EA002318B1 - Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний - Google Patents

Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA002318B1
EA002318B1 EA199800948A EA199800948A EA002318B1 EA 002318 B1 EA002318 B1 EA 002318B1 EA 199800948 A EA199800948 A EA 199800948A EA 199800948 A EA199800948 A EA 199800948A EA 002318 B1 EA002318 B1 EA 002318B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
solution
chlorin
chlorophyll
extraction
drug
Prior art date
Application number
EA199800948A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199800948A1 (ru
Inventor
Людмила Васильевна Пленина
Станислав Валентинович Хлюстов
Людмила Александровна Грубина
Георгий Афанасьевич Кочубеев
Эдвард Антонович Жаврид
Original Assignee
Научно-Производственное Республиканское Унитарное Предприятие "Диалек"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Научно-Производственное Республиканское Унитарное Предприятие "Диалек" filed Critical Научно-Производственное Республиканское Унитарное Предприятие "Диалек"
Priority to EA199800948A priority Critical patent/EA002318B1/ru
Publication of EA199800948A1 publication Critical patent/EA199800948A1/ru
Publication of EA002318B1 publication Critical patent/EA002318B1/ru

Links

Abstract

Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний включает СО-экстракцию и отделение из растительного сырья каротиноидов и жирных кислот под давлением 10-300 бар, экстракцию хлорофилла и его производных органическим растворителем, их окисление с выделением феофитина и последующего превращения его, причем превращение хлорофилла осуществляют незамедлительно обработкой экстракта концентрированной соляной кислотой, и после его окислительного расщепления и выделения из солянокислого раствора и осаждения щелочью при рН 4,0±0,2 проводят очистку препарата и вводят стабилизатор - раствор хитозана.

