DE3237438C2 - 2-Thiazolamin-Derivate und dieselben enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen - Google Patents

Description

H₃CO ^NHCONH OCH₃

5. N,N'Bls[4-syn-{(l-carbomethoxy-l-methoxyimlno)-methyll-thlazol-2-yl]-oxamld der Formel

H₃COOC- C—ι N N n—C-COOCH,

H₃CO

NHCOCONH

OCH₃

6. Pharmazeutische Zusammensetzung mit Immunitätsregeinder Wirkung, dadurch gekennzeichnet, daß sie ein 2-Thiazolamln-Derlvat gemäß Anspruch 1 enthalt.

mi Die Erfindung betrifft neue 2-Thlazolamln-Derivate, die eine derartige Immunltatsregullerende Aktivität besitzen, daß sie gegen Immunlclden (?. B. rheumatische Arthritis) wirksam sind und auch bei der Behandlung von Vlruskraiikhelien uml bei iler Immunlhernple von Krebs hriuichhiir sind uml dmdber hlnmis wey.en Ihrer nleilrl (jcn ΓοχΙ/lini für therapeutische Zwecke sehr geeignet sind, sowie pharmazeutische /.usamniensel.'ungen, die diese 2-TliU\/olamln-Dcrlvaie enthalten.

(·> llerkönimllcherwelse Ist eine große Anzahl von steroldalen und nicht steroldalen entzündungshemmenden Mitteln bei der klinischen Behandlung von Autolmmunlelden wie Rheumatismus verwendet worden. Aus EP 00 01 727 und EP 00 05 070 sowie aus der Veröffentlichung In »Arzneimittel-Forschung« 24 (1974), 887 bis 892 Ist weiterhin bekannt, daß Amlnothlazole mit dem Strukturelement 2-ThIaZoIyI-NII-CC)- anllvivalc und

Immunstimulierende Wirkungen besitzen. So beschreibt die EP 00 01 727, daß beispielsweise die Verbindung Lotlfa?.ol (F 1686) gegenüber dem bekannten Levamisol eine überlegene Wirkung zeigt.

Diese bekannten Arzneimittel sind jedoch noch nicht vollständig befriedigend in be/ug auf Ihre pharmakoluglschen Wirkungen, Nebenwirkungen und Toxlzltät.

Ks ist daher Aufgabe der Erfindung, neue 2-Thlazolarriln-Derlvate zu schaffen, die eins spezifische Wirkung auf die Zellen ausüben, die an Immunreakilonen teilnehmen, und dadurch zur Regulierung der Immunreaktionen der Tragerperson dienen.

Es Ist auch Aufgabe der Erfindung, eine pharmazeutische Zusammensetzung zu schaffen, die durch Immunitätsregulierende Wirkung und niedrige Toxlzltät charakterisiert Ist.

Gemäß einer Ausführungsform der Erfindung wird ein 2-Thlazolamln-Derlvat geschaffen, das die folgende allgemeine Formel besitzt

H₃COOC-C-

I β

(D NHCO-X

wobei X einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einen Alkoxycarbonylrest, dessen Alkylgruppe 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist, einen Rest mit der Formel

C — COOCH₃

oder einen Rest mit der Formel

N |—C —COOCH₃ 3n

XT"

-CONH \

35 darstellt.

Die erfindungsgemaßen Verbindungen mit der allgemeinen Formel (1) können dadurch hergestellt werden, daß ein 2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-methoxylmlnoesslgsäureester mit der allgemeinen Formel

H₁COOC-C-, N to

Il

N
H₃CO

(2) NH₂

45 mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

A —CO —B (3)

umgesetzt wird, wobei A ein Halogenatom oder einen niederen Alkoxyrest darstellt und B ein Halogenatom. einen niederen Alkylrest, einen niederen Alkoxyrest, einen Halogenalkoxyrest oder einen Rest mit der Formel -CO-A darstellt.

Gemäß einer anderen Ausführungsform der Erfindung umfaßt eine pharmazeutische Zusammensetzung mit Immunregelnder Wirkung eine Verbindung mit der allgemeinen Formel (1) und einen pharmazeutisch geeigneten Trager.

