EP1356020A1 - Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation - Google Patents

Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation

Info

Publication number
EP1356020A1
EP1356020A1 EP02701341A EP02701341A EP1356020A1 EP 1356020 A1 EP1356020 A1 EP 1356020A1 EP 02701341 A EP02701341 A EP 02701341A EP 02701341 A EP02701341 A EP 02701341A EP 1356020 A1 EP1356020 A1 EP 1356020A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
psm according
psm
observation
enclosure
workspace
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP02701341A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Catherine Poirot
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Universite Pierre et Marie Curie
Original Assignee
Universite Pierre et Marie Curie
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Universite Pierre et Marie Curie filed Critical Universite Pierre et Marie Curie
Publication of EP1356020A1 publication Critical patent/EP1356020A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/14—Incubators; Climatic chambers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M21/00—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
    • C12M21/06—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses for in vitro fertilization
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/22—Transparent or translucent parts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/46—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/36—Microscopes arranged for photographic purposes or projection purposes or digital imaging or video purposes including associated control and data processing arrangements
    • G02B21/362—Mechanical details, e.g. mountings for the camera or image sensor, housings
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N2035/00346—Heating or cooling arrangements
    • G01N2035/00356—Holding samples at elevated temperature (incubation)
    • G01N2035/00366—Several different temperatures used
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N2035/00346—Heating or cooling arrangements
    • G01N2035/00356—Holding samples at elevated temperature (incubation)
    • G01N2035/00376—Conductive heating, e.g. heated plates

