CS212526B1 - Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby - Google Patents

Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby Download PDF

Info

Publication number
CS212526B1
CS212526B1 CS493379A CS493379A CS212526B1 CS 212526 B1 CS212526 B1 CS 212526B1 CS 493379 A CS493379 A CS 493379A CS 493379 A CS493379 A CS 493379A CS 212526 B1 CS212526 B1 CS 212526B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
antibiotic
culture
antibacterial
preparation
antifungicide
Prior art date
Application number
CS493379A
Other languages
English (en)
Inventor
Marta Semerdzieva
Original Assignee
Marta Semerdzieva
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Marta Semerdzieva filed Critical Marta Semerdzieva
Priority to CS493379A priority Critical patent/CS212526B1/cs
Publication of CS212526B1 publication Critical patent/CS212526B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Předmětem vynálezu je způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby.
Dosud je z antifungálních antibiotik z kloboukatých stopkovýtrusných hub znám mucidin, připravený ze submersní kultury houby Oudemansiella mucida (Čs. patent 136 492).
Mucidin (Mucidermin SPOFA) se aplikuje povrchově např. ve formě spraye nebo masti. Antibakteriální antibiotika, získané fermentaění cestou z kloboukatých stopkovýtrusných hub, nejsou dosud v klinické praxi používána.
Podstatou způsobu přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika podle vynálezu je, že se myceální kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita (Brig.) Sing,, kmen Ag ae I, kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C (- 4°) po dobu 14 až 24 dnů v tekutém živném prostředí, obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlíku a dusíku minerální živné sole a růstové látky, načež se odfiltruje kultivační tekutina obsahující antibiotikum.
Organismus, který produkuje nové antibiotikum podle vynálezu, je stopkovýtrusné houba Agrocybe aegerita (Brig.) Sing. (Basidiomycetes) z řádu hub lupenatých (Agaricales). Jde o teplomilnou dřevní jedlou houbu (M. Moser: Rohrlinge und Blatterpilze, Kleine Kryptogamenflora IIb/2 Basidiomyzeten”, Gustav Fischer Verlag Stuttgart, New York, 1978, str. 286) Její synonymum je Pholiota cylindracea (DC ex Fr.). Vzhled a výskyt přírodní plodnice je popsán Pilátem (A. Pilát: Klíč k určování našich hub hřibovitých a bedlovitých, Brázda, 1951, str. 356) a Hennigem (Michael Hennig: Handbuch fiir Pilzfreunde, IV. Blatterpilze-Dunkelblater, VEB Gustav Fischer Verlag Jene, 1967, str. 230).
Čistá kultuře Agrocybe eegerita byla získána 1971 izolací explantátovou metodou z čerstvé plodnice z přírody. Kmen Ag ae I kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů oddělení experimentální mykologie MBÚ ČSAV, která je součástí sbírky Czechoslovak Collection of ííicroorganismus.
Mycelium je udržováno na sladinkovém ageru 8°Ball. ve zkumavkách. Myceliální kolonie je vatovitá, hustá, žlutobílá, bez pigmentace do živného egaru. Vlákna hyf jsou přehrádkovaná, silná 3 až 5 Aun, netvoří žádné vegetativní výtrusy. Rychlost růstu je střední (většina podhoubí stopkovýtrusných hub roste pomalu), Petriho miska o průměru ,0 cm, naočkovaná dikaryontní kulturou, poroste myceliem během 10 dnů. Sexualita tohoto druhu je řízena tetrapolárním mechanismem inkompatibility (Esser a Kuenen: Genetik der Pilze. Springer Verlag Berlin-Heidelberg-New York, 1967). Dikaryontní kultura rostě o něco rychleji než monokaryont a má na hyfách přezky, charakteristické pro většinu kultur stopkovýtrusných hub.
Monokaryontní kultura (z 1 výtrusu) je makroskopicky podobná dikaryontu, na hyféch má však jednoduchá septa. Agrocybe aegerita splňuje předpoklady pro šlechtění, nebot tvoří za vhodných podmínek v laboratoři plodnice, má dobře klíčící basidiospory a poměrně krátký vývojový cyklus (Esser, Semerdžieva, Stáhl: Genetische Untersuchungen an dem Basidiomyzeten Agrocybe aegerita, Theoret. Appl. Genetics 45: 77 až 85, 1974). Mycelium pěstované metodou hloubkové kultivace na třepacím stroji v tekuté půdě v baňce je kuličkoví té, později se kuličky rozpadají. Růst submersní kultury probíhá pomaleji, než je tomu např. u penicilií nebo aktinomycetů.
Živná půda musí obsahovat zdroj asimilovatelného uhlíku a organického nebo anorganického dusíku, minerální sole, stopy kovů a růstové látky. Z komplexních půd roste houba nejlépe na sladince o koncentraci 8°Ball. při počátečním pH 5,5-7,0, ze syntetických půd na MS-půdě (glukóza 30 g, kyselina ^lutamová 2,5 g, glycin 0,1 g, vinen amonný 0,5 g, fosforečnan draselný primární 1,0 g, síran hořečnatý krystalický 0,5 g, chlorid vápenatý 0,25 g, 1 ml roztoku stopových prvků Fe, Zn, B, Mn, Cu, Na, KJ, aneurin 100 ,ug, destilovaná voda 1 000 ml, pH 5,8).
