EP4739998A1 - Dispositif optique pour mesures de fluorescence et d'absorbance - Google Patents
Dispositif optique pour mesures de fluorescence et d'absorbanceInfo
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Abstract
Le présent document concerne un dispositif optique configuré pour mesurer la fluorescence et l'absorbance dans un dosage immunologique et en chimie humide comprenant : - un canal d'illuminateur (26) comportant au moins une source d'excitation (28), - un canal de détecteur (34) comportant au moins un capteur (36), - une cuvette (130) contenant un échantillon (132) entre le canal d'illuminateur (26) et le canal de détecteur (34), - un mélangeur de lumière optique (38) entre le canal d'illuminateur (26) et la cuvette (130) et un séparateur optique (40) entre la cuvette (130) et le canal de détecteur (34).
Description
Dispositif optique pour mesures de fluorescence et d'absorbance
Cette divulgation se rapporte au domaine des mesures d'absorbance et de fluorescence au moyen d'un dispositif optique.
La présente demande se rapporte au domaine des mesures d'absorbance et de fluorescence.
Dans les mesures de fluorescence, un échantillon est éclairé grâce à une source d'éclairage à une longueur d'onde d'excitation précise, par exemple à 370 nm. Ensuite, l'échantillon émet une autre longueur d'onde qui est différente de la longueur d'onde d'excitation, par exemple à 450 nm.
Dans les mesures d'absorbance, une atténuation de la lumière du fait de la présence d'un échantillon est mesurée. Premièrement, une cuvette dépourvue d'échantillon est disposée. La source d'éclairage est allumée et la lumière reçue est mesurée après son passage dans la cuvette vide ou avec de l'eau. Ensuite, un échantillon est disposé dans la cuvette et la source d'éclairage est allumée. L'atténuation de la lumière est mesurée en présence de l'échantillon. Plus précisément, le logarithme décimal de la lumière mesurée avec une cuvette vide ou de l'eau divisée par la lumière mesurée avec l'échantillon donne l'absorbance de l'échantillon.
Dans l'art antérieur, comme représenté à la figure 1, il existe un dispositif optique motorisé 2 pour les mesures de l'absorbance et de la fluorescence. Le dispositif optique motorisé 2 est composé d'un canal d'émission 4 doté d'une lumière blanche 6 et d'une première lentille 8, d'une première 10 et d'une deuxième 12 roue porte-filtre motorisée, d'un échantillon 14 dans une cuvette 16 et d'un canal de détection 18. La première roue porte-filtre motorisée 10 est déplacée pour sélectionner dans la lumière blanche 6 la longueur d'onde pour l'éclairage de l'échantillon 14. En même temps, dans le canal de détection 18, la deuxième roue porte-filtre motorisée 12 est utilisée pour sélectionner la longueur d'onde à des fins de détection. Dans ce cas, une source d'éclairage à large bande et un détecteur à large bande 20 doté d'une deuxième lentille 22 sont utilisés. La sélection des longueurs d'onde est effectuée par le biais de ces première 10 et deuxième 12 roues porte-filtre motorisées.
Par conséquent, il y a deux pièces de moteur qui exercent des contraintes mécaniques sur le dispositif. En outre, la taille de chaque roue porte-filtre motorisée est importante. Une telle taille importante de la première 10 et de la deuxième 12 roue porte-filtre motorisée se traduit par un grand encombrement de l'instrument dans lequel ces roues porte-filtre motorisées doivent être mises en oeuvre. En effet, l'agencement dans l'art antérieur n'est pas optimal puisque la cuvette est positionnée entre la première roue porte-filtre motorisée 10 et la deuxième roue porte-filtre motorisée 12, deux pièces motorisées sont par conséquent indépendantes et distinctes l'une de l'autre, ce qui multiplie les éléments à l'intérieur du dispositif et rend un tel dispositif complexe. Il génère aussi des problèmes de fiabilité du fait des pièces mobiles des roues porte-filtre motorisées. Qui plus est, des problèmes d'alignement se posent pendant la rotation des roues porte-filtre motorisées.
Cette divulgation améliore la situation.
