DE4118200C1 - In-vitro testing for adhesion of dressing to wound - by forming agar or agarose-collagen matrix, applying human plasma, calcium chloride soln. and clotting agent and warming until onset of fibrin net formation, etc. - Google Patents

In-vitro testing for adhesion of dressing to wound - by forming agar or agarose-collagen matrix, applying human plasma, calcium chloride soln. and clotting agent and warming until onset of fibrin net formation, etc.

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Abstract

Process for in vitro testing of the adhesion of dressings to wounds comprises; forming a matrix of agar/collagen or agarose/collagen; applying human plasma, and aq. CaCl2 soln. and a clotting reagent and warming at 37 deg.C until the fibrin net begins to form; applying a test sample of the dressing material; maintaining at 37 deg.C until the fibrin net is completely formed; pulling off the test sample and evaluating the result. Pref. process comprises heating 1-3% aq. soln. of agar or agarose to 100-750 deg.C; cooling to 50 deg.C; adding 0.1-2% insoluble collagen; putting 10 ml portions of the obtd. suspension in petridishes and allowing to cool; applying 0.5-3 ml human plasma; applying 0.5-3 ml human plasma; applying 0.5-3 ml 0.025m aq. CaCl2 soln.; warming the dish at 25-37 deg.C for 30-60 mins. until the fibrin net begins to form; applying a small piece of the dressing on the still liq. layer; warming at 37 deg.C for 60-120 minutes; and removing the sample. ADVANTAGE - Test can be standardised

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren, das es ermöglicht in-vitro zu prüfen, inwieweit eine Wundauflage mit einer Wunde verklebt sowie ein Substrat dafür. The invention relates to a method which makes it possible to examine in vitro the extent to which a wound dressing with a wound bonded and a substrate therefor.

Die Prüfung der Verklebung von Wundauflagen erfolgt bisher ua an Versuchstieren. has so far been among others on laboratory animals testing the adhesion of wound dressings. Ein in-vivo Modell an Meerschweinchen (Doppelringwunden-Modell) wurde von H. Baron (Baron, H., Untersuchung über Wundtextil- Verklebung, Arzneimittel-Forschung 1955, 4, 237-241) entwickelt. An in vivo model in guinea pigs (double ring wounds model) was developed by H. Baron (Baron, H., study of Wundtextil- bonding, drug research in 1955, 4, 237-241). Diese Versuche sind mit dem Einsatz von Versuchstieren verbunden. These attempts are associated with the use of experimental animals.

Neuere Literatur zu diesem Thema beschreibt die klinische Studie, die von WD Malone durchgeführt wurde (Malone, WD, Wound dressing adherence: a clinical comparative study, Archives of Emergency Medicine, 1987, 4, 101-105). Recent literature on the subject describes the clinical trial, which was conducted by WD Malone (Malone, WD, Wound dressing adherence: a clinical comparative study, Archives of Emergency Medicine, 1987, 4, 101-105).

In dieser Studie wurden 4 verschiedene Wundauflagen, die als nicht-klebend bezeichnet waren, an 40 Patienten getestet. In this study, four different wound dressings, which were referred to as non-adhesive, tested on 40 patients.

Der Grad der Verklebung wurde am Schmerzempfinden der Patienten beim Entfernen der Auflage von der Wunde gemessen. The degree of adhesion was measured on the pain of the patient upon removal of the pad from the wound.

Die von Baron entwickelte Prüfmethode und die Studie von Malone haben beide den Nachteil, daß eine Standardisierung der Versuche schwierig ist, da die Wundarten, Wundtiefe und die Zusammensetzung der Bakterienflora individuell verschieden sind. Developed by Baron test method and the study of Malone both have the disadvantage that a standardization of tests is difficult because the types of wounds, wound depth and composition of the bacterial flora are individually different.

Eine Alternative zu tierexperimentellen Studien stellt die von Scales & Winter (Scales, JT & Winter, GD, The adhesion of Wound dressings, an experimental study, Wound Healing: Proceedings of a Symposium 12/13 November 1959, 54-61) vorgeschlagene und durchgeführte in-vitro Methode mit verdünntem menschlichem Serum dar. An alternative to animal studies, the & Scales of Winter (Scales, JT & Winter, DG, The adhesion of Wound dressings on experimental study, Wound Healing: Proceedings of a Symposium 12/13 November 1959, 54-61) proposed and implemented in-vitro method is with diluted human serum.