Antibiotická látka, produkovaná submersní kulturou uvedenou stopkovýtrusné houby nebyla dosud izolována v chemicky čistém stavu. Antibiotikum, obsažené v kultivačním filtrátu, je extracelulární, rozpustné ve vodě. Je účinné proti gram-pozitivním i gram-negativním bakteriím a fungicidní. V tabulce 1 je uveden antibiotický účinek antibiotika podle vynálezu (obsaženého v kultivačním filtrátu) na některé patogenní a podmíněné patogenní mikroorganismy.
Tabulka 1
Antibiotický účinek kultivačního filtrátu Agrocybe aegerita na některé patogenní a
podmíněně patogenní mikroogranisrny
typ patogenní mikroorganismus počet sledov. patos. kmenů antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (kornínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu
baktericidní bal íteriostaticl
gram + Pneumococcus 15 8 až 28
koky Staphyloooccus aureus 7 8 až 10
Streptococcus faecalis 23 8 až 13
Streptocoocus hemolyt. A 8 ,0 až 15 15 až 30
Streptococcus hemolyt. B 16 12 až 26 19 až 34
gram - Aeromonas 2 16 až 26
tyčinky Enterobacter agglomeratus 1 12
Enterobacter cloaceae 2 8 až 12
Enterobacter hafniae 2 8 až 10
pokračování tabulky 1 typ kvasinky
patogenní mikroorganismus počet sledov. patog. kmenů antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (komínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu
baktericidní bakteriostatický
Escherichia coli 18 8 až ,8 10 až 36
Klebsiella pneumoniae 2 8 až 10
Próteus mirabilis Próteus morgani Próteus rettgeri ,0 1 2 11 až 26 12 až 25 10
Próteus vulgaris Providentia Pseudomonas aeruginosa 6 1 5 16 8 až 20 10 až 18
Salmonella 2 8 až 12
Serratia Yersinia 1 2 30 14 až 20
Candida albicans 8 fungicidní 8 až 12
Candida pseudotropicalis Candida tropicalis 1 4 18 8 až 1 0
Z tab. 1 je patrno, že z gram-pozitivních koků je účinnost antibiotika největší proti β hemolytickým streptokokům (inhibiční zóny až 34 mm), z gram-negativních koků proti Aeromonas, Escherichia coli, Próteus mirabilis a P. rettgeri a Serratia (inhibiční zóny 25 až 36 mm); na kvasinky rodu Candida má antibiotikum účinek fungicidní.
Antibiotická aktivita kultivačního filtrátu (lyofilizátu) byla stanovena plotnovou difusní mikrobiologickou titrací. Nebyla zjištěna v žádné části plodnic Agrocybe aegerita. Stacionární kultury vykazují slabou aktivitu proti gram-pozitivním bakteriím.
Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy antibiotika podle vynálezu.
Příklad 1
Do rotačního třepacího stroj_p se vloží Erlenmayerovy baňky (a 300 ml) obsahující 100 ml tekuté 8°Ball. sladinky (pH 5,5). Baňky byly zaočkovány drátkem 10 až 20 částicemi dobře narostlé myceliální kultury Ag ae I (20 dnů) ze šikmého agaru ve zkumavce a uzavřeny vatovou zátkou. Po 20 dnech třepání byl kultivační filtrát oddělen od mycelia a testován metodou plotnové titrace na antibakteriální a antifungální aktivitu s kmeny Baccillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis při použití streptomycinu a fungieidinu jako srovnávacího standardu. Účinek aktivity (vzorek filtrátu 0,1 ml) odpovídal, pokud jde o antibakteriální aktivitu cca 100 j streptomycinu, pokud jde o antifungální aktivitu cca 500 j fungieidinu. Suchá váha mycelia 22 mg/ml.
Příklad 2
Kultivace na rotačním třepacím stroji jako u příkladu 1, avšak na syntetické půdě (MS-půdě: její složení uvedeno dříve). Kultura roste o něco slaběji (maximum 15 mg/ml suché váhy mycelia) a pomaleji (maximální produkce antibiotika po 28 dnech kultivace). Kultivační filtrát vykazuje rovněž antibiotiokou aktivitu proti gram-pozitivním , gram-negativním bakteriím a kvasinkám. Koncetraoe antibiotika je o něco nižší než u příkladu 1.
Na obr. 1 je graficky znázorněna antibiotická aktivita na mikroorganismy Bacillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis v průběhu 28 dnů submersní kultivace výchozího kmene Ag ae I na 8°Ball. sladinkové půdě. Z obrázku je patrno, například, že největší antibakteriální úšinek proti Escherichia coli je po 24 dnech kultivace výchozího kmene, kdy průměr inhibiční zóny je cca 24 mm. Křivky na obrázku znázorňuji:
α—o- ' gram + bakterie (Bacillus subtilis) —δ—ů— gram - bakterie (Escherichia coli) —o—o- kvasinka (Candida pseudotropicelis)
--------- suché váha mycelia

