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Verfahren zur Herstellung von Magenschleimhautpräparaten durch Selbstandauuncr
Zur Herstellung von Pepsinpräparaten hat man bereits vorgeschlagen, die als Ausgangsprodukt
dienenden \lagenschleimliautteile in verdünnter Salzsäure einer Selbstandauung zu
unterwerfen, welche bekanntlich am raschesten vor sich geht, wenn man sie hei einer
Temperatur von. etwa 35 bis 45,' C durchführt. Durch die Selbstandauung wird das
Zell,gewehe des Ausgangsmaterials praktisch restlos aufgeschlossen, so daß die enthaltenen
Fermente in Lösung geben und sich dann nach Abpressen der Rückstände aus der entstehendien
Lösung gewinnen lassen.
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Dies Verfahren ergibt jedoch dann, wenn man die :\ridauung in der
1» slier üblichen und: naheliegenden Weise innerhalb desjenigen * ph-Bere@ichs durchführt,
in dem das Wirkungsmaximum von Pepsin liegt (pn = 1,0 bis 2,5), sehr geringe
Ausbeuten, weil mit dem intensiven Angriff des Pepsins auf die in den Magenschleim-hautteilen
reichlich vorhandenen Eiweißstoffe auch ein erheblicher Pepsinverhrauoh verbunden
ist.
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Die Erfindung betrifft ein Verfahren, das es gestattet, diese Verluste
erheblich herabzusetzen und gleichzeitig zu pharmazeutischbesonderswertvollen .#1agAe:nschleirrihautpräparaten
zu gelangen. Nach der Erfindung werden die ungesalzenen Magen, sclileimhautteile
mit verdünnter Salzsäure solcher Konzentration und Menge angedaut, daß der
PH-Wert
der Lösung trotz der entstehenden Abpufferung während des ganzen Andauungsvorgangs
unter i bleibt.
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Daß man auf diesem Wege überhaupt zu einer ausreichenden Andauung
gelangt, ist höchst überraschend, denn es ist bekannt, daß die Verdauungskraft von
Pepsin unter PH = i fast Null ist. Eingehende Untersuchungen zeigten jedoch folgendes:
Wenn die Säure in die aufzuarbeitenden Zellverbände eindiffundiert, wird sie in
Zellmembranen und Bindegewebe weitgehend abgepuffert und dringt deshalb mit wesentlich
verminderter Konzentration in das fermenthaltige Zellinmere ein. Stellt man Konzentration
und Menge der verwendeten Säure richtig ein, so kann man erreichen, claß erst im
Zellinnern derjenige PH-Wert entsteht, welcher volle fermentative Wirkung des Pepsins
gewährleistet. Die Zellen werden dann von innen her angedaut, und, sobald hierbei
ihre Membranen gesprengt sind und sich der fermenbhaltige Zellinlialt in die Lösung
ergießt, kommt das Pepsin wieder in ein Medium, dessen pH-Wert für die Aktivierung
seiner fermentativen Wirkung zu niedrig liegt, und wird so .gewissermaßen gelähmt.
Das Pepsin beschränkt daher seine Wirkung praktisch auf die im vorliegenden Falle
angestrebte Zellenaufschließung und stellt nach Erledigung dieser Aufgahe seine
Wirkung im wesentlichen, ein. Dabei unterliegt es dann auch keinem merklichen Verbrauch
mehr.
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Die zur Erzielung dieses Vorgangs erforderlichen Säuremengen und Säurekonzentrationen
richten sich nach Art und Herkommen der verarbeiteten Magenschleimhautteile. Verarbeitet
man die ganze Mukosa, so benötigt man bei Schweinemägen etwa 2,2 %ige Salzsäue,
bei Rindermägen etwa 2,8 %ige Salzsäure in einer Menge, die etwa einem Drittel des
Gewichts der verarbeiteten Magenschleimhäute entspricht. Verarbeitet man nur die
besonders pepsinreichen Funduszellemgebiete, so genügen .geringere Säuremengen.
