CZ286236B6 - Pentacyklické sloučeniny, jejich meziprodukty, způsob jejich výroby a kompozice s jejich obsahem - Google Patents

Pentacyklické sloučeniny, jejich meziprodukty, způsob jejich výroby a kompozice s jejich obsahem Download PDF

Info

Publication number
CZ286236B6
CZ286236B6 CZ1998678A CZ67898A CZ286236B6 CZ 286236 B6 CZ286236 B6 CZ 286236B6 CZ 1998678 A CZ1998678 A CZ 1998678A CZ 67898 A CZ67898 A CZ 67898A CZ 286236 B6 CZ286236 B6 CZ 286236B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
formula
piperidinyl
phenyl
ethoxy
Prior art date
Application number
CZ1998678A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ67898A3 (cs
Inventor
Timothy Alan Grese
Original Assignee
Eli Lilly And Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly And Company filed Critical Eli Lilly And Company
Publication of CZ67898A3 publication Critical patent/CZ67898A3/cs
Publication of CZ286236B6 publication Critical patent/CZ286236B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/30—Oestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/32—Antioestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/20—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D211/22—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/04—Ortho- or peri-condensed ring systems
    • C07D221/18—Ring systems of four or more rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/78—Ring systems having three or more relevant rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C07F7/1872—Preparation; Treatments not provided for in C07F7/20
    • C07F7/1892—Preparation; Treatments not provided for in C07F7/20 by reactions not provided for in C07F7/1876 - C07F7/1888

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Catalysts (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Mechanical Pencils And Projecting And Retracting Systems Therefor, And Multi-System Writing Instruments (AREA)

Abstract

Pentacyklické deriváty obecného vzorce I nebo obecného vzorce II, ve kterém X je -O-, -S-, nebo -NR.sup.5.n.-; Y je -O-, -S-, -CH.sub.2.n.-, -CH.sub.2.n.CH.sub.2.n.-, -CH=CH-, nebo -NR.sup.5.n.-; B je -CH.sub.2.n.- nebo -CO-; R.sup.1.n., R.sup.2 .n.a R.sup.3.n. jsou každý nezávisle na sobě -H, -OH, -O(C.sub.1.n.-C.sub.4 .n.alkyl), -OCOC.sub.6.n.H.sub.5.n., -OCO(C.sub.1.n.-C.sub.6 .n.alkyl), -OSO.sub.2.n. (C.sub.4.n.-C.sub.6 .n.alkyl), -OSO.sub.2.n.CF.sub.3.n., Cl nebo F; n je 1 nebo 2; W je CH.sub.2.n. nebo C=O; R.sup.4.n. je 1-piperidinyl, 2-oxo-1-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl-1-pyrrolidinyl, dimethyl-1-pyrrolidinyl, 2-oxo-1-pyrrolidinyl, 4-morfolino, dimethylamino, diethylamino nebo 1-hexamethylenimino; R.sup.5 .n.je.sup. .n.C.sub.1.n.-C.sub.3 .n.alkyl, -COC.sub.6.n.H.sub.5.n., -CO(C.sub.1.n.-C.sub.6 .n.alkyl), -C(O)OC.sub.6.n.H.sub.5.n., -C(O)O(C.sub.1.n.-C.sub.6 .n.alkyl), -SO.sub.2.n. (C.sub.1.n.-C.sub.6 .n.alkyl), -SO.sub.2.n.C.sub.6.n.H.sub.5.n., nebo -SO.sub.2.n.CF.suŕ

Description

Vynález se týká pentacyklických derivátů, jejich meziproduktů, způsobu jejich přípravy, farmaceutické kompozice a jejich použití. Vynález se tedy týká oblasti farmaceutické a organické chemie a poskytuje nové pentacyklické deriváty, kterých se používá pro léčení různých lékařských indikací, asociovaných se syndromem post-menopauzy, fibroidních chorob dělohy, endometriózy a proliferace aortálních buněk hladkého svalstva. Předložený vynález se také týká meziproduktů a způsobu přípravy aktivních sloučenin a farmaceutických kompozicí.
Dosavadní stav techniky „Syndrom post-menopauzy“ je termín, používaný pro popsání různých patologických podmínek, které často postihují ženy, které vstoupily nebo završily fyziologickou metamorfózu, nazývanou menopauza. Ačkoliv používáním tohoto termínu je míněno množství patologií, tři hlavní jevy post-menopauzálního syndromu jsou zdrojem dlouhodobého léčení, a to:
osteoporóza, kardiovaskulární jevy, jako je hyperlipidemie, a rakovina vyvolaná estrogenem, zvláště rakovina prsu a rakovina dělohy.
Osteoporóza označuje skupinu nemocí, které povstávají z různých etiologií, ale které jsou charakterizovány čistou ztrátou kostní hmoty na jednotku objemu. Následky ztráty kostní hmoty a výsledná fraktura kosti je selháním kostry zajišťovat odpovídající strukturní oporu těla. Jeden z nejznámějších typů osteoporózy je spojován s menopauzou. Většina žen ztrácí od okolo 20 % do okolo 60 % kostní hmoty ztrabekulámí části kosti během 3 až 6 let po ustání menses. Tato rychlá ztráta je obecně spojována se vzrůstem kostní resorpce a formace. Resorpční cyklus je však dominantní a výsledkem je čistá ztráta kostní hmoty. Osteoporóza je obecné a vážné onemocnění mezi ženami v post-menopauze.
Existuje odhad 25 milionů žen ve Spojených státech, které jsou sužovány touto nemocí. Výsledky osteoporózy jsou škodlivé pro postiženou osobu a zapříčiňují také velké ekonomické ztráty, způsobené její chronicitou a potřebou dlouhodobé podpory (hospitalizace a domácí ošetřovatelská péče) pro následky nemoci. To platí obzvláště pro starší pacientky. Mimo to, i když osteoporóza není obecně považována za nemoc ohrožující život, 20 až 30 % úmrtí je u starších žen ve vztahu k frakturám kyčli. Velké procento těchto úmrtí lze přímo asociovat s post-menopauzální osteoporózou.
Nejvíce zranitelná tkáň v kosti vzhledem k účinkům postmenopauzální osteoporózy je trabekulámí část kosti. Tato tkáň je často popisována jako porézní nebo mřížkovitá kost a je obzvláště koncentrovaná blízko konce kosti (blízko kloubů) a v obratlích páteře. Trabekulámí tkáň je charakterizovaná malými osteoidními strukturami, které se uvnitř dotýkají jedna druhé, jakož i pevnější a hustší kortikální tkání, která tvoří vnější povrch a centrální diafyzu kosti. Tato vnitřně spojená síť trabekuly poskytuje laterální podporu vnější kortikální struktuře a je kritická pro biomechanickou pevnost celkové struktury. Při postmenopauzální osteoporóze je to zejména čistá resorpce a ztráta trabekuly, která vede k narušení a frakturám kosti. Vzhledem k ztrátě trabekuly u post-menopauzálních žen nepřekvapuje, že většina obvyklých fraktur je asociována s kostmi, které jsou vysoce závislé na trabekulámí podpoře, to jest obratli, krčky, nesoucími zátěž kostí, jako je femora (stehenní kost) a předloktí. Kyčelní fraktury, fraktury krčku a fraktury obratlů rozdrcením jsou hlavními projevy post-menopauzální osteoporózy.
- 1 CZ 286236 B6
V přítomnosti je jediná obecně přijímaná metoda pro léčení post-menopauzální osteoporózy estrogenová substituční terapie. Ačkoliv je tato terapie obecně úspěšná, její přijatelnost pro pacientku je nízká, a to zvláště proto, že léčba estrogenem často produkuje nežádoucí vedlejší efekty.
Během premenopauzálního času má většina žen menší výskyt kardiovaskulárních nemocí než věkem srovnatelní muži. Avšak následkem menopauzy se poměr kardiovaskulárních nemocí u žen pomalu zvyšuje ke stupni výskytu, pozorovaného u mužů. Tato ztráta ochrany je spojena s úbytkem estrogenu a zvláště se ztrátou schopnosti estrogenu regulovat hladinu sérových tuků. Povaha estrogenové schopnosti regulovat sérové tuky není dobře známa, ale současné znalosti naznačují, že estrogen reguluje receptory nízkohustotních lipidů (LDL) v játrech k odstranění přebytku cholesterolu. K tomu se ukazuje, že estrogen též účinkuje při biosyntéze cholesterolu a má další příznivé vlivy na kardiovaskulární zdraví.
V literatuře je popsáno, že ženy v post-menopauze, podstupující substituční estrogenovou terapii, vykazují hladiny sérových lipidů blízké koncentracím, které byly v pre-menopauzálním stavu. Z tohoto důvodu by se zdálo podávání estrogenu rozumnou léčbou. Avšak vedlejší účinky estrogenové substituční terapie nejsou přijatelné pro mnoho žen, což limituje použití této terapie. Ideální terapií za těchto podmínek by bylo činidlo, které by bylo schopné regulovat hladinu sérových lipidů, jak to dělá estrogen, ale umožnilo by vyhnout se vedlejším efektům a rizikům, spojených s estrogenovou terapií.
Třetí hlavní patologie, spojená se syndromem post-menopauzální osteoporózy, je s estrogenem související rakovina prsu a v menším rozsahu s estrogenem související rakoviny dalších orgánů, zvláště dělohy. I když takovéto neoplazmy nejsou výhradně omezeny na ženy v post-menopauze, jsou rozšířenější ve starší, post-menopauzální populaci. Běžná chemoterapie těchto rakovin je silně založena na použití anti-estrogenových sloučenin, jako je například tamoxifen. I když takovéto směsi agonista-antagonista mají příznivé účinky v léčení těchto rakovin, a estrogenové vedlejší účinky jsou tolerovány v akutních život ohrožujících situacích, nejsou přesto ideální. Na příklad tato činidla mohou mít stimulační efekty na jisté rakovinové buněčné populace v děloze, způsobené jejich estrogenovými (agonistickými) vlastnostmi a mohou tudíž býti v některých případech kontraproduktivní. Lepší terapii pro léčení těchto typů rakoviny by bylo činidlo, které je antiestrogenovou sloučeninou, mající zanedbatelné nebo neestrogenové agonistické vlastnosti na reproduktivní tkáně.
Vzhledem k jasné potřebě nových farmaceutických činidel, která jsou schopná ulehčit symptomům, inter alia, post-menopauzálního syndromu, předložený vynález popisuje nové pentacyklické sloučeniny, jejich farmaceutické kompozice a způsoby použití těchto sloučenin pro léčení post-menopauzálního syndromu a dalších k estrogenu se vztahujících patologických stavů, jak je zmíněno výše.
Děložní fibrózy (nádorové onemocnění dělohy) představují starý a stále přítomný klinický problém, kteiý je znám pod různými jmény, zahrnujíce v to děložní fíbroidní chorobu, děložní hypertrofii, lieomyomata, myometriální hypertrofii, děložní fibrózu a fibrotické metritidy. Podstatné spočívá vtom, že děložní fíbróza nastává za stavu nevhodného ukládání fíbroidní tkáně na stěnách dělohy.
Tento stav je případem dysmenorey a neplodnosti žen. Přesná příčina tohoto stavu není zatím dobře pochopena, ale zkušenost naznačuje, že je to způsobeno nevhodnou odezvou fíbroidní tkáně na estrogen. Tento stav byl vyvolán u králíků denním podáváním estrogenu po dobu 3 měsíců. U morčat byl tento stav vyvolán denním podáváním estrogenu po dobu 4 měsíců. Dále u krys estrogen způsoboval obdobnou hypertrofii.
-2CZ 286236 B6
Nejobvyklejší léčení děložních fibróz zahrnuje chirurgické zásahy, které jsou jak drahé, tak občas zdrojem komplikací, jako jsou abdominální adheze a infekce. U některých pacientek je počáteční chirurgický zákrok pouze dočasným opatřením a fibroidy znovu dorůstají. V těchto případech je prováděna hysterektomie, která účinně odstraní fibroidy (nádory), ale také reprodukční etapu života pacientky. Také lze podávat hormonové antagonisty, uvolňující gonadotropin, i když jeho podávání je omezeno faktem, že vede k osteoporóze. Je zde tedy nutná potřeba vynalézt nový způsob léčení děložních fibróz, což splňuje řešení podle předkládaného vynálezu.
Endometrióza (ložiska tkáně podobná děložní sliznici na neobvyklých místech) je stavem těžké dysmenorey, která je doprovázená krutou bolestí, krvácením do endometriální hmoty a nebo do peritoneální (pobřišnicové) dutiny a často vede k neplodnosti. Příčinou symptomů tohoto stavu se ukazují ektopické endometriální růsty, které odpovídají nevhodně na normální hormonální řízení a jsou lokalizovány v nevhodných tkáních. V důsledku nevhodné lokace endometriáiního růstu se zdá, že tkáň iniciuje místní zánětům se podobající odezvy, způsobující makrofágovou infiltraci a kaskádu událostí, vedoucích k iniciování bolestivé odezvy. Dosud není dobře pochopena exaktní etiologie těchto nemocí a jejich léčení hormonální terapií je různé, špatně definované a doprovázené množstvím nechtěných a snad i nebezpečných vedlejších účinků.
Jednou z léčeb této nemoci je používání nízkých dávek estrogenu k potlačení endometriáiního růstu vyvoláním záporného zpětnovazebního efektu na centrální gonadtropinové uvolňování a následně ovariální produkci estrogenu; při tom je však občas nutné použít nepřetržité podávání estrogenu k ovládnutí symptomů. Takovéto používání estrogenu často způsobuje nežádoucí vedlejší efekty a dokonce i risk rakoviny děložní sliznice.
Další léčba spočívá v nepřetržitém podávání progestinů, což zahrnuje amenoreu (vynechání menstruace v období plodnosti) a potlačením produkce ovariálního estrogenu způsobuje regresi endometriáiního růstu. Použití chronické progestinové terapie je často doprovázeno nepříjemnými CNS vedlejšími efekty progestinů a často vede k neplodnosti, způsobené potlačením funkce vaječníků.
Třetí léčba spočívá v podávání slabých androgenů, které jsou účinné v řízení endometriózy; avšak tyto indikují značné maskulinizační efekty. Několik těchto léčeb endometriózy mělo za následek způsobení lehkého stupně ztráty kosti průběžnou terapií. Z toho důvodu jsou žádoucí nové způsoby léčení endometriózy.
Proliferace (bujení) buněk hladkého aortálního svalu hraje důležitou roli u nemocí, jako je ateroskleróza a restenóza (znovuvytváření stenózy). Vaskulámí restenóza po perkutánní transluminámí koronární angioplastice - (PTCA) se ukázala být odezvou tkáně, charakterizovanou rannou a pozdní fází. Ranná fáze, trvající hodiny až dny po provedení PCTA, je způsobena trombózou s jistým vasospasmem, zatímco v pozdní fázi je dominantní excesivní proliferace a migrace aortálních buněk hladkého svalstva. Při této chorobě vzrůstající buněčná mobilita a kolonizace takovými svalovými buňkami a makrofágy přispívá významně kpatogenezi nemoci. Excesivní proliferace a migrace aortálních buněk hladkého svalstva může být primárním mechanismem k reokluzi (opětnému uzavření) koronárních arterií, následující po PTCA, aterektomii, laserové angioplastice a arteriální chirurgii přemostěním štěpem (bypass). Viz „Intimal Proliferation of Smooth Muscle Cells as an Explantation for Recurrent Coronaiy Artery Stenosis afiter Percutaneous Transluminar Coronary Angioplasty, „Austin a kol., Joumal of the Americal College of Cardiology. 8: 369 - 375 (Aug. 1985).
Vaskulámí restenóza zůstává hlavní dlouhodobou komplikací, následující po chirurgické intervenci blokovaných arterií perkutánní transluminační koronární angioplastikou (PTCA), aterektomii, laserovou angioplastikou a arteriální „bypass“ štěpovou chirurgií. U okolo 35 % pacientů, kteří podstoupí PCTA, dojde k reokluzi během tří až šesti měsíců po zásahu. Běžná
-3CZ 286236 B6 strategie pro léčení vaskulámí restenózy zahrnuje mechanickou intervenci zařízením, jako je stent (pomůcka k přidržení štěpu a jiné podpory), nebo farmakologické terapie, zahrnující heparin, heparin s nízkou molekulovou hmotností, kumarin, aspirin, rybí olej, vápníkové antagonisty, steroidy a prostacyklin. Tyto strategie selhávají při omezování reokluze a jsou neúčinné pro léčení a prevenci vaskulámí restenózy. Viz „Prevention of Restenosis after Precutaneous Transluminal Coronary Angioplasty: The Search for a 'Magie Bulleť“, Hermans a kol., Američan Heart Joumal, 122: 171-187 (July 1991).
V patogenezi restenózy excesivní proliferace buněk a migrace nastává jako výsledek růstových faktorů, produkovaných buněčnými konstituenty v krvi a poškozené arteriální cévní stěně, což zprostředkovává proliferaci buněk hladkého svalstva při vaskulámí restenóze.
Činidla, která inhibují proliferaci a/nebo migraci buněk hladkého aortálního svalstva, jsou používána při léčení a prevenci restenózy. Předložený vynález se týká sloučenin, působících jako inhibitory proliferace buněk hladkého aortálního svalstva a tudíž jako inhibitory restenózy.
Transformující růstový faktor β (TGF-β) je peptidický růstový faktor, který patří do generické skupiny peptidů, často nazývaných izoformy, což znamená, že členové skupiny buď sdílejí aminokyselinovou homologii a/nebo mají podobné fyziologické působení. Faktory TGF-β, obzvláště ty, které jsou označené TGF-βι, β2 a β3, jsou obzvláště asociovány s procesy, knimž dochází při obnově tkáně, a nemocí, asociovaných s abnormálními procesy obnovy tkáně (viz. Spom a Roberts „The transforming Growth Factor β'5'“, Peptide Growth Factors a their Receptors I, 419—472 (Berlin: Springer Verlag, 1990).
Činidla, indukující produkci TGF-Ů's, obzvláště ΤΰΡ-β3, jsou užitečná v zajišťování reparace (obnovy) tkání a léčení nemocí, které se týkají abnormální reparace tkáně.
Toto použití zahrnuje, ale neomezuje se na hojení zranění, redukci jizev (viz, Ferguson, „Wound Healing, Scaring, TGF-β Antagonists, and Isoforms“, Abst. NIH TGF-β Symposium Bethesda MD, 3 May 1994) a uleerativní muskositidu indukovanou chemoterapií a radioterapií (viz Soins a Haley, „Prevention of Chemotherapy-Induced Ulcerative Muscositis by Transforming Growth Factor-Ů3“, Abst. NIH TGF-β Symposium Bethesda MD, 3 May 1994). Předložený vynález se týká použití sloučenin jako promotorů procesů obnovy tkáně a jako léčiv nemocí, zahrnujících abnormální tkáňovou obnovu.
Podstata vynálezu
Předložený vynález se týká derivátů obecného vzorce I
-4CZ 286236 B6 ve kterém
X je -O-, -S-, nebo -NR5-;
Y je -O-, -S-, -CH2-, -CH2CHr-, -CH=CH-, nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou každá nezávisle na sobě -H, -OH, -O(Ci-C4 alkyl), -OCOC6H5, -OCO(C]-C6 alkyl), -OSO2(C4-C6 alkyl), -OS02CF3, Cl nebo F;
n je 1 nebo 2;
W je CH2 nebo C=O;
R4 je 1-piperidinyl, 2-oxo-l-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl-l-pyrrolidinyl, dimethyl-1pyrrolidinyl, 2-oxo-l-pyrrolidinyl, 4-morfolino, dimethylamino, diethylamino, nebo 1hexamethylenimino;
R5 je C,-C3 alkyl, -COC6H5, -CO(Ci-C6 alkyl), -C(O)OC6H5, -C(O)O(Ci-C6 alkyl), -SO2(Ci-C6 alkyl), -SO2C6H5, nebo -SO2CF3;
nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.
Vynález se také týká derivátů obecného vzorce II
ve kterém
B je —CH2— nebo —CO—,
Y, R1, R2, R3, R4, n a W jsou definovány výše; nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.
Vynález se také týká derivátů obecného vzorce ΠΙ a IV, které jsou použitelné pro výrobu farmaceuticky aktivních sloučenin podle předloženého vynálezu a jsou znázorněny níže
σπ), kde
RIa, R2a a R3a jsou nezávisle na sobě -H, -O(C]-C4 alkyl), -Cl, -F nebo vhodný chránící hydroxyl;
Z je -OH, -OH6H5, —O(Cj—C4 alkyl) nebo 4-hydroxyfenyl;
X a Z jsou stejné jako bylo definováno výše;
(IV), kde
Rla, R2a, R3a a Y jsou jako bylo definováno výše.
Předpokládaný vynález se také týká farmaceutických kompozicí, obsahujících sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce Π, popřípadě obsahujících estrogen nebo progestin, a použití takových sloučenin buď samotných nebo v kombinaci s estrogenem nebo progestinem, pro zmírnění symptomů postmenopauzálního syndromu, obzvláště osteoporózy, souvisejících kardiovaskulárních patologických stavů a s estrogenem souvisejících rakovin. Výraz „estrogen“, tak jak je používán zde, zahrnuje steroidní sloučeniny, mající estrogenový účinek, jako je například 17b-estradiol, estron, konjugované estrogeny (Premarin<R)), 17a-ethynyl estradiol a podobně. Výraz „progestin“, tak jak je zde používán, zahrnuje sloučeniny s progestinálním účinkem, jako jsou například progesteron, norethylnodrel, nongestrel, megestrol acetát, norethidron a podobně.
Sloučeniny podle předpokládaného vynálezu jsou také použitelné pro inhibici děložních fibroidních onemocnění a endometriózy u žen a proliferace aortálních buněk hladkého svalstva, obzvláště restenózy, u člověka.
-6CZ 286236 B6
Předkládaný vynález se také týká způsobu výroby sloučenin obecného vzorce Ia
kde
Rla, R2a a R3a nezávisle představuji -H, -O(Ci-C6 alkyl), -Cl, -F, nebo vhodně chráněný hydroxyl;
X a Y jsou definovány výše;
G je -OH nebo -O(CH2)nWR4, kde n, W a R4 jsou definovány výše;
nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, přičemž tento způsob zahrnuje kroky
a) reakci sloučeniny obecného vzorce lila
ve kterém
Rla, R2a, R3a, X a Y jsou jako definovány výše,
Za je -OH, OC6H5, —O(C]—C4 alkyl), s Grignardovým činidlem obecného vzorce IVa
(IVa), ve kterém
Ga je -O(Si(CH3)3, vhodně chráněný hydroxyl, kteiý může být selektivně zbaven ochrany v přítomnosti Rla, R2a, R3a nebo -O(CH2)nWR4, ve kterém n, W a R4 jsou jako definovány výše;
b) pokud Ga je -OSi(CH3)3 nebo jiná vhodná chránící skupina, pak případné odstranění ochranné skupiny a poté reakci vzniklého -OH s Q-(CH2)n-W-R4 kde Q je bromo, chloro nebo hydroxy;a
c) případná salifikace reakčního produktu z kroku a) nebo b).
Další předmět předkládaného vynálezu se týká sloučenin obecného vzorce I
ve kterém
X je -0-, —S— nebo -NR5-;
Y je -O-, -S-, -CH2-, -CHjCHz-, -C=C- nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou nezávisle na sobě -H, -OH, -O(Ci-C4 alkyl), -OCOC6H5, -OCO(C]-C6 alkyl), -OSO2(C4-C6 alkyl), -OSO2CF3, Cl nebo F;
n je 1 nebo 2;
W je CH2 nebo C=O;
R4 je 1-piperidinyl, 2-oxo-l-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl-l-pyrrolidinyl, dimethyl-1pyrrolidinyl, 2-oxo-l-pyrrolidinyl, 4—morfolino, dimethylamino, diethylamino nebo 1hexamethylenimino;
R5 je C,-C3 alkyl, -COC6H5, -CO(C]-C6 alkyl), -C(O)OC6H5, -C(O)O(Ci-C6 alkyl), —SO2(Ci-C6 alkyl), — SO2CgH5, nebo —SO2CF3;
nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.
Obecné výrazy, používané pro popis sloučenin, popsaných v této přihlášce, mají běžně užívaný význam. Například „Ci-Ce alkyl“ označuje přímý nebo rozvětvený alifatický řetězec, obsahující
-8CZ 286236 B6 od 1 do 6 atomů uhlíku a zahrnuje methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, n-butyl, pentyl, izopentyl, hexyl, izohexyl a podobně.
Výchozí sloučeniny pro jednu cestu výroby sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce V
(V), ve kterém
RIa, R2a a R3a nezávisle představují -H, -O(Ci-C4 alkyl), -Cl, -F, nebo vhodně chráněný hydroxyl;
X a Y jsou definovány výše;
Jedno z provedení tohoto výchozího materiálu, sloučeniny obecného vzorce Vb
(Vb), ve kterém
Rla, R2a a R3a jsou definovány výše;
X' je-O-,-S-nebo-NH-;
jsou získány v zásadě tak, jak je popsáno vJoumal of Organic Chemistry. 40:3169 (1975). Výhodně jsou RIa a R2a methoxy nebo vhodně chráněný hydroxyl, R3a je -H a X' je -O-.
Obecně se snadno získatelný thioindoxyl obecného vzorce
-9CZ 286236 B6 ve kterém R2a je definováno výše, nechá reagovat s benzaldehydem obecného vzorce
ve kterém Xb je -OH, -SH, nebo -NH2, a Rla a R2a jsou definovány výše. Reakce obecně probíhá v přítomnosti slabé báze, jako je triethylamin, a protického rozpouštědla, jako je ethanol a probíhá při teplotě okolí nebo při nižší teplotě. Produkt této kondenzace je potom hydrogenován různými metodami, známými odborníkům, nejvýhodněji reakcí s 2,3-dichlor-5,6dikyano-l,4-benzochinonem (DDQ), čímž se získá sloučenina obecného vzorce V.
Je-li to požadováno, sloučeniny obecného vzorce V, ve kterých Rla, R2a a/nebo R3a jsou methoxy, mohou být zbaveny ochranné skupiny reakcí s chloridem hlinitým a ethanthiolem a může jim být poskytnuta nová ochranná skupina, chránící fenol v této etapě. Výhodné jsou ochranné skupiny, které je možno odstranit za slabých podmínek, jako je t-butyldimethylsilyl.
Alternativní výchozí sloučenina obecného vzorce Vc
(Vc), ve kterém
Rlc a R2c jsou vhodně chráněné hydroxyly;
jsou dostupné standardní ochranou komerčně dostupného kumestrolu. Výhodné jsou ochranné skupiny, které je možno odstranit za slabých podmínek, jako je t-butyldimethylsilyl.
Výchozí sloučenina obecného vzorce Vd
(Vd),
-10CZ 286236 B6 ve kterém
Rla, R2a, a R3a jsou definovány výše;
X je -O- nebo -S-; a
Y je -CH2-, -CH2-CH2-, nebo -CH=CH-, jsou získány von Pechamnovou reakcí, jak je popsáno v Organic Reactions, 7:1 (1953).
Obecně je snadno dostupný tetralon nebo indanon obecného vzorce
CO?Me
.0 ve kterém R2a je definováno výše a yd je -CH2- nebo -CH2- CH2-, kondenzován s vhodně substituovaným fenolem nebo thiofenolem:
ve kterém
RIa' je -OH, -H, -O(Ci-C4 alkyl), -F, -Cl, nebo vhodně chráněný hydroxyl;
R3a je definován výše; a
Xd je-OH nebo-SH, pod vlivem kondenzačního činidla, jako je fosforoxychlorid, oxid fosforečný, kyselina sírová, chlorid hlinitý a podobně. Výhodně je Rla, -OH, R3a je -H, Xd je OH, yd je CH2CH2 a R2a je methoxy a reakce je prováděna v toluenu nebo benzenu při teplotě 80 až 110°C s použitím fosforoxychloridu jako kondenzačního činidla. Jestliže von Pechmanův produkt obsahuje fenolickou složku, může být v této fázi chráněn, nebo alternativně je-li R2d methoxy, může být podroben dealkylační/deprotekční posloupnosti, jak bylo popsáno výše. Je-li to požadováno, případná dvojná vazba může potom být vytvořena reakcí s DDQ nebo jiným dehydrogenačním činidlem.
Další výchozí sloučenina obecného vzorce Ve
-11CZ 286236 B6
(Ve), ve kterém
Xe a Ye jsou nezávisle na sobě -O-, -S-, -NH-, nebo -NR5;
RIa, R2a, R3a, a R5 jsou definovány výše;
je získána v zásadě způsobem, popsaným v Heterocvcles, 15:1425 (1993); United States patent číslo 5,073,553 vydaný 17. prosince 1991; a Indián Joumal of Chemistry. 24B:556 (1989).
Další výchozí sloučenina obecného vzorce Vf
ve kterém
Rla, R2a, a R3a jsou definovány výše;
Xf je-NH-nebo-NR5-; a
Yf je -CH2-, -CH2-CH2~, nebo -CH=CH, je připravena v zásadě způsobem, popsaným v Indián Joumal of Chemistry. 14B: 132 (1976) a v Joumal of the Chemical Society. Perkin Trans. I. 1747 (1974). Jestliže je požadována dvojná vazba (Y - -CH=CH-), může být získána způsobem, popsaným výše, s využitím DDQ.
Jestliže je vytvořena sloučenina obecného vzorce V, jednou z možností je redukce zvolené sloučeniny obecného vzorce V na sloučeninu obecného vzorce nib
-12CZ 286236 B6
am), ve kterém
Rla, R2a, R3a, X a Y jsou definovány výše;
reakcí s vhodným redukčním činidlem, jako je diizobutylaluminium hydrid v rozpouštědle, jako je toluen, CH2CI2 nebo tetrahydrofuran. Obecně je tato redukce prováděna při teplotě pod 0 °C a výhodně mezi -50 °C a -100 °C. Sloučenina obecného vzorce Illb může potom být konvertována, buď in šitu nebo v odděleném kroku, na sloučeninu obecného vzorce IIIc, uvedenou níže
(Hic), ve kterém
R6 je -C1-C4 alkyl nebo -C6H5,
Rla, R2a, R3a, X, a Y jsou definovány výše;
reakcí s alkoholem nebo fenolem R6OH a popřípadě s acidickou sloučeninou nebo dehydrogenačním činidlem, jako je síran hořečnatý. Výhodné je provádět tuto konverzi v odděleném kroku, v CH2CI2 nebo chlorobenzenu, při teplotě mezi teplotou okolí a teplotou zpětného toku. Výhodně jsou Rla a R2a vhodně chráněné hydroxyly, R3a je Η, X je -Ο-, Y je -O- nebo -S-, a R6 je -C6H5.
Alternativně může být sloučenina obecného vzorce V, ve kterém X je -NH-, acylována v dusíku a potom přímo konvertována na sloučeninu obecného vzorce IIIc reakcí sNaBHt nebo podobným redukčním činidlem v přítomnosti acidické sloučeniny, jako je kyselina chlorovodíková, a v alkoholovém rozpouštědle. Při tomto provedení IIIc je výhodné, aby Rla a R2a byly methoxy, aby R3a bylo H, aby X bylo -N(COC6H5)- nebo -N(COC(CH3)4)-, Y bylo —O—, a R6 bylo výhodně -C2H5.
V následujícím kroku sloučenina obecného vzorce Illb nebo Hic reaguje s arylovým Grignardovým činidlem obecného vzorce IVa
-13CZ 286236 B6
(IVa), ve kterém
Ga je -OSi(CH3)3, vhodně chráněný hydroxyl, který může být selektivně zbaven ochrany v přítomnosti buď Rla a R2a nebo -(CH2)nWR4;
kde n, W, a R4 jsou definovány výše;
v rozpouštědle jako je toluen, tetrahydrofuran, diethyl ether, CH2C12 nebo jejich směs a při teplotě okolí nebo pod ní. Reakce může být popřípadě usnadněna přítomností Lewisovy kyseliny, jako je etherát fluoridu boritého, chlorid cíničitý, chlorid titaničitý a podobně.
Pokud Ga z obecného vzorce IVa je -O(CH2)„WR4, tato Grignardova reakce dává sloučeninu obecného vzorce Ib
(Ib), ve kterém
R,a, R2a, a R3a představují nezávisle na sobě -H, -O(C]-C4 alkyl), -Cl, -F, nebo vhodně chráněný hydroxyl;
X, Y, n, W, a R4 jsou definovány výše;
které mohou být popřípadě zbaveny ochrany a odvozeny, jak je popsáno níže, čímž vznikne požadovaná sloučenina obecného vzorce I.
Alternativně, pokud Ga ze vzorce IVa je -OSi(CH3)3 nebo jiná vhodná chránící skupina, chránící skupina je odštěpena v této fázi za podmínek, které ponechají Rla, R23, a R3a beze změny, čímž se získá sloučenina obecného vzorce Ic
-14CZ 286236 B6
(Ic), ve kterém
Rla, R2a, R3a, X a Y jsou definovány výše.
Takové podmínky jsou závislé na povaze chránících skupin a jsou dobře známy odborníkům v oboru (viz např. Greene a Wuts, Protective Groups v Organic Synthesis, 2nd ed., (1991)). Ve výhodném provedení, ve kterém jsou Rla, R2a t-butyldimethylsilyloxy nebo methoxy a ve kterém R3a je H a Ga je -OSi(CH3)4, toho může být dosaženo krátkou expozicí methanolové suspenze uhličitanu draselného při teplotě okolí nebo nižší v přítomnosti korozpouštědla, jako je tetrahydrofuran nebo diethylether.
Sloučeniny obecného vzorce Ic mohou být konvertovány na sloučeniny obecného vzorce Ib použitím jedné z cest syntézy, které jsou znázorněny na schématu I. V tomto schématu jsou Rla, R2a, R3a, R4, W, Y, Y a n, jak byly definovány výše.
Schéma I R2a
-15CZ 286236 B6
Každý krok ve schématu I je prováděn postupy, které jsou dobře známy odborníkům v oboru.
Například sloučeniny obecného vzorce IC mohou reagovat se sloučeninami obecného vzorce
R4-W—(CH2)n-Q ve kterém R4, W a n jsou jak bylo definováno výše, a Q je bromo nebo, výhodně, chloro, čímž se získají sloučeniny obecného vzorce Ib. Tato alkylace je normálně dosahována prováděním reakce v přítomnosti přebytku jemně práškového uhličitanu draselného a použitím ekvivalentu nebo slabého přebytku reagentu Q-(CH2)-R3.
Výhodnější způsob zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce IC se sloučeninou obecného vzorce
R4-W-(CH2)n-OH ve kterém R4, W a n jsou jak bylo definováno výše, v přítomnosti trifenylfosfinu, diethylazodikarboxylátu (DEAD) a ve vhodném rozpouštědle, což vede k vytvoření sloučeniny obecného vzorce Ib. Tento proces je znám jako Mitsunobuhova reakce. Výhodně se 2 až 4 ekvivalenty 1(2-hydroxyethyl)pyrrolidinu ponechají reagovat se sloučeninou obecného vzorce Ic v přítomnosti 2 až 5 ekvivalentů trifenylfosfinu a DEAD v inertním rozpouštědle, jako je toluen, a při teplotě okolí. Při této teplotě reakce proběhne za asi 30 minut až 3 hodiny, avšak změny reakčních podmínek mohou změnit množství času, který tato reakce potřebuje k úplnému dokončení. Je zřejmé, že postup reakce může být monitorován použitím standardních chromatografických technik.
V ještě další možné cestě syntézy se nechá sloučenina obecného vzorce IC reagovat s přebytkem alkylujícího činidla obecného vzorce
J-W-(CH2)n-J' ve kterém J a J' jsou stejné nebo různé štěpitelné skupiny, v alkalickém roztoku.
Vhodné odstupující skupiny zahrnují například sulfonáty, jako je methansulfonát, 4bromsulfonát, toluensulfonát, ethansulfonát, izopropansulfonát, 4-methoxybenzensulfonát, 4nitrobenzensulfonát, 2-chlorbenzensulfonát a podobně, halogeny, jako bromo, chloro, jodo a podobně a další podobné skupiny. Výhodné alkylující činidlo je 1,2-dibromethan a alespoň 2 ekvivalenty a výhodně více než 2 ekvivalenty 1,2-dibromethanu jsou použity na ekvivalent substrátu.
Výhodný alkalický roztok pro tuto alkylační reakci obsahuje uhličitan draselný v inertním rozpouštědle, jako je například methylethylketon (MEK) nebo DMF. V tomto roztoku 4—hydroxy skupina benzoylu sloučenina obecného vzorce Illd existuje jako fenoxidový iont, který přemisťuje jednu z odstupujících skupin alkylačního činidla.
Nejlépe je tuto reakci provádět v alkalickém roztoku, obsahujícím reaktanty a reagenty, přivedené na teplotu zpětného toku a ponechány, aby reakce byla ukončena. Pokud je používán MEK jako výhodné rozpouštědlo, reakční doba je v rozmezí od 6 hodin do 20 hodin.
Alternativně jsou sloučeniny obecného vzorce Id připraveny reakcí alkoholu obecného vzorce
J-W-(CH2)n-OH
-16CZ 286236 B6 ve kterém J je zvoleno jako odstupující skupina popsaná výše, se sloučeninou obecného vzorce lc pomocí Mitsunobuhovy reakce. Výhodný alkohol je 2-bromethanol.
Reakční produkt z tohoto kroku, sloučenina obecného vzorce Id, se potom nechá reagovat s 1piperidinem, 1-pyrrolidinem, methyl-l-pyrrolidinem, dimethyl-l-pyrrolidinem, 4-morfolinem, dimethylaminem, diethylaminem nebo 1-hexamethyleniminem použitím standardních technik, čímž se vytvoří sloučenina obecného vzorce lb. Výhodně se nechá hydrochloridová sůl piperidinu reagovat se sloučeninou obecného vzorce lb v inertním rozpouštědle, jako je bezvodý DMF, a je zahřívána na teplotu v rozmezí od asi 60 °C do asi 110 °C. Pokud je reakční směs zahřívána na výhodnou teplotu okolo 90 °C, reakce trvá jen asi 30 minut až asi 1 hodinu. Změny reakčních podmínek však ovlivňují dobu potřebnou ktomu, aby tato reakce proběhla až do konce. Je zřejmé, že postup této reakce může být monitorován pomocí standardních chromatografických technik.
Dealkylace/deprotekce terminálně chráněné hydroxy skupiny u sloučeniny obecného vzorce la může být prováděna, pokud je to požadováno, aby se získala farmaceuticky aktivní sloučenina obecného vzorce I, a to použitím metod, dobře známých odborníkům v oboru. Výhodná metoda deprotekce t-butyldimethylsilyletherů, výhodného provedení Rla a R2a, zahrnuje míchání směsi ve vhodném rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, s rozpustným zdrojem fluoru, jako je tetra-nbutylammoniumfluorid, při teplotě okolí.
Výše popsané procedury popisují nové, farmaceuticky účinné sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých R1 a R2 jsou oba methoxy, nebo jsou R1 a R2 oba hydroxy, R3 je H, R4 je piperidinyl nebo pyrrolidinyl, X je -O-, Z je -S-, W je -CH2- a n je 1. Tyto výhodné sloučeniny, stejně tak jako další sloučeniny obecného vzorce la, mohou být používány jako farmaceutická činidla, nebo z nich mohou být odvozeny další sloučeniny, čímž se získají další sloučeniny obecného vzorce I, které také mohou být užitečné způsobem podle předkládaného vynálezu.
Alternativní způsob pro přípravu sloučenin obecného vzorce I nebo la „v jedné nádobě“ ze sloučenin obecného vzorce V může být použit také. Tato cesta zahrnuje:
1) Redukci sloučeniny obecného vzorce V diizobutylaluminiumhydridem nebo podobným redukčním činidlem v tetrahydrofuranu při teplotě pod -60 °C.
2) Vypláchnutí přebytku redukčního činidla molámím ekvivalentem protického rozpouštědla, jako je metanol nebo ethanol.
3) Adici arylového Grignardova činidla obecného vzorce
a zahříváním na teplotu okolí.
4) Standardní extrakci reakční směsi a koncentraci.
5) Případné působení na tetrahydrofuranový roztok zbytku silnou kyselinou, jako je kyselina chlorovodíková, po dobu asi 24 hodin a následující bazické zpracování.
-17CZ 286236 B6
V někteiých případech může způsob „v jedné nádobě“ dát sloučeniny obecného vzorce Ia, které mohou být zbaveny chránících skupin výše popsaným způsobem.
Alternativně může závěrečné působení kyselinou indukovat současné odstranění chránících skupin a vést k přímé přípravě sloučenin obecného vzorce I. Výhodné sloučeniny obecného vzorce I z této jsou ty, které byly popsány výše a které mohou být používány jako farmaceuticky účinná činidla pro způsoby, které jsou zde popsány a nebo které mohou být přeměněny na nové sloučeniny obecného vzorce I, které jsou také použitelné způsobem podle předkládaného vynálezu (viz níže).
Další předmět předkládaného vynálezu se týká sloučenin obecného vzorce Π
ai), ve kterém
B je —CH2— nebo —CO—,
Y, R1, R2, R3, R4, n a W jsou jak je definováno výše;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Klíčový meziprodukt v přípravě sloučenin obecného vzorce lije sloučenina obecného vzorce VI
R2“
ve kterém
Rla, R2a, R3a a Y jsou jak je definováno výše. Syntéza výhodného provedení sloučenin obecného vzorce VI, Via ve kterém Y je -CH2CH2~, je popsána ve schématu Π.
-18CZ 286236 B6
Schéma II
(Via)
Snadno získatelný tetralon obecného vzorce Vila, ve kterém R2a je jak je definován výše, je kondenzován s jedním ekvivalentem 4—aminofenolu, výhodně v nepřítomnosti rozpouštědla a při teplotě takové, že směs se taví, obvykle asi 180 °C, pod dusíkovým proudem. V průběhu reakce 10 může být přidáván dodatečný 4-aminofenol, aby nahradil materiál, ztracený sublimací. Výsledný imin obecného vzorce Vlila se po ochlazení mění v pevnou látku a může být popřípadě rekrystalizován.
Ochrana hydroxylové skupiny sloučeniny obecného vzorce VHIa jako jeho silylového derivátu 15 Vlila' se provádí za standardních podmínek a imin je konvertován na enamid obecného vzorce IXa acylací s aroylhalidem obecného vzorce
-19CZ 286236 B6
ve kterém Rla a R2a jsou jak bylo definováno výše, obecně v přítomnosti slabé báze, jako je triethylamin, a v inertním rozpouštědle, jako je CH2C12, a při teplotě mezi teplotou okolí a teplotou zpětného toku.
Sloučeniny obecného vzorce IXa jsou potom fotolyzovány v křemíkové ponořovací jamce s použitím Hanovia rtuťové lampy v rozpouštědle, jako je ether nebo benzen, po dobu od 4 hodin do 1 týdne, čímž se získá sloučenina obecného vzorce Via'. Procedura je v zásadě taková, jak je popsána v Joumal of Chemical Society, Perkin Transactions I, 762 (1975).
Desylilace sloučeniny obecného vzorce Via' za standardních podmínek potom dává sloučeninu obecného vzorce Via. Pro seznam vhodných reakčních podmínek viz například Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd. Ed., str. 80, 161 (1991). Výhodné sloučeniny obecného vzorce VI jsou ty, ve kterých Rla a R2a jsou každá zvlášť -H nebo methoxy, a R3a je -H. Nej výhodnější jsou sloučeniny, ve kterých jak Rla, tak R2a jsou methoxy.
Sloučenina obecného vzorce Vije konvertována na sloučeninu obecného vzorce lib
ve kterém
Rla, R2a, R3a, R4, Y, n, a W jsou jak bylo popsáno výše;
metodami, popsanými výše pro konverzi sloučenin obecného vzorce IC na sloučeniny obecného vzorce lb. Například výhodným způsobem je Mitsunobuhova reakce sloučeniny obecného vzorce VI s l-(2-hydroxyethyl)pyrrolidinem nebo l-(2-hydroxyethyl)piperidinem.
Jakmile je získána sloučenina obecného vzorce lib, může být popřípadě zbavena chránících skupin nebo dealkylována, čímž se získá sloučenina obecného vzorce Π nebo, alternativně, může být redukována na sloučeninu obecného vzorce líc
-20CZ 286236 B6
R2®
ve kterém
Rla, R2a, R3a, R4, y, n, a W jsou jak bylo popsáno výše.
Jeden ze způsobů provádění této redukce zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce Ila s hydridem hlinito-lithným v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran. Jestliže reakce probíhá při teplotě okolí, může být izolován meziprodukt, který je po další redukci s borohydridem sodným v kyselině octové konvertován do sloučeniny obecného vzorce líc. Alternativně, pokud reakce je prováděna při teplotě zpětného toku, požadovaná sloučenina obecného vzorce líc může být izolována přímo. Sloučeniny obecného vzorce líc mohou být případně dealkylovány nebo zbaveny chránících skupin, což dá sloučeninu obecného vzorce Π.
Ve výhodném případě, kdy Y je -CH2CH2-, to jest v případě obecného vzorce Ila
ve kterém
Rla, R2a, R3a, R4, y, n, a W jsou jak bylo popsáno výše, může být žádoucí provádět dehydrogenační reakci, čímž se vytvoří sloučenina obecného vzorce Dd
-21CZ 286236 B6
ve kterém
Rla, R2a, R3a, R4, n, a W jsou jak bylo popsáno výše.
Tato dehydrogenace může být prováděna různými způsoby, známými odborníkům, nejvýhodněji reakcí s 2,3-dichloro-5,6-dikyano-l,4-benzochinonem (DDQ).
Alternativně může být žádoucí provádět dehydrogenaci v rannější etapě syntézy sloučeniny obecného vzorce Via', což dá sloučeninu obecného vzorce VIb:
Sloučeniny obecného vzorce VIb mohou být přeměněny na sloučeniny obecného vzorce Re způsoby analogickými přeměně sloučenin obecného vzorce Via na sloučeniny obecného vzorce Ila.
Sloučenina obecného vzorce Úd může být popřípadě zbavena chránících skupin nebo dealkylována, což dá sloučeninu obecného vzorce Π, nebo může být alternativně redukována, jak bylo popsáno výše, což dá sloučeninu obecného vzorce Ile
(Ile),
-22CZ 286236 B6 ve kterém
Rla, R2a, R3a, R4, n, a W jsou jak bylo popsáno výše.
Sloučenina obecného vzorce Ile může být popřípadě zbavena chránících skupin nebo dealkylována, což dá sloučeninu obecného vzorce Π.
Sloučeniny obecných vzorců Ila-e s jejich různými definujícími substituenty a/nebo produkty jejich deprotekce, jak bylo popsáno výše, jsou představovány jako sloučeniny obecného vzorce II podle předkládaného vynálezu.
Tak například pokud Rla, R2a a/nebo R3a z obecného vzorce Ile jsou Q-C4 alkylhydroxylové chránící skupiny, pak takové skupiny mohou být odstraněny standardními dealkylačními technikami, čímž se získají obzvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce Ile. Nej výhodnější příklady sloučenin obecného vzorce Π jsou takové, kde R1 a R2 jsou každý zvlášť -H, -OH, nebo methoxy, Y je -CH=CH-, B je -CH2-, n je 1, W je -CH2-, a R4 je 1-piperidinyl nebo 1pyrrolidinyl.
Alternativní způsob zahrnuje vytvoření výhodných sloučenin obecného vzorce I nebo II nahrazením R1, R2, a/nebo R3 hydroxy skupin podle obecného vzorce I nebo obecného vzorce II skupinou methoxy. Tato transformace může být prováděna dobře známými procedurami (viz, například, Greene a Wuts, Protective Groups v Organic Synthesis, 2nd ed., str. (1991)). Obzvláště výhodný způsob zahrnuje reakci mono- nebo difenylové sloučeniny s přebytkem diazomethanu.
Další výhodné sloučeniny obecného vzorce I nebo Π jsou získány nahrazením nově vytvořených R1, R2, a/nebo R3 hydroxy skupin sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce II skupinou obecného vzorce -O-CO-(Ci-C6 alkyl) nebo -O-SO2-(C4-C6 alkyl) pomocí známých postupů, viz například patent US 4,358,593.
Například pokud je požadována skupina -O-CO-(Ci-C6 alkyl), dihydroxy sloučenina obecného vzorce I se nechá reagovat s činidlem, jako je acylchlorid, bromid, kyanid nebo azid, nebo s vhodným anhydridem nebo smíšeným anhydridem. Reakce je výhodně prováděna v bazickém rozpouštědle, jako je pyridin, lutidin, chinolin nebo izochinolin, nebo v terciárním aminovém rozpouštědle, jako je triethylamin, tributylamin, methylpiperidin a podobně. Reakce také může být prováděna v inertním rozpouštědle, jako je ethylacetát, dimethylformamid, dimethylsulfoxid, dioxan, dimethoxyethan, acetonitril, aceton, methylethylketon a podobně, ke kterému je přidán alespoň jeden ekvivalent kyselého akceptoru radikálů (s výjimkami uvedenými níže), jako je terciární amin. Je-li to požadováno, může být použit acylační katalyzátor, jako je 4— dimethylaminopyridin nebo 4-pyrrolidinopyridin. Viz například Haslam a kol., Tetrahedron, 36:2409-2433 (1980).
Acylační reakce, která poskytuje výše uvedené koncové skupiny R1, R2 a R3 sloučenin obecného vzorce I nebo sloučenin obecného vzorce Π, je prováděna při mírné teplotě v rozmezí od asi -25 °C do asi 100 °C, často pod inertní atmosférou, jako je plynný dusík. Teplota okolí je však obvykle vhodná pro provádění reakce.
Taková acylace těchto hydroxy skupin může být také prováděna kyselinou katalyzovanou reakcí vhodné karboxylové kyseliny v inertním prostředí, nebo teplem. Mohou být použity kyselé katalyzátory, jako je kyselina sírová, polyfosforová kyselina, methansulfonová kyselina a podobně.
-23CZ 286236 B6
Výše uvedené skupiny R1, R2 a/nebo R3 sloučenin obecného vzorce I nebo sloučenin obecného vzorce II mohou být také získány vytvořením aktivního esteru vhodné kyseliny, jako jsou například estery vytvořené reagenty, jako je dicyklohexylkarbodiimid, acylimidazoly, nitrofenoly, pentachlorfenol, N-hydroxysukcinimid a 1-hydroxybenzotriazol. Viz například Bull. Chem. Soc. Japan. 38: 1979 (1965), a Chem. Ber.. 788 a 2024 (1970).
Každá zvýše uvedených technik, která poskytuje -O-CO(Ci-C6 alkyl), může být prováděna v rozpouštědlech, diskutovaných výše. Tyto techniky, které neprodukují v průběhu reakce kyselý produkt, pochopitelně nevyžadují použití kyselého akceptoru radikálů v reakční směsi.
Pokud je požadována sloučenina obecného vzorce I nebo sloučenina obecného vzorce Π, ve kterém Rl, R2 a/nebo R3 skupina sloučeniny obecného vzorce I je konvertována na skupinu obecného vzorce -O-SOr-(C4-C6 alkyl) nebo -O-SO2-CF3, dihydroxy sloučenina obecného vzorce I je ponechána reagovat s, například, sulfonovým anhydridem nebo s derivátem vhodné sulfonové kyseliny, jako je sulfonylchlorid, bromid, nebo sulfonylamoniová sůl, viz King a Monoir, J. Am. Chem. Soc.. 97:2566-2567 (1975), nebo se nechá reagovat s reagentem, jako je N-fenyltrifluormethansulfonimid, viz Handrickson a Bergeron, Tetrahedron Letters, 4607 (1973). Dihydroxy sloučenina také může být nechána reagovat s vhodným sulfonovým anhydridem, smíšenými sulfonovými anhydridy nebo sulfonimidy. Takové reakce jsou prováděny za podmínek, které byly objasněny výše v diskusi reakce s kyselými halidy a podobně.
V případě, že R1, R2 a/nebo R3 sloučenin obecného vzorce I nebo obecného vzorce II byly konvertovány na -O-SO2-CF3, uvedený derivát může být dále konvertován na sloučeninu obecného vzorce I nebo sloučeninu obecného vzorce II, ve kterém -O-SO2-CF3 skupiny byly nahrazeny -H. Trifluormethansulfonát obecného vzorce I nebo obecného vzorce II je tedy redukován za podmínek, popsaných v příkladu 7, viz níže v příkladové části, nebo jak lze nalézt v Ritter, Synthesis. 735 (1993).
I když sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce II ve formě volné báze mohou být použity způsobem podle předkládaného vynálezu, je občas výhodné připravit a používat je ve formě jejich farmaceuticky přijatelných solí. Sloučeniny, používané způsobem podle předkládaného vynálezu, jsou tedy používány ve formě farmaceuticky přijatelných adičních solí se širokou škálou organických a anorganických kyselin a zahrnují fyziologicky přijatelné soli, které jsou často používány ve farmaceutické chemii. Takovéto soli také tvoří předmět vynálezu. Typické anorganické kyseliny, které vytvářejí soli sloučenin podle vynálezu, zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu jodovodíkovou, kyselinu dusičnou, kyselinu sírovou, kyselinu fosforečnou a fosforičitou a podobně. Soli, odvozené od organických kyselin, jako jsou alifatické mono nebo dikarboxylové kyseliny, fenylem substituované alkanové kyseliny, hydroxyalkanové a hydroxyalkandiové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické a aromatické sulfonové kyseliny, mohou být použity také.
Takovéto farmaceuticky přijatelné soli tedy zahrnují acetát, fenylacetát, trifluoroacetát, akrylát, askorbát, benzoát, chlorobenzoát, dinitrobenzoát, hydroxybenzoát, methoxybenzoát, methylbenzoát, o-acetoxybenzoát, naftalen-2-benzoát, bromid, izobutyrát, fenylbutyrát, b-hydroxybutyrát, butyn-l,4-dioát, hexin-l,8-dioát, kaprát, kaprylát, chlorid, cinnamát, citrát, mravenčan, fumarát, glykolát, heptanoát, hippurát, mléčnan, maleát, maleinát, hydroxymaleát, malonát, mandelan, mesylát, nikotinát, izonikotinát, dusičnan, oxalát, ftalát, tereftalát, fosforečnan, monohydrogenfosfát, dihydrogenfosfát, metafosforečnan, pyrofosforečnan, propiolát, propionát, fenylpropionát, salicylát, sebakát, sukcinát, suberát, síran, kyselý síran, pyrosulfát, siřičitan, kyselý siřičitan, sulfonát, benzensulfonát, p-bromofenylsulfonát, chlorobenzensulfonát, ethansulfonát, 2-hydroxyethansulfonát, methansulfonát, naftalen-l-sulfonát, naftalen-2-sulfonát, ptoluensulfonát, xylensulfonát, vinan a podobně. Výhodná sůl je sůl kyseliny chlorovodíkové.
-24CZ 286236 B6
Farmaceuticky přijatelné soli adičních kyselin jsou typicky vytvořeny reakcí sloučeniny obecného vzorce I nebo sloučeniny obecného vzorce II s ekvimolámím množstvím nebo přebytkem kyseliny. Reagenty jsou obecně kombinovány ve vzájemném rozpouštědle, jako je diethylether nebo ethylacetát. Sůl normálně precipituje z roztoku v průběhu doby v rozmezí od jedné hodiny do 10 dní a může být izolována filtrací, nebo může být rozpouštědlo odstraněno konvenčními prostředky.
Farmaceutické přijatelné soli obecně mají zvýšenou rozpustnost ve srovnání se sloučeninami, z nichž byly odvozeny, a tak jsou často snadněji formulovatelné ve formě tekutin nebo emulzí.
Příklady provedení vynálezu
Následující příklady jsou podávány pro další ilustraci vynálezu a sloučenin podle něj připravených. Rozsah vynálezu není žádným z podávaných příkladů omezen.
NMR data v následujících příkladech byla generována na přístroji NMR GE 300 MHz, a pokud není uvedeno jinak, jako rozpouštědlo byl používán bezvodý aceton-ds.
Příprava la
6-Methoxythianaften-2-on
Do tetrahydrofuranu (200 ml), obsahujícího 2-dimethylamino-6-methoxybenzo-[b]-thiofen (viz U.S. patent 5,420,349) (20,00 g, 96,5 mmol), bylo přidáno 1N vodné kyseliny chlorovodíkové (200 ml) a výsledná směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Směs byla ochlazena, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem (300 ml). Spojené organické vrstvy byly promývány (250 ml), sušeny (síran hořečnatý), filtrovány a koncentrovány, čímž se získal surový produkt, který byl rekrystalizován z 3A-ethanolu a sušen ve vakuu při teplotě okolí, čímž byl získán 6-methoxythianaften-2-on (13,89 g, 77,0 mmol, 80 %): teplota tání 80 až 82 °C; IR (KBr) 1713, 1605, 1485, 1287, 1015, 865, 813 cm’1; ‘HNMR (DMSO-d6) δ 7,22 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 7,11 (s, 1 H), 6,78 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 4,06 (s, 2 H), 3,71 (S, 3H); l3CNMR (DMSO-d6) δ 203,5, 159,0, 136,9, 125,6, 124,6, 112,3, 108,4, 55,3, 46,2. Vypočtená anal. C9H9O2S: C, 59,98; H, 4,47; S, 17,78. Naměřeno: C, 60,19; H, 4,57; S, 18,03.
Příprava lb
6a, 11 a-dihydro-3,9-dimethoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-on
-25CZ 286236 B6
Do míchaného roztoku 6-methoxythianaften-2-onu (viz Docket B-9459) (20 g, 111 mmol) ve směsi ethanolu (100 ml) a methylenchloridu (50 ml) byl přidán 4-methoxysalicylaldehyd 5 (17,5 g, 115 mmol), následovaný triethylaminem (567 mg, 784 ml, 5,6 mmol) při pokojové teplotě. Po třiceti minutách pevná látka začala precipitovat a míchání pokračovalo celou noc. Směs potom byla zředěna studeným hexanem (1 1) a filtrována, čímž se získalo 28,7 g (82 %) 6a,1 la-dihydro-3,9-dimethoxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu jako šedobílé pevné látky, čisté vzhledem k *HNMR analýze. Analytický vzorek byl získán rekrystalizací io z toluenu ve formě světle žlutých kiystalů, teplota tání 157 až 165 °C; ’HNMR (300 MHz,
CDCIj) δ 7,33 (d, J = 8,6Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,lHz, 1H), 6,75 (d, J = 2,4Hz, 1H), 6,70 (m, 2H), 6,60 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,76 (s, 3H); IR (CHC13) 1759 cm’1; MS (FD) m/e 314 (M+); Vypočtená anal. C17H14O4S: C 64,95; H, 4,50. Naměřeno: C, 65,01; H, 4,58.
Příprava 2
3,9-dimethoxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-on
Směs produktu z přípravy 2 (4,5 g, 14,3 mmol) a 2,3-dichloro-5,6-dikyano-l,4-benzochinonu (DDQ) (3,4 g, 15 mmol) v dichlorethanu (100 ml) byla rychle zahřívána na teplotu 80 °C, což 25 indukovalo vytváření precipitátu. Směs byla filtrována horká, precipitát byl promýván methylenchloridem a matečná tekutina byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v horkém methylenchloridu, filtrován pro odstranění reziduálního hydrochinonu a znovu koncentrován.
Produkt byl rekrystalizován z toluenu, čímž se získalo 3,94 g (88%) 3,9-dimethoxy-6-H[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu ve formě bílých jehliček, teplota tání 220-221 °C: 30 'H NMR (aceton-de/DMSO-de) δ 8,41 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,74 (d,
J = 2,3 Hz, 1H), 7,20 (dd, J 8,9, 2,4 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,03 (dd, J = 8,6, 2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,91 (s, 3H); IR (KBr) 1717 cm’1; MS (FD+) m/e 312 (M+); Vypočtená anal. Ci7Hi2O4S: C, 65,37; H, 3,88. Naměřeno: C, 65,51; H, 3,90.
-26CZ 286236 B6
Příprava 3
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-on
Do mechanicky míchané suspenze produktu přípravy 2 (12 g, 38,4 mmol) v methylenchloridu (220 ml) byl přidán ethanthiol (ll,9g, 13,4 ml, 192 mmol) následovaný chloridem hlinitým (38,4 g, 288 mmol), přidávaným po částech. Reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 5 hodin, potom ochlazena na teplotu 0 °C a opatrně propláchnuta tetrahydrofuranem (THF) (250 ml) a poté nasyceným kyselým uhličitanem sodným (250 ml). Směs byla zředěna tetrahydrofuranem (1 1), vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla promývána tetrahydrofuranem (200 ml). Kombinované organické vrstvy byly sušeny (síran sodný) a koncentrovány, čímž se získalo 11,1 g (102 %) surového difenolu ve formě žluté pevné látky, která byla používána bez dalšího čistění.
Surový produkt byl suspendován v methylenchloridu (220 ml) a bylo na něj působeno triethylaminem (20,2 g, 28 ml, 200 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridem (20,3 g, 134,4 mmol). Směs byla míchána při teplotě okolí po dobu pěti hodin, během nichž se zvolna stala homogenní. Po zředění hexanem (600 ml) byla směs promývána solankou (600 ml) a vodná vrstva byla extrahována hexanem (300 ml). Kombinované organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a reziduum bylo rekrystalizováno z hexanu, čímž se získalo 18,0 g (91 %) 3,9bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c][ 1 ]benzo-pyran-6-onu ve formě bělavé pevné látky, teplota tání 142-144 °C: ]HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,50 (d, J 8,7 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,05 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,4, 2,2 Hz, 1H), 1,01 (s, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,27 (s, 6H), 0,25 (s, 6H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-dó) δ 158,4, 157,0, 154,6, 152,7, 149,6, 138,5, 130,5, 125,2,
124,6, 120,0, 117,6, 116,3, 112,7, 111,3, 108,0, 25,6, 25,6, 18,2, 18,2, -4,4, -4,4; IR(CHC13) 1717 cm'1; MS (FD) m/e 512 (M+); Vypočtená anal. C27H36O4SSi2: C, 63,24; H, 7,07. Naměřeno: C, 63,45; H, 7,36.
Příprava 4
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-[ 1 ] benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-ol
-27CZ 286236 B6
Roztok produktu z přípravy 3 (2,0 g, 3,9 mmol) v toluenu (200 ml) byl ochlazen na teplotu -92 °C a bylo na něj působeno po kapkách 1,0 M toluenovým roztokem diizobutylaluminium5 hydridu (11,3 ml, 11,3 mmol), přidávaného rychlostí, která umožnila udržovat vnitřní teplotu pod
-89 °C. Směs byla míchána přibližně po tři hodiny, zatímco teplota postupně rostla na -ΊΊ °C, potom promývána methanolem (5 ml) a 10% vodnou kyselinou citrónovou (50 ml). Po zředění methylenchloridem (200 ml) byla směs míchána s nasyceným vinanem sodno-draselným (100 ml), a vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem (2 x200 ml). Sloučené organické 10 vrstvy byly promývány solankou (300 ml) a výsledná látka byla dále extrahována methylenchloridem (100 ml). Organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a zbytek byl chromatografován (silikagel, 1 až 15% ethylacetát/hexan) čímž se získalo 360 mg (18%) výchozího materiálu 1,21 g (60%, 74% vzhledem k získanému výchozímu materiálu) 3,9bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c][1 ]benzo-pyran-6-olu ve formě 15 bílé krystalické pevné látky (analytický vzorek byl rekrystalizován ze směsi hexan/ethyl acetát, teplota tání 162-164 °C): ’HNMR (300 MHz) 6 7,70 (d, J = 9,0Hz, 1H), 7,46 (d, J = 2,l Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,00 (dd, J 8,5, 1,8 Hz, 1H), 6,85 (br s, 1H), 6,6 (m, 2K), 6,39(br s, 1H), 1,01 (s, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,25 (s, 6H), 0,25 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 156,9, 153,3,
151,7, 139,9, 131,9,124,5,123,9, 121,7, 118,8, 113,7, 113,1,112,7,108,7, 90,7,25,1,25,1, 17,9, 20 -5,2, -5,2; IR (CHC13) 3540 cm1; MS (FD+) m/e 514 (M+); Vypočtená anal. C27H38O4SSi2: C,
62,98; H, 7,45. Naměřeno: C, 63,25; H, 7,68, a 260 mg (13%, 16% vzhledem k získanému výchozímu materiálu, představovanému diolem, jako amorfní pevné látce:
I
O-Si
’HNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,73 (d, J 8,7 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 2,0Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,2 Hz 1H), 6,98 (dd, J = 8,7, 2,0 Hz, 1H), 6,5 (m, 3H), 6,30 (br s 1H), 4,71 (s, 2H), 1,01 (s, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,22 (s, 6H), 0,19 (S, 6H); IR (CHC13) 3600, 3510 cm’1; MS (FD+) m/e 516 (M+); Vypočtená anal. C27H40O4SSÍ2: C 62,73; H, 7,82. Naměřeno: C, 62,49; H, 7,83.
-28CZ 286236 B6
Příprava 5
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-fenoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Do roztoku produktu z přípravy 4 (4,52 g, 8,78 mmol) a fenolu (4,13 g, 43,9 mmol) v methylenchloridu (100 ml) byl přidán bezvodý síran hořečnatý (4,5 g) a vzniklá suspenze byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě okolí. Směs byla filtrována a koncentrována a reziduum bylo rozpuštěno v chlorobenzenu a znovu koncentrováno ve vakuu při teplotě přibližně 70 °C. Reziduum potom bylo rozpuštěno v methylenchloridu (300 ml), promýváno koncentrovaným uhličitanem sodným (3 x 300 ml) a vodou (2 x 300 ml), sušeno (síran sodný) a koncentrováno, čímž se získalo 5,16 g, (99 %) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-fenoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1jbenzopyranu jako amorfní pevné látky, která byla používána bez dalšího čištění: *H NMR (300 MHz) δ 7,76 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,4-7,5 (m, 4H), 7,23 (d, J = 8,4 1H), 7,08 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 8,7,2,1 Hz, 1H), 6,67 (dd, J = 8,4,2,3 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 0,99 (s, 9H), 0,96 (s, 9H), 0,24 (s, 6H), 0,21 (s, 6H); 13C NMR (125 MHz) δ 156,9, 153,3,
151,7, 139,9, 131,9, 124,5, 123,9, 121,7, 118,8, 113,7, 113,1, 112,7, 108,7, -90,7, 25,1, 25,1,
17,9, -5,2, -5,2; Ms (FD+) m/e 590 (M+); Vypočtená anal. C33H42O4SS12: C, 67,06; H, 7,18. Naměřeno: C, 66,78; H, 6,96.
Příprava 6
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxyj-6-[4-[2(l-piperidinyl)ethoxy]fenylj-6-H-[ljbenzo- thieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Do roztoku produktu přípravy 5 (4,0 g, 6,7 mmol) v toluenu (100 ml) při teplotě 0 °C byl přidán 0,5 M THF roztok 4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenylmagneziumbromidu (získaného zodpoví
-29CZ 286236 B6 dajícího bromobenzenu a hořčíkových štěpin, katalyzovaných jódem v tetrahydrofuranu, 27 ml, 13,5 mmol). Směs byla ponechána ohřát se na teplotu okolí a míchána po dobu 1,5 h. Po propláchnutí vodou (300 ml) byla směs extrahována ethylacetátem (2 x 300 ml) a organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Reziduum bylo čištěno chromatografií (silikagel, 3:1 hexan:ethylacetát, 0,1 % hydroxidu amonného) čímž se získalo 3,85 g (82 %) 3,9bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 Jbenzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako bezbarvé gumovité pevné látky: 'HNMR (300 MHz) δ 7,45 (s, 1H), 7,2-7,3 (m, 4H), 6,8-6,9 (m, 3H), 6,68 (s, 1H), 6,51 (d, J 8,1 Hz, 1H), 6,36 (s, 1H), 4,01 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,62 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,41 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H), 0,99 (s, 9H), 0,96 (s, 9H), 0,22 (s, 6H), 0,20 (s, 6H); nCNMR (125 MHz) δ 160,3, 157,9, 154,0, 153,5, 141,0, 132,8, 132,6, 130,1, 129,8, 126,1, 124,8, 122,7, 119,4, 115,3, 114,5, 114,2, 114,0, 109,4, 78,2, 66,9, 58,5, 55,6, 26,8, 26,0, 26,0, 25,0, 18,7, -4,3, -4,3; MS (FD) m/e 702 (M+); Vypočtená anal. C40H55NO4SSÍO2: C, 68,43; H, 7,90; N, 2,00. Naměřeno: C, 68,58; H, 8,00; N, 2,26.
Příklad 1
3,9-dihydroxy-6-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Do roztoku produktu přípravy 6 (3,85 g, 5,5 mmol) v tetrahydrofuranu (150 ml) byl přidán 1,0 M THF roztok tetra-n-butylamonium fluoridu (TBAF) (27,4 ml, 27,4 mmol). Roztok byl míchán při teplotě okolí po dobu 2 hodin a potom zředěn ethylacetátem (300 ml) a promýván nasyceným chloridem amonným (300 ml). Vodná vrstva byla promývána ethylacetátem (150 ml) a kombinované organické vrstvy byly promývány nasyceným kyselým uhličitanem sodným (300 ml), sušeny (síran sodný) a koncentrovány. Vzniklá látka byla čištěna chromatografií (silikagel, 1:1 hexamethylacetát, 10% methanol, 0,1% hydroxid amonný), čímž se získalo 2,35 g (90 %) 3,9dihydroxy-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzo-pyranu jako červené pěny. Krystalizace z methanolu dala šedobílý prášek, teplota tání 242 až 245 °C: *H NMR (300 MHz) δ 8,58 (br s, 2H), 7,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,16 (d, J 8,6 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,80 (m, J = 2,2 Hz, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,46 (dd, J = 8,2, 2,2 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,02 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 6,0Hz, 2H), 2,42 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); 13CNMR (125 MHz, dimethylformamid-d7) δ 160,2, 159,9, 156,4, 153,2, 140,8, 132,8, 130,9, 129,6, 125,3, 124,6, 122,5, 115,2, 115,1, 112,2, 109,6, 108,8, 108,7, 104,5, 77,6, 66,6, 58,3, 55,3, 26,5, 24,8; HRMS (FAB+) m/e Vypočtená anal. C28H28NO4S 474,1739 (MH+), Naměřeno: 474,1726; Vypočtená anal. C28H27NO4S0,8H2O: C, 68,90; H, 5,92; N, 2,87. Naměřeno: C, 68,88; H, 5,76; N, 2,86.
-30CZ 286236 B6
Příklad 2
3,9-dimethoxy-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l ]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Na roztok produktu z příkladu 1 (300 mg, 0,633 mmol) v methanolu (75 ml) bylo působeno roztokem diazomethanu ve směsi ether/ethanol (přibližně 16 mmol) při teplotě okolí. Směs byla míchána, dokud neustal vývin, poté jí byl probubláván dusík po dobu 10 minu, aby se odstranil přebytek diazomethanu, a směs byla koncentrována. Radiální chromatografie rezidua (1:1 hexan:ethylacetát, 2 % methanolu, v čpavkové atmosféře) dala 118 mg (37 %) 3,9-dimethoxy-
6—[4—[2—( 1 -piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 jbenzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyranu jako bílých krystalů, teplota tání 134 až 136 °C: ’H NMR (300 MHz) δ 7,51 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,2-7,4 (m, J = 8,6 Hz, 4H), 6,86 (m, 3H), 6,70 (s, 1 H), 6,55 (dd, J = 8,4, 2,3 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,01 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,62 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,40 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); 13CNMR (125 MHz, CDC13) δ 160,8, 159,2, 157,1, 152,6, 140,3, 131,6, 131,3, 130,5, 129,1, 124,3, 124,0, 121,7, 114,6, 114,0, 112,8, 107,6, 105,7, 102,3,
77,9, 65,8, 57,8, 55,5, 55,2, 54,9, 25,9, 24,1; MS (FD+) m/e 501 (M+); Vypočtená anal. C30H31NO4S: C, 71,83; H, 6,23; N, 2,79. Naměřeno: C, 71,53; H, 6,20; N, 2,84.
Příklad 3
3,9-bis(benzoyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]- benzopyran
-31CZ 286236 B6
Do roztoku produktu z příkladu 1 (200 mg, 0,42 mmol) v methylenchloridu (25 ml) při teplotě okolí byl přidán triethylamin (0,18 ml, 1,27 mmol), následovaný benzoylchloridem (0,15 ml, 1,27 mmol), přidávaném stříkačkou po dobu 10 minut. Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin a potom promývána nasyceným kyselým uhličitanem sodným (25 ml), následovaným vodou (25 ml). Organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována a reziduum bylo čištěno radiální chromatografíí (silikagel, 12:12:1 ethylacetát:hexan:methanol pod čpavkovou atmosférou) což dalo 200 mg (69%) 3,9-bis(benzoyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako světle hnědé pevné látky: ’HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,1-8,2 (m, 5H), 7,5-7,8 (m, 8H), 7,2-7,3 (m, 3H), 6,9-7,0 (m, 5H), 4,00 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 2,38 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 4H), 1,31,4 (m, 2H); HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C42H36NO6S 682,2263 (MH+), naměřeno 682,2286.
Příklad 4
3,9-bis(pivaloyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran
Způsobem podle příkladu 2 se produkt z příkladu 1 (200 mg, 0,42 mmol) nechal reagovat s triethylaminem (0,18 ml, 1,27 mmol) a pivaloylchloridem (0,16 ml, 1,27 mmol) v methylenchloridu (25 ml), což dalo 190 mg (703,9-bis(pivaloyloxy-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako bílé pěny: *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,58 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 9,6 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,93 (dd, J 8,8, 2,1 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,70 (dd, J 4,3, 2,1 Hz, 1H), 6,63 (s, 2H), 4,13 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,58 (m, 4H), 1,66 (m, 4H), 1,46 (m, 2H), 1,37 (S, 9H), 1,33 (s, 9H); MS (FD+) m/e 641 (M+); HRMS (FAB+) m/e vypočteno pro C^H^NOsS 642,2889 (MH+), naměřeno 642,2848; Vypočtená anal. C^H^NOůS: C, 71,11; H, 6,75; N, 2,18. Naměřeno: C, 71,86; H, 6,49; N, 2,09.
Příklad 5
3,9-bis(l-butylsulfonyloxy)-6-[4-2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c]benzopyran
-32CZ 286236 B6
O
Postupem podle příkladu 2 byl produkt z příkladu 1 (200 mg, 0,42 mmol) nechán reagovat s triethylaminem (0,18 ml, 1,27 mmol) a n-butansulfonylchloridem (0,17 ml, 1,27 mmol) v methylenchloridu (25 ml), čímž se získalo 120 mg (40 %) 3,9-bis(l-butylsulfonyloxy)-6-[42-(lpiperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako čiré hnědé gumy: ‘H NMR (300 MHz, CDC13) 5 7,77 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 9,5 Hz, 2H), 7,11 (s, 2H), 6,8-6,9 (m, 4H), 6,63 (s, 1H), 4,08 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,2-3,2 (m, 4H), 2,77 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,51 (m, 4B) 1,9-2,0 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 10H), 0,9-1,0 (m, 6H); HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C38H44NOgS3 714,2229 (MH+), naměřeno 714,2206.
Příklad 6
3,9-bis(trifluoromethansulfonyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzo- thieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Do roztoku produktu z příkladu 1 (500 mg, 1,06 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml), obsahujícím dimethylformamid (2 ml), při teplotě okolí byl přidán triethylamin (0,64 g, 0,69 ml, 6,36 mmol), následovaný N-fenyltrifluormethansulfonimidem (0,83 g, 2,33 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 12 hodin, zahřívána na teplotu 60 °C a pak byl přidán další N-fenyltrifluormethansulfonimid (0,30 g, 0,85 mmol). Po 30 minutách byla reakční směs ochlazena na teplotu okolí a koncentrována a reziduum bylo čištěno radiální chromatografií (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 1% methanol pod čpavkovou atmosférou), což dalo 780 mg (100%) 3,9bis(trifluoromethansulfonyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako bílé pěny: *HNMR (300 MHz, methanol-d4) δ 7,63 (d, J = 8,8 Hz,
-33CZ 286236 B6
1H), 7,56 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 8,8, 2,7 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,80 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,49 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,05 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 4,00 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 2,67 (m, 2H), 2,45 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz) δ 159,8, 152,8, 150,2, 146,9, 140,4, 136,6, 130,5, 129,2, 127,3, 125,3, 123,4, 119,2,
118,9, 116,3, 114,7, 114,6, 110,4, ΊΊ,Ί, 66,0, 57,6, 54,7, 25,8, 24,0; MS (FD) m/e 737 (M+); Vypočtená anal. C3oH25F6N08S3: C, 48,84; H, 3,42; N, 1,90. Naměřeno: C, 49,05; H, 3,71; N, 1,72.
Příklad 7
6-[4—[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Roztok produktu z příkladu 6 (780 mg, 1,06 mmol), octanu palladnatého (42 mg, 0,19 mmol), l,2-bis(difenylfosfmopropanu (149 mg, 0,36 mmol), kyseliny mravenčí (0,6 ml) a triethylaminu (3,0 ml) v bezvodém dimethylformamidu (40 ml) byl míchán při teplotě okolí po dobu 4 dní. Po koncentraci bylo reziduum podrobeno chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan :ethylacetát, 210 % methanol, 0,1 % hydroxid amonný). Produkt, obsahující frakce, byl koncentrován, rozdělen mezi methylenchlorid (100 ml) a nasycený kyselý uhličitan sodný (100 ml) a vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem (50 ml). Spojené organické extrakty byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a reziduum bylo čištěno chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan: , 2-10% methanol, 0,1 % hydroxid amonný), čímž se získalo 267 mg (57 %) 6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako oleje, který dal bílou krystalickou pevnou látku, teplota tání 107 °C, pro rozetření se směsí ether/hexan: 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,86 (d,
J = 7,4 Hz, 1H), 7,40 (m, 1H), 7,1-7,3 (m, 6H), 6,97 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,66 (s, 1H), 4,07 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,75 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,49 (m, 4H), 1,5-1,7 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 2H); 13CNMR (125 MHz, CDC13) δ 159,1, 151,6, 139,3, 137,1, 133,0, 131,5, 129,8, 129,1, 126,8, 124,6, 124,4, 123,7, 122,6, 121,5, 121,5, 119,3, 116,9, 114,6, 77,6, 65,7, 57,7, 54,9,25,8, 24,0; MS (FD+) m/e 441 (M+); Vypočtená anal. C28H27NO2S:
C, 76,15; H, 6,17; N, 3,17. Naměřeno: C, 75,93; K, 6,44; N, 3,01.
Příprava 7
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4—hydroxyfenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran
-34CZ 286236 B6
Do roztoku produktu přípravy 5 (3,0 g, 5,08 mmol) v toluenu (150 ml) při teplotě 0 °C byl přidán 0,4 M THF roztok 4—(trimethylsilyloxy)fenylmagnezium bromidu (získaného z odpovídajícího bromobenzenu a hořčíkových štěpin, katalyzovaných jódem v tetrahydrofuranu, 25,4 ml, 10,16 mmol). Směs byla ponechána ohřát se na teplotu okolí a byla míchána po 1,5 hodiny. Po zředění etherem (250 ml) byla směs propláchnuta nasyceným chloridem amonným (250 ml) a organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Reziduum bylo suspendováno v methanolu (100 ml) a byl přidáván ether, dokud směs nebyla homogenní. Roztok byl ochlazen na 0 °C a bylo na něj působeno bezvodým uhličitanem draselným (3 g) po dobu 15 minut. Po zředění etherem (250 ml) byla směs filtrována přes Celíte, promývána nasyceným chloridem amonným a vodná vrstva byla extrahována dodatečným etherem (100 ml). Sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a reziduum bylo čištěno chromatografií (silikagel, 10:1 hexan:ethylacetát). Rekiystalizace z hexanu dala 2,6 g (87%) 3,9-bis[(tercbutyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-hydroxyfenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyranu jako světle růžové pevné látky, teplota tání 174-175 °C: *H NMR (300 MHz) δ 8,49 (s, 1H), 7,44 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,3-7,4 (m, 4H), 6,83 (dd, J = 8,7, 2,2 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,50 (dd, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 0,98 (s, 9H), 0,95 (s, 9H), 0,21 (s, 6H), 0,20 (s, 6H); 13C NMR (125 MHz) δ 158,7, 157,8, 153,9, 153,5, 140,9, 132,7, 131,6, 131,1,
129,9, 126,1, 124,7, 122,7, 119,3, 116,1, 114,4, 114,0, 113,9, 109,3, 78,3, 26,0, 25,9, 18,7,-4,3; IR (CHC13) 3590, 3310 cm’1; MS (FD+) m/e 590 (M+); Vypočtená anal. CssH^SSiz: C, 67,07; H, 7,16. Naměřeno: C, 66,79; H, 7,05.
Příprava 8
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4—[2-(l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
-35CZ 286236 B6
Na toluenový roztok produktu přípravy 7 (400 mg, 0,68 mmol), trifenylfosfinu (708 mg, 2,7 mmol) a l-(2-hydroxyethyl)pyrrolidinu (390 mg, 396 ml, 3,39 mmol) bylo působeno diethyl azodikarboxylátem (DEAD) (470 mg, 425 ml, 2,7 mmol) při teplotě okolí a míchání po dobu 2 hodin. Směs potom byla zředěna etherem (100 ml), promývána nasyceným chloridem amonným (100 ml) a vodná vrstva byla promývána dodatečným etherem (50 ml). Sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a reziduální trifenylfosfinoxid byl precipitován z hexanu. Hexanová matečná tekutina byla koncentrována a reziduum bylo čištěno chromatografií (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 3-5% methanol, 0,1% hydroxid amonný), což dalo 359 mg (77%) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě bezbarvého oleje: ]HNMR (300 MHz) δ 7,45 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,22 (m, 2H), 6,85 (d, 8,6 Hz, 2H), 6,83 (dd, J = 8,6, 2,3 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,50 (dd, J = 8,3, 2,2 Hz, 1H), 6,36 (d, 2,2 Hz, 1H), 4,03 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,77 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,50 (m, 4H), 1,67 (m, 4H), 0,98 (s, 9H), 0,95 (S, 9H), 0,21 (s, 6H), 0,20 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 160,1, 157,8, 153,9, 153,4,
140,9, 132,7, 132,5, 131,1, 129,8, 125,9, 124,7, 122,6, 119,3, 115,1, 114,4, 114,1, 113,9, 109,4,
78,1, 67,7, 55,2, 54,9, 26,0, 25,9, 24,0, 18,6, -4,3; MS (FD+) m/e 687 (M+); Vypočtená anal. C39H53NO4SS12: C, 68,06; H, 7,78; N, 2,04. Naměřeno: C, 67,94; H, 7,61; N, 2,21.
Příklad 8
3,9-dihydroxy-6-[4-[2-( l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ ljbenzopyran
Způsobem, popsaným v příkladu 1, byl produkt přípravy 8 (331 mg, 0,48 mmol) nechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (2,4 mmol), což dalo po radiální chromatografii (silikagel, 1:1
-36CZ 286236 B6 hexan:ethylacetát, 30% methanol, pod čpavkovou atmosférou) 200 mg (91 %) 3,9-dihydroxy-6[4-[2-(l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako bílé pevné látky, teplota tání 237-240 °C: 'HNMR (300 MHz, dimethylformamid-d;) δ 10,05 (br, 2H), 7,45 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,7Hz, 2H), 6,86 (dd, J= 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,51 (dd, J = 8,2, 2,1 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,14 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,96 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 2,6-2,8 (m, 4H), 1,6-1,8 (m, 4H); nCNMR (125 MHz, dimethylformamid-d?) δ 160,2, 159,6 156,4, 153,2, 140,8, 133,0, 130,8, 129,6, 125,2, 124,6, 122,4, 115,3, 115,1, 112,2, 109,7, 108,8, 104,5, 77,6, 66,8, 54,8, 54,7, 23,8; IR (KBr) 3286 cm'1; HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C27H26NO4S 460,1583 (MH+), naměřeno 460,1572; Vypočtená anal. C27H25NO4S0,5H2O: C, 69,20; H, 5,60; N, 2,99. Naměřeno: C, 69,13; H, 5,31; N, 2,58.
Příprava 9
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4—(2-dimethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Způsobem, popsaným v přípravě 8, byly produkt přípravy 7 (450 mg, 0,76 mmol), trifenylfosfin (799 mg, 3,1 mmol) a N,N-dimethylethanolamin (340 mg, 383 ml, 3,81 mmol) reagovány s diethylazodikarboxylátem (DEAD) (531 mg, 480 ml, 3,1 mmol) v toluenu (30 ml). Chromatografie (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 3% methanol, 0,1% hydroxid amonný) dala 357 mg (71 %) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-(2-dimethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu jako bílé pěny: *HNMR (300 MHz) δ 7,45 (d, J = 2,l Hz, 1H), 7,27 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,24 (m, 2H), 6,83 (m, 3H), 6,67 (s, 1H), 6,50 (dd, J = 8,2, 2,2 Hz, 1H), 6,36 (d, 2,2 Hz, 1H), 4,00 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,20 (s, 6H), 0,98 (s, 9H), 0,95 (s, 9H), 0,21 (s, 6H), 0,20 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 160,1, 157,8, 153,9, 153,4, 141,0, 132,7, 132,6, 131,2, 129,8, 126,0, 124,7, 122,7, 119,4, 115,2, 114,4, 114,1, 113,9, 109,4,
78,1, 67,0, 58,7, 46,0, 26,0, 25,9, 18,6, -4,3; MS (FD+) m/e 661,5 (M+); Vypočtená anal. C37H5iNO4SSi2: C, 67,11; H, 7,78; N, 2,12. Naměřeno: C, 67,38; H, 7,52; N, 2,09.
-37CZ 286236 B6
Příklad 9
3,9-dihydroxy-6-[4-(2-dimethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran
Způsobem, popsaným v příkladu 1, byl produkt přípravy 9 (328 mg, 0,50 mmol) nechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (2,5 mmol), čímž se po radiální chromatografii (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 30% methanol, pod čpavkovou atmosférou) získalo 212 mg (99%) 3,9dihydroxy-6-[4-(2-dimethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu, který krystalizoval ze směsi chlorid uhličitý/aceton jako růžová pevná látka, teplota tání 130— 140 °C: 'H NMR (300 MHz) 5 7,34 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,15 (m, 2H),
6,9-7,0 (m, 3H), 6,62 (s, 1H), 6,45 (dd, J= 8,3, 2,3 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,01 (t, J = 5,8Hz, 2H), 2,64 (t, J = 5,8Hz, 2H), 2,30 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 160,0, 159,8, 156,0, 153,5, 141,1, 133,0, 131,4, 130,2, 129,8, 125,3, 124,8, 122,6, 115,3, 115,2, 112,7, 109,7, 109,0, 104,8, 78,0, 66,6, 58,6, 45,8; IR (KBr) 3300 cm’1; HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C25H24NO4S 434,1426 (MH+), naměřeno 434,1440; Vypočtená anal. C25H23NO4SO,4CC14: C, 61,62; H, 4,69; N, 2,83. Naměřeno: C, 60,93; H, 4,73; N, 2,95.
Příprava 10
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]- benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
-38CZ 286236 B6
Způsobem, popsaným v přípravě 8, byl produkt přípravy 7 (450 mg, 0,76 mmol), trifenylfosfin (799 mg, 3,1 mmol), a l-(2-hydroxyethyl)-2-pyrrolidinon (492 mg, 431 ml, 3,81 mmol) nechán reagovat s diethylazodikarboxylátem (DEAD) (531 mg, 480 ml, 3,1 mmol) v toluenu (30 ml). Chromatografíe (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát) dala 368 mg (69%) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2c] [ 1 ]benzopyranu ve formě bílé pěny: ’HNMR (300 MHz) δ 7,45 (d, J = 2,lHz, 1H), 7,28 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,88 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 6,51 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 6,36 (d, 2,3 Hz, 1H), 4,05 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,54 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,46 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,15 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 1,91 (m, 2H), 0,98 (s, 9H), 0,95 (s, 9H), 0,21 (s, 6H), 0,20 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 175,0, 160,1, 158,1, 154,2, 153,6, 141,2, 133,2, 133,0, 131,4, 130,1, 126,2, 125,0, 122,9, 119,6, 115,5, 114,6, 114,4, 114,2, 109,6, 78,3, 67,0, 48,7, 42,7, 31,2, 26,2, 26,2, 18,9, -4,1; IR (CHC13) 1673 cm'1; HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C39H51NO5SSi2 701,3027 (M+), naměřeno 701,3039.
Příklad 10
3,9-dihydroxy-6-[4-[2-(2-oxo-l-pynOlidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran
Způsobem, popsaným v příkladě 1, byl produkt přípravy 10 (331 mg, 0,47 mmol) nechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (2,4 mmol), čímž se získalo po radiální chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 20% methanol, pod čpavkovou atmosférou) a rekrystalizaci z acetonu 161 mg (72%) 3,9-dihydroxy-6-[4-[2-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě červené pevné látky, teplota tání 150-160 °C: ’HNMR (300 MHz, methanol-d4) δ 7,21 (m, 3H), 7,11 (d, J = 8,3Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,71 (dd, J = 8,6, 2,2 Hz, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,37 (dd, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,57 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,48 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,28 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,91 (kvintet, J = 7,5 Hz, 2H); 13CNMR (125 MHz, methanol-d,) δ 178,0, 160,2, 160,0, 156,2, 153,9, 141,7, 133,7, 131,9,
130,9, 130,3, 125,6, 125,0, 122,7,115,6, 115,4, 113,4, 109,8, 109,0,104,9, 78,6, 66,6, 43,4,31,8, 30,7, 18,9; IR (CHC13) 1680 cm’1; MS (FD+) m/e 474 (MH+); Vypočtená anal. C27H23NO5S(CH3)2CO: C, 67,77; H, 5,51; N, 2,64. Naměřeno C, 67,92; H, 5,56; N, 2,59.
-39CZ 286236 B6
Příklad 10a
3,9-dihydroxy-6-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran
Způsobem, popsaným v příkladě 1, se produkt přípravy 11 (458 mg, 0,66 mmol) nechal reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (3,3 mmol), což dalo po radiální chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 10 až 20% methanolu, pod čpavkovou atmosférou) a krystalizaci ze směsi aceton/ether 296 mg (72 %) 3,9-dihydroxy-6-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě červené pevné látky, teplota tání 118 až 123 °C: *H NMR (300 MHz) δ 7,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,81 (m, 3H), 6,62 (s, 1H), 6,45 (dd, J = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,98 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,78 (t, J= 6,2 Hz, 2H), 2,56 (q, J= 7,1 Hz, 4H), 0,97 (t, J = 7,1 Hz, 6H); 13CNMR (75 MHz) δ 160,2, 159,7, 155,9, 153,5, 141,1, 132,9, 131,5, 130,2,
129,9, 125,4, 124,8, 122,7, 115,2, 112,8, 109,6, 108,9, 104,8, 78,1, 67,5, 52,6, 48,3, 12,4; IR(KBr) 3311 cm-1; MS (FD+) m/e 462 (MH+); Vypočtená anal. C27H27NO4S: C, 70,04, H, 6,13; N, 3,04. Naměřeno: C, 70,26; H, 5,90; N, 3,03.
Příklad 10b
3,9-dihydroxy-6-[4-[2-( 1 -morfoliny l)ethoxy] feny 1]—6—Η—[ 1 ]benzothieno [3,2-c] [ 1 ]benzopyran
Způsobem, popsaným v příkladě 1, produkt přípravy 12 (521 mg, 0,74 mmol) byl ponechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (3,7 mmol), což dalo po radiální chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 15 % methanolu, pod čpavkovou atmosférou) a krystalizaci ze směsi aceton/ether 286 mg (81%) sloučeninu, uvedenou v názvu ve formě červené pevné látky,
-40CZ 286236 B6 teplota tání 147 až 153 °C: 'H NMR (300 MHz) 6 7,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,16 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,6Hz, 1H), 6,81 (m, 3H), 6,62 (s, 1H), 6,46 (dd, J = 8,2, 2,2 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,56 (t, J = 4,7 Hz, 4H), 2,68 (t, J= 5,7 Hz, 2H), 2,47 (t, J = 4,3 Hz, 4H); nCNMR (75 MHz) 6 160,0, 159,7, 155,9, 153,5, 141,1, 132,9, 131,4, 129,8, 129,7, 125,4, 124,8, 122,6, 115,2, 112,8, 109,6, 108,9, 104,7, 78,0, 67,2, 66,5, 58,1, 54,7; IR (KBr) 3471 cm’1; MS (FD+) m/e 475 (MH+); Vypočtená anal. C27H25NO5S.0,25H2O: C 67,54; H, 5,36; N, 2,92. Naměřeno: C, 67,58; H, 5,51; N, 2,57.
Příprava 12a
6a, 11 a-dihydro-9-methoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c][I ]benzopyran-6-on
Do míchané směsi 6-methoxythianaften-2-onu (52,6 g, 290 mmol) ve směsi ethanolu (260 ml) a methylenchloridu (130 ml) byl přidán triethylamin (2,0 ml, 14,8 mmol), následovaný salicylaldehydem (32 ml, 300 ml) při teplotě okolí. Po 1 hodině pevná látka začala precipitovat a míchání pokračovalo po další 3,5 hodiny. Směs potom byla zředěna studeným hexanem a filtrována, což dalo 68,3 g (83%) 6a,l la-dihydro-9-methoxy-6-H-[l]benzothieno[3,2c][l]benzopyran-6-onu ve formě práškovité bílé pevné látky, čisté podle ’HNMR analýzy: ’HNMR (300 MHz, CDC13) 87,45 (d, J = 7,5Hz, 1H), 7,33 (m, 2H), 7,17 (m, 1H), 7,07 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 2,4, 8,5 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,37 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H); 13CNMR (75 MHz, CDC13) 8166,4, 160,7, 150,8, 141,4,
130,1, 129,0, 127,7, 127,0, 124,9, 119,5, 117,2, 111,2, 108,3, 55,5, 50,6, 49,6; IR (CHC13) 1766 cm'1; MS (FD) m/e 284 (M+); Vypočtená anal. Ci6Hi2O3S: C 67,59; H, 4,26. Naměřeno: C, 67,77; H, 4,24.
Příprava 12b
9-methoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-on
-41CZ 286236 B6
Směs produktu přípravy 12a (14,0 g, 49 mmol) a 2,3-dichloro-5,6-dikyano-l,4-benzochinonu (DDQ) (11,6 g, 51 mmol) v dichloroethanu (350 ml) byla zahřívána krátce na teplotu zpětného toku, což indukovalo vytváření precipitátu. Směs byla filtrována horká, precipitát byl promýván methylenchloridem a matečná tekutina byla koncentrována ve vakuu. Surový produkt byl potom promýván několikrát acetonem a sušen ve vakuu, což dalo 12,6 g (91 %) 9-methoxy-6-H[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu ve formě bělavé pevné látky: 'HNMR (300 MHz, CDC13) 68,55 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 1,2, 8,0 Hz, 1H), 7,4-7,6 (m, 2H), 7,33 (m, 2H), 7,13 (dd, J= 2,3, 8,9 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H); IR (CHC13) 1722 cm’1; MS (FD) m/e 282 (Mt); Vypočtená anal. Ci6HI0O3S: C, 68,07; H, 3,57. Naměřeno: C, 67,80; H, 3,53.
Příprava 12c
9-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-on
Do mechanicky míchané suspenze produktu přípravy 12b (9,0 g, 32 mmol) v methylenchloridu (235 ml) byl přidán ethanthiol (5,9 ml, 80 mmol), následovaný chloridem hlinitým (15,8 g, 120 mmol), přidávaným po částech. Reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 1 hodiny, potom ochlazena na 0 °C a opatrně promývána tetrahydrofuranem (THF), následovaným nasyceným kyselým uhličitanem sodným. Směs byla zředěna tetrahydrofuranem, vrstvy byly separovány a vodné vrstvy byly několikrát promývány tetrahydrofuranem. Sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný) a koncentrovány, což dalo 7,4 g (86 %) surového fenolu jako šedobílé, mírně růžové pevné látky, která byla použita bez dalšího čištění.
Surový produkt byl suspendován v methylenchloridu (200 ml) a bylo na něj působeno triethylaminem (19,1 ml, 140 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridem (10,4 g, 69 mmol). Směs byla míchána při teplotě okolí po celou noc, během níž se stala homogenní. Po zředění hexanem byla směs dvakrát promývána solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný), koncentrována, a reziduum bylo rekrystalizováno z hexanu, čímž se získalo 9,8 g (80 %) 9-(tbutyldimethylsilyl)oxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu ve formě bělavé pevné látky: 'HNMR (300 MHz, CDC13) 68,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,4-7,6 (m, 2H), 7,34 (m, 2H), 7,08 (dd, J = 2,2, 8,8 Hz, 1H), 1,02 (s, 9H), 0,26 (s, 6H); IR (CHCI3) 1717 cm’1; MS (FD) m/e 382 (M+); Vypočtená anal. C21H22O3SS1: C, 65,93; H, 5,80. Naměřeno: C, 66,23; H, 5,84.
-42CZ 286236 B6
Příprava 12d
9-{t-butyldimethylsilyl)oxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c][ 1 ]benzopyran-6-ol
Roztok produktu z přípravy 12c (3,5 g, 9,1 mmol) v toluenu (490 ml) byl ochlazen na teplotu -78 °C a bylo na něj působeno po kapkách l,0M roztokem toluenu vdiizobutylaluminiumhydridu (11,0 ml, 11 mmol), přidávaném s rychlostí, která umožnila udržovat vnitřní teplotu pod -70 °C. Směs byla míchána po dobu přibližně čtyř hodin, potom promývána methanolem (14 ml), 10% vodnou kyselinou citrónovou (140 ml) a vodou (315 ml). Vodná vrstva byla extrahována třikrát v methylenchloridu (560 ml). Organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a zbytek byl chromatografován (silikagel, gradient od 2 % ethylacetátu v hexanu do 20 % ethylacetátu v hexanu), což dalo 1,7 g (49 %) 9-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-olu jako bílé krystalické pevné látky: ’HNMR (300 MHz) δ 7,77 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,89 (m, 1H), 6,46 (m, 1H), 1,02 (s, 9H), 0,26 (s, 6H); IR (CHC13) 2959, 2932, 2861, 1612, 1598 cm-1; MS (FD) m/e 384 (M+); Vypočtená anal. C2iH24O3SSi: C, 65,59; H, 6,29. Naměřeno: C, 65,51; H, 6,32.
Příprava 12e
9-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6—fenoxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran
Produkt přípravy 12d (1,5 g, 3,9 mmol) a fenol (2,7 g, 29 mmol) byly rozpuštěny vchlorobenzenu (50 ml) a směs byla míchána po dobu 3,5 hodin při teplotě zpětného toku. Směs byla koncentrována a reziduum bylo znovu rozpuštěno v chlorobenzenu a znovu koncentrováno ve vakuu při teplotě zhruba 70 °C. Reziduum bylo rozpuštěno v diethyletheru, promýváno třikrát v nasyceném uhličitanu sodném, ve vodě a solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována, což dalo 1,7 g (93 %) 9-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-fenoxy-6-H-[l]benzo
-43CZ 286236 B6 thieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě bělavé pevné látky, která byla používána bez dalšího čistění: 'H NMR spektrum (300 MHz) bylo konzistentní se strukturou látky.
Příklad 10c
9-hydroxy-6-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran
Do roztoku produktu přípravy 12e (1,7 g, 3,6 mmol 1) v toluenu (50 ml) při teplotě 0 °C bylo přidáno 0,2 M tetrahydrofuranového roztoku 4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenylmagneziumbromidu (připraveného zodpovídajícího bromobenzenu a hořčíkových štěpin, katalyzovaného jódem v tetrahydrofuranu, 45,3 ml, 9,1 mmol). Směs byla ponechána se ohřát na teplotu okolí a míchána po dobu 14 hodin. Po propláchnutí vodou byla směs extrahována třikrát v methylenchloridu a organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Zbytek byl čištěn chromatografií (silikagel, hexan- 4:1 hexan:ethylacetát) což dalo 2,6 g (126%) částečně purifíkovaného silylovaného produktu.
Do roztoku částečně purifíkovaného produktu (2,6 g, 3,6 mmol) v tetrahydrofuranu (40 ml) byl přidán 1,0 M THF roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu (TBAF) (5,0 ml, 5,0 mmol). Roztok byl míchán při teplotě okolí po 10 minut, potom zředěn ethylacetátem a promýván pětkrát nasyceným kyselým uhličitanem sodným a solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Zbytek byl čištěn chromatografií (silikagel, 1:1 hexan.ethylacetát, 0-10% methanol, 0,1% hydroxid amonný), což dalo 0,93 g (56%) 9-hydroxy-6-[4-[2-(lpiperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě bělavé pevné látky: ’H NMR (300 MHz) δ 6,7-7,4 (m, 12H), 4,02 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,41 (m, 4H), 1,49 (m, 4H), 1,37 (m, 2H); IR (KBr) 2934, 1609 cm’1; MS (FD) m/e 457 (M+); HRMS (FAB) m/e vypočteno pro C28H28NO3S (MH+): 458,1790. Naměřeno: 458,1798; Vypočtená anal. C28H27NO3S-O,5H2O·. C, 72,08; H, 6,05; N, 3,00. Naměřeno: C, 71,97; H, 6,04; N, 3,06.
Příprava 12f
3-(t-buty ldimethylsily l)oxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-on
-44CZ 286236 B6
TBDMSO
Do mechanicky míchané suspenze 3-methoxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu (Joumal of Organic Chemistry. 40:3169 (1975)) (1,0 g, 3,6 mmol) v methylenchloridu (30 ml) byl přidán ethanthiol (1,4 ml, 18,0 mmol), následovaný chloridem hlinitým (1,6 g, 12 mmol), přidávaným po částech. Reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 1,5 hodiny, potom ochlazena na 0 °C a opatrně proplachována tetrahydrofuranem (THF), následovaným nasyceným kyselým uhličitanem sodným. Směs byla zředěna tetrahydrofuranem, vrstvy separovány a vodná vrstva byla několikrát promývána tetrahydrofuranem. Spojené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný) a koncentrovány, čímž se získal surový fenol, který byl používán bez dalšího čištění.
Surový produkt byl suspendován v methylenchloridu (30 ml) a bylo na něj působeno triethylaminem (2,5 ml, 18 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridem (1,3 g, 9,0 mmol). Směs byla míchána při teplotě okolí po celou noc, během níž se stala homogenní. Po zředění hexanem byla směs dvakrát promývána solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný), koncentrována a reziduum bylo čištěno chromatografií (silikagel, hexan-4:l hexan.ethylacetát), což dalo 0,95 g (69 %) 3-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-onu ve formě bělavé pevné látky: ’HNMR (300 MHz, aceton-dó) 88,57 (d, J = 7,8Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,5-7,7 (m, 2H), 6,99 (m, 2H), 1,03 (s, 9H), 0,33 (s, 6H); IR (CHClj) 1716 cm'1; MS (FD) m/e 382 (M+); Vypočtená anal. C21H22O3SSi: C, 65,93; H, 5,80. Naměřeno: C, 66,11; H, 5,83.
Příprava 12g
3-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran-6-ol
Roztok produktu z přípravy 12f (5,0 g, 13 mmol) v toluenu (700 ml) byl ochlazen na -78 °C a bylo na něj po kapkách působeno 1,0 M toluenovým roztokem diizobutylaluminiumhydridu (15,7 ml, 15,7 mmol), který byl přidáván rychlostí, umožňující udržet vnitřní teplotu pod -70 °C. Směs byla míchána po dobu přibližně 4 hodin, potom proplachována methanolem (20 ml), 10% vodnou kyselinou citrónovou (200 ml) a vodou. Vodná vrstva byla extrahována třikrát methylenchloridem (800 ml). Organická vrstva byla sušena (síran sodný), koncentrována a zbytek byl chromatografován (silikagel, gradient od 2 % ethylacetátu hexanu do 20 % ethylacetátu
-45CZ 286236 B6 v hexanu) což dalo 1,7 g (45%) 3-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran-6-olu ve formě bělavé pevné látky: *H NMR (300 MHz) δ 7,96 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,3-7,8 (m, 3H), 6,91 (m, 1H), 6,62 (m, 2H), 1,00 (s, 9H), 0,26 (s, 6H); IR (CHClj) 2958, 2932, 2861, 1616, 1594 cm’1; MS (FD) m/e 384 (M+); Vypočtená anal. C21H24O3SSÍ: C, 65,59; H, 6,29. Naměřeno: C, 65,31; H, 6,18.
Příprava 12h
3-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-fenoxy-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran
TBDMSO
Produkt přípravy 12g (0,09 g, 0,24 mmol) a fenol (0,25 g, 2,6 mmol) byly rozpuštěny v chlorobenzenu (10 ml) a směs byla míchána po dobu 3 hodin při teplotě 100 °C. Směs byla míchána a reziduum bylo znovu rozpuštěno v chlorobenzenu a opětovně koncentrováno ve vakuu při teplotě přibližně 70 °C. Reziduum potom bylo rozpuštěno v diethyletheru, promýváno pětkrát nasyceným uhličitanem sodným, vodou a solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována, což dalo 0,11 g (100%) 3-(t-butyldimethylsilyl)oxy-6-fenoxy-6-H-[lJbenzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě bělavé pevné látky, která byla používána bez dalšího čištění: *H NMR spektrum (300 MHz) bylo v souladu se strukturou látky.
Příklad lOd
3-hydroxy-6-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran
Do roztoku produktu přípravy 12h (0,28 g, 0,61 mmol) v toluenu (20 ml) při teplotě 0 °C byl přidán 0,2 M tetrahydrofuranový roztok 4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenylmagneziumbromidu (připravený zodpovídajícího bromobenzenu a hořčíkových štěpin, katalyzovaných jódem v tetrahydrofuranu, 7,6 ml, 1,5 mmol). Směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána
-46CZ 286236 B6 po dobu jedné hodiny. Po propláchnutí vodou byla směs šestkrát extrahována v methylenchloridu a organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Zbytek byl čištěn chromatografií (silikagel, 4:11:1 hexan:ethylacetát), což dalo 0,41 g (119 %) částečně purifikovaného silylovaného produktu.
Do roztoku částečně purifikovaného produktu (0,41 g, 0,72 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) byl přidán 1,0 M tetrahydrofuranový roztok tetra-n-butylamoniumfluoridu (TBAF) (0,67 ml, 0,67 mmol). Roztok byl míchán při teplotě okolí po dobu 10 minut, potom zředěn ethylacetátem a promýván třikrát nasyceným kyselým uhličitanem sodným a solankou. Organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Zbytek byl rozetřen v methylenchloridu a precipitát byl filtrován a promýván v methylenchloridu, což dalo 0,23 g (82%) 3-hydroxy-6-[4-[2-(lpiperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě bílé práškovité pevné látky. Pevná látka byla suspendována v methanolu a po kapkách byla přidávána kyselina trifluoroctová, dokud všechen materiál nevstoupil do roztoku, nerozpustný materiál pak byl odfiltrován a matečná tekutina byla koncentrována, což dalo 0,28 g (80 %) TFA soli ve formě naoranžovělé pevné látky: ]H NMR (300 MHz) δ 7,95 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,2-7,3 (m, 5H), 6,90 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,76 (s, 1H), 6,51 (dd, J = 2,2, 8,2 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,44 (t, J = 4,9Hz, 2H), 3,5-3,7 (m, 4H), 3,03,2 (m, 2H), 1,7-2,0 (m, 5H), 1,4-1,7 (m, 1H); IR(CHC13) 3271, 3022, 3009, 1670, 1610 cm'1; MS (FD) m/e 457 (M+); HRMS (FAB) m/e vypočteno pro C28H28NO3S (MH+): 458,1790. Naměřeno: 458,1781; Vypočtená anal. C28H2NO3SCF3COOH1,2H2O: C, 60,69; H, 5,12; N, 2,36. Naměřeno: c, 60,62; H, 4,82; N, 2,40.
Příprava 18a
2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5H-benzo[b]nafito[2,l-d]pyran-5-on
Směs produktu přípravy 10 (7,0 g, 13,8 mmol) a 2,3-dichloro-5,6-dikyano-l,4—benzochinonu (DDQ) (3,3 g, 14,5 mmol) v dichloroethanu (100 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po jednu noc, což indukovalo vytváření precipitátu. Směs byla filtrována horká, precipitát byl promýván v methylenchloridu a matečná tekutina byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozdělen mezi směs hexan:ether a vodu a organická vrstva byla sušena (magnézium sulfát), koncentrována a rekrystalizována z hexanu, což dalo 5,5 g (79 %) 2,8-bis[(terc—butyldimethylsilyl)oxy]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran-5-onu ve formě světle hnědé pevné látky, teplota tání 154 až 156 °C: ’HNMR (300 MHz, CDC13) δ 9,69 (d, J = 9,4Hz), 8,80 (s, 2H), 8,01 (d, J = 9,5 Hz), 7,34 (dd, J = 9,3,2,5 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,90 (m, 2H), 1,05 (s, 9H), 1,03 (s, 9H), 0,29 (s, 12H); IR (CHC13) 1711, 1622, 1604 cm'1; MS (FD) m/e 506 (M+); Vypočtená anal. C29H38O4Si2: C, 68,72; H, 7,57. Naměřeno: C, 68,93; H, 7,36.
-47CZ 286236 B6
Příprava 18b
2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran-5-ol
Způsobem, popsaným v přípravě 4, byl produkt přípravy 18a (5,0 g, 9,9 mmol) ponechán reagovat s 1,0 M diizobutylaluminiumhydridem v toluenu (11,9 ml, 11,9 mmol), což dalo po rekrystalizaci ze směsi hexan:ether, 4,14 g (82%) 2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5Hbenzo[b]nafto[2,l-d]pyran-5-olu ve formě bílé pevné látky, teplota tání 188 až 190 °C: *HNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, J = 9,lHz, 1H), 7,86 (d, J = 8,8Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,18 (dd, J = 9,0, 2,4 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,67 (m, 2H), 3,24 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 1,04 (s, 9H), 1,02 (s, 9H), 0,27 (s, 6H), 0,27 (s, 6H); IR (CHC13) 3574 cm’1; MS (FD) m/e 508 (M+); Vypočtená anal. C29H38O4Si2: C, 68,44; H, 7,94. Naměřeno: C, 68,63; H, 8,11.
Příprava 18c
2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-fenoxy-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran
Způsobem, popsaným v přípravě 5, byl produkt přípravy 18b (3,5 g, 6,88 mmol) ponechán reagovat s fenolem (3,2 g, 34,3 mmol), což dalo 3,82 g (95 %) 2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5-fenoxy-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyranu ve formě amorfní bílé pevné látky, která byla používána bez dalšího čištění: *H NMR (300 MHz) δ 7,9-8,1 (m, 4H), 7,61 (s, 1H), 7,3-7,5 (m, 3H), 7,2-7,3 (m, 3H), 7,11 (t, J = 7,3Hz, 1H), 6,74 (dd, J= 8,5, 2,3 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 2,4Hz, 1H), 1,03 (s, 9H), 0,99 (s, 9H), 0,29 (s, 6H), 0,24 (s, 6H); nCNMR (75 MHz) δ 157,9, 157,6, 154,3, 151,8, 135,1, 130,4, 130,1, 126,4, 125,8, 125,1, 124,9, 123,9, 123,6, 123,1,
121,1, 118,5, 116,7, 116,2, 115,7, 110,0, 94,8, 26,0, 25,9, 18,8, 18,7, -4,3, -4,4; MS (FD) m/e 584 (M+).
-48CZ 286236 B6
Příprava 18d
2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto- [2,l-d]pyran
18c (3,5 g, 6,0 mmol) ponechán
Způsobem, popsaným v přípravě 6, byl produkt přípravy reagovat s 0,2 M tetrahydrofuranovým roztok 4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenylmagneziumbromidu, což dalo po chromatografii (silikagel, 3:2 hexan:ethylacetát, 0,1% hydroxidu amonného), 3,5 g (84 %) 2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyranu ve formě bezbarvé gumovité pevné látky: *HNMR (300 MHz) δ 7,97 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,10 (m, 3H), 7,02 (s, 1H), 6,73 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,53 (dd, J = 8,3, 2,4 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,95 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,58 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,38 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H), 1,00 (s, 9H), 0,94 (s, 9H), 0,25 (S, 6H), 0,19 (S, 6H); 13CNMR (75 MHz) δ 159,8, 1,57,6, 154,1, 154,0, 135,0, 132,2, 130,1, 128,6, 127,3, 126,3,
126,2, 125,6, 124,7, 123,4, 121,6, 118,0, 116,5, 115,0, 114,5, 110,3, 76,0, 66,8, 58,5, 55,6, 26,8, 26,0, 26,0, 25,0, 18,7, 25 18,7, -4,2, -4,3; MS (FD) m/e 696 (M+); Vypočtená anal. C42H57NO4SÍ2: C, 72,46; H, 8,27; N, 2,01. Naměřeno: C, 72,53; H, 8,49; N, 2,08.
Příklad 1 lb
2,8-dihydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran
Způsobem, popsaným v příkladě 1, byl produkt přípravy 18d (3,4 g, 4,9 mmol) ponechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (24,4 mmol) což dalo po chromatografii (silikagel, 1:1 hexan: ethylacetát, 10 % methanolu, 0,1 % hydroxidu amonného) a rozetření s etherem 2,2 g (96 %) 2,8-dihydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyranu ve formě bílé pevné látky, teplota tání 158 až 161 °C: ’H NMR (300 MHz) δ 7,89 (d, J = 8,7 Hz,
-49CZ 286236 B6
1H), 7,77 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,68 (m, 2H), 7,23 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,09 (m, 3H), 6,97 (s, 1H), 6,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 6,49 (dd, J= 8,3, 2,4 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 2,3Hz, 1H), 3,95 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 6,0Hz, 2H), 2,40 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); 13CNMR(75 MHz) 8159,5, 159,5, 155,8, 153,9, 135,0, 132,4, 130,1, 128,0, 126,7, 125,6, 125,4,
125,3, 124,7, 121,4, 119,9, 116,1, 114,8, 111,0, 110,1, 105,5, 75,8, 66,1, 58,3, 55,3, 26,3, 24,7; IR (KBr) 2934 cm-1; MS (FD) m/e 468 (MH+); Vypočtená anal. C3oH29N04-H20: C, 74,19; H, 6,45; N, 2,88. Naměřeno: C, 74,13; H, 6,45; N, 2,88.
Příprava 22a
2,8-dimethoxy-5-[4-[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
Směs produktu přípravy 22 (100 mg, 0,19 mmol) a 2,3-dichloro-5,6-dikyano-l,4-benzochinonu (DDQ) (47 mg, 0,21 mmol) v dichloroethanu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin, což indukovalo tvorbu precipitátu. Směs byla ochlazena na pokojovou teplotu, filtrována a filtrát byl zředěn CH2C12 (70 ml), promýván 1 N hydroxidem sodným (2 x 70 ml), sušen (síran sodný) a koncentrován, což dalo 98 mg (98 %) 2,8-dimethoxy-5-[4-[(tercbutyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě bílé krystalické pevné látky, teplota tání 211 až 213 °C: ]H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,21 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,37 (dd, J = 9,0, 2,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,66 (dd, J= 9,7, 2,8 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 1,02 (S, 9H), 0,25 (s, 6H); i3CNMR (75 MHz, CDC13) δ 163,1, 159,2, 156,9, 154,9, 137,3, 136,3, 133,8, 129,8, 128,3,
127,4, 126,4, 123,9, 123,7, 122,9, 120,7, 120,5, 119,5, 116,5, 115,7, 109,1, 106,9, 55,5, 55,1,
25,7, 18,3, -4,2; IR (CHC13) 1646, 1619 cm'1; MS (FD) m/e 511 (M+); Vypočtená anal. C31H33NO4SÍ: C, 72,75; H, 6,51; N, 2,74. Naměřeno: C, 72,57; H, 6,50; N, 2,83.
Příprava 23 a
2,8-dimethoxy-5-(4—hydroxyfenyl)-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
-50CZ 286236 B6
Produkt přípravy 22a (6,8 g, 13,3 mmol) byl rozpuštěn ve směsi 1:1 acetonitrikmethylenchlorid (200 ml), bylo na něj působeno směsí fluorovodíku a pyridinu (80 ml) po dobu jedné hodiny. Směs byla zředěna solankou (500 ml) a extrahována tetrahydrofuranem (3 x 300 ml). Sloučené organické vrstvy byly neutralizovány nasyceným kyselým uhličitanem sodným a výsledná vodná vrstva byla promývána tetrahydrofuranem (2 x 500 ml). Všechny vodné vrstvy byly potom sloučeny a promývány s THF (500 ml), pak byly sloučené organické vrstvy sušeny (síran sodný) a koncentrovány a pevné reziduum bylo promýváno acetonem, což dalo 5,27 g (100%) 2,8dimethoxy-5-(4-hydroxyfenyl)-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu, teplota tání 310 °C: ’HNMR (300 MHz, DMSO-de) δ 9,79 (bs, 1H), 8,52 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,42 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,72 (m, 2H), 7,47 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 7,31 (d, 2,1 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,68 (dd, J = 9,3, 2,6 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,79 (s, 3H); MS (FD) m/e 397 (M+).
Příklad 12a
2,8-hydroxy-5-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-6on
Způsobem, popsaným v příkladě 14, byl produkt příkladu 12 (310 mg, 0,61 mmol) ponechán reagovat s ethanthiolem (189 mg, 3,1 mmol) a chloridem hlinitým (611 mg, 4,6 mmol), což dalo po radiální chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 10-20 % methanolu, pod čpavkovou atmosférou) 237 mg (81 %) 2,8-hydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě žluté pěny, která krystalizovala po rozetření v etheru, teplota tání 166-174 °C: 'HNMR (300 MHz, methanol-d4) δ 7,80 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 8,9, 2,7 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,97 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,66 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 6,21 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 4,16 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,86 (s, 4H), 2,81 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,59 (m, 4H), 1,6-1,7 (m, 4H), 1,41,6 (m, 2H); IR (CHCb) 3673, 1637, 1602 cm-1; MS (FD) m/e 482 (M+); Vypočtená anal. C30H30N204.H2O: C, 71,96; H, 6,46; N, 5,60. Naměřeno: C, 71,68; H, 6,63; N, 5,46.
-51CZ 286236 B6
Příklad 12b
2,8-dimethoxy-5-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthridin
Na roztok produktu z příkladu 12 (350 mg, 0,69 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) bylo 10 působeno hydridem hlinitolithným (129 mg, 3,4 mmol), což indukovalo mírnou exotermii. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána po dobu dvou hodin, potom rychle zahřáta na teplotu zpětného toku, ochlazena, propláchnuta ethylacetátem (50 ml), následovaným chloridem amonným (50 ml). Vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (2 x 50 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a čištěny radiální chromatografíí 15 (silikagel, 1:1 hexamethylacetát, 5 % methanolu, pod čpavkovou atmosférou), což dalo 248 mg (64 %) 2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[cJfenanthridinu ve formě žluté pěny: ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,79 (m, 3H), 6,72 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,65 (d, 9,0 Hz, 2H), 6,58 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 6,52 (dd, J = 8,6, 2,6 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 3,94 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,74 (s, 20 3H), 3,74 (s, 3H), 2,96 (dd, J = 8,3, 5,6, 2H), 2,81 (dd, J = 8,3, 5,9 Hz, 2H), 2,66 (t, J = 6,1 Hz,
2H), 2,43 (m, 4H), 1,5-1,6 (m, 4H), 1,3-1,5 (m, 2H); 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 158,5, 158,3, 153,3, 141,7, 138,4, 134,6, 132,3, 126,6, 126,2, 125,3, 122,9, 121,7, 120,5, 114,9, 113,4, 112,3, 111,2, 111,0, 65,8, 57,8, 55,6, 55,2, 55,1, 54,8, 29,0, 25,7, 24,0, 22,2; IR (CHC13) 1610, 1506 cm’1; MS (FD) m/e 496 (M+); Vypočtená anal. C32H36N2O3: C, 77,37; H, 7,32; N, 5,64. 25 Naměřeno: C, 77,25; H, 7,12; N, 5,75.
Příklad 12c
2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
-52CZ 286236 B6
Způsobem, popsaným v příkladě 12, byl produkt přípravy 23a (4,8 g, 12,1 mmol), trifenylfosfin (6,3 g, 24,2 mmol) a l-(2-hydroxyethyl)piperidin (3,9 g, 30,3 mmol) ponechány reagovat s diethyldiazodikarboxylátem (DEAD) (4,2 g, 24,2 mmol) což dalo po chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 5-20% methanolu, 0,1% hydroxidu amonného) a rekrystalizaci z ethylacetátu 5,14 g (84%) 2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě bělavé pevné látky, teplota tání 176 °C: 'HNMR (300 MHz, CDCIj) 8 8,25 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,40 (dd, J = 9,0, 2,8 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,10 (d, J = 2,7Hz, 1H), 6,99 (d, J= 8,9 Hz, 2H), 6,70 (dd, J= 9,6, 2,7 Hz, 1H), 4,16 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 2,81 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,53 (m, 4H), 1,5-1,7 (m, 4H), 1,41,5 (m, 2H); 13CNMR (75 MHz, CDC13) δ 163,2, 159,2, 157,9, 156,9, 136,3, 135,7,
133,7, 129,7, 128,3, 127,3, 126,4, 123,9, 123,7, 122,8, 120,5, 119,4, 116,6, 115,7, 115,1, 109,1, 106,9, 66,2, 57,8, 55,5, 55,1, 55,0, 25,9, 24,1; IR (CHC13) 1647, 1619 cm-1; MS (FD) m/e 508 (M+); Vypočtená anal. C32H32N2O4: C, 75,56; H, 6,35; N, 5,51. Naměřeno: C, 75,58; H, 6,28; N, 5,77.
Příklad 12d
2,8-hydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
Způsobem, popsaným v příkladě 14, byl produkt příkladu 12a (500 mg, 0,98 mmol) ponechán reagovat s ethanthiolem (304 mg, 4,9 mmol) a chloridem hlinitým (987 mg, 7,4 mmol), což dalo po chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 10-30% methanolu, 0,1% hydroxidu amonného) a krystalizaci z methanolu 397 mg (84 %) 2,8-hydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě bílého prášku. Analytický vzorek byl rekrystalizován ze směsi methanol/CHCl3, teplota tání 227 až 232 °C: ’HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,15 (bs, 1H), 9,82 (bs, 1H), 8,43 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 9,2Hz, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,0-7,3 (m, 6H), 6,58 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,13 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,69 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 2,46 (m, 4H), 1,3-1,6 (m, 6H); 13CNMR (75 MHz, DMF-d7/aceton-dí/CDCl3) δ 162,2, 158,4, 157,3, 155,9, 137,4, 137,2, 133,9, 130,8, 127,6, 127,5, 126,9, 125,0, 124,0, 123,1, 121,1, 119,0, 117,3, 115,7, 115,5, 112,8, 110,6, 63,4, 55,8, 53,6, 23,2, 22,1; IR (KBr) 3303, 1643, 1602 cm’1; MS (FD) m/e 480 (M+); Vypočtená anal. C3oH28N204-0,5H20: C, 73,59; H, 5,98; N, 5,72. Naměřeno: C, 73,72; H, 5,88; N, 5,71.
-53CZ 286236 B6
Příklad 13
2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthridin
Na roztok produktu z příkladu 12a (3,82 g, 7,51 mmol) v tetrahydrofuranu (250 ml) bylo působeno hydridem hlinitolithným (1,43 g, 37,5 mmol), což vedlo k mírné exotermii. Poté, když exotermie ustala, byla směs ohřívána na teplotu zpětného toku po jednu noc, ochlazena na teplotu okolí, proplachována opatrně ethylacetátem (200 ml), následovaným 1 N hydroxidem sodným (200 ml). Vrstvy byly separovány a vodná vrstva extrahována ethylacetátem (2 x 200 ml) a sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (200 ml), sušeny (síran sodný) a koncentrovány. Reziduum bylo rekrystalizováno ze směsi hexan :ethylacetát, což dalo 3,24 g (87 %) 2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthridinu ve formě šedobílé pevné látky, teplota tání 136 až 137 °C: ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,91 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,61 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,95 (dd, J= 9,2, 2,6, 1H), 6,91 (dd, J= 8,5, 2,6 Hz, 1H), 6,6-6,8 (m, 5H), 4,75 (s, 2H), 3,95 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 2,68 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,44 (m, 4H), 1,5-1,7 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 2H); 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 159,1, 157,3, 153,4, 143,5, 137,9, 135,0,
134,1, 126,5, 125,6, 124,9, 124,2, 123,8, 123,7, 122,4, 121,7, 118,1, 114,9, 113,8, 111,2, 106,4,
65,8, 57,8, 55,8, 55,2, 54,8, 25,7, 24,0; IR (CHC13) 1506 cm’1; MS (FD) m/e 494 (M+); Vypočtená anal. C32H34N2O3: C 77,70; H, 6,94; N, 5,66. Naměřeno: C, 77,54; H, 6,99; N, 5,63.
Příprava 11
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c] [ljbenzopyran
-54CZ 286236 B6
Způsobem, popsaným v přípravě 8, byl produkt přípravy 7 (500 mg, 0,85 mmol), trifenylfosfin (892 mg, 3,4 mmol) a N,N-diethylethanolamin (496 mg, 438 ml, 4,23 mmol) ponechán reagovat s diethylazodíkarboxylátem (DEAD) (592 mg, 535 ml, 3,4 mmol) v toluenu (35 ml). Chromatografie (silikagel, 3:1 hexan:ethylacetát, 0,1 % hydroxidu amonného) dala 540 mg (92%) 3,9bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-(2-diethyIaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu, bezbarvého oleje: ‘HNMR (300 MHz) δ 7,46 (d, J 2,5 Hz, 1H), 7,3-7,4 (m, 4H), 6,86 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 6,51 (dd, 3 = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 6,37 (d, 2,2 Hz, 1H), 3,98 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,77 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,54 (q, J = 7,1 Hz, 4H), 0,99 (s, 9H), 0,97 (t, J = 7,0 Hz, 6K), 0,96 (s, 9H), 0,22 (s, 6H), 0,21 (s, 6K); 13C NMR (125 MHz) δ 160,0, 157,5,
153.7, 153,3, 140,8, 132,6, 132,3, 131,1, 129,7, 125,7, 124,6, 122,5, 119,2, 115,0, 114,2, 113,9,
113.7, 109,3, 78,1, 67,2, 52,3, 48,1, 26,0, 26,0, 18,6, 12,5,-4,3; MS (FD+)m/e 689 (M+).
Příprava 12
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(l-morfolinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 Jbenzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Způsobem, popsaným v přípravě 8, byl produkt přípravy 7 (500 mg, 0,85 mmol), trifenylfosfin (892 mg, 3,4 mmol), a l-(2-hydroxyethyl)morfolin (555 mg, 512 ml, 4,23 mmol) ponechán reagovat s diethylazodíkarboxylátem (DEAD) (592 mg, 535 ml, 3,4 mmol) v toluenu (35 ml). Chromatografíe (silikagel, 3:1 hexan.ethylacetát, 0,1% hydroxidu amonného) dala 569 mg (95 %) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(l-morfolinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyranu ve formě růžové pěny: lHNMR (300 MHz) δ 7,46 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,2-7,3 (m, 4H), 6,86 (m, 3H), 6,70 (s, 1H), 6,51 (dd, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 6,37 (d, 2,7 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,57 (t, J = 4,5 Hz, 2H), 2,69 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,47 (m, 4H), 0,99 (s, 9H), 0,96 (s, 9H), 0,22 (s, 6H), 0,21 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 159,8, 157,6, 153,7, 153,2, 140,8, 132,5, 132,5, 131,1, 129,7, 125,8, 124,6, 122,5, 119,2, 115,1, 114,2, 114,0, 113,8, 109,3, 78,2, 67,0, 66,2, 57,9, 54,6, 26,0, 25,9, 18,6, -4,3; MS (FD+) m/e 703 (M+).
-55CZ 286236 B6
Příprava 13
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-benzofuro[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran—6-on
Kumestrol (10 g, 37,3 mmol) byl suspendován v methylenchloridu (600 ml), ochlazen na 0 °C a bylo na něj působeno triethylaminem (24,9 g, 34,3 ml, 246 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridem (24,7 g, 164 mmol). Směs byla zahřívána na teplotu okolí a míchána po jednu noc, během níž se pomalu stala homogenní. Po zředění v etheru (800 ml) byla směs promývána solankou (800 ml) a vodná vrstva byla extrahována etherem (500 ml). Sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný), koncentrovány a reziduum rekrystalizováno z hexanu, což dalo 14,2 g (77 %) 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-benzofuro[3,2-c][l]benzopyran-6-onu ve formě bílého prášku, teplota tání 118 až 119°C: ’HNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,90 (d, J = 8,5Hz, 1H), 7,82 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,10 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 6,97 (m, 2H), 6,90 (dd, J = 8,5, 2,0 Hz, 1H), 1,03 (s, 9H), 1,02 (S, 9H), 0,28 (s, 6H), 0,25 (s, 6H); IR (CHC13) 1733 cm MS (FD+) m/e 496 (M+); Vypočtená anal. C27H36O5SÍ2: C 65,27; H, 7,32. Naměřeno: C, 65,57; H, 7,26.
Příprava 14
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-benzofuro[3,2-c][l]benzopyran-6-ol
Způsobem, popsaným v přípravě 4, byl produkt přípravy 13 (5,0 g, 10,0 mmol) ponechán reagovat s 1,0 M toluenovým roztokem diizobutylaluminiumhydridu (12,0 ml, 12,0 mmol) v toluenu (450 ml). Rekrystalizace z hexanu dala 1,26 g 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxyJ6-H-benzofuro[3,2-c][l] benzopyran-6-olu ve formě směsi sjeho aldehydovým tautomerem. Chromatografie (silikagel, 2-15 % ethylacetát/hexan) matečné tekutiny dala 1,37 g výchozího materiálu (čistota přibližně 67 %) a po rekrystalizaci bylo získáno 580 mg 3,9-bis[(terc
-56CZ 286236 B6 butyldimethylsilyl)oxy]-6-H-benzofuro[3,2-c][l]benzopyran-6-olu s celkovým ziskem 1,85 g (37%) tautomemí směsi: *HNMR (300 MHz) δ 10,15 (s, 0,5H), 9,2 (br s, 0,5H), 7,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,50 (m, 0,5H), 7,09 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,6-6,7 (m, 2H), 6,55 (m, 0,5H), 1,01 (s, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,27 (s, 6H), 0,25 (s, 6H); IR (CHC13) 3550, 1663 cm'1; MS (FD) m/e 499 (M+); Vypočtená anal. C27H38O5SÍ2: C, 65,02; H, 7,69. Naměřeno: C, 65,32; H, 7,76.
Příprava 15
3,9-bis [(terc-butyldimethylsilyI)oxy]-6-fenoxy-6-H-benzofuro [3,2-c] [ 1 jbenzopyran
Způsobem, popsaným v přípravě 5, byl produkt přípravy 14 (464 mg, 0,93 mmol) ponechán reagovat s fenolem (1,05 g, 11,2 mmol) v chlorobenzenu (25 ml), obsahujícím bezvodý síran hořečnatý (1,0 g), což dalo 467 mg (87%) surového 3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6fenoxy-6-H-benzofuro[3,2-c][l]benzopyranu ve formě nestabilní růžové pěny, která byla použita bez dalšího čištění: ’H NMR (300 MHz) δ 7,1-7,7 (m, 8H) 6,6-6,9 (m, 3H), 1,01 (s, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,28 (s, 6H), 0,25 (s, 6H).
Příprava 16
3,9-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-benzofuro[3,2-c] [ 1 jbenzopyran
-57CZ 286236 B6
Způsobem, popsaným v přípravě 6, byl produkt přípravy 15 (467 mg, 0,81 mmol) ponechán reagovat s 0,5M tetrahydrofuranového roztoku 4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenylmagneziumbromidu (2,6 ml, 1,62 mmol) v toluenu (15 ml). Radiální chromatografie (silikagel, 2:1 hexan:ethylacetát, 1 % methanolu pod čpavkovou atmosférou) dala 500 mg (90 %) 3,9bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-benzofuro[3,2c][l]benzopyranu ve formě bezbarvé gumovité pevné látky: 'HNMR (300 MHz) δ 7,39 (m, 3H), 7,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,53 (dd, J = 8,2, 2,2 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,05 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,64 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,42 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H), 0,96 (s, 9H), 0,95 (s, 9H), 0,20 (s, 6H), 0,19 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz) δ 160,3, 158,0, 156,8, 155,5, 154,0,
148,2, 132,7, 129,8, 121,6, 121,1, 119,8, 117,3, 115,3, 113,8, 110,6, 109,8, 109,1, 103,8, 79,0,
66,9, 58,5, 55,6, 26,8, 26,0, 26,0, 25,0, 18,7, -4,3, —4,3; MS (FD) m/e 686 (M+); Vypočtená anal. C40H55NO5SÍ2: C, 70,03; H, 8,08; N, 2,04. Naměřeno: C, 70,28; H, 8,14; N, 2,08.
Příklad 11
3,9-dihydroxy-6-[4—[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-benzofuro[3,2-c][l Jbenzopyran
Způsobem, popsaným v příkladě 1, byl produkt přípravy 16 (520 mg, 0,76 mmol) ponechán reagovat s 1,0 M TBAF v tetrahydrofuranu (4,5 mmol), což dalo po radiální chromatografíi (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 10% methanolu, pod čpavkovou atmosférou) 292 mg (72%)
3,9-dihydroxy-6-[4-[2-( 1 -piperidinyl)ethoxy] fenyl]-6-H-benzofuro[3,2-c] [ 1 ] benzopyranu ve formě jasně červené pěny, která rekiystalizovala z chloridu uhličitého: ]HNMR (300 MHz, dimethylformamid-d7) δ 10,00 (br s, 1H), 9,83 (br s, 1H), 7,3-7,5 (m, 3H), 7,10 (s, 1H), 6,98 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,7-6,9 (m, 3H), 6,54 (dd, J = 8,1, 1,8 Hz, 1H), 6,42 (s, 1H), 4,10 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,67 (m, 2H), 2,44 (m, 4H), 1,4-1,6 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); 13CNMR (125 MHz, dimethylformamid-d7) δ 160,2, 159,9, 156,8, 156,4, 155,1, 147,2, 133,0, 129,5, 121,4, 119,5,
118,9, 115,1, 112,9, 109,2, 108,9, 108,3, 104,3, 98,7, 78,5, 66,5, 58,2, 55,3, 26,4, 24,6; IR(KBr) 3220 cm-1; HRMS (FAB+) m/e vypočtená pro C28H28NO5 458,1967 (MH+), naměřeno 458,1974; Vypočtená anal. C28H27NO4S.0,25CCLi: C 68,40; H, 5,49; N, 2,82. Naměřeno: C, 68,58; H, 5,81; N, 2,94.
-58CZ 286236 B6
Příprava 17
2-methoxy-8-hydroxy-l 1,12-dihydro-5H-benzo[b]nafto[2, l-d]pyran-5-on
OMe
Do roztoku l-karbomethoxy-6-methoxy-2-tetralonu (viz Colvin, Martin, a Shroot, Chemistry and Industry, 2130 (1966)) (18,0 g, 76,8 mmol) a resorcinolu (8,9 g, 80,7 mmol), míchaného při teplotě okolí v toluenu (450 ml), byl přidán po kapkách fosforoxychlorid (12,0 g, 7,3 ml, 18,3 mmol) a směs byla zahřívána na teplotu 80 °C po dobu 12 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla směs vlita do vody (500 ml), filtrována, precipitát byl promýván etherem. Filtrované vrstvy byly separovány, vodná vrstva byla extrahována ethylacetátem (3 x 500 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný) a koncentrovány.
Rekrystalizace rezidua zmethanolu dala 16,0 g 2-methoxy-8-hydroxy-ll,12-dihydro-5Hbenzo[b]nafto[2,l-d]pyran-5-onu ve formě žluté pevné látky, teplota tání 244-249 °C: *H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 10,55 (br s, 1H), 8,24 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,67,0 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 2,8-3,0 (m, 4H); I3CNMR (125 MHz, DMSO-<16) δ 170,3, 160,3,
158.3, 158,1, 153,3, 147,7, 137,5, 127,4, 125,8, 122,5, 114,5, 112,6, 112,4, 110,9, 101,4, 54,6,
26.3, 22,7; IR (KBr) 3250, 1676, 1618 cm’1; MS (FD+) m/e 294 (M+); Vypočtená anal. C18H,4O4: C 73,45; H, 4,80. Naměřeno: C, 73,15; H, 4,86.
Příprava 18
2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy] 11,12-dihydro-5H-benzo[b]nafto[2, l-d]pyran-5-on
Způsobem, popsaným v přípravě 3, byl produkt přípravy 17 (4,17 g, 14,2 mmol) ponechán reagovat s ethanthiolem (3,53 g, 3,95 ml, 56,8 mmol) a chloridem hlinitým (9,0 g, 67,5 mmol) v methylenchloridu (100 ml). Surový produkt byl dále ponechán reagovat s triethylaminem (8,6 g, 11,9 ml, 85,2 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridem (8,6 g, 56,8 mmol) v methylenchloridu (100 ml), což dalo po rekrystalizaci z hexanu 2,8-bis[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]ll,12-dihydro-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran-5-onu ve formě žluté pevné látky, teplota tání 145 až 147 °C: *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,37 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,72 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 2,8-3,0 (m, 4H), 1,00 (S, 18H), 0,27 (s, 6H),
-59CZ 286236 B6
0,24 (s, 6H); ,3CNMR (125 MHz, CDC13) δ 159,8, 158,6, 155,4, 153,9, 147,1, 137,7, 128,6, 125,0, 123,9, 119,0, 118,1, 117,5, 117,3, 113,8, 107,5, 27,4, 25,7, 25,6, 23,9, 18,3, 18,2, -4,3, —4,4; IR (CHClj) 1708,1602 cm’1; MS (FD) m/e 508 (M+).
Příprava 19
6-Methoxy-l -[(4-hydroxy)feny 1] imino-1,2,3,4-tetrahydronaftalen
Směs 6-methoxytetralonu (25 g, 142 mmol) a 4-hydroxyanilinu (16,3 g, 149 mmol) byla zahřívána na teplotu 180 °C pod proudem dusíku po dobu 2 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla pevná látka rekrystalizována ze směsi toluen/methanol: ’HNMR (300 MHz) δ 8,15 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,5-7,9 (m, 6H), 3,80 (s, 3H), 2,84 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,51 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,85 (m, 2H).
Příprava 20
6-Methoxy-l-[(4-hydroxy)fenyl]imino-l,2,3,4-tetrahydronaftalen
Produkt přípravy 19 (36 g, 134,7 mmol) byl rozpuštěn ve směsi 1:1 methylenchlorid:tetrahydrofuran (300 ml) a bylo na něj působeno triethylaminem (28,6 g, 39,4 ml, 283 mmol) a tercbutyldimethylsilylchloridem (30,5 g, 202 mmol). Směs byla míchána po jednu noc a byly přidány dodatečné dávky triethylaminu (6,8 g, 9,4 ml, 67 mmol) a terc-butyldimethylsilylchloridu (10,2 g, 67 mmol), aby bylo podporováno dokončení reakce. Po pěti hodinách byla směs zředěna etherem (500 ml), filtrována, koncentrována a reziduum bylo promýváno směsí hexan/ether. Extrakty byly filtrovány, koncentrovány a reziduum bylo čištěno rychlou chromatografií (silikagel, 18:1-10:1 hexan:ethylacetát), což dalo 21,0 g (41 %) 6-methoxy-l[(4-hydroxy)fenyl]imino-l,2,3,4—tetrahydronaftalenu ve formě světle žluté pěny: *HNMR
-60CZ 286236 B6 (300 MHz, CDC13) δ 8,32 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,86 (m, 3H), 6,73 (m, 3H), 3,92 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,96 (m, 2H), 1,05 (s, 9H), 0,26 (s, 6H).
Příprava 21
6-Methoxy-l-[N-[[4-(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-N-(2,5-dimethoxybenzoyl)]amino3,4-dihydronaftalen
Produkt přípravy 20 (10,2 g, 26,8 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (100 ml), ochlazen na 0 °C a bylo na něj působeno triethylaminem (3,8 g, 5,2 ml, 37,5 mmol), následovaným roztokem 2,5-dimethoxybenzoylchloridu (6,72 g, 33,5 mmol) v dichloromethanu (25 ml). Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po jednu noc, pak na ni bylo působeno dodatečným triethylaminem (1,4 g, 1,9 ml, 13,4 mmol) a kyselinou chlorovodíkovou (2,7 g, 13,4 mmol) a zahřívání pokračovalo po dalších 12 hodin. Po koncentraci ve vakuu bylo reziduum rozpuštěno v etheru (250 ml), promýváno solankou (250 ml), sušeno (sodium-94-sulfate) a koncentrováno. Čištění rezidua chromatografii (silikagel, 9:1-4:1 hexan:ethylacetát) dalo 10,3 g 6-methoxy-l[N-[[4-(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-N-(2,5-dimethoxybenzoyl)]amino 3,4-dihydronaftalenu ve formě bílé pěny: *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6,4-7,6 (br m, 11H), 5,83 (br s, 1H), 3,4-3,8 (br m, 9H), 1,9-3,0 (br m, 4H), 0,95 (2 br s, 9H), 0,14 (2 br s, 6H); IR (CHC13) 1651, 1607, 1507 cm’1; MS (FD) m/e 545 (M+); Vypočtená anal. C32H39NO5SÍ: C, 70,43; H, 7,20; N, 2,57. Naměřeno: C, 70,53; H, 7,26; N, 2,76.
Příprava 22
2,8-dimethoxy-5-[4-[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
-61CZ 286236 B6
Roztok produktu přípravy 21 (2,73 g, 5 mmol) v benzenu (250 ml) byl zbaven plynu pomocí tří cyklů zmražení /pumpování/ rozmrznutí a ozařováním 450 wattovou vnitřní rtuťovou lampou v křemíkové ponořovací jamce a pod přebytkem dusíku. Po 22 hodinách byla směs koncentrována a reziduum čištěno chromatografii (silikagel, 20:1 toluen:ether), což dalo 675 mg (26 %)
2,8-dimethoxy-5-[4-[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě žluté pěny. Analytický vzorek byl získán po krystalizaci ze směsi hexan/ether jako světle žluté krystaly, teplota tání 194-95 °C: !HNMR (300 MHz, CDC13) 7,94 (d, 2,8 Hz, 1H), 7,73 (d, 8,9 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 8,9, 2,8 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,67, (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,35 (dd, J = 8,8, 2,7 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 2,90 (s, 4H), 0,99 (s, 9H), 0,21 (s, 6H); 13CNMR (125 MHz, CDCI3) δ 162,6, 158,3, 157,7, 154,4, 139,7, 134,3, 133,6, 129,9, 129,8, 128,1, 126,2, 123,7, 123,2, 122,6, 119,8, 114,9, 112,7, 110,4, 108,6,55,3,54,8, 29,3, 25,5,23,5, 18,1,-4,4; IR (CHCI3) 1640, 1615, 1507 cm1; MS (FD+) m/e 513 (M+); Vypočtená anal. C31H35NO4S1: C, 72,48; H, 6,87; N, 2,73. Naměřeno: C, 72,66; H, 6,95; N, 2,86.
Příprava 23
2,8-dimethoxy-5-[4-[(terc-butyldimethylsilyl)oxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-6-on
Produkt přípravy 22 (790 mg, 1,5 mmol) byl rozpuštěn ve směsi 3:2 acetonitrikmethylenchlorid (50 ml) a bylo na něj působeno směsí fluorovodíku a pyridinu (10 ml) ve 2 dávkách v jednohodinových intervalech. Po dalším míchání po dobu jedné hodiny byla směs rozpuštěna v tetrahydrofuranu (100 ml) a filtrována a promývána methanolem a etherem. Filtráty byly rozpuštěny v tetrahydrofuranu (200 ml) a promývány solankou (200 ml) a nasyceným kyselým 30 uhličitanem sodným (200 ml). Sloučené vodné vrstvy byly extrahovány tetrahydrofuranem (100 ml) a pak byly sloučené organické vrstvy sušeny (síran sodný) a koncentrovány, což dalo 340 mg (57 %) žlutého prášku, teplota tání 250 až 275 °C, který byl používán bez dalšího čištění: 'HNMR (300 MHz, dimethylformamid-d7) δ 9,80 (br s, 1H), 7,91 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 1,9 Hz, 1), 7,44 (dd, J = 9,7, 1,9 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,8-7,0 (m, 4H), 6,47 (dd, 35 J = 8,7, 1,9 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 2,89 (m, 4H); MS (FD+) m/e 399 (M+).
-62CZ 286236 B6
Příklad 12
2,8-dimethoxy-5-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-
6—on
Do roztoku produktu přípravy 23 (340 mg, 0,85 mmol), trifenylfosfinu (446 mg, 1,7 mmol), a 1(2-hydroxyethyl)piperidinu (275 mg, 282 ml, 2,1 mmol) v tetrahydrofuranu (20 ml) byl přidán diethylazodikarboxylát (DEAD) (296 mg, 268 ml, 1,7 mmol) a směs byla míchána při teplotě okolí po jednu noc. Po koncentraci ve vakuu dala chromatografie (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 5-20 % methanolu, 0,1 % hydroxidu amonného) 338 mg (66 %) 2,8-dimethoxy-5-[4-[2(l-piperidinyl)ethoxy] feny 1]-11,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid-6-onu ve formě žluté pěny: 'HNMR (300 MHz) δ 7,82 (m, 2H), 7,35 (dd, J = 9,7, 2,9 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 9,7Hz,2H), 6,91 (d, J= 9,7 Hz, 2H), 6,82 (m, 1H), 6,70 (d, J = 9,7Hz, 1H), 6,38 (dd, J = 9,7, 1,9 Hz, 1H), 4,12 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,86 (m, 6H), 2,65 (m, 4H), 1,5-1,7 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 2H).
Příklad 13
2,8-dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyI]-6H-benzo[c]fenanthridin
Roztok produktu z příkladu 12 (753 mg, 1,47 mmol) byl rozpuštěn v dichloroethanu (20 ml), bylo na něj působeno DDQ (352 mg, 1,55 mmol) a byl zahříván na 80 °C. Po několika hodinách byla směs ochlazena na teplotu okolí, rozpuštěna v methylenchloridu (100 ml), promývána nasyceným uhličitanem sodným a organická vrstva byla sušena (síran sodný) a koncentrována. Reziduum bylo čištěno chromatografií (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 15% methanolu), což dalo 330 mg (44 %) žluté pevné látky.
-63CZ 286236 B6
Výše získaná pevná látka (309 mg, 0,61 mmol) byla rozpuštěna v tetrahydrofuranu (25 ml) a bylo na ni působeno hydridem hlinito-lithným (LAH) (115 mg, 3,05 mmol) při teplotě okolí.
Po 10 minutách byl přebytek LAH vymyt ethylacetátem (50 ml) a směs byla promývána nasyceným chloridem amonným (25 ml). Vodné vrstvy byly promyty ethylacetátem (25 ml) a sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (25 ml), sušeny (síran sodný), koncentrovány a podrobeny radiální chromatografií (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 5% methanolu, pod čpavkovou atmosférou). Produkt byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (10 ml) a bylo na něj působeno hydridem borito-sodným (69 mg, 1,82 mmol). Po jedné hodině byla směs propláchnuta nasyceným kyselým uhličitanem sodným a rozdělena mezi methylenchlorid a nasycený kyselý uhličitan sodný. Organická vrstva byla sušena (síran sodný), koncentrována a reziduum bylo používáno bez dalšího čištění: *H NMR (300 MHz) δ 7,99 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,92 (m, 2H), 6,81 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,63 (d, J = 9,1, 2H), 3,89 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 2,57 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,39 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H).
Příklad 14
2,8-dihydroxy-5-[4—[2-(l-piperidinyl)ethoxyfenyl]-6H-benzo[c]fenanthridin
Na roztok produktu z příkladu 13 (195 mg, 0,39 mmol) v methylenchloridu (25 ml) bylo působeno ethanthiolem (200 mg, 220 ml, 3,2 mmol) a chloridem hlinitým (320 mg, 2,4 mmol). Po míchání po dobu 4 hodiny při teplotě okolí byla směs opatrně propláchnuta THF (25 ml) a nasyceným kyselým uhličitanem sodným (25 ml). Vrstvy byly separovány, vodná vrstva byla extrahována tetrahydrofuranem (25 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny (síran sodný) a koncentrovány. Reziduum bylo čištěno radiální chromatografií (silikagel, 1:1 hexan:ethylacetát, 10-20% methanolu, pod čpavkovou atmosférou), což dalo 110 mg (60%) 2,8dihydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxyfenyl]-6H-benzo[c]fenanthridinu ve formě světle hnědé pěny. Analytický vzorek byl krystalizován z methanolu ve formě světle červené pevné látky: 'HNMR (300 MHz, dimethylformamid-d7) δ 9,92 (br s, 1H), 9,74 (br s, 1H), 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,98 (dd, J = 9,0, 2,1 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 6,73 (m, 5H), 3,92 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,38 (m, 4H), 1,4-1,5 (m, 4H), 1,3-1,4 (m, 2H); IR (KBr) 3560, 3490 cm1; MS (FD+) m/e 466 (M+); Vypočtená anal. C3oH3oN203-0,5H20: C, 75,75; H, 6,58; N, 5,89. Naměřeno: C, 75,82; H, 6,76; N, 5,95.
-64CZ 286236 B6
Příklad 15
2,8-dihydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)-ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran
Tato sloučenina byla připravena způsobem podle předcházejících příkladů.
V příkladech ilustrujících způsoby byl používán postmenopauzální model, ve kterém účinky byly určovány podle účinků různého působení na cirkulující lipidy.
Sedmdesát pět dní staré samice krys Sprague Dawley (hmotnost v rozmezí od 200 do 225 g) byly získány z Charles River Laboratories (Portage, MI). Zvířata byla buď bilaterálně ovariektomizována (OVX) nebo podrobena Sham chirurgické proceduře v Charles River Laboratories a potom po jednom týdnu odeslána. Po přijetí byla umístěna v kovových klecích ve skupinách po 3 nebo 4 v kleci a měla ad libitum přístup k potravě (obsah vápníku přibližně 0,5 %) a vodě po jeden týden. Teplota místnosti byla udržována na 22,2 °C ± 1,7 °C s minimální relativní vlhkostí 40 %. Fotoperioda v místnosti byla 12 hodin světlo a 12 hodin tma.
Dávkovači režim tkáňového souboru. Po jednom týdnu aklimatizace (a tudíž dva týdny postOVX) bylo započato s dávkováním testované sloučeniny. 17a-ethynyl estradiol nebo testovací sloučenina byly podávány orálně, pokud není uvedeno jinak v suspenzi v 1% karboxymethylcelulóze nebo rozpuštěny v 20% cyclodextrinu. Dávky byly zvířatům podávány denně po dobu 4 dní. Po dávkovacím režimu byla zvířata vážena, podrobena anestézii směsí ketamin: Xylazin (2:1, objemově) a krevní vzorky byly odebrány kardiální punkcí. Zvířata potom byla usmrcena asfyxií kysličníkem uhličitým, děloha byla odebrána incizi a byla určena hmotnost dělohy.
Cholesterolová analýza. Krevní vzorky byly ponechány koagulovat při teplotě okolí po dobu 2 hodin a získané sérum bylo získáno po centrifugaci po dobu 10 minut při 3000 otáčkách za minutu. Sérový cholesterol byl určen použitím diagnostické soupravy Boehringer Mannheim. Cholesterol byl rychle oxidován na cholest-4-en-3-on a peroxid vodíku. Peroxid vodíku byl potom ponechán reagovat s fenolem a 4-aminofenazonem v přítomnosti peroxidázy, což vytvořilo p-chinoniminové barvivo, které bylo určováno spektrofotometricky při 500 nm. Cholesterolová koncentrace potom byla vypočtena vzhledem k standardní křivce. Celý test byl proveden automaticky použitím Biomek Automated Workstation.
Děložní Eosinofil Peroxidázový (EPO) Test. Dělohy byly uchovávány při teplotě 4 °C až do okamžiku enzymatické analýzy. Potom byly dělohy homogenizovány v 50 objemech 50 mM Tris pufru (pH 8,0), obsahujícího 0,005 % Triton X-100. Po přidání 0,01 % peroxidu vodíku a 10 mM O-fenylendiaminu (konečná koncentrace) v pufru Tris, byl monitorován vzrůst absorpce po jednu minutu při 450 nm. Přítomnost eosonofilů v děloze je indikací estrogenického účinku sloučeniny. Maximální rychlost v 15 sekundovém intervalu byla určena na počáteční lineární části reakční křivky.
-65CZ 286236 B6
Zdroj sloučeniny: 17a -ethinyl estradiol byl získán od Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.
Vliv sloučenin obecného vzorce I a sloučenin obecného vzorce II na sérový cholesterol a určení aktivity agonista/neagonista.
Data, předložená v tabulce 1, uvedené níže, ukazují srovnávací výsledky u ovariektomizovaných krys, krys, které byly léčeny 17a -ethinyl estradiolem (EE2, orálně dostupná forma estrogenu) a u krys, které byly léčeny jistými sloučeninami podle předkládaného vynálezu. I když EE2 způsobil snížení sérového cholesterolu, pokud byl podáván orálně v dávkách 0,1 mg/kg/den, vyvolával také stimulující účinek na dělohu, takže EE2 děložní hmotnost byla podstatně větší než děložní hmotnost u ovariektomizovaných kontrolních zvířat. Děložní odezva na estrogen je dobře známa odborníkům.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu nejenom snižovaly množství sérového cholesterolu ve srovnání s kontrolními ovariektomizovanými zvířaty, ale vzrůst hmotnosti dělohy byl nepatrný nebo mírně nižší u většiny testovaných sloučenin. Ve srovnání s estrogenovými sloučeninami podle současného stavu techniky je účinek sloučenin podle předkládaného vynálezu, spočívající v redukci sérového cholesterolu bez nepříznivého ovlivnění hmotnosti dělohy, vzácný a žádoucí.
Jak je uvedeno v tabulce podané níže, estrogenicita byla také určována určováním odezvy eosinofilové infiltrace do dělohy. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu nezpůsobují vzrůst počtu pozorovaných eosinofilů u ovariektomizovaných krys, zatímco estradil způsobil podstatný a očekávaný vzrůst infiltrace eosinofilů.
Data podávaná v tabulce 1 podávají výsledky odezvy u 5 až 6 krys projeden způsob léčení.
Tabulka 1
Sloučenina Dávka mg/kg Dělož. hm. (% vzrůstu vs. OVX) Dělož. EPO (V. max) Sér. cholest. (% poklesu vs. OVX)
ee2 0,1 86,3 116,4 81,4
Příklad 1 0,1 25,3 7,8 72,8
1,0 9,2 3,0 51,0
10,0 5,9 2,1 54,6
Příklad 3 0,1 32,5 4,2 51,5
1,0 7,4 3,0 50,8
Příklad 4 0,1 10 3,3 62,6
1,0 15,3 3,3 48,2
Příklad 5 0,1 -5,1 4,5 -9
1,0 18,6 4,8 61,3
Příklad 6 0,1 23 4,2 -2,5
1,0 6,4 1,8 9,9
10,0 50,0 3,6 -11,4
Příklad 7 0,1 28,9 4,8 39,8
1,0 31,2 6,6 65,5
10,0 14,7 3,6 54,0
-66CZ 286236 B6
Tabulka 1 - pokračování
Sloučenina Dávka mg/kg Dělož. hm. (% vzrůstu vs. OVX) Dělož. EPO (V. max) Sér. cholest. (% poklesu vs. OVX)
Příklad 8 0,01 10,2 2,1 50,5
0,1 27,4 4,8 38,5
1,0 27,2 4,8 68,0
Příklad 9 0,1 77,8 52,2 40,1
109,1 83,1 54,7
94,6 75,0 65,2
Příklad 11 0,1 -8,8 2,7 17,4
1,0 3 4,2 30,9
10,0 -12,6 4,2 36,3
Příklad 14 0,01 -0,6 2,7 24,8
0,1 60,0 5,4 59,5
1,0 49,1 36,0 60,7
Navíc kromě prokázání účinku sloučenin podle předloženého vynálezu, zejména když jsou srovnány s estradiolem, uvedené hodnoty jasně demonstrují, že sloučeniny obecného vzorce I a Π nejsou estrogenová mimetika. K tomu nebyly u nich pozorovány zhoubné toxikologické účinky (přežívání).
Způsob testování osteoporózy
Podle níže popsaného obecného způsobu přípravy byla krysám látka podávána po 35 dní (6 krys v léčené skupině) a byly usmrceny oxidem uhličitým asfíxií 36. den. Den 35 časového rozmezí byl dostatečný pro vyvolání maximální redukce hustoty kosti, měřené jak je zde popsáno. V době usmrcení byla vyjmuta děloha, odpreparována od vnější tkáně a tekutý obsah byl odstraněn před určením hmotnosti, aby byl potvrzen nedostatek estrogenu, asociovaný s úplnou ovariektomií. Hmotnost dělohy byla obvykle redukována okolo 75 % v odezvě na ovariektomií. Dělohy byly poté umístěny do 10 % neutrálně pufrovaného formalinu pro další následné histologické analýzy.
Pravé stehenní kosti byly vyříznuty a digitalizovány RTG—paprsky a analyzovány programem NIH pro obrazovou analýzu (NIH obraz) u distální metafyzy. Proximální aspekt holenní kosti z těchto zvířat byl též skanován kvantitativní počítačovou tomografií.
V souladu s výše uvedenými procedurami byly sloučeniny podle předkládaného vynálezu aethinyl stradiol (EE2) v 20% hydroxypropyl b-cyclodextrinu orálně podávány testovaným zvířatům. Data, týkající se distantní metafyzy stehenní kosti a podaná v tabulkách 2 a 3, uvedených níže, jsou výsledky léčení pomocí sloučenin obecného vzorce I, porovnávané s testovanými zvířaty bez zásahu a ovariektomovanými zvířaty. Výsledky jsou podány v procentech vzhledem k ovariektomií.
-67CZ 286236 B6
Tabulka 2
Sloučenina/léČení Dávka/kg Distantní metafyza stehenní kosti (RTG obrazová analýza - Skóre šedi)
EE2 0,1 mg 62,4*
Příklad 1 0,01 mg 14,2
0,1 mg 49,8*
1,0 mg 51,7*
10,0 mg 48,2*
*P <= 0,5 dvojitý Studentův T Test na hrubých datech.
V souhrnu ovariektomie testovaných zvířat způsobila významnou redukci hustoty stehenní kosti ve srovnání se zvířaty, která nepodstoupila zákrok a byla léčena vehikulem. Orálně podávaný ethinyl estradiol (EE2) zabraňuje této ztrátě, ale riziko děložní stimulace je u tohoto způsobu léčení stále přítomno.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu také zabraňují kostním ztrátám obecným, na dávkování závislým způsobem. V souladu s tím jsou sloučeniny podle vynálezu použitelné pro léčení post-menopauzálního syndromu, obzvláště osteoporózy.
MCF-7 Proliferační test
MCF-7 buňky adenokarcinomu prsu (ATCC HTB 22) byly pěstovány v MEM (minimální esenciální médium, fenolu prosté, Sigma, St. Louis, MO) do kterého bylo přidáno 10 % fetálního hovězího séra (FBS) (objemově), L-glutamin (2 mM), pyruvát sodný (1 mM), HEPES {(N-[2hydroxyethyl]piperazine-N'-[2-ethansulfonová kyselina] 10 mM}, neesenciální aminokyseliny a hovězí inzulín (1 pg/ml) (udržovací médium). Deset dní před testem byly MCF-7 buňky přeneseny do udržovacího média, ke kterému bylo přidáno 10% fetální hovězí sérum, čištěné dextranem, pokrytém aktivním uhlím (DCC-FBS pokusné médium) namísto 10% FBS, aby se odstranily vnitřní zbytky steroidů. MCF-7 byly vyjmuty z udržovací baňky použitím buněčného disociačního média (Ca++/Mg++ prostý HBSS fenolu prostý), doplněného 10 mM HEPES a 2 mM EDTA). Buňky byly dvakrát promývány pokusným médiem a adjustovány na 80 000 buněk/ml.
Přibližně 100 ml (8000 buněk) bylo přidáno do mikrokultivačních jamek s plochým dnem (Costar 3596) a inkubováno při teplotě 37 °C v 5% CO2 zvlhčovaném inkubátoru po 48 hodin, aby se umožnila buněčná adherence a vyváženost po přenosu. Sériové ředění chemické sloučeniny nebo DMSO jako kontroly bylo připraveno v pokusném médiu a 50 ml bylo přeneseno do triplikovaných mikrokultur, následováno 50 ml pokusného média až do konečného objemu 200 ml. Po dalších 48 hodinách při 37 °C v 5% CO2 zvlhčovaném inkubátoru byly mikrokultury pulzovány stritiovaným thymidinem (1 pCi/jamka) po 4 hodiny. Kultury byly ukončeny ochlazením na -70 °C po 24 hodiny, následovaným roztáním a odběrem mikrokultur použitím Skatron Semiautomatic Cell Harvester. Vzorky byly odečítány kapalinovou scintilací použitím čítače Wallac BetaPlace b. Výsledky v tabulce 3 ukazují IC50 pro některé sloučeniny podle vynálezu.
-68CZ 286236 B6
Tabulka 3
Sloučenina (číslo příkladu) IC5O
1 0,2
2 100
3 3,0
4 5,0
5 1000
6 500
11 0,7
14 1
DMBA-indukovaná inhibice nádoru prsní žlázy
Estrogenem způsobované nádory prsní žlázy byly vyvolány u samic krys Sprague-Dawley, které byly zakoupeny od Harlan Industries, Indianapolis, Indiana. Zhruba ve stáří 55 dní krysy dostaly jednu orální dávku 20 mg 7,12-dimethylbenz[a]anthracenu (DMBA). Zhruba 6 týdnů po podání DMBA byly prsní žlázy v týdenních intervalech ohmatány na výskyt nádoru. Jakmile se objevil jeden nebo více nádorů, byl největší a nejmenší průměr nádoru změřen metrickým kalibrem, měření bylo zaznamenáno a zvíře bylo vybráno pro pokus. Byla vyvíjena snaha rozdělit různé velikosti nádorů stejnoměrně mezi kontrolní a pokusná zvířata tak, aby střední velikost nádoru byla stejným způsobem rozdělena mezi obě testované skupiny. Kontrolní a pokusné skupiny pro každý pokus se skládaly z 5 až 9 zvířat.
Sloučeniny obecného vzorce I byly podávány buď intraperitoneální injekcí v 2 % akátovém oleji nebo orálně. Orálně podávaná látka byla buď rozpuštěna nebo suspendována v 0,2 ml kukuřičného oleje. Každá látka, v to počítaje kontrolní ošetření s akátovým a kukuřičným olejem, byla podávána testovaným zvířatům jednou. Po počátečním změření nádoru a volbě testovacích zvířat byly nádory měřeny každý týden výše uvedenou metodou. Ošetření a měření zvířat pokračovalo po 3 až 5 týdnů a po této době bylo provedeno konečné změření nádorů. Pro každou testovanou skupinu a kontrolní skupinu byla určena střední změna velikosti oblasti, zaujímané nádorem.
Testovací procedury děložní fibrózy
Test 1
Ženám, trpícím děložní fibrózou, v počtu mezi 3 až 20, byla podávána sloučenina podle předkládaného vynálezu. Množství podávané látky bylo mezi 0,1 a 1000 mg/den a doba podávání byla 3 měsíce.
U žen byly pozorovány během podávání látky a až do 3 měsíců po přerušení podávání účinky podávané látky na děložní fíbrózu.
Test 2
Byla použita stejná procedura jako v testu 1, ale doba podávání byla 6 měsíců.
Test 3
Byla použita stejná procedura jako v testu 1, ale doba podávání byla 1 rok.
-69CZ 286236 B6
Test 4
A. Indukce fibroidních nádorů u morčete.
Dlouhodobá estrogenová stimulace byla použita k indukci leiomyomatózy u sexuálně zralých samic morčete. Zvířatům byl podáván estradiol 3-5 krát týdně injekcí po dobu 2-4 měsíců a nebo do výskytu nádoru. Léčení sestávalo z podávání látky podle předkládaného vynálezu nebo vehikula denně po dobu 3-16 týdnů; poté byla zvířata usmrcena a odebrány dělohy, které byly analyzovány na regresi nádoru.
B. Implantace lidské tkáně děložních fibroidů do holé myši.
Tkáně z lidských leiomyomatóz byly implantovány do peritoneální dutiny nebo děložního myometria sexuálně zralých, kastrovaných samic holé myši. Byl podáván exogenní estrogen k indukci růstu explantované tkáně. V některých případech byly odebrané nádorové buňky kultivovány in vitro před implantací. Ošetření spočívalo v podávání sloučeniny podle předkládaného vynálezu nebo vehikula gastrickou sondou denně po dobu 3-16 týdnů, poté byly implanty odebrány a měřen jejich růst nebo regrese. V okamžiku usmrcení zvířat byly odebrány dělohy pro určení stavu orgánu.
Test 5
A. Tkáň z lidského děložního fíbroidního nádoru byla odebrána a udržována in vitro jako primární netransformovaná kultura. Chirurgické vzorky byly protlačeny sterilní mřížkou nebo sítem nebo alternativně odtrženy od okolní tkáně, čímž byla vytvořena jediná buněčná suspenze. Buňky byly udržovány v médiu, obsahujícím 10 % séra a antibiotika. Byla určena rychlost růstu v přítomnosti a nepřítomnosti estrogenu. Buňky byly testovány na jejich schopnost produkovat komplementární komponentu C3 a na jejich odezvu na růstové faktory a růstové hormony. Byla měřena proliferativní odezva in vitro kultur, následující po ošetření progestiny, GnRH, sloučeninami podle vynálezu a vehikulem.
Úroveň receptorů steroidních hormonů byla určována týdně za účelem určení, zda jsou důležité buněčné vlastnosti uchovávány in vitro. Byly použity tkáně od 5 až 25 pacientek.
Účinek v alespoň jednom z výše uvedených testů indikuje, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou potenciálně použitelné pro léčení děložní fibrózy.
Testovací procedury děložní sliznice.
V testech 1 a 2 mohou být určeny účinky 14—denního a 21-denního podávání sloučenin podle předkládaného vynálezu na růst explantované tkáně děložní sliznice.
Test 1
Jako pokusná zvířata bylo použito dvacet až třicet dospělých krysích samic kmene CD. Zvířata byla rozdělena do tří skupin stejné velikosti. V den estruace byl na každé samici proveden chirurgický zákrok. Samicím v každé skupině byl odebrán levý roh děložní, rozdělen na malé čtverce a čtverce byly volně přišity v různých místech, přiléhajících ke krevnímu oběhu v mezenteriu. U samic skupiny 2 byly navíc odebrány vaječníky.
V den, následující po chirurgickém zákroku, byla zvířatům ve skupinách 1 a 2 podávána po 14 dní intraperitoneální injekce vody, zatímco zvířata ve skupině 3 dostávala po stejnou dobu intraperitoneální injekce 1,0 mg sloučeniny podle předkládaného vynálezu na jeden kilogram tělesné hmotnosti. Po 14 dnech podávání látky byla každá samice usmrcena a byly odebrány
-70CZ 286236 B6 endometriální explanty, nadledviny, zbývající části děloh a vaječníky (u samic, kterým byly ponechány) a připraveny pro histologické zkoumání. Vaječníky a nadledviny byly váženy.
Test 2
Jako pokusná zvířata bylo použito dvacet až třicet dospělých krysích samic kmene CD. Zvířata byla rozdělena do dvou stejných skupin. Byl monitorován estruační cyklus všech zvířat. V den estruace byl na každé samici proveden chirurgický zákrok. Samicím v každé skupině byl odebrán levý roh děložní, rozdělen na malé čtverce a čtverce byly volně přišity v různých místech, přiléhajících ke krevnímu oběhu v mezentériu. U samic skupiny 2 byly navíc odebrány vaječníky.
Přibližně 50 dní po chirurgickém zákroku začala zvířata ve skupině 1 dostávat po 21 dní intraperitoneální injekce vody, zatímco zvířata ve skupině 2 dostávala po stejnou dobu intraperitoneální injekce 1,0 mg sloučeniny podle předkládaného vynálezu na jeden kilogram tělesné hmotnosti. Po 21 dnech podávání látky byla každá samice usmrcena a byly odebrány a váženy endometriální explanty a nadledviny. Explanty byly měřeny jako indikace růstu. Byl monitorován estruační cyklus.
Test 3
A. Chirurgická indukce endometriózy.
Pro indukci endiometriózy u krys a/nebo králíků byly použity autografy tkáně děložní sliznice. Zvířecí samice v reprodukční zralosti podstoupily bilaterální ooforektomii a byl exogenně podáván estrogen, čímž byla zajištěna specifická a konstantní úroveň hormonu. Autologní tkáň děložní sliznice byla implantována do pobřišnice 5-150 zvířat a byl podáván estrogen pro indukci růstu explantované tkáně. Sloučenina podle předkládaného vynálezu byla podávána denně po 3-16 týdnů gastrickou sondou a implanty byly odebrány a měřen jejich růst nebo regrese. V okamžiku usmrcení zvířat byl odebrán neporušený roh děložní a určen stav děložní sliznice.
B. Implantace lidské tkáně děložní sliznice holé myši.
Tkáň z lidské endometriální léze byla implantována do peritonea sexuálně zralé kastrované samice holé myši. Byl podáván exogenní estrogen pro indukci růstu explantované tkáně.
V některých případech byly odebrané buňky děložní sliznice před implantací kultivovány in vitro. Působení spočívalo v podávání sloučeniny podle předkládaného vynálezu denně po 316 týdnů gastrickou sondou. Potom byly odebrány implanty a měřen jejich růst nebo regrese.
V okamžiku usmrcení zvířat byly odebrány dělohy a byl určován stav neporušené děložní sliznice.
Test 4
A. Tkáň z lidské endometriální léze byla odebrána a udržována in vitro jako primární netransformovaná kultura. Chirurgické vzorky byly protlačeny sterilní mřížkou nebo sítem nebo alternativně odtrženy od okolní tkáně, čímž byla vytvořena jediná buněčná suspenze. Buňky byly udržovány v médiu, obsahujícím 10% séra a antibiotika. Byla určena rychlost růstu v přítomnosti a nepřítomnosti estrogenu. Buňky byly testovány na jejich schopnost produkovat komplementární komponentu C3 a na jejich odezvu na růstové faktoiy a růstové hormony. Byla měřena proliferativní odezva in vitro kultur, následující po ošetření progestiny, GnRH, sloučeninami podle vynálezu a vehikulem. Úroveň receptorů steroidních hormonů byla určována týdně, aby bylo určeno, zda jsou důležité buněčné vlastnosti uchovávány in vitro. Byla použita tkáň od 5-25 pacientek.
-71CZ 286236 B6
Účinek v alespoň jednom z výše uvedených testů indikuje, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou potenciálně použitelné pro léčení endometriózy.
Testovací procedura inhibice proliferace/restenózy aortálních buněk hladkého svalstva.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají schopnost inhibice proliferace aortálních buněk hladkého svalstva. To může být demonstrováno použitím kultivovaných buněk hladkého svalstva, získaných z králičí aorty, přičemž proliferace je určena měřením syntézy DNA. Buňky byly získány explantační metodou, popsanou v Ross, J. of Cell. Biol. 50: 172 (1971).
Buňky byly umístěny na 96 jamkové mikrotitrační destičky na pět dní. Kultury se spojily a růst se zastavil. Buňky byly potom přeneseny do média „Dulbecco's Modifíed Eagle's Medium“ (DMEM), obsahujícího 0,5-2% na krevní destičky chudé plazmy, 2 mM L-glutaminu, lOOU/ml penicilinu, 100 mg/ml streptomycinu, 1 mC/ml 3H-thymidinu, 20 ng/ml růstového faktoru, odvozeného z krevních destiček, a různé koncentrace sloučenin podle vynálezu. Zásobní roztok sloučenin byl připraven v dimethylsulfoxidu a potom zředěn na potřebnou koncentraci (0,01 -30 mM) ve výše uvedeném pokusném médiu. Buňky potom byly inkubovány při 37 °C po 24 hodin v atmosféře 5 % oxidu uhličitého a 95 % vzduchu. Po 24 hodinách byly buňky fixovány vmethanolu. Inkorporace 3H-thymidinu v DNA byla potom měřena scintilačním způsobem, jak je popsáno v Bonin a kol., Exp. Cell Res.. 181: 475—482 (1989).
Inhibice proliferace aortálních buněk hladkého svalstva sloučeninami podle předkládaného vynálezu byla dále demonstrována jejich účinkem na pokusně pěstované buňky. Buňky hladkého svalstva z králičí aorty byly uloženy na 12 jamkovou destičku pro tkáňovou kultivaci v DMEM, obsahujícím 10 % fetálního hovězího séra, 2 mM L-glutaminu, 100 U/ml penicilinu a 100 mg/ml streptomycinu. Po 24 hodinách byly buňky spojeny a médium bylo nahrazeno médiem DMEM, obsahujícím 10% sérum, 2 mM L-glutaminu, 100 U/ml penicilinu, 100 mg/ml streptomycinu a požadovanou koncentraci sloučenin podle vynálezu. Buňky byly ponechány růst po čtyři dny. Na buňky bylo působeno trypsinem a počet buněk v každé kultuře byl určen použitím čítače ZM-Coulter.
Účinek v alespoň jednom z výše uvedených testů indikuje, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou potenciálně použitelné pro léčení restenózy.
Předkládaný vynález také poskytuje způsob zmírnění postmenopauzálního syndromu u žen, který zahrnuje výše uvedené způsoby, používající sloučeniny obecného vzorce I, a dále zahrnuje podávání účinného množství estrogenu nebo progestinu pacientce. Tento způsob je obzvláště užitečný pro léčení osteoporózy a snížení úrovně sérového cholesterolu, neboť pacientka bude profitovat z působení uvedeného farmaceutického činidla nebo činidel, zatímco sloučeniny podle předkládaného vynálezu budou inhibovat nežádoucí vedlejší účinky estrogenu a progestinu. Účinek těchto kombinovaných způsobů léčení v kterémkoli z postmenopauzálních testů uvedených výše indikuje, že kombinovaný způsob léčení je užitečný pro zmírnění symptomů postmenopauzálního syndromu u žen.
Komerčně jsou dostupné různé formy estrogenu a progestinu. Na estrogenu založená činidla zahrnují například ethinyl estrogen (0,01 až 0,03 mg/den), mestranol (0,05-0,15 mg/den) a konjugované estrogenové hormony, jako je Premarin® (Wyeth-Ayerst; 0,3 až 2,5 mg/den). Na progestinu založená činidla zahrnují například medroxyprogesterony, jako je Proveral® (Upjohn; 2,5 až 10 mg/den), norethylnodrel (1,0 až 10,0 mg/den) a nonethindron (0,5 až 2,0 mg/den). Výhodnou sloučeninou, založenou na estrogenu, je Premarin, a norethylnodrel a norethindron jsou výhodná činidla, založená na progestinu.
-72CZ 286236 B6
Způsob podávání každého činidla, založeného na estrogenu nebo progestinů, je konzistentní s poznatky, známými ze stavu techniky. V případě většiny způsobů podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I a obecného vzorce II podávány nepřetržitě, jednou až třikrát denně. Cyklická terapie však může být obzvláště užitečná při léčení endometriózy nebo mohou být sloučeniny používány akutně v průběhu bolestivých ataků onemocnění. V případě restenózy může být terapie omezena na krátké (1-6 měsíců) intervaly, následující po lékařských procedurách, jako je angioplastika.
Výraz „účinné množství“, tak jak je zde používán, znamená množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu, které je schopno poskytnout zmírnění symptomů různých patologických stavů, které zde byly popsány. Specifické dávkování podávaných sloučenin podle předkládaného vynálezu bude pochopitelně určeno s přihlédnutím ke konkrétním okolnostem uvažovaného případu, mezi něž patří například volba podávané sloučeniny, způsob podávání, stav pacienta a patologický stav, který má být léčen. Typická denní dávka zahrnuje netoxickou úroveň dávkování od asi 5 mg do asi 600 mg/den sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Výhodná denní dávka sloučeniny podle předkládaného vynálezu je obecně od asi 15 mg do asi 80 mg/den.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být podávány různými cestami, které zahrnují podávání orální, rektální, transdermální, subkutánní, intravenózní, intramuskulámí a intranasální.
Tyto sloučeniny jsou výhodně před podáváním upraveny do vhodné podávači formy a konkrétní způsob bude zvolen ošetřujícím lékařem. Dalším předmětem vynálezu je tedy farmaceutický přípravek, obsahující účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce Π, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, a popřípadě obsahující účinné množství estrogenu nebo progestinů a farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo excipient.
Celkové množství účinné složky v takovémto přípravku představuje od 0,1% do 99,9% hmotnostních přípravku.
Výraz „farmaceuticky přijatelný“, tak jak je zde používán, znamená, že nosič, ředidlo nebo excipient a sůl musí být použitelné spolu s dalšími složkami přípravku a nesmí být škodlivý pro jejího příjemce.
Farmaceutické přípravky podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny způsoby, známými ze stavu techniky a s použitím dobře známých a snadno dostupných ingredientů. Například je možno připravit farmaceutické přípravky, obsahující sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce Π, s nebo bez obsahu estrogenové nebo progestinové sloučeniny s použitím běžných excipientů, ředidel nebo nosičů ve formě tablet, kapslí, suspenzí, prášků a podobně. Příklady excipientů, ředidel nebo nosičů, které jsou vhodné pro přípravu takových farmaceutických přípravků, zahrnují následující: plnidla, jako je škrob, cukry, mannitol a silikonové deriváty; vazebná činidla, jako je karboxymethyl celulóza a další celulózové deriváty, algináty, želatina a polyvinyl-pyrrolidon; zvlhčovači činidla, jako je glycerol; dezintegrační činidla, jako je uhličitan vápenatý a kyselý uhličitan sodný; činidla, zpomalující rozpouštění, jako je parafín; urychlovače resorpce, jako jsou kvartemí amonné sloučeniny; povrchově aktivní činidla, jako je ketylalkohol a glycerolmonostearan; adsorptivní nosiče, jako je kaolin a bentonit; a lubrifikanty, jako je talek, stearan vápenatý a hořečnatý a pevné polyethylglykoly.
Sloučeniny mohou být také připraveny ve formě elixírů nebo roztoků pro výhodné orální podávání, nebo jako roztoky pro parenterální podávání, například intramuskulámí, subkutánní nebo intravenózní cestou. Sloučeniny podle vynálezu jsou kromě toho dobře použitelné v přípravcích se zpožděným účinkem. Farmaceutické přípravky mohou být vytvořeny tak, aby uvolňovaly účinnou složku pouze nebo převážně v určitém fyziologickém místě, případně po
-73CZ 286236 B6 určitou dobu. Pokrytí, obaly a ochranné matrice mohou být vytvořeny například z polymerických látek nebo vosků.
Sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce II, samotné nebo v kombinaci s farmaceutickým činidlem podle předkládaného vynálezu, jsou obecně podávány ve formě vhodného přípravku. Následující příklady přípravků jsou pouze ilustrativní a neomezují rozsah předkládaného vynálezu.
Farmaceutické přípravky
V popisu následujících farmaceutických přípravků znamená výraz „účinná složka“ sloučeninu obecného vzorce I nebo obecného vzorce Π nebo její sůl.
Farmaceutický přípravek 1: Zelatinové kapsle
Tvrdé želatinové kapsle byly připraveny s použitím:
Složka Množství (mg/kapsle)
Účinná složka 0,1 až 1000
Škrob, NF 0 až 650
Škrobový sypký prášek 0 až 650
Silikonová tekutina 350 centistoke 0 až 15
Výše uvedený přípravek může být změněn řadou různých proveditelných způsobů.
Přípravek ve formě tablet může být připraven z následujících složek:
Farmaceutický přípravek 2: Tablety
Složka Množství (mg/tableta)
Účinná složka 2,5 až 1000
Mikrokrystalická celulóza 200 až 600
Oxid křemičitý 10 až 650
Kyselina stearová 5 až 15
Složky byly smíchány a lisovány do tablet.
Alternativně mohou být připraveny tablety, obsahující 2,5-1000 mg účinné složky následujícím způsobem:
Složka Množství (mg/tableta)
Účinná složka 25 až 1000
Škrob 45
Mikrokrystalická celulóza 35
Polyvinylpyrrolidin (jako 10% roztok ve vodě) 4
Sodná karboxymethyl celulóza 4,5
Stearan hořečnatý 0,5
Talek 1
Účinná složka, škrob a celulóza se protlačí sítem s velikostí ok 0,321 mm a pečlivě rozmíchají. Roztok polyvinylpyrrolidinu je smíchán s výsledným práškem a potom jsou protlačeny sítem s velikostí ok 1,168 mm. Takto získané granule se suší při teplotě 50 až 60 °C a protlačí sítem
-74CZ 286236 B6 s velikostí ok 0,921 mm. Sodná karboxymethyl celulóza, stearan hořečnatý a talek se protlačí sítem s velikostí ok 0,246 mm a potom přidají ke granulím, které jsou lisovány na tabletovacím stroji a tím se vytvoří tablety.
Suspenze, obsahující 0,1 až 1000 mg léčiva na dávku 5 ml, se vyrobí následujícím způsobem:
Farmaceutický přípravek 4: Suspenze
Složka Množství (mg/5 ml)
Účinná složka 0,1 až 1000 mg
Sodná karboxymethyl celulóza 50 mg
Sirup 1,25 mg
Roztok kyseliny benzoové 0,10 ml
Chuťová přísada q.v.
Barvicí činidlo q.v.
Čistá voda do 5 ml
Léčivo bylo protlačeno sítem s velikostí ok 0,321 mm a smíchá se se sodnou karboxymethyl celulózou a sirupem, čímž se vytvoří jemná pasta. Roztok kyseliny benzoové, chuťoví přísada a barvivo se rozpustí v malém množství vody a za míchání se přidají. Poté je přidáno dostatečné množství vody pro dosažení požadovaného objemu.
Aerosolový roztok byl připraven s použitím následujících složek:
Farmaceutický přípravek 5: Aerosol
Složka Množství (% hmotnostních)
Účinná složka 0,25
Ethanol 25,75
Propelent 22 (chlordifluormethan) 70,00
Účinná složka byla smíchána s ethanolem a směs přidána do části propelentu 22, ochlazena na 30 °C a přenesena do plnicího zařízení. Nádobka z nerezové oceli byla naplněna požadovaným objemem roztoku, zředěným zbývajícím propelentem. K. nádobce byla přidána ventilová jednotka.
Čípky byly získány následujícím způsobem:
Farmaceutický přípravek 6: Čípky
Složka Množství (mg/čípek)
Účinná složka 250
Glyceridy nasycené mastné kyseliny 2000
Účinná složka byla protlačena sítem s velikostí ok 0,246 mm a suspendována vglyceridech nasycené mastné kyseliny, které byly předtím roztaveny s použitím nejmenšího možného zahřátí. Směs potom byla vlita do čípkové formy o jmenovité hmotnosti 2 g a ponechána vychladnout.
-75CZ 286236 B6
Intravenózní přípravek byl vytvořen následujícím způsobem:
Farmaceutický přípravek 7: Intravenózní roztok
Složka Množství
Účinná složka 50 mg
Izotonický fyziologický roztok 1000 ml
Roztok výše uvedených složek je podáván pacientce intravenózně rychlostí zhruba 1 ml za minutu.
Farmaceutický přípravek 8: Kombinované kapsle I
Složka Množství (mg/kapsle)
Účinná složka 50
Premarin 1
Avicel pH 101 50
Škrob 1500 117,50
Silikonový olej 2
Tween 80 0,50
Cab-O-Sil 0,25
Farmaceutický přípravek 9: Kombinované kapsle II
Složka Množství (mg/kapsle)
Účinná složka 50
Norethylnodrel 5
Avicel pH 101 82,50
Škrob 1500 90
Silikonový olej 2
Tween 80 0,50
Farmaceutický přípravek 10: Kombinované tablety
Složka Množství (mg/tableta)
Účinná složka 50
Premarin 1
Kukuřičný škrob NF 50
Povidon, K29-32 6
Avicel pH 101 41,50
Avicel pH 102 136,50
Crospovidon XL10 2,50
Stearan hořečnatý 0,50
Cab-O-Sil 0,50
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat jedno nebo více asymetrických center a proto mohou existovat ve formě směsi izomerů nebo jako jednotlivé izomery. Libovolná směs i libovolný izomer jsou použitelné způsobem podle předkládaného vynálezu a jako takové mohou být použity.

Claims (5)

1 nebo 2 její ochrany a získá se sloučenina obecného vzorce a dále se případně (4) převede produkt z předcházejícího kroku na svoji farmaceuticky přijatelnou sůl.
7. Způsob výroby derivátů obecného vzorce Π
-81CZ 286236 B6
Rz ve kterém
B je —CH2—nebo—CO—;
Y je -O-, -S-, -CHr-, -CH2CH2-, -CH=CH- nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou každý nezávisle na sobě -H, -OH, -O(C]-C4 alkyl), -OCOC6H5, -OCO(C]-C6 alkyl), -OSO2(C4-C6 alkyl), -OS02CF3, Cl nebo F;
n je 1 nebo 2;
W je CH2 nebo C=O;
R4 je 1-piperidinyl, 2-oxo-l-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl-l-pyrrolidinyl, dimethyl-1pyrrolidi-nyl, 2-oxo-l-pyrrolidinyl, 4-morfolino, dimethylamino, diethylamino nebo 1hexamethylenimino;
R5 je C,-C3 alkyl, -COC6H5, -CO(C!-C6 alkyl), -C(O)OC6H5, -C(O)O(C,-C6 alkyl), —SO2(Ci-Cí alkyl), —SO2CíH5, nebo —SO2CF3;
nebo jej ích farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se tím, že se (1) alkyluj e sloučenina obecného vzorce R2a
-82CZ 286236 B6 ve kterém
Y je definováno výše; a
Rla, R2a, R3a představují nezávisle na sobě H, -O(Ci-C4 alkyl), -Cl, -F nebo chráněnou skupinu -OH;
a připraví se sloučenina obecného vzorce lib a dále probíhá (2) případná redukce karbonylu za vzniku sloučeniny obecného vzorce líc
-CH2CH2-;
(1) reaguje sloučenina obecného vzorce III
-79CZ 286236 B6 ve kterém
RIa, R2a, R3a představují nezávisle na sobě H, -O(Ci~C4 alkyl), -Cl, -F nebo chráněnou skupinu -OH;
X a Y jsou definovány výše; a
Za je -OH, OC6H5 nebo -O(C,-C4 alkyl), s Grignardovým činidlem obecného vzorce ve kterém
Ga je -OSi(CH3)3, chráněný hydroxyl, který může být selektivně zbaven ochrany v přítomnosti Rla, R2a, R3a s významy uvedenými výše, nebo -O(CH2)nWR4; kde W a R4 mají význam uvedený v nároku 1, čímž se získá sloučenina obecného vzorce (2) pokud Ga je -OSi(CH3)3 nebo chráněná OH, jak bylo definováno, pak (a) se působí na produkt z kroku (1) a odstraní se ochranné skupiny a vznikne sloučenina obecného vzorce
-80CZ 286236 B6 a poté (b) se alkyluje tato sloučenina na sloučeninu obecného vzorce (3) a zbaví se jakákoli chráněná skupina OH ve skupině Rla, R2a nebo R3a ve sloučenině z kroku
1. Pentacyklické deriváty obecného vzorce I nebo obecného vzorce Π: (D,
O-(CH2)n— w—R4 (Π),
O-(CH2)n—W--R4 ve kterém
X je-O-,-S-, nebo-NR5-;
Y je -O-, -S-, -CH2-, -CH2CH2-, -CH=CH- nebo -NR5-;
B je —CH2— nebo -CO-;
R1, R2 a R3 jsou každý nezávisle na sobě -H, -OH, -O(Ci-C4 alkyl), -OCOC6H5, -OCO(C]-C6 alkyl), -OSO2(C4-C6 alkyl), -OSO2CF3, Cl nebo F;
n je 1 nebo 2;
W je CH2 nebo C=O;
R4 je 1-piperidinyl, 2-oxo-l-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl—1-pyrrolidinyl, dimethyl-1pyrrolidinyl, 2-oxo-l-pyrrolidinyl, 4-morfolino, dimethylamino, diethylamino nebo 1hexamethylenimino;
-77CZ 286236 B6
R5 je C]-C3 alkyl, -COC6H5, -CO(C,AZ6 alkyl), -C(O)OC6H5, -C(O)O(C]-C6 alkyl), -SO2(Ci-C6 alkyl), -SO2C6H5, nebo -SO2CF3; nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.
2.8- dihydroxy-5-[4—[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-5H-benzo[b]nafto[2,l-d]pyran.
-78CZ 286236 B6
6. Způsob výroby derivátů obecného vzorce I ve kterém
X je -O-, -S-, nebo -NR5-;
Y je -O-, -S-, -CH2-, -CH2CH2-, -CH=CH- nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou každý nezávisle na sobě -H, -OH, -O(Ci-C4 alkyl), -OCOC6H5, -OCO(Ci-C6 alkyl), -OSO2(C4-C6 alkyl), -OSO2CF3, Cl nebo F;
n jel nebo2;
W je CH2 nebo C=O;
R4 je 1-piperidinyl, 2-oxo-l-piperidinyl, 1-pyrrolidinyl, methyl-l-pyrrolidinyl, dimethyl-1pyrrilidinyl, 2-oxo-l-pyrrolidinyl, 4-morfolino, dimethylamino, diethylamino nebo 1hexamethylenimino;
R5 je C,-C3 alkyl, -COC6H5, -CO(C,-C6 alkyl), -C(O)OC6H5, -C(O)O(Ci-C6 alkyl), —SO2(Ci-C6 alkyl), —SO2C6Hs, nebo —SO2CF3;
nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se tím, že:
2.8- dihydroxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthridin; a
2.8- dimethoxy-5-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6H-benzo[c]fenanthridin;
2.8- dimethoxy-5-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-l 1,12-dihydro-6H-benzo[c]fenanthrid6-on;
2. Derivát podle nároku 1, který má obecný vzorec I, ve kterém X je -O- a Y je -S-.
3.9- dihydroxy-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-benzofuro[3,2-c][l]benzopyran;
3.9- dihydroxy-6-[4-[2-(2-oxo-1 -pyrrolidiny l)ethoxy] feny 1]—6—Η—[ 1 ] benzothieno[3,2c][ ljbenzopyran;
3.9- dihydroxy-6-[4-(2-dimethylaminoethoxy)fenyl]-6-H-[l ]benzothieno[3,2-c] [ 1 Jbenzopyran;
3.9- dihydroxy-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran;
3.9- bis[trifluormethansulfonyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c] [ ljbenzopyran;
6—[4—[2—( 1 -piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 ]benzopyran;
3.9- bis(l-butylsulfonyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2c][l]benzopyran;
3.9- bis(pivaloyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran;
3.9- bis(benzoyloxy)-6-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran;
3.9- dimethoxy-6-[4—[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[l]benzothieno[3,2-c][l]benzopyran;
3.9- dihydroxy-6-[4-[2-( l-piperidinyl)ethoxy]fenyl]-6-H-[ 1 ]benzothieno[3,2-c] [ 1 jbenzopyran;
3. Derivát podle nároku 1, který má obecný vzorec II, ve kterém Y je -CH=CH-
(4) a odstraní se chránící skupina kterékoli chráněné skupiny OH v R1, R2 a R3 v produktu kteréhokoli z kroků (1), (2) nebo (3);
a poté se (5) případně převede produkt z předcházejícího kroku na svoji farmaceuticky přijatelnou sůl.
-83CZ 286236 B6
8. Meziprodukt pro přípravu derivátu podle nároku 1 obecného vzorce ve kterém
X je —O—, —S—, nebo -NR5-;
Y je -O-, -S-, -CHr-, -CH2CH2-, -CH=CH- nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou každý nezávisle na sobě -H, -O(C]-C4 alkyl), -Cl, -F nebo chráněná skupina -OH; a
Z je -OH, -OC6H5, -O(Ci-C4 alkyl) nebo 4-hydroxyfenyl.
9. Meziprodukt pro přípravu derivátu podle nároku 1 obecného vzorce ve kterém
Y je -O-, -S-, -CH2-, -CH2CHr-, -CH=CH-, nebo -NR5-;
R1, R2 a R3 jsou každý nezávisle na sobě -H, -O(Ci-C4 alkyl), -Cl, -F nebo chráněná skupina -OH.
10. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje pentacyklický derivát podle nároku 1, farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo excipient.
11. Pentacyklický derivát podle nároku 1 obecného vzorce I nebo Π pro použití jako léčivo k inhibici ztráty kostní tkáně nebo kostní resorpce.
-84CZ 286236 B6
12. Pentacyklický derivát podle nároku 1 obecného vzorce I nebo Π pro použití jako léčivo k léčení ztráty kostní tkáně nebo kostní resorpce, způsobené menopauzou nebo ovariektomií.
4. Derivát podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, ve kterém skupina -O-(CH2)n-W-R4 je 2-(lpiperidiny l)ethoxy.
5. Deriváty podle nároku 1, zvolené ze souboru, zahrnujícího:
5 13. Pentacyklický derivát podle nároku 1 obecného vzorce I nebo II pro použití jako léčivo ke snižování úrovně sérového cholesterolu.
CZ1998678A 1995-09-08 1996-08-26 Pentacyklické sloučeniny, jejich meziprodukty, způsob jejich výroby a kompozice s jejich obsahem CZ286236B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US349695P 1995-09-08 1995-09-08

