ES2280566T3

ES2280566T3 - Macrociclos antibacterianos.

Info

Publication number: ES2280566T3
Application number: ES02764872T
Authority: ES
Inventors: Berthold Hinzen; Heike Brotz-Oesterhelt; Rainer Endermann; Kerstin Henninger; Holger Paulsen; Siegfried Raddatz; Thomas Lampe; Veronika Hellwig; Andreas Schumacher
Original assignee: Bayer Healthcare AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2001-09-19
Filing date: 2002-09-06
Publication date: 2007-09-16
Anticipated expiration: 2022-09-06
Also published as: DE50209187D1; AU2002329267A1; EP1430075A2; WO2003024996A3; WO2003024996A2; DE10146104A1; US7405201B2; EP1430075B1; CA2460646A1; JP2005510468A; US20050107288A1; JP4427326B2

Abstract

Compuestos de **fórmula**, en la que R1 significa igual a halógeno, R2, R3 y R4 son iguales o distintos y se seleccionan independientemente entre sí del grupo compuesto por hidrógeno y halógeno, R5 significa igual a hidrógeno, alquilo C1-C4, flúor o cloro R6 significa igual a hidrógeno, halógeno o alquilo, R7 significa igual a alquilo o (cicloalquil)alquilo, R8a significa igual a alquilo, alquileno, cicloalquilo o (cicloalquil)alquilo, pudiendo estar R8a dado el caso substituido con 1, 2 ó 3 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por hidroxi, alcoxi, un resto - OR8a-1, carboxilo, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, aminosulfonilo; así como sus sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables.

Description

Macrociclos antibacterianos.

La presente invención se refiere a compuestos, procedimientos para su preparación, composiciones farmacéuticas que los contienen así como a su uso en el tratamiento de enfermedades en seres humanos o animales.

El documento US 4 492 650 describe los compuestos

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(R^{C} representa hidrógeno, R^{a} es igual a hepta-1,3,5-trienilo, R^{b} igual a hidrógeno o R^{a} es igual a hepta-1,3,5-trienilo, R^{b} igual a metilo o R^{a} es igual a hepta-1,3-dienilo, R^{b} igual a metilo o R^{a} es igual a penta-1,3-dienilo, R^{b} igual a metilo o R^{a} es igual a penta 1,3-dienilo, R^{b} igual a hidrógeno o R^{a} es igual a pente-5-hidroxo-1,3-dienilo, R^{b} igual a metilo) como antibacterianos eficaces.

El documento JP 05 065 297 describe la enopeptina A (R^{a} igual a octa-1,3,5,7-tetraenilo, R^{b} igual a hidrógeno, R^{c} igual a metilo) como antibacteriano eficaz.

El documento JP 05 117 290 describe los depsipéptidos A y B, en los que R^{a} es igual a un resto

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R^{b} igual a hidrógeno, R^{c} igual a hidrógeno o metilo, como antibacteriano eficaz.

El documento WO 01/07467 describe derivados de esteptogramina que presentan un resto fenilo que entre otros está substituido con Cl o Br.

Es un objetivo de la presente invención proporcionar compuestos alternativos con actividad antibacteriana comparable o mejorada para el tratamiento de enfermedades bacterianas en seres humanos y animales.

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Son por consiguiente objeto de la presente invención compuestos de fórmula general (I)

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en la que

R^{1}: significa igual a halógeno,

R^{2}, R^{3} y R^{4} son iguales o distintos y se seleccionan independientemente entre sí del grupo compuesto por hidrógeno y halógeno,

R^{5}: significa igual a hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, flúor o cloro

R^{6}: significa igual a hidrógeno, halógeno o alquilo,

R^{7}: significa igual a alquilo o (cicloalquil)alquilo,

R^{8a}: significa igual a alquilo, alquileno, cicloalquilo o (cicloalquil)alquilo,

pudiendo estar R^{8a} dado el caso substituido con 1, 2 ó 3 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por hidroxi, alcoxi, un resto -OR^{8a-1}, carboxilo, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo, dialquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, heterociclilaminosulfonilo, heteroarilaminosulfonilo, aminocarbonilamino, hidroxicarbonilamino, alcoxicarbonilamino, aminocarboniloxi, siendo R^{8a-1} igual a un resto de aminoácido unido a carbonilo,

o R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico que, dado el caso, puede estar substituido con 1, 2 ó 3 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, azido, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi,

R^{8b}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

R^{9a}: significa igual a hidrógeno, alquilo, hidroxialquilo, carboxialquilo o aminoalquilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

R^{10a}: ignifica igual a hidrógeno o flúor,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{11}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

R^{12}: significa igual a alquilo, alquenilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, (cicloalquil)alquilo, (cicloalquenil)alquilo, (cicloalquil)alquenilo, (cicloalquenil)alquenilo,

pudiendo estar R^{12} dado el caso substituido con 1, 2 ó 3 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, hidroxi, alcoxi, fluoroalcoxi, ariloxi, alcanoiloxi, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo, dialquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, heteroarilaminosulfonilo, heterociclilaminosulfonilo, aminocarbonilamino, alcoxicarbonilamino,

o

R^{6} y R^{12} junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un cicloalquilo que dado el caso puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, hidroxi, alcoxi,

R^{13}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

A: representa un heterociclo que dado el caso puede estar substituido con 1, 2 ó 3 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, azido, alcoxicarbonilamino,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble,

así como sus sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención pueden presentarse en distintas formas estereoisómeras que se comportan como objeto y su imagen especular (enantiómeros), o que no se comportan como objeto y su imagen especular (diastereómeros). La invención se refiere tanto a los enantiómeros como también a los diastereómeros así como a sus mezclas respectivas. Las formas racémicas pueden separarse de modo conocido, al igual que los diastereómeros, en los componentes estereoisómeros unitarios.

Las substancias de fórmula general (I) conforme a la invención pueden también presentarse como sales. En el marco de la invención son preferidas sales farmacéuticamente aceptables.

Sales farmacéuticamente aceptables pueden ser sales de los compuestos conforme a la invención con ácidos inorgánicos u orgánicos. Preferiblemente son sales con ácidos inorgánicos como por ejemplo el ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico o ácido sulfúrico, o sales con ácidos orgánicos carboxílicos o sulfónicos, como por ejemplo el ácido acético, ácido propiónico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido benzoico o ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico o ácido naftalenodisulfónico.

Igualmente pueden ser sales farmacéuticamente aceptables sales de los compuestos conforme a la invención con bases, como por ejemplo sales de metales o de amonio. Son ejemplos preferidos sales de metales alcalinos (p.ej. sales de sodio o potasio), sales de metales alcalinotérreos (p.ej. sales de magnesio o calcio), así como sales de amonio, derivadas del amoniaco o de aminas orgánicas, como por ejemplo etilamina, di- o trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, di- o trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, dibencilamina, N-metilmorfolina, dihidroabietilamina, metilpiperidina, arginina, lisina, etilendiamina o 2-feniletilamina.

Las definiciones de restos anteriormente mencionadas en general o en intervalos de preferencia son válidas tanto para los productos finales de fórmula (I) como también correspondientemente para las respectivas substancias de partida o productos intermedios necesarios para la preparación..

Las definiciones de restos indicadas en concreto en las combinaciones o combinaciones preferidas de restos se substituyen también independientemente de las respectivas combinaciones indicadas discrecionalmente por definiciones de restos de otras combinaciones.

Alquilo así como las partes alquilo en substituyentes como alcoxi, mono- y dialquilamino, alquilsulfonilo comprenden alquilo lineal y ramificado, p.ej. alquilo C_{1}-C_{24}, preferiblemente C_{1}-C_{12} y C_{7}-C_{24}, en especial C_{1}-C_{6} y C_{1}-C_{4}.

Alquilo C_{1}-C_{24} comprende metilo, etilo, n- e i-propilo, n-, i-, sec- y terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, 2-etilhexilo, n-octilo, decilo, dodecilo, palmitilo, estearilo,

Alquilo C_{1}-C_{12} comprende metilo, etilo, n- e i-propilo, n-, i-, sec- y terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, 2-etilhexilo, n-octilo, decilo, dodecilo,

Alquilo C_{1}-C_{6} comprende metilo, etilo, n- e i-propilo, n-, i-, sec- y terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo,

Alquilo C_{1}-C_{4} comprende metilo, etilo, n- e i-propilo, n-, i-, sec- y terc-butilo,

Alquenilo comprende alquenilo lineal y ramificado C_{2}-C_{24}, preferiblemente C_{2}-C_{12}, en especial C_{2}-C_{6} y C_{2}-C_{4}, como p.ej. vinilo, alilo, prop-1-en-1-ilo, isopropenilo, but-1-enilo, but-2-enilo, buta-1,2-dienilo, buta-1,3-dienilo.

Cicloalquilo comprende restos de hidrocarburos policíclicos saturados de hasta 14 átomos de C, a saber alquilo monocíclico C_{3}-C_{12}, preferiblemente C_{3}-C_{8}, como p.ej. ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclononilo, y alquilo policíclico, es decir alquilo C_{7}-C_{14} preferiblemente bicíclico y tricíclico, dado el caso espirocíclico, como p.ej. biciclo[2.2.1]hept-1-ilo, biciclo[2.2.1]hept-2-ilo, biciclo[2.2.1]hept-7-ilo, biciclo[2.2.2]oct-2-ilo, biciclo[3.2.1]oct-2-ilo, biciclo[3.2.2]non-2-ilo y adamantilo.

Cicloalquenilo comprende restos de hidrocarburos policíclicos insaturados no aromáticos de hasta 14 átomos de C, a saber alquenilo monocíclico C_{3}-C_{12}, preferiblemente C_{3}-C_{8}, como p.ej. ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo, ciclooctenilo, ciclononenilo, y alquenilo policíclico, es decir alquenilo C_{7}-C_{14} preferiblemente bicíclico y tricíclico, dado el caso espirocíclico.

(Cicloalquil)alquilo representa un resto alquilo que está substituido con un resto cicloalquilo, siendo de mencionar a modo de ejemplo ciclohexilmetilo. De forma correspondiente

(Cicloalquenil)alquilo representa un resto alquilo que está substituido con un resto cicloalquenilo, p.ej. 2-ciclohexenilmetilo.

Arilo representa en el marco de la invención un resto aromático con preferiblemente 6 a 10 átomos de carbono. Son restos arilo preferidos fenilo y naftilo.

Alcoxi representa en el marco de la invención preferiblemente un resto alcoxi de cadena lineal o ramificado, en especial de 1 a 6, 1 a 4 ó 1 a 3 átomos de carbono. Preferiblemente es un resto alcoxi de cadena lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, t-butoxi, n-pentoxi y n-hexoxi.

Alcoxicarbonilo representa en el marco de la invención preferiblemente un resto alcoxi de cadena lineal o ramificado de 1 a 6 ó 1 a 4 átomos de carbono que está unido a través de un grupo carbonilo. Preferiblemente es un resto alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo y t-butoxicarbonilo.

Alcanoiloxi representa en el marco de la invención preferiblemente un resto alquilo de cadena lineal o ramificado de 1 a 6, 1 a 5 ó 1 a 3 átomos de carbono, que en la posición 1 lleva un átomo de oxígeno unido con doble enlace y unido en la posición 1 a través de otro átomo de oxígeno. Preferiblemente es un resto alcanoiloxi de cadena lineal o ramificado de 1 a 3 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: acetoxi, propionoxi, n-butiroxi, i-butiroxi, pivaloiloxi y n-hexanoiloxi.

Monoalquilamino representa en el marco de la invención un grupo amino con un substituyente alquilo de cadena lineal o ramificado que preferiblemente presenta 1 a 6, 1 a 4 ó 1 a 2 átomos de carbono. Preferiblemente es un resto monoalquilamino de cadena lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: metilamino, etilamino, n-propilamino, isopropilamino, t-butilamino, n-pentilamino y n-hexilamino.

Dialquilamino representa en el marco de la invención un grupo amino con dos substituyentes alquilo de cadena lineal o ramificados iguales o distintos que preferiblemente presentan respectivamente 1 a 6, 1 a 4 ó 1 a 2 átomos de carbono. Preferiblemente son restos dialquilamino de cadena lineal o ramificados de respectivamente 1 a 4 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n-propilamino, N-isopropil-N-n-propilamino, N-t-butil-N-metilamino, N-etil-N-n-pentilamino y N-n-hexil-N-metilamino.

Mono- o dialquilaminocarbonilo representa en el marco de la invención un grupo amino que está unido a través de un grupo carbonilo y que presenta un substuyente alquilo de cadena lineal o ramificado o dos iguales o distintos de cadena lineal o ramificados de preferiblemente respectivamente 1 a 4 ó 1 a 2 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar metilaminocarbonilo, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, t-butilaminocarbonilo, N,N-dimetilaminocarbonilo, N,N-dietilaminocarbonilo, N-etil-N-metilaminocarbonilo, y N-t-butil-N-metilaminocarbonilo.

