EA020578B1 - Бензимидазолы и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина - Google Patents

Бензимидазолы и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина Download PDF

Info

Publication number
EA020578B1
EA020578B1 EA201170137A EA201170137A EA020578B1 EA 020578 B1 EA020578 B1 EA 020578B1 EA 201170137 A EA201170137 A EA 201170137A EA 201170137 A EA201170137 A EA 201170137A EA 020578 B1 EA020578 B1 EA 020578B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
phenyl
substituted
fluoro
mmol
Prior art date
Application number
EA201170137A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170137A1 (ru
Inventor
Чи Б. Ву
Джереми С. Диш
Пуи Йи Нг
Чарльз А. Блум
Роберт Б. Перни
Original Assignee
Сертрис Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сертрис Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Сертрис Фармасьютикалз, Инк.
Publication of EA201170137A1 publication Critical patent/EA201170137A1/ru
Publication of EA020578B1 publication Critical patent/EA020578B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/422—Oxazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/46—8-Azabicyclo [3.2.1] octane; Derivatives thereof, e.g. atropine, cocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/18—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with aryl radicals directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

В настоящей заявке представлены сиртуин-модулирующие соединения формулы (II). Сиртуин-модулирующие соединения можно использовать для увеличения продолжительности жизни клетки и для лечения и/или профилактики множества различных заболеваний и расстройств, включая, например, заболевания или расстройства, связанные со старением или стрессом, диабет, ожирение, нейродегенеративные заболевания, сердечно-сосудистое заболевание, нарушения свертываемости крови, воспаление, рак и/или приливы, а также заболевания или расстройства, для которых будет полезным повышение митохондриальной активности. Также представлены композиции, включающие сиртуин-модулирующее соединение в сочетании с другим терапевтическим средством.