Definitions

  • the invention relates to the field of microbiological safety stations (hereinafter designated by the acronym PSM), allowing the manipulation of microscopic samples under visual control.
  • PSM microbiological safety stations
  • the invention relates more particularly to PSMs suitable for the manipulation of biological material, and in particular for in vitro fertilization (IVF), without however being limited to this field of application.
  • Horizontal laminar flow hoods are enclosures where the air comes from the rear part of the hood and flows horizontally towards the front part of the hood, which is widely or even entirely open.
  • the manipulator is placed in front of this open part, and is therefore exposed to projections coming from the sample which it is handling and / or treating. In this configuration, the manipulator is therefore not protected from possible contamination.
  • the manipulator is protected in microbiological safety stations (PSM), the simplest model of which (PSM type I) has an air flow entering the hood and a filtration system for the exhaust air.
  • PSM type I microbiological safety stations
  • the samples handled in type I PSMs are not protected.
  • In vertical laminar flow hoods the flow comes from the ceiling of the hood and descends towards the worktop. On the front part of these hoods there is a protective glass to avoid projections out of it.
  • These hoods therefore constitute microbiological safety stations, since they protect the manipulator.
  • Vertical laminar flow hoods belong to the category of type II PSM, defined in that they ensure the protection of the sample, the manipulator and also the environment, when they are equipped with a filtration system of the expelled air.
  • Certain types of microbiological manipulations require an enlarged observation of the sample handled, and therefore the use of a binocular magnifier or a microscope.
  • the introduction of such an optical device into a laminar flow hood disrupts the flow, and therefore reduces the efficiency of the hood.
  • Using a binocular magnifier or microscope under a vertical flow hood is particularly difficult (if not impossible), due to. the protective glass located on the front of the hood.
  • the introduction of material into the working space of a hood impairs the ease of cleaning said working space and contributes to increasing the risks of contamination between different samples handled.
  • the PSM and horizontal laminar flow hoods currently available therefore do not allow biological samples to be manipulated under visual control through a magnifying optical device, under conditions ensuring microbiological safety of the sample and of the manipulator and, moreover, allowing easy cleaning. manipulation space.
  • the object of the present invention is to solve at least part of the aforementioned drawbacks.
  • the present invention relates to a microbiological safety station (PSM), comprising walls defining a workspace, and in which an optical device is provided placed outside the workspace, and allowing observation of a sample in at least one area of the work space by a transparent window secured to one of said walls.
  • PSM microbiological safety station
  • the PSM comprises a plate P suitable for receiving the sample in the observation area of the working space, the plate comprising a transparent window F1 allowing the lighting and / or the observation of the sample.
  • the floor of the workspace of a PSM according to the invention may include one or more zones equipped with temperature regulation means so as to be thermostatically controlled at a temperature between 20 and 45 ° C, and in particular at 37 ° C +/- 0.2 ° C.
  • the plate P mentioned above can be equipped with such a temperature control device.
  • the optical observation device preferably comprises lighting means suitable for illuminating the sample in the observation area, and light collection means allowing the observation of a sample in this observation area. All these means can be located under the floor of the working space, so as to illuminate and observe the sample from below, through the window F1 of the stage. Alternatively, all or part of the lighting and / or light collection means may be located behind one or more other windows provided in at least one of the walls, for example in the upper wall (ceiling), placed opposite the floor.
  • the light collection device of the PSM of the invention preferably comprises an autofocus camera. In order to observe microscopic samples, this camera is preferably arranged to ensure several magnifications of the image between 10 and 1000, in particular between 10 and 400, and if necessary, only between 10 and 70.
  • the optical light collection device (for example, the autofocus camera) further comprises fine-tuning means at each magnification, which can advantageously be controlled from a dashboard located outside the workspace and / or integral with one of the walls defining the workspace.
  • this dashboard can be located on the front face, outside the hood, or in the form of buttons or touch-sensitive keys formed on a screen, incorporated into the floor of the hood, for example on the left. from the work and observation station.
  • the light collection device of the PSM of the invention is preferably connected to a device for recording the collected images, such as for example a computer equipped with data storage means, such as a hard disk or a medium. removable recording.
  • a device for recording the collected images such as for example a computer equipped with data storage means, such as a hard disk or a medium. removable recording.
  • the PSM of the invention may include an observation screen E, integral with one of the walls defining the working space, said screen allowing the operator to view the images collected by the light collection.
  • This observation screen can be, for example, a flat screen integrated into the rear wall of the workspace.
  • the PSM may further include a zone for gassing the samples, comprising a gas inlet, an enclosure allowing the confinement of the gas, and a connection device. connecting the gas supply to the enclosure.
  • the enclosure and the connection device are easily removable, and more preferably, the enclosure and the connection device are inserts of consumable type.
  • the gas inlet is preferably integrated into one of the vertical walls defining the working space, and the enclosure is a transparent bell, connected to the gas inlet by a pipe.
  • the connection device connecting the gas inlet to the enclosure can advantageously include a protective flange intended to protect the gas inlet from projections.
  • the PSM of the invention comprises a data entry device.
  • This input device can consist of a tactile keyboard secured to the floor of the hood and connected to a computer.
  • the touch keyboard can be located outside the workspace, on the front of the hood. If necessary, a data sheet being entered can be viewed on screen E mentioned above, or on a portion of this screen. Alternatively, a second specific screen can be integrated into a wall of the workspace.
  • the floor and the vertical walls defining the workspace of a PSM according to the invention are preferably flat and made of smooth, washable materials and resistant to cleaning products used in laboratories, such as products containing quaternary ammoniums or the most powerful virucides.
  • the floor consists of one or more removable disposable elements or sterilizable by autoclave.
  • FIG. 1 is a very schematic perspective view of a microbiological safety station (PSM) according to the invention
  • FIG. 2 schematically details part of the optical device of the PSM in FIG. 1, and
  • FIG. 3 shows an exemplary embodiment of the data entry keyboard.
  • the object of the present invention is a PSM (as defined in the introduction) comprising several elements cooperating in an original way to allow easy manipulation and under visual control, of microscopic objects, under conditions ensuring the protection of the objects handled and the manipulator vis-à-vis microbiological risks.
  • This invention can be used for all types of applications requiring microbiological protection of the objects handled and / or of the manipulator. Examples include the making of small sterile equipment, research in biology or cell therapy (for example, for the preparation of corneas intended to be grafted), and the manipulation of embryos or stem cells.
  • a preferred field of application of this invention is in vitro fertilization.
  • MPA Medically assisted procreation
  • IVF In Vitro Fertilization
  • the oocytes are rid, one by one, of their surrounding cells (decoronization), to allow microscopic examination of the signs of fertilization (presence of the pronoyals).
  • Manipulators must in fact avoid contamination of the gametes entrusted to them, ensure sterile embryonic culture from an infectious point of view, and avoid cross-contamination between samples.
  • the various stages of in vitro fertilization procedures are carried out in a sterile manner, conventionally in a laminar flow hood.
  • the purpose of the laminar flow of the hoods is to prevent the introduction of potentially contaminating foreign elements into the work area.
  • the handling area must be free of objects disturbing the flow.
  • the search for oocytes (150 ⁇ m in diameter), insemination, decoronization and loading of the transfer catheter can only be carried out under visual control, currently carried out using a binocular magnifier.
  • inter-sample contamination can come from the manipulator (following a projection of a contaminated sample on his lab coat, for example), or from objects used by the manipulator, such as pencils or observation book.
  • a binocular magnifier comprising in particular a plate, several objectives, lamps and adjustment knobs, is a particularly long and difficult instrument to clean so as to ensure its sterility.
  • the PSM of the invention makes it possible to respond to at least some of these constraints.
  • an essential and original point of the PSM of the invention is the integration, in the body of the PSM, of all the material necessary for in vitro fertilization, and in particular of the optical system, in order to strip the space as much as possible. work to obtain a good level of protection for the sample and the manipulator, but also so that the interior of the hood is quickly and completely cleanable between each sample, thus reducing the risk of contamination between samples.
  • the PSM of the invention can be a type I, II, or even III PSM.
  • Type III PSMs are enclosures in a confined atmosphere maintained under pressure, in which the manipulations are carried out by means of gloves sealed at the enclosure. The integration of optical equipment in the body of such
  • the PSM is part of the present invention.
  • the integration of optical equipment into the body of any microbiological safety station, so as to obtain the most open workspace possible, is part of the invention.
  • the PSM is of type II, for example a vertical laminar flow hood.
  • the working space is defined by the floor 1 of the hood, vertical side walls 2, the bottom 3 of the hood, its ceiling 4, and a front protective pane 5. It further comprises a plate 6 suitable for receiving the sample in an observation area of the working space, said plate comprising a first transparent window 7 allowing lighting and / or observation of said sample.
  • the optical observation device comprises lighting means 8 suitable for illuminating the sample in the observation area, and light collection means 9 allowing the observation of a sample placed in this area.
  • the optical device is preferably a video system making it possible to store images, for example an autofocus camera 9 connected to an image recording device, such as a computer 17 equipped with data storage means 18.
  • the cameras can be digital or analog.
  • the video system essentially comprises an optical unit 9 for the collection of photons from the observation area and a system for controlling the various adjustments, for the focal length, the lighting 8 and the magnification.
  • This optical unit can be reversed to allow fixing under the worktop 1 (hood floor).
  • the majority of technical gestures are made at relatively low magnifications (from 10 to 70 approximately).
  • a more efficient optical system allowing magnifications up to 400 or more can be used to observe the zygotes on D + 1 and the embryos, on D + 2 or D + 3, or even until D + 6.
  • a 1 / z inch CDD sorting camera can be used to observe on a 1 1 17 "(inch) screen, a 125 ⁇ m object with a size of approximately 100 mm.
  • CCD charge coupled device bars
  • the optical element 9 can be placed under the floor 1 of the hood, opposite a transparent window 7 preferably integrated in the plate 6, as shown in Figures 1 and 2. Also preferably, the plate 6 , located around this window 7, is a heating zone.
  • At least part of the lighting and / or light collection means may be located behind one or more windows integral with at least one of the walls and distinct from the window 7.
  • certain elements, in particular the light collection means can be placed at the level of the ceiling 4 of the hood, opposite the observation area.
  • the entire observation area is illuminated by a device 8 called "long front", by adding a condenser placed about 182 mm from the sample.
  • This system includes an optical fiber attached to the end of a stainless steel tube, which is itself integral with the wall of the workstation.
  • the light generator for example, has a power of 150 W, and it is preferably adjustable.
  • any other lighting means known to those skilled in the art can be used to illuminate the area for handling and observing the sample.
  • control of the entire apparatus is carried out from a pedal set located on the ground under the work station, in order to direct the various adjustments by pressing on the pedals assigned to each of the functions.
  • the motorization system comprises for example three pairs of pedals placed on an inclined support:
  • control systems other than the pedals can be envisaged.
  • the fine adjustment of the focus can be carried out by keys actuated by the fingers at the level of an instrument panel 10, placed on the front of the hood, to the left of the observation zone of the The sample, as shown in Figure 1.
  • the zoom and lighting settings can also be made from this dashboard.
  • a control unit placed outside the hood, includes a device for adjusting the speed of the motorizations, for example a potentiometer (this adjustment should preferably be made before the operator puts his hands in the flux).
  • a device for adjusting the speed of the motorizations for example a potentiometer (this adjustment should preferably be made before the operator puts his hands in the flux).
  • the PSM of the invention comprises an observation screen 11 secured to one of the walls defining the workspace, said screen making it possible to view the images collected by the light collection device 9.
  • the observation screen 1 1 is a flat screen secured to one of the vertical walls 2 or 3 of the hood, for example of the rear wall 3 of the workspace, behind the observation area of the sample.
  • the handling temperature must be maintained around 37 ° C, which implies a work plan thermostatically controlled at around 37 ° C.
  • the floor 1 of the workspace may include one or more zones equipped with temperature regulation means, so as to be thermostatically controlled at a temperature between 20 and 45 ° C, in particular at 37 ° C +/- 0.2 ° C.
  • the plate 6 can be equipped with such means for regulating its temperature. It may be, for example, heating resistors placed under the plate 6, and therefore outside the working space. If necessary, the entire floor of the workspace can be thermostatically controlled.
  • IVF IVF
  • This sample is therefore preferably placed in an enclosure 13 maintained at approximately 5% CO 2 .
  • This enclosure 13 can for example consist of a bell connected to a gas inlet 12 by a tube 14. In order to reduce the risk of inter-sample contamination mentioned above, this bell can be replaced after treatment of the samples of each patient .
  • autoclavable bells for example, glass
  • single-use bells for example consumables made of fine plastic.
  • the tube 14 is preferably for single use, but it can also be reusable after sterilization by autoclave or by any other means known to those skilled in the art.
  • One aspect of the invention relates to a protective collar 15, intended to protect the gas inlet 12 from possible projections of biological liquid or aerosols. Indeed, a gas supply inevitably constitutes a rupture of the plane of the wall in which it is integrated, and can therefore be difficult to clean. Tools and protocols to reduce the number of objects needed in the hood during the processing of each sample are also offered, always with the aim of limiting the risk of nosocomial contamination between samples and / or patients. Thus, a system for capturing observed data, intended to replace the current
  • Bench sheet can be integrated into the PSM.
  • the recording of the data must be able to be done without passing by the intermediary of a traditional keyboard, which does not answer the health security rules.
  • Several types of data entry means can be envisaged. A first possibility is to integrate a touch keyboard into the work plan of the hood
  • a second possibility consists in using a screen where predefined keys appear, on which one can direct a pointer.
  • the screen is preferably secured to one of the walls of the PSM. It may for example be the observation screen (11) or an active window thereof. Alternatively, it can be a separate screen from
  • FIG. 3 An example of the arrangement of the keys of such a keyboard is illustrated in FIG. 3.
  • the data entry system can be linked to a computer station in the laboratory, from which the identity of the patients, associated with the samples to be processed, and the characteristics of the attempt are entered.
  • the file of the couple to which the sample to be processed belongs can be called up and displayed on the screen of the hood, for example via the number of the attempt. This number can include 6 digits (ex: 990123).
  • the keyboard can therefore also contain numeric keys.
  • the camera cannot observe the zygotes and the embryos 2. the camera makes it possible to observe the zygotes and the embryos.
  • Data recording is done over several days (3 to 8 days).
  • the walls 1, 2, 3, 4 and 5, defining the workspace are preferably flat and made of smooth, washable materials resistant to cleaning products, such as products containing quaternary ammoniums or virucides more powerful.
  • the floor consists of one or more removable and disposable or sterilizable elements by autoclave or by any other means.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Thermal Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Multimedia (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)

