EP4003301A1 - Procédé continu de nano-émulsification par inversion de phase en concentration - Google Patents

Procédé continu de nano-émulsification par inversion de phase en concentration

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Publication number
EP4003301A1
EP4003301A1 EP20756917.9A EP20756917A EP4003301A1 EP 4003301 A1 EP4003301 A1 EP 4003301A1 EP 20756917 A EP20756917 A EP 20756917A EP 4003301 A1 EP4003301 A1 EP 4003301A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
microchannel
fatty
lipid nanocapsules
phase
surfactants
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP20756917.9A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Brice CALVIGNAC
Jean-Christophe GIMEL
Emilie Roger
Nicolas ROLLEY
Guillaume LEFEBVRE
Guillaume Bastiat
Florian FOUCHET
Kévin MATHA
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite dAngers
Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite dAngers
Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Universite dAngers, Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Publication of EP4003301A1 publication Critical patent/EP4003301A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Definitions

  • the present invention relates to the field of nanoemulsion formulations, more particularly the invention relates to a continuous process of nanoemulsification carried out by phase concentration inversion (IPC).
  • IPC phase concentration inversion
  • the present invention also relates to lipid nanocapsules that can be obtained by the process according to the invention.
  • the present invention relates to the use of the lipid nanocapsules according to the invention for the encapsulation of molecules such as a pharmacologically active molecule.
  • Nano formulations such as lipid nanoemulsions (NEL), solid lipid nanoparticles (NLS) or even nanostructured lipid vectors such as lipid nanocapsules (NCL)
  • NNL lipid nanoemulsions
  • NLS solid lipid nanoparticles
  • NCL nanostructured lipid vectors
  • the lipid nanocapsules kinetically very stable, are not very sensitive to changes in temperature and composition. They are of very particular interest. For example, it has been shown that these nanoformulations could be used as encapsulation and drug delivery systems (Hôrmann and Zimmer, 2016, J. Controlled Release, 223, 85-98).
  • Two main techniques are used for the production of lipid nanocapsules: - High energy methods, such as high pressure homogenization (HHP) technology and ultrasound technology.
  • Patent WO2001064328 describes a process for formulating lipid nanocapsules by temperature phase inversion, “IPT process”. However, since this process is based on a temperature variation over time, it also does not allow the use of heat-sensitive molecules.
  • a risk of the method described lies in the difficulty of controlling the operating conditions (temperature and mixing conditions) and the variabilities in the size of the lipid nanocapsules as well as their size polydispersity index (known as PDI, Polydispersity Index). are often observed.
  • the method according to the invention has the advantage of providing lipid nanocapsules having a homogeneous and controlled particle size, that is to say with a very low polydispersity.
  • the method according to the invention makes it possible in particular to produce lipid nanocapsules at different scales. Indeed, unlike a "batch" process, the continuous process according to the invention can easily be transposed to an industrial scale, for example by simply putting different microfluidic reactors in parallel or by using static mixers.
  • Another advantage of the process of the present invention is to be able to formulate, on demand, nanomedicines at low temperature, for example at body temperature, on an industrial scale for a production of nanomedicines on a large scale or on a laboratory scale for the production of personalized treatment.
  • the invention therefore relates to a continuous nano-emulsification process characterized in that said process is carried out by concentration phase inversion (IPC) in a microfluidic reactor, and comprising the following steps:
  • the surfactant (s) are chosen from nonionic hydrophilic surfactants, and mixtures thereof. In one embodiment, the surfactant (s) are chosen from mono- and di-esters of fatty acid and of polyethylene glycol, and their mixtures. In one embodiment, the surfactant (s) are chosen from mono- and di-esters of stearic acid and of polyethylene glycol, and mixtures thereof.
  • the fatty substance (s) are chosen from mono-esters, di-esters and tri-esters of glycerol, mono-esters and di-esters of polyethylene glycol, and mixtures thereof. In one embodiment, the fatty substance (s) are chosen from Cs-Cis triglycerides, and mixtures thereof. In one embodiment, the fatty substance (s) are chosen from triglycerides of capric and caprylic acids and their mixtures. In one embodiment, the fatty phase further comprises one or more co-surfactants. In one embodiment, the fatty phase further comprises one or more co-surfactants chosen from nonionic surfactants. In one embodiment, the fatty phase further comprises one or more co-surfactants chosen from sorbitan monooleate or diethylene glycol mono-ethyl ether, and mixtures thereof.
  • the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactants and co-surfactants over the flow rate of fatty substances in the formulation chamber is between 0.8 and 4. In one embodiment, the weight ratio the sum of the flow rates of surfactants and co-surfactants over the flow rate of fatty substances in the formulation chamber is between 2 and 4.
  • the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactant, co-surfactants and fatty substances to the flow rate of the aqueous phase in the formulation chamber is between 0.03 and 0.3. In one embodiment, the weight ratio the sum of the flow rates of surfactant, co-surfactants and fatty substances over the flow rate of the aqueous phase in the formulation chamber is between 0.04 and 0.2.
  • the fatty phase further comprises water, in a content of between 0% and 30% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises water, in a content of between 0% and 20% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises water, in a content of between 0% and 15% by weight, relative to the total weight of the fatty phase.
  • the first microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 70 ° C, preferably between 30 ° C and 50 ° C.
  • the second microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 70 ° C, preferably between 30 ° C and 50 ° C.
  • the invention also relates to lipid nanocapsules capable of being obtained by the method as described above, said nanocapsules comprising one or more co-surfactants chosen from nonionic surfactants, preferably chosen from sorbitan monooleate or mono- ethyl ether of diethylene glycol and mixtures thereof.
  • co-surfactants chosen from nonionic surfactants, preferably chosen from sorbitan monooleate or mono- ethyl ether of diethylene glycol and mixtures thereof.
  • the lipid nanocapsules further comprise a thermosensitive pharmacologically active principle, preferably chosen from peptides, proteins or nucleic acids, anticancer agents, anti-infective agents or antibiotics.
  • the lipid nanocapsules have a particle size of between 20 and 100 nm, preferably between 15 and 50 nm, more preferably between 20 and 35 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.2, preferably between 0.05 and 0.1.
  • the invention also relates to the use of lipid nanocapsules as described above as nanovectors of pharmacologically active principle.
  • the pharmacologically active principle is a heat-sensitive active.
  • Active agent relates to a compound of therapeutic or cosmetic interest.
  • the active agent is a pharmacologically active molecule.
  • the active agent is a cosmetic active.
  • Cosmetic active relates to a substance or a mixture intended to be brought into contact with the superficial parts of the human body or with the teeth and the oral mucous membranes, with a view, exclusively or mainly, to cleaning them, to perfume them, to change their appearance, protect them, keep them in good condition or correct body odor
  • Fatty substance designates a compound such as oils, lipids, lipophilic molecules and other non-polar solvents, capable of dissolving in fatty phases, but immiscible in aqueous phases at 25 ° C and atmospheric pressure .
  • the aqueous phase is prepared in a first mixing chamber.
  • the fatty phase is prepared in a second mixing chamber by mixing a fatty substance as defined in the present invention and a surfactant as defined in the present invention.
  • the mixing chamber in which the aqueous phase is prepared is connected via a first microchannel to a formulation chamber.
  • the mixing chamber in which the fatty phase is prepared is connected via a second microchannel to said formulation chamber.
  • “Formulation chamber” designates the place where said fatty phase and said aqueous phase are brought into contact in order to cause the nanoemulsification process, leading to the formation of the lipid nanocapsules according to the invention.
  • “Hydrophilic” relates to a molecule or portion of a molecule being negatively or positively charged or neutral, capable of forming hydrogen bonds, allowing easier dissolution in water than in oil or other solvents.
  • Polydispersity index designates in the case of a monomodal size distribution, the ratio of the variance of the size of the particles to the square of the mean size of the particles.
  • Lipophilic concerns a chemical compound capable of dissolving in fatty phases such as oil, lipids and other non-polar solvents.
  • Microchannel concerns a channel whose characteristic dimension allows the flow of fluids such as liquids or gases.
  • the microchannel can be delimited by a lower wall, an upper wall and two opposite side walls; the distance between the opposing side walls is the characteristic distance.
  • the microchannel has a characteristic distance of between about 100 mhi to about 2000 mhi.
  • the microchannel has a characteristic distance between 100 mhi and 1500 ⁇ m.
  • the microchannel has a characteristic distance between 500 ⁇ m and 1500 ⁇ m.
  • the microchannel has a characteristic distance between 800 and 1200 ⁇ m.
  • the microchannel has a characteristic distance between 100 ⁇ m and 500 ⁇ m.
  • the microchannel has a characteristic distance between 100 and 300 ⁇ m.
  • the microfluidic channel can also be a cylindrical channel, the diameter of which is the characteristic distance.
  • microfluidic relates to a structure comprising at least one microchannel.
  • microfluidics relates to a structure comprising at least two microchannels.
  • microfluidics relates to a structure comprising at least three microchannels.
  • lipid nanocapsules relates to a nanoparticle consisting of a liquid or semi-liquid core at room temperature, coated with a film that is solid at room temperature.
  • the lipid nanocapsules comprise a core consisting of one or more fatty substances and a crown consisting of one or more surfactants and / or co-surfactants.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 120 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 70 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 120 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 100 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 50 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 50 and 100 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 50 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 35 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 35 and 50 nm.
  • Nano-emulsification refers to a process consisting of dispersing two immiscible liquid phases, such as water and oil, but which through specific operations succeed in having a macroscopically homogeneous, but microscopically heterogeneous, appearance.
  • One of the phases will be dispersed in the second phase in the form of nano-droplets or liquid nanoparticles.
  • the lipid nanodroplets or nanoparticles are lipid nanocapsules as described above.
  • Nano-emulsion relates to an emulsion produced by nano-emulsification, composed of nano-droplets or nano-particles with a size in a range from 15 nm to 120 nm.
  • a nanoemulsion is an emulsion which comprises nanodroplets or nanoparticles with a size in the range of 15nm to 70nm.
  • a nano-emulsion is an emulsion that includes nano-droplets. or nano-particles with a size in the range of 20 nm to 120 nm.
  • a nanoemulsion is an emulsion which comprises nanodroplets or nanoparticles with a size in the range of 20nm to 100nm.
  • a nanoemulsion is an emulsion which comprises nanodroplets or nanoparticles with a size in the range of 20nm to 50nm.
  • the nano-droplets or the lipid nanoparticles are lipid nanocapsules as described above.
  • “Oily phase” or “oily phase” are equivalent terms. They denote a phase comprising at least 50% of one or more fatty substances immiscible in water at 25 ° C and atmospheric pressure. In one embodiment, they denote a phase comprising at least 60% of one or more fatty substances immiscible in water at 25 ° C and atmospheric pressure. In one embodiment, they denote a phase comprising at least 70% of one or more fatty substances immiscible in water at 25 ° C and atmospheric pressure. In one embodiment, they denote a phase comprising at least 80% of one or more fatty substances immiscible in water at 25 ° C and atmospheric pressure.
  • “Pharmacologically active molecule” relates to a compound of therapeutic interest. Primarily, a pharmacologically active molecule may be indicated for the treatment or prevention of diseases.
  • Treatment of a disease refers to the reduction or elimination of at least one adverse effect or symptom of a disease, disorder or condition associated with the deficiency of an organ, tissue or cellular function.
  • the term “preventing disease” refers to preventing the onset of a symptom.
  • Heat-sensitive active agent relates, within the meaning of the invention, to a molecule which can undergo a modification of its chemical structure due to the rise in temperature. In one embodiment, the molecule is cut into one or more fragments. In one embodiment, the molecule undergoes degradation of its biological activity. In one embodiment, the molecule undergoes degradation of its pharmacological activity.
  • the active agent thermosensitive has a sensitivity to a temperature above 70 ° C, preferably above 50 ° C.
  • the heat-sensitive active agent is a pharmacologically active principle.
  • the heat-sensitive active agent is a heat-sensitive cosmetic active.
  • the heat-sensitive active agent is chosen from peptides, proteins, nucleic acids, anticancer agents, anti-infective agents or antibiotics.
  • surfactant concerns an amphiphilic compound which, by virtue of this particular structure, makes it possible to lower the free energy of interfaces, for example the oil / water or air / water interfaces.
  • a surfactant is a compound which modifies the interfacial tension between two surfaces. Surfactants facilitate the formation of drops or bubbles by reducing the interfacial tension.
  • SOWR designates the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactants, co-surfactants and fatty substances over the flow rate of the aqueous phase in the formulation chamber.
  • the present invention relates to a continuous nano-emulsification process characterized in that said process is carried out by concentration phase inversion (IPC) in a microfluidic reactor, and comprising the following steps:
  • the method according to the invention comprises a step of injecting an aqueous phase into a first microchannel, the first microchannel opening into a formulation chamber.
  • the aqueous phase comprises at least 90% by weight of water.
  • the aqueous phase comprises at least 95% by weight of water.
  • the aqueous phase comprises at least 98% by weight of water.
  • the aqueous phase consists of water.
  • the water is MilliQ ultrapure water filtered through 0.2 mhi.
  • the aqueous phase further comprises an active agent.
  • the active agent is a heat-sensitive active.