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby vyznačený tím, že myceliálnl kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocy be aegerita, kmen Ag ae I, se kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C ± 4° na sladinkové tekuté půdě při pH 5,5 až 7, po dobu ,4 až 24 dnů, načež se odfiltruje kultivační tekutina, která obsahuje antibiotikum.
CS493379A 1979-07-13 1979-07-13 Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby CS212526B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS493379A CS212526B1 (cs) 1979-07-13 1979-07-13 Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS493379A CS212526B1 (cs) 1979-07-13 1979-07-13 Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS212526B1 true CS212526B1 (cs) 1982-03-26

Family

ID=5393171

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS493379A CS212526B1 (cs) 1979-07-13 1979-07-13 Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS212526B1 (cs)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006016701A1 (ja) * 2004-08-13 2006-02-16 Kodaka, Isamu 糖尿病予防・改善剤及び糖尿病の予防・改善用機能性食品

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006016701A1 (ja) * 2004-08-13 2006-02-16 Kodaka, Isamu 糖尿病予防・改善剤及び糖尿病の予防・改善用機能性食品

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Brock Studies on the nutrition of Morchella esculenta Fries
EP3178325B1 (en) Use of bacillus methylotrophicus strain xt1 as a stimulant of plant growth and biological control means, and isolates of said species
HU230555B1 (hu) Környezetbarát mikroorganizmus-készítmény és annak előállítása
CN108048356B (zh) 解淀粉芽孢杆菌及培养芽孢和菌剂的制备方法与应用
JP2829325B2 (ja) 抗菌・抗線虫剤、植物細胞活性剤及びそのための微生物
Yakkou et al. Assessment of earthworm (Aporrectodea molleri)'s coelomic fluid-associated bacteria on different plant growth-promoting traits and maize germination and seedling growth
RU2495119C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis 8A В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ ФИТОПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
CN101899098B (zh) 一种环脂肽类化合物Maribasin B制备及其应用
KR20020031961A (ko) 길항미생물인 스트렙토마이세스 카슈겐시스 지비에이-0927균주, 이를 포함하는 미생물 제제, 및 이를 이용한 난시들음병 및 오이 흑성병 병해를 방제하는 방법
RU2757123C1 (ru) Штамм бактерий Pantoea agglomerans Ф19 для повышения урожайности зерновых культур
JP3132195B2 (ja) 新規微生物および植物病害防除剤
CS212526B1 (cs) Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby
KR100757298B1 (ko) 식물병 방제활성을 갖는 길항미생물과 이들을 이용한식물병방제제
US20120202692A1 (en) Plant growing agent, plant disease resistance inducer, and plant disease control method
RU2551968C2 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ
RU2245918C1 (ru) Штамм бактерий azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с корневыми гнилями пшеницы и повышения количества и качества урожая
CN101838314A (zh) 一种环脂肽类化合物制备及其应用
KR101108830B1 (ko) 사상균 포자의 제조 방법 및 식물 병해 방제 방법
KR20010038285A (ko) 신규의 항진균성 활성을 갖는 슈도모나스 에루지노사 비5 및 이 균주로부터 생산되는 항생물질의 제조방법
Jizba et al. Insecticidal properties of nonactic acid and homononactic acid, the precursors of macrotetrolide antibiotics
RU2787586C1 (ru) Средство для защиты от болезней и стимуляции роста томатов и огурцов в условиях защищенного грунта
Min et al. Burkholderia pyrrocinia JK-SH007 enhanced seed germination, cucumber seedling growth and tomato fruit via catecholate-siderophore-mediation.
KR100757300B1 (ko) 식물병 방제활성을 가지는 크로모박테리움속 스트레인 c-61 균주 및 이를 이용한 식물병방제제
RU2789123C1 (ru) Биопрепарат на основе продуктов метаболизма триходермы с минеральной компонентой и способ его получения
Mohamed Evaluation Of The Efficiency Of Some Bio-Fertilizers And Different Silicon Sources For Controlling Bulb Rot Of Lilium spp. In Egypt