Il est proposé un système d'analyse comprenant un dispositif optique configuré pour mesurer la fluorescence et l'absorbance dans un échantillon biologique contenu dans au moins une cuvette comprenant : un canal d'illuminateur comportant au moins une source de lumière pour chaque spectre lumineux requis, un canal de détecteur comportant au moins un capteur servant à mesurer lesdites fluorescence et absorbance dans ledit échantillon biologique, un mélangeur de lumière optique entre le canal d'illuminateur et la cuvette et un séparateur optique entre la cuvette et le canal de détecteur, au moins une cuvette configurée pour contenir ledit échantillon biologique, ladite cuvette étant disposée entre le canal d'illuminateur et le canal de détecteur.
Grâce à cet agencement, le dispositif optique est configuré pour évaluer les mesures de fluorescence et d'absorbance en parallèle et de préférence en même temps et indépendamment mais à l'aide du même dispositif, ce qui permet de donner une analyse complexe et précise des données dudit échantillon.
Le canal de détecteur est configuré pour filtrer la lumière au besoin sans devoir avoir recours à des pièces mobiles. Le dispositif optique est plus stable que les dispositifs optiques de l'art antérieur.
Le dispositif optique est configuré pour être miniaturisé et pouvoir être intégré dans un instrument de mesure.
Par mesure de la fluorescence et de l'absorbance en parallèle et de préférence en même temps, le dispositif optique est particulièrement approprié aux dosages immunologiques.
Selon l'invention, « en parallèle » signifie dans le même cycle d'analyse avec le même dispositif.
Le mélangeur de lumière optique peut être une combinaison intégrée de lentilles et de verres configurée pour transmettre un faisceau de sortie collimaté unique du canal d'illuminateur à la cuvette.
Ce mélangeur de lumière optique est composé de pièces fixes (non mobiles) de petite dimension et positionnées à l'intérieur d'un boîtier moulé sans alignements spéciaux. Ce mélangeur de lumière optique permet de travailler avec différentes longueurs d'onde en même temps et d'utiliser différentes techniques d'entraînement de source et de détection. Les verres du mélangeur de lumière optique peuvent comprendre des filtres et au moins un mélangeur de faisceaux.
Le séparateur optique peut être une combinaison intégrée de lentilles et de verres configurée pour séparer le faisceau de sortie unique qui a traversé la cuvette en au moins deux faisceaux de détection. Ce séparateur optique est composé de pièces fixes (non mobiles) de petite dimension et positionnées à l'intérieur d'un boîtier moulé sans alignements spéciaux. Ce séparateur optique permet de travailler
avec différentes longueurs d'onde en même temps et d'utiliser différentes techniques d'entraînement de source et de détection. Les verres du séparateur optique peuvent comprendre des filtres et au moins un séparateur de faisceau.
Le mélangeur de lumière optique peut comprendre un premier prisme trichroïque configuré pour transmettre un faisceau de sortie collimaté unique du canal d'illuminateur à la cuvette.
Le premier prisme trichroïque est configuré pour éviter de perdre de l'énergie en sélectionnant des longueurs d'onde spécifiques et pour obtenir un seul faisceau de sortie collimaté.
Le canal d'illuminateur peut comprendre une première, une deuxième et une troisième source de lumière pour un spectre lumineux.
La première source de lumière pour un spectre lumineux peut être une DEL blanche.
La deuxième source de lumière pour un spectre lumineux peut être une DEL à UV configurée pour émettre à 340 nm.
La troisième source de lumière pour un spectre lumineux peut être une DEL à UV configurée pour émettre à 370 nm.
Le séparateur optique peut comprendre un deuxième prisme trichroïque configuré pour séparer le faisceau de sortie unique qui a traversé la cuvette en un premier, un deuxième et un troisième faisceau de détection.
Le canal de détecteur peut comprendre un premier, un deuxième et un troisième capteur.
Le premier capteur peut être un capteur à large bande configuré pour détecter des longueurs d'onde comprises entre 340 et 700 nm.
Le deuxième capteur peut être un capteur de sensibilité configuré pour détecter une longueur d'onde de 450 nm.
Le deuxième capteur est configuré pour détecter un signal très faible.
Le troisième capteur peut être un capteur configuré pour détecter une longueur d'onde de 450 nm.
Le système d'analyse comprend un consommable d'analyse comprenant l'au moins une cuvette configurée pour contenir l'échantillon biologique.
Le consommable d'analyse comprend un corps jetable configuré pour recouvrir et protéger une bande de forme radiale dans laquelle l'au moins une cuvette est disposée.
Avantageusement, la bande de forme radiale comprend une pluralité de cuvettes.
La bande de forme radiale est montée rotative dans le dispositif optique.
Avantageusement, au moins une autre cuvette est préremplie d'un réactif.
