CZ302913B6 - Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C - Google Patents
Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C Download PDFInfo
- Publication number
- CZ302913B6 CZ302913B6 CZ20100394A CZ2010394A CZ302913B6 CZ 302913 B6 CZ302913 B6 CZ 302913B6 CZ 20100394 A CZ20100394 A CZ 20100394A CZ 2010394 A CZ2010394 A CZ 2010394A CZ 302913 B6 CZ302913 B6 CZ 302913B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- oocytes
- metaphase
- glass
- vitro
- protein kinase
- Prior art date
Links
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 title claims abstract description 8
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 title claims abstract description 8
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 23
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 claims description 20
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 18
- 230000035800 maturation Effects 0.000 claims description 13
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 11
- PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N Cocarcinogen A1 Natural products CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(CO)=CC2C2C1(OC(C)=O)C2(C)C PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 claims description 6
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 claims description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 4
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims 5
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 claims 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000005357 flat glass Substances 0.000 claims 2
- 238000006124 Pilkington process Methods 0.000 claims 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 claims 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 claims 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 abstract 1
- PWTCCMJTPHCGMS-YRBAHSOBSA-N 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](CO)OC(C)=O PWTCCMJTPHCGMS-YRBAHSOBSA-N 0.000 description 8
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- NSXLMTYRMFVYNT-IUJDHQGTSA-N 1-stearoyl-2-arachidonoyl-sn-glycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](CO)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC NSXLMTYRMFVYNT-IUJDHQGTSA-N 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000001776 parthenogenetic effect Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 108010025267 calcium-dependent protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 108010046046 calcium-independent protein kinase C Proteins 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Rešení se týká zpusobu zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C, což je charakterizováno tím, že se na oocyty, jež dosud neukoncily svou rustovou fázi, behem zrání in vitro pusobí v urcité fázi kultivace látkami, které specificky aktivují protein kinázy C. Tato kultivace má velké využití pri reprodukcních biotechnologiích hospodárských zvírat.
Description
Oblast techniky
Vynález se týká zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytů v podmínkách kultivace in vitro s využitím látek aktivujících protein kinázy C. Tento způsob kultivace má velký význam zejména při asistované reprodukci hospodářských zvířat.
in
Dosavadní stav techniky
V současné době se pro asistovanou reprodukci savců (klonování, in vitro oplození, transgenoze) včetně hospodářsky významných druhů využívají oocyty, což jsou samičí pohlavní buňky, které t5 ukončily v těle samice růstovou fázi. Těchto oocytů je v daný okamžik od jednoho zvířete dostupný jen omezený počet, a to limituje využití metod asistované reprodukce. Kromě oocytů s ukončenou růstovou fází se nachází ve vaječnících samice i mnohonásobně vyšší počet oocytů, které ještě růstovou fázi neukončily. Tyto oocyty ale mají sníženou vývojovou schopnost a pro metody asistované reprodukce je nelze použít. To významně snižuje možnosti využití Šlechtitels2o kého potenciálu samic s vysokou plamennou hodnotou a omezuje možnosti asistované reprodukce, protože se často nedaří získat dostatek vajíček ve fázi ukončeného růstu. Pokud by se podařilo zvýšit vývojové schopnosti oocytů s neukončenou růstovou fází, využití šlechtitelského potenciálu samic by se zvýšilo a zefektivnily by se i postupy asistované reprodukce.
Podstata vynálezu
Uvedené problémy odstraňuje způsob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytů aktivací protein kináz C, podle vynálezu, jehož podstata spočívá vtom, že se na oocyty, jež dosud neu30 končily svou růstovou fázi, během zrání in vitro působí v určité fázi kultivace látkami, které specificky aktivují protein kinázy C.
Způsob podle vynálezu je dále charakterizován tím, že se oocyty s neukončenou růstovou fázi kultivují in vitro bez aktivátorů protein kináz C po dobu, která je u daného živočišného druhu běžně nutná pro dosažení stádia metafáze I, následně jsou oocyty kultivovány v médiu se specifickým aktivátorem protein kináz C po dobu, která je běžně u daného druhu nutná pro postup zrání z metafáze I do metafáze H.
Způsob podle vynálezu je také charakterizován tím, že se na oocyty s neukončeným růstem během kultivace in vitro v určité fázi působí látkami, jež jsou obecně známy jako aktivátory protein kináz C, zejména forbol--12- myristát-13-acetátem v koncentracích od 10 do 100 nM, lstearoyl- 2 arachidonoy 1-sn glycerolem v koncentracích od 20 do 200 mikroM, popřípadě kombinací l-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerolu (OLE) s dipalmitoyl-L-alfafosfatidylinositol-3,4,5-trifosfát heptaammoniovou solí (DIPALM) v koncentracích 10 mikroM OLE a 100 nM DIPALM, přičemž působení aktivátorem protein kináz C trvá po dobu, která odpovídá době nutné v podmínkách kultivace in vitro pro postup zrání oocytů ze stádia metafáze I do stádia metafáze II.
