Patents
Search within
Search within the title, abstract, claims, or full patent document: You can restrict your search to a specific field using field names.
Use TI= to search in the title, AB= for the abstract, CL= for the claims, or TAC= for all three. For example, TI=(safety belt).
Search by Cooperative Patent Classifications (CPCs): These are commonly used to represent ideas in place of keywords, and can also be entered in a search term box. If you're searching forseat belts, you could also search for B60R22/00 to retrieve documents that mention safety belts or body harnesses. CPC=B60R22 will match documents with exactly this CPC, CPC=B60R22/low matches documents with this CPC or a child classification of this CPC.
Learn More
Title
Abstract
Claims
Full Document
Find patents
Keywords and boolean syntax (USPTO or EPO format): seat belt searches these two words, or their plurals and close synonyms. "seat belt" searches this exact phrase, in order. -seat -belt searches for documents not containing either word.
For searches using boolean logic, the default operator is AND with left associativity. Note: this means safety OR seat belt is searched as (safety OR seat) AND belt. Each word automatically includes plurals and close synonyms. Adjacent words that are implicitly ANDed together, such as (safety belt), are treated as a phrase when generating synonyms.
Learn More
Search by
Chemistry searches match terms (trade names, IUPAC names, etc. extracted from the entire document, and processed from .MOL files.)
Substructure (use SSS=) and similarity (use ~) searches are limited to one per search at the top-level AND condition. Exact searches can be used multiple times throughout the search query.
Searching by SMILES or InChi key requires no special syntax. To search by SMARTS, use SMARTS=.
To search for multiple molecules, select "Batch" in the "Type" menu. Enter multiple molecules separated by whitespace or by comma.
Learn More
Patent numbers
Search specific patents by importing a CSV or list of patent publication or application numbers.
Príprava polysacharidové fólie s imunomodulacními úcinky, obsahující beta - (1-3), (1-6)-D-glukan
CZ303500B6
Czechia
- Other languages
English - Inventor
Novák@Miroslav Copíková@Jana Blahovec@Jirí
Description
translated from
Technickým řešením je způsob přípravy polysacharidové fólie, obsahující nerozpustný (partikulární) β—(1 —>3), (l->6)-D-glukan, získaný z buněčných stěn makromycet a mikromycet, s výhodou ze stěn Saccharomyces cerevisiae, která může být použita jako hojivý a krycí prostředek při io ošetřování ran, zanícených tkání a popálenin.
Dosavadní stav techniky
Je známo, že určité polysacharidy, izolované z různých přírodních zdrojů, především vyšších i nižších hub, modulují nespecifické mechanismy imunitního systému u živočichů, včetně člověka. Z ťarmakologického hlediska lze tyto látky zařadit do skupiny modífíkátorů biologické odpovědi (biological response modifíers, BRM). Mezi nejúěinnější modifikátory biologické odpovědi s pozitivním, immunostirnulačním účinkem náležejí polymery glukózy - větvené β—(l—>3), (1 ->6)-D—glukany, obvykle jednodušeji označované jako β-glukany. Immunomodulační účinek β-glukanů spočívá především v aktivaci profesionálních fagocytů - granulocytů, monocytů, dendritických buněk a především makrofágů (DiLuzio N. R., Trends Pharmacol Sci4, 344 (1983); Chihara G., Maeda Y. Y., Hamuro J., Int. J. Tissue Reac. IV, 207 (1982); Bohn J. A., BeMiller
J.N., Carbohydr. Polym. 28, 3 (1995); Novák M„ Chem. listy 101, 872 (2007); Novák M.,
Větvička V.,Immunotoxicol. 5, 47 (2008)).
Takovéto účinky vykazují β-glukany nejen při vnitřním, ale i při zevním použití. Byly popsány pozitivní účinky β-glukanu na hojení popálenin, rozsáhlých poranění, otevřených zlomenin a bércových vředů (Leibovich S. J. and Danon D., J. Reticuloendothel. Soc. 27, 1 (1978);
Wolk M., Danon D„ Med. Biol. 63, 73 (1985); Sang Bong Lee, etal Biomaterials 24, 2503 (2003). Je znám rovněž příznivý účinek β-glukanu na biosyntézu kolagenu pří hojení ran různého původu (Portera C. A., etal, Amer. Surgeon 63, 125 (1997); Hída Shunsuke etal Microbiol Immunol 50, 453 (2006)).