Alquilcarbonilamino (acilamino) representa en el marco de la invención un grupo amino con un substituyente alcanoílo de cadena lineal o ramificado que preferiblemente presenta 1 a 6, 1 a 4 ó 1 a 2 átomos de carbono y que está unido a través del grupo carbonilo. Preferiblemente es un resto monoacilamino de 1 a 2 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: formamido, acetamido, propionamido, n-butiramido y pivaloilamido.

Heterociclilo (heterociclo) representa un resto heterocíclico mono- o policíclico de 4 a 10 átomos de carbono y hasta 3, preferiblemente 1, heteroátomos o heterogrupos de la serie de N, O, S, SO, SO_{2}. Es preferido heterociclilo de 4 a 8 miembros. Es preferido heterociclilo mono- o bicíclico. Es especialmente preferido heterociclilo monocíclico. Como heteroátomos son preferidos N y O. Los restos heterociclilo pueden ser saturados o parcialmente insaturados. Son preferidos restos heterociclilo saturados. Los restos heterociclilo pueden estar unidos a través de un átomo de carbono o de un heteroátomo. Son especialmente preferidos restos heterociclilo de 5 a 7 miembros monocíclicos saturados con hasta dos heteroátomos de la serie de O, N y S. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: oxetan-3-ilo, pirrolidin-2-ilo, pirrolidin-3-ilo, pirrolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, piranilo, piperidinilo, tiopiranilo, morfolinilo, perhidroazepinilo. Un anillo heterociclilo nitrogenado es a este respecto un heterociclo que como heteroátomo solo presenta átomos de nitrógeno.

Heteroarilo representa un resto aromático mono- o bicíclico de 5 a 10 átomos de anillo y hasta 5 heteroátomos de la serie de O, N y S. Preferiblemente son heteroarilos de 5 a 6 miembros con hasta 4 heteroátomos, El resto heteroarilo puede estar unido a través de un átomo de carbono o de un heteroátomo. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: tienilo, furilo, pirrolilo, tiazolilo, oxazolilo, imidazolilo, piridilo, pirimidinilo, indolilo, indazolilo, benzofuranilo, benzotiofenilo, quinolinilo, isoquinolinilo.

Alcoxicarbonilamino representa en el marco de la invención un grupo amino con un substituyente alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificado que preferiblemente presenta en el resto alcoxi 1 a 6 ó 1 a 4 átomos de carbono y que está unido a través del grupo carbonilo. Preferiblemente es un resto alcoxicarbonilamino de 1 a 4 átomos de carbono. A modo de ejemplo y preferiblemente son de mencionar: metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino, n-propoxicarbonilamino y t-butoxicarbonilamino.

Aminosulfonilo representa un grupo -S(O)_{2}NH_{2}. Correspondientemente alquilaminosulfonilo, dialquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, heterociclilaminosulfonilo y heteroarilaminosulfonilo están substituidos en el grupo amino con los restos correspondientes, es decir alquilo, arilo, etc.

Resto de aminoácido unido a carbonilo representa un resto de aminoácido que está unido a la funcióm ácido del aminoácido a través del grupo carbonilo. Son preferidos a este respecto \alpha-aminoácidos en la configuración L o en la D, en especial \alpha-aminoácidos de existencia natural en la configuración L natural, p.ej. glicina (R^{8a-1} igual a aminometilcarbonilo), L-alanina (R^{8a-1} igual a (S)-(+)-aminopropilcarbonilo), L-prolina (R^{8a-1} igual a (S)-(-)-pirrolidin-2-carbonilo), N,N-dimetilglicina (R^{8a-1} igual a N,N-dimetilaminometilcarbonilo).

Halógeno incluye en el marco de la invención flúor, cloro, bromo y yodo. Preferiblemente son flúor y cloro.

\underbar{.....} representa un enlace sencillo o doble. Este puede estar configurado en cis o trans, siendo preferido en trans.

Preferiblemente en el marco de la invención son compuestos de fórmula general (I), en la que

R^{1}: significa igual a halógeno

R^{2}: significa igual a hidrógeno o halógeno,

R^{3}: significa igual a hidrógeno o halógeno,

R^{4}: significa igual a hidrógeno o halógeno,

R^{5}: significa igual a hidrógeno, metilo o flúor,

R^{6}: significa igual a hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4},

R^{7}: significa igual a alquilo,

R^{8a}: significa igual a alquilo, alquileno, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo,

pudiendo estar R^{8a} dado el caso substituido con 1 ó 2 substituyentes que independientemente entre sí se seleccionan del grupo constituido por hidroxi, alcoxi, un resto -OR^{8a-1}, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alcoxicarbonilamino,

siendo R^{8a-1} igual a un resto de aminoácido unido a carbonilo,

o R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico que dado el caso puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi,

R^{8a}: significa igual a hidrógeno,

R^{9a}: significa igual a hidrógeno, metilo o hidroximetilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno,

R^{10a}: significa igual a hidrógeno,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno,

R^{11}: significa igual a hidrógeno,

R^{12}: significa igual a alquilo, alquenilo, (cicloalquil)alquilo, (cicloalquenil)alquilo, (cicloalquil)alquenilo, (cicloalquenil)alquenilo,

pudiendo estar R^{12} dado el caso substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, hidroxi, alcoxi,

o

R^{13}: significa igual a hidrógeno,

A: representa un heterociclo que dado el caso puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por flúor, alquilo, trifluorometilo, alcoxicarbonilamino,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble.

Preferiblemente en el marco de la presente invención son también compuestos de fórmula general (I), en la que

R^{1}: significa igual a flúor,

R^{2}: gnifica igual a hidrógeno o flúor,

R^{3}: significa igual a hidrógeno,

R^{4}: significa igual a hidrógeno,

R^{5}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{6}: significa igual a hidrógeno,

R^{7}: significa igual a metilo,

R^{8a}: significa igual a alquilo C_{1}-C_{4},

pudiendo estar R^{8a} dado el caso substituido con 1 substituyente seleccionado del grupo constituido por hidroxi o un resto -OR^{8a-1},

en el que R^{8a-1} es igual a un resto aminometilcarbonilo,

o R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico nitrogenado de 5 a 6 miembros que puede contener hasta 2 átomos de nitrógeno y que dado el caso puede estar substituido con 1 substituyente seleccionado del grupo constituido por alquilo, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi,

R^{8a}: significa igual a hidrógeno,

R^{9a}: significa igual a hidrógeno, alquilo o hidroximetilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno,

R^{10a}: significa igual a hidrógeno,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno,

R^{11}: significa igual a hidrógeno,

pudiendo estar R^{12} dado el caso monosubstituido con hidroxi,

o

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R^{6} y R^{12} junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un cicloalquilo de 5 a 6 miembros que dado el caso puede estar monosubstituido con hidroxi,

R^{13}: significa igual a hidrógeno,

A: representa un heterociclo de 5 miembros que contiene 1 átomo de nitrógeno y que dado el caso puede estar monosubstituido con un substituyente seleccionado del grupo constituido por flúor, alquilo,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble.

Preferiblemente en el marco de la presente invención son compuestos de fórmula general (I) que presentan la fórmula general (II):

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en la que A, \underbar{.....} y R^{1} a R^{12} son como se definieron anteriormente.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) que presentan la fórmula general (III):

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en la que A, \underbar{......} y R^{1} a R^{12} son como se definieron anteriormente.

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Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) que presentan la fórmula general (IV):

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en la que A, \underbar{......} y R^{1} a R^{12} son como se definieron anteriormente y R^{14} significa igual a alquilo.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I),

en la que R^{1} significa igual a flúor y R^{2}, R^{3} y R^{4} son iguales o distintos e independientemente entre sí se seleccionan del grupo constituido por hidrógeno y flúor, en especial en la que R^{1} y R^{2} son flúor y están respectivamente en posición meta en relación al grupo metileno bencílico, y R^{3} y R^{4} son hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{5} significa hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{6} significa hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{7} significa metilo.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{8a} significa metilo, hidroximetilo o -OR^{8a-1} en la que R^{8a-1} significa un resto de aminoácido unido a carbonilo, en especial aminometilcarbonilo o N-alquil- o N,N-dialquilaminometilcarbonilo y R^{8b} hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico que, dado el caso, puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo y amino, en especial en la que R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros. Son especialmente preferidos compuestos en los que R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo de pirrolidina, un anillo de morfolina o un anillo de piperidina.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{9a} significa alquilo, en especial metilo, y R^{9b} hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{10a} y R^{10b} significan hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{11} significa hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{12} significa alquilo C_{3}-C_{8}, en especial en la que R^{12} significa alquilo C_{3}-C_{5} en forma de cadena, en especial alquilo C_{4} en forma de cadena.

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Son preferidos también los siguientes restos R^{12}:

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Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{13} significa hidrógeno.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que A representa un heterociclo de 5 miembros que contiene 1 átomo de nitrógeno y quedado el caso puede estar monosubstituido con un substituyente seleccionado del grupo constituido por flúor y alquilo.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención compuestos de fórmula general (I) en la que R^{5} y R^{6} son hidrógeno y \underbar{.....} representa un enlace doble.

Además, son preferidos en el marco de la presente invención los siguientes compuestos:

[(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,7S,13S,16S,19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17-
tetraaza-triciclo[17.3.0.0.^{7,11}]docos-3-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido (E)-hept-2-enoico

[(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido (E)-hept-2-enoico

[(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido 3-ciclohexilpropanoico

[(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido 3-ciclohexil-2-propenoico

Los compuestos de la presente invención se caracterizan por un amplio espectro de actividad frente a bacterias gram-positivas, pudiendo incluir también a gérmenes multirresistentes, en especial estafilococos, neumococos y enterococos, incluidas cepas resistentes a vancomicina o meticilina.

La presente invención se refiere además a un procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula general (I) en el que se hacen reaccionar compuestos de fórmula general (V)

11

en la que

R^{1} a R^{4}, R^{7} a R^{11}, R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado,

con compuestos de fórmula general (XXV)

\vskip1.000000\baselineskip

12

en la que

R^{5}, R^{6}, R^{12} y \underbar{.....} presentan el significado anteriormente indicado,

pudiendo presentarse estos dado el caso en forma activada.

Para la transformación de los compuestos a la forma activada son adecuadas por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC) (dado el caso en presencia de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azobenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases.

Son bases por ejemplo carbonatos alcalinos, como p.ej. carbonato o hidrogenocarbonato sódico o potásico, o bases orgánicas como trialquilaminas, p.ej. trietilamina, N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, 4-dimetilaminopiridina o diisopropiletilamina.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferida la dimetilformamida.

Los compuestos de fórmula general (XXV) son conocidos o pueden prepararse conforme a procedimientos conocidos de la literatura a partir de ácidos carboxílicos conocidos.

Los compuestos de fórmula general (V) son nuevos y pueden prepararse mezclando compuestos de fórmula general (VI)

\vskip1.000000\baselineskip

13

en la que

\global\parskip0.900000\baselineskip

con ácido.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, dioxano, nitrometano, dimetilformamida o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferido el diclorometano.

Como ácido es especialmente adecuado el ácido trifluoroacético, especialmente en solución acuosa, o cloruro de hidrógeno en dioxano.

Los compuestos de fórmula general (VI) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (VII)

14

en la que

R^{7} a R^{9}, R^{11}, R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado,

con compuestos de fórmula general (VIII)

15

en la que

R^{1} a R^{4} y R^{10} presentan el significado anteriormente indicado en presencia de reactivos de deshidratación.

Como reactivos de deshidratación son adecuados a este respecto por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-
dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC) (dado el caso en presencia de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases. Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con HATU.

\global\parskip1.000000\baselineskip

Son bases por ejemplo carbonatos alcalinos, como p.ej. carbonato o hidrogenocarbonato sódico o potásico, o bases orgánicas como trialquilaminas, p.ej. trietilamina, N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, 4-dimetilaminopiridina o diisopropiletilamina. Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con diisopropiletilamina.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida, acetonitrilo o hexametilfosforamida. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferida la dimetilformamida.

Los compuestos de fórmula general (VII) también pueden presentarse en forma de sus sales, en especial de sus clorhidratos.

Los compuestos de fórmula general (VIII) son conocidos o pueden prepararse conforme a procedimientos conocidos de la literatura a partir de aminoácidos conocidos.

16

en la que

R^{7} a R^{9}, R^{11}, R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado, se hidrogenan dado el caso con adición de ácido, p.ej. con cloruro de hidrógeno en metanol.

Como catalizadores son adecuados a este respecto metales de transición, como por ejemplo paladio, platino o rodio, preferiblemente paladio, en una cantidad de 0,01 a 1 equivalente respecto a la masa utilizada del compuesto de fórmula general (IX), preferiblemente de 0,05 a 0,2 equivalentes. Es muy especialmente preferido el paladio adsorbido sobre carbón activo.

Los compuestos de fórmula general (IX) son nuevos y pueden prepararse ciclando compuestos de fórmula general (X)

17

en la que

R^{7} a R^{11}, R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado.