Způsob podle vynálezu se výhodně provádí tak, že se na oocyty s neukončeným růstem a neúplně vyvinutou vývojovou schopností během jejich zrání in vitro působí látkami obecně známými jako aktivátory protein kinázy C, zejména prostřednictvím forbol-12-myristát-13- acetátu (PMA), 1stearoyl-2-arachidonoyl-sn-glycerolem (STEAR) nebo kombinovaným ošetřením aktivátorů, které aktivují buď jen kalcium-dependentní, nebo jen kalcium-independentní protein kinázy C. Tak lze využít kombinované ošetření oocytů specifickým aktivátorem kalcium-dependentních protein kináz C 1 -oleoy 1- 2- acety 1-sn-glycerolem (OLE) spolu se specifickým aktivátorem kal-1 CZ 302913 B6 cium-índependentních protein kináz C dipalmitoyl-L-alfa-phosphatidylinositol-3,4,5”trifosfát heptaammoniovou solí (DlPALM).
Způsob zvýšení vývojové schopnosti oocytů podle vynálezu se konkrétně provádí tak, že se nez5 ralé savčí oocyty s neukončeným růstem a neúplně vyvinutou vývojovou schopností in vitro nejprve kultivují v médiu bez aktivátorů protein kináz C. Doba této kultivace odpovídá času, za jaký nezralé, dorostlé oocyty s plnou vývojovou schopností dosáhnou stádia metafáze I (24 hodin u prasete, 12 hodin u skotu, ovce). Následně jsou oocyty vystaveny na 24 hodin účinku specifického aktivátoru protein kináz C, např. forbol—12-myristát-13—acetát se používá v koncentracích io od 10 do 100 nM, l -stearoyl--2-arachÍdonoyl-sn -glycerol se používá v koncentracích od 20 do 200 mikroM, l-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerolem (OLE) spolu s dipalmitoyl-L-alphaphosphatidylinositol~3,4,5-trifosfát heptaammoniovou solí se používají v koncentracích 10 mikroM OLE a 100 nM DIPALM. S aktivátory protein kinázy C jsou oocyty kultivovány po dobu, za jakou dorostlé oocyty s plnou vývojovou schopností dospějí ze stádia metafáze I do stádia metafáze II a dokončí tak zrání (např. prase 20 hodin, skot a ovce 10 hodin).
Způsobem podle vynálezu jsou v oocytech specificky aktivovány protein kinázy C, které následně fosfory 1 ují své intracelulámí substráty. To se ukazuje jako velmi výhodné, protože experimenty původců prokázaly, že aktivace protein kinázy C po počáteční kultivaci oocytů má příz2o nivy efekt na další průběh zrání oocytů. Pokud není použit způsob podle vynálezu, zastaví většina kultivovaných oocytů s neukončeným růstem a neúplnou vývojovou schopností zrání ve stádiu metafáze I a jsou pro většinu biotechnologií nepoužitelné. Způsobem podle vynálezu je dosaženo úplného zrání oocytů do metafáze II u 80 % oocytů. Tyto oocyty lze použít pro další reprodukční biotechnologie, protože jsou s to se vyvíjet v embrya.
Výsledkem způsobu podle vynálezu je podstatné zvýšení podílu oocytů, jež dokončí zrání a jsou využitelné pro další reprodukční biotechnologie. Ve srovnání s tradičními postupy kultivace je nárůst podílu dozrálých oocytů zhruba trojnásobný, což má velký hospodářský význam. Způsob kultivace oocytů in vitro s cílenou aktivací protein kinázy ve specifické fázi podle vynáiezu lze využít zejména při reprodukčních biotechnologiích hospodářských zvířat (např. klonování, ICSI).
Následující příklady provedení způsob podle vynálezu pouze dokládají, aniž by ho jakkoliv omezovaly.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1
Při klasické kultivaci prasečích oocytů s neukončeným růstem dochází v podmínkách in vitro k dokončení zrání do stádia metafáze II u 20 % oocytů. Způsobem podle vynálezu jsou prasečí oocyty s neukončenou růstovou fází kultivovány nejprve po 24 hodin v kultivačním médiu bez přídavku aktivátorů protein kináz C, následně pak jsou kultivovány 20 hodin s přídavkem
100 nM forbol-12-myristát-l 3-acetátu. Při tomto postupu stoupá významně podíl dozrálých oocytů, které dosáhnou stádia metafáze II (kolem 80 %). Takto získané oocyty lze podrobit standardní partenogenetické aktivaci a navodit u nich vývoj do stádia blastocyty. Takto získané savčí partenogenetické zárodky ve vývojovém stádiu blastocyty lze využít například pro tvorbu embryonálních kmenových buněk.