Abstract

L'invention concerne le domaine des postes de sécurité microbiologique (PSM), permettant la manipulation d'échantillons microscopiques sous contrôle visuel. L'invention porte plus particulièrement sur des PSM adaptés à la manipulation de matériel biologique, et en particulier à la fécondation in vitro , sans être toutefois limités à ce domaine d'application. Un point essentiel et original du PSM de l'invention est l'intégration, dans le corps du PSM, d'un système optique permettant l'observation d'un échantillon placé dans la hotte, afin de dépouiller au maximum l'espace de travail, mais aussi pour que l'intérieur de la hotte soit rapidement et entièrement nettoyable.

Description

POSTES DE SÉCURITÉ MICROBIOLOGIQUE UTILISABLES EN ASSISTANCE MÉDICALE A LA PROCREATION
L'invention concerne le domaine des postes de sécurité microbiologique (ci- après désignés par l'acronyme PSM), permettant la manipulation d'échantillons microscopiques sous contrôle visuel. L'invention porte plus particulièrement sur des PSM adaptés à la manipulation de matériel biologique, et en particulier à la fécondation in vitro (FIV), sans être toutefois limités à ce domaine d'application.
Les manipulations de matériel biologique nécessitent le plus souvent des moyens de protection des échantillons manipulés et/ou du manipulateur vis- à-vis des risques microbiologiques. Ces manipulations sont donc, en général, effectuées dans des hottes à flux laminaire de type horizontal ou vertical.
Les hottes à flux laminaire horizontal sont des enceintes où l'air provient de la partie postérieure de la hotte et se dirige horizontalement vers la partie antérieure de celle-ci, qui est largement, voire entièrement ouverte. Le manipulateur est placé devant cette partie ouverte, et se trouve par conséquent exposé aux projections provenant du prélèvement qu'il est en train de manipuler et/ou traiter. Dans cette configuration, le manipulateur n'est donc pas protégé des contaminations éventuelles.
La protection du manipulateur est assurée dans les postes de sécurité microbiologique (PSM), dont le modèle le plus simple (PSM de type I) présente un flux d'air entrant dans la hotte et un système de filtration de l'air expulsé. En revanche, les échantillons manipulés dans les PSM de type I ne sont pas protégés. Dans les hottes à flux laminaire vertical, le flux provient du plafond de la hotte et descend vers le plan de travail. Sur la partie antérieure de ces hottes existe une vitre protectrice pour éviter les projections hors de celle-ci. Ces hottes constituent donc des postes de sécurité microbiologique, puisqu'elles protègent le manipulateur. Les hottes à flux laminaire vertical appartiennent à la catégorie des PSM de type II, définis en ce qu'ils assurent la protection du prélèvement, du manipulateur et aussi de l'environnement, lorsqu'ils sont équipés d'un système de filtration de l'air expulsé.
Certains types de manipulations microbiologiques nécessitent une observation agrandie de l'échantillon manipulé, et donc l'utilisation d'une loupe binoculaire ou d'un microscope. L'introduction d'un tel dispositif optique dans une hotte à flux laminaire perturbe le flux, et donc diminue l'efficacité de la hotte. L'utilisation d'une loupe binoculaire ou d'un microscope sous une hotte à flux vertical est particulièrement difficile (voire impossible), du fait de . la vitre protectrice située sur la face avant de la hotte. De plus, l'introduction de matériel dans l'espace de travail d'une hotte nuit à la facilité de nettoyage dudit espace de travail et contribue à augmenter les risques de contamination entre différents échantillons manipulés.
Les PSM et hottes à flux laminaire horizontal actuellement disponibles ne permettent donc pas de manipuler des échantillons biologiques sous contrôle visuel à travers un dispositif optique grossissant, dans des conditions assurant la sécurité microbiologique de l'échantillon et du manipulateur et permettant en outre un nettoyage facile de l'espace de manipulation.
La présente invention a pour but de résoudre une partie au moins des inconvénients précités . La présente invention porte sur un poste de sécurité microbiologique (PSM), comportant des parois définissant un espace de travail, et dans lequel on prévoit un dispositif optique placé en-dehors de l'espace de travail, et permettant l'observation d'un échantillon dans au moins une zone de l'espace de travail par une fenêtre transparente solidaire de l'une desdites parois.
Dans une réalisation particulière de l'invention, le PSM comprend une platine P propre à recevoir l'échantillon dans la zone d'observation de l'espace de travail, la platine comportant une fenêtre transparente F1 permettant l'éclairage et/ou l'observation de l'échantillon.
En outre, le plancher de l'espace de travail d'un PSM selon l'invention peut comporter une ou plusieurs zones équipées de moyens de régulation de température de manière à être thermostatées à une température comprise entre 20 et 45 °C, et en particulier à 37°C +/- 0,2°C. En particulier, la platine P mentionnée ci-dessus peut être équipée d'un tel dispositif de régulation de température.
Dans les PSM de l'invention, le dispositif optique d'observation comprend, de préférence, des moyens d'éclairage propres à éclairer l'échantillon dans la zone d'observation, et des moyens de collection de lumière permettant l'observation d'un échantillon dans cette zone d'observation. Tous ces moyens peuvent être situés sous le plancher de l'espace de travail, de façon à éclairer et observer l'échantillon par en-dessous, à travers la fenêtre F1 de la platine. Alternativement, tout ou partie des moyens d'éclairage et/ou de collection de lumière peuvent être situés derrière une ou plusieurs autres fenêtres prévues dans au moins l'une des parois, par exemple dans la paroi supérieure (plafond), placées en regard du plancher. Le dispositif de collection de lumière du PSM de l'invention comporte, de préférence, une caméra autofocus. Afin d'observer des échantillons microscopiques, cette caméra est preferentiellement agencée pour assurer plusieurs grossissements de l'image entre 10 et 1000, en particulier entre 10 et 400, et le cas échéant, seulement entre 10 et 70.
Dans une réalisation préférée du PSM de l'invention, le dispositif optique de collection de lumière (par exemple, la caméra autofocus) comporte en outre des moyens de mise au point fine à chaque grossissement, qui peuvent être avantageusement pilotés à partir d'un tableau de bord situé en-dehors de l'espace de travail et/ou solidaire de l'une des parois définissant l'espace de travail. Par exemple, ce tableau de bord peut être situé sur la face avant, à l'extérieur de la hotte, ou sous forme de boutons ou de touches à commande tactile formées sur un écran, incorporés au plancher de la hotte, par exemple à gauche du poste de travail et d'observation.
Le dispositif de collection de lumière du PSM de l'invention est, de préférence, relié à un dispositif d'enregistrement des images collectées, comme par exemple un ordinateur équipé de moyens de stockage de données, tel qu'un disque dur ou un support d'enregistrement amovible.
Dans une réalisation préférée, le PSM de l'invention peut comporter un écran E d'observation, solidaire de l'une des parois définissant l'espace de travail, ledit écran permettant à l'opérateur de visualiser les images collectées par le dispositif de collection de lumière. Cet écran d'observation peut être, par exemple, un écran plat intégré à la paroi postérieure de l'espace de travail.
Dans une réalisation particulière de l'invention, le PSM peut comporter, en outre, une zone de gazage des échantillons, comportant une arrivée de gaz, une enceinte permettant le confinement du gaz, et un dispositif de connexion reliant l'arrivée de gaz à l'enceinte. De manière préférée, l'enceinte et le dispositif de connexion sont facilement démontables, et de manière encore préférée, l'enceinte et le dispositif de connexion sont des pièces rapportées de type consommables. Dans cette réalisation de l'invention, l'arrivée de gaz est preferentiellement intégrée à l'une des parois verticales définissant l'espace de travail, et l'enceinte est une cloche transparente, reliée à l'arrivé de gaz par un tuyau. Le dispositif de connexion reliant l'arrivée de gaz à l'enceinte peut avantageusement comporter une collerette protectrice destinée à protéger l'arrivée de gaz des projections.