A este fin, los compuestos de fórmula general (X) se hacen reaccionar sucesivamente en una reacción multietapa en un solo recipiente del siguiente modo:

1.: Formación de un éster activo (p.ej. con EDC y pentafluorofenol) y subsiguiente eliminación del disolvente.

2.: Disociación del grupo protector Boc por tratamiento con ácido, p.ej. con cloruro de hidrógeno en dioxano, y subsiguiente eliminación del disolvente.

3.: Ciclación en mezcla bifásica (agua/disolvente orgánico, p.ej. diclorometano/agua o cloroformo/agua) por neutralización con solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico (u otro sistema tampón) en condiciones de dilución.

Como reactivos de deshidratación son adecuados a este respecto por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC) (dado el caso en presencia de pentafluorofenol (PFP)), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azobenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases. Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con EDC en presencia de pentafluorofenol.

Sin vincularnos a esta teoría, la ciclación se realiza probablemente por la formación del éster activado con auxilio del reactivo de deshidratación (1.), la formación del clorhidrato del éster con ayuda del ácido (2.) y la ciclación por la lenta liberación de la amina (3.).

Los compuestos de fórmula general (X) son nuevos y pueden prepararse sometiendo compuestos de fórmula general (XI)

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18

\vskip1.000000\baselineskip

en la que

R^{7} a R^{11}, R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado,

a una hidrólisis de éster reductora, p.ej. con cinc en ácido acético al 90%.

\newpage

Los compuestos de fórmula general (XI) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (XII)

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19

\vskip1.000000\baselineskip

en la que

R^{7} a R^{9} y R^{11} presentan el significado anteriormente indicado,

con compuestos de fórmula general (XIII)

\vskip1.000000\baselineskip

20

en la que

R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado, con agentes de deshidratación.

Como reactivos de deshidratación son adecuados a este respecto por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azobenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases.

Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con TPTU (tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio) en presencia de HOBT y base, en especial base de Hünig.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferido el diclorometano.

Los compuestos de fórmula general (XIII) también pueden presentarse en forma de sus sales, en especial de sus clorhidratos.

Los compuestos de fórmula general (XIII) son nuevos y pueden prepararse mezclando compuestos de fórmula general (XIV)

21

en la que

R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado,

con ácido, en especial con cloruro de hidrógeno en disolventes orgánicos anhídros, en especial dioxano o tetrahidrofurano.

Los compuestos de fórmula general (XIV) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (XV)

22

con compuestos de fórmula general (XVI)

23

en la que

R^{13} y A presentan el significado anteriormente indicado,

dado el caso en presencia de reactivos de deshidratación.

Como reactivos de deshidratación son adecuados a este respecto por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azobenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases.

Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con EDC en presencia de DMAP.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida, o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferido el diclorometano.

Los compuestos de fórmula general (XV) y (XVI) son conocidos o pueden prepararse conforme a procedimientos conocidos de la literatura a partir de aminoácidos.

Los compuestos de fórmula general (XII) son nuevos y pueden prepararse hidrogenando compuestos de fórmula general (XVII)

24

en la que

R^{7} a R^{9} y R^{11} presentan el significado anteriormente indicado.

Como catalizadores son adecuados a este respecto metales de transición, como por ejemplo paladio, platino o rodio, preferiblemente paladio, en una cantidad de 0,01 a 1 equivalente respecto a la masa utilizada del compuesto de fórmula general (XVII), preferiblemente de 0,05 a 0,2 equivalentes. Es muy especialmente preferido el paladio adsorbido sobre carbón activo.

Los compuestos de fórmula general (XVII) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (XVIII)

25

en la que

R^{7} a R^{9} y R^{11} presentan el significado anteriormente indicado,

con N-Boc-prolina, dado el caso en presencia de reactivos de deshidratación.

Como reactivos de deshidratación son adecuados a este respecto por ejemplo carbodiimidas, como p.ej. N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diisopropil-, N,N'-diciclohexilcarbodiimida, clorhidrato de N-(3-dimetilaminoisopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC), N-ciclohexilcarbodiimida-N'-propiloximetil-poliestireno (PS-carbodiimida) o compuestos carbonílicos como carbonildiimidazol, o compuestos de 1,2-oxazolio como 2-etil-5-fenil-1,2-oxazolio-3-sulfato o perclorato de 2-terc-butil-5-metil-isoxazolio, o compuestos de acilamino como 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, o anhídrido del ácido propanofosfónico, o cloroformiato de isobutilo, o cloruro de bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosforilo o hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tri(dimetilamino)-fosfonio, o hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TPTU) o hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio (BOP), o mezclas de estos, con bases.

Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con HATU o con EDC en presencia de HOBt.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida, o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferido el diclorometano o la dimetilformamida.

Los compuestos de fórmula general (XVIII) son nuevos y pueden prepararse mezclando compuestos de fórmula general (XIX)

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26

en la que

R^{7} a R^{9} y R^{11} presentan el significado anteriormente indicado,

con ácido, en especial con cloruro de hidrógeno en disolventes orgánicos anhídros, en especial dioxano o tetrahidrofurano, o con ácido trifluoroacético en diclorometano.

Los compuestos de fórmula general (XIX) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (XX)

27

en la que

R^{9} y R^{11} presentan el significado anteriormente indicado,

con compuestos de fórmula general (XXI)

28

en la que

R^{7} y R^{8} presentan el significado anteriormente indicado,

dado el caso en presencia de reactivos de deshidratación.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida, o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferida la dimetilformamida o el diclorometano.

Los compuestos de fórmulas generales (XX) y (XXI) son conocidos o pueden prepararse conforme a procedimientos conocidos de la literatura a partir de aminoácidos.

Como alternativa para la preparación de los compuestos de fórmula general (I) también pueden hacerse reaccionar compuestos de fórmula general (VII) con compuestos de fórmula general (XXII)

29

en la que

R^{1} a R^{6}, R^{10}, R^{12} y \underbar{......} presentan el significado anteriormente indicado,

dado el caso en presencia de reactivos de deshidratación.

Preferiblemente la condensación se lleva a cabo con HATU.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes que no se alteran bajo las condiciones de reacción. A estos pertenecen hidrocarburos halogenados como diclorometano o triclorometano, hidrocarburos como benceno, nitrometano, dioxano, dimetilformamida, o acetonitrilo. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferida la dimetilformamida.

Los compuestos de fórmula general (I) pueden epimerizarse en esta ruta de reacción en el átomo de carbono marcado en la fórmula (XXII) con un asterisco (*) y se presentan en forma de distintos diastereómeros. En este caso se separan los diastereómeros no deseados por procedimientos convencionales, p.ej. cromatográficamente.

Los compuestos de fórmula general (XXII) son nuevos y pueden prepararse haciendo reaccionar compuestos de fórmula general (XXIII)

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30

en la que R^{1} a R^{4} y R^{10} presentan el significado anteriormente indicado,

con compuestos de fórmula general (XXIV)

31

en la que R^{5}, R^{6}, R^{12} y \underbar{.....} presentan el significado anteriormente indicado y X significa igual a halógeno,

dado el caso en presencia de bases.

Aquí, la función ácido de la fenilamina se bloquea in situ como éster de sililo. Como alternativa puede trabajarse en varias etapas a través del éster terc-butílico.

Preferiblemente la reacción se lleva a cabo con diisopropiletilamina.

Los compuestos de las fórmulas generales (XXIII) y (XXIV) son conocidos o pueden prepararse conforme a procedimientos conocidos de la literatura a partir de aminoácidos o ácidos carboxílicos.

Las reacciones anteriormente descritas se realizan en general en un intervalo de temperaturas de -78ºC a temperatura de reflujo, preferiblemente de -78ºC a +20ºC.

Las reacciones pueden llevarse a cabo a presión normal, elevada o reducida (p.ej. de 50 a 500 kPa). En general se trabaja a presión normal.

Los siguientes esquemas de flujo fig. 1 a fig. 3 ilustrarán los procedimientos:

\vskip1.000000\baselineskip

32

33

\newpage

Los intermedios (XII) pueden representarse como se muestra en la fig. 3:

34

El principio activo puede actuar sistémica y/o localmente. A tal efecto puede administrarse de modo adecuado, como p.ej. por vía oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, rectal, transdérmica, conjuntival, ótica o como implante.

Para estas vías de administración el principio activo puede administrarse en formas de administración adecuadas.

Para la administración oral son adecuadas formas de administración conocidas que liberan el principio activo de forma rápida y/o modificada, como p.ej. comprimidos (comprimidos no recubiertos y recubiertos, p.ej. comprimidos provistos de revestimientos gastrorresistentes o comprimidos con película), cápsulas, grageas, granulados, pellas, polvos, emulsiones, suspensiones y soluciones.

La administración parenteral puede llevarse a cabo evitando un paso de resorción (por vía intravenosa, intraarterial, intracardiaca, intraespinal o intralumbar) o intercalando una resorción (por vía intramuscular, subcutánea, intracutánea, percutánea o intraperitoneal). Para la administración parenteral son adecuadas como formas de administración entre otras preparados de inyección e infusión en forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, liofilizados y polvos estériles.

Para las demás vías de administración son adecuadas p.ej. formas farmacéuticas de inhalación (entre otras inhaladores de polvos, nebulizadores), gotas/soluciones nasales, aerosoles; comprimidos o cápsulas de administración lingual, sublingual o bucal, supositorios, preparaciones óticas y oftálmicas, cápsulas vaginales, suspensiones acuosas (lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipófilas, pomadas, cremas, leche, pastas, polvos para extender sobre la piel o implantes.

Los principios activos pueden transformarse de modo conocido en las formas de administración citadas. Esto se lleva a cabo usando coadyuvantes inertes no tóxicos farmacéuticamente adecuados. Para ello cuentan entre otros vehículos (p.ej. celulosa microcristalina), disolventes (p.ej. polietilenglicoles líquidos), emulsionantes (p.ej. dodecilsulfato sódico), dispersantes (p.ej. polivinilpirrolidona), biopolímeros sintéticos y naturales (p.ej. albúmina), estabilizadores (p.ej. antioxidantes como ácido ascórbico), colorantes (p.ej. pigmentos inorgánicos como óxidos de hierro) o correctores del sabor y/o olor.

En general ha mostrado ser ventajoso en la administración parenteral administrar cantidades de aproximadamente 5 a 250 mg/kg de peso corporal cada 24 horas para la consecución de resultados eficaces. En la administración oral la cantidad asciende a aproximadamente 5 a 100 mg/kg de peso corporal cada 24 horas.

Sin embargo, dado el caso, puede ser preciso desviarse de las cantidades indicadas, y concretamente en función del peso corporal, de la vía de administración, del comportamiento individual frente al principio activo, del tipo de preparado y del momento o intervalo a los que se realice la administración.

Determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI)

La CMI se determinó en el ensayo de dilución con líquido. Se diluyeron cultivos de una noche de los gérmenes de ensayo a 1:5000 ó S. aureus 133 a 1:10000 en caldo de Múller Hinton (fabricante: BBL) y se incubaron con diluciones de las substancias de ensayo (escalones de dilución 1:2). Son excepciones los ensayos con S. pyogenes Wacker y S. pneumoniae 1707/4 que se llevaron a cabo en caldo de Múller Hinton más 20% de suero bovino. Los cultivos se incubaron a 37ºC durante 18-24 horas; enterococos y estreptococos en presencia de 8-10% de CO_{2}.

Resultados

La correspondiente concentración de substancia más baja a la que ya no se presenta crecimiento visible de bacterias alguno se define como CMI. Los valores de la CMI en \mug/ml de algunos compuestos conforme a la invención frente a una serie de gérmenes están expuestos a modo de ejemplo en la siguiente tabla. Los compuestos muestran muy buena actividad contra la mayoría de los gérmenes de ensayo y por consiguiente una amplia actividad gram-positiva.

35

Infección sistémica con S. aureus 133

Se cultivaron células de S. aureus 133 durante una noche en caldo BH (Oxoid). El cultivo de una noche se diluyó a 1:100 en caldo BH nuevo y se centrifugó a alta velocidad durante 3 horas. Las bacterias que se encontraban en fase de crecimiento logarítmico se separaron por centrifugación y se lavaron 2 x con solución fisiológica salina tamponada. Después de esto se ajustó en un fotómetro (Dr. Lange LP 2W) una suspensión celular en solución de sal común a una extinción de 50 unidades. Tras un paso de dilución (1:15) esta suspensión se mezcló 1:1 con una suspensión de mucina al 10%. De esta solución de infección se administraron ip 0,25 ml/20 g de ratón. Esto correspondía a un número de células de aproximadamente 1 x 10E6 gérmenes/ratón. La terapia ip se realizó 30 minutos después de la infección. Para el ensayo de infección se utilizaron ratones hembras CFW1. Se protocolizó la supervivencia de los animales durante 6 días. Los compuestos conforme a la invención presentan un amplio espectro antibacteriano, en especial frente a gérmenes gram-positivos. Estas propiedades posibiltan su uso como principios activos quimioterapéuticos en medicina y veterinaria. Con su ayuda pueden combatirse gérmenes gram-positivos así como prevenirse, mejorarse y/o curarse enfermedades causadas por estos agentes patógenos.