Příklad 2
Při tradiční kultivaci oocytů skotu s neukončeným růstem dochází v podmínkách in vitro k dokončení zrání do stádia metafáze II u 15 % oocytů. Způsobem podle vynálezu jsou oocyty
-2CZ 302913 B6 skotu s neukončenou růstovou fází kultivovány nejprve po 12 hodin v kultivačním médiu bez přídavku aktivátorů protein kináz C, následně jsou kultivovány 10 hodin v kultivačním médiu s 100 mikroM l-stearoyl-2-arachidonoyI-sn-glycerolu. Při tomto postupu stoupá významně podíl dozrálých oocytů, které dosáhnou stádia metafáze II (76 %). Takto získané oocyty lze podrobit standardnímu oplození in vitro. Úspěšně oplozené oocyty se dále vyvíjí v embrya vhodná pro přenos náhradní matce.
Příklad 3
Při klasické kultivaci prasečích oocytů s neukončeným růstem dochází v podmínkách in vitro k dokončení zrání do stádia metafáze II u 20 % oocytů. Způsobem podle vynálezu jsou prasečí oocyty s neukončenou růstovou fází kultivovány nejprve po 24 hodin v kultivačním médiu bez přídavku aktivátorů protein kináz C a následně jsou kultivovány 20 hodin v kultivačním médiu s přídavkem 10 nM l-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerolu spolu se 100 nM dipalmitovl-L alfaphosphatidylinositol-3,4,5-trifosfát heptaammoniové soli. Při tomto postupu stoupá významně podíl dozrálých oocytů, které dosáhnou stádia metafáze II (80 %). Takto získané oocyty lze použít pro produkci cytoplastů pro klonování přenosem jader somatických buněk.
Průmyslová využitelnost
Řešení se týká zdokonaleného kultivačního postupu oocytů in vitro, jenž využívá specifické aktivace protein kináz C v určité fázi kultivace, což má velký význam při reprodukčních biotechnologiích hospodářských zvířat.
Claims (5)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytů aktivací protein kináz C, vyznačující se tím, že se na oocyty, jež dosud neukončily svou růstovou fázi, během zrání in vitro působí v průběhu kultivace látkami, které specificky aktivují protein kinázy C.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se oocyty sneukončenou růstovou fází kultivují in vitro bez aktivátorů protein kináz C po dobu, kteráje u daného živočišného druhu nutná pro dosažení stádia metafáze I, následně jsou oocyty kultivovány v médiu se specifickým aktivátorem protein kináz C po dobu, která je běžně u daného druhu nutná pro postup zrání z metafáze I do metafáze II.
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že na oocyty s neukončeným růstem se během kultivace in vitro působí látkami, ze skupiny aktivátorů protein kináz C, zejména forbol-12-myristát-13-acetátem v koncentracích od 10 do 100 nM, l-stearoyl-2-arachidonoyl-snglycerolem v koncentracích od 20 do 200 mikroM, popřípadě kombinací l-oleoyl-2-acetyl-snglycerolu (OLE) s dipalmitoyl-L-alfa-fosfatidylinositol~3,
- 4,5-trifosfát heptaammoniovou solí (DIPALM) v koncentracích 10 mikroM OLE a 100 nM DIPALM, přičemž působení aktivátorem protein kináz C trvá po dobu, která odpovídá době nutné v podmínkách kultivace in vitro pro postup zrání oocytů ze stádia metafáze I do stádia metafáze II.Konec dokumentu-3 CZ 302914 B6 přičemž sklo má propustnost světla (LTA) větší než 35 % a až 60 %, celkovou propustnost slunečního ultrafialového záření (TSUV) 35% nebo nižší, celkovou propustnost slunečního infračerveného záření (TSIR) 25 % nebo nižší, celkovou propustnost sluneční energie (TSET)
- 5 40 % nebo nižší a barva skla je charakterizována náhradní vlnovou délkou v rozmezí od 480 do489 nanometrů a souřadnicovou čistotou nejméně 8 %, přičemž všechny tyto hodnoty jsou určené při tloušťce přibližně 4,06 mm.19. Sklo podle nároku 18, vyznačené tím, že barva skla je charakterizována náhradní io vlnovou délkou v rozmezí od 482 do 487 nanometrů a souřadnicovou čistotou 10 až 30 %, přičemž všechny tyto hodnoty jsou určené při tloušťce přibližně 4,06 mm.20. Sklo podle nároku 19, vyznačené tím, že koncentrace celkového železa je od 1,0 do 1,4 hmotn. %, koncentrace FeO je od 0,20 až 0,50 hmotn. %, koncentrace CoO je 100 až15 150 ppm, koncentrace selenu je 0 až 8 ppm a koncentrace titanu TiO? je od 0,02 do0,40 hmotn. %.21. Tabu lov itý dílec z plochého skla, vytvořeného postupem float ze skla podle kteréhokoli z nároků 1 až 20.22. Okno automobilového vozidla, vyrobené z tabulovitého dílce z plochého skla podle nároku