Spezifische Beispiele für die 2-Thlazolamln-Derlvate, die durch die allgemeine Formel (1) dargestellt werden, umfassen

2-[2-Acetylami:io)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylrnlnoesslgsäuremethylester,

2-[(2-Proplonylamlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylrnlnoesslgsäuremethylester,

2-[(2-n-Butyrylamlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylrnlnoesslgsäurernelhylester,

2-[(2-Isobutyrylamlno)thizol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsäuremethylester,

2-[(2-n-Pcnlanoyl;tmino)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsäurernethylester,

2-|2-(a-Methylbutyryl)amlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsaurernethylester,

2-[2-(/i-Mcthylbutyryl)amlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsäuremeihylester,

2-((2-(ct,a:-Dlmethylproplonyl)amlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsäuremethylester,

N-l4-syn{(l-Carbomethoxy-l-melhoxylmlno)melhyl}thlnzol-2-yl]-oxamldsäuremethylester,

N-14-syn-{(l-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methyl)thlazol-2-yl]oxamldsaureäthylester,

N-H-syn-Ul-Carbomethoxy-l-methoxylmlnoJmethyllthlazol^-ylloxamldsäurc-n-prcpylester, N-^-syn-id-Carbomethoxy-l-methoxylmlnoJmethylkhlazol^-ylloxamldsäurelsopropylester, N-[4-syn-{(l-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methylhhlazul-2-yl]oxamldsäure-n-butylesler, N.[4-syn-{d-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methylkhlazol-2-yl]oxamldsäurelsobutylester, _N.[4._Syn.{(l-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methyl}thlazol-2-yl]oxamldsäure-tert-butylester,

NN'-BlsW-syn-id-Carbomethyoxy-l-methoxylminoJmethylkhlazol^-yllharnstoff, N.N'-BlsH-syn-id-Carbemethoxy-l-methoxylminoiinethyllthiazol^-ylloxamld.

Zur Herstellung derartiger 2-Thlazolamln-Derlvate wird die Reaktion vorzugsweise durchgeführt. Indem ein >o Ausgangsmaterial der allgemeinen Formel (2) (das In Form eines durch die Zugabe einer geeigneten Säure gebildeter .Salzes vorliegen kann) gelöst oder suspendiert wird und eine Verbindung der allgemeinen formel (3) τ. Β. Traufen für Tropfen hinzugegeben wird. Bevorzugte Beispiele für die Verbindungen, die durch die allgemeine Formel (3) dargestellt werden, umfassen Acetylchlorid, Proplonylchlorld, Chloroformsäureäthylester, Athyloxalvlchlorid Phosgen Oxalylchlorid, Diäthylcarbonat, Diäthyloxalat und tert-Butyläthyloxalat. Spezifische '5 Beispiele für'dle Lösungsmittel, die für diesen Zweck geeignet sind, umfassen Benzol, Toluol, Xylol, Aceton, Athvlmethyiketon Dloxan, Pyrldln, Ν,Ν-Dlmethylformamld, Methylenchlorid, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff 1 1-Dimetho'xyäthan, Tetrahydrofuran. In Abhängigkeit von der Art der Reaktion kann es günstig sein, eine organische Base (wie Pyridln oder Triäthylamln) oder eine anorganische Base (wie Natriumhydrogencarbonat, Natriumcarbonat oder Kaliumcarbonat) zum Zwecke der Entfernung der Säure, die sich während der Reak^ll°Obgleich d^oberTbeschriebene Reaktion auch bei Raumtemperatur oder tiefer fortschreitet, kann die Reaktlonsmtschung bis zum Siedepunkt des Lösungsmittels aufgeheizt werden, um die Reaktion zu beschleunigen.

2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-oxylminoesslgsäureester der allgemeinen Formel (2), die bei dem Verfahren der Erfindung als Ausgangsmaterialien verwendet werden, können nach dem Verfahren hergestellt werden, das beispielsweise in der Japanischen Patentoffenlegungsschrlft No. 1 01 393/1978 beschrieben Ist.

Die Verbindungen der Erfindung, die Innerhalb des Umfangs der oben angegebenen Formel (1) liegen, besitzen pharmakologtsche Wirkungen. Unter anderem wurde von den Erfindern unerwarteter Welse gefunden, daß die Verbindungen der Erfindung immunmodulierende Wirkung besitzen. Darüber hinaus sind die Verbindungen der Erfindung sehr gut für therapeutische Zwecke brauchbar, da sie niedrige Toxlzltäl aufweisen. Diese Tatsachen werden unter Bezugnahme auf die folgenden Bewertungstests noch näher erklärt.