Estos son buenos para la profilaxis y quimioterapia de infecciones locales y sistémicas en medicina y veterinaria causadas por tales agentes patógenos.

Abreviaturas

ac.: acuoso(a)

AE: acetato de etilo (éster etílico del ácido acético)

Bn: bencilo

Boc: terc-butoxicarbonilo

CDCl_{3}: cloroformo

CH: ciclohexano

DCM: diclorometano

DMSO: dimetilsulfóxido

DMAP: 4-N,N-dimetilaminopiridina

d.t: del teórico

EDC: N'-(3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida x HCl

EM: espectroscopía de masas

EM-CL: espectroscopía de masas acoplada a cromatografía líquida

ESI: ionización por electropulverización (en EM)

HATU: hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio

HBTU: hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio

HOBt: 1-hidroxi-1H-benzotriazol x H_{2}O

h: hora

HPLC: cromatografía líquida de alta presión, de alta resolución

MeOH: metanol

Pd/C: paladio/carbón

por c.: por ciento

R_{f}: índice de retención (en TLC)

RMN: resonancia magnética nuclear

R_{t}: tiempo de retención (en HPLC)

sat.: saturada

TA: temperatura ambiente

TPTU: tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-1(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronio

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Métodos de HPLC

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36

Métodos de EM-CL

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38

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39

\newpage

SMKL-ZQ-1

Método MHZ-2P-01

Instrumento: Micromas Platform LCZ, HP1100; columna: Symmetry C18, 50 mm x 2,1 mm, 3,5 \mum, eluyente A: agua + 0,05% de ácido fórmico, eluyente B: acetonitrilo + 0,05% de ácido fórmico; gradiente: 0,0 min 90% A \rightarrow 4,0 min 10% A \rightarrow 6,0 min 10% A; horno: 40ºC; flujo: 0,5 ml/min; detección UV: 208-400 nm.

Método MHZ-2Q-01

Instrumento: Micromas Quattro LCZ, HP1100; columna: Symmetry C18, 50 mm x 2,1 mm, 3,5 \mum, eluyente A: agua + 0,05% de ácido fórmico, eluyente B: acetonitrilo + 0,05% de ácido fórmico; gradiente: 0,0 min 90% A \rightarrow 4,0 min 10% A \rightarrow 6,0 min 10% A; horno: 40ºC, flujo: 0,5 ml/min; detección UV: 208-400 nm.

Método SMKL-ZQ-1

Instrumento: Waters Alliance 2790 LC; columna: Symmetry C18, 50 mm x 21 mm, 3,5 \mum; eluyente A: agua + 0,0% de ácido fórmico, eluyente B: acetonitrilo + 0,05% de ácido fórmico; gradiente: 0,0 min 10% B \rightarrow 4,0 min 90% B \rightarrow 6,0 min 90% B \rightarrow 6,1 min 10% B; temperatura: 50ºC; fluji: 0,8 ml/min; detección UV: 210 nm.

Ejemplo 1A Éster (2-oxo-2-fenil-etílico) del ácido (S)-2-benciloxicarbonilamino-3-hidroxi-propiónico

41

A 1,6 l de acetato de etilo se les añadieron 169,0 g (706 mmol) de Z-(L)-serina y 197 ml (1,41 mol) de trietilamina a temperatura ambiente. En el transcurso de 10 min se añadieron 154,7 g (777 mmol) de 2-bromoacetofenona. La mezcla de reacción se agitó durante 3 h a TA. Se diluyó con 2,4 l de acetato de etilo, se agitó una vez con 2 l de ácido sulfúrico 2N, se filtró la materia en suspensión precipitada, se separó la fase orgánica y la fase acuosa se extrajo dos veces con sendos 500 ml de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con solución saturada de hidrogenocarbonato sódico, la fase acuosa se extrajo con 800 ml de acetato de etilo y las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico. Tras la filtración el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se disolvió en caliente en 3,0 l de acetato de etilo y se enfrió en baño de hielo a TA. Los cristales precipitados se separaron por filtración con succión, se lavaron después con un poco de dietiléter y se secaron a alto vacío. Se obtuvieron 124,5 g (49% d.t.) del producto. Las aguas madre se concentraron a la mitad, el precipitado se disolvió en caliente y se enfrió a 0ºC. Tras filtración con succión y secado se aislaron otros 30,6 g (12% d.t.) de producto. Las aguas madre restantes se concentraron a sequedad, el residuo se disolvió en caliente en 500 ml de acetato de etilo y se precipitó de nuevo a 0ºC. Se obtuvieron 17,0 g (7%) del producto así como tras la concentración y el secado de las aguas madre otros 38,8 g (15%) del producto todavía del 96% según el análisis por HPLC.

R_{f} (MeOH/diclorometano 1/20) = 0,54.

HPLC (método A): R_{t} = 4,21 min.

EM (ESI pos.): m/z = 358 (M+H)^{+}, 380 (M+Na)^{+}, 715 (2M+H)^{+}, 737 (2M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 3,64 (dd, 1H), 3,91 (dt, 1H, J_{t} = 11,0 Hz, J_{d} = 3,2 Hz), 4,34 (m, 1H), 4,63 (m, 1H), 5,14 (s, 2H), 5,32 (d, 1H, J = 16,7 Hz), 5,74 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 5,74-5,84 (m, 1H), 7,29-7,41 (m, 5H), 7,46-7,57 (m, 2H), 7,61-7,71 (m, 1H), 7,86-7,96 (m, 2H).

Ejemplo 2A Éster 2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-fenil-etoxicarbonil)-etílico] y 1-terc-butílico del ácido (S)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

42

Se disolvieron 15,06 g de N-Boc-(L)-prolina (69,96 mmol) y 25,00 g (69,96 mmol) del éster de serina del ejemplo 1A bajo argón en cloruro de metileno (250 ml). La solución se enfrió a -20ºC y se mezcló con 13,41 g de EDC (69,96 mmol) y 0,85 g de DMAP (7,00 mmol). La solución de reacción se agitó durante 1 h a -20ºC y luego durante 48 h a temperatura ambiente, se evaporó y el residuo se suspendió en acetato de etilo. La solución se lavó con ácido cítrico ac., solución ac. saturada de hidrogenocarbonato sódico y solución ac. saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó. Se aislaron 32,47 g (84% d.t.) de producto por cromatografía en gel de sílice con tolueno/acetato de etilo (5/1).

EM-CL: R_{t} = 4,66 min;

EM (ESI+, método MHZ2P): m/z = 577 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,85-2,3 (m, 4H), 3,25 (m, 2H), 4,4-4,8 (m, 4H), 5,1 (s, 2H), 5,5-5,8 (m, 2H), 7,3-8,1 (m, 10H), 8,9 (s, 1H).

Ejemplo 3A Cloruro de (S)-2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-fenil-etoxicarbonil)-etoxicarbonil]pirrolidinio

43

Se disolvieron 31,5 g (56,8 mmol) del compuesto del ejemplo 2A bajo argón en 200 ml de solución 4M de cloruro de hidrógeno en dioxano y se agitó durante la noche a TA. La solución de reacción se concentró, se suspendió una vez con acetato de etilo y se concentró nuevamente así como se concentró dos veces con diclorometano. El residuo se disolvió en etanol (100 ml), se añadió lentamente con agitación dietiléter (400 ml), se enfrió y se separó el precipitado por filtración con succión. Se obtuvieron 25,2 (86% d.t.) del producto que se hizo reaccionar posteriormente sin purificación adicional.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 2,84 min;

EM (ESI+): m/z = 454 (M)^{+}.

Ejemplo 4A Éster bencílico del ácido (S)-2-[(S)-2-(terc-butoxicarbonil-metil-amino)-propanoilamino]-propiónico

44

Se dispusieron bajo argón en 10 ml de dimetilformamida anhidra 4,81 g (22,3 mmol) de clorhidrato de éster bencílico de L-alanina, 3,32 g (24,6 mmol) de HOBt y 4,92 g (25,7 mol) de EDC. A 0ºC se añadieron 4,54 g (22,3 mmol) de N-Boc-N-metil-L-alanina así como 14,7 ml (133,9 mmol) de N-metilmorfolina y la mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se mezcló con agua y tolueno y se agitó. La fase acuosa se extrajo dos veces con tolueno, las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico y tras filtración se evaporaron a sequedad. El producto se purificó cromatográficamente por cromatografía de gel de sílice en aprox. 1500 ml de gel de sílice con MeOH/diclorometano 10/1. Se obtuvieron 7,9 g (97% d.t.) del producto.

HPLC (método A): R_{t} = 4,56 min.

EM (ESI pos.): m/z = 365 (M+H)^{+}, 387 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,34 (d, 3H), 1,40 (d, 3H), 1,48 (s, 9H), 2,78 (s, 3H), 4,52-4,73 (m, 2H), 5,15 (d, 1H), 5,19 (d, 1H), 6,57 (s a, 1H), 7,29-7,41 (m, 5H).

Ejemplo 5A Cloruro de [(S)-1-((S)-1-benciloxicarbonil-etilcarbamoil)-etil]-metil-amonio

45

Se disolvieron 7,80 g (21,4 mmol) del compuesto del ejemplo 4A en solución 4N de cloruro de hidrógeno en dioxano (80 ml). Tras pocos minutos comenzó la formación de un precipitado. Se agitó todavía durante 1 h a TA, se separó la materia sólida por filtración con succión y se lavó con dietiléter. Tras secado a vacío se obtuvieron 5,96 g (93% d.t.) del producto.

HPLC (método A): R_{t} = 3,55 min.

EM (ESI pos.): m/z = 265 [(M-HCl)+H]^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,36 (d, 6H), 2,45 (s a, 3H), 3,80 (s a, 1H), 4,40 (quint., 3H), 5,13 (s, 2H), 7,30-7,40 (m, 5H), 8,96 (s a, 1H), 9,13 (d, 1H), 9,58 (s a, 1H).

Ejemplo 6A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{[(S)-1-((S)-1-benciloxicarbonil-etilcarbamoil)-etil]-metil-carbamoil}-pirrolidin-1-carboxílico

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46

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A una solución de 5,96 g (19,8 mmol) del clorhidrato del ejemplo 5A y 4,27 g (19,8 mmol) de N-Boc-(L)-prolina en dimetilformamida anhidra (150 ml) se le añadió bajo argón a 0ºC 7,53 g (19,8 mmol) de HATU así como 3,8 ml (21,8 mmol) de etildiisopropilamina. Tras 30 min de agitación con enfriamiento en baño de hielo se añadieron otros 7,6 ml (43,6 mmol) de etildiisopropilamina y la mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se mezcló con tolueno y ácido cítrico acuoso al 10 por c., se agitó, la fase orgánica se lavó de nuevo con solución acuosa de ácido cítrico, las fases orgánicas reunidas se agitaron sendas dos veces con solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y con agua y se secaron sobre sulfato sódico. Tras eliminar el disolvente a vacío se suspendió en diclorometano y se concentró de nuevo. Se obtuvieron 9,14 g (98% d.t.) del producto.

HPLC (método A): R_{t} = 4,46 min.

EM (ESI pos.): m/z = 462 (M+H)^{+}, 484 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,31-1,48 (m, 15H), 1,73-2,26 (m, 4H), 2,76 (s, 2H), 2,96 (d, 1H), 3,37-3,69 (m, 2H), 4,47-4,66 (m, 2H), 4,76 (c, 0,66H), 5,04 (c, 0,33H), 5,07-5,25 (m, 2H), 6,62 (d a, 0,33H), 7,29-7,37 (m, 5H), 8,45 (d a, 0,66H).*

* Amidisomería.

Ejemplo 7A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{[(S)-1-((S)-1-carboxi-etilcarbamoil)-etil]-metil-carbamoil}-pirrolidin-1-carboxílico

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47

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Se disolvieron 9,10 g (19,7 mmol) del compuesto del ejemplo 6A en metanol (100 ml), se añadió bajo argón 1 g de paladio al 10 por c. sobre carbón activo y entonces se hidrogenó durante 3 h a TA a 300 kPa de presión de hidrógeno. La solución de reacción se filtró con succión a través de tierra de diatomeas, se lavó después con metanol y el disolvente se eliminó a vacío. Se obtuvieron 7,03 g (96% d.t.) del producto como sólido incoloro.

HPLC (método A): R_{t} = 3,52 min.

EM (ESI pos.): m/z = 372 (M+H)^{+}, 394 (M+Na)^{+}, 765 (2M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,31-1,51 (m, 15H), 1,70-2,35 (m, 4H), 2,78 (s, 1,5H), 3,00 (d, 1,5H), 3,35-3,68 (m, 2H), 4,40-4,75 (m, 2H), 4,85 (c, 0,5H), 4,98 (c, 0,25H), 5,24 (c, 0,25H), 7,00 (t a, 0,5H), 6,5-8,2 (a, 1H), 8,49 (d a, 0,5H).*

* Amidisomería.

