ES2235769T3

ES2235769T3 - Pirrolocarbazoles fusionados.

Info

Publication number: ES2235769T3
Application number: ES00204170T
Authority: ES
Inventors: Robert L. Hudkins; Ernest Knight, Jr.
Original assignee: Cephalon LLC
Current assignee: Cephalon LLC
Priority date: 1994-10-14
Filing date: 1995-10-03
Publication date: 2005-07-16
Anticipated expiration: 2015-10-03
Also published as: DE69533899T2; EP1088823A1; EP0785938A1; ATE286055T1; CA2202487A1; MX9702682A; EP1088823B1; EP0785938B1; NO308996B1; DE69524882T2; FI971479A0; DK1088823T3; DE69524882D1; DK0785938T3; WO1996011933A1; US5705511A; ES2170812T3; PT1088823E; ATE211472T1; NO971677D0

Abstract

Una composición farmacéutica constando de un pirrolocarbazol fusionado de fórmula G **(Fórmula)** en donde: a) cada E1 y E2, independientemente, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman 1) un anillo aromático carbocíclico insaturado de 6 miembros en el que uno a tres átomos de carbono pueden estar reemplazados por átomos de nitrógeno; o 2) un anillo aromático carbocíclico insaturado de 5 miembros en el que i) un átomo de carbono está reemplazado con un átomo de oxígeno, nitrógeno, o azufre; o ii) dos átomos de carbono están reemplazados con un átomo de azufre y uno de nitrógeno, o un átomo de oxígeno y uno de nitrógeno, b) A1 y A2 juntos representan O, y B1 y B2 juntos representan O; c) R1 es H, alquilo de 1-4 carbonos(inclusive)o arilo C6-10, arilalquilo C7-14, heteroarilo, o heteroarilalquilo; COR9, donde R9 es alquilo de 1-4 carbonos(inclusive)o arilo C6-10; OR10 donde R10 es H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -ONH 2, -R 7R8, -(H 2)NR7R8, donde n es un número entero de 1-4 carbonos(inclusive)o -(C2)NR7R8, y cualquiera de 1) R7 y R8, independientemente, son H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); o 2) R7 y R8 son combinados juntos para formar un grupo de unión de fórmula general -(CH2)2-X1-(CH2)2-, donde X1 es O, S o CH2; d) R2 es H, -SO2R9, -CO2R9, -COR9, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido de 5-7 carbonos, independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de 1) cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive) no está sustituido; o 2) cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos(inclusive), independientemente, está sustituido con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO2, OH, -OR9, -O(CH2)nNR7R8, -OCOR9, -OCONHR9, O-tetrahidropiranilo, NH2, -NR7R8, -NR10COR9, -NR10CO2R9, -NR10CONR7R8, -NHC(=NH)NH2, -NR10SO2R9, -S(O)y R11 (donde R11 es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo, e y es 1 ó 2); -SR11, -CO2R9, -CONR7R8, -CHO, COR9, -CH2OR7, -CH=NNR11R12, -CH=NOR11, -CH=NR9, -CH=NNHCH (N=NH)NH2, -SO2NR12R13, -PO(OR11)2, o OR14 donde R14 es el residuo de un aminoácido después de que se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de i) R12 y R13, independientemente, son H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo; o ii) R12 y R13 son combinados juntos para formar un grupo de unión.

Description

Pirrolocarbazoles fusionados.

Antecedentes de la invención

La materia obtenida microbianamente, mencionada como "K-252a", es un compuesto único que ha conseguido una atención importante durante los últimos años debido a la diversidad de actividades funcionales que posee. El K-252a es un alcaloide indolocarbazol que fue aislado originalmente de un cultivo de Nocordiosis sp. (Kase, H. y col., 39 J. Antibiotics 1.059, 1986). El K-252a es un inhibidor de varias enzimas, incluyendo la proteína quinasa C ("PQC") y la tirosina quinasa trk. Las actividades funcionales reportadas del K-252a son numerosas y diversas: inhibición tumoral (Patente U.S. N^{os} 4.877.776 y 5.063.330; Publicación Europea 238.011 en el nombre de Nomato); actividad insecticida (Patente U.S. Nº 4.735.939); inhibición de la inflamación (Patente U.S. Nº 4.816.450); tratamiento de enfermedades asociadas con células neuronales (Publicación WIPO WO 94/02488, publicada el 3 de febrero de 1994 en los nombres de Cephalon, Inc., y Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd.).

Los indolocarbazoles reportados comparten atributos comunes: en particular, cada uno consta de tres anillos de cinco miembros que incluyen todos una porción nitrógeno, estaurosporina (derivada de Streptomyces sp.) y K-252a (derivado de Nocordiosis sp.), además constando cada una de una porción azúcar unida vía dos enlaces N-glicosídicos. Ambos K-252a y estaurosporina han sido extensamente estudiados con respecto a su utilidad como agentes terapéuticos. Los indolocarbazoles son generalmente lipófilos, lo que permite su facilidad comparativa al atravesar las membranas biológicas y, a diferencia de las materias proteínicas, manifiestan una vida media in vivo más larga.

Mientras que el K-252a posee tales variadas y útiles actividades, un inconveniente para el compuesto es que, debido a un origen microbiano, tiene que ser obtenido a partir de medios de cultivo vía un proceso de fermentación; la bibliografía indica que el K-252a nunca ha sido sintetizado químicamente. Por consiguiente, los compuestos que posean las deseadas actividades funcionales del K-252a, pero que se puedan obtener fácilmente utilizando técnicas de síntesis química, ofrecerían varias ventajas, únicas y diferentes, sobre los otros tipos de compuestos de carbazol actualmente disponibles en la técnica.

Sumario de la invención

Revelados aquí son compuestos orgánicos sintéticos, de molécula pequeña, que son biológicamente activos y que mencionamos como "pirrolocarbazoles fusionados". Mediante "sintéticos" queremos decir que las moléculas reveladas son sintetizadas químicamente de novo; el indolocarbazol K-252a es un compuesto "natural" que tiene que ser obtenido inicialmente vía un proceso de fermentación, seguido por aislamiento y purificación.

A diferencia de los indolocarbazoles, nuestros nuevos pirrolocarbazoles fusionados comprenden un único anillo "E" que no incluye nitrógeno en la posición 12 (con fines de referencia se utilizan las designaciones alfabéticas del anillo establecidas en Porter, B. y Ross, C. 57 J. Org. Chem. 2.105, 1992). Adicionalmente, los pirrolocarbazoles fusionados no incluyen una porción azúcar unida vía dos enlaces N-glicosídicos. Debido a que nuestros compuestos no incluyen tal porción azúcar, se puede lograr fácilmente la producción sintética. Beneficiosamente y de manera sorprendente, nuestros compuestos únicos, que no son de origen microbiano, pueden ser fácilmente sintetizados y poseen una variedad de diversas y selectivas actividades biológicas, lo que permite una amplia gama de aplicaciones únicamente observadas, hasta este momento, con ciertos indolocarbazoles.

Los pirrolocarbazoles fusionados revelados aquí están representados por la fórmula general siguiente:

Fórmula G

1

Los miembros constitutivos están revelados detalladamente abajo. Como se observó anteriormente, en el anillo E el constituyente "X" no es nitrógeno.

Los pirrolocarbazoles fusionados preferidos están representados por la siguiente fórmula:

Fórmula I

2

Los miembros constitutivos están revelados detalladamente abajo.

Pirrolocarbazoles fusionados más preferidos están representados por las fórmulas siguientes:

Fórmula Ia

3

Fórmula Ib

4

Los miembros constitutivos están revelados detalladamente abajo.

Las especies de pirrolocarbazoles fusionados preferidas son aquellas representadas por las Fórmulas I, Ia y Ib en la Tabla I, la cual está presentada abajo.

También están reveladas aquí las metodologías preferidas para las rutas de preparación sintética, incluyendo metodologías para la preparación de un pirrolocarbazol fusionado regioespecífico, isómero lactama, y para halogenar un pirrolocarbazol fusionado.

Hemos descubierto que nuestros pirrolocarbazoles fusionados se pueden utilizar de diversas maneras, incluyendo: intensificar la función y/o supervivencia de células de linaje neuronal, separadamente o en combinación con un fac-
tor(es) neurotrófico(s) y/o indolocarbazoles; intensificar la actividad inducida por factores tróficos; la inhibición de la actividad de la proteína quinasa C ("PQC"); la inhibición de la actividad de la tirosina quinasa trk; intensificar la actividad tirosina quinasa trk; la inhibición de la proliferación de una línea celular de cáncer de próstata; la inhibición de las rutas celulares involucradas en el proceso de inflamación; y la intensificación de la supervivencia de células neuronales en riesgo de desecación. Debido a estas variadas actividades, los compuestos revelados encuentran utilidad en diversos marcos, incluyendo los entornos de investigación y terapéutico.

En las siguientes páginas de la revelación de la patente serán reveladas estas y otras características y ventajas de los pirrolocarbazoles fusionados.

Descripción detallada de las formas de realización preferidas

En primer lugar describimos los dibujos.

I. Dibujos

La Fig. 1 es un gráfico que muestra que los pirrolocarbazoles fusionados intensifican la actividad de la CAT, inducida por NT-3, de cultivos de cerebro basal anterior de rata.

La Fig. 2 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de pirrolocarbazoles fusionados isómeros (IX y X) a partir de un indol (IV).

La Fig. 3 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de pirrolocarbazoles fusionados isómeros (XIV y XVII) a partir de un 2-(2-indenil)indol (XI).

La Fig. 4 es un dibujo esquemático que esboza la deshidrogenación de un hexahidrocarbazol (XVIII) para formar el correspondiente, parcial o más completamente deshidrogenado, pirrolocarbazol fusionado (XX).

La Fig. 5 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de un derivado de 2-(2-indenil)indol (XXII) a partir de un 1-carboxi-2-tributilestanilindol (XXI).

La Fig. 6 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de una indoloindenilimida (XXIII) a partir de un 2-(2-indenil)indol (XXII). Se cicla la indoloindenilimida (XXIII), bajo condiciones reductoras, para formar el correspondiente pirrolocarbazol fusionado (XXIV).

La Fig. 7 es un dibujo esquemático que muestra la síntesis química de un pirrolocarbazol fusionado bromado (XXVI) a partir de un pirrolocarbazol fusionado (XXV).

La Fig. 8 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de pirrolocarbazoles fusionados isómeros seleccionados (XXXIII y XXXIV) a partir de un indol (XXVII).

La Fig. 9 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de pirrolocarbazoles fusionados isómeros seleccionados (XXXIII y XXXIV) a partir de un indol (XXX).

La Fig. 10 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de intermedios para pirrolocarbazoles fusionados en los que el anillo F contiene un átomo de nitrógeno del anillo.

La Fig. 11 es un dibujo esquemático que esboza la síntesis química de intermedios (XL) para pirrolocarbazoles fusionados en los que ambos anillos B y F contienen heteroátomos en el anillo.

La Fig. 12 es un dibujo esquemático que esboza la transformación de intermedios (XL) en pirrolocarbazoles fusionados isómeros (XLIII y XLIV) en los que ambos anillos B y F contienen heteroátomos en el anillo.

II. Pirrolocarbazoles fusionados

Aquí caracterizados están pirrolocarbazoles fusionados representados por las Fórmulas siguientes:

A. Fórmula G

5

en donde:

a) cada E^{1} y E^{2}, independientemente, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman

1): un anillo aromático carbocíclico insaturado de 6 miembros en el que uno a tres átomos de carbono pueden estar reemplazados por átomos de nitrógeno; o

2): un anillo aromático carbocíclico insaturado de 5 miembros en el que

i): un átomo de carbono está reemplazado con un átomo de oxígeno, nitrógeno, o azufre; o

ii): dos átomos de carbono están reemplazados con un átomo de azufre y uno de nitrógeno, o un átomo de oxígeno y uno de nitrógeno,

b) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

c) R^{1} es H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo, arilalquilo, heteroarilo, y heteroarilalquilo; COR^{9}, donde R^{9} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), o arilo, preferentemente fenilo o naftilo; -OR^{10}, donde R^{10} es H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -CONH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, donde n es un número entero de 1-4 (inclusive); o -O(CH_{2})_{n}
NR^{7}R^{8}, y cualquiera de

1): R^{7} y R^{8}, independientemente, son H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); o

2): R^{7} y R^{8} son combinados juntos para formar un grupo de unión de fórmula general -(CH_{2})_{2}-X^{1}-(CH_{2})_{2}-, donde X^{1} es O, S o CH_{2};

d) R^{2} es H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquenilo de 1-4 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquinilo de 1-4 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido, independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

1): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive) no está sustituido; o

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive), independientemente, está sustituido con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), preferentemente fenilo o naftilo, heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, O-tetrahidropiranilo, NH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CO_{2}R^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -NHC(=NH)NH_{2}, -NR^{10}SO_{2}R^{9}, -S(O)_{y}R^{11} donde R^{11} es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, preferentemente fenilo o naftilo, o heteroarilo, e y es 1 ó 2; -SR^{11}, -CO_{2}R^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, COR^{9}, -CH_{2}OR^{7}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNHCH(N=NH)NH_{2}, -SO_{2}NR^{12}R^{13}, -PO(OR^{11})_{2}, o OR^{14} donde R^{14} es el residuo de un aminoácido después de que se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de

i): R^{12} y R^{13}, independientemente, son H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo de 6-10 carbonos, preferentemente fenilo o naftilo, o heteroarilo; o

ii)

R^{12} y R^{13} son combinados juntos para formar un grupo de unión, preferentemente

\hskip0.15cm

-(CH_{2})_{2}-X^{1}- (CH_{2})_{2}-;

e) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, arilo, preferentemente un arilo de 6-10 carbonos (inclusive), más preferentemente fenilo o naftilo; heteroarilo; F, Cl, Br, I, -CN, CF_{3}, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, NH_{2}, -CH_{2}OH, -CH_{2}OR^{14}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -SR^{11}, -S(O)_{y}R^{11} donde y es 1 ó 2; -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -(CH_{2})_{n}SR^{9}, donde n es un número entero de 1-4 (inclusive), -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{9}, -CH_{2}SR^{15} donde R^{15} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}
R^{14}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NHR^{14}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquenilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquinilo de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive) está sustituido como se describe en d)2) arriba;

f) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

2): X es un alquileno de 1-3 carbonos (inclusive) sustituido con un grupo R^{2}, preferentemente OR^{10}, -SR^{10}, R^{15}, donde R^{15} es un alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); fenilo, naftilo, arilalquilo de 7-14 carbonos (inclusive), preferentemente bencilo; o

3): X es -CH=CH-, -CH(OH)-CH(OH)-, -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)_{2}, -C(R^{10})_{2}-, -C(=O)-, -C(=NOR^{11})-, -C(OR^{11})(R^{11})-, -C(=O)CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=O)-, -C(=NOR^{11})CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=NOR^{11})-, -CH_{2}Z-, -Z-CH_{2}-, -CH_{2}ZCH_{2}-, donde Z es

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11};

g) A^{1} y A^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; B^{1} y B^{2} juntos representan O, y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en c), d), e), y f) arriba; o

h) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en c), d), e), y f) arriba.

B. Fórmula I

6

en donde:

a) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

b) R^{1} es H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo, arilalquilo, heteroarilo, y heteroarilalquilo; COR^{9}, donde R^{9} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), o arilo, preferentemente fenilo o naftilo; -OR^{10}, donde R^{10} es H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -CONH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, donde n es un número entero de 1-4 (inclusive); o -O(CH_{2})_{n}
NR_{7}R_{8}, y cualquiera de

c) R^{2} es H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquenilo de 1-4 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente un alquinilo de 1-4 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido, independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive) está sustituido, independientemente, con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), preferentemente fenilo o naftilo; heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, O-tetrahidropiranilo, NH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CO_{2}R^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -NHC(=NH)NH_{2}, -NR^{10}SO_{2}R^{9}, -S(O)_{y}R^{11}, donde R^{11} es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, preferentemente fenilo o naftilo, o heteroarilo, e y es 1 ó 2; -SR^{11}, -CO_{2}R^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, COR^{9}, -CH_{2}OR^{7}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNHCH(N=NH)NH_{2}, -SO_{2}NR^{12}R^{13}, -PO(OR^{11})_{2}, o OR^{14} donde R^{14} es el residuo de un aminoácido después de se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de

ii)

\hskip0.15cm

-(CH_{2})_{2}-X^{1}- (CH_{2})_{2}-;

d) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, arilo, preferentemente un arilo de 6-10 carbonos (inclusive), más preferentemente fenilo o naftilo; heteroarilo; F, Cl, Br, I, -CN, CF_{3}, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, NH_{2}, -CH_{2}OH, -CH_{2}OR^{14}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -SR^{11}, -S(O)_{y}R^{11} donde y es 1 ó 2; -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -(CH_{2})_{n}SR^{9}, donde n es un número entero de 1-4 (inclusive), -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{9}, -CH_{2}SR^{15} donde R^{15} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}
R^{14}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NHR^{14}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquenilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive), preferentemente alquinilo de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de 1-8 carbonos (inclusive), o alquinilo de 1-8 carbonos (inclusive) está sustituido como se describe en c)2) arriba;

e) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

3): X es -CH=CH-, -CH(OH)-CH(OH)-, -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)_{2}, -C(=O)-, -C(=NOR^{11})-, -C(OR^{11})(R^{11})-, -C(=O)CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=O)-, -C(R^{10})_{2}, -C(=NOR^{11})CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=NOR^{11})-, -CH_{2}Z-, -Z-CH_{2}-, -CH_{2}ZCH_{2}-, donde Z es

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11};

f) A^{1} y A^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; B^{1} y B^{2} juntos representan O, y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba.

g) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba.

C. Fórmulas Ia y Ib

7

en donde:

a) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

b) R^{1} es H;

c) R^{2} es H, alilo, hidroxietilo, o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), preferentemente metilo;

d) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, F, Cl, Br, I, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), preferentemente metilo, alcoxilo de 1-4 carbonos (inclusive), preferentemente metoxilo, heteroarilalquenilo, preferentemente piridilvinilo, heteroarilalquilo, preferentemente piridiletilo, cianoetilo, cianovinilo, arilo de 6-10 carbonos, preferentemente fenilo, alquinilo, arilalquenilo, preferentemente estirilo, alcoxicarbonilalquenilo, preferentemente etoxicarbonilvinilo, o haloalquenilo;

e) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive), preferentemente -CH_{2}-, o -CH_{2}CH_{2}-; o

2): X es un alquileno de 1-3 carbonos (inclusive), preferentemente -CH_{2}- o -CH_{2}CH_{2}-, en donde cada alquileno de 1-3 carbonos (inclusive) está sustituido con un grupo R^{2}, preferentemente -OR^{11}, -SR^{11}, R^{15}; fenilo, naftilo, arilalquilo de 7-11 carbonos (inclusive), preferentemente bencilo; o

3): X es -CH=CH-, -CH(OH)CH(OH)-, -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)_{2}-, -C(=O)-, -C(=NOR^{11})-, -C(OR^{11})(R^{11})-, -C(=O)CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=O)-, -C(R^{10})_{2}-, -C(=NOR^{11})CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=NOR^{11})-, -CH_{2}Z-, -Z-CH_{2}-, -CH_{2}ZCH_{2}-, donde Z es

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11};

f) A^{1} y A^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; o H, OH; y B^{1} y B^{2} juntos representan O; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba.

g) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; o H, OH; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba.

Como se utiliza aquí con respecto a la definición de R^{14}, el término "aminoácido" significa una molécula conteniendo un grupo aminoácido y un grupo carboxilo. Incluye un "\alpha-aminoácido" que tiene su significado habitual como ácido carboxílico que lleva una funcionalidad amino en el carbono adyacente al grupo carboxilo. Los \alpha-aminoácidos pueden ser de origen natural o de origen no natural. Los aminoácidos también incluyen "dipéptidos" que están definidos aquí como dos aminoácidos que están juntados en una unión peptídica. De este modo, los constituyentes de los dipéptidos no se limitan a \alpha-aminoácidos, y pueden ser cualquier molécula conteniendo un grupo amino y un grupo carboxilo. Los preferidos son los \alpha-aminoácidos, dipéptidos tales como la lisil-\beta-alanina, y ácidos aminoalcanoicos de 2-8 carbonos, por ejemplo, el ácido 3-dimetilaminobutírico.

Las formas de realización preferidas de los pirrolocarbazoles fusionados son aquellas representadas por las Fórmulas I, Ia y Ib en la Tabla I, donde se hacen las sustituciones siguientes (los números romanos indican la representación de la fórmula):

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA I

8

9

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 (1) \+  \begin{minipage}[t]{145mm}R ^{1} , R ^{5} , y R ^{6} 
son H cada uno, excepto donde se advierta.\end{minipage} \cr 
(2) \+  \begin{minipage}[t]{145mm}A ^{1}  y A ^{2}  son H.H;
H.OH; o ambos son combinados juntos para representar oxígeno, donde
se indique.\end{minipage} \cr  (3) \+
 \begin{minipage}[t]{145mm}B ^{1}  y B ^{2}  son H.H; H.OH; o
ambos son combinados juntos para representar oxígeno, donde se
indique.\end{minipage} \cr  (4) \+
 \begin{minipage}[t]{145mm}El compuesto I-5 es
una mezcla de compuestos en una proporción molar 5/1, donde
A ^{1} A ^{2}  = H.H; B ^{1} B ^{2}  = O/A ^{1} A ^{2}  = O;
B ^{1} B ^{2}  = H.H.\end{minipage} \cr  (5) \+
 \begin{minipage}[t]{145mm}El compuesto I-8 es
una mezcla de compuestos en una proporción molar 2/1, donde
A ^{1} A ^{2}  = H.H; B ^{1} B ^{2}  = O/A ^{1} A ^{2}  = O;
B ^{1} B ^{2}  = H.H.\end{minipage} \cr  (6) \+
 \begin{minipage}[t]{145mm}El compuesto Ia-2 es
una mezcla de compuestos en una proporción molar 4/1, donde
A ^{1} A ^{2}  = H.H; B ^{1} B ^{2}  = O/A ^{1} A ^{2}  = O;
B ^{1} B ^{2}  = H.H.\end{minipage} \cr  (7) \+ R ^{6}  =
Br.\cr  (8) \+ R ^{5}  = Br.\cr  (9) \+ R ^{6}  = F.\cr  (10) \+
R ^{6}  = 2  -  piridilvinilo.\cr  (11) \+ R ^{6}  =
2  -  piridiletilo.\cr  (12) \+ 2  -  pir =
2  -  piridilo.\cr}

Los compuestos particularmente preferidos de la Tabla I incluyen los compuestos I-1, I-2, I-3, I-4, I-6, I-7, I-9, I-11, I-12, I-14, I-15, I-16, I-17, I-22, I-23, I-26, I-29, I-32, I-34, I-39, I-42, y I-43, siendo sumamente preferidos los compuestos I-34 y I-32.

Las sales farmacéuticamente admisibles de los pirrolocarbazoles fusionados también caen dentro del campo de aplicación de los compuestos revelados aquí. El término "sales farmacéuticamente admisibles", como se utiliza aquí, significa una sal por adición de ácido inorgánico tal como clorhidrato, sulfato, y fosfato, o una sal por adición de ácido orgánico tal como acetato, maleato, fumarato, tartrato, y citrato. Ejemplos de sales metálicas farmacéuticamente admisibles son las sales de metales alcalinos tales como la sal sódica y la sal potásica, sales de metales alcalinotérreos tales como la sal magnésica y la sal cálcica, la sal de aluminio y la sal de zinc. Ejemplos de sales amónicas farmacéuticamente admisibles son la sal amónica y la sal de tetrametilamonio. Ejemplos de sales farmacéuticamente admisibles por adición de aminas orgánicas son las sales con morfolina y piperidina. Ejemplos de sales farmacéuticamente admisibles por adición de aminoácidos son las sales con lisina, glicina, y fenilalanina.

Los compuestos proporcionados aquí pueden ser formulados en composiciones farmacéuticas mediante mezcla con excipientes y soportes no tóxicos farmacéuticamente admisibles. Como se advirtió antes, tales composiciones pueden ser preparadas para su uso en administración parenteral, particularmente en forma de soluciones o suspensiones líquidas; o administración oral, particularmente en forma de comprimidos o cápsulas; o intranasalmente, particularmente en forma de polvos, gotas nasales, o aerosoles; o dérmicamente vía, por ejemplo, parches transdérmicos.

La composición se puede administrar convenientemente en forma de dosificación unitaria y se puede preparar mediante alguno de los métodos conocidos en la técnica farmacéutica, por ejemplo, como se describió en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., Easton, PA, 1980). Las formulaciones para administración parenteral pueden contener, como excipientes comunes, agua estéril o salino, polialquilénglicoles tales como polietilénglicol, aceites de origen vegetal, naftalenos hidrogenados, y otros. En particular, el polímero de lactida, el copolímero de lactida/glicólido, o los copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno, biocompatibles, biodegradables, pueden ser excipientes útiles para controlar la liberación de los compuestos activos. Otros sistemas de liberación parenteral, potencialmente útiles para estos compuestos activos, incluyen partículas de copolímero de etileno-acetato de vinilo, bombas osmóticas, sistemas de infusión implantables, y liposomas. Las formulaciones para administración por inhalación contienen como excipientes, por ejemplo, lactosa, o pueden ser soluciones acuosas conteniendo, por ejemplo, polioxietilén-9 lauril éter, glicocolato y desoxicolato, o soluciones oleosas para administración en forma de gotas nasales, o como gel para ser aplicado intranasalmente. Las formulaciones para administración parenteral también pueden incluir glicocolato para administración bucal, un salicilato para administración rectal, o ácido cítrico para administración vaginal. Las formulaciones para parches transdérmicos son preferentemente emulsiones lipófilas.

Las materias de esta invención se pueden emplear como el único agente activo en un producto farmacéutico, o se pueden utilizar en combinación con otros principios activos, por ejemplo, otros factores de crecimiento que podrían facilitar la supervivencia neuronal o regeneración axonal en enfermedades o trastornos.