Diese Methode basiert auf der Tatsache, daß die Wundauflage mit der Wunde durch das Wundexudat verklebt. This method is based on the fact that the wound dressing adhering to the wound through the wound exudate. Scales & Winter haben verschiedene Wundauflagen mit 33%iger Serumlösung getränkt und diese auf eine mit Human Serum beschichtete Oberfläche gelegt. Scales & Winter have different impregnated dressings with 33% hydrochloric serum solution and placed on a surface coated with human serum surface. Nach Trocknen bei 37°C und 60% rel. After drying at 37 ° C and 60% rel. Luftfeuchte wurden in 1/2 stündlichem Abstand über 24 Stunden lang die Proben von der beschichteten festen Unterlage "abgeschält". Humidity are "peeled" in 1/2 hourly intervals over 24 hours, the samples of the coated solid support. Die hierfür benötigte Kraft wurde mit einem Tensiometer ermittelt. The force required for this was determined using a tensiometer.

Diese Ersatzmethode für tierexperimentelle Studien entspricht jedoch nur zum Teil den Anforderungen, die an eine ideale in-vitro Alternative gestellt werden, da die Ausbildung des Fibrinnetzes in Verbindung mit der zu prüfenden Wundauflage und in Verbindung mit den Collagenfasern nicht in feuchtem Milieu wie bei einer wirklichen Wunde stattfindet und außerdem eine praktische und schnelle Durchführung der Versuche mit der Möglichkeit zur Übertragung auf in-vivo Bedingungen nur zum Teil gewährleistet ist. However, this alternative method for animal studies only partly complies with the requirements that are placed on an ideal in vitro alternative, since the formation of the fibrin network in conjunction with the test wound dressing and in conjunction with the collagen fibers are not in a moist environment like a real held wound and also a practical and rapid execution of the tests with the ability to transfer to in vivo conditions is guaranteed only in part.

Das Verkleben einer Wundauflage ist ua ein Problem der Adhäsion von zwei Flächen durch einen Kleber, nämlich das Wundsekret. Bonding a wound pad is, inter alia, a problem of the adhesion of two surfaces by an adhesive, namely, the wound exudate.

Die Adhäsion kann im Verlauf der Wundheilung in zwei Phasen unterteilt werden: The adhesion can be divided in the course of wound healing in two phases:

  • - Die Phase I ist fibrinabhängig und verläuft zwischen dem Zeitraum der Wundentstehung und 72 Stunden danach. - The Phase I is fibrinabhängig and extends between the time of wound formation and 72 hours thereafter.
  • - Die Phase II beginnt 72 Stunden nachdem eine Wunde entstanden ist und ist eng gekoppelt an die Neubildung von Gefäßen und Granulationsgewebe. - The Phase II begins 72 hours after a wound is formed and is closely linked to the formation of new blood vessels and granulation tissue.

Es war daher Aufgabe der Erfindung, eine Nachstellung der Vorgänge, die in der Phase I der Wundheilung stattfinden und die für das Phänomen der Wundverklebung verantwortlich sind, in einem in-vitro Test zu realisieren. It is an object of the invention to provide an adjustment of the processes which take place in the Phase I of wound healing and are responsible for the phenomenon of wound adhesion to implement test in an in-vitro.

Das heißt, es war ein Verfahren zu entwickeln, das es ermöglichte, in-vitro möglichst rasch, einfach und reproduzierbar zu prüfen, ob und wie stark eine Wundauflage mit einer Wunde verkleben würde. That is, it was to develop a method that made it possible to test in vitro as quickly, easily and reproducibly if and how strongly adhere to a wound dressing with a wound would.

Da ein Verkleben der Wundauflage mit der Wunde in der Regel unerwünscht ist, ermöglicht ein solches Verfahren durch ständiges Testen die gezielte Entwicklung von nichtverklebenden Auflagen. Since adhesion of the wound dressing to the wound is generally undesirable, such a method makes it possible by continuously testing the targeted development of nichtverklebenden conditions.

Gelöst wird diese Aufgabe durch ein Verfahren gemäß Anspruch 1. This object is achieved by a method according to Claim. 1

Das Wesentliche bei dem erfindungsgemäßen Verfahren ist, daß sich dabei ein praktisch völlig gleichmäßiges Fibrinnetz auf der Oberfläche der Matrix ausbildet und gleichzeitig auch mit dieser einen Verbund eingeht. The essence in the present process that it forms an almost completely uniform fibrin on the surface of the matrix and comes in the same time with this one composite.

