentos y el entorno exterior. Durante esta acción, la junta de estanqueidad 122 también dirige cualquier exceso de muestra al canal de rebose 122a, que está diseñado y puesto de una forma para aislar el exceso de volumen del conjunto de los compartimentos de ensayo 126. Esta acción de aislamiento interior evita que cualquiera de las reacciones de ensayo individuales experimente contaminación cruzada debido a una muestra en cualquiera de los otros compartimentos de ensayo 126.
Después, el dispositivo de ensayo 100 se incuba o se deja a temperatura ambiente durante la duración requerida indicada por el protocolo de ensayo particular para desarrollar el resultado (preferiblemente un cambio colorimétrico, que se puede ver a simple vista). Después, se cuentan estas indicaciones positivas. El dispositivo se puede incubar hacia arriba o al revés. Además, el dispositivo se puede volver a abrir, mediante la tapa roscada, permitiendo el subcultivo adicional de aislados individuales, que se puedan desarrollar durante el periodo de ensayo.
Tras completarse el ensayo, el dispositivo puede desecharse por procedimientos adecuados. La plataforma del dispositivo permite el ensayo "multiplexado" de diferentes tipos de medio, es decir, permite que se lleven a cabo una serie de ensayos simultáneamente.
También está previsto un procedimiento alternativo en el que no se requiere junta de estanqueidad. En esta realización, se puede proporcionar una tapa (no se muestra) para facilitar la distribución de la muestra y sellar individualmente cada uno de los compartimentos de ensayo de las cámaras adyacentes.
En relación con la fig. 9, se muestra una realización alternativa adicional del presente aparato de ensayo de muestra líquida descrito como dispositivo de ensayo 200. En lugar de los múltiples componentes que forman el submontaje de la cámara de múltiples compartimentos 110 del dispositivo de ensayo 100 como se muestra en la fig. 3, el dispositivo de ensayo 200 incluye una cámara unitaria 210 que incorpora las características de múltiples componentes en una sola unidad, por ejemplo, por medio de moldeo por inyección.
Se proporcionan una tapa sellable tal como la tapa 224 y la junta de estanqueidad 222, para formar un sellado en el extremo abierto de cada cámara objetivo 226 con respecto al entorno exterior y con respecto a cada una de las otras cámaras objetivo 226. La junta de estanqueidad 222 preferiblemente es de un material hidrófobo, tal como un material de junta de estanqueidad de espuma de células cerradas no absorbente, para proporcionar un entorno de ensayo sellado y evitar la contaminación cruzada entre las cámaras objetivo 226. La tapa 224 está sujeta de forma que se puede quitar a la cámara 210, por ejemplo, mediante sujetadores de tipo bayoneta 210a y 210b formados alrededor de la periferia del collar anular de carga 220 y el distribuidor de carga 216, respectivamente. También están previstos procedimientos de sujeción que se pueden quitar alternativos, tales como acoplamiento enroscado.

Claims (26)

1. Un artículo (100, 200) adaptado para contener una muestra licuada para la cuantificación de material biológico en la muestra, que comprende un dispositivo (110, 210) que tiene una cámara de reacción (112) que encierra un volumen en la misma, dicha cámara de reacción (112) tiene una abertura superior a través de la cual se puede verter una muestra licuada y una pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226), teniendo cada uno de dichos compartimentos (126, 126a-c, 226) un borde superior y estando configurado y dimensionado para contener partes alícuotas separadas de una muestra licuada en el mismo, y una tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) sujeta de forma que se puede quitar a la parte superior de dicho dispositivo (110, 210), estando configurada y dimensionada dicha tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) para sellar el borde superior de cada compartimento (126, 126a-c, 226) para evitar la comunicación líquida entre dichos compartimentos (126, 126a-c, 226), caracterizado porque la cámara de reacción (112) define un eje central a través de la misma y la pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226) están formados radialmente alrededor de dicho eje central, y por un distribuidor de carga (116) sujeto a la cámara de reacción (112) de modo que dicho distribuidor de carga (116) distribuye una muestra líquida a cada uno de los compartimentos (126, 126a-c, 226) mediante dicho distribuidor de carga (116).
2. El artículo (100, 200) de la reivindicación 1 que además comprende un medio de ensayo previamente dispensado en cada compartimento (126, 126a-c, 226).
3. El artículo (100, 200) de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que los compartimentos (126, 126a-c, 226) tienen una forma con sección transversal trapezoidal.