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100394A CZ302913B6 (cs) | 2010-05-21 | 2010-05-21 | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100394A CZ302913B6 (cs) | 2010-05-21 | 2010-05-21 | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2010394A3 CZ2010394A3 (cs) | 2011-11-30 |
| CZ302913B6 true CZ302913B6 (cs) | 2012-01-18 |
Family
ID=45002308
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20100394A CZ302913B6 (cs) | 2010-05-21 | 2010-05-21 | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ302913B6 (cs) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ299219B6 (cs) * | 2006-12-08 | 2008-05-21 | Výzkumný ústav živocišné výroby, v.v.i. | Zpusob prodloužení životnosti savcích oocytu v podmínkách in vitro |
-
2010
- 2010-05-21 CZ CZ20100394A patent/CZ302913B6/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ299219B6 (cs) * | 2006-12-08 | 2008-05-21 | Výzkumný ústav živocišné výroby, v.v.i. | Zpusob prodloužení životnosti savcích oocytu v podmínkách in vitro |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Chen Y. et al.: "Effect of protein kinase C in oocyte maturation, fertilization and preimplantation embryonic development", Sheng Wu Yi Xue Gong Cheng Xue Za Zhi.,Vol. 25(3):747-50, 2008 * |
| Downs S.M. et al.: "Protein kinase C and meiotic regulation in isolated mouse oocytes, Mol. Reprod. Dev., Vol. 58(1), 101-115, 2001 * |
| Quan H.M. et al.: "Effects of PKC activation on the meiotic maturation, fertilization and early embryonic development of mouse oocytes", Zygote 11(4):329-337, 2003 * |
| Viveiros M. M. et al.: "Protein kinase C activity regulates the onset of anaphase I in mouse oocytes", Biol Reprod. Vol. 71(5):1525-32, 2004 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2010394A3 (cs) | 2011-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2932580A1 (en) | Methods and compositions for generation of developmentally-incompetent eggs in recipients of nuclear genetic transfer | |
| RU2018122615A (ru) | Способы, среда и продукты для культивирования эмбрионов | |
| CN105283541A (zh) | 干细胞培养用培养基 | |
| CN103074294A (zh) | 一种可提高猪胚胎体外发育效率的猪胚胎培养液及其制备方法 | |
| CZ302913B6 (cs) | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu aktivací protein kináz C | |
| Azuma et al. | Developmental competence of interspecies cloned embryos produced using cells from large Japanese field mice (Apodemus speciosus) and oocytes from laboratory mice (Mus musculus domesticus) | |
| CN103103160B (zh) | 牛体外胚胎两段培养方法 | |
| CZ307948B6 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem C | |
| CZ307949B6 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem C | |
| CZ2017366A3 (cs) | Způsob elimace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných bisfenolem A nebo bisfenolem S | |
| CZ2018320A3 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem B | |
| CZ2014809A3 (cs) | Způsob kultivace in vitro rostoucích oocytů zvířat | |
| CZ307943B6 (cs) | Způsob eliminace defektů zrání savčích oocytů vyvolaných glyfosátem A | |
| Zheng | Cell types for cultured meat production: current challenges and recent advances | |
| CZ302232B6 (cs) | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu inhibicí kalcineurinu | |
| CZ301317B6 (cs) | Zpusob zvýšení vývojové schopnosti rostoucích oocytu inhibicí histon deacetylázy | |
| Qin | The Pivotal Scientific Developmental History of Nuclear Transfer | |
| Phuong et al. | Improving the efficiency of bovine somatic cell nuclear transfer protocol by establishment of culture medium changing system | |
| CZ2014296A3 (cs) | Kultivační medium pro zvýšení kvality savčích oocytů dozrálých v podmínkách in vitro | |
| Taşkin et al. | Comparison of parthenogenetic oocyte activation in different mouse strains on in vitro development rate and quality. | |
| CZ299271B6 (cs) | Použití inhibitoru histon deacetylázy pro prípravu kultivacního média na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro | |
| CZ27174U1 (cs) | Kultivační medium pro zvýšení kvality savčích oocytů dozrálých v podmínkách in vitro | |
| CZ302580B6 (cs) | Kultivacní medium na prodloužení životnosti savcích oocytu in vitro a zpusob tohoto prodloužení | |
| Binsila et al. | Current Biotechnological Advances and Challenges in Culture and Transplantation of Spermatogonial Stem Cells in Animals. | |
| CN116616218A (zh) | 一种长棘海星底栖稚体的人工培育方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20150521 |