Description

Изобретение относится к химикофармацевтической промышленности и касается способа получения фармацевтического препарата, используемого в медицине для фотодинамической терапии онкологических заболеваний.
Известны способы получения фотосенсибилизирующих препаратов из растительного сырья путем экстракции свежего или специально высушенного сырья полярными растворителями (спирт, ацетон) и получения экстракта суммы хлорофиллов а и Ь. Из хлорофильного экстракта осаждают сумму феофитинов а и Ь, из которых путем хроматографической очистки выделяют чистый феофитин а. Из феофитина а получают неустойчивый хлорин путем окисления в спиртах (метиловом, этиловом, пропиловом), содержащих щелочь, и обработкой его при нагревании и кипячении в органических растворителях или декарбоксилирующими агентами [1].
Однако эти способы сложны, многостадийны и имеют низкий выход целевого продукта.
Известен способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии, модифицированный на стадии очистки целевого продукта [2].
Способ заключается в том, что из растительного сырья выделяют путем его поэтапной обработки органическим растворителем производные хлорофилла. Сначала выделяют путем экстракции сырья полярным растворителем (этанолом) смесь хлорофиллов а и Ь, из которой при помощи реактива Жирара осаждают феофитины а и Ь. Далее из этой смеси получают чистый феофитин а путем хроматографической очистки на силикагеле, феофитин а затем подвергают окислительному расщеплению в диэтиловом эфире с добавлением к нему 20-30% едкого калия при барботировании воздухом при комнатной температуре в течение 2 ч до образования неустойчивого хлорина, который затем обрабатывают, как описано выше.
Однако этот способ также многостадийный, трудоемкий и не пригоден для промышленного производства. Выход целевого продукта не высок из-за потерь производных хлорофилла на стадии обработки смеси реактивом Жирара и хроматографической очистки на силикагеле, а также при экстрагировании диэтиловым эфиром из слабокислой среды, при которой часть хлорина не переходит в кислое соединение, а остается в водной фазе. Известный способ получения хлорина в промышленных условиях нетехнологичен, так как требует использования большого количества взрывоопасного и вредного растворителя - диэтилового эфира, содержит значительное количество трудоемких процессов экстрагирования и требует больших объемов сырья. Кроме того, в процессе экстракции этанолом хлорофилл подвергается алломеризации, т.е. в этих условиях может наблюдаться частич ное окисление изоциклического кольца пигмента. При омылении феофитина с окисленным изоциклом основным продуктом реакции получается не хлорин, а ряд хлориноподобных продуктов, таких как пурпурины.
Задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в упрощении способа получения фармацевтического препарата, предотвращении окисления изоцикла хлорофилла, повышении выхода целевого продукта.
Задача решается тем, что в способе получения фармацевтического препарата путем экстракции из растительного сырья хлорофилла и его производных органическим растворителем и окислительного расщепления с выделением феофитина и последующего превращения его в хлорин в качестве сырья используют высушенные листья крапивы, люпина, люцерны и спирулины, а экстракцию проводят в два этапа. Сначала выделяют путем СО2-экстракции из сырья под давлением 10-300 бар смесь каротиноидов и жирных кислот, а затем этанолом извлекают производные хлорофилла, сразу же обрабатывают их концентрированной соляной кислотой с образованием осадка феофитина и растворяют его в спиртовом растворе в вакууме.
Проводят окислительное расщепление фитола и размыкание изоцикла в спиртовом растворе щелочи. Затем растворяют в кислоте и выделяют гидроксидом натрия осадок, состоящий преимущественно из хлорина, который подвергают стабилизации, сушке и очистке от примесей растворением в минимальном количестве ацетона.
Новым, согласно изобретению, является то, что растительное сырье подвергают СО2экстракции под давлением с извлечением каротиноидов и жирных кислот. И после извлечения каротиноидов и жирных кислот из растительной массы выделяют путем экстракции полярным растворителем этанолом производные хлорофилла. Спиртовой экстракт пигментов сразу же обрабатывается концентрированной соляной кислотой с выделением хлорина. Такая обработка растительного сырья позволяет извлечь производные хлорофилла без потерь и, тем самым, увеличить выход феофитинов.
А обработка феофитинов концентрированной соляной кислотой позволяет полнее выделить в раствор хлорин из осадка хлорофильных пигментов.
Способ осуществляется следующим образом.