Description

Настоящая заявка заявляет преимущество предварительной заявки США № 61/133938, поданной 3 июля 2008 г., содержание которой включено посредством ссылки во всей полноте.
Предпосылки изобретения
Семейство молчащих информационных регуляторных (8Иеи1 1и1огша1юп Ке§и1а1ог 8ΙΚ) генов представляет собой высококонсервативную группу генов, присутствующих в геномах организмов от агсЬаеЪас1егта до высших эукариот. Кодируемые 8ΙΚ белки вовлечены в различные процессы от регуляции сайленсинга гена до репарации ДНК. Белки, кодируемые членами генного семейства 8ΙΚ, демонстрируют высокую консервативность последовательности в 250-аминокислотном центральном представляющем собой ядро домене. Хорошо охарактеризованным геном в этом семействе является 8. сегеу181ае 8ΙΚ2, который вовлечен в сайленсинг НМ локусов, которые содержат информацию, определяющую тип спаривания дрожжей, эффекты положения теломера и клеточное старение. Белок 8ιγ2 дрожжей относится к семейству гистондеацетилаз. Гомолог 8п2, СоЬВ, в 8а1топе11а ТурЫтигшт действует как ΝΑΌ (никотинамидадениндинуклеотид)-зависимая ΑΌΡ-рибозилтрансфераза.
8ιγ2 белок представляет собой деацетилазу класса III, которая использует ΝΑΌ в качестве сосубстрата. В отличие от других деацетилаз, многие из которых вовлечены в сайленсинг генов, 8ιγ2 не чувствительна к ингибиторам гистондеацетилаз класса I и II, подобных трихостатину А (Т8А).
Деацетилирование ацетил-лизина посредством 8п2 тесно связано с ΝΑΌ гидролизом, с образованием никотинамида и нового ацетил-ΑΌΡ рибозного соединения. ΝΑΌ-зависимая деацетилазная активность 8ιγ2 является существенной для его функций, что может связывать его биологическую роль с клеточным метаболизмом в дрожжах. Гомологи 8ιγ2 млекопитающих имеют ΝΑΌ-зависимую гистондеацетилазную активность.
Биохимические исследования показали, что 8ιγ2 может легко деацетилировать амино-концевые отростки гистонов Н3 и Н4, приводя к образованию 1-О-ацетил-Α^Ρ-рибозы и никотинамида. Штаммы с дополнительными копиями 8ГК2 демонстрируют повышенный гДНК сайленсинг и на 30% большую продолжительность жизни. Недавно было показано, что дополнительные копии гомолога 8ГК2 С. е1е§аи8, 81Г-2.1, и Й8и2 ген Ό. ше1аио§а81ег сильно увеличивают продолжительность жизни в этих организмах. Это говорит о том, что 8ГК2-зависимый регуляторный путь для старения возник рано в результате эволюции и хорошо сохранился. В настоящее время считается, что развитие 8ιγ2 генов произошло для усиления здоровья организма и резистентности к стрессу для повышения возможности его выживания в неблагоприятных условиях.
У человека существует семь 8п2-подобных генов (8IΚТ1-8IΚТ5), у которых есть общий для них консервативный каталитический домен 8ιγ2. 8ГКТ1 представляет собой ядерный белок с наивысшей степенью сходства последовательности с 8п2. 8ГКТ1 регулирует несколько клеточных мишеней путем деацетилирования, включая супрессор опухоли р53, клеточный сигнальный фактор ΝΡ-κΒ и РОХО транскрипционный фактор.
8ГКТ3 представляет собой гомолог 8ГКТ1, который является консервативным в прокариотах и эукариотах. 8ΣΚ.Τ3 белок нацелен на кристы митохондрий посредством уникального домена, расположенного на Ν-конце. 8ΣΚ.Τ3 обладает ΝΑ^+-зависимой протеиндеацетилазной активностью и широко экспрессируется, в частности, в метаболически активных тканях. Считается, что 8ΣΚ.Τ3 при переносе в митохондрии должен расщепляться до более мелкой активной формы под действием митохондриальной матриксной процессинговой пептидазы (МРР).
Ограничение калорий известно более 70 лет как способствующее улучшению здоровья и продлению жизни млекопитающих. Продолжительность жизни дрожжей, также как у многоклеточных животных, также продлевается в результате вмешательств, которые напоминают ограничение калорий, таких как низкий уровень глюкозы. То открытие, что дрожжи и мухи, у которых отсутствует 8ГК2 ген, долго не живут при ограничении калорий, является свидетельством того, что 8ГК2 гены опосредуют благоприятные в отношении здоровья эффекты диеты с ограничением калорий. Более того, мутации, которые снижают активность глюкоза-чувствительного сАМР (аденозин 3',5'-монофосфат)-зависимого (ΡΚΑ) пути у дрожжей, увеличивают продолжительность жизни в клетках дикого типа, но не в мутантных 81г2 штаммах, указывая на то, что 8ГК2 вероятно является ключевым компонентом, действующим по направлению пути ограничения калорий.
Краткое описание изобретения
В настоящей заявке представлены новые сиртуин-модулирующие соединения и способы их применения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает сиртуин-модулирующие соединения структурных формул (I) и (II), как описано подробно ниже.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает способы применения сиртуин-модулирующих соединений или композиций, включающих сиртуин-модулирующие соединения. В некоторых вариантах воплощения сиртуин-модулирующие соединения, которые повышают уровень и/или активность белка сиртуина, можно использовать для различных терапевтических применений, включая, лечение и/или профилактику множества различных заболеваний и расстройств, включая, например, лечение
- 1 020578 субъекта, страдающего от или чувствительный к резистентности к инсулину, метаболического синдрома, диабета или его осложнений, или повышения чувствительности к инсулину у субъекта.
Сиртуин-модулирующие соединения можно вводить отдельно или в сочетании с другими соединениями, включая другие сиртуин-модулирующие соединения или другие терапевтические средства.
Подробное описание изобретения
1. Определения
Как это используется в настоящей заявке, следующие термины и фразы должны иметь значения, указанные ниже. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящей заявке, имеют общепринятые значения, известные специалистам в данной области со средней квалификацией.
Термин средство используется в настоящей заявке для обозначения химического соединения, смеси химических соединений, биологической макромолекулы (такой как нуклеиновая кислота, антитело, белок или его часть, например, пептид) или экстракта, полученного из биологических веществ, таких как клетки или ткани бактерий, растений, грибов или животных (в частности, млекопитающих). Активность таких средств может сделать их подходящими в качестве терапевтического средства, которое представляет собой биологически, физиологически или фармакологически активное вещество (или вещества), которое действует локально или системно в организме субъекта.
Термин биодоступный, когда он относится к соединению, является общепринятым в данной области и относится к форме соединения, которая, для этого соединения или части вводимого количества этого соединения, обеспечивает возможность абсорбции, включения или делает его иным образом физиологически доступным для субъекта или пациента, которому его вводят.
Биологически активная часть сиртуина относится к части белка сиртуина, обладающей биологической активностью, такой как способность к осуществлению деацетилирования. Биологически активные части сиртуина могут включать домен, представляющий собой ядро сиртуинов. Биологически активные части 8ΙΚΤ1 с номером доступа ОепВапк № ΝΡ_036370, которые охватывают ΝΑΌ+связывающий домен и субстрат-связывающий домен, например, могут включать без ограничения, аминокислоты 62-293 с номером доступа ОепВапк № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 237932 с номером доступа ОепВапк № ΝΜ_012238. Поэтому эта область иногда указывается как представляющий ядро домен. Другие биологически активные части 8ΙΚΤ1, также иногда указываемые как являющиеся ядром домены, включают область аминокислот 261-447 с номером доступа ОепВапк № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 834-1394 с номером доступа ОепВапк № ΝΜ1_12238; область аминокислот 242-493 с номером доступа ОепВапк ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 777-1532 с номером доступа ОепВапк № ΝΜ_012238; или область аминокислот 254-495 с номером доступа ОепВапк № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 813-1538 с номером доступа ОепВапк № ΝΜ_012238.
Термин домашние животные относится к кошкам и собакам. Как он используется в настоящей заявке, термин собака (собаки) относится к любому члену вида Сашк ГатШагТ. который включает большое количество различных пород. Термин кошка (кошки) относится к кошачьему животному, включая домашних кошек и других членов семейства РеШае, рода РеЙ8.
Диабет относится к высокому уровню сахара в крови или кетоацидозу, а также к хроническим общим метаболическим расстройствам, возникающим в результате продолжительного состояния, характеризующегося высоким уровнем сахара в крови, или в результате пониженной толерантности к глюкозе. Диабет охватывает обе формы этого заболевания, тип I и тип II (инсулин-независимый сахарный диабет или ΝΙΌΌΜ). Что касается диабета, факторы риска включают следующие: объем талии больше чем 40 дюймов (101,6 см) для мужчин или 35 дюймов (88,9 см) для женщин, кровяное давление 130/85 мм рт.ст. или выше, уровень триглицеридов выше 150 мг/дл, уровень глюкозы в крови натощак больше чем 100 мг/дл или уровень липопротеинов высокой плотности меньше чем 40 мг/дл у мужчин или 50 мг/дл у женщин.
Термин ΕΌ50 является общепринятым в данной области. В некоторых вариантах воплощения, ΕΌ50 означает дозу лекарственного средства, которая обеспечивает 50% от максимального ответа или эффекта, или, альтернативно, дозу, которая обеспечивает предваретельно определенный ответ для 50% испытываемых субъектов или препаратов. Термин БО5о является общепринятым в данной области. В некоторых вариантах воплощения, ЬО50 означает дозу лекарственного средства, которая является летальной для 50% испытываемых субъектов. Термин терапевтический индекс является общепринятым в данной области термином, который относится к терапевтическому индексу лекарственного средства, определяемому как ΡΌ50/ΕΌ50.
Термин гиперинсулинемия относится к состоянию индивидуума, при котором уровень инсулина в крови выше нормального.
Термин резистентность к инсулину относится к состоянию, при котором нормальное количество инсулина вызывает недостаточный биологический ответ по сравнению с биологическим ответом у субъекта, который не имеет резистентности к инсулину.
Расстройство резистентности к инсулину, как обсуждается в настоящей заявке, относится к лю- 2 020578 бому заболеванию или состоянию, которое вызвано резистентностью к инсулину или которому способствует резистентность к инсулину. Примеры включают диабет, ожирение, метаболический синдром, синдромы инсулин-резистентности, синдром X, резистентность к инсулину, высокое кровяное давление, гипертензия, высокий уровень холестерина в крови, дислипидемия, гиперлипидемия, дислипидемия, атеросклеротическое заболевание, включая удар, заболевание коронарных артерий или инфаркт миокарда, гипергликемия, гиперинсулинемия и/или гиперпроинсулинемия, нарушенная толерантность к глюкозе, замедленное выделение инсулина, диабетические осложнения, включая коронарное сердечное заболевание, стенокардия, застойная сердечная недостаточность, удар, когнитивные функции при деменции, ретинопатия, периферическая невропатия, нефропатия, гломерулонефрит, гломерулосклероз, нефротический синдром, гипертензивный нефросклероз, некоторые типы рака (такие как эндометриальный, молочной железы, предстательной железы и толстой кишки), осложнения беременности, плохое женское репродуктивное здоровье (такое как нарушение ментруального цикла, бесплодие, нерегулярная овуляция, синдром поликистоза яичников (РСО8)), липодистрофия, расстройства, связанные с холестерином, такие как желчные конкременты, холецистит и желчекаменная болезнь, подагра, обструктивные приступы апноэ во сне и респираторные проблемы, остеоартрит и профилактика и лечение потери костной массы, например, остеопороза.
Термин скот относится к одомашненным четвероногим животным, которые включают животных, которых выращивают на мясо и различные побочные продукты, таким как коровы, включая крупный рогатый скот и других членов рода Вое, свиньи, включая домашнюю свинью и других членов рода §ив, овцы, включая овцу и других членов рода Ονίβ, домашние козы и другие члены рода Сарга; к одомашненным четвероногим животным, которых выращивают для специальных целей, например, для использования в качестве вьючных животных, таким как лошади, включая домашних лошадей и других членов семейства Есцибас. рода Есцшв.
Термин млекопитающее известен из уровня техники, и примеры млекопитающих включают человека, приматов, домашний скот (включая коров, свиней и т.д.), домашних животных (например, собак, кошек и т.д.) и грызунов (например, мышей и крыс).
Тучные индивидуумы или индивидуумы, страдающие ожирением, это, в основном, индивидуумы, имеющие индекс массы тела (ΒΜΙ) по меньшей мере 25 или больше. Ожирение может быть или не быть связано с резистентностью к инсулину.
Термины парентеральное введение и вводимый парентерально являются общепринятыми в данной области и относятся к способам введения, отличным от энтерального и местного введения, обычно путем инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, внутрисердечную, внутрикожную, интраперитонеальную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную и интрастернальную инъекцию и инфузию.
Пациент, субъект, индивидуум или хозяин относится либо к человеку или животному, отличному от человека.
Термин фармацевтически приемлемый носитель является общепринятым в данной области и относится к фармацевтически приемлемому веществу, композиции или носителю, такому как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или инкапсулирующее вещество, вовлеченному в перенос или транспортирование какой-либо представляющей интерес композиции или ее компонента. Каждый носитель должен быть приемлемым в том смысле, что он должен быть совместим с представляющей интерес композицией и ее компонентами и не быть вредным для пациента. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; (9) масла, такие как арахисовое масло, масло семян хлопчатника, саффлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло, (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический физиологический раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатно-буферные растворы и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических композициях.
Термин профилактическое или терапевтическое лечение является общепринятым в данной области и относится к введению лекарственного средства хозяину. Если его вводят до клинического проявления нежелательного состояния (например, заболевания или другого нежелательного состояния животного-хозяина), тогда лечение является профилактическим, т.е. защищает хозяина против развития нежелательного состояния, тогда как, если его вводят после проявления нежелательного состояния, лечение является терапевтическим (т.е. оно предназначено для уменьшения, облегчения или поддержания существующего нежелательного состояния или вызываемых им побочных эффектов).
- 3 020578
Термин апирогенный, при ссылке на композицию, относится к композиции, которая не содержит пирогена в количестве, которое могло бы привести к неблагоприятному эффекту (например, раздражение, лихорадка, воспаление, диарея, респираторный дистресс-синдром, эндотоксический шок и т.д.) у субъекта, которому была введена такая композиция. Например, предполагается, что термин охватывает композиции, которые не содержат или, по существу, не содержат эндотоксина, такого как, например, липополисахарида (ЬР8).
Репликативная продолжительность жизни клетки относится к количеству дочерних клеток, продуцируемых отдельной материнской клеткой. Хронологическое старение или хронологическая продолжительность жизни, с другой стороны, относится к промежутку времени, в течение которого популяция не-делящихся клеток остается жизнеспособной, будучи лишенной питательных веществ. Увеличение продолжительности жизни клетки или продление продолжительности жизни клетки, при применении к клеткам или организмам, относится к увеличению количества дочерних клеток, продуцируемых одной клеткой; повышению способности клеток или организмов справляться со стрессами и бороться с повреждением, например, ДНК, белков; и/или повышение способности клеток или организмов выживать и существовать в живом состоянии более длительное время в конкретных условиях, например, стресса (например, тепловой шок, осмотический стресс, высокоэнергетическое излучение, химическииндуцированный стресс, повреждение ДНК, недостаточный уровень соли, недостаточный уровень азота или недостаточный уровень питательных веществ). Продолжительность жизни можно увеличить по меньшей мере на около 20, 30, 40, 50, 60% или в пределах от 20 до 70%, от 30 до 60%; от 40 до 60% или более с использованием способов, описанных в настоящей заявке.
Сиртуин-активирующее соединение относится к соединению, которое повышает уровень белка сиртуина и/или повышает по меньшей мере одну активность белка сиртуина. В иллюстративном варианте воплощения, сиртуин-активирующее соединение может повышать по меньшей мере одну биологическую активность белка сиртуина на по меньшей мере около 10, 25, 50, 75, 100% или более. Примеры биологических активностей сиртуиновых белков включают деацетилирование, например, гистонов и р53; продление продолжительности жизни; повышение геномной стабильности; сайленсинг транскрипцию и контроль сегрегации окисленных белков между материнскими и дочерними клетками.
Белок сиртуин относится к члену семейства белков сиртуиндеацетилазы или, предпочтительно, к δίτ2 семейству, которое включают διτ2 дрожжей (номер доступа СепВапк Р53685), δίτ-2.1 С. е1едап5 (номер доступа СепВапк ΝΡ_501912) и человеческий δΙΚΤΙ (номер доступа СепВапк ΝΜ_012238 и ΝΡ_036370 (или АР083106)) и δΙΚΤ2 (номер доступа СепВапк ΝΜ_012237, ΝΜ_030593, ΝΡ_036369, ΝΡ_085096 и ΑΡ083107) белки. Другие члены семейства включают четыре дополнительных 5>н2-подобны.\ гена дрожжей, называемых НБТ генами (гомологи δίτ два) ΗδΤΙ, ΗδΤ2, Н8Т3 и Н8Т4 и пять других человеческих гомологов ΗδΙΚΤ3, ΗδΙΚΤ4, ΙιδΙΚΤΤ ΗδΙΚΤ6 и ΒδΙΗΤ7 (ВтаеЬшапп еС а1. (1995) Сепез Όεν. 9:2888 апД Ртуе е! а1. (1999) ВВКС 260:273). Предпочтительными сиртуинами являются те, которые имеют больше сходства с δΙΚΤΙ, т.е. ΗδΙΚΤΙ и/или διτ2, чем с δΙΚΤ2, такие как члены, имеющие по меньшей мере часть Ν-концевой последовательности, которая присутствует в δΙΚΤΙ и отсутствует в δΙΚΤ2, например, как это имеет δΙΚΤ3.
δΙΚΤΙ белок относится к члену διτ2 семейства сиртуиндеацетилаз. В одном варианте воплощения, δΙΚΤΙ белок включает διτ2 дрожжей (Номер доступа СепВапк Р53685), διτ-2.1 С. е1едап8 (Номер доступа СепВапк ΝΡ_501912), человеческий δΙΚΤΙ (Номер доступа СепВапк ΝΜ_012238 или ΝΡ_036370 (или АР083106) ) белки и их эквиваленты и фрагменты. В другом варианте воплощения, δΙΚΤΙ белок включает полипептид, включающий последовательность, состоящую из или, по существу, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ΝΡ_036370, ΝΡ_501912, ΝΡ_085096, ΝΡ_036369 или Ρ53685. δΙΚΤΙ белки включают полипептиды, включающие всю или часть аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ΝΡ_036370, ΝΡ_501912,
ΝΡ_085096, ΝΡ_036369 или Ρ53685; аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ΝΡ_036370, ΝΡ_501912, ΝΡ_085096, ΝΡ_036369 или Ρ53685, с от 1 до около 2, 3, 5, 7, 10, 15, 20, 30, 50, 75 или более консервативных аминокислотных замен; аминокислотной последовательности, которая, по меньшей мере, является на 60, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ΝΡ_036370, ΝΡ_501912, ΝΡ_085096, ΝΡ_036369 или Ρ53685, и их функциональные фрагменты. Полипептиды по настоящему изобретению также включают гомологи (например, ортологи и паралоги), варианты или фрагменты представленных в СепВапк с номерами доступа ΝΡ_036370, ΝΡ_501912, ΝΡ_085096, ΝΡ.®6369 или Ρ53685.
δΙΚΤ3 белок относится к члену белкового семейства сиртуиндеацетилазы и/или к гомологу δΙΚΤΙ белка. В одном варианте воплощения, δΙΚΤ3 белок включает человеческий δΙΚΤ3 (номер доступа СепВапк ААН01042, ΝΡ_036371 или ΝΡ_001017524) и мышиный δΙΚΤ3 (номер доступа СепВапк ΝΡ_071878) белки и их эквивалетны и фрагменты. В другом варианте воплощения, δΙΚΤ3 белок включает полипептид, включающий последовательность, состоящую из или, по существу, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ААН01042, ΝΡ_036371, ΝΡ_001017524 или ΝΡ_071878. δΙΚΤ3 белки включают полипептиды, включающие всю или часть аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа ААН01042, ΝΡ_036371, ΝΡ_001017524 или ΝΡ_071878; аминокислотной последовательности, представленной в СепВапк, номера доступа
- 4 020578
ААН01042, ΝΡ_036371, ΝΡ_001017524 или ΝΡ_071878, с от 1 до около 2, 3, 5, 7, 10, 15, 20, 30, 50, 75 или более консервативных аминокислотных замен; аминокислотной последовательности, которая, по меньшей мере, является на 60, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичной последовательности, представленной в ОепВапк, номера доступа ААН01042, ΝΡ_036371, ΝΡ_001017524 или ΝΡ_071878, и их функциональные фрагменты.
Полипептиды по настоящему изобретению также включают гомологи (например, ортологи и паралоги), варианты или фрагменты представленных в ОепВапк с номерами доступа ААН01042, ΝΡ_036371, ΝΡ_001017524 или ΝΡ_071878. В одном варианте воплощения, 8ΙΚΤ3 белок включает фрагмент 8ΙΚΤ3 белка, который образуется путем расщепления митохондриальной матриксной процессинговой пептидазой (МРР) и/или митохондриальной промежуточной пептидазой (ΜΙΡ).
Термины системное введение, вводимый системно, периферическое введение и вводимый периферийно являются общепринятыми в данной области и относятся к введению представляющей интерес композиции, терапевтического или другого средства, отличному от введения непосредственно в центральную нервную систему, так, чтобы оно поступало в систему пациента, подвергалось, таким образом, метаболизму и другим подобным процессам.
Термин терапевтическое средство является общепринятым в данной области и относится к любой химической частице, которая является биологически, физиологически или фармакологически активным веществом, которое действует локально или системно у субъекта. Термин также означает любое вещество, предназначенное для использования в диагностике, лечении, облегчению, лечению или профилактики заболевания или для усиления желаемого физического или умственного развития и/или состояний у животного или человека.
Термин терапевтический эффект является общепринятым в данной области и относится к местному или системному эффекту у животных, в частности, млекопитающих и, более конкретно, у людей, вызванному фармакологически активным веществом. Фраза терапевтически эффективное количество означает такое количество этого вещества, которое обеспечивает некоторый желаемый местный или системный эффект при разумном соотношении польза/риск, применимом к любому лечению. Терапевтически эффективное количество такого вещества варьирует в зависимости от субъекта и состояния заболевания, подлежащего лечению, массы тела и возраста субъекта, тяжести состояния заболевания, способа введения и подобных факторов, и его легко может определить специалист в данной области со средней квалификацией. Например, некоторые композиции, описанные в настоящей заявке, можно вводить в достаточном количестве для получения желаемого эффекта при разумном соотношении польза/риск, применимом к такому лечению.
Лечение состояния или заболевания относится к лечению, а также облегчению по меньшей мере одного симптома состояния или заболевания.
Термин ухудшение зрения относится к снижению зрения, которое часто является только частично обратимым или необратимым после лечения (например, хирургической операции). В частности, сильное ухудшение зрения называется слепотой или потерей зрения, что относится к полной потере зрения, зрению хуже чем 20/200, что нельзя исправить при помощи корректирующих линз, или к полю зрения с диаметром меньше чем 20° (радиус 10°).
2. Модуляторы сиртуина
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает новые сиртуин-модулирующие соединения для лечения и/или профилактики множества различных заболеваний и расстройств, включая, например, лечение субъекта, страдающего от или чувствительный к резистентности к инсулину, метаболического синдрома, диабета или его осложнений, или повышения чувствительности к инсулину у субъекта. Соединения, раскрытые в настоящей заявке, могут быть подходящими для использования в фармацевтической композиции и/или одном или нескольких способах, раскрытых в настоящей заявке.
В одном варианте воплощения сиртуин-модулирующие соединения по настоящему изобретению представлены структурной формулой (II)
или его соль, где
К13 выбран из водорода, галогена, -ОН, -Ο^Ν, фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-(С1-С2 фторзамещенный алкил), -8-(С1-С2 фторзамещенный алкил), С1-С4 алкила, -(С1-С2 алкил)-Ы(К14)(К14), -ОСН2СН(ОН)СН2ОН, -О-(С!-С4) алкила, -О-(С-С3) алкил-Ы(К14)(К14), -Ν(Κ14)(Κ14), -8-(С1-С4) алкила и С3С7 циклоалкила;
- 5 020578
К выбран из водорода, -(С2-С4) алкила, -(С1-С4) фторзамещенного алкила, -(С1-С4) алкил-И(К7)(К7), (С1-С4) алкил-С(О)-Ы(К7)(К7), -(С2-С4) алкил -О-К7 и -(С2-С4) алкил-Ы(К7)-С(О)-К7, где каждый К7 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К7, связанные с одним и тем же атомом азота, взятые вместе с атомом азота, образуют 4-7членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(=О)2 и О, где насыщенный гетероцикл необязательно замещен по одному атому углерода -ОН, -С1-С4 алкилом, фтором, -ΝΗ2, -ΝΗ(^-^ алкил), - Ν(Οι-Ο4 алкил)2, -ΝΗ(ΟΗ^Η2Ο^3) или -Ν(ΟΗ^Η2ΟΟΗ3)2;
К4 выбран из водорода, галогена, -С^Ы, фторзамещенного С1-С2 алкила, -8-(С1-С2) фторзамещенного алкила, С1-С4 алкила, -8-(С1-С4) алкила и С3-С7 циклоалкила;
X выбран из
-ΝΗ-σ(=ο)-ί, -с(=о)-ын-т, -ин-с(=е)-1, -с(=з)ΝΗ-Ι, -ΝΗ-3(=Ο)-ί, -3(=Ο)-ΝΗ-ί, -ΝΗ-5 (О) 2-ΝΕ13-I, -ΝΕ15-3 (Ο) 2-ΝΗί, -ΝΗ-С(=0)Ο-ΐ, О-С(=0)-ΝΗ-ί, -ΝΗ-С(=0)ΝΗ-ί, -ΝΗ-С (=Ο)ΝΕ13-ί , ΝΕ13-0 (=0) ΝΗ-I, -ΝΗ-ΝΕ13-I, -ΝΕ13-ΝΗ-Ι, -Ο-ΝΗ-ί, -ΝΗ-Ο-ί, -ΝΗСЕ13Е16-|, -СЕ13Е16-ЫН-|, -ΝΗ-С (=ΝΕ13> - ί, -С(=ΝΕ13) -ΝΗ-ί , -ΝΗС (=5)-СЕ13Е16-ί , -СЕ13Е16-С(=3) -ΝΗ-ί, -ΝΗ-3 (О) -СК13Е16-ί , -СЕ13Е163(0)-ΝΗ-ί, -ΝΗ-3 (О) 2-СЕ13Е1е-ί , -СЕ13Е1в-3 (Ο) 2-ΝΗ-ί , -ΝΗ-С (=0)-0СЕ13Е16-1, -СЕ13Е16-0-С(=0)-ΝΗ-ί, -ΝΗ-С (=0)-ΝΕ14-ΟΕ13Ε1£-ί , -ΝΗС(=0)-ΟΕ13Ε16-ί и -ΟΕ13Ε16-ΝΗ-Ο (=Ο) -0-ί где указывает, где X связан с К11, и
К15 и К16 независимо выбраны из водорода, С1-С4 алкила, СР3 и -(С1-С4 алкил)-СР3;
К11 представляет собой гетероцикл, который представляет собой 4-7-членное моноциклическое кольцо или 8-12-членное бициклическое кольцо, а также спиро-конденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, включающие один или несколько гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8 атомов, причем моноциклическое кольцо и каждое из бициклических колец независимо выбраны из насыщенного, ненасыщенного или ароматического кольца, где К11 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, ΡξΝ. С1-С3 алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, =0, -О-С1-С4 алкила, -8-К14, -(С1С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -Ы(К14)(К14), -О-СС-Сд алкил)-Ы(К14)(К14), -С(О)-Ы(К14)(К14), -С(О)-О-К14 и -(С1-С4 алкил)-С(О)-Ы(К14)(К14), где каждый К14 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К14, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(О)2 и О, где когда К14 представляет собой алкил, такой алкил необязательно замещен одной или несколькими группами -ОН, -О-(С1-С4 алкил), фтор, -ΝΗ2, -ЫИ(С1-С4 алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, ΝΗ^Η^Η^^^ или ЫС^^О^Ь, и когда два К14, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, такой насыщенный гетероцикл необязательно замещен по атому углерода группой ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ2, -ΝΗ(0ι-04 алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, -ЫИ(СН2СН2ОСН3) или Ν^Η^Η^^^; и необязательно замещен по любому замещаемому атому азота группой -С1-С4 алкил, фторзамещенный С1-С4 алкил или - (СН2)2-О-СН3; и
К12 выбран из карбоцикла, который представляет собой 5-7-членную моноциклическую кольцевую систему, независимо выбранную из насыщенной, ненасыщенной и ароматической кольцевой системы, где все кольцевые атомы представляют собой углерод, и гетероцикла, определенного для К11, отличного от пиперазина, индазола, триазола или пиразолопиридина, где К12 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, -С^Ы, С1-С4 алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, -О-К14, -8-К14, -8(О)К14, -8(О)2-К14, -(С1-С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -Ы(К14)(К14), -О(С2-С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -С(О)-Ы(К14)(К14), -(С1-С4 алкил)-С(О)-Ы(К14)(К14), -О-фенила, фенила и второго гетероцикла, определенного для К11, и когда К12 представляет собой фенил, К12 также необязательно замещен 3,4-метилендиокси, фторзамещенным 3,4-метилендиокси, 3,4-этилендиокси, фторзамещенным 3,4-этилендиокси или -О-(насыщенный гетероцикл), где любой фенильный или второй гетероциклический заместитель радикала К12 необязательно замещен галогеном; -ίΆΝ; С1-С4 алкилом, С1-С2 фторзамещенным алкилом, группой -О-(С1-С2 фторзамещенный алкил), -О-(С1-С4 алкил), -8-(С1-С4 алкил), -8(С1-С2 фторзамещенный алкил), -ΝΗ-(Οι-Ο4 алкил) и -Ы-(С1-С4 алкил)2.
- 6 020578
В некоторых вариантах воплощения соединение имеет формулу
В одном воплощении изобретения в указанных структурах К является водородом, а X является
-С(=О)-ΝΗ-Ι.
В некоторых воплощениях в соединениях формулы (II) К11 выбирают из
- 7 020578
В другом воплощении К12 выбран из
- 8 020578
- 9 020578
Настоящее изобретение также относится к соединению общей формулы (I)
или его соли, где
Э 3 1 7 3 один из Ζ и Ζ представляет собой СК , а другой из Ζ и Ζ выбран из N и СК , где
К3 выбран в каждом случае из водорода, гидрокси, галогена, -ΝΝ, фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-(С1-С2) фторзамещенного алкила, -8-(С1-С2) фторзамещенного алкила, С1-С4 алкила, -О-(С1-С4) алкила, -8-(С1-С4) алкила, С3-С7 циклоалкила;
К выбран из водорода, -(С2-С4) алкила, -(С1-С4) фторзамещенного алкила, -(С1-С4) алкил-Х(К7)(К7), (С1-С4) алкил-С(О)-Х(К7)(К7), -(С2-С4) алкил-О-К7 и -(С2-С4) алкил-Х(К7)-С(О)-К7, где каждый К7 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К7, связанные с одним и тем же атомом азота, взятые вместе с атомом азота, образуют 4-7членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(=О)2 и О, где насыщенный гетероцикл необязательно замещен по одному атому углерода группой -ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ2, -ΝΗ^-^ алкил), -ЫЩ-С алкил)2, ΝΗ^Η^Η^^^ или ^(СН2СН2ОСН3)2;
К1 выбран из карбоцикла, который представляет собой 5-7-членную моноциклическую или 8-12членную бициклическую кольцую систему, а также спиро-конденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, где все кольцевые атомы представляют собой углерод, причем моноциклическое или каждое из бициклических колец независимо выбрано из насыщенного, ненасыщенного и ароматического кольца, и гетероцикла, который представляет собой 4-7-членную моноциклическую или 8-12-членную бициклическую кольцевую систему, а также спиро-конденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, включающую один или несколько гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8 атомов, причем моноциклическое кольцо и каждое из бициклических колец независимо выбраны из насыщенного, ненасыщенного или ароматического кольца, где К1 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, (=Ν, С1-С3 алкила, =О, С3-С7 циклоалкила, фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-К8, -8-К8, -(С1-С2 алкил)^К8)(К8), -Ы(К8)(К8), -О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), -(С1-С2алкил)-О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8) и -(С1-С2 ал К8), и когда К1 представляет собой фенил, К1 также необязательно замещен 3,4 фторзамещенным 3,4-метилендиокси, 3,4-этилендиокси и фторзамещенным 3,4 кил)-С(О)-Ы(К8)(К8), и когда К1 представляет собой фенил, К1 также необязательно замещен 3,4метилендиокси, этилендиокси;
каждый К8 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К8, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(=О)2 и О, где алкил необязательно замещен одной или несколькими группами -ОН, фтор, -ΝΗ2, ΝΗ^ι^ алкил), -ЫЩ-С алкил)2, -ЫН(СН2СН2ОСН3) или -Ы(СН2СН2ОСН3)2, и насыщенный гетероцикл необязательно замещен по атому углерода группой -ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ^-ΝΗ^-^ алкил), ^СгСд алкил)2, NΗ(СΗ2СΗ2ОСΗ3) или -N(СΗ2СΗ2ОСΗ3)2,
К2 выбран из карбоцикла, определенного для К1, содержащего по меньшей мере пять кольцевых атомов, и 4-7-членного моноциклического гетероцикла, определенного для К1, отличного от пиперазина, где К2 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, -С =Ν, С1-С3 алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, -О-К8, -8-К8, -(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), ^К8)(К8), -О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), -(С1-С2 алкил)-О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), -С(ОЖК8)(К8), -(С1-С2 алкил)-С(О)-Ы(К8)(К8), -О-фенила, фенила и второго гетероцикла, определенного для К1, и когда К2 представляет собой фенил, К2 также необязательно замещен 3,4-метилендиокси, фторзамещенным 3,4метилендиокси, 3,4-этилендиокси или фторзамещенным 3,4-этилендиокси, где любой фенильный или второй гетероциклический заместитель К2 необязательно замещен галогеном; -ΝΝ; С1-С3 алкилом, С1-С2 фторзамещенным алкилом, -О-(С1-С2) фторзамещенным алкилом, -О-(С1-С3) алкилом, -8-(С1-С3) алкилом, -8-(С1-С2) фторзамещенным алкилом, -ΝΗ-^-^) алкилом и -Ы-(С1-С3)2 алкилом; и
К4 выбран из водорода, галогена, -ΝΝ, фторзамещенного С1-С2 алкила, -8-(С1-С2) фторзамещенного алкила, С1-С4 алкила, -8-(С1-С4) алкила и С3-С7 циклоалкила;
X выбран из
-ын-с(=о)-|, -α(=ο)-ΝΗ-ι, где указывает, где X связан с К1; и каждый К5 и К6 независимо выбран из водорода, С1-С4 алкила, -СР3 и (С1-С2 алкил)-СР3, где
- 10 020578 когда X представляет собой (О) -ΝΗ- Т каждый Ζ1 и Ζ2 представляют собой СН и К1 представляет собой необязательно замещенный фенил, тогда К2 является отличным от пиридинила.
Соединение общей формулы (I) может иметь следующую структуру:
В одном воплощении изобретения в указанных структурах К является водородом. В одном воплощении изобретения в указанных структурах X является
Примеры К1 включают
ΛΛ/ν
- 11 020578
В некоторых вариантах воплощения К2 выбран из арила и гетероарила. Примеры К2 включают
- 12 020578
- 13 020578
СР3.
В одном воплощении изобретения соединение общей формулы (I) выбирают из
или его соли.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения соединение, представленное структурной формулой II выбирают из
- 14 020578
или его соли.
Соединения по настоящему изобретению, включающие новые соединения по настоящему изобретению, также можно использовать в способах, описанных в настоящей заявке.
Соединения и их соли, описанные в настоящей заявке, также могут образовывать их соответствующие гидраты (например, полугидрат, моногидрат, дигидрат, тригидрат, тетрагидрат) и сольваты. Подходящие растворители для получения сольватов и гидратов, как правило, может выбрать специалист в данной области.
Соединения и их соли могут присутствовать в аморфной или кристаллической (включая кокристаллическую и полиморфную) формы.
Сиртуин-модулирующие соединения по настоящему изобретению успешно модулируют уровень и/или активность белка сиртуина, в частности, деацетилазную активность белка сиртуина.
Отдельно или в дополнение к указанным выше свойствам, некоторые сиртуин-модулирующие соединения по настоящему изобретению, по существу, не обладают одной или несколькими из следующих активностей: ингибирование Р13-киназы, ингибирование альдоредуктазы, ингибирование тирозиновой киназы, трансактивация БОРК тирозиновой киназы, коронарная дилатация или спазмолитическая активность, при концентрациях соединения, которые являются эффективными для модулирования деацетилирующей активности белка сиртуина (например, такого как 8ΙΚΤ1 и/или 8ΙΚΤ3 белок).
Термин гетероцикл или гетероциклический означает кольцевые системы, включающие один или несколько гетероатомов, выбранных из, например, Ν, О и 8 атомов, и включает 4-7 членные моноциклические и 8-12-членные бициклические кольца, а также спиро-конденсированные и связанные мостиковой связью полициклические кольцевые системы, где моноциклическое кольцо и каждое из бициклических колец независимо выбраны из насыщенного, ненасыщенного или ароматического колец. Когда гетероцикл является полициклическим, должно быть понятно, что необходимо, чтобы только одно кольцо содержало гетероатом. Если не указано иное, гетероцикл необязательно замещен одной или несколькими группами заместителей, выбранными из галогена, -Ο=Ν, С1-С3 алкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, -О-(С1-С2) фторзамещенного алкила, -О-(С1-С3) алкила, -8-(С1-С3) алкила, -8-(С1-С2) фторзамещенного алкила, гидроксила, амино, -ΝΗΤΟ-Ο,) алкила и -Ν-(^-^)2 алкила.
Моноциклические кольца включают 5-7-членный арил или гетероарил, 3-7-членный циклоалкил и 5-7-членный неароматический гетероциклил. Моноциклические кольца необязательно замещены одной или несколькими группами заместителей, выбранных из галогена, циано, низшего алкокси, низшего алкила, гидроксила, амино, низшего алкиламино и низшего диалкиламино. Примеры моноциклических групп включают замещенные и незамещенные гетероциклы и карбоциклы. Конкретные моноциклические группы включают тиазолил, оксазолил, оксазинил, тиазинил, дитианил, диоксанил, изоксазолил, изотиазолил, триазолил, фуранил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, пиранил, тетразолил, пиразолил, пиразинил, пиридазинил, имидазолил, пиридинил, пирролил, дигидропирролил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, пиримидинил, морфолинил, тетрагидротиофенил, тиофенил, циклогексил, циклопентил, циклопропил, циклобутил, циклогептанил, азетидинил, оксетанил, тииранил, оксиранил, азиридинил и тиоморфолинил.
Ароматические (арильные) группы включают карбоциклические ароматические группы, такие как фенил, нафтил и антрацил, и гетероарильные группы, такие как имидазолил, тиенил, фурил, пиридил, пиримидил, пиранил, пиразолил, пирролил, пиразинил, тиазолил, оксазолил и тетразолил.
Ароматические группы также включают конденсированные полициклические ароматические коль- 15 020578 цевые системы, в которых карбоциклическое ароматическое кольцо или гетероарильное кольцо является конденсированным с одним или несколькими другими гетероарильными кольцами.
Примеры включают бензотиенил, бензофурил, индолил, хинолинил, бензотиазол, бензоксазол, бензимидазол, хинолинил, изохинолинил и изоиндолил.
Фторзамещенный включает от одного фтор-заместителя до перфторзамещения. Примеры фторзамещенного С1-С2 алкила включают -СРН2, СР2Н, -СР3, -СН2СН2Р, -Сн2СНР2, -СНРСН3, -СР2СНР2. Перфторзамещенный С1-С2 алкил, например, включает -СР3 и -СР2СР3.
Подходящие заместители в группах, указанных как являющиеся замещенными или незамещенными, представляют собой такие, которые, по существу, не оказывают вмешательства в способность раскрываемого соединения обладать одним или несколькими свойствами, раскрытыми в настоящей заявке. Заместитель, по существу, мешает таким свойствам соединения, когда цифровой показатель этого свойства снижается больше чем на около 50% в соединении с заместителем по сравнению с соединением без заместителя.
Комбинации заместителей и переменных, предусматриваемые настоящим изобретением, представляют собой только такие комбинации, которые приводят к образованию стабильных соединений. Как он используется в настоящей заявке, термин стабильный относится к соединениям, которые обладают стабильностью, достаточной для возможности их промышленного получения и которая поддерживает целостность соединения в течение периода времени, достаточного для того, чтобы соединение было полезным для целей, подробно описанных в настоящей заявке.
Также в настоящее изобретение включены соли, в частности, фармацевтически приемлемые соли, сиртуин-модулирующих соединений, описанных в настоящей заявке. Соединения по настоящему изобретению, которые содержат достаточно кислотные, достаточно основные или и те и другие функциональные группы, могут взаимодействовать с любым из широкого ряда неорганических оснований и неорганических и органических кислот с образованием соли. Альтернативно, соединения, которые имеют присущий им заряд, такие как соединения с четвертичным азотом, могут образовывать соль с подходящим противоионом (например, галогенид, такой как бромид, хлорид или фторид, в частности, бромид).
Кислоты, обычно используемые для образования кислотно-аддитивных солей, представляют собой неорганические кислоты, такие как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и подобные, и органические кислоты, такие как п-толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, п-бромфенилсульфоновая кислота, угольная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота и подобные. Примеры таких солей включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, вторичный кислый фосфат, первичный кислый фосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацат, фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, гаммагидроксибутират, гликолят, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталины-сульфонат, манделат и подобные.