En una composición terapéutica, las concentraciones de los compuestos descritos aquí variarán dependiendo de algunos factores, incluyendo la dosificación del fármaco a administrar, las características químicas (por ejemplo, hidrofobia) de los compuestos empleados, y la ruta de administración, En términos generales, los compuestos de esta invención pueden ser suministrados en una solución de tampón fisiológica acuosa conteniendo aproximadamente 0'1 al 10% p/v de compuesto para administración parenteral. Los intervalos de dosis típicos son desde aproximadamente 1 \mug/kg hasta aproximadamente 1 g/kg de peso corporal y día; un intervalo preferido de dosis es desde aproximadamente 0'01 mg/kg hasta 100 mg/kg de peso corporal y día. La dosificación preferida de fármaco a administrar es probable que dependa de variables tales como el tipo y extensión de la progresión de la enfermedad o trastorno, la situación de salud general del paciente concreto, la eficacia biológica relativa del compuesto seleccionado, y la formulación del excipiente del compuesto, y su ruta de administración.

III. Utilidades de los pirrolocarbazoles fusionados

Nuestros pirrolocarbazoles fusionados han dado muestras de una panoplia de actividades farmacológicas funcionales importantes que encuentran utilidad en diversos marcos, incluyendo los ruedos de investigación y terapéutico. Para facilidad de presentación, y para no limitar el abanico de utilidades por las que se pueden caracterizar estos compuestos, describimos en general las actividades de los pirrolocarbazoles fusionados como sigue:

A.: Efecto en la función y/o supervivencia de células reactivas a factores tróficos.

B.: Inhibición de la actividad enzimática.

C.: Inhibición de respuestas asociadas a la inflamación.

D.: Inhibición del crecimiento celular asociado con estados hiperproliferativos.

E.: Inhibición de la muerte de motoneuronas programada desarrolladamente.

El efecto en la función y/o supervivencia de células reactivas a factores tróficos, por ejemplo, células de un linaje neuronal, puede verificarse utilizando cualquiera de los ensayos siguientes: (1) ensayo de la colina acetiltransferasa ("CAT") en la médula espinal cultivada, (2) ensayo de la extensión de neuritas del ganglio de la raíz dorsal cultivado ("DRG"), (3) ensayo de actividad de la CAT en neuronas del cerebro basal anterior ("CBA") cultivadas. La inhibición de la actividad enzimática se puede determinar utilizando ensayos de inhibición de la PQC y de inhibición de la tirosina quinasa trk. La inhibición de la respuesta asociada a la inflamación puede ser verificada utilizando un ensayo de ARNm para indolamina-2,3-dioxigenasa ("IDO"). La inhibición del crecimiento celular asociado con estados hiperproliferativos puede ser determinada midiendo el crecimiento de líneas celulares de interés, tal como una línea AT2 en el caso de cáncer de próstata. La inhibición de la muerte de motoneuronas programada desarrolladamente puede ser valorada in ovo utilizando motoneuronas somáticas de pollo embriónico, las cuales células experimentan una muerte de origen natural entre los días embriónicos 6 y 10, y analizando la inhibición de tal muerte celular de origen natural mediada por los compuestos revelados aquí.

Como se utiliza aquí, el término "efecto", cuando se utiliza para modificar los términos "función" y "supervivencia", significa una alteración o cambio positivos o negativos. Un efecto que sea positivo puede ser denominado aquí como una "intensificación" o "intensificador", y un efecto que sea negativo puede ser denominado aquí como "inhibición" o "inhibidor".

Como se utiliza aquí, los términos "intensificación" o "intensificador", cuando se utiliza para modificar los términos "función" o "supervivencia" quiere decir que la presencia de un pirrolocarbazol fusionado tiene un efecto positivo en la función y/o supervivencia de una célula reactiva a los factores tróficos comparada con una célula en ausencia del pirrolocarbazol fusionado. Por ejemplo, y no como limitación, con respecto a la supervivencia de, por ejemplo, una neurona colinérgica, el pirrolocarbazol fusionado daría muestras de intensificación de la supervivencia de una población neuronal colinérgica en riesgo de desecación (debido a, por ejemplo, lesión, un estado de enfermedad, un estado degenerativo o progresión natural) cuando se compara a una población neuronal colinérgica no presentada a tal pirrolocarbazol fusionado, si la población tratada tiene un periodo de funcionalidad comparativamente mayor que la población no tratada. Como ejemplo adicional, y nuevamente no como limitación, con respecto a la función de, por ejemplo, una neurona sensorial, el pirrolocarbazol fusionado daría muestras de intensificación de la función (por ejemplo, extensión de neuritas) de una población neuronal sensorial cuando se compara a una población neuronal sensorial no presentada a tal pirrolocarbazol fusionado, si la extensión de neuritas de la población tratada es comparativamente mayor que la extensión de neuritas de la población no tratada.

Como se utiliza aquí, "inhibir" e "inhibición" significan que una respuesta especificada de una materia diseñada (por ejemplo, la actividad enzimática) ha disminuido comparativamente en presencia de un pirrolocarbazol fusionado.

Como se utiliza aquí, el término "neurona", "célula de linaje neuronal", y "célula neuronal" incluye, pero no se limita a, una población heterogénea de tipos neuronales teniendo transmisores singulares o múltiples, y/o funciones singulares o múltiples; preferentemente, estos son neuronas colinérgicas y neuronas sensoriales. Como se utiliza aquí, la frase "neurona colinérgica" quiere decir neuronas del Sistema Nervioso Central (SNC) y Sistema Nervioso Periférico (SNP) cuyo neurotransmisor es acetilcolina; ejemplares son las neuronas del cerebro basal anterior y de la médula espinal. Como se utiliza aquí, la frase "neurona sensorial" incluye neuronas reactivas a estímulos ambientales (por ejemplo, temperatura, movimiento) de, por ejemplo, piel, músculo y articulaciones; ejemplar es una neurona del GRD.

Como se utiliza aquí, un "factor trófico" es una molécula que afecta, directa o indirectamente, a la supervivencia o función de una célula reactiva a los factores tróficos. Los factores tróficos ejemplares incluyen el Factor Neurotrófico Ciliar (CNTF), el Factor de Crecimiento de Fibroblastos básico (FGFb), los factores de crecimiento de la insulina y tipo insulina (por ejemplo, IGF-I, IGF-II, IGF-III), interferones, interleuquinas, citoquinas, y las neurotrofinas, incluyendo el Factor de Crecimiento Nervioso (FCN), la Neurotrofina-3 (NT-3), la Neurotrofina-4/5 (NT-4/5), y el Factor Neurotrófico derivado del Cerebro (FNDC).

Una "célula reactiva a los factores tróficos", como se define aquí, es una célula que incluye un receptor al que se puede unir específicamente un factor trófico; los ejemplos incluyen neuronas (por ejemplo, neuronas colinérgicas y sensoriales) y células no neuronales (por ejemplo, monocitos y células neoplásicas).

Como se utiliza aquí, "actividad del factor trófico" y "actividad inducida por el factor trófico" son definidas como cualquier respuesta que resulta, directa o indirectamente, de la unión de un factor trófico (por ejemplo, FCN) a una célula que comprende un receptor de factores tróficos (por ejemplo, una neurona constando de una trk. En el caso de, por ejemplo, la unión del FCN con trk, una respuesta ejemplar incluiría la autofosforilación de residuos tirosina trk, conduciendo a una actividad incrementada de la CAT que produce supervivencia y/o función neuronal intensificadas.

Como se utiliza aquí, el término "trk" se refiere a la familia de receptores para neurotrofinas de alta afinidad, comprendiendo actualmente la trk A, la trk B, y la trk C, y otras proteínas asociadas a la membrana a las que se pueda unir una neurotrofina.

Como se utiliza en las frases "actividad del factor trófico" y "actividad inducida por el factor trófico", el término "factor trófico" incluye factores tróficos endógenos y exógenos, donde "endógeno" tiene que ver con un factor trófico normalmente presente, y "exógeno" se refiere a un factor trófico añadido a un sistema. Como se definió, "actividad inducida por el factor trófico" incluye la actividad inducida por (1) factores tróficos endógenos; (2) factores tróficos exógenos; y (3) una combinación de factores tróficos endógenos y exógenos.

Como se utiliza aquí, la frase "estado hiperproliferativo", en referencia al término "células", significa células cuyo crecimiento no regulado y/o anormal puede conducir al desarrollo de un estad no deseado, por ejemplo, un estado canceroso o un estado psoriático.

Como se utiliza aquí, "cáncer" y "canceroso" se refieren a cualquier proliferación maligna de células en un mamífero. Los ejemplos incluyen cáncer de próstata, hiperplasia benigna de próstata, de ovarios, de mama y otros cánceres identificados. Como se utiliza aquí, el término "psoriasis" y "estado psoriático" tiene que ver con trastornos que implican la hiperproliferación queratinocítica, infiltración celular inflamatoria, y alteración citoquínica.

Como se utiliza aquí, la frase "en riesgo de desecación" conjuntamente con una materia biológica, por ejemplo, una célula tal como una neurona, significa un estado o condición que afecta negativamente a la materia biológica de manera que la materia tiene una probabilidad incrementada de desecación debido a tal estado o condición. Por ejemplo, En el Ejemplo III (E)(1) demostramos que los compuestos revelados aquí pueden "rescatar" o intensificar la supervivencia de motoneuronas que estén naturalmente en riesgo de desecación, en un modelo in ovo de muerte celular programada. De manera similar, por ejemplo, una neurona puede estar en riesgo de desecación debido al proceso natural de envejecimiento que ocasiona la muerte de una neurona, o debido a una lesión tal como un trauma en la cabeza, el cual puede ser tal que, por ejemplo, las neuronas y/o glía afectadas por tal trauma puedan estar en riesgo de desecación. Además, por ejemplo, una neurona puede estar en riesgo de desecación debido a un estado o condición de enfermedad, como en el caso de neuronas en riesgo de desecación ocasionado por la enfermedad ELA. De este modo, por intensificar la supervivencia de una célula en riesgo de desecación, mediante el empleo de un compuesto de la invención reivindicada, se quiere decir que tal compuesto disminuye o previene el riesgo de muerte de la célula.

Como se utiliza aquí, el término "poner en contacto" significa el causar, directa o indirectamente, la colocación conjunta de porciones, de manera que las porciones entren, directa o indirectamente, en asociación física entre sí, por lo que se logra un resultado deseado. De este modo, como se utiliza aquí, uno puede "poner en contacto" una célula diana con un compuesto revelado aquí, incluso aunque el compuesto y la célula no se unan físicamente necesariamente (como, por ejemplo, es el caso donde se unen físicamente un ligando y un receptor), con tal que se logre el resultado deseado (por ejemplo, intensificación de la supervivencia de la célula). De este modo, el poner en contacto incluye actos como el colocar porciones juntas en un recipiente (por ejemplo, añadiendo un compuesto revelado aquí a un recipiente que conste de células para estudios in vitro) así como la administración del compuesto a una entidad diana (por ejemplo, inyectando un compuesto revelado aquí dentro de un animal de laboratorio para pruebas in vitro, o dentro de un humano con fines de terapia o tratamiento).

A. Efecto en la función y/o supervivencia de células reactivas a factores tróficos

Los pirrolocarbazoles fusionados revelados aquí se pueden utilizar para intensificar la función y/o supervivencia de células de linaje neuronal. En este contexto, los pirrolocarbazoles fusionados pueden ser utilizados individualmente o con otros pirrolocarbazoles fusionados, o en combinación con otras moléculas beneficiosas tales como indolocarbazoles, los cuales también dan muestras de capacidad para llevar a cabo la función y/o supervivencia de una célula designada. En situaciones donde el pirrolocarbazol fusionado pretenda intensificar, por ejemplo, la actividad de las neurotrofinas, se pueden utilizar neurotrofinas exógenas conjuntamente con el pirrolocarbazol fusiona-
do.

Diversos trastornos neurológicos se caracterizan por células neuronales que están desecadas, lesionadas, comprimidas funcionalmente, experimentando degeneración axonal, en riesgo de desecación, etc. Estos trastornos incluyen, pero no se limitan a: Alzheimer, trastornos de las neuronas motoras (por ejemplo, esclerosis lateral amiotrófica), Parkinson, trastornos cerebrovasculares, (por ejemplo, choque, isquemia), Huntington, demencia por SIDA, epilepsia, esclerosis múltiple, neuropatías periféricas (por ejemplo, aquellas que afectan a las neuronas del GRD en neuropatía periférica asociada a quimioterapia) incluyendo neuropatía diabética, trastornos inducidos por aminoácidos excitatorios, trastornos asociados con lesiones conmocionales o penetrantes del cerebro o médula dorsal.

Como se expone en los Ejemplos de esta sección de la revelación, la capacidad de un pirrolocarbazol fusionado para intensificar la función y/o supervivencia de células de un linaje neuronal puede ser determinada empleando cualquiera de los ensayos siguientes:

1.: Ensayo de Actividad de la CAT en la médula espinal.

2.: Ensayo de Actividad de la CAT en el Cerebro Basal Anterior.

3.: Ensayo de la Extensión de Neuritas del GRD.

4.: Ensayo de Intensificación de la Actividad de las Neurotrofinas.

La CAT cataliza la síntesis del neurotransmisor acetilcolina, y es considerada un marcador enzimático para una neurona colinérgica funcional. Una neurona funcional también es capaz de supervivencia. La supervivencia de las neuronas se ensaya mediante la cuantificación de la captación específica y transformación enzimática de un colorante (por ejemplo, calceína-AM) por neuronas vivas. Las neurotrofinas activan la actividad quinasa de una trk, por ejemplo trkA, en células tales como neuronas sensoriales o colinérgicas. La intensificación de una neurotrofina tal como NT-3 puede ser determinada comparando la actividad funcional de la neurotrofina con, o sin, el presente pirrolocarbazol fusionado.

Debido a sus variadas utilidades, los pirrolocarbazoles fusionados revelados aquí encuentran utilidad en diversos marcos. Los compuestos se pueden utilizar en el desarrollo de modelos in vitro de supervivencia, función, e identificación celular neuronal, o para el escrutinio de otros compuestos sintéticos que tengan actividades similares a las de los pirrolocarbazoles fusionados. Los compuestos se pueden utilizar en un entorno de investigación para investigar, definir y determinar dianas moleculares asociadas con respuestas funcionales. Por ejemplo, radiomarcando un pirrolocarbazol fusionado asociado con una función celular específica (por ejemplo, mitogénesis), la entidad diana a la que se une el pirrolocarbazol fusionado puede ser identificada, aislada, y purificada para su caracterización. En aún otro ejemplo, se puede utilizar un pirrolocarbazol fusionado como herramienta de escrutinio para descubrir agentes que tengan actividad marginal semejante a los factores tróficos, pero cuando se combinan con al menos un pirrolocarbazol fusionado revelado, son capaces de intensificar la actividad, inducida por factores tróficos, de una célula reactiva a los factores tróficos.

La degeneración, muerte o no funcionamiento de las neuronas es una característica de muchos trastornos neurológicos humanos, incluyendo, pero no se limitan a, Alzheimer, trastornos de las neuronas motoras (por ejemplo, ELA), Parkinson, trastornos cerebrovasculares, (por ejemplo, choque, isquemia), Huntington, demencia por SIDA, epilepsia, esclerosis múltiple, lesiones conmocionales o penetrantes del cerebro o médula espinal, neuropatías periféricas (por ejemplo, aquellas que afectan al GRD en neuropatía periférica asociada a quimioterapia), y trastornos inducidos por aminoácidos excitatorios. Debido a que los pirrolocarbazoles fusionados son útiles para intensificar las actividades, inducidas por factores tróficos, de células reactivas a los factores tróficos (por ejemplo, neuronas sensoriales y colinérgicas), los compuestos revelados se prestan beneficiosamente ellos mismos a una utilidad de actividad farmacológica como agentes terapéuticos. De este modo, debido a que los compuestos revelados han dado muestras de utilidad en, por ejemplo, la intensificación de la actividad de la CAT o supervivencia de las neuronas del GRD, la utilidad de los compuestos en el tratamiento de trastornos asociados con, por ejemplo, la actividad disminuida de la CAT o la muerte de neuronas del GRD, está dentro del campo de aplicación de esta invención.

Ejemplo III(A)(1)

Intensificación de la actividad de la CAT en la médula espinal

Como se advirtió, la CAT es un marcador bioquímico específico para neuronas colinérgicas funcionales. Las neuronas colinérgicas representan la principal aportación colinérgica en la formación hipocampal, núcleo olfatorio, núcleo interpeduncular, córtex, amígdala, y partes del tálamo. En la médula espinal, las neuronas motoras son neuronas colinérgicas que contienen CAT [Phelps y col., J. Comp. Neurol. 273: 459-472 (1988)]. La actividad de la CAT ha sido utilizada para estudiar los efectos de las neurotrofinas (por ejemplo, FCN o NT-3) en la supervivencia y/o función de las neuronas colinérgicas. El ensayo de la CAT también sirve como una indicación de la regulación de los niveles de CAT dentro de las neuronas colinérgicas.

Los pirrolocarbazoles fusionados aumentaron la actividad de la CAT en el ensayo de cultivo de médula espinal disociada embriónica de rata (Tabla II). Por ejemplo, el Compuesto I-13 aumentó la actividad de la CAT 217% sobre los cultivos de control (no tratados con el pirrolocarbazol fusionado) después de dejar un periodo de plaqueo de 2-3 horas para que las células ataquen a los pocillos de cultivo tisular de control. En estos ensayos, se añadió directamente un pirrolocarbazol fusionado a un cultivo de médula espinal disociada. Los compuestos de la invención aumentaron la actividad de la CAT de una manera dependiente de la concentración. Los compuestos que aumentaron la actividad de la CAT, un 120% como mínimo de la actividad de control, fueron considerados activos. La actividad incrementada de la CAT fue observada después de una única aplicación de un pirrolocarbazol fusionado. El pirrolocarbazol fusionado fue añadido en el mismo día que se inició el cultivo de médula espinal disociada. La actividad incrementada de la CAT fue detectable 48 horas después.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA II Efecto de los pirrolocarbazoles fusionados en la actividad de la CAT en la médula espinal

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Métodos: Se disociaron células de médula espinal de rata fetal, y se realizaron experimentos como se describió [Smith y col., J. Cell Biology 101: 1.608-1.621 (1985); Glicksman y col., J. Neurochem. 61:210-221 (1993)]. Se prepararon células disociadas a partir de médulas espinales diseccionadas de ratas (14-15 día embriónico) mediante técnicas estándar de disociación con tripsina [Smith y col., J. Cell Biology 10: 1.608-1.621 (1985)]. Las células fueron plaqueadas a 6 x 10^{5} células/cm^{2} en pocillos de plástico para cultivo tisular, recubiertos con poli-L-ornitina, en medio N2 sin suero, suplementado con 0'05% de albúmina de suero bovino (BSA) [Bottenstein y col., PNAS USA 76:514-517 (1979)]. Los cultivos fueron incubados a 37ºC en una atmósfera humidificada de 5% de CO_{2}/95% de aire, durante 48 horas. Se midió la actividad de la CAT después de 2 días in vitro, utilizando una modificación del procedimiento de Fonnum [Fonnum, J. Neurochem. 24:407-409 (1975)] según McManaman y col. y Glicksman y col. [McManaman y col., Developmental Biology 125:311-320 (1988); Glicksman y col., J. Neurochem. 61:210-221 (1993)].

Ejemplo III(A)(2)

Ensayo de actividad de la CAT en cerebro basal anterior

Se ensayaron pirrolocarbazoles fusionados por su capacidad para aumentar la actividad de la CAT de cultivos de cerebro basal anterior. Se descubrió que los pirrolocarbazoles fusionados aumentan la actividad de la CAT en cultivos de cerebro basal anterior (Tabla III; "N.E." = no ensayado). Los cultivos de control no recibieron un pirrolocarbazol fusionado.

TABLA III Pirrolocarbazoles fusionados estimulan la actividad de la CAT en cerebro basal anterior

12

Métodos: Se disoció el cerebro basal anterior de embriones de rata (embriones de 17 ó 18 días), y las células fueron disociadas con una proteasa neutra (Dispase™, Collaborative Research). Las neuronas fueron plaqueadas a una densidad de 5 x 10^{4} células/pocillo (1'5 x 10^{5} células/cm^{2}) en placas recubiertas con poli-L-ornitina y laminina. Las células fueron cultivadas en medio N2 sin suero, conteniendo 0'05% de BSA, a 37ºC en una atmósfera humidificada, 5% de CO_{2}/95% de aire. Se valoró la actividad de la CAT 5 días después de plaquear, utilizando el ensayo CAT descrito en el Ejemplo III(A)(1).

Ejemplo III(A)(3)

Ensayo de la extensión de neuritas del GRD

Los pirrolocarbazoles fusionados estimularon la excrecencia de la fibra nerviosa (esto es, neurita) en cultivos de explante (esto es, primarios) de neuronas del ganglio de la raíz dorsal de pollito. La excrecencia de las fibras nerviosas del ganglio de la raíz dorsal (esto es, el GRD) aumentó cuando se añadió a cultivos un pirrolocarbazol fusionado, a una concentración de 200nM (Tabla IV). Los cultivos de control constaban de: 1) no añadido FCN o pirrolocarbazol fusionado ("Control"), o 2) 50 ng/ml de FCN, una neurotrofina conocida por estimular la extensión de neuritas en cultivos de GRD ("FCN").

TABLA IV Pirrolocarbazoles fusionados estimulan la extensión de neuritas del GRD

13

Métodos: se diseccionaron ganglios de la raíz dorsal de embriones de pollito (9º día embriónico), y se plaquearon los ganglios individuales en placas recubiertas con poli-L-ornitina y laminina. Se añadió un pirrolocarbazol fusionado, o 50 ng/ml de FCN, a cultivos independientes después de dejar un periodo de unión celular de 1-2 horas. Se cultivaron explantes durante 48 horas en medio N2, sin suero, suplementado con 0'05% de BSA [Bottenstein y col., PNAS USA 76:514-517 (1979)]. Los cultivos fueron mantenidos a 37ºC en una atmósfera humidificada, 5% de CO_{2}/95% de aire. Se valoró la excrecencia de las fibras nerviosas mediante la densidad y longitud de las neuritas. Para aquellos especializados en la técnica debería ser evidente que los ensayos de la extensión de neuritas son semicuantitativos, y suponen una comparación visual entre los cultivos celulares neuronales de control y experimentales [Alberts y col., Molecular Biology of the Cell, 2ª ed. Garland Publishing, Inc., Nueva York (1989)].

Ejemplo III(A)(4)

Ensayo de intensificación de la actividad de la neurotrofinas

Se ensayaron pirrolocarbazoles fusionados por su capacidad para aumentar la actividad de la neurotrofina NT-3 en cultivos de cerebro basal anterior. Se ensayó la actividad de la CAT como medida de la función y supervivencia de las neuronas colinérgicas. La concentración de NT-3 (100 ng/ml) utilizada en estos experimentos aumentó la actividad de la CAT sobre los cultivos de control (no tratados con NT-3 o un pirrolocarbazol fusionado) en un 40%. Los compuestos I-1, I-6, I-7, y Ia-1 intensificaron cada uno la actividad de la CAT en presencia de una concentración de 100 ng/ml de NT-3. Cuando estos compuestos fueron añadidos cada uno solo a neuronas del cerebro basal anterior, en ausencia de NT-3, no hubo efecto en la actividad de la CAT. El aumento en actividad de la CAT fue mayor que el provocado por solamente NT-3, como se indica en el gráfico de barras presentado en la Fig. 1.

Métodos: se prepararon cultivos de cerebro basal anterior de ratas embriónicas (día embriónico 17) y se disociaron con la proteasa neutra Dispase™. Las células fueron plaqueadas a una densidad de 4 x 10^{5} células/cm^{2}, en placas de plástico de cultivo tisular recubiertas con poli-L-ornitina, en una mezcla de medios DMEM y F12 (50/50 v/v, GIBCO) suplementados con 5% de suero de caballo y 0'5% de suero bovino fetal. Las células fueron incubadas a 37ºC en una atmósfera humidificada de 5% de CO_{2}/95% de aire, durante 5 días. Se midió la actividad de la CAT como se describe en el Ejemplo III(A)(1).

Se produjo NT-3 recombinante de rata utilizando un vector de expresión de baculovirus recombinante, bajo el control del promotor del virus de la poliedrosis [Fraser, In Vitro Cell. and Dev. Biol. 25:225-235 (1989)]. El plásmido pXM-NT3 [Hallbook y col., Neuron 6:845-858 (1991)], que contenía el clon de ADNc de NT-3, fue proporcionado por el Dr. Ira Black (Universidad de Medicina y Odontología de New Jersey, Piscataway, NI). El ADNc de NT-3 fue subclonado en del vector de transferencia pVL1392 (In Vitrogen Corp., San Diego, CA) para producción del virus recombinante. El baculovirus recombinante fue producido como se describe en Meyer y col. [Meyer y col., J. Neurochem 62:825-833 (1994)].

Ejemplo III(A)(5)

Ensayo de supervivencia de neuronas del GRD

Los pirrolocarbazoles fusionados estimularon la supervivencia neuronal del ganglio de la raíz dorsal (GRD) en cultivos de neuronas del GRD de pollito. Se midió la supervivencia celular mediante la captación de calceína-AM, un análogo del colorante viable, diacetato de fluoresceína. La calceína es absorbida por células viables, y escindida intracelularmente en sales fluorescentes que son retenidas por las membranas intactas de las células viables. Los recuentos microscópicos de neuronas viables se correlacionan directamente con valores de fluorescencia relativos obtenidos con el ensayo de viabilidad fluorimétrico. Así, este método proporciona una medición fidedigna y cuantitativa de la supervivencia celular en la población celular total de un cultivo dado [Bozyczko-Coyne y col., J. Neur. Meth. 50:205-216 (1993)].

La supervivencia neuronal del ganglio de la raíz dorsal fue intensificada por pirrolocarbazoles fusionados, siendo observada actividad a 100-500 nM (Tabla V). Todos estos análogos fueron también activos incrementando la actividad de la CAT de la médula espinal [ver Ejemplo III(A)(1), Tabla II]. El examen microscópico de las neuronas del ganglio de la raíz dorsal, estimuladas con los seis compuestos activos, indicó también excrecencia intensificada de las fibras nerviosas.

TABLA V Pirrolocarbazoles fusionados estimulan la supervivencia de neuronas del GRD

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Métodos: se diseccionaron ganglios de la raíz dorsal de embriones de pollito de 9 días de edad embriónica, y se prepararon células disociadas mediante disociación posterior con Dispase (proteasa neutra, Collaborative Research). Las neuronas fueron sembradas a baja densidad (3 x 10^{4} células/cm^{2}) en placas de 96 pocillos recubiertos con poli-L-ornitina y laminina. Las células fueron cultivadas durante 48 horas en medio N2 sin suero (Bottenstein y Sato, 1979) a 37ºC en una atmósfera humidificada, 5% de CO_{2}/95% de aire. Se valoró la supervivencia celular a las 48 horas, utilizando el ensayo fluorimétrico viable descrito antes.

