DE3926658A1

DE3926658A1 - Fettsaeurezusammensetzung

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Publication number: DE3926658A1
Application number: DE3926658A
Authority: DE
Inventors: Erfinder Wird Nachtraeglich Benannt Der
Original assignee: Norsk Hydro ASA
Current assignee: Pronova Biopharma Norge AS
Priority date: 1988-08-11
Filing date: 1989-08-11
Publication date: 1990-02-15
Anticipated expiration: 2009-08-12
Also published as: HK84196A; GR890100507A; ZA895512B; NL193459C; GB8819110D0; AU3896789A; IL91275A; KR900002771A; IE64524B1; LU87570A1; DK392089A; NL8902020A; GR1000567B; AU616784B2; BE1002547A5; IL91275A0; JPH02104522A; JP2810916B2; FR2635263A1; SE504742C2

Description

Die Erfindung betrifft eine Fettsäurezusammensetzung mit Gehalt an mindestens 80 Gew.-% omega-3-polyungesättigte Fettsäuren, wobei mindest 75 Gew.-% der Gesamtfettsäuren omega-3 (all-Z)-5,8,11,14,17-Eicosapentaensäure (EPA) C 20:5 und (all-Z)-4,7,10,13,16,19-Docosahexaensäure (DHA) C 22:6 sind.

Kardiovaskulare Erkrankungen, die zu vorzeitiger Erkrankung und Tod führen, werden mit verschiedenen Risikofaktoren in Verbindung gebracht wie Hochdruck, Hypertriglyceridemia, Hypercholesterolemia, hohe Blutplättchenaggregation und nach neueren Erkenntnissen hohe Aktivität des Blutcoagulationsfaktor- VII-phosphorlipidkomplexes. In den letzten drei Jahrzehnten haben antihypertensive Medikamente dazu beigetragen, Erkrankungen und Tod im Zusammenhang mit kardiovaskularen Erkrankungen herabzusetzen. Allerdings bestehen größere Bedenken bezüglich Seiteneffekten und Schädlichkeit bis Giftigkeit im Zusammenhang mit derzeitigen antihypertensiven Therapien, insbesondere bei Patienten mit nur geringem Hochdruck. Ergebnisse weisen darauf hin, daß die gegenwärtig verwendeten antihypertensiven Medikamente den Blutdruck wirksam senken, die Pulsrate jedoch erhöhen können. Demnach besteht ein Bedarf an Medikamenten zur Behandlung des Hochdrucks mit weniger nachteiligen Eigenschaften. Es wäre besonders vorteilhaft, wenn solche Medikamente zur gleichzeitigen Behandlung aller der obenerwähnten Mehrfachrisikofaktoren bezüglich kardiovaskularer Erkrankungen verwendet werden könnten, was im allgemeinen mit den gegenwärtig verfügbaren antihypertensiven Medikamenten nicht möglich ist.

Während des letzten Jahrzehnts sind zahlreiche Veröffentlichungen erschienen, in denen berichtet wird, daß verschiedene diätische Fischölzubereitungen mit Gehalt an omega-3-polyungesättigten Fettsäuren einen Einfluß auf das Serumcholesterol und Blutplättchenaggregation besitzen. Der vorgeschlagene Mechanismus für diese Wirkungen ist oft um das Prostanoidsystem zentriert. Es gibt demnach einige Informationen, wie diätische Fischöle die Exkretion einiger Prostaglandinmetabolite ändert; verfügbare Daten widersprechen sich jedoch in zahlreichen Punkten.

Nach Aufnahme von Fisch, rohem Fischöl (beginnend mit 7% EPA und 5% DHA) oder leichtkonzentrierten Fischölzubereitungen (üblicherweise 18% EPA und 12% DHA) wurde über Blutdrucksenkung berichtet, obwohl die für diese Wirkungen verantwortlichen Komponenten niemals identifiziert wurden. Darüber hinaus wiesen alle Untersuchungen, die bisher vorgelegt wurden, ein oder mehrere ernsthafte Fehler auf, wie das Studium der verfügbaren Veröffentlichungen zeigt (H. R. Knapp et al., Proceedings of AOCS Short Course on polyunsaturated Fatty Acids and Eicosanoids, Ed. W. E. M. Lands, Seiten 41-55, American Oil Chemists Society und K. Bonaa, Tidskr. Nor Laegeforen Nr. 28, 1987, 2425-8).