  • the active agent is a heat-sensitive pharmacologically active ingredient.
  • the active agent is a heat-sensitive cosmetic active.
  • the heat-sensitive active agent is hydrophilic in nature.
  • the heat-sensitive active agent is selected from peptides, proteins, nucleic acids, anticancer agents or anti-infective agents.
  • the aqueous phase is injected into the formulation chamber.
  • the aqueous phase is prepared in a mixing chamber.
  • the outlet of the mixing chamber is connected via said first microchannel to the formulation chamber.
  • the mixing chamber is of the static mixer type, that is to say a device for continuously mixing aqueous phases.
  • the outlet of the mixing chamber is connected via said first microchannel to the formulation chamber.
  • the mixing chamber is of the stirred tank type, that is to say that the aqueous phases are mixed by mechanical action.
  • the outlet of the mixing chamber is connected via said first microchannel to the formulation chamber.
  • the first microchannel is made of a polymer. In one embodiment, the first microchannel is made of a polymer selected from polyaryletherketones (PE AK). In one embodiment, the first microchannel is made of polyetheretherketone (PEEK).
  • PE AK polyaryletherketones
  • PEEK polyetheretherketone
  • the first microchannel is made of silica.
  • the first microchannel is made of silicon. In one embodiment, the first microchannel is made of glass.
  • the first microchannel is made of polytetrafluoroethylene (PTFE).
  • PTFE polytetrafluoroethylene
  • the first microchannel is a parallelepipedal channel.
  • the characteristic distances of the channel are depth and width.
  • the first microchannel has a depth of between 100mh and 1500mh.
  • the first microchannel has a width of between 100 ⁇ m and 1500 mhi.
  • the first microchannel is a cylindrical channel.
  • the characteristic distance of the channel is the diameter.
  • the first microchannel has a characteristic distance between 200 ⁇ m and 2000 ⁇ m.
  • the first microchannel has a characteristic distance between 500 ⁇ m and 1500 ⁇ m.
  • the first microchannel has a characteristic distance between 800 and 1200 ⁇ m.
  • the injection of the aqueous phase into the first microchannel is carried out by means of a syringe pump pump.
  • the injection of the aqueous phase into the first microchannel is carried out by means of a ISCO 100DX syringe pump.
  • the injection of the aqueous phase into the first microchannel is accomplished by means of a Harvard Apparatus PHD Ultra syringe pump. In one embodiment, the injection of the aqueous phase into the first microchannel is carried out by means of an Elveflow OBI MK3 pressure controller.
  • the flow rate of aqueous phase in the first microchannel is between 100 qL / min and 500,000 pL / min, preferably between 1000 pL / min and 72,500 pL / min.
  • the first microchannel is thermalized, that is to say permanently maintained at a set temperature. In one embodiment, the first microchannel is thermalized by a water circulation system via the use of a thermostated bath.
  • the first microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 70 ° C. In one embodiment, the first microchannel is thermalized at a temperature of 20 ° C, 25 ° C, 30 ° C, 35 ° C, 40 ° C, 45 ° C, 50 ° C, 55 ° C, 60 ° C , 65 ° C, 70 ° C. the first microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 30 ° C. In a preferred embodiment, the first microchannel is thermalized at a temperature between 30 ° C and 50 ° C.
  • the method according to the invention comprises a step of injecting into a second microchannel of a fatty phase comprising one or more fatty substances immiscible in said aqueous phase, and one or more surfactants, the second microchannel opening into the formulation chamber.
  • the fatty phase is injected into the formulation chamber.
  • the fatty phase is prepared in a mixing chamber.
  • the outlet of the mixing chamber is connected via said second microchannel to the formulation chamber.
  • the mixing chamber is of the static mixer type, that is to say a device for continuously mixing fatty phases.
  • the output of the static mixer is connected via said second microchannel to the formulation chamber.
  • the mixing chamber is of the stirred tank type, that is to say that the fatty phases are mixed by mechanical action.
  • the outlet of the stirred tank is connected via said second microchannel to the formulation chamber.
  • the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactants and co-surfactants over the flow rate of fatty substances (SOR) in the formulation chamber is between 0.8 and 4. In one embodiment, the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactants and co-surfactants to the flow rate of fatty substances (SOR) in the formulation chamber is between 2 and 4.
  • the second microchannel is made of a polymer. In one embodiment, the second microchannel is made of a polymer selected from polyaryletherketones (PEAK). In one embodiment, the second microchannel is made of polyetheretherketone (PEEK).
  • PEAK polyaryletherketones
  • PEEK polyetheretherketone
  • the second microchannel is made of silica.
  • the second microchannel is made of silicon. In one embodiment, the second microchannel is made of glass.
  • the second microchannel is a parallelepipedal channel.
  • the characteristic distances of the canal are depth and width.
  • the second microchannel has a depth of between 100mh and 1500mh.
  • the second microchannel has a width between 100 mhi and 1500 mhi.
  • the second microchannel is a cylindrical channel.
  • the characteristic distance of the channel is the diameter.
  • the second microchannel has a characteristic distance of between 100 mhi and 1500 mhi.
  • the second microchannel has a characteristic distance between 500 ⁇ m and 1500 mhi.
  • the second microchannel has a characteristic distance between 800 and 1200 ⁇ m.
  • the second microchannel has a characteristic distance between 100 ⁇ m and 500 ⁇ m.
  • the second microchannel has a characteristic distance of between 100 and 300 ⁇ m.
  • the injection of the fatty phase into the second microchannel is carried out by means of a syringe pump. In one embodiment, the injection of the fatty phase into the second microchannel is carried out by means of an ISCO 100DX syringe pump. In one embodiment, the injection of the fatty phase into the second microchannel is performed using a Harvard Apparatus PHD 2000 infusion syringe pump. In one embodiment, the injection of the aqueous phase into the second microchannel is performed by means of an Elveflow OBI MK3 pressure controller.
  • the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 50 ⁇ L / min and 500,000 ⁇ L / min. In one embodiment, the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 300 pL / min and 10,000 pL / min. In one embodiment, the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 100 pL / min and 500,000 pL / min. In one embodiment, the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 50 pL / min and 300 pL / min. In one embodiment, the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 100 pL / min and 300 pL / min.
  • the fatty phase flow rate in the second microchannel is between 300 pL / min and 500 pL / min. In one embodiment, the flow rate of fatty phase in the second microchannel is between 500 pL / min and 1000 pL / min.
  • the second microchannel is thermalized, that is to say permanently maintained at a set temperature. In one embodiment, the second microchannel is thermalized by a water circulation system via the use of a thermostated bath.
  • the second microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 70 ° C. In one embodiment, the second microchannel is thermalized at a temperature of 20 ° C, 25 ° C, 30 ° C, 35 ° C, 40 ° C, 45 ° C, 50 ° C, 55 ° C, 60 ° C , 65 ° C, 70 ° C. the second microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 30 ° C. In a preferred embodiment, the second microchannel is thermalized at a temperature between 30 ° C and 50 ° C. In one embodiment, the surfactant (s) of the fatty phase are chosen from nonionic hydrophilic surfactants, and mixtures thereof.
  • the surfactant (s) of the fatty phase are chosen from mono- and di-esters of fatty acid and of polyethylene glycol, and mixtures thereof. In one embodiment, the surfactant (s) of the fatty phase are chosen from mono- and di-esters of stearic acid and of polyethylene glycol, and mixtures thereof. In one embodiment, the fatty phase surfactant is Kolliphor ® HS 15 from BASF. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more surfactants in a content of between 40% and 65% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more surfactants in a content of between 45% and 65% by weight, relative to the total weight of the fatty phase.
  • the fatty phase comprises one or more surfactants in a content of between 45% and 55% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more surfactants in a content of between 55% and 65% by weight, relative to the total weight of the fatty phase.
  • the fatty substance (s) of the fatty phase are chosen from glycerol mono-esters, di-esters and tri-esters, polyethylene glycol mono-esters and di-esters, and mixtures thereof. In one embodiment, the fatty substance (s) of the fatty phase are chosen from Cs-Cis triglycerides, and mixtures thereof. In one embodiment, the fatty substance (s) are chosen from triglycerides of capric and caprylic acids and their mixtures. In one embodiment, the fat of the fatty phase is Labrafac ® WL 1349 Gattefosse. In one embodiment, the fatty substance of the fatty phase is Captex ® 8000 from Abitec.
  • the fat of the fat phase is Labrafil ® Ml 944 CS from Gattefosse (mixture of mono-, di- and triglycerides, PEG-6 oleate mono- and di triesters).
  • the fatty substance of the fatty phase is Ethyl Oleate.
  • the fatty substance of the fatty phase is Ethyl Palmitate.
  • the fatty substance of the fatty phase is Glyceryl Oleate.
  • the fatty phase comprises one or more fatty substances in a content of between 20% and 60% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more fatty substances in a content of between 25% and 55% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more fatty substances in a content of between 25% and 35% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase comprises one or more fatty substances in a content of between 35% and 55% by weight, relative to the total weight of the fatty phase.
  • the fatty phase further comprises one or more co-surfactants.
  • the co-surfactant (s) are chosen from lipophilic surfactants and their mixtures.
  • the co-surfactant of the fatty phase is a phospholipid chosen from lecithins, phosphatilglycerol, phophatidylinositol, phosphatidylserine, phophatidic acid, phosphatidylethanolamine and their mixtures.
  • the co-surfactant (s) are chosen from nonionic surfactants and their mixtures.
  • the co-surfactant is chosen from sorbitan esters.
  • the co-surfactant is sorbitan monooleate. In one embodiment, the co-surfactant is Span 80 ® from BASF. In one embodiment, the co-surfactant is diethylene glycol mono-ethyl ether. In one embodiment, the co-surfactant is Transcutol ® HP Gattefossé.
  • the fatty phase further comprises one or more cosurfactants in a content of between 0% and 20% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises one or more co-surfactants in a content of between 0% and 10% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises one or more co-surfactants in a content of between 10% and 20% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises water. In one embodiment, the fatty phase further comprises water in a content of between 0% and 30% by weight, relative to the total weight of the fatty phase. In one embodiment, the fatty phase further comprises water in a content of between 0% to 20%. In one embodiment, the fatty phase further comprises water in a content of between 0% to 15%.
  • the fatty phase further comprises an active agent.
  • the active agent is a heat-sensitive active.
  • the active agent is a heat-sensitive pharmacologically active ingredient.
  • the active agent is a heat-sensitive cosmetic active.
  • the heat-sensitive active agent is hydrophilic in nature.
  • the heat-sensitive active agent is lipophilic in nature.
  • the heat-sensitive active agent is chosen from among peptides, proteins or nucleic acids, anticancer agents or anti-infective agents.
  • the method according to the invention comprises a step c of mixing the aqueous phase and the fatty phase in the formulation chamber.
  • the formulation chamber is of the “co-flow” type, that is to say that the flow of the first microchannel and the flow of the second microchannel are in the same direction and open into the formulation chamber. from the same direction.
  • the formulation chamber is of the “co-flow” type and the first microchannel has a larger diameter than that of the second microchannel.
  • the formulation chamber is of the “co-flow” type and the first microchannel includes the second microchannel.
  • the formulation chamber is of type "T", that is to say that the flow of the first microchannel and the flow of the second microchannel in the formulation chamber form a "T" with the flow of output channel.
  • the flow of the first microchannel and the flow of the second microchannel in the mixing chamber form an angle of between 30 ° and 150 ° with the flow of the outlet channel. In one embodiment, the flow of the first microchannel and the flow of the second microchannel in the mixing chamber form an angle of 45 ° with the flow of the outlet channel.
  • the flow of the first microchannel and the flow of the second microchannel in the mixing chamber form an angle of 135 ° with the flow of the outlet channel.
  • the formulation chamber is of the “Flow focusing” type (also called hydrodynamic focusing), ie the flow of the first microchannel is focused in a narrowing by the flow of a second microchannel and of 'a third microchannel.
  • the flow of the first microchannel and the flow of the second or third microchannel in the mixing chamber form an angle of between 15 ° and 90 °.
  • the first microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 70 ° C. In one embodiment, the first microchannel is thermalized at a temperature of 20 ° C, 25 ° C, 30 ° C, 35 ° C, 40 ° C, 45 ° C, 50 ° C, 55 ° C, 60 ° C , 65 ° C, 70 ° C. the first microchannel is thermalized at a temperature between 20 ° C and 30 ° C. In a preferred embodiment, the first microchannel is thermalized at a temperature between 30 ° C and 50 ° C.
  • the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactants, co-surfactants and fatty substances on the flow rate of the aqueous phase (SOWR) in the formulation chamber is between 0.01 and 0.30. In one embodiment, the weight ratio of the sum of the flow rates of surfactant, co-surfactants and fatty substances to the flow rate of the aqueous phase (SOWR) in the formulation chamber is between 0.03 and 0.3 , preferably is between 0.04 and 0.2.
  • the method according to the invention comprises a step of recovering, at the outlet from the formulation chamber, a suspension comprising lipid nanocapsules in an aqueous phase.
  • the method of the present invention as described above allows the formulation of a lipid nanocapsule at low temperature.
  • This embodiment is particularly advantageous for the encapsulation of pharmacologically active principle. temperature sensitive.