Selon un autre mode de réalisation, le PSM de l'invention comprend un dispositif de saisie de données. Ce dispositif de saisie peut consister en un clavier tactile solidaire du plancher de la hotte et relié à un ordinateur. Alternativement, le clavier tactile peut être situé en-dehors de l'espace de travail, sur la face avant de la hotte. Le cas échéant, une feuille de données en cours de saisie peut être visualisée sur l'écran E mentionné ci-dessus, ou sur une portion de cet écran. Alternativement, un deuxième écran spécifique peut être intégré à une paroi de l'espace de travail.
Le plancher et les parois verticales définissant l'espace de travail d'un PSM selon l'invention sont preferentiellement planes et constituées de matériaux lisses, lavables et résistant aux produits d'entretien utilisés dans les laboratoires, tels que les produits contenant des ammoniums quaternaires ou les virucides les plus puissants. Alternativement et/ou de manière complémentaire, le plancher est constitué d'un ou plusieurs éléments démontables jetables ou stérilisables par autoclave.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à l'examen de la description détaillée ci-après, et des dessins annexés, sur lesquels :
- la figure 1 est une vue en perspective très schématique d'un poste de sécurité microbiologique (PSM) selon l'invention, - la figure 2 détaille de façon schématique une partie du dispositif optique du PSM de la figure 1 , et
- la Figure 3 représente un exemple de réalisation de clavier de saisie des données.
L'objet de la présente invention est un PSM (tel que défini dans l'introduction) comprenant plusieurs éléments coopérant de façon originale pour permettre une manipulation aisée et sous contrôle visuel, d'objets microscopiques, dans des conditions assurant la protection des objets manipulés et du manipulateur vis-à-vis des risques microbiologiques. Cette invention peut être utilisée pour tous les types d'applications nécessitant la protection microbiologique des objets manipulés et/ou du manipulateur. A titre d'exemples, on peut citer la confection de petit matériel stérile, la recherche en biologie ou en thérapie cellulaire (par exemple, pour la préparation de cornées destinées à être greffées), et la manipulation d'embryons ou de cellules souches. Un domaine d'application privilégié de cette invention est la fécondation in vitro.
Les techniques d'Assistance Médicale à la Procréation (AMP) ont pour enjeu la conception d'êtres humains. Elles sont aussi appliquées dans le domaine vétérinaire.
La Fécondation In Vitro (FIV) a pour but d'assurer la rencontre entre l'ovocyte (gamète féminin) et le spermatozoïde (gamète masculin) en dehors de l'organisme (in vitro).
Les différentes étapes biologiques de la FIV sont réparties sur plusieurs jours (Ji) : > à JO • préparation des spermatozoïdes
• recherche des ovocytes dans les liquides folliculaires contenus dans des seringues
• mise en culture des ovocytes
• insémination : mise en contact dans les boites de culture des spermatozoïdes avec les ovocytes.
> à J1 les ovocytes sont débarrassés, un à un, de leurs cellules environnantes (décoronisation), pour permettre l'examen microscopique des signes de fécondation (présence des Pronoyaux).
> à J2 ou J3 « observation des premiers stades du développement embryonnaire
• replacement d'une partie des embryons dans la cavité utérine de la patiente à l'aide d'un petit cathéter.
Une grande rigueur doit accompagner ces opérations, notamment dans le domaine de la sécurité sanitaire. Les manipulateurs doivent en effet éviter la contamination des gamètes qui leur sont confiés, assurer une culture embryonnaire stérile sur le plan infectieux, et éviter les contaminations croisées entre prélèvements.
Pour atteindre ces objectifs, les différentes étapes des procédures de fécondation in vitro se font de façon stérile, classiquement sous une hotte à flux laminaire. Le flux laminaire des hottes a pour but d'empêcher l'introduction d'éléments étrangers potentiellement contaminants dans la zone de travail. Pour une efficacité optimum, la zone de manipulation doit être dépourvue d'objets perturbant le flux. Cependant, la recherche des ovocytes (de diamètre de 150 μm), l'insémination, la décoronisation et le chargement du cathéter de transfert ne peuvent s'effectuer que sous contrôle de la vue, effectué actuellement par le biais d'une loupe binoculaire.
En conséquence, pour toutes les étapes de la FIV, sauf pour la préparation des spermatozoïdes, qui ne nécessite pas de contrôle microscopique, les praticiens ont besoin de placer une loupe binoculaire sous une hotte, afin de travailler dans des conditions d'asepsie correcte. Malheureusement, comme cela a été expliqué plus haut, l'utilisation d'une loupe binoculaire est incompatible avec l'utilisation d'une hotte à flux laminaire vertical. En pratique, les étapes nécessitant un contrôle visuel microscopique sont effectuées en plaçant une loupe binoculaire sous une hotte à flux horizontal, ce qui pose trois types de problèmes : premièrement, le manipulateur n'est pas protégé ; deuxièmement, le flux est perturbé, ce qui diminue l'efficacité . de la hotte et donc le degré de protection de l'échantillon ; troisièmement, le nettoyage de la hotte (et de la loupe binoculaire) après manipulation d'un échantillon est long et difficile.
Dans le cadre de la FIV, le manipulateur a besoin d'être protégé pour, au moins, trois raisons :
» Tout prélèvement d'origine humaine doit être considéré a priori comme à risque infectieux ;
• Il existe des gestes à risques de contamination, comme la projection possible de liquides biologiques lors de l'examen des liquides folliculaires, liquides qui sont assez souvent sanglants ; • Enfin, certaines législations tendent à écarter les patients atteints de certaines maladies des protocoles d'assistance médicale à la procréation. Par exemple, en France, la loi de Bioéthique du 24 juillet 1994 oblige les praticiens à contrôler les sérologies HIV, hépatites B et C et syphilis de tous les patients devant bénéficier d'une AMP. Les patients infectés ne sont plus pris en charge.
La pression des couples dont l'une au moins des personnes est infectée par un des virus visés ci-dessus (hépatite B, hépatite C, VIH, syphilis) est devenue telle que des protocoles de recherche de prise en charge des patients ou des patientes infectés se sont mis en place. Dans certains hôpitaux, comme par exemple à l'Hôpital Cochin (Paris, France), des couples sérodifférents pour le virus du sida sont pris en charge, dans le cadre d'un protocole financé par l'ANRS (Association Nationale de Recherche contre le Sida). Cette prise en charge concerne les couples où le patient est séropositif et la patiente séronégative. Les couples où la patiente est séropositive ne sont pas pris en charge à cause du risque de contamination des manipulateurs lié au fait que lesdits manipulateurs travaillent sous hotte à flux laminaire horizontal pour les étapes de manipulation des gamètes féminins. En outre, certains laboratoires d'AMP ne prennent pas en charge les couples infectés par le virus de l'hépatite C, pour les mêmes raisons.
Pour pouvoir répondre à ces demandes et pour la protection du manipulateur, il est donc indispensable de travailler, pour toutes les étapes des AMP, dans des postes de sécurité microbiologique (PSM), par exemple sous des hottes à flux laminaire vertical.