Durch die Fibrinnetzbildung in-vitro auf einer Agar-Collagen Matrix kann die in der Phase I der Wundheilung stattfindende biologische Verklebungsreaktion mit einer daraufliegenden Wundauflage im Versuch simuliert werden. By Fibrinnetzbildung in vitro on an agar collagen matrix which takes place in phase I of wound healing biological Verklebungsreaktion can be simulated with an overlying dressing in the experiment. Dabei entsteht das Fibrinnetz unter der zu prüfenden Wundauflage. Here, the fibrin is formed under the under test wound dressing.

Vorzugsweise wird das Verfahren in der Weise ausgeführt, daß man eine 1-3%ige wäßrige Lösung aus Agar oder Agarose, beispielsweise Agarose Standard Low m r , durch Erhitzen auf 100-150°C herstellt, diese auf etwa 50°C abkühlen läßt und 0,1 bis 2 Gew.-% im wesentlichen unlösliches Collagen, beispielsweise aus Rinderachillesferse, zufügt. Preferably, the method is carried out in such a way that a 1-3% aqueous solution of agar or agarose, for example, agarose Standard Low m r, is prepared by heating at 100-150 ° C, this is allowed to cool to about 50 ° C., and 0.1 to 2 wt .-% substantially insoluble collagen, for example, from bovine Achilles heel, inflicts. Die Suspension wird anschließend in kleine Petrischalen gegossen (ca. 10 ml/Schale) und bei Raumtemperatur bis zum völligen Erkalten stehengelassen. The suspension is then poured into small petri dishes (about 10 ml / dish) and allowed to stand at room temperature until complete cooling. Anschließend können die Petrischalen mit dem Agar/Collagen-Boden im Kühlschrank bei +4°C für 2 bis 3 Tage aufbewahrt werden. Subsequently, the petri dish can be stored for 2 to 3 days with the agar / collagen ground in a refrigerator at + 4 ° C.

Zur Herstellung des Fibrinnetzes werden 0,5-3 ml Humanplasma, 0,5-3 ml 0,025 mol. For the preparation of the fibrin are 0.5-3 ml of human plasma, 0.5-3 ml 0.025 mol. CaCl 2 -Lösung und 0,5-3 ml Gerinnungsreagenz (Actin ® FS der Fa. Baxter, Reagenz zur Aktivierung der Gerinnung über das endogene System) nacheinander auf den Agar-Collagen Boden pipettiert. CaCl 2 solution and 0.5-3 ml coagulation reagent (Actin ® FS of Messrs. Baxter, reagent for the activation of the coagulation via the endogenous system) are pipetted in succession on the agar collagen ground.

Die so beschichtete Petrischale wird bei 25°C-37°C für ca. 30 bis 60 min. The thus-coated Petri dish at 25 ° C-37 ° C for about 30 to 60 min. in den Brutschrank gestellt. placed in the incubator. Das Fibrinnetz beginnt sich zu bilden. The fibrin begins to form.

Die zu prüfenden Wundauflagen werden in ca. 2×2 cm große Stücke geschnitten und mittels Pinzette auf das noch flüssige und noch nicht vollständig ausgebildete Fibrinnetz gelegt. The wound dressings to be tested are cut in approximately 2 x 2 cm pieces and placed using tweezers on the still liquid and not yet fully formed fibrin. Dieser Zustand wird visuell überprüft und ist nach ca. 30 Minuten erreicht. This condition is checked visually and is reached after about 30 minutes. Er kann je nach Blutspender jedoch auch etwa länger dauern. It may take about longer depending on blood donors but also. Anschließend wird die Petrischale wieder mit der Wundauflage bei 37°C für 60 bis 120 min. Subsequently, the petri dish is again min with the wound dressing at 37 ° C for between 60 and 120th in den Brutschrank gestellt bis zur völligen Ausbildung des Fibrinnetzes. placed in the incubator until the complete formation of the fibrin network.

Dann wird die Wundauflage mittels Pinzette von der Petrischale entfernt und das Fibrinnetz auf Verletzung hin untersucht. Then, the wound dressing is removed by forceps from the petri dish and examined the fibrin violation out.

Die Verklebungseigenschaften von Wundauflagen werden anhand der Verletzung des Fibrinnetzes beurteilt, dh ein verletztes Fibrinnetz wird mit einer Verklebung der Wundauflage mit der Wunde gleichgesetzt. The bonding properties of wound dressings can be judged by the violation of the fibrin, ie an injured fibrin network is equated with an adhesion of the wound dressing to the wound. Morphologische Veränderungen im Fibrinnetz und Ablagerungen oder Verfärbungen können im Versuch mit beurteilt werden. Morphological changes in fibrin and debris or discoloration may be in trial with judges.