  • the lipid nanocapsules obtained at low temperature also have a lower polydispersity, allowing the production of nanomedicines of uniform size with a view to optimal efficiency in targeting and cell internalization.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 120 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 70 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 120 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 100 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 50 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 50 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 50 and 100 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 35 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 35 and 50 nm.
  • the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.2. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.15. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.1.
  • the invention also relates to lipid nanocapsules that can be obtained by the process according to the invention.
  • the lipid nanocapsules comprise a core consisting of one or more fatty substances and a crown consisting of one or more surfactants and / or co-surfactants.
  • the lipid nanocapsules are metastable and withstand a dilution for which the concentration of the surfactants is less than their critical micellar concentration.
  • the fatty substance (s) are chosen from mono-esters, di-esters and tri-esters of glycerol, mono-esters and di-esters of polyethylene glycol, and their mixtures, preferably from triglycerides in Cs-Cis, and mixtures thereof, plus preferentially from the triglycerides of capric and caprylic acids and their mixtures.
  • the surfactant (s) are chosen from nonionic hydrophilic surfactants, and mixtures thereof, preferably from mono- and di-esters of fatty acid and of polyethylene glycol, and mixtures thereof, more preferably from mono- and di-esters of stearic acid and of polyethylene glycol, and mixtures thereof.
  • the co-surfactant (s) are chosen from nonionic surfactants, preferably from sorbitan monooleate or diethylene glycol mono-ethyl ether, and mixtures thereof.
  • the lipid nanocapsules of the invention further comprise an active agent.
  • the active agent is a heat-sensitive active.
  • the active agent is a heat-sensitive pharmacologically active ingredient.
  • the active agent is a heat-sensitive cosmetic active.
  • the heat-sensitive active agent is selected from peptides, proteins, nucleic acids, anticancer agents or anti-infective agents.
  • the lipid nanocapsules of the invention are part of the composition of a medicament for administration. In one embodiment, the lipid nanocapsules of the invention form part of the composition of a medicament intended to be administered enterally, for example orally, rectally or buccally.
  • the lipid nanocapsules of the invention form part of the composition of a medicament intended to be administered percutaneously, for example by transdermal or cutaneous route.
  • the lipid nanocapsules of the invention enter into the composition of a medicament intended to be administered by the airway, for example by the nasal, auricular or pulmonary route. In one embodiment, the lipid nanocapsules of the invention enter into the composition of a medicament intended to be administered by the ocular route.
  • the lipid nanocapsules of the invention form part of the composition of a medicament intended to be administered vaginally. In one embodiment, the lipid nanocapsules of the invention form part of the composition of a medicament intended to be administered parenterally, for example intravenously, intraarterially, intradermally, epidurally, subcutaneously.
  • the lipid nanocapsules of the invention enter into the composition of a cosmetic product intended to be administered.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 120 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 70 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 120 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 100 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 15 and 50 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 50 nm.
  • the lipid nanocapsules have a particle size between 50 and 100 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 20 and 35 nm. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a particle size between 35 and 50 nm.
  • the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.2. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.15. In one embodiment, the lipid nanocapsules have a polydispersity index of between 0.05 and 0.1.
  • the sizes of lipid nanocapsules are measured by the dynamic light scattering method (DLS method).
  • the invention also relates to the use of the lipid nanocapsules according to the invention as active agent nanovectors.
  • the active agent is a pharmacologically active ingredient. In one embodiment, the active agent is a cosmetic active.
  • the invention also relates to the use of the lipid nanocapsules according to the invention as nanovectors of pharmacologically active principle.
  • the pharmacologically active principle is a heat-sensitive active.
  • the pharmacologically active principle is chosen from proteins, peptides, oligonucleotides and DNA plasmids.
  • the pharmacologically active principle is chosen from anti-infectives, for example antimycotics and antibiotics.
  • the pharmacologically active principle is chosen from anticancer drugs.
  • the pharmocologically active principle is chosen from active principles intended for the Central Nervous System, such as antiparkinson drugs and more generally active principles for treating neurodegenerative diseases.
  • the pharmacologically active principle is lipophilic in nature. In one embodiment, the pharmacologically active principle is dissolved or dispersed in the heart of the lipid nanocapsules.
  • the pharmacologically active principle is incorporated into the core of the nanocapsule. In one embodiment, the pharmacologically active principle is incorporated into the fatty phase. In one embodiment, the pharmacologically active principle is attached to the surface of the lipid nanocapsules.
  • the pharmacologically active principle is of a water-soluble or dispersible nature in the aqueous phase.
  • the pharmacologically active principle of a water-soluble or dispersible nature in the aqueous phase is fixed to the surface of the lipid nanocapsules by introducing said active principle into the solution within which the stable lipid nanoparticles obtained are dispersed at the end. of the method according to the invention.
  • the pharmacologically active principle of a water-soluble or dispersible nature in the aqueous phase is fixed to the surface of the lipid nanocapsules by introducing said pharmocologically active principle into the water included in the fatty phase before the formulation of the stable lipid nanoparticles obtained at the outcome of the process according to the invention.
  • the invention also relates to the use of the lipid nanocapsules according to the invention as cosmetic active nanovectors.
  • the cosmetic active is a heat-sensitive active.
  • the invention also relates to lipid nanocapsules according to the invention for their use as a medicament.
  • the invention also relates to the use of the lipid nanocapsules according to the invention in the manufacture of a medicament.
  • the invention also relates to a method of treatment in a subject in need thereof, said method comprising administering to said subject a therapeutically effective amount of at least one lipid nanocapsule according to the invention.
  • Figure 1 is a diagram of the device used in the method according to the invention according to a first embodiment (called "co-flow” type).
  • the microchannel 1 makes it possible to inject the aqueous phase into the formulation chamber 3.
  • the microchannel 2 makes it possible to inject the fatty phase into the formulation chamber 3.
  • the formulation chamber 3 thus makes it possible to form the lipid nanocapsules according to the invention. .
  • Figure 2 compares the results in terms of size of lipid nanoparticles and polydispersity index of a microfluidic process according to the present invention and a comparative batch process.
  • Figure 3 compares the results in terms of size of lipid nanoparticles and polydispersity index of a microfluidic process according to the present invention at different flow rates.
  • FIG. 4 is a diagram of the device used in the method according to the invention according to a second embodiment (referred to as “T at 45 °” type).
  • the microchannel 4 and the microchannel 5 of the mixing chamber form an angle of 45 ° with the microchannel 7.
  • the microchannel 4 makes it possible to inject the aqueous phase into the formulation chamber 6.
  • the microchannel 5 makes it possible to inject the fatty phase in the formulation chamber 6.
  • the formulation chamber 6 thus makes it possible to form the lipid nanocapsules according to the invention and to recover them via the microchannel 7.
  • FIG. 5 is a diagram of the device used in the method according to the invention according to a third embodiment (referred to as “T” type).
  • the microchannel 8 and the microchannel 9 of the mixing chamber form an angle of 135 ° with the microchannel 10 outlet.
  • FIG. 6 is a diagram of the device used in the method according to the invention according to a second embodiment (referred to as the “Flow focusing” type formulation chamber).
  • the microchannel 14 is focused in a narrowing by the flow of the microchannel 13 and the microchannel 15 of the mixing chamber 17.
  • the microchannels 13 and 15 form an angle of 90 ° with the microchannel 14.
  • the microchannel 14 makes it possible to inject the phase. oily in the formulation chamber 17.
  • the microchannels 13 and 15 make it possible to inject the aqueous phase into the formulation chamber 17 with the same flow rate in each of the microchannels.
  • the formulation chamber 17 thus makes it possible to form the lipid nanocapsules according to the invention and to recover them via the microchannel 16.
  • Example 1 Formulation of lipid nanocapsules by continuous IPC process using a "co-flow" type device
  • Kolliphor ® HS 15 12-hydroxystearate of PEG 660 sold by BASF,
  • Labrafac WL 1349 Triglycerides of capric and caprylic acids sold by Gattefosse,
  • MilliQ ultrapure water prepared using a Millipore device
  • Tetrahydrofuran used for cleaning the microfluidic system.
  • Fisherband Polystat 36 thermostatic bath, to maintain the oily phase at temperature and to thermostate the injection capillaries, Silica capillary with an internal diameter of 320 ⁇ m, for supplying the formulation chamber with the fatty phase,
  • ISCO 100 DX syringe pump for injecting the fatty phase into the formulation chamber.
  • the first microchannel 1 (internal diameter 530 ⁇ m) allows the injection of the aqueous phase consisting of MilliQ ultrapure water.
  • the second microchannel 2 (internal diameter 320 ⁇ m) allows the injection of the fatty phase consisting of a fatty substance, Labrafac ® WL 1349, and a surfactant, Kolliphor ® HS 15.
  • the two microchannels 1 and 2 are connected to a T junction and are arranged in the same plane at 90 ° to each other.
  • a microchannel 3 (internal diameter 530 ⁇ m) from the mixer outlet is connected to the junction fitting T so that the microchannel 2 is introduced into the capillary 3, leading to the mixing zone of the fatty and aqueous phases where it takes place the formation of lipid nanocapsules.
  • the flow rates for both microchannels 1 and 2 are adjusted using the ISCO 100 DX syringe pump and Harvard Apparatus PHD 2000 infusion syringe pump, respectively.
  • FIG. 2 presents the results of the characteristics of the lipid nanocapsules, size and polydispersity index. It is noted that the size of the particles is substantially equivalent for the lipid nanocapsules produced by the comparative batch process as for the lipid nanocapsules produced by the continuous process according to the invention.
  • the polydispersity index is appreciably reduced for the continuous process according to the invention in particular for an SOR ratio of 1.
  • the process according to the invention therefore makes it possible to obtain lipid nanocapsules which are of controlled sizes and relatively very monodisperse which is particularly suitable for the vectorization of pharmaceutical compounds.
  • the process according to the invention makes it possible to be industrialized more easily by placing continuous reactors in parallel.
  • Figure 3 shows the effect of flow rate on the size and polydispersity index of lipid nanocapsules. This figure shows that the increase in the flow rate makes it possible to slightly reduce the size of the particles but to significantly reduce the polydispersity index.
  • Example 2 Formulation of lipid nanocapsules by continuous IPC process using a “T” type formulation chamber and syringe pumps
  • Kolliphor ® HS 15 12-hydroxystearate of PEG 660 sold by BASF,
  • Span ® 80 Sorbitan monooleate sold by BASF
  • MilliQ ultrapure water prepared using a WATERS device
  • Tetrahydrofuran used for cleaning the microfluidic system. Specific material and conditions
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • the device used in this second example is shown in FIG. 4.
  • the first microchannel 4 allows the injection of the aqueous phase consisting of MilliQ ultrapure water filtered at 0.2 ⁇ m.
  • the second microchannel 5 allows the injection of the fatty phase consisting of a fatty substance, Labrafac WL 1349, a surfactant, Kolliphor ® HS 15 and optionally with a co-surfactant, Span ® 80.
  • the two microchannels 4 and 5 are arranged in the same plane at 45 ° to each other and are each connected at one of their ends to a syringe pump allowing the flow control of each phase.
  • the two microchannels 4 and 5 open at their other ends into a formulation chamber 6 where the formation of the lipid nanocapsules takes place.
  • the suspension comprising the lipid nanocapsules is recovered through microchannel 7.
  • Table 2 shows comparative tests of the results of the mixing plan of different fatty phase formulations obtained by batch and continuous process.
  • the temperature was set at 50 ° C, the oil phase flow rate at 425 pL / min and the S O WR ratio at 0.047.
  • the sizes of the lipid nanocapsules obtained by the two methods are generally in very good agreement with an absolute mean deviation of 5.3 nm. Average sizes ranging from 25 to 100 nm, within the desired range, are observed.
  • the method according to the invention is robust and makes it possible to increase the quantity of lipid nanocapsules produced without modifying the characteristics of these lipid nanocapsules.
  • Table 3 shows formulations of lipid nanocapsules obtained according to the continuous process of the invention, the fatty phase composition of which consists of Kolliphor ® HS 15 (surfactant), Labraf ⁇ l ® Ml 944 CS (fatty substance) and Transcutol ® HP (co-surfactant). Comparative trials for four formulations were performed at a SOWR of 0.047 and at room temperature.
  • Table 4 shows the results of tests of increasing the SOWR ratio of formulations by continuous IPC process of lipid nanocapsules having the same fatty phase composition as in Table 3.
  • Example 3 Formulation of lipid nanocapsules by continuous IPC process by means of a microfluidic pilot unit coupled to a “T” type formulation chamber
  • Kolliphor ® HS 15 12-hydroxystearate of PEG 660 sold by BASF,
  • Labrafac ® WL 1349 Triglycerides of capric and caprylic acids sold by Gattefosse,
  • Span ® 80 Sorbitan monooleate sold by BASF
  • MilliQ ultrapure water prepared using a WATERS device
  • Ethanol 95 ° used for cleaning the microfluidic system.
  • Fisherband Polystat 36 thermosaté bath, to maintain the oily phase at temperature and thermoregulate the injection capillaries
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • OBI MK3 pressure controller to inject the fatty phase and the aqueous phase into the microfluidic chip
  • the device used in this second example is shown in Figure 4.