Основно-аддитивные соли включают соли, образованные из неорганических оснований, таких как гидроксиды, карбонаты, бикарбонаты аммония или щелочных или щелочно-земельных металлов и подобные. Такие основания, полезные для получения солей по настоящему изобретению, таким образом, включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия и подобные.
В соответствии с другим вариантом воплощения, настоящее изобретение обеспечивает способы получения определенных выше сиртуин-модулирующих соединений. Соединения могут быть синтезированы с использованием традиционных способов. Выгодным образом, эти соединения удобным образом синтезируют из легко доступных исходных веществ.
Синтетические химические преобразования и процедуры, полезные для синтеза сиртуинмодулирующих соединений, описанных в настоящей заявке, известны из уровня техники и включают, например, такие, которые описаны в К. Ьатоек, СотргсНспмус Огдашс ТгаикСогтабоик (1989); Т. Огеепе апб Ρ. О. М. \УШ5. РгоЮсОус Огоирк ш Огдашс δγηΐΗεδίδ, 26. Еб. (1991); Ь. РК^сг апб М. РК^ст. Р1С5СГ апб Р1е8ег'8 Кеадейк Сог Огдатс δγηίΗεδίδ (1994) ; и Ь. Радиебе, еб., Епсус1ореб1а оС Кеадейк Сог Огдатс δνηΐΐιοδίδ (1995).
В иллюстративном варианте воплощения сиртуин-модулирующее соединение может пересекать цитоплазматические мембраны клеток. Например, соединение может обладать способностью проникновения в клетку по меньшей мере около 20, 50, 75, 80, 90 или 95%.
Сиртуин-модулирующие соединения, описанные в настоящей заявке, также могут иметь одну или несколько из следующих характеристик: соединение может быть, по существу, нетоксичным для клетки или субъекта; сиртуин-модулирующее соединение может представлять собой органическую молекулу или малую молекулу 2000 аши (атомных единиц массы) или меньше, 1000 аши или меньше; соединение может иметь период полужизни в нормальных атмосферных условиях по меньшей мере около 30 дней, 60 дней, 120 дней, 6 месяцев или 1 год; соединение может иметь период полужизни в растворе по мень- 16 020578 шей мере около 30 дней, 60 дней, 120 дней, 6 месяцев или 1 год; сиртуин-модулирующее соединение может быть более стабильным в растворе, чем ресвератрол, по меньшей мере на около 50%, в 2 раза, 5 раз, 10 раз, 30 раз, 50 раз или 100 раз; сиртуин-модулирующее соединение может способствовать деацетилированию фактора ДНК-репарации Ки70; сиртуин-модулирующее соединение может способствовать деацетилированию Ке1А/р65; соединение может повышать общие скорости обмена и усиливать чувствительность клеток к ΤΝΡ-индуцированному апоптозу.
В некоторых вариантах воплощения сиртуин-модулирующее соединение не обладает какой-либо существенной способностью ингибирования гистондеацетилазы (НЭАС5) класса I, НЭАС класса II или НЭАС I и II при концентрациях (например, ш νίνο), эффективных для модулирования деацетилазной активности сиртуина. Например, в предпочтительных вариантах воплощения сиртуин-модулирующее соединение представляет собой сиртуин-активирующее соединение, и оно выбрано таким образом, чтобы его значение ЕС50 для активирования деацетилазной активности сиртуина было по меньшей мере в 5 раз меньше, чем значение ЕС50 для ингибирования НЭАС I и/или НЭАС II, и еще более предпочтительно по меньшей мере в 10 раз, в 100 раз или даже в 1000 раз меньше. Способы анализа НОАС I и/или НОАС II активности хорошо известны из уровня техники, и наборы для осуществления таких анализов могут быть коммерчески доступными (см., например, Βίονίδίοη, 1пс. (Моийаш У1с\у. СА; уог1й у1Йе усЬ а! Ыоуыоп.сош) и ТЬотак Зшеиййс (ЗусйсхЬого. N1; уог1й У1йе уеВ а! 1ота55стсот).
В некоторых вариантах воплощения сиртуин-модулирующее соединение не обладает какой-либо существенной способностью модулирования гомологов сиртуина. В одном варианте воплощения активатор человеческого белка сиртуина может не обладать какой-либо существенной способностью активировать сиртуиновый белок низших эукариот, в частности, дрожжей или человеческих патогенов, при концентрациях (например, ш угуо), эффективных для активирования деацетилазной активности человеческого сиртуина. Например, сиртуин-активирующее соединение может быть выбрано таким образом, чтобы его значение ЕС50 для активирования деацетилазной активности человеческого сиртуина, такого как δΙΚΤΙ и/или δΙΚΤ3, было по меньшей мере в 5 раз меньше, чем значение ЕС50 для активирования сиртуин дрожжей, такого как §ιγ2 (такого как СаиФйа, δ. ссгсу151ас и т.д.), и еще более предпочтительно по меньшей мере в 10 раз, в 100 раз или даже в 1000 раз меньше. В другом варианте воплощения ингибитор белка сиртуина низших эукариот, в частности дрожжей или человеческих патогенов, не обладает какойлибо существенной способностью ингибирования сиртуинового белка человека при концентрациях (например, ίη угуо), эффективных для ингибирования деацетилазной активности белка сиртуина низших эукариот. Например, сиртуин-ингибирующее соединение может быть выбрано таким образом, чтобы его значение ИК50 для ингибирования деацетилазной активности человеческого сиртуина, такого как δΙΚΤΙ и/или δΙΚΤ3, было по меньшей мере в 5 раз меньше, чем значение ИК50 для ингибирования сиртуина дрожжей, такого как δπ2 (такого как Саийгйа, δ. сегеуг5гае и т.д.), и еще более предпочтительно по меньшей мере в 10 раз, в 100 раз или даже в 1000 раз меньше.
В некоторых вариантах воплощения сиртуин-модулирующее соединение может обладать способностью модулирования одного или нескольких гомологов белка сиртуина, например, одного или нескольких человеческих δΙΚΤΙ, δΙΚΤ2, δΙΚΤ3, δΙΚΤ4, δΙΚΤ5, δΙΚΤ6 или δΙΚΤ7. В одном варианте воплощения сиртуин-модулирующее соединение обладает способностью модулирования как δΙΚΤΙ, так и δΙΚΤ3 белка.
В других вариантах воплощения модулятор δΙΚΤΙ не обладает какой-либо существенной способностью модулирования других гомологов белка сиртуина, например, одного или нескольких человеческих δΙΚΤ2, δΙΚΤ3, δΙΚΤ4, δΙΚΤ5, δΙΚΤ6 или δΙΚΤ7, при концентрациях (например, ш угуо), эффективных для модулирования деацетилазной активности человеческого δΙΚΤΙ. Например, сиртуин-модулирующее соединение может быть выбрано таким образом, чтобы его значение ΕΌ50 для модулирования деацетилазной активности человеческого δΙΚΤΙ было по меньшей мере в 5 раз меньше, чем значение ΕΌ50 для модулирования одного или нескольких человеческих δΙΚΤ2, δΙΚΤ3, δΙΚΤ4, δΙΚΤ5, δΙΚΤ6 или δΙΚΤ7, и еще более предпочтительно по меньшей мере в 10 раз, в 100 раз или даже в 1000 раз меньше. В одном варианте воплощения модулятор δΙΚΤΙ не обладает какой-либо существенной способностью модулирования δΙΚΤ3 белка.
В других вариантах воплощения модулятор δΙΚΤ3 не обладает какой-либо существенной способностью модулирования других гомологов белка сиртуина, например, одного или несколько человеческих δΙΚΤΙ, δΙΚΤ2, δΙΚΤ4, δΙΚΤ5, δΙΚΤ6 или δΙΚΤ7, при концентрациях (например, ш угуо), эффективных для модулирования деацетилазной активности человеческого δΙΚΤ3. Например, сиртуин-модулирующее соединение может быть выбрано таким образом, чтобы его значение ΕΌ50 для модулирования деацетилазной активности человеческого δΙΚΤ3 было по меньшей мере в 5 раз меньше, чем значение ΕΌ50 для модулирования одного или нескольких человеческих δΙΚΤΙ, δΙΚΤ2, δΙΚΤ4, δΙΚΤ5, δΙΚΤ6 или δΙΚΤ7, и еще более предпочтительно по меньшей мере в 10 раз, в 100 раз или даже в 1000 раз меньше. В одном варианте воплощения модулятор δΙΚΤ3 не обладает какой-либо существенной способностью модулирования δΙΚΤ1 белка.
В некоторых вариантах воплощения сиртуин-модулирующее соединение может иметь сродство связывания в отношении белка сиртуина около 10-9М, 10-10М, 10-11М, 10-12М или меньше. Сиртуин- 17 020578 модулирующее соединение может снижать (активатор) или повышать (ингибитор) кажущийся Кт белка сиртуина в отношении его субстрата или ΝΛΌ+ (или другого ко-фактора) по меньшей мере примерно в 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 50 или 100 раз. В некоторых вариантах воплощения Кт значения определяют с использованием масс-спектрометрического анализа, описанного в настоящей заявке.
Предпочтительные активирующие соединения снижают Кт сиртуина в отношении его субстрата или ко-фактора в большей степени, чем ресвератрол при такой же концентрации, или снижают Кт сиртуина в отношении его субстрата или ко-фактора аналогичнго тому, как это достигается с использованием ресвератрола, при более низкой концентрации. Сиртуин-модулирующее соединение может повышать Ушах белка по меньшей мере примерно в 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 50 или 100 раз. Сиртуин-модулирующее соединение может иметь значение ΕΌ50 для модулирования деацетилазной активности 8ΙΚΤ1 и/или 8ΙΚΤ3 белка меньше чем около 1 нМ, меньше чем около 10 нМ, меньше чем около 100 нМ, меньше чем около 1 мкМ, меньше чем около 10 мкМ, меньше чем около 100 мкМ, или от около 1-10 нМ, от около 10100 нМ, от около 0,1-1 мкМ, от около 1-10 мкМ или от около 10-100 мкМ. Сиртуин-модулирующее соединение может модулировать деацетилазную активность 8ΙΚΤ1 и/или 8ΙΚΤ3 белка по меньшей мере примерно в 5, 10, 20, 30, 50 или 100 раз, как определено в клеточном анализе или в анализе на основе клетки. Сиртуин-активирующее соединение может вызывать по меньшей мере примерно на 10%, 30%, 50%, 80%, в 2 раза, 5 раз, 10 раз, 50 раз или 100 раз большую индукцию деацетилазной активности белка сиртуина по сравнению с такой же концентрацией ресвератрола. Сиртуин-модулирующее соединение может иметь значение ΕΌ50 для модулирования 8ΙΚΤ5 больше по меньшей мере примерно в 10 раз, 20 раз, 30 раз, 50 раз или более, чем для модулирования 8ΙΚΤ1 и/или 8ΙΚΤ3.
3. Примеры применения
В некоторых аспектах настоящее изобретение обеспечивает способы для модулирования уровня и/или активности белка сиртуина и способы их применения.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение обеспечивает способы применения сиртуин-модулирующих соединений, где сиртуин-модулирующие соединения активируют белок сиртуина, например, повышают уровень и/или активность белка сиртуина. Сиртуин-модулирующие соединения, которые повышают уровень и/или активность белка сиртуина, могут быть полезными для различных терапевтических применений, включая, например, в лечении страдающего от или чувствительный к резистентности к инсулину, метаболического синдрома, диабета или его осложнений, или повышения чувствительности к инсулину у субъекта. Способы включают введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтически эффективного количества сиртуин-модулирующего соединения, например, сиртуинактивирующего соединения.
Хотя авторы настоящего изобретения не желают быть связанными теорией, считается, что активаторы по настоящему изобретению могут взаимодействовать с сиртуином в одном и том же местоположении в белке сиртуина (например, активный сайт или сайт, влияющий на Кт или Утах активного сайта). Считается, что это является причиной, почему некоторые классы активаторов и ингибиторов сиртуина могут иметь существенное структурное сходство.
Сиртуин-модулирующие соединения, описанные в настоящей заявке, могут быть взяты отдельно или в сочетании с другими соединениями. Смесь двух или более сиртуин-модулирующих соединений можно вводить субъекту, нуждающемуся в этом. Сиртуин-модулирующее соединение, которое повышает уровень и/или активность белка сиртуина, можно вводить с одним или несколькими из следующих соединений: ресвератрол, бутеин, фисетин, пицеатаннол или кверцетин. Сиртуин-модулирующее соединение, которое повышает уровень и/или активность белка сиртуина, можно вводить в сочетании с никотиновой кислотой. Также сиртуин-модулирующее соединение, которое снижает уровень и/или активность белка сиртуина, можно вводить с одним или несколькими из следующих соединений: никотинамид (ΝΑΜ), сурамин; ΝΡ023 (антагонист Обелка); ΝΡ279 (антагонист пуринергического рецептора); тролокс (6-гидрокси-2,5,7,8,тетраметилхроман-2карбоновая кислота); (-)-эпигаллокатехин (гидрокси на участках 3,5,7,3',4',5'); (-)-эпигаллокатехин галлат (гидрокси на участках 5,7,3',4',5' и галлатный сложный эфир на участке 3); цианидин хлорид (3,5,7,3',4'пентагидроксифлавилий хлорид); делфинидин хлорид (3,5,7,3',4',5'-гексагидроксифлавилий хлорид); мирицетин (каннабисцетин; 3,5,7,3',4',5'-гексагидроксифлавон); 3,7,3',4',5'-пентагидроксифлавон; госсипетин (3,5,7,8,3',4'-гексагидроксифлавон), сиртинол и сплитомицин. В различных вариантах воплощения комбинированные терапии, включающие сиртуин-модулирующее соединение, могут относиться к (1) фармацевтическим композициям, которые включают одно или несколько сиртуин-модулирующих соединений в сочетании с одним или несколькими терапевтическими средствами (например, одним или несколькими терапевтическими средствами, описанными в настоящей заявке); и (2) совместное введение одного или нескольких сиртуинмодулирующих соединений с одним или несколькими терапевтическими средствами, где сиртуинмодулирующее соединение и терапевтическое средство не были сформулированы в одну и ту же композицию (но могут присутствовать в одном и том же наборе или упаковке, такой как блистерная упаковка или другая многокамерная упаковка; соединенные, отдельно запаянные контейнеры (например, мешочки из фольги), которые может отделять сам потребитель; или набор, где сиртуин модулирующее соединение(соединения) и другое терапевтическое средство(средства) находятся в отдельных емкостях). Когда используют отдельные композиции, сиртуин-модулирующее соединение можно вводить одновременно с введением другого
- 18 020578 терапевтического средства, с перерывами, ступенчато, до, после, или используя сочетания таких способов.
В некоторых вариантах воплощения способы снижения тяжести, профилактики или лечения заболеваний или расстройств с использованием сиртуин-модулирующего соединения также могут включать повышение уровня белка сиртуина, такого как человеческий 81КТ1, 81КТ2 и/или 81КТ3 или их гомологи. Повышение уровней белка достигается путем введения в клетку одной или нескольких копий нуклеиновой кислоты, которая кодирует сиртуин. Например, уровень сиртуина можно увеличить в клетке млекопитающего путем введения в клетку млекопитающего нуклеиновой кислоты, кодирующей сиртуин, например, повышение уровня 81КТ1 путем введения нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, представленную под номером доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, и/или повышение уровня 81КТ3 путем введения нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, представленную под номером доступа СеиВаик № ААН01042.
Нуклеиновая кислота, которую вводят в клетку для повышения уровня белка сиртуина, может кодировать белок, который является по меньшей мере на около 80, 85, 90, 95, 98 или 99% идентичным последовательности сиртуина, например, 81КТ1 и/или 81КТ3 белок. Например, нуклеиновая кислота, кодирующая белок, может быть по меньшей мере на около 80, 85, 90, 95, 98 или 99% идентичной нуклеиновой кислоте, кодирующей 81КТ1 (например, номер доступа СеиВаик № ΝΜ_12238) и/или 81КТ3 (например, номер доступа СеиВаик № ВС001042) белок. Нуклеиновая кислота также может представлять собой нуклеиновую кислоту, которая гибридизуется, предпочтительно в жестких условиях гибридизации, с нуклеиновой кислотой, кодирующей сиртуин дикого типа, например, 81КТ1 и/или 81КТ3 белок. Жесткие условия гибридизации могут включать гибридизацию и промывку в 0,2х§§С при 65°С. Когда используют нуклеиновую кислоту, которая кодирует белок, который является отличным от белка сиртуина дикого типа, такой как белок, который представляет собой фрагмент сиртуина дикого типа, этот белок, предпочтительно, является биологически активным, например, является способным к деацетилированию. Необходимо только экспрессировать в клетке часть сиртуина, который является биологически активным. Например, белок, который отличается от 81КТ1 дикого типа, имеющего номер доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, предпочтительно содержит структуру его ядра. Структура ядра иногда относится к аминокислотам 62-293 с номером доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 237-932 с номером доступа СеиВаик № нМ_012238, который охватывает ΝΑΌ-связывающий, а также субстратсвязывающий домены. Домен ядра 81КТ1 также может относиться к области аминокислот от 261 до 447 с номером доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 834-1394 с номером доступа СеиВаик № нМ_012238; к области аминокислот от 242 до 493 с номером доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 777-1532 с номером доступа СеиВаик № нМ_012238; или к области аминокислот от 254 до 495 с номером доступа СеиВаик № ΝΡ_036370, которые кодируются нуклеотидами 813-1538 с номером доступа СеиВаик № ΝΜ_012238. Сохраняет ли белок биологическую функцию, например, способность к деацетилированию, можно определить в соответствии со способами, известными из уровня техники.
В некоторых вариантах воплощения, способы снижения тяжести, профилактики или лечения заболеваний или расстройств с использованием сиртуин-модулирующего соединения также могут включать снижение уровня белка сиртуина, такого как человеческий 81КТ1, 81КТ2 и/или 81КТ3 или его гомологи. Снижение уровня белка сиртуина достигается в соответствии с способами, известными из уровня техники. Например, κίΡΝΑ, антисмысловая нуклеиновая кислота или рибозим, мишенью которых является сиртуин, могут экспрессироваться в клетке. Доминантный отрицательный сиртуиновый мутант, например, мутант, который не способен к деацетилированию, также можно использовать. Например, можно использовать мутант Η363Υ белка 81КТ1, описанный, например, в Ьио εΐ а1. (2001) Се11 107:137. Альтернативно, можно использовать средства, которые ингибируют транскрипцию.
Способы модулирования уровней белка сиртуина также включают способы модулирования транскрипции генов, кодирующих сиртуины, способы стабилизации/дестабилизации соответствующих тРНК и другие способы, известные из уровня техники.
Метаболические расстройства/диабет
В другом аспекте сиртуин-модулирующие соединения, которые повышают уровень и/или активность белка сиртуина, можно использовать для лечения или профилактики метаболического расстройства, такого как резистентность к инсулину, преддиабетическое состояние, диабет типа II и/или их осложнения. Введение сиртуин-модулирующего соединения, которое повышает уровень и/или активность белка сиртуина, может повысить чувствительность к инсулину и/или понизить уровни инсулина у субъекта. Субъект, нуждающийся в таком лечении, может быть субъектом, у которого имеется резистентность к инсулину или другой предшествующий симптом диабета типа II, который страдает диабетом типа II или у которого имеется предрасположенность к развитию любого из этих состояний. Например, субъект может быть субъектом, у которого имеется резистентность к инсулину, например, высокие уровни циркуляции инсулина и/или связанные с этим состояния, такие как гиперлипидемия, дислипогенез, гиперхолестеринемия, нарушенная толерантность к глюкозе, высокий уровень глюкозного сахара в крови, другие проявления синдрома X, гипертензия, атеросклероз и липодистрофия.
- 19 020578
В иллюстративном варианте воплощения сиртуин-модулирующие соединения, которые повышают уровень и/или активность белка сиртуина, можно вводить в виде комбинированной терапии для лечения или профилактики метаболического расстройства. Например, одно или несколько сиртуинмодулирующих соединений, которые повышают уровень и/или активность белка сиртуина, можно вводить в сочетании с одним или несколькими анти-диабетическими средствами.
Глазные расстройства
Один аспект настоящего изобретения представляет собой способ ингибирования, уменьшения или иным образом лечения ухудшения зрения путем введения пациенту терапевтической дозы модулятора сиртуина, выбранного из соединения, раскрытого в настоящей заявке, или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или метаболического производного.
В некоторых аспектах настоящего изобретения ухудшение зрения вызвано повреждением сетчатки. В конкретных вариантах воплощения повреждение сетчатки вызвано нарушением притока крови к глазу (например, артериосклероз, васкулит).
Примеры заболеваний сетчатки включают диабетический макулярный отек, ретинопатию на фоне диабета, пролиферативную диабетическую ретинопатию.
Соединения настоящего изобретения могут быть полезны в ингибировании, принимающего лечение химиотерапевтическим лекарственным средством (например, нейротоксичным лекарственным средством, лекарственным средством, которое повышает внутриглазное давление, таким как стероид), путем введения субъекту, нажудающемуся в таком лечении, терапевтической дозы модулятора сиртуина, раскрытого в настоящей заявке.
Модулятор сиртуина можно вводить в сочетании с терапией для лечения и/или профилактики СМУ ретинопатии.
4. Анализы
Соединения настоящей заявки могут использовать для скрининга для идентификации соединений или веществ, которые модулируют сиртуины. Вещество может представлять собой нуклеиновую кислоту, такую как аптамер. Анализы можно осуществлять в клеточном или не-клеточном формате. Например, анализ может включать инкубирование (или контактирование) сиртуина с испытываемым веществом в условиях, в которых сиртуин может модулироваться средством, известным как модулирующее сиртуин, и контроль или определение уровня модуляции сиртуина в присутствии испытываемого вещества по сравнению с отсутствием испытываемого вещества. Уровень модуляции сиртуина можно определить путем определения его способности к деацетилированию субстрата. Примеры субстратов включают ацетилированные пептиды, которые могут быть получены от ВЮМОЬ (ИушоиТй Меейид, РА). Предпочтительные субстраты включают пептиды р53, такие как включающие ацетилированный К382. Особенно предпочтительным субстратом является Р1иот йс Ьуз-δΙΚΤΙ (ВЮМОЬ), т.е. ацетилированный пептид Атд-Шз-Ьуз-Ьуз. Другими субстратами являются пептиды из человеческих гистонов НЗ и Н4 или ацетилированная аминокислота. Субстраты могут быть флуорогенными. Сиртуин может представлять собой 8ΙΚ.Τ1, δΙΚ.2, 8ΙΚ.Τ3 или его часть. Например, рекомбинантный 8ΙΚ.Τ1 может быть получен от ВЮМОЬ. Реакцию можно осуществлять в течение около 30 мин и останавливать, например, при помощи никотинамида. Анализ флуоресцентной активности НЭАС/набор для определения лекарственного средства (АК-500, ВЮМОЬ КезеатсЬ ЬаЬотаЮпсз) можно использовать для определения уровня ацетилирования.
Подобные анализы описаны в ВЫетшаи εΐ а1. (2002) ί. Вю1. СЬеш. 277:45099. Уровень модуляции сиртуина в анализе можно сравнить с уровнем модуляции сиртуина в присутствии одного или нескольких (отдельно или одновременно) соединений, описанных в настоящей заявке, которые могут служить в качестве положительного или отрицательного контролей. Сиртуины для использования в этих анализах могут представлять собой непроцессированные сиртуиновые белки или их части. Поскольку в настоящей заявке было показано, что активирующие соединения, как оказалось, взаимодействуют с Ν-концом 8ΙΚ.Τ1, белки для использования в анализах включают Ν-концевые части сиртуинов, например, область аминокислот 1-176 или 1-255 8ΙΚ.Τ1; область аминокислот 1-174 или 1-252 δίτ2.
Скрининговый анализ включает (ΐ) контактирование сиртуина с испытываемым веществом и ацетилированным субстратом в условиях, подходящих для деацетилирования субстрата сиртуином в отсутствие испытываемого вещества; и (и) определение уровня ацетилирования субстрата, где более низкий уровень ацетилирования субстрата в присутствии испытываемого вещества по сравнению с отсутствием испытываемого вещества показывает, что испытываемое вещество стимулирует деацетилирование сиртуином, тогда как более высокий уровень ацетилирования субстрата в присутствии испытываемого вещества по сравнению с отсутствием испытываемого вещества показывает, что испытываемое вещество ингибирует деацетилирование сиртуином.
Способы идентификации средства, которое модулирует, например, стимулирует, сиртуины ш утуо, могут включать (ΐ) контактирование клетки с испытываемым веществом и субстратом, который способен проникать в клетку в присутствии ингибитора класса I и класса II НЭАСз в условиях, подходящих для деацетилирования субстрата сиртуином в отсутствие испытываемого вещества; и (ϋ) определение уровня ацетилирования субстрата, где более низкий уровень ацетилирования субстрата в присутствии испытываемого вещества по сравнению с отсутствием испытываемого вещества показывает, что испытываемое
- 20 020578 вещество стимулирует деацетилирование сиртуином, тогда как более высокий уровень ацетилирования субстрата в присутствии испытываемого вещества по сравнению с отсутствием испытываемого вещества показывает, что испытываемое вещество ингибирует деацетилирование сиртуином. Предпочтительным субстратом является ацетилированный пептид, который также предпочтительно является флуорогенными, как описано далее в настоящей заявке. Способ, кроме того, может включать лизис клетки для определения уровня ацетилирования субстрата. Субстраты могут быть добавлены к клеткам в концентрации в пределах от около 1 мкМ до около 10 мМ, предпочтительно от около 10 мкМ до 1 мМ, еще более предпочтительно от около 100 мкМ до 1 мМ, такой как около 200 мкМ. Предпочтительный субстрат представляет собой ацетилированный лизин, например, ε-ацетиллизин (Р1иог бе Ьуз, РбЬ) или Р1иог бе Ьу88ΙΚΤ1. Предпочтительный ингибитор класса I и класса II НИАСз представляет собой трихостатин А (ΤδΑ), который можно использовать при концентрациях в пределах от около 0,01 до 100 мкМ, предпочтительно от около 0,1 до 10 мкМ, такой как 1 мкМ. Инкубацию клеток с испытываемым соединением и субстратом можно осуществлять в течение времени от около 10 мин до 5 ч, предпочтительно около 1-3 ч. Поскольку ΤδΑ ингибирует все ΗΌΑίΤ класса I и класса II и поскольку некоторые субстраты, например, Р1иог бе Ьу8, являются плохим субстратом для δΓΚΤ2 и еще худшим субстратом для δΓΚΤ3-7, такой анализ можно использовать для идентификации модуляторов δΓΚΤΙ ш νίνο.
5. Фармацевтические композиции
Сиртуин-модулирующие соединения, описанные в настоящей заявке, можно формулировать в композицию традиционным способом с использованием одного или нескольких физиологически или фармацевтически приемлемых носителей или эксципиентов. Например, сиртуин-модулирующие соединения и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты могут быть сформулированы для введения, например, путем инъекции (например, подкожной (п/к), внутримышечной (в/м), интраперитонеальной (и/п)), ингаляции или инсуффляции (либо через рот, либо через нос) или перорального, буккального, сублингвального, чрескожного, назального, парентерального или ректального введения. В одном варианте воплощения, сиртуин-модулирующее соединение можно вводить местно, на участок, где присутствуют целевые клетки, т.е. в конкретную ткань, орган или жидкость организма (например, кровь, цереброспинальную жидкость и т.д.).
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть сформулированы для различных способов введения, включая системное и местное или локализованное введение. Способы и композиции можно найти в ВсттфопТ РЬагтасеиИса1 δοίοποοδ. Меабе РиЪНзЫид Со., ЕазЮп. РА. Для парентерального введения предпочтительными являются инъекции, включая внутримышечную, внутривенную, интраперитонеальную и подкожную. Для введения путем инъекции, соединения могут быть сформулированы в форме жидких растворов, предпочтительно в физиологически совместимых буферах, таких как раствор Хэнка или раствор Рингера. Кроме того, соединения могут быть сформулированы в твердую форму и снова растворены или суспендированы непосредственно перед использованием. Также включены лиофилизированные формы.
Для перорального введения фармацевтические композиции могут быть в форме, например, таблеток, лепешек или капсул, полученных традиционными способами с использованием фармацевтически приемлемых эксципиентов, таких как связующие (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропилметилцеллюлоза) ; наполнителей (например, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза или вторичный кислый фосфат кальция) ; смазывающих веществ (например, стеарат магния, тальк или диоксид кремния); разрыхлителей (например, картофельный крахмал или натрийкрахмалгликолят); или смачивающих веществ (например, лаурилсульфат натрия). Таблетки могут иметь покрытие, нанесенное способами, хорошо известными из уровня техники. Жидкие препараты для перорального введения могут быть в форме, например, растворов, сиропов или суспензий, или они могут быть представлены в виде сухого продукта для реструктурирования водой или другим подходящим носителем перед применением. Такие жидкие препараты могут быть получены традиционными способами с использованием фармацевтически приемлемых добавок, таких как суспендирующие вещества (например, сироп сорбита, производные целлюлозы или гидрогенизированные пищевые жиры); эмульгаторов (например, лецитин или аравийская камедь); неводных носителей (например, миндальное масло, масляные сложные эфиры, этиловый спирт или фракционированные растительные масла); и консервантов (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота). Препараты также могут содержать буферные соли, отдушки, красители и подсластители, если это является подходящим. Препараты для перорального введения могут быть соответствующим образом сформулированы для получения контролируемого высвобождения активного соединения.
Для введения путем ингаляции (например, для доставки в легкие) доставку сиртуин-модулирующих соединений удобным образом можно осуществить при помощи аэрозольного спрея из находящихся под давлением упаковок или распылителя, с использованием подходящего пропеллента, например, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, диоксида углерода или другого подходящего газа. В случае находящегося под давлением аэрозольного препарата, единицу дозирования можно определять путем обеспечения клапана для доставки отмеренного количества. Капсулы и картриджи, например, из желатина для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть сформулированы таким
- 21 020578 образом, чтобы они содержали порошкообразную смесь соединения и подходящей основы для порошка, такой как лактоза или крахмал.
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть сформулированы для парентерального введения путем инъекции, например, болюсной инъекции или непрерывной инфузии. Композиции для инъекций могут быть представлены в стандартной лекарственной форме, например, в ампулах или многодозовых контейнерах, с добавлением консерванта. Композиции могут быть в такой форме как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных носителях и могут содержать агенты для формулирования, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие вещества. Альтернативно, активный ингредиент может быть в порошкообразной форме для соединения с подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой, перед применением.
Сиртуин-модулирующие соединения также могут быть сформулированы в ректальные композиции, такие как суппозитории или удерживаемые клизьмы, например, содержащие традиционные основы для суппозиторий, такие как масло какао или другие глицериды.
Помимо композиций, описанных выше, сиртуин-модулирующие соединения также могут быть сформулированы в виде депо препарата. Такие долгодействующие композиции можно вводить путем имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или путем внутримышечной инъекции. Таким образом, например, сиртуин-модулирующие соединения могут быть сформулированы с подходящими полимерными или гидрофобными веществами (например, в виде эмульсии в приемлемом масле), или ионообменными смолами, или в виде плохо растворимых производных, например, в виде плохо растворимой соли. Формула контролируемого высвобождения также включает пластыри.
Липосомы представляют собой еще одну систему доставки лекарственного средства, которое легко вводится путем инъекции. Соответственно, в способе по настоящему изобретению активные соединения также можно вводить в форме липосомной системы доставки. Липосомы хорошо известны специалистам в данной области. Липосомы могут быть образованы из различных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин фосфатидилхолинов. Липосомы, которые можно использовать в способе по настоящему изобретению охватывают все типы липосом, включая, но не ограничиваясь этим, малые однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные везикулы.
Другой путь получения композиции, в частности, раствора, модулятора сиртуина, такого как ресвератрол или его производное, включает использование циклодекстрина. Под циклодекстрином подразумевается α-, β- или γ-циклодекстрин. Циклодекстрины подробно описаны в ΡιΙΗα с1 а1., патент США № 4727064, который включен в настоящую заявку посредством ссылки. Циклодекстрины представляют собой циклические олигомеры глюкозы; эти соединения образуют комплексы включения с любым лекарственным средством, молекула которого может подходить в липофильно-ищущие полости молекулы циклодекстрина.
Быстро разлагаемые или растворимые лекарственные формы являются полезными для быстрой абсорбции, в частности, буккальной и сублигвальной абсорбции фармацевтически активных средств. Быстро плавящиеся лекарственные формы являются удобными для пациентов, таких как пациенты пожилого и детского возраста, для которых затруднительно проглатывание типичной твердой лекарственной формы, такой как лепешки и таблетки. Кроме того, у быстро плавящихся лекарственных форм отсутствуют недостатки, связанные, например, с лекарственными формами для жевания, где продолжительность времени, в течение которого активное вещество остается у пациента во рту, играет важную роль в определении количества маскирующего вкус вещества и степени, до которой пациент может отвергать по причине неприятного ощущения в горле активное вещество. Фармацевтические композиции (включая косметические препараты) могут включать от около 0,00001 до 100%, например, от 0,001 до 10% или от 0,1 до 5 мас.%, одного или нескольких сиртуин-модулирующих соединений, описанных в настоящей заявке. В другом варианте воплощения, фармацевтическая композиция включает: (ι) от 0,05 до 1000 мг соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и (ϋ) от 0,1 до 2 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте воплощения, сиртуин-модулирующее соединение, описанное в настоящей заявке, включено в композицию для местного применения, содержащую носитель местного применения, который, как правило, подходит для местного введения лекарственного средства, и включающий любое такое вещество, известное из уровня техники. Носитель местного применения можно выбрать таким образом, чтобы обеспечить композицию в желаемой форме, например, в форме мази, лосьона, крема, микроэмульсии, геля, масла, раствора или т.п., и может состоять из вещества либо природного, либо синтетического происхождения.
Предпочтительно, чтобы выбранный носитель не оказывал вредного действия на активное вещество или другие компоненты композиции для местного применения. Примеры подходящих для местного применения носителей для использования в настоящей заявке включают воду, спирты и другие нетоксичные органические растворители, глицерин, минеральное масло, силикон, вазелин, ланолин, жирные кислоты, растительные масла, парабены, воски и подобные вещества.
Композиции могут представлять собой бесцветные, не имеющие запаха мази, лосьоны, кремы, микроэмульсии, гели.
- 22 020578
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть включены в мази, которые, как правило, представляют собой полутвердые препараты, в основе которых обычно вазелин или другие нефтепродукты. Специальная основа для мази, которую можно использовать, как должно быть понятно специалистам, представляет собой такую, которая может обеспечить оптимальную доставку лекарственного средства и, предпочтительно, может обеспечить также и дополнительные желаемые характеристики, например, смягчающие свойства или подобные. Что касается других носителей или наполнителей, основа для мази должна быть инертной, стабильной, нераздражающей и неощущаемой.
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть включены в лосьоны, которые, как правило, представляют собой препараты для нанесения на поверхность кожи без трения, и типично являются жидкими или полужидкими препаратами, в которых твердые частицы, включая активное вещество, присутствуют в водной или спиртовой основе. Лосьоны обычно представляют собой суспензии твердых частиц и могут включать жидкую масляную эмульсию типа масло-в-воде.
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть включены в кремы, которые, как правило, представляют собой вязкие жидкие или полутвердые эмульсии, либо масло-в-воде, либо вода-в-масле. Основы для крема являются водосмываемыми и содержат масляную фазу, эмульгатор и водную фазу. Масляная фаза, в основном, состоит из вазелина и жирного спирта, такого как цетиловый или стеариловый спирт; водная фаза обычно, хотя необязательно, превышает по объему масляную фазу и, как правило, содержит увлажнитель. Эмульгатор в композиции крема, как объясняется в указанном выше ссылочном документе КспипЦоп. как правило, представляет собой нетоксичное анионное, катионное или амфотерное поверхностно-активное вещество.
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть включены в микроэмульсии, которые, как правило, представляют собой термодинамически стабильные изотропно чистые дисперсии, состоящие из двух несмешивающихся жидкостей, таких как масло и вода, стабилизированных межфазной пленкой молекул поверхностно-активного вещества (Еисус1ореб1а οί ΡΙιαγιιμκοιιΙΚαΙ ТесЬио1оду (Νε^ Уогк: Магсе1 Эскксг, 1992), уо1. 9).
Сиртуин-модулирующие соединения могут быть включены в композиции гелей, которые, как правило, представляют собой полутвердые системы, состоящие либо из суспензий, образованных из небольших неорганических частиц (двухфазные системы), либо крупных органических молекул, распределенных, по существу, однородно в жидком носителе (однофазные гели). Хотя для гелей обычно используют водный жидкий носитель, спирты и масла также можно использовать в качестве жидкого носителя.
Другие активные вещества также могут быть включены в композиции, например, другие противовоспалительные средства, анальгетики, противомикробные средства, противогрибковые средства, антибиотики, витамины, антиоксиданты и блокирующие солнечные лучи средства, обычно используемые в солцезащитных композициях, включая, но не ограничиваясь этим, антранилаты, бензофеноны (в частности, бензофенон-3), производные камфоры, циннаматы (например, октилметоксициннамат), дибензоилметаны (например, бутилметоксидибензоилметан), п-аминобензойную кислоту (РАВА) и ее производные и салицилаты (например, октилсалицилат).
В некоторых композициях для местного применения активное вещество присутствует в количестве, которое находится в пределах приблизительно от 0,25 до 75 мас.%, в расчете на массу композиции, предпочтительно в пределах приблизительно от 0,25 до 30 мас.% в расчете на массу композиции, более предпочтительно в пределах приблизительно от 0,5 до 15 мас.% в расчете на массу композиции и наиболее предпочтительно в пределах приблизительно от 1,0 до 10 мас.% в расчете на массу композиции.
Состояния глаза можно лечить или осуществлять профилактику, например, системно, местно, путем внутриглазной инъекции сиртуин-модулирующего соединения или путем введения устройства замедленного высвобождения, которое высвобождает сиртуин-модулирующее соединение. Сиртуинмодулирующее соединение, которое повышает уровень и/или активность белка сиртуина, может доставляться в фармацевтически приемлемом офтальмологическом носителе так, чтобы поддерживать контакт соединения с поверхностью глаза в течение достаточного периода времени, обеспечивая возможность пенетрации соединения в роговичную и внутреннюю области глаза, например, в переднюю камеру, заднюю камеру, стекловидное тело, водянистую влагу, эндолимфу, роговицу, радужную оболочку/ресничную область, хрусталик, сосудистую оболочку/сетчатку и склеру. Фармацевтически приемлемый офтальмологический носитель может, например, представлять собой мазь, растительное масло или инкапсулирующее вещество. Альтернативно, соединения по настоящему изобретению можно вводить при помощи инъекции непосредственно в эндолимфу или водянистую влагу глаза. Еще в одном альтернативном случае, соединения можно вводить системно, например, путем внутривенной инфузии или путем инъекции, для лечения глаза.
Сиртуин-модулирующие соединения, описанные в настоящей заявке, можно хранить в среде без доступа кислорода. Например, ресвератрол или его аналог могут обеспечиваться в герметичной капсуле для перорального введения, такой как Сар8иде1 от компании ΡίΐζεΓ, 1пс.
Клетки, например, которые были обработаны ех у1уо сиртуин-модулирующим соединением, можно вводить в соответствии со способами, предусмотренными для введения трансплантата субъекту, которые могут сопровождаться, например, введением иммуносупрессанта, например, циклоспорина А. Общие