Ejemplo 8A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{[(S)-1-((S)-2-{(S)-2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-fenil-etoxicarbonil)-etoxicarbonil]-pirrolidin-1-il}-1-metil-2-oxo-etilcarbamoil)-etil]-metil-carbamoil}-pirrolidin-1-carboxílico

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48

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Se dispusieron 90,0 g (242 mmol) del tripéptido del ejemplo 7A y 152,5 g (242 mmol) del clorhidrato del ejemplo 3A juntos en diclorometano (2,0 l) a -5ºC bajo argón y se añadieron sucesivamente 86,4 (291 mmol) de TPTU, 45,8 (339 mmol) de HOBT y 118 ml (678 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó durante la noche calentando lentamente hasta TA. Para el procesamiento se concentró, el residuo se suspendió en acetato de etilo, se agitó dos veces con ácido cítrico acuoso al 10 por c., dos veces con solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico al 10 por c. y una vez con solución acuosa saturada de cloruro sódico. La fase orgánica se secó sobre sulfato magnésico, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó cromatográficamente en gel de sílice con acetato de etilo/etanol 20/1. Se obtuvieron 162 g (83% d.t.) del producto.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 4,26 min; EM (ESI-): m/z = 806 (M)^{-}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,1-1,4 (m, 13H), 1,5-2,3 (m, 10H), 2,5 (m, 1H), 2,7 (s, 2H), 2,85 (s, 2H), 3,2-3,65 (m, 4H), 3,95-5,1 (m, 10H), 5,5-5,6 (m, 2H), 7,25-8,0 m, 10H).

Ejemplo 9A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-[((S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((S)-2-benciloxicarbonilamino-2-carboxi-etoxicarbonil)-pirrolidin-1-il]-1-metil-2-oxo-etilcarbamoil}-etil]-metil-carbamoil]-pirrolidin-1-carboxílico

49

A una solución de 17,0 g (21,0 mmol) del compuesto del ejemplo 8A en ácido acético acuoso al 90 por c. se le añadieron bajo argón 10,3 g (158 mmol) de cinc. La mezcla de reacción se calentó ligeramente y se enfrió a 25ºC. Se agitó durante 3 h a esta temperatura y a continuación la mezcla se filtró con succión a través de tierra de diatomeas y después se lavó con acetato de etilo. El disolvente se eliminó en evaporador rotatorio, el residuo se suspendió en acetato de etilo y se agitó dos veces con ácido clorhídrico 1N. La fase orgánica se concentró de nuevo, se mezcló tres veces con tolueno y se evaporó a vacío a sequedad y finalmente se secó a vacío. Se aislaron 14 g (94% d.t.). El producto se hizo reaccionar sin purificación adicional.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 3,62 min; EM (ESI+): m/z = 689 (M)^{\text{*}}.

Ejemplo 10A Éster bencílico del ácido ((3S, 7S, 13S, 16S, 19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17-tetraaza-triciclo[17.3.0.0^{7,11}]docos-3-il)-carbámico

50

Se disolvieron 109,0 g (158 mmol) del ácido carboxílico del ejemplo 19A y 116,4 g (632 mmol) de pentafluorofenol en 1000 ml de diclorometano anhidro, se enfrió a -20ºC y se introdujeron 39,4 g (205 mmol) de EDC. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. El disolvente se eliminó a vacío y el residuo se mezcló enfriando con hielo con cloruro de hidrógeno en dioxano (600 ml). Se agitó durante 3 h a TA, el disolvente se eliminó a vacío y el residuo se suspendió tres veces con tolueno y se concentró de nuevo a sequedad. El residuo se dividió en tres partes y cada parte se trató como sigue: el producto intermedio se suspendió en diclorometano (900 ml) y se introdujo con un caudal de 0,8 ml/min a TA en una mezcla bifásica fuertemente agitada de 1,5 l de solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico y 5 l de diclorometano y se agitó después durante aprox. 2 h. La fase orgánica se separó, la acuosa se extrajo tres veces con sendos 500 ml de diclorometano, las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a sequedad.

Los residuos reunidos de las tres reacciones se purificaron cromatográficamente en gel de sílice con, en primer lugar, acetato de etilo/ciclohexano 2/1, luego acetato de etilo puro, luego acetato de etilo/etanol 20/1 y finalmente 10/1. Se obtuvieron 49,2 g (53% d.t.) del producto. Por nueva cromatografía de una carga impurificada así como suspensión en acetato de etilo/diclorometano, concentración incompleta y enfriamiento se obtuvieron otros aprox. 5 g (5%) de producto cristalino.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 3,32 min;

EM (ESI+): m/z = 571 (M)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,4 (d, 3H), 1,5 (d, 3H), 1,9-2,4 (m, 9H), 3,5-3,85 (m, 5H), 4,2-4,2 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 4,75-5,25 (m, 5H), 5,64 (m, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H), 8,3 m, 1H).

Ejemplo 11A Cloruro de (3S,7S,13S,16S,19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17-tetraaza-triciclo [17.3.0.0^{7,11}]docos-3-il)-amonio

51

Se dispusieron 4,10 g (7,17 mmol) del compuesto del ejemplo 10A bajo argón en metanol (30 ml), se mezclaron con 8,6 ml (8,6 mmol) de solución acuosa 1N de ácido clorhídrico y se añadieron 500 mg de paladio al 10 por c. sobre carbón activo. Se hidrogenó durante 2 h a presión normal y TA. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas, se lavó después con metanol y se concentró a sequedad. Para la purificación se agitó el residuo con dietiléter y se filtró con succión. Se obtuvieron 3,18 g (94% d.t.) del producto que se hace reaccionar sin purificación adicional.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 0,36 min.

HPLC (método B): R_{t} = 1,95 min.

EM (ESI pos.): m/z = 438 [(M-HCl)+H]^{+}, 875 [2x(M-HCl+H)^{+}.

Ejemplo 12A Éster terc-butílico del ácido [(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,7S,13S,16S, 19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17-tetraaza-triciclo[17.3.0.0^{7,11}]docos-3-ilcarbamoil)-etil]-carbámico

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52

Se disolvieron 1,30 g (2,74 mmol) del cloruro de amonio del ejemplo 11A y 0,91 g (3,02 mmol) de N-Boc-3,5-difluoro-L-fenilalanina bajo argón en dimetilformamida anhidra (6 ml) y se enfrió en baño de hielo. Se añadieron 1,15 g (3,02 mmol) de HATU y 0,525 ml (3,02 mmol) de etildiisopropilamina y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a 0ºC antes de añadir otros 1,05 ml (6,03 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se purificó cromatográficamente en 3 fracciones directamente por medio de una RP-HPLC preparativa con acetonitrilo/agua (gradiente). Se obtuvieron 1,13 g (57% d.t.) del producto.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 4,03 min; EM (ESI+): m/z = 720 (M)^{+}.

HPLC (método A): R_{t} = 4,51 min.

EM (ESI pos.): m/z = 721 (M+H]^{+}, 743 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,40 (d, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,52 (d, 3H), 1,88-2,40 (m, 8H), 2,82 (s, 3H), 2,87 (dd, 1H), 3,06 (dd, 1H), 3,50-3,71 (m, 4H), 3,76 (m, 1H), 4,27 (c, 1H), 4,48-4,56 (m, 2H), 4,77 (c, 1H), 4,84-4,94 (m, 2H), 5,17 (m, 1H), 5,84 (d a, 1H), 6,66 (t a, 1H), 6,73-6,80 (m, 2H), 6,90 (d a, 1H), 8,51 (d a, 1H).

La reacción puede llevarse a cabo alternativamente en diclororometano y el producto se purifica mediante una cromatografía en gel de sílice con diclorometano/metanol, luego con acetato de etilo.

Ejemplo 13A 2,2,2-Trifluoroacetato de (S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,7S,13S,16S,19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17-tetraaza-triciclo[17.3.0.0^{7,11}]docos-3-ilcarbamoil)-etilamonio

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Se disolvieron 2,12 g (2,94 mmol) del carbamato del ejemplo 12A en diclorometano (32 ml) y se enfrió a 0ºC. A continuación se añadió una mezcla de agua y ácido trifluoroacético (1/9) (32 ml), la mezcla se agitó durante 45 min a 0ºC y entonces se evaporó. Se obtuvieron 2,83 g de producto bruto que tras suspensión en tolueno y diclorometano y subsiguiente concentración se hizo reaccionar posteriormente.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 2,33 min;

EM (ESI+): m/z = 620 (M)^{+}.

Ejemplo 14A Ácido 3-(3,5-difluorofenil)-2-((E)-hept-2-enoilamino)-propiónico

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54

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A una solución de 5,0 g (24,9 mmol) de 3,5-difluoro-DL-fenilalanina en diclorometano (150 ml) se le añadieron 6,3 ml (49,7 mmol) de clorotrimetilsilano y la mezcla de reacción se calentó durante 1 h a reflujo. Tras enfriamiento a 0ºC se añadieron lentamente 9,7 ml (55,9 mmol) de etildiisopropilamina y luego gota a gota 3,64 g (24,9 mmol) de cloruro de ácido trans-2-heptenoico. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche y se dejó estar dos días a TA. Para el procesamiento se evaporó a vacío a sequedad, el residuo se suspendió con dietiléter y se extrajo con solución acuosa al 2,5 por c. de hidrogenocarbonato sódico (250 ml). La fase acuosa se extrajo dos veces con éter y las fases orgánicas reunidas se extrajeron aún tres veces con solución de hidrogenocarbonato sódico. Las fases acuosas reunidas se llevaron a pH = 2 con ácido clorhídrico acuoso 1N y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases de acetato de etilo reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se agitó con dietiléter y se filtró. El residuo del filtro se aisló, el filtrado se concentró y se trató nuevamente con dietiléter. Tras doble repetición se obtuvieron en total 6,12 g (79% d.t.) de producto como sólido incoloro.

HPLC (método A): R_{t} = 4,30 min.

EM (ESI pos.): m/z = 312 (M+H]^{+}, 334 (M+Na)^{+}, 623 (2M+H]^{+}, 645 (2M+Na)^{+},

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 0,91 (t, 3H), 1,20-1,53 (m, 4H), 2,20 (c a, 2H), 3,14 (dd, 1H), 3,28 (dd, 1H), 4,92 (c a, 1H), 5,80 (d a, 1H, J_{d} = 15,4 Hz), 5,99 (d a, 1H), 6,63-6,79 (m, 3H), 6,91 (dt, 1H, J_{d} = 15,3 Hz, J_{t} = 6,9 Hz), 7,5-9,0 (a, 1H).

Ejemplo 15A Éster 1-terc-butílico 2-metílico del ácido (2S,4R)-4-(toluil-4-sulfoniloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

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55

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Se dispusieron 20,0 g (81,5 mmol) de trans-N-Boc-L-hidroxiprolina bajo argón en 75 ml de diclorometano, se añadieron 26,4 ml (326 mmol) de piridina y se adicionaron a 0ºC 31,1 g (163 mmol) de cloruro de p-toluenosulfonilo en diclorometano (75 ml). La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche y se dejó estar 2 días a TA. Para el procesamiento se agitó con agua, la fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se purificó cromatográficamente en gel de sílice con acetato de etilo/ciclohexano 1/5. Se obtuvieron 30,1 g (92% d.t.) del producto como sólido incoloro.

R_{f} (acetato de etilo/ciclohexano 1/1) = 0,56

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 4,30 min.

EM (ESI pos.): m/z = 400 (M+H]^{+}, 422 (M+Na)^{+}, 821 (2M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,39+1,42 (2 x s, 9H), 2,05-2,24 (m, 1H), 2,33-2,62 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 3,56-3,65 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 4,37 (c, 1H), 4,97-5,11 (m, 1H), 7,36 (d, 2H), 7,79 (d 2H).

Ejemplo 16A Éster 1-terc-butílico del ácido (2S,4R)-4-(toluil-4-sulfoniloxi)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

56

Se disolvieron 25,0 g (62,6 mmol) de éster metílico del ejemplo 15A en acetonitrilo/agua 3/1 y se mezclaron con 10,5 g (250 mmol) de hidróxido de litio hidratado. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a TA. Para eliminar el acetonitrilo se concentró la solución a vacío. A la solución acuosa se le añadieron 50 ml de ácido clorhídrico acuoso 5N, se ajustó a pH = 3 con ácido clorhídrico acuoso 1N y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y el disolvente se eliminó a vacío. Se obtuvieron 21,0 g (87% d.t.) del producto como sólido incoloro. La caracterización por espectroscopía de RMN-^{1}H indicó una proporción de aprox. 20% del compuesto diastereómero.

HPLC (método A): R_{t} = 4,23 min.

EM (DCI-NH_{3}): m/z = 403 (M+NH_{4}]^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,48 (s, 9H), 2,23-2,31 (m, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,55 (m, 1H), 3,49 (dd, 1H), 3,81 (d a, 1H), 4,47 (t, 1H), 4,98 (m a, 1H), 7,38 (d, 2H), 7,79 (d 2H).

Señales de la impurificación por el diastereómero: \delta = 1,42 (s), 2,60 (m, a), 3,56 (m a), 3,66 (d a), 4,41 (t a), 5,03 (a).