Eicosapentaensäure C 20:5-omega-3 (EPA) wurde als die wichtigste der marinen omega-3-polyungesättigte Fettsäuren teilweise wegen ihrer deutlichen Antiaggregationswirkung betrachtet, beispielsweise beschrieben in US-PS 40 97 602, Silver et al., die im August 1974 angemeldet wurde. Später beschrieben Dyerberg et al. die gleiche Wirkung in Lancet, Seite 152, 1. Jan. 1978, und in Lancet II, Seiten 117-119, 15. July 1978. Der Hauptgrund für die angenommene Bedeutung von EPA besteht wahrscheinlich darin, daß sie zu den Eicosanoiden gehören, die Schlüsselsubstanzen für den Prostaglandinmetabolismus sind.

Gemäß zahlreicher neuerer Berichte hat jedoch EPA alleine keinen wesentlichen Einfluß auf Hochdruck. In "Effects of highly purified eicosapentaenoic acid to angiotensin II and norepinephrine in the rabbit" (Prostaglandins August 1986, Band 32, Nr. 2, Seiten 179-187) wurde keine Senkung des Blutdrucks bei Kaninchen bei Verwendung von hochgereinigtem EPA in 90%iger Konzentration erzielt. Terano et al. berichten in Atherosclerosis, 46, 321-331, 1983, daß eine Zusammensetzung mit 75% EPA-Gehalt und 6,2% DHA keinen wesentlichen Einfluß auf den Blutdruck bei gesunden Freiwilligen nach Einnahme von 3,6 g EPA-Ethylester zeigten. Gleicherweise berichteten Yoshida et al. in Artery, 14, 295-303, 1987, daß nach Einnahme von 900 mg EPA-Ethylester über 14 Tage oder mehr keine Wirkung auf den basalen Blutdruck festgestellt wurde. Darüber hinaus hatte 90% EPA-Methylester auf Ratten mit spontanem Bluthochdruck keine Wirkung (K. Yin et al., 1988, Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 15, 275-280).

Im Gegensatz hierzu beschreibt die GB-PS 21 97 199 eine Zusammensetzung gegen schwangerschaftsinduzierten Hochdruck, wobei die im Beispiel verwendeten Zusammensetzungen einen EPA-Gehalt von 28 bis 35% aufweisen. Die Patienten hatten keine frühere Hochdruckgeschichte. Es wird angenommen, daß Hochdruck, der sich durch Schwangerschaft entwickelt, andere biologische Ursachen als normaler Hochdruck hat, was dadurch anscheinend bestätigt wird, daß dieser Bluthochdruck normalerweise nach Ende der Schwangerschaft verschwindet.

Es ist nichts bekannt, durch das dargelegt wird, daß DHA allein irgendeine Wirkung auf den Blutdruck ausübt.

Gemäß US-PS 30 82 228 (am 18. Dez. 1959 angemeldet) senkt ein Produkt mit Gehalt an mindestens 60% polyungesättigten Fettsäuren mit 20 C-Atomen oder mehr den Blutcholesterolgehalt wesentlich. Obwohl frühere Studien angeben, daß Fischöle das Gesamtcholesterol- und LDL-Cholesterol senken und HDL-Cholesterol erhöhen, haben spätere Ergebnisse im allgemeinen zu entgegengesetzten Folgerungen geführt, wie beispielsweise bei W. S. Harris in [(n-3)news, 3 (4), 1-7]. Er fand unter Zusammenfassung von 45 Artikeln bezüglich des Gegenstands, daß LDL-Cholesterol um 2 bis 30%, abhängig vom Typ der Hyperlipidaemia, erhöht wurde.

Aus PCT/WO 87/02 247 ist für parenterale Verwendung eine Lipidemulsion bekannt, die einen Emulgator, Wasser und ein marines Öl mit einem Gehalt von mindestens einer omega-3- Fettsäure enthält, bei der die Konzentration der freien Fettsäure in der Emulsion unter etwa 5 meq/l ist, und wobei das marine Öl mindestens 30 Gew.-% einer Kombination von Estern von EPA und DHA enthält. Diese Lipidemulsion wird für intravenöse Behandlung von thrombotischen Krankheitszuständen verwendet.

Es wurde nun gefunden, daß bestimmte Fettsäurezubereitungen überraschend vorteilhafte Wirkungen auf alle der obenerwähnten Risikofaktoren bezüglich kardiovaskularer Erkrankungen aufweisen, und insbesondere bei geringem Hochdruck, Hypertriglyceridemia sowie auf die Aktivität des Koagulationsfaktor VII-phosphorlipidkomplexes, wobei diese Zubereitungen eine hohe Konzentration von mindestens 80 Gew.-% omega-3-Fettsäuren, ihren Salzen oder Derivaten enthalten, wobei EPA und DHA in relativen Mengen von 1 : 2 bis 2 : 1 enthalten sind und mindestens 75% aller Fettsäuren ausmachen. Obwohl der biologische Mechanismus im einzelnen für die Wirkungen der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen noch nicht genau bekannt ist, gibt es Hinweise auf überraschende synergetische Effekte beim Zusammenwirken von EPA und DHA.