Die Protokollierung und die Auswertung der Versuche erfolgt in der Regel mittels Licht- und evtl. Rasterelektronenmikroskopie. Logging and evaluation of the tests is usually done by means of light and possibly scanning electron microscopy.

Die Ergebnisse der Versuche werden anhand von drei Bewertungskriterien ausgewertet: The test results are evaluated based on three criteria:

  • 1. Die Wundauflage verklebt nicht, bedeutet, daß ein vollständiges Fibrinnetz unter der Wundauflage gebildet wurde. 1. The wound dressing does not adhere, means that a complete fibrin was formed under the wound dressing. Nach Entfernung derselben bleibt das Fibrinnetz intakt. After removal of the same the fibrin remains intact.
  • 2. Die Wundauflage verklebt, bedeutet, daß das Fibrinnetz nicht vollständig unter der Wundauflage gebildet wird, bzw. beim Entfernen derselben reißt das gebildete Netz auf und bleibt an der Oberfläche der Wundauflage haften. 2. The wound dressing bonded, means that the fibrin is not completely formed under the wound dressing, or when removing it tears the network formed on and adheres to the surface of the wound dressing.
  • 3. Nebeneffekte: Als Nebeneffekt werden die nach Entfernung der Wundauflage evtl. vorhandenen Rückstände aus der Wundauflage auf dem Fibrinnetz festgestellt. 3. Side effects: The side effect of the possibly existing after removal of the wound dressing from the wound dressing residues on the fibrin network are detected.

Die Anwendung des erfindungemäßen in-vitro Wundverklebungstests kann durch folgende Beispiele näher erläutert werden: The application of the erfindungemäßen in vitro Wundverklebungstests can be illustrated by the following examples:

Beispiel 1 example 1 Vergleich der wundverklebenden Eigenschaften von einer Gelatinefolie (Labormuster) und zwei Wundauflagen von handelsüblichen Produkten Comparison of-adherent properties of a gelatin film (laboratory samples) and two dressings of commercial products

In eine Petrischale wurden 10 ml einer noch warmen 1%igen, wäßrigen Agarose-Lösung mit 0,1% Collagen pipettiert. In a petri dish 10 ml of a still warm 1% aqueous agarose solution were separated, pipetted with 0.1% collagen. Anschließend wurde die Schale bei Raumtemperatur bis zum Erkalten stehengelassen. Subsequently, the dish was allowed to stand at room temperature until cool. Danach wurden 1 ml Humanblutplasma, 1 ml wäßrige 0,025 molare CaCl 2 -Lösung und 1 ml Gerinnungsreagenz (Actin ® FS der Fa. Baxter, München, Reagenz zur Aktivierung der Gerinnung über das endogene System) nacheinander hinzupipettiert. Thereafter, (Baxter, Munich, reagent for the activation of the coagulation via the endogenous system Actin ® FS of Messrs.) Was added 1 ml of human blood plasma, 1 ml of an aqueous 0.025 molar CaCl 2 solution and 1 ml of coagulation reagent pipetted in succession.

Die Petrischale wurde vorsichtig in einen auf 37°C vorgeheizten Brutschrank gelegt und für 30 min. The petri dish was gently placed in a preheated to 37 ° C incubator and min for 30 min. inkubiert. incubated. Das Fibrinnetz beginnt sich zu bilden. The fibrin begins to form. Anschließend wurden ein 2×2 cm großes Gelatine-Folienstück und ein 2×2 cm großes Stück der Wundauflagen von Hansamed ® soft und Hansamed ® universal (ein Spezial-Zellstoff-Gewirke und ein Viskose-Zellwoll-Vlies mit Polyesterschicht) in die Mitte jeweils einer Petrischale gelegt. Then, a 2 × 2 cm gelatin film piece and a 2 × 2 cm from the wound dressings of Hansamed ® were soft and Hansamed ® universal (a specialty pulp knits and viscose rayon fabric with polyester layer) into the center each put a petri dish. Der Versuch wurde mit 12fachen Wiederholungsansätzen ausgeführt. The experiment was carried out with 12 times replications.