Como alternativa la síntesis puede llevarse a cabo a través del éster bencílico de prolina y una hidrogenólisis con paladio sobre carbón.

Ejemplo 17A Éster 1-terc-butílico del ácido (2S,4R)-4-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

57

Se dispusieron 11,0 g (123 mmol) de cianuro de cobre(I) en un matraz desgasificado bajo a argón en tetrahidrofurano anhidro (110 ml) a -78ºC. Se añadieron gota a gota 153 ml de solución 1,6 M de metil-litio en dietiléter, la solución se calentó a 0ºC y se agitó durante 10 min a esta temperatura. Tras enfriamiento a -78ºC se añadieron lentamente 18,9 g (49,0 mmol) del tosilato del ejemplo 16A en tetrahidrofurano anhidro (110 ml). El tosilato se secó nuevamente primeramente por suspensión en tolueno y evaporación. La mezcla de reacción incolora ligeramente turbia se enfrió a -20ºC una vez realizada la adición y se agitó a 0ºC durante 3 h calentando lentamente. La reacción se finalizó a -20ºC por adición de solución acuosa saturada de cloruro amónico (150 ml) y la mezcla se agitó durante la noche calentando hasta TA. Tras acidificación a pH = 3 con ácido clorhídrico acuoso 5N se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se agitaron con solución acuosa saturada de cloruro amónico, se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se suspendió en diclorometano y se filtró de nuevo. La evaporación del filtrado a vacío proporcionó 11,8 g del producto bruto como aceite viscoso. El compuesto se utilizó sin purificación adicional en la siguiente reacción.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 3,32 min.

EM (ESI neg.): m/z = 228 (M-H]^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,06 (d, 3H), 1,43+1,49* (2 x s, 9H), 1,55-2,04 (m a, 1H), 2,04-2,57 (m a, 2H), 2,80-3,06 (m a, 1H), 3,45-3,82 (m a, 1H), 4,16-4,50 (m a, 1H).

* Relación de intensidades aprox. 1:2.

Ejemplo 18A Éster 2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-fenil-etoxicarbonil)-etílico] 1-terc-butílico del ácido (2S,4R)-4-metil-pirrolidin-1,2-dicarboxílico

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Se dispusieron 11,8 g (\leq 49,0 mmol) del producto bruto del ejemplo 17A y 17,5 g (49,0 mmol) de éster fenacílico del ejemplo 1A en diclorometano (140 ml) a 0ºC y se añadieron 0,6 g (4,9 mmol) de DMAP así como 9,4 g (49,0 mmol) de EDC. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. Para el procesamiento se agitó con agua y diclorometano, la fase orgánica se lavó dos veces con ácido clorhídrico acuoso 0,1N y la fase orgánica se agitó con solución saturada de cloruro sódico. Las fases acuosas se reextrajeron una vez cada una con diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo se purificó cromatográficamente en gel de sílice con acetato de etilo/ciclohexano 1/4 a 1/2. Se obtuvieron 19,3 g (69% d.t.) del producto.

R_{f} (acetato de etilo/ciclohexano 1/1) = 0,58.

HPLC (método A): R_{t} = 5,09 min.

EM (ESI pos.): m/z = 569 (M+H]^{+}, 591 (M+Na)^{+}, 469 [(M-Boc)+H]^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 0,95-1,07 (m, 3H), 1,33-1,48 (m, 9H), 1,53-1,67 + 1,73-1,89 (2 x m, 0,25H + 0,75H), 2,08-2,26 (m, 1H), 2,26-2,48 (m, 1H), 2,83-3,02 (m, 1H), 3,58-3,78 (m, 1H), 4,16-4,26 + 4,27-4,39 (2 x m, 0,2H + 0,8H), 4,48-4,71 (m, 2H), 4,79-4,90 (m, 1H), 5,07-5,20 (m, 2H), 5,37 (dd, 1H, J_{1} = 16,2 Hz, J_{2} = 3,6 Hz), 5,49 (dd, 1H, J_{1} = 16,4 Hz, J_{2} = 2,1 Hz), 5,32-5,54 (a, 0,25H), 5,57 (c a, 0,25H), 5,97 (d a, 0,38H), 6,45 (d a, 0,12H), 7,29-7,40 (m, 5H), 7,45-7,55 (m, 2H), 7,58-7,67 (m, 1H), 7,84-7,93 (m, 2H).

Ejemplo 19A Cloruro de (2S,4R)-2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-fenil-etoxicarbonil)-etoxicarbonil]-4-metil-pirrolidinio

59

A 16 g (28,1 mmol) del compuesto del ejemplo 18A se les añadieron 92 ml (366 mmol) de solución de cloruro de hidrógeno 4N en dioxano. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a TA y el disolvente se eliminó a vacío. El residuo se suspendió dos veces con diclorometano y se concentró a sequedad. Se obtuvieron 15,1 g de producto bruto como espuma dura amarilla clara que todavía contenía aprox. 4% en peso. El producto bruto se hizo reaccionar posteriormente sin purificación adicional.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 2,91 min.

EM (ESI pos.): m/z = 469 [(M-HCl)+H]^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,03-1,08 (m, 3H), 1,76 (c a, 0,25H), 1,93 (m, 0,75H), 2,38-2,52 (m, 2H), 2,95 (m a, 1H), 3,65 (m a, 1H), 4,42-4,61 (m, 2H), 4,78-4,95 (m, 2H), 5,13 (t*, 2H), 5,32 (d, 0,75H), 5,40 (d, 0,25H), 5,56 (d, 1H), 7,01 (d a, 0,75H), 7,12 (d a, 0,25H), 7,27-7,41 (m, 5H), 7,45-7,53 (m, 2H), 7,57-7,65 (m, 1H), 7,87 (d a, 1,5H), 7,91 (d a, 0,5H), 8,81 (s a, 0,66H), 9,08 (s a, 0,33H), 11,05 (s a, 0,33H), 11,20 (s a, 0,66H).

* Relación de intensidades del sistema AB: 1:12:1.

Ejemplo 20A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-((S)-1-benciloxicarbonil-etilcarbamoil)-piperidin-1-carboxílico

60

Se dispusieron 9,85 g (45,57 mmol) de éster bencíñico de alanina, 6,79 g de HOBT (50,23 mmol) y 10,07 g (52,52 mmol) de EDC en dimetilformamida (30 ml) a 0ºC, se mezclaron con 10,47 g (45,67 mmol) de ácido N-Boc-pipecolínico y 27,71 g (274 mmol) de N-metil-morfolina y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A continuación la mezcla se mezcló con agua y tolueno, las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con solución acuosa sat. de cloruro sódico. Se aislaron 14,9 g (83% d.t.) de producto por cromatografía en gel de sílice con ciclohexano/acetato de etilo 10/1.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 4,40 min;

EM (ESI+): m/z = 390 (M)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,48-1,65 (m, 17H), 2,2-2,3 (m, 1H), 2,7-2,8 (m, 1H), 3,9-4,1 (m, 1H), 4,52-4,48 (m, 2H), 5,15 (m, 2H), 6,6 (m, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H).

Ejemplo 21A Cloruro de (S)-2-((S)-1-benciloxicarbonil-etilcarbamoil)-piperidinio

61

Se disolvieron 2,30 g (5,89 mmol) del carbamato del ejemplo 20A en ácido clorhídrico 4N en dioxano (23 ml) y se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La solución se evaporó a continuación, se suspendió nuevamente en tolueno y se concentró de nuevo. El residuo se agitó con dietiléter y se filtró con succión. Se obtuvieron 1,70 g (88% d.t.) de producto que se utilizó sin purificación adicional en la reacción siguiente.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 1,76 min;

EM (ESI+): m/z = 290 (M)^{+}.

Ejemplo 22A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{1-[(S)-2-((S)-1-benciloxicarbonil-etilcarbamoil)-piperidin-1-il]-metanoil}-pirro- lidin-1-carboxílico

62

Se disolvieron 12,27 g (37,54 mmol) del clorhidrato del ejemplo 21A y 10,50 g (48,81 mmol) de N-Boc-L-prolina en cloruro de metileno (30 ml) y se enfrió a 0ºC. A continuación se mezclaron con 18,56 g (48,81 mmol) de HATU y 5,82 g (45,05 mmol) de etildiisopropilamina y se agitó durante 30 min a 0ºC. Tras nueva adición de 11,64 g (90,10 mmol) de etildiisopropilamina la mezcla se agitó durante 72 h a temperatura ambiente y entonces se evaporó. El residuo se suspendió en acetato de etilo y la solución se lavó con ácido cítrico ac. y solución ac. de hidrogenocarbonato sódico y solución ac. sat. de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice con ciclohexano/acetato de etilo 5/1: Se obtuvieron 18,25 g (99% d.t.) del producto.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 4,30 min;

EM (ESI+): m/z = 487 (M+Na)^{+}.

Ejemplo 23A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{1-[(S)-2-((S)-1-carboxi-etilcarbamoil)-piperidin-1-il]-metanoil}-pirrolidin-1-carboxílico

63

Se mezcló una solución de 10,00 g (20,51 mmol) del éster del ejemplo 22A en metanol (100 ml) con Pd/C (1,00 g) (10 por c.) y se hidrogenó a TA a una presión de hidrógeno de 100 kPa. A continuación se filtró la solución a través de gel de sílice y se evaporó. Se obtuvieron 7,93 g (97% d.t.) del producto que se hicieron reaccionar sin purificación adicional.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 3,16 min;

EM (ESI+): m/z = 397 (M)^{+}.

RMN-^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta = 1,45-1,58 (m, 15H), 1,6-1,75 (m, 2H), 1,78-2,0 (m, 2H), 2,05-2,2 (m, 2H), 2,4-2,6 (m, 2H), 3,05-3,2 (m, 1H), 3,38-3,6 (m, 2H).

Ejemplo 24A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-{1-[(S)-2-((S)-2-{(2S,4R)-2-[(S)-2-benciloxicarbonilamino-2-(2-oxo-2-feniletoxicarbonil)-etoxicarbonil]-4-metil-pirrolidin-1-il}-1-metil-2-oxo-etilcarbamoil)-piperidin-1-il]-metanoil}-pirrolidin-1-carboxílico

64

Se dispusieron 3,12 g (6,18 mmol) del clorhidrato del ejemplo 19A y 2,46 g (6,18 mmol) del ácido tripeptídico del ejemplo 23A en diclorometano (40 ml) a -0ºC bajo argón y se añadieron sucesivamente 1,17 g (8,65 mmol) de HOBT, 2,20 g (7,41 mmol) de TPTU y 3,0 ml (17,4 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó durante la noche calentando lentamente hasta TA. Para el procesamiento se concentró, el residuo se suspendió en acetato de etilo y se agitó con solución acuosa de hidrogenocarbonato sódico. La fase orgánica se lavó con ácido clorhídrico 0,1N, agua y solución acuosa saturada de cloruro sódico, la fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y el disolvente se eliminó a vacío. Se obtuvieron 5,8 g (71% d.t.) del producto como espuma dura amarillo claro que se utilizó sin purificación adicional en la reacción siguiente.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 4,59 min.

HPLC (método A): R_{t} = 4,81 min.

EM (ESI pos.): m/z = 848 (M+H)^{+}, 870 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,00-1,13 (m, 3H), 1,25-1,34 (m, 3H), 1,34-1,48 (m, 11H), 1,58-1,70 (m, 3H), 1,75-2,57 (m, 8H), 2,95-3,19 (m, 2H), 3,29-3,82 (m, 1H), 4,30-4,75 (m, 5H), 4,77-4,84 (m, 1H), 5,09-5,21 (m, 3H), 5,26-5,55 (m 2,33H), 5,74-5,81 (m, 0,66H), 6,64 (dd, 0,66H), 7,29-7,41 (m, 5H), 7,45-7,55 (m, 2H), 7,59-7,66 (m, 1H), 7,85-7,94 (m, 2H), 8,41-8,53 (m, 0,33H).

Ejemplo 25A Éster terc-butílico del ácido (S)-2-[1-((S)-2-{(S)-2-[(2S,4R)-2-((S)-2-benciloxicarbonilamino-2-carboxi-etoxicarbonil)-4-metil-pirrolidin-1-il]-1-metil-2-oxo-etilcarbamoil}-piperidin-1-il)-metanoil]-pirrolidin-1-carboxílico

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Se disolvieron 5,17 g (6,1 mmol) del éster fenacílico del ejemplo 24A en ácido acético acuoso al 90 por c. (60 ml) y se mezclaron con 2,99 g (45,8 mmol) de polvo de cinc. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a TA. La solución de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas y se lavó después con acetato de etilo. La fase orgánica se concentró a vacío (no hasta sequedad), el residuo se agitó con acetato de etilo y ácido clorhídrico 1N y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo, las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a sequedad. El residuo se suspendió en tolueno y se evaporó dos veces. El residuo se suspendió en dietiléter, se agitó con solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y la fase acuosa se lavó nuevamente con dietiléter. La fase acuosa se ajustó a continuación con ácido clorhídrico 5N a pH 2,7 y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos orgánico reunidos se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se eliminó el disolvente a vacío. Se obtuvieron 4,01 g (91% d.t.) del producto como espuma dura.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 4,02 min;

EM (ESI pos.): m/z = 730 (M+H)^{+}, 752 (M+Na)^{+}.

