CZ8493A3 - Isolation process of crystalline silybine and silymarine - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se týká současné izolace krystalického silybinu a silymarinu ze semen silybinové odrůdy ostropestřece mariánského CSilybum marianum Gaertnb.

Dosavadní stav techniky

Plody ostropestřece mariánského obsahuji skupinu látek odvozených od flavanolu taxi foli nu, souhrnné označovaných jako flavolignany. Komplex flavolignanů izolovaných z této drogy bývá také označován jako silymarin a používá se řadu let jako hepatoprotektivum pro jeho ochranné působeni na jaterní membrány Cnapř. Arzneimittel Forschung 25_r 82 /1975/0. Hlavními složkami silymarinu jsou izomerni sloučeniny sumárního vzorce ^C25^22°10^: siiybin, izosilybin, silydianin a silychristin, jejichž úplná struktura byla objasněna v řadě předních časopisů CTetrahedron Lett. 25_r 2911 /1968/; Chem. Ber. 108_x 1481 /1975/b; J. Chem. Soc. Chem.

Commun, 16_x 696 /1979/; Tetrahedron Lett. 31 _x 2675 /1970/;

Tetrahedron Lett. 51 _r 4547 /1977/L>.

Hepatoprotektivní účinek je přisuzován celému souhrnu flavolignanů - předpokládá se synergismus působení jednotlivých složek silymarinu. Proto se většina známých postupů zabývá izolaci tzv. silymarinového· komplexu - silymarinu CDE 19 23 082, DE 20 17 789, J 8 091 212. BE 766 228. CS 216 997, CS 162 722, CS 223 986, FR

181 188, DD 112 261, DE 1 767 666, DE 2 020 407, DE 2 914 330, DE 3 225 688, DE 2 459 388, US 3 773 932, US 4 368 195, AT 290 223, CH 646 6925 nebo |tlg. pat. přihláška BE 08 800 376b.

Postupy se liší jak použitým izolačním postupem, tak i kvalitou získávaného produktu; kvalita produktu však závisí zejména na použité výchozí surovině - droze ostropestřece mariánského. Výše uvedené flavolignany - silybin, silydianin a silychristiň jsou obsaženy v červeně kvetoucí varietě, zatímco bílá varieta obsahuje jiné flavolignany, které se liší nepřítomnosti jedné hydroxylové skupiny a prostorovým uspořádáním molekuly. Poměr silybin, silydianin a silychristin v Červeně kvetoucí varietě je různý v různých odrůdách; existuji odrůdy s dominantním obsahem silydianinu - si1ydiani nové odrůdy a odrůdy s dominantním obsahem silybinu - silybinové odrůdy. Starší patenty zabývající se izolací silymarinového komplexu se vůbec o poměru jednotlivých složek nezmiňují. V novějším patentu firmy Madaus CDE 2 914 3300 je uveden jako ideální poměr silybin - silydianin - silychristin 3:1:1, tzv. standardizovaný silymarin.

Izolace čistého silybinu se objevuje až v novější patentové literatuře. Cílem je získat čistý silybin pro přípravu vodorozpustných derivátů silybinu, vhodných k výrobě injekčních lékových forem nebo pevných lékových forem s vyšší biodostupnosti. V patentu DE 3 537 656 se izoluje silybin ze silymarinu získaného podle DE 1 923 082 opakovanou krystalizací z ethylacetátu. V postupu podle čs. . iLii .ΤΡΎ 7OSO.<ň70 se izoluje silybin z drogy poměrně složitým postupem, obtížně realizovatelným v průmyslovém měřítku.

Podstata vynálezu

Postup podle vynálezu řeší současnou izolaci krystalického silybinu a silymarinu z plodů silybinové odrůdy ostropestřece mariánského extrakci drogy acetonem obsahujícím 5 až 15 % vody.

Získaný extrakt se zahustí na jednu' polovinu až jednu pětinu » původního objemu a zahuštěný extrakt se rafinuje petroletherem.

V rafinovaném extraktu se dále sníží koncentrace acetonu odpařením a/nebo přídavkem vody. Tim dojde k vyloučeni koncentrátu, který se oddělí od vodní fáze a naředí se methanolem. Ze získaného methanolového roztoku vykrystaluje surový silybin, ze kterého se Čistý silybin získá krystalizací z ethanolu. Methanolové matečné louhy po izolaci surového silybinu se dále rozdělí na dvě frakce roztřepáním v systému methylenchlořid-methanol-voda. Vodná frakce obsahující zejména silychristin, taxifolin a polární balastní látky se z procesu vyřadí. Methylenchloridové frakce obsahující zejména silybin a izosilybin se spojí s matečnými louhy z rekrystalizace surového silybinu a zpracují se na silymarin o sobě známým postupem, tedy buď se usuší ve fluidní nebo

-i rozprašovací sušárně nebo se silymarin vysráží přídavkem vody a získaná sraženina se odfiltruje a usuší.