Eine Vielzahl experimenteller Systeme wird Im allgemeinen verwendet, um Immunmodullcrendc Wirkungen bei Tieren zu testen. Von derartigen Tests 1st der typischste Test ein Verstärkungstest für verzögerte Hypersenslbllltat (Überempfindlichkeit), wie nachfolgend angegeben.

Die bei Mäusen hervorgerufene verzögerte Hypersenslbllltat durch Verabreichung von Plcrylchlorld (2-Chlor-

1 3 5-trinltrobenzol) an die Haut Ist bekanntermaßen ein typisches Phänomen der zellularen Immunität und

bildet eines der experimentellen Systeme In weltweiter Anwendung [Asherson, G. L. und Ptak, W. »Contact

and delayed hypersensltlvlty In the mouse I. Active sensltlzatlon and passive transfer«. Immunology, 15,

405-416 (1968)]. .

In dem folgenden Bewertungstest 1 wurde dieses experimentelle System verwendet, um einen vcrsiarKungstest für verzögerte Hypersenslbllltat durchzuführen.

Bewertungstest 1 (Verstärkungstesl für verzögerte Hypersenslblliläl.) Testverfahren:

Männliche Mäuse vom ICR-Stamm, die etwa 30 g wogen, wurden In Gruppen zu jeweils 8 Mäusen verwendet. Diese Tiere wurden senslblllslert, Indem das Haar auf dem Bauch abrasiert wurde und dort eine 3-%-Lösung Picrylchlofld In einer 4: 1-Mischung von Olivenöl und Aceton aufgebracht wurde. Gleichzeitig mit dieser Senslbllislerung wurden jeweils drei Verbindungen der Erfindung In physiologischer Kochsalzlösung, die 0,2% Carboxymethylzellulose enthielt, gelöst oder suspendiert und den Tieren In einer Dosis von 500 mg pro kg Körpergewicht oral verabreicht. Eine Kontrollgruppe wurde nur mit physiologischer Kochsalzlösung, die 0,2% Carboxymethylzellulose enthielt, behandelt.

Sieben Tage nach der Senslblllslerung wurden die Tiere gereizt. Indem die Spitzen einer Zange mit Mlzstuckchen umwickelt wurden, der Filz mit 1% Picrylchlorld enthaltendem Olivenöl getränkt wurde und beide Ohren

jedes Tieres zusammengedrückt wurden. Die Dicke des Ohres wurde jeweils vor und 24 Stunden nach der Reizung gemessen, und das berechnete prozentuale Anwachsen der Ohrdicke 1st In Tabelle 1 angegeben (wobei dieser Wert der Mittelwert von 16 Messungen an den Ohren von 8 Tieren Ist). Zum Zwecke des Vergleichs sind auch die Ergebnisse eines Experiments mit Levamlsole-Hydrochlorld angegeben. Die so erhaltenen Testergebnisse wurden einer statistischen Ai.alyse unter Verwendung des F.t-Testcs unterworfen. Die mit einem Kreuz

W) (+) markierten Werte zeigen bei Ihrem Vergleich mit dem Verglelchswert, daß die Differenzen bei P<0,05 bedeutsam waren.

Ergebnisse:

^ Durch Verabreichen der Verbindungen der Erfindung gleichzeitig mit der Senslblllslerung wurde die durch eine Reizung hervorgerufene Reaktion erhöht. Es wurde gefunden, daß die AkIIvItHt der Verbindungen gemäß der Erfindung gleich oder hoher als die von Lcvamlsole waren, das für Verglclchszweckc verwendet wurde. Deshalb wird angenommen, daß die Verbindungen der Erfindung die Wirkung besitzen, zellulare Immunrcak-

Honen in Mäusen zu regulieren (d. h. Immunregclnde Aktivität besitzen).

Tabelle I

Test zur Erhöhung von verzögerter Überempfindlichkcil

Verbindung	\	H1Cu	H1CO	N I	N — ι	NHCHN Η	—r—C —COOCH, Il	I'ro/.enliialei Anstieg der OhruVke
11,COOC- C-η N		\ /		0	Il / \	30,3
N 1	H1COOC-C-,
	N
	NHCOC2H,
			35,2f

Lcvamisolc-hydroehlorid ■* ·*■

Die Adjuvans-Arthrltls, die bei Ratten durch Injektion eines Tuberkelbazlllus-Adjuvans hervorgerufen wird, wird häufig als ein experimentelles Modell für rheumatische Arthritis beim Menschen verwendet.