Par ailleurs, la prise en charge de patients séropositifs pour un virus dangereux implique que l'espace de travail dans lequel les échantillons sont manipulés, soit systématiquement et parfaitement stérilisé après le traitement de chaque échantillon. En effet, il faut absolument éviter les contaminations nosocomiales entre les patientes prises en charge dans les protocoles d'AMP. De telles contaminations ont été décrites (Lesourd et al., Human Reproduction, 2000, Vol.15 n° 5, pp 1083-1085), soulignant l'attention qu'il convient de porter à ce problème.
Ce type de contamination nosocomiale peut provenir principalement de deux origines :
• En premier lieu, une contamination inter-échantillons peut provenir du manipulateur (suite à une projection d'un échantillon contaminé sur sa blouse, par exemple), ou d'objets utilisés par le manipulateur, tels que crayons ou cahier d'observations.
• La deuxième cause possible d'une contamination inter-échantillons est un nettoyage imparfait de la hotte et de son contenu. Le risque de contamination par la hotte et les instruments utilisés sous la hotte est d'autant plus élevé que l'espace de travail est encombré par de nombreux objets, et que ces objets sont d'une géométrie complexe. Ainsi, une loupe binoculaire, comportant notamment un plateau, plusieurs objectifs, des lampes et des molettes de réglage, est un instrument particulièrement long et difficile à nettoyer de façon à assurer sa stérilité.
En pratique, si le nettoyage complet de la hotte nécessite un temps long, incompatible avec les contraintes liées au nombre d'échantillons à traiter chaque jour sur un poste, ce nettoyage sera effectué de manière imparfaite. L'encombrement de l'espace de travail par des objets nécessaires aux manipulations est donc gênant à double titre : d'une part, il nuit à l'efficacité de la hotte en perturbant les flux laminaires, et d'autre part, il rend la stérilisation de la hotte longue et difficile, et en pratique souvent imparfaite. Dans ce contexte, il existe donc un besoin important d'un poste de sécurité microbiologique adapté aux besoins de la FIV, c'est-à-dire assurant la protection simultanée de l'échantillon, du manipulateur et de l'environnement, et permettant l'observation microscopique des gamètes et des embryons, tout en réduisant le risque de contaminations croisées. Les contraintes liées à la nature des manipulations dans la FIV se retrouvent dans les manipulations d'autres échantillons biologiques, notamment les manipulations impliquant des cellules humaines ou animales pour la recherche, la thérapie cellulaire, la thérapie génique, ou la recherche sur les embryons. Un poste de sécurité adapté à la FIV est donc approprié aux autres manipulations précitées. Idéalement, un tel PSM sera facile et rapide à nettoyer et ne nécessitera pas l'introduction sous la hotte de matériel autre que du matériel consommable ou le cas échéant stérilisable par autoclave.
Le PSM de l'invention permet de répondre à au moins une partie de ces contraintes. En effet, un point essentiel et original du PSM de l'invention est l'intégration, dans le corps du PSM, de tout le matériel nécessaire à la fécondation in vitro, et notamment du système optique, afin de dépouiller au maximum l'espace de travail pour obtenir un bon niveau de protection de l'échantillon et du manipulateur, mais aussi pour que l'intérieur de la hotte soit rapidement et entièrement nettoyable entre chaque échantillon, réduisant ainsi le risque de contamination entre les prélèvements.
Le PSM de l'invention peut être un PSM de type I, II, ou même III. Les PSM de type III sont des enceintes en atmosphère confinée maintenue en sous- pression, dans lesquelles les manipulations sont effectuées par le moyen de gants scellés à l'enceinte. L'intégration de matériel optique au corps d'un tel
PSM fait partie de la présente invention. De manière générale, l'intégration de matériel optique au corps de n'importe quel poste de sécurité microbiologique, de manière à obtenir un espace de travail le plus dégagé possible, fait partie de l'invention. De manière préférée, le PSM est de type II, par exemple une hotte à flux laminaire vertical.
Dans une réalisation préférée du PSM de l'invention, illustrée à la figure 1 , l'espace de travail est défini par le plancher 1 de la hotte, des parois latérales verticales 2, le fond 3 de la hotte, son plafond 4, et une vitre protectrice antérieure 5. Il comprend en outre une platine 6 propre à recevoir l'échantillon dans une zone d'observation de l'espace de travail, ladite platine comportant une première fenêtre transparente 7 permettant l'éclairage et/ou l'observation dudit échantillon.
Dans cette réalisation de l'invention, le dispositif optique d'observation comprend des moyens d'éclairage 8 propres à éclairer l'échantillon dans la zone d'observation, et des moyens de collection de lumière 9 permettant l'observation d'un échantillon placé dans cette zone.
Le dispositif optique est de préférence un système vidéo, permettant de stocker des images, par exemple une caméra autofocus 9 reliée à un dispositif d'enregistrement des images, tel qu'un ordinateur 17 équipé de moyens de stockage des données 18. Les caméras peuvent être de type numérique ou analogique. De manière préférée, le système vidéo comprend essentiellement un bloc optique 9 pour la collection des photons issus de la zone d'observation et un système de pilotage des différents réglages, pour la focale, l'éclairage 8 et le grossissement. Ce bloc optique peut être inversé pour permettre une fixation sous le plan de travail 1 (plancher de la hotte). La majorité des gestes techniques se font à des grossissements relativement faibles (de 10 à 70 environ). Cependant, un système optique plus performant permettant des grossissements jusqu'à 400 ou plus, peut être utilisé pour observer les zygotes à J+1 et les embryons, à J+2 ou J+3, voire jusqu'à J+6.
A cet effet, une caméra tri CDD 1/z pouce peut être utilisée pour observer sur un écran 1 1 de 17" (pouces) un objet de 125 μm sous une taille d'environ 100 mm.
Alternativement, d'autres types de dispositifs de collection d'image peuvent être utilisés. A titre d'exemple, mais de manière non restrictive, on peut citer les barrettes de dispositif à couplage de charge (plus connues sous l'acronyme anglais CCD).
L'élément optique 9 peut être placé sous le plancher 1 de la hotte, en regard d'une fenêtre transparente 7 de préférence intégrée dans la platine 6, comme cela est représenté sur les figures 1 et 2. Egalement de préférence, la platine 6, située autour de cette fenêtre 7, est une zone chauffante.
D'autres dispositions du système optique sont envisageables. Par exemple, une partie au moins des moyens d'éclairage et/ou de collection de lumière peut être située derrière une ou plusieurs fenêtres solidaires de l'une au moins des parois et distinctes de la fenêtre 7. En particulier, certains éléments, notamment les moyens de collection de lumière, peuvent être placés au niveau du plafond 4 de la hotte, en regard de la zone d'observation.
Dans un exemple particulier de réalisation de l'invention, l'ensemble de la zone d'observation est éclairé par un dispositif 8 dit de « longue frontale », par adjonction d'un condenseur placé à environ 182 mm de l'échantillon. Ce système comporte une fibre optique fixée à l'extrémité d'un tube inox, lui- même solidaire de la paroi du poste de travail. Le générateur de lumière a par exemple une puissance de 150 W, et il est de préférence réglable. Bien entendu, tout autre moyen d'éclairage connu de l'homme du métier peut être utilisé pour éclairer la zone de manipulation et d'observation de l'échantillon.
Dans une réalisation particulière de l'invention, le pilotage de l'ensemble de l'appareil est exécuté depuis un pédalier situé au sol sous le poste de travail, afin de diriger les différents réglages par pression sur les pédales affectées à chacune des fonctions. Le système de motorisation comprend par exemple trois paires de pédales placées sur un support incliné :
- 2 pédales pour la mise au point
- 2 pédales pour le zoom - 2 pédales pour l'éclairage.