  • the first microchannel 4 allows the injection of the aqueous phase consisting of MilliQ ultrapure water filtered at 0.2 mhi.
  • the second microchannel 5 allows the injection of the fatty phase consisting of a fatty substance, Labrafac ® WL 1349, a surfactant, Kolliphor ® HS 15 and possibly a co-surfactant, Span ® 80.
  • the two microchannels 4 and 5 are arranged in the same plane at 45 ° to each other and are each connected to one of their ends at the bottom of a bottle.
  • An overpressure of compressed air is provided by the OBI MK3 air pressure sensor in order to allow injection of the oily phase and of the aqueous phase.
  • the flow of each phase is monitored by the flow meters (MFS5 and Ml 4) and the compressed air pressure is adjusted by the pressure controller in order to control the flow rates.
  • the two microchannels 4 and 5 open at their other ends into a formulation chamber 6 where the formation of the lipid nanocapsules takes place.
  • the suspension comprising the lipid nanocapsules is recovered through microchannel 7.
  • Example 4 Formulation of nanocapsules by continuous IPC process by means of a microfluidic pilot unit coupled to a microfluidic chip
  • Kolliphor ® HS 15 12-hydroxystearate of PEG 660 sold by BASF,
  • Labrafac ® WL 1349 Triglycerides of capric and caprylic acids sold by Gattefosse,
  • Span ® 80 Sorbitan monooleate sold by BASF
  • MilliQ ultrapure water prepared using a WATERS device
  • Ethanol 95 ° used for cleaning the microfluidic system.
  • Fisherband Polystat 36 thermosaté bath, to maintain the oily phase at temperature and to thermostate the injection capillaries,
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • OBI MK3 pressure controller to inject the fatty phase and the aqueous phase into the microfluidic chip
  • the first microchannel 8 allows the injection of the aqueous phase consisting of MilliQ ultrapure water filtered in line at 0.2 qm.
  • the second microchannel 9 allows the injection of the fatty phase consisting of a fatty substance, Labrafac ® WL 1349, a surfactant, Kolliphor ® HS 15 and possibly a co-surfactant, Span ® 80.
  • the two microchannels 8 and 9 are arranged in the same plane at 90 ° to each other and are each connected to one of their ends at the bottom of a bottle.
  • An overpressure of compressed air is provided by the OBI MK3 air pressure sensor in order to allow injection of the oily phase and of the aqueous phase.
  • the flow rate of each phase is monitored by the flowmeters (MFS5 and Ml 4) and the compressed air pressure is adjusted by the flow controller. pressure in order to control the flow rates.
  • the two microchannels open at their other ends into a mixing zone which can be constituted by an “accident” in the form of slots 11 where the formation of the lipid nanocapsules takes place.
  • the suspension comprising the lipid nanocapsules is recovered through microchannel 10.
  • the temperature was set at 50 ° C., the fatty phase flow rate at 106 m L / m in and the SOWR ratio at 0.05.
  • Example 5 Encapsulation of Miltefosine in lipid nanocapsules formulated by continuous IPC process using a "T" type formulation chamber and syringe pumps
  • Kolliphor ® HS 15 12-hydroxystearate of PEG 660 sold by BASF,
  • Labrafac ® WL 1349 Triglycerides of capric and caprylic acids sold by Gattefosse,
  • Span ® 80 Sorbitan monooleate sold by BASF
  • MilliQ ultrapure water prepared using a WATERS device
  • Tetrahydrofuran used for cleaning the microfluidic system.
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • PEEK Polyetheretherketone
  • the first microchannel 4 allows the injection of the aqueous phase consisting of MilliQ ultrapure water filtered at 0.2 qm.
  • the second microchannel 5 allows the injection of the fatty phase consisting of a fatty substance, Labrafac WL 1349, of a pharmacologically active principle (anti-infective and anti-cancer), Miltefosine, of a surfactant, Kolliphor ® HS 15 and optionally of a co-surfactant, Span ® 80. Miltefosine is initially solubilized in Labrafac WL 1349 for the preparation of the fatty phase.
  • the two microchannels 4 and 5 are arranged in the same plane at 45 ° to each other and are each connected at one of their ends to a syringe pump allowing the flow rate of each of the phases to be controlled.
  • the two microchannels 4 and 5 open at their other ends into a formulation chamber 6 where the formation of the lipid nanocapsules takes place.
  • the suspension comprising the lipid nanocapsules loaded with miltefosine is recovered via microchannel 7.
  • Table 7 shows comparative tests of the results of the formulations of miltefosine lipid nanocapsules obtained by continuous IPC process.
  • the temperature was set at 37 ° C, the oil phase flow rate at 425 pL / min and the SO WR ratio at 0.047.
  • the sizes of the lipid nanocapsules of encapsulated Miltefosine are on the whole in very good agreement with the formulation of lipid nanocapsules without Miltefosine with an absolute mean deviation of 3.0 and 5.0 nm.
  • the polydispersity indices are low and not significantly different between the formulations with or without encapsulated miltefosine.
  • the Zeta potential decreases significantly little with increasing miltefosine composition with an absolute mean deviation of 0.3 and 1.1 mV.
  • Table 8 shows the results of tests to increase the SOWR ratio of formulations by continuous IPC process of lipid nanocapsules loaded with miltefosine having the same fatty phase composition as in Table 7.
  • the increase in the SOWR ratio for these same compositions did not show any modification of the characteristics of the lipid nanocapsules (size and polydispersity index).
  • the process according to the invention is robust and easily industrialized. It allows the formulation at low temperature (37 ° C) of lipid nanocapsules loaded with a pharmacologically active principle, in particular an anti-cancer agent and an anti-infectious agent (Miltefosine).
  • a pharmacologically active principle in particular an anti-cancer agent and an anti-infectious agent (Miltefosine).
  • the lipid nanocapsules loaded with pharmacologically active principle have a homogeneous and controlled particle size, that is to say with a very low polydispersity of less than 0.1.
  • the method according to the invention makes it possible in particular to produce lipid nanocapsules at different scales.

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Abstract

La présente invention concerne un procédé continu de nano-émulsification caractérisé en ce que ledit procédé est réalisé par inversion de phase en concentration (IPC) en réacteur microfluidique, et comprenant les étapes suivantes : a. injection dans un premier microcanal d'une phase aqueuse, ledit premier microcanal débouchant dans une chambre de formulation, b. injection dans un deuxième microcanal d'une phase grasse comprenant un ou plusieurs corps gras non miscibles dans ladite phase aqueuse, et un ou plusieurs tensioactifs, ledit deuxième microcanal débouchant dans ladite chambre de formulation, puis c. mélange de la phase aqueuse et de la phase grasse dans ladite chambre de formulation, puis d. récupération, en sortie de la chambre de formulation, d'une suspension comprenant des nanocapsules lipidiques. La présente invention concerne également les nanocapsules lipidiques susceptibles d'être obtenues par le procédé selon l'invention. Enfin, l'invention concerne l'utilisation des nanocapsules lipidiques selon l'invention comme nanovecteurs de principe pharmacologiquement actif.

Description

PROCÉDÉ CONTINU DE NANO-ÉMULSIFICATION PAR INVERSION DE
PHASE EN CONCENTRATION
DOMAINE DE L’INVENTION La présente invention concerne le domaine des formulations de nanoémulsions, plus particulièrement l’invention concerne un procédé continu de nano-émulsification réalisé par inversion de phase en concentration (IPC).
La présente invention concerne également des nanocapsules lipidiques susceptibles d’être obtenues par le procédé selon l’invention. Enfin, la présente invention concerne l’utilisation des nanocapsules lipidiques selon l’invention pour l’encapsulation de molécules telles qu’une molécule pharmacologiquement active.
ÉTAT DE LA TECHNIQUE Les nano formulations, telles que les nanoémulsions lipidiques (NEL), les nanoparticules lipidiques solides (NLS) ou encore les vecteurs lipidiques nanostructurés tels que les nanocapsules lipidiques (NCL) (Matougui et al., 2016, Int. J. Pharm., 502, 80-97) ont un intérêt croissant ces dernières années, en particulier dans les industries pharmaceutiques, cosmétiques et alimentaires. Les nanocapsules lipidiques, cinétiquement très stables, sont peu sensibles au changement de température et de composition. Elles présentent un intérêt très particulier. Par exemple, il a été montré que ces nanoformulations pouvaient être utilisées comme systèmes d’encapsulation et de délivrance de médicaments (Hôrmann et Zimmer, 2016, J. Controlled Release, 223, 85-98). Deux principales techniques sont utilisées pour la production des nanocapsules lipidiques : - Les méthodes à haute énergie, telles que la technologie d'homogénéisation haute pression (HHP) et la technologie des ultrasons.
- Les méthodes de basse énergie, comprenant les procédés d’inversion de phases des émulsions par effet thermique, par changement de la composition ou également des méthodes spontanées.
Les méthodes à haute énergie étant particulièrement énergivores, elles peuvent être peu recommandées pour l’encapsulation de molécules thermo- et/ou mécano-sensibles, telles que des protéines ou des peptides. Des technologies moins énergivores et utilisant des conditions plus douces de formulation doivent donc être préférées. Le brevet WO2001064328 décrit un procédé de formulation de nanocapsules lipidiques par inversion de phase en température, « procédé IPT ». Cependant, ce procédé étant basé sur une variation de température dans le temps, il ne permet pas non plus l’utilisation de molécules thermosensibles.
Le document Lefebvre et al., Int. J. of Pharm., 534(1-2), 2017 divulgue un procédé « batch » de préparation de nanocapsules lipidiques par inversion de phase en concentration « procédé IPC ». Il consiste en la formation d’une phase huileuse (tensioactif et co-tensioactif dispersés dans l’huile) à laquelle la totalité de l’eau va ensuite être ajoutée. La possibilité avec le procédé IPC de réduire la température de formulation jusqu’à 20°C (contre 70°C-90°C par procédé IPT en fonction de la concentration en NaCl) a été montrée. Cependant, un risque du procédé décrit réside dans la difficulté de contrôle des conditions opératoires (température et conditions de mélange) et des variabilités au niveau de la taille des nanocapsules lipidiques ainsi que de leur indice de polydispersité en taille (dit PDI, Polydispersity Index) sont souvent observés.
Ainsi, dans l’optique de produire des nanocapsules lipidiques de taille uniforme et présentant une polydispersité adéquate en vue d’une efficacité optimale pour une application donnée (par exemple l’internalisation cellulaire et le franchissement de barrières biologiques), il existe un besoin pour un procédé de formulation de nanocapsules lipidiques permettant une maîtrise des conditions opératoires. Il serait également intéressant de pouvoir envisager un procédé autre que « batch » tel que celui décrit, dans l’optique d’une production continue à l’échelle industrielle.
Il a été découvert et mis en œuvre un procédé continu de nano-émulsification caractérisé en ce que ledit procédé est réalisé par inversion de phase en concentration (IPC) en réacteur microfluidique, qui fait l’objet de la présente invention.
Le procédé selon l’invention présente l’avantage de fournir des nanocapsules lipidiques présentant une taille particulaire homogène et contrôlée, c’est-à-dire avec une polydispersité très faible. Ainsi, le procédé selon l’invention permet en particulier de produire à différentes échelles des nanocapsules lipidiques. En effet, contrairement à un procédé « batch », le procédé selon l’invention en continu est aisément transposable à l’échelle industrielle comme par exemple par la simple mise en parallèle de différents réacteurs microfluidiques ou par l’utilisation de mélangeurs statiques.
Un autre avantage du procédé de la présente invention et de pouvoir formuler, à la demande, des nanomédicaments à basse température, par exemple à température corporelle, à l’échelle industrielle pour une production de nanomédicaments à grande échelle ou à l’échelle du laboratoire pour la production d’un traitement personnalisé.
RÉSUMÉ
L’invention concerne donc un procédé continu de nano-émulsification caractérisé en ce que ledit procédé est réalisé par inversion de phase en concentration (IPC) en réacteur microfluidique, et comprenant les étapes suivantes :
a. injection dans un premier microcanal d’une phase aqueuse, ledit premier microcanal débouchant dans une chambre de formulation,
b. injection dans un deuxième microcanal d’une phase grasse comprenant un ou plusieurs corps gras, et un ou plusieurs tensioactifs, ledit deuxième microcanal débouchant dans ladite chambre de formulation, puis
c. mélange de la phase aqueuse et de la phase grasse dans ladite chambre de formulation, puis d. récupération, en sortie de la chambre de formulation, d’une suspension comprenant des nanocapsules lipidiques.
Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs hydrophiles non-ioniques, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs sont choisis parmi les mono- et les di-esters d’acide gras et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs sont choisis parmi les mono- et les di-esters d’acide stéarique et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras sont choisis parmi les mono-esters, di-esters et tri-esters de glycérol, les mono-esters et di-ester de polyéthylène glycol, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras sont choisis parmi les triglycérides en Cs-Cis, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras sont choisis parmi les triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs choisis parmi les tensioactifs non-ioniques. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs choisis parmi le monooléate de sorbitane ou le mono-éthyl éther de diéthylène glycol et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras dans la chambre de formulation est compris entre 0,8 et 4. Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras dans la chambre de formulation est compris entre 2 et 4.
Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactif, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse dans la chambre de formulation est compris entre 0,03 et 0,3. Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactif, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse dans la chambre de formulation est compris entre 0,04 et 0,2.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau, dans une teneur comprise entre 0 % et 30 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau, dans une teneur comprise entre 0 % et 20 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau, dans une teneur comprise entre 0 % et 15 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C, de préférence entre 30°C et 50°C.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C, de préférence entre 30°C et 50°C.
L’invention concerne également des nanocapsules lipidiques susceptibles d’être obtenues par le procédé tel que décrit précédemment, lesdites nanocapsules comprenant un ou plusieurs co-tensioactifs choisis parmi les tensioactifs non-ioniques, de préférence choisis parmi le monooléate de sorbitane ou le mono-éthyl éther de diéthylène glycol et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques comprennent en outre un principe pharmacologiquement actif thermosensible, de préférence choisi parmi les peptides, les protéines ou les acides nucléiques, les agents anticancéreux, les agents anti-infectieux ou les antibiotiques.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 100 nm, préférentiellement comprise entre 15 et 50 nm, plus préférentiellement comprise entre 20 et 35 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,2, de préférence entre 0,05 et 0,1. L’invention concerne aussi l’utilisation des nanocapsules lipidiques telles que décrites précédemment comme nanovecteurs de principe pharmacologiquement actif.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmacologiquement actif est un actif thermosensible.
DÉFINITIONS
Dans la présente invention, les termes ci-dessous sont définis de la manière suivante :
- « Agent actif » concerne un composé d’intérêt thérapeutique ou cosmétique. Dans un mode de réalisation l’agent actif est une molécule pharmacologiquement active. Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un actif cosmétique.
- « Actif cosmétique » concerne une substance ou un mélange destiné à être mis en contact avec les parties superficielles du corps humain ou avec les dents et les muqueuses buccales, en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, de les parfumer, d’en modifier l’aspect, de les protéger, de les maintenir en bon état ou de corriger les odeurs corporelles
- « Corps gras » : désigne un composé tel que les huiles, les lipides, les molécules lipophiles et autres solvants non-polaires, capable de se dissoudre dans des phases grasses, mais non miscible dans les phases aqueuses à 25°C et pression atmosphérique.
- « Chambre de mélange » : désigne l’endroit où sont préparés les fluides de même nature. Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse est préparée dans une première chambre de mélange. Dans un mode de réalisation, la phase grasse est préparée dans une seconde chambre de mélange par mélange d’un corps gras tel que défini dans la présente invention et un tensioactif tel que défini dans la présente invention. Dans un mode de réalisation la chambre de mélange dans laquelle est préparée la phase aqueuse est connectée via un premier microcanal à une chambre de formulation. Dans un mode de réalisation, la chambre de mélange dans laquelle est préparée la phase grasse est connectée via un deuxième microcanal à ladite chambre de formulation. - « Chambre de formulation » : désigne l’endroit où ladite phase grasse et ladite phase aqueuse sont mises en contact afin de provoquer le processus de nano-émulsification, conduisant à la formation des nanocapsules lipidiques selon l’invention. - « Hydrophile » : concerne une molécule ou portion de molécule étant négativement ou positivement chargée ou neutre, capable de former des liaisons hydrogènes, permettant une dissolution plus aisée dans l’eau que dans l’huile ou d’autres solvants.
- « Indice de polydispersité » ou « PDI » : désigne dans le cas d’une distribution de taille monomodale, le rapport de la variance de la taille des particules sur le carré de la taille moyenne des particules.
- « Lipophile » : concerne un composé chimique capable de se dissoudre dans des phases grasses tel que l’huile, lipides et autres solvant non-polaire.
- « Microcanal » : concerne un canal dont la dimension caractéristique permet l’écoulement de fluides tels que des liquides ou des gaz. Le microcanal peut être délimité par une paroi inférieure, une paroi supérieure et deux parois latérales opposées ; la distance entre les parois latérales opposées est la distance caractéristique. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre environ 100 mhi et environ 2000 mhi. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 mhi et 1500 pm. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre 500 pm et 1500 pm. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre 800 et 1200 pm. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 pm et 500 pm. Dans un mode de réalisation, le microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 et 300 pm. Le canal micro fluidique peut être également un canal cylindrique dont le diamètre est la distance caractéristique.
- « Microfluidique » : concerne une structure comprenant au moins un microcanal. Dans un mode de réalisation, microfluidique concerne une structure comprenant au moins deux microcanaux. Dans un mode de réalisation, microfluidique concerne une structure comprenantau moins trois microcanaux. - « Nanocapsules lipidiques » : concerne une nanoparticule constituée d’un cœur liquide ou semi-liquide à température ambiante, enrobé d’un film solide à température ambiante. Au sens de l’invention, les nanocapsules lipidiques comprennent un cœur constitué d’un ou plusieurs corps gras et une couronne constituée d’un ou plusieurs tensioactifs et/ou co-tensioactifs. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 70 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 50 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 35 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 35 et 50 nm.
- « Nano-émulsification » : désigne un procédé consistant à disperser deux phases liquides non miscibles, comme l’eau et l’huile, mais qui vont par des opérations spécifiques réussir à avoir un aspect macroscopiquement homogène, mais microscopiquement hétérogène. L'une des phases sera dispersée dans la seconde phase sous forme de nano-gouttelettes ou de nano-particules liquides. Au sens de l’invention, les nano-gouttelettes ou les nano-particules lipidiques sont des nanocapsules lipidiques telles que décrites précédemment.
- « Nano-émulsion » : concerne une émulsion produite par nano-émulsification, composée de nano-gouttelettes ou de nano-particules d’une taille comprise dans un intervalle allant de 15 nm à 120 nm. Dans un mode de réalisation, une nano-émulsion est une émulsion qui comprend des nano-gouttelettes ou des nano-particules d’une taille comprise dans un intervalle allant de 15 nm à 70 nm. Dans un mode de réalisation, une nano-émulsion est une émulsion qui comprend des nano-gouttelettes ou des nano-particules d’une taille comprise dans un intervalle allant de 20 nm à 120 nm. Dans un mode de réalisation, une nano-émulsion est une émulsion qui comprend des nano-gouttelettes ou des nano-particules d’une taille comprise dans un intervalle allant de 20 nm à 100 nm. Dans un mode de réalisation, une nano-émulsion est une émulsion qui comprend des nano-gouttelettes ou des nano-particules d’une taille comprise dans un intervalle allant de 20 nm à 50 nm. Au sens de l’invention, les nano-gouttelettes ou les nanoparticules lipidiques sont des nanocapsules lipidiques telles que décrites précédemment
- « Phase grasse » ou « phase huileuse » sont des termes équivalents. Ils désignent une phase comprenant au moins 50 % d’un ou plusieurs corps gras non-miscibles dans l’eau à 25°C et pression atmosphérique. Dans un mode de réalisation, ils désignent une phase comprenant au moins 60 % d’un ou plusieurs corps gras non-miscibles dans l’eau à 25°C et pression atmosphérique. Dans un mode de réalisation, ils désignent une phase comprenant au moins 70 % d’un ou plusieurs corps gras non-miscibles dans l’eau à 25°C et pression atmosphérique. Dans un mode de réalisation, ils désignent une phase comprenant au moins 80 % d’un ou plusieurs corps gras non-miscibles dans l’eau à 25°C et pression atmosphérique.
- « Molécule pharmacologiquement active » : concerne un composé d’intérêt thérapeutique. Principalement, une molécule pharmacologiquement active peut être indiquée pour le traitement ou la prévention de maladies.
- « Traitement d’une maladie » réfère à la diminution ou l’élimination d’au moins un effet indésirable ou symptôme d’une maladie, désordre ou condition associée à la déficience d’un organe, tissu ou fonctionnement cellulaire. Le terme « prévenir une maladie » réfère à la prévention de l’apparition d’un symptôme. - « Agent actif thermosensible » concerne, au sens de l’invention, une molécule pouvant subir une modification de sa structure chimique du fait de l’élévation de la température. Dans un mode de réalisation, la molécule subit une coupure en un ou plusieurs fragments. Dans un mode de réalisation, la molécule subit une dégradation de son activité biologique. Dans un mode de réalisation, la molécule subit une dégradation de son activité pharmacologique. Au sens de l’invention, l’agent actif thermosensible présente une sensibilité à une température supérieure à 70°C, de préférence supérieur à 50°C. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est un principe pharmacologiquement actif. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est un actif cosmétique thermosensible. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est choisi parmi les peptides, les protéines, les acides nucléique, les agents anticancéreux, les agents anti-infectieux ou les antibiotiques.
- « Tensioactif » : concerne un composé amphiphile qui, par cette structure particulière, permet d’abaisser l’énergie libre des interfaces, par exemple les interfaces huile/eau ou air/eau. Ainsi un tensioactif est un composé qui modifie la tension interfaciale entre deux surfaces. Les tensioactifs facilitent la formation de gouttes ou de bulles en diminuant la tension interfaciale.
- « SOR » : désigne le rapport pondéral du débit de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras dans la chambre de formulation.
- « SOWR » : désigne le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse dans la chambre de formulation.
DESCRIPTION DÉTAILLÉE La présente invention concerne un procédé continu de nano-émulsification caractérisé en ce que ledit procédé est réalisé par inversion de phase en concentration (IPC) en réacteur microfluidique, et comprenant les étapes suivantes :
a. injection dans un premier microcanal d’une phase aqueuse, ledit premier microcanal débouchant dans une chambre de formulation,
b. injection dans un deuxième microcanal d’une phase grasse comprenant un ou plusieurs corps gras, et un ou plusieurs tensioactifs, ledit deuxième microcanal débouchant dans ladite chambre de formulation, puis
c. mélange de la phase aqueuse et de la phase grasse dans ladite chambre de formulation, puis d. récupération, en sortie de la chambre de formulation, d’une suspension comprenant des nanocapsules lipidiques.
Le procédé selon l’invention comprend une étape d’injection dans un premier microcanal d’une phase aqueuse, le premier microcanal débouchant dans une chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse comprend au moins 90 % en poids d’eau.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse comprend au moins 95 % en poids d’eau.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse comprend au moins 98 % en poids d’eau.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse est constituée d’eau. Dans un mode de réalisation, l’eau est de l’eau ultrapure MilliQ filtrée sur 0,2 mhi.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse comprend en outre un agent actif. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un actif thermosensible. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un principe pharmacologiquement actif thermosensible. Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un actif cosmétique thermosensible. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif thermosensible est de nature hydrophile. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est choisi parmi les peptides, les protéines, les acides nucléiques, les agents anticancéreux ou les agents anti-infectieux.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse est injectée dans la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la phase aqueuse est préparée dans une chambre de mélange. La sortie de la chambre de mélange est connectée via ledit premier microcanal à la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la chambre de mélange est de type mélangeur statique, c’est- à-dire un dispositif de mélange en continu de phases aqueuses. La sortie de la chambre de mélange est connectée via ledit premier microcanal à la chambre de formulation. Dans un mode de réalisation, la chambre de mélange est de type cuve agitée, c’est-à-dire que les phases aqueuses sont mélangées par action mécanique. La sortie de la chambre de mélange est connectée via ledit premier microcanal à la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué d’un polymère. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué d’un polymère choisi parmi les polyaryléthercétones (PE AK). Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué de polyétheréthercétone (PEEK).
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué de silice.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué de silicium. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué de verre.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est constitué de polytétrafluoroéthylène (PTFE).
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est un canal parallélépipédique. Lorsque le premier microcanal est un canal parallélépipédique, les distances caractéristiques du canal sont la profondeur et la largeur. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal a une profondeur comprise entre 100 mhi et 1500 mhi. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal a une largeur comprise entre 100 pm et 1500 mhi.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est un canal cylindrique. Lorsque le premier microcanal est un canal cylindrique, la distance caractéristique du canal est le diamètre. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal a une distance caractéristique comprise entre 200 pm et 2000 pm. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal a une distance caractéristique comprise entre 500 pm et 1500 pm. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal a une distance caractéristique comprise entre 800 et 1200 pm. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase aqueuse dans le premier microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase aqueuse dans le premier microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue ISCO 100DX. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase aqueuse dans le premier microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue Harvard Apparatus PHD Ultra. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase aqueuse dans le premier microcanal s’effectue au moyen d’un contrôleur de pression Elveflow OBI MK3.