Hlavní výhodou postupu podle vynálezu oproti dosud známým postupům je současná izolace silybinu a silymarinu přímo z drogy ostropestřece mariánského. Toto je dosaženo zejména způsobem zpracováni matečných louhů po izolaci krystalického surového silybinu. Tyto matečné louhy obsahují zejména silychristin C20-30% v suši ně), silybin Cvčetně izosilybinu 10-20% v sušině). Dále jsou přítomny minoritní látky ze skupiny flavolignanů Cnapříklad taxi f olinu} a polární bal as tni látky.

Roztřepáváním těchto matečných louhů v systému methylenchlorid-methanol-voda dojde k rozděleni látek na dvě frakce, z nichž vodná frakce obsahuje zejména silychristin, taxifolin a polární balastni látky a je z procesu vyřazena a methylenchlořidová frakce obsahuje zejména silybin Cvčetně izosilybinu 25-35% v sušině? a silychristin Cl 5-20% v sušině?. Tato methylenchlořidová frakce může být společně s matečnými louhy z rekrystalizace surového silybinu Cobsahují převážně silybin - cca 50%? zpracována na silymarin vyhovující kvality. Při přípravě standardizovaného silymarinu je možno doplnit silydianin přidáním silymarinu, získaného izolací ze silydianinové odrůdy ostropestřece mariánského.

Postup podle vynálezu blíže vysvětlí následující příklad.

I

Příklad provedeni

1,0 kg mleté drogy ostropestřece mariánského Csilybinové odrůdy? se extrahuje pětinásobnou macerací právě potřebným množstvím acetonu, který obsahuje 1O obj. % vody. Získá se .3,1 1 extraktu, který se zahustí na objem 900 ml. Získaný roztok se rafinuje trojnásobnou extrakcí 100 ml petroletheru a rafinát se dále zahustí na objem 600 ml, načež se přidá ještě 600 ml vody. Vyloučený produkt se oddělí od vodné fáze, naředi se 200 ml methanolu a roztok se při husti na 100 ml. Vyloučený surový silybin se po 5 hodinách krystalizace při teplotě O^C oddělí filtrací. Získá se 16,2 g surového silybinu, který se rekrystaluje ze 160 ml ethanolu. Tím se získá 9,5 g čistého silybinu Cobsah silybinu

97,2% ve vysušené látce; obsah vody 2,1%; obsah ethanolu 0,5%b.

Matečné louhy po izolaci surového silybinu se naředí 100 ml methanolu a 200 ml methylenchloridu a k získanému roztoku se přidá 150 ml vody. Po 5 minutách mícháni se fáze oddéli a vodná fáze se extrahuje ještě 5—krát 50 ml methyienchloridu. Spojené methylen— chloridové extrakty se zahusti na odparek, který se pak rozpustí v ethanolových matečných loužich po rekrystalizaci surového silybinu a získaný ethanolový roztok se naleje do 500 ml 1 %-ního vodného roztoku chloridu sodného. Vyloučená sraženina se usuší. Takto se získá 21,2 g silymarinu Cobsah silybinu 25,1%, obsah izosilybinu 15,2%, obsah silychri stínu 19,5%3.

Průmyslová využitelnost

Vynález je využitelný ve farmaceutickém průmyslu při výrobě substancí silybin a silymarin. Tyto substance mají široké uplatnění jako hepatoprotektiva a léčiva poruch organismu souvisejících s indukcí nebo supresí řady enzymů.

Claims (1)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   Způsob sfB-taiž a orné izolace krystalického silybinu a silymarinu ze silybinové odrůdy ostropestřece mariánského CSilybum marianum Saertn) vyznačený tim, že se pomletá droga extrahuje acetonem obsahujícím 5 až 15 obj. % vody, získaný extrakt se zahustí na jednu polovinu až jednu pětinu původního objemu, zahuštěný extrakt se rafinuje petroletherem, načež se v rafinovaném extraktu sníží koncentrace acetonu odpařením a/nebo přídavkem vody, čímž dojde k vyloučení silymarinového koncentrátu, který se oddělí od vodné fáze a naředi se methanolem a ze získaného roztoku vykrystaluje surový silybin, který se rekrystaluje z ethanolu na čistý silybin a matečné louhy z obou krystalizaci se zpracují na silymarin o sobě známým způsobem s tím, že methanolové matečné louhy po izolaci surového silybinu se rozdělí na dvě frakce roztřepáním v systému methylenchlorid-methanol-voda, přičemž ke zpracování na silymarin se použije pouze methylenchloridová frakce obsahující zejména silybin a izosilybin.