Ein Vorteil der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen besteht darin, daß sie sehr gut toleriert werden und keine wesentlichen Seiteneffekte bewirken.

Eine besonders bevorzugte erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält mindestens 90 Gew.-% langkettige polyungesättigte omega-3-Fettsäuren, von denen EPA und DHA mindestens 85 Gew.-% aller Fettsäuren ausmachen, und EPA : DHA in einem Verhältnis von 1 : 1 bis 2 : 1, insbesondere etwa 3 : 2, enthalten sind.

Um EPA und DHA in einer Mischung hoher Konzentration gemäß Erfindung zu isolieren, wurde eine spezielle Methode zum Reinigen und Isolieren der langkettigen Fettsäuren aus natürlichen Fischölen entwickelt. Zusammensetzungen gemäß Erfindung können nach dem Verfahren der europäischen Patentanmeldung Nr. 8 69 06 964.1 hergestellt werden. Die Analyse in Gew.-% basiert auf den Ethylestern, auch dann, wenn andere Derivate oder Salze der Säuren selbst Teil der vorliegenden Erfindung sind.

Die erfindungsgemäße Zusammensetzung wird bevorzugt nach dem folgenden Verfahren hergestellt.

Zunächst wird das marine Rohölmaterial verestert und über Harnstofffraktionierung oder ähnliches konzentriert, wobei die Bedingungen ausreichend milde sind, um Disintegration der Produkte zu verhindern. Die zweite Stufe ist eine Molekulardestillation.

Die Fraktionierung entfernt anfänglich im Prinzip den Großteil der Ester mit Kettenlängen unter 20 C-Atomen. Dann wird die Hauptfraktion, bestehend im wesentlichen aus Estern der C 20- und C 22-Säuren entfernt. Da die Harnstofffraktionierung die gesättigten und weniger ungesättigten Ester entfernt, enthält diese Fraktion hohe Konzentrationen von EPA und DHA, erfindungsgemäß mindestens 75 Gew.-%. Die Gesamtmenge an langkettigen omega-3-Säuren beträgt mindestens 80 Gew.-%. Andere bevorzugte Zusammensetzungen gemäß Erfindung enthalten mindestens 95 Gew.-%, wobei der EPA- plus DHA-Gehalt mindestens 90 Gew.-% beträgt. Andere bevorzugte erfindungsgemäße Zusammensetzungen enthalten mindestens 85 Gew.-% an omega-3- Fettsäuren und mindestens 80 Gew.-% EPA und DHA.

Andere omega-3-Säuren mit 20, 21 und 22 Kohlenstoffatomen werden annähernd in ihren Ausgangskonzentrationen, nämlich etwa von 3 bis 5 Gew.-%, üblicherweise mindestens 4, 5 Gew.-%, erhalten. So ist die spezielle und ungradzahlige omega-3 all-Z 6,9,12,15,19-Heneicosapentaensäure C 21:5 normalerweise in Konzentrationen von mindestens 1,5 Gew.-% und omega-3 all-Z 7,10,13,16,19-Docosapentaensäure normalerweise in Konzentration von etwa 3,0 Gew.-% vorhanden.

Nach Entfernung der Harnstoffausfällung wird das verwendete Lösungsmittel, normalerweise Ethanol, teilweise oder ganz durch Abdampfen entfernt, und die auf diese Weise isolierten Ester können weiter durch Waschen mit Wasser oder einer leicht alkalischen Wasserlösung gereinigt werden, wenn die reinen Ester ohne Verunreinigung der Säuren isoliert werden sollen.

Die freien Säuren können durch an sich bekannte Hydrolyseverfahren hergestellt werden.

Die Aufwertung der EPA-Fraktion, um ein Gewichtsverhältnis von EPA : DHA von 1 : 1 auf 2 : 1, insbesondere 3 : 2, zu erhalten, oder die Aufwertung der DHA-Fraktion, um ein EPA : DHA-Gewichtsverhältnis von 1 : 1 auf 1 : 1 zu erhalten, kann in der Molekulardestillationsstufe erzielt werden. Das Verfahren ermöglicht ebenso die Anwendung der superkritischen Fluidextraktion und/oder Chromatographie in der zweiten Stufe mit CO₂, wobei ggfs. ein polares Modifizierungsmittel wie Ethanol zur Konzentration der EPA- und/oder DHA-Fraktion enthalten ist.