Dans un mode de réalisation, le débit de phase aqueuse dans le premier microcanal est compris entre 100 qL/mn et 500000 pL/min, de préférence entre 1000 pL/mn et 72500 pL/mn.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé, c’est-à-dire maintenu en permanence à une température de consigne. Dans un mode de réalisation le premier microcanal est thermalisé par un système de circulation d’eau via l’utilisation d’un bain thermostaté.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé à une température de 20°C, 25°C, 30°C, 35°C, 40°C, 45°C, 50°C, 55°C, 60°C, 65°C, 70°C. le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 30°C. Dans un mode de réalisation préféré, le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 30°C et 50°C. Le procédé selon l’invention comprend une étape d’injection dans un deuxième microcanal d’une phase grasse comprenant un ou plusieurs corps gras non miscible dans ladite phase aqueuse, et un ou plusieurs tensioactifs, le deuxième microcanal débouchant dans la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse est injectée dans la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse est préparée dans une chambre de mélange. La sortie de la chambre de mélange est connectée via ledit deuxième microcanal à la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la chambre de mélange est de type mélangeur statique, c’est-à-dire un dispositif de mélange en continu de phases grasses. La sortie du mélangeur statique est connectée via ledit deuxième microcanal à la chambre de formulation. Dans un mode de réalisation, la chambre de mélange est de type cuve agitée, c’est-à-dire que les phases grasses sont mélangées par action mécanique. La sortie de la cuve agitée est connectée via ledit deuxième microcanal à la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras (SOR) dans la chambre de formulation est compris entre 0,8 et 4. Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras (SOR) dans la chambre de formulation est compris entre 2 et 4.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué d’un polymère. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué d’un polymère choisi parmi les polyaryléthercétones (PEAK). Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué de polyétheréthercétone (PEEK).
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué de silice.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué de silicium. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est constitué de verre.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est un canal parallélépipédique. Lorsque le deuxième microcanal est un canal parallélépipédique, les distances caractéristiques du canal sont la profondeur et la largeur. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une profondeur comprise entre 100 mhi et 1500 mhi. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une largeur comprise entre 100 mhi et 1500 mhi.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est un canal cylindrique. Lorsque le deuxième microcanal est un canal cylindrique, la distance caractéristique du canal est le diamètre. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 mhi et 1500 mhi. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une distance caractéristique comprise entre 500 pm et 1500 mhi. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une distance caractéristique comprise entre 800 et 1200 pm. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 pm et 500 pm. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal a une distance caractéristique comprise entre 100 et 300 pm.
Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase grasse dans le deuxième microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase grasse dans le deuxième microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue ISCO 100DX. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase grasse dans le deuxième microcanal s’effectue au moyen d’une pompe pousse-seringue Harvard Apparatus PHD 2000 infusion. Dans un mode de réalisation, l’injection de la phase aqueuse dans le deuxième microcanal s’effectue au moyen d’un contrôleur de pression Elveflow OBI MK3.
Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 50 uL/min et 500000 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 300 pL/min et 10000 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 100 pL/min et 500000 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 50 pL/min et 300 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 100 pL/min et 300 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 300 pL/min et 500 pL/min. Dans un mode de réalisation, le débit de phase grasse dans le deuxième microcanal est compris entre 500 pL/min et 1000 pL/min.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est thermalisé, c’est-à-dire maintenu en permanence à une température de consigne. Dans un mode de réalisation le deuxième microcanal est thermalisé par un système de circulation d’eau via l’utilisation d’un bain thermostaté.
Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C. Dans un mode de réalisation, le deuxième microcanal est thermalisé à une température de 20°C, 25°C, 30°C, 35°C, 40°C, 45°C, 50°C, 55°C, 60°C, 65°C, 70°C. le deuxième microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 30°C. Dans un mode de réalisation préféré, le deuxième microcanal est thermalisé à une température comprise entre 30°C et 50°C. Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs de la phase grasse sont choisis parmi les tensioactifs hydrophiles non-ioniques, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs de la phase grasse sont choisis parmi les mono- et les di-esters d’acide gras et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs de la phase grasse sont choisis parmi les mono- et les di-esters d’acide stéarique et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le tensioactif de la phase grasse est le Kolliphor® HS 15 de BASF. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs tensioactifs dans une teneur comprise entre 40 % et 65 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs tensioactifs dans une teneur comprise entre 45 % et 65 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs tensioactifs dans une teneur comprise entre 45 % et 55 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs tensioactifs dans une teneur comprise entre 55 % et 65 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse.
Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras de la phase grasse sont choisis parmi les mono-esters, di-esters et tri-esters de glycérol, les mono-esters et di-ester de polyéthylène glycol et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras de la phase grasse sont choisis parmi les triglycérides en Cs-Cis, et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras sont choisis parmi les triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est le Labrafac® WL 1349 de Gattefosse. Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est le Captex® 8000 de Abitec. Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est le Labrafïl® Ml 944 CS de Gattefosse (mélange de mono-, di- et triglycérides, PEG-6, Oléate de mono- et di triesters). Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est l’Oléate d’Ethyle. Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est le Palmitate d’Ethyle. Dans un mode de réalisation, le corps gras de la phase grasse est l’Oléate de Glycéryle.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs corps gras dans une teneur comprise entre 20 % et 60 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs corps gras dans une teneur comprise entre 25 % et 55 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs corps gras dans une teneur comprise entre 25 % et 35 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend un ou plusieurs corps gras dans une teneur comprise entre 35 % et 55 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs. Dans un mode de réalisation, le ou les co-tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs lipophiles et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif de la phase grasse est un phospho lipide choisi parmi les lécithines, le phosphatilglycérol, le phophatidylinositol, la phosphatidylsérine, l’acide phophatidique, la phosphatidyléthanolamine et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation préféré, le ou les co-tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs non-ioniques et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif est choisi parmi les esters de sorbitane. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif est le monooléate de sorbitane. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif est le Span® 80 de BASF. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif est le mono-éthyl éther de diéthylène glycol. Dans un mode de réalisation, le co-tensioactif est le Transcutol® HP de Gattefossé.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs dans une teneur comprise entre 0 % et 20 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs dans une teneur comprise entre 0 % et 10 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs dans une teneur comprise entre 10 % et 20 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau dans une teneur comprise entre 0 % et 30% en poids, par rapport au poids total de la phase grasse. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau dans une teneur comprise entre 0 % à 20 %. Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre de l’eau dans une teneur comprise entre 0 % à 15 %.
Dans un mode de réalisation, la phase grasse comprend en outre un agent actif. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un actif thermosensible. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un principe pharmacologiquement actif thermosensible. Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un actif cosmétique thermosensible. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif thermosensible est de nature hydrophile. Dans un autre mode de réalisation préféré, l’agent actif thermosensible est de nature lipophile. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est choisi parmi choisi parmi les peptides, les protéines ou les acides nucléiques, les agents anticancéreux ou les agents anti-infectieux.
Le procédé selon l’invention comprend une étape c de mélange de la phase aqueuse et de la phase grasse dans la chambre de formulation.
Dans un mode de réalisation, la chambre de formulation est de type « co-flow », c’est-à-dire que le flux du premier microcanal et le flux du deuxième microcanal sont dans la même direction et débouchent dans la chambre de formulation depuis la même direction. Dans un mode de réalisation, la chambre de formulation est de type « co-flow » et le premier microcanal a un diamètre plus large que celui du deuxième microcanal. Dans un mode de réalisation, la chambre de formulation est de type « co-flow » et le premier microcanal englobe le deuxième microcanal. Dans un mode de réalisation, la chambre de formulation est de type « T », c’est-à-dire que le flux du premier microcanal et le flux du deuxième microcanal dans la chambre de formulation forment un « T » avec le flux du canal de sortie. Dans un mode de réalisation, le flux du premier microcanal et le flux du deuxième microcanal dans la chambre de mélange forment un angle compris entre 30° et 150° avec le flux du canal de sortie. Dans un mode de réalisation, le flux du premier microcanal et le flux du deuxième microcanal dans la chambre de mélange forment un angle compris 45° avec le flux du canal de sortie.
Dans un mode de réalisation, le flux du premier microcanal et le flux du deuxième microcanal dans la chambre de mélange forment un angle de 135° avec le flux du canal de sortie.
Dans un mode de réalisation, la chambre de formulation est de type « Flow focusing » (dit aussi Focalisation hydrodynamique), c’est à dire que le flux du premier microcanal est focalisé dans un rétrécissement par le flux d’un deuxième microcanal et d’un troisième microcanal. Dans un mode de réalisation, le flux du premier microcanal et le flux du deuxième ou troisième microcanal dans la chambre de mélange forment un angle compris entre 15° et 90°.
Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C. Dans un mode de réalisation, le premier microcanal est thermalisé à une température de 20°C, 25°C, 30°C, 35°C, 40°C, 45°C, 50°C, 55°C, 60°C, 65°C, 70°C. le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 30°C. Dans un mode de réalisation préféré, le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 30°C et 50°C.Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse (SOWR) dans la chambre de formulation est compris entre 0,01 et 0,30. Dans un mode de réalisation, le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactif, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse (SOWR) dans la chambre de formulation est compris entre 0,03 et 0,3, préférentiellement est compris entre 0,04 et 0,2.
Le procédé selon l’invention comprend une étape de récupération, en sortie de la chambre de formulation, d’une suspension comprenant des nanocapsules lipidiques dans une phase aqueuse.
Avantageusement, le procédé de la présente invention tel que décrit ci-dessus permet la formulation de nanocapsule lipidique à basse température. Ce mode de réalisation est particulièrement avantageux pour l’encapsulation de principe pharmacologiquement actif thermosensibles. Les nanocapsules lipidiques obtenues à basse température présentent par ailleurs une polydispersité plus faible, permettant la production de nanomédecines de taille uniforme en vue d’une efficacité optimale de ciblage et d’internalisation cellulaire.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 70 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 50 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 35 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 35 et 50 nm.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,2. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,15. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,1. L’invention concerne également des nanocapsules lipidiques susceptibles d’être obtenues par le procédé selon l’invention.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques comprennent un cœur constitué d’un ou plusieurs corps gras et une couronne constituée d’un ou plusieurs tensioactifs et/ou co-tensioactifs. Les nanocapsules lipidiques sont métastables et supportent une dilution pour laquelle la concentration des tensioactifs est inférieure à leur concentration micellaire critique.
Dans un mode de réalisation, le ou les corps gras sont choisis parmi les mono-esters, di-esters et tri-esters de glycérol, les mono-esters et di-ester de polyéthylène glycol, et leurs mélanges, de préférence parmi les triglycérides en Cs-Cis, et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi les triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, le ou les tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs hydrophiles non-ioniques, et leurs mélanges, de préférence parmi les mono- et les di-esters d’acide gras et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi les mono- et les di-esters d’acide stéarique et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, le ou les co-tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs non-ioniques, de préférence parmi le monooléate de sorbitane ou le mono-éthyl éther de diéthylène glycol et leurs mélanges.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention comprennent en outre un agent actif. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un actif thermosensible. Dans un mode de réalisation préféré, l’agent actif est un principe pharmacologiquement actif thermosensible. Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un actif cosmétique thermosensible. Dans un mode de réalisation, l’agent actif thermosensible est choisi parmi les peptides, les protéines, les acides nucléiques, les agents anticancéreux ou les agents anti-infectieux.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie entérale, par exemple par voie orale, rectale ou buccale.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie percutanée, par exemple par voie transdermique ou cutanée.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie aérienne, par exemple par voie nasale, auriculaire ou pulmonaire. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie oculaire.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie vaginale. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d’un médicament destiné à être administré par voie parentérale, par exemple par voie intraveineuse, intra-artérielle, intradermique, épidurale, sous-cutanée.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques de l'invention entrent dans la composition d'un produit cosmétique destiné à être administré. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 70 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 120 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 15 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 50 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 50 et 100 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 20 et 35 nm. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont une taille particulaire comprise entre 35 et 50 nm.
Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,2. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,15. Dans un mode de réalisation, les nanocapsules lipidiques ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,1.
Les tailles de nanocapsules lipidiques sont mesurées par la méthode de diffusion dynamique de lumière (méthode DLS). L’invention concerne également l’utilisation des nanocapsules lipidiques selon l’invention comme nanovecteurs d’agent actif.
Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un principe pharmocologiquement actif. Dans un mode de réalisation, l’agent actif est un actif cosmétique. L’invention concerne également l’utilisation des nanocapsules lipidiques selon l’invention comme nano vecteurs de principe pharmocologiquement actif.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est un actif thermosensible.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est choisi parmi les protéines, les peptides, les oligonucléotides et les plasmides ADN.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est choisi parmi les anti-infectieux par exemple les antimycosiques et les antibiotiques.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est choisi parmi les anticancéreux. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est choisi parmi les principes actifs destinés au Système Nerveux Central, tels que les antiparkinsoniens et plus généralement les principes actifs pour traiter les maladies neurodégénératives.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est de nature lipophile. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est dissous ou dispersé dans le cœur des nanocapsules lipidiques.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est incorporé dans le cœur de la nanocapsule. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est incorporé dans la phase grasse. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est fixé à la surface des nanocapsules lipidiques.
Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif est de nature hydrosoluble ou dispersible en phase aqueuse. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif de nature hydrosoluble ou dispersible en phase aqueuse est fixé à la surface des nanocapsules lipidiques par introduction dudit principe actif dans la solution au sein de laquelle se trouvent dispersées les nanoparticules lipidiques stables obtenues à l'issue du procédé selon l’invention. Dans un mode de réalisation, le principe pharmocologiquement actif de nature hydrosoluble ou dispersible en phase aqueuse est fixé à la surface des nanocapsules lipidiques par introduction dudit principe pharmocologiquement actif dans l’eau incluse dans la phase grasse avant la formulation des nanoparticules lipidiques stables obtenues à l'issue du procédé selon l'invention.
L’invention concerne également l’utilisation des nanocapsules lipidiques selon l’invention comme nanovecteurs d’actif cosmétique.