Le système d'analyse comprend une unité d'analyse configurée pour analyser des signaux provenant du dispositif optique.
Le système d'analyse comprend au moins un dispositif d'avertissement, configuré au moins pour communiquer les résultats de l'analyse à l'utilisateur.
D'autres caractéristiques, détails et avantages seront présentés dans la description détaillée suivante et dans les figures, dans lesquelles :
La figure 1 représente une vue schématique d'un dispositif optique de l'art antérieur.
La figure 2 représente une vue tridimensionnelle d'une partie du dispositif optique selon l'invention comprenant une bande de forme radiale ouverte dans la « partie A » et fermée dans la « partie B ».
La figure 3 représente une vue schématique du dispositif optique selon l'invention intégré dans la bande de forme radiale de la présente invention.
La figure 4 représente une vue schématique du canal d'illuminateur et du canal de détecteur du dispositif optique illustré à la figure 3.
La figure 5 représente une vue schématique du dispositif optique de la figure 3 avec une vue détaillée du canal d'illuminateur et du canal de détecteur, dans un côté inverse par comparaison avec la figure 4.
La figure 6 représente une vue schématique du dispositif optique illustré à la figure 4 comprenant un guide de lumière, selon l'invention.
La figure 7 représente une vue schématique d'un mélangeur de lumière optique et d'un séparateur optique mis en oeuvre avec des prismes trichroïques, selon l'invention.
La figure 8 représente une vue tridimensionnelle du dispositif optique.
La figure 9 représente une vue schématique d'un mini-spectromètre comme capteur du dispositif optique.
La figure 10 représente une vue tridimensionnelle d'une cuvette de la présente invention avec le seul faisceau de sortie collimaté.
La figure 11 est un graphe représentant une comparaison préliminaire entre les résultats obtenus à l'aide du dispositif de lecture de fluorescence actuel et les résultats obtenus à l'aide du dispositif optique de la présente invention.
La figure 12 est un graphe représentant des tests d'absorbance.
La figure 13 est une vue en perspective d'un mode de réalisation de l'invention.
La présente invention concerne un dispositif optique configuré pour mesurer la fluorescence et l'absorbance d'un échantillon de faible volume, dans le domaine des dosages immunologiques et/ou de la chimie humide.
L'invention se rapporte à un système d'analyse qui comprend un consommable d'analyse 100 doté d'au moins une cuvette 130 et un dispositif optique qui coopère avec ladite au moins une cuvette 130. Si l'on se réfère aux figures 2 à 6, le dispositif optique de la présente invention est configuré pour coopérer avec un consommable d'analyse 100 comprenant l'au moins une cuvette 130 configurée pour contenir l'échantillon biologique 132. Comme on peut le constater à la figure 2, le consommable d'analyse 100 comprend un corps jetable 110 configuré pour recouvrir et protéger une bande dé formé radiale 120 dans laquelle l'au moins une cuvette 130 est disposée. Par ailleurs, la bande de forme radiale 120 comprend une pluralité de cuvettes 130. La bande de forme radiale 130 est montée rotative dans le dispositif optique de l'invention.
Une extrémité rotative à quatre canaux 140 est disposée sur la partie supérieure du corps jetable 110 : trois canaux peuvent être dédiés au pré-traitement de l'échantillon et un canal peut être interfacé avec un pompage par exemple. Un marqueur de dosage 150 est disposé sur l'extrémité rotative à quatre canaux 140 et un marqueur de bande 134 est disposé sur la bande de forme radiale 120.
Le dispositif optique comprend en outre un canal d'illuminateur 26 comportant au moins une source de lumière 28 pour chaque spectre lumineux requis, une cuvette 130 contenant un échantillon 132 à analyser et un canal de détecteur 34. Ce canal d'illuminateur 26 génère de la lumière à longueurs d'onde multiples à partir du canal d'illuminateur 26. Le canal de détecteur 34 est configuré pour détecter de la lumière à longueurs d'onde multiples. Le canal de détecteur 34 comprend au moins un capteur 36. Le capteur 36 est configuré pour recevoir la lumière à longueurs d'onde multiples qui a traversé la cuvette 130 ou émise par l'échantillon 132 à l'intérieur de la cuvette 130. Le dispositif optique est configuré pour évaluer les mesures de fluorescence et d'absorbance en parallèle.