- 23 020578 принципы формулирования лекарственных средств можно найти в Се11 ТЬегару: 81ст Се11 Тгаивр1аи1аЬои, Оепе ТЬегару апД Се11и1аг ПптипоШсгару, Ьу О. МогвТуи & 8ЬегШаи еДв, СатЬгШде ИпщегвЬу Ргевв, 1996; и НстаЮроюРс 81ст Се11 ТЬегару, Ε. Ό. Ва11, 1. Ыв1сг & Р. Ьат, СЬигсЬШ ЬгутдвЮпс, 2000.
Токсичность и терапевтическую эффективность сиртуин-модулирующих соединений можно определить с использованием стандартных фармацевтических процедур в клеточных культурах или с использованием экспериментальных животных. ЬО50 представляет собой дозу, летальную для 50% популяции. ΕΌ50 представляет собой дозу, терапевтически эффективную для 50% популяции. Отношение доз, вызывающих токсический и терапевтический эффекты (ΕΌ50/ΕΌ50) представляет собой терапевтический индекс. Сиртуин-модулирующие соединения, которые демонстрируют большие терапевтические индексы, являются предпочтительными. Хотя можно использовать сиртуин-модулирующие соединения, которые демонстрируют токсические побочные эффекты, необходимо принять меры предосторожности и разработать систему доставки, которая нацеливает такие соединения на участок пораженной ткани, чтобы свести к минимуму потенциальное повреждение непораженных клеток и, таким образом, уменьшить побочные эффекты.
Данные, полученные в анализах клеточных культур и исследованиях на животных, можно использовать для формулирования ряда доз, предназначенных для человека. Доза таких соединений может находиться в пределах циркулирующих концентраций, которые включают ΕΌ50 с незначительной или полностью отсутствующей токсичностью. Доза может варьировать в этих пределах в зависимости от используемой лекарственной формы и используемого пути введения. Для любого соединения, терапевтически эффективную дозу изначально можно определить при помощи анализов клеточных культур. Доза может быть сформулирована в животных моделях для достижения пределов концентрации в плазме, которые включают значение ИК50 (т.е. концентрация испытываемого соединения, при которой достигается полумаксимальное ингибирование симптомов), определенное в клеточной культуре. Такую информацию можно использовать для более точного определения полезных доз для человека. Уровни в плазме можно измерить, например, при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Также соединения настоящей заявки могут включаться в наборы, например, наборы для терапевтических целей. Набор может включать одно или несколько сиртуин-модулирующих соединений, например, в предварительно отмеренных дозах. Набор, необязательно, может включать устройства для контактирования клеток с соединениями и инструкции по применению. Устройства включают шприцы, стенты и другие устройства для введения сиртуин-модулирующего соединения субъекту (например, в кровеносный сосуд субъекта) или наложения его на кожу субъекта.
В другом варианте воплощения, настоящее изобретение обеспечивает композицию вещества, включающую модулятор сиртуина по настоящему изобретению и другое терапевтическое средство (тех самых, которые используют в комбинированной терапии и комбинированных композициях) в отдельных лекарственных формах, но связанных друг с другом. Термин связанные друг с другом, как он используется в настоящей заявке, означает, что отдельные лекарственные формы упакованы вместе или иным образом связаны друг с другом так, чтобы было понятно, что эти отдельные лекарственные формы продаются и предназначены для введения как часть одной схемы лечения. Такое средство и модулятор сиртуина предпочтительно упакованы вместе в блистерной упаковке или другой многокамерной упаковке, или в связанных между собой отдельно запаянных контейнерах (таких как мешочки из фольги или подобные), которые разделяются пользователем (например, отрываются по линии раздела между двумя контейнерами).
Набор может представлять собой отдельные сосуды, включающие а) модулятор сиртуина по настоящему изобретению; и В) другое терапевтическое средство, такое как средства, указанные в настоящем описании.
Для практического осуществления описанных способов используют, если не указано иное, традиционные процедуры клеточной биологии, клеточного культивирования, молекулярной биологии, трансгенной биологии, микробиологии, рекомбинантной ДНК и иммунологии, которые известны специалистам в данной области. Такие процедуры подробно объясняются в литературе (см., например, Мо1еси1аг С1отид А ЬаЬогакогу Маииа1, 2'1 Εά., еД. Ьу 8атЬгоок, РгЪвсЬ апД МатаЬв (Со1Д 8ргшд НагЬог ЬаЬогакогу Ргевв: 1989); ΌΝΑ Сштид, Уо1. I и II (Ό. Ν. 01оусг еД. , 1985); ОЬдоиис1еоЬДе 8уиШев1в (Μ. 1. ОаЪ еД., 1984); МиШв ек а1. И.8. Ракеик №: 4683195; ШсЮс АсШ НуЬпД1/аРоп (В. Ό. Натев & 8. I. ШддШв еДв. 1984); Тгаивспркюи АиД Тгаив1аЬои (В. Ό. Натев & 8. 1. Шддтв еДв. 1984); СиЬиге ОГ АШта1 Се11в (К. I. РгевЬиеу, А1ап К. Ь1вв, Шс., 1987); ЬптоЬШ/сД Се11в АиД Εηζутев ДКЬ Ргевв, 1986); В. РегЬа1, А РгасЬса1 ОшДе То Мо1еси1аг С1отпд (1984); Ше ТгеаЬве, МеШоДв ш Нп/уто1оду (АсаДетю Ргевв, Шс., Ν. Υ.); Оепе ТгапвГсг УссЮгв Рог МаттаЬап Се11в (I. Н. МШег апД М. Р. Са1ов еДв., 1987, Со1Д 8ргшд НагЬог ЬаЬогакогу); МеШоДв т Εηζуто1о§у, Уо1в. 154 апД 155 (\Уи с! а1. ейв.), ЬптипосЬсписа! МеШоДв Ш Се11 АпД Мо1еси1аг Вю1оду (Мауег апД ^а1кег, еДв., АсаДетю Ргевв, ЬопДоп, 1987); НапДЬоок ОГ Εxрег^теηΐа1 Iттипо1оду, νо1. ЫУ (Ό. М. \УсЬ апД С. С. В1аск\ус11, еДв., 1986); Матри1акшд Ше Мойве ΕтЬгуо (Со1Д 8ргшд НагЬог ЬаЬогакогу Ргевв, Со1Д 8рппд НагЬог, Ν. Υ., 1986)).
- 24 020578
Примеры
Настоящее изобретение, общее описание которого представлено выше, будет более понятно при ссылке на представленные ниже примеры, которые включены исключительно в целях иллюстрации некоторых аспектов и вариантов воплощения настоящего изобретения, и не предназначены для какоголибо ограничения настоящего изобретения.
Пример 1. Общая процедура получения 2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (3)
2,3-Диаминобензойная кислота (1; 50 мг, 0,33 ммоль), 2-(трифторметил)бензальдегид (2; 57 мг, 0,33 ммоль) и метабисульфит натрия (Ыа282О5, 82 мг, 0,43 ммоль) поглощались в ΌΜΡ (5 мл) и смесь перемешивали при 100°С в течение 17 ч.
Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли при помощи Н2О. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и фильтровали. Собранные твердые вещества промывали водой и сушили с получением 2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоновой кислоты 3 в виде бледно-коричневого твердого вещества (75 мг, выход: 74%). Μδ (Ε8Ι) рассчитано для С'5Н.9РА;О2: 306,06; найдено: 307 [М+Н].
Эту общую процедуру используют для получения любых 4-карбоксипроизводных 1Н-бензо [Щимидазола с использованием подходящего альдегидного компонента в качестве замены для 2(трифторметил)бензальдегида 2 в описанной выше схеме.
Пример 2. Получение Ы-(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 208)
2-(2-(Трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновая кислота (3; 75 мг, 0,24 ммоль) поглащалась в ΌΜΡ (2 мл) вместе с тиазол-2-амином (4; 24 мг, 0,24 ммоль) и НАТИ (186 мг, 0,49 ммоль). Добавляли ΌΙΕΑ (81 мкл, 0,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и фильтровали. Собранные твердые вещества подвергали дальнейшей очистке при помощи хроматографии на силикагеле с получением желаемого продукта, а именно Ы-(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 208), в виде белого твердого вещества (35 мг, выход: 38%). Μδ (Ε8Ι) рассчитано для С18Н11Р3К4О8: 388,06; найдено: 389 [М+Н].
Эту общую процедуру используют для любых амидных производных, представленных в Таблице 1, путем замещения подходящей карбоновой кислотой и аминовыми компонентами соединений 3 и 4, соответственно.
Пример 3. Синтез гидрохлорида 2-(6-пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 251).
Стадия 1. Получение 2-(6-хлорпиридин-3-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (6)
2,3-Диаминобензойная кислота (1; 200 мг, 1,31 ммоль), 6-хлорникотинальдегид (5; 186 мг, 1,31 ммоль) и Ыа282О5 (324 мг, 1,7 ммоль) поглащалась в ΌΜΡ (10 мл) и перемешивали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли при помощи Н2О. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и фильтровали. Собранные твердые вещества промывали водой, МеОН и сушили с получением 2-(6-хлорпиридин-3-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 6 в виде бледно-твердого вещества (340 мг, выход: 95%).
- 25 020578
Стадия 2. Получение 2-(6-хлорпиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (7)
2-(6-Хлорпиридин-3-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновая кислота (6; 340 мг, 1,24 ммоль) поглащалась в ΌΜΡ (5 мл) вместе с тиазол-2-амином (4; 125 мг, 1,24 ммоль) и НАТИ (943 мг, 2,48 ммоль). Добавляли ΌΙΕΑ (0,41 мл, 2,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой и полученные твердые вещества собирали фильтрованием. Очистка при помощи хроматографии на силикагеле (пентан/ЕТОАс) давала 2-(6-хлорпиридин-3ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамид 7 в виде бледно-желтого твердого вещества (215 мг, выход: 52%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С16Н1оС1ЮО8: 355,03; найдено: 356 [М+Н].
Стадия 3. Получение трет-бутил 4-(5-(4-(тиазол-2-илкарбамоил)-1Н-бензо[й]имидазол-2-ил) пиридин-2 -ил)пиперазин-1 -карбоксилата (8)
Смесь, содержащую 2-(6-хлорпиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамид (7; 30 мг, 0,084 ммоль) и трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (170; 156,5 мг, 0,84 ммоль) в ΌΜ8Ο (1,2 мл), перемешивали при 140°С в микроволновом реакторе в течение 25 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме с получением трет-бутил 4-(5-(4-(тиазол-2-илкарбамоил)1Н-бензо[й]имидазол-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоксилата 8 в виде бледно-желтого твердого вещества (20 мг, 71%) . Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С25Н27ЮО38: 505,19; найдено: 506 [М+Н].
Стадия 4. Получение гидрохлорида 2-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо [й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 251)
Смесь, содержащую трет-бутил 4-(5-(4-(тиазол-2-илкарбамоил)-1Н-бензо[й]имидазол-2ил)пиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоксилат (8; 20 мг, 0,039 ммоль) в метанольном растворе НС1 (3н., 2 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием, промывали при помощи МеОН и сушили с получением гидрохлорида 2-(6-(пиперазин-1ил)пиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 251) в виде бледножелтого твердого вещества (21 мг). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С20Н!9ЮО8 (т/ζ) : 405,14; найдено: 406 [М+Н].
Пример 4. Получение 2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 247)
Смесь, содержащую 2-(6-хлорпиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамид (7; 20 мг, 0,056 ммоль) и морфолин (48; 49 мг, 0,56 ммоль) в □[^О (1,5 мл), перемешивали при 140°С в микроволновом реакторе в течение 25 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили. Твердые вещества снова растворяли в ΕίΟΑс и добавляли достаточное количество петролейного эфира для осаждения из него продукта снова. Твердые вещества собирали фильтрованием, промывали при помощи МеОН и сушили с получением 2-(6морфолинопиридин-3-ил)-Ю(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 247) в виде бледно-желтого твердого вещества (13 мг, 57%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для СаДвНЮгВ: 406,12; найдено: 407 [М+Н].
- 26 020578
Пример 5. Получение 2-(2-морфолинопиридин-3-ил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 250)
2-(2-Хлорпиридин-3-ил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамид 9 получали в соответствии с общей процедурой, описанной выше, с использованием подходящего альдегидного компонента. Смесь, содержащую это вещество, а именно 2-(2-хлорпиридин-3-ил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамид (9; 19 мг, 0,053 ммоль) и морфолин (48; 46 мг, 0,53 ммоль) в ΌΜ8Ο (1,2 мл), перемешивали при 140°С в микроволновом реакторе в течение 25 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили. Твердые вещества снова растворяли в ΕΐΟΑс и добавляли достаточное количество петролейного эфира для осаждения продукта снова. Твердые вещества собирали фильтрованием, промывали при помощи МеОН и сушили с получением 2-(2-морфолинопиридин-3-ил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 250) в виде белого твердого вещества (13 мг, 60%). М8 (Е8Ц рассчитано для ^οΗι8Ν6Ο28 (μ/ζ): 406,12; найдено: 407 [М+Н].
Пример 6. Получение 2-(2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамидо) пиридин 1-оксида (соединение 329)
К раствору ^(пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (10; 100 мг, 0,26 ммоль) в СН2С12 (10 мл) добавляли шСΡΒΑ (140 мг, 0,81 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Добавляли насыщенный водный раствор К2СО3 (10 мл) и смесь экстрагировали при помощи СН2С12 (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили (№28О4), концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (СН2С12:метанол=20:1) с получением 2-(2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамидо)пиридин 1-оксида (Соединение 329) (60,0 мг, 58%) в виде бесцветного твердого вещества. М8 (Е8Ц рассчитано для С20Н13Р3^О2: 398,10; найдено: 399 [М+Н].
Пример 7. Синтез ^(2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-ил)тиазол-4-карбоксамида (соединение 332).
Стадия 1. Получение бензил 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-илкарбамата (12)
Раствор 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (11; 1,53 г, 5,0 ммоль), дифенилфосфорилазида (ΌΡΡΑ, 1,39 г, 5,0 ммоль) и Εΐ3Ν (0,75 г, 7,4 ммоль) в толуоле (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Добавляли бензиловый спирт (0,54 г, 5,0 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником еще в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь промывали последовательно водным раствором лимонной кислоты (10% мас./мас.), насыщенным раствором ΝаΗСΟ3 и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением бензил 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-илкарбамата 12 (1,45 г, 70%) в виде твердого вещества. М8 (Е8Ц рассчитано для С22Н16Р^3О2: 411,12; найдено: 412 [М+Н].
- 27 020578
Стадия 2. Получение 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амина (13)
К перемешиваемому раствору бензил 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4илкарбамата (12; 1,45 г, 3,5 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли 5% Рй/С (0,20 г). Реакционную смесь тщательно продували азотом и затем перемешивали в атмосфере водорода, 1 атм, при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь фильтровали через слой целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амина 13 (0,90 г, 3,25 ммоль, 93%) в виде твердого вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для ^4Ηι0Ρ3Ν3: 277,08; найдено: 278 [М+Н].
Стадия 3. Получение Ы-(2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-ил)тиазол-4-карбоксамида (соединение 332)
Смесь 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амина (13; 0,28 г, 1,0 ммоль), тиазол-4карбоновой кислоты (14; 0,15 г, 1,2 ммоль), ΌΙΕΑ (0,42 мл, 2,4 ммоль) и НАТИ (0,79 г, 2,07 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (5 мл) и смесь фильтровали. Остаток промывали этилацетатом (3x15 мл) и водный слой экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением Ы-(2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4ил)тиазол-4-карбоксамида (соединение 332) (0,30 г, 0,77 ммоль, 77%) в виде бесцветного твердого вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для ^8ΗϋΡ3Ν40δ: 388,06; найдено: 389 [М+Н].
Пример 8. Получение Ы-(пиридин-2-ил)-2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амина (соединение 581)
Смесь, содержащую 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амин (13; 332 мг, 1,20 ммоль), 2-хлорпиридин (15; 138 мг 1,22 ммоль), Рй(ОАс)2 (120 мг, 0,53 ммоль), В1ЫАР (336 мг, 0,53 ммоль) и ΐ-ВиОК (150 мг, 1,34 ммоль) в толуоле (10 мл), перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч в инертной атмосфере Ν2. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением Ν(пиридин-2-ил)-2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амина (соединение 581) (30 мг, 0,085 ммоль, 7,1%) в виде бесцветного твердого вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С19Н13Р3К4: 354,11; найдено: 355 [М+Н]
Пример 9. Получение Ы-(пиридин-3-илметил)-2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4амина (соединение )
Смесь, содержащую 2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-амин (13; 120 мг, 0,43 ммоль), никотинальдегид (16; 51 мг, 0,47 ммоль) и ЫаВН(ОАс)3 (143 мг, 0,67 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч в инертной атмосфере Ν2. Добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (10 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный
- 28 020578 остаток очищали при помощи хроматографии (градиентное элюирование, петролейный эфир:этилацетат=1:1 до 1:3) с получением ^(пиридин-3-илметил)-2-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо [й]имидазол-4-амина (соединение ) (70 мг, 0,198 ммоль, 46%) в виде бледно-желтого твердого вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для Ο20Η15Ρ3Ν4: 368,12; найдено: 369 [М+Н].
Пример 10. Синтез 2-(4-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 430).
Стадия 1. Получение 4-хлор-1-(диметоксиметил)-2-(трифторметил)бензола (18)
К перемешиваемому раствору 4-хлор-2-(трифторметил)бензальдегида (17; 4,20 г, 20,0 ммоль) в метаноле (25 мл) добавляли триэтоксиметан (3,60 г, 24,0 ммоль) при 0°С. Полученную реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Добавляли раствор МсО№ в метаноле для доведения рН 10. Растворитель удаляли при пониженном давлении и полученный остаток разбавляли водой. Смесь экстрагировали этилацетатом (3x50 мл) и объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-хлор-1(диметоксиметил)-2-(трифторметил)бензола 18 (3,20 г, 12,6 ммоль, 63%).
Стадия 2. Получение 4-(4-(диметоксиметил)-3-(трифторметил)фенил)морфолина (19)
Смесь 4-хлор-1-(диметоксиметил)-2-(трифторметил)бензола (18; 3,20 г, 12,6 ммоль), Рй2(йЬа)3(0,30 г, 0,33 ммоль), ΐ-ВиОК (3,50 г, 31,2 ммоль) и морфолина (48; 1,09 г, 12,6 ммоль) в безводном толуоле (50 мл) перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч в инертной атмосфере азота. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением 4-(4-(диметоксиметил)-3-(трифторметил)фенил)морфолина 19 (0,40 г, 10,4%).
Стадия 3. Получение 2-(4-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (20)
Смесь 4-(4-(диметоксиметил)-3-(трифторметил)фенил)морфолина (19; 0,40 г, 1,31 ммоль), 2,3диаминобензойной кислоты (1; 0,20 г, 1,31 ммоль), Ν;·ι2δ2Ο5 (0,33 г, 1,74 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) перемешивали при 110°С (масляная баня) в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли водой (20 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали; фильтровальную лепешку промывали водой (3x10 мл) и сушили с получением 2-(4-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 20 (0,37 г, 72%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 4. Получение 2-(4-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 430)
Смесь 2-(4-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (20; 157 мг, 0,40 ммоль), ΗΑΤυ (304 мг, 0,80 ммоль), ΌΙΕΑ (207 мг, 1,60 ммоль) и 3-аминопиридина (173; 37 мг, 0,40 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч.
Добавляли воду (20 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с получением 2-(4-морфолино-2(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[Д|имидазол-4-карбоксамида (соединение 430) (64 мг, 34%) в виде бледно-желтого твердого вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для Ο24Η20Ρ3Ν5Ο2: 467,16; найдено: 468 [М+Н].
- 29 020578
Пример 11. Получение 2-(5-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 450)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной в примере 10 выше для получения 2-(4морфолино-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида, за исключением того, что 5-хлор-2-(трифторметил)бензальдегид 21 использовали в качестве исходного вещества с получением 2-(5-морфолино-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4карбоксамида (соединение 450). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С24Н20Р3^О2: 467,16; найдено: 468 [М+Н].
Пример 12. Синтез 2-(2-(пиперидин-4-илокси)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4карбоксамида (соединение 428).
Стадия 1. Получение трет-бутил 4-(метилсульфонилокси)пиперидин-1-карбоксилата (24)
К раствору Ы-Вос-4-гидроксипиперидина (22; 25 г, 124 ммоль) и Εΐ3Ν (20,7 мл) в СН2С12 (100 мл) добавляли раствор метансульфонилхлорида 23 в СН2С12 (20 мл) по каплям на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь разбавляли при помощи 100 мл СН2С12 и промывали последовательно насыщенным водным раствором №-ьСО3 (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл). Органический слой сушили Ща^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил 4-(метилсульфонилокси)пиперидин-1-карбоксилата 24 (45 г, грубый выход: >100%). Это вещество затем использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2. Получение трет-бутил 4-(2-формилфенокси)пиперидин-1-карбоксилата (26)
Смесь, содержащую 2-гидроксибензальдегид (25; 4,2 г, 34,5 ммоль), трет-бутил 4- (метилсульфонилокси)пиперидин-1-карбоксилат (24; 15,0 г, ~41 ммоль), К2СО3 (7,15 г, 51,7 ммоль) и иодид тетрабутиламмония (500 мг, кат.) в ИМР (100 мл) перемешивали при 70-80°С в течение 18 ч. Растворитель ИМР удаляли концентрированием при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли при помощи ЕЮАс (100 мл) и промывали водой (50 мл). Органический слой сушили (ΜдδО4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (пентан/ЕЮАс=1:10) с получением трет-бутил 4-(2-формилфенокси)пиперидин-1-карбоксилата 26 в виде желтого масла (2,89 г, 27%).
Стадия 3. Получение 2-(2-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-илокси)фенил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоновой кислоты (27)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше для получения бензимидазольных производных, с использованием 2,3-диаминобензойной кислоты 1 и трет-бутил 4-(2-формилфенокси) пиперидин-1-карбоксилата 26 с получением 2-(2-(1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-илокси)фенил)1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты 27. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С24Н27ЩО5: 437,20; найдено: 438 [М+Н].
- 30 020578
Стадия 4. Получение 2-(2-(пиперидин-4-илокси)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4карбоксамида (соединение 428)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с использованием 2-(2-( 1 -(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-илокси)фенил)-1Н-бензо [Д]имидазол-4-карбоновой кислоты 27 и 2-аминотиазола 4 в качестве исходных веществ. Полученный неочищенный продукт амидного связывания (0,2 ммоль) обрабатывали при помощи 4 мл 25% раствора ΤΡΑ в СН2С12 и давали выстояться при комнатной температуре в течение 8 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с использованием водного раствора ацетонитрила, забуференного 0,1% ΤΡΑ, с получением 2-(2-(пиперидин-4-илокси)фенил)-Ы-(тиазол-2ил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 428). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С22Н2^5О^: 419,14; найдено: 420 [М+Н].
Пример 13. Синтез 2-(2-(пирролидин-3-илокси)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4карбоксамида (соединение 459).
Стадия 1. Получение трет-бутил 3-(2-формилфенокси)пирролидин-1-карбоксилата (30)
К раствору ^Вос-3-гидроксипирролидина (28; 2 г, 10,7 ммоль) и Εΐ3Ν (2,2 мл, 16,0 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли раствор метансульфонилхлорида (1,84 г, 2,52 мл, 16,0 ммоль) в СН2С12 (5 мл) по каплям на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь разбавляли при помощи 50 мл СН2С12, промывали насыщенным раствором №-ьСО3 (20 мл), насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении с получением Ν-Вос3-(метилсульфонилокси)пирролидина 29 (2,6 г, 92%). Это вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
2-Гидроксибензальдегид (25; 1,2 г, 9,8 ммоль), ^Вос-3-(метилсульфонилокси)пирролидин (29; 2,6 г, 9,8 ммоль), К2СО3 (2,0 г, 14,7 ммоль) и иодид тетрабутиламмония (300 мг, кат.) в СН2С12 (20 мл) перемешивали при 70-80°С в течение 18 ч. ΌΜΡ удаляли концентрированием при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли при помощи ЕТОАс (100 мл), промывали водой (50 мл), сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (пентан:ЕЮАс=1:10) с получением 676 мг трет-бутил 3-(2-формилфенокси)пирролидин-1-карбоксилата 30 в виде масла (выход: 23%).
Стадия 2. Получение 2-(2-(1-(трет-бутоксикарбонил)пирролидин-3-илокси)фенил)-1Н-бензо [Д]имидазол-4-карбоновой кислоты (31)
Смесь 2,3-диаминобензойной кислоты (1; 350 мг, 2,3 ммоль), трет-бутил 3-(2-формилфенокси) пирролидин-1-карбоксилата (30; 670 мг, 2,3 ммоль) и №^2О5 (568 мг, 1,3 ммоль) в ΌΜΡ (30 мл) перемешивали при 90°С в течение 18 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли водой (100 мл), перемешивали в течение 1 ч, фильтровали и промывали водой. Фильтровальную лепешку сушили в вакууме с получением 822 мг указанного в заголовке соединения 31 (84%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С23Н25№,О5: 423,18; найдено: 424 [М+Н].
- 31 020578
Стадия 3. Получение трет-бутил 3-(2-(4-(тиазол-2-илкарбамоил)-1Н-бензо[й]имидазол-2-ил) фенокси)пирролидин-1-карбоксилата (32)
К раствору 2-(2-(1-(трет-бутоксикарбонил)пирролидин-3-илокси)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоновой кислоты (31; 150 мг, 0,36 ммоль), тиазол-2-амина (4; 35,5 мг, 0,36 ммоль) и НАУЛ (202 мг, 0,53 ммоль) в ΌΜΡ (5 мл) добавляли ОША (137 мг, 1,06 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь разбавляли водой (20 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Осадок собирали фильтрованием и затем очищали при помощи колоночной хроматографии с получением 85 мг указанного в заголовке соединения 32 (выход: 48%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С26Н27^О^: 505,18; найдено: 506 [М+Н].
Стадия 4. Получение 2-(2-(пирролидин-3-илокси)фенил)^-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоксамида (соединение 459)
Раствор трет-бутил 3-(2-(4-(тиазол-2-илкарбамоил)-1Н-бензо[й]имидазол-2-ил)фенокси) пирролидин-1-карбоксилата 32 в 8 мл 4М НС1/МеОН перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Образовавшийся осадок собирали фильтрованием и промывали метанолом с получением 72 мг 2-(2(пирролидин-3-илокси)фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 459) (выход: 96%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С^Н^^ОгЗ: 405,13; найдено: 406 [М+Н].
Пример 14. Получение 2-(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 324).
Стадия 1. Получение (2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил 4-метилбензолсульфоната (34) но· о-4г
ТаС1, Β3Ν, ОМАР осм.кт
ΤβοΆ'Ά
34 (2,2-Диметил-1,З-диоксолан-4-ил)метанол (33; 7,56 ммоль, 1,0 г) поглащался в 20 мл дихлорметана. Затем добавляли триэтиламин (26,46 ммоль, 3,687 мл) с последующим добавлением птолуолсульфонилхлорида (15,12 ммоль, 2,88 г) и каталитического количества 4-диметиламинопиридина. Реакционную смесь оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч. Неочищенную реакционную смесь разбавляли дихлорметаном, промывали последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой, сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток 34 использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (грубый выход 89%).
Стадия 2. Получение 2-(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Нбензо [й] имидазол-4-карбоксамида (36)
К раствору (2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил 4-метилбензолсульфоната (34; 4,02 ммоль, 1,15 г) и 3-гидроксибензальдегида (35; 4,824 ммоль, 0,614 г) в 20 мл диметилформамида добавляли карбонат калия (10,05 ммоль, 1,39 г). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 18 ч. Неочищенную реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (ΝΑ2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (пентан/ΕΐΟΑс). Желаемый продукт 36 получали с 84% выходом.
- 32 020578
Стадия 3. Получение 2-(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-Л-(тиазол-2-ил)-1Нбензо [б] имидазол-4-карбоксамида (37)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше для получения бензимидазолов с использованием 2,3-диаминобензойной кислоты, с получением 2-(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4ил)метокси)фенил)-Л-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида 37. Μ8 (ΕδΙ) рассчитано для С23ЩА4О48: 450,14; найдено: 451 [М+Н].
Стадия 4. Получение 2-(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-Л-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол4-карбоксамида (соединение 324)
К раствору 2-(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-Л-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (37; 50 мг, 0,111 ммоль) в ТГФ добавляли 4н раствор Η0 по каплям до тех пор, пока не наблюдалось образование осадка. Осадок собирали при помощи вакуумного фильтрования и промывали безводным этанолом. Продукт (соединение 324) сушили в течение ночи в вакууме. (Продукт имел бледно-желтый цвет и выход=86%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С23ЩА4О48: 410,10; найдено: 411 [М+Н].
Пример 15. Получение 2-(2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)-Л-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 482).
Стадия 1. Получение 2-хлорэтил 4-метилбензолсульфоната (39) С1^^он ,зж С|^^0Тз
39
В типичном эксперименте, п-толуолсульфонилхлорид (Т§С1, 70,5 г, 0,37 моль) добавляли медленно к раствору 2-хлорэтанола (38; 25,0 г, 0,31 моль) в пиридине (100 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0-5°С в течение 18 ч. Добавляли ледяную воду (300 мл) и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические слои промывали 1 н раствором ΗΟ (3 х100 мл), водой (100 млх3), сушили Ща28О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 2хлорэтил 4-метилбензолсульфоната 39 (64,3 г, 88%).
Стадия 2. Получение 2-(2-хлорэтокси)бензальдегида (40)
Смесь 2-хлорэтил 4-метилбензолсульфоната (39; 27,0 г, 0,115 моль), 2-гидроксибензальдегида (25; 14,0 г, 0,115 моль) и К2СО3 (31,7 г, 0,23 моль) в ΌΜΡ (100 мл) перемешивали при 45°С в течение 12 ч. Добавляли воду (200 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3x150 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (3x50 мл), сушили Ща28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением 2-(2-хлорэтокси)бензальдегида 40 (16,8 г, 0,091 моль, 79%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия 3. Получение 2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)бензальдегида (41)
Раствор 2-(2-хлорэтокси)бензальдегида (40; 2,5 г, 13,5 ммоль), пирролидина (172; 1,9 г, 26,8 ммоль), К2СО3 (3,8 г, 27,2 ммоль) и ΝαΙ (0,6 г, 4,2 ммоль) в ΌΜΡ (50 мл) перемешивали при 80°С в течение 12 ч. Добавляли воду (200 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3x150 мл). Объединенные органические
- 33 020578 слои промывали насыщенным солевым раствором (3x50 мл), сушили (Ν;·ι2δΟ.·ι) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (дихлорметан:метанол=100:1) с получением 2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)бензальдегида 41 (1,63 г, 7,43 ммоль, 55%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия 4. Получение 2-(2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты (42)
Смесь 2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)бензальдегид (41; 1,6 г, 7,3 ммоль), 2,3-диаминобензойной кислоты (1; 1,10 г, 7,3 ммоль), Ν2δ2Ο5 (2,0 г, 11,0 ммоль) в ΌΜΡ (30 мл) перемешивали при 95°С (масляная баня) в течение 18 ч. Добавляли воду (30 мл) и смесь фильтровали. Твердые вещества промывали смесью дихлорметаном/метанол (50 мл, об./об.=5/1) и сушили с получением 2-(2-(2-(пирролидин-1ил)этокси)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты 42 (1,80 г, 5,1 ммоль, 70%) в виде коричневого твердого вещества.
Стадия 5. Получение 2-(2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 482)
Смесь 2-(2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты (42; 0,30 г, 0,85 ммоль), ΗΑΤυ (0,42 г, 1,1 ммоль), ΌΡΕΑ (0,22 г, 1,7 ммоль) и 2-аминотиазола (4; 0,17 г, 1,7 ммоль) в ΌΜΡ (15 мл) перемешивали при 50°С в течение 14 ч. Добавляли воду (30 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали и фильтровальную лепешку очищали при помощи хроматографии (дихлорметан:метанол:аммиак=60:1:0,3) с получением 2-(2-(2-(пирролидин-1-ил)этокси) фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 482) (70 мг, 0,16 ммоль, 18,8%) в виде бесцветного твердого вещества. Μδ (Εδ^ рассчитано для ^3Η23Ν5Ο2δ: 433,16; найдено: 434 [М+Н].
Пример 16. Синтез 2-(2-(дифторметил)-4-фторфенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты (соединение 559).
Стадия 1. Получение 1-бром-2-(дифторметил)-4-фторбензола (44)
К раствору 2-бром-5-фторбензальдегида (43; 10 г, 43,5 ммоль) в СН2С12 (100 мл) добавляли раствор трифторида (диэтиламино) серы (ΌΑδΤ, 10,5 г, 65,2 ммоль) в СН2С12 (50 мл) при 0°С. Реакционную смесь затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Смесь медленно выливали в водный раствор ΝаΗСΟз и слои разделяли. Водный слой экстрагировали при помощи СН2С12. Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали путем дистилляции в вакууме с получением 1-бром-2-(дифторметил)-4фторбензола 44 (7,9 г, 71,3%).
Стадия 2. Получение 2-(дифторметил)-4-фторбензальдегида (46)
Изопропилмагнийбромид (30 мл, 1М в ТГФ, 30 ммоль) добавляли по каплям к охлажденному льдом раствору 1-бром-2-(дифторметил)-4-фторбензола (44; 6 г, 26,7 ммоль) в ТГФ (100 мл). Реакционной смеси затем давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Добавляли диметилформамид (3,5 мл, 45,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентриро- 34 020578 вали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с получением 2-(дифторметил)-4-фторбензальдегида 45 (3,2 г, 68,5%).
Стадия 3. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-фторфенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (46)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше для получения бензимидазола, с использованием 2-(дифторметил)-4-фторбензальдегида 45 и 2,3-диаминобензойной кислоты 1 в качестве исходных веществ с получением 2-(2-(дифторметил)-4-фторфенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 46. М§ (ΕδΙ) рассчитано для С15Н9Р^2О2: 306,6; найдено: 307 [М+Н].
Стадия 4. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-фторфенил)^-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоксамида (соединение 559)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с получением 2-(2-(дифторметил)-4-фторфенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 559). Мδ (ΕδΙ) рассчитано для ^ΗπΡ^Ν^δ: 388,06; найдено: 389 [М+Н].
Пример 17. Синтез 2-(2-(дифторметил)-4-морфолинофенил)^-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол4-карбоксамида (соединение 551).
Стадия 1. Получение 2-(дифторметил)-4-морфолинобензальдегида (49)
Смесь, содержащую 2-(дифторметил)-4-фторбензальдегид (47; 3,50 г, 20,1 ммоль), морфолин (48; 1,9 г, 22,1 ммоль) и К2СО3 (5,5 г, 40,2 ммоль) в 50 мл О1^О, перемешивали при 100°С в течение 4 ч. Полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (200 мл). Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением 2-(дифторметил)-4морфолинобензальдегида 49 (2,5 г, 52%).
Стадия 2. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-морфолинофенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислот (50)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше для получения бензимидазола, с использованием 2-(дифторметил)-4-морфолинобензальдегида 49 и 2,3-диаминобензойной кислоты 1 в качестве исходных веществ с получением 2-(2-(дифторметил)-4-морфолинофенил)-1Н-бензо[й]имидазол4-карбоновой кислоты (50). Мδ (ΕδΙ) рассчитано для С19Н17р2^О3: 373,12; найдено: 374 [М+Н].
Стадия 3. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-морфолинофенил)^-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 551)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с получением 2-(2-(дифторметил)-4-морфолинофенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 551). Мδ (ΕδΙ) рассчитано для С22Н19Р2^О^: 455,12; найдено: 456 [М+Н].
Пример 18. Синтез 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-^(3-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н- 35 020578 бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 490).
Стадия 1. Получение 3-(пирролидин-1-илметил)анилина (53)
1-(Бромметил)-3-нитробензол (51; 5 г, 23,1 ммоль) поглащался в 100 мл безводного ТГФ вместе с пирролидином (2,3 мл, 27,72 ммоль) и К2СО3 (4,8 г, 34,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-нитробензил)пирролидина 52. Это вещество 52 поглащалось в 100 мл абсолютного ΕΐΟΗ и добавляли 10% Рй/С (300 мг). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода, 1 атм, в течение 18 ч. Смесь затем фильтровали через слой целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2,81 г 3-(пирролидин1-илметил)анилина 53 (70%).
Стадия 2. Получение 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(3-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 490)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с получением 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(3-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоксамида (соединение 490) из 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоновой кислоты 54 и 3-(пирролидин-1-илметил)анилина 53. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С26Н22С1РзЫ4О: 498,14; найдено: 499 [М+Н].
Пример 19. Синтез 2-(4-фтор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(4-(морфолинометил)тиазол-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 681).
Стадия 1. Получение трет-бутил 4-(гидроксиметил)тиазол-2-илкарбамата (57)
Этил 2-аминотиазол-4-карбоксилат (55; 10,0 г, 58,1 ммоль) поглащался в 150 мл безводного ТГФ вместе с ди-трет-бутилкарбонатом (ВОС2О, 12,67 г, 58,1 ммоль) вместе с 10 мг 4-(диметил) аминопиридина (ΌΜΛΡ). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч и затем при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь концентрировали при пониженном давлении с получением вязкого масла. Добавляли пентан и полученные кристаллические вещества собирали фильтрованием и сушили с получением 10,5 г этил 2-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксилата 56. Это вещество 56 (10,5 г, 38,5 ммоль) растворяли в 300 мл безводного ТГФ и охлаждали на бане сухой лед-ацетонитрил. Затем добавляли раствор 1 Μ διιροΓ Нуйпйе™ в ТГФ (85 мл) в течение 10 мин. Полученную реакционную смесь перемешивали при -45°С в течение 2 ч. Затем добавляли еще одну порцию 1 Μ δηροτ Нуйпйе™ в ТГФ (35 мл) и реакционную смесь перемешивали еще в течение 2 ч при -45°С. Реакцию гасили при -45°С путем добавления 50 мл насыщенного солевого раствора. После нагревания до комнатной температуры, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученную смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (ΝΑ2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с получением 6,39 г трет-бутил 4-(гидроксиметил)тиазол-2-илкарбамата 57 (72%).
Стадия 2. Получение 4-(морфолинометил)тиазол-2-амина (59) • Вое
ΝΗ
А
О — о 'ОН
Вое
ЫНг
- о трет-Бутил 4-(гидроксиметил)тиазол-2-илкарбамат (57; 2,0 г, 8,7 ммоль) поглащался в 25 мл СН2С12 вместе с Εί3Ν (1,82 мл, 13,05 ммоль) и охлаждали до 0°С. Добавляли метансульфонилхлорид (0,85 мл,
- 36 020578
10,88 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 60 мин. Затем добавляли морфолин (48; 3,0 мл, 35 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток поглащался в ΕΐΟΑс и промывали разбавленным водным раствором ΝаΗСΟз, насыщенным солевым раствором, сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Это вещество очищали путем фильтрования через короткую колонку с силикагелем. Фильтрат концентрировали с получением 1,88 г трет-бутил 4-(морфолинометил)тиазол-2-илкарбамата 58. Вое группу удаляли при помощи обработки трет-бутил 4-(морфолинометил)тиазол-2-илкарбаматом 58 с 20 мл 25% ΤΡΑ в СН2С12 в течение 18 ч при комнатной температуре. После удаления всех растворителей путем концентрирования и сушки в условиях высокого вакуума полученный остаток обрабатывали смесью пентан/ΕΐΟΑс с получением 2,17 г 4(морфолинометил)тиазол-2-амина 59 в виде белого твердого вещества.
Стадия 3. Получение 2-(4-фтор-2-(трифторметил)фенил)-И-(4-(морфолинометил) тиазол-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 681)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с получением 2(4-фтор-2-(трифторметил)фенил)-Н-(4-(морфолинометил)тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имцдазол-4-карбоксамида (соединение 681). М8 (Е8Ц рассчитано для С23Н|9,С1Р3Н2О28: 521,09; найдено: 522 [М+Н].
Пример 20. Синтез ^(5-(морфолинометил)тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 780).
