DE102007004991B4

DE102007004991B4 - Verwendung von RiV-Präparaten zur Behandlung des Hirninfarktes

Info

Publication number: DE102007004991B4
Application number: DE102007004991.0A
Authority: DE
Inventors: Patentinhaber gleich
Original assignee: Individual
Current assignee: Varicula Biotec De GmbH
Priority date: 2006-08-14
Filing date: 2007-02-01
Publication date: 2018-08-30
Anticipated expiration: 2027-02-02
Also published as: DE102007004991A1

Abstract

Verwendung von BK-RiV-Präparaten, enthaltend RiV-Partikel mit einer Größe von 30 bis 70 nm zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung des Hirninfarktes, wobei die Herstellung der BK-RiV-Präparate folgende Schritte aufweist:- Kultivierung von primären, diploiden oder unbegrenzt wachsenden Vertebratenzellen;- Stressung der Zellen, bevorzugt mittels Hungerstress aufgrund der Verwendung von Medium ohne Serum, wodurch die 30-70 nm großen RiV-Partikel entstehen;- Zellaufschluss;- Abtrennung größerer Zelltrümmer;- Anreicherung der RiV-Partikel im resuspendierten Sediment durch Ultrazentrifugation und kurzzeitige Lösungsmittelbehandlung oder durch Ultrafiltration oder durch Affinitätschromatographie;- Gewinnung der wäßrigen, die RiV-Partikel enthaltenden Phase nach niedertouriger Zentrifugation.