B. Inhibición de la actividad enzimática

Es conocida y documentada la capacidad del indolocarbazol K-252a, por ejemplo, para inhibir la actividad de la proteína quinasa C ("PQC"). Se ha sugerido la inhibición de la actividad de la PQC como un enfoque para inhibir, mediar, reducir y/o prevenir diversos estados de enfermedad, incluyendo enfermedades inflamatorias, estados de alergia y cancerosos, como se indica en las referencias representativas siguientes: Patente U.S. N^{os} 4.877.776 y 4.923.986; Especificación de Patente Europea publicada 558.962 (publicada el 8 de septiembre de 1993, en el nombre de E. R. Squibb & Sons. Inc.); Tadka, T. y col., 170(3) Biochem. Biophys. Res. Comm. 1.151, 1980). Las tirosina quinasas, de las que la trk es un miembro, son enzimas que catalizan la transferencia del fosfato \gamma del ATP hacia el grupo hidroxilo de la tirosina en muchas proteínas clave. Las proteínas tirosina quinasas activadas han sido identificadas como los productos de aproximadamente la mitad de los oncogenes conocidos (ver Chang, C-J & Geahlen, R.L. 55(11) J. Nat. Prods. 1.529, 1992). Se ha expuesto que inhiben, median, reducen y/o previenen diversos estados cancerosos vía la inhibición de proteínas quinasas.

Debido a la importante asociación entre la actividad de las proteínas quinasas y ciertas enfermedades y trastornos, nuestros pirrolocarbazoles fusionados encuentran utilidad también en los marcos de investigación y terapéutico. Por ejemplo, en un entorno de investigación, los compuestos se pueden utilizar en el desarrollo de ensayos y modelos para el incremento adicional de la comprensión de los papeles que la inhibición de las proteínas quinasas (por ejemplo, PQC, tirosina quinasa trk) juega en los aspectos mecanísticos de los trastornos y enfermedades asociados. En un marco terapéutico, los compuestos que inhiben estas actividades enzimáticas pueden ser utilizados para inhibir las consecuencias nocivas de estas enzimas con respecto a trastornos tales como el cáncer.

Como demostramos en los Ejemplos de esta sección, la inhibición de la actividad enzimática utilizando nuestros compuestos puede ser determinada empleando los ensayos siguientes:

1. Ensayo de Inhibición de la Actividad de la PQC.

2. Ensayo de Inhibición de la Actividad de la Tirosina Quinasa trkA.

Ejemplo III(B)(1)

Ensayo de inhibición de la actividad de la PQC

Los pirrolocarbazoles fusionados inhibieron la actividad de la proteína quinasa C (Tabla VI). Ha sido revelado el ensayo de la proteína quinasa C [Murakata y col., Patente U.S. 4.923.986; Kikkawa y col., J. Biol. Chem. 257:13.341-13.348 (1982)]. El ensayo se realizó con varias concentraciones de pirrolocarbazoles fusionados. Se determinó la concentración a la que la proteína quinasa C fue inhibida el 50% (IC_{50}).

TABLA VI Inhibición de la proteína quinasa C

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Ejemplo III(B)(2)

Ensayo de inhibición de la actividad de la tirosina quinasa trkA

Los pirrolocarbazoles fusionados inhibieron la actividad de la tirosina quinasa trkA, como se determinó mediante ELISA. El trkA es un receptor de alta afinidad para las neurotrofinas. Se añadieron pirrolocarbazoles fusionados a placas de microtitulación de 96 pocillos que fueron previamente recubiertas con un sustrato para fosforilación (fosfolipasa C-\gamma (PLC\gamma)/proteína de fusión pGEX) (ver Rotin y col., 11 EMBO J. 559, 1992). Después, estos compuestos fueron ensayados por su capacidad para inhibir la fosforilación del sustrato mediante la tirosina quinasa trkA. Varios pirrolocarbazoles fusionados inhibieron la actividad de la tirosina quinasa taka, con unos IC_{50} de aproximadamente 20 nM (Tabla VII).

TABLA VII Inhibición de la actividad de la tirosina quinasa trkA

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Métodos: Se recubrieron placas ELISA (Nunc) de 96 pocillos con 100 \mul/pocillo del sustrato (PLC\gamma/proteína de fusión pGEX) para fosforilación (40 \mug/ml) en Tris 20 mM, pH 7'6, ClNa 137 mM, y 0'02% de N_{3}Na, durante la noche a 4ºC. Luego, las placas fueron lavadas tres veces con TBST (Tris 20 mM, pH 7'6, ClNa 137 mM, 0'2% de Tween-20) y posteriormente bloqueadas con albúmina de suero bovino (BSA) al 3% en TBST, durante 1 hora a 37ºC. Las placas fueron lavadas tres veces con TBST, seguido por dos lavados con TBS (TBST sin Tween-20). Después, se añadieron pirrolocarbazoles fusionados, a diversas concentraciones, a una mezcla de reacción (HEPES 50 mM, pH 7'4, Cl_{2}Mn 5 mM, Cl_{2}Mg 5 mM; ClNa 140 mM, ATP 16 \muM, y 15 ng de trkA en un volumen total de 100 \mul). Como control negativo, en la solución de reacción se incluyó EDTA 100 mM. Luego, las placas fueron incubadas a 37ºC durante 15 minutos. Se añadió el anticuerpo de detección, anticuerpo monoclonal antifosfotirosina (UBI), a una dilución de 1:2.000 en TBST, y se incubó durante 1 hora a 37ºC. Luego, se lavaron las placas tres veces con TBST, seguido por una 1 hora de incubación, a 37ºC, con cabra anti-IgG de ratón marcado con fosfatasa alcalina [1:2.000 en TBST (Bio-Rad)]. Después de lavar tres veces con TBST, seguido por dos lavados con TBS, se produjo un producto coloreado utilizando NADPH como sustrato para fosfatasa alcalina, y las reacciones de acoplamiento de diaforasa y alcohol deshidrogenasa (sistema de amplificación ELISA GIBCO-BRL). El producto coloreado fue leído a 490 nm en un lector de microplacas (Biotek).

C. Inhibición de la inducción de una respuesta asociada con inflamación

Los interferones humanos (IFNs) denominados alfa (IFN\alpha), beta (IFN\beta) y gamma (IFN\gamma) inducen sus respuestas biológicas en células a partir de dos diferentes receptores celulares superficiales, un primer receptor para IFN\alpha e IFN\beta, y un segundo receptor para IFN\gamma. Es necesaria la transcripción de genes específicos de IFN para las posteriores respuestas biológicas inducidas por los IFN. Los receptores para IFN no tienen actividad quinasa conocida, pero la unión del específico IFN con su receptor estimula la fosforilación de proteínas intracelulares; cuando estas proteínas son fosforiladas, ellas rápidamente se translocan al núcleo e inician la transcripción de genes específicos de IFN.

Muchas respuestas biológicas inducidas por los IFN, esto es, la inhibición de la replicación viral, la inhibición del crecimiento tumoral, etc., son beneficiosas para el animal. Sin embargo, algunas de las respuestas biológicas de los IFN\gamma son perjudiciales. Por ejemplo, cuando se dan exógenamente, el IFN\gamma exacerba los síntomas de la esclerosis múltiple y la artritis reumatoide; también se cree que el IFN\gamma endógeno juega un papel al exacerbar los síntomas de estas enfermedades. Además, también se cree que el IFN\gamma juega un papel eminente (causativo y negativo) en la sepsis y la inflamación general.

La indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO) es una enzima que inicia la degradación del triptófano en la ruta de la quinurenina en macrófagos, monocitos y astrocitos. La ruta de degradación del triptófano, así como el sistema de interferones, son relativamente inactivos en células bajo condiciones fisiológicas normales. El ácido quinolínico, presente normalmente en cantidades muy bajas no perjudiciales, se deriva de la degradación del triptófano. Se ha propuesto que el ácido quinolínico es neurotóxico por sobreestimular los receptores de glutamato (NMDA), produciendo la afluencia de Ca^{++} y la posterior muerte de las neuronas positivas a los receptores NMDA. Se ha propuesto que algunas enfermedades cerebrales inflamatorias están causadas por un exceso de ácido quinolínico. Bajo situaciones patológicas, el IFN\gamma incrementado en respuesta a tales situaciones puede inducir la IDO, activando de ese modo la ruta de degradación del triptófano, aumentando de este modo los niveles de ácido quinolínico, produciendo la muerte de neuronas (ver Heyes, M. P. y col., 115 Brain 1249, 1992). Se han reportado niveles elevados de ácido quinolínico en diversos trastornos cerebrales inflamatorios, incluyendo el VIH, la enfermedad de Lyme, el trauma craneal, el choque, las enfermedades autoinmunes y la sepsis (ver 259 Science 25, 1993).

El K-252a y la estaurosporina inhiben la transcripción de genes de IFN\alpha, y esta inhibición de la transcripción no está asociada con la inhibición de la proteína quinasa C. Esto se evidenció mediante el tratamiento prolongado de células con TPA, el cual eliminaba toda la PQC detectable mediante análisis inmunoblot, pero no la transcripción inducida por IFN\alpha y la inhibición de los mismos por K-252a y estaurosporina (ver Kessler y Levy 266 IBC 23471, 1991; ver también Schindler y col., 257 Science 809, 1994). También se ha sugerido que el K-252a tiene efectos antiinflamatorios y antialérgicos in vivo (ver Ohimori, K. y col., 38(1), 6 Drug Res 809, 1988).

Dada la asociación nociva entre la IDO y el ácido quinolínico, y las implicaciones del ácido quinolínico con algunos estados patológicos, los agentes que sean capaces de inhibir la inducción de IDO por IFN\gamma son útiles en un entorno de investigación donde los compuestos que inhiban la inducción de IDO puedan ser radiomarcados para determinar su identidad, aislar y purificar células a las que se unen estos compuestos, y que estén implicados en la cascada de inflamación. En un marco terapéutico, los compuestos que inhiban tal inducción pueden ser utilizados para inhibir, mediar, prevenir y/o tratar enfermedades y trastornos tales como la sepsis, la esclerosis múltiple, la artritis reumatoide, y las enfermedades por inflamación crónica.

Ejemplo III(C)(1)

Inhibición de la inducción por IFN\gamma de ARNm de IDO

Los pirrolocarbazoles fusionados, de acuerdo con nuestra invención, fueron ensayados por una actividad farmacológica que constase de su capacidad para inhibir la inducción por IFN\gamma de ARNm de indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO) en células THP-1, una línea celular de monocitos humanos.

Cultivo Celular: Se cultivaron células THP-1 (American Type Culture Collection, Rockville, MD), una línea celular de leucemia monocítica humana, en medio RPMI 1640 (Mediatech, Herndon Valley, VA) con 50 \muM de 2-mercaptoetanol y 10% de suero bovino fetal. Las células fueron plaqueadas en matraces de cultivo T75 a 4 x 10^{4} células/cm^{2} en 10 ml de medio, y fueron tratadas inmediatamente con pirrolocarbazoles fusionados a diversas concentraciones. Después de 30 minutos, se añadió IFN\gamma (E. coli) recombinante (Boehringer Mannheim Corporation, Indianápolis, IN), a 200-400 unidades/ml. Se incubaron las células (37ºC, 5% de CO_{2}/95% de aire) durante 48 horas después del tratamiento.

Aislamiento de ARN: Las células fueron sedimentadas por centrifugación (50 x g, 7 min.) y se decantó el medio. Después, se lavaron las células dos veces con salino tamponado con fosfato (PBS) (Mediatech, Herndon Valley, VA), pH 7'2. Las células en el sedimento lavado fueron lisadas en 2 ml de RNAzol B (Tel-Test, Inc., Friendswood, TX). El ARN fue aislado por extracción con cloroformo, precipitado, y lavado siguiendo el protocolo "RNAzol B isolation of RNA" que acompaña a este producto. Luego, se solubilizó el ARN en H_{2}O, y se determinaron la concentración y pureza leyendo la absorbancia a A_{260} nm y A_{280} nm. Finalmente, el ARN fue vuelto a precipitar en etanol, durante la noche a -20ºC.

Sondas de ADNc: Se recibió ADNc de indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO) de Sohan L. Gupta, Ph. D. (Hipple Cancer Research Center, Dayton, OH) (ver Da., W. & Gupta, S.L., 168 Biochem. Biophys. Res. Commun. 1, 1990; y Hassanain, H. H. y col., 268 J. Biol. Chem. 5077, 1993). Se obtuvo ADNc de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) a través de American Type Culture Collection (Rockville, MD). Estos ADNc fueron producidos y purificados utilizando métodos estándar (ver, Sambrook, Fritsch, Maniatis (1989) Molecular Cloning a Laboratory Manual/Second Edition 1, 1.21-1.24, 1.74-1.81; "Maniatis a" de ahora en adelante en este Ejemplo) utilizando juegos de purificación de plásmidos Qiagen (Qiagen Inc., Chatsworth, CA). Se determinaron la concentración y la pureza del ADN mediante absorbancia a 280 nm y 260 nm. Se cortaron inserciones específicas de ADN mediante métodos estándar utilizando enzimas de restricción, y posteriormente se separaron en geles de agarosa como en Maniatis (ver, Sambrook, Fritsch, Maniatis (1989) Molecular Cloning a Laboratory Manual/Second Edition 1, 6.9-6.15; "Maniatis b" de ahora en adelante en este Ejemplo). Las sondas de ADNc fueron además purificadas para marcaje [^{32}P] utilizando el juego de purificación de ADN Geneclean II (BIO 101, Inc., La Jolla, CA). Las sondas fueron marcadas con dCTP-\alpha-^{32}P (Amersham Corp., Arlington Heights, IL) por marcaje aleatorio del cebador, utilizando el Sistema de Marcaje Prime-a-Gene (Promega Corp., Madison, WI).

Análisis y Cuantificación de ARNm: Se detectó el ARNm de IDO mediante análisis Northern (ver Maniatis a, p. 7.39-7.51) utilizando métodos estándar. Después de la separación por electroforesis en geles de agarosa al 1% conteniendo formaldehído, se transfirió el ARN a una membrana de transferencia de nylon Magnagraph (Micron Separations Inc., Westboro, MA). Después, los blots fueron hibridados con ADNc de IDO marcado con [^{32}P] (Hipple Cancer Research Center, Dayton, OH) según métodos estándar (ver Maniatis a, p. 7.52), lavados y colocados en casetes de Phosphorimager durante 1 a 4 días. La cuantificación del ARNm de IDO se llevó a cabo utilizando un Phosphorimager (Molecular Dynamics), en la que la densidad (esto es, la cantidad de ARN) está expresada como unidades relativas del Phosphorimager. Los blots fueron posteriormente sondados para ARNm de gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) (ATCC, Rockville, MD), y ARNm que no cambia con el tratamiento con IFN\gamma. La medición del ARNm de GAPDH, mediante cuantificación con Phosphorimager de los Northern blots, sirve como un medio para normalizar las diferencias potenciales, muestra a muestra, en la cantidad de ARN total cargada en geles. La proporción resultante de ARNm de IDO/ARNm de GAPDH está expresada en la Tabla VIII como porcentaje de la proporción observada en células inducidas con IFN\gamma (definida con 100%).

TABLA VIII

17

D. Inhibición del crecimiento celular asociado con estados hiperproliferativos

Aunque el factor de crecimiento nervioso (FCN) es una proteína neurotrófica que juega un papel crucial en el desarrollo y mantenimiento de las neuronas sensoriales y simpáticas, existe la evidencia creciente de que el FCN, además de acciones dentro del sistema nervioso, posee algunos efectos biológicos en células del compartimiento inmunoinflamatorio. Se piensa que los queratinocitos, las células más numerosas en la epidermis, son cruciales para las respuestas inflamatorias cutáneas (Barker, JNWN y col., 337 Lancet 211, 1991); la psoriasis, un trastorno caracterizado por hiperproliferación queratinocítica, la infiltración celular inflamatoria, y la alteración de ciertas citoquinas (Jablonaka, S. y col., In: Roencgk, H. H., Miaback H. (eds.) Psoriasis Dekker, Inc., Nueva York, NY 1991; págs. 261-342). El FCN está también reportado por activar la mayoría de las células y linfocitos T, los cuales invaden la lesión psoriática; la interleuquina 6, también expresada en altos niveles en la piel psoriática y que también estimula la proliferación de queratinocitos humanos, puede intensificar la secreción de FCN (ver Grossman, RM y col., 86 PNAS 6367, 1989; y Frei, K. y col., 19 Eur. J. Immunol. 689, 1989). Recientemente, se informó que el FCN estimula la proliferación de queratinocitos humanos en un cultivo, y que el K-252a previene tal proliferación (ver Pincelli, C. y col., 103(1) J. Invest. Derma. 13, 1994).

En marcos terapéuticos, los pirrolocarbazoles fusionados se pueden utilizar provechosamente para inhibir la hiperproliferación de queratinocitos, de este modo actuando para inhibir, mediar, invertir y/o prevenir la aparición de un estado psoriático. El empleo de nuestros pirrolocarbazoles fusionados puede ser explotado beneficiosamente en el ruedo de los estados psoriáticos, dada la capacidad del K-252a para inhibir la proliferación de queratinocitos humanos y la conexión entre la hiperproliferación de queratinocitos y la psoriasis; los pirrolocarbazoles fusionados se pueden utilizar para intensificar además la comprensión de la inhibición de los queratinocitos y la relación celular entre, por ejemplo, FCN, queratinocitos y los trastornos ejemplificados por la psoriasis.

Los cánceres, casi universalmente por definición, implican el crecimiento hiperproliferativo de células hacia un estado maligno, produciendo típicamente la formación de tumores. De este modo, hemos investigado la capacidad de nuestros compuestos para llevar a cabo el crecimiento de células de cáncer de próstata como un enfoque ejemplar para definir compuestos que inhiban el crecimiento de células asociadas con un estado hiperproliferativo. Por consiguiente, nuestros compuestos pueden ser utilizados también en este contexto para los caminos de investigación y terapéutico: en un entorno de investigación, los compuestos se pueden utilizar para, por ejemplo, escrutar otros compuestos que también puedan inhibir el crecimiento de células asociadas con estados hiperproliferativos; en un ruedo terapéutico, los compuestos que inhiban beneficiosamente el crecimiento de células específicas, asociadas con enfermedades y/o trastornos específicos, pueden ser explotados ventajosamente en la mediación, tratamiento y/o prevención de tales enfermedades o trastornos.

Ejemplo III(D)(1)

Inhibición del crecimiento de la línea celular de cáncer de próstata utilizando pirrolocarbazoles fusionados

Las células AT-2 son una sublínea celular de cáncer de próstata derivada del tumor Dunning, cortésmente suministra a nosotros por el Dr. John Isaacs (John Hopkins, M.D.). A diferencia de las células tumorales Dunning, las células AT-2 pueden ser cultivadas in vitro.

Métodos: Se plaquearon células AT-2 (7'5 x 10^{4} células/pocillo) en placas de plástico de 96 pocillos para cultivo tisular, en presencia de medio RPMI-1640 conteniendo 10% de suero de ternero fetal, dexametasona 250 nM, glutamina 2mM, piruvato sódico 1 mM, y antibióticos penicilina/estreptomicina. Al siguiente día, se añadieron los compuestos en 4 concentraciones (10, 1, 0'1, 0'01 \muM) para determinar el intervalo aproximado de la IC_{50}. Se ensayaron cultivos, 3 días después, para el número de células utilizando el ensayo MTS [(3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio, sal interior]. El ensayo MTS (comprado como juego a Promega) mide la formación de un formazano hidrosoluble acuoso (detectado mediante un lector de placas a 490 nm) producido por la biorreducción de un compuesto de tetrazolio (MTS) en células metabólicamente activas, vía la succinato deshidrogenasa mitocondrial. Después de determinar la linealidad del tiempo de incubación del sustrato por encima de un intervalo de densidades celulares de plaqueo, la cantidad de producto medida es directamente proporcional al número de células. Se mezclan MTS (333 \mug/ml) y 25 \muM de metosulfato de fenacina y se añaden directamente al medio de cultivo, y se incuban a 37ºC en el incubador con 5% de CO_{2}/95% de aire, durante 0'5-4 horas. Se lee la absorbancia del producto a 490 nm en el lector de placas BIO-TEK. Se obtuvieron valores de fondo de los pocillos conteniendo medio de cultivo con solución de sustrato, pero no células. Además, también se obtuvieron valores de pocillos conteniendo células plaqueadas en el día 0, y ensayadas en el día que se añadió compuesto (día 1) para determinar el número de células en el momento que se añadió el compuesto. Después de que se completó el experimento descubridor de la dosis, se establecieron experimentos posteriores para que hubiera 3 ó más concentraciones próximas a la IC_{50}.

TABLA IX

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E. Inhibición de la muerte de motoneuronas programada desarrolladamente

En el pollito, las motoneuronas somáticas experimentan muerte de origen natural entre los días embriónicos 6 y 10 (E6 y E10) (ver Chu-Wang, IW & Oppenheim, RW 177 J. Comp. Neurol. 33, 1978; y Hamburger, V., 160 J. Comp. Neurol. 535, 1975). Durante este periodo, el número de motoneuronas en las dos caras de la médula espinal lumbar de embriones de pollito en desarrollo disminuye aproximadamente un 50%, desde unas 46.000 hasta unas 23.000.

Como los datos abajo revelan, los pirrolocarbazoles fusionados revelados aquí inhibieron la muerte de origen natural de estas neuronas; tal inhibición ocurrió de una manera dependiente de la dosis.

Ejemplo III(E)(1)

Inhibición de la muerte de motoneuronas in ovo utilizando pirrolocarbazoles fusionados

Se trataron embriones de pollito (E6-E9) con vehículo (5% de Solutol HS 15, BASF Aktiengesellschaft) o concentraciones de I-34 o I-32 como se describió. Las muestras (50 \mul) fueron aplicadas a la membrana corioalantoica vascularizada a través de una ventana en la cáscara del huevo como se describió anteriormente (Oppenheim y col., 1988). Se sacrificaron los embriones el E10 y se extrajeron las médulas espinales, se fijaron con solución Carnoy (10% de ácido acético, 60% de etanol, 30% de cloroformo), se embebieron en parafina, se seccionaron a 8 \mum, y se tiñeron con tionina, como se describió anteriormente (Oppenheim y col., 1988). Se contaron las motoneuronas (identificadas por la morfología y posición) mediante un ciego individual para las condiciones del tratamiento en cada décima sección, según los criterios previamente establecidos (Oppenheim y col., 1982, Oppenheim 1986).

La aplicación diaria de I-34 o I-32 a la membrana corioalantoica de pollitos E6 a E9 in ovo produjo un aumento, dependiente de la dosis, en el número de motoneuronas lumbares supervivientes (Tabla X). Para los compuestos I-34 e I-32, el máximo efecto se logró a una dosis de 0'6 \mug/huevo, produciendo un aumento del 27% y 31%, respectivamente, en la supervivencia de motoneuronas tratadas en embriones tratados frente a tratados con vehículo de control.

TABLA X

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\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 El número de motoneuronas representa recuentos hechos en una cara
de la médula espinal\cr  Prueba de la t de Student: ** p<0'01; *
p<0'05 frente a embriones tratados con vehículo de
control\cr}

IV. Procesos sintéticos para la producción de pirrolocarbazoles fusionados

La invención delinea un método para preparar un pirrolocarbazol fusionado por el anillo D, el método comprendiendo las etapas de:

a): obtener un indol representado por la fórmula general IV, en donde R^{2} es H, SO_{2}R^{9}, CO_{2}R^{9}, o alquilo de 1-4 carbonos, y cada R^{3a} y R^{4a} es H, F, Cl. Br, I, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, NR^{7}R^{8}, -SR^{11}, alquilo, arilo, heteroarilo, -(CH_{2})_{n}SR^{11}, -(CH_{2})_{n}OR^{9}, o -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8};

b): hacer reaccionar dicho indol con una 2-indanona representada por la Fórmula general siguiente:

20

: en donde cada R^{5a} y R^{6a} es H, F, Cl, Br, I, alquilo, arilo, heteroarilo, CN, NO_{2}, OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, CO_{2}R^{9}, SO_{2}R^{9}, SR^{11}, -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{9}, -(CH_{2})_{n}SR^{11}, NR^{7}R^{8}, o -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, y X es un grupo alquileno de 1-3 carbonos (inclusive) o -C(R^{10})_{2}-, bajo condiciones capaces de formar un alcohol 2-(2-cicloalquenil)indolo terciario (Fórmula V) y eliminar el grupo hidroxilo de dicho alcohol para formar el correspondiente 2-(2-cicloalquenil)indol (Fórmula VI),

c): hacer reaccionar dicho 2-(2-cicloalquenil)indol con una imida representada por la Fórmula general siguiente:

21

: en donde R^{1} está definido antes, bajo condiciones que formen un tetrahidropirrolocarbazol representado por la Fórmula general VII,

d): deshidrogenar el anillo tetrahidrocarbazol de dicho tetrahidropirrolocarbazol bajo condiciones que formen un pirrolocarbazol fusionado de Fórmula general VIII.

La invención delinea un método para fabricar isómeros lactama de pirrolocarbazol fusionado por el anillo D, dicho método comprendiendo las etapas de:

a): obtener un pirrolocarbazol fusionado representado por la fórmula general VIII, en donde R^{1}, R^{2}, R^{3a}, R^{4a}, R^{5a}, R^{6a} y X son como se definió antes;

b): reducir el grupo imida de dicho pirrolocarbazol fusionado, bajo condiciones que formen dos isómeros lactama de pirrolocarbazol fusionado representados por las Fórmulas generales IX y X; y

c): separar dicho isómeros bajo condiciones que produzcan isómeros lactama de pirrolocarbazol fusionado, regioespecíficos, sustancialmente puros.