Die jeweils geeignete Säuremenge läßt sich für jeden Verarbeitungsprozeß am besten
empirisch bestimmen, indem man Proben des Materials mit abgestuften Säuremengen
behandelt und dabei von Zeit zu Zeit den innerhalb der aus der Lösung '-herausgenommenen
und kurz abgespültenRestzellenverbändeherrschenden pfii-Wert mittels der Einstechelektrode
eines elektrischen PH-Meßgeräts prüft. Er soll bei etwa 1,5 bis 2,o liegen,
während der PH-Wert der Lösung unter i bleiben muß. Wo ein Meßgerät nicht zur Verfügung
steht, genügt auch die abgestufte Behandlung einer Anzahl von Proben und die Feststellung
des Ausbeutemaximums.
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Der Andauungsvorgang kann z. B. sehr bequem in langgestreckten, zylindrischen
Absitzgefäßen durchgeführt werden, welche man in einem Wasserl)ad von entsprechender
Temperatur unterbringt. Hierdurch wird das anschließmde Abtrennen des Extrakts von
den Rückständen erheblich erleichtert. Als besonders vorteilhaft hat es sich jedoch
erwiesen, den Andauungsvorgang in einem Filtersack vor sich gehen zu lassen, dessen
Inhalt durch kontinuierlich zugeführte, verdünnte. Salzsäure auf einem PH-Wert unter
i gehalten wird, und von dem man den abtropfenden Extrakt in ein gekühltes Gefäß
abführt. Auf diese Weise wird jeder Tropfen des gewonnenen Extrakts unverzüglich
aus der Zone erhöhter Temperatur herausgeführt, und eine so erhebliche Einschränkung
der im Extrakt weiterlaufenden fermentativen Vorgänge erzielt, daß man eine weitere,
merkliche Verbesserung der Ausbeuten erreicht. Der Ablauf ist hierbei zweckmäßig
laufend auf seinen 1)t1-NVert zu prüfen und geltebenenfalls aachzusäuern. Das Rohmaterial
wird vor der Einführung in den Filtersack zweckmäßig einige Stunden bei normaler
Temperatur mit etwa 2 o/oiger Salzsäure anigequollen. damit von vornherein ein ferinenblialti,ger
Extrakt abläuft. Ausführungsbeispiel to kg frische Nlagenschleiinhaut vom Schwein
werden mit 3,5 1 2,2 %iger Salzsäure bei Zimmertemperatur 3 Stunden aasgequollen
und dann in einen Filtersack gegelxiii, der über einem Trichter im Brutschrank aufgehängt
wird. Der Ablauf wird in einem auf 8° C gekühlten Gefäß aufgefangen und durch Nachsäuern
auf etwa pH = o,5 gehalten. Nach etwa r Stunde öffnet inan den Hahn eines mit 2.2
%iger Salzsäure gefüllten Gefäßes, welches weitere Salzsäure in den Filtersack nachtropfen
läßt. Diese laugt den Rückstand, der hierbei einer fortschreitenden Selbstandauun@g
unterliegt, weiter aus und tropft dann finit Extrakt beladen aus dem Filtersack
in das gekühlte Sammelgefäß ab. Nach etwa 6 Stunden ist die Extraktion beendet und
der Rückstand zu einer formlosen Masse zusammengeschmolzen. Während dieser ganzen
Zeit wird der Ablauf gekühlt und auf dem erwähnten pH-Wert gehalten.
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Bei pH-Werten von etwa o,5 halten sich Magenschl.eimpräparate auch
im flüssigen Zustande über längere Zeit. Zur Gewinnung von 'Trockenprodukten muß
die enthaltene Säure. jedoch vor dem "Trocknen abgestumpft werden, damit ihre Konzentration
nicht durch den l?ind'aml)fungsprozeß auf unerwünscht hohe Werte koinnit. Denn Pepsin
verträgt im allgemeinen keine Salzsäurekonzentrationen über .I bis 5%. Es hat sich
gezeigt, daß man diesen Gefahrenbereich vermeiden, aber trotzdem noch die zur Vermeidung
bakterieller Infizierung erwünschten Säuregrade im Trocknungsgut erhalten kann,
wenn man die zweckmäßig unmittelbar vor Beginn des Trocknun@gsprozesses vorzunehmende
Abstumpfung nur bis zii einem pH-Wert von etwa 3 treibt. Die Trocknung erfolgt am
besten in bekannter Weise auf Milchzucker od. dgl. Das entstehende Präparat enthält
außer Pepsin noch reichlich Kathepsin sowie eine Reihe weiterer, pharmazeutisch
wichtiger i\-la:genfermetite.