Description

Die Erfindung betrifft die Verwendung eines Präparates, das aus BK-RiV (Bio-komplex-Reaktionsmuster in Vertebratenzellen) besteht, im wesentlichen repräsentiert durch 30 bis 70 nm (im Mittel 50 nm) große sphärische RiV-Partikel, zur Nachsorge des Hirninfarktes und anderer Erkrankungen, die mit akuten Durchblutungsstörungen verbunden sind und bei denen bisher bekannte Arzneimittel nicht ausreichend wirken oder/und mit stärkeren Nebenwirkungen verbunden sind.
Dem Hirninfarkt liegt eine akute Durchblutungsstörung des Gehirns zugrunde, die „schlagartig“ unterschiedlichste Funktionsstörungen und vielfach auch Funktionsverluste zur Folge hat. Auslöser für einen ischämischen Insult ist entweder ein Gefäßverschluss (arterielle Thrombose) aufgrund einer Arteriosklerose oder ein von der Halsschlagader oder vom Herzen ausgehendes, losgelöstes und in die Gehirnarterien gelangtes Blutgerinnsel (Embolie). Wenn es nicht gelingt, den Sauerstoffmangel rasch zu beheben, stirbt das nicht mehr durchblutete Hirngewebe nach einigen Stunden ab. Die Folgeschäden sind sehr unterschiedlich, je nachdem welche Hirnanteile betroffen sind. Ist beispielsweise das Sprachzentrum betroffen, sind Sprachstörungen die Folge („Schlaganfall“ in: Praxisatlas Gesundheit; Wissen Media Verlag GmbH u ADAC Verlag GmbH München 2002). Der Schlaganfall ist in den Industrieländern die dritthäufigste Todesursache. Ca. ein Drittel der Patienten bleibt auf lange Sicht pflegebedürftig und schwer behindert. Etwa 80 % der Schlaganfälle sind auf eine mangelhafte Durchblutung des Gehirns zurückzuführen. Die Diagnose - ob Hirninfarkt oder Hirnblutung - wird heute durch bildgebende Verfahren wie Computertomographie (CT) oder Kernspintomographie (Magnetresonanztomographie (MRT) gestellt.
Entsprechend dem Stand der Technik kann beim Hirninfarkt in den ersten sechs Stunden nach Beginn der Symptome intravenös ein Gerinnsel auflösendes Medikament (Thrombolyse mittels Gewebeplasminogenaktivator) verabreicht werden. Auch der Einsatz von Kalziumantagonisten unterstützt die Rückbildung der neurologischen Ausfälle, sofern sie innerhalb der ersten zwölf Stunden verabreicht werden („Schlaganfall“ in: Praxisatlas Gesundheit; Wissen Media Verlag GmbH u ADAC Verlag GmbH München 2002).
Innerhalb der ersten 3 Stunden nach Einsetzen der Beschwerden können Verschlüsse der außerhalb des Gehirns gelegenen Arterien, also der Halsschlagader und ihrer Verzweigungen auch operativ wieder rückgangig gemacht werden. Weitere Maßnahmen beinhalten eine Unterstützung von Herz und Kreislauf, Atmung und insbesondere die Sauerstoffversorgung des Gehirns. Zur Vorbeugung einer Thrombose wird eine Heparintherapie eingeleitet.
In der Nachsorge stellt die Therapie mit Acetylsalicylsaure (ASS) einen wirksamen medikamentösen Schutz vor einem erneuten Schlaganfall dar. Sie verhindert, dass sich Gerinnsel bilden und erneut ein Gefäß verschließt. Teurere Thrombozytenaggregationshemmer mit dem gleichen Effekt haben aber im Vergleich zum ASS nicht die Nebenwirkungen auf die Magenschleimhaut. Die Rehabilitation des Schlaganfallpatienten soll möglichst noch im Krankenhaus beginnen, wobei Krankengymnastik, Arbeitstherapie und Sprachübungen helfen sollen, die neurologischen Ausfälle zu reduzieren oder besser zu kompensieren (Praxisatlas Gesundheit, S. 415). Trink- und Essschwierigkeiten, Inkontinenz, verstärkt durch die Bewegungsstörungen und Druckstellen gehören oft zu den alltäglichen Problemen, die häufig Depressionen nach sich ziehen.
Bei der komplementären Medizin seien neben homöopathischen Mitteln wie Arnica montana, Belladonna, Nux vomica, Schlafmohn je nach Krankheitsbild, Ozontherapie, Hydrotherapie und Reflexzonentherapie die Phytotherapie zur Linderung der Beschwerden und Funktionsstörungen nach einem Schlaganfall erwähnt.