Comme illustré aux figures 4, 5 et 6, le canal d'illuminateur 26 et le canal de détecteur 34 sont interchangeables. Il n'y a pas de position spécifique pour le canal d'illuminateur 26 et le canal de détecteur 34. Cette interchangeabilité confère une flexibilité en termes de positionnement des canaux d'illuminateur 26 et de détecteur 34.
Selon la figure 7 , un mélangeur de lumière optique 38 est positionné entre le canal d'illuminateur 26 et la cuvette 130. Un séparateur optique 40 est positionné entre la cuvette 130 et le canal de détecteur 34. L'au moins une source de lumière 28 pour le spectre lumineux est modulée grâce à des systèmes adéquats logiciels (FW) et matériels (HW) connectés à l'au moins une source de lumière et à des récepteurs. Ces blocs de modulateur et de démodulateur sont configurés pour moduler la lumière et éliminer tout le bruit dû à la lumière ambiante ou aussi le bruit électronique.
Le mélangeur de lumière optique 38 comprend au moins un premier prisme trichroïque 42. Le premier prisme trichroïque 42 est configuré pour éviter de perdre de l'énergie en sélectionnant des longueurs d'onde spécifiques et pour obtenir un seul faisceau de sortie collimaté 44. Si l'on se réfère aux figures 6 et 7 , le premier prisme trichroïque 42 permet d'utiliser au moins un guide de lumière 46.
Si l'on se réfère aux figures 7 et 8, le canal d'illuminateur 26 peut comprendre trois sources de lumière pour des spectres lumineux. La première source de lumière d'excitation 48 est une diode électroluminescente (DEL) blanche dotée d'une large bande de source d'excitation pour un spectre lumineux. L'expression « large bande » signifie des longueurs d'onde comprises, par exemple, entre 340 nm et 700 nm. Cette large bande de source d'excitation pour un spectre lumineux peut être utilisée pour des tests d'absorbance. La deuxième source de lumière d'excitation 50 pour un spectre lumineux est, par exemple, une DEL à UV configurée pour émettre à 340 nm et la troisième source de lumière d'excitation 52 pour un spectre lumineux est, par exemple, une DEL à ultraviolets (UV) configurée pour émettre à 370 nm. Chaque source de lumière d'excitation pour un spectre lumineux émet un faisceau à sa propre bande de longueurs d'onde. Ce premier prisme trichroïque 42 combine les trois longueurs d'onde différentes en un seul faisceau de sortie 44 qui éclaire une face de la cuvette 130 contenant l'échantillon 132 à analyser. Le premier prisme trichroïque 42 est configuré pour obtenir
un faisceau collimaté. Le dispositif optique comprend en outre un boîtier 54 pour la cuvette 130 qui est positionné entre le canal d'illuminateur 26 et le canal de détecteur 34.
Comme illustré à la figure 7 , du côté du canal de détecteur 34, les longueurs d'onde à détecter sont sélectionnées. Le séparateur optique 40 peut comprendre un deuxième prisme trichroïque 43. Ce deuxième prisme trichroïque sépare le seul faisceau de sortie 44 en un premier 56, un deuxième 58 et un troisième 60 faisceaux de détection. Le premier 56, le deuxième 58 et le troisième 60 faisceaux de détection sont détectés grâce aux trois capteurs. Par exemple, le premier capteur 62 peut être un capteur à large bande détectant des longueurs d'onde comprises entre 340 nm et 700 nm. Comme illustré à la figure 9, le premier capteur 62 peut être un mini-spectromètre. La sélection des longueurs d'onde devant être mesurées est effectuée à l'intérieur du mini-spectromètre lui-même. À l'intérieur du mini-spectromètre, il y a un réseau de pixels 64 susceptibles de recevoir chacun une longueur d'onde spécifique 66 (cf. la figure 9). Chaque longueur d'onde du faisceau de détection éclaire un seul pixel à l'intérieur du mini-spectromètre. Le deuxième capteur 68 peut être un capteur de sensibilité détectant une longueur d'onde de 450 nm. Ce deuxième capteur 68 est configuré pour détecter un signal très faible. La cuvette 130 contenant un faible volume d'échantillon 130, de très faibles signaux doivent être détectés par le deuxième capteur 68 et particulièrement pour la mesure de fluorescence. Le troisième capteur 70 peut être un capteur détectant une longueur d'onde de 450 nm. Le canal de détecteur 34 est configuré pour filtrer la lumière au besoin sans devoir avoir recours à des pièces mobiles. Le dispositif optique est plus stable que les dispositifs optiques de l'art antérieur.