Bien entendu, des systèmes de commande autre que les pédales sont envisageables. Par exemple, le réglage fin de la mise au point peut être effectué par des touches actionnables par les doigts au niveau d'un tableau de bord 10, placé sur l'avant de la hotte, à gauche de la zone d'observation de l'échantillon, comme cela est indiqué dans la figure 1. Les réglages du zoom et de l'éclairage peuvent aussi être effectués à partir de ce tableau de bord.
Le cas échéant, un boîtier de commande, placé en dehors de la hotte, comprend un dispositif de réglage de la vitesse des motorisations, par exemple un potentiomètre (ce réglage devra être fait preferentiellement avant que l'opérateur n'introduise ses mains dans le flux).
De manière préférée, le PSM de l'invention comporte un écran d'observation 1 1 solidaire de l'une des parois définissant l'espace de travail, ledit écran permettant de visualiser les images collectées par le dispositif de collection de lumière 9. De manière encore préférée, l'écran d'observation 1 1 est un écran plat solidaire d'une des parois verticales 2 ou 3 de la hotte, par exemple de la paroi postérieure 3 de l'espace de travail, derrière la zone d'observation de l'échantillon.
Par ailleurs, il existe d'autres impératifs généraux afin d'assurer une qualité optimum de la technique de FIV. En premier lieu, la température des manipulations doit être maintenue autour de 37°C, ce qui implique un plan de travail thermostaté à environ 37°C. Dans cette optique, le plancher 1 de l'espace de travail peut comporter une ou plusieurs zones équipées de moyens de régulation de température, de manière à être thermostatées à une température comprise entre 20 et 45 °C, en particulier à 37°C +/- 0,2°C. En particulier, la platine 6 peut être équipée de tels moyens de régulation de sa température. Il peut s'agir, par exemple, de résistances chauffantes placées sous la platine 6, et par conséquent à l'extérieur de l'espace de travail. Le cas échéant, la totalité du plancher de l'espace de travail peut être thermostatée.
Une autre contrainte importante dans le cas de la FIV est de maintenir le pH des milieux de culture aux alentours de 7 - 7,2, pour ne pas altérer la viabilité des gamètes et des embryons. Ces cellules ne tolérant pas bien des tampons de type Hepes, le pH est maintenu par la présence de bicarbonate dans les milieux de culture et un système de gazage à 5% de CO2 pour équilibrer ces milieux. Entre deux manipulations sur un échantillon, cet échantillon est donc de préférence placé dans une enceinte 13 maintenue à environ 5% de CO2. Cette enceinte 13 peut par exemple être constituée d'une cloche reliée à une arrivée de gaz 12 par un tube 14. Afin de réduire le risque de contaminations inter-échantillons mentionné plus haut, cette cloche peut être remplacée après traitement des échantillons de chaque patient. Dans ce but, on peut envisager soit des cloches autoclavables (par exemple, en verre), qui doivent être systématiquement stérilisées après usage, soit des cloches à usage unique, par exemple des consommables en plastique fin. Le tube 14 est preferentiellement à usage unique, mais il peut aussi être réutilisable après stérilisation par autoclave ou par tout autre moyen connu de l'homme du métier.
Un aspect de l'invention concerne une collerette de protection 15, destinée à protéger l'arrivée de gaz 12 des projections possibles de liquide biologique ou d'aérosols. En effet, une arrivée de gaz constitue inévitablement une rupture du plan de la paroi dans laquelle elle est intégrée, et peut donc être délicate à nettoyer. Des outils et des protocoles permettant de réduire le nombre d'objets nécessaires dans la hotte lors du traitement de chaque échantillon sont également proposés, toujours dans le but de limiter le risque de contamination nosocomiale entre échantillons et/ou patientes. Ainsi, un système de saisie des données observées, destiné à remplacer l'actuelle
« feuille de paillasse », peut être intégré au PSM. L'enregistrement des données doit pouvoir se faire sans passer par l'intermédiaire d'un clavier classique, qui ne répond pas aux règles de sécurité sanitaire. Plusieurs types de moyens de saisie des données peuvent être envisagés. Une première possibilité est d'intégrer dans le plan de travail de la hotte un clavier tactile
16, composé de touches prédéfinies. Une deuxième possibilité consiste à utiliser un écran où apparaissent des touches prédéfinies, sur lesquelles on peut diriger un pointeur. L'écran est de préférence solidaire d'une des parois du PSM. Il peut s'agir par exemple de l'écran d'observation (11 ) ou d'une fenêtre active de celui-ci. Alternativement, il peut s'agir d'un écran distinct de
(1 1 ). Les mouvements du pointeur et l'activation des touches peuvent être effectués à partir d'une aire de contrôle du pointeur, plus connue sous la terminologie anglaise « track pad », ou, plus généralement, par tout moyen connu sous le nom de « souris ». Tout autre moyen connu de l'homme du métier peut aussi être utilisé pour la saisie des données concernant les échantillons traités.
Ces moyens de saisie des données (écran tactile, track pad ou autre) sont, par exemple, situés à gauche du système optique (contrairement à ce qui est représenté à la figure 1 ). Une possibilité de « désactivation » des moyens de saisie doit être prévue pour éviter l'entrée de données aberrantes lors du nettoyage du plan de travail de la hotte. Une liste possible des touches prédéfinies d'un clavier 16 est donnée ci-après :
Touches des jours : J1 J2 J3 J4 J5 J6
Chiffres Touche de visualisation de la feuille de paillasse Touche de validation Touches prédéfinies :
Ovocyte
Pellucide vide Ovocyte atrétique
VG
M1
M2
OGP 1 GP
2GP
OPN
1 PN
2PN 3PN
Sup 3PN
Granuleux
Vacuole
(Type) A (Type) B
(Type) C
(Type) D
Morula
Morula compactée Début de cavitation
Blastocyste
Blastocyste expansé.
Un exemple d'agencement des touches d'un tel clavier est illustré sur la figure 3. Le système de saisie des données peut être relié à un poste informatique du laboratoire, à partir duquel sont rentrées l'identité des patients, associés aux échantillons à traiter, et les caractéristiques de la tentative. Le dossier du couple auquel appartient l'échantillon à traiter, peut être appelé et visualisé au niveau de l'écran de la hotte, par exemple par l'intermédiaire du numéro de la tentative. Ce numéro peut comprendre 6 chiffres (ex : 990123). Le clavier peut donc contenir aussi des touches numériques.
Deux cas sont à envisager :
1. la caméra ne permet pas d'observer les zygotes et les embryons 2. la caméra permet d'observer les zygotes et les embryons.
Dans le premier cas, l'enregistrement des données se fait sur une seule journée.
Lorsque le manipulateur appuie sur une touche prédéfinie du clavier 16, la donnée correspondante s'inscrit sur la feuille de paillasse. Une touche de visualisation de la feuille de paillasse permet de la faire apparaître à l'écran
1 1 en cas de besoin, le cas échéant dans un espace prédéfini de l'écran.
Dans le second cas, où la caméra permet d'observer les zygotes et les embryons, des touches de jour sont nécessaires.
L'enregistrement des données se fait en effet sur plusieurs jours (de 3 à 8 jours).
Il faut donc pouvoir rappeler la feuille de paillasse du couple correspondant pour continuer à entrer les données. Par exemple, le numéro de la tentative permet de faire apparaître la feuille de paillasse, la touche correspondant au jour (ex : J1 ou J2) permet l'entrée des données dans la bonne colonne. Des données numériques peut être entrées dans des cases de la feuille de paillasse, comme par exemple la quotation pour la survie des spermatozoïdes à 24 heures. Un exemple de clavier de saisie possible est représenté à la Figure 3.
Les parois 1 , 2, 3, 4 et 5, définissant l'espace de travail, sont de préférence planes et constituées de matériaux lisses, lavables et résistant aux produits d'entretien, tels que les produits contenant des ammoniums quaternaires ou les virucides les plus puissants. Alternativement et/ou de manière complémentaire, le plancher est constitué d'un ou plusieurs éléments démontables et jetables ou stérilisables par autoclave ou par tout autre moyen.