Obgleich der Mechanismus, durch den dieses Phänomen auftritt, nicht vollständig verstanden wtra ist bekannt, daß zelluläre Immunität eine wichtige Rolle spielt: Unter Verwendung dieses^^J".^/-*"^™" Arthritistests wurden die gleichen Verbindungen der Erfindung weiter auf ihre immunitätsregelnde Wirkung untersucht.

Bewerlungstest 2 [Adjuvans-Arthritlstest (Tabelle 2)]

Testverfahren:

Es wurde ein Ajuvans hergestellt. Indem 0,4 mg abgetötete und getrocknete Zellen des menschlichen Tuberkelbarillus (Mycobacterlum tuberculosis) In 0,1 ml flüssigem Paraffin suspendiert und In die ionie aer recmen Hinterpfote von 8 Wochen allen männlichen Ratten des SD-Stammes Intradermal eingeimpft wurden. Jeae aer drei Verbindungen der Erfindung wurde neunmal vor und nach der Injektion des Adjuvans Mtounvofflreicht. Diese Verbindungen wurden In physiologischer Kochsalzlösung, die 0,2% Carboxymethy Zellulose enthielt gelöst oder suspendiert und In einer Menge von 5 mg pro kg des Körpergewichtes verabreicht, uas Volumen der linken Hinterpfote jedes einzelnen Tieres wurde täglich vom Tage der Einlmpiii'"/ ^{des JUVa}"' bis /um Ende des Tests gemessen, und es wurde die prozentuale Hemmung der Schwellung berechnet. Zu Verglelchszwecken sind auch die Ergebnisse eines Experiments mit Levamlsole-Hydrochlorld angegeben

Die so erhaltenen Testergebnisse wurden einer statistischen Analyse unter Verwendung des F.i-Iests unterworfen. Die mit einem Kreuz (₊) markierten Werte zeigen, wenn sie mit dem Wert einer nur mit Physiologischer Kochsalzlösung, die 0,2% Carboxymethylzellulose enthielt, behandelten Vergleichsgruppe % erglichen werden, daß die Differenzen bei P<0,05 bedeutsam waren.

Ergebnisse:

Die Verbindungen der Erfindung hemmten in bemerkenswerter Welse sekundäre Entzündung der Adjuvans-Arthritis und Ihre Wirkung war im Vergleich zu der Vergleichsgruppe statistisch bedeutsam Es wurde gefunden, daß die Wirkung der Verbindungen der Erfindung gleich oder höher als die von Levamlsole war da^ für Vergleichszwecke verwendet wurde. Es wurde daher angenommen, daß die Verbindungen der Erfindung Immunltäisregelnde Aktivität und zusätzlich eine antlarthritische Wirkung besaßen.

IO

20

Tabelle 2 Adjuvans-Arthritis-Tests

Verbindung

Anzahl

der

Tiere

H₃COOC-C

OCH₃

25 H₃CO

NHCOC₂H₅

l'ro/.enlUiilc Hemmung der Schwellung im Vergleich mit Kontrollgruppc (Mittelwcrl von 16 bis 20 Tagen)

34,5'

22,3

Levamisole-hydrochlorid

19,8'

35 40 45 50 55 6(1 65

Aus den Bewertungstests 1 und 2 Ist ersichtlich, daß die Verbindungen der Erfindung starke Immunltatsregelnde Wirkung besitzen. Demzufolge sind sie bei der Behandlung von Krankheiten wirksam, die dafür bekannt sind, daß sie Verschlechterungen oder Anormalttäten In Immunitätsreaktionen mit sich bringen, z. B. von Autoimmunkrankheiten wie rheumatische Arthritis.

Die Toxlzltät der aktiven Bestandteile einiger typischer pharmazeutischer Zusammensetzungen der Erfindung wurde In dem folgenden Bewertungstest 3 untersucht.

Bewertungstest 3 (Test für akute orale Toxlzltät)
Testverfahren:

Jede der zwei Verbindungen, die in den Bewertungstests 1 und 2 verwendet worden waren, wurde in physiologischer Kochsalzlösung gelöst oder suspendiert und einer Gruppe von 5 mannlichen Mausen des ddY-Stammes oral verabreicht. Der LD₅₀-Wert der Verbindung wurde durch Beobachtung dieser Tiere über 7 Tage nach Verabreichung abgeschätzt.