EM (ESI neg.): m/z = 728 (M-H)^{-},

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,02-1,11 (m, 3H), 1,23-1,34 (m, 3H), 1,35-1,44 (m, 6H), 1,46 (d a, 3H), 1,51-1,76 (m a, 4H), 1,77-2,41 (m a, 7H), 2,41-2,55 (m, 1H), 3,00 (dd, 0,66H), 3,07-3,23 (m, 1H), 3,32-3,90 (m, 4H), 4,14-4,21 (m a, 0,5H), 4,31-4,38 (m a, 0,66H), 4,39-4,86 (m, 5H), 5,08-5,19 (m, 3H), 5,20-5,28 (m 0,5H), 5,82-5,93 (m, 1H), 7,00 (dd, 0,4H), 7,29-7,40 (m, 5H), 8,01-8,06 (m, 0,2H).

Ejemplo 26A Éster bencílico del ácido ((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7},0^{13,17}]hexacos-9-il)-carbámico

66

Se disolvieron 3,95 g (5,41 mmol) del ácido del ejemplo 25A y 3,98 g (21,65 mmol) de pentafluorofenol en diclorometano (13 ml) y se enfrió bajo argón a -20ºC. Se añadieron 1,14 g (5,95 mmol) de EDC y la mezcla de reacción se agitó durante la noche calentando lentamente hasta TA. La solución de reacción se concentró a sequedad y el residuo se mezcló a 0ºC con solución 4N de cloruro de hidrógeno en dioxano (80 ml). Se agitó durante 3 h y a continuación se eliminó el disolvente a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (aprox. 900 ml) y se añadió a TA gota a gota lentamente a una mezcla bifásica fuertemente agitada de solución acuosa 1N de hidrogenocarbonato sódico (700 ml) y diclorometano (1200 ml). La mezcla de reacción se agitó durante la noche. Las fases se separaron, la fase acuosa se extrajo tres veces con diclorometano y las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a sequedad. El residuo (2,7 g de espuma dura amarilla) se purificó cromatográficamente en 3 partes por RP-HPLC preparativa con acetonitrilo/agua (gradiente). Se obtuvieron 1,98 g (60% d.t.) del producto.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 3,74 min.

EM (ESI pos.): m/z = 612 (M+H)^{+}.

EM (ESI neg.): m/z = 610 (M-H)^{-},

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,08 (d, 3H), 1,24-1,51 (m, 3H), 1,42 (d, 3H), 1,58-1,65 (d a, 1H), 1,71-1,78 (m a, 1H), 1,86 (m, 1H), 1,91-2,01 (m, 2H), 2,06-2,20 (m, 1H), 2,10 (dd, 1H), 2,30-2,42 (m, 1H), 2,45-2,61 (m, 2H), 2,73 (d, a, 1H), 3,22 (dd, 1H), 3,55 (dt, 1H, J_{d} = 11,5 Hz, J_{t} = 7,1 Hz), 3,62 (dd, 1H, J_{1} = 9,7 Hz, J_{2} = 11,7 Hz), 3,71 (dd, 1H, J_{1} = 8,8 Hz, J_{2} = 11,8 Hz), 3,78 (m, 1H), 4,21 (dt, 1H, J_{d} = 1,2 Hz, J_{t} = 9,7 Hz), 4,47-4,55 (m a, 2H), 4,69 (s a, 1H), 4,80 (dd, 1H, J_{1} = 11,6 Hz, J_{2} = 1,2 Hz), 5,02 (m, 1H), 5,08 (c*, 2H), 5,19 (dd, 1H), 5,60 (d a, 1H), 7,28-7,40 (m, 5H), 8,32 (d a, 1H).

* Relación de intensidades del sistema AB aprox. 1:12:12:1.

Ejemplo 27A Cloruro de (3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo [20.4.0.0^{3,7},0^{13,17}]hexacos-9-il-amonio

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Se dispusieron 1,45 g (2,37 mmol) del ciclo protegido con carbamato de bencilo del ejemplo 26A bajo argón en metanol (60 ml), se añadió ácido clorhídrico 1N (2,8 ml) y se mezcló con 320 mg de paladio al 10% sobre carbón activo. Se hidrogenó durante 2 h a TA a presión normal. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas, se lavó después con metanol y el filtrado se concentró. Se obtuvieron 1,2 g (98% d.t.) del producto que se utilizó sin purificación adicional en la reacción siguiente.

EM-CL (método A): R_{t} = 3,44 min.

EM (ESI pos.): m/z = 478 [(M-HCl)+H]^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,07 (d, 3H), 1,20-1,80 (m, 6H), 1,42 (d, 3H), 1,88 (m, 1H), 1,80-2,12 (m, 4H), 2,13-2,29 (m a, 1H), 2,40 (m, 1H), 2,45-2,67 (m a, 2H), 2,75 (m a, 1H), 3,08-3,28 (m a, 1H), 3,55-3,67 (m a, 1H), 3,67-4,04 (m a, 4H), 4,49 (d a, 1H), 4,55 (d, 1H), 4,61 (d a, 2H), 4,72-5,20 (m a, 2H).

Ejemplo 28A Éster terc-butílico del ácido [(S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7},0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-carbámico

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A una solución de 350 mg (0,68 mmol) del clorhidrato del ejemplo 27A y 267 mg (0,89 mmol) de N-Boc-L-3,5-difluorofenilalanina en dimetilformamida anhidra (2 ml) bajo argón a 0ºC se le añadieron 337 mg (0,89 mmol) de HATU y 0,138 ml (0,78 mmol) de etildiisopropilamina. Tras 30 min de agitación se añadieron otros 0,277 ml (1,56 mmol) de etildiisopropilamina y la mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se aplicó directamente a una RP-HPLC preparativa con acetonitrilo/agua como eluyentes. Tras la purificación cromatográfica se obtuvieron 505 mg (97% d.t.) del producto.

HPLC (método A): R_{t} = 4,62 min.

EM (ESI pos.): m/z = 761 (M+H)^{+}, 783 (M+Na)^{+},

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,09 (d, 3H), 1,36-1,49 (m, 14H), 1,65 (d a, 1H), 1,72-1,80 (m a, 1H), 1,83-2,01 (m, 3H), 2,08-2,19 (m, 2H), 2,30-2,51 (m, 2H), 2,64 (dt, 1H, J_{d} = 2,4 Hz, J_{t} = 13,4 Hz), 2,72 (d, a, 1H), 2,85 (dd, 1H), 3,07 (dd, 1H), 3,16 (dd, 1H), 3,50-3,65 (m, 2H), 3,72-3,87 (m, 2H), 4,25 (c a, 1H), 4,51 (dt, 1H, J_{d} = 1,3 Hz, J_{t} = 9,9 Hz), 4,56 (d, 2H), 4,61-4,70 (m a, 2H), 4,83 (d a, 1H), 4,99 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 5,84 (d a, 1H), 6,62-6,71 (m, 2H), 6,72-6,79 (m, 2H), 6,84 (d a, 1H), 8,58 (d a, 1H).

Ejemplo 29A 2,2,2-Trifluoroacetato de (S)-2-(3,5-difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7},0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etilamonio

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Se dispusieron 485 mg (0,64 mmol) del compuesto del ejemplo 28A en diclorometano (7 ml) a 0ºC. Se añadieron 7 ml de una solución de 9 partes en volumen de ácido trifluoroacético y 1 parte de agua y la mezcla de reacción se agitó durante 45 min. El disolvente se eliminó a vacío y el residuo se suspendió respectivamente en diclorometano y a continuación en tolueno y se concentró a sequedad. Se obtuvieron 588 mg de producto bruto que se utilizó sin purificación adicional en la etapa siguiente.

Opcionalmente la reacción también puede llevarse a cabo en diclorometano.

EM-CL (método MHZ2P): R_{t} = 2,70 min.

EM (ESI pos.): m/z = 661 [(M-TFA)+H]^{+}.

EM (ESI neg.): m/z = 659 [(M-TFA)-H]^{-}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,02 (d, 3H), 1,26 (d, 3H), 1,31-1,55 (m, 4H), 1,63-1,89 (m, 4H), 1,91-2,03 (m, 2H), 2,04-2,19 (m, 2H), 2,32-2,51 (m, 2H), 2,60 (t a, 1H,), 2,67-2,75 (m, a, 1H), 2,97 (dd, 1H), 3,10-3,25 (m, 2H), 3,47-3,57 (m, 1H), 3,60-3,87 (m, 4H), 4,30 (t a, 1H), 4,44 (t a, 1H), 4,53 (d, 1H), 4,62-4,70 (m a, 2H), 4,77 (d, 1H), 4,96 (m, 1H), 5,11 (m, 1H), 6,72 (m, 1H), 6,77-6,85 (m, 2H), 7,86 (s a, 1H), 8,23 (d a, 1H).

Ejemplo 30A Ácido 3-ciclohexil-2-propenoico

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Se disolvieron 3,34 g (3,21 mmol) de ácido malónico en piridina (10 ml), tras la atenuación de la reacción débilmente exotérmica se añadieron 3,0 g (26,7 mmol) de ciclohexanocarbaldehído y 0,23 g (2,7 mmol) de piperidina y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 h. La solución de reacción enfriada se añadió a una mezcla de hielo y ácido clorhídrico concentrado, la fase acuosa se extrajo tres veces con dietiléter, las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y el disolvente se eliminó a vacío. Se obtuvieron 4,42 g de producto que se hizo reaccionar posteriormente sin purificación.

HPLC (método A): R_{t} = 4,21 min.

EM (ESI pos.): m/z = 155 (M+H)^{+}, 177 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,02-1,45 (m, 5H), 1,59-1,87 (m, 5H), 2,06-2,28 (m 1H), 5,77 (dd, 1H, J_{1} = 15,8 Hz, J_{2} = 1,1 Hz), 7,03 (dd, 1H, J_{1} = 15,8 Hz, J_{2} = 6,8 Hz), 11,7 (s, a, 1H).

Ejemplo 31A Cloruro del ácido 3-ciclohexil-2-propenoico

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Se suspendieron 4,22 g (27,3 mmol) de ácido 3-ciclohexil-2-propenoico en diclorometano (30 ml), se añadieron 5 gotas de DMF y lentamente gota a gota a TA 1,9 ml (164 ml) de cloruro de tionilo. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 h, se enfrió y se concentró a sequedad en evaporador rotatorio. El residuo oleoso se suspendió dos veces en tolueno, se concentró a sequedad y se secó a vacío. Se obtuvieron 4,72 g de producto que se hizo reaccionar directamente más tarde.

Ejemplo 32A N-[(2E)-3-Ciclohexil-2-propenoil]-3,5-difluorofenilalanina

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A una solución de 5,0 g (24,9 mmol) de 3,5-difluoro-DL-fenilalanina en diclorometano (150 ml) se le añadieron 6,3 ml (49,7 mmol) de clorotrimetilsilano y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 h. Tras enfriamiento a 0ºC se añadieron lentamente 9,7 ml (55,9 mmol) de etildiisopropilamina y entonces gota a gota 4,29 g (24,9 mmol) de cloruro de ácido trans-3-ciclohexil-2-propenoico. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche y se dejó estar dos días a TA. Para el procesamiento se evaporó a vacío a sequedad, el residuo se suspendió con dietiléter y se extrajo con solución ac. al 2,5 por c. de hidrogenocarbonato sódico (250 ml). La fase acuosa se extrajo dos veces con dietiléter. Las fases orgánicas reunidas se extrajeron aún tres veces con solución de hidrogenocarbonato sódico. Las fases acuosas reunidas se llevaron a pH = 2 con ácido clorhídrico acuoso 1N y se extrajeron tres veces con acetato de etilo. Las fases de acetato de etilo reunidas se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y el disolvente se concentró a vacío. El residuo (4,63 g) se agitó con dietiléter y se filtró. Se obtuvieron 3,64 g (43% d.t.) de sólido incoloro. El residuo de las aguas madre concentradas y el residuo de la fase de dietiléter concentrada de la extracción alcalina (v. a.) se suspendieron juntos en acetato de etilo y se extrajeron con ácido clorhídrico 1N. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró. El residuo se agitó con dietiléter y se filtró con succión. Se aislaron otros 2,18 g (26%) de producto.

Ejemplos de preparación Ejemplo 1 [(S)-2-(3,5-Difluorofenil)-1-((3S,7S,13S,16S,19S)-13,16,17-trimetil-2,6,12,15,18-pentaoxo-5-oxa-1,11,14,17- tetraaza-triciclo[17.3.0.0.^{7,11}]docos-3-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido (E)-hept-2-enoico

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Se dispusieron 2,89 g (2,75 mmol) del compuesto del ejemplo 13A y 458,8 mg (3,58 mmol) de ácido trans-2-heptenoico en diclorometano (20 ml), se enfrió a 0ºC, entonces se mezcló con 2,09 g (5,51 mmol) de HATU y 462,7 mg (3,58 mmol) de etildiisopropilamina. La solución se agitó durante 30 min a 0ºC, entonces se añadieron otros 925,3 mg (7,16 mmol) de etildiisopropilamina y se agitó durante 18 h a temperatura ambiente. La solución de reacción se evaporó, el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con ácido cítrico ac., solución ac. de hidrogenocarbonato sódico y solución ac. sat. de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró a sequedad. El residuo se cromatografió en gel de sílice con acetato de etilo/ciclohexano 1/2. Se obtuvieron 1,51 g (56% d.t.) del producto.