Растительное сырье подвергают сушке в токе воздуха при 40-80°С.
Обезвоженное сырье помещают в экстрактор для СО2-экстракции и под давлением 10-300 бар и температуре 25°С проводят экстракцию каротиноидов и жирных кислот. Травяную массу выгружают из СО2-экстрактора, загружают в сосуд, заливают этанолом и прово дят экстракцию хлорофилла. После экстракции этанольный раствор хлорофиллов а+Ь отфильтровывают через стеклянный фильтр. К экстракту сразу же добавляют концентрированную соляную кислоту из расчета 2 мл на 1 л экстракта и через 12 ч осаждают сумму феофитинов а+Ь в виде черного осадка, который отфильтровывают и многократно промывают спиртом. Феофитин а+Ь растворяют в минимальном количестве ацетона, а затем спирта в вакууме. Далее в реакционный сосуд под вакуумом добавляют спиртовой раствор КОН до концентрации 15%. В результате происходит омыление фитола и размыкание изоцикла. Затем реакционную смесь при атмосферном давлении выливают в четырехкратное количество воды для прекращения реакции омыления.
Щелочной раствор подкисляют соляной кислотой до содержания в общем растворе 4,7%. При этом происходит растворение хлорина в кислоте. Затем проводят нейтрализацию раствора 30% раствором гидроксида натрия, получают осадок, состоящий из ряда пигментов, исключая хлорин. Осадок отделяют, а раствор фильтруют, и из раствора при нейтрализации выпадает осадок с содержанием хлорина 5060%, который промывают, собирают и сушат при температуре +37°С.
Для очистки хлорина от примесей его растворяют в минимальном количестве ацетона. Не растворившуюся часть препарата отделяют центрифугированием, раствор разводят дистиллированной водой 1:1 и доводят рН до 3,4, при этом образовавшийся осадок отделяют центрифугированием при тех же условиях. Осадок собирают и сушат в термостате при температуре +37°С.
Спектрофотометрически установлено, что после процедуры очистки содержание активного вещества в препарате возрастает на 10-15%.
Очищенный хлорин растворяют в воде, стерильно фильтруют. Для стабилизации препарата вводят раствор хитозана, который снижает общую токсичность и повышает специфические свойства препарата. Затем раствор разливают во флаконы и лиофильно высушивают из замороженного состояния. Высушенный препарат укупоривают в стерильных условиях и закатывают.
Описанный метод получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии удобен тем, что кроме использования легко доступных реактивов не содержит технологически сложных операций. Кроме того, основной растворитель - этиловый спирт - после отделения феофитинов может перегоняться и использоваться многократно в этой технологии.
Введение стабилизатора хитозана позволяет получать препарат не только в сухой, но и в жидкой форме.
В соответствии с изобретением полученный препарат содержит лиофильно высушенный хлорин в виде тринатриевой соли.
Физико-химические показатели препарата следующие.
Молекулярная масса 662 Да. В препарате содержится не менее 0,3 мг хлорина на 1 мг сухого вещества. Остальное составляет хлорид натрия, необходимый для лиофильной сушки препарата, и стабилизатор.
По внешнему виду препарат представляет собой лиофилизированный аморфный порошок черного цвета с зеленовато-фиолетовым металлическим блеском. Без запаха. рН водного раствора определяют потенциометрически. Содержимое 1 флакона, растворенное в 20 мл воды, должно иметь рН 8,5±0,5.
Водный раствор 0,002 г препарата в 400 мл воды должен быть прозрачным.
Препарат умеренно растворим в пиридине (1 г в 100 мл), в воде (1 г в 100 мл), в 0,9% изотоническом растворе хлорида натрия (1 г в 100 мл).
Подлинность определяют спектрофотометрически по спектру поглощения при длинах волн от 400 до 700 нм.
Хлорин имеет характерный спектр в виде четырех основных пиков при 401,5, 500, 530, 560, 605, 665 нм (фиг. 1).
В качестве второго теста на подлинность применяют тонкослойную хроматографию на пластинах с силуфолом - ИУ-256.
В качестве растворителя используют гексан, ацетон, хлороформ в соотношении 1:1:1. На хроматографическую пластину наносят 2 мкл раствора хлорина в воде. По окончании процесса хроматографии и подсушивания пластины на хроматограмме выявляют одно ярко-зеленое пятно на старте и до семи слабоокрашенных пятен с К.я=0,08±0,03; К.Е=0,2±0,05; В(з=0,31±0,07; Ви=0,44±0,09; ВГ5=0,60+0,10; ВГ6=0,85±0,07; Βί7=0,95±0,04.
Испытание на чистоту и допустимые пределы примесей проводят по ГФ XI, вып. 1, стр.165.
Содержание тяжелых металлов определяют методом влажной минерализации по статье Компедиум Медикаменторум.
Содержание меди в препарате не превышает 1,2х10-3%, цинка 8,3х10-3%, железа 1х10-1%, магния 1,25х10-2%, алюминия 1,3х10-2%, молибдена 0,17%.