Ergebnisse:

Die LDso-Werte der obengenannten Verbindungen wurden so eingeschätzt, daß sie nicht kleiner als 1000 mg/kg waren. Diese Werte sind viel höher als der geschätzte LDso-Wert (= 200-300 mg/kg) von Levamisole-Hydrochlorld, so daß die aktiven Bestandteile der pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung als ausreichend niedrige Toxlzität besitzend angesehen werden.

Als Ausgangsmaterialien für die Herstellung von pharmazeutischen Zubereitungen oder Präparaten können die Verbindungen der Erfindung direkt in der Form der freien Basen verwendet werden. Wenn es gewünscht wird, können sie auch In der Form pharmazeutisch annehmbarer Salze eingesetzt werden.

Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung können In den gleichen Dosisformen und durch die gleichen Verabreichungsverfahren wie herkömmliche immunltätsregelnde oder Antlkrebsmittel verwendet werden. Spezieller gesagt, können sie für Zwecke der oralen Verabreichung in Kapseln, Granulat, Pillen, feine Körnchen, Tabletten oder Sirupe ausgeformt werden. Für Zwecke der intrarectalen Verabreichung werden sie geeigneterweise zu Zäpfchen ausgeformt. Für Zwecke der Injektion können sie In die Form von subcutanen. Intramuskulären und Intravenösen Injektionsmitteln gebracht werden.

Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung enthalten vorzugsweise einen aktiven Bestandteil In einer Menge von etwa 10 bis 9596, stärker zu bevorzugen 15 bis 90%, und werden durch an sich bekannte Verfahren wie Mischen, Granulieren, Zuckerbeschichtung, Lösen und Gefriertrocknen hergestellt. Wenn sie Tür oralen Gebrauch bestimmt sind, wird der aktive Bestandteil mit einem festen Träger kombiniert und es werden geeignete pharmazeutische Hilfsmittel hinzugegeben, wenn es gewünscht wird. Spezifische Beispiele für die brauchbaren Träger umfassen Zucker, Zellulosepräparate und Kalziumphosphat und spezifische Beispiele für brauchbare pharmazeutische Hilfsmittel umfassen Bindemittel, gemahlene Stoffe (z. B. Stärke), Fließsteuermittel und Schmiermittel. Darüber hinaus können jegliche geeigneten Zusatzstoffe entsprechend der Dosierungsform Inkorporiert werden.

Die Indikationen für die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung umfassen eine Vlel/uhl von Krankheiten, von denen bekannt lsi, daß sie Immunitätsverschiebungen mit sich bringen, und spezifische Beispiele dafür sind Aulolmmunltatskrankhelten wie rheumatische Arthritis und multiple Muskelenizündung, verschiedene Arten von Infektion und verschiedene. Arten von Krebs. Es kann erwartet werden, daß die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung die Immunitätsreaktion bzw. -funktion von Patienten, die an derartigen Krankheiten leiden, normalisieren.

Es Ist wünschenswert, daß das Verabreichungsverfahren und die Dosierungsform der pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung In geeigneter Welse entsprechend der Art der Krankheit und der Kondition des Patienten bestimmt werden. Die tägliche Dosis pro Kilogramm Körpergewicht sollte üblicherweise 0,5 bis 100 mg, vorzugsweise 1 bis 30 mg, für orale Verabreichung, 1 bis 100 mg für Intrarectale Verabreichung, 1 bis in 10 mg für Intravenöse Verabreichung und 1 bis 30 mg für subcutane oder Intramuskuläre Verabreichung sein. Es 1st jedoch wünschenswert, diese Dosen In geeigneter Welse entsprechend der Art der Krankheit und der Kondltion des Patienten zu modifizieren. In Abhängigkeit von dem Typ der Krankheit und tier Kondition des Patlenten können die therapeutischen Wirkungen des aktiven Bestandteils der Erfindung vergrößert werden, Indem gleichzeitig eine andere Arznei oder andere Arzneien verwendet werden, wenn es gewünscht wird. Beispielsweise bewirken chemotherapeutische Mittel gegen Krebs wie z. B. alkyllerende MIttel und metabolische antagonistisch wirkende Stoffe die Nebenwirkung, daß die Immunitätsfähigkeil des Patienten verschlechtert wird. Wenn der aktive Bestandteil der Erfindung In Kombination mit einer derartigen Arznei verwendet wird, kann erwartet werden, daß die Ausbildung der genannten Nebenwirkung der Arznei verhindert wird und dadurch die therapeutischen Wirkungen synergistisch vergrößert werden.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen 2-Thlazolamln-Derlvate wird nun durch die folgenden Beispiele erläutert.