4. El artículo (100, 200) de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el número de compartimentos (126, 126a-c, 226) es entre 12 y 36.
5. El artículo (100, 200) de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que los compartimentos (126, 126a-c, 226) son sustancialmente del mismo tamaño.
6. El artículo (100, 200) de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que los compartimentos (126, 126a-c, 226) están configurados y dimensionados para contener aproximadamente 4 mililitros de líquido.
7. El artículo (100) de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que una primera pluralidad de los compartimentos (126b) tienen un primer tamaño y una segunda pluralidad de los compartimentos (126c) tienen un segundo tamaño que es un tamaño menor que el primer tamaño.
8. El artículo (100) de la reivindicación 7, que además comprende una tercera pluralidad de los compartimentos que tienen un tercer tamaño diferente de dicha primera pluralidad y dicha segunda pluralidad de compartimentos (126b, 126c).
9. El artículo (100) de la reivindicación 7 o reivindicación 8, en el que el número de la primera pluralidad de compartimentos (126b) es entre 12 y 36, y el número de la segunda pluralidad de compartimentos (126c) es entre 12 y 36.
10. El artículo (100) de cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que la primera pluralidad de compartimentos (126b) están configurados y dimensionados para contener aproximadamente 3 mililitros de líquido y la segunda pluralidad de compartimentos (126c) están configurados y dimensionados para contener aproximadamente 0,3 mililitros de líquido.
11. El artículo (100, 200) de cualquier reivindicación precedente en el que el dispositivo está formado al menos parcialmente de poliestireno.
12. El artículo (200) de cualquier reivindicación precedente en el que la tapa con junta de estanqueidad (222, 224) tiene cierres de tipo bayoneta tanto internos como externos (210b, 210a).
13. Un kit (100, 200) para usar en la cuantificación de material biológico en una muestra licuada que comprende un dispositivo (110, 210) que tiene una cámara de reacción (112) que encierra un volumen en la misma, y dicha cámara de reacción tiene una abertura superior a través de la cual se puede verter una muestra licuada y una pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226), teniendo cada uno de dichos compartimentos (126, 126a-c, 226) un borde superior y estando configurado y dimensionado para contener partes alícuotas separadas de una muestra licuada en el mismo, y una tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) sujeta de forma que se puede quitar a la parte superior de dicho dispositivo (110, 210), estando configurada y dimensionada dicha tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) para sellar el borde superior de cada compartimento para evitar la comunicación líquida entre dichos compartimentos, y un medio de detección biológico específico, caracterizado porque la cámara de reacción (112) define un eje central a través de la misma y la pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226) están formados radialmente alrededor de dicho eje central, y por un distribuidor de carga (116) sujeto a la cámara de reacción (112) de modo que dicho distribuidor de carga (116) distribuye una muestra líquida a cada uno de los compartimentos (126, 126a-c, 226) por dicha abertura superior mediante dicho distribuidor de carga (116).
14. El kit (100, 200) de acuerdo con la reivindicación 13, en el que el medio de detección biológico específico es un medio para detectar bacterias coliformes y E. coli en una muestra.
15. El kit (100, 200) de acuerdo con la reivindicación 13, en el que el medio de detección biológico específico es un medio para detectar bacterias enterocócicas en una muestra.
16. Un procedimiento para cuantificar material biológico en una muestra licuada que comprende las etapas de:
a) proporcionar un dispositivo (110, 210) que tiene una cámara de reacción (112) que encierra un volumen en la misma, dicha cámara de reacción (112) tiene una abertura superior por la que se puede verter una muestra licuada y una pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226), teniendo cada uno de dichos compartimentos (126, 126a-c, 226) un borde superior y estando configurado y dimensionado para contener partes alícuotas separadas de una muestra licuada en el mismo, y una tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) sujeta de forma que se puede quitar a la parte superior de dicho dispositivo (110, 210), estando configurada y dimensionada dicha tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) para sellar el borde superior de cada compartimento (126, 126a-c, 226) para evitar la comunicación líquida entre dichos compartimentos;
b) añadir una muestra licuada a dicho dispositivo (110, 210);
c) distribuir la muestra licuada en dichos compartimentos del dispositivo (126, 126a-c, 226) vertiendo dicha muestra licuada en un distribuidor de carga (116) sujeto a la cámara de reacción (112);
d) sujetar la tapa con junta de estanqueidad (122, 124, 222, 224) a la parte superior de dicho dispositivo (110, 210) sellando de esta forma dichos compartimentos (126, 126a-c, 226; y
e) detectar la presencia o ausencia de dicho material biológico en cada uno de dichos compartimentos (126, 126a-c, 226);
caracterizado porque la cámara de reacción (112) del dispositivo proporcionado en la etapa a) define un eje central a través de la misma y la pluralidad de compartimentos discretos no permeables (126, 126a-c, 226) están formados radialmente alrededor del eje central.