Dans un mode de réalisation, l’actif cosmétique est un actif thermosensible.
L’invention concerne également des nanocapsules lipidiques selon l’invention pour leur utilisation comme médicament.
L’invention concerne également l’utilisation des nanocapsules lipidiques selon l’invention dans la fabrication d’un médicament.
L’invention concerne également une méthode de traitement chez un sujet qui en a besoin, ladite méthode comprenant l’administration audit sujet d’une quantité thérapeutiquement efficace d'au moins une nanocapsule lipidique selon l’invention. BRÈVE DESCRIPTION DES FIGURES
La Figure 1 est un schéma du dispositif utilisé dans le procédé selon l’invention selon un premier mode de réalisation (dit de type « co-flow »). Le microcanal 1 permet d’injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation 3. Le microcanal 2 permet d’injecter la phase grasse dans la chambre de formulation 3. La chambre de formulation 3 permet ainsi de former les nanocapsules lipidiques selon l’invention.
La Figure 2 compare les résultats en termes de taille de nanoparticules lipidiques et d’indice de polydispersité d’un procédé microfluidique selon la présente invention et d’un procédé batch comparatif. La Figure 3 compare les résultats en termes de taille de nanoparticules lipidiques et d’indice de polydispersité d’un procédé microfluidique selon la présente invention à différents débits.
La Figure 4 est un schéma du dispositif utilisé dans le procédé selon l’invention selon un deuxième mode de réalisation (dit de type « T à 45° »). Le microcanal 4 et le microcanal 5 de la chambre de mélange forment un angle de 45° avec le microcanal 7. Le microcanal 4 permet d’injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation 6. Le microcanal 5 permet d’injecter la phase grasse dans la chambre de formulation 6. La chambre de formulation 6 permet ainsi de former les nanocapsules lipidiques selon l’invention et de les récupérer via le microcanal 7. La Figure 5 est un schéma du dispositif utilisé dans le procédé selon l’invention selon un troisième mode de réalisation (dit de type « T »). Le microcanal 8 et le microcanal 9 de la chambre de mélange forment un angle de 135° avec le microcanal 10 de sortie. Le microcanal 8 permet d’injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation 12. Le microcanal 9 permet d’injecter la phase grasse dans la chambre de formulation 12. Les chicanes 11 servent à créer des zones de mélanges supplémentaires dans le microcanal 10. La chambre de formulation 12 permet ainsi de former les nanocapsules lipidiques selon l’invention et de les récupérer via le microcanal 10 de sortie. La Figure 6 est un schéma du dispositif utilisé dans le procédé selon l’invention selon un deuxième mode de réalisation (dit chambre de formulation de type « Flow focusing »). Le microcanal 14 est focalisé dans un rétrécissement par le flux du microcanal 13 et du microcanal 15 de la chambre de mélange 17. Les microcanaux 13 et 15 forment un angle de 90° avec le microcanal 14. Le microcanal 14 permet d’injecter la phase grasse dans la chambre de formulation 17. Les microcanaux 13 et 15 permettent d’injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation 17 avec le même débit dans chacun des microcanaux. La chambre de formulation 17 permet ainsi de former les nanocapsules lipidiques selon l’invention et de les récupérer via le microcanal 16.
EXEMPLES
La présente invention se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants qui illustrent non-limitativement l’invention.
Exemple 1 : Formulation de nanocapsules lipidiques par procédé IPC en continu au moyen d’un dispositif de type « co-flow »
Réactifs et produits utilisés
Kolliphor® HS 15 : 12-hydroxystéarate de PEG 660 vendu par BASF,
Labrafac WL 1349 : Triglycérides des acides capriques et capryliques vendu par Gattefosse,
- Eau ultrapure MilliQ : préparée à partir d’un appareil Millipore,
Tétrahydrofurane : utilisé pour le nettoyage du système micro fluidique.
Matériel spécifique et conditions
Balance de pesée : pour la préparation de la formulation,
Plaque chauffante/agitation IKA C-MAG HS7 : pour la préparation de la formulation,
Bain thermostaté Fisherband Polystat 36, pour maintenir la phase huileuse à température et thermostater les capillaires d’injection, Capillaire en silice de diamètre interne 320 pm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase grasse,
Capillaire en silice de diamètre interne 530 pm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase aqueuse,
Capillaire en silice de diamètre interne 530 pm, pour la sortie du mélange de la formulation de mélange,
Pousse-seringue Harvard Apparatus PHD 2000 infusion pour injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation,
Pousse-seringue ISCO 100 DX pour injecter la phase grasse dans la chambre de formulation.
Le dispositif utilisé dans ce premier exemple est présenté à la figure 1.
Le premier microcanal 1 (diamètre interne 530 pm) permet l’injection de la phase aqueuse constituée d’eau ultrapure MilliQ. Le deuxième microcanal 2 (diamètre interne 320 pm) permet l’injection de la phase grasse constituée d’un corps gras, Labrafac® WL 1349, et d’un tensioactif, Kolliphor® HS 15. Les deux microcanaux 1 et 2 sont reliés à une jonction T et sont disposés dans un même plan à 90° l’un de l’autre. Un microcanal 3 (diamètre interne 530 pm) de sortie de mélangeur est connecté au raccord de jonction T de façon à ce que le microcanal 2 soit introduit dans le capillaire 3, débouchant sur la zone de mélange des phases grasse et aqueuse où s’effectue la formation des nanocapsules lipidiques. Les débits des deux microcanaux 1 et 2 sont réglés à l’aide de la pompe-seringue ISCO 100 DX et du pousse-seringue Harvard Apparatus PHD 2000 infusion, respectivement.
Sur la base de ce dispositif, il a été comparé les caractéristiques des nanocapsules lipidiques, taille et indice de polydispersité, de 3 formulations (par inversion de phase en concentration) de nanocapsules lipidiques obtenues par un procédé batch comparatif et un procédé continu selon l’invention. Formulations
Tableau 1
La figure 2 présente les résultats des caractéristiques des nanocapsules lipidiques, taille et indice de polydispersité. On constate que la taille des particules est sensiblement équivalente pour les nanocapsules lipidiques produites par le procédé batch comparatif que pour les nanocapsules lipidiques produites par le procédé continu selon l’invention.
En revanche, l’indice de polydispersité est sensiblement diminué pour le procédé continu selon l’invention en particulier pour un rapport SOR de 1. Le procédé selon l’invention permet donc d’obtenir des nanocapsules lipidiques qui sont de tailles contrôlées et relativement très monodisperses ce qui est particulièrement adapté à la vectorisation de composés pharmaceutiques. De plus, le procédé selon l’invention permet d’être industrialisé plus facilement par la mise en parallèle de réacteurs continus.
La figure 3 présente l’effet du débit sur la taille et l’indice de polydispersité des nanocapsules lipidiques. Cette figure montre que l’augmentation du débit permet de légèrement diminuer la taille des particules mais de diminuer de manière importante l’indice de polydispersité. Exemple 2 : Formulation de nanocapsules lipidiques par procédé IPC en continu au moyen d’une chambre de formulation de type « T » et de pousse-seringues
Réactifs et produits utilisés
Kolliphor® HS 15 : 12-hydroxystéarate de PEG 660 vendu par BASF,
- Labrafac® WL 1349 : Triglycérides des acides capriques et capryliques vendu par
Gattefosse,
Span® 80 : Monooléate de sorbitane vendu par BASF,
Eau ultrapure MilliQ : préparée à partir d’un appareil WATERS,
Tétrahydrofurane : utilisé pour le nettoyage du système micro fluidique. Matériel spécifique et conditions
Balance de pesée Mettler Toledo : pour la préparation de la formulation,
Plaque chauffante/agitation IKA C-MAG HS7 : pour la préparation de la formulation,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase grasse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase aqueuse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour la sortie du mélange de la chambre de formulation,
Pousse-seringue Harvard Apparatus PHD 2000 infusion pour injecter la phase grasse dans la chambre de formulation,
Pousse-seringue Harvard Apparatus PHD Ultra (ou ISCO 100DX) pour injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation.
Le dispositif utilisé dans ce deuxième exemple est présenté à la figure 4. Le premier microcanal 4 permet l’injection de la phase aqueuse constituée d’eau ultrapure MilliQ filtrée à 0,2 pm. Le deuxième microcanal 5 permet l’injection de la phase grasse constituée d’un corps gras, Labrafac WL 1349, d’un tensioactif, Kolliphor® HS 15 et éventuellement d’un co-tensioactif, Span® 80. Les deux microcanaux 4 et 5 sont disposés dans un même plan à 45° l’un de l’autre et sont reliés chacun à une de leurs extrémités à un pousse-seringue permettant le contrôle du débit de chacune des phases. Les deux microcanaux 4 et 5 débouchent à leurs autres extrémités sur une chambre de formulation 6 où s’effectuent la formation des nanocapsules lipidiques. La suspension comprenant les nanocapsules lipidiques est récupérée par le microcanal 7.
Comparaison batch/continu
Le tableau 2 ci-dessous présente des essais comparatifs des résultats du plan de mélange de différentes formulations de phase grasse obtenues par procédé batch et continu. La température a été fixée à 50°C, le débit de phase huile à 425 pL/min et le rapport S O WR à 0,047.
Tableau 2
Les tailles des nanocapsules lipidiques obtenues par les deux procédés sont dans l’ensemble en très bon accord avec un écart moyen absolu de 5,3 nm. Des tailles moyennes allant de 25 à 100 nm, dans la gamme désirée, sont observées.
Des indices de polydispersité signifîcativement réduits d’un facteur de 1,3 à 4,1 par rapport au procédé batch sont obtenus. Ainsi le procédé selon l’invention permet d’obtenir des indices de polydispersité plus faible que pour un procédé batch comparatif.
Changement d’échelle du procédé continu selon l’invention
Des essais comparatifs de la taille des nanocapsules lipidiques et de l’indice de polydispersité (PDI) de la formulation à un rapport SOR de 1,86 (65 % en poids de Kolliphor®HS15, 35 % en poids de Labrafac®WL1349) ont été réalisés jusqu’à un débit de phase grasse x32 (soit de 3,41 mL/min).
La figure 5 présente ces résultats.
Il est constaté qu’aucune modification significative de la taille des nanocapsules lipidiques et de l’indice de polydispersité obtenus n’a été observée. Ainsi le procédé selon l’invention est robuste et permet d’augmenter la quantité de nanocapsules lipidiques produites sans modifications des caractéristiques de ces nanocapsules lipidiques.
Influence de la nature du co-tensioactif et du corps gras
Le tableau 3 ci-dessous présente des formulations de nanocapsules lipidiques obtenues selon le procédé continu de l’invention dont la composition de phase grasse est constituée de Kolliphor® HS 15 (tensioactif), Labrafïl® Ml 944 CS (corps gras) et de Transcutol® HP (co-tensioactif). Des essais comparatifs pour quatre formulations ont été réalisés à un rapport SOWR de 0,047 et à température ambiante.
Tableau 3
Les résultats montrent que la transposition microfluidique du procédé batch a permis l’obtention de nanocapsules lipidiques possédant très sensiblement les mêmes caractéristiques de taille et de d’indice de polydispersité.
Influence du rapport S O WR
Le tableau 4 ci-dessous présente des résultats d’essais d’augmentation du rapport SOWR de formulations par procédé IPC continu de nanocapsules lipidiques ayant la même composition de phase grasse que dans le tableau 3.
L’augmentation du rapport SOWR pour ces mêmes compositions n’a pas montré de modification des caractéristiques des nanocapsules lipidiques (taille et indice de polydispersité). Tableau 4
Ainsi, il a été montré aux moyens des exemples ci-dessus que le procédé selon l’invention est robuste et facilement industrialisable. Il permet d’obtenir des nanocapsules lipidiques présentant une taille particulaire homogène et contrôlée, c’est-à-dire avec une polydispersité très faible (PDI inférieurs à 0,15, voire très souvent inférieur à 0,1). Ainsi, le procédé selon l’invention permet en particulier de produire à différentes échelles des nanocapsules lipidiques. Exemple 3 : Formulation de nanocapsules lipidiques par procédé IPC en continu au moyen d’une unité pilote microfluidique couplé à une chambre de formulation de type « T »
Réactifs et produits utilisés
Kolliphor® HS 15 : 12-hydroxystéarate de PEG 660 vendu par BASF,
Labrafac® WL 1349 : Triglycérides des acides capriques et capryliques vendu par Gattefosse,
Span® 80 : Monooléate de sorbitane vendu par BASF,
Eau ultrapure MilliQ : préparée à partir d’un appareil WATERS,
Ethanol 95° : utilisé pour le nettoyage du système microfluidique.