Beispiel 1

Es wurde eine Lösung hergestellt, Indem 4,3 g 2-(2-Amlnothiazol-4-yl)-2-syn-meihoxylmlnoesslgsäuremethylester In 30 ml Tetrahydrofuran gelöst wurden und 2,0 g Trläthylamln hinzugegeben wurde, und Ihre Temperatur

wurde auf 0 bis 5" C gehalten. Nachdem 2,72 g Äthyloxalylchlorld zu der genannten Lösung hinzugegeben worden war, wurde die entstandene Reaktionsmischung 1 Stunde gerührt. Diese Reakiionsmlschung wurde unter verringertem Druck konzentriert, und der in Chloroform aufgenommene entstandene Rückstand wurde mit Wasser gewä- 3" sehen. Das so erhaltene Rohprodukt wurde der Slllcagel-Säulenchromatographle unterworfen, bei der eine Ausbeute von 3,1g N-[4-syn-{(l-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methylhhlazol-2-yl]oxamldsäureäthylester durch Elutlon mit einer 20:1-Mischung von Chloroform und Tetrahydrofuran erhalten wurde.

Schmelzpunkt: 142-143,5° C

Elementaranalyse:

CHNS

— ■

Berechneter Wert (%) 41,90 4,16 13,32 10,17

für C_1nH₁₅N₃O₆S
Gefundener Wert (%) 41,76 4,13 13,25 10,21

NMR (kemmagnelische Resonanz) Spektrum (δ j^§ ', ppm):

1,40 (3 H, t, J = 7,0 Hz), 3,92 (3 H, s), 4,02 (3 H, s),

4,42 (2 H, q, J = 7,0 Hz), 7,32(1 H,s),ll,0(l H,br: verschwand, als das Spektrum in D₂O aufgezeichnet wurde), so

Beispiel 2

Es wurde eine Lösung hergestellt, indem 2,2 g 2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-methoxylminoessigsäurethylester in 20 ml Pyridln gelöst wurden. Nachdem 1,4 g Äthyloxalylchlorld tropfenweise zu dieser Lösung hinzugegeben worden waren, wurde die entstandene Reaktionsmischung über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsprodukt wurde auf die gleiche Welse wie In Beispiel 1 isoliert und gereinigt, um eine Ausbeute von 1,9 g N-[4-syn-{( 1 -Carbomethoxy-1 -methoxyimlno)-methyl)thlazol-2-yl]oxamldsäureäthylester zu erhalten.

Beispiel 3

Es wurde eine Reaktionsmischung hergestellt, Indem 2,2 g 2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-methoxyimlnoessigsäuremethylester zu 50 ml Dlälhyloxalat hinzugegeben wurden. Diese Reaktionsmischung wurde bei 100° C 12 Stunden lang erhitzt und dann unter Unterdruck konzentriert. Danach wurde das Reaktionsprodukt auf die gleiche Welse wie in Beispiel 1 gereinigt, um eine Ausbeute von 1,5g N-[4-syn-{(l-Carbomethoxy-l-methoxy- &5 lmlno)methyl}thlazol-2-yl]oxamldsäureäthylester zu erhalten.

Beispiel 4

Das Verfahren von Beispiel 1 wurde mit der Ausnahme wiederholt, daß Proptonylchlorld anstelle des Älhyloxalylchlorlds verwendet wurde. Als Folge davon wurde eine 42% Ausbeute von 2-[(2-Proplonylamlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsauremethylester erhalten.

Schmelzpunkt: 140,5-141,5° C Elementaranalyse:

C 11 N S

Berechneter Wert (%) 44,27 4,83 15,49 11,82

für

Gefundener Wert (%) 44,21 5,00 15,39 11,83 NMR (kernmagnetische Resonanz) Spektrum (<5 _TMc . ppm):

1,10 (3 H, t, J = 8 Hz), 2,50 (2 H, q, J = 8 Hz), 3,93 (3 H, s),

4,02 (3 H, s), 7,12 (1 H, s), 10,65 (1 H, s: verschwand, als das Spektrum in D₂O aulgezeichnet wurde).

