Patents
Search within
Search within the title, abstract, claims, or full patent document: You can restrict your search to a specific field using field names.
Use TI= to search in the title, AB= for the abstract, CL= for the claims, or TAC= for all three. For example, TI=(safety belt).
Search by Cooperative Patent Classifications (CPCs): These are commonly used to represent ideas in place of keywords, and can also be entered in a search term box. If you're searching forseat belts, you could also search for B60R22/00 to retrieve documents that mention safety belts or body harnesses. CPC=B60R22 will match documents with exactly this CPC, CPC=B60R22/low matches documents with this CPC or a child classification of this CPC.
Learn More
Title
Abstract
Claims
Full Document
Find patents
Keywords and boolean syntax (USPTO or EPO format): seat belt searches these two words, or their plurals and close synonyms. "seat belt" searches this exact phrase, in order. -seat -belt searches for documents not containing either word.
For searches using boolean logic, the default operator is AND with left associativity. Note: this means safety OR seat belt is searched as (safety OR seat) AND belt. Each word automatically includes plurals and close synonyms. Adjacent words that are implicitly ANDed together, such as (safety belt), are treated as a phrase when generating synonyms.
Learn More
Search by
Chemistry searches match terms (trade names, IUPAC names, etc. extracted from the entire document, and processed from .MOL files.)
Substructure (use SSS=) and similarity (use ~) searches are limited to one per search at the top-level AND condition. Exact searches can be used multiple times throughout the search query.
Searching by SMILES or InChi key requires no special syntax. To search by SMARTS, use SMARTS=.
To search for multiple molecules, select "Batch" in the "Type" menu. Enter multiple molecules separated by whitespace or by comma.
Learn More
Patent numbers
Search specific patents by importing a CSV or list of patent publication or application numbers.
Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby
CS212526B1
Czechoslovakia
- Other languages
English - Inventor
Marta Semerdzieva
- Info
- Cited by (1)
- Similar documents
- Priority and Related Applications
- External links
- Espacenet
- Global Dossier
- Discuss
Description
translated from
Předmětem vynálezu je způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby.
Dosud je z antifungálních antibiotik z kloboukatých stopkovýtrusných hub znám mucidin, připravený ze submersní kultury houby Oudemansiella mucida (Čs. patent 136 492).
Mucidin (Mucidermin SPOFA) se aplikuje povrchově např. ve formě spraye nebo masti. Antibakteriální antibiotika, získané fermentaění cestou z kloboukatých stopkovýtrusných hub, nejsou dosud v klinické praxi používána.
Podstatou způsobu přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika podle vynálezu je, že se myceální kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita (Brig.) Sing,, kmen Ag ae I, kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C (- 4°) po dobu 14 až 24 dnů v tekutém živném prostředí, obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlíku a dusíku minerální živné sole a růstové látky, načež se odfiltruje kultivační tekutina obsahující antibiotikum.
Organismus, který produkuje nové antibiotikum podle vynálezu, je stopkovýtrusné houba Agrocybe aegerita (Brig.) Sing. (Basidiomycetes) z řádu hub lupenatých (Agaricales). Jde o teplomilnou dřevní jedlou houbu (M. Moser: Rohrlinge und Blatterpilze, Kleine Kryptogamenflora IIb/2 Basidiomyzeten”, Gustav Fischer Verlag Stuttgart, New York, 1978, str. 286) Její synonymum je Pholiota cylindracea (DC ex Fr.). Vzhled a výskyt přírodní plodnice je popsán Pilátem (A. Pilát: Klíč k určování našich hub hřibovitých a bedlovitých, Brázda, 1951, str. 356) a Hennigem (Michael Hennig: Handbuch fiir Pilzfreunde, IV. Blatterpilze-Dunkelblater, VEB Gustav Fischer Verlag Jene, 1967, str. 230).
Čistá kultuře Agrocybe eegerita byla získána 1971 izolací explantátovou metodou z čerstvé plodnice z přírody. Kmen Ag ae I kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů oddělení experimentální mykologie MBÚ ČSAV, která je součástí sbírky Czechoslovak Collection of ííicroorganismus.
