CS212526B1 - Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby - Google Patents
Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby Download PDFInfo
- Publication number
- CS212526B1 CS212526B1 CS493379A CS493379A CS212526B1 CS 212526 B1 CS212526 B1 CS 212526B1 CS 493379 A CS493379 A CS 493379A CS 493379 A CS493379 A CS 493379A CS 212526 B1 CS212526 B1 CS 212526B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antibiotic
- culture
- antibacterial
- preparation
- antifungicide
- Prior art date
Links
Description
Předmětem vynálezu je způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby.
Dosud je z antifungálních antibiotik z kloboukatých stopkovýtrusných hub znám mucidin, připravený ze submersní kultury houby Oudemansiella mucida (Čs. patent 136 492).
Mucidin (Mucidermin SPOFA) se aplikuje povrchově např. ve formě spraye nebo masti. Antibakteriální antibiotika, získané fermentaění cestou z kloboukatých stopkovýtrusných hub, nejsou dosud v klinické praxi používána.
Podstatou způsobu přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika podle vynálezu je, že se myceální kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita (Brig.) Sing,, kmen Ag ae I, kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C (- 4°) po dobu 14 až 24 dnů v tekutém živném prostředí, obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlíku a dusíku minerální živné sole a růstové látky, načež se odfiltruje kultivační tekutina obsahující antibiotikum.
Organismus, který produkuje nové antibiotikum podle vynálezu, je stopkovýtrusné houba Agrocybe aegerita (Brig.) Sing. (Basidiomycetes) z řádu hub lupenatých (Agaricales). Jde o teplomilnou dřevní jedlou houbu (M. Moser: Rohrlinge und Blatterpilze, Kleine Kryptogamenflora IIb/2 Basidiomyzeten”, Gustav Fischer Verlag Stuttgart, New York, 1978, str. 286) Její synonymum je Pholiota cylindracea (DC ex Fr.). Vzhled a výskyt přírodní plodnice je popsán Pilátem (A. Pilát: Klíč k určování našich hub hřibovitých a bedlovitých, Brázda, 1951, str. 356) a Hennigem (Michael Hennig: Handbuch fiir Pilzfreunde, IV. Blatterpilze-Dunkelblater, VEB Gustav Fischer Verlag Jene, 1967, str. 230).
Čistá kultuře Agrocybe eegerita byla získána 1971 izolací explantátovou metodou z čerstvé plodnice z přírody. Kmen Ag ae I kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů oddělení experimentální mykologie MBÚ ČSAV, která je součástí sbírky Czechoslovak Collection of ííicroorganismus.
Mycelium je udržováno na sladinkovém ageru 8°Ball. ve zkumavkách. Myceliální kolonie je vatovitá, hustá, žlutobílá, bez pigmentace do živného egaru. Vlákna hyf jsou přehrádkovaná, silná 3 až 5 Aun, netvoří žádné vegetativní výtrusy. Rychlost růstu je střední (většina podhoubí stopkovýtrusných hub roste pomalu), Petriho miska o průměru ,0 cm, naočkovaná dikaryontní kulturou, poroste myceliem během 10 dnů. Sexualita tohoto druhu je řízena tetrapolárním mechanismem inkompatibility (Esser a Kuenen: Genetik der Pilze. Springer Verlag Berlin-Heidelberg-New York, 1967). Dikaryontní kultura rostě o něco rychleji než monokaryont a má na hyfách přezky, charakteristické pro většinu kultur stopkovýtrusných hub.
Monokaryontní kultura (z 1 výtrusu) je makroskopicky podobná dikaryontu, na hyféch má však jednoduchá septa. Agrocybe aegerita splňuje předpoklady pro šlechtění, nebot tvoří za vhodných podmínek v laboratoři plodnice, má dobře klíčící basidiospory a poměrně krátký vývojový cyklus (Esser, Semerdžieva, Stáhl: Genetische Untersuchungen an dem Basidiomyzeten Agrocybe aegerita, Theoret. Appl. Genetics 45: 77 až 85, 1974). Mycelium pěstované metodou hloubkové kultivace na třepacím stroji v tekuté půdě v baňce je kuličkoví té, později se kuličky rozpadají. Růst submersní kultury probíhá pomaleji, než je tomu např. u penicilií nebo aktinomycetů.