Beispiel 5

Es wurde eine Lösung hergestellt, Indem 4,3 g 2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-methoxylmlnoesslgsäuremethylester In 40 ml Tetrahydrofuran gelöst und 2,0 g Triethylamin hinzugegeben wurden, und sie wurde dann auf 5° C oder weniger abgekühlt. Nachdem 10 ml Toluol, das 0,99 g Phosgen enthielt, langsam tropfenweise zu dieser Lösung hinzugegeben worden war, wurde die entstandene Reaktionsmischung bei Raumtemperatur 5 Stunden lang gerührt. Diese Reaktionsmischung wurde filtriert, um alle unlöslichen Substanzen zu entfernen. Das Flltrat wurde unter Unterdruck konzentriert und der In Chloroform aufgenommene entstandene Rückstand wurde mit Wasser gewaschen. Das so erhaltene Rohprodukt wurde der Slllcagel-Saulenchromatographle unterworfen, In der eine Ausbeute von 2,6g N,N'-Bls[4-syn-{(l-carbomethoxy-l-methoxylmlno)methyl}thlazol-2-yl]-harnstoff durch Elutlon mit einer 40 :1-Mischung von Chloroform und Tetrahydrofuran erhalten wurde.

Schmelzpunkt: 130-135⁰C

Elementaranalyse:
CHNS

Berechneter Wert (%) 39,47 3,53 18,41 14,05

fiir C₁₅H₁₆N₆O₇S₂ Gefundener Wert (%) 39,33 3,49 18,69 14,11

NMR (kernmagnetische Resonanz) Spektrum (<5 y^g ", ppm):

3,86 (6 H, s), 3,88 (6 H, s), 7,10 (2 H, s), 11,88 (2 H, br: verschwand, als das Spektrum in D₂O aufgezeichnet wurde).

Beispiel 6

Es wurde eine Lösung hergestellt, indem 2,15 g 2-(2-Amlnothlazol-4-yl)-2-syn-methoxylrnlnoesslgsaurernethylester In 30 ml Tetrahydrofuran gelöst und 1,0 g Triethylamin hinzugegeben wurden, und sie wurde dann auf 0° C abgekühlt. Nachdem 0,64 g Oxalylchlorid zu dieser Lösung hinzugegeben worden waren, -wurde die entstandene Reaktionsmischung bei Raumtemperatur 3 Stunden lang und dann bei Rückflußtemperatur 1 Stunde lang gerührt. Diese Reaktionsmischung wurde unter Unterdruck konzentriert, und der entstandene Rückstand wurde

μ nacheinander mit Wasser, Methylalkohol und Tetrahydrofuran gewaschen. Das so erhaltene Rohprodukt wurde dann von Ν,Ν-Dimethylformamld umkristallisiert, um eine Ausbeute von 1,6 g N,N'-Bls[4-syn-{(l-carbomethoxy-l-methoxytmlno)methylhhlazol-2-yl]oxamld zu erhalten.

Schmelzpunkt: 260-262° C (zersetzt)

Elementaranalyse:

H N

Berechneter Wert (%) 39,67 3,33 17,35 13,24

für C₁₆H₁₆N₆OA
Gefundener Wert (%) 39,70 3,30 17,34 12,99

, DMSO-d₆ . ⁱ⁰

NMR (kernmagnetische Resonanz) Spektrum (<5 _TMS , ppm):

3,9 (6 H, s), 3,98 (6 H, s), 7,78 (2 H, s), 13,38 (2 H, s: verschwand, als das Spektrum in D₂O aufgezeichnet wurde).

Zur Bestimmung der Toxlzltät der erflndungsgemäßen Verbindungen wurden Vergleichstests der Verbindung is nach Beispiel 4 mit der unter der Bezeichnung Lotlfazol bekannten Verbindung durchgeführt, wobei die nachfolgend im einzelnen aufgeführten Ergebnisse erhalten wurden:

1) Vergleichstest auf akute Toxlzltat §

Testverfahren: $.

2-[(2-Proplonylamlno)thiazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoessigsauremethylester, (die Verbindung nach Beispiel 4) | und die Verbindung Lotlfazol wurden jeweils In einer O,2gew.-Klgen Carboxymethyizelluloselösung suspendiert it und oral In einer Dosierung von 250 mg pro kg Körpergewicht einer Gruppe von 5 sechswochenalten mämi- 25 f liehen Ratten vom SD-Stamm verabreicht. Einer Kontrollgruppe wurde lediglich eine 0,2gew.-96lge Carboxymethyizelluloselösung allein verabreicht. V;

Ergebnisse: β

Die Anzahl Ratten, die In den der Verabreichung folgenden 7 Tagen In jeder Gruppe verstarben, sind In der ;

nachfolgenden Tabelle aufgeführt: _;.;;

Tabelle ■

— ■ 35 \;

Tage nach der Verabreichung ΐ

12 3 4 5 6 7 ⁷

Kontrollversuch	0	0	0	0	0	0	0
Lolilazol	3	0	0	1	0	0	0
Verbindung nach Beispiel 4	0	0	0	0	0	0	0

Aus vorstehenden Daten 1st ersichtlich, daß die Sterblichkeit In der Gruppe, der die Verbindung Lotlfazol 45 verabreicht worden war, In den der Verabreichung folgenden 7 Tagen V₅ betrug.