Стадия 1. Получение 5-(морфолинометил)тиазол-2-амина (61)
5-(Морфолинометил)тиазол-2-амин 61 получали с использованием такой же последовательности синтеза, как описано выше для 4-(морфолинометил)тиазол-2-амина, с использованием этил 2аминотиазол-5-карбоксилата 60 в качестве исходного вещества.
Стадия 2. Получение ^(5-(морфолинометил)тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 780)
Использовали общую процедуру амидного связывания, аналогичную описанной выше, с получением ^(5-(морфолинометил)тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 780) из 2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 3 и 5(морфолинометил)тиазол-2-амина 61. М8 (Е8Ц рассчитано для С23Н20Рз^О28: 487,13; найдено: 488 [М+Н].
Пример 21. Синтез (К)-2-(2-(дифторметил)-4-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-Н-(тиазол-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 556).
Стадия 1. Получение (8)-2-бром-5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)бензальдегида (64)
К раствору 2-бром-5-гидроксибензальдегида (62; 5 г, 0,025 моль) в ИМР (100 мл) добавляли (К)-4(хлорметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (63; 4,87 г, 0,032 моль) и К2СО3(7,О г, 0,05 моль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 150°С в течение 10 ч, охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и затем экстрагировали при помощи ΕΏΑ^ Объединенные органические слои сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир/ΕΐΟΑс=10:1 с получением желаемого продукта, а именно (8)-2-бром- 37 020578
5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)бензальдегида 64 (4,1 г, 56%).
Стадия 2. Получение (8)-4-((4-бром-3-(дифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (65)
65
К раствору ΌΑ8Τ (3,04 г, 0,019 моль) в 20 мл СН2С12 добавляли по каплям раствор (8)-2-бром-5((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)бензальдегида (64; 4,0 г, 0,013 моль) в 8 мл СН2С12 при комнатной температуре. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Затем смесь разбавляли при помощи СН2С12 (50 мл), промывали водой, сушили (Ыа28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии (петролейный эфир/ΕΐОΑс=5:1) давала (8)-4-((4-бром-3-(дифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан 65 (3,3 г, 75%).
Стадия 3. Получение (8)-2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси) бензальдегида (66)
К раствору (8)-4-((4-бром-3-(дифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (65; 3 г, 0,089 моль) в ТГФ (30 мл) добавляли п-ВцН (2,5Μ раствор в гексане, 3,9 мл, 0,097 моль) при -78°С. Смесь перемешивали при указанной температуре в течение 1 ч и добавляли по каплям ΌΜΡ (0,929 г, 0,103 моль). После перемешивания при -78°С еще в течение 20 мин, добавляли насыщенный водный раствор МН4С1 (30 мл). Полученную реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и экстрагировали при помощи БрО (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (Яа28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир/ΕΐОΑс=5:1) с получением указанного в заголовке соединения, а именно, (8)-2-(дифторметил)4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)бензальдегида 66 (1,83 г, 72%).
Стадия 4. Получение (8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоновой кислоты (67)
К раствору (8)-2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)бензальдегида (66; 1,83 г, 6,40 ммоль) в ΌΜΡ (150 мл) добавляли 2,3-диаминобензойную кислоту (1; 0,97 г, 6,40 ммоль) и Ыа282О5 (1,82 г, 9,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением (8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4ил)метокси)фенил)-1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоновой кислоты 67 в виде темно-желтого твердого вещества (0,84 г, 51%). Μ8 (Ε8Ι) рассчитано для СУШРзАОб 418,13; найдено: 419 [М+Н].
Стадия 5. Получение (8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)Ы-(3Н-пиррол-2-ил)-1Н-бензо[0]имидазол-4-карбоксамида (68)
(8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-1Н-бензо[4]имидазол4-карбоновая кислота (67; 100 мг, 0,239 ммоль) поглащалась в 10 мл ΌΜΡ вместе с 2-аминотиазолом (4; 28,7 мг, 0,289 ммоль), НАТИ (181,7 мг, 0,478 ммоль) и ΌΙΕΑ (61,8 мг, 0,289 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и разбавляли водой. Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили. Очистка при помощи хроматографии (ΕΐОΑс/гексан=2:1) давала (8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[0]имидазол-4-карбоксамид 68 (77 мг, 65%). Μ8 (Ε8Ι) рассчитано для
- 38 020578
С24Н22Р2Ы4О48: 500,13; найдено: 501 [М+Н].
Стадия 6. Получение (К)-2-(2-(дифторметил)-4-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 556)
К раствору (8)-2-(2-(дифторметил)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-Ы-(тиазол2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (68; 80 мг, 0,160 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли концентрированную НС1 (1 мл) и воду (1 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли достаточное количество 1н раствора ЫаОН для доведения рН 8-9. Полученную смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии (петролейный эфир/ЕЮАс=2:1) давала (К)-2-(2-(дифторметил)-4-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамид (соединение 556) (67 мг, 91%). Μδ (Ε8Ι) рассчитано для С21Н18Р2Ы4О48.
Пример 22. Синтез 6-морфолино-Ы-(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол4-карбоксамида (соединение 628).
Стадия 1. Получение 3-амино-5-хлор-2-нитробензойной кислоты (77)
К смеси трет-бутоксида калия (38,9 г, 0,347 моль) и ацетата меди(11) моногидрата (0,9 г, 4,96 ммоль) в ΌΜΡ (160 мл) добавляли раствор О-метилгидроксиламингидрохлорида (8,3 г, 99,3 ммоль) и 3-хлор-6нитробензойную кислоту (69; 10 г, 49,6 ммоль) в ΌΜΡ (160 мл) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 3 ч. Затем смесь гасили водой, подкисляли при помощи 10% раствора НС1 и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (№ШО.-|) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглащался в ЕЮАс и экстрагировали 10% водным раствором ЫаОН. Объединенные водные слои подкисляли при помощи концентрированной НС1 до рН 3 и затем экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-амино-5-хлор-2нитробензойной кислоты 70 (6,5 г, 60,5%) в виде коричневато-красного твердого вещества.
Стадия 2. Получение метил 3-амино-5-хлор-2-нитробензоата (71)
Концентрированную Н^О4 (1,5 мл) добавляли к смеси 3-амино-5-хлор-2-нитробензойной кислоты (70; 3,5 г, 16,2 ммоль) в МеОН (120 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 дней. Затем смесь нейтрализовали насыщенным водным раствором Ыа2СОз и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии давала метил 3-амино-5-хлор-2-нитробензоат 71 (3,3 г, 88,5%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 3. Получение метил 3-амино-5-морфолино-2-нитробензоата (72)
К раствору 3-амино-5-хлор-2-нитробензоата (71; 3,3 г, 14,35 ммоль) в ΌΜΡ (66 мл) добавляли морфолин (48; 7,12 г, 81,78 ммоль) и К2СО3 (11,28 г, 81,78 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 4 ч. Затем смесь фильтровали, разбавляли водой (500 мл) и экстрагировали
- 39 020578 при помощи ΕΏΑ^ Объединенные органические слои сушили ^а^ОЭ и концентрировали при пониженном давлении. Колоночная хроматография давала метил 3-амино-5-морфолино-2-нитробензоат 72 (2,1 г, 52,1%) в виде коричневого желтого твердого вещества.
Стадия 4. Получение метилового эфира 2,3-диамино-5-морфолин-4-ил-бензойной кислоты (73)
Раствор метил 3-амино-5-морфолино-2-нитробензоата (72; 2,1 г, 7,5 ммоль) в ΕΏΗ (100 мл) гидрировали над 5% Рй/С (200 мг) при комнатной температуре. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением метилового эфира 2,3-диамино-5-морфолин4-ил-бензойной кислоты 73 (1,3 г, 69,5%) в виде коричневого желтого твердого вещества.
Стадия 5. Получение метилового эфира 6-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметил-фенил)-1Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты (75)
К смеси метилового эфира 2,3-диамино-5-морфолин-4-ил-бензойной кислоты (73; 600 мг, 2,39 ммоль) в ΕΏΗ (60 мл) добавляли метабисульфит натрия (373 мг, 1,96 ммоль), Н2О (2 мл) и 2трифторметилбензальдегид (74; 990 мг, 5,69 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии давала метиловый эфир б-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметил-фенил)-1Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 75 (670 мг, 69,2%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 6. Получение 6-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметил-фенил)-1Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты (76)
Смесь, содержащую метиловый эфир 6-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметил-фенил)-1Нбензоимидазол-4-карбоновой кислоты (75; 670 мг, 1,65 ммоль) в 1М №ЮН (27 мл) перемешивали при 70°С в течение 30 мин. Реакционную смесь нейтрализовали при помощи 10% водного раствора НС1. Полученный осадок собирали фильтрованием и сушили с получением 6-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметилфенил)-1Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 76 (600 мг, 93%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия 7. Получение 6-морфолино-Ю(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 628)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 6морфолино-Ю(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 628) из 6-морфолин-4-ил-2-(2-трифторметил-фенил)-1Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 76 и 2-аминотиазола 4. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С22Н18Рз^О28: 473,11; найдено: 474 [М+Н].
Пример 23. Получение Ю(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7карбоксамида (соединение 341).
Стадия 1. Получение этилового эфира 4-амино-5-нитро-никотиновой кислоты (78)
КМОэ/Н28О4 Ν^γΜΟί!
ЁЮН ί!^''ΝΗ2
СО2Е|
- 40 020578
Нитрат калия (20,5 г, 200 ммоль) добавляли к охлажденному льдом раствору 4-амино пиридин-3карбоновой кислоты (77; 27,6 г, 200 ммоль) в 200 мл концентрированной Н^О4. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин и затем при 75 °С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли этанол (540 мл) при перемешивании. Полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 18 ч и затем медленно добавляли к охлажденному льдом раствору ацетата калия (800 г в 1500 мл Н2О). Полученный осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили с получением этилового эфира 4-амино-5-нитро-никотиновой кислоты 78 (14,6 г, 35%).
Стадия 2. Получение этилового эфира 4,5-диамино-никотиновой кислоты (79)
Смесь, содержащую этиловый эфир 4-амино-5-нитро-никотиновой кислоты (78; 15 г, 0,071 моль) и 10% Рб/С (500 мг) в МеОН (500 мл), перемешивали в атмосфере водорода, 1 атм, при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением этилового эфира 4,5-диамино-никотиновой кислоты 79 (10 г, 80%).
Стадия 3. Получение этилового эфира 2-(2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7карбоновой кислоты (80)
Смесь, содержащую этиловый эфир 4,5-диамино-никотиновой кислоты (79; 1,81 г, 10 ммоль), 2трифторметилбензальдегид (1,9 г, 11 ммоль), №^2О5 (9,5 г, 50 ммоль) в 50 мл ИМР, перемешивали при 120°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в 100 мл холодной воды. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием, промывали водой и сушили с получением этилового эфира 2-(2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты 80 (2,35 г, 70%).
Стадия 4. Получение 2-(2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты (81)
Этиловый эфир 2-(2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты (80; 2,35 г, 7 ммоль) поглащался в 10% водный раствор №ЮН (40 мл) и этанол (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь подкисляли при помощи 5н раствора НС1. Полученное желтое твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили с получением 2-(2трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты 81 (1,77 г, 85%).
Стадия 5. Получение ^(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоксамида (соединение 341)
Использовали общую процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения ^(тиазол-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоксамида (соединение 341) из 2-(2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты 81 и 2-аминотиазола 4. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С17Н10РзΝ5Оδ: 389,06; найдено: 390 [М+Н].
Пример 24. Синтез тиазол-2-иламида 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин7-карбоновой кислоты (соединение 693).
- 41 020578
Стадия 1. Получение этилового эфира 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с] пиридино-карбоновой кислоты (83)
Смесь, содержащую этил 4,5-диаминоникотинат (79; 0,9 г, 5 ммоль) и 4-фтор-2-(трифторметил) бензальдегид (82; 1,0 г, 5,2 ммоль) в нитробензоле (50 мл), перемешивали при 220°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли простым эфиром. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием, промывали простым эфиром и сушили с получением этилового эфира 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты 83 (600 мг, 39%).
Стадия 2. Получение тиазол-2-иламида 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с] пиридин-7-карбоновой кислоты (соединение 693)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше, для получения тиазол-2-иламида 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7-карбоновой кислоты (соединение 693) с использованием этилового эфира 2-(4-фтор-2-трифторметил-фенил)-3Н-имидазо[4,5-с]пиридин-7карбоновой кислоты 83 в качестве подходящего исходного вещества. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С17Η9Ρ4Ν50δ: 407,05; найдено: 408 [М+Н].
Пример 25. Синтез 6-метокси-Ы-(пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол4-карбоксамида (соединение 632).
Стадия 1. Получение О-метилгидроксиламина (84).
Гидрохлорид метоксиламина обрабатывали избыточным количеством 50% раствора КОН в небольшом перегонном аппарате для одного образца. Полученную смесь нагревали до 80°С и фракцию, которая перегонялась при 45-50°С, собирали в принимающую колбу, содержащую гранулы КОН.
Стадия 2. Получение 3-амино-5-метокси-2-нитробензойной кислоты (85)
Раствор свежеперегнанного о-метилгидроксиламина (3,00 г, 53,6 ммоль) и 3-амино-5-метокси-2нитробензойной кислоты (84; 5,33 г, 27,0 ммоль) в ΌΜΕ (100 мл) добавляли по каплям к перемешиваемой суспензии ТВиОН (7 экв.) и Си(ОАс)2 (10 мол.%) в ΌΜΕ (50 мл) в течение 10 мин при комнатной температуре. После перемешивания в течение 4-8 ч при комнатной температуре смесь гасили водой и добавляли достаточное количество концентрированной НС1 для доведения рН 3. Полученную смесь экстрагировали при помощи БЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии (СΗС13-ΜеΟΗ-ΑсΟΗ=8:2:0,1) давала 3амино-5-метокси-2-нитробензойную кислоту в виде темно-желтого твердого вещества 85 (4,62 г).
Стадия 3. Получение 2,3-диамино-5-метоксибензойной кислоты (86)
3-Амино-5-метокси-2-нитробензойную кислоту (85; 1,6 г, 7,5 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл) и добавляли 10% Рй/С (300 мг). Полученную реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода, 1 атм, при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2,3-диамино-5-метоксибензойной кислоты 86 (0,7 г).
- 42 020578
Стадия 4. Получение 6-метокси-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (87)
Смесь 2,3-диамино-5-метоксибензойной кислоты 86 (1,1 экв.) и 2-(трифторметил)бензальдегида 74 (1 экв.) и метабисульфит натрия (3 экв.) в ΌΜΡ перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли водой. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением 6-метокси2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 87 в виде темно-желтого твердого вещества (40%).
Стадия 5. Получение 6-метокси-И-(пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 632)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 6метокси-И-(пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 632) из 6-метокси-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 87 и 2аминопиридина 89. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для Ο21Η15Ρ3Ν4Ο2: 412,11; найдено: 413 [М+Н].
Пример 26. Синтез ^(6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 620).
Стадия 1. Получение этил 6-аминопиколината (91)
К раствору 2-амино-6-пиридинкарбоновой кислоты (90; 6,0 г, 43,5 ммоль) в этаноле (150 мл) добавляли δΟΟ12 (12,0 г, 101 ммоль) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора Ν;·ι2ίΌ3 для доведения рН 9. Смесь концентрировали при пониженном давлении и к полученному остатку добавляли дихлорметан (150 мл). Смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением этил 6-аминопиколината 91 (5,5 г, 76%).
Стадия 2. Получение этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)пиколината (92)
Η2Ν-ΑΙ. .СО2Е1
V”
К раствору этил 6-аминопиколината (91; 5,5 г, 33 ммоль) в 1-ΒιιΟΗ (120 мл) и ацетоне (40 мл) добавляли ΌΜΑΡ (0,08 г, 0,66 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (10,8 г, 49,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли концентрированием при пониженном давлении и добавляли смесь гексан/дихлорметан (180 мл, 3:1). Полученную смесь охлаждали до -20°С в течение 2 ч. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)пиколината 92 (11,0 г, 91%).
Стадия 3. Получение трет-бутил 6-(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамата (93)
ΒοοΗΝ^Ν^,ΟΟζΕί ΒοοΗΝ^Ν^ΟΗίΟΗ — V .,
К перемешиваемому раствору этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)пиколината (92; 11,0 г, 33 ммоль) в ТГФ (120 мл) в атмосфере азота добавляли ΡίΑ1Η4 (3,80 г, 100 ммоль) в ТГФ (60 мл) в течение 30 мин при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 6 ч и осторожно гасили путем добавления воды (2,0 мл) и 10% раствора ΝαΟΗ (4,0 мл) при 0°С. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (1:1 петролейный эфир:этилацетат) с получением трет-бутил 6-(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамата 93 (3,0 г, 41%).
- 43 020578
Стадия 4. Получение (6-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-2-ил)метилметансульфоната (94)
ВосНГк ^СН2ОН МаС1 ΒοοΗΝ-,Ν ^СН2ОМз
К раствору трет-бутил 6-(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамата (93; 3,0 г, 13,4 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (5,0 г, 40 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) добавляли МзС1 (2,0 г, 17,4 ммоль) в течение 30 мин при 0°С и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Ρеакцию гасили путем добавления насыщенного водного раствора ΝаΗСΟз и экстрагировали этилацетатом (3x60 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением, по существу, количественного выхода неочищенного (6-(третбутоксикарбониламино)пиридин-2-ил)метил метансульфоната 94.
Стадия 5. Получение трет-бутил 6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-илкарбамата (96)
Смесь, содержащую (6-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-2-ил)метилметансульфонат (94; 1,30 г, 3,2 ммоль), пирролидин (95; 0,46 г, 6,4 ммоль) и К2СО3 (1,30 г, 9,6 ммоль) в ацетонитриле (15 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Добавляли насыщенный водный раствор ΝаΗСΟ3 и смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный водный слой экстрагировали при помощи ЕТОАс. Объединенные органические слои сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил 6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-илкарбамата 96 (0,75 г, 2,7 ммоль, 62% для двух стадий).
Стадия 6. Получение 6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-амина (97)
К раствору трет-бутил 6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-илкарбамата (96; 750 мг, 2,7 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли ΤΡΑ (4,0 мл) при комнатной температуре. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора №-ьСО3 для доведения рН 9. Смесь затем экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 6(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-амина 97 (440 мг, 92%).
Стадия 7. Получение ^(6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 620)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения N-(6(пирролидин-1 -илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо [Д]имидазол-4 карбоксамида (соединение 620) из 2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоновой кислоты 3 и 6(пирролидин-1-илметил)пиридин-2-амина 97. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С25Н22Р3^О: 465,18; найдено: 466 [М+Н].
Пример 27. Синтез ^(5-(пиперазин-1-илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо [Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 621).
Стадия 1. Получение этил 6-аминоникотината (99)
99 ^А^сОгЕ!
К раствору 2-амино-5-пиридинкарбоновой кислоты (98; 5,0 г, 36,2 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли δΟС12 (8,6 г, 72,4 ммоль) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем к реакционной смеси добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора №-ьСО3, для доведения рН 9. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением этил 6-аминоникотината 99 (5,64 г, 94%).
- 44 020578
Стадия 2. Получение этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)никотината (100) (Вос)2О „ХА
ОМАР
ΒοεΗΝ^,Ν
СОгЕ!
100
ΥΊι
СОгЕ1
К раствору этил 6-аминоникотината (99; 11,3 г, 68,3 ммоль) в ΐ-ΒиОΗ (120 мл) и ацетоне (40 мл) добавляли ΌΜΛΡ (0,17 г, 1,37 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (30,0 г, 137 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли смесь гексан/дихлорметан (180 мл, 3:1) и реакционную смесь охлаждали до -20°С в течение 2 ч. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)никотината 100 (17,0 г, 68%).
Стадия 3. Получение трет-бутил 5-(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамата (101)
1АН ВосНЩΛΙ ~ ДА
ΒοοΗΝ^.Жк
Υ1
100 ^'^'СОД 101 СНгОН
К перемешиваемому раствору этил 6-(трет-бутоксикарбониламино)никотината (100; 10,0 г, 27,3 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляли ЫЛЩ4 (1,92 г, 50,5 ммоль) в ТГФ (60 мл) в течение 30 мин при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 6 ч. Реакцию затем гасили путем осторожного добавления воды (1,0 мл) и 10% раствора NаОΗ (2,0 мл) при 0°С. Полученную смесь фильтровали и фильтрат сушили Ща28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (дихлорметан:метанол=40:1) с получением трет-бутил 5(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамата 101 (4,50 г, 74%).
Стадия 4. Получение (6-(трет-бутоксикарбониламино)лиридин-3-ил)метилметансульфоната (102)
ВосНМ маа ΒοεΗΝ. .Ν
101
СНгОН юг
О,
СН2ОМа
К смеси, содержащей трет-бутил 5-(гидроксиметил)пиридин-2-илкарбамат (101; 4,5 г, 20,2 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (16,0 г, 121 ммоль) в ТГФ (45 мл), добавляли ΜδΟ (6,93 г, 60,5 ммоль) в течение 30 мин при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Смесь затем промывали водой (2x5 мл), сушили Ща28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (10:1 петролейный эфир/этилацетат) с получением (6(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-3-ил)метилметансульфоната 102 (3,0 г, 61%).
Стадия 5. Получение бензил 4-((6-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-3-ил)метил)пиперазин-1карбоксилата (104)
А 01М
I] лк ВосНП Л ™ СЬ:
102 кАА
Смесь (6-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-3-ил)метилметансульфоната (102; 1,30 г, 5,4 ммоль), бензилпиперазин-1-карбоксилата 103 (1,42 г, 6,5 ммоль), К2СО3 (2,30 г, 16,1 ммоль) и ΝαΙ (0,08 г, 0,54 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) перемешивали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Добавляли воду (30 мл) и смесь фильтровали. Собранные твердые вещества промывали снова водой и сушили с получением бензил 4-((6-(третбутоксикарбониламино)пиридин-3-ил)метил)пиперазин-1-карбоксилата 104 (2,20 г, 96%).
Стадия 6. Получение бензил 4-((6-аминопиридин-3-ил)метил) пиперазин-1-карбоксилата (105)
К раствору бензил 4-((6-(трет-бутоксикарбониламино) пиридин-3-ил)метил)пиперазин-1карбоксилата (104; 2,20 г, 5,20 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли ТРА (3,4 г, 31,2 ммоль) при комнатной температуре.
Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора №-ьСО3 для доведения рН 9. Полученную смесь затем экстрагировали дихлорметаном (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ^^^ и концентрировали при пониженном давлении с получением бензил 4-((6-аминопиридин-3-ил) метил) пиперазин-1-карбоксилата 105 (1,50 г, 89%).
- 45 020578
Стадия 7. Получение бензил 4-((6-(2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамидо)пиридин-3 -ил)метил)пиперазин-1 -карбоксилата (106)
2-(2-(Трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновую кислоту (3; 306 мг, 1,0 ммоль) и бензил 4-((6-аминопиридин-3-ил)метил)пиперазин-1-карбоксилат 105 подвергали общей процедуре амидного связывания, которая подробно описана выше, для получения бензил 4-((6-(2-(2(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)пиперазин-1-карбоксилата 106 (280 мг, 45,6%).
Стадия 8. Получение ^(5-(пиперазин-1-илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 621)
К раствору бензил 4-((6-(2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамидо) пиридин-3-ил)метил)пиперазин-1-карбоксилата (106; 280 мг, 0,46 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли Рб/С (0,1 г, 5% на углероде). Реакционную смесь перемешивали в условиях 1 атм Н2 в течение 12 ч и затем фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (дихлорметан:метанол=5:1) с получением N-(5(пиперазин-1-илметил)пиридин-2-ил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 621) (28,0 мг, 13%). Μδ (Εδ^ рассчитано для ^5Η23Ρ3Ν6Ο: 480,19; найдено: 481 [М+Н].
Пример 28. Синтез 2-(5-фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(5-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 624).
Стадия 1. Получение трет-бутил 5-(морфолинометил)пиридин-2-илкарбамата (107)
Смесь, содержащую (6-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-3-ил) метилметансульфонат (102; 1,21 г, 5,0 ммоль), морфолин (48; 1,31 г, 15,0 ммоль), Κ2ίΌ3, (2,10 г, 15,0 ммоль) и NаI (0,12 г, 0,75 ммоль) в ΌΜΡ (30 мл), перемешивали при 80°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (30 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3x30 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1 до 1:1) с получением трет-бутил 5-(морфолинометил)пиридин-2-илкарбамата 107 (1,40 г, 95%).
Стадия 2. Получение 5-(морфолинометил)пиридин-2-амина (108)
К раствору трет-бутил 5-(морфолинометил)пиридин-2-илкарбамата (107; 1,40 г, 4,77 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли ΤΡΑ (10,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора Ν;·ι3ί'Ό3, к полученному остатку для доведения рН 9. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 5-(морфолинометил)пиридин-2-амина 108 (0,85 г, 92%).
- 46 020578
Стадия 3. Получение 2-(5-фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(5-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 624)
5ОС|г ηζΝ ΕΐΟΗ 2
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 2-(5фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(5-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 624) из 5-(морфолинометил)пиридин-2-амина 108 и 2-(5-фтор-2-(трифторметил) фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 109. Мδ (ΕδΙ) рассчитано для С25Н21Р4^О2: 499,16; найдено: 500 [М+Н].
Пример 29. Синтез 2-(5-фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(6-(морфолинометил)пиридин-3-ил)-1Нбензо [й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 686).
Стадия 1. Получение этил 5-аминопиколината (111)
110^4θ2Η 111 'С0гЕ1
К раствору 5-аминопиколиновой кислоты (110; 8,4 г, 60,8 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли δОС12 (14,5 г, 120 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора №-ьС.'О3 добавляли для доведения рН 9. Полученную смесь фильтровали и твердые вещества сушили при пониженном давлении с получением этил 5-аминопиколината 111 (7,5 г, 75%).
Стадия 2. Получение этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)пиколината (112) (Вос)2О
Η2Ν
111
СО2Ё(
112
СОгЕ1
ВосНМ^^
112
К смеси этил 5-аминопиколината (111; 7,5 г, 45 ммоль) в ΐ-ВиОН (60 мл) и ацетоне (20 мл) добавляли ОМАР (0,10 г, 0,9 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (19,6 г, 90 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли гексан (150 мл) и смесь охлаждали до -20°С в течение 2 ч. Осажденные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением этил 5-(третбутоксикарбониламино)пиколината 112 (8,9 г, 53%).
Стадия 3. Получение трет-бутил 6-(гидроксиметил)пиридин-3-илкарбамата (113)
ΙΑΗ ΒοίΗΝ·-^'ρ 'СОгЕ( 113 ^^СНгОН
К перемешиваемому раствору этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)пиколината (112; 8,9 г, 24,0 ммоль) в этиловом эфире (200 мл) добавляли Ь1А1Н4 (1,80 г, 48 ммоль) в этиловом эфире (100 мл) в течение 30 мин при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч и затем осторожно гасили путем осторожного добавления воды (1,0 мл) и 10% раствора №ГОН (2,0 мл). Смесь фильтровали; фильтрат сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением третбутил 6-(гидроксиметил)пиридин-3-илкарбамата 113 (4,20 г, 78%).
Стадия 4. Получение (5-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-2-ил)метилметансульфоната (114) ΒοοΗΝ^ίχ^ МбС1 ΒμΗΝ^γχ^
113 ^Чх%СН20Н 114
К раствору трет-бутил 6-(гидроксиметил)пиридин-3-илкарбамата (113; 4,20 г, 18,8 ммоль) и ΌΙΡΕΛ (7,0 г, 56,4 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли МзС1 (2,8 г, 24,4 ммоль) в течение 30 мин при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора ΝаΗСО3. Смесь экстрагировали этилацетатом (3x60 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением (5-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-2-ил) метилметансульфоната 114 (5,50 г). Это вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
- 47 020578
Стадия 5. Получение трет-бутил 6-(морфолинометил)пиридин-3-илкарбамата (115)
Смесь, содержащую (5-(трет-бутоксикарбониламино)пиридин-2-ил)метилметансульфонат (114; 1,70 г), морфолин (48; 1,0 г, 11,3 ммоль) и К2СО3 (2,30 г, 16,9 ммоль) в ацетонитриле (30 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Добавляли воду (30 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3x30 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=1:1 до 1:3) с получением трет-бутил 6-(морфолинометил)пиридин-3-илкарбамата 115 (1,20 г, 71% для двух стадий).
Стадия 6. Получение 6-(морфолинометил)пиридин-3-амина (116)
ΒοοΗΝ
115
ШЗ АХиЗ
К раствору трет-бутил 6-(морфолинометил)пиридин-3-илкарбамата (115; 1,20 г, 4,1 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли ΤΡΑ (6,0 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли достаточное количество насыщенного водного раствора №гС'О3 к остатку для доведения рН 9. Смесь экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 6-(морфолинометил)пиридин-3-амина 116 (450 мг, 56%).
Стадия 7. Получение 2-(5-фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(6-(морфолинометил)пиридин-3-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 686)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 2-(5фтор-2-(трифторметил)фенил)-^(6-(морфолинометил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 686) из 6-(морфолинометил)пиридин-3-амина 116 и 2-(5-фтор-2-(трифторметил) фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 109. Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С25Н21Р4^О2: 499,16; найдено: 500 [М+Н].
Пример 30. Синтез ^(5-метилтиазол-2-ил)-2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 703).
Стадия 1. Получение метил 2,3-диаминобензоата (118)
Метил 2-амино-3-нитробензоат (117; 3,2 г) растворяли в ΕΐΟΑс (100 мл) и добавляли 10% Рй/С (200 мг). Полученную реакционную смесь гидрировали в атмосфере водорода, 1 атм, при комнатной температуре в течение 2 дней и фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением, по существу, количественного выхода метил 2,3-диаминобензоата 118.
Стадия 2. Получение 2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (119)
4-(Трифторметил)никотиновая кислота (88; 1,00 г, 5,23 ммоль) поглащалась в ΌΜΡ (8 мл) вместе с метил 2,3-диаминобензоатом (118; 0,86 г, 5,23 ммоль), НАТО (2,98 г, 7,84 ммоль) и ОША (1,82 мл, 10,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь разбавляли при помощи ΕΐΟΑс, промывали водой, сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного метил 2-амино-3-(4-(трифторметил)никотинамидо)бензоата. Это вещество поглащалось в 5 мл ледяной уксусной кислоты и перемешивали при 60°С в течение 18 ч. Реак- 48 020578 ционную смесь перемешивали при 90°С еще в течение 8 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли при помощи ЕЮАс, промывали разбавленным водным раствором ΝаНСОз, сушили Ща^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного метил 2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Нбензо [б] имидазол-4-карбоксилата.
Это вещество поглащалось в МеОН (8 мл) и Н2О (8 мл), содержащей ПОН (0,4 г), и перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и нейтрализовали 6 н раствором НС1. Полученные твердые вещества собирали фильтрованием и сушили с получением 570 мг 2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты (35% выход, исходя из метил 2,3-диаминобензоата) 119. Μδ ^δΐ) рассчитано для С!4Н8Р3ЩО2: 307,06; найдено: 308 [М+Н].
Стадия 3. Получение ^(5-метилтиазол-2-ил)-2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 703)
2-(4-(Трифторметил)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновую кислоту 119 подвергали сочетанию с 2-амино-5-метилтиазолом 171 с использованием общей процедуры амидного связывания, которая показана выше, с получением ^(5-метилтиазол-2-ил)-2-(4-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 703). Μδ ^δΐ) рассчитано для С18Н12Р3Ν50δ: 403,07; найдено: 404 [М+Н].
Пример 31. Синтез 2-(2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)^-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо [б]имидазол-7-карбоксамида (соединение 723).
Стадия 1. Получение 2-бром-5-(2-морфолиноэтокси)бензальдегида (121)
К смеси 2-бром-5-гидроксибензальдегида (62; 3 г, 15 ммоль) и 4-(2-хлорэтил) морфолингидрохлорида (120; 5,6 г, 30 ммоль) в ИМР (75 мл) добавляли К2СО3 (10,3 г, 74,6 ммоль). После взаимодействия в течение при 120°С в течение 3 ч реакционную смесь гасили путем добавления воды и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Органический слой сушили над №^О4 и концентрировали при пониженном давлении. Колоночная хроматография давала 2-бром-5-(2-морфолиноэтокси)бензальдегид 121 (3,3 г, 72%) в виде коричневого твердого вещества.
Стадия 2. Получение 4-(2-(4-бром-3-(дифторметил)фенокси)этил)морфолина (123)
К раствору 2-бром-5-(2-морфолиноэтокси)бензальдегида (121; 4,7 г, 15 ммоль) в СН2С12 (30 мл) добавляли раствор ΌΑδΤ (3,63 г, 22,5 ммоль) в СН2С12 (15 мл) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 дней. Реакционную смесь выливали в насыщенный водный раствор ΝаНСО3 и экстрагировали при помощи СН2С12. Объединенные органические слои сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Колоночная хроматография давала 4-(2-(4-бром-3-(дифторметил)фенокси)этил)морфолин 123 (3,13 г, 63%) в виде бледно-желтого масла.
Стадия 3. Получение 2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)бензальдегида (124)
К раствору 4-(2-(4-бром-3-(дифторметил)фенокси)этил)морфолина (123; 2,8 г, 8,38 ммоль) в ТГФ (90 мл) добавляли и-ВиЫ (1,6 М раствор в гексане, 7 мл, 11,2 ммоль) при -78°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 1 ч и добавляли по каплям ИМР (1,24 г,
- 49 020578 ммоль). После перемешивания смеси при -78°С еще в течение 30 мин добавляли насыщенный водный раствор ИН4С1 и смесь экстрагировали при помощи ΕΏΑα Объединенные органические слои сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии давала 2(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)бензальдегид 124 (1,6 г, 67%) в виде коричневого желтого масла.
Стадия 4. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-7карбоновой кислоты (125)
2,3-Диаминобензойную кислоту (1; 222 мг, 1,5 ммоль) и соответствующий 2-(дифторметил)-4-(2морфолиноэтокси)бензальдегид 124 подвергали такой же общей процедуре, которая подробно описана выше, для получения 2-(2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-7карбоновой кислоты 125 (300 мг, 48%).
Стадия 5. Получение 2-(2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)-Н-(пиридин-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-7-карбоксамида (соединение 723)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 2-(2(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)-Н-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-7-карбоксамида (соединение 723) из 2-(2-(дифторметил)-4-(2-морфолиноэтокси)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-7карбоновой кислоты 125 и 2-аминопиридина 89. М8 (Е8Ц рассчитано для С25Н21Р4Н5О2: 499,16; найдено: 500 [М+Н].
Пример 32. Синтез (К)-2-(4-(2,3-дигидроксипропокси)-2-(трифторметил)фенил)-Н-(пиридин-2-ил)1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 757).
Стадия 1. Получение (8)-4-((4-бром-3-(трифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (127)
(8)-4-(Хлорметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан (63; 3,3 г, 20,5 ммоль) добавляли к смеси, содержащей 4-бром-3-(трифторметил) фенол (126; 5 г, 20 ммоль) и К2СО3 (8,30 г, 60 ммоль) в 20 мл ИМР. Полученную реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь выливали в воду и экстрагировали при помощи ΕΏΑα Объединенные органические слои сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:ΕΐΟΑс=50:1) с получением (8)-4-((4-бром-3(трифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (4 г, 56%).
Стадия 2. Получение (8)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил) бензальдегида (128)
Раствор пВиЫ в гексане (6,76 мл, 1,6 М в гексане) добавляли по каплям к раствору (8)-4-((4-бром-3(трифторметил)фенокси)метил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (127; 3,20 г, 9 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 78°С в течение 30 мин. После перемешивания еще в течение 10 мин добавляли ИМР (1,4 мл) по каплям в течение 10 мин. Полученную реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. Затем смесь гасили водой и экстрагировали при помощи ΕΏΑα Объединенные органические слои сушили (№28О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:ΕΐΟΑс=50:1) с получением (8)-4-((2,2диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил)бензальдегида 128.
Стадия 3. Получение (8)-2-(4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил)фенил)1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты (129)
- 50 020578
^)-4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил)бензальдегид 128 подвергали взаимодействию с 2,3-диаминобензойной кислотой 1, следуя общей процедуре, аналогичной описанной выше, для получения ^)-2-(4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 129.
Стадия 4. Получение (К)-2-(4-(2,3-дигидроксипропокси)-2-(трифторметил)фенил)-Н-(пиридин-2ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 757)
^)-2-(4-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол4-карбоновую кислоту 129 подвергали взаимодействию с 2-аминопиридином 89 с использованием такой же последовательности реакций, как описано в примере 25, стадия 5, с получением (К)-2-(4-(2,3дигидроксипропокси)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 757). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С23Н19р3Ы5О4: 472,14; найдено: 473 [М+Н].
Пример 33. Синтез ^)-М-(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо [й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 725).
Стадия 1. Получение (К)-2,2-диметил-4-((3-нитрофенокси)метил)-1,3-диоксолана (132)
3-Нитрофенол (130; 2,0 г, 14,37 ммоль) поглащался в 20 мл безводного ΌΜΡ вместе с безводным карбонатом калия (4,96 г, 35,93 ммоль) и (К)-4-(хлорметил)-2,2-диметил-1,3-диоксоланом (131; 2,55 мл, 18,68 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревали в микроволновом реакторе при перемешивании при 160°С в течение 4 ч. Неочищенную реакционную смесь промывали водой, фильтровали и экстрагировали дихлорметаном (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с использованием этилацетата:пентана с получением желаемого продукта 132 в виде масла янтарного цвета (52%).
Стадия 2. Получение (К)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)анилина (133)
В атмосфере азота объединяли Ре порошок (2,38 г, 42,54 ммоль) и ЯН4С1 (2,38 г, 42,54 ммоль), с последующим добавлением (К)-2,2-диметил-4-((3-нитрофенокси)метил)-1,3-диоксолана (132; 1,8 г, 7,09 ммоль) и 4:1 смеси изопропанол:вода (30 мл:10 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Неочищенное вещество фильтровали через слой целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный водный слой экстрагировали дихлорметаном (3x15 мл). Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением (К)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)анилина 133 (1,2 г, 79% выход). Это вещество использовали на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