17. El procedimiento de la reivindicación 16, en el que los microorganismos que se van a cuantificar se seleccionan de una o más especies bacterianas y el medio de ensayo es un medio de detección biológico específico.
18. El procedimiento de la reivindicación 16 o reivindicación 17, en el que el medio biológico específico se dispensa previamente en los compartimentos (126, 126a-c, 226).
19. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18, en el que el número de compartimentos (126, 126a-c, 226) es entre 12 y 36.
20. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en el que los compartimentos (126, 126a-c, 226) son sustancialmente del mismo tamaño.
21. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en el que los compartimentos comprenden una primera pluralidad de compartimentos (126b) de un tamaño y una segunda pluralidad de compartimentos (126c) de un tamaño diferente que el primer tamaño.
22. El procedimiento de la reivindicación 21, en el que los compartimentos comprenden una tercera pluralidad de compartimentos de un tamaño diferente de dichas primera y segunda pluralidad de compartimentos (126b, 126c).
23. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 22 cuando dependen de la reivindicación 17, en el que dichas una o más especies bacterianas son bacterias Escherichia coli y coliformes.
24. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, en el que la muestra licuada es agua.
25. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que el medio de detección biológico específico se mezcla con la muestra licuada antes de la distribución en el dispositivo (110, 210).
26. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que el medio de detección biológico específico comprende dos o más medios distintos que se distribuyen individualmente en diferentes compartimentos (126, 126a-c, 226) proporcionando así detección multiplexada.
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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050112292A1 (en) * 2003-11-25 2005-05-26 Parker Russell A. Methods for treating at least one member of a microarray structure and methods of using the same
CA2895994A1 (en) 2004-06-23 2006-01-05 Zyzeba Testing Limited Improvements in and relating to micro-organism test apparatus and methods of using the same
GB0524770D0 (en) * 2005-12-03 2006-01-11 Univ Bristol A low cost water test device for use in developing countries in remote field conditions
DE102008005968B4 (de) * 2007-03-21 2015-07-30 Sartorius Stedim Biotech Gmbh Nährmedieneinheit und Verfahren zur Aufnahme eines Filters aus einer Filtrationsvorrichtung
US9045726B2 (en) * 2009-01-29 2015-06-02 Hitachi High-Technologies Corporation Device for automatically analyzing microorganisms and method for automatically analyzing microorganisms
GB0907605D0 (en) * 2009-05-01 2009-06-10 Univ Bristol Apparatus for testing the quality of a fluid sample
WO2011149853A1 (en) * 2010-05-27 2011-12-01 3M Innovative Properties Company Methods and articles for sample processing
US9283559B2 (en) 2012-05-09 2016-03-15 Wisconsin Alumni Research Foundation Lid for functionalized microfluidic platform and method
US8454562B1 (en) * 2012-07-20 2013-06-04 Asante Solutions, Inc. Infusion pump system and method
US20160053293A1 (en) 2014-08-25 2016-02-25 Idexx Laboratories Inc. Multi-well sample testing apparatus and methods of sample testing using the same
EP3200922B1 (en) * 2014-09-30 2020-05-06 Exosome Diagnostics, Inc. Apparatuses, methods, and systems for sample collection and dispersion
GB201800303D0 (en) * 2018-01-09 2018-02-21 Univ Plymouth Water quality testing
US11633741B2 (en) * 2019-03-19 2023-04-25 Miltenyi Biotec B.V. & Co. KG Slide chamber
US11684877B2 (en) * 2020-09-30 2023-06-27 Dionex Corporation Extraction cell cap assembly with toolless disassembly

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3083145A (en) * 1959-11-04 1963-03-26 Dundee Lab Inc Process and device for determining the sensitivity of bacteria to antibiotics
US3107204A (en) * 1961-01-23 1963-10-15 Dalde Reagents Inc Microbiological testing method and structure therefor