Andererseits verstarb weder In der Gruppe, der die Verbindung nach Beispiel 4 verabreicht worden war, noch In der Kontrollgruppe eine Ratte.

2) Verglelchstest auf Toxlzltät bei kontinuierlicher Verabreichung In 1 Woche 50

Testverfahren:

Wie Im vorstehenden Test 1 wurde die suspendierte Lösung von der Verbindung nach Beispiel 4, und der Verbindung Lollfazol In O,2gew.-961ger Carboxymethylzelluloselösuniä oral In einer Dosis von 200 mg pro kg 55 Körpergewicht 7 Tage lang pro Tap einer Gruppe von 5 sechswochenalten m&nnllchen Ratten vom SD-Stamm verabreicht.

Einer Kontrollgruppe wurde lediglich eine entsprechende O,2gew.-96tge Carboxymethyizelluloselösung allein verabreicht.

Ergebnisse:

Es wurden die Körpergewichte (In Gramm) der noch lebenden Ratten bestimmt, und zwar an dem der Verabreichung vorausgehenden Tag und an dem 3., 5. und 7. Tag nach Beginn des Testes, wobei In der nachfolgenden Tabelle die Gewichte jeder Gruppe aufgeführt sind, wobei 198 ± 3,7 g beispielsweise für das Körpergewicht ^b5 der lebenden Ratten dieser Gruppe steht, welche sich zwischen 198-3,7 g und 198 + 3,7 g aufteilt.

Tabelle Voraus- Tage nach Beginn des Tests

gehender Tag

3 5

Kontrollversuch 198 ± 3,7 219 ± 3,9 233 ± 4,5 249 + 4,6

Lotifazoi 198 ±5,3 156 ± 10,8(3)*) 161 ± 14,0 163 ±8,0

¹⁰ Verbindung nach Beispiel 4 197 ±5,1 215 ± 6,5 230 ± 6,7 244 ±6,7

♦) (3) bedeutet, daß in disser Gruppe 3 Ratten bis zum 3. Tag nach dem Beginn des Tests verstarben.

15 Aus vorstehenden Ergebnissen 1st ersichtlich, daß In der Gruppe von Ratten, der die Verbindung Lotlfazol verabreicht worden war, das Wachstum der Ratten, die überlebten, wesentlich gehemmt war, wahrend andererseits die Ratten In der Gruppe, der die Verbindung nach Beispiel 4 verabreicht worden war, und In der Kontrollgruppe normal wuchsen. Obgleich somit ein wesentlicher Unterschied zwischen der Immunltatsregullerenden Aktivität der erflndungs-

2» gemäßen Verbindungen einerseits und der Verbindung Lotlfazol andererseits nicht festgestellt werden kann, so 1st doch andererseits die Toxlzltat der erflndungsgemaßen Verbindungen wesentlich geringer als bei der Verbindung Lotlfazol.

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Claims (1)

1. Patentansprüche:

   1. 2-Thlazolamln-Derivat mit der allgemeinen Formel H₃COOC-C-T N

   111 ^N

   wobei X einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einen Aikoxycarbonylrest, dessen Alkylgruppe 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist, einen Rest mit der Formel

   -NH oder einen Rest mit der Formel

   — CONH

   OCH₃

   OCH₃

   darstellt.
   2. N-[4-syn-{(l-Carbomethoxy-l-methoxylmlno)methyl}-thlazol-2-yl]oxamldsaureaihylester der Formel

   NHCOCOOC₂H₅

   H₃CO

   3. 2-l(2-Proplonylamlno)thlazol-4-yl]-2-syn-methoxylmlnoesslgsaurernethy1ester.

   4. N,N'-Bls[4-syn-{(l-carbomethoxy-l-methoxylmlno)-methyl}-thlazol-2-yl-]harnstoff der Formel