Die Harnstofffraktionierung und die nachfolgende Molekulardestillation werden unter milden Bedingungen durchgeführt, um die Oxidation und/oder Isomerisation der hoch instabilen omega-3-Säuren zu vermeiden. Gemäß nachfolgenden Tabellen 1 und 2, in denen die Analyse der durch das erfindungsgemäße Verfahren erhaltenen Produkte wiedergegeben ist, enthielt das gereinigte Produkt nicht mehr als 1% unbekannter Bestandteile. Es gibt jedoch in gewissen Mengen niedere Produkte wie C-16- und C-18-Säuren, wie sich aus den detaillierten Analysen in Tabelle 2 ergibt.

Diese Produkte sind in etwa die kombinierte Summe der Fraktion der Fettsäureester, die natürlich in Fischölen auftreten; die Konzentration jedes einzelnen Esters jedoch im Endprodukt ist kleiner als 0,2%, abgesehen von der omega-3- Octadecatetraensäure C 18:4 n-3, die in angenähert der gleichen Menge wie im Ausgangsmaterial enthalten ist.

Daraus ergibt sich, daß die Gesamtkonzentration an Nebenprodukten aus dem Verfahren sehr niedrig ist.

Das Verfahren ist flexibel genug, um die relativen Verhältnisse zwischen den langkettigen C 20-, C 21- und C 22- Fettsäuren, die natürlich in verfügbaren Fischölrohmaterialien auftreten, zu beeinflussen. Es ermöglicht nicht nur die Aufwertung (Konzentration) der einzelnen Säuren, sondern auch das Verhältnis zwischen ihnen bleibt innerhalb einer Variationsverteilung, die in der Natur optimal ist. Gleichzeitig ist jedoch Raum für Kompensation der manchmal extremen Variationsbreite, die in der Natur auftritt, s. u. Auf diese Weise ist es möglich, ein Produkt mit konstantem und vorbestimmtem Gehalt herzustellen.

Fischöle können ebenfalls Nebenprodukte und Verunreinigungen wie Pestizide, chlorierte Kohlenwasserstoffe, Schwermetalle, Cholesterol und Vitamine enthalten. Während der Herstellung des Konzentrats werden die Konzentrationen dieser Komponenten im Vergleich zu den unbehandelten Fischölen wesentlich verringert.

In der Natur sind die relativen Gehalte an EPA und DHA und auch die an anderen langkettigen omega-3-Säuren abhängig von der marinen Spezie und es treten darüber hinaus saisonale Veränderungen innerhalb der gleichen Spezie auf. In den USA wird heute Fischöl im wesentlichen aus Menhaden hergestellt. Dieses Öl enthält üblicherweise 14 bis 19% EPA und 5 bis 8% DHA. Eine Analyse eines Kabeljauleberöls ergab einen Gehalt von 6,9% EPA und 8,4% DHA. Für Capelin (englisch: capelin) variierten die EPA-Werte von 8,6 bis 11,4% von Januar 1973 bis August 1973, während die DHA-Werte von 6,7% bis 11% während der gleichen Periode betrugen. Bei norwegischem Küstenhering betrug der Gehalt im Oktober 1973 6,4% EPA und 9,8% DHA, während Fänge im November 1983 eine Verminderung auf 1,7% bzw. 1,1% ergaben.

Diese Abweichungen bedeuten, daß die diätische Aufnahme von Fischölen oder Fisch alleine nicht eine konstante Aufnahme von omega-3-Säuren sichert. Selbst wenn alle langkettigen C 20-, C 21- und C 22-omega-3-Säuren nicht oder nur in moderatem Umfang während des Verfahrens aufkonzentriert werden, werden sie zumindest in ihren ursprünglichen Verhältnissen bewahrt.

In Tabelle 1 in der linken Spalte werden die typischen Veränderungen zwischen den Gehalten an individuellen langkettigen Säuren in den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen angegeben, während in der rechten Spalte die exakte Analyse der Testproben, die beim Studium der biologischen Wirkungen verwendet wurden, angezeigt werden, wobei die Ergebnisse der Untersuchung der biologischen Wirkungen in den Tabellen 4 bis 8 unten wiedergegeben werden.