V odborné i patentové literatuře jsou popsány fólie sloužící jako kryty ran. připravené z různých β-glukanů, Často i v kombinaci s dalšími látkami (želatinou, kolagenem, polyvinylalkoholem ad., např. Delatte S. J., etal, J. Pediatr. Surg. 36, 1 13 (2001); Sang Bong Lee etal Biomaterials 24, 2503 (2003); Mei-Hua Huang a Ming-Chien Yang, Internát. .1. Pharmaceut. 346, 38 (2008); Williams J. M., Lawin T. P., U.S. patent 5676967 a řada dalších).
io
Publikované práce a patenty vycházejí nejčastěji z cereálních β-glukanů, případně z vodorozpustných fungálních β-glukanů. Cereální β-glukany, izolované nejčastěji z ovsa nebo ječmene, a fungální β-glukany, izolované z mikromycet (např. ze Saccharomyces cerevisiae) nebo vyšších hub (např. z Lentinula edodes, Pleurotus ostreatus ad.), se liší svojí primární strukturou: biolo45 gicky účinné cereální β-glukany jsou lineární β—(1—>3), (1 >4)-D-glukany, zatímco fungální jsou větvené β—(1—>3), (1 ->6)-D-glukany. Vodorozpustnost fungálních β-glukanů je nepřímo úměrná velikosti molekuly. Na základě četných prací (např. Bohn J. A., BeMiller J. N., Carbohvdr. Polym, 28, 3 (1995); Bell S., etal, Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 39, 189 (1999); Volman J. J,, Ramakers J. D„ Plat J„ Physiol Behav. 94 276 (2008)) je známo, že vyšší biologickou účinnost mají (1) β-glukany s větší molekulou (a tedy nerozpustné ve vodě), a (2) díky svojí struktuře fungální β-glukany ve srovnání s cereálními je β-glukan. izolovaný z buněčných stěn kvasinek
Saccharomyces cerevisiae.
Kromě zdroje β-glukanu má na jeho biologickou účinnost i způsob přípravy, který ovlivňuje jeho fyzikálně-chemické i biologické vlastnosti. Z řady prací (viz např. revíew Bohn J. A., BeMiller J. N., Carbohydr. Polym. 28, 3 (1995)) je známo, že na biologický účinek β-glukanu má podstatnou měrou vliv jeho konformace, tedy uspořádání polymerní molekuly do jednoduchého nebo trojitého helixu, případně do amorfní formy. Maximální účinek vykazuje konformace trojitého helixu; tato forma β-glukanu má vysoký stupeň krystalinity. Na přítomnost té či oné konformace v preparátu β-glukanu má podstatný vliv způsob přípravy β-glukanu, zejména finální fáze přípravy, sušení (lísková nebo sprejová sušárna, lyofilizace apod.); to je obecný závěr, platný i pro řadu dalších biologicky aktivních polysacharidů. Je popsáno, že sušení při teplotách nad 90 °C io působí pokles biologického účinku, a kromě toho snižuje elasticitu a viskozitu oproti nativnímu polysacharidů (Ginzberg A., Korin E., A rad S., Biotechnol. Bioeng. 99, 411 (2007)). Zřejmou příčinou je doložená skutečnost, že vysoká teplota při sušení (90 až 140 °C) vede k nevratným změnám trojhelixové konformace na konformací jednovláknového ohebného řetězce (Wang X.,
Zhang Y., Zhang L., Ding Y., J. Phys. Chem. B 113, 9915 (2009)).
V publikovaných odborných pracích a patentech, týkajících se přípravy fólií s β-glukanem a používaných jako krytu ran, se uvádí, že β-glukan byl zakoupen od určité firmy, zabývající se výrobou β-glukanu ve velkém. Je zřejmé, že se jednalo o sušený β-glukan, neboť výrobci nedistribuují jinou formu. Pro použití k přípravě fólie musí být tento produkt znovu rehydratován, ovšem rehydratace jednou usušeného β-glukanu ale nevede k obnovení původní krystalinity, ani stupně homogenity molekulární konformace, které vykazoval původní, nativní β-glukan (Kobayashí K., Kimura S., Togawa E., Wada M., Kuga S., Carbohydr. Polym. 80, 491 (2010)). Z toho vyplývá, že používání sušeného komerčního β-glukanu pro přípravu fólií vede ke snížení jeho biologické účinnosti a léčivé kvality z něho připravovaných krytů ran. Navíc se v důsledku změn makroskopické struktury sušeného preparátu v důsledku nedostatečné homogenity výchozí suspenze nebo naopak agregace částic se mění k horšímu i rnakrostruktura fólií, kvalita jejich povrchu a následně i jejich mechanická pevnost.