La invención delinea un método para fabricar un isómero lactama de pirrolocarbazol fusionado por el anillo D, regioespecífico, dicho método comprendiendo las etapas de:

a): obtener un compuesto de la Fórmula general XI, en donde R^{2}, R^{3a}, R^{4a}, R^{5a}, R^{6a} son como se definió anteriormente, y X es S, O, CO, alquileno de 1-3 carbonos, -C(R^{10})_{2}-, -CH_{2}Z-, -ZCH_{2}-, o -CH_{2}ZCH_{2}-;

b): hacer reaccionar dicho compuesto con un \beta-cianoacrilato de alquilo inferior, preferentemente \beta-cianoacrilato de etilo, bajo condiciones que formen isómeros del cianoéster de tetrahidrocarbazol representados por las Fórmulas generales XII y XV, en donde R es un grupo alquilo inferior;

c): separar dichos isómeros bajo condiciones que produzcan isómeros del cianoéster de tetrahidrocarbazol regioespecíficos, sustancialmente puros;

d): deshidrogenar por separado el anillo tetrahidrocarbazol de cada uno de dichos isómeros, suficiente para formar los correspondientes cianoésteres de carbazol (Fórmulas XIII y XVI), y

e): hacer reaccionar por separado cada uno de dichos cianoésteres de carbazol, bajo condiciones reductivas, que produzcan independientemente pirrolocarbazoles fusionados regioespecíficos representados por las fórmulas generales XIV y XVII.

La invención delinea un método para fabricar un pirrolocarbazol fusionados por el anillo D, dicho método comprendiendo las etapas de:

a): obtener un indol representado por la fórmula general IV, en donde R^{2}, R^{3a} y R^{4a} son como se definió antes;

b): hacer reaccionar dicho indol con una 2-benzocicloalcanona representada por la fórmula general siguiente:

22

: en donde R^{5a} y R^{6a} son como se definió anteriormente, y X es un grupo alquileno de 1-3 carbonos (inclusive); dicha reacción siendo bajo condiciones que formen un alcohol 2-(2-(1,2,3,4-tetrahidroarilalquil))indolilo terciario, y eliminar el grupo hidroxilo de dicho alcohol para formar el correspondiente 2-(2-cicloalquenil)indol;

23

: en donde R^{1} está definido antes; dicha reacción siendo bajo condiciones que formen un tetrahidroarilalquilpirrolocarbazol representado por la Fórmula general XVIII, y cualquiera de

i): deshidrogenar el anillo D de dicho pirrolocarbazol, bajo condiciones que produzcan el correspondiente pirrolocarbazol fusionado representado por la Fórmula general XIX;

ii): deshidrogenar el anillo E de dicho pirrolocarbazol, bajo condiciones que produzcan el correspondiente pirrolocarbazol fusionado representado por la Fórmula general XX.

La invención delinea un método para fabricar un pirrolocarbazol fusionado por el anillo D, dicho método comprendiendo las etapas de:

a): obtener un estanilindol de alquilo inferior representado por la fórmula general XXI, en donde R^{2} es -CO_{2}H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9} o alquilo; R^{3a} y R^{4} son como se definió anteriormente;

b): acoplar dicho estanilindol de alquilo inferior con un compuesto representado por la siguiente Fórmula general:

24

: en donde R^{5a} y R^{6a} son como se definió antes; X es S, O, CO, alquileno de 1-3 carbonos, -C(R^{10})_{2}-, -CH_{2}Z-, -ZCH_{2}-, y -CH_{2}ZCH_{2}-; e Y es Br, I o -OSO_{2}CF_{3},

: dicho acoplamiento siendo bajo condiciones que formen un indol de fórmula general XXII,

c): hacer reaccionar por separado dicho indol con cualquiera de:

i): una imida representada por la siguiente fórmula general:

25

: o

ii): un \beta-cianoacrilato de alquilo inferior;

: cada una bajo condiciones que formen, independientemente, la correspondiente indoloimida representada por la Fórmula general XXIII; y

d): ciclar dicha indoloimida bajo condiciones que formen un pirrolocarbazol fusionado representado por la siguiente Fórmula general XXIV.

: Lo siguiente se aplica aquí:

: El alquilo inferior tiene 1-4 átomos de carbono.

: El arilo es C_{6}-C_{10}, preferentemente fenilo o naftilo.

: El \beta-cianoacrilato de alquilo tiene 1-8 átomos de carbono en el grupo alquilo.

: El arilalquilo tiene 7-14 átomos de carbono.

: El heteroarilo es un grupo de 3-10 átomos seleccionados de C, O, S y N, con al menos un átomo siendo O, S o N.

: El heteroarilalquilo es un grupo heteroarilo unido a un alquilo de 1-8 átomos de carbono.

: El alquileno tiene 2-8 átomos de carbono.

: El monosacárido es un azúcar de 3, 4, 5, 6 ó 7 carbonos tal como glucosa, ribosa, o rhamnosa.

: El alquilcarboniloxi contiene un grupo alquilo de 1-8 carbonos.

V. Descripción general de los procesos sintéticos

Los compuestos de la invención se preparan mediante los procesos generales descritos a continuación.

Se emplearon dos rutas sintéticas generales para preparar los pirrolocarbazoles fusionados de la invención (Figs. 2 y 3). El Método A (Fig. 2) utiliza un derivado indol (IV) que está no sustituido, o sustituido en 4-7 carbonos (inclusive). Los derivados indol son preparados utilizando metodología estándar [Patente U.S. 3.976.639; Patente U.S. 3.732.245; The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Indoles Parts One and Two; Houlihan Ed., Wiley-Interscience (1972)]. En el Método A (Fig. 2), el 1H-indol o un derivado del mismo es protegido como intermedio de indol-1-carboxilato de litio [Tetrahedron Lett., 26:5.935 (1985)], tratado luego con una base fuerte tal como t-BuLi, alquilado después con un derivado 2-indanona adecuado para dar el correspondiente alcohol terciario V. Los derivados 2-indanona pueden ser preparados utilizando procedimientos previamente descritos [ver Patente U.S. 4.192.888; Patente U.S. 4.128.666; J. Am. Chem. Soc. 89:4.524 (1967), Tetrahedron Lett. 43:3.789 (1974); Chem. Ber. 122:1.791 (1989); Can. J. Chem. 60:2.678 (1982); Helvetica Chimica Acta 70:1.791 (1987); Chem. Pharm. Bull. 33:3.336 (1985); J. Org. Chem. 55:4.835 (1990); Tetrahedron 45:1.441 (1989); Synthesis 818 (1981)]. El alcohol terciario V resultante se trata con un ácido diluido (por ejemplo, ClH 2N en acetona) para dar el correspondiente 2-(2-indenil)indol VI. Alternativamente, el derivado 1H-indol de partida, descrito anteriormente, es transformado en un derivado indol 1-sustituido (IV; R^{2} no es igual a H) mediante metodología estándar, por ejemplo, por tratamiento del 1H-indol con base y un agente alquilante para dar un indol 1-sustituido. En estos ejemplos, el derivado indol puede ser tratado directamente con una base fuerte (por ejemplo, t-BuLi, sec-Buli, n-BuLi, diisopropilamida de litio), seguido por alquilación con un derivado 2-indanona para dar el correspondiente alcohol terciario V, que incluye sustituyentes en la posición uno del anillo indol. La reacción de cicloadición de compuestos de la fórmula general VI con maleimida, preferentemente a temperaturas de 160-200ºC, forma el correspondiente tetrahidrocarbazol VII. Las reacciones de cicloadición de 2-(2-indenil)indoles no han sido descritas anteriormente. Son conocidas las reacciones de cicloadición de 2-vinilindoles con maleimidas (Patente U.S. Nº 4.912.107, y referencias allí dentro). El compuesto VII es deshidrogenado según procesos convencionales con, por ejemplo, 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona, Pd sobre carbón vegetal activado, azufre o nitrito sódico (Patente U.S. Nº 4.912.107 y referencias allí dentro) para dar el correspondiente derivado pirrolocarbazol aromatizado VIII. Las lactamas isómeras de fórmula general IX y X se pueden preparar mediante la reducción de la imida VIII con agentes reductores (por ejemplo, amalgama de zinc, cloruro de hidrógeno gaseoso, amalgama de zinc en ácido acético, zinc en ácido acético glacial, o agentes reductores hidruro tal como hidruro de litio y aluminio). Se separan los regioisómeros mediante procesos estándar tales como recristalización o cromatografía, por ejemplo, cromatografía en columna o HPLC. Las imidas son reducidas a hidroxilactamas, donde A^{1}, A^{2} o B^{1}, B^{2} = H,OH, mediante agentes reductores hidruro tales como borohidruros o hidruros de aluminio (Patente U.S. N^{os} 4.192.107 y 4.923.986, y referencias allí dentro). El grupo hidroxilo resultante es fácilmente transformado en grupos alcoxi o tioalquilo (Patente U.S. Nº 4.923.986). Los derivados en los que A^{1}, A^{2} o B^{1}, B^{2} juntos representen S o N se preparan como se describió en la Solicitud de Patente Europea Nº 0 508 792 A.I.

El Método B (Fig. 3) esboza un nuevo método para la preparación de lactamas de pirrolocarbazoles fusionados isómeras (XIV, XVII). La reacción de cicloadición de un compuesto de fórmula general XI con \beta-cianoacrilato de etilo, a temperaturas de 160-200ºC, produce cianoésteres de tetrahidrocarbazol isómeros (XII y XV). Los isómeros XII y XV son separados en isómeros regioespecíficos mediante recristalización o cromatografía, por ejemplo, cromatografía en columna o HPLC. XII y XV pueden ser deshidrogenados por separado según métodos convencionales, por ejemplo, con 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona, Pd sobre carbón vegetal activado, azufre o nitrito sódico (Patente U.S. Nº 4.912.107 y referencias citadas allí dentro), para dar el correspondiente derivado pirrolocarbazol aromatizado (XIII o XVI). Las lactamas regioespecíficas de las estructuras generales XIV y XVII (Fig. 3) pueden ser preparadas, independientemente, mediante ciclación reductiva de los correspondientes ésteres de nitrilo XIII o XVI, utilizando agentes reductores, por ejemplo, níquel Raney/H_{2}, PdO, o Pd sobre carbono vegetal activado.

Los derivados pirrolocarbazol fusionados de Fórmula I, en la que X = CH_{2}CH_{2}, XIX, o CH=CH, XX, se preparan por los procedimientos descritos para los Métodos A y B (Figs. 2 y 3), excepto que el compuesto 2-indanona fue reemplazado con una 2-tetralona. El compuesto de 2-tetralona se puede preparar utilizando procedimientos estándar [J. Med. Chem. 32:2.128 (1989); J. Med. Chem. 36:2.279 (1993); J. Med. Chem. 36:2.485 (1993); Tetrahedron Lett. 14:951 (1971); J. Org. Chem. 33:4.288 (1986), J. Org. Chem. 26:4.232 (1961); J. Med. Chem. 25:1.358 (1982); Synth. Commun. 21:981 (1991); WO 92/06967, WO 92/16524, y WO 90/15047]. La Fig. 4 muestra un derivado pirrolocarbazol fusionado en el que X es CH_{2}CH_{2} (XVIII). La deshidrogenación parcial de XVIII con 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona en tolueno, a 65ºC, da el correspondiente derivado dihidronaftilo XIX. El tratamiento de XVIII con 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona en dioxano, a temperaturas de reflujo, da el correspondiente derivado naftilo XX completamente deshidrogenado. El reemplazo del compuesto 2-indanona con un derivado 2-benzosuberona [J. Am. Chem. Soc. 13:1.344, (1991), J. Org. Chem. 44:1.342 (1979)] da pirrolocarbazoles fusionados de estructura general I, donde X = CH_{2}CH_{2}CH_{2}. Se pueden preparar derivados cetona, donde X sea C=O, por oxidación de cualquiera de la imida o lactama de I, utilizando reactivos oxidantes estándar (por ejemplo, SeO_{2}, CrO_{3}, CrO_{7}Na_{2}, o MnO_{2}).

Los compuestos en los que X = S, O, o C=O (estructura general XXII) pueden ser preparados mediante reacciones de cicloadición descritas en los Métodos A y B (Figs. 2 y 3). Por ejemplo, los compuestos 2-(2-(1-oxoindenil)indol, 2-(2-benzotienil)indol, 2-(2-indenil)indol, y 2-(2-benzofuranil)indol pueden ser preparados cada uno acoplando 1-carboxi-2-tributilestanilindol (XXI) con 2-bromobenzotiofeno, 2-bromobenzofurano, o 1-oxo-2-(trifluorometanosulfonato)indeno (Fig. 5), utilizando procedimientos estándar publicados [Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 25:508 (1986); J. Am. Chem. Soc. 109:5.478 (1987); Tetrahedron Lett. 37:4.407 (1986)]. La preparación de un carbazol también se logra mediante tratamiento de 2-(2-benzotienil)indol o 2-(2-benzofuranil)indol (XVII, donde X = S u O, respectivamente) con maleimida o \beta-cianoacrilato de etilo, en presencia de un catalizador ácido tal como ácido trifluoracético, lo cual da un compuesto de fórmula general XXIII (Fig. 6). Estos compuestos se pueden ciclar para formar el pirrolocarbazol fusionado correspondiente (estructura general XXIV) mediante tratamiento con un catalizador, por ejemplo, Pd(OAc)_{2}
en ácido acético glacial.

Se utiliza la metodología del acoplamiento cruzado, catalizado por paladio, para preparar otros derivados, por ejemplo, donde X en la Fig. 6 tenga 1-3 carbonos (inclusive), acoplando el derivado 2-(trifluorometanosulfonato) de la correspondiente cetona cíclica con 1-carboxi-2-tributilestanilindol.

Los isómeros lactama de fórmulas generales XIV y XVII, en las que R^{2} es hidrógeno, se pueden alquilar en presencia de base (por ejemplo, hidruros, alcóxidos, hidróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos, o de compuestos de organolitio) por tratamiento con R^{2}L en el que L es un grupo activo tal como un halógeno. El pirrolocarbazol fusionado resultante tiene un grupo alquilo unido al nitrógeno del indol (AU-A-29607 y Patente U.S. Nº 4.912.107). Se puede añadir un grupo azúcar al nitrógeno del indol, como se describió (Solicitud de Patente Europea Nº

\hbox{0 602
597 A2).}

Las imidas de la fórmula general XX, en las que el nitrógeno de la imida está unido mediante hidrógeno, pueden ser transformadas en un grupo R^{1} como se describió para I (Patente U.S. Nº 4.923.986). Los isómeros lactama con derivados que sean otra cosa que R^{1} = H son preparados mediante procesos descritos en el Método A.

Las imidas de la fórmula general I, en la que los sustituyentes R^{3}, R^{4}, R^{5}, o R^{6} sean otra cosa que H, son preparados mediante los procedimientos descritos (Patente U.S. Nº 4.923.986), o utilizando métodos estándar conocidos por aquellos especializados en la técnica de la química orgánica.

Los pirrolocarbazoles fusionados de la fórmula general G, en la que los anillos B y F pueden contener, independientemente, átomos de nitrógeno, oxígeno, o azufre en el anillo, como se definió arriba para E^{1} y E^{2}, se pueden preparar mediante procesos similares utilizados para preparar los análogos carbocíclicos descritos en las fórmulas generales Ia y Ib.

La preparación de derivados en los que el anillo B sea un anillo heterocíclico de 6 miembros, conteniendo nitrógeno, está esbozada en la Figura 8. Un 1H-azaindol (XXVII: N en las posiciones 4, 5, 6, ó 7 de la porción fenilo del indol, utilizado en lugar de un 1H-indol; R = H, R^{3a}, R^{4a}, como se describió anteriormente) sustituido o no sustituido, es protegido como litio-1-carboxilato, seguido por tratamiento con una base fuerte tal como t-butil-litio, alquilado después con un derivado cetona cíclico (por ejemplo 2-indanona o 2-tetralona) para dar el alcohol terciario XXIX (R^{5a}, R^{6a} y X como se describió anteriormente). Los derivados 1H-azaindol pueden ser preparados utilizando procedimientos de la bibliografía descritos previamente [ver J. Org. Chem. 57:6.995 (1992); Bioorg. Med. Chem. Lett. 2.1053 (1992); Heterocycles 34.2.347 (1992), J. Hetero. Chem. 29:359 (1992); Khim. Geterotsikl. Soedin. 1:86 (1979); Khim. Geterotsikl. Soedin. 8:1.135 (1978); J. Hetero. Chem. 6:775 (1969); Tetrahedron 49:2.885 (1993); Chem. Pharm. Bull. 35:1.823 (1987); Khim. Geterotsikl. Soedin. 3.375 (1979); J. Hetero. Chem. 15:325 (1978); Khim. Geterotsikl. Soedin. 1:27 (1970); J. Organomet. Chem. 445:273 (1993); Heterocycles 34:2.379 (1992); J. Chem. Soc. C 11:1.505 (1969); especificaciones de patente publicada WO 94/20497; y WO 94/20459]. El alcohol terciario XXIX resultante se puede tratar con un ácido diluido, por ejemplo ClH 2N en acetona, para dar el producto deshidratado XXX. Los derivados 1H-azaindol (XXVII) de partida anteriormente descritos pueden ser transformados en un derivado azaindol 1-sustituido (R^{2} no H) mediante metodología estándar, por ejemplo por tratamiento del 1H-azaindol con una base y un agente alquilante, para dar un producto 1-sustituido. En estos ejemplos, el derivado azaindol se puede tratar directamente con una base fuerte, seguido por alquilación con un derivado cetona cíclico para dar el correspondiente alcohol terciario XXIX, que incluye sustituyentes en la posición 1 del anillo azaindol. Las reacciones de cicloadición del compuesto de fórmula general XXX con maleimida (Fig. 8) darían compuestos de la fórmula general XXXI. La deshidrogenación del intermedio XXXI, de una manera similar a la preparación de VIII (Fig. 2), daría derivados imida de la fórmula general XXXII (Fig. 8). Los isómeros lactama de las fórmulas generales XXXIII y XXXIV se pueden preparar por la reacción de derivados imida de la fórmula general XXXII con agentes reductores tales como amalgama de zinc-ClH, amalgama de zinc en ácido acético, o agentes reductores hidruro tales como hidruro de litio y aluminio. Se pueden separar los regioisómeros mediante procesos estándar tales como recristalización o cromatografía, por ejemplo cromatografía en columna o HPLC. Las imidas son reducidas a hidroxilactamas donde A^{1}, A^{2} o B^{1}, B^{2} = H, OH, mediante agentes reductores hidruro tales como borohidruros o hidruros de aluminio.

El Método B (Fig. 9) perfila un método alternativo para la preparación directa de isómeros lactama regioisómeros XXXIII y XXXIV. La reacción de cicloadición de un compuesto de fórmula general XXX con \beta-cianoacrilato de etilo daría isómeros de tetrahidrocarbazol XXXV y XXXVI. Los regioisómeros se pueden separar por procesos estándar tales como recristalización o cromatografía, por ejemplo, cromatografía en columna o HPLC. Los isómeros pueden ser separados en esta etapa o en una etapa posterior en el proceso. Se pueden deshidrogenar los isómeros XXXV y XXXVI conforme a métodos convencionales, por ejemplo con 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ), para dar los correspondientes derivados pirrolocarbazol aromatizados de las fórmulas generales XXXVII y XXXVIII. Se pueden preparar isómeros lactama de las fórmulas generales XXXIII y XXXIV mediante ciclación reductiva de los ésteres de nitrilo XXXVII y XXXVIII con agentes reductores, por ejemplo, níquel Raney, PdO, o Pd sobre carbón activado, bajo una atmósfera de hidrógeno.

Los compuestos en los que el anillo B sea un anillo de 5 miembros conteniendo oxígeno o azufre pueden ser preparados partiendo de furil-pirroles o tieno-pirroles respectivamente, en lugar de indoles, siguiendo los esquemas sintéticos perfilados en las Figs. 8 y 9. Se pueden preparar furil-pirroles fusionados por el anillo utilizando procedimientos de la bibliografía anteriormente establecidos, o modificaciones de los mismos [Coll. Czech. Chem. Commun. 53:1.770 (1988); Can. J. Chem. 56:1.429 (1978); C. R. Hebd. Seances Acad. Sci., Ser. C 281:793 (1975)]. Se pueden preparar tieno-pirroles fusionados por el anillo utilizando procedimientos de la bibliografía anteriormente establecidos, o modificaciones de los mismos [especificación de patente belga BE 899925; Ind. J. Chem. 20B:271 (1981); Can. J. Chem. 56:1.429 (1978); Bull. Soc. Chim. Fr. 11-12 pt 2:2.511 (1975); C. R. Hebd. Seances Acad. Sci. Ser. C 277:1.149 (1973)].

Alternativamente, los compuestos en los que el anillo F contenga átomos de nitrógeno en el anillo pueden ser preparados partiendo de derivados piridina fusionados con cicloalcanonas (X = alquileno C_{1}-C_{3}). La síntesis de derivados de cicloalcanona-piridina ha sido descrita en la bibliografía [J. Med. Chem. 36.3381 (1993)], y estos compuestos pueden ser utilizados directamente para preparar intermedios de la estructura general XXXIX (Fig. 10). Los derivados de cicloalquil o cicloalcanona-piridina fusionados por el anillo pueden ser transformados en bromuros de vinilo cíclicos por aquellos especializados en la técnica de la síntesis orgánica. Los intermedios de bromuro de vinilo serían sustratos apropiados para experimentar la metodología del acoplamiento cruzado con estaño descrita en la Fig.
5.

Los compuestos en los que el anillo F contenga un átomo de oxígeno pueden ser preparados partiendo de cicloalcanonas fusionadas con furilo o derivados cicloalquenilo (X = alquileno C_{1}-C_{3}). Los compuestos en los que el anillo F contiene un átomo de azufre pueden ser preparados partiendo de cicloalqueniltiofenos fusionados. Se pueden preparar derivados tienilo y furilo, fusionados por el anillo de cicloalquilo, utilizando procedimientos de la bibliografía descritos anteriormente [Acta Chem. Scand. 25:1.287 (1971); J. Am. Chem. Soc. 103:2.760 (1981)] o modificaciones de los mismos. Estos intermedios pueden ser transformados en furil o tienilciclopentanonas, o furil o tienilciclopentenos. Alternativamente, las materias de partida pueden ser transformadas en los correspondientes bromuros de vinilo cíclicos por aquellos especializados en la técnica de la síntesis orgánica. Los intermedios bromuro de vinilo se pueden utilizar para dar intermedios deseados, utilizando la metodología del acoplamiento cruzado con estaño descrita en la Fig. 5.

Como se muestra en la Fig. 11, los anillos B y F pueden estar simultáneamente sustituidos con heteroátomos. Se puede formar el intermedio XL a partir de un intermedio con el anillo B sustituido con heteroátomos (XXVII) y un intermedio bromuro de vinilo o cetona cíclica, con el anillo F sustituido con heteroátomos, como se muestra en la Fig. 8 y Fig. 5. Los derivados imida y lactama conteniendo heteroátomos en los anillos B y F pueden ser preparados mediante los métodos mostrados en las Figs. 8 y 9. Alternativamente, se puede utilizar la metodología del acoplamiento cruzado catalizado con paladio, descrita en la Fig. 6, para preparar derivados imida de la estructura general XLII (Fig. 12). La reducción de la imida mediante los métodos descritos (Fig. 8) daría isómeros lactama XLIII y XLIV (Fig. 12).

A. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Fig. 2: Síntesis de pirrolocarbazoles fusionados (Método A)

Parte IA

Etapa 1A

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol (Fig. 2 V, R^{2}, R^{3} = H, X = CH_{2})

Se añadió n-BuLi (107'5 mmol, 43 ml de solución 2'5M en hexanos), gota a gota (15 minutos), a una solución (12'0 g, 102'4 mmol) de indol (Fig. 2, I, R^{2}, R^{3} = H) en THF seco (400 ml) a -78ºC (atmósfera de nitrógeno). Se agitó la solución durante 30 minutos, después se pasó CO_{2} (g) a través de la solución durante 10 minutos. Se dejó que la solución transparente calentase a temperatura ambiente, después fue concentrada a presión reducida, hasta la mitad del volumen original. Se añadió THF (200 ml) a la solución reenfriada a -78ºC. En este punto, se añadió t-BuLi (102 mmol, 60 ml de solución 1'7M en hexanos), gota a gota (45 minutos). Se dejó que la solución amarilla resultante agitase durante 2 horas a -78ºC. Después, se añadió, gota a gota (30 minutos), indanona (15'0 g, 112'6 mmol) en THF (100 ml), y se agitó la mezcla durante 1 hora. Se apagó la reacción por la adición de agua (5 ml), la solución resultante fue vertida en solución saturada de ClNH_{4} (250 ml), y extraída después con éter (1 x 200 ml). La capa de éter fue lavada con 100 ml de ClNH_{4} saturado, desecada (SO_{4}Mg), y concentrada a presión reducida para dar un producto oleoso. El producto (V) fue recristalizado en Et_{2}O-hexano para dar 10'5 g de un polvo color canela, con un punto de fusión de 244-245ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'4 (s ancho, 1H), 3'3 (d, 2H), 3'6 (d, 2H), 6'4 (s, 1H), 7'1-7'4 (m, 7H), 7'6 (d, 1H), 8'6 (s ancho, 1H). Análisis calculado para C_{17}H_{15}NO: C, 81'90; H, 6'06; N, 5'62. Encontrado: C, 82'16; H, 6'03; N, 5'58.

Se concentró la solución madre para producir un producto oleoso. La cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 1:2) produjo 2'1 g adicionales de producto, para un rendimiento total de 12'6 g (49%).

Etapa 2A

Preparación de 2-(2-indenil)indol (Fig. 2, VI)

A una solución con agitación de 2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol (Fig. 2, V, R^{2}, R^{3} = H, X = CH_{2}) (4'0 g, 16'1 mmol) en acetona (30 ml) se añadió ClH 2N (10 ml). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadieron unos 20 ml de agua, y se recogió el precipitado por filtración. El filtrado fue lavado bien con agua y desecado para dar 3'6 g (98%) de un producto sólido blanco, con un punto de fusión de 273-274ºC (MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 3'9 (s, 2H), 6'7 (s, 1H), 7'0-7'6 (m, 9H), 8'3 (s ancho, 1H). Análisis calculado para C_{17}H_{13}N: C, 88'28; H, 5'67; N, 6'06. Encontrado: C, 88'11; H, 5'60; N, 5'98.

Etapa 3A

Preparación de 4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7- (5H,7H)diona (Fig. 2, VII, R^{2}, R^{3}, R = H, X = CH_{2})

Se calentó, a 180-190ºC durante 30 minutos, una mezcla de 2-(2-indenil)indol (Fig. 2, VI, R, R^{2}, R^{3} = H, X = CH_{2}) (1'0 g, 4'3 mmol) y maleimida (525 mg, 5'41 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de enfriar la reacción a temperatura ambiente, se añadió MeOH (5 ml). Se recogió el producto (VII) para dar 880 mg (62%) de un producto sólido blanco, con un punto de fusión de 254-255ºC (MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'1-3'4 (m, 2H), 3'8 (m, 2H), 3'95 (t, 1H), 4'35 (d, 1H), 6'9-7'4 (m, 7H), 7'75 (d, 1H), 11'05 (s, 1H), 11'25 (s, 1H).