Die so beschichteten und bestückten Petrischalen wurden abermals vorsichtig in den Brutschrank bei 37°C für 120 min. The thus-coated and assembled Petri dishes were again gently min in the incubator at 37 ° C for 120th gelegt. placed. Das Fibrinnetz ist nach dieser Zeit vollständig ausgebildet. The fibrin is fully formed after this time.

Anschließend wurden die Schalen aus dem Brutschrank entnommen, und es erfolgte die Auswertung der Versuche. Then the dishes were removed from the incubator, and there was the evaluation of the tests.

Hierfür wurden die zu prüfenden Gelatine-Labormuster und die Wundauflagen mittels Pinzette entfernt und das Fibrinnetz nach Schäden bzw. Rückständen untersucht. For this, the gelatine to be tested laboratory model and the wound dressings were removed using tweezers and examines the fibrin network from damage or debris. Die Versuche zeigten, daß die Gelatinefolien beim Entfernen von der Petrischale das Fibrinnetz völlig zerreißen, dh die Gelatinefolie verklebt mit der Wunde. The tests showed that the gelatin films during the removal from the petri dish the fibrin completely tear, that is, the gelatin film adhere to the wound.

Nach Entfernung der beiden anderen Wundauflagen von der Petrischale zeigte sich ein intakt gebildetes und gebliebenes Fibrinnetz. After removal of the two other wound dressings from the petri dish to a intact educated and retarded fibrin showed. Lediglich ein Abdruck der Wundauflage auf dem Fibrinnetz war zu erkennen. Only an impression of the dressing on the fibrin was seen. Es fand keine Verklebung statt. There was no bond.

Beispiel 2 example 2

In diesem Versuch wurde die gleichmäßige Fibrinnetz-Bildung und die Verbindung zwischen Fibrinnetz und der Agar-Collagen Matrix mittels Färbung ermittelt. In this experiment, the uniform fibrin formation and the link between fibrin and the agar collagen matrix was determined by staining.

In eine Petrischale wurden wieder 10 ml einer warmen 1%igen Agarose-Lösung mit 0,1% Collagen pipettiert. In a petri dish 10 ml of warm 1% agarose solution were pipetted with 0.1% collagen again. Die Schale wurde anschließend bis zum völligen Erkalten bei Raumtemperatur stehengelassen. The dish was then allowed to stand until complete cooling, at room temperature. Danach wurden 1 ml Humanplasma, 1 ml 0,025 mol. Thereafter, 1 ml of human plasma, 1 ml of 0.025 mol. CaCl 2 -Lösung und 1 ml Gerinnungsreagenz (Actin® FS der Fa. Baxter, Reagenz zur Aktivierung der Gerinnung über das endogene System) nacheinander zupipettiert. CaCl 2 solution and 1 ml of coagulation reagent (Actin® FS of Messrs. Baxter, reagent for the activation of the coagulation via the endogenous system) are pipetted in succession.

Die Petrischale wurde vorsichtig in einen auf 37°C vorgeheizten Brutschrank gelegt und für 120 min. The petri dish was gently placed in a preheated to 37 ° C incubator and incubated for 120th inkubiert. incubated.

Das Fibrinnetz war nach dieser Zeit vollständig ausgebildet. The fibrin was completely formed by that time.

Anschließend wurde eine Farblösung hergestellt nach einem Vorschlag von Marion Bradford (M. Bradford, 1976, A Rapid and Sensitiv Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein Dye Binding, Analytical Biochemistry 72, 248- 254). Then, a dye solution was prepared by a proposal from Marion Bradford (M. Bradford, 1976, A rapid and sensitive method for the quantitation of Micro Gram Quantities of Protein Utilizing the Principle of protein dye binding, Analytical Biochemistry 72, 248- 254).

100 mg Coomassie Brilliant Blue 6-250 (der Fa. Sigma, Deisenhofen) wurden in 50 ml 95%igem Ethanol gelöst. 100 mg Coomassie Brilliant Blue 6-250 (Fa. Sigma, Deisenhofen) dissolved in 50 ml of 95% ethanol were dissolved. Anschließend wurden 100 ml 85%ige Phosporsäure hinzupipettiert. Subsequently, 100 ml of 85% phosphoric acid were added with a pipette. Die Lösung wurde auf ein Endvolumen von 1 Liter mit dest. The solution was least to a final volume of 1 liter with. Wasser aufgefüllt. Water was added.

1 ml dieser Lösung wurde auf die Petrischale pipettiert. 1 ml of this solution was pipetted onto the petri dish.