Tabelle 1

Tabelle 2 zeigt eine detaillierte Analyse einer Probe des Ausgangsmaterials und eine erfindungsgemäße Zusammensetzung hieraus.

Tabelle 2

Tabelle 3 zeigt die Hauptfettsäurengehalte von verschiedenen erfindungsgemäßen Zusammensetzungen.

Tabelle 3

Um den Einfluß einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung auf Blutdruck, Pulsrate, Triglyceridlevel, Serumcholesterol und HDL-Cholesterol, Blutplättchenaggregation und die Aktivität des Koagulationsfaktor VII-phospholipidkomplexes zu bewerten, wurde die gesamte Bevölkerung im Alter von 34 bis 60 Jahren einer kleinen norwegischen Stadt zu einer Gesundheitsuntersuchung eingeladen und aus diesen 22 000 Personen nach folgenden Kriterien ausgewählt:

- unbehandelter mäßiger Hochdruck des diastolischen Blutdrucks (DBP) von 89 bis 111 mm Hg und systolischer Blutdruck (SBP) von 110 bis 180 mm Hg;
- keine frühere Herzerkrankung und kein Gebrauch von Herzmitteln;
- keine schweren Erkrankungen;
- kein extremes Übergewicht;
- kein Alkoholismus;
- Serumcholesterol von mindestens 6,0 mMol/Liter.

Die Freiwilligengruppe, die nach diesen Kriterien ausgesucht wurde, bestand aus 172 Personen. Die Freiwilligen wurden während einer Vorlaufzeit von 6 Monaten untersucht, um Stabilisierung des Blutdrucks vor Eingabe der Testsubstanz zu gewährleisten.

Alle Blutdruckmessungen wurden mit einem automatischen Gerät (Dinamap) durchgeführt; bei jeder Gelegenheit wurden drei Messungen (mit 2 Minuten Intervallen) im Sitzen und im Stehen unter geregelten Bedingungen durchgeführt. Der Durchschnitt der beiden letzten Messungen im Sitzen und im Stehen wurde verwendet.

Die Studie wurde als doppelblind-kontrollierte Studie durchgeführt. Die 172 Freiwilligen wurden durch Zufallswahl auf zwei Gruppen gleicher Größe verteilt. Eine Gruppe wurde mit Placebokapseln Maisöl behandelt, wobei jede 1 g Kornöl mit 0,3% Vitamin E enthielt. Die andere Gruppe erhielt Kapseln, die 1 g der Testsubstanz enthielt, deren Zusammensetzung in Tabelle 1 wiedergegeben wird. Beide Kapselsets wurden aus farbiger weicher Gelatine hergestellt, um die Blindwirkung abzusichern. Die Freiwilligen wurden gebeten, 3 Kapseln 2× täglich der Test- bzw. Kontrollsubstanz 11 bis 12 Wochen zu nehmen. 171 Freiwillige beendeten die Studie, und im Schnitt wurden etwa 90% der Kapseln eingenommen.

Aus den Tabellen 4 und 5 geht hervor, daß Maisöl keinen statistisch bedeutsamen Einfluß auf den Blutdruck hatte. Die Wirkung der Testsubstanz auf den Blutdruck wurde zum einen bezüglich der ganzen Gruppe, die die Testsubstanz eingenommen hatte, und zum anderen bezüglich solcher Personen mit höherem Blutdruck gewertet. Der durchschnittliche Blutdruck der Patienten mit höherem Blutdruck zu Beginn und am Ende der Behandlung mit der aktiven Testsubstanz gemäß Erfindung wird in Tabelle 4 (diastolischer Blutdruck) und Tabelle 5 (systolischer Blutdruck) wiedergegeben.

Tabelle 4

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf diastolischen Blutdruck

Tabelle 5

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf systolischen Blutdruck

Aus den Tabellen geht hervor, daß die Testsubstanz eine hochsignifikante hypotensive Wirkung sowohl auf systolischen als auch diastolischen Blutdruck besitzt. Es ergibt sich ebenso klar, daß die Wirkung am stärksten bei den Patienten mit höchstem Blutdruck ist. In der Maisölgruppe wurden keine signifikanten Wirkungen beobachtet.

Tabelle 6

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf systolischen und diastolischen Blutdruck gemäß diätischer Einnahme von Fisch (Mahlzeiten je Woche)

Aus Tabelle 6 geht hervor, daß gute hypotensive Wirkung mit erfindungsgemäßen Zusammensetzungen erreicht wird, überraschenderweise sogar in der Gruppe mit hoher diätischer Aufnahme von 3 bis 5 Fischmahlzeiten je Woche. Im Vergleich hierzu werden keine vorteilhaften Wirkungen mit Maisöl beobachtet.