Podstata vynálezu
Podstatou předkládané přihlášky vynálezu je způsob přípravy zevní aplikační formy β-glukanu ve formě fólií, který minimalizuje až eliminuje nedostatky dosud užívaných postupů přípravy takovýchto fólií tím, že fólie jsou připraveny z nativního, předem nesušeného nerozpustného (partikulárního) β—<1—>3), (l-»6)-D-gIukanu, získaného z buněčných stěn makromycet nebo mikromycet. Vhodným a výhodným výchozím materiálem jsou buněčné stěny kulturních kvasinek Saccharomyces cerevisiae. β-Glukan, připravený ze stěn Saccharomyces cerevisiae má vysokou biologickou aktivitu a není třeba se obávat jeho kontaminace mykotoxiny. K přípravě nativního β-glukanu ze stěn 5. cerevisiae lze použít různé, v podstatě ekvivalentní metody, které
4o jsou vesměs založeny na alkalické digesci komerčního pekařského droždí, např. popsané v pracích Bell D. J. a Northcote D. H„ J. Chem. Soc. 1944-7 (1950), Baeon J. S. D., Farmer V. C\, Jones D.. Taylor I. F., Biochem. .1. 114, 557-567 (1969) nebo Misaki A., Johnson J.. Kirkwood S., Scaletti J. V., Smith F.. Carbohydr. Pes. 6 150-164 (1968).
Fólie se připraví tím, že se suspenze nativního, předem nesušeného β-(1 ->3), (1 —»6)-D-glukanu, získaného z různých mikromycet nebo makromycet, přímo bez předcházející dehydratace (sprejové sušení, lyofilizace apod., smísí s přídavkem látek, zvyšujících pružnost, ohebnost, pevnost a prodyšnost fólií, vybraných ze skupiny látek tvořené glyccroiem. sorbitolem, propylenglykolem. polyakrylátovými gely. tragantem, arabskou gumou, pektiny, sodnou solí karboxymethyl5o celulózy, estery- sorbitanu s vyššími mastnými kyselinami atd. v množství I až 70% hmotn..
vztaženo na hmotnost β-glukanu, směs se nalije na ohraničeny inertní povrch, přičemž množství glukanu v suspenzi je 1 až 20 mg.cm inertního povrchu a posléze se suspenze vvsuší při teplotě až 60 °C, například v horkovzdušné sušárně.
β-Glukan ve fólii může být případně dále smíšen kromě zmíněných látek s léčivy, kterými mohou být lokální antibiotika (např. erytromycin, clindamycin, neomycin, bacitracin aj.), chemoterapeutika (především sulfonamidy), lokální antimykotíka (např. clotrimazol, nystatin, pimaricin, terbinafin) a další účinné látky, volené podle účelu použití fólií, v takovém množství, aby se docí5 lilo jejich účinné lokální koncentrace podle příslušných doporučení Státního ústavu pro kontrolu léčiv.
Přehled obrázků na výkrese io
Obr. 1 snímek z elektronového mikroskopu zobrazuje fólii připravenou ze směsi 50 % hmotn. rehydratovaného, β-glukanu a 50 % hmotn. želatiny.
Obr. 2 snímek z elektronového mikroskopu zobrazuje fólii připravenou ze směsi 50% hmotn.
nativního β-gl ukanu a 50 % hmotn. želatiny.
Obr. 3 snímek z konfokálního mikroskopu zobrazuje fólii připravenou ze směsi 50 % hmotn. rehydratovaného, β-glukanu a 50 % hmotn. želatiny.
2o Obr. 4 snímek z konfokálního mikroskopu zobrazuje fólii připravenou ze směsi 50 % hmotn. nativního β -gl ukanu a 50 % hmotn. želatiny.
Příklady provedení
Příklad 1
Do suspenze obsahující 100 g nativního, předem nesušeného β-(1->3), (l->6)-D-glukanu, při30 praveného z intaktních buněk Saccharomyces cerevisiae alkalickou d i gescí, nejprve za normální teploty a poté za desetiminutového varu. neutralizací a několikanásobným promytím vodou, se přidá 50 g chemicky čistého glycerolu a dokonale se promíchá. Poté se směs vylije na vhodnou podložku s plochou takovou, aby konečná plošná hustota fólie byla 20 mg.cm“2. Vše se umístí do sušárny a usuší při teplotě nepřevyšující 50 °C. Hotová fólie se opatrně sejme a rozdělí na díly potřebné velikosti.