Mycelium je udržováno na sladinkovém ageru 8°Ball. ve zkumavkách. Myceliální kolonie je vatovitá, hustá, žlutobílá, bez pigmentace do živného egaru. Vlákna hyf jsou přehrádkovaná, silná 3 až 5 Aun, netvoří žádné vegetativní výtrusy. Rychlost růstu je střední (většina podhoubí stopkovýtrusných hub roste pomalu), Petriho miska o průměru ,0 cm, naočkovaná dikaryontní kulturou, poroste myceliem během 10 dnů. Sexualita tohoto druhu je řízena tetrapolárním mechanismem inkompatibility (Esser a Kuenen: Genetik der Pilze. Springer Verlag Berlin-Heidelberg-New York, 1967). Dikaryontní kultura rostě o něco rychleji než monokaryont a má na hyfách přezky, charakteristické pro většinu kultur stopkovýtrusných hub.
Monokaryontní kultura (z 1 výtrusu) je makroskopicky podobná dikaryontu, na hyféch má však jednoduchá septa. Agrocybe aegerita splňuje předpoklady pro šlechtění, nebot tvoří za vhodných podmínek v laboratoři plodnice, má dobře klíčící basidiospory a poměrně krátký vývojový cyklus (Esser, Semerdžieva, Stáhl: Genetische Untersuchungen an dem Basidiomyzeten Agrocybe aegerita, Theoret. Appl. Genetics 45: 77 až 85, 1974). Mycelium pěstované metodou hloubkové kultivace na třepacím stroji v tekuté půdě v baňce je kuličkoví té, později se kuličky rozpadají. Růst submersní kultury probíhá pomaleji, než je tomu např. u penicilií nebo aktinomycetů.
Živná půda musí obsahovat zdroj asimilovatelného uhlíku a organického nebo anorganického dusíku, minerální sole, stopy kovů a růstové látky. Z komplexních půd roste houba nejlépe na sladince o koncentraci 8°Ball. při počátečním pH 5,5-7,0, ze syntetických půd na MS-půdě (glukóza 30 g, kyselina ^lutamová 2,5 g, glycin 0,1 g, vinen amonný 0,5 g, fosforečnan draselný primární 1,0 g, síran hořečnatý krystalický 0,5 g, chlorid vápenatý 0,25 g, 1 ml roztoku stopových prvků Fe, Zn, B, Mn, Cu, Na, KJ, aneurin 100 ,ug, destilovaná voda 1 000 ml, pH 5,8).
Antibiotická látka, produkovaná submersní kulturou uvedenou stopkovýtrusné houby nebyla dosud izolována v chemicky čistém stavu. Antibiotikum, obsažené v kultivačním filtrátu, je extracelulární, rozpustné ve vodě. Je účinné proti gram-pozitivním i gram-negativním bakteriím a fungicidní. V tabulce 1 je uveden antibiotický účinek antibiotika podle vynálezu (obsaženého v kultivačním filtrátu) na některé patogenní a podmíněné patogenní mikroorganismy.