Es zeigte sich deutlich eine Blaufärbung der Schale mit abgesetzten Collagenfasern und einem auf der Oberfläche netzartigen Gebilde, welches das Fibrinnetz darstellt. It was clearly a blue coloration of the shell with contrasting collagen fibers and a net-like structure on the surface, which is the fibrin clot.

Das Fibrinnetz war gleichmäßig ausgebildet und ging eindeutig eine Verbindung mit der darunterliegenden Agar-Collagen Matrix ein. The fibrin was made uniform and went clearly a connection to the underlying agar collagen matrix. Diese Tatsache ist für den Einsatz dieses Testmodells als in-vitro Test zur Bewertung der Verklebung von Wundversorgungsprodukten von Bedeutung, weil die in-vivo vorhandene Verbindung zwischen den Fibrinfasern und dem Collagen im in-vitro Test gewährleistet ist. This fact is for the use of this test model as in-vitro test for evaluating the adhesion of wound care products is important, because the existing in vivo link between the fibrin fibers and the collagen in the in vitro test is ensured.

Claims (3)

1. Verfahren zur Prüfung der Verklebung einer Wundauflage mit einer Wunde in vitro, gekennzeichnet durch die Verfahrensschritte 1. Method for testing the adhesion of a wound dressing with a wound in vitro, characterized by the method steps
Herstellen einer Agar/Collagen- oder Agarose/Collagen-Matrix, Preparing an agar / collagen or agarose / collagen matrix,
Aufbringen auf diese Matrix von Humanplasma, eine wäßrige CaCl 2 -Lösung und Gerinnungsreagenz, Erwärmen bei ca. 37°C bis sich das Fibrinnetz zu bilden beginnt, Applying 2 solution and coagulation reagent, heating begins to form the fibrin at about 37 ° C up to this matrix of human plasma, an aqueous CaCl
Auflegen einer Probe der zu prüfenden Wundauflage, weiteres Warmhalten bei ca. 37°C bis sich das Fibrinnetz vollständig ausgebildet hat, Placing a sample of the wound dressing to be tested, further keeping warm at about 37 ° C until the fibrin has formed completely,
Abziehen der Wundauflage und Auswerten des Versuchs. Removal of the wound dressing and evaluating the experiment.
2. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, 2. The method according to claim 1, characterized in that
daß man eine 1-3%ige wäßrige Lösung aus Agar oder Agarose durch Erhitzen auf 100-750°C herstellt, nach Abkühlen auf ca. 50°C 0,1 bis 2% im wesentlichen unlösliches Collagen zufügt, beispielsweise ca. 10 ml dieser Suspension in beispielsweise eine kleine Petrischale gibt und abkühlen läßt, that one produces a 1-3% aqueous solution of agar or agarose by heating to 100-750 ° C, after cooling to about 50 ° C 0.1 to 2% substantially insoluble collagen adding, for example about 10 ml of this suspension is a small petri dish in, for example, and allowed to cool,
daß man auf diese Unterlage nacheinander etwa 0,5 bis 3 ml Humanplasma, 0,5 bis 3 ml ca. 0,025 molare wäßrige CaCl 2 -Lösung und 0,5 bis 3 ml Gerinnungsreagenz gibt, that are 2 solution and 0.5 to 3 ml coagulation reagent to this document sequentially about 0.5 to 3 ml of human plasma, 0.5 to 3 ml about 0.025 molar aqueous CaCl
daß man die Schale bei 25-37°C für ca. 30-60 Minuten erwärmt, bis sich das Fibrinnetz zu bilden beginnt, that heating the dish at 25-37 ° C for about 30-60 minutes until the fibrin begins to form,
daß man ein Stückchen der zu prüfenden Wundauflage auf die noch flüssige Schicht legt, that one of the sets a bit to be tested wound dressing on the still liquid layer,
daß man die Schale nochmals ca. 60-120 Minuten lang bei ca. 37°C warm hält, that holds the tray again for about 60-120 minutes at about 37 ° C warm,
daß man die Wundauflage abnimmt und das Ergebnis auswertet. that decreases the wound dressing and evaluates the result.
3. Matrix für das Verfahren gemäß Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie aus einem wasserhaltigen Gel besteht, das 1-3 Gew.-% Agar oder Agarose und 0,1-2 Gew.-% im wesentlichen unlösliches Collagen enthält. 3. Matrix for the process according to claim 1 or 2, characterized in that it consists of a water-containing gel containing 1-3 wt .-% agar or agarose and 0.1-2 wt .-% substantially insoluble collagen.
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