- 51 020578
Стадия 3. Получение (К)-№(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (134)
2-(2-(Трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновая кислота (3; 75 мг, 0,24 ммоль) поглащалась в ΝΜΡ (2 мл) вместе с (К)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)анилином (133; 64,3 мг, 0,288 ммоль) и НАТи (186 мг, 0,49 ммоль). Добавляли ΌΙΕΑ (81 мкл, 0,49 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Температуру затем повышали до 60°С и реакционную смесь оставляли для перемешивания еще в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и фильтровали. Собранные твердые вещества подвергали дальнейшей очистке при помощи хроматографии на силикагеле с получением желаемого продукта 134, в виде желтого твердого вещества (51,5 мг, 42%).
Стадия 4. Получение ^)-^(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 725)
К раствору (К)-^(3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-2-(2-(трифторметил)фенил)1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (134; 51,5 мг, 0,1 ммоль) в 3 мл ТГФ добавляли 4 н раствор НС1 по каплям до момента, когда можно было наблюдать изменение цвета, раствор темнел, в этот момент добавляли еще 1 мл НС1 и раствор оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи МеОН и затем концентрировали при пониженном давлении. Полученную желтоватую суспензию очищали при помощи препаративной ВЭЖХ. Желаемый продукт (Соединение 725) получали в виде белого твердого вещества (32,5 мг, 64%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С24Н20Р^3О4: 471,14; найдено: 472 [М+Н].
Пример 34. Синтез 2-(3-(2,6-диметилморфолино)фенил)^-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоксамида (соединение 576).
Стадия 1. Получение 2-(3-бромфенил)-1,3-диоксана (136)
135 136
Смесь, содержащую 3-бромбензальдегид (135; 18,5 г, 100 ммоль), пропан-1,3-диол (9,1 г, 120 ммоль) и ТкОН (0,1 г) в толуоле (200 мл), перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в ловушке Дина-Старка в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь промывали 5% водным раствором №-ьС.'О3 (200 мл), сушили (№^О4) и концентрировали при пониженном давлении с получением, по существу, количественного выхода неочищенного 2-(3-бромфенил)-1,3диоксана 136 в виде желтого масла (25 г).
Стадия 2. Получение 3-(2,6-диметилморфолино)бензальдегида (137)
Смесь, содержащую 2-(3-бромфенил)-1,3-диоксан (136; 2,0 г, 8,23 ммоль), 2,6-диметилморфолин (122; 1,14 г, 9,88 ммоль), Рй2(йЬа)3 (50 мг), №Ю1-Ви (1,39 г, 14,0 ммоль) и ΒιΝΑΡ (100 мг) в 20 мл толуола, перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли достаточное количество холодного раствора 1н НС1 (50 мл) для доведения рН 1. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли №ЮН (водн.) для доведения рН 11. Водную смесь экстрагировали при помощи СН2С12 (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили (М^О4) и концентрировали при пониженном дав- 52 020578 лении. Очистка при помощи хроматографии (петролейный эфир:ΕΐОΑс=10:1) давала 3-(2,6диметилморфолино)бензальдегид 137 в виде желтого масла (1,36 г, выход: 72%).
Стадия 3. Получение 2-(3-((2,6-диметилморфолино)фенил)-1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоновой кислоты (138)
2,3-Диаминобензойную кислоту (1; 0,94 г, 6,2 ммоль) и 3-(2,6-диметилморфолино)бензальдегид (137; 1,36 г, 6,2 ммоль) подвергали такой же общей процедуре, как описано выше, для получения 2-(3((2,6-диметилморфолино)фенил)-1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоновой кислоты 138 с 87% выходом (1,9 г).
Стадия 4. Получение 2-(3-(2,6-диметилморфолино)фенил)-И-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[4]имидазол-4карбоксамида (соединение 576)
Использовали процедуру амидного связывания, подробно описанную выше, для получения 2-(3(2,6-диметилморфолино)фенил)-И-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[0]имидазол-4-карбоксамида (соединение 576) из 2-(3-((2,6-диметилморфолино)фенил)-1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоновой кислоты 138 и 2-аминотиазола 4. Μ8 (Ε8Ι) рассчитано для С23Н25Р2Н5О3: 433,16; найдено: 434 [М+Н].
Пример 35. Синтез (К)-2-(2-(дифторметил)фенил)-И-(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-6-фтор1Н-бензо[4]имидазол-4-карбоксамида (соединение 811).
Стадия 1. Получение 5-фтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бензойной кислоты (140)
2-Амино-5-фторбензойная кислота (139; 1,0 г, 6,4 ммоль) поглащалась в 10 мл безводного ТГФ и полученную смесь охлаждали до 0°С. Затем добавляли 2,2,2-трифторуксусный ангидрид (3,6 мл) по каплям при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток обрабатывали при охлаждении льдом и полученный осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили с получением 5-фтор-2-(2,2,2трифторацетамидо)бензойной кислоты 140 (1,3 г, 80%).
Стадия 2. Получение 5-фтор-3-нитро-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бензойной кислоты (141)
5-Фтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бензойную кислоту (140; 1,29 г, 5,1 ммоль) добавляли небольшими порциями к дымящей азотной кислоте (7 мл) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем выливали в ледяную воду (10 мл). Полученный осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили с получением 5-фтор-3-нитро-2-(2,2,2трифторацетамидо)бензойной кислоты 141 (1,2 г, 80%).
Стадия 3. Получение 2-амино-5-фтор-3-нитробензойной кислоты (142)
К раствору 5-фтор-3-нитро-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бензойной кислоты (141; 1,2 г, 4,1 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли 10% водный раствор гидроксида натрия (20 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученное оранжевое твердое вещество подкисля- 53 020578 ли при помощи разбавленной НС1, фильтровали и сушили с получением 2-амино-5-фтор-3нитробензойной кислоты 142 (0,73 г, 90%).
Стадия 4. Получение 2,3-диамино-5-фторбензойной кислоты (143)
2-Амино-5-фтор-3-нитробензойную кислоту (142; 0,73 г) растворяли в метаноле (10 мл). К этому раствору добавляли 5% Рй/С (0,1 г). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода, 1 атм, в течение 18 ч и затем фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2,3-диамино-5-фторбензойной кислоты 143 в виде коричневого твердого вещества (0,59 г, 95%).
Стадия 5. Получение 2-(2-(дифторметил)фенил)-5-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-7-карбоновой кислоты (144)
2,3-Диамино-5-фторбензойную кислоту (143; 0,826 г, 5,29 ммоль) и 2-(дифторметил)бензальдегид 144 подвергали такой же общей процедуре, как описано выше, для получения 2-(2-(дифторметил)фенил)5-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-7-карбоновой кислоты 145, которую получали с 65% выходом (0,7 г). Μδ (Εδΐ) рассчитано для С^НдР^Оу 306,6; найдено: 307 [М+Н].
Стадия 6. Получение ^^-^-(дифторметил^енилЦЮ^-^Д-диметил-СЗ-диоксоланЧ-ил) метокси)фенил)-6-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (147)
2-(2-(Дифторметил)фенил)-5-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-7-карбоновую кислоту (145; 250 мг, 0,82 ммоль) подвергали сочетанию с ^-З-^Д-диметил-СЗ-диоксоланЧ-ил^етоксиЦнилином 146 (полученным, как описано для 133 в примере 33, стадии 1-2, кроме использования (8)-4-(хлорметил)-2,2диметил-1,3-диоксолана на стадии 1), как описано выше. (§)-2-(2-(Дифторметил)фенил)-№(3-((2,2диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-6-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамид 147 получали с 48% выходом (200 мг). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С27Н24Р^3О4: 511,17; найдено: 512 [М+Н].
Стадия 7. Получение (К)-2-(2-(дифторметил)фенил)-Ю(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-6-фтор1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 811)
Десять капель концентрированной НС1 добавляли к раствору ^^-^-(дифторметил^енилЦЮр((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)фенил)-6-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (147; 200 мг, 0,391 ммоль) в метаноле (15 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении с получением (К)-2-(2(дифторметил)фенил)-Ю(3-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)-6-фтор-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 811) (160 мг, 87%). Μδ (ΕδΙ) рассчитано для С27Н24Р3^О4: 511,17; найдено: 512 [М+Н].
Пример 36. Синтез 2-(2-метилпиридин-3-ил)-Ю(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[й] имидазол-4-карбоксамида (соединение 814).
- 54 020578
Стадия 1. Получение 2-метилникотинальдегида (149)
К раствору 3-бром-2-метилпиридина (148; 10 г, 58,1 ммоль) в ТГФ (150 мл) добавляли п-ВиЫ (2,5 М, 25,6 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. Затем добавляли ΌΜΡ (1,30 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Реакцию гасили путем добавления водного раствора ЫН4С1. После нагревания до комнатной температуры смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с получением 2-метилникотинальдегида 149 (2,18 г, 31%).
Стадия 2. Получение 2-(2-метилпиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты (150)
2-Метилникотинальдегид (149; 2,18 г, 18 ммоль) подвергали стандартным условиям, используемым для получения замещенных бензимидазолов, путем взаимодействия с 2,3-диаминобензойной кислотой 1. Желаемый продукт, 2-(2-метилпиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновую кислоту 150, получали путем очистки с использованием хроматографии, с последующей кристаллизацией из ЕЮАс (0,43 г, 11%).
Стадия 3. Получение 2-(2-метилпиридин-3-ил)-Ы-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 814)
2-(2-Метилпиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновую кислоту 150 подвергали сочетанию с
6-морфолинометилпиридин-2-амином 172 (полученным, как описано в примере 29, стадии 1-6, кроме использования этил-6-аминопиколината на стадии 1) с использованием стандартной процедуры амидного связывания, подробно описанной выше, с получением 2-(2-метилпиридин-3-ил)-Ы-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 814). Μδ (ΚδΙ) рассчитано для С24Н24Ы6О2: 428,20; найдено: 429 [М+Н].
Пример 37. Синтез 2-(6-метилпиридин-3-ил)-Ы-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 815).
Стадия 1. Получение 6-метилникотинальдегида (152)
161 152
К раствору 5-бром-2-метилпиридина (151; 10 г, 58,1 ммоль) в ТГФ (150 мл) добавляли и-ВиЕ1 (2,5 М, 25,6 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. Затем добавляли ΌΜΡ (1,30 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°С. Реакцию гасили путем добавления водного раствора ЫН4С1. После нагревания до комнатной температуры смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные органические слои сушили (Ыа^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии с получением б-метилникотинальдегида 152 (5,0 г, 72%).
Стадия 2. Получение 2-(6-метилпиридин-3-ил)-Ы-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 815)
6-Метилникотинальдегид 152 подвергали сочетанию с 2,3-диаминобензойной кислотой 1 с использованием тех же стандартных условий, которые подробно описаны выше, с получением соответствующе- 55 020578 го замещенного бензимидазола 153. Полученную 2-(6-метилпиридин-3-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4карбоновую кислоту 153 подвергали сочетанию с 6-морфолинометилпиридин-2-амином 172 с использованием такой же стандартной процедуры амидного связывания с получением 2-(6-метилпиридин-3-ил)^(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 815). Μδ (Εδ^ рассчитано для ^4Η24Ν6Ο2: 428,20; найдено: 429 [М+Н].
Пример 38. Синтез 2-(2-метилпиридин-4-ил)^-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 816).
Стадия 1. Получение 2-метилизоникотинальдегида (156)
К раствору 2,4-лутидина (154; 10 г, 93,3 ммоль) в ТГФ (150 мл) добавляли п-ВиЫ (2,5 М, 41,1 мл) при -78°С. Затем добавляли диэтиламин (8,19 г, 112 ммоль) при этой же температуре, с последующим добавлением ΌΜΡ (10 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Реакцию гасили путем добавления водного раствора ΝΗ4Ο. После нагревания до комнатной температуры смесь экстрагировали при помощи СЩС12. Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении с получением промежуточного енамина 155.
К раствору ШЮ) (40 г) в воде (200 мл) добавляли указанный выше промежуточный енамин 155 в СЩС12 (200 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем добавляли достаточное количество 2 н раствора ΝαΟΗ для доведения рН смеси до 8. Смесь затем фильтровали, разделяли и экстрагировали при помощи СЩС12. Объединенные органические слои сушили (№2δΟ4) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка при помощи хроматографии давала 2метилизоникотинальдегид 156 (4 г, 35%).
Стадия 2. Получение 2-(2-метилпиридин-4-ил)^-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Н-бензо[б] имидазол-4-карбоксамида (соединение 816)
2-Метилизоникотинальдегид 156 подвергали сочетанию с 2,3-диаминобензойной кислотой 1 с использованием таких же стандартных условий, как подробно описано выше, с получением 2-(2метилпиридин-4-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновой кислоты 157, которую затем подвергали сочетанию с 6-морфолинометилпиридин-2-амином 172 с использованием такой же стандартной процедуры амидного связывания с получением 2-(2-метилпиридин-4-ил)^-(6-(морфолинометил)пиридин-2-ил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 816). Μδ (Εδ^ рассчитано для ^4Η24Ν6Ο2: 428,20; найдено: 429 [М+Н].
Пример 39. Синтез 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-^(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 828).
Стадия 1. Получение 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол4-карбоновой кислоты (159)
2-(4-Хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоновую кислоту (54; 500 мг, 1,46 ммоль) суспендировали в СЩС12 (15 мл). Добавляли метанол (2 мл) для растворения. К реакционному раствору добавляли по каплям оксалилхлорид (130 мкл, 1,46 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение ночи смесь концентрировали. Остаток поглащался в ΕΐΟΑс и промывали последовательно насыщенным раствором NаΗСΟз и затем насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над Μ§δΟ4, фильтровали и концентрировали. Очистка при помощи хроматографии на силикагеле ^ϊΟΑ^ε^ά^ давала метил 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксилат в виде оранжевого твердого вещества (структура не показана) (390 мг, выход: 75%).
Из герметично закрытой пробирки, содержащей смесь метил 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксилата (390 мг, 1,10 ммоль), калий 1-трифторборатом-этилпирролидина
- 56 020578 (158; 212 мг, 1,11 ммоль), Рй(ОЛс)2 (22 мг, 0,03 ммоль), ХРйов (31 мг, 0,06 ммоль) и карбоната цезия (1,0 г, 3,3 ммоль) откачивали газ и заполняли азотом два раза. К смеси добавляли ТГФ/Н2О (10:1, 4,4 мл). Суспензию нагревали при 80°С в течение ночи и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (2 мл) и реакционную смесь экстрагировали при помощи ΠΗ2Ο2 два раза. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над М§8О4, фильтровали и концентрировали. Очистка при помощи хроматографии на силикагеле (МеО^^^^^ Εΐ3Ν) давала метил 2-(4(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксилат (структура не показана) в виде желтого твердого вещества (544 мг).
Метил 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо [ά] имидазол-4-карбоксилат (544 мг) и ^^ΟΗ (95 мг, 4 ммоль) растворяли в ТГФ/Н2О (1:1, 24 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем нагревали при 50°С в течение ночи. Растворители удаляли в вакууме. Остаток поглащался в воду и рН доводили до 7-8 при помощи 1н раствора ΗΟ. Смесь оставляли для перемешивания в течение 1 ч, затем твердые вещества собирали фильтрованием с получением 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 159 в виде палевого твердого вещества (170 мг, выход за 2 стадии: 40%). М8 (Ε8Ι) рассчитано для Ο^^Ν^: 389,14; найдено: 390 [М+Н].
Стадия 2. Получение 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 828)
К раствору 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4карбоновой кислоты (159; 60 мг, 0,154 ммоль), 2-аминотиазола (4; 17 мг, 0,169 ммоль) и ΗΑΤυ (117 мг, 0,308 ммоль) в ΌΜΡ (1,5 мл) добавляли диизопропилэтиламин (107 мкл, 0,616 ммоль). Реакционную смесь подвергали микроволновому нагреву при 140°С в течение 15 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи ЕЮАс и промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над М§8О4, фильтровали и концентрировали. Очистка при помощи препаративной ВЭЖХ и последующая лиофилизация с разбавленным водным раствором ΗΟ давала ΗΟ-соль 2-(4(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 828) в виде ржаво-коричневого твердого вещества (24,3 мг, выход: 31%). М8 (Ε8Ι) рассчитано для С23Η20Ρ3Ν5Ο8: 471,13; найдено: 472 [М+Н].
Пример 40. Синтез Ы-(пиридин-2-ил)-2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 838)
2-(4-(Пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновой кислоты 159 подвергали сочетанию с 2-аминопиридином 89 с использованием общей процедуры, аналогичной описанной выше в примере 39, с получением Ы-(пиридин-2-ил)-2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 838). М8 (Ε8Ι) рассчитано для С^^Р^О: 465,18; найдено: 466 [М+Н].
Пример 41. Синтез 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(4-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 869)
2-(4-(Пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоновую кислоту 159 подвергали сочетанию с 4-(пирролидин-1-илметил)анилином 160 для получения 2-(4(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(4-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н-бензо[й]имидазол-4-карбоксамида (соединение 869) с использованием общей процедуры, аналогичной описанной в примере 39. М8 (Ε8Ι) рассчитано для С^^Р^О: 547,26; найдено: 548 [М+Н].
Пример 42. Синтез 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-п-толил-1Н-бензо[й]
- 57 020578 имидазол-4-карбоксамида (соединение 870)
2-(4-(Пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоновую кислоту 159 подвергали сочетанию п-толуидином 161 для получения 2-(4-(пирролидин-1-илметил)-2(трифторметил)фенил)-Ы-п-толил-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 870) с использованием общей процедуры, аналогичной описанной в примере 39. М8 (Ε8^ рассчитано для С27Н25Р3^О: 478,20; найдено: 479 [М+Н].
Пример 43. Синтез 2-(5-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)^-(тиазол-2-ил)-1Нбензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 871)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше в примере 39, стадии 1 и 2, за исключением того, что использовали 2-(5-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4карбоновую кислоту 163 в качестве исходного вещества, с получением 2-(5-(пирролидин-1-илметил)-2(трифторметил)фенил)-Ы-(тиазол-2-ил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 871). М8 (Ε8^ рассчитано для С23Н20Р3^О8: 471,13; найдено: 472 [М+Н].
Пример 44. Синтез ^(пиридин-2-ил)-2-(5-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 872)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше в примере 39, стадия 1, и примере 40, за исключением того, что использовали 2-(5-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4карбоновую кислоту 163 в качестве исходного вещества, с получением ^(пиридин-2-ил)-2-(5(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 872). М8 (Ε8^ рассчитано для С25Н22Р3^О: 465,18; найдено: 466 [М+Н].
Пример 45. Синтез 2-(5-(пирролидин-1-илметил)-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(4-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 873)
Использовали общую процедуру, аналогичную описанной выше в примере 39, стадия 1, и примере 41, за исключением того, что использовали 2-(5-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4карбоновую кислоту 163 в качестве исходного вещества, с получением 2-(5-(пирролидин-1-илметил)-2(трифторметил)фенил)-Ы-(4-(пирролидин-1-илметил)фенил)-1Н-бензо[Д]имидазол-4-карбоксамида (соединение 873). М8 (Ε8^ рассчитано для С31Н32Р3^О: 547,26; найдено: 548 [М+Н].
Пример 46. Синтез 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(6-морфолинопиридин-2-ил)-1Н-бензо[Д] имидазол-4-карбоксамида (соединение 868).
Стадия 1. Получение 6-морфолинопиридин-2-амина (165)
Смесь, содержащую 4-хлор-2-аминопиридин (164; 26 г, 0,20 моль), К2СО3 (0,40 моль) и морфолин (48; 0,6 моль) в ЭМ8О (150 мл), перемешивали при 190°С в течение 10 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли водой (300 мл) и полученную смесь экстрагировали
- 58 020578 этилацетатом (4x150 мл). Объединенные органические слои промывали водой (3x25 мл), сушили Ща^О4) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением 6-морфолинопиридин-2-амина 165 (17 г, 47%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 2. Получение 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(6-морфолинопиридин-2-ил)-1Н-бензо [б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 868)
6-Морфолинопиридин-2-амин 165 подвергали сочетанию с 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоновой кислотой 54 с использованием такой же процедуры амидного связывания, как описано выше, с получением 2-(4-хлор-2-(трифторметил)фенил)-Ы-(6-морфолинопиридин-2-ил)1Н-бензо[б]имидазол-4-карбоксамида (соединение 868). Μδ ^δΐ) рассчитано для С24Н19С1Р3ЩО2: 501,12; найдено: 502 [М+Н].
Пример 47. Биологическая активность
Масс-спектрометрический анализ использовали для идентификации модуляторов δΙΚΤΙ активности. В масс-спектрометрическом анализе использовали пептид, содержащий 20 аминокислотных остатков, такой как: Ас-ЕЕ-К(биотин)-О^δΤδδНδК(Αс)Ν1еδΤΕО-К(5ΤΜΚ)-ΕΕ-ΝН2 (δΙΤ) ΙΌ ΝΘ: 1), где К (Ас) представляет собой ацетилированный лизиновый остаток и Νΐε представляет собой норлейцин. Пептид метили флуорофором 5ТМК (длина волны возбуждения 540 нм/длина волны испускания 580 нм) по С-концу. Последовательность пептидного субстрата основана на р53 с некоторыми модификациями. Кроме того, метиониновый остаток, присутствующий в природе в этой последовательности был заменен норлейцином, поскольку метионин может быть подвержен окислению в процессе синтеза и очистки.
Масс-спектрометрический анализ осуществляли следующим образом: 0,5 мкМ пептидного субстрата и 120 мкМ βΝΑΌ+ инкубировали с 10 нМ δΙΚΤΙ в течение 25 мин при 25°С в реакционном буфере (50 мМ Тпк-ацетат рН 8, 137 мМ №С1, 2,7 мМ КС1, 1 мМ МдС12, 5 мМ ΌΤΤ, 0,05% ΒδΑ). Испытываемые соединения можно добавлять в реакцию, как описано выше. δΙΚΤΙ ген клонировали в содержащий Т7промотор вектор и трансформировали в ВЬ21 (ЭЕ3). После 25-минутной инкубации с δΙΚΤΙ, добавляли 10 мкл 10% раствора муравьиной кислоты для остановки реакции. Реакционные смеси герметично закрывали и замораживали для дальнейшено использования в масс-спектрометрическом анализе. Определение массы пептидного субстрата позволяет точно определить степень ацетилирования (т.е. исходное вещество) по сравнению с деацетилированным пептидом (продукт).
Контроль ингибирования активности сиртуина осуществляли путем добавления 1 мкл 500 мМ никотинамида в качестве отрицательного контроля в начале реакции (например, позволяет определить максимальное ингибирование сиртуина). Контроль активации активности сиртуина осуществляли с использованием 10 нМ белка сиртуина, с 1 мкл ^ΜδО вместо соединения, для количественного определения деацетилирования субстрата в заданной точке времени в линейных пределах анализа. Эта точка времени является такой же, которую использовали для испытываемых соединений, и, в линейных пределах, конечная точка представляет изменение скорости.
Для указанного выше анализа δΙΚΤΙ белок экспрессировали и очищали следующим образом. δΙΚΤΙ ген клонировали в содержащий Т7-промотор вектор и трансформировали в ВЬ21(ОЕ3). Белок экспрессировали путем индукции с использованием 1 мМ ΙΡΤΟ в виде гибридного белка с Ν-концевой Н15-меткой при 18°С в течение ночи и собирали при 30000хд. Клетки лизировали лизозимом в лизисном буфере (50 мМ так-НС1, 2 мМ так[2-карбоксиэтил]фосфин (ТСЕР), 10 мкМ ΖηΟΕ, 200 мМ №С1) и затем обрабатывали ультразвуком в течение 10 мин для полного лизиса. Белок очищали при помощи Νι-ΝΤΑ колонки (АшегкЬаш) и фракции, содержащие чистый белок, объединяли, концентрировали и пропускали через колонку с ситом для разделения по размеру (ЪсрНабсх δ200 26/60 д1оЬа1). Пик, содержащий растворимый белок, собирали и обрабатывали на ионообменной колонке (МоноО). Градиентное элюирование (200-500 мМ №С1) давало чистый белок. Этот белок концентрировали и диализировали против буфера для диализа (20 мМ так-НС1, 2 мМ ТСЕР) в течение ночи. Белок делили на аликвоты и замораживали при -80°С до последующего использования.
Сиртуин-модулирующие соединения, которые активировали δΙΚΤΙ, были идентифицированы при помощи анализа, описанного выше, и представлены ниже в таблице. Значения ЕС^ для активирующих соединений представлены как А (ЕС1>5<1,0 мкМ), В (ЕС1>5 1-25 мкМ), С (ЕС1>5>25 мкМ). Процент максимально повышенной активациии представлен как А (повышение активации >200%) или В (повышение активации <200%).
- 59 020578
- 60 020578
210 407 ЧАи ΟΓΊΝΗ ό Τ'- ρ V/ Β Β
ού- X
211 346 Ο^ΝΗ ό Β Α
05 ““V/
СГ-ΝΗ
212 339 ό Β Α
Ρ
ЖЖ-Ν “V/
213 357 СГ-ΝΗ Ο Ρ Β Α
Η οχ
214 357 сг-нн ό С Β
0 ~Ο
Ο^ΝΗ ό
215 322 Β Α
........ — 1.»
03- РЖР /> Οκ
216 407 Ο^ΝΗ ό С Β
Ρν/ \_Х>
ο> Ό
217 407 θΑΐΗ ό С Β
Η οχ Ρ^Ζ /> Λχ '
218 407 ζγ-ΝΗ ό Ρ Β Α
С1
ι^Τ\ кА/ “X/
219 355 СГ-ΝΗ ό Β Α
γΛ Ρ V/
сг-ин ό С1
220 373 Β Α
- 61 020578
221 401 ОСо- X—У (Г0Н ό С Β
222 397 ό С Β
223 397 О®АЗАО СГ0Н ό С Β
224 413 гЛтА СГ >1Н ό Β Α
225 404 Ο^ΝΗ ό Β Α
226 408 αΑ сг'нн ό Α Α
227 322 СХН5 ог'ын ό Β Α
228 371 ΰ^ΝΗ ό Β Α
229 311 СХаО. СГ^Н ό Β Α
230 328 СА®® с/Чн ό Α Β
- 62 020578
- 63 020578
- 64 020578
251 406 ό Α Α
252 397 л н лт ί Т/ЛЧ, а \__У ·Π5 Β Α
253 401 Ο^ΝΗ ό Α Α
254 387 о φ&Λ Ο^ΝΗ ό Α Α
255 397 с& ό Β Α
256 406 схйэ Ο^ΝΗ ό Β Α
257 373 и V/ ( Л лЧ ) Ο^ΝΗ ό Β Α
258 423 Γ~Χ λ~ί~У ) С1 ό Β Α
259 408 03чЗл> суш ό Β Α
260 403 φεκί 8 8
- 65 020578
261 401 ΟζΧ' Амн аГ С Β
ρνρ
262 383 Ο^ΤΜΗ ό ΑΑ Α Α
ν СХХСа
263 407 СГ'НН Αν \=/ Α Α
264 407 X Γ Α с- ин Αν \=/ Β Α
266 357 Ы Μ // ^ψ^-Ν )—V Υ'ΝΗ Αν \=1 Β Α
-VI а ''-«.чпг.
266 373 « с,Уа С Л. }—\\ # γΑ Ο^ΝΚ Αν \=/ Β Α
ΙΑ,λ0
267 420 οΎ-ΙΗ \|—. Αν Ο \=ζ Β Α
Η Ο^ΝΗ
263 406 Αν \=1 Α Α
05 Α СХЛАу
269 407 СТАН Αν \=7 Α Α
270 397 ρν Η . {* (ХНЭ (Αν'Ύ'^ν η υ С Β
- 66 020578
1.....'Ί 1--- ----- --- - I^мя
271 397 С Β
272 415 оуХ (Τ^ΝΗ ώ Β Α
273 390 αΧ - сг'мн СГ Β Α
274 417 σ:κ? Ο^ΝΗ зХ Μ Α Α
275 390 схи9 оАн ό Β Α
276 374 оуХ о^мн ό С Β
277 364 0+9' Ο^-νη ό Β Α
278 400 ΝΗ χ Β Α
279 411 сг'ин χλ Α Α
280 390 ο ί Л}—¢. # стАн ό Β Α
- 67 020578
- 68 020578
- 69 020578
302 407 Ρ СХлч оУн 8^Ν \==/ Α Α
303 325 σκι оГн 3^Ν Β Α
304 356 <Υνη ό Α Α
305 405 Ρ Ρ Α ϊ! °Α СсУО <ΓΝΗ ό Α Α
зое 403 Ρ Ρ СХгО оУн Ά Β Β
307 417 Ρ Ρ СХ/-О οΥ «φ С1 Β Β
308 4Θ1 Ρ Ρ ρΑ/Υ У-Л1 θΥ У Β Α
309 418 Ρ Ρ ΥφΥ Ο^ΝΗ φ С! С Β
310 381 Γ οΗ“ Ο^ΝΗ ά Ν Α Α
311 381 9 οΥ <Ανη π Β Α
- 70 020578
- 71 020578
323 401 Ρ СХХЦ Ο^ΝΗ ό Α Α
324 411 НО_ζΟΗ н ΟχΧ) Ο^ΝΗ \=/ Α Α
325 411 Η ΟΗ /V. /“\ Ш 0 Ί /—Й-0 ОН -ί^Ν Ο+'ΝΗ \=7 Α Α
326 411 ΗΟ но-/ гЛЪ о^мн ό Β Α
327 421 „рУ ιτνΌ^ ЦЛм^уА X С! Ο ΝΗ ό Α Α
328 421 РгУХ ЦАм'у-’ч X θι Ο ΝΗ Λ Χ.Ν Α Α
329 399 Ρ ΗΡ4Χ СО-0 Ο^ΉΗ &' Β Α
330 433 Ρ яХч О:ИУ« сХмн сУ Β Α
331 433 Ρ одр -Ьр Ο^ΝΗ Л Α Α
332 389 Ρ Ρ рХсГ ΗΝγΟ Αν \=/ Β Α
- 72 020578
- 73 020578
343 403 Ρ 1А»АТ СГ ΝΗ δΑ А А А
344 416 Ц-ЛАТ СГ-МН δΑ м А А
345 411 Р нрЧ± ОЗа) Ο^ΝΗ А А А
346 437 А ί Л #С| ΑΑ (ΑΝΗ А А
347 450 У 1 М /? ΑΑν ’Л “ 0 В А
348 389 н ГУ^лу/и сАмАта» (ΑΝΗ 5^Ν \=/ А А
349 383 Н ЛЛ/=\Ь ид/А ОАН ό А В
350 414 ΑΓθ η ι Ν>Η^ А,л0 н 6 А
351 404 н схна СТАН ό β А
352 398 Н гО СХА-0 оАн ό В А
353 390 Р Р—Ар со~о стан Аг° '—о С В
354 400 Р Р—Ар 03~О С>Ан АЧ К А А
- 74 020578
355 424 Ρ Ρ—£-Ρ Γϊ—СХ-01 4—/ стАн Α° Μ) Β Α
356 434 Ρ Ρ—(-Ρ ί I >4 λ-01 9—у СГ-ΝΗ X Α Α
357 421 Ρ Ρ-Α-Ρ Γχ>Ο^ ζΓΝΗ Α Α
358 435 Ρ Ρ—(-Ρ Ρχ >~О~р Ν-Α'-ν СГ-ΝΗ Α Α Α
359 429 Ρ Ρ—£-Ρ СХ>-О-р <γΥ·Ν СГ-ΝΗ Α Α Α
360 389 СА0_ <Α Д Α Ν ο Α Α
361 383 (ХКЭ сАш νΑν ό ' Α Α
362 383 СА0 О^ЫН Ο ό ” Α Α
363 389 Ρ ρ-Αρ (χΧΟ ΗΝ^.0 ά Β Α
364 383 Ρ Ρ—ό-Ρ ΗΝγ° ό Β Α
- 75 020578
- 76 020578
374 408 Ρ ρ—Αρ СХАХн Ο^ΝΗ <ν '—Ο С Β
375 418 Ρ ρ—Αρ <ΧΝΗ Η Α Α
376 421 Ρ ρ—Αρ (ХЬЦ Ο^ΝΗ Α Α
377 435 Ρ ρ—Αρ Οφρ (Χ'ΝΗ 5 4Ν Μ Α Α
378 408 Ρ ρ-Αρ С0А <χνη Χ° '—Ο С Β
379 429 Ρ ρ—Αρ ΟΟΑ (ΤΝΗ Α Α Α
330 418 Ρ ρ—Αρ Γ X —С # ч^-Ν 'Μ; СГ>1Н νΑ Α Α
331 401 9 ιΓν\_ΛΝ гмНи (Τ'ΉΗ 9 Α Α
382 434 Ο (ХМЭ Ο^ΝΗ 5 ΧΝ Μ Α Α
- 77 020578
383 391 σΑ сАн еА \=/ в в
384 407 Р г—Ар ΗΝγΟ р 0 в А
385 401 Р р—Ар нАо р ό в А
386 401 Р Р—Ар НМуС р А в А
387 402 Р р—Ар нАо р ό в А
388 401 о Ν-/ нАо А в А
389 401 Αχ 1 Ν-\ о 7Н < > ό ° в А
390 399 о ,χ4~-Ν Ν=( Ν<Ϊ>Ά\Ι чо Η в В
391 406 О С-Х'НА ΗΝ^Ο чО в А
392 387 9 рсК* нАо А в А
- 78 020578
393 451 Ρ Ρ—6-ρ ОТ />О/-С1 стан δ\ΐ Μ А А
394 445 Ρ Ρ—4-Ρ ΟΓΌ3-01 Ч^-Ν СТАН Α А А
395 415 9 ΑΆΝ'Ν ΙΑΛΑι Ο^ΝΗ Α А А
396 420 ν 0 ί Л /2 Ο^ΝΗ ρ А А
397 407 Ο Ν—7 СХК? СТАН В А
398 428 ν ρ (ΧΉ) Ο^ΝΗ Α А А
399 417 0 Ν—7 СХК5 оАн Ά; К А А
400 367 гту<гл N^8 сА ΝΗ ό А А
401 385 00-0 <Ανη ά В А
402 399 °·'3Ζ ΡτνΧ Ο^ΝΗ Αδ \=/ А А
- 79 020578
403 393 θ4 θΛ·ΙΗ О Β Α
404 393 : о Α Α
405 399 /=\ я ' о С> ΝΗ нА \=/ Β Β
406 393 ά Β Α
407 393 Ο^λΌ-®- Ν 3—' ο Ο^ΝΗ ό С Β
408 418 Ο Α Α
409 412 2^¾ ό Α Α
410 412 ό Α Β
411 427 ο Ο^ΝΗ ό Α Α
412 421 ,Ύο ί 1 >4 Ιϊ Ο^ΝΗ ά Α Α
- 80 020578
413 421 О СГ“ ΝΗ А Α Α
414 474 Р Р-4-Р ΙΑΚ>Ν·._/0 Ο^ΝΗ ό Α Α
415 468 Ρ ρ—4-р гГ^г'Ч ζ=\ /— уКк? СУЩН ό Α Α
415 423 Ρ ρ—4-ρ СХ/>“‘О-С| ΗΝ^Ο Β Β
417 417 Ρ ρ-4-ρ СХ'>—Ο^α Ч^-Ν ν—? ΗΝ^Ο ό Β Α
418 417 Ρ Ρ-γΡ X—У ΗΝ^Ο Λ 4^Ν Β Α
419 418 Ρ ρ~4-ρ ί X НУ0 Ч_У ΗΝ.. .0 Α 4-Ν Β Α
420 397 Ρ Γ—Χρ (ХНЭ СГМН Π) Β Α
421 390 Ρ ρ—4-ρ ССКЭ Ο^ΝΗ 0 С Β
422 409 0}¾ Ο^ΝΗ Λ Α Α
423 398 9 сАмн Ά Β Α
- 81 020578
- 82 020578
434 424 Ρ Ρ—£-Ρ Ο/·»—Ο СТ^МН ό Β Β
435 415 Ρ Ρ_Ζ_Ρ Χί^Ν \—ί/ (Τ'ΝΗ Β Β
436 408 Ρ Ρ—£-Ρ ОС-^О-1 Χ^Ν ν—? ό Β Β
437 408 Ρ Ρ—^-Ρ СУТЧН 0 С Β
438 407 Ρ Ρ—£-Ρ Γ ίΓ —с# Χ^Ν \ οΑιη ό Η С Β
439 387 Ο—\ ιτν\ /4 / [2 >4 /)-ч АУ'М ’-Ν Α ηιΑ'ο ο С Β
440 407 (ΧΚ_Μ ΗΝ'Ί? 9 Α Α
441 /4ιη «, Ρ 1 Λ. АЧ χ<^Ν ΗΝ'ΟΟ ό Α Α
442 400 ΟΗ /=\ ζ ο ι/хч /-° Χί^Ν у ηνχ> ι^Ν V Α Α
443 388 9 ίΥΌ*· ш-Ао °ν> 0—' С Β
- 83 020578
- 84 020578
- 85 020578
465 402 Ρ ρΑ-ρ ίΧ. ΑΓΑ X—У Ο^ΝΗ ί^Ν XX Α Α
466 385 σκι сАмн X Β Α
467 382 анз Ά 4χΝ Β Α
468 395 ΟΑ-ο '-ί+'Ν Ν'ν С Β
469 404 [χΧ %— 'Ь—\ .1 Ν—\ ° ;,Η Ο Ц Β Α
470 401 ίΧ)—ζ~~)> οΑ θ Β Α
- 86 020578
471 414 Сс/Ά А о (У ° Β Α
472 428 С&-р ό 0 Β Β
473 388 Сс-кЯ ΗΝ% γ^Ν Μ Β Α
474 444 ί~Χ )—ХХ рА сАмН \ Ο 0 Β Α
475 464 СхАр Λ 1 + ο Β Α
476 478 α^ο Μ/'Ά \ /-VI Β Α
477 393 СР, АЛЛ Α-ΑΑ Ο^ΉΗ 8^Ν \=1 Α Α
478 472 Ρ ρ—4-ρ ОАО оАн ζ·Χ0^°Η Α Α Α
479 506 Ρ Ρ-ί-Ρ (ΧΝΗ>α οΆιη ^Χ-θ-^χ^ΟΗ Α Α Α
480 490 Ρ ΡΆ ί а мСХ +Α μ, (Ανη ζ·Χο^γ°Η Α Α Α
481 387 Ρ ρ—Α ОАО СГТЧН Α Α Α
- 87 020578
482 434 ОчЛр сгмн \ 0 Β Α
483 449 ОрР СГ-ΝΗ \ βΆΜ \ и \_Ν Η Β Α
484 443 ρρρ 0 л °? ά Ь Ν Η Β Α
485 491 ррэ Α Ν Β Α
486 485 оур сгЭмн ) ό 0 λ- Β Α
487 461 стЛн °\ > ο Β Α
488 445 р/р сАн ρΝ ν—\ μ Ο ν.0 Β Β
489 445 ρ^ρ 0 X °? ά у Β Β
490 499 Ρ Ρ ΟίΝ^Ο^α Ар-Ν Ο^ΝΗ Λα> Α Α
491 499 Ρρ Ос^>~Р5“с| <γΝΗ φ ο Α Α
- 88 020578
492 472 Ρ ρ-^-ρ СТЕН X А А
493 506 Р р—\р СХу-О-01 СЖМН X А А
494 490 р р—£-Р ОХР оХн ф, οΌχχΟΜ А А
495 441 |<νΝΆ=Ν Ц-ОА А С1 Ο Ν δ^Ν А А
496 395 схр °Х °Х° ά А А
497 412 ч Ν—ч охх оХн о В А
498 385 Ссх-СХ0 СГ»Н 6 В В
499 385 о^Чгн л В А
500 405 Е X —ЖЖ-О ΟΧ'Ν ^-<4 сгин р А А
501 484 С1 ОХр <ΓΝ \ 6 р '—о А А
502 478 С1 схр сРин \ О Ь '—о В А
503 468 οχχ 0 т ? ό В В
- 89 020578
504 462 СтФ—О-г УЛ (УЛИ \ ό ь —О в В
505 498 С1 Серр стАн \ А < V θ ''—О в А
506 492 С( Серр Υ в В
507 452 ОУр θΥ \ ,л, < и η Р в В
508 446 Ο^ΝΗ °) ό ίρ Р в А
....... __ ......
509 452 Серр γΥνη ό Р А В
510 446 СХрр οΥ \ ό ь Р в В
511 389 Р (γΧ /)—аУ УЛ οΥίΗ ό в А
512 403 Ρ ЛЧ-Ч_/=\ МАЦ СГ-ΝΗ 9 А А
513 383 Р УРО (Ун 0 А А
514 371 Ρ Серо οΎ ό А А
- 90 020578
- 91 020578
527 419 СсХХ X Ν—\ ° ΪΗ < > X '—Ν δ\=/Ν 4 Α Α
528 413 (Хкэ X Ν—\ 0 7Η \ > ό Α Α
529 447 ΟΧΌ* ° г С? ό λ- Α Α
530 441 ζχχρ 1 Ν—< Ο^ΝΗ / > ό τ Α Α
531 395 0Αθ ΟΧΟ (ΤΝΗ ό Α Α
532 415 Λ (ХМЭ Ο^ΝΗ ρ Α Α
533 386 ΓΤ\-Γ0° 1X -ЬА Χ° сХиН Λ 4χΝ С Β
534 406 ρ ΓΧχ-Ο- θ (ΧνΗ X Α Α
535 414 Χί 0 X ьч λ-° Χρ-'Ν & Ο^ΝΗ ό Α Α
536 414 Η /—Ν тч-гР ΙΙ X9-4. Χ° Чр-Ν СГ-ΝΗ Λ Β Α
537 434 Чр-Ν χ—ν сИын X Α Α
538 414 (ΧΧΐ) с/Хн )—. ό Β Α
- 92 020578
- 93 020578
550 469 ΑνΝ\ / \ Π >4 >-ν ρ Ο^ΝΗ Α» Α Α
551 456 Ρ ϋ-Λ4ΑΝ^° οΆη ό Α Α
552 470 Ρ ОчМАкЭ’ суЖн Α Α
553 450 Ρ ιΧΑΛ /“Ч ША/ν СГ-ΝΗ ά Α Α
554 450 Ρ /ЧД /=\ /—υ СА·,/ Ο^ΝΗ ό Α Α
555 451 Ρ /λ /”> Ο^ΝΗ Λ Α-Ν Α Α
556 461 Ρ Р-/ он (АЛ /=\ 4·{ ¢. Α Α° > \Αν ч-у но ο*Αη ό Α Α
557 475 Ρ Ρ-< он ι<ν\ /=\ 1 Α —(ν ρ 0 / ΑΑ-ν ηο Ο^ΝΗ Χζ Α Α
558 455 Ρ Ρ—Ζ он ιτν\ /=\ (χκ>° Η0> Ο^ΝΗ ά Α Α
559 389 Ρ ГХУАХ-р Ο^ΝΗ ό Α Α
560 403 Ρ СХХСА Ο^ΝΗ Я Α Α
561 383 Ρ ΓΧ Α-Ο“ρ Ο^ΝΗ ό Α Α
- 94 020578
562 405 Ρ ОсЛСУс| сгАн ν^Ά Α Α
563 419 Ρ ΐχΧ —С/^с| СгАн Л 4 Α Α
564 399 Ρ γΑ υα сгАн ό Β Α
565 386 ο 0 СсЛО“°? сгАн о Β Β
566 414 ОХ} „ СГАн ύ
567 414 ?Α> СгАн Α_/ ά Α Α
,... ..,
565 385 н _Ώ (ΓΧΆ/ 40 Υ-7 ССАН Λ Чл С Β
569 398 ,/ΐχ-Ν /=<Ί СС-ьСН-ч 'ΛΐΙ 4-0 X Ο>'ΝΗ Λ 4χΝ Β Α
570 418 γΑ Υ-'/ \ сгАн Β Β
571 496 СК ,- /ЧЛ /=\ г~\ Χ\\ X Ν ο Ο>'ΝΗ ό Α Α
572 458 С.РЭ ίΑ,ΑΑΌ СгАн ό Β Α
573 452 сб ακκι Ο^ΝΗ ό Чл Α Α
- 95 020578
- 96 020578
- 97 020578
598 515 А РХ ΟΝΗ ко- Α Α
599 501 срз Гт аО-с' СГ-ΝΗ А Α Α
500 417 ,0 °/А СХгЦ ηνΆ ό Β Α
601 441 о 1 1 у—С II ΥίΑ-Ν Λ-Ν СГ-ΝΗ Α Α
602 432 N (ХНХ7 сг-νη ρ Β Α
603 502 Счрз ?' Υ^Ν >=\ />—(\ /)— Ν Ο СГ-ΝΗ ό Α Α
604 496 ср3 ? /=\ СТАН ό Α Α
605 452 Ν X ίΧ'ΥΧΧΟ 4χΥΝ СТИН Χν υ Β Α
606 476 °Ά ρ )=\ /-Ά ЫН /Мд СГ-ΝΗ ό Α Α
607 470 СМг’С СГ-ΝΗ Χν υ Α Α
608 476 Ν X 'Ρ ΓΧ /λ-ΧΧ'Ο 4^Ν ΧΥ Ο^ΉΗ 5^Ν \=/ Α Α
609 470 СРЭ иМДи СГ-ΝΗ Χν υ Β Α
- 98 020578
- 99 020578
- 100 020578
Ъ. тхн: )
631 469 Ο^ΝΗ Г ϊί Ι^Ν Α Α
04
632 413 (Ли ί^Ν Ο Α Α
СЛ “νγ“ -οι
633 467 сгчмн ά Α Α
ί * <*,
634 419 ΟΓ'ΝΚ ό Α Α
Χθ-γ^ΪΓ'Ν, Ϋν 04 4_/“ -С1
635 453 Ο^ΝΗ \=/ Α Α
....... .........ρ.„
«-γ\ Μ-,Г 04 Ό
636 384 Ο^ΝΗ 0 Α Α
Ν'-νν I Ν <4 Ό
637 384 стам Υ-Ν Α Α
Ν-ν\ %Αγ <4 Ό
633 385 Ο^ΝΗ Λ 4^-Ν Α Α
»ν, I Ν СР,
639 404 Ο^ΝΗ Α Α
Ογ^.. 07 04 νγ· -С1
640 508 €ΓΝΗ ό Α Α
θΎ Υ—Νγ^4τ-Ν I Ν> сг, “Ο С1
641 502 Ο^ΝΗ ό Α Α
- 101 020578
642 502 СА-. Ал СР3 со А А
Ο^ΝΗ ά г,
Си, Ν Ν 0(, Ο~α
643 503 Ο^ΝΗ ά Α Ν ι Ν А А
644 492 ο αΑ ν Ο^ΝΗ ό 0(, “Ο Ρ А А
645 486 Άν I ζ <ΣΓ~ΝΗ ά ¢(, Ρ А А
646 486 α^. 1“ сгАн ό =(, -Ο Ρ А А
647 487 Ο Χ^Ν·γ^4--Ν <ΓΝΗ Αν к ¢(, -Ο Ρ А А
«V, I Ν> ¢(, 4.
648 424 Ο^ΝΗ δΑ \=/ А А
νΆΑ I Ν 0(з “V
649 418 (ΧΝΗ ό А А
ν^ν I Ν с(з ^01
650 418 <ΧΝΗ л 4ζ-Ν А А
Г СР8 Α ^НС!
651 419 СГ^Н Λ) Αν А А
ΑΑν ¢(, “V
652 438 СГ ΝΗ А А
- 102 020578
653 408 Τ’ СГ'МН ό Β Α
654 402 τ» Ν-'νΌΑ уЦМЦ <Τ'ΝΗ ά Β Α
Θ55 402 СуХн Γιΐ Χ^-ν Α Α
656 403 ст СТТ-ЛН XX Α Α
657 422 Τ’ ΎΗ_Α <Τ~ΝΗ χ Α Α
658 411 5Ο2Μθ 0^X0 Ο^ΝΗ ί^Ν Μ Α Α
659 411 ЗОгМе СсХЦ (ΤΉΗ Ο Β Α
Ά ΟΙ+λΑ
660 485 °όΉ Α Α
Τ’ ΟΑ>“Ο-ρ Ч-г^м Ή_У
661 499 Ο^ΝΗ αοΌ- Α Α
662 502 τ. СХХ-0 °ΧΧΗ 0..... 5 ΧΝ ί \=Ζ Β Α
663 496 сь сххр 1 Ν—\ Ο^ΝΗ / >·.., ά μ С Β
664 458 τ, ОУ0 X Ν—\ ο τ Ο 5^Ν \=/ С Β
- 103 020578
665 476 СРа сххр 1 Ν—. 0 г Сч ύ Α Α
666 470 N Ά СХК5 X Ν~Λ Ο^ΝΗ < V ι о Β Β
667 476 N ϋ Л хЧ, & ХА \ X Ν—1 Ο^ΝΗ / 1 1 \Аг ό Β Α
668 470 °Ά ССХА 1 Ν—, Ο^ΝΗ Ζ Υ I ΧΑ'.ρ ό Α Β
669 403 °Ά Αχ —ΑΧα 'ί—V ΗΝ. Λ С Β
670 387 СЧ ΗΝ. ρ [Ίι С Β
671 367 (ΎΧχ Ν'Ν 7 6 С Β
672 462 Α СсХО сХын 070 Α Α
673 482 оХн ά ο Α Α
674 482 с7з 0X0 оХн Υ χχ Α Α
- 104 020578
675 516 А ГХ СТАН ΑΑ иои А А
676 516 ГЛ кЧЛ”с| γΧ V? сгАк ά о А А
677 500 Ν Ά СФЧЗ ОАН Ао А А
678 506 СК (хК>с| САН О-0-γΟΗ ДЭН А А
679 490 СА сХ'Гкх ААц \!_А сЛан ΌΗ А А
680 490 олч 0А1Н ζΧθ-γΟΗ ΌΗ А А
681 506 СР, Г Л Р 4_ί7 ΟΑ ч <- А0> А А
682 481 СР, ОЧО сЛАм А-О” А А
683 466 сг» очо ОА1Н 6 л А А
684 516 СР, Гл ,>—Ο_α Αν ΟΑ ό о А А
- 105 020578
- 106 020578
- 107 020578
707 496 СРз / \ '— /)-Ν о Ο^ΝΗ (Αν υ А А
708 502 СРз (ΧλΑ 1 Ν—\ ο 7Η < > Α Λθ А А
709 496 СРз 1 Ν^\ 0 Vм < ) ό λ“ А А
710 463 (ΧχΟ Α Ν-\ ° А Ο Ό* V А А
711 478 Γ^- 0 СО-0 О%н ό А А
712 472 ο Ν—' ζ—' 0 οχο (ΜνΗ ά В В
713 455 Ρ м-^γ-Ν ~\==\ Μ'Ν ν—Τ Ο^ΝΗ Λ он А А
714 455 Ρ ν^νΧ САМ? СГ^Н ό 0Η А А
715 489 Ρ II 1 ν—4 //“С1 сг^н ^ογ°Η он А А
716 489 Ρ νΜΜ /М Цм>-4 /АС| Ο^ΝΗ Λ ^оМ^он он А А
- 108 020578
- 109 020578
- 110 020578
- 111
- 112 020578
759 494 СР3 Ν II #—(\ //~° ОН \Α·Ν ЛЛ Τ ν-он ΗΝ^Ο ρ Α Α
760 474 с.рэ /Л иллгл™ Τ ν°Η ΗΝΧ> Ο Α Α
761 480 СГ, ιλ-λ Я |(_Ц V—χ #°\_/0Н Ррм °н ΗΝ'Χ» ό Α Α
762 494 °Γ· X 0Η ΗΝ—'ό ρ Α Α
763 474 τ· Д=\ ЙД_ он X Ν Χ-°Η ΗνΛ) ό Α Α
764 440 СНР, СсХчАО 'Ό^Ν X—’ Χ--1 ° ΝΗ ό Α Α
765 454 СНР2 ΟΓ χ>—(ΟΟ Ар-Ν '' 0 ΝΗ «Α Α Α Α
766 434 СНР2 ιτνΟΑ /> ΐΧχΟΌ 0 ΝΗ Ук υ Β Α
767 468 Ο Α 1 1 /—4 /) 0^—ΝΗ л Α Α
768 474 Ο Α Όθ-ρ сгрн 5^Ν \=/ Α Α
769 468 θννΑ СО Ο сгАн ό Α Α
- 113 020578
- 114 020578
780 488 № ОАО <ΑνΗ О С в
(Хна
761 422 оНн л М%Гон он А А
СсХ0
782 438 Ο^ΝΗ ά он А А
й-о
783 405 о^мн ό ^ΥΥη он А А
Р (Хна
784 422 οΆνΗ Л Ηγ™ он А А
785 440 Ρ ОАО сАмн ° Т он он А А
786 440 Р 0Αθς оЙн И он А А
787 489 ОАО сА-мн < ~\ ό ° он О^Л^ОН А А
788 473 схнр А. о А ОхМон А А
789 439 оз-к Ο^ΝΗ А О^А^ОИ А А
- 115 020578
- 116 020578
- 117 020578
- 118 020578
620 456 ρ Ο^ΝΗ 3Λν Ρ-Ο Β Α
821 423 Ρ Ρ'^4τ-Ν >=\ тт ^-4/-° X—ν θΑ Η Ο Α Α
822 437 Ρ ΡΧ-^γ-'Νκ /=\ ΎΧ>~ζ Xе1 <Ла Α Α
823 417 ОС^Ч^-01 Ο^ΝΗ ό Α Α
824 407 Ρ ТХрСР Ο-^ΝΗ Ν^δ Α Α
825 421 Ρ Ύ /С уЧ г~* ζΡ~~ΝΗ мАз Ρ Α Α
826 401 Ρ Ύ'χν-νΡ Ο’^ΝΗ ό Α Α
327 472 \=χ СЧн^Ч7 оАм Α ^‘-ο'Ύ'-οη ΟΗ Α Α
828 472 Юг ОСКЗч Ο^ΝΗ ό Α Α
829 473 Ρ ρ—( ΟΗ ΡΌ:νΑ-^0Η Χ?^Ν \—!ί Ο^ΝΗ ό Α Α
830 473 Ρ—< ΟΗ ργνΝΡν Α-» 1 Τ -АА д~ ° \-ΰ Ο^ΝΗ ά Α Α
331 479 Ρ Ρ—/ ΟΗ РТХИХ<ОН γ-Ν ΡΡ Ο^ΝΗ ό Α Α
- 119 020578
832 389 Ρ ΪΧοΟ Ο^ΝΗ Аз \=/ Α Α
833 403 Ρ ρΧ-Ν ° λ ρ Α Α
834 383 Ρ иц) θΧΝΗ ό Α Α
835 407 /=\ ΤΧθ4 Ο=*ΝΗ Ρ Ο Α Α
836 421 Ρ )=\ υχρ Ο1β*'“ΝΗ Ι-Χδ 4 Α Α
837 401 Ρ /=л хх>Я о^=~~И р ό Α Α
838 466 р Ρ (ЖХ НМ'ЧЭ Αν V Α Α
838 479 Ρ Ρ—< ОН ο+'νη ό Α Α
840 473 ρ р—( ОН ЧХК>Ш°Н Ο^ΝΗ ύ Α Α
841 473 Ρ ρ-Ч он νΥν-Χ-Ζν™ оШ ό Α Α
842 435 ρχο СТ-МН Α^ си Α Α
- 120 020578
843 435 ХА ί X. -ЬЧ &— 4ρ--Ν ν сХмн •Λ <о А А
844 435 ίΧν-ο* </Χ νΧ А А
845 470 Ρ охЪ оЧн <4 А А
846 488 Ρ 0X99% <ρ^Ν \__у (Τ^ΝΗ ο-9 А А
847 449 РЧг--Л ,δ^Χ (ί Ί /Н\ Η ΗΜ^Ο ΑΜ Χό А А
848 455 ГГмУ ΗΝ^Ο А. <ο А А
849 504 Ρ ΟίΑΟ-θ· <ρί^Ν СтОЧН чл ό О-< А А
850 415 =Ν ΧΛ-ν сгХн Αν <^ο ихо А А
851 432 Ρ Г X ·<ΧΧ γ4 сгХн όοα А А
852 450 Ρ ΟΧ<ζ О'Ь'НН ОСО А А
- 121 020578
- 122 020578
863 446 Сра ОуЧУС^ стУн ό Α Α
864 544 ууу СГУН Уо Α Α
865 446 она ууу СГУН 6 Α Α
866 463 сч ,ΤΎ-Ν >=\ Г~\ иУлУ^° СГУН У Α Α
867 453 сч ιΟΆ )=\ г~\ 1У Ά Ά ρ '-Υ'Ν '—Ν / СГ 'ΝΗ ό Α Α
....... __
868 502 У ГУ УУ°’ οΓίΗ Γν У Α Α
869 548 ί у )—V /—\ -γ'Ν Ν-1 НМ^О ф Ό Α Α
870 479 гУ2У ГУЛУУ ΙΗνΎ ф Α Α
871 472 У-УмУ, I *—N 1 НГ-ГУ 5Χν \=/ Β Α
872 456 иуу» ί 1 ныЛэ Υν Μ Α Α
- 123 020578
Рз%\ Л Αχ X 1 ΗΙΤΧ) ф
873 548 о А А
В другом варианте воплощения соединение по настоящему изобретению выбрано из любого из соединений
№№ 202, 203, 208,
226, 243, 247, 254, 262, 269, 287, 288, 289, 290, 295, 300,
302, 304, 312, 313, 315, 316, 317, 319, 321, 323, 327, 328,
340, 343, 344, 345, 346, 354, 356, 357, 358, 359, 360, 361,
362, 368, 369, 370, 371, 372, 376, 377, 379, 380, 381, 382,
394, 395, 396, 398, 399, 409, 411, 412, 413, 414, 430, 432,
440, 446, 448, 451, 452, 455, 456, 457, 458, 461, 464, 465,
478, 479, 480, 481, 492, 493, 494, 495, 514, 515, 516, 531,
540, 541, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558,
559, 560, 561, 573, 574, 575, 589, 590, 591, 592, 593, 594,
595, 596, 601, 603, 604, 620, 622, 623, 628, 629, 630, 631,
640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 672, 674, 675, 677,
678, 679, 680, 681, 689, 690, 691, 692, 698, 699, 700, 701,
706, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 124, 725, 134, 735,
736, 737, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 749, 151, 7 67,
768, 769, 770, 774, 775, 776, 782, 785, 786, 789, 798, 811,
817, 818, 819, 820, 824, 825, 827, 829, 831, 832, 833, 834,
836, 839, 840, 841, 845, 847, 849, 851, 852, 853, 854, 855,
862, 863, 865, 866, 867 или 868
из таблицы, представленной выше.
Эквиваленты
Настоящее изобретение обеспечивает, среди прочего, сиртуин-активирующие соединения и способы их применения. Хотя были обсуждены конкретные варианты воплощения настоящего изобретения, представленное выше описание является иллюстративным, а не ограничивающим. Многие варианты настоящего изобретения будут очевидны специалистам в данной области при рассмотрении этого описания. Полный объем настоящего изобретения должен определяться формулой изобретения, вместе с полным объемом эквивалентов, и описанием, вместе с такими вариантами.
Включение посредством ссылки
Все публикации и патенты, указанные в настоящей заявке, включая те, которые указаны ниже, включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте, как если бы каждая отдельная публикация или патент были специально и индивидуальным образом указаны как включенные посредством ссылки. В случае конфликта, контролем является настоящая заявка, включая любые содержащиеся в ней определения.
Также включены посредством ссылки во всей полноте любые полинуклеотидные и полипептидные последовательности, имеющие ссылку на номер доступа, соответствующий входящему номеру в публичной базе данных, например, ΤΗε ΙηκΙίΙυΙο £от Сепотю КезеатсН (ИСК) (\у\у\у.Пдг.огд) и/или 1Нс ΝαΙίοηηΙ СсШсг Гот Вю1есЪпо1оду 1пГоппа1юп (Νί',ΒΙ) (\\у\уу.псЫ.п1т.пП1.до\').