Matériel spécifique et conditions
Balance de pesée Mettler Toledo : pour la préparation de la formulation,
Plaque chauffante/agitation IKA C-MAG HS7 : pour la préparation de la formulation,
Bain thermosaté Fisherband Polystat 36, pour maintenir la phase huileuse à température et thermo-réguler les capillaires d’injection,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la puce microfluidique en phase grasse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la puce microfluidique en phase aqueuse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour la sortie du mélange de la puce microfluidique,
Contrôleur de pression OBI MK3, pour injecter la phase grasse et la phase aqueuse dans la puce microfluidique,
Débitmètre Elveflow MFS5, pour contrôler le débit de la phase grasse,
Débitmètre Bronkhorst Ml 4, pour contrôler le débit de la phase aqueuse,
Tablette Microsoft Surface Pro + logiciel ESI, pour la gestion informatique des débitmètres, et du contrôleur de pression
Le dispositif utilisé dans ce deuxième exemple est présenté à la Figure 4. Le premier microcanal 4 permet l’injection de la phase aqueuse constituée d’eau ultrapure MilliQ filtrée à 0,2 mhi. Le deuxième microcanal 5 permet l’injection de la phase grasse constituée d’un corps gras, Labrafac® WL 1349, d’un tensioactif, Kolliphor® HS 15 et éventuellement d’un co-tensioactif, Span® 80. Les deux microcanaux 4 et 5 sont disposés dans un même plan à 45° l’un de l’autre et sont reliés chacun à une de leurs extrémités au fond d’un flacon. Une surpression d’air comprimé est apportée par le capteur de pression d’air OBI MK3 afin de permettre l’injection de la phase huileuse et de la phase aqueuse. Le débit de chacune des phases est monitoré par les débitmètres (MFS5 et Ml 4) et la pression d’air comprimé est ajustée par le contrôleur de pression afin de contrôler les débits. Les deux microcanaux 4 et 5 débouchent à leurs autres extrémités sur une chambre de formulation 6 où s’effectuent la formation des nanocapsules lipidiques. La suspension comprenant les nanocapsules lipidiques est récupérée par le microcanal 7.
Tableau 5
Exemple 4 : Formulation de nanocapsules par procédé IPC en continu au moyen d’une unité pilote microfluidique couplé à une puce microfluidique
Réactifs et produits utilisés
Kolliphor® HS 15 : 12-hydroxystéarate de PEG 660 vendu par BASF,
Labrafac® WL 1349 : Triglycérides des acides capriques et capryliques vendu par Gattefosse,
Span® 80 : Monooléate de sorbitane vendu par BASF,
Eau ultrapure MilliQ : préparée à partir d’un appareil WATERS,
Ethanol 95° : utilisé pour le nettoyage du système microfluidique. Matériel spécifique et conditions
Balance de pesée Mettler Toledo : pour la préparation de la formulation,
Plaque chauffante/agitation IKA C-MAG HS7 : pour la préparation de la formulation,
Bain thermosaté Fisherband Polystat 36, pour maintenir la phase huileuse à température et thermostater les capillaires d’injection,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la puce micro fluidique en phase grasse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la puce microfluidique en phase aqueuse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour la sortie du mélange de la puce microfluidique,
Contrôleur de pression OBI MK3, pour injecter la phase grasse et la phase aqueuse dans la puce microfluidique,
Débitmètre Elveflow MFS5, pour contrôler le débit de la phase grasse,
Débitmètre Bronkhorst Ml 4, pour contrôler le débit de la phase aqueuse,
Tablette Microsoft Surface Pro + logiciel ESI, pour la gestion informatique des débitmètres, et du contrôleur de pression
Puce microfluidique en polyétheréthercétone (PEEK) Le dispositif utilisé dans ce deuxième exemple est présenté à la figure 5.
Le premier microcanal 8 permet l’injection de la phase aqueuse constituée d’eau ultrapure MilliQ filtrée en ligne à 0,2 qm. Le deuxième microcanal 9 permet l’injection de la phase grasse constituée d’un corps gras, Labrafac® WL 1349, d’un tensioactif, Kolliphor® HS 15 et éventuellement d’un co-tensioactif, Span® 80. Les deux microcanaux 8 et 9 sont disposés dans un même plan à 90° l’un de l’autre et sont reliés chacune à une de leurs extrémités au fond d’un flacon. Une surpression d’air comprimé est apportée par le capteur de pression d’air OBI MK3 afin de permettre l’injection de la phase huileuse et de la phase aqueuse. Le débit de chacune des phases est monitoré par les débitmètres (MFS5 et Ml 4) et la pression d’air comprimé est ajustée par le contrôleur de pression afin de contrôler les débits. Les deux microcanaux débouchent à leurs autres extrémités sur une zone de mélange pouvant être constituée « d’accident » en forme de créneaux 11 où s’effectuent la formation des nanocapsules lipidiques. La suspension comprenant les nanocapsules lipidiques est récupérée par le microcanal 10. La température a été fixée à 50°C, le débit de phase grasse à 106 m L/m in et le rapport SOWR à 0,05.
Tableau 6
Exemple 5 : Encapsulation de Miltéfosine dans des nanocapsules lipidiques formulées par procédé IPC en continu au moyen d’une chambre de formulation de type « T » et de pousse-seringues
Réactifs et produits utilisés
Kolliphor® HS 15 : 12-hydroxystéarate de PEG 660 vendu par BASF,
Labrafac® WL 1349 : Triglycérides des acides capriques et capryliques vendu par Gattefosse,
Span® 80 : Monooléate de sorbitane vendu par BASF,
Eau ultrapure MilliQ : préparée à partir d’un appareil WATERS,
Tétrahydrofurane : utilisé pour le nettoyage du système micro fluidique.
Matériel spécifique et conditions
Balance de pesée Mettler Toledo : pour la préparation de la formulation, Plaque chauffante/agitation IKA C-MAG HS7 : pour la préparation de la formulation,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase grasse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour l’alimentation de la chambre de formulation en phase aqueuse,
Capillaire en polyétheréthercétone (PEEK) de diamètre interne 1 mm, pour la sortie du mélange de la chambre de formulation,
Pousse-seringue Harvard Apparatus PHD 2000 infusion pour injecter la phase grasse dans la chambre de formulation,
Pousse-seringue Harvard Apparatus PHD Ultra (ou ISCO 100DX) pour injecter la phase aqueuse dans la chambre de formulation.
Le dispositif utilisé dans ce deuxième exemple est présenté à la figure 4.
Le premier microcanal 4 permet l’injection de la phase aqueuse constituée d’eau ultrapure MilliQ filtrée à 0,2 qm. Le deuxième microcanal 5 permet l’injection de la phase grasse constituée d’un corps gras, Labrafac WL 1349, d’un principe pharmacologiquement actif (anti-infectieux et anti-cancéreux), la Miltéfosine, d’un tensioactif, Kolliphor® HS 15 et éventuellement d’un co-tensioactif, Span® 80. La Miltéfosine est solubilisée initialement dans le Labrafac WL 1349 en vue de la préparation de la phase grasse. Les deux microcanaux 4 et 5 sont disposés dans un même plan à 45° l’un de l’autre et sont reliés chacun à une de leurs extrémités à un pousse-seringue permettant le contrôle du débit de chacune des phases. Les deux microcanaux 4 et 5 débouchent à leurs autres extrémités sur une chambre de formulation 6 où s’effectuent la formation des nanocapsules lipidiques. La suspension comprenant les nanocapsules lipidiques chargées en Miltéfosine est récupérée par le microcanal 7.
Encapsulation de la Miltéfosine
Le tableau 7 ci-dessous présente des essais comparatifs des résultats des formulations de nanocapsules lipidiques de Miltéfosine obtenues par procédé IPC continu. La température a été fixée à 37°C, le débit de phase huile à 425 pL/min et le rapport S O WR à 0,047.
Tableau 7
Les tailles des nanocapsules lipidiques de Miltéfosine encapsulée sont dans l’ensemble en très bon accord la formulation de nanocapsules lipidiques sans Miltéfosine avec un écart moyen absolu compris en 3,0 et 5,0 nm.
Les indices de polydispersité sont faibles et peu significativement différents entre les formulations avec ou sans Miltéfosine encapsulée.
Le potentiel Zêta (charge de surface) diminue significativement peu avec l’augmentation de la composition en Miltéfosine avec un écart moyen absolu de 0,3 et 1 ,1 mV.
Ainsi, les résultats montrent que le procédé IPC continu a permis la formulation à basse température (37°C) de nanocapsules lipidiques chargées avec un principe pharmacologiquement actif, possédant sensiblement les mêmes caractéristiques de taille, d’indice de polydispersité et potentiel Zêta que les nanocapsules non chargées. Influence du rapport S O WR
Le tableau 8 ci-dessous présente des résultats d’essais d’augmentation du rapport SOWR de formulations par procédé IPC continu de nanocapsules lipidiques chargées en Miltéfosine ayant la même composition de phase grasse que dans le tableau 7. L’augmentation du rapport SOWR pour ces mêmes compositions n’a pas montré de modification des caractéristiques des nanocapsules lipidiques (taille et indice de polydispersité).
Tableau 8
Ainsi, il a été montré aux moyens des exemples ci-dessus que le procédé selon l’invention est robuste et facilement industrialisable. Il permet la formulation à basse température (37°C) de nanocapsules lipidiques chargées avec un principe pharmacologiquement actif, notamment d’un anti-cancéreux et un anti-infectieux (la Miltéfosine). Les nanocapsules lipidiques chargées en principe pharmacologiquement actif présentent une taille particulaire homogène et contrôlée, c’est-à-dire avec une polydispersité très faible inférieurs à 0,1. Ainsi, le procédé selon l’invention permet en particulier de produire à différentes échelles des nanocapsules lipidiques.

Claims

REVENDICATIONS
Procédé continu de nano-émulsification caractérisé en ce que ledit procédé est réalisé par inversion de phase en concentration (IPC) en réacteur microfluidique, et comprenant les étapes suivantes :
a. injection dans un premier microcanal d’une phase aqueuse, ledit premier microcanal débouchant dans une chambre de formulation, b. injection dans un deuxième microcanal d’une phase grasse comprenant un ou plusieurs corps gras, et un ou plusieurs tensioactifs, ledit deuxième microcanal débouchant dans ladite chambre de formulation, puis c. mélange de la phase aqueuse et de la phase grasse dans ladite chambre de formulation, puis
d. récupération, en sortie de la chambre de formulation, d’une suspension comprenant des nanocapsules lipidiques.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le ou les tensioactifs sont choisis parmi les tensioactifs hydrophiles non-ioniques, et leurs mélanges, de préférence parmi les mono- et les di-esters d’acide gras et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi les mono- et les di-esters d’acide stéarique et de polyéthylène glycol, et leurs mélanges.
3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le ou les corps gras sont choisis parmi les mono-esters, di-esters et tri-esters de glycérol, les mono-esters et di-ester de polyéthylène glycol, et leurs mélanges, de préférence parmi les triglycérides en Cs-Cis, et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi les triglycérides des acides capriques et capryliques et leurs mélanges.
4. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la phase grasse comprend en outre un ou plusieurs co-tensioactifs, de préférence choisis parmi les tensioactifs non-ioniques, de préférence parmi le monooléate de sorbitane ou le mono-éthyl éther de diéthylène glycol et leurs mélanges.
5. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactifs et de co-tensioactifs sur le débit de corps gras dans la chambre de formulation est compris entre 0,8 et 4, préférentiellement est compris entre 2 et 4.
6. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le rapport pondéral de la somme des débits de tensioactif, de co-tensioactifs et de corps gras sur le débit de la phase aqueuse dans la chambre de formulation est compris entre 0,03 et 0,3, préférentiellement est compris entre 0,04 et 0,2.
7. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que la phase grasse comprend en outre de l’eau, dans une teneur comprise entre 0 % et
30 % en poids, par rapport au poids total de la phase grasse, préférentiellement entre 0 % et 20 %, plus préférentiellement entre 0 % et 15 %.
8. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que le premier microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C, de préférence entre 30°C et 50°C.
9. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que le deuxième microcanal est thermalisé à une température comprise entre 20°C et 70°C, de préférence entre 30°C et 50°C.
10. Nanocapsules lipidiques obtenues par le procédé selon l’une quelconque des revendications 4 à 9, caractérisé en ce qu’elles comprennent un ou plusieurs co-tensioactifs choisis parmi les tensioactifs non-ioniques, de préférence choisis parmi le monooléate de sorbitane ou le mono-éthyl éther de diéthylène glycol et leurs mélanges.
11. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 10, caractérisées en ce qu’elles comprennent en outre un principe pharmacologiquement actif, de préférence choisi parmi les peptides, les protéines, les acides nucléiques, les agents anticancéreux, les agents anti-infectieux ou les antibiotiques.
12. Nanocapsules lipidiques selon la revendication 10 ou la revendication 11, caractérisées en ce qu’elles ont une taille particulaire comprise entre 15 et 120 nm, préférentiellement comprise entre 15 et 50 nm, plus préférentiellement comprise entre 20 et 35 nm.
13. Nanocapsules lipidiques selon l’une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisées en ce qu’elles ont un indice de polydispersité compris entre 0,05 et 0,2, de préférence entre 0,05 et 0,1.
14. Utilisation des nanocapsules lipidiques telles que définies selon l’une quelconque des revendications 10 à 13 comme nanovecteurs de principe pharmacologiquement actif.
15. Utilisation des nanocapsules lipidiques selon la revendication 14, caractérisé en ce que le principe pharmacologiquement actif est un actif thermosensible, de préférence choisis parmi les peptides, les protéines, les acides nucléiques, les agents anticancéreux, les agents anti-infectieux ou les antibiotiques.
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