Tabulka 1
| Antibiotický účinek kultivačního filtrátu Agrocybe aegerita na některé patogenní a | |||||
| podmíněně | patogenní mikroogranisrny | ||||
| typ | patogenní mikroorganismus | počet sledov. patos. kmenů | antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (kornínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu | ||
| baktericidní | bal | íteriostaticl | |||
| gram + | Pneumococcus | 15 | 8 | až 28 | |
| koky | Staphyloooccus aureus | 7 | 8 až 10 | ||
| Streptococcus faecalis | 23 | 8 | až 13 | ||
| Streptocoocus hemolyt. A | 8 | ,0 až 15 | 15 | až 30 | |
| Streptococcus hemolyt. B | 16 | 12 až 26 | 19 | až 34 | |
| gram - | Aeromonas | 2 | 16 až 26 | ||
| tyčinky | Enterobacter agglomeratus | 1 | 12 | ||
| Enterobacter cloaceae | 2 | 8 až 12 | |||
| Enterobacter hafniae | 2 | 8 až 10 |
pokračování tabulky 1 typ kvasinky
| patogenní mikroorganismus | počet sledov. patog. kmenů | antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (komínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu | |
| baktericidní | bakteriostatický | ||
| Escherichia coli | 18 | 8 až ,8 | 10 až 36 |
| Klebsiella pneumoniae | 2 | 8 až 10 | |
| Próteus mirabilis Próteus morgani Próteus rettgeri | ,0 1 2 | 11 až 26 | 12 až 25 10 |
| Próteus vulgaris Providentia Pseudomonas aeruginosa | 6 1 5 | 16 8 až 20 | 10 až 18 |
| Salmonella | 2 | 8 až 12 | |
| Serratia Yersinia | 1 2 | 30 14 až 20 | |
| Candida albicans | 8 | fungicidní 8 až 12 | |
| Candida pseudotropicalis Candida tropicalis | 1 4 | 18 8 až 1 0 |
Z tab. 1 je patrno, že z gram-pozitivních koků je účinnost antibiotika největší proti β hemolytickým streptokokům (inhibiční zóny až 34 mm), z gram-negativních koků proti Aeromonas, Escherichia coli, Próteus mirabilis a P. rettgeri a Serratia (inhibiční zóny 25 až 36 mm); na kvasinky rodu Candida má antibiotikum účinek fungicidní.
Antibiotická aktivita kultivačního filtrátu (lyofilizátu) byla stanovena plotnovou difusní mikrobiologickou titrací. Nebyla zjištěna v žádné části plodnic Agrocybe aegerita. Stacionární kultury vykazují slabou aktivitu proti gram-pozitivním bakteriím.
Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy antibiotika podle vynálezu.
Příklad 1
Do rotačního třepacího stroj_p se vloží Erlenmayerovy baňky (a 300 ml) obsahující 100 ml tekuté 8°Ball. sladinky (pH 5,5). Baňky byly zaočkovány drátkem 10 až 20 částicemi dobře narostlé myceliální kultury Ag ae I (20 dnů) ze šikmého agaru ve zkumavce a uzavřeny vatovou zátkou. Po 20 dnech třepání byl kultivační filtrát oddělen od mycelia a testován metodou plotnové titrace na antibakteriální a antifungální aktivitu s kmeny Baccillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis při použití streptomycinu a fungieidinu jako srovnávacího standardu. Účinek aktivity (vzorek filtrátu 0,1 ml) odpovídal, pokud jde o antibakteriální aktivitu cca 100 j streptomycinu, pokud jde o antifungální aktivitu cca 500 j fungieidinu. Suchá váha mycelia 22 mg/ml.
Příklad 2
Kultivace na rotačním třepacím stroji jako u příkladu 1, avšak na syntetické půdě (MS-půdě: její složení uvedeno dříve). Kultura roste o něco slaběji (maximum 15 mg/ml suché váhy mycelia) a pomaleji (maximální produkce antibiotika po 28 dnech kultivace). Kultivační filtrát vykazuje rovněž antibiotiokou aktivitu proti gram-pozitivním , gram-negativním bakteriím a kvasinkám. Koncetraoe antibiotika je o něco nižší než u příkladu 1.
Na obr. 1 je graficky znázorněna antibiotická aktivita na mikroorganismy Bacillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis v průběhu 28 dnů submersní kultivace výchozího kmene Ag ae I na 8°Ball. sladinkové půdě. Z obrázku je patrno, například, že největší antibakteriální úšinek proti Escherichia coli je po 24 dnech kultivace výchozího kmene, kdy průměr inhibiční zóny je cca 24 mm. Křivky na obrázku znázorňuji:
—α—o- ' gram + bakterie (Bacillus subtilis) —δ—ů— gram - bakterie (Escherichia coli) —o—o- kvasinka (Candida pseudotropicelis)
--------- suché váha mycelia
Claims (1)
Hide Dependent
translated from
Claims (1)
Hide Dependent
translated from
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby vyznačený tím, že myceliálnl kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocy be aegerita, kmen Ag ae I, se kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C ± 4° na sladinkové tekuté půdě při pH 5,5 až 7, po dobu ,4 až 24 dnů, načež se odfiltruje kultivační tekutina, která obsahuje antibiotikum.