Příklad 2 ao Obdobným způsobem jako v příkladu 1, byly získány fólie připravené ze směsi 50% hmotn, nativního β-glukanu a 50 % hmotn. želatiny a fólie připravené ze směsi 50 % hmotn. rehydratovaného předem usušeného β-glukanu a 50 % hmotn. želatiny. Získané fólie z nativního β-glukanu jsou homogenní ajejich povrch je relativné vysoce hladký. To dokládají snímky fólií připravených ze směsi 50 % hmotn. nativního β-glukanu a 50 % hmotn, želatiny v elektronovém (obr. 2) a konfokálním mikroskopu (obr. 4). Snímky z elektronového mikroskopu (obr. 1) a konfokálního mikroskopu (obr. 3) zobrazují fólie připravené ze směsi 50% hmotn. rehydratovaného, β-glukanu a 50 % hmotn. želatiny (rozměry výřezů resp. zvětšení jsou uvedeny na snímcích). Ze snímkuje patrná podstatně hrubší a nehomogenní struktura fólií, připravených z rehydratovaného, sušeného β-glukanu oproti fóliím připraveným z nativního glukanu.
Příklad 3 % g nativního, předem nesušeného β (1 ->3), (I- >6)-D-glukanu, připraveného podle Příkla5 dul, se smísí s 20 g chemicky čistého glycerolu a 5 g polyoxyethylen—(20) sorbitanmonolaurátu, promísí a zpracuje stejně jako v Příkladu 1 s tím, že plošná hustota fólie se upraví na 5 mg.cm 2.
Příklad 4 o
K suspenzi, připravené podle Příkladu 1 se přidá 1 g 4-aminobenzensulfonamidu a po promíchání a rozpuštěné se postupuje jako v Příkladu 1.
is Příklad 5
K suspenzi, připravené podle Příkladu 1 se přidá 1 % hmotn. klindamycinu (jako Clindamycini phosphas) a po promíchání a rozpuštění se postupuje jako v Příkladu 1.
Příklad 6
Fólie, připravená způsobem podle Příkladu 1, 3, 4 nebo 5 se vloží na navlhčenou hydrofilní gázu a společně se usuší při teplotě do 50 °C tak, aby vznikl dvojvrstvý obvazový materiál, který se poté upraví na vhodnou velikost, neprodyšně uzavře ve vhodném obalu a vysterílizuje ozářením.
Průmyslová využitelnost
3() Fólie, díky tmunomodulačním účinkům daným obsahem β—(1 —>3), (1 —>6)-D-glukanu a případně hojivým účinkům, daným dalšími obsaženými léčivými látkami, může sloužit jako zevní hojivý a krycí prostředek při ošetřování ran, zanícených tkání, popálenin a dalších poškození. V modifikované podobě může být využita rovněž v kosmetice, například jako pleťová maska.
Claims (5)
Hide Dependent
translated from
Claims (5)
Hide Dependent
translated from
1. Příprava polysacharidové fólie s imunomodulačními účinky, vyznačující se tím, že se suspenze obsahující nativní, předem nesušený β—(I —>3), (1 —>6)-D-glukan, smísí s přídavkem látek, zvyšujících pružnost, ohebnost, pevnost a prodyšnost fólií vybraných ze skupiny tvořené glycerolem, sorbitolem. propylenglykolem, polyakrylátovými gely, tragantem, arabskou gu45 mou, želatinou, kolagenem, pektiny. alkalickými solemi karboxymethylcelulózy, estery sorbitanu s vyššími mastnými kyselinami, v množství 1 až 70 % hmotn. (vztaženo na hmotnost β-glukanu), směs se nalije na ohraničený inertní povrch, přičemž množství glukanu v suspenzi je 1 až 20 mg.cm ' inertního povrchu a posléze se suspenze vysuší při teplotě 10 až 110 °C.
50
2. Příprava podle nároku I. vyznačující se tím, že nativní, předem nesušený β(l —>3), (1—>6)-D-glukan se získá z buněčných stěn kvasinek Saccharomyces cerevisiae.
3. Příprava podle nároků 1 a 2, vyznačující se tím. že se suspenze vhodným způsobem vysuší, například v horkovzdušné sušárně s kontrolovanou teplotou.
-4 QZ 303500 B6
4. Příprava podle nároků l a 2, vyznačující se tím, že se suspenze nativního βglukanu smísí s dalšími lokálně působícími farmakologicky účinnými látkami, kterými mohou například být lokální antibiotika, chemoterapeutika, lokální antimykotika a další účinné látky,
5 volené podle účelu použití fólií, v takovém množství, aby se docílilo jejich účinné lokální koncentrace.
5. Příprava podle nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že se připravená fólie kombinuje s dalšími obvazovými materiály vybranými ze skupiny tvořené tkanými, netkanými obvazy, io kompresy nebo tampony.