Živná půda musí obsahovat zdroj asimilovatelného uhlíku a organického nebo anorganického dusíku, minerální sole, stopy kovů a růstové látky. Z komplexních půd roste houba nejlépe na sladince o koncentraci 8°Ball. při počátečním pH 5,5-7,0, ze syntetických půd na MS-půdě (glukóza 30 g, kyselina ^lutamová 2,5 g, glycin 0,1 g, vinen amonný 0,5 g, fosforečnan draselný primární 1,0 g, síran hořečnatý krystalický 0,5 g, chlorid vápenatý 0,25 g, 1 ml roztoku stopových prvků Fe, Zn, B, Mn, Cu, Na, KJ, aneurin 100 ,ug, destilovaná voda 1 000 ml, pH 5,8).
Antibiotická látka, produkovaná submersní kulturou uvedenou stopkovýtrusné houby nebyla dosud izolována v chemicky čistém stavu. Antibiotikum, obsažené v kultivačním filtrátu, je extracelulární, rozpustné ve vodě. Je účinné proti gram-pozitivním i gram-negativním bakteriím a fungicidní. V tabulce 1 je uveden antibiotický účinek antibiotika podle vynálezu (obsaženého v kultivačním filtrátu) na některé patogenní a podmíněné patogenní mikroorganismy.
Tabulka 1
| Antibiotický účinek kultivačního filtrátu Agrocybe aegerita na některé patogenní a | |||||
| podmíněně | patogenní mikroogranisrny | ||||
| typ | patogenní mikroorganismus | počet sledov. patos. kmenů | antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (kornínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu | ||
| baktericidní | bal | íteriostaticl | |||
| gram + | Pneumococcus | 15 | 8 | až 28 | |
| koky | Staphyloooccus aureus | 7 | 8 až 10 | ||
| Streptococcus faecalis | 23 | 8 | až 13 | ||
| Streptocoocus hemolyt. A | 8 | ,0 až 15 | 15 | až 30 | |
| Streptococcus hemolyt. B | 16 | 12 až 26 | 19 | až 34 | |
| gram - | Aeromonas | 2 | 16 až 26 | ||
| tyčinky | Enterobacter agglomeratus | 1 | 12 | ||
| Enterobacter cloaceae | 2 | 8 až 12 | |||
| Enterobacter hafniae | 2 | 8 až 10 |
pokračování tabulky 1 typ kvasinky
| patogenní mikroorganismus | počet sledov. patog. kmenů | antibiotický účinek (průměr zóny v mm) stanoveno difusní titrací (komínek na plotně 5 mm) kapáno 0,1 ml filtrátu | |
| baktericidní | bakteriostatický | ||
| Escherichia coli | 18 | 8 až ,8 | 10 až 36 |
| Klebsiella pneumoniae | 2 | 8 až 10 | |
| Próteus mirabilis Próteus morgani Próteus rettgeri | ,0 1 2 | 11 až 26 | 12 až 25 10 |
| Próteus vulgaris Providentia Pseudomonas aeruginosa | 6 1 5 | 16 8 až 20 | 10 až 18 |
| Salmonella | 2 | 8 až 12 | |
| Serratia Yersinia | 1 2 | 30 14 až 20 | |
| Candida albicans | 8 | fungicidní 8 až 12 | |
| Candida pseudotropicalis Candida tropicalis | 1 4 | 18 8 až 1 0 |
Z tab. 1 je patrno, že z gram-pozitivních koků je účinnost antibiotika největší proti β hemolytickým streptokokům (inhibiční zóny až 34 mm), z gram-negativních koků proti Aeromonas, Escherichia coli, Próteus mirabilis a P. rettgeri a Serratia (inhibiční zóny 25 až 36 mm); na kvasinky rodu Candida má antibiotikum účinek fungicidní.
Antibiotická aktivita kultivačního filtrátu (lyofilizátu) byla stanovena plotnovou difusní mikrobiologickou titrací. Nebyla zjištěna v žádné části plodnic Agrocybe aegerita. Stacionární kultury vykazují slabou aktivitu proti gram-pozitivním bakteriím.
Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy antibiotika podle vynálezu.