Claims (15)

  1. ΦΟΡΜΥΠΑ ИЗΟБΡΕТΕНИЯ
    1. Соединение формулы (II) или его соль, где один из Ζ11 и Ζ12 представляет собой СК13, а другой из Ζ11 и Ζ12 выбран из Ν и СК13, где
    К выбран из водорода, галогена, -ОН, -С^Ч фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-(С1-С2 фторзаме- 124 020578 щенный алкил), -8-(С1-С2 фторзамещенный алкил), С1-С4 алкила, -(С1-С2 алкил)-Ы(К14)(К14), -ОСН2СН(ОН)СН2ОН, -О-(С1-С4) алкила, -О4С1-С3) алкил-Ы(К14)(К14), -Ы(К14)(К14), -8-(С1-С4> алкила и С3С7 циклоалкила;
    К выбран из водорода, -(С2-С4) алкила, -(С1-С4) фторзамещенного алкила, -(Ц-СДалкил-^К7)^7), (С1-С4) алкил-С(О)-Х(К7)(К7), -(С2-С4) алкил-О-К7 и -(С2-С4) алкил-К(К7)-С(О)-К7, где каждый К7 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К7, связанные с одним и тем же атомом азота, взятые вместе с атомом азота, образуют 4-7членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(=О)2 и О, где насыщенный гетероцикл необязательно замещен по одному атому углерода -ОН, -С1-С4 алкилом, фтором, -ΝΗ2, -ΝΗ(Ο1-04 алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, -ΝΗ^Η^Η^ΟΗ^ или -Ы(СН2СН2ОСН3)2;
    К4 выбран из водорода, галогена, -С^Ы, фторзамещенного С1-С2 алкила, -8-(С1-С2) фторзамещенного алкила, С1-С4 алкила, -8-(С1-С4) алкила и С3-С7 циклоалкила;
    X выбран из
    С(=О)-СК15К1€-1 и -СК15К16-НН-С(=О) -Ο-ΐ, где ΐ указывает, где X связан с К11, и
    К15 и К16 независимо выбраны из водорода, С1-С4 алкила, СР3 и -(С1-С4 алкил)-СР3;
    К11 представляет собой гетероцикл, который представляет собой 4-7-членное моноциклическое кольцо или 8-12-членное бициклическое кольцо, а также спироконденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, включающие один или несколько гетероатомов, выбранных из Ν, О и 8 атомов, причем моноциклическое кольцо и каждое из бициклических колец независимо выбраны из насыщенного, ненасыщенного или ароматического кольца, где К11 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, ΡξΝ. С1-С3 алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, =О, -О-С1-С4 алкила, -8-К14, -(С1С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -Ы(К14)(К14), -ОЦС2-С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -С(О)-Ы(К14)(К14), -С(О)-О-К14 и -(С1-С4 алкил)-С(О)-Ы(К14)(К14), где каждый К14 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К14, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, 8, 8(=О), 8(О)2 и О, где когда К14 представляет собой алкил, такой алкил необязательно замещен одной или несколькими группами -ОН, -О-(С1-С4 алкил), фтор, -ΝΗ2, -ЫИ(С1-С4 алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, -ΚΗ^Η^Η^^^ или -Κ^Η^Η^ΘΗ^, и когда два К14, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, такой насыщенный гетероцикл необязательно замещен по атому углерода группой ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ2, -ЫИ(С1-С4 алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, -ΝΗ^Η^Η^ΩΗ^ или Ы(СН2СН2ОСН3)2; и необязательно замещен по любому замещаемому атому азота группой -С1-С4 алкил, фторзамещенный С1-С4 алкил или -(СН2)2-О-СН3;
    К12 выбран из карбоцикла, который представляет собой 5-7-членную моноциклическую кольцевую систему, независимо выбранную из насыщенной, ненасыщенной и ароматической кольцевой системы, где все кольцевые атомы представляют собой углерод, и гетероцикла, определенного для К11, отличного от пиперазина, индазола, триазола или пиразолопиридина, где К12 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, -С^Ы, С1-С4 алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, -О-К14, -8-К14, -8(О)-К14, -8(О)2-К14, -(С1-С4 алкил)-Ы(К14)(К14), -Ы(К14)(К14), -О(С2-С4 алкил)-К(К14)(К14), -С(О)-Ы(К14)(К14), -(С1-С4 алкил)-С(О)-Ы(К14)(К14), -О-фенила, фенила и второго гетероцикла, определенного для К11, и когда К12 представляет собой фенил, К12 также необязательно замещен 3,4-метилендиокси, фторзамещенным 3,4-метилендиокси, 3,4-этилендиокси, фторзамещенным 3,4-этилендиокси или -О-(насыщенный гетероцикл), где любой фенильный или второй гетероциклический заместитель радикала К12 необязательно замещен галогеном; -ί'=Ν; С1-С4 алкилом, С1-С2 фторзамещенным алкилом, группой -О-(С1-С2 фторзамещенный алкил), -О-(С1-С4 алкил), -8-(С1-С4 алкил), -8(С1-С2 фторзамещенный алкил), -ΝΗ-^-^ алкил) и -Ы-(С1-С4 алкил)2.
    - 125 020578
  2. 2. Соединение по п.1, имеющее формулу
  3. 3. Соединение формулы (Ι) или его соль, где один из Ζ и Ζ представляет собой СК , а другой из Ζ и Ζ выбран из Ν и СК , где
    К3 выбран в каждом случае из водорода, гидрокси, галогена, -ΝΝ, фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-(О-С2) фторзамещенного алкила, А-(С1-С2) фторзамещенного алкила, С1-С4 алкила, -О-(О-С4) алкила, -8-(С1-С4) алкила, С3-С7 циклоалкила;
    К выбран из водорода, -(С2-С4) алкила, -(С1-С4)фторзамещенного алкила, -(С1-С4) алкил-И(К7)(К7), (СГС4) алкил-С(О)-Ы(К7)(К7), -(С2-С4)алкил-О-К7 и -(С2-С4) алкил-Ы(К7)-С(О)-К7, где каждый К7 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К7, связанные с одним и тем же атомом азота, взятые вместе с атомом азота, образуют 4-7членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, δ, 8(=О), 8(=О)2 и О, где насыщенный гетероцикл необязательно замещен по одному атому углерода группой -ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ2, -ΝΗ^ι-Ο алкил), -И(С1-С4 алкил)2, ΝΗ^Η^^Ν) или -Ы(СН2СН2ОСН3)2;
    К1 выбран из карбоцикла, который представляет собой 5-7-членную моноциклическую или 8-12членную бициклическую кольцую систему, а также спиро-конденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, где все кольцевые атомы представляют собой углерод, причем моноциклическое или каждое из бициклических колец независимо выбрано из насыщенного, ненасыщенного и ароматического кольца, и гетероцикла, который представляет собой 4-7-членную моноциклическую или 8-12-членную бициклическую кольцевую систему, а также спироконденсированную и связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую систему, включающую один или несколько гетероатомов, выбранных из Ν, О и δ атомов, причем моноциклическое кольцо и каждое из бициклических колец независимо выбраны из насыщенного, ненасыщенного или ароматического кольца, где К1 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, ΝΝ, О-Сз алкила, =О, С3-С7 циклоалкила, фторзамещенного С1-С2 алкила, -О-К8, -δ-К8, -(С1-С2 алкил)^К8)(К8), -Ы(К8)(К8), -О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), -(С1-С2 алкил)-О-(С--С; алкил)-Ы(К8)(К8) и -(С1-С2 алкил)-С(О)-И(К8)(К8), и когда К1 представляет собой фенил, К1 также необязательно замещен 3,4метилендиокси, фторзамещенным 3,4-метилендиокси, 3,4-этилендиокси и фторзамещенным 3,4этилендиокси;
    каждый К8 независимо выбран из водорода и -С1-С4 алкила; или два К8, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий один дополнительный гетероатом, выбранный из Ν, δ, 8(=О), 8(=О)2 и О, где алкил необязательно замещен одной или несколькими группами -ОН, фтор, -ΝΗ2, ΝΗ(0-0 алкил), -И(С1-С4 алкил)2, -NΗ(СН2СН2ОСН3) или -Ы(СН2СН2ОСН3)2, и насыщенный гетероцикл необязательно замещен по атому углерода группой -ОН, -С1-С4 алкил, фтор, -ΝΗ2, -ΝΗ^-Ο алкил), -Ы(С1-С4 алкил)2, -^ЩСЩСЩОСЩ) или -Ц(СН2СН2ОСН3)2,
    К2 выбран из карбоцикла, определенного для К1, содержащего по меньшей мере пять кольцевых атомов, и 4-7-членного моноциклического гетероцикла, определенного для К1, отличного от пиперазина, где К2 необязательно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, -Ο=Ν, С-С алкила, С3-С7 циклоалкила, С1-С2 фторзамещенного алкила, -О-К8, -δ-К8, -(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), ^К8)(К8), -О-(С1-С2 алкил)-Ы(К8)(К8), -(С1-С2 алкил)-О-(С--С; алкил)-Ы(К8)(К8), -С(ОЖК8)(К8), -(С1-С2 алкил)-С(О)-Ы(К8)(К8), -О-фенила, фенила и второго гетероцикла, определенного для К1, и когда К2 представляет собой фенил, К2 также необязательно замещен 3,4-метилендиокси, фторзамещенным 3,4метилендиокси, 3,4-этилендиокси или фторзамещенным 3,4-этилендиокси, где любой фенильный или второй гетероциклический заместитель К2 необязательно замещен галогеном; -ΝΝ; О-С3 алкилом, С1-С2 фторзамещенным алкилом, -О-(О-С2) фторзамещенным алкилом, -О-(О-С3) алкилом, -8-(О-Сз) алкилом, А-Щ-СД фторзамещенным алкилом, -ΝΗ-^ι-Ο) алкилом и -Ы-(С1-С3)2 алкилом; и
    К4 выбран из водорода, галогена, -ΝΝ, фторзамещенного С1-С2 алкила, А-Щ-СД фторзамещенно- 126 020578 го алкила, С1-С4 алкила, -8-(С1-С4) алкила и С3-С7 циклоалкила;
    X выбран из
    -ЫН-С(=О)-+,
    -С(=0)-ΝΗ-1, где 1 указывает, где X связан с К1; и каждый К5 и К6 независимо выбран из водорода, С1-С4 алкила, -СР3 и (С1-С2 алкил)-СР3, где когда X представляет собой
    -С(0)-ΝΗ-Ι, каждый Ζ1 и Ζ2 представляют собой СН и К1 представляет собой необязательно замещенный фенил, тогда К2 является отличным от пиридинила.
  4. 4. Соединение по п.3, имеющее формулу
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, где К является водородом.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-5, где X является
    -С(=0)-ΝΗ-1,
  7. 7. Соединение по п.1 или 2, где К11 выбирают из
    - 127 020578
  8. 8. Соединение по любому из пп.1, 2 или 7, где К12 выбран из ρ
    - 128 020578
  9. 9. Соединение по п.3 или 4, где К1 выбран из
  10. 10. Соединение по любому из пп.3, 4 или 9, где К2 выбран из
    - 129 020578
    - 130 020578
  11. 11. Соединение по п.1, выбранное из или его соль.
  12. 12. Соединение по п.3, выбранное из
    - 131 020578 или его соль.
  13. 13. Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из пп.1-12 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
  14. 14. Фармацевтическая композиция по п.13, дополнительно включающая другое активное средство, выбранное из противовоспалительных средств, анальгетиков, противомикробных средств, противогрибковых средств, антибиотиков, витаминов, антиоксидантов и блокирующих солнечные лучи средств, включая антранилаты, бензофеноны (в частности, бензофенон-3), производные камфоры, циннаматы (например, октилметоксициннамат), дибензоилметаны (например, бутилметоксидибензоилметан), паминобензойную кислоту (РАВА) и ее производные и салицилаты (например, октилсалицилат).
  15. 15. Способ лечения субъекта, страдающего от или чувствительного к резистентности к инсулину, метаболического синдрома, диабета или его осложнений, или повышения чувствительности к инсулину у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции по п.13.
EA201170137A 2008-07-03 2009-07-02 Бензимидазолы и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина EA020578B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13393808P 2008-07-03 2008-07-03
PCT/US2009/049498 WO2010003048A1 (en) 2008-07-03 2009-07-02 Benzimidazoles and related analogs as sirtuin modulators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170137A1 EA201170137A1 (ru) 2011-08-30
EA020578B1 true EA020578B1 (ru) 2014-12-30