Препарат не содержит кобальта, ртути, свинца, стронция, мышьяка.
Органические примеси в препарате отсутствуют.
Остаточная влажность препарата не должна превышать 12%.
Количественное определение хлорина основано на спектрофотометрическом измерении оптической плотности раствора при 665 нм.
Расчет содержания хлорина в препарате ведут по формуле
С = Бх50/Ех1х 662, где Ό - оптическая плотность раствора при 665 нм;
Е - коэффициент молярной экстинции хлорина в данном растворителе при данной длине волны, равный 5,3х10-4 М-1 см;
- толщина слоя кюветы (в см);
662 - молекулярная масса тринатриевой соли хлорина;
- коэффициент разведения препарата.
Содержание хлорина в сухом препарате должно быть 50±5 мг.
Пример 1 (субстрат - крапива).
I. Получение феофитинов.
Измельченные до порошка листья крапивы (3,5-4 кг) замачивают в 20 л смеси воды со спиртом в соотношении 1:1 в течение 1,5-2 ч при температуре 15-25°С. Затем воду отсасывают под вакуумом. Обезвоженную растительную массу помещают в СО2-экстрактор и под давлением 10-300 бар проводят экстракцию каротиноидов и жирных кислот. Травяную массу извлекают из СО2-экстрактора, помещают в стеклянную трубку (Ь=120 см, Ό=40 мм) и заливают 15 л этанола на 1,5-2 ч. Экстракция повторяется 3 раза. Экстракты объединяют, фильтруют через стеклянный, бумажный или ватно-марлевый фильтр.
К экстракту сразу же добавляют концентрированную НС1 (2 мл на 1 л экстракта), через 12 ч осадок отфильтровывают и сушат на воздухе.
Выход - 30 г порошка.
II. Синтез хлорина.
г порошка феофитина растворяют в 250 мл ацетона. Полученный раствор смешивают с 5 л спирта. Смесь аэрируют азотом в течение 3040 мин при температуре +40°С.
Параллельно готовится спиртовой раствор гидроксида калия из расчета 1,2 кг на 5 л 96% спирта в атмосфере азота. Затем раствор щелочи прокачивается в емкость с растворенным в этаноле феофитином.
Реакция проводится в течение 40-50 мин при температуре +40°С в азотной атмосфере.
По окончании реакции раствор нейтрализуется 28 л заранее приготовленного раствора 9% соляной кислоты до рН=0,4-0,8 при интенсивном перемешивании. При этом выпадает осадок, состоящий из примесных пигментов, который отделяют фильтрацией через мезгу на нутчфильтре.
Доводят рН фильтрата до 4,0±0,2 30% раствором гидроксида натрия. Выпавший осадок, состоящий преимущественно из хлорина, собирают на центрифуге и отмывают дистиллированной водой до рН=3,6.
Полученный осадок сушат при температуре +37°С до постоянной массы.
Выход продукта - около 5 г.
III. Очистка от примесей.
Берут навеску препарата и растворяют в минимальном количестве ацетона. Не растворившуюся часть препарата отделяют центрифугированием при 3000 об/мин в течение 15 мин.
Затем раствор разводят дистиллированной водой 1:1 и доводят рН до 3,4, при этом выпадает осадок, который отделяют центрифугированием при тех же условиях. Осадок собирают и сушат в термостате при температуре + 37°С.
IV. Стабилизация препарата.
Полученное сухое вещество растворяют в дистиллированной воде при рН=11,0. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр. РН фильтрата доводят до значения 8,08,5 и вводят 125 мл стабилизатора, (растворенный 2% раствор хитозана). Далее полученный раствор стерильно фильтруют, разливают во флаконы и леофильно высушивают.
Влажность полученного препарата не более 10%.
Пример 2 ( субстрат - люпин).
I. Получение феофитинов.
Схема получения феофитинов из люпина аналогична схеме получения из крапивы как в примере 1.
Выход продукта составляет около 50 г.
II. Синтез хлорина.
г феофитина растворяют в 0,5 л ацетона. Далее см. схему получения хлорина и очистку от примесей как в примере 1.
Пример 3 (субстрат - смесь крапивы, люпина, люцерны в весовом соотношении 1:1:1) получение жидкой формы.
I. Получение феофитина.
Растительную смесь 80 кг, высушенную при температуре 40-80°С в токе воздуха, замачивают в 300 л смеси воды с этанолом (1:1) в течение 1,5 ч при температуре 15-25°С. Затем раствор отсасывают под вакуумом. Обезвоженную траву помещают в экстрактор для СО2экстракции под давлением 10-300 бар и температуре 25°С. Затем травяную массу выгружают из СО2-экстрактора, загружают в сосуд для обработки этанолом и проводят 3 экстракции хлорофилла этанолом (по 200-250 л). Экстракты объединяют и далее проводят получение феофитина по схеме получения из экстракта крапивы по примеру 1.
Выход продукта - 800 г.
II. Получение хлорина.
Полученный феофитин растворяют в 2 л ацетона. Полученный раствор заливают в 15 л этанола на 45-60 мин, добавляют раствор КОН в этаноле (3,5 кг на 15 л спирта). Реакция длится 60 мин при температуре +40°С в атмосфере азота.