Dem Stand der Technik entspricht weiterhin der in bisherigen Patentschriften vorgeschlagene Einsatz von BK-RiV-Präparaten u. a. zur Therapie von bestimmten Virus-bedingten Erkrankungen, insbesondere AIDS, zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen, bevorzugt in Kombination mit der Chemo- oder Radiotherapie, extremen Schmerzzuständen, solchen des rheumatischen Formenkreises inklusive schweren Formen der Psoriasis ( DD 228 739 A1 , DD 283 330 A5 , Gebrauchsmuster DE 92 18 127 U1 , EP 0 702 955 B1 , DE 19728323 A1 , EP 0702955 A1 , EP 0 889 053 B8 ). Desweiteren ist die Verwendung von RiV-Präparaten in der Behandlung von idiopatischer Lungenfibrose (siehe DE 10 2006 023 560 A1 ), Allergien, Mykosen, Psoriasis und diverser Sarkome (siehe DE 197 28 323 A1 ) sowie von Erkrankungen des Leberparenchyms (siehe WO 02/067954 A2 ) vorbekannt.
Die zellkulturbasierenden RiV-Präparate, hergestellt nach den Verfahren, die in DD 283 330 A5 , DE 92 18 127 U1 , EP 0 889 053 B8 , DE 10 2004 036 079 A1 , oder im DE 103 06 331 A1 beschrieben worden sind, zeichnen sich dadurch aus, dass sie bei Krebspatienten bei fast allen ultima-ratio-Fällen zu einer deutlich verbesserten Lebensqualität der Patienten nicht nur durch Schmerzminderung oder -aufhebung (auch bei morphinresistenten Schmerzzuständen) führen, sondern mental aufhellend und z. T. auch lebensverlängernd wirken. Bei generalisierter psoriatischer Erythrodermie beispielsweise kommt es zu einer wesentlichen Besserung der Symptome und Beschwerden. Unerwünschte Nebenwirkungen (eine Allergie z. B. gegen Schweineprotein, wenn beispielsweise BK-RiV aus Zellkulturen porcinen Ursprungs hergestellt wird, darf nicht vorliegen) kamen bisher auch nach mehrmonatiger und mehrjähriger Applikation von je 5ml BK-RiV i.m. in 14tägigen Abständen nicht zur Beobachtung ( DE 4435352 C2 ; Solisch, Liebermann und Wazel, Poster CLI 09, Jahrestagung der Ges. f. Virologie, Berlin, Marz 2003). Die morphologisch charakteristischen Bestandteile von BK-RiV-Präparaten, ca. 30 bis 70 nm große RiV-Partikel, sind neben kleineren RiV-spezifischen Komponenten/Untereinheiten wahrscheinlich ein Reaktionsprodukt der Zelle auf Stress (Liebermann et al., 2005, Eng. Life Sci. 5, No 3, 240-246). RiV-Partikel sind Exosomen-ähnliche Partikel (exosome-like particles). BK-RiV-Präparate enthalten identifizierte Proteine ( DE 197 28 323 A1 ).
Die vorliegende Erfindung bezweckt, insbesondere die Nachsorge und Rehabilitation des Hirninfarktes und anderer Erkrankungen, die mit plötzlichen Durchblutungsstörungen verbunden sind, deutlich zu verbessern, d. h. insbesondere die Rehabilitation durch den Einsatz eines BK-RiV-Präparates im Vergleich zu bekannten medikamentösen Behandlungen wesentlich zu verbessern und zu beschleunigen.
Es wurde überraschend gefunden, dass eine primäre oder adjuvante Behandlung (Nachsorge) des Hirninfarktes mittels BK-RiV (RiV-Partikelpräparaten oder RiV-spezifische Komponenten enthaltenden Praparaten), hergestellt nach bereits vorgeschlagenen Verfahren, durchgeführt werden kann. Die Behandlung führt zu einer erstaunlich schnellen und sehr deutlichen Reduzierung bzw. Aufhebung der Beschwerden und Funktionsstörungen. Paraklinisch normalisierte sich das subjektive Befinden äußerst rasch. Die Lebensqualität des Patienten wird durch die deutliche Steigerung seiner körperlichen und geistigen Leistungsfähigkeit und der Stimmungslage wesentlich verbessert.
Nebenwirkungen wurden im Behandlungszeitraum (ca. 6 Wochen, dann Weiterbehandlung wegen Nierenzellkarzinom und Hirnmetastasen über weitere 4 Monate) nicht beobachtet.
Die Herstellung von BK-RiV- bzw. RiV-Partikelpräparaten wird im wesentlichen durch folgenden Ablauf beschrieben:
Kultivierung von primären, diploiden oder unbegrenzt wachsenden Vertebratenzellen, Stressung der Zellen zwecks Anreicherung von BK-RiV-spezifischen Komponenten, insbesondere der etwa 30-70 nm großen RiV-Partikel, vorzugsweise durch Hungerstress (Medium ohne Serum), nach Zellaufschluss mit oder ohne den serumfreien Zellkulturüberstand, Abtrennung größerer Zelltrümmer, Ultrazentrifugation und kurzzeitige Lösungsmittelbehandlung des resuspendierten Sediments, Gewinnung der wässrigen Phase nach niedertouriger Zentrifugation. Vorzugsweise folgt zuletzt ein Inaktivierungsschritt (10 min. 100°C im Wasserbad, siehe DE 10 2004 036 079 A1 ). Im Unterschied zu obiger Variante der Aufarbeitung kann auch die Ultrazentrifugation durch Ultrafiltration oder andere bekannte Anreicherungs- und Reinigungsverfahren ersetzt werden. Anstelle der Lösungsmittelbehandlung kann eine 2. Ultrazentrifugation auch in Form einer Dichtegradienten- oder -Polsterzentrifugation gemäß. dem Stand der Technik in Analogie zur Reinigung von Viren durchgeführt werden, (siehe Liebermann, H. „Reinigung und Konzentrierung animaler Viren" Gustav Fischer Verlag Jena 1982, S.76-97). Anschließend wird elektronenmikroskopisch, immunchemisch und biochemisch auf Identität, Quantität, Sterilität, Unschädlichkeit etc. gemäß europäischer Pharmakopoe geprüft. Die Herstellung des RiV-Präparates kann auch mittels Affinitätsseparation gemäß DE 103 06 331 A1 erfolgen, was den Vorteil erhöhter Ausbeute an RiV-spezifischen Komponenten und der Abreicherung eines möglichen Fremdvirus hat.
Das RiV-Präparat wird vorzugsweise aus Zellen porcinen, bovinen oder humanen Ursprungs gewonnen.
BK-RiV wird intramuskulär appliziert. Ein mögliches Applikationsschema ist:
Am ersten Tag 1-2 ml; am 2. Tag 2-3ml; am 7. Tag 3ml; nach einer weiteren Woche Wiederholung, dann jede Woche 2-3 ml oder 14-tägig 5 ml, insgesamt mindestens 20 ml entsprechend dem Heilungsverlauf.
Eine Überdosierung wurde bisher bei allen behandelten Patienten nicht festgestellt. Alle 2 Tage 3ml wurden von einem Patienten (kein Infarktpatient) auch gut vertragen.
Die Behandlung mit RiV-Präparat kann über Monate und sogar Jahre ausgedehnt werden und kann auch prophylaktisch erfolgen.
Anwendungsbeispiel:
Patient, männlich, 54 Jahre;
Diagnose: Schlaganfall (Hirninfarkt), außerdem niedrig differenziertes Nierenzellkarzinom mit Hirnmetastasen im linken Temporallappen, diesbezüglich austherapiert;
Erstbefund (10 Tage nach Hirninfarkt): stationärer Patient in sehr schlechtem Allgemeinzustand, völlig bewegungsunfähig, Sprache lallend, kathederisiert, starke Druckschmerzen im Kopf trotz analgetischer Therapie, depressive Stimmungslage.
RiV-Therapie:
Nach intramuskulärer Applikation von 8 ml BK-RiV innerhalb von 7 Tagen, verteilt auf 2 bzw. 3 ml pro Injektion, Schmerzsymptomatik beseitigt, aufgehellte Stimmungslage, Sprache verständlich; nach Applikation von weiteren 3ml am 17. Tag: normaler Harnfluss, erste Bewegungsübungen, gezielte Konversation möglich; nach Applikation von weiteren 2ml BK-RiV am 30. Tag: Nahrungsaufnahme außerhalb des Bettes, normaler Appetit, Sprache ausdauernd, klar und verständlich, nur noch geringe Pflegeaufwendungen. Nach weiteren 2ml 14 Tage später: erhöhter Harndrang, erhebliche Wasserauslagerungen aus dem Körper, Patient nimmt wieder normale Proportionen an und fühlt sich sehr wohl. Patient wird aus der Klinik nach Hause entlassen.
Das hier eingesetzte RiV-Partikelpräparat (Versuchscharge aus Kalbernierenzellkulturen) hatte eine chemisch-colorimetrisch bestimmte Proteinkonzentration von 87 ± 91 µg/ml.

Claims

Verwendung von BK-RiV-Präparaten, enthaltend RiV-Partikel mit einer Größe von 30 bis 70 nm zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung des Hirninfarktes, wobei die Herstellung der BK-RiV-Präparate folgende Schritte aufweist: - Kultivierung von primären, diploiden oder unbegrenzt wachsenden Vertebratenzellen; - Stressung der Zellen, bevorzugt mittels Hungerstress aufgrund der Verwendung von Medium ohne Serum, wodurch die 30-70 nm großen RiV-Partikel entstehen; - Zellaufschluss; - Abtrennung größerer Zelltrümmer; - Anreicherung der RiV-Partikel im resuspendierten Sediment durch Ultrazentrifugation und kurzzeitige Lösungsmittelbehandlung oder durch Ultrafiltration oder durch Affinitätschromatographie; - Gewinnung der wäßrigen, die RiV-Partikel enthaltenden Phase nach niedertouriger Zentrifugation.