EM-CL (método MHZ2Q): R_{t} = 4,32 min;

EM (ESI+): m/z = 731 (MH)^{+}.

HPLC (método A): R_{t} = 4,54 min.

EM (ESI pos.): m/z = 731 (M+H)^{+}, 753 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 0,90 (t, 3H), 1,28-1,39 (m, 5H), 1,40-1,48 (m, 2H), 1,53 (d, 3H), 1,85-2,06 (m, 5H), 2,09-2,26 (m, 4H), 2,30-2,41 (m, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,96 (d, 2H), 3,32 (m, 1H), 3,50-3,67 (m, 3H), 3,77 (m, 1H), 4,45-4,54 (m, 2H), 4,62 (c, 1H), 4,77 (c, 1H), 4,84 (dd, 1H, J_{1} = 11,7 Hz, J_{2} = 1,7 Hz), 4,89 (dc, 1H), 5,15 (dd, 1H), 6,18 (dt, 1H, J_{d} = 15,3 Hz, J_{t} = 1,5 Hz), 6,63 (d a, 1H), 6,67 (tt, 1H, J_{1} = 9,1 Hz, J_{2} = 2,3 Hz), 6,75 (m, 2H), 6,88-7,00 (m, 2H), 8,46 (d a, 1H).

Como alternativa puede sintetizarse en primer lugar la cadena lateral de acil-fenilalanina análogamente al ejemplo 14A (v.ab.). El clorhidrato del ejemplo 11A se hace reaccionar entonces con este ácido para dar la amida. A este respecto el compuesto diana ejemplo 1 debe separarse todavía del epímero de (R)-fenilalanina.

Ejemplo 2 [(S)-2-(3,5-Difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido (E)-hept-2-enoico

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Se dispusieron 101,5 mg (0,13 mmol) del compuesto del ejemplo 29A y 23,0 mg (0,17 mmol) de ácido trans-2-heptenoico bajo argón en dimetilformamida anhidra (2 ml) a 0ºC y entonces se añadieron 65,0 mg (0,17 mmol) de HATU así como 0,025 ml (0,14 mmol) de etildiisopropilamina. Después de 30 min se añadieron a la mezcla de reacción otros 0,05 ml (0,29 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se sometió directamente a una RP-HPLC con acetonitrilo/agua como eluyente. De este modo se obtuvieron 63 mg (62% d.t.) de un sólido incoloro.

HPLC (método A): R_{t} = 4,90 min.

EM (ESI pos.): m/z = 771 (M+H)^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 0,98 (t, 3H), 1,02 (d, 3H), 1,29-1,53 (m, 10H), 1,66 (d a, 1H), 1,73-1,87 (m, 2H), 1,91-2,02 (m, 2H), 2,05-2,18 (m, 2H), 2,22 (c a, 2H), 2,31-2,48 (m, 2H), 2,63 (t a, 1H), 2,71 (d a, 1H), 2,90-3,00 (m, 2H), 3,10 (dd, 1H), 3,48-3,59 (m, 3H), 3,76 (m, 1H), 4,46-4,54 (m, 2H), 4,63 (dt, 1H), 4,65-4,73 (m, 2H), 4,80 (dd, 1H, J_{1} = 11,8 Hz, J_{2} = 1,5 Hz), 4,98 (dc, 1H), 5,11 (dd, 1H), 6,19 (dt, 1H, J_{d} = 15,4 Hz, J_{t} = 1,5 Hz), 6,60 (d a, 1H), 6,66 (tt, 1H, J_{1} = 9,0 Hz, J_{2} = 2,2 Hz), 6,70-6,76 (m, 2H), 6,90-7,00 (m, 2H), 8,50 (d a, 1H).

Ejemplo 3 [(S)-2-(3,5-Difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido 3-ciclohexilpropanoico

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Se dispusieron 100 mg (0,13 mmol) del compuesto del ejemplo 29A y 22,0 mg (0,14 mmol) de ácido 3-ciclohexilpropiónico bajo argón en dimetilformamida anhidra (1 ml) a 0ºC y entonces se añadieron 54,0 mg (0,14 mmol) de HATU así como 0,025 ml (0,14 mmol) de etildiisopropilamina. Después de 30 min se añadieron a la mezcla de reacción otros 0,05 ml (0,29 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se sometió directamente a una RP-HPLC con acetonitrilo/agua como eluyente. De este modo se obtuvieron 50 mg (49% d.t.) de un sólido incoloro.

HPLC (método A): R_{t} = 5,14 min.

EM (ESI pos.): m/z = 779 (M+H)^{+}, 821 (M+Na)^{+}.

RMN-^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta = 0,84-0,98 (m, 2H), 1,05 (d, 3H), 1,10-1,30 (m, 4H), 1,37 (d, 3H), 1,35-1,80 (m, 12H), 1,80-1,89 (m, 1H), 1,92-2,03 (m, 2H), 2,04-2,20 (m, 2H), 2,31-2,52 (m, 4H), 2,63 (t a, 1H), 2,72 (d a, 1H), 2,89 (dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 3,15 (dd, 1H), 3,48-3,59 (m, 3H), 3,77 (m, 1H), 4,44-4,55 (m, 3H), 4,64-4,73 (d a, 2H), 4,80 (d a, 1H), 4,97 (m, 1H), 5,11 (dd, 1H, J_{1} = 8,7 Hz, J_{2} = 2,8 Hz), 6,43 (d a, 1H), 6,67 (tt, 1H, J_{1} = 9,0 Hz, J_{2} = 2,2 Hz), 6,71-6,76 (m, 2H), 6,84 (d a, 1H), 8,47 (d a, 1H).

Ejemplo 4 [(S)-2-(3,5-Difluorofenil)-1-((3S,9S,13S,15R,19S,22S)-15,19-dimetil-2,8,12,18,21-pentaoxo-11-oxa-1,7,17,20-tetraaza-tetraciclo[20.4.0.0^{3,7}.0^{13,17}]hexacos-9-ilcarbamoil)-etil]-amida del ácido 3-ciclohexil-2-propenoico

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76

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Se dispusieron 152 mg (0,30 mmol) del cloruro de amonio del ejemplo 27A y 110 mg (0,33 mmol) del ácido del ejemplo 32A bajo argón en dimetilformamida anhidra (1 ml) a 0ºC y entonces se añadieron 124 mg (0,33 mmol) de HATU así como 0,057 ml (0,11 mmol) de etildiisopropilamina. Después de 30 min se añadieron a la mezcla de reacción otros 0,113 ml (0,22 mmol) de etildiisopropilamina. La mezcla de reacción se agitó calentando lentamente hasta TA durante la noche. La solución de reacción se sometió directamente a una RP-HPLC con acetonitrilo/agua como eluyente. De este modo se aislaron 104 mg (4% d.t.) del producto y 71 mg (30% d.t.) de epímero.

HPLC (método A): R_{t} = 5,31 min.

EM (ESI pos.): m/z = 797 (M+H)^{+}.

RMN-^{1}H (200 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,02 (d, 3H), 1,08-1,30 (m, 5H), 1,37 (d, 3H), 1,30-1,57 (m, 4H), 1,60-1,88 (m, 7H), 1,88-2,28 (m, 5H), 2,28-2,52 (m, 2H), 2,52-2,82 (m, 2H), 2,84-3,05 (m, 2H), 3,11 (dd, 1H), 3,44-3,66 (m, 3H), 3,68-3,85 (m, 1H), 4,42-4,58 (m, 2H), 4,61-4,86 (m, 4H), 4,98 (m, 1H), 5,12 (d a, 1H), 6,16 (d a, 1H, J = 15,4 Hz), 6,58-6,79 (m, 3H), 6,58-7,02 (m, 3H), 8,52 (d, 1H).

Epímero:

: HPLC (método A): R_{t} = 5,31 min.

: EM (ESI pos.): m/z = 797 (M+H)^{+}, 819 (M+Na)^{+}.

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* Estos compuestos están enumerados solo para comparación.

Claims

1. Compuestos de fórmula general (I)

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en la que

R^{1}: significa igual a halógeno,

R^{5}: significa igual a hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4}, flúor o cloro

R^{6}: significa igual a hidrógeno, halógeno o alquilo,

R^{7}: significa igual a alquilo o (cicloalquil)alquilo,

R^{8b}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

R^{10a}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{11}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

o

R^{13}: significa igual a hidrógeno o alquilo,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble,

así como sus sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables.

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2. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1, en la que

R^{1}: significa igual a halógeno y

R^{5}: significa igual a hidrógeno, metilo o flúor,

R^{6}: significa igual a hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{4},

R^{7}: significa igual a alquilo,

pudiendo estar R^{8a} dado el caso substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por hidroxi, alcoxi, un resto -OR^{8a-1}, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alcoxicarbonilamino,

siendo R^{8a-1} igual a un resto de aminoácido unido a carbonilo,

o R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico que, dado el caso, puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi,

R^{8b}: significa igual a hidrógeno,

R^{9a}: significa igual a hidrógeno, metilo o hidroximetilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno,

R^{10a}: significa igual a hidrógeno,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno,

R^{11}: significa igual a hidrógeno,

o

R^{13}: significa igual a hidrógeno,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble,

así como sus sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables.

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3. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1, en la que

R^{1}: significa igual a flúor,

R^{2}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{3}: significa igual a hidrógeno,

R^{4}: significa igual a hidrógeno,

R^{5}: significa igual a hidrógeno o flúor,

R^{6}: significa igual a hidrógeno,

R^{7}: significa igual a metilo,

R^{8a}: significa igual a alquilo C_{1}-C_{4},

pudiendo estar R^{8a} dado el caso substituido con 1 substituyente seleccionado del grupo constituido por hidroxi y un resto -OR^{8a-1},

en el que R^{8a-1} es igual a un resto aminometilcarbonilo,

o

R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico nitrogenado de 5 a 6 miembros que puede contener hasta 2 átomos de nitrógeno y que dado el caso puede estar substituido con 1 substituyente seleccionado del grupo constituido por alquilo, amino, alquilamino, dialquilamino, hidroxi,

R^{8b}: significa igual a hidrógeno,

R^{9a}: significa igual a hidrógeno, alquilo o hidroximetilo,

R^{9b}: significa igual a hidrógeno,

R^{10a}: significa igual a hidrógeno,

R^{10b}: significa igual a hidrógeno,

R^{11}: significa igual a hidrógeno,

pudiendo estar R^{12} dado el caso monosubstituido con hidroxi,

o

R^{13}: significa igual a hidrógeno,

\underbar{.....}: \vtcortauna representa un enlace sencillo o doble,

así como sus sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables.

4. Compuestos conforme a la reivindicación 1 que presentan la fórmula general (II):

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en la que A, \underbar{.....} y R^{1} a R^{12} son como se han definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 3.

5. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{5} significa hidrógeno.

6. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{6} significa hidrógeno.

7. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{7} significa metilo.

8. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{8a} significa metilo, hidroximetilo o -OR^{8a-1}, siendo R^{8a-1} un resto de aminoácido unido a carbonilo y R^{8b} significa hidrógeno.

9. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{7} y R^{8a} junto con el átomo de carbono al que está unido R^{8a} y el átomo de nitrógeno al que está unido R^{7} forman un anillo heterocíclico que dado el caso puede estar substituido con 1 ó 2 substituyentes que se seleccionan independientemente entre sí del grupo constituido por halógeno, alquilo y amino.

10. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{9a} significa alquilo y R^{9b} hidrógeno.

11. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{10a} y R^{10b} significan hidrógeno.

12. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{11} significa hidrógeno.

13. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{12} significa alquilo C_{3}-C_{8}.

14. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{12} se selecciona del grupo siguiente:

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15. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que R^{13} significa hidrógeno.

16. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la que A representa un heterociclo de 5 miembros que contiene 1 átomo de nitrógeno y que dado el caso puede estar monosubstituido con un substituyente seleccionado del grupo constituido por flúor y alquilo.

17. Procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en el que se hacen reaccionar compuestos de fórmula general (V)

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en la que

R^{1} a R^{4}, R^{7} a R^{11}, R^{13} y A presentan el significado indicado en la reivindicación 1,

con compuestos de fórmula general (XXV)

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en la que

R^{5}, R^{6}, R^{12} y \underbar{.....} presentan el significado indicado en la reivindicación 1,

pudiendo presentarse estos dado el caso en forma activada.

18. Compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 para combatir enfermedades.

19. Medicamentos que contengan compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 y coadyuvantes.

20. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades bacterianas.