Раствор нейтрализуют 9% НС1 (15 л на 60 л Н2О), рН=0,6-75 л.
Образовавшийся осадок удаляют на нутчфильтре. Доводят рН фильтрата до 4,0. Образовавшийся осадок собирают на центрифуге и отмывают подкисленной водой.
Выход продукта - около 100 г.
Вещество растворяют в дистиллированной воде при рН=11,0.
Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр. РН фильтрата доводят до значения 8,0-8,5 и вводят стабилизатор - 2% раствор хитозана.
Полученный раствор стерильно фильтруют и разливают во флаконы.
Фармацевтический препарат, полученный предлагаемым способом, выпускается в сухом виде по 50±100 мг во флаконах на 50 мл или в жидкой форме. Содержание активного вещества хлорина составляет не менее 0,3 мг/мг сухого вещества.
По своему действию препарат относится к фотосенсибилизаторам, избирательно накапливающимся в опухолевой ткани. Последующее воздействие светом с длиной волны 665 нм приводит (фотодинамическая терапия) к возбуждению молекулы хлорина и последующему разрушению опухолевой ткани. Эффект фотосенсибилизации проявляется в нарушении клеточного дыхания, синтеза белка, подавлении гликолиза, в изменении проницаемости клеточной мембраны. На этих свойствах хлорина основано его применение при лечении опухолей. Введение стабилизатора снижает общую токсичность и повышает его специфические свойства.
Препарат вводят внутривенно. Раствор препарата готовят ех 1етроге. Содержимое флакона разводят в 50 мл физиологического раствора хлорида натрия. Лечебную дозу препарата вводят в вену в течение 20 мин в 200 мл физиологического раствора.
Полученное фотосенсибилизирующее средство прошло клинические испытания и показало положительные результаты.
Клинические испытания фармакологических свойств фотосенсибилизатора хлорина были проведены при фотодинамической терапии опухолей на мышах и крысах путем внутривенного введения фотосенсибилизатора и последующего облучения опухолевых очагов.
Фотосенсибилизатор хлорин имеет максимум поглощения при длине волны 660 нм. Поэтому для фотооблучения опухолей использовался лазер с указанной длиной волны света.
Испытания показали, что препарат является малотоксичным веществом. Так, для мышей ЬЭ|0 составляет 40 мг/кг, для крыс - 30 мг/кг.
Для перевитых опухолей крыс и мышей характерно более медленное накопление и выведение препарата по сравнению с нормальными тканями.
Через 24-72 ч после введения концентрация хлорина в опухолях превышала его содержание в печени, почках, селезенке и мышцах у животных с саркомой 45 соответственно в 2,6, 1,2, 4,3 и 6,5 раз; с саркомой М-1 - в 4,6, 2,1, 7,7 и 11,5 раз; с саркомой 180 - в 6, 12, 10 и 55 раз; с солидной опухолью Эрлиха - в 6,5, 13, 11 и 65 раз.
Диапазон терапевтических доз хлорина составлял 1-10 мг/кг. Глубина повреждения ново образований при использовании препарата в этих дозах варьировала от 4 до 16 мм, а противоопухолевый эффект фотодинамического воздействия находился в прямой зависимости от концентрации фотосенсибилизатора в крови, ткани опухоли и от энергетической экспозиции светового облучения.
Различные типы опухолей отличались по чувствительности к фотодинамическому воздействию: излеченность животных с альвеолярным раком печени РС-1, саркомой 45, саркомой М-1 и лимфосаркомой Плисса составила соответственно 100, 100, 50 и 20%.
Фотодинамическое воздействие с хлорином вызывает структурно-функциональные изменения и некроз опухолевой ткани. В зависимости от дозы препарата гибель опухолевых клеток может наступать в результате прямого фотоцитотоксического эффекта или опосредованно вследствие необратимого нарушения кровообращения с последующим аутолизом.
Основное побочное действие хлорина выражалось в незначительных структурнофункциональных нарушениях в печени при длительном (в течение 30 суток) введении препарата. При 2-3-кратном введении патологических изменений не наблюдалось.
В токсических дозах, вызывающих гибель всех или части подопытных животных, наблюдались выраженные морфологические изменения в печени.
Максимальное повреждение опухолевой и нормальной тканей наблюдалось при проведении фотооблучения в момент наибольшей концентрации хлорина в крови, а преимущественное повреждение опухолевой ткани - при интервале времени между введением препарата и световым воздействием 24-72 ч. Терапевтическая доза фотооблучения составляет 45-135 Дж/см2.
Результаты испытаний показали, что полученный данным способом фармацевтический препарат является эффективным фотосенсибилизатором для лечении онкологических заболеваний при использовании метода лазеродинамической терапии. Данное соединение превосходит по своим характеристикам применяемые в настоящее время препараты на основе гематопорфирина.