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ67898A3 CZ67898A3 (cs) 1998-06-17
CZ286236B6 true CZ286236B6 (cs) 2000-02-16

Family

ID=21706148

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1998678A CZ286236B6 (cs) 1995-09-08 1996-08-26 Pentacyklické sloučeniny, jejich meziprodukty, způsob jejich výroby a kompozice s jejich obsahem

Country Status (25)

Country Link
US (3) US5726186A (cs)
EP (1) EP0761669B1 (cs)
JP (1) JP3688299B2 (cs)
KR (1) KR19990044422A (cs)
CN (1) CN1201392A (cs)
AT (1) ATE197712T1 (cs)
AU (1) AU705454B2 (cs)
BR (1) BR9610356A (cs)
CA (1) CA2230974A1 (cs)
CZ (1) CZ286236B6 (cs)
DE (1) DE69611015T2 (cs)
DK (1) DK0761669T3 (cs)
EA (1) EA001649B1 (cs)
ES (1) ES2152496T3 (cs)
GR (1) GR3035253T3 (cs)
HU (1) HUP9802213A3 (cs)
IL (1) IL123560A (cs)
MX (1) MX9801734A (cs)
NO (1) NO980936L (cs)
NZ (1) NZ318183A (cs)
PL (1) PL325479A1 (cs)
PT (1) PT761669E (cs)
SI (1) SI0761669T1 (cs)
TR (1) TR199800387T1 (cs)
WO (1) WO1997009044A1 (cs)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5811447A (en) 1993-01-28 1998-09-22 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US6515009B1 (en) 1991-09-27 2003-02-04 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US6251920B1 (en) 1993-05-13 2001-06-26 Neorx Corporation Prevention and treatment of cardiovascular pathologies
US6491938B2 (en) 1993-05-13 2002-12-10 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
CA2223595C (en) * 1995-06-07 2008-08-05 Neorx Corporation Prevention and treatment of cardiovascular pathologies with tamoxifen analogues
WO2000037083A1 (en) * 1998-12-18 2000-06-29 Schering Corporation Oral antiestrogen pharmaceutical composition
US7329654B2 (en) 2001-12-19 2008-02-12 Janssen Pharmaceutica N.V. Heteroatom containing tetracyclic derivatives as selective estrogen receptor modulators
US7105679B2 (en) 2001-12-19 2006-09-12 Kanojia Ramesh M Heteroatom containing tetracyclic derivatives as selective estrogen receptor modulators
EP1551822B1 (en) 2002-07-24 2006-12-20 Eli Lilly And Company Pentacyclic oxepines and derivatives thereof, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
JP2005538091A (ja) 2002-07-24 2005-12-15 イーライ・リリー・アンド・カンパニー ジヒドロ−ベンゾ［ｂ，ｅ］オキセピンに基づく選択的エストロゲン受容体調節物質、組成物および方法
JP3887588B2 (ja) * 2002-08-30 2007-02-28 株式会社リガク Ｘ線回折による応力測定法
MXPA05003166A (es) * 2002-09-25 2005-06-08 Lilly Co Eli Derivados de dihidro-dibenzo (a) antracenos y su uso como modulares de receptores de estrogenos selectivos.
US6894061B2 (en) 2002-12-04 2005-05-17 Wyeth Substituted dihydrophenanthridinesulfonamides
US7074779B2 (en) * 2003-07-02 2006-07-11 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Estrieno[3,2-b]/[3,4-c]pyrrole derivatives useful as modulators of the estrogen receptors
CN1910167B (zh) * 2004-01-22 2011-08-10 伊莱利利公司 用于治疗血管舒缩症状的选择性雌激素受体调节剂
WO2005073204A1 (en) * 2004-01-22 2005-08-11 Eli Lilly And Company Selective estrogen receptor modulators for the treatment of vasomotor symptoms
WO2005073244A1 (en) * 2004-01-22 2005-08-11 Eli Lilly And Company Selective estrogen receptor modulators
KR20160088947A (ko) 2010-06-16 2016-07-26 앙도르쉐르슈 인코포레이티드 에스트로겐-관련 질병의 치료 또는 예방 방법
KR102021162B1 (ko) * 2011-11-01 2019-09-11 메르크 파텐트 게엠베하 유기 전계발광 소자
US8829993B2 (en) 2012-10-30 2014-09-09 Eta Devices, Inc. Linearization circuits and methods for multilevel power amplifier systems
CN109678878A (zh) * 2019-02-27 2019-04-26 陕西科技大学 一种苯并噻吩并香豆素类化合物及其合成方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2884427A (en) * 1958-01-22 1959-04-28 Oliver H Emerson Synthesis of coumestrol and its esters
US2987398A (en) * 1958-05-12 1961-06-06 Emanuel M Bickoff Coumestrol ethers and use thereof
US3912740A (en) * 1974-02-28 1975-10-14 Us Health Method for the preparation of oxygenated benzo{8 c{9 phenanthridine compounds
US4230862A (en) * 1975-10-28 1980-10-28 Eli Lilly And Company Antifertility compounds
US4418068A (en) * 1981-04-03 1983-11-29 Eli Lilly And Company Antiestrogenic and antiandrugenic benzothiophenes
US4659671A (en) * 1983-07-01 1987-04-21 Massachusetts Institute Of Technology Enzymatic separation of racemic mixtures of hydroxy compounds
CA2054569A1 (en) * 1990-11-07 1992-05-08 Masanobu Suzuki Process for preparing benzo¬c|phenanthridinium derivatives, and novel compounds prepared by said process
US5147880A (en) * 1991-07-22 1992-09-15 Eli Lilly And Company Benzo[a]fluorene compounds
TW366342B (en) * 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
US5336687A (en) * 1993-08-04 1994-08-09 American Home Products Corporation Inhibition of bone loss by 4-aryloxy-5-hydroxy-2(5H)-furanones

Also Published As

Publication number Publication date
NO980936L (no) 1998-05-07
ATE197712T1 (de) 2000-12-15
AU705454B2 (en) 1999-05-20
JPH11514347A (ja) 1999-12-07
JP3688299B2 (ja) 2005-08-24
KR19990044422A (ko) 1999-06-25
EA001649B1 (ru) 2001-06-25
CA2230974A1 (en) 1997-03-13
ES2152496T3 (es) 2001-02-01
US6133288A (en) 2000-10-17
DE69611015D1 (de) 2000-12-28
GR3035253T3 (en) 2001-04-30
WO1997009044A1 (en) 1997-03-13
HUP9802213A3 (en) 2000-03-28
SI0761669T1 (en) 2001-04-30
PT761669E (pt) 2001-04-30
EA199800278A1 (ru) 1998-08-27
PL325479A1 (en) 1998-07-20
IL123560A0 (en) 1998-10-30
TR199800387T1 (xx) 1998-05-21
DE69611015T2 (de) 2001-05-10
US6004971A (en) 1999-12-21
EP0761669B1 (en) 2000-11-22
MX9801734A (es) 1998-08-30
NO980936D0 (no) 1998-03-04
IL123560A (en) 2002-02-10
HUP9802213A2 (hu) 1999-02-01
EP0761669A3 (en) 1997-10-29
US5726186A (en) 1998-03-10
DK0761669T3 (da) 2000-12-11
CN1201392A (zh) 1998-12-09
BR9610356A (pt) 1999-07-06
CZ67898A3 (cs) 1998-06-17
AU6959096A (en) 1997-03-27
EP0761669A2 (en) 1997-03-12
NZ318183A (en) 1998-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ286236B6 (cs) Pentacyklické sloučeniny, jejich meziprodukty, způsob jejich výroby a kompozice s jejich obsahem
US5510498A (en) Benzothiophene compounds, intermediates, compositions, and methods
RU2165924C2 (ru) Нафтилсодержащие соединения, фармацевтическая композиция, способ смягчения симптомов постклимактерического синдрома и других связанных с эстрогеном физиологических состояний, способы получения нафтилсодержащих соединений
US5523309A (en) Benzofuran pharmaceutical compounds
JPH08268881A (ja) ナフチル化合物、その中間体、該ナフチル化合物を含有する医薬組成物
PL182493B1 (pl) Nowe pochodne benzotiofenu, nowe związki pośrednie i sposób wytwarzania nowych pochodnych benzotiofenu oraz środek farmaceutyczny
JPH09118676A (ja) 窒素含有非塩基性側鎖を有する化合物および医薬製剤
RU2167158C2 (ru) Производные нафталина или дигидронафталина, фармацевтическая композиция на их основе, способы лечения и промежуточные вещества
DE69532079T2 (de) Benzofuranverbindungen, präparate und verfahren
MXPA98000800A (en) Compounds, intermediates of naftilo and dihidronaftilo, compositions and meto
EP0747376B1 (en) Compounds and compositions with nitrogen-containing non-basic side chains
US6391892B1 (en) Naphthyl pharmaceutical compounds
EP0806420B1 (en) Benzothiophenes, formulations containing same, and methods
JPH08333366A (ja) 窒素含有非塩基性側鎖を有する化合物および医薬組成物
JPH08268909A (ja) α−置換−１−ベンジルナフチル類
EP0729964A1 (en) Phosphorous-containing benzothiophenes
JPH08283254A (ja) α−置換−３−ベンジル−ベンゾフラン類
IL140162A (en) (4-substituted phenyl) substituted tetracyclic compounds
JP2005538092A (ja) 五環系オキセピンおよびその誘導体、組成物および方法
MXPA97006737A (en) New pharmaceutical compounds of benzotiof
MXPA97006738A (en) New pharmaceutical compounds of benzofur
MXPA97006741A (en) Novedous pharmaceutical compounds of naft

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20020826