Claims

REVENDICATIONS
1. Poste de sécurité microbiologique (PSM), comportant des parois (1- 5) définissant un espace de travail, caractérisé en ce qu'il comprend un dispositif optique placé en-dehors de l'espace de travail, et permettant l'observation d'un échantillon dans au moins une zone de l'espace de travail par une fenêtre transparente solidaire de l'une desdites parois.
2. PSM selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu'il comprend une platine (6) propre à recevoir l'échantillon dans ladite zone d'observation de l'espace de travail, ladite platine comportant une première fenêtre transparente (7) permettant l'éclairage et/ou l'observation dudit échantillon.
3. PSM selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce le plancher (1 ) de l'espace de travail comporte une ou plusieurs zones équipées de moyens de régulation de température, de manière à être thermostatées à une température comprise entre 20 et 45 °C, en particulier à 37°C ± 0,2 °C.
4. PSM selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisé en ce que la platine (6) est équipée de moyens de régulation de température, permettant de fixer la température au niveau de sa surface entre 20 et
45 °C, en particulier à 37°C ± 0,2 °C.
5. PSM selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le dispositif optique d'observation comprend des moyens d'éclairage (8) propres à éclairer l'échantillon dans la zone d'observation, et des moyens de collection de lumière (9) permettant l'observation d'un échantillon placé dans cette zone.
6. PSM selon la revendication 5, caractérisé en ce que le dispositif de collection de lumière (9) comporte une caméra autofocus.
7. PSM selon la revendication 5 ou 6, caractérisé en ce que le dispositif de collection de lumière est placé sous la première fenêtre (7) de la platine (6).
8. PSM selon la revendication 5 ou 6, caractérisé en ce que tout ou partie des moyens d'éclairage et/ou de collection de lumière sont situés derrière une ou plusieurs fenêtres distinctes de la première fenêtre (7) et solidaires de l'une au moins des parois, en particulier de la paroi supérieure (4).
9. PSM selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, caractérisé en ce que le dispositif de collection de lumière (9) est agencé pour assurer plusieurs grossissements de l'image entre 10 et 1000, en particulier entre 10 et 400.
10. PSM selon la revendication 9, caractérisé en ce que le dispositif de collection de lumière (9) comporte en outre un système de mise au point fine à chaque grossissement.
11. PSM selon la revendication 10, caractérisé en ce que le système de mise au point fine est piloté à partir d'un tableau de bord (10) situé en- dehors de l'espace de travail et/ou solidaire de l'une des parois définissant l'espace de travail.
12. PSM selon l'une quelconque des revendications 5 à 11 , caractérisé en ce que le dispositif de collection de lumière (9) est relié à un dispositif d'enregistrement des images collectées.
13. PSM selon la revendication 12, caractérisé en ce que le dispositif d'enregistrement des images est un ordinateur équipé de moyens de stockage de données.
14. PSM selon l'une quelconque des revendications 5 à 13, caractérisé en ce qu'il comporte un écran d'observation (11) solidaire de l'une des parois définissant l'espace de travail, ledit écran permettant de visualiser les images collectées par le dispositif de collection de lumière (9).
15. PSM selon la revendication 14, caractérisé en ce que l'écran d'observation (11 ) est un écran plat intégré à la paroi postérieure (3) de l'espace de travail.
16. PSM selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, caractérisé en ce qu'il comporte en outre une zone de gazage des échantillons, comportant une arrivée de gaz (12), une enceinte permettant le confinement du gaz (13), et un dispositif de connexion (14) reliant ladite arrivée de gaz (12) à ladite enceinte (13).
17. PSM selon la revendication 16, caractérisé en ce que l'enceinte (13) et le dispositif de connexion (14) reliant l'arrivée de gaz (12) à ladite enceinte (13) sont facilement démontables.
18. PSM selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'enceinte (13) et le dispositif de connexion (14) reliant l'arrivée de gaz (12) à ladite enceinte (13) sont des pièces rapportées.
19. PSM selon l'une des revendications 16 à 18, caractérisé en ce que l'arrivée de gaz (12) est intégrée à l'une des parois verticales (2) et (3) définissant l'espace de travail, et en ce que l'enceinte (13) est une cloche transparente, reliée à l'arrivé de gaz (12) par un tuyau.
20. PSM selon l'une des revendications 16 à 19, caractérisé en ce que le dispositif de connexion (14) reliant l'arrivée de gaz à l'enceinte comporte une collerette protectrice (15) destinée à protéger l'arrivée de gaz (12) des projections.
21. PSM selon l'une quelconque des revendications 1 à 20, caractérisé en ce qu'il comprend en outre des moyens de saisie de données.
22. PSM selon la revendication 21 , caractérisé en ce que lesdits moyens de saisie de données comprennent un clavier tactile (16) solidaire du plancher (1 ) définissant l'espace de travail.
23. PSM selon la revendication 21 , caractérisé en ce que lesdits moyens de saisie de données comprennent un écran et une aire de contrôle d'un pointeur, ladite aire de contrôle étant solidaire du plancher (1 ), et ledit pointeur étant propre à permettre l'activation de touches prédéfinies matérialisées sur l'écran.
24. PSM selon l'une quelconque des revendications 21 à 23, caractérisé en ce que les moyens de saisie de données sont reliés à un ordinateur.
25. PSM selon l'une quelconque des revendications 1 à 24, caractérisé en ce que les parois (1-5), définissant l'espace de travail sont planes et constituées de matériaux lisses, lavables et résistant aux produits d'entretien.
6. PSM selon l'une quelconque des revendications 1 à 25, caractérisé en ce que le plancher (1) est constitué d'un ou plusieurs éléments démontables et jetables ou stérilisables par autoclave.
EP02701341A 2001-01-30 2002-01-29 Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation Withdrawn EP1356020A1 (fr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0101250 2001-01-30
FR0101250A FR2820144B1 (fr) 2001-01-30 2001-01-30 Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation
PCT/FR2002/000346 WO2002061031A1 (fr) 2001-01-30 2002-01-29 Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP1356020A1 true EP1356020A1 (fr) 2003-10-29