Claims (2)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний, включающий экстракцию из растительного сырья хлорофилла и его производных органическим растворителем, их окисление с выделением феофитина и последующим превращением его, отличающийся тем, что, из растительного сырья путем СО2 экстракции под давлением 10-300 бар до извлечения хлорофилла этанолом отделяют каротиноиды и жирные кислоты, а превращение хлорофилла осуществляют незамедлительно обработкой концентрированной соляной кислотой и после его окислительного расщепления и выделения из солянокислого раствора и осаждения щело чью при рН=4,0±0,2 проводят последующую очистку препарата и вводят стабилизатор.
  2. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора применяют раствор хитозана.
EA199800948A 1998-09-03 1998-09-03 Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний EA002318B1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA199800948A EA002318B1 (ru) 1998-09-03 1998-09-03 Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA199800948A EA002318B1 (ru) 1998-09-03 1998-09-03 Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199800948A1 EA199800948A1 (ru) 2000-04-24
EA002318B1 true EA002318B1 (ru) 2002-04-25

Family

ID=8161467

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199800948A EA002318B1 (ru) 1998-09-03 1998-09-03 Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний

Country Status (1)

Country Link
EA (1) EA002318B1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03215433A (en) * 1990-01-19 1991-09-20 Ichimaru Pharcos Co Ltd Anti-mutagenic action substance originated from hydrangeae dulcis folium
DE4111208A1 (de) * 1991-04-06 1992-10-08 Inge Witte Heilmittel fuer die behandlung von krebs und pflegemittel fuer von hautkrebs befallene koerperpartien
JPH05186361A (ja) * 1991-03-04 1993-07-27 Kobe Steel Ltd 抗発癌物質及びその製造方法
RU2078578C1 (ru) * 1995-02-23 1997-05-10 Центр народной медицины "Юнона" Средство и способ повышения противоопухолевой активности и уменьшения побочных действий цитостатической терапии