Ejemplo V(A)(1)

Etapa 4A

Preparación de 6H,12H,13H-indenol[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Fig. 2, VIII, Compuesto I-1)

Se disolvió compuesto VII (Fig. 2, R^{2}, R^{3}, R = H) (800 mg, 2'44 mmol) en tolueno (60 ml). A la solución de tolueno se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (1'4 g, 6'1 mmol) en una porción. La solución fue mantenida a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el producto sólido por filtración, se volvió a suspender en MeOH (20 ml) y se recogió por filtración. El producto (VIII) fue recristalizado en acetona-MeOH para dar 710 mg (90%) de un producto sólido amarillo, con un punto de fusión mayor de 330ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'3 (s, 2H), 7'35 (t, 1H), 7'45-7'65 (m, 4H), 7'75 (d, 1H), 8'95 (d, 1H), 9'1 (d, 1H), 11'15 (s, 1H), 12'3 (s, 1H). MS (FAB): m/e 325 (m+
1)^{+}. Análisis calculado para C_{21}H_{12}N_{2}O_{2}\cdot0'75 H_{2}O: C, 74'65; H, 4'03; N, 8'29. Encontrado: C, 74'40; H, 3'75; N,
8'26.

Ejemplos V(A)(2) y (3)

Preparación de 6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Fig. 2, IX, Compuesto I-3) y 5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Fig. 2, X, Compuesto I-2)

Se fabricó una suspensión con agitación de polvo de Zn (5 g) y cloruro mercúrico (1 g) en 10 ml de agua. Se añadió ácido clorhídrico concentrado (2 ml) gota a gota. Después de 10 minutos, se decantó y eliminó la capa acuosa. La amalgama de zinc obtenida fue lavada en primer lugar con agua, después con EtOH repetidamente. La amalgama de zinc fue suspendida en EtOH (75 ml). Después, se añadió Compuesto VIII sólido (500 mg, 1'5 mmol, R, R^{2}, R^{3} = H, X = CH_{2}) en una porción. Se pasó ClH (g) a través, a medida que la mezcla era mantenida a reflujo durante 2 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se concentró la solución a presión reducida para producir un producto oleoso. Se añadió TFH-AcOEt (200 ml, 1:1) al producto oleoso, y la mezcla fue extraída con una solución saturada de CO_{3}HNa (3 x 100 ml), solución saturada de ClNa (3 x 100 ml), y desecada (SO_{4}Mg) la solución resultante. Se eliminó el agente desecante, y el disolvente fue concentrado a presión reducida para dar un sólido bruto. La purificación mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:MeOH 95:5) produjo 240 mg (50%) de una mezcla 4:1 de Compuesto I-3 y I-2. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'15 (s, 1'6H), 4'25 (s, 0'4H), 4'9 (s, 0'4H), 4'95 (s, 1'6H), 7'2-7'8 (m, 6H), 8'0 (d, 1H), 8'6 (s, 0'8H), 8'8 (s, 0'2H), 9'2 (d, 0'2H), 9'4 (d, 0'8H), 11'8 (s, 0'2H), 11'95 (s, 0'8H). MS (FAB): m/e 311 (m+1)^{+}.

B. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Fig. 3: Síntesis de pirrolocarbazoles fusionados (Método B)

Parte IIB

Etapa 1B

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]indeno[2,3-a]9H-carbazol (XII) y 4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]indeno[2,3-a]9H-carbazol (XV)

Etapa 1: se calentó, a 190ºC con agitación durante 1'5 horas, una mezcla de 2-(2-indenil)indol (VI) (R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2}, 3'5 g, 15'2 mmol) y cis-\beta-cianoacrilato de etilo (10 g, 80 mmol) en un matraz de reacción sellado. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se añadió MeOH (20 ml), y la solución fue enfriada a -20ºC. Se recogió Compuesto XV del filtrado, para dar 1'65 g (31%) de un sólido amarillo claro con un punto de fusión de 270-272ºC (acetona-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'3 (t, 3H), 3'1-3'4 (m, 3H), 3'7 (m, 1H), 3'9 (t, 1H), 4'4 (m, 2H), 4'6 (d, 1H), 6'95-7'2 (m, 6H), 7'3 (d, 1H), 7'45 (d, 1H), 11'3 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1690 (C=O). MS (FAB): m/e 356 (m^{+}).

Se concentró el filtrado XV a presión reducida para dar un producto oleoso viscoso. Se eliminó el exceso de cis-\beta-cianoacrilato de etilo por destilación Kugelrohr (temperatura del horno: 80-85ºC; 0'5 mm). Se añadió éter y el Compuesto XII (R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2}) fue recristalizado del residuo para dar 650 mg (12%) de un sólido blancuzco con un punto de fusión de 206-207ºC (acetona-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'15 (t, 3H), 3'1-3'25 (m, 1H), 3'4-3'5 (m, 1H), 3'8 (q, 1H), 3'9 (m, 1H), 4'05 (t, 1H), 4'2-4'3 (m, 3H), 6'95 (t, 1H), 7'1 (t, 1H), 7'2-7'4 (m, 5H), 7'55 (m, 1H), 11'35 (s, 1H). MS (FAB): m/e = 356
(m^{+}).

Etapa 2B

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-indeno[2,3-a]9H-carbazol (Fig. 3, XIII; R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2})

Se disolvió Compuesto XII (400 mg, 1'12 mmol) en tolueno seco (50 ml). Se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (640 mg, 2'8 mmol) en una porción a la solución agitada. Se agitó la solución a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar en baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, se suspendió el producto en MeOH (20 ml), se recogió y lavó con MeOH frío (10 ml), para dar 355 mg (90%) de un sólido verde claro con un punto de fusión de 292-293ºC (acetona). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'4 (t, 3H), 4'3 (s, 2H), 4'7 (q, 2H), 7'3 (m, 1H), 7'4-7'7 (m, 4H), 7'8 (d, 1H), 8'05 (d, 1H), 8'45 (d, 1H), 12'5 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1710 (C=O). MS (FAB): m/e 353 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{23}H_{16}N_{2}O_{2}: C, 78'39; H, 4'58; N, 7'95. Encontrado: C, 78'61; H, 4'28; N, 7'75.

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Ejemplo V(B)(1)

Etapa 3B

Preparación de 6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Fig. 3, XIV, Compuesto I-3)

Una mezcla de Compuesto XIII (300 mg, 0'85 mmol) y catalizador níquel Raney (aproximadamente 1 g, forma húmeda) en MeOH/THF (125/25 ml) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. La solución resultante fue diluida con THF (50 ml), y filtrada luego a través de celita. El disolvente fue concentrado a presión reducida y el producto purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice; AcOEt:Hex 2:1, R_{f}= 0'3). Se recogieron y concentraron las fracciones de producto para dar un sólido blanco. Este sólido fue triturado con MeOH (10 ml), recogido por filtración y desecado (100ºC, 0'5 mm, 12 horas) para dar 140 mg (53%) de Compuesto I-3, en forma de un sólido blanco con un punto de fusión mayor de 300ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'25 (s, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'2 (t, 1H), 7'35-7'5 (m, 3H), 7'6 (d, 1H), 7'8 (t, 1H), 8'8 (s, 1H), 9'2 (d, 1H), 11'85 (s, 1H). MS (FAB): m/e = 311 (M+1)^{+}. Análisis calculado para C_{21}H_{14}N_{2}O\cdot0'4 H_{2}O: C, 79'42; H, 4'65; N, 8'82. Encontrado: C, 79'54; H, 4'60; N, 8'70.

Etapa 4B

Preparación de 4-ciano-3-etoxicarbonil-indeno[2,3-a]9H-carbazol (Fig. 3, XVI; R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2})

A una solución con agitación de Compuesto XV (1'1 g, 3'1 mmol; R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2}) en tolueno seco (70 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (1'75 g, 7'7 mmol) en una porción. Se agitó la solución a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar en baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, el producto fue suspendido en MeOH (40 ml), recogido y lavado con MeOH frío (10 ml), para dar 975 mg (89%) de un sólido verde claro (XVI; R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2}) con un punto de fusión de 260-263ºC (acetona). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'4 (t, 3H), 4'35 (s, 2H), 4'6 (q, 2H), 7'3-7'5 (m, 3H), 7'55-7'8 (m, 5H), 8'5 (d, 1H), 12'6 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1710 (C=O). MS (FAB): m/e 353 (m+1)^{-}. Análisis calculado para C_{23}H_{16}N_{2}O_{2}: C, 78'39; H, 4'58; N, 7'95. Encontrado: C, 78'77; H, 4'39; N, 7'71.

Ejemplo V(B)(2)

Etapa 5B

Preparación de 6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona

Una mezcla de Compuesto XVI (170 mg, 0'5 mmol) y catalizador níquel Raney (aproximadamente 500 mg, forma húmeda) en MeOH/THF (75 ml, 3:1) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. El disolvente fue diluido con THF (50 ml), y filtrado luego a través de celita. El disolvente fue concentrado a presión reducida, y el producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice; AcOEt:Hex 2:1, R_{f}= 0'3) para dar 115 mg (77%) de un sólido blancuzco (XVII, Compuesto I-2), punto de fusión >300ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'15 (s, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'2-7'5 (m, 4H), 7'65 (d, 1H), 7'7 (d, 1H), 8'0 (d, 1H), 8'6 (s, 1H), 9'4 (d, 1H), 11'95 (s, 1H). MS (FAB): m/e 311 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{21}H_{14}N_{2}O\cdot0'4 H_{2}O: C, 79'42; H, 4'65; N, 8'82. Encontrado: C, 79'61; H, 4'56; N, 8'63.

C. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados halogenados

Parte IIIA

Derivados fluorados

Etapa 1A

Preparación de 5-fluoro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol

Este compuesto fue preparado utilizando sustancialmente el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyó I por 5-fluoroindol.

5-Fluoro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol: rendimiento del 64%, punto de fusión 158-161ºC (desc.) (MeOH-éter). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'2 (s ancho, 1H), 3'35 (d, 2H), 3'6 (d, 2H), 6'4 (s, 1H), 6'95 (t, 1H), 7'2-7'35 (m, 6H), 8'6 (s ancho, 1H). Análisis calculado para C_{17}H_{14}FNO: C, 76'36; H, 5'28; N, 5'24. Encontrado: C, 76'70; H, 5'20; N, 5'08.

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Etapa 2A

Preparación de 5-fluoro-2-(2-indenil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 2A.

5-Fluoro-2-(2-(2-hidroxi)indenil)indol: rendimiento del 95%, punto de fusión 233-236ºC (desc.) (MeOH-éter). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 3'85 (s, 2H), 6'65 (s, 1H), 6'9-7'5 (m, 9H), 8'3 (s, 1H). Análisis calculado para C_{17}H_{12}FNO: C, 81'91; H, 4'85; N, 5'62. Encontrado: C, 81'60; H, 4'75; N, 5'54.

Etapa 3A

Preparación de 3-fluoro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indenol[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 30 minutos, una mezcla de 5-fluoro-2-(2-indenil)indol (365 mg, 1'45 mmol) y maleimida (215 mg, 2'2 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de enfriar la reacción a temperatura ambiente, se añadió CH_{3}OH enfriado con hielo (4 ml). Se recogieron por filtración los cristales resultantes, para dar 275 mg (55%) de producto con un punto de fusión de 272-275ºC (acetona-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'1-3'4 (m, 2H), 3'7-3'8 (m, 2H), 3'95 (m, 1H), 4'3 (d, 1H), 6'9 (m, 1H), 7'1-7'3 (m, 5H), 7'4 (d, 1H), 11'2-11'3 (d, 2H).

Ejemplo V(C)(1)

Etapa 4A

Preparación de 3-fluoro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-7)

A una solución de 3-fluoro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Parte IIIA, Etapa 3) (250 mg, 0'73 mmol) en tolueno (25 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (410 mg, 1'8 mmol) en una porción. La mezcla fue calentada a 45ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, y se volvió a suspender en MeOH (10 ml). El producto fue recogido por filtración y lavado con MeOH frío (1 x 5 ml). La recristalización en THF-MeOH-Et_{2}O dio 215 mg (86% de rendimiento) de Compuesto I-7. El Compuesto I-7 manifestó un punto de fusión mayor de 275ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'25 (s, 2H), 7'35-7'55 (m, 3H), 7'65 (m, 1H), 7'75 (d, 1H), 8'6 (d, 1H), 9'1 (d, 1H), 11'3 (s, 1H), 12'35 (s, 1H). MS (FAB): m/e 343 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(C)(2)

Etapa 5A

Preparación de 3-fluoro-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona y 3-fluoro-5H,6H,12H, 13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-8)

Se fabricó una suspensión con agitación de polvo de Zn (1'3 g) y cloruro mercúrico (200 mg) en agua (3 ml), y se añadió, gota a gota, 0'5 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de cinco minutos, se decantó la capa acuosa. La amalgama de zinc fue lavada en primer lugar con agua, después lavada repetidamente con EtOH. La amalgama de zinc fue suspendida en EtOH (20 ml), y se añadió, en una porción, 75 mg (0'22 mmol) de Compuesto I-7. Se pasó ClH (g) a través de la solución, mientras la solución era mantenida a reflujo durante 1 hora. Después de enfriar a temperatura ambiente, se concentró la solución a presión reducida para dar un sólido bruto. El sólido fue disuelto en THF-AcOEt (100 ml, 1:1) y extraído con CO_{3}HNa saturado (2 x 100 ml), solución saturada de ClNa (3 x 100 ml), y desecado luego (SO_{4}Mg). Se eliminó el agente desecante por filtración, y el disolvente concentrado a presión reducida. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexanos 2:1, R_{f}= 0'3) para dar 20 mg (28% de rendimiento) de la mezcla de Compuesto I-8. La mezcla exhibió un punto de fusión mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'15 (s, 1'34H), 4'25 (s, 0'66H), 4'9 (s, 0'66H), 4'95 (s, 1'34H), 7'2-7'85 (m, 6H), 8'6 (s, 0'67H), 8'85 (s, 0'33H), 8'9 (d, 0'33H), 9'4 (d, 0'67H), 11'95 (s, 0'33H), 12'0 (s, 0'67H). MS (FAB): m/e 329 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(C)(3) (Método B)

Etapa 1B

Preparación de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro[1H]indeno[2,3-a]9H-carbazol

Se calentó, a 180ºC con agitación durante 1'5 horas, una mezcla de 5-fluoro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol (Parte IIIA, Etapa 1A, 1'5 g, 6'0 mmol) y cis-\beta-cianoacrilato de etilo (10'0 g, 80 mmol) en un matraz de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, se añadió MeOH (10 ml), y se enfrió la solución a -20ºC. Se recogió el producto para dar 650 mg (29% de rendimiento) de un sólido color café claro, con un punto de fusión de 301-305ºC (MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'3 (t, 3H), 3'1-3'35 (m, 3H), 3'75 (s, m, 4H), 3'95 (m, 1H), 4'4 (q, 2H), 4'65 (d, 1H), 6'9-7'0 (m, 1H), 7'02-7'4 (m, 6H), 11'4 (s, 1H), IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1690 (C=O).

Etapa 2B

Preparación de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil[1H]indeno[2,3-a]9H-carbazol

A una solución con agitación de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol [Ejemplo V(C)3, Etapa 1B] (400 mg, 1'1 mmol) en tolueno seco (40 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (600 mg, 2'7 mmol) en una porción. La solución fue agitada a 65-70ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, se volvió a suspender el producto en MeOH (20 ml), se recogió nuevamente, se lavó después con MeOH frío (10 ml), para dar 375 mg (92% de rendimiento) de un producto amarillo claro con un punto de fusión de 256-258ºC (acetona). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'4 (t, 3H), 4'3 (s, 2H), 4'7 (q, 2H), 7'0 (m, 1H), 7'1 (m, 1H), 7'15 (m, 1H), 7'4-7'9 (m, 4H), 12'5 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1710 (C=O). MS (FAB): m/e 370 (m)^{+}.

Etapa 3B

Preparación de 3-fluoro-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-12)

Una mezcla de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol [Ejemplo V(C)3, Etapa 2B] (100 mg, 0'27 mmol) y catalizador níquel Raney (aproximadamente 500 mg, forma húmeda) en THF/MeOH (50 ml) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. Se añadió THF (50 ml) y el disolvente se filtró a través de tierra de diatomeas Celite®, y se concentró a presión reducida. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1, R_{f}= 0'3) para dar 15 mg (17% de rendimiento) de Compuesto I-12 en forma de un sólido blancuzco. El Compuesto I-12 exhibió un punto de fusión mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'18 (s, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'3-7'45 (m, 4H), 7'6-7'75 (m, 2H), 7'83 (d, 1H), 8'6 (s, 1H), 9'4 (d, 1H), 12'0 (s, 1H). MS (FAB): m/e 329 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(C)(4)

Preparación de 3-fluoro-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Compuesto I-23)

A una solución con agitación de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol [Ejemplo V(C)3, Etapa 2B] (230 mg, 0'6 mmol) en tolueno seco (25 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (340 mg, 1'5 mmol) en una porción. La solución fue agitada a 65-70ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, el producto fue suspendido en MeOH (20 ml), recogido y lavado con MeOH frío (10 ml), para dar 160 mg (70%) de un sólido amarillo claro. El punto de fusión fue >300ºC (acetona). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'45 (t, 3H, J= 6 Hz), 4'3 (s, 2H), 4'65 (q, 2H, J= 6 Hz), 7'4-7'6 (m, 3H), 7'62-7'68 (m, 1H), 7'75-7'82 (m, 2H), 8'5 (d, 1H, J= 8 Hz), 12'55 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1710 (C=O). MS (FAB): m/e 370 (m)^{+}.

Una mezcla de 6-fluoro-4-ciano-3-etoxicarbonil-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol [125 mg, 0'34 mmol; Ejemplo V(C)3, Etapa 3B] y catalizador níquel Raney (aproximadamente 500 mg, forma húmeda) en THF (50 ml) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. Se añadió THF (50 ml) y la solución fue después filtrada a través de Celite® y concentrada a presión reducida para dar 75 mg de producto bruto. El producto fue purificado mediante HPLC para dar Compuesto I-23 en forma de un sólido blanco. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'26 (s, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'25-7'60 (m, 4H), 7'75-8'05 (m, 2H), 8'83 (s, 1H), 8'9 (d, 1H, J= 10 Hz), 11'88 (s, 1H). MS (FAB): m/e 329 (m+1)^{+}.

D. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados clorados

Parte IIIB

Derivados clorados

Etapa 1A

Preparación de 6-cloro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyó I por 6-cloroindol.

6-Cloro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol: rendimiento (24%); punto de fusión, 202-204ºC (MeOH-éter). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'35 (s, 1H), 3'35 (d, 2H), 3'6 (d, 2H), 6'4 (s, 1H), 7'05 (d, 1H), 7'2-7'4 (m, 5H), 7'45 (d, 1H), 8'6 (s, 1H).

Etapa 2A

Preparación de 6-cloro-2-(2-indenil)indol

6-Cloro-2-(2-indenil)indol: rendimiento (94%); punto de fusión, 215-218ºC (desc.) (MeOH-éter). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 3'9 (s, 2H), 6'65 (s, 1H), 7'0-7'65 (m, 8H),

\hbox{8'25 (s, 1H).}

Etapa 3A

Preparación de 2-cloro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-6H-5,7-(5H,7H)-diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 1 hora, una mezcla de 6-cloro-2-(2-indenil)indol (210 mg, 0'8 mmol) y maleimida (160 mg, 1'7 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de que la mezcla fuese enfriada a temperatura ambiente, se disolvió el producto en MeOH (4 ml). Se añadieron Et_{2}O (5 ml) y hexano (10 ml) para precipitar el producto en forma de un aceite. El aceite solidificó en forma de un producto sólido amarillo al dejar estar. La purificación mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexanos 2:1) dio 200 mg (69% de rendimiento) de producto con un punto de fusión mayor de 225ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'0-3'3 (m, 2H), 3'75 (m, 2H), 3'9 (t, 1H), 4'3 (d, 1H), 6'9-7'3 (m, 6H), 7'7 (d, 1H), 11'2 (s, 1H), 11'35 (s, 1H).

Ejemplo V(D)(1)

Etapa 4A

Preparación de 2-cloro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto Ia-1)

A una solución de 2-cloro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona (250 mg, 0'7 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (400 mg, 1'7 mmol) en una porción. Se agitó la mezcla a 60-65ºC durante 4 horas. La solución fue enfriada en un baño de hielo y el precipitado recogido por filtración. El producto fue resuspendido y triturado con MeOH (10 ml). Se recogió el producto y recristalizó en THF-MeOH-Et_{2}O para dar 210 mg (85% de rendimiento) de Compuesto Ia-1 en forma de un producto sólido amarillo, con un punto de fusión mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'25 (s, 2H), 7'3 (d, 2H), 7'4-7'5 (m, 2H), 7'6 (s, 1H), 7'75 (d, 1H), 8'85 (d, 1H), 9'05 (d, 1H), 11'15 (s, 1H), 12'35 (s, 1H). MS (FAB): m/e 359 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(D)(2)

Preparación de 2-cloro-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona y 2-cloro-5H,6H,12H, 13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto Ia-2)

A una suspensión con agitación de polvo de Zn (1'5 g) y cloruro mercúrico (400 mg) en agua (5 ml) se añadió (gota a gota) 1 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de 10 minutos, se decantó la capa acuosa. La amalgama de zinc fue lavada en primer lugar con agua, después con EtOH repetidamente. La amalgama de zinc fue suspendida en EtOH (25 ml), y se añadió Compuesto II-1 (120 mg, 0'34 mmol) sólido en una porción. Se pasó ClH (g) a través, mientras que la mezcla era mantenida a reflujo durante 4 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se concentró la solución a presión reducida. El residuo fue disuelto en TFH-AcOEt (100 ml, 1:1) y extraído con CO_{3}HNa saturado (2 x 100 ml), solución saturada de ClNa (2 x 100 ml), y desecado (SO_{4}Mg). Se eliminó por filtración el agente desecante, y el disolvente concentrado a presión reducida para dar un sólido bruto. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexanos 2:1, R_{f}= 0'35), para dar 65 mg (56% de rendimiento) de la mezcla de Compuesto Ia-2. La mezcla exhibió un punto de fusión mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'15 (s, 1'6H), 4'2 (s, 0'4H), 4'9 (d, 1H), 7'2-7'5 (m, 3H), 7'55-7'8 (m, 2H), 8'0 (d, 1H), 8'6 (s, 0'8H), 8'8 (s, 0'2H), 9'1 (d, 0'2H), 9'4 (d, 0'8H), 11'95 (s, 0'2H), 12'05 (s, 0'8H). MS (FAB): m/e 345 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(D)(3)

Etapa 1A

Preparación de 5-cloro-2(-2-(2-hidroxi)indanil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyo I por 5-cloroindol.

5-Cloro-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol: rendimiento, 1'7 g (36%); punto de fusión, 254-256ºC (éter-hexano). RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'3 (s ancho, 1H), 3'35 (d, 2H), 3'6 (d, 2H), 6'35 (s, 1H), 7'1-7'4 (d, 6H), 7'6 (s, 1H), 8'6 (s, 1H).

Etapa 2A

Preparación de 5-cloro-2-(2-indenil)indol

5-Cloro-2-(2-indenil)indol: rendimiento, 1'35 g (96%); punto de fusión, 260-263ºC (éter-hexano). RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 3'85 (s, 2H), 6'65 (s, 1H), 7'05 (s, 1H), 7'15 (d, 1H), 7'2-7'35 (m, 3H), 7'4 (d, 1H), 7'5 (d, 1H), 8'25 (s ancho, 1H).

Etapa 3A

Preparación de 3-cloro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 1 hora, una mezcla de 5-cloro-2-(2-indenil)indol (280 mg, 1'1 mmol) y maleimida (200 mg, 2'1 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de que la mezcla fuese enfriada a temperatura ambiente, se añadió MeOH (4 ml). La solución fue enfriada a -20ºC, y se recogió por filtración el producto en forma de un sólido blanco. La recristalización en acetona-MeOH-éter dio 250 mg en forma de un producto sólido blanco (63%). Punto de fusión: 292-293ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'05-3'3 (m, 2H), 3'7-3'8 (m, 2H), 3'95 (m, 1H), 4'3 (d, 1H), 7'0-7'35 (m, 6H), 7'7 (s, 1H), 11'3 (s, 1H), 11'4 (s, 1H).

Etapa 4A

Preparación de 3-cloro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto I-10)

A una solución de 3-cloro-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona (220 mg, 0'61 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (345 mg, 1'52 mmol) en una porción. Se agitó la mezcla a 60-65ºC durante 4 horas. La solución fue enfriada en un baño de hielo y el precipitado recogido por filtración. El producto fue resuspendido y triturado con MeOH (10 ml). Se recogió el producto y recristalizó en THF-MeOH-Et_{2}O para dar 210 mg (96%) de Compuesto I-10 en forma de un producto sólido amarillo. El punto de fusión fue mayor de 320ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 7'4-7'65 (m, 4H), 7'75 (d, 1H), 8'89 (s, 1H), 9'05 (d, 1H), 11'3 (s, 1H), 12'4 (s, 1H). MS (FAB): m/e 359 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{21}H_{11}ClN_{2}O_{2}: C, 69'47; H, 3'19; N, 7'72. Encontrado: C, 69'29; H, 3'04; N, 7'60.

E. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados bromados

Parte IIIC

Derivados bromados y yodados

Ejemplo V(E)(1)

Preparación de 3-bromo-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto I-6)

Se añadió N-bromosuccinimida sólida (55 mg, 0'31 mmol) en una porción a una solución, con agitación, de Compuesto I-1 (100 mg, 0'31 mmol) en THF seco (5 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución oscura fue diluida con AcOEt (5 ml) y lavada secuencialmente con una solución acuosa de S_{2}O_{3}Na_{2} al 5% (1 x 10 ml), agua (1 x 10 ml), solución saturada de ClNa (2 x 10 ml) y desecada (SO_{4}Mg). Se concentró el disolvente a presión reducida para dar 85 mg (68% de rendimiento) de un producto bruto. La recristalización en THF-MeOH dio Compuesto I-6 en forma de polvo amarillo, con un punto de fusión mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'25 (s, 2H), 7'4-7'8 (m, 5H), 9'0-9'05 (d, s, 2H), 11'3 (s, 1H), 12'4 (s, 1H). MS (FAB): m/e 404 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(E)(2)

Preparación de 3-bromo-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Compuesto I-11)

Se añadió N-bromosuccinimida sólida (20 mg, 0'1 mmol) a una solución, con agitación, de Compuesto I-3 [Ejemplo V(B)(1)] (30 mg, 0'1 mmol) en THF seco (5 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 6 horas, se almacenó después a -20ºC durante 24 horas. Se recogió el producto por filtración, para dar 30 mg (80% de rendimiento) de Compuesto I-11 en forma de un producto sólido amarillo claro, con un punto de fusión mayor de 340ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'3 (s, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'35-7'45 (m, 2H), 7'55 (s ancho, 2H), 7'7-7'85 (m, 2H), 8'9 (s, 1H), 9'35 (s, 1H), 12'05 (s, 1H). MS (FAB): m/e 389 (m^{+}). Análisis calculado para C_{21}H_{13}BrN_{2}O\cdot0'4 H_{2}O: C, 63'50; H, 3'33; N, 6'86. Encontrado: C, 63'61; H, 3'51; N, 7'07.

Ejemplo V(E)(3)

Preparación de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9)

Se añadió N-bromosuccinimida sólida (20 mg, 0'1 mmol) a una solución, con agitación, de Compuesto I-2 (30 mg, 0'1 mmol) en THF seco (7 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 6 horas, se almacenó después a -20ºC durante 12 horas. Se recogió el producto por filtración, para dar 32 mg (84% de rendimiento) de un sólido blanco (Compuesto I-9). El Compuesto I-9 exhibió un punto de fusión mayor de 320ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'3-7'5 (m, 2H), 7'6 (s ancho, 2H), 7'7 (d, 1H), 8'15 (s, 1H), 8'6 (s, 1H), 9'4 (d, 1H), 12'15 (s, 1H). MS (FAB): m/e 389 (m^{-}). Análisis calculado para C_{21}H_{13}BrN_{2}O: C, 64'80; H, 3'37; N, 7'20. Encontrado: C, 64'62; H, 3'63; N, 6'72.

Ejemplo V(E)(4)

Etapa 1A

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi-5-bromo)indanil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyo I por 5-bromo-2-indanona.

2-(2-(2-hidroxi-5-bromo)indanil)indol: rendimiento, 500 mg (31%); punto de fusión, 158-160ºC (éter-hexano). RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'3 (s ancho, 1H), 3'25-3'4 (dd, 4H), 6'4 (s, 1H), 7'1-7'4 (m, 6H), 7'6 (d, 1H), 8'6 (s, 1H).

Etapa 2A

Preparación de 2-(2-(5-bromoindenil)indol y 2-(2-(6-bromoindenil)indol

Estos compuestos fueron preparados, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 2A.

2-(2-(5-bromoindenil)indol y 2-(2-(6-bromoindenil)indol; RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 3'8 (d, 2H), 6'7 (s, 0'5H), 6'95 (s, 0'5H), 7'1-7'6 (m, 6H), 8'25 (s ancho, 1H).

Etapa 3A

Preparación de 4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-(5-bromo)indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H, 7H)-diona y 4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-(6-bromo)indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 1 hora, una mezcla conteniendo 2-(2-(5-bromoindenil)indol y 2-(2-(6-bromoindenil)indol (260 mg, 0'84 mmol) y maleimida (125 mg, 1'3 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de que se enfriara la mezcla a temperatura ambiente, se añadió MeOH (4 ml). Se enfrió la solución a -20ºC, y se recogió el producto en forma de un producto sólido blanco.

Etapa 4A

Preparación de 9-bromo-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto Ib-2) y 10-bromo-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona (Compuesto Ia-3)

A una solución de la mezcla conteniendo 4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-5-bromoindeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona y 4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-6-bromoindeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)-diona (240 mg, 0'59 mmol) en tolueno (20 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (335 mg, 1'5 mmol) en una porción. Se agitó la mezcla a 60-65ºC durante 4 horas. La solución fue enfriada en un baño de hielo y el precipitado recogido por filtración. El producto fue resuspendido y triturado con MeOH (10 ml). Se recogió el producto por filtración, y se purificó mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 1:1).

Compuesto Ia-3: R_{f}= 0'45 (isómero 10-bromo). El punto de fusión fue mayor de 300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'3 (s, 2H), 7'3 (m, 1H), 7'5-7'75 (m, 3H), 8'0 (s, 1H). Análisis calculado para C_{21}H_{11}BrN_{2}O_{2}\cdot0'4 H_{2}O: C, 61'45; H, 2'90; N, 6'82. Encontrado: C, 61'39; H, 2'67; N, 6'66.

Compuesto Ib-2: R_{f}= 0'4 (isómero 9-bromo). Punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'3 (s, 2H), 7'35 (m, 1H), 7'55-7'75 (m, 4H), 8'95 (d, 1H), 9'3 (s, 1H), 11'3 (s, 1H), 12'35 (s, 1H). MS (FAB): m/e 404 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{21}H_{11}BrN_{2}O_{2}: C, 62'55; H, 2'75; N, 6'95. Encontrado: C, 62'23; H, 2'71; N, 6'66.

Ejemplo V(E)(5)

Preparación de 3-yodo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-40)

Etapa 1

Preparación de 3-tributilestanil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (50 mg, 0'13 mmol), bis(tributilestaño) (0'065 ml, 0'13 mmol) y trietilamina (10 ml) en DMF (11 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (32 mg). Se calentó la solución a 120ºC, durante 18 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y el disolvente concentrado a presión reducida. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:MeOH 1:2, R_{f}= 0'64) para dar 17 mg (20%). El compuesto fue además purificado por TLC preparativa (gel de sílice, AcOEt:hexano 3:1) para dar el compuesto objeto en forma de un sólido color café claro; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 0'88 (t, 3H), 1'13 (q, 2H), 1'33 (q, 2H), 1'58 (q, 2H), 4'17 (s, 2H), 4'92 (s, 2H), 7'33-7'54 (m, 4H), 7'63-7'71 (m, 3H), 8'0 (s, 1H), 8'54 (s, 1H), 9'42 (d, 1H), 11'92 (s, 1H). MS(m/e) = 600 (m+1)^{-}.

Etapa 2

Preparación de Compuesto I-40

A una solución de 3-tributilestanil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Etapa 1) (16 mg, 0'026 mmol) en CH_{2}Cl_{2} seco (4 ml) se añadió una solución de I_{2} (8 mg, 2 ml de CH_{2}Cl_{2}), gota a gota. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 horas, después se añadió una solución de SO_{3}HNa al 10%. Después de agitar durante 10 minutos, se filtró la mezcla. Se recogió el sólido y se lavó con agua, CH_{2}Cl_{2}, y se desecó a vacío (100ºC, 6 horas) para dar 6 mg (53%) de Compuesto I-40. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'29 (s, 2H), 4'96 (s, 2H), 7'33-7'50 (m, 3H), 7'66-7'79 (m, 2H), 8'29 (s, 1H), 8'62 (s, 1H), 8'42 (d, 1H), 12'08 (s, 1H). MS (m/e) = 437 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(E)(6)

Preparación de 3-(2-yodoetenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-44)

Etapa 1

Preparación de 3-(2-trimetilsililetenil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (400 mg, 1'0 mmol), 2-(trimetilsililvinil)tributilestannano (500 mg, 1'3 mmol) y cloruro de zinc (170 mg, 1'3 mmol) en DMF (5 ml) se añadió cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (7 mg). Se calentó la solución a 100ºC, durante 36 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y el disolvente concentrado a presión reducida. El residuo fue triturado con hexano para dar 470 mg (89%) de un sólido color café claro. Se cromatografió el producto (alúmina neutra, THF:hexano 1:1 hasta THF:hexano 2:1, R_{f}= 0'45), y el compuesto objeto cristalizó en las fracciones recolectadas; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 0'2 (s, 9H), 4'17 (s, 2H), 4'94 (s, 2H), 6'55 (d, 1H, J= 19'1 Hz), 7'12 (d, 1H, J= 19'2 Hz), 7'33-7'45 (m, 4H), 7'56-7'59 (m, 1H), 7'68 (d, 1H, J= 7 Hz), 8'09 (s, 1H), 8'62 (s, 1H), 9'40 (d, 1H, J= 7'6 Hz), 12'01 (s, 1H). MS (m/e) = 431 (m-1)^{-}.

Etapa 2

A un lodo líquido de 3-(2-trimetilsililetenil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Etapa 1) (50 mg, 0'12 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (3 ml) se añadió una solución de yodo (19 mg) en CH_{2}Cl_{2}, gota a gota. La mezcla fue agitada 4 horas a temperatura ambiente, después concentrada a presión reducida. Al residuo se añadió una solución de SO_{3}HNa al 10% (2 ml), y se agitó la solución 20 horas. Se recogió un sólido amarillo y se desecó para dar 35 mg. Un extracto en THF del sólido, después de la evaporación y trituración con MeOH, dio 10 mg de Compuesto I-44 en forma de un sólido amarillo; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'17 (s, 2H), 4'96 (s, 2H), 7'22-7'70 (m, 7H), (m, 1H), 8'10 (s, 1H), 8'63 (s, 1H), 9'40 (d, 1H, J= 7'6 Hz), 12'04 (s, 1H). MS (m/e) = 463
(m+1)^{-}.

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F. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados metilados

Parte IIIC

Derivados metilados

Ejemplo V(F)(1)

Etapa 1A

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi)indanil)-7-metilindol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyo I por 7-metilindol.

2-(2-(2-Hidroxi)indanil)-7-metilindol: rendimiento, 11%; punto de fusión, 199-200ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'3 (s, 1H), 2'55 (s, 3H), 3'4 (d, 2H), 3'6 (d, 2H), 6'4 (s, 1H), 7'0 (m, 2H), 7'2-7'35 (m, 4H), 7'45 (d, 1H), 8'5 (s, 1H).

Etapa 2A

Preparación de 2-(2-indenil)-7-metilindol

2-(2-Indenil)-7-metilindol: rendimiento, 92%; punto de fusión, 204-206ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'6 (s, 3H), 3'85 (s, 2H), 6'7 (s, 1H), 7'0-7'5 (m, 8H), 8'2 (s, 1H).

Etapa 3A

Preparación de 1-metil-12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-6H-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto Ib-1)

Se calentó, a 180-185ºC durante 30 minutos, una mezcla de 2-(2-indenil)-7-metilindol (100 mg, 0'41 mmol) y maleimida (80 mg, 0'82 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se disolvió el producto en CH_{3}OH (5 ml), y precipitó por la adición lenta de éter-hexano (1:2) para producir un sólido amorfo amarillo. Este sólido, 1-metil-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[1,2-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona, en tolueno (20 ml) fue añadido a 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (235 mg, 1'03 mmol) en una porción. La mezcla fue calentada a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se recogió el sólido precipitado. El producto fue suspendido y triturado en MeOH frío, y el precipitado recogido por filtración. El precipitado fue lavado con MeOH frío, y recristalizado en THF-MeOH-Et_{2}O para producir Compuesto Ib-1 en forma de un polvo naranja. El rendimiento fue de 35 mg (25% de rendimiento). El punto de fusión fue mayor de 320ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'65 (s, 3H), 4'35 (s, 2H), 7'2 (t, 2H), 7'35 (d, 1H), 7'4-7'55 (m, 2H), 7'8 (d, 1H), 8'8 (d, 1H), 9'15 (d, 1H), 11'2 (s, 1H), 12'35 (s, 1H). MS (FAB): m/e 339 (m+1)^{+}.

Ejemplos V(F)(2) y (3)

Etapa 1A

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi)indanil)-1-metilindol

Se añadió n-BuLi (6'1 ml de solución 2'5M en hexanos, 15'2 mmol), gota a gota por encima de un periodo de 10 minutos, a una solución de 1-metilindol (2'0 g, 15'2 mmol) recientemente destilado en éter seco (15 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. La solución fue agitada 6 horas a reflujo. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió, gota a gota, 2-indanona (2'2 g, 16'8 mmol) en éter (15 ml). Se agitó la mezcla a reflujo durante 30 minutos, se vertió en ClH 2N (50 ml) y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}(2 x 50 ml). Las capas combinadas de CH_{2}Cl_{2} fueron lavadas con H_{2}O (2 x 50 ml), solución saturada de ClNa (2 x 50 ml), y desecadas (SO_{4}Mg). Se purificó el producto mediante cromatografía en columna (gel de sílice, CH_{2}Cl_{2}) para dar 500 mg (13% de rendimiento) con un punto de fusión de 160-161ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'2 (s, 1H), 3'5 (d, 2H), 3'65 (d, 2H), 4'0 (s, 3H), 7'0-7'6 (m, 9H).

Etapa 2A

Preparación de 2-(2-indenil)-1-metilindol

2-(2-Indenil)-1-metilindol: rendimiento, 95%; punto de fusión, 146-148ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 4'0 (s, 2H), 4'1 (s, 3H), 7'1-7'7 (m, 10H). MS (FAB): m/e 245 (m^{+}).

Etapa 3A

Preparación de 13-metil-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 30 minutos, una mezcla de 2-(2-indenil)-1-metilindol (300 mg, 1'4 mmol) y maleimida (200 mg, 2'1 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió MeOH (5 ml), y los cristales que se formaron fueron recogidos por filtración y lavados con MeOH frío, para dar 335 mg (70% de rendimiento) en forma de un sólido amarillo claro. El punto de fusión fue mayor de 220ºC (acetona-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 1H), 3'4-3'55 (m, 2H), 3'65-3'95 (m, 5H), 4'5 (d, 2H), 7'1-7'5 (m, 7H), 8'1 (d, 1H). MS (FAB): m/e 342 (m^{+}).

Ejemplo V(F)(4)

Etapa 4A

Preparación de 13-metil-6H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto I-4)

A una solución de 13-metil-4c,7a,7b-12a-tetrahidro-6H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (300 mg, 0'9 mmol) en tolueno (25 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (500 mg, 2'2 mmol). Se agitó la mezcla a 60-65ºC durante 4 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración. El sólido fue suspendido en MeOH, recogido y lavado con MeOH frío (5 ml). Se recristalizó el producto en THF-MeOH para dar 260 mg (88% de rendimiento) de Compuesto I-4 en forma de un polvo amarillento. El Compuesto I-4 tiene un punto de fusión mayor de 220ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 3H), 4'6 (s, 2H), 7'3 (t, 1H), 7'4-7'55 (m, 2H), 7'6 (t, 1H), 7'75 (m, 2H), 9'0 (d, 1H), 9'15 (d, 1H), 11'2 (s, 1H). MS (FAB): m/e 338 (m^{+}).

Ejemplo V(F)(5) (Método A)

Preparación de una mezcla de 13-metil-6H,7H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona y 13-metil-5H,6H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-5)

A una suspensión con agitación de polvo de Zn (800 Mg) y cloruro mercúrico (100 mg) en agua (5 ml) se añadió (gota a gota) 0'5 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de 5 minutos, se decantó la capa acuosa. La amalgama de zinc fue lavada en primer lugar con agua, después con EtOH repetidamente. La amalgama de zinc fue suspendida en THF (40 ml), y se añadió Compuesto I-4 sólido [Ejemplo V(A)(3)] (200 mg, 0'6 mmol) en una porción. Se pasó ClH (g) a través, mientras que la mezcla era mantenida a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reacción fue enfriada en un baño de hielo, y se recogió por filtración un precipitado marrón, y se lavó con MeOH (5 ml). La recristalización en THF-éter dio 45 mg (23% de rendimiento) de la mezcla en forma de un producto en polvo, con un punto de fusión mayor de 260ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 3H), 4'6 (s, 1'67H), 4'75 (s, 0'33H), 4'85 (s, 0'33H), 4'90 (s, 1'67H), 7'25-7'45 (m, 3H), 7'55 (t, 1H), 7'65 (d, 1H), 7'75 (d, 1H), 8'0 (d, 1H), 8'55 (s, 0'83H), 8'8 (s, 0'17H), 9'3 (d, 0'17H), 9'5 (d, 0'83H). MS (FAB): m/e 325
(m+1)^{+}.

G. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados metoxilados

Parte VA

Derivados metoxilados

Ejemplo V(G)(1)

Etapa 1A

Preparación de 5-metoxi-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en la Parte IA, Etapa 1A, excepto que se sustituyo I por 5-metoxiindol.

5-Metoxi-2-(2-(2-hidroxi)indanil)indol: rendimiento, 2'9 g (59%); punto de fusión, 139-142ºC (éter-hexano). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'3 (s ancho, 1H), 3'3 (d, 2H), 3'55 (d, 2H), 3'9 (s, 3H), 6'35 (s, 1H), 6'8 (d, 1H), 7'05 (s, 1H), 7'2-7'4 (m, 5H), 8'45 (s ancho, 1H).

Etapa 2A

Preparación de 5-metoxi-2-(2-indenil)indol

5-Metoxi-2-(2-indenil)indol: rendimiento (59%); punto de fusión, 208-210ºC (éter-hexano). RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 3'9 (s, 5H), 6'6 (s, 1H), 6'85 (d, 1H), 7'05 (d, 2H), 7'15-7'3 (m, 3H), 7'4 (d, 1H), 7'45 (d, 1H), 8'15 (s ancho, 1H).

Etapa 3A

Preparación de 6-metoxi-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]indeno[2,3-a]9H-carbazol

Se calentó, a 180ºC con agitación durante 1'5 horas, una mezcla de 5-metoxi-2-(2-indenil)indol (500 mg, 1'9 mmol) y cis-\beta-cianoacrilato de etilo (5'0 g, 40 mmol) en un matraz de reacción sellado. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se añadió MeOH (10 ml), y la solución fue enfriada a-20ºC. Se recogió el producto para dar 175 mg (24%) de un producto sólido color canela claro, punto de fusión de 278-282ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'25 (t, 3H), 3'1-3'35 (m, 3H), 3'8 (s, m, 4H), 3'9 (m, 1H), 4'3-4'55 (m, 2H), 4'6 (d, 1H), 6'7 (d, 1H), 6'95 (s, 1H), 7'05-7'25 (m, 5H), 11'1 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1690 (C=O).

Etapa 4A

Preparación de 6-metoxi-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol

A una solución con agitación de 6-metoxi-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol (125 mg, 0'32 mmol) en tolueno seco (20 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (185 mg, 0'81 mmol) en una porción. La solución fue agitada a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el precipitado por filtración, el producto fue suspendido en MeOH (20 ml), recogido y lavado con MeOH frío (10 ml). Se recristalizó el filtrado en acetona para dar 110 mg (90%) de un producto castaño claro. El punto de fusión fue mayor de 250ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'4 (t, 3H), 3'9 (s, 3H), 4'25 (s, 2H), 4'6 (q, 2H), 7'25 (d, 1H), 7'4 (m, 2H), 7'62 (m, 1H), 7'75 (m, 1H), 7'95 (d, 1H), 12'5 (s, 1H). IR (BrK) cm^{-1}: 2210 (CN); 1710 (C=O). MS (FAB): m/e 370 (m^{+}).

Etapa 5A

Preparación de 3-metoxi-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-13)

Una mezcla de 6-metoxi-4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-[1H]-indeno[2,3-a]9H-carbazol (80 mg, 0'21 mmol) y catalizador níquel Raney (aproximadamente 500 mg, forma húmeda) en THF (50 ml) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. Se añadió THF (50 ml) y el disolvente fue después filtrado a través de Celite® y concentrado a presión reducida. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice; AcOEt:hexano 2:1; R_{f}= 0'3) para producir 76 mg (94%) de Compuesto I-13 en forma de un producto sólido blancuzco. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'9 (s, 3H), 4'15 (s, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'1 (d, 1H), 7'3-7'8 (m, 5H), 8'57 (s, 1H), 9'4 (d, 1H), 11'75 (s, 1H). MS (FAB): m/e 341 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{22}H_{16}N_{2}O_{2}\cdot0'75 H_{2}O: C, 74'66; H, 4'99; N, 7'92. Encontrado: C, 74'46; H, 4'65; N, 7'79.

H. Descripción específica de los procedimientos sintéticos Preparación de derivados de pirrolocarbazoles fusionados teniendo el anillo e expandido

Parte VIA

Derivados con el anillo E expandido

Ejemplo V(H)(1)

Etapa 1A

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi)-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol (Fig. 2, V, R^{2}, R^{3} = H, X = CH_{2}CH_{2})

Se añadió n-BuLi (85'3 mmol, 34 ml de solución 2'5M en hexanos), gota a gota por encima de un periodo de 15 minutos, a una solución de indol (10'0 g, 85'3 mmol) en THF seco (500 ml) a -78ºC (atmósfera de nitrógeno). Se agitó la solución durante 30 minutos, seguido por la adición (mediante burbujeo) de CO_{2} (g) durante 10 minutos. Se dejó que la solución calentase a temperatura ambiente, después concentrada a presión reducida hasta aproximadamente 300 ml. Se añadió THF (200 ml), y la solución fue reenfriada a -78ºC. Después, se añadió una solución de t-BuLi (85'3 mmol, 50 ml de solución 1'7M en hexanos), gota a gota. Se dejó que la solución amarilla resultante agitase durante 2 horas a -78ºC. En lugar de 2-indanona se añadió, gota a gota, 2-tetralona (13'7 g, 12'9 ml, 93'7 mmol), y se agitó la mezcla durante 1 hora. Se apagó la reacción por la adición de agua (5 ml). La reacción fue vertida en una solución saturada de ClNH_{4} (250 ml), y extraída con éter (2 x 200 ml). La capa de Et_{2}O fue lavada con 100 ml de solución saturada de ClNH_{4}, seguido por desecación (SO_{4}Mg), y concentración para dar un aceite. El producto fue recristalizado en MeOH para dar 10 g (45%) de un producto sólido blanco (punto de fusión de 191-192ºC). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'1-2'2 (b, 2H), 2'5-2'65 (m, 1H), 2'9-3'1 (m, 2H), 3'35 (m, 1H), 5'35 (s, 1H), 6'2 (s, 1H), 6'2-7'1 (m, 6H), 7'35 (d, 1H), 7'4 (d, 1H), 11'5 (s, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{17}NO: C, 82'10; H, 6'51; N, 5'32. Encontrado: C, 82'07; H, 6'47; N, 5'18.

Etapa 2A

Preparación de 2-(2-(3,4-dihidro)naftil)indol

A una solución con agitación de 2-(2-(2-hidroxi)-1,2,3,4-(tetrahidronaftil)indol (Etapa 1) (5'0 g, 19'0 mmol) en acetona (150 ml) se añadió ClH 2N (5 ml) a temperatura ambiente. Se agitó la solución durante 1 hora, después se añadió agua (aproximadamente 25 ml). El precipitado fue recogido por filtración, lavado bien con agua, y desecado para dar 4'5 g (97%) de producto purificado. Una muestra fue recristalizada en MeOH para dar producto que exhibió un punto de fusión de 179-180ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2'7 (m, 2H), 2'9 (m, 2H), 6'65 (s, 1H), 6'98 (t, 1H), 7'05-7'15 (m, 6H), 7'35 (d, 1H), 7'5 (d, 1H), 11'35 (s ancho, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{15}N: C, 88'13; H, 6'16; N, 5'71. Encontrado: C, 88'24; H, 6'14; N, 5'61.

Etapa 3A

Preparación de 4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona (Fig. 4, XVIII, A1, A2; B1, B2 = O)

Se calentó, a 180-190ºC con agitación durante 30 minutos, una mezcla de 2-(2-(3,4-dihidronaftil)indol (500 mg, 2'0 mmol) y maleimida (300 mg, 3'1 mmol) en un vial de reacción sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió MeOH (5 ml), el producto fue recogido y recristalizado en MeOH para dar 610 mg (89%) de un producto sólido blanco; punto de fusión de 256-258ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'6-1'75 (m, 1H), 2'15 (d, 1H), 2'9-3'0 (m, 2H), 3'15-3'25 (m, 1H), 3'45 (t, 1H), 3'95 (m, 1H), 4'3 (d, 1H), 7'0-7'4 (m, 7H), 7'8 (d, 1H), 10'8 (s, 1H), 11'15 (s, 1H).

Etapa 4A

Preparación de 12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-14)

A una solución de 4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona (400 mg, 1'2 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (930 mg, 4'1 mmol) en una porción. La solución fue mantenida a 60-65ºC durante seis horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogió el sólido por filtración, se suspendió en MeOH (20 ml), y se recogió el producto por filtración para dar 320 mg (79%) de Compuesto I-14 en forma de un sólido naranja. El punto de fusión fue 258-260ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 2H), 3'1 (m, 2H), 7'3-7'4 (m, 4H), 7'5-7'65 (m, 2H), 8'15 (d, 1H), 8'95 (d, 1H), 11'1 (s, 1H), 12'0 (s, 1H). MS (FAB): m/e 338 (m^{+}). Análisis calculado para C_{22}H_{14}N_{2}O_{2}: C, 78'09; H, 4'17; N, 8'28. Encontrado: C, 77'67; H, 3'96; N, 8'16.

Ejemplo V(H)(2)

Preparación de 6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-diona (Compuesto I-15)

A una solución de 4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona (200 mg, 0'59 mmol) en dioxano seco (30 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (465 mg, 2'1 mmol) en una porción. La solución fue agitada a reflujo durante 12 horas. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, el precipitado fue eliminado por filtración, y el disolvente concentrado a presión reducida. Se calentó el residuo a reflujo en MeOH (25 ml), se enfrió a temperatura ambiente, recristalizó en THF-MeOH, y se recogió el producto para producir 120 mg (61%) de Compuesto I-15 en forma de un sólido marrón. El punto de fusión fue mayor de 330ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 7'4 (t, 1H), 7'6 (t, 1H), 7'7-7'8 (m, 3H), 8'1 (m, 1H), 8'2 (d, 1H), 8'6 (d, 1H), 9'1 (d, 1H), 10'0 (m, 1H), 11'2 (s, 1H), 12'9 (s, 1H). MS (FAB): m/e 336 (m^{+}). Análisis calculado para C_{22}H_{12}N_{2}O_{2}: C, 78'56; H, 3'60; N, 8'33. Encontrado: C, 78'03; H, 3'30; N, 8'12.