Diese Ergebnisse zeigen, daß eine erfindungsgemäße Zusammensetzung zu einer überraschend erhöhteren Wirkung führt als man bei diätischer Aufnahme von Fisch oder leicht konzentriertem marinem Öl erwarten würde. Dieses hängt wahrscheinlich mit synergistischem Zusammenwirken von EPA und DHA zusammen.

Verglichen mit den Testergebnissen der zuvor durchgeführten Studien über diätische Aufnahme von marinen Fischölen, zeigen die Resultate mit einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung erstaunliche Verbesserungen des Einflusses auf diastolischen und systolischen Blutdruck bei leichthypertensiven Patienten bzw. hypertensivere Patienten von etwa 30% und 45%.

Tabelle 7

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf die Pulsrate (je Minute)

Die Pulsratenuntersuchung umfaßte 78 Personen in der Gruppe, die die Testsubstanz erhielt und 77 Personen in der anderen Gruppe.

Aus der obigen Tabelle geht hervor, daß eine signifikante Erniedrigung der Pulsrate mit der erfindungsgemäßen Testsubstanz und eine leicht nichtsignifikante Erhöhung der Pulsrate mit Maisöl erzielt wird.

Tabelle 8

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf Serum Cholesterol (mmol/Liter)

Aus Tabelle 8 geht hervor, daß die erfindungsgemäße Testzusammensetzung das Gesamtserumcholesterol signifikant bei Patienten mit einem Gesamtcholesterol von etwa 7,0 mmol/ Liter senkt und signifikant HDL-Cholesterol in der gesamten Bevölkerung erhöht. Ähnliche, aber schwächere Wirkungen werden in der Maisölgruppe festgestellt.

Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen erniedrigen darüber hinaus LDL-Cholesterol um 5 bis 10% bei Patienten mit Gesamtcholesterol <7 mmol/l, besitzt jedoch keine signifikante Wirkung bei Patienten mit einem Gesamtcholesterol von <6,5 mmol/l.

Tabelle 9

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf Serumtriglycerid

Aus Tabelle 9 geht hervor, daß die Testsubstanz den Serumtriglyceridlevel insbesondere bei Patienten mit hohen Leveln (<2,0 mmol/l) vor der Behandlung erniedrigt. Mit Maisöl ist in der gesamten Gruppe der Freiwilligen kein signifikanter Einfluß feststellbar, während sehr geringe Wirkung bei Personen mit hohen Triglyceridleveln feststellbar sind.

Tabelle 10

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf Blutplättchenaggregation

Aus Tabelle 10 geht hervor, daß die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen eine Antiaggregationswirkung auf Blutplättchen ausüben. Der Phospholipidkomplex des Koagulationsfaktors VII wird im Plasma von Männern, die einer Hochrisikogruppe für kardiovaskulare Erkrankungen gehören, gefunden, wie beschrieben in P. Leren et al. [The Oslo Study, Cardiovascular diseas in middle aged and young Oslo men. Acta med. Scand. suppl. 588, 1-38 (1987)] und Dalaker et al. [A novel form of factor VII in plasma from men at risk for cardiovascular disease, Br. J. Haematol., 61, 315-322 (1985)], und wird als ein anderer Risikofaktor für kardiovaskulare Erkrankungen angesehen.

Tabelle 11

Wirkung der Testsubstanz und von Maisöl auf die Aktivität des Koagulationsfaktors VII- phospholipidkomplexes (je Hundert)

Aus der Tabelle geht hervor, daß die Aktivität mit der erfindungsgemäßen Zusammensetzung signifikant reduziert wird, während keine signifikante Wirkung bei Maisöl beobachtet wird.

Gemäß den Ergebnissen in den Tabellen 3 bis 11 besitzt eine erfindungsgemäße Zusammensetzung signifikanten Einfluß auf alle obenerwähnten Risikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen. Im Vergleich hierzu werden einige positive Ergebnisse mit Maisöl erzielt; kein signifikanter Einfluß ist jedoch auf Blutdruck, Serumtriglyceridlevel oder Aktivität des Koagulationsfaktors VII erzielbar. Darüber hinaus scheinen die Wirkungen, die in der Maisölgruppe bezüglich dieser Risikofaktoren festgestellt wurden, in entgegengesetzte Richtung zu deuten.

Demnach sind Fettsäurezusammensetzungen gemäß Erfindung potentiell wertvoll für die Behandlung und Prophylaxe von Mehrfachrisikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen wie Hochdruck, Hyperglyceridemia und hohe Aktivität des Koagulationsfaktors VII- phospholipidkomplexes.