US3787290A (en) * 1972-04-10 1974-01-22 S Kaye Method and means for assaying biological factors demonstrating quantal response
US4070249A (en) * 1976-06-08 1978-01-24 American Home Products Corporation Apparatus for compensating for pressure within a biological test device
US4073693A (en) * 1976-06-08 1978-02-14 American Home Products Corporation Apparatus and method for conducting a plurality of biological tests
US4129483A (en) * 1977-03-03 1978-12-12 Bochner Barry R Device, composition and method for identifying microorganisms
FR2400700A1 (fr) * 1977-08-18 1979-03-16 Guigan Jean Dispositif de conditionnement d'un echantillon de liquide en vue de son analyse
IT1097442B (it) * 1977-08-18 1985-08-31 Guigan Jean Dispositivo di condizionamento di un campione di liquido in preparazione della sua analisi
US4226531A (en) * 1977-08-29 1980-10-07 Instrumentation Laboratory Inc. Disposable multi-cuvette rotor
US4258135A (en) * 1978-10-30 1981-03-24 Meunier Henry E Device for use in the study of biochemical or enzymatic reactions
US4239853A (en) * 1979-01-22 1980-12-16 Bradley Rex L Antibiotic testing method and apparatus having a channelized reservoir
US4385115A (en) * 1980-10-22 1983-05-24 Hoffmann-La Roche Inc. Diagnostics testing devices and processes
US4772558A (en) * 1987-06-01 1988-09-20 Ranier Hammann Blood culture system
WO1990011830A1 (en) * 1989-04-11 1990-10-18 Ares-Serono Research & Development Limited Partnership Multianalyte test vehicle
US5149505A (en) * 1989-07-18 1992-09-22 Abbott Laboratories Diagnostic testing device
US5182082A (en) * 1991-01-23 1993-01-26 Becton, Dickinson And Company Multiple aliquot device for distributing a liquid solution into a well
JP3305322B2 (ja) * 1992-11-06 2002-07-22 バイオログ,インコーポレーテッド 液体及び懸濁液の分析装置
US5342581A (en) * 1993-04-19 1994-08-30 Sanadi Ashok R Apparatus for preventing cross-contamination of multi-well test plates
US6258325B1 (en) * 1993-04-19 2001-07-10 Ashok Ramesh Sanadi Method and apparatus for preventing cross-contamination of multi-well test plates
US5518892A (en) * 1994-02-23 1996-05-21 Idexx Laboratories, Inc. Apparatus and method for quantification of biological material in a liquid sample
US5429804A (en) 1994-07-15 1995-07-04 Sayles; Philip W. One-step testing device
CA2179364C (en) * 1995-06-27 1999-09-28 Klaus W. Berndt Method and apparatus for detecting microorganisms
US5759494A (en) * 1995-10-05 1998-06-02 Corning Incorporated Microplates which prevent optical cross-talk between wells
US5700655A (en) * 1995-11-14 1997-12-23 Idexx Laboratories, Inc. Method for quantification of biological material in a sample
US5985594A (en) * 1995-11-14 1999-11-16 Idexx Laboratories, Inc. Method for quantification of biological material in a sample
US6342183B1 (en) * 1997-02-14 2002-01-29 Escreen System for collecting and locally analyzing a fluid specimen
USD403077S (en) * 1997-05-12 1998-12-22 Neogen Corporation Microorganism culture tray
US5922288A (en) * 1997-05-29 1999-07-13 Herst; C. V. Taylor Device for isolating a component of a physiological sample
EP1046912A1 (en) 1997-10-27 2000-10-25 Idexx Laboratories, Inc. Device and methods for determination of analyte in a solution
US5962250A (en) * 1997-10-28 1999-10-05 Glaxo Group Limited Split multi-well plate and methods
US20010007642A1 (en) * 1998-03-03 2001-07-12 Marc Feiglin Sealing apparatus for use with microplates
DE19810499A1 (de) 1998-03-11 1999-09-16 Microparts Gmbh Mikrotiterplatte
GB9809943D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Amersham Pharm Biotech Ab Microfluidic device
DE19852835A1 (de) 1998-11-17 2000-05-18 Stratec Biomedical Systems Ag Probenträger
US6555389B1 (en) * 1999-05-11 2003-04-29 Aclara Biosciences, Inc. Sample evaporative control
AU2001272926A1 (en) * 2000-05-26 2001-12-11 Whatman, Inc. Use of membrane cover in prevention of cross-contamination in multiple biological material isolation processing
US6939516B2 (en) 2000-09-29 2005-09-06 Becton, Dickinson And Company Multi-well plate cover and assembly adapted for mechanical manipulation
US6627432B2 (en) * 2001-02-28 2003-09-30 Dade Behring Inc. Liquid flow and control in a biological test array

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