Ejemplo V(H)(3)

Etapa 1B

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol y 4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2,3,4-tetrahidro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol

Se calentó, a 180ºC con agitación durante 1 hora, una mezcla de 2-(2-(3,4-dihidro)naftil)indol (Fig. 2, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6},= H, X = CH_{2}CH_{2}; 1'0 g, 4'1 mmol) y cis-\beta-cianoacrilato de etilo (5'0 g, 40 mmol) en un matraz de reacción sellado. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, y se eliminó el exceso de cianoacrilato por destilación Kugelrohr (temperatura del horno: 80-85ºC, 0'5 mm). Se añadió MeOH (25 ml) al residuo, y el producto triturado para dar 700 mg (46%) de un sólido blanco. Los datos de RMN-^{1}H mostraron una mezcla aproximadamente 2:1 de cada uno de los isómeros 4-CN:3-CN. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'25 (t, 3H), 3'1-3'35 (m, 3H), 3'8 (s, m, 4H), 3'9 (m, 1H), 4'3-4'55 (m, 2H), 4'6 (d, 1H), 6'7 (d, 1H), 6'95 (s, 1H), 7'05-7'25 (m, 5H), 11'1 (s, 1H).

Etapa 2B

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol y 4-ciano-3-etoxicarbonil-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol

A una solución con agitación del producto de la etapa precedente (590 mg, 1'6 mmol) en tolueno seco (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (900 mg, 4'0 mmol) en una porción. Se agitó la solución a 65-70ºC durante 6 horas. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y el precipitado eliminado por filtración, y lavado con tolueno (10 ml). La solución de tolueno se concentró a presión reducida para producir un sólido bruto. La purificación mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1) dio 510 mg (87%) de un producto sólido blancuzco. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'15 y 1'4 (t, 3H), 2'9 y 3'1-3'2 (q, 2H), 4'35 y 4'6 (q, 2H), 7'2-7'7 (m, 4H), 7'9 (d, 0'5H), 8'2 (d, 0'5H), 8'4 (d, 1H), 12'2 (d, 1H).

Etapa 3B

Preparación de 12,13-dihidro-6H,7H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Compuesto I-16) y 12, 13-dihidro-5H,6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-17)

La mezcla isómera de la etapa precedente (300 mg, 0'81 mmol) fue añadida a catalizador níquel Raney (aproximadamente 1 g, en forma húmeda) en MeOH (75 ml)/THF (25 ml), y fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. La solución fue diluida con THF (50 ml), filtrada después a través de Celite®. Se concentró el disolvente a presión reducida para dar 210 mg (80%) de producto bruto. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1, R_{f} 5-oxo = 0'3, R_{f} 7-oxo = 0'25). Se recogieron y concentraron las fracciones conteniendo producto, para dar un sólido blanco. Se recristalizó una muestra en MeOH-éter y se desecó (100ºC, 0'5 mm, 12 horas) para obtener la información siguiente:

Compuesto I-16: isómero 5-oxo; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 2H), 3'1 (m, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'1 (t, 1H), 7'3-7'48 (m, 4H), 7'55 (d, 1H), 7'85 (d, 1H), 8'75 (s, 1H), 9'15 (d, 1H), 11'6 (s, 1H). MS (FAB): m/e = 325 (M+1)^{+}. Análisis calculado para C_{22}H_{16}N_{2}O\cdot0'1 H_{2}O: C, 81'01; H, 5'01; N, 8'59. Encontrado: C, 80'83; H, 5'04; N, 8'46.

Compuesto I-17: isómero 7-oxo; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 2H), 3'1 (m, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'2-7'35 (t, 4H), 7'5 (t, 1H), 7'6 (d, 1H), 8'0 (d, 1H), 8'2 (m, 1H), 8'4 (s, 1H), 11'7 (s, 1H). MS (FAB): m/e = 325 (M+1)^{+}. Análisis calculado para C_{22}H_{16}N_{2}O\cdot0'25 H_{2}O: C, 80'34; H, 5'06; N, 8'52. Encontrado: C, 80'16; H, 5'08; N, 8'23.

Ejemplo V(H)(4)

Preparación de 3-bromo-12,13-dihidro-6H,7H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona (Compuesto I-18)

Se añadió N-bromosuccinimida sólida (14 mg, 0'1 mmol) a una solución con agitación de Compuesto I-16 (25 mg, 0'08 mmol) en THF seco (5 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. La solución fue agitada a temperatura ambiente durante 12 horas, concentrada después a presión reducida. La recristalización en MeOH dio 25 mg (81%) de Compuesto I-18 en forma de un sólido blanco. El punto de fusión fue mayor de 300ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 2H), 3'2 (m, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'3-7'45 (m, 3H), 7'5-7'6 (m, 2H), 7'82 (d, 1H), 8'92 (s, 1H), 9'35 (s, 1H), 11'8 (s, 1H). MS (FAB): m/e 403 (m^{+}).

Ejemplo V(H)(5)

Preparación de 3-bromo-12,13-dihidro-5H,6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-19)

A una solución con agitación de Compuesto I-17 (25 mg, 0'08 mmol) en THF seco (7 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, se añadió N-bromosuccinimida sólida (14 mg, 0'1 mmol). La solución fue agitada a temperatura ambiente durante 12 horas, concentrada después a presión reducida. Se recristalizó el producto en MeOH-éter para producir 22 mg (71% de rendimiento) de Compuesto I-19 en forma de un sólido blanco. El punto de fusión fue mayor de 300ºC (THF-MeOH). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'9 (m, 2H), 3'05 (m, 2H), 4'95 (s, 2H), 7'3-7'35 (m, 3H), 7'55-7'65 (m, 2H), 8'15 (s, 1H), 8'2 (m, 1H), 8'48 (s, 1H), 11'9 (s, 1H). MS (FAB): m/e 403 (m^{+}).

Ejemplo V(H)(6)

Etapa 1

Preparación de 5-fluoro-2-(2-(2-hidroxi)-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol (Fig. 3, V, R^{2} = H, R^{3} = F en C5, X = CH_{2}CH_{2})

La preparación de este compuesto empleó, sustancialmente, el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 1A, excepto que se utilizaron 5-fluoroindol (3'35 g, 24'8 mmol) y 2-tetralona (4'0 g, 27'3 mmol) para dar 5-fluoro-2-(2-(2-hidroxi)-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol; rendimiento de 1'8 g (26%); punto de fusión, 158-159ºC (desc.) (éter-hexano). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'1 (s, 1H), 2'25 (t, 2H), 2'8-2'9 (m, 1H), 3'05-3'2 (m, 2H), 3'45 (d, 1H), 6'23 (s, 1H), 6'9 (t, 1H), 7'1-7'3 (m, 6H), 8'55 (s ancho, 1H).

Etapa 2

Preparación de 2-(2-(3,4-dihidro)naftil)-5-fluoroindol

Se empleó sustancialmente el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 2A, utilizando 5-fluoro-2-(2-(2-hidroxi)-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol (1'0 g, 3'6 mmol); rendimiento de 900 mg (96%); punto de fusión, 174-176ºC (desc.) (MeOH-éter). Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'75-2'82 (m, 2H), 2'95-3'02 (m, 2H), 6'65 (s, 1H), 6'8 (s, 1H), 6'9-7'0 (m, 1H), 7'1-7'3 (m, H), 8'25 (s ancho, 1H).

Etapa 3

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]-9H-carbazol y 4-ciano-3-etoxicarbonil-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]-9H-carbazol (Fig. 3, XII y XV, R^{2}, R^{3}, R^{5}, R^{6} = H, R^{4} = F) (X = CH_{2}CH_{2})

Se calentó, a 180ºC con agitación durante 1 hora, una mezcla de 2-(2-(3,4-dihidro)naftil)-5-fluoroindol (700 mg, 2'7 mmol) y cis-\beta-cianoacrilato de etilo (3'3 g, 27 mmol) en un matraz de reacción sellado. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, y se eliminó el exceso de cianoacrilato por destilación Kugelrohr (temperatura del horno: 80-85ºC, 0'5 mm). Se añadió MeOH (25 ml) al residuo, y se separó el producto 4-ciano para dar 400 mg (39%) de un sólido blanco; punto de fusión, 256-2548ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'25 (t, 3H), 3'1-3'35 (m, 3H), 3'8 (s, m, 4H), 3'9 (m, 1H), 4'3-4'55 (m, 2H), 4'6 (d, 1H), 6'7 (d, 1H), 6'95 (s, 1H), 7'05-7'25 (m, 5H), 11'1 (s, 1H).

Etapa 4

Preparación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-6-fluoro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol

A una solución con agitación de 3-ciano-4-etoxicarbonil-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol (325 mg, 0'84 mmol) en tolueno seco (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (475 mg, 2'1 mmol) en una porción. La solución fue agitada a 65-70ºC durante 6 horas. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, el precipitado eliminado por filtración y lavado con tolueno (10 ml). Se concentró la solución de tolueno a presión reducida, para dar un sólido bruto. La purificación del sólido combinado, mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1), dio 275 mg (85%) de un producto sólido amarillo claro; punto de fusión de 258-260ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'2 (t, 3H), 2'9-3'0 (q, 2H), 3'1-3'2 (m, 2H), 4'35 (q, 2H), 7'3-7'5 (m, 5H), 7'7 (m, 1H), 8'1 (m, 1H), 12'25 (s, 1H).

Etapa 5

Preparación de 12,13-dihidro-3-fluoro-5H,6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-22)

Una solución de 3-ciano-4-etoxicarbonil-6-fluoro-1,2-dihidronaftil[3,4-a]9H-carbazol (140 mg, 0'37 mmol) y catalizador níquel Raney (aproximadamente 0'5 mg, forma húmeda) en MeOH (40 ml)/THF (20 ml) fue hidrogenada a 35 psi, en un aparato Parr durante 12 horas. La solución fue diluida con THF (50 ml), después filtrada a través de Celite®. Se concentró el disolvente a presión reducida, y el producto fue recristalizado para dar 35 mg (28%) de un sólido blanco (Compuesto I-22). El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'85 (m, 2H), 3'02 (m, 2H), 4'9 (s, 2H), 7'2-7'35 (m, 4H), 7'6 (m, 1H), 7'8 (d, 1H), 8'2 (m, 1H), 8'45 (m, 1H), 11'95 (s ancho, 1H). MS (FAB): m/e = 343 (M+1)^{+}.

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Ejemplo V(H)(7)

Etapa 1

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol

Este compuesto fue preparado, sustancialmente, mediante el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 1A, excepto que se utilizaron 6-fluoro-2-tetralona e indol para dar 2-(2-(6-fluoro-2-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidronaftil))indol; punto de fusión, 187-188ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'05 (s, 1H), 2'25 (m, 2H), 2'75-2'9 (m, 1H), 3'0-3'15 (m, 2H), 3'4 (m, 2H), 6'25 (s, 1H), 7'0-7'2 (m, 3H), 7'25-7'35 (m, 2H), 7'4 (d, 1H), 7'55 (d, 1H), 8'55 (s, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{16}BrNO: C, 63'17; H, 4'71; N, 4'09; Br, 23'35. Encontrado: C, 63'06; H, 4'71; N, 4'02; Br, 23'57.

Etapa 2

Preparación de 2-(2-(6-fluoro-3,4-dihidronaftil)indol)

Se empleó sustancialmente el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 2A, utilizando 2-(2-(2-hidroxi-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidronaftil)indol) (Etapa 1) para dar el compuesto objeto; punto de fusión, 228-231ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'8 (m, 2H), 2'95 (m, 2H), 6'70 (s, 1H), 6'75 (s, 1H), 7'0 (m, 2H), 7'1 (m, 1H), 7'2-7'4 (m, 4H), 7'4 (d, 1H), 7'6 (d, 1H), 8'3 (s, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{14}BrN: C, 66'58; H, 4'33; N, 4'22; F, 24'87. Encontrado: C, 66'68; H, 4'35; N, 4'32; F, 24'64.

Etapa 3

Preparación de 10-fluoro-4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H, 7H)diona

Se calentó, a 180-190ºC con agitación durante 2 horas, una mezcla de 2-(2-(6-fluoro-3,4-dihidronaftil)indol (500 mg, 1'9 mmol) y maleimida (370 mg, 3'8 mmol) en un vial de reacción sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió MeOH (3 ml), y el producto fue recogido y recristalizado en MeOH para dar 465 mg (68%) de un sólido blanco; punto de fusión, 322-325ºC. RMN-^{1}H (acetona-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'76-2'84 (m, 1H), 2'98-3'10 (m, 1H), 3'17-3'20 (m, 1H), 3'95-3'96 (m, 2H), 4'24-4'32 (m, 1H), 4'53 (t, 1H, J= 5'8 Hz), 4'93-4'98 (dd, 1H, J= 6 Hz, 1'8 Hz), 5'34-5'37 (dd, 1H, J= 6'8 Hz, 1'8 Hz), 7'85-7'92 (m, 2H), 7'97-8'09 (m, 3H), 8'30 (d, 1H, J= 7'5 Hz), 8'38-8'43 (m, 1H), 8'94 (d, 1H, J= 8'1 Hz). MS (m/e) = 360 (m^{+}).

Etapa 4

Preparación de 10-fluoro-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-4)

A una solución de 10-fluoro-4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,
7H)diona (400 mg, 1'1 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (630 mg, 2'8 mmol) en una porción. La solución fue mantenida a 60-65ºC durante seis horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogieron los sólidos por filtración, se suspendieron en MeOH (25 ml), y se recogió el producto por filtración para dar 30 mg (77%) de Compuesto Ia-4; punto de fusión de 304-305ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'91-2'96 (m, 2H), 3'1-3'35 (m, 2H), 7'11-7'18 (m, 1H), 7'24-7'34 (m, 2H), 7'54-7'63 (m, 2H), 8'20 (t, 1H, J= 6'5 Hz), 8'94 (d, 1H, J= 7'9 Hz), 11'14 (s, 1H), 12'0 (s, 1H). MS (m/e) = 325 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{22}H_{13}N_{2}O_{2}F: C, 74'15; H, 3'68; N, 7'86. Encontrado: C, 73'79; H, 3'50; N, 7'71.

Ejemplo V(H)(8)

Etapa 1

Preparación de 2-(2-(2-hidroxi-6-bromo-1,2,3,4-tetrahidro)naftil)indol

El compuesto objeto fue preparado, sustancialmente, por el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 1A, excepto que se utilizaron 6-bromo-tetralona e indol para dar 2-(2-(2-hidroxi-6-bromo-1,2,3,4-tetrahidro)naftil)indol; punto de fusión, 231-232ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'1 (s, 1H), 2'3 (m, 2H), 2'8-2'9 (m, 1H), 3'0-3'15 (m, 2H), 3'4 (m, 2H), 6'25 (s, 1H), 6'8-6'9 (m, 2H), 7'05-7'20 (m, 3H), 7'4 (d, 1H), 7'55 (d, 1H), 8'55 (s, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{16}FNO: C, 76'85; H, 5'93; N, 4'98; F, 6'75. Encontrado: C, 76'36; H, 5'75; N, 4'99; F, 6'66.

Etapa 2

Preparación de 2-(2-(6-bromo-3,4-dihidro)naftil)indol

Se empleó, sustancialmente, el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(H)(1), Etapa 2A, utilizando 2-(2-(2-hidroxi-6-bromo-1,2,3,4-tetrahidro)naftil)indol (Etapa 1) para dar el compuesto objeto; punto de fusión, 193-195ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 2'8 (m, 2H), 2'95 (m, 2H), 6'65 (s, 1H), 6'75 (s, 1H), 6'9 (m, 2H), 7'1 (m, 2H), 7'2 (t, 1H), 7'4 (d, 1H), 7'6 (d, 1H), 8'3 (s, 1H). Análisis calculado para C_{18}H_{14}FN: C, 82'11; H, 5'36; N, 5'32; F, 7'22. Encontrado: C, 81'94; H, 5'34; N, 5'30; F, 7'24.

Etapa 3

Preparación de 10-bromo-4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H, 7H)diona

Se calentó, a 190ºC con agitación durante 2 horas, una mezcla de 2-(2-(6-bromo-3,4-dihidronaftil)indol (400 mg, 0'95 mmol) y maleimida (540 mg, 2'4 mmol) en un vial de reacción sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió MeOH (3 ml), y el producto fue recogido y recristalizado en MeOH para dar 500 mg (77%) del compuesto objeto en forma de un sólido amarillo; punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'61 (m, 1H), 2'10 (m, 1H), 2'91-2'93 (m, 2H), 3'17-3'30 (m, 2H), 3'91-3'95 (m, 1H), 4'24 (d, 1H, J= 7'7 Hz), 6'97-7'09 (m, 2H), 7'28-7'37 (m, 4H), 7'82 (d, 1H, J= 7'8 Hz), 10'86 (1H), 11'14 (s, 1H). MS (m/e) = 422 (m+1)^{+}.

Etapa 4

Preparación de 10-bromo-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-5)

A una solución de 10-bromo-4c,7a,7b,12,13,13a-hexahidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona (400 mg, 1'1 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (540 mg, 2'4 mmol) en una porción. La solución fue mantenida a 60-65ºC durante seis horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogieron los sólidos por filtración, se suspendieron en MeOH (25 ml), y se recogió el producto por filtración para dar 365 mg (92%) de Compuesto Ia-5; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'91-2'96 (m, 2H), 3'09-3'12 (m, 2H), 7'25-7'33 (m, 2H), 7'50-7'63 (m, 3H), 8'09 (d, 1H, J= 8'5 Hz), 8'93 (d, 1H, J= 7'9 Hz), 11'16 (s, 1H), 12'06 (s, 1H). MS (m/e) = 418 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(H)(9)

Preparación de 10-(2-(4-piridiletenil))-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]-carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-6)

A una solución de 10-bromo-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-5) (120 mg, 0'29 mmol), 2-vinilpiridina (60 mg, 0'58 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml), se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (20 mg). La solución fue calentada a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se filtró a través de una almohadilla de tierra de diatomeas (Celite®), y se concentró el disolvente a presión reducida. El producto fue triturado con MeOH para dar 125 mg (99%) de un sólido amarillo. La recristalización en MeOH-Et_{2}O dio Compuesto Ia-6 en forma de un sólido amarillo, punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'97-3'00 (m, 2H), 3'13-3'17 (m, 2H), 7'29-7'41 (m, 3H), 7'57-7'63 (m, 3H), 7'70 (d, 1H, J= 7'7 Hz), 7'77-7'83 (m, 2H), 8'18 (d, 1H, J= 8'3 Hz), 8'61 (s, 1H), 8'95 (d, 1H, J= 7'9 Hz), 11'14 (s, 1H), 12'04 (s, 1H). MS (FAB): m/e 442 (m+1)^{-}.

Ejemplo V(H)(10)

Preparación de 10-(2-(4-piridiletil))-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]-carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-7)

A 10-(2-(4-piridiletenil))-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]-carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto Ia-6) (100 mg, 0'23 mmol) en DMF (30 ml) se añadió una pequeña espátula de catalizador níquel Raney. La solución fue hidrogenada a 40 psi durante 12 horas. Se filtró el disolvente a través de una almohadilla de Celite®, y se concentró después a presión reducida. El producto fue recristalizado en MeOH para dar 90 mg (90%) de Compuesto Ia-7 en forma de un sólido amarillo claro; punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 2'93-2'97 (m, 2H), 3'00-3'15 (m, 6H), 7'18-7'34 (m, 5H), 7'54-7'59 (m, 3H), 8'07 (d, 1H, J= 8'0 ), 8'55 (m, 1H), 9'40 (d, 1H, J= 7'8 Hz), 11'05 (s ancho, 1H), 11'98 (s, 1H). MS (FAB): m/e 444 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(H)(11)

Preparación de 5-hidroxi-12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a[pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-38)

A una solución de 12,13-dihidro-6H,14H-naftil[3,4-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-15) (25 mg, 0'07 mmol) en DMF (5 ml) se añadió BH_{4}Na (50 mg). Se agitó la mezcla 12 horas a temperatura ambiente, y se concentró después a presión reducida. El producto fue recristalizado en DMF-MeOH-Et_{2}O para dar 20 mg (80%) de Compuesto I-38 en forma de un sólido amarillo; punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 6'5 (s ancho, 1H), 6'86 (s, 1H), 7'3 (t, 1H), 7'56 (t, 1H), 7'65-7'8 (m, 3H), 8'1 (d, 1H), 8'19 (d, 1H), 8'65 (d, 1H), 9'2-9'3 (m, H), 12'45 (s, 1H). MS (m/e) = 337 (m-1)^{+}.

I. Descripción específica de procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados de benzotienilo

Parte VII

Derivados de benzotienilo

Ejemplo V(I)(1)

Preparación de 6H,12-benzo[b]tieno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-20)

Se agitó a reflujo, durante 12 horas, una solución de 2-(2-benzo[b]tienil)indol (Fig. 2, V, R, R^{2}, R^{3} = H, X = S; 250 mg, 1'0 mmol), maleimida (120 mg, 1'2 mmol) y ácido trifluoracético (1 ml) en tolueno seco (75 ml). La solución fue enfriada a temperatura ambiente y concentrada a presión reducida para dar un sólido bruto. Se disolvió el sólido en AcOH glacial (40 ml), se añadió Pd(OAc)_{2} al 5% y se mantuvo la mezcla a reflujo durante 12 horas. La solución fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de Celite®, concentrada después a presión reducida. Se añadió MeOH al residuo, y se recogió el producto (80 mg, 23%). El producto fue adicionalmente purificado mediante cromatografía en columna (AcOEt:hexano 2:1; R_{f}= 0'5) para dar Compuesto I-20. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 7'4 (t, 1H), 7'55-7'75 (m, 4H), 8'25 (m, 1H), 9'05 (d, 1H), 9'8 (m, 1H), 11'4 (s, 1H), 12'8 (s, 1H). MS (FAB): m/e = 343 (M+1)^{+}. Análisis calculado para C_{20}H_{10}N_{2}OS\cdot0'5 H_{2}O: C, 67'94; H, 3'26; N, 7'87. Encontrado: C, 67'50; H, 3'07; N, 7'51.

Ejemplos V(I)(2) y V(I)(3)

Preparación de 6H,7H,12H-benzo[b]tieno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)ona y 6H,7H,12H-benzo[b]tieno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuestos I-42 e I-43)

A una suspensión con agitación de polvo de Zn (500 mg) y cloruro mercúrico (150 mg) en agua (3 ml) se añadió, gota a gota, 0'5 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de 10 minutos, se decantó la capa acuosa. La amalgama de zinc fue lavada en primer lugar con agua, después con EtOH repetidamente. La amalgama de zinc fue suspendida en EtOH (10 ml) y se añadió 6H,12-benzo[b]tieno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona sólida (Compuesto I-20) (40 mg, 0'12 mmol). Se añadió unas pocas gotas de ácido clorhídrico concentrado, y después se llevó la reacción a reflujo. Después de 3 horas, se dejó que la reacción enfriara a temperatura ambiente, y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo fue disuelto en THF-AcOEt (1:1, 50 ml) y extraído con solución saturada de CO_{3}HNa (2 x 25 ml), solución saturada de ClNa (2 x 25 ml), y desecado (SO_{4}Mg). Después de la filtración, se eliminó el disolvente a presión reducida para dar un sólido amarillo. El producto fue primero purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexanos 2:1) para dar una mezcla 2:1 (7-oxo:5-oxo) de regioisómeros. Los isómeros 5 y 7-oxo fueron separados mediante HPLC de fase inversa, para dar 24 mg del isómero 7-oxo y 12 mg del isómero 5-oxo (89% de rendimiento total). Se obtuvieron los datos siguientes: isómero 5-oxo (Compuesto I-42), punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 5'10 (s, 2H), 7'26 (t, 1H, J= 8'1 Hz), 7'39 (dt, 1H, J= 6'9, 1'5 Hz), 7'47 (t, 1H, J= 7'3 Hz), 7'61 (dt, 2H, J= 6'9, 1'5 Hz), 8'21 (dt, 2H, J= 7'3, 5'1 Hz), 8'89 (s, 1H), 9'23 (d, 1H, J= 8'1 Hz), 12'31 (s, 1H). MS (ID): m/e 329'17 (m+1). Isómero 7-oxo (Compuesto I-43), punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 5'01 (s, 2H), 7'29 (t, 1H, J= 7'3 Hz), 7'35 (m, 1H), 7'53 (m, 1H), 7'68 (t, 2H, J= 8'8 Hz), 8'14 (dd, 2H, J= 8'8, 5'6 Hz), 8'74 (s, 1H), 10'24 (m, 1H), 12'43 (s, 1H). MS (ID): m/e 329'18 (m+1).

J. Descripción específica de los procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados de benzofuranilo

Parte VIII

Derivados de benzofuranilo

Ejemplo V(J)(1)

Preparación de 6H,13H-benzofuranil[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-21)

Este compuesto fue preparado a partir de 2-(2-benzofuranil)indol (Fig. 2; VI, R, R^{2}, R^{3} = H, X = O) y maleimida, sustancialmente mediante el mismo procedimiento que en la Parte VII, para dar el Compuesto I-21. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 7'3 (t, 1H), 7'5-7'7 (m, 4H), 7'9 (d, 1H), 8'7 (m, 1H), 8'9 (m, 1H), 11'2 (b, 1H), 12'8 (b, 1H). MS (FAB): m/e 326 (M^{+}).

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K. Descripción específica de los procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados de arilo, alquilo, alquinilo, y de alquilo y alcanilo sustituidos

Parte IX

Derivados de arilo, arilalquenilo y heteroarilalquenilo

Ejemplo V(K)(1)

Preparación de 3-fenil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-27)

Una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), ácido fenilborónico (35 mg, 0'29 mmol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (25 mg) en DMF (5 ml), fue calentada a 100-110ºC durante 24 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y concentrada a presión reducida. Se trituró el producto con THF para dar 77 mg de un sólido marrón que contenía producto y materia de partida. La purificación por HPLC dio el Compuesto I-27 en forma de un sólido castaño claro. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 5'05 (s, 2H), 7'3-7'55 (m, 5H), 7'7 (d, 2H, J= 8 Hz), 7'8-7'9 (m, 3H), 8'2 (s, 1H), 8'6 (s, 1H), 9'4 (d, 1H, J= 9 Hz), 12'0 (s, 1H). MS (FAB): m/e 387 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(K)(2)

Preparación de 3-(2-feniletenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-24)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), estireno (30 mg, 0'29 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (25 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, después el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 85 mg (80%) de un sólido marrón. La recristalización en DMF-Et_{2}O dio el producto, Compuesto I-24, en forma de un sólido castaño claro. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 5'02 (s, 2H), 7'25-7'5 (m, 7H), 7'6-7'75 (m, 4H), 7'8 (d, 1H, J= 8 Hz), 8'2 (s, 1H), 8'6 (s, 1H), 9'4 (d, 1H, J= 9 Hz), 12'8 (s, 1H). MS (FAB): m/e 413 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(K)(3)

Preparación de 3-(2-piridiniletenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-32)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), 2-vinilpiridina (54 mg, 0'6 ml, 0'51 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (30 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, después el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 90 mg (84%) de Compuesto I-31, en forma de un sólido amarillo; purificación mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:MeOH 9:1); punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 5'0 (s, 2H), 7'2-7'42 (m, 4H), 7'58-7'7 (m, 4H), 7'8-7'95 (m, 2H), 8'3 (s, 1H), 8'6 (d, 1H, J= 6 Hz), 8'63 (s, 1H), 9'4 (d, 1H, J= 9 Hz), 12'1 (s, 1H). MS (FAB): m/e 414 (m+1)^{+}.

Parte X

Derivados éster

Ejemplo V(K)(4)

Preparación de 3-(3-etil propenoato)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-25)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), acrilato de etilo (52 mg, 0'05 ml, 0'52 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (25 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 18 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y concentrada a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH hasta sólido, y fue recristalizado en THF-MeOH para dar 75 mg (72%) de Compuesto I-25, en forma de un sólido castaño claro. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 1'3 (t, 3H, J= 6 Hz), 4'2-4'3 (s, m, 4H), 5'0 (s, 2H), 6'75 (d, 1H, J= 20 Hz), 7'35-7'5 (m, 2H), 7'6-7'75 (m, 2H), 7'85-7'95 (m, 2H), 8'4 (s, 1H), 8'65 (m, 1H), 9'4 (d, 1H, 8 Hz), 12'2 (s, 1H). MS (FAB): m/e 409 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(K)(5)

Preparación de 3-(2-(4-piridil)etenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-33)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), 4-vinilpiridina (55 mg, 0'52 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (30 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 75 mg (70%) de un sólido castaño claro. La recristalización en DMF-THF-Et_{2}O dio el Compuesto I-33, en forma de un sólido castaño claro. Punto de fusión >330ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'19 (s, 2H), 5'02 (s, 2H), 7'30-7'43 (m, 3H), 7'59-7'85 (m, 6H), 8'28 (s, 1H), 8'55 (s ancho, 2H), 8'65 (s, 1H), 9'41 (d, 1H, J= 7'3 Hz), 12'10 (s, 1H). MS m/e = 414 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{28}H_{19}N_{3}O\cdot2'5 H_{2}O: C, 73'35; H, 5'28; N, 9'16. Encontrado: C, 73'66; H, 4'92; N, 8'82.

Ejemplo V(K)(6)

Preparación de 3-(2-(2-ftalimido)etenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-39)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (150 mg, 0'39 mmol), N-vinilftalimida (134 mg, 0'77 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (4 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (25 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 85 mg (80%) de un sólido marrón. La recristalización en DMF-Et_{2}O dio el Compuesto I-39, en forma de un sólido castaño claro. Punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'17 (s, 2H), 5'03 (s, 2H), 7'35-7'42 (m, 4H), 7'60-7'72 (m, 4H), 7'87-7'97 (m, 3H), 8'10 (s, 1H), 8'61 (s, 1H), 9'40 (d, 1H, J= 7'2 Hz), 12'03 (s, 1H). MS m/e = 504'5 [m+23 (Na)]^{+}.

Ejemplo V(K)(7)

Preparación de 3-(2-(2-piridiletenil))-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)-ona (Compuesto I-41)

A una solución de 3-bromo-6H,7H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-8) (450 mg, 1'16 mmol), 2-vinilpiridina (245 mg, 2'3 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (6 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (25 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 300 mg (67%) de Compuesto I-41, en forma de un sólido amarillo claro. Una muestra fue purificada mediante cromatografía en columna [AcOEt:PAW (pir:AcOH:H_{2}O 55:25:20) 85:15]; punto de fusión >320ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'22 (s, 2H), 4'92 (s, 2H), 7'21-7'28 (m, 2H), 7'38-7'55 (m, 2H), 7'60-7'65 (m, 3H), 7'70-7'85 (m, 4H), 8'6 (m, 2H), 8'82 (s, 1H), 9'4 (m, 1H), 12'05 (s, 1H). MS m/e = 414 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(K)(8)

Preparación de 3-(2-(2-piridiletil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-34)

A Compuesto I-32 [Ejemplo V(K)(3)] (460 mg, 1'1 mmol) en DMF (25 ml) se añadió una pequeña espátula de catalizador níquel Raney, y después la solución fue hidrogenada a 40 psi durante 12 horas. El disolvente fue filtrado a través de una almohadilla de Celite®, y concentrado luego a presión reducida. Se añadió MeOH y se recogió el producto para dar 410 mg (89%) de Compuesto I-34 en forma de un sólido amarillo claro; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'17-3'22 (s ancho, 4H), 4'15 (s, 2H), 4'89 (s, 2H), 7'22-7'41 (m, 5H), 7'51 (d, 1H, J= 8'2 Hz), 7'66-7'71 (m, 2H), 8'55 (s, 2H), 9'39 (d, 1H, J= 7'5 Hz), 11'82 (s, 1H). MS m/e = 415 (m+1)^{+}. Análisis calculado para C_{28}H_{21}N_{3}O\cdot1'0 H_{2}O: C, 77'58; H, 5'35; N, 9'69. Encontrado: C, 77'54; H, 4'93; N, 9'35.

Ejemplo V(K)(9)

Preparación de 3-(2-cianoetenil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-35)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (100 mg, 0'26 mmol), cianoacrilato (0'43 ml, 0'51 mmol) y trietilamina (0'5 ml) en DMF (3 ml) se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (20 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 48 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, y el disolvente fue concentrado a presión reducida. Se trituró el producto con MeOH para dar 90 mg (97%) de un sólido castaño claro. La recristalización en DMF-Et_{2}O dio el Compuesto I-35, en forma de un sólido castaño claro; punto de fusión >330ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 5'0 (s, 2H), 7'3-7'5 (m, 3H), 7'6-7'95 (m, 4H), 8'35 (s, 1H), 8'65 (s, 1H), 9'4 (d, 1H, J= 9 Hz), 12'25 (s, 1H). IR: 2220 cm^{-1}. MS m/e = 362 (m+1)^{+}.

Ejemplo V(K)(10)

Preparación de 3-etinil-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-36)

A una solución de 3-bromo-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-9) (435 mg, 1'1 mmol), trimetilsililacetileno (0'47 ml, 3'3 mmol) y trietilamina (1'0 ml) en DMF (11 ml) se añadió cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (17 mg). Se calentó la solución a 100-110ºC, durante 24 horas, en un tubo de reacción sellado. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada a través de una almohadilla de Celite®, después el disolvente concentrado a presión reducida. El producto fue disuelto en DMF (8 ml), se añadió MeOH (8 ml), fluoruro de cesio (370 mg, 2'4 mmol), y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 24 horas. El disolvente fue concentrado a presión reducida para dar un sólido oscuro. La purificación mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:MeOH 10:1; R_{f}= 0'53) dio 30 mg de un sólido castaño claro. El compuesto fue además purificado por TLC preparativa (gel de sílice, AcOEt:hexano 3:1) para dar el Compuesto I-36 en forma de un sólido castaño claro; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 4'2 (s, 2H), 5'0 (s, 2H), 7'38-7'46 (m, 3H), 7'58-7'75 (m, 4H), 8'15 (s, 1H), 8'63 (s, 1H), 9'42 (d, 1H, J= 9 Hz), 12'19 (s, 1H). MS m/e = 335 (m^{-}).

Ejemplo V(K)(11)

Etapa 1

Preparación de 5-pentil-2-(2-(2-hidroxiindenil))indol

Se preparó 5-pentil-2-(2-(2-hidroxiindenil))indol sustancialmente mediante el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(A)(1), Etapa 1A, excepto que se utilizaron 2-indanona y 5-pentilindol. El 5-pentil-2-(2-(2-hidroxiindenil))indol fue inmediatamente utilizado en la etapa siguiente.

Etapa 2

Preparación de 5-pentil-2-(2-indenil)indol

Sustancialmente, se empleó el mismo procedimiento que en el Ejemplo V(A)(1), Etapa 2A, utilizando 5-pentil-2-(2-(2-hidroxiindenil))indol (Etapa 1) para dar el compuesto objeto; punto de fusión 222-223ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 1'9 (m, 3H), 1'4 (m, 4H), 1'7 (m, 2H), 2'65 (m, 2H), 3'9 (s, 2H), 6'6 (s, 1H), 7'1 (m, 2H), 7'2-7'35 (m, 3H), 7'4 (m, 2H), 7'5 (d, 1H), 8'2 (s, 1H). Análisis calculado para C_{22}H_{23}N: C, 87'66; H, 7'69; N, 4'65. Encontrado: C, 87'33; H, 7'72; N, 4'58.

Etapa 3

Preparación de 3-pentil-4c,7a,7b,12a-tetrahidro-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona

Se calentó, a 180-190ºC durante 1 hora, una mezcla de 5-pentil-2-(2-indenil)indol (Etapa 2) (300 mg, 1'0 mmol) y maleimida (193 mg, 2'0 mmol) en un vial de reacción de 10 cm sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, el producto fue disuelto en MeOH (5 ml) y concentrado después a presión reducida. Se purificó el producto mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1) para dar 260 mg (66%) del compuesto objeto en forma de una espuma amarilla. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 0'89 (t, 3H, J= 5'5 Hz), 1'26-1'35 (m, 4H), 1'63-1'67 (m, 2H), 2'68-2'75 (m, 2H), 2'94-3'02 (m, 1H), 3'30-3'36 (m, 1H), 3'70-3'89 (m, 3H), 4'40 (m, 1H), 6'74 (s, 1H), 7'05 (d, 1H, J= 7'2 Hz), 7'14-7'39 (m, 5H), 7'80 (s, 1H), 7'98 (s, 1H).

Etapa 4

Preparación de 3-pentil-6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)-ona (Compuesto I-37)

A una solución del producto de la Etapa 3 (250 mg, 0'63 mmol) en tolueno (15 ml) se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona sólida (356 mg, 1'57 mmol) en una porción. La solución fue mantenida a 60-65ºC durante 6 horas. Después de enfriar en un baño de hielo, se recogieron los sólidos por filtración. El producto fue purificado mediante cromatografía en columna (gel de sílice, AcOEt:hexano 2:1) para dar 75 mg (30%) de Compuesto I-37 en forma de un sólido oscuro; punto de fusión >300ºC. RMN-^{1}H (CDCl_{3}, 300 MHz): \delta 0'94 (m, 3H), 1'40 (m, 4H), 1'74 (m, 2H), 2'80 (m, 2H), 4'28 (s, 2H), 6'96 (s, 1H), 6'4-6'6 (m, 3H), 7'8 (d, 1H), J= 6'9 Hz), 7'8 (s, 1H), 9'13 (d, 1H, J= 7'2 Hz), 11'23 (s, 1H), 12'15 (s, 1H). MS m/e = 393 (m-1)^{-}.

L. Descripción específica de los procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados alílicos

Parte XI

Derivados alílicos

Ejemplo V(L)(1)

Preparación de 13-alil-5H,6H,12H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-26)

Se añadió 5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)-ona (Compuesto I-2) (200 mg, 0'65 mmol) a una solución con agitación de NaH (25 mg de una dispersión oleosa al 60%, 0'65 mmol) en DMF seco (10 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla oscura fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora, después se añadió, gota a gota, bromuro alílico (87 mg, 0'08 ml, 0'72 mmol), y se agitó la mezcla 12 horas a temperatura ambiente. La solución amarilla resultante fue concentrada a presión reducida para dar un sólido. Se cristalizó el producto en MeOH para dar 90 mg (40%) de Compuesto I-26, en forma de un sólido amarillo. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'45 (s, 2H), 4'7 (d, 1H), 4'95 (s, 2H), 5'1 (d, 1H), 5'4 (s, 2H), 6'2-6'3 (m, 1H), 7'35-7'45 (m, 3H), 7'55 (t, 1H), 7'7 (m, 2H), 8'05 (d, 1H, J= 8 Hz), 8'6 (s, 1H), 9'5 (d, 1H, J= 9 Hz). MS (FAB): m/e 351 (m+1)^{+}.

M. Descripción específica de los procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados oxo

Parte XII

Derivados oxo

Ejemplo V(M)(1)

Preparación de 12-oxo-6H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-28)

A una solución de CrO_{3} (465 mg, 4'65 mmol) en piridina (20 ml) se añadió 6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(5H,7H)diona (Compuesto I-1), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2'5 días. Se añadió un exceso de THF, y se filtró la solución a través de una almohadilla de Celite®. La solución de THF fue lavada bien con solución saturada de ClNa, concentrada después a presión reducida para dar un producto sólido naranja. Se recristalizó el producto en THF-MeOH para dar 270 mg (86%) de Compuesto I-28 en forma de un sólido naranja. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 7'35 (t, 1H, J= 6 Hz), 7'45 (t, 1H, J= 6 Hz), 7'6 (t, 1H, J= 6 Hz), 7'7 (m, 3H), 8'7 (d, 1H, J= 9 Hz), 8'9 (d, 1H, J= 9 Hz), 11'6 (s, 1H), 12'4 (s, 1H). MS (FAB): m/e 338 (M)^{+}.

Ejemplo V(M)(2)

Preparación de 7-hidroxi-12-oxo-6H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5(5H)diona (Compuesto I-30) y 5-hidroxi-12-oxo-6H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)diona (Compuesto I-33)

A una solución con agitación de 12-oxo-6H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7-(5H,7H)diona (Compuesto I-28) (75 mg, 0'22 mmol) en DMF/MeOH (10 ml, 1:1) se añadió borohidruro sódico sólido (50 mg, 1'3 mmol) en una porción. La mezcla fue agitada 14 horas a temperatura ambiente, concentrada después a presión reducida. Se añadió MeOH y se trituró el producto para dar 25 mg (33%) de una mezcla 2:1 de Compuesto I-31:Compuesto I-30 en forma de un sólido naranja; punto de fusión >330ºC. RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}+D_{2}O, 300 MHz): \delta 6'32 (s, 0'33H), 6'4 (s, 0'66H), 7'25-7'7 (m, 5H), 7'95 (d, 0'33H, J= 6'7 Hz), 8'25 (d, 0'67H, J= 6'7 Hz), 8'76 (m, 0'67H), 8'9 (m, 1'33H). MS (FAB): m/e 341 (m+1)^{-}.

\newpage

N. Descripción específica de los procesos sintéticos Preparación de pirrolocarbazoles fusionados de hidroxialquilo inferior

Parte XIII

Derivados de hidroxialquilo inferior

Ejemplo V(N)(1)

Preparación de 13-(2-hidroxietil)-5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-29)

Se añadió 5H,6H,12H,13H-indeno[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-7(7H)ona (Compuesto I-2) (200 mg, 0'65 mmol) a una solución con agitación de NaH (25 mg de una dispersión oleosa al 60%, 0'65 mmol) en DMF seco (10 ml), bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla oscura fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió, gota a gota, bromoacetato de etilo (120 mg, 0'08 ml, 0'72 mmol), y se agitó la mezcla 12 horas. La solución amarilla resultante fue concentrada a presión reducida para dar un sólido amarillo bruto. El producto fue disuelto en THF seco (10 ml) y se añadió, gota a gota, hidruro de litio y aluminio (1 ml de solución 1M en éter). La solución fue agitada 6 horas a temperatura ambiente, después se apagó la reacción por la adición de H_{2}O (1 ml). La mezcla fue filtrada y concentrada a presión reducida. Se añadió THF al residuo, y se recogió el producto para dar 30 mg (17%) de Compuesto I-29 en forma de un sólido blanco. El punto de fusión fue mayor de 300ºC. Se obtuvieron los siguientes datos de RMN: RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}, 300 MHz): \delta 3'8-3'9 (b, 2H), 4'55 (s, 2H), 4'77 (t, 2H), 4'9 (s, 2H), 5'0 (b, 1H, intercambio D_{2}O), 7'3-7'45 (m, 3H), 7'5-7'57 (t, 1H), 7'67 (d, 1H, J= 6 Hz), 7'5 (d, 1H, J= 6 Hz), 8'0 (d, 1H, J= 6 Hz), 8'57 (s, 1H), 9'5 (d, 1H, J= 7 Hz). MS (FAB): m/e 355 (M+1)^{+}.

Claims

1. Una composición farmacéutica constando de un pirrolocarbazol fusionado de fórmula G

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en donde:

2): un anillo aromático carbocíclico insaturado de 5 miembros en el que

b) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

c) R^{1} es H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo C_{6-10}, arilalquilo C_{7-14}, heteroarilo, o heteroarilalquilo; COR^{9}, donde R^{9} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), o arilo C_{6-10}; -OR^{10}, donde R^{10} es H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive); -CONH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, donde n es un número entero de 1-4 (inclusive); o -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, y cualquiera de

d) R^{2} es H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido de 5-7 carbonos, independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

1): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive) no está sustituido; o

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive), independientemente, está sustituido con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, O-tetrahidropiranilo, NH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CO_{2}R^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -NHC(=NH)NH_{2}, -NR^{10}SO_{2}R^{9}, -S(O)_{y} R^{11} (donde R^{11} es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo, e y es 1 ó 2); -SR^{11}, -CO_{2}R^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, COR^{9}, -CH_{2}OR^{7}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNHCH(N=NH)NH_{2}, -SO_{2}NR^{12}R^{13}, -PO(OR^{11})_{2}, o OR^{14} donde R^{14} es el residuo de un aminoácido después de que se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de

i): R^{12} y R^{13}, independientemente, son H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo; o

ii): R^{12} y R^{13} son combinados juntos para formar un grupo de unión;

e) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, arilo C_{6-10}, heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, CF_{3}, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, NH_{2}, -CH_{2}OH, -CH_{2}OR^{14}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -S(O)_{y}R^{11} (donde y es 1 ó 2); -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -(CH_{2})_{n}SR^{9} [donde n es un número entero de 1-4 (inclusive)], -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{9}, -CH_{2}SR^{15} [donde R^{15} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive)]; -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{14}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NHR^{14}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive), y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive) está sustituido como se describe en d)2) arriba;

f) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

2): un alquileno de 1-3 carbonos (inclusive) sustituido con un grupo R^{2}; o

3): -CH=CH-, -CH(OH)CH(OH)-, -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)_{2}-, -C(=O)-, -C(=NOR^{11})-, -C(OR^{11})(R^{11})-, -C(=O)CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=O)-, -C(R^{10})_{2}-, -C(=NOR^{11})CH(R^{15})-, -CH(R^{15})C(=NOR^{11})-, -CH_{2}Z-, -Z-CH_{2}-, -CH_{2}ZCH_{2}-, donde Z es

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11}; o

h) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en c), d), e), y f) arriba;

o una sal del mismo, farmacéuticamente admisible; junto con un excipiente o soporte farmacéuticamente admisible; en donde, a menos que se establezca lo contrario, cada grupo heteroarilo contiene 3 a 10 átomos seleccionados de C, N, O y S, uno como mínimo siendo O, S o N; y cada heteroarilalquilo es un grupo heteroarilo unido a un alquilo de 1 a 8 átomos de carbono.

2. Una composición como se reclama en la Reivindicación 1, en donde el pirrolocarbazol fusionado es de fórmula I

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en donde:

a) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

b) R^{1} es H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), arilo C_{6-10}, arilalquilo C_{7-14}, heteroarilo, heteroarilalquilo, COR^{9} [donde R^{9} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive) o arilo C_{6-10}], -OR^{10} [donde R^{10} es H o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive)], -CONH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8} [donde n es un número entero de 1-4 (inclusive)], o -O(CH_{2})_{n}NR_{7}R_{8}, y cualquiera de

c) R^{2} es H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido de 5-7 carbonos, independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive) está sustituido, independientemente, con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, O-tetrahidropiranilo, NH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CO_{2}R^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -NHC(=NH)NH_{2}, -NR^{10}SO_{2}R^{9}, -S(O)_{y} R^{11} (donde R^{11} es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo, e y es 1 ó 2); -SR^{11}, -CO_{2}R^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, COR^{9}, -CH_{2}OR^{7}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNHCH(N=NH)NH_{2}, -SO_{2}NR^{12}R^{13}, -PO(OR^{11})_{2}, OR^{14} donde R^{14} es el residuo de un aminoácido después de se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de

ii): R^{12} y R^{13} son combinados juntos para formar un grupo de unión;

d) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, arilo C_{6-10}, heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, CF_{3}, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, NH_{2}, -CH_{2}OH, -CH_{2}OR^{14}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -SR^{11}, -S(O)_{y}R^{11} (donde y es 1 ó 2), -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -(CH_{2})_{n}SR^{9} [donde n es un número entero de 1-4 (inclusive)], -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{9}, -CH_{2}SR^{15} [donde R^{15} es alquilo de 1-4 carbonos (inclusive)]; -(CH_{2})_{n}S(O)_{y}R^{14}, -(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -(CH_{2})_{n}NHR^{14}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive), y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive) está sustituido como se describe en c)2) arriba;

e) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11}; o

f) A^{1} y A^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; B^{1} y B^{2} juntos representan O, y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba; o

g) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba;

o una sal del mismo farmacéuticamente admisible.

3. Una composición como se reclama en la Reivindicación 2, en donde el pirrolocarbazol fusionado es de fórmula Ia o Ib

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en donde:

a) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

b) R^{1} es H;

c) R^{2} es H, alilo, hidroxietilo, o alquilo de 1-4 carbonos (inclusive);

d) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, F, Cl, Br, I, alquilo de 1-4 átomos de carbono (inclusive), alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive), heteroarilalquenilo, heteroarilalquilo, cianoetilo, cianovinilo, arilo de 6-10 carbonos, alquinilo, arilalquenilo, alcoxicarbonilalquenilo o haloalquenilo;

e) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11}; o

f) A^{1} y A^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; o H, OH; y B^{1} y B^{2} juntos representan O; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba; o

g) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos son cada uno, independientemente, H, H; o H, OH; y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en b), c), d), y e) arriba;

o una sal del mismo farmacéuticamente admisible.

4. Una composición como se reclama en la Reivindicación 3, en donde el pirrolocarbazol fusionado de fórmula Ia o Ib

a) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

b) R^{1} es H;

c) R^{2} es H, CH_{3}, CH_{2}CH=CH_{2}, o CH_{2}CH_{2}OH;

d) cada R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6}, independientemente, es H, F, Cl, Br, I, CH_{3}, OCH_{3}, HC=CHC_{6}H_{5}, HC=CHCO_{2}H_{5}, C_{6}H_{5}, HC=CH-2-pir, HC=CH-4-pir, H_{2}CCH_{2}-2-pir, HC=CHCN, C\equivCH, n-pentilo, HC=CH-2-ftalimida, o HC=CHI;

e) X es -CH_{2}-, -CH_{2}CH_{2}-, -CH=CH-, -S-, -O-, o -C(=O)-; o

o una sal del mismo farmacéuticamente admisible.

5. Una Composición como se reclama en la Reivindicación 4, en donde el pirrolocarbazol fusionado tiene una de las fórmulas siguientes: I-1, I-2, I-3, I-4, I-6, I-7, I-9, I-11, I-12, I-14, I-15, I-16, I-17, I-22, I-23, I-26, I-29, I-32, I-34, I-39, I-42 y I-43.

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o una sal del mismo farmacéuticamente admisible.

6. Un pirrolocarbazol fusionado de fórmula G

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en donde

2): un anillo aromático carbocíclico insaturado de 5 miembros en el que

b) A^{1} y A^{2} juntos representan O, y B^{1} y B^{2} juntos representan O;

d) R^{2} es H, -SO_{2}R^{9}, -CO_{2}R^{9}, -COR^{9}, alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive); o un monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive) donde cada grupo hidroxilo del monosacárido de 5-7 carbonos (inclusive), independientemente, está no sustituido o está reemplazado por H, alquilo de 1-4 carbonos (inclusive), alquilcarboniloxi de 2-5 carbonos (inclusive) o alcoxi de 1-4 carbonos (inclusive); y cualquiera de

2): cada alquilo de 1-8 carbonos (inclusive), alquenilo de hasta 8 carbonos (inclusive), o alquinilo de hasta 8 carbonos (inclusive), independientemente, está sustituido con arilo 1-3 de 6-10 carbonos (inclusive), heteroarilo, F, Cl, Br, I, -CN, -NO_{2}, OH, -OR^{9}, -O(CH_{2})_{n}NR^{7}R^{8}, -OCOR^{9}, -OCONHR^{9}, O-tetrahidropiranilo, NH_{2}, -NR^{7}R^{8}, -NR^{10}COR^{9}, -NR^{10}CO_{2}R^{9}, -NR^{10}CONR^{7}R^{8}, -NHC(=NH)NH_{2}, -NR^{10}SO_{2}R^{9}, -S(O)_{y} R^{11} (donde R^{11} es H o alquilo de 1-4 carbonos, arilo de 6-10 carbonos, o heteroarilo, e y es 1 ó 2), -SR^{11}, -CO_{2}R^{9}, -CONR^{7}R^{8}, -CHO, COR^{9}, -CH_{2}OR^{7}, -CH=NNR^{11}R^{12}, -CH=NOR^{11}, -CH=NR^{9}, -CH=NNHCH(N=NH)NH_{2}, -SO_{2}NR^{12}R^{13}, -PO(OR^{11})_{2}, o OR^{14} donde R^{14} es el residuo de un aminoácido después de que se elimine el grupo hidroxilo del grupo carboxilo; y cualquiera de

ii): R^{12} y R^{13} son combinados juntos para formar un grupo de unión;

f) X es cualquiera de

1): un alquileno no sustituido de 1-3 carbonos (inclusive); o

: C(R^{11})(OR^{11}), O, S, C(=O), C(=NOR^{11}), o NR^{11}; o

g) A^{1} y A^{2} juntos son, independientemente, H, H; H, -OR^{11}; H, -SR^{11}; H, -N(R^{11})_{2}; o juntos representan =S o =NR^{11}; B^{1} y B^{2} juntos representan O, y cada R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, y X son como se definió en c), d), e), y f) arriba;
o

o una sal del mismo, farmacéuticamente admisible; en donde, a menos que se establezca lo contrario, cada grupo heteroarilo contiene 3 a 10 átomos seleccionados de C, N, O y S, uno como mínimo siendo O, S o N; y cada heteroarilalquilo es un grupo heteroarilo unido a un alquilo de 1 a 8 átomos de carbono.