Die Dosis der erfindungsgemäßen Zusammensetzung für therapeutisch oder prophylaktische Wirkung ist abhängig von der Art der Verabreichung. In den beschriebenen umfangreichen Versuchen wurden 6 g der Testzusammensetzung je Person je Tag verabreicht. Im allgemeinen kann die Dosis bei durchschnittlichen erwachsenen Personen von 1 bis 10 g, abhängig von Körpergröße und der Ernsthaftigkeit des zu behandelnden Zustandes, variieren.

Die erfindungsgemäße Zusammensetzung kann darüber hinaus als zusätzliches Mittel zu üblichen hypertensiven Medikamenten bei der Behandlung von Hochdruck verwendet werden. Die Dosis liegt dann wahrscheinlich in niederen Bereichen des zuvor angegebenen Dosisbereiches.

Zu anderen möglichen medizinischen Indikationen der erfindungsgemäßen Zusammensetzung zählen Chronische Polyarthritis, psoriatische Artheritis, Periarteritis Nodosa, Lupus Erythematosus Disseminatus (LED), Sklerodermia, Chrohnsche Krankheit, Ulcerative Colitis, Psoriasis, Atopische Dermatitis und Migräne, wie es sich in in vivo Versuchen gezeigt hat.

Bevorzugt sollten die aktiven Verbindungen in Form von Tabletten, weichen Kapseln oder ähnlichem oral verabreicht werden. Die Verabreichung kann aber auch beliebig auf solche Weise erfolgen, daß die aktiven Bestandteile effizient absorbiert und verbraucht werden, beispielsweise durch intravenöse, subcutane, rektale, vaginale oder möglicherweise topikale Verabreichung.

Die pharmazeutische Zusammensetzung kann ggfs. zusätzlich zu EPA und DHA aktiven Bestandteilen gemäß Erfindung ein oder mehr pharmazeutisch verträgliche Träger enthalten. Die Zusammensetzungen können ebenfalls Füllmaterialien, Stabilisatoren, Verdünnungsmittel, Bindemittel, Feuchtmacher, oberflächenaktive Mittel, Gleitmittel und ähnliche enthalten, wie sie bei der Formulierung von pharmazeutischen Zusammensetzungen an sich bekannt sind.

Zusätzlich können Antioxidantien, beispielsweise Hydroxytoluol, Butyrat, Chinon, Tocopherol, Ascorbinsäure usw., Konservierungsmittel, Farbmittel, Geruchs- und Geschmacksmittel und andere pharmazeutische Mittel verwendet werden.

Beispiel einer pharmazeutischen Präparation
Weiche Gelatinekapseln, die 1 g/per Kapsel folgender Zusammensetzung enthalten
EPA Ethylester
525 mg/Kapsel
DHA Ethylester	315 mg/Kapsel
d-alpha Tocopherol	4 IU/Kapsel
Gelatine	246 mg/Kapsel
Glycerol	118 mg/Kapsel
Roteisenoxid	2,27 mg/Kapsel
Gelbeisenoxid	2,27 mg/Kapsel

Die aktiven Bestandteile und die Exzipienten werden gewogen und in einem Hochgeschwindigkeitsrührer homogenisiert. Die Mischung wird dann in einer Kolloidmühle gemahlen und in einem rostfreien Stahlbehälter zum Einkapseln entlüftet. Die Mischung wird in weiche Gelatinekapseln einer Größe von 20 Oblong (mittleres Gewicht 1,4 g) unter Verwendung einer Standardkapselmaschine gefüllt.

Claims

1. Fettsäurezusammensetzung mit Gehalt an mindestens 80 Gew.-% omega-3-Fettsäuren, wobei (all-Z)-5,8,11,14,17- Eicosapentaensäure (EPA) C 20:5 und (all-Z)-4,7,10,13,16,19- Docosahexaensäure (DHA) C 22:6 in relativen Mengen von 1 : 2 bis 2 : 1 enthalten sind und mindestens 75 Gew.-% des Gesamtfettsäuregehalts ausmachen.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, wobei als andere langkettige Fettsäuren (all-Z C 21:5)-6,9,12,15,18-Heneicosapentaensäure und/oder (all-Z C 22:5)-7,10,13,16,19- Docosapentaensäure und/oder (all-Z C 18:4)-6,9,12,15-Octadecatetraensäure enthalten sind.