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03215433A (en) * 1990-01-19 1991-09-20 Ichimaru Pharcos Co Ltd Anti-mutagenic action substance originated from hydrangeae dulcis folium
JPH05186361A (ja) * 1991-03-04 1993-07-27 Kobe Steel Ltd 抗発癌物質及びその製造方法
DE4111208A1 (de) * 1991-04-06 1992-10-08 Inge Witte Heilmittel fuer die behandlung von krebs und pflegemittel fuer von hautkrebs befallene koerperpartien
RU2078578C1 (ru) * 1995-02-23 1997-05-10 Центр народной медицины "Юнона" Средство и способ повышения противоопухолевой активности и уменьшения побочных действий цитостатической терапии

Also Published As

Publication number Publication date
EA199800948A1 (ru) 2000-04-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK172284B1 (da) Renset hematoporfyrinderivat til diagnose og behandling af tumorer samt fremgangsmåde til fremstilling af de rensede derivater og præparater indeholdende dem
US5698524A (en) Method of treating a patient suffering from a viral infection
EP0810222B1 (fr) Procédé d'extraction de polyphénols catéchiques à partir de potentilles, extrait obtenu et son utilisation
FR2643073A1 (fr) Procede de preparation d'extraits polyphenoliques de type flavane-3-ol purifies et extraits obtenus
WO2007049846A1 (en) Process for preparation of rhus verniciflua extracts having excellent anti-cancer activity and anti-cancer pharmaceutical composition containing the same
EP0349469A1 (fr) Produit pharmaceutique doté d'activité de régénération de l'épiderme basé sur le principe actif du mimosa tenuiflora et procédé d'obtention correspondant
FR2522001A1 (fr) Polysaccharides, leur preparation et compositions therapeutiques contenant ces produits
JP3610358B2 (ja) 抗酸化剤
JPH0539305A (ja) アストラガルス・メンブラナセウスから抽出した免疫 変調性多糖類及びこれらを含有する薬剤組成物
US20030202984A1 (en) Active oxygen scavenger and cancer chemopreventer from Grifola
EA002318B1 (ru) Способ получения фармацевтического препарата для фотодинамической терапии онкологических заболеваний
JP4772190B2 (ja) 皮膚美白剤
JP2005154322A (ja) ザクロ果皮抽出物
EP0507035A1 (fr) Extraits de Reine des Prés, leur préparation et leurs applications
FI101042B (fi) Menetelmä kasviperäisten, antineoplastisten, kemoterapeuttisten aineid en valmistamiseksi
KR100991375B1 (ko) 신규 크라이토싸이빈 유도체, 이의 제조방법 및 이를유효성분으로 함유하는 노화방지용 조성물
JP3937188B2 (ja) ルトナリンの製造方法
RU2180342C2 (ru) Способ получения метилового эфира феофорбида (а)
KR20190141118A (ko) 클로로필 함유 천연물로부터 고순도 페오피틴의 제조방법 및 그 페오피틴을 이용한 클로린 e6, 클로린 e6와 PVP(polyvinylpyrrolidone)의 복합체 제조방법
EP0571520B1 (fr) Utilisation en therapeutique de pycnogenols pour la preparation de medicaments a activite anti-inflammatoire
KR20190106834A (ko) 고순도 트리소듐 클로린 e6(trisodium Chlorin e6)와 PVP (polyvinylpyrrolidone)의 복합체 제조 방법과 Chlorin e6의 제조 방법
KR20190053490A (ko) 클로로필 함유 천연물로부터 고순도 페오피틴의 제조방법 및 그 페오피틴을 이용한 클로린 e6, 클로린 e6와 PVP(polyvinylpyrrolidone)의 복합체 제조방법
US3584123A (en) Method of treatment of skin diseases and therapeutic products from the roots of securidaca longipedonculata
CN112321597A (zh) 一种二氢卟吩e6衍生物及其制备方法和应用
Obluchinskaya et al. Development of extraction technology and characterization of extract from wrack algae grist

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KZ KG MD TJ TM