Le dispositif optique utilise la même cuvette 130 pour effectuer la mesure de fluorescence et/ou d'absorbance. Les mesures de fluorescence et d'absorbance peuvent être réalisées en même temps et/ou en parallèle. Par conséquent, il n'y a pas de diaphonie entre l'effet des deux tests. La cuvette 130 est configurée avec un matériau spécifique constitué de différents types de plastiques. Comme illustré à la figure 10, la forme de cette cuvette 130 est aussi particulière car le volume de l'échantillon est très faible, habituellement compris entre 130 pL et 200 pL. Le volume éclairé est maximisé, et le volume mort est réduit au minimum.
Le dispositif optique est configuré pour être miniaturisé et pouvoir être intégré dans un instrument de mesure. Ce dispositif optique n'a pas de pièces mobiles et, par conséquent, il est stable. Le dispositif optique s'accorde avec toutes les contraintes mécaniques.
Par la mesure de la fluorescence et de l'absorbance en parallèle, le dispositif optique est particulièrement approprié aux dosages immunologiques et/ou à la chimie humide. Par exemple, la procalcitonine peut être mesurée par fluorescence et la créatinine peut être mesurée par absorbance en parallèle au moyen du même dispositif pendant le même cycle. Ces mesures sont utiles pour l'évaluation de la défaillance viscérale du foie lors de la septicémie.
Si l'on se réfère à la figure 8, des tests de mesures de fluorescence et d'absorbance ont été effectués. Le canal d'illuminateur 26 comprend trois sources d'excitation pour des spectres lumineux. La première source d'excitation 48 pour un spectre lumineux est une DEL blanche à large bande de source
d'excitation. Cette large bande de source d'excitation peut être utilisée pour des tests d'absorbance. La deuxième source d'excitation 50 pour un spectre lumineux est une DEL à UV configurée pour émettre à 340 nm et la troisième source d'excitation 52 pour un spectre lumineux est une DEL à UV configurée pour émettre à 370 nm. Le dispositif optique comprend en outre un boîtier 54 pour la cuvette qui est positionné entre le canal d'illuminateur 26 et le canal de détecteur 34. Le canal de détecteur 34 comprend un micro-spectromètre correspondant à un capteur à large bande détectant des longueurs d'onde comprises entre 340 et 700 nm. Un mélangeur de lumière optique 38 est positionné entre le canal d'illuminateur 26 et la cuvette 130. Ce mélangeur de lumière optique 38 est un premier prisme trichroïque 42. Un séparateur optique 40 est positionné entre la cuvette 130 et le canal de détecteur 34. Un seul mini-spectromètre similaire à un capteur à large bande est positionné entre la cuvette 130 et le canal de détecteur 34.
Une comparaison préliminaire entre les résultats obtenus à l'aide du dispositif de lecture de fluorescence actuel et les résultats obtenus à l'aide du dispositif optique de la présente invention est donnée comme suit. Le graphe à la figure 11 présente la fluorescence en coups purs en ordonnée 72 et les concentrations de fluorophore en « nM » en abscisse 74. La ligne continue 76 représente les résultats obtenus à l'aide du dispositif optique de la présente invention et la ligne discontinue 78 représente les résultats obtenus à l'aide de l'instrument actuel de mesures de fluorescence. La faible différence observée pourrait être due au réglage différent des sources d'excitation pour des spectre lumineux et peut facilement être chevauchée à l'aide d'un facteur de conversion linéaire.
Des tests d'absorbance ont également été réalisés. Le graphe à la figure 12 présente l'absorbance 80 en ordonnée 82 et la concentration de l'échantillon en nM en abscisse 84. La ligne continue 86 représente les résultats obtenus à l'aide du dispositif optique de la présente invention et la ligne discontinue 88 représente ceux qui ont été obtenus à l'aide d'un spectrophotomètre. Le même échantillon est utilisé. Les résultats obtenus à l'aide du dispositif optique de la présente invention et ceux obtenus au moyen d'un instrument d'absorbance réel sont comparables.
Dans le mode de réalisation représenté à la figure 13, le canal d'illuminateur 26 comprend deux sources : une DEL à UV (ultraviolets) configurée pour émettre à 370 nm et une DEL blanche configurée pour émettre entre 400 et 700 nm. La DEL à UV 82 est configurée pour mesurer la fluorescence et la DEL blanche 84 pour mesurer l'absorbance. Les deux DEL pourraient être utilisées simultanément et modulées chacune à différentes fréquences. Le canal de détecteur 34 comprend deux capteurs : un capteur à compteurs de photons multi-pixels (MPPC) 86 configuré pour mesurer un signal de fluorescence faible et un spectromètre 88 configuré pour mesurer un signal de fluorescence élevé à moyen et pour l'absorbance. Les deux capteurs pourraient lire simultanément. Le spectromètre pourrait distinguer la lumière de fluorescence ou la lumière d'absorbance grâce à différentes fréquences utilisées pour moduler les deux sources d'excitation (DEL à UV et DEL blanche).
Le mélangeur de lumière optique 38 est une combinaison intégrée de lentilles et de verres configurée pour transmettre un seul faisceau de sortie collimaté 44 du canal d'illuminateur 26 à la cuvette 130. Le mélangeur de lumière optique 38 comprend une première 90 et une deuxième 92 lentilles, un
premier miroir 94 configuré pour réfracter la lumière émise par la DEL à UV, un premier mélangeur de faisceaux 96 et une troisième lentille 98. Entre le mélangeur de lumière optique 38 et la cuvette 130, le seul faisceau de sortie collimaté 44 traverse un deuxième miroir 204, une lentille 206, un filtre 208, une lentille de suivi 210 et un troisième miroir 212.
Le séparateur optique 40 est une combinaison intégrée de lentilles et de verres configurée pour séparer le faisceau de sortie unique 44 qui a traversé la cuvette en au moins deux faisceaux de détection 80. Le séparateur optique 40 comprend au moins deux lentilles 200, deux filtres et un séparateur de faisceau 202.
Claims
1. Dispositif optique configuré pour mesurer la fluorescence et l'absorbance dans un échantillon de dosage immunologique et/ou de chimie humide comprenant : un canal d'illuminateur (26) comportant au moins une source de lumière (28) pour chaque spectre lumineux requis, un canal de détecteur (34) comportant au moins un capteur (36) servant à mesurer lesdites fluorescence et absorbance dans ledit échantillon de dosage immunologique et/ou de chimie humide, une cuvette (130) configurée pour contenir ledit échantillon de dosage immunologique ou de chimie humide (132) entre le canal d'illuminateur (26) et le canal de détecteur (34), un mélangeur de lumière optique (38) entre le canal d'illuminateur (26) et la cuvette (130) et un séparateur optique (40) entre la cuvette (130) et le canal de détecteur (34).
2. Dispositif optique selon la revendication 1, le mélangeur de lumière optique (38) étant une combinaison intégrée de lentilles et de verres qui est configurée pour transmettre un faisceau de sortie collimaté unique (44) du canal d'illuminateur à la cuvette.
3. Dispositif optique selon l'une des revendications 1 ou 2, le séparateur optique (40) étant une combinaison intégrée de lentilles et de verres qui est configurée pour séparer le faisceau de sortie unique (44) qui a traversé la cuvette en au moins deux faisceaux de détection (80).
4. Dispositif optique selon la revendication 1, le mélangeur de lumière optique (38) comprenant un premier prisme trichroïque (42) qui est configuré pour transmettre un faisceau de sortie collimaté unique (44) du canal d'illuminateur à la cuvette.
5. Dispositif optique selon la revendication 4, le canal d'illuminateur (26) comprenant une première, une deuxième et une troisième source de lumière pour un spectre lumineux.
6. Dispositif optique selon la revendication 1 à 5, la première source de lumière d'excitation (48) pour un spectre lumineux étant une DEL blanche.
7. Dispositif optique selon la revendication 1 à 6, la deuxième source de lumière d'excitation (50) pour un spectre lumineux étant une DEL à UV configurée pour émettre à 340 nm.
8. Dispositif optique selon l'une des revendication 1 à 7, la troisième source de lumière d'excitation (52) pour un spectre lumineux étant une DEL à UV configurée pour émettre à 370 nm.
9. Dispositif optique selon l'une des revendications 4 à 8, le séparateur optique (40) comprenant un deuxième prisme trichroïque (43) configuré pour séparer le faisceau de sortie unique (44) qui a traversé la cuvette en un premier (56), un deuxième (58) et un troisième (60) faisceau de détection.
10. Dispositif optique selon la revendication 1 à 9, le canal de détecteur (34) comprenant un premier (62), un deuxième (68) et un troisième (70) capteur.
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