Family

ID=41056804

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170137A EA020578B1 (ru) 2008-07-03 2009-07-02 Бензимидазолы и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина

Country Status (13)

Country Link
US (2) US8846947B2 (ru)
EP (1) EP2315763B1 (ru)
JP (2) JP5758292B2 (ru)
KR (1) KR20110036602A (ru)
CN (2) CN104193740A (ru)
AU (1) AU2009266889B2 (ru)
BR (1) BRPI0914006A2 (ru)
CA (1) CA2729128C (ru)
EA (1) EA020578B1 (ru)
IL (1) IL210206A (ru)
MX (1) MX2011000079A (ru)
WO (1) WO2010003048A1 (ru)
ZA (1) ZA201009170B (ru)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8685970B2 (en) 2008-05-01 2014-04-01 GlaxoSmithKline, LLC Quinolines and related analogs as sirtuin modulators
US8846947B2 (en) * 2008-07-03 2014-09-30 Glaxosmithkline Llc Benzimidazoles and related analogs as sirtuin modulators
CN102227420B (zh) 2008-09-29 2015-06-24 西特里斯药业公司 作为沉默调节蛋白调节剂的喹唑啉酮、喹诺酮和相关的类似物
AU2010319842A1 (en) 2009-10-29 2012-05-17 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic pyridines and analogs as sirtuin modulators
EP2558589A4 (en) 2010-04-15 2014-01-01 Glaxosmithkline Llc SIRTUIN ACTIVATORS AND ACTIVATION ASSAYS FOR THIS
RS55662B1 (sr) 2010-10-06 2017-06-30 Glaxosmithkline Llc Derivati benzimidazola kao inhibitori pi3 kinaze
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2015009883A1 (en) * 2013-07-18 2015-01-22 The Hamner Institutes Activators of nad-dependent protein deacteylases and uses thereof
WO2015009884A1 (en) * 2013-07-18 2015-01-22 The Hamner Institutes Cell culture media formulations comprising an activator of nad-dependent protein deacteylase and ueses thereof
US10172915B2 (en) 2013-10-20 2019-01-08 Duke University Methods and compositions for activation of sirtuins with Annexin A1 peptides
US10316054B2 (en) 2014-06-02 2019-06-11 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Preparation and use of crystalline beta-D-nicotinamide riboside
WO2015186114A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Nicotinamide riboside analogs and pharmaceutical compositions and uses thereof
HUE051395T2 (hu) 2015-12-09 2021-03-01 Cadent Therapeutics Inc Heteroaromás NMDA receptor modulátorok és alkalmazásaik
EP3386990B1 (en) 2015-12-09 2023-04-19 Novartis AG Thienopyrimidinone nmda receptor modulators and uses thereof
TW201825465A (zh) 2016-09-23 2018-07-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201815787A (zh) 2016-09-23 2018-05-01 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201813963A (zh) 2016-09-23 2018-04-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
EP3558318B1 (en) 2016-12-22 2023-12-20 Novartis AG Nmda receptor modulators and uses thereof
US11987579B2 (en) 2018-07-30 2024-05-21 Duke University Niclosamide analogues and therapeutic use thereof
CR20210125A (es) 2018-08-03 2021-06-30 Cadent Therapeutics Inc Moduladores del receptor nmda heteroaromático y usos de los mismos
JP7345220B2 (ja) * 2019-08-30 2023-09-15 ティーエスディー ライフ サイエンス カンパニー リミテッド イミダゾピリジン誘導体及びこれを有効成分として含有する薬学的組成物
IL293592A (en) 2019-12-06 2022-08-01 Vertex Pharma Transduced tetrahydrofurans as sodium channel modulators
KR20220122879A (ko) * 2021-02-26 2022-09-05 주식회사 티에스디라이프사이언스 이미다조피리딘 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물
MX2023014378A (es) 2021-06-04 2023-12-15 Vertex Pharma N-(hidroxialquil(hetero)aril)tetrahidrofurano carboxamidas como moduladores de canales de sodio.
WO2024071439A1 (ja) * 2022-09-30 2024-04-04 科研製薬株式会社 縮環化合物及びそれを含有する医薬

Family Cites Families (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1108698B (de) 1959-09-03 1961-06-15 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von 2-(2'-Aminoaryl)-4, 5-arylen-1, 2, 3-triazolen
DE2641060A1 (de) 1976-09-11 1978-03-16 Hoechst Ag Beta-lactamverbindungen und verfahren zu ihrer herstellung
US5874431A (en) * 1993-08-28 1999-02-23 Cancer Research Campaign Technology Limited Benzazole compounds
CA2168016C (en) * 1994-05-31 2000-09-26 Akio Matsunaga Benzimidazole derivatives
US5821258A (en) 1994-12-27 1998-10-13 Mitsui Chemicals, Inc. Phenylbenzimidazole derivatives
EP0934307B1 (en) 1996-06-19 2011-04-27 Aventis Pharma Limited Substituted azabicylic compounds and their use as inhibitors of the production of tnf and cyclic amp phosphodiesterase
US5866702A (en) 1996-08-02 1999-02-02 Cv Therapeutics, Incorporation Purine inhibitors of cyclin dependent kinase 2
JP2000143635A (ja) * 1998-06-10 2000-05-26 Takeda Chem Ind Ltd 血管新生阻害剤
SK286857B6 (sk) 1999-06-23 2009-06-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituované benzimidazoly, spôsob ich prípravy, ich použitie a liečivo, ktoré ich obsahuje
DE19928424A1 (de) 1999-06-23 2000-12-28 Aventis Pharma Gmbh Substituierte Benzimidazole
JP2002363169A (ja) * 2001-06-08 2002-12-18 Fujiyakuhin Co Ltd 抗腫瘍活性を有する複素環化合物
ITRM20010465A1 (it) 2001-07-31 2003-01-31 Sigma Tau Ind Farmaceuti Derivati della triazolil-imidazopiridina e delle triazolilpurine utili come ligandi del recettore a2a dell'adenosina e loro uso come medicam
FR2831536A1 (fr) 2001-10-26 2003-05-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de kdr
US6897208B2 (en) * 2001-10-26 2005-05-24 Aventis Pharmaceuticals Inc. Benzimidazoles
WO2003035065A1 (en) 2001-10-26 2003-05-01 Aventis Pharmaceuticals Inc Benzimidazoles and analogues and their use as protein kinases inhibitors
CN1425663A (zh) 2002-12-19 2003-06-25 上海交通大学 2－吡啶基－4－碳酰基－苯骈咪唑型衍生物的制备方法
CN1272333C (zh) 2004-11-18 2006-08-30 上海交通大学 2－吡啶基－1h－苯并咪唑－4－酰胺型衍生物
WO2006094248A1 (en) 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Aryl-substituted cyclic sirtuin modulators
WO2006094209A2 (en) * 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. N-benzimidazolylalkyl-substituted amide sirtuin modulators
EP1853920B1 (en) 2005-03-03 2012-02-01 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence polarization assays for acetyltransferase/deacetylase activity
WO2006094210A2 (en) 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydroquinoxalinone sirtuin modulators
WO2006094246A2 (en) 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. N-arylmethyl benzamide sirtuin modulators
WO2006094236A1 (en) 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. N-phenyl benzamide derivatives as sirtuin modulators
WO2006094233A1 (en) 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. N,n'-dicyclic isothiourea sirtuin modulators
CA2599987A1 (en) * 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Fused heterocyclic compounds and their use as sirtuin modulators
EP2457901A1 (en) * 2005-03-14 2012-05-30 High Point Pharmaceuticals, LLC Benzazole derivatives, compositions, and methods of use as B-secretase inhibitors
EP2805719A1 (en) 2005-03-30 2014-11-26 Glaxosmithkline LLC Nicotinamide riboside and analogues thereof
US20070014833A1 (en) 2005-03-30 2007-01-18 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Treatment of eye disorders with sirtuin modulators
AU2006249816A1 (en) 2005-05-25 2006-11-30 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Treatment of eye disorders with sirtuin modulators
WO2006130673A1 (en) 2005-05-31 2006-12-07 Janssen Pharmaceutica, N.V. 3-benzoimidazolyl-pyrazolopyridines useful in treating kinase disorders
AU2006269459B2 (en) 2005-07-07 2013-02-07 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Methods and related compositions for treating or preventing obesity, insulin resistance disorders, and mitochondrial-associated disorders
US8093401B2 (en) * 2005-08-04 2012-01-10 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
US8088928B2 (en) * 2005-08-04 2012-01-03 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
DK1910384T3 (da) * 2005-08-04 2012-12-17 Sirtris Pharmaceuticals Inc Imidazo [2,1-b] thiazol-derivater som sirtuinmodulerende forbindelser
US7855289B2 (en) * 2005-08-04 2010-12-21 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin modulating compounds
WO2007056155A1 (en) * 2005-11-03 2007-05-18 Chembridge Research Laboratories, Inc. Heterocyclic compounds as tyrosine kinase modulators
WO2007102861A2 (en) 2005-12-02 2007-09-13 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Modulators of cdc2-like kinases (clks) and methods of use thereof
ES2389111T3 (es) 2005-12-02 2012-10-23 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Ensayos de espectrometría de masas para la actividad acetiltransferasa/desacetilasa
WO2008027379A2 (en) 2006-08-29 2008-03-06 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Indicators of sirtuin activity and methods of use thereof
US20080249103A1 (en) 2006-11-15 2008-10-09 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Sirtuin polymorphisms and methods of use thereof
WO2008073451A2 (en) 2006-12-11 2008-06-19 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Benzoimidazole derivatives as sirtuin (sir) modulating compounds
WO2008100423A1 (en) 2007-02-09 2008-08-21 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Gut microsomal triglyceride transport protein inhibitors
WO2008100376A2 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Truncation variants of sirt1 and methods of use thereof
AU2008229385A1 (en) 2007-03-19 2008-09-25 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Biomarkers of sirtuin activity and methods of use thereof
CL2008001822A1 (es) * 2007-06-20 2009-03-13 Sirtris Pharmaceuticals Inc Compuestos derivados de tiazolo[5,4-b]piridina; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y uso del compuesto en el tratamiento de la resistencia a la insulina, sindrome metabolico, diabetes, entre otras.
TW200918542A (en) * 2007-06-20 2009-05-01 Sirtris Pharmaceuticals Inc Sirtuin modulating compounds
WO2009058348A1 (en) 2007-11-01 2009-05-07 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Amide derivatives as sirtuin modulators
CN101910184A (zh) 2007-11-08 2010-12-08 西特里斯药业公司 可溶性噻唑并吡啶
WO2009085226A2 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of cdc2-like kinases (clks) and methods of use thereof
WO2009089011A2 (en) 2008-01-08 2009-07-16 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Resveratrol formulations
US8685970B2 (en) 2008-05-01 2014-04-01 GlaxoSmithKline, LLC Quinolines and related analogs as sirtuin modulators
US20110113498A1 (en) 2008-05-15 2011-05-12 Westphal Christoph H Sirt1 polymorphic variants and methods of use thereof
KR20110019385A (ko) 2008-05-29 2011-02-25 서트리스 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 시르투인 조절제로서의 이미다조피리딘 및 관련 유사체
US8846947B2 (en) * 2008-07-03 2014-09-30 Glaxosmithkline Llc Benzimidazoles and related analogs as sirtuin modulators
AU2009282076A1 (en) 2008-08-12 2010-02-18 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Benzoxazoles, benzthiazoles and related analogs as sirtuin modulators
CN101353326A (zh) * 2008-09-11 2009-01-28 上海交通大学 一种2-羟基苯基-1h-苯并咪唑-4-酰胺型衍生物
CN102227420B (zh) 2008-09-29 2015-06-24 西特里斯药业公司 作为沉默调节蛋白调节剂的喹唑啉酮、喹诺酮和相关的类似物
BRPI0919625A2 (pt) * 2008-10-29 2015-12-01 Sirtris Pharmaceutical Inc piriridina, piridina bicíclica e análogos relacionados como moduladores de sirtuína
WO2010077686A1 (en) 2008-12-08 2010-07-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Isoindolinone and related analogs as sirtuin modulators
EP2373646A4 (en) 2008-12-16 2012-07-18 Sirtris Pharmaceuticals Inc PHTALAZINONE AND RELATED ANALOGUES AS MODULATORS OF SIRTUINE
NZ594122A (en) 2008-12-19 2013-03-28 Sirtris Pharmaceuticals Inc 2-Phenyl-N-(2-(6-(pyrrolidin-1-ylmethyl)thiazolo[5,4-b]pyridin-2-yl)phenyl)thiazole-4-carboxamide derivatives
CN101619058A (zh) * 2009-01-08 2010-01-06 上海交通大学 一种苯并咪唑-4-酰胺型衍生物
WO2010088574A1 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Azabenzimidazoles and related analogs as sirtuin modulators
EA201171098A1 (ru) 2009-03-02 2012-04-30 Сертрис Фармасьютикалз, Инк. 8-замещенные хинолины и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина
WO2011116176A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Sirtris Pharmaceuticals Inc. 3-substitued imidazo (4, 5-b) pyridines and analogs as sirtuin modulators

Also Published As

Publication number Publication date
IL210206A0 (en) 2011-03-31
CN102143957B (zh) 2014-08-20
CN102143957A (zh) 2011-08-03
EP2315763A1 (en) 2011-05-04
EA201170137A1 (ru) 2011-08-30
EP2315763B1 (en) 2016-06-01
ZA201009170B (en) 2014-03-26
AU2009266889A1 (en) 2010-01-07
IL210206A (en) 2016-06-30
MX2011000079A (es) 2011-03-02
AU2009266889B2 (en) 2013-05-02
JP2015051987A (ja) 2015-03-19
JP5758292B2 (ja) 2015-08-05
KR20110036602A (ko) 2011-04-07
CA2729128C (en) 2016-05-31
CA2729128A1 (en) 2010-01-07
CN104193740A (zh) 2014-12-10
US20110124637A1 (en) 2011-05-26
US20150057272A1 (en) 2015-02-26
WO2010003048A1 (en) 2010-01-07
BRPI0914006A2 (pt) 2015-10-27
US8846947B2 (en) 2014-09-30
JP2011526927A (ja) 2011-10-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020578B1 (ru) Бензимидазолы и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина
RU2527269C2 (ru) Аналоги хроменона в качестве модуляторов сиртуина
JP5498940B2 (ja) サーチュイン調節性チアゾロピリジン化合物
JP5281081B2 (ja) サーチュイン調節性イミダゾチアゾール化合物
JP2011521960A (ja) サーチュイン調節薬としてのイミダゾピリジンおよび関連する類似体
EA021424B1 (ru) Тиазолопиридиновые соединения, регулирующие сиртуин
JP2012512254A (ja) サーチュインモジュレーターとしてのフタラジノンおよび関連するアナログ
EA021938B1 (ru) Хинолины и их аналоги в качестве модуляторов сиртуина

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU