CS264880B1 - Způsob izolace ergokristinu - Google Patents

Abstract

Ergokristin je důležitý meziprodukt výroby léčiv. Získává se izolací z námele. Podle dosud užívaných postupů se námel vyextrahoval vhodným rozpouštědlem a ze získaného extraktu se připravil surový ergokristin. Ten se v dalším stupni převedl na kyselý fosforečnan ergokristinia, jehož rozkladem se získal ergokristin. Postup umožňuje získat čistý ergokristin bez nutnosti izolacje surového ergokristinu. Surový ether-ethanolový nebo ether-methanolový extrakt námele se rozmíchá s vodným roztokem kyseliny sírové, citrónové nebo chlorovodíkové. Tím se vyloučí příslušná sůl ergokristinu, z niž se po izolaci uvolní báze ergokristinu, která krystalizací poskytne čistý ergokristin.

Description

Vynález se týká izolace ergokristinu z ergokristinového námele.

Ergokristin, alkaloid ergotoxinové skupiny peptidiokých námelových alkaloidů, má praktický význam zejména ve formě terapeuticky používaného 9,10-dihydroderivátu, který je v lékařství využíván bu3 přímo jako takový, nebo ve směsi s jinými farmaky.

Izolaci čistého ergokristinu byla už v odborné literatuře věnována značná pozornost. Všechny známé postupy využívají k oddělování nežádoucích alkaloidních i balastních příměsí tvorby solí ergokristinia. A. Stolí a A. Hofmanu připravili di-p-toluyl-l-vinan ergokristinia (Helv. Chim. Acta 26. 1570 /1943/); Berger a Carr poprvé připravili fosfát ergokristinia (J. Chem. Soc. 21' 337 /1907/). Přípravě fosfátu ergokristinia byla později věnována řada prací a tento se stal klíčovým meziproduktem izolace čistého ergokristinu (Z. Physiol. Chem. 250, /1937/); čs. vynálezy 86 237, 227 996 a 228 851, mačarské .patenty 142 095 (1951) a 17 749 (1980)). Všechny tyto postupy detailně propracovávají reakční podmínky přípravy výše uvedeného fosfátu za účelem přípravy co nejčistší solí s maximálním výtěžkem a z co nejméně rafinovaného surového materiálu. Ve všech případech se však vychází z určitého, definovaného surového ergokristinu, který se získává zpracováním námele nebo jiného zdroje (fermentační tekutiny nebo mycelia).

Fosfát ergokristinia se v dalším stupni převádí na bázi ergokristinu. Podle čs. vynálezu č. 86 237 se fosfát ergokristinia rozloží ve vodném prostředí účinkem hydrouhličitanu sodného nebo amoniaku a báze ergokristinu se vyjme do směsi etheru a chloroformu, načež se získaný roztok zahustí na odparek, který se zkrystaluje z acetonu. Podle čs. vynálezu č. 202 484 se fosfát ergokristinia rozloží v nevodném prostředí účinkem plynného amoniaku, vyloučené amonné soli se odfiltrují a ergokristin se izoluje po zahuštění opět krystalizací.

Příprava čistého ergokristinu z námele zahrnuje tedy podle dosud známých postupů v podstatě 3 stupně:

1. extrakce námele a převedeni získaného extraktu na definovaný surový ergokristin

2. příprava fosfátu ergokristinia

3. uvolnění báze ergokristinu z fosfátu a její krystalizace.

Izolaci ergokristinu podstatně zjednodušuje postup podle vynálezu. Jeho podstata spočívá v tom, že umožňuje získat čistý ergokristin přímo ze surového extraktu získaného bateriovou extrakcí ergokristinového námele směsí etheru s 5 až 12 % obj. methanolu nebo ethanolu a vyznačuje se tím, že se k surovému extraktu přidá vodný roztok kyseliny poskytující málo rozpustnou a dobře krystalizující sůl ergokristinu. Vyloučená sůl ergokristinu se koncentruje filtrací, načež se z ní uvolní báze, která se zkrystaluje z organického rozpouštědla.

Příprava dobře krystalizující soli ergokristinu přímo z ether-ethanolového nebo ether-methanolového extraktu námele je velmi překvapivá a nebyla dosud popsána. Tak např. přídavkem ekvivalentu kyseliny chlorovodíkové k ether-ethanolovému extraktu námele, který obsahuje cca 3 g/1 alkaloidů, dojde k vyloučení chloridu ergokristinia v dobře filtrovatelném stavu ve výtěžku přesahujícím 75 %. Podobně přídavkem 3% hmot. vodného roztoku kyseliny citrónové ke stejnému surovému extraktu v množství 3 ekvivalentů kyseliny citrónové dojde k vyloučení oitranu ergokristinia ve výtěžku 70 %. Analogicky přídavkem vodného roztoku, který obsahuje 1 až 5 ekvivalentů kyseliny sírové, dojde k vyloučení síranu ergokristinia ve výtěžku 80 8.

Vyloučené soli ergokristinu jsou velmi čisté. V matečných louzích zůstanou nejen balastní látky, zejména tuky, kterých ether-alkoholový extrakt obsahuje značné množství, ale i nežádoucí doprovodné alkaloidy - ergokristinin, alfa-ergokryptin a ergometrin. Překvapivý je zejména značný rafinační účinek výše uvedených solí pro alfa-ergokryptin; dosud připravovaný fosfát ergokristinia odděluje alfa-ergokryptin nedostatečně a alfa-ergokryptin musí být odstraňován několikanásobnou krystalizací báze ergokristinu po uvolnění z fosfátu.

Podmínkou vysokého výtěžku přípravy výše uvedených solí z ether-ethanolového, případně ether-methanolového extraktu je:

1. vysoký obsah alkaloidů v surovém extraktu

2. minimální obsah ethanolu nebo methanolu v surovém extraktu.

Oba tyto požadavky jsou v rozporu. Pro vysoký obsah alkaloidů v surovém extraktu je nutno extrakční činidlo pro vyluhování námele polarizovat přídavkem nižšího alifatického alkoholu; čím vyšší obsah alkoholu, tím koncentrovanější extrakt lze získat (viz čs. vynález č. 85 995). Pro vyloučeni výše uvedených solí ergokristinu je naopak nutno obsah alkoholu v extraktu minimalizovat. Při obsahu 20 i obj. ethanolu je výtěžek solí nízký a navíc vyloučená krystalická látka je špatně filtrovatelná. Proto byla hledána optimální koncentrace methanolu nebo ethanolu v etheru. Bylo zjištěno, že při obsahu alkoholu vyšším než 5 i obj. už lze důslednou aplikací bateriové extrakce dosáhnout koncentrace alkaloidů v surovém extraktu vyšší než 2 g/1 a výtěžek přípravy solí výše uvedeným postupem je vyhovující.

Soli připravené postupem podle vynálezu lze v dalším snadno převést na bázi ergokristinu. Uvolnění báze lze provést jak klasicky, to je s využitím extrakce mezi vodu a s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, s výhodou dichlormethan nebo chloroform, tak i nasuspendováním chloridu, síranu nebo citranu ergokristinia do vhodného organického rozpouštědla a rozložením soli plynným amoniakem. První postup je vhodnější při přípravě čistého ergokristinu jako finálního produktu, druhý postup je naopak výhodnější při přípravě ergokristinu pro hydrogenaci na dihydroergokristín. Potom lze s výhodou vykrystalovat bázi ergokristinu i s příslušnou amoniovou solí a tuto oddělit až v následujícím stupni při přípravě roztoku pro hydrogenaci.

Postup podle vynálezu blíže vysvětlíme následujícími příklady.

Příklad 1 kg ergokristinového námele o celkovém obsahu alkaloidů 0,80 % hmot., z toho 0,65% hmot. ergokristinu, 0,09 % hmot. alfa-ergokryptinu a 0,04 % hmot. ergometrinu, bylo jemně pomleto a zalkalizováno přídavkem 1 1 10% hmot. roztoku uhličitanu sodného. Po čtyřech hodinách stání byla droga bateriovým způsobem extrahována směsí ether-ethanol v objemovém poměru 9:1. Celkem bylo získáno 11 1 extraktu, k němuž bylo přidáno 1 000 ml 3% hmot. vodného roztoku kyseliny citrónové a směs byla 1 h intenzívně míchána. Po oddělení fází byla vodná fáze zfiltrována a filtrační koláč byl promyt 100 ml etheru. Po vysušení bylo získáno 39 g citranu ergokristinia, který byl nasuspendován do 150 ml acetonu a k suspenzi byl přiváděn plynný amoniak do rozpuštění krystalického citranu. Po vychlazení vykrystalovala báze ergokristinu společně s citranem amonným, který byl oddělen filtrací v dalším stupni, při přípravě dioxanového roztoku ergokristinu pro hydrogenaci na dihydroergokristín.

Příklad 2

Podobně jako v příkladu 1 byl stejný námel pomlet a zalkalizován. Potom byl extrahován směsí ether-methanol v objemovém poměru 19:1. K získanému extraktu bylo přidáno 15 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po důkladném promíchání směsi došlo k vyloučení chloridu ergokristinia, který byl odfiltrován a usušen. Bylo získáno 36 g chloridu ergokristinia, který byl nasuspendován do 100 ml vody a přídavkem vodného roztoku amoniaku byla uvolněna báze ergokristinu, která byla vyextrahována 4x100 ml dichlormethanu. Získaný roztok byl odpařen na odparek, který byl zkrystalován z octanu ethylnatého.

Příklad 3

K 11 1 extraktu získaného stejným postupem jako v příkladu 1 bylo přidáno 500 ml 1% hmot. kyseliny sírové a směs byla 30 minut míchána. Po 1 h stání byly fáze odděleny a vodná fáze obsahující krystalický síran ergokristinia byla zfiltrována a krystaly byly promyty etherem. Vlhké krystaly byly nasuspendovány do 200 ml vody a 50 ml etheru. Suspenze byla za intenzivního míchání zalkalizována vodným amoniakem na pH = 8,5. Po 3 h míchání byla vyloučená báze ergokristinu odsáta a promytá 25 ml etheru. Bylo získáno 28 g ergokristinu o obsahu 80,2 %.

Claims (5)

1. Způsob izolace ergokristinu ze surového extraktu získaného bateriovou extrakcí ergokristinového námele směsi etheru s 5 až 12 % obj. methanolu nebo ethanolu vyznačený tím, že se k surovému extraktu přidá vodný roztok kyseliny poskytující málo rozpustnou a dobře krystalizující sůl ergokristinu, vyloučená sůl ergokristinu se zkoncentruje filtrací, načež se z ní uvolní báze, která se zkrystaluje z organického rozpouštědla.

2. Postup podle bodu 1 vyznačený tím, že se .jako kyselina poskytující málo rozpustnou a dobře krystalizující sůl ergokristinu, použije vodný roztok obsahující 1 až 10 ekvivalentů kyseliny citrónové.

3. Postup podle bodu 1 vyznačený tím, že se jako kyselina poskytující málo rozpustnou a dobře krystalizující sůl ergokristinu, použije koncentrovaná kyselina chlorovodíková v množství 1 až 3 ekvivalenty.

4. Postup podle bodu 1 vyznačený tím, že se jako kyselina poskytující málo rozpustnou a dobře krystalizující sůl ergokristinu, použije vodný roztok kyseliny sirové o maximální koncentraci 2 % hmot. v množství 1 až 3 ekvivalenty.

5. Postup podle bodu 1 vyznačený tím, že se jako organické rozpouštědlo ke krystalizaci báze ergokristinu použije benzen, aceton, octan ethylnatý nebo ether.