3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, wobei die Gesamtkonzentration an langkettigen omega-3-Fettsäuren mindestens 90 Gew.-% beträgt, wobei EPA und DHA mindestens 85 Gew.-% des Gesamtfettsäuregehalts ausmachen und in relativen Mengen EPA : DHA von 1 : 1 bis 2 : 1, insbesondere 3 : 2, enthalten sind und die anderen langkettigen omega-3 C 20-, C 21- und C 22-Säuren mindestens 4,5 Gew.-% ausmachen.

4. Zusammensetzung nach Anspruch 1, wobei die Gesamtkonzentration an langkettigen omega-3-Fettsäuren mindestens 95 Gew.-% beträgt, wobei EPA und DHA mindestens 90 Gew.-% des Gesamtfettsäurengehalts und die anderen langkettigen omega-3 C 20-, C 21- und C 22-Säuren mindestens 4,5 Gew.-% ausmachen.

5. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, wobei die Gesamtkonzentration an langkettigen omega-3-Fettsäuren mindestens 85 Gew.-% beträgt, wobei EPA und DHA mindestens 80 Gew.-% und die anderen langkettigen C 20-, C 21- und C 22- Säuren mindestens 4,5 Gew.-% ausmachen.

6. Zusammensetzung nach Anspruch 4 oder 5, wobei EPA und DHA in relativen Mengen von 1 : 1 bis 2 : 1 enthalten sind.

7. Zusammensetzung nach Anspruch 1, wobei die Fettsäuren in Form von pharmazeutisch verträglichen Salzen enthalten sind.

8. Zusammensetzung nach Anspruch 1, wobei die Fettsäuren in Form von Derivaten enthalten sind.

9. Zusammensetzung nach Anspruch 8, wobei die Derivate Ester, insbesondere Alkylester, sind.

10. Zusammensetzung nach Anspruch 9, wobei die Fettsäuren in Form von Ethylestern enthalten sind.

11. Zusammensetzung nach mindestens einem der vorhergehenden Ansprüche zur Behandlung oder Prophylaxe von Mehrfachrisikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen.

12. Verfahren zur Herstellung einer Fettsäurezusammensetzung gemäß mindestens einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei das marine Rohmaterial über folgende Stufen in beliebiger Folge wie folgt bearbeitet wird: Transesterbildung, Konzentration über Harnstofffraktionierung oder ähnliches; Molekulardestillation und/oder superkritische Fluidextraktion oder Chromatographie, wobei eine Hauptfraktion isoliert wird, die im wesentlichen aus Ester der omega-3 C 20:5- und C 22:6- Säuren besteht, wobei sich eine Gesamtmenge an langkettigen omega-3-Fettsäureestern von mindestens 80 Gew.-% ergibt, und wobei die Harnstofffraktionierung und die Molekulardestillation unter milden Bedingungen zur Vermeidung von Oxidation und Isomerisierung der omega-3-Säuren durchgeführt wird.

13. Verwendung von marinen Ölkonzentraten, enthaltend mindestens 80% langkettige omega-3-Fettsäuren, deren Salze oder deren Derivate, wobei (all-Z)-5,8,11,14,17-Eicosapentaensäure (EPA) C 20:5 und (all-Z)-4,7,10,13,16,19-Docosahexaensäure (DHA) C 22:6 in relativen Mengen von 1 : 2 bis 2 : 1 enthalten sind und mindestens 75 Gew.-% des Gesamtgehalts an langkettigen Fettsäuren ausmachen, für die Herstellung einer pharmazeutischen Zubereitung zur Behandlung oder Prophylaxe von Mehrfachrisikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen.

14. Verfahren zur Behandlung oder Prophylaxe von Mehrfachrisikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen durch Verabreichung einer Zusammensetzung gemäß Ansprüchen 1 bis 10, ggfs. in Mischung mit pharmazeutisch verträglichen Trägern.

15. Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung oder Prophylaxe von Mehrfachrisikofaktoren für kardiovaskulare Erkrankungen, wobei in einen pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungs- oder Streckmittel ein marines Ölkonzentrat mit Gehalt von mindestens 80 Gew.-% langkettigen omega-3-Fettsäuren oder deren Salzen oder Derivaten eingebracht wird, wobei (all-Z)- 5,8,11,14,17-Eicosapentaensäure (EPA) C 20:5 und (all-Z)- 4,7,10,13,16,19-Docosahexaensäure (DHA) C 22:6 in relativen Mengen von 1 : 2 bis 2 : 1 vorhanden sind und mindestens 75 Gew.-% des Gesamtfettsäuregehalts ausmachen.