CZ223299A3

CZ223299A3 - Derivát cyklopeptidu, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Info

Publication number: CZ223299A3
Application number: CZ992232A
Authority: CZ
Inventors: Günter Hölzemann; Claus Fittschen; Simon Goodman
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1996-12-19
Filing date: 1997-12-15
Publication date: 1999-09-15
Also published as: PL334186A1; RU2202557C2; EP0948525B1; EP0948525A1; NO993010L; AU5758498A; GR3035848T3; DK0948525T3; CA2280233A1; WO1998027112A1; US6333308B1; SK82099A3; PT948525E; HUP0000490A3; ES2156011T3; UA55439C2; ZA9711392B; AR008717A1; ATE199256T1; DE19653036A1

Description

Derivát cyk1opeptidu, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje.

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů cyklopeptidu jako inhibitoru integrinu, způsobu jeho přípravy a farmaceutického prostředku, který ho obsahuje. Sloučeniny podle vynálezu jsou vhodné jakožto inhibitory integrinu zvláště pro profylaxi a ošetřování nemocí jako jsou zvláště thrombosy, srdeční infarkt, koronární onemocnění srdce, arteriosklerosa, nádory, osteoporóza, záněty a infekce.

Dosavadní stav techniky

Podobné deriváty cyklických peptidů jako podle vynálezu jsou popsány v německém patentovém spise čsílo DE 43 10 643 nebo v evropském patentovém spise číslo EP O 683173, úkolem vynálezu je vyvinout nové sloučeniny s hodnotnými vlastnostmi, které by se zvláště hodily pro výrobu léčiv.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je derivát cyklopeptidu obecného vzorce I cyklo - (Arg-X-Asp-R¹) (I) kde znamená

X Gly, Ala nebo NH-NH-CO, přičemž uvedené aminokyseliny mohou být také derivátizovány a aminokyselinové zbytky jsou přes α-aminoskupinu a ot-karboxylovou skupinu peptidovitě navzájem spojeny, • 4 • · · · • 4 444 4 44 4

44 44 444444 f 4 · 4 · 4 4

4444 ·4 44 44 44 44

R¹ skupinu obecného vzorce II

kde znamená

R² , R³ , R⁴ na sobe nezávisle atom vodíku, skupinu A, Ar, R⁵ -Ar, Het nebo R^s-Het,

A alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,

Ar

R^s fenylovou skupinu popřípadě s jedním, se dvěma nebo se třemi subsubstituenty ze souboru zahrnujícího skupinu R⁷ , R^s nebo R⁹ , nebo nesubstituovanou naftylovou skupinu, alkylenovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,

R⁶ a R⁶’ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu A, skupinu benzylovou nebo fenylovou,

R⁷, R⁸ , R⁹ na sobě nezávisle skupinu R⁶ , OR⁶ , Hal, NO2 , NR⁶ R⁶ ’ , NHCOR⁶ , CN, NHSO2R⁶, COOR⁶ nebo COR⁶,

Hal

Het atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu a jednokruhový nebo dvoukruhový heterocyklus s jedním až čtyřmi atomy ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku a síry, popřípadě s jedním, se dvěma nebo se třemi subsubstituenty ze souboru zahrnujícího Hal, skupinu A, NR⁶ R⁶ ’ , CN a NO2 , φ · « · φφ» · φ φ « φφ φ φ φφφφ · φ · φ φφφ φ φ φ φ · φ φφφ φφφ φ ΦΦΦΦΦ « · φφφ* φφ φ· φφ φφ φφ přičemž pokud jde ο zbytky opticky aktivních aminokyselin nebo derivátů aminokyselin jsou zahrnuty jak D tak také L formy a jejich fyziologicky vhodné soli.

S překvapením se zjistilo, že sloučeniny obecného vzorce I a jejich soli mají při dobré snášenlivostí velmi hodnotné farmakologické vlastnosti. Především působí jako inhibitory integrinu, přičemž především inhibují vzájemné působení αν-, βο- nebo βδ-integrinových receptorů s ligandy, například voazbu fibrinogenu na β3-integrinový receptor. Obzvláštní účinnost vykazují sloučeniny obecného vzorce I v případě integrinů ανβι, αν β3 , αν βί , αι i b β3 jakož také α_ν β6 a α_ν βϊ . Toto působení lze doložit například způsobem, který popsal J. W. Smith a kol. (J. Biol. Chem. 265, str. 12267 až 12271, 1990).

P.C. Brooks, R.A. Clark a D.A. Cheresh (Science 264, str. 569 až 571, 1994) uvádějí, že vývoj angiogeneze závisí na vzájemném působení vaskulárního integrinu a extracelulárních matricových proteinů.

Možnost použití cyklického peptidu podle vynálezu k inhibici tohoto vzájemného působení a tím k navození apoptosy (programované umírání buněk) angiogenních vaskulárních buněk působením cyklického peptidu popsal P.C. Brooks, A.M. Montgomery, M. Rosenfeld, R.A. Reisfeld, T.-Hu, G. Klier a D.A. Cheresh (Cell 79, str. 1157 až 1164, 1994).

Sloučeniny obecného vzorce I, které blokují interakci integrinových ' receptorů a ligandů, jako fibrinogen k fibrinogenovému receptorů (glykoprotein Ilb/IIIa), zabraňují jakožto GPIIb/IIIa antagonisty, rozšiřování nádorových buněk metastázováním. Je to doloženo následujícím pozorováním:

K rozšiřování nádorových buněk z lokalizovaného nádoru do vaskulárního systému dochází vytvářením mikroaregátů (mikro• · « 4 4 · · 4*4*

4 * * 44*4 4 44 4 • 444 44 44 44 444 444 «4444 4 4

444 4 44 44 Μ 44 44 thrombů) jako následek vzájemného působení nádorových buněk a krevních destiček. Nádorové buňky se zastiňují jako výsledek protekce podpořené mikroagregáty a nejsou od buněk imunitního systému rozpoznány. Mikroagregáty se usazují na stěnách cév, tím usnadňují další penetraci nádorových buněk do tkáně. Jelikož je vytváření mikrotrombů zprostředkováváno vázáním fibrinogenu na fibrinogenové receptory na aktivovaných krevních destičkách, mohou být GPIIa/IIIb antagonisty považovány za účinné inhibitory metastáz.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto léčivově účinné látky v humánní a veterinární medicíně zvláště k profylaxi a k ošetřování thrombosy, infarktu myokardu, arteriosklerosy, zánětů, apoplexie, angíny pektoris, nádorových onemocnění, osteolytických nemocí, jako je zvláště osteoporosa, nemocí podmíněných angiogenezí, jako jsou například záněty, oftalmologických onemocnění, diabetiucké retinopathie, rohovkové degenerace, krátkozrakosti, okulární histoplasmosy, reumatické arthritis, osteoarthritis, rhubeotického gluakomu, avšak také vředovité kolitis, Crohnovy nemoci, rozptýlené sklerózy, lupenky a restenosy po angioplasti i, virových onemocnění, bakteriálních infekcí, plísňových infekcí, akutního selhání ledvin a při podpoře procesů hojení ran a při podpoře léčivých procesů.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto antimikrobiálně působící látky při operacích, při kterých se používá biologického materiálu, implantátů, katheteru nebo srdečních stímulátorů. Přitom tyto sloučeniny působí antiseptický. účinnost antimikfobiální aktivity se může doložit způsobem, který popsal P. Valentin-Weigund a kol. (Infection and Immunity, str. 2851 až 2855, 1988).

Jelikož sloučeniny obecného vzorce I představují inhibitory vazby fibrinogenu a tím ligandy receptorů fibrinogenu na

Β Β Β Β Β Β Β ΒΒΒΒ \

ΒΒΒ Β Β ΒΒ Β · · Β ·

Β ΒΒΒ Β Β Β Β · Β ΒΒΒ ΒΒΒ • ΒΒΒΒ· ··

ΒΒΒ· ΒΒ Β· ΒΒ ΒΒ ΒΒ \ krevní destičky, jsou použitelné jako diagnostika k detekci a k lokalizaci thrombů ve vaskulárním systému in vivo, pokud jsou substituovány radioaktivním nebo UV detektovatelným zbytkem.

Sloučeniny obecného vzorce I jakožto inhibitory vazby fibrinogenu se mohou také používat jako účinné pomocné prostředky ke studiu metabolismu krevních destiček při různých aktivačních stadiích nebo v intracelu1árních signálových mechanismech receptorů fibrinogenu. Detekovate1ná jednotka zabudovatelného značení například isotopového značení ³H dovoluje po vázání na receptor zkoumat uvedené mechanismy.

Uváděné zkratky zbytků aminokyselin znamenají zbytky následujících aminokyselin:

A1 a	alanin
AMP	aminomethy1 fenyiová skupina
Asn	asparagin
Asp	asparagová kyselina
Arg	arginin
Cys	cystein
Gin	glutamin
Glu	glutaminová kyselina
Gly	glycin
His	hist idin
homo-Phe	homo-fenylalanin
I le	isoleucin
Leu	1 e u c i n
Lys	lysin
Met	methionin
Nle	norleucin
Orn	ornithin
Phe	f enylalanin
Phg	fenylglycin

• · ft ··· « ftftft· • ftftft ·· «· ·· ft · • ft

4-Hal-Phe	4-halogenfenylalanin
Pro	prolin
Ser	ser in
Thr	threonin.
Trp	t ryptof an
Tyr	tyros in
Val	val in

Skupina 3-AMP má tuto strukturu
	77
H	1

Kromě toho se ještě používají zkratky, které mají následu-

jící význam:
Ac	ace ty 1
BOC	terč.-butoxykarbony1
CBz nebo Z	benzyloxykarbonyl
DCC1	dicyklohexylkarbod i imid
DMF	dimethylformamid
EDC1	N-ethy1-N,Ν'-(dimethylaminopropy 1)karbod i imid
Et	ethyl
FCA	fluoresceinkarboxylová kyselina
Fmoc	9-fluorenylmethoxykarbony 1
HOBt	1-hydroxybenzot r i azo1
Me	methyl
MBHA	4-me t hy1benzhydrylamin
Mtr	4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfony1
HONSu	N-hydroxysukcínimid
OBzl	benzylester
OtBu	terc.-butylester
Oct	oktanoy1
OMe	methylester

«4 00 ·· 00 · _ 00*···« 0000 7 — 0 0 0 0 0 000 0 0 0 0

000 0 0 0 0 0 0 000 000

00000 0 0 0000 <0 00 00 00 00

OEt	ethyl ester
POA	fenoxyacetyl
Sal	salicyloy1
TFA	trifluoroctová kyselina
Trt	trityl· (tri f eny lmethyl)

Shora uvedené aminokyseliny mohou být v několika enantiomerních formách, například jako integrální podíl sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu, přičemž všechny tyto formy a také jejich směsi (například DL formy) vynález zahrnuje. Kromě toho mohou být aminokyseliny, například jako podíl sloučenin obecného vzorce I, chráněny o sobě známými chránícími skupinami.

Sloučeniny podle vynálezu zahrnují také tak zvané prodrogové deriváty, to znamená například alkylovými nebo acylovými skupinami, cukry nebo oligopeptidy obměněné sloučeniny obecného vzorce I, které se v organismu rychle Štěpí na účinné Sloučeniny podle vynálezu. Do této skupiny patří také biologicky odbouratelné polymerní deriváty sloučenin podle vynálezu popsané v literatuře (například Int. J. Pharm. 115, str, 61 až 67, 1995).

Aminokyseliny, jejichž konfigurace výslovně není uvedena, mají (S)- nebo (L)-konfiguraci.

Způsob přípravy derivátu cyklopeptidu obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam,nebo jeho solí spočívá podle vynálezu v tom, že

a) se sloučenina obecného vzorce III

H-Z-OH kde znamená

Z skupinu -Arg-X-Asp-R¹-X-Asp-R¹-Arg(III)

• · *·* ·»· • · ·· ·«

-Asp-R¹-Arg-X- nebo -R¹-Arg-X-Asp- , a X a R¹ mají shora uvedený význam, nebo reaktivní derivát sloučeniny obecného vzorce II zpracovává cyklizačním činidlem, nebo

b) se sloučenina obecného vzorce I uvolňuje ze svého funkčního derivátu zpracováním solvolyzačním nebo hydrogenolyzačním Činidlem a/nebo se zásaditá sloučenina nebo kyselá sloučenina obecného vzorce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sůl.

Shora uvedené symboly X, R¹, R² , R³ a R⁴ mají význam uvedený u obecných vzorců I, II a III, pokud není jinak vysloveně uvedeno.

Ve shora uvedených vzorcích se míní alkylem především skupina methylová, ethylová, propylová, isopropy1ová, butylová, isobutylová, sek.-butylová nebo terč.-butylová, dále také pentylová, 1-, 2- nebo 3-methylbutylová, 1,1-, 1,2- nebo 2,2dimethylpropylová, 1-ethylpropylová, hexylová, 1-, 2-, 3- nebo

4-methylpentylová, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- nebo 3,3—di— methylbutylová, 1- nebo 2-ethylbutylová, 1-ethyl-l-methylpropylová, l-ethyl-2-methylpropylová a 1,1,2- nebo 1,2,2-trimethylpropylová skupina.

Symbol R² a R³ znamená na sobě nezávisle s výhodou například atom vodíku nebo skupinu A, dále také skupinu Ar nebo R⁵ -Ar.

Symbol R⁴ znamená s výhodou například atom vodíku nebo skupinu A, Ar nebo R^s-Ar, dále také skupinu Het nebo R⁵-Het. Pokud R⁴ znamená alkylovou skupinu, může být methylenový podíl v alkylovém řetězci nahrazen atomem dusíku, kyslíku nebo síry.

• a φφ • · * « • ♦ · • ·Μ

Φ · ·Φ·Φ ΦΦ ·· Φ· • · Φ

Φ ΦΦΦΦ Φ · Φ Φ

Φ · Φ Φ • Φ ΦΦ ·· ·Φ Φ Φ Φ Φ • Φ Φ »

Φ ··· φφφ

Φ Φ • Φ ΦΦ

Ve shora uvedených vzorcích se míní alkylenem především skupina methylenová, ethylenová, propylenová, butylenová, pentylenová nebo hexylenová.

Skupinou symbolu R⁵-Ar je s výhodou benzylová nebo fenethylová skupina.

Uvedené aminokyseliny nebo aminokyselinové zbytky mohou být také derivát izovány, přičemž jsou výhodnými N-methylové, N-ethylové, N-propylové, N-benzylové nebo Ca-methy1ové deriváty. Dále jsou výhodnými driváty aminokyselin Asp a Glu, zvláště methylester, ethylester, propylester, butylester, terc.-butylester, neopentylester nebo benzylester postranních řetězců karboxy1ových skupin, dále také deriváty aminokyseliny Arg, které jsou popřípadě substituovány na skupině vzorce -NH-C(=NH)-NH2 acetylovým, benzoylovým, methoxykarbonylovým nebo ethoxykarbon.vlovým zbytkem.

Symbol R⁶ znamená s výhodou například atom vodíku, skupinu methylovou nebo ethylovou, dále skupinu benzylovou nebo fenylovou. Symbol OR⁶ znamená s výhodou například hydroxylovou skupinu nebo methoxyskupinu. Symbol COR⁶ znamená alkanoyl, s výhodou skupinu formylovou, acetylovou, propionylovou, butyrylovou, pentanoylovou nebo hexanoylovou.

Ar znamená nesubstituovanou s výhodou, jak dále uvedeno, monosubstituovanou skupinu fenylovou, přičemž s výhodou znamená skupinu fenylovou, o-, m- nebo p-tolylovou, o-, m- nebo p-ethylfenylovou, o-, m- nebo p-propy1fenylovou, o-, m- nebo p-isopropylfenylovou, o-, m- nebo p-terc.-butylfenylovou, o-, m- nebo p-trifluormethy1fenylovou, o-, m- p-hydroxyfenylovou, o-, m- nebo p-nitrofenylovou, o-, m- nebo p-aminofenylovou, o-, m- p-(N-methylamino)fenylovou, o-, m- nebo p-acetamidofenylovou, o-, m- nebo p-(tri-fluormethoxy)fenylovou, o-, m- nebo p-kyanfenylovou, o-, m- nebo p-methoxyfenylovou, o-, m- nebo p-ethoxyfenylovou, o-, m- nebo p-karboxyfenylovou,

44

4

4 4 «44

4

4444 44 *4

4 *

4 4 4 4 « 4 4 4 · · 4

4 «

4 4 ·

9 4 4 ·, 444 444

4

4 4 4 ο-, m- nebo ρ-methoxykarbony1fenylovou, o-, m- nebo p-ethoxykarbonylfenylovou, o-, m- nebo p-benzyloxykarbony1feny1ovou, o-, m- nebo p-(karboxymethyloxy)fenylovou, o-, m- nebo p-(methoxykarbonyImethyloxy)feny1ovou, o-, ra- nebo p-(methoxykarbonylethyloxy)fenylovou, o-, m- nebo p-(N,N-dimethylamino)fenylovou, o-, m- nebo p-(N-cthylamino)feny1ovou, o-, m- nebo p(Ν,Ν-diethylamino)fenylovou, 0-, m- nebo p-fluorfeny1ovou, o-, m- nebo p-bromfeny1ovou, o-, m- nebo ρ-chlorfenylovou, o-, mnebo p-(difluormethoxy)feny1ovou, o-, m- nebo p-(fluormethoxy)feny1ovou , o-, m- nebo p-formy1 fenylovou, o-, m- nebo p-acetylfenylovou, o-, m- nebo p-propiony1feny1ovou, o-, m- nebo p-butyrylfenylovou, o-, m- nebo p-pentanoy1fenylovou, o-, mnebo p-(feny1su1fonamidokarbony1)feny1ovou, o-, m- nebo p-fe-noxyfenylovou, o-, m- nebo p-methy1thiofeny1ovou, o-, m- nebo ρ-methylsulfiny1fenylovou, o-, m- nebo ρ-methy1su1fony1feny1ovou a naftylovou skupinu.

Het znamená s výhodou skupinu 2- nebo 3-furylovou, 2nebo 3-thieny1ovou, 1-, 2- nebo 3-pyrrolylovou, 1-, 2-, 4- nebo 5-imidazolylovou, 1-, 3-,. 4- nebo 5-pyrazolylovou, 2-, 4nebo 5-oxazolylovou, 3-, 4- nebo 5-isoxazolylovou, 2-, 4- nebo

5-thiazolylovou, 3-, 4- nebo 5-ísothiazolylovou, 2-, 3- nebo

4- pyridylovou, 2-, 4-, 5- nebo 6-pyrimidinylovou, dále s výhodou skupinu 1,2,3-triazol-l-, -4- nebo -5-ylovou, 1,2,4-triazol-1-, 3- nebo -5-ylovou, 1- nebo 5-1etrazo1y lovou. 1,2,3-0xadiazol-4- nebo -5-ylovou, 1,2,4-oxadiazo1-3- nebo -5-ylovou,

1,3,4 — thi ad i azo1 — 2— nebo -5-ylovou, 1,2,4-thiadiazol-3- nebo -5-ylovou, 1,2,3 —thi ad iazo1 —4— nebo -5-ylovou, 2-, 3-, 4-, 5nebo 6-2H-thiopyranylovou, 2-, 3- nebo 4-4H-thiopyranylovou,

3- nebo 4-pyridazinylovou, pyrazinylovou, 2-, 3-, 4-, 5-, 6nebo 7-benzofury1ovou, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzotbienylovou, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-indolylovou, 1-, 2-, 4nebo 5- benzimidazolylovou, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzopyrazolylovou, 2-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzoxazoly1ovou, 3-, 4-,

5- , 6- nebo 7-benzisoxazolylovou, 2-, 4-, 5-, 6- nebo 7-benz4

MM

K

V 4 4 4 »

•f 44

4 4 ♦ 4 * ·

4 « 4

4 4 4

4« 4« • 4 »*

4 4 4 • 4 4 »

Ml 44« 4 4

M 4» thiazolylovou, 2~, 4-, 5-, 6- nebo 7-benzisothiazo1y1ovou, 4-,

5-, 6- nebo 7-benz-2,1,3-oxadiazolylovou, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-,

7- nebo 8-chinolylovou, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-isochinolylovou, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- nebo S-cinnoIiny1ovou, 2-,

4-, 5-, 6-, 7- nebo 8-chinazolinylovou skupinu.

Hěterocyklické skupiny mohou být částečně nebo plně hydrogenovány.

Symbol Het může také například znamenat skupinu 2,3—di— hydro-2-, -3-, -4- nebo -5-furylovou, 2,5-dihydro-2-, -3-, -4nebo -5-fury1ovou, tetrahydro-2- nebo -3-furylovou, 1,3-dioxolan-4-ylovou, tetrahydro-2- nebo -3-thienylovou, 2,3-dihydro1-, -2 -, -3-, -4- nebo -5-pyrrolylovou, 2,5-d i hydro-1 -. -2 - ,

-3-, -4- nebo -5-pyrrolylovou, 1-, 2- nebo 3-pyrrolidinylovou, tetrahydro-1-, -2- nebo -4-imidazolylovou, 2,3-dihydro-l-, -2-, -3-, -4- nebo -5-pyrazolylovou, tetrahydro-1-, -3- nebo -4-pyrazo1y1ovou, 1,4-dihydro-l-, -2-, -3- nebo -4-pyridy1ovou,

1.2.3.4- tetrahydro-1-, -2-, -3-, -4-, -5- nebo -ó-pyridy1ovou,

1-, 2-, 3- nebo 4-piperidinylovou, 2-, 3- nebo 4-morfolinylovou, tetrahydro-2-, -3- nebo -4-pyraný 1ovou, 1,4-dioxanylovou, 1,3-dioxan-2-, -4- nebo -5-ylovou, hexahydro-1-, -3- nebo -4-pyridaziny1ovou, hexahydro-1-, -2-, -4- nebo -5-pyrimidinylovou, 1-, 2- nebo 3-piperazinylovou, 1,2,3,4-tetrahydro1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- nebo -8-chinolylovou, 1,23.4- tetrahydro-l-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- nebo -8-isochinolylovou skupinu.

Skupinou chránící aminoskupinu se míní s výhodou skupina acetylová, propionylová, butyrylová, fenylacetylová, benzoylová, toluylová, skupina POA, methoxykarbonylová, ethoxykarbonylová, 2,2,2-trichlorethoxykarbonylová, BOC, 2-jodethoxykarbonylová, CBZ (karbobenzoxyskupina), skupina 4-methoxybenzy1oxykarbonylová, skupina FMOC, Mtr nebo benzylová skupina.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou mít jedno nebo několik

9 9 * · · · »999 • ·· · · 9 ··· » · · » ♦ '*· 9 « 9 9 4 9 »«* ||»

9 · 9 9 9 9 9 «999 9* 9* 99 99 99 chirálních center a mohou být proto v různých stereoizomernícb formách. Obecný vzorec I všechny tyto formy zahrnuje.

Vynález se tedy týká zvláště sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých alespoň jeden ze symbolů má shora uvedený výhodný význam. Některými výhodnými skupinami sloučenin obecného vzorce I jsou následující sloučeniny dílčích vzorců Ia až Ie, kde zvláší neuvedené symboly mají význam uvedený u obecného

vzorce I	, přičemž znamená v obecném vzorci
I a) R² ,	R³ na sobě nezávisle H nebo A,
R⁴	H, A, Ar, R^J-Ar, Het nebo R⁵-Het a
R⁶ ,	R⁶ ’ H nebo A.
Ib) R² ,	R³ na sobě nezávisle H nebo A,
R⁴	H, A, Ar, R^s-Ar, Het nebo R⁵-Het,
R6 ,	R^É * H nebo A a
Ar	nesubtituovanou nebo jedním substituentem R⁷ sub-
	stituovanou fenylovou skupinu,
Ic) R² ,	R³ na sobě nezávisle H nebo A,
R⁴	H, A, Ar, R^s-Ar, Het nebo R^s-Het,
R* ,	R⁶ ’ H nebo A,
Ar	nesubtituovanou nebo jedním substituentem R⁷ sub-
	stituovanou fenylovou skupinu a
Het	aromatickou nebo nasycenou heterocyklickou skupi-
	nu s jedním kruhem s jedním nebo se dvěma atomy
	dusíku nebo kyslíku, nesubstituovanou nebo substi
	tuovanou jedním nebo dvěma substituenty ze soubo-
	ru zahrnujícího Hal, A, NR⁶R⁶’, CN a NO2 ,
Id) R²,	R³ na sobě nezávisle H nebo A,
R⁴	H, A, Ar nebo R^s-Ar,
R* ,	R⁶’ H nebo A,
Ar	nesubtituovanou nebo jedním substituentem R⁷ sub-

toto toto ·« ·· ·* tototo· ··· · · · · toto · · etototo to β β · • to·· ·· toto ·· *·· ·♦· • ····· a · •toto toto toto toto · · · stituovanou fenylovou skupinu a

X	Gly nebo Ala
R² ,	R³	na sobě nezávisle H nebo A,
R⁴		H, A, Ar nebo R^s-Ar,
R⁶ ,	R6 ’	H nebo A,
Ar		nesubtituovanou nebo jedním substituentem R⁷ sub

stituovanou fenylovou skupinu.

Sloučeniny obecného vzorce I a výchozí látky pro jejich přípravu se připravují o sobě známými způsoby, které jsou popsány v literatuře (například ve standardních publikacích jako Houben-Weyl, Methoděn der organischen Chemie, Georg-Thieme Verlag, Stuttgart), a to za reakčních podmínek, které jsou pro jmenované reakce známy a vhodné. Přitom se může také používat o sobě známých, zde blíže nepopisovaných variant.

Výchozí látky se mohou popřípadě vytvářet in sítu, to znamená že se z reakční směsi neizolují, nýbrž se reakční směsi ihned používá pro přípravu sloučenin obecného vzorce I.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou získat zvláště cyklizací sloučenin obecného vzorce III za podmínek peptidové syntézy. Přitom se účelně pracuje za o sobě známých způsobů peptidové syntézy popsané v literatuře (například Houben-Weyl

l.c.', svazek 15/11, str. 1 až 806, 1974).

Reakce se daří s výhodou v přítomnosti dehydrati začni ho činidla vybraného ze souboru zahrnující ho například karbodi imid, jako jsou DCC1 nebo EDC1, dále anhydrid propanfosfonové kyseliny (Angew. Chem. 92, str.129, 1980), difenylfosforylazid a 2-ethoxy-N-ethoxykarbony1-1,2-dihydrochinolin, v inertním rozpouštědle, jako je například halogenovaný uhlovodík, jako dichlormethan; ether, jako tetrahydrofuran nebo dioxan; amid, jako dimethy1formamid nebo dimethylacetamid; nítril, jako ace14 • 4 44 44 44 44 «4·· *44 4,444

4 4 4444 4 44 ·

444 4 4 44 4 4 444 **·

44444 · ·

444444 «4 44 44 44 tonitril nebo ve směsi těchto rozpouštědel, při teplotě přibližně -10 až +40 °C, s výhodou O až 30 C. K podpoře intramolekulární cyklizace před intramo1ekulární peptidovou vazbou je účelné pracovat ve zředěných roztocích. Reakční doba je podle použitích reakčních podmínek několik minut až 14 dní.

Místo sloučeniny obecného vzorce III se mohou pro reakci používat také vhodné reaktivní deriváty těchto sloučenin, například předaktivovaná karboxylová kyselina nebo halogenid karboxylové kyseliny, symetrický nebo směsný anhydrid nebo aktivní ester. Takové skupiny k aktivaci karboxy 1ové skupiny v typických acylačních reakcích jsou popsány v literatuře (například ve standardních publikacích jako Houben-tVeyl. Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme Verlag, Stuttgart). Aktivované estery se účelně vytvářejí in šitu, například přísadou HOBt nebo N-hydroxysukcinimidu.

Reakce se zpravidla provádí v inertním organickém rozpouštědle, za použití halogenidu karboxylové kyseliny v přítomnosti Činidla vázajícího kyselinu, s výhodou organické zásady, jako je triethylamin, dimethy1 ani 1in, pyridin nebo chinolin, Příznivé může být také přidání hydroxidu, uhličitanu nebo hydrogenuhličitanu alkalického kovu nebo kovu alkalické zeminy nebo jiné soli slabé kyseliny alkalického kovu nebo kovu alkalické zeminy, s výhodou draslíku, sodíku, vápníku nebo cesia.

Výchozí látky obecného vzorce III jsou zpravidla nové. Mohou se připravovat o sobě známými způsoby syntézy peptidů.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou získat také tak, že se uvolňují ze svých funkčních derivátů solvolýzou zvláště hydrolýzou nebo hydrogenolýzou.

Pro solvolýzu nebo pro hydrogeno1ýzu jsou jako výchozí • * • · • »·»«· ·· • · * · * * · »η» »* «· ·· · · ·· látky vhodné sloučeniny, které mají místo jedné nebo několika volných aminoskupin a/nebo hydroxylových skupin odpovídající chráněné aminoskupiny a/nebo hydroxylové skupiny, s výhodou sloučeniny, které místo jednoho H-atomu, který je spojen s N-atomem mají skupinu chránící aminoskupinu, například sloučeniny, které odpovídají obecnému vzorci I, avšak místo NH2 skupiny mají skupinu NHR’ (kde R’ znamená skupinu chránící aminoskupinu, například skupinu BOC nebo CBZ).

Dále jsou jako výchozí látky vhodné sloučeniny, které místo H-atomů hydroxylové skupiny mají skupinu chránící hydroxylovou skupinu, například sloučeniny, které odpovídají obecnému vzorci I, avšak místo hydroxyfenyIové skupiny mají R’’Ofenylovou skupinu (kde R’’ znamená skupinu chránící hydroxylovou skupinu).

V molekule výchozí látky může být také několik stejných nebo různých skupin chránících aminoskupinu a/nebo hydroxyskuí pinu. Pokud molekula obsahuje navzájem odlišné chránící skupiny, mohou se v mnoha případech tyto chránící skupiny selektivně odštěpovat.

Výraz skupina chránící aminoskupinu’’ je obecně znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) aminoskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena. Typické pro takové skupiny jsou zvláště nesubstituované nebo substituované skupiny acylové, arylové, aralkoxymethylové nebo aralkylové. Jelikož se skupiny, chránící aminoskupinu, po žádoucí reakci (nebo po sledu reakcí) odstraňují, nemá jejich druh a velikost rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 8 atomy uhlíku. Výraz acylová skupina je zde vždy míněn v nejširším slova smyslu. Zahrnuje acylové skupiny odvozené od alifatických, aralifatických, aromatických nebo heterocyklických karboxylových nebo • · • · 0 • 0 00

0 0 « 0 «

• 0 00 • 0 • 0 ·

* 0 0 *

0 0 0

000 000 «

00 sulfonových kyselin, jakož zvláště skupiny a 1koxykarbonylové, aryloxykarbonylové a především ara1koxykarbonylové. Jakožto příklady takových acylových skupin se uvádějí skupiny alkanoylové jako acetylová, propionylová, butyrylová skupina; aralkanoylové jako fenylacetylová skupina; aroylové jako benzoylová nebo toluylová skupina; aryloxyalkanoylové jako fenoxyacetylová skupina (POA); a 1 koxykarbonylové, jako skupina methoxykarbonylová, ethoxykarbonylová, 2,2,2-trich1orethoxykarbony1ová, terc.-butoxykarbonylová (BOC), 2-jodethoxykarbonylová; aralkoxykarbonylové jako skupina benzyloxykarbonylová (karbobenzoxy-CBZ), 4-methoxybenzyloxykarbonylová nebo 9-f1uoreny1methoxykarbonylová (FMOC) skupina a ary 1su1fony 1ové jako skupina 4methoxy-2,3,6-1rimethylfeny 1su1fony1ová (Mtr). Výhodnými skupinami, chránícími aminoskupinu, jsou skupiny BOC a Mtr a také skupina CBZ, Fmoc, benzylová a acetylová skupina.

Výraz skupina chránící hydroxyskupinu je obecně rovněž znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) hydroxyskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena. Typické pro takové skupiny jsou shora uvedené nesubstitUované nebo substituované skupiny arylové, araikylové nebo acylové dále také skupiny alkylové. Jelikož se skupiny, chránící hydroxyskupinu, po žádoucí reakci (nebo reakčním sledu) odstraňují, nemá jejich druh a velikost rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 10 atomy uhlíku. Jakožto příklady skupin chránících hydroxylovou skupinu, se uvádějí skupina benzylová, p-nitrobenzylová, p-toluensuifonylová terc.-butyIová a acetylová, přičemž jsou obzvláště výhodnými skupina benzylová a terc.butylová. Skupiny COOH v asparagové a v glutamové kyselině jsou především chráněny ve formě svých terč.-butylesterů (například Asp(OBut)).

Uvolňování sloučenin obecného vzorce I z jejích funk- 17 • Β · · * · · · · ·

Β Β Β · Β ♦· · » «Β Β

Β ΒΒΒ « Β Β Β Β Β ·Β· ··»

Β ΒΒΒΒ· Β ·

ΒΒΒ · Β · ΒΒ ΒΒ ΒΒ ΒΒ

Čních derivátů se daří - podle použité chránící skupiny - například silnými kyselinami, jako je zvláště kyselina trifluoroctová a chloristá avšak také jinými silnými anorganickými kyΛ setinami, jako je kyselina chlorovodíková nebo sírová, silnými organickými karboxylovými kyselinami, jako je trichloroctová kyselina nebo sulfonovými kyselinami, jako je kyselina benzensulfonová nebo ρ-toluensu1fonová. Je možné, nikoliv však vždy nutné provádět reakci v přítomnosti přídavných rozpouštědel.

Jakožto inertní rozpouštědla jsou vhodné organické.napřiklad karboxylové kyseliny, jako je kyselina octová, ethery, jako je tetrahydrofuran (THF) nebo dioxan, amidy, jako je dimethyl formamid (DMF), halogenované uhlovodíky, jako je dichlormethan, dále také alkoholy, jako je methanol, ethanol nebo isopropanol jakož také voda. V úvahu mohou přicházet také směsi těchto rozpouštědel. Kyseliny trifluoroctové se s výhodou používá v nadbytku bez přísady dalších rozpouštědel, kyseliny chloristé ve formě směsi kyseliny octové a 70% kyseliny chloristé v poměru 9:1. Reakční teplota pro odštěpení je účelně přibližně 0 až přibližně 50 ’C, s výhodou 15 až JO °C (teplota místnost i).

Skupina BOC, OBut a Mtrše může například s výhodou odštěpovat kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu nebo přibližně 3 až 5n kyselinou chlorovodíkovou v dioxanu při teplotě ^? 15 až 30 ’C, zatímco skupina FMOC přibližně 5 až 50% roztokem dimethylaminu, diethylaminu nebo piperidinu v dimethylformamidu při teplotě 15 až 30 °C.

Tritylová skupina se používá ke chránění aminokyselin histidin, asparagin, glutamin a cystein. Odštěpování chránící skupiny se provádí podle žádoucího konečného produktu systémem trifluoroctová kyselina/10 % thiofenolu, přičemž se tritylová skupina od uvedených aminokyselin odštěpí. Při použití systému trifluoroctová kyše 1ina/anisol nebo trifluoroctová kyselina/ • O O · β β 9 9 * · 999 9 9 9 *

99*99 99 99 999 999

99990 9 9

9999 99 09 99 9« 99 thioanisol se odštěpí tritylová skupina z His, Asn a Gin, zůstává však na postranním řetězci Cys.

Hydrogenolyticky odstranitelné chránící skupiny (například skupiny CBZ nebo skupina benzylová) se mohou odštěpovat například zpracováním vodíkem v přítomnosti katalyzátoru (například katalyzátoru na bázi ušlechtilého kovu, jako palladium, účelně na nosiči, jako na uhlí). Jakožto rozpouštědlo se hodí shora uvedená rozpouštědla, zvláště například alkoholy, jako methanol nebo ethanol nebo amidy jako dimethylformamid. Hydrogenolýza se zpravidla provádí při teplotě přibližně O až 100 °C, za tlaku přibližně 0,1 až 20 MPa, s výhodou při teplotě 20 až 30 ’C, za tlaku přibližně 0,1 až 1 MPa. Hydrogenolýza CBZ skupiny se daří například dobře na 5 až 10% palladiu na uhlí v methanolu, nebo za použití amoniumformátu (místo vodíku) na palladiu na uhlí v systému methanol/dimethylformamid při teplotě 20 až 30 °C.

Zásada obecného vzorce I se může kyselinou převádět na příslušnou adiční sůl s kyselinou, například reakcí ekvivalentního množství zásady a kyseliny v inertním rozpouštědle, jako je například ethanol a následným odpařením rozpouštědla. Pro tuto reakci přicházejí v úvahu vzláště kyseliny, které poskytují fysiologicky nezávadné soli. Může se používat anorganických kyselin, jako jsou kyselina sírová, dusičná, halogenovodíkové kyseliny, jako chlorovodíková nebo bromovodíková, fosforečné kyseliny, jako kyselina ortofosforečná, sulfaminová kyselina a ogranické kyseliny, zvláště alifatické, alicyklické, aralifatické, aromatické nebo heterocyklické jednosytné nebo několikasytné karboxylové, sulfonové nebo sírové kyseliny, jako jsou kyselina mravenčí, octová, propionová, pivalová, diethyloctová, malonová, jantarová, pimelová, fumarová, maleinová, mléčná, vinná, jablečná, citrónová, glukonová, askorbová, nikotinová, isonikotinová, methansulfonová, ethansulfonová, ethandisulfonová, 2-hydroxyethansulfonová, benzensulfono19 ·♦ ·· «· · · ** *· • · Φ Φ «4» aaa» • · Φ φ Φ · φ Φ Φ ·· Φ

Φ ΦΦΦ φ φ φ · φ «Φ·

Φ ΦΦΦΒΦ Φ ·

ΦΦΦβ ΦΦ ·Φ «Φ ·Φ ·· vá, p-tοluensu1fonová,>nafta 1enraonosu1fonová a nafta 1endisu1fonová a laurylsírová kyselina. Solí s fysiologicky nevhodnými kyselinami, například pikrátů, se může používat k izolaci a/ nebo k čištění sloučenin obecného vzorce I.

Na druhé straně se sloučeniny obecného vzorce I reakcí se zásadou mohou převádět na své fysiologicky vhodné soli kovové nebo amoniové. Jakožto soli přicházejí v úvahu zvláště soli sodné, draselné, horečnaté, vápenaté a amoniové, dále substituované amoniové soli, například dimethylamoniové, diethylamoniové, diisoproipylamoniové, monoethanolamoniové, diet hano 1amoniové, nebo diisopropy1amoniové, cyklohexylamoniové, dicyk1ohexy1amoniové, dibenzyIethvIendiamoniové, dále například soli s argininem nebo s lysinem.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich fysiologicky nezávadné soli se mohou používat pro výrobu farmaceutických prostředků, zvláště nechemickou cestou. Za tímto účelem se mohou převádět na vhodnou dávkovači formu s alespoň jedním pevným nebo kapalným a/nebo polokapalným nosičem nebo pomocnou látkou a popřípadě ve směsi s jednou nebo s několika jinými účinnými látkami.

Vynález se proto také týká prostředků’, zvláště farmaceutických prostředků, obsahujících alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I, a/riebo její fysiologicky vhodnou sůl.

Těchto prostředků podle vynálezu se může používat jakožto léčiv v humánní a ve veterinární medicíně. Jakožto nosiče přicházejí v úvahu anorganické nebo organické látky, které jsou vhodné pro enterální (například orální) nebo pro parenterální nebo topické podávání nebo pro podávání ve formě inhalčních sprejů a které nereagují se sloučeninami obecného vzorce I, jako jsou například voda, rostlinné oleje, benzylalkoholy, alkylenglykoly, polyethylenglykoly, glycerintriacetát, želatina, • »

4» »· « · · 4 • · * * 4 4 4 • * 44 4 4 4 4 li » » · » 4 4«·

4 4 ·

4 4 4

44 »4 fr 4 » · «4.4

44· 444 • 4 • 4 4 4 uhlohydráty, jako laktóza nebo Škroby, stearát horečnatý, mastek a vaselina. Pro orální použití se hodí zvláště tablety, pilulky, dražé, kapsle, prášky, granuláty, sirupy, štávy nebo kapky, pro rektální použití čípky, pro parenterální použití roztoky, zvláště olejové nebo vodné roztoky, dále suspenze, emulze nebo implantáty, pro topické použití masti, krémy nebo pudry. Sloučeniny podle vynálezu se také mohou lyofilizovat a získaných lyofilizátů se může například používat pro přípravu vstřikovatelných prostředků. Prostředky se mohou sterilovat a/ nebo mohou obsahovat pomocné látky, jako jsou kluzná činidla, konzervační, stabilizační činidla a/nebo smáčedla, emulgátory, soli k ovlivnění osmotického tlaku, pufry, barviva, chutové přísady a/nebo ještě jednu další nebo ještě několik dalších úč.inných látek, jako jsou například vitaminy. Pro podávání ve formě inhalačních sprejů se účinná látka rozpouští nebo suspenduje ve hnacím plynu nebo ve směsi hnacích plynů (jako jsou. například oxid uhličitý nebo f 1 uorch .1 orované uh1ovodíky).V takovém případě se přitom používá účinné látky v mikronizované formě, přičemž se může přidávat alespoň jedno fyziologické kompatibilní rozpouštědlo, například ethanol. Inhalační roztoky se mohou podávat za použití o sobě známých zařízení k tomu t o ú č e1u.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich fyziologicky nezávadné soli se mohou podávat jakožto integrinové inhibitory v boji proti nemocem, jako jsou zvláště thrombosy, srdeční infarkt, koronární onemocnění srdce, arteriosklerosa, nádory, osteoporóza, záněty a infekce.

Sloučeniny obecného vzorce I a/nebo jejich fyziologicky vhodné soli, jsou také vhodné pro použití při patologických pochodech udržovaných a šířených angiogenezí, zvláště nádorů, nebo rheumatoidní arthritis.

Sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu se zpravidla používá v dávkách podobných jako obchodně známé peptidy, • ft ftft ftft ftft ftft ·· «ftft ft ftftft ftftft· • ftft ftft ftftft ft ftft ft • ftftft ftft ftft ftft »·· ftftft « ···«* · ft ftftft* ftft ftft ·· ftft ft* zvláště obdobně jako sloučeniny podle amerického patentového spisu číslo 4 472305, S výhodou v dávce přibližně 0,05 až 500 mg, zvláště 0,5. až 100 mg na dávkovači jednotku. Denní dávka je s výhodou přibližně 0,01 až 2 mg/kg tělesné hmotnostní. Určitá dávka pro každého jednotlivého jedince závisí na nejrůznějších faktorech, například na účinnosti určité použité sloučeniny, na stáří, tělesné hmotnosti, všeobecném zdravotním stavu, pohlaví, stravě, na okamžiku a cestě podání, na rychlosti vylučování, na kombinaci léčiv a na závažnosti určitého onemocnění. Výhodné je parenterální podávání.

Kromě toho se sloučeniny obecného vzorce I jakožto integrinové ligandy mohou používat pro výrobu sloupců pro afinitní chromatografií k výrobě čistého integrinu. Ligand, to znamená sloučenina obecného vzorce I, se přitom pres kotvicí funkci, například karboxylovou skupinu Asp. kovalentně kopuluje na polymerní nosič.

Jakožto polymerní nosiče jsou vhodné z chemie peptidů. o sobě známé polymerní pevné fáze s výhodou s hydrofilními vlastnostmi, například sesítěné polycukry, jako celulóza, sepharose nebo Sephadex^R, akrylamidy, polymery na polyethylenglykolové bázi nebo Tentakelpolymer^R.

Výroba materiálů pro afinitní chromatografií k čištění integrinu se provádí za podmínek, které jsou pro kondenzaci aminokyselin běžné a o sobě známé.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou mít jedno nebo několik chirálních center a mohou být proto v racemické nebo v opticky aktiyní formě. Popřípadě se získané racemáty mohou o sobě známými způsoby mechanicky nebo chemicky dělit na své enantiomery. S výhodou se vytvářejí diastereomery z racemátu reakcí s opticky aktivním dělicím činidlem. Jakožto příklady takových dělicích činidel se uvádějí opticky aktivní kyseliny, ja22 b* 4« ·· ·· *· • « « 4 ♦ 4 * 4 · 4 * • · ♦ 4 4 4«· · 44 4 «44 4 4 » 4 4 4 444 444

44444 4 4

4444 44 44 44 4« 44 ko jsou D a L formy kyseliny vinné, diacetylvinné, dibenzoylvinné, kyseliny mandlové, jablečné nebo mléčné nebo různé opticky aktivní kafrsulfonové kyseliny, jako je kyselina β-kafrsulfonová. Výhodné je také dělení enantiomerů pomocí sloupců plněných opticky aktivními dělicími činidly (například dinit— robenzoy1 feny 1glycinem); jako eluční činidlo je vhodná například směs hexan/isopropano1/acetonitri 1 například v objemovém poměru 82:15:3.

Je také samozřejmě možné opticky aktivní sloučeniny obecného vzorce I získat některým ze shora uvedených způsobů, přičemž se vychází z opticky aktivních látek.

Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Teploty se uvádějí vždy ve stupních Celsia. Výraz zpracování obvyklým způsobem v následujících příkladech praktického provedení znamená:

Popři pádě se při dává voda, popřípadě podle konstituce konečného produktu se hodnota pH nastavuje na 2 až 10, reakční směs se extrahuje ethylacetátem nebo dichlormethanem, provádí se oddělení, vysušení organické fáze síranem sodným, odpaření a čištění chromatografii na silikagelu a/nebo krystalizací.

Hodnoty Rf jsou na silikagelu, eluční činidlo je systém ethylacetát/methanol 9:1,

RT je retenční doba (v minutách) při HPLC v následujících systé mech:

[A] sloupec: Lichrosorb* RP 18 (250 x 4; 5 pm);

eluční činidlo A: 0,1 % TFA ve vodě eluční činidlo B: 0,1 % TFA v 90 % acetonitrilu a 10 % vody tok: 1 ml/min gradient: 20 až 95 % B/50 min • 4' • · ·♦ • 4 4 < 4 . ·

4BBB ·:!

ΒΒ

Β· • · 4 • 4 ·♦♦ • 4 · « • 4 · ·

Β* »4 4

Β · Β. 4.

·*· ··· • 4 ··

Detekce při 215 nm.

Dělební diastereomerů se provádí s výhodou za uvedených podmínek.

Hmotová spektrometrie (MS): FAB (bombardování rychlými atomy) (M+H)⁺

Příklady provedení, vynálezu

Příklad 1

Ekvimolární množství methylesteru (R,S)-2-brom-2-feny1 octové kyseliny a 3^hydroxymethylani1 inu se nechávají reagovat za získání methylesteru N-(3-hydroxymethy1 feny1)aminofenvloctové kyseliny. Reakcí s thionylchloridem se získá methylester N-(3-chlormethy1 feny 1)aminofeny1octové kyseliny a následnou reakcí s azidem sodným,methylester N-( 3-azidomethylfenyl)aminofenyloctové kyseliny (A). Roztok'9,2 g A ve 350 ml ethylacetátu se hydrogenuje v přítomnosti 1 g palladia na uhlí (5%) po dobu 35 minut. Po odstranění katalyzátoru a rozpouštědla se získá methylester N-(3-aminomethy1feny1)aminofeny1 octové kyseliny (B) v podobě oleje o RT 19,5; FAB 271.

Reakcí B s dibenzylanhydridem se získá methylester N-(3benzyloxykarbonylamínomethylfenyl)aminofenyloctové kyseliny, který se následně hydrolyzuje systémem hydroxid draselný/methanol na N-(3-benzyloxykarbonylaminomethylfenyl)aminofenyIoctovou kyselinu (= (Z-3-AMP)aminofenyloctovou kyselinu). Reakcí vždy s jedním ekvivalentem H-Arg(Mtr)-Gly-PtBu, DCCl a HOBt v dichlormethanu se získá Z-3-AMP-Phg-Arg(Mtr)Gly-0tBu. Odstranění Z chránící skupiny se provádí shora popsanou katalytickou hydrogenací. Následnou peptidovou kopulací s BOC-Asp(OBzl)-OH se získá BOC-Asp(OBz1)-3-AMP-Phg-Arg(Mtr)-Gly-OtBu. Po odštěpení chránící skupiny BOC a terč.-buty1 esteru v systé99

99 I» 9» 99 * · · 9 9·· 9 9 9 9

9 9 9 9 999 · · · · ···)> 9 9 9 9-9 999 999

9 9 9 9 9 · 9

999» 9» ·9 99 ·· ·· mu kyselina chlorovodíková/dioxan se získá H-Asp(OBz1)-3-AMPPhg-Arg(Mtr)-Gly-OH a cyklizaci sloučenina cyklo-(Asp(OBz1)-3AMP-Phg-Arg(Mtr)-Gly). Zmýdelněním esteru, odštěpením chránící skupiny Mír v 98% kyselině trifluoroctové, čištěním a dělením chromatografii HPLC se získá cyklo-(Asp-3-AMP-L-Phg-A.rg-Gly) a cyklo-(Asp-3-AMP-D-Phg-Arg(Mtr)-Gly).

Obě sloučeniny mají následující charakterizaci:

RT 15,5 FAB 567 popřípadě TR 12,5 FAB 567, přičemž přiřazení K oběma diastereomerům je otevřené.

Obdobně se získá z 2-brom-3-methylmáselné kyseliny cyklo-(Asp-3-AMP-L-Val-Arg-Gly) a cyklo-(Asp-3-AMP-D-Val-Arg(Mtr)-Gly).

z 2-bromoctové kyseliny cyklo-(Asp-3-AMP-Gly-Arg-Gly) a z 2-brom3-fenylpropionové kyseliny cyklo-(Asp-3-AMP-L-Phe-Arg-Gly) a cyklo-(Asp-3-AMP-D-Phe-Arg-Gly).

Následující příklady blíže objasňují, nijak však neomezují farmaceutické prostředky podle vynálezu:

Příklad A

Injekční ampulky

Roztok 100 g účinné látky obecného vzorce I a 5 g dinatriumhydrogenfosfátu se ve 3 litrech dvakrát destilované vody upraví 2 n kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 6,5, Sterilně se filtruje, plní se do injekčních ampulí, za sterilních podmínek se lyofilizuje a sterilně se uzavře. Každá ampule ob25 • 4- *♦ 44 44 *4 ··

4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

4.1 · 4 „ 4 * ·♦· 4 *4' * • ···!<>« 4 4' *.« '444 444 • 4/ 4 4 4 4- 4 4

4 4, »4 «4 44 44 44 sáhuje 5 mg účinné látky.

Příklad B

Čí pky

Roztaví se směs 20 g účinné látky obecného vzorce I se 100 g sojového lecithinu a 1400 g kakaového másla, vlije se do forem a nechá se ztuhnout. Každý čípek obsahuje 20 mg účinné látky.

Příklad C

Roztok

Připraví se roztok 1 g účinné látky obecného vzorce I a

9,38 g dihydrátu natriumdihydrogenfosfátu, 28,48 g dinatriumhydrogenfosfátu s 12 molekulami vody a 0,1 g benzalkoniumchloridu v 940 ml dvakrát destilované vody. Hodnota pH se upraví na 6,8, doplní se na jeden litr a steriluje se ozářením. Tohoto roztoku se může používat například jako očních kapek.

Příklad D

Mast

Smísí se 500 mg účinné látky obecného vzorce I a 99,5 g vaseliny za aseptických podmínek.

Příklad E

Tablety

Směs 1 kg účinné látky obecného vzorce 1, 4 kg laktosy, 1,2 kg bramborového škrobu, 0,2 kg mastku a 0,1 kg stearátu hořečnatého se lisuje o sobě známým způsobem na tablety, při94 ·· 44 44 94 · · ♦ 4 4 4

4 4 * 9 994

4. 4 4 414-4 9 4 9 4

4 4 4 4 4

4,4 4 «· 9 4 9 4:

4 9 9

4 4 «

999 449

4

94 čemž každá tableta obsahuje 10 mg účinné látky obecného vzorce I .

Příklad F

Dražé

Podobně jako podle příkladu E se lisují tablety, které se o sobě známým způsobem povléknou povlakem ze sacharosy, kukuřičného škrobu, mastku, tragantu a barviva.

Příklad G

Kaps 1 e

Plní se 2 kg účinné látky obecného vzorce I do tvrdých želatinových kapslí, přičemž každá kapsle obsahuje 20 mg účinné látky obecného vzorce I.

Příklad H

Inhalační sprej

Rozpustí se 14 g účinné látky obecného vzorce I v 10 1 isotonického roztoku chloridu sodného a plní se do běžných obchodních nádob pro stříkání s pumpovým mechanizmem. Roztok se může stříkat do úst nebo do nosu. Každý střik (přibližně 0,1 ml) odpovídá dávce přibližně 0,14 mg.

Průmyslová využitelnost

Derivát cyklopeptidu jako inhibitor integrinu vhodný pro výrobu farmaceutických prostředků zvláště pro profylaxi a ošetřování zvláště thrombosy, srdečního infarktu, nemocí srdce, arteriosklerosy, nádorů, osteoporózy, zánětů a infekcí.

Claims

a a a a

PATENTOVÉ NÁROKY 1 . Sloučenina obecného vzorce I cyklo - (Arg-X-Asp-R¹) (I) kde znamená

X Gly, Ala nebo NH-NH-CO, přičemž uvedené aminokyseliny mohou být také derivát izovány a aminokyselinové zbytky jsou přes α-aminoskupinu a ct-karboxylovou skupinu peptidovitě navzájem spojeny,

R^l skupinu obecného vzorce II kde znamená na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu A. Ar, R^s-Ar , Het nebo R⁵-Het.

A alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

Ar fenylovou skupinu popřípadě s jedním, se dvěma nebo se třemi subsubstituenty ze souboru zahrnujícího skupinu R⁷, R⁸ nebo R⁹ , nebo nesubstituovanou naftylovou skupinu,

R^s alkylenovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

R⁶ a R⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu A, skupinu benzylovou nebo fenylovou, • to ·» toto toto ·· toto • to· to- · · ·· to to« « • to to » ··· · ·· · ·' to to i »1 · toto toto ·*· «·· • to. · · « · to to tototoFto.' toto toto · ·) toto ··

R⁷, R^s, R⁹ na sobě nezávisle skupinu R⁶, OR⁶, Hal, NOa , NR⁶R⁶’. NHCOR⁶, CN, NHSO2R⁶, COOR⁶ nebo COR⁶ ,

Hal atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu a

Het jednokruhový nebo dvoukruhový heterocyklus s jedním až čtyřmi atomy ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku a síry, popřípadě s jedním, se dvěma nebo se třemi subsubstituenty ze souboru zahrnujícího Hal, skupinu A, NR⁶R⁶ ’ . CN a NO2, přičemž pokud jde o zbytky opticky aktivních aminokyselin nebo derivátů aminokyselin jsou zahrnuty jak D tak také L formy a jejich fyziologicky vhodné soli.
2. Enantiomer nebo diastereomer derivátu sloučeniny podle nároku i obecného vzorce I,
3. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1 (a) cyklo-(Arg-Gly-Asp-3-AMP-L-Phg), (b) cyklo-(Arg-Gl_v-Asp-3-AMP-D-Phg), (c) cyklo-(Arg-Gly-Asp-3-AMP-L-Va]), (d) cyklo-(Arg-Gly-Asp-3-AMP-D-Va1), (e) cyklo-(Arg-Gly-Asp-3-AMP-Phe), (f) cyklo-(Arg-G1y-Asp-3-AMP-D-Phe), (g) cyklo-(Arg-Gly-Asp~3-AMP-Gly).
4. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku l,nebo jejích solí ,vyznačující se t í m, že

a) se sloučenina obecného vzorce III

H-Z-OH (III) kde znamená

Z skupinu -Arg-X-Asp-R¹-X-Asp-R¹-Arg29

4» ·· ** 4- ·· ·· • · 4 4 4 4 4 4 4 · 4

4' 4 · 4 »44« 4 44 4 • »·»,♦ · 4« 4 4 ··· ···

4 *4444 4 4 *4 4 4 4 4 4 4 «·' 4 4 4 4

-Asp-R¹-Arg-X- nebo -R¹-Arg-X-Asp- , a X a R¹ mají shora uvedený význam, nebo reaktivní derivát sloučeniny obecného vzorce II zpracovává cyklizačním činidlem, nebo

b) se sloučenina obecného vzorce I uvolňuje ze svého funkčního derivátu zpracováním solvolyzacním nebo hydrogenolvzácním činidlem a/nebo se zásaditá sloučenina nebo kyselá sloučenina obecného V2orce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sůl.
5. Způsob výroby farmaceutického prostředku, vyznačující se t í m, že se sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo její fysio log i cky vhodná sůl zpracovává na dávkovači formu s alespoň jedním pevným, kapalným nebo polopevným nosičem nebo s pomocnou látkou.
6. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í s e t í m , že obsahuje jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo její fysiologicky vhodnou sůl.
7. Sloučenina obecného vzorce I a její fysiologicky nezávadné soli jakožto inhibitory integrinu k potírání thrombos, srdečního infarktu, koronárních nemocí srdce, arteriosklerosy, nádorů, osteoporózy, zánětů a infekcí.
8. Použití sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo jejich fysiologicky vhodných solí při 'patologických procesech probíhajících a šířících se angiogenezí.
9. Použití sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo jejich fysiologicky vhodných solí pro výrobu léčiva,
10. Použití sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 a jejich fysiologicky vhodných solí pro boj proti nemocem.