Family

ID=8859412

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP02701341A Withdrawn EP1356020A1 (fr) 2001-01-30 2002-01-29 Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20040202584A1 (fr)
EP (1) EP1356020A1 (fr)
JP (1) JP2004527234A (fr)
CA (1) CA2436635A1 (fr)
FR (1) FR2820144B1 (fr)
WO (1) WO2002061031A1 (fr)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE20214480U1 (de) 2002-09-18 2003-01-02 Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie, 69117 Heidelberg Vorrichtung zur Klimakontrolle
DE10304171B4 (de) * 2003-02-02 2005-02-10 Kendro Laboratory Products Gmbh Klimaschrank sowie Vorrichtung und Verfahren zu seiner Überwachung
GB2407048B (en) * 2003-10-15 2007-07-11 Biotrace Internat Plc Laboratory apparatus
GB2435448B (en) * 2006-02-20 2009-12-02 Devlin Electronics Ltd A Healthcare keyboard
GB2461707B (en) * 2008-07-08 2013-06-26 Ruskinn Life Sciences Ltd Laboratory apparatus for a controlled environment
WO2025024698A1 (fr) * 2023-07-26 2025-01-30 Germfree Laboratories, Llc Système de composition pharmaceutique

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE627235A (fr) * 1962-02-02
US4301252A (en) * 1980-04-04 1981-11-17 Baker Fraser L Controlled environment incubator for light microscopy
DD201732A5 (de) * 1981-10-08 1983-08-03 Ts Lab Biophysika Einrichtung zur ultramikroskopischen beobachtung
DE3924701A1 (de) * 1989-07-26 1991-01-31 Buehler Edmund Gmbh & Co Mikroskopinkubator
AU7909091A (en) * 1990-05-16 1991-12-10 Scientific Imaging Instruments, Inc. Method and apparatus for preparing a liquid specimen
KR100291052B1 (ko) * 1996-01-24 2004-11-26 마쯔시다덴기산교 가부시키가이샤 조직또는세포의물리화학적특성측정방법,약품검사방법및그장치

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of WO02061031A1 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2004527234A (ja) 2004-09-09
FR2820144B1 (fr) 2004-01-16
CA2436635A1 (fr) 2002-08-08
US20040202584A1 (en) 2004-10-14
FR2820144A1 (fr) 2002-08-02
WO2002061031A1 (fr) 2002-08-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Gianaroli et al. ESHRE guidelines for good practice in IVF laboratories
EP2069749B1 (fr) Appareil destiné à recevoir des échantillons biologiques et procédé pour leur dissection au laser
Magli et al. Revised guidelines for good practice in IVF laboratories
Pallier et al. Herpesvirus, cytomegalovirus, human sperm and assisted fertilization
Sewell Laboratory-associated infections and biosafety
US20060057555A1 (en) Method and system for controlling the development of biological entities
Gilling-Smith et al. Laboratory safety during assisted reproduction in patients with blood-borne viruses
Abatenh et al. Contamination in a microbiological laboratory
Letur‐Könirsch et al. Safety of cryopreservation straws for human gametes or embryos: a study with human immunodeficiency virus‐1 under cryopreservation conditions
EP1356020A1 (fr) Postes de securite microbiologique utilisables en assistance medicale a la procreation
Malhotra et al. ISAR consensus guidelines on safety and ethical practices in in vitro fertilization clinics
WO2005111587A1 (fr) Dispositif de détection de biospécimen
WO2019125583A1 (fr) Dispositif d'imagerie pour mesurer la motilité du sperme
Sparks et al. Infection precautions for severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 in assisted reproduction centers: dodging an invisible bullet
Weidner et al. Male urogenital infections
Seabra et al. The importance of design in the development of a portable and modular Iot-based detection device for clinical applications
Kujur et al. Digital optical microscope (housing inside biosafety cabinet): a promising imaging technology for micro-and cell-biology, and histopathology
Puy et al. Detection of Loa loa microfilariae in follicular fluid during assisted reproductive technology: case report and review of the literature
Zivkovic et al. Croatian Society of Clinical Embryologist–guidelines on the epidemiological framework for the implementation of medically assisted reproduction (MAR) procedures during the COVID-19 pandemic regarding the safety of patients and medical health workers
CN110066733A (zh) 干细胞培养机器人
Rizal Adjustment of sperm cryopreservation laboratory management during the COVID-19 pandemic
de Beer et al. South Africa: A Laboratory Perspective on Quality Control
Wittemer et al. The Leica Microsystems’ IMSI System
Vujisic Zivkovic et al. Croatian Society of Clinical Embryologists–guidelines on the epidemiological framework for the implementation of medically assisted reproduction (MAR) procedures during the COVID-19 pandemic regarding the safety of patients and medical health workers
Mngwengwe et al. HEK293/ACE2 cells' response to severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 infection and low-level-laser therapy under microscopy

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

17P Request for examination filed

Effective date: 20030717

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LI LU MC NL PT SE TR

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE APPLICATION IS DEEMED TO BE WITHDRAWN

18D Application deemed to be withdrawn

Effective date: 20070801