Příklad 1
Do rotačního třepacího stroj_p se vloží Erlenmayerovy baňky (a 300 ml) obsahující 100 ml tekuté 8°Ball. sladinky (pH 5,5). Baňky byly zaočkovány drátkem 10 až 20 částicemi dobře narostlé myceliální kultury Ag ae I (20 dnů) ze šikmého agaru ve zkumavce a uzavřeny vatovou zátkou. Po 20 dnech třepání byl kultivační filtrát oddělen od mycelia a testován metodou plotnové titrace na antibakteriální a antifungální aktivitu s kmeny Baccillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis při použití streptomycinu a fungieidinu jako srovnávacího standardu. Účinek aktivity (vzorek filtrátu 0,1 ml) odpovídal, pokud jde o antibakteriální aktivitu cca 100 j streptomycinu, pokud jde o antifungální aktivitu cca 500 j fungieidinu. Suchá váha mycelia 22 mg/ml.
Příklad 2
Kultivace na rotačním třepacím stroji jako u příkladu 1, avšak na syntetické půdě (MS-půdě: její složení uvedeno dříve). Kultura roste o něco slaběji (maximum 15 mg/ml suché váhy mycelia) a pomaleji (maximální produkce antibiotika po 28 dnech kultivace). Kultivační filtrát vykazuje rovněž antibiotiokou aktivitu proti gram-pozitivním , gram-negativním bakteriím a kvasinkám. Koncetraoe antibiotika je o něco nižší než u příkladu 1.
Na obr. 1 je graficky znázorněna antibiotická aktivita na mikroorganismy Bacillus subtilis, Escherichia coli a Candida pseudotropicalis v průběhu 28 dnů submersní kultivace výchozího kmene Ag ae I na 8°Ball. sladinkové půdě. Z obrázku je patrno, například, že největší antibakteriální úšinek proti Escherichia coli je po 24 dnech kultivace výchozího kmene, kdy průměr inhibiční zóny je cca 24 mm. Křivky na obrázku znázorňuji:
—α—o- ' gram + bakterie (Bacillus subtilis) —δ—ů— gram - bakterie (Escherichia coli) —o—o- kvasinka (Candida pseudotropicelis)
--------- suché váha mycelia
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby vyznačený tím, že myceliálnl kultura kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocy be aegerita, kmen Ag ae I, se kultivuje metodou hloubkové kultivace při teplotě 24 °C ± 4° na sladinkové tekuté půdě při pH 5,5 až 7, po dobu ,4 až 24 dnů, načež se odfiltruje kultivační tekutina, která obsahuje antibiotikum.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS493379A CS212526B1 (cs) | 1979-07-13 | 1979-07-13 | Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS493379A CS212526B1 (cs) | 1979-07-13 | 1979-07-13 | Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS212526B1 true CS212526B1 (cs) | 1982-03-26 |
Family
ID=5393171
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS493379A CS212526B1 (cs) | 1979-07-13 | 1979-07-13 | Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS212526B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006016701A1 (ja) * | 2004-08-13 | 2006-02-16 | Kodaka, Isamu | 糖尿病予防・改善剤及び糖尿病の予防・改善用機能性食品 |
-
1979
- 1979-07-13 CS CS493379A patent/CS212526B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006016701A1 (ja) * | 2004-08-13 | 2006-02-16 | Kodaka, Isamu | 糖尿病予防・改善剤及び糖尿病の予防・改善用機能性食品 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brock | Studies on the nutrition of Morchella esculenta Fries | |
| EP1788074B1 (en) | Novel strains belonging to the genus paenibacillus and method of controlling plant disease by using these strains or culture thereof | |
| HU230555B1 (hu) | Környezetbarát mikroorganizmus-készítmény és annak előállítása | |
| JP2829325B2 (ja) | 抗菌・抗線虫剤、植物細胞活性剤及びそのための微生物 | |
| RU2495119C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis 8A В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ ФИТОПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ | |
| WO2010137404A1 (ja) | 細菌のバイオフィルムを接種した種子 | |
| KR20070074377A (ko) | 식물병 방제활성을 갖는 길항미생물과 이들을 이용한식물병방제제 | |
| KR20120064291A (ko) | 신규한 스트렙토마이세스 젤다나마이시니너스 ｂｓ３２８３ 및 이를 이용한 식물병 방제방법 | |
| DE19835669A1 (de) | Neuer Stamm von Streptomyces und dessen Verwendungen | |
| CN105916986A (zh) | 由接种微生物形成的接种物，和使用其生产抗生素的方法 | |
| KR20020031961A (ko) | 길항미생물인 스트렙토마이세스 카슈겐시스 지비에이-0927균주, 이를 포함하는 미생물 제제, 및 이를 이용한 난시들음병 및 오이 흑성병 병해를 방제하는 방법 | |
| JPS63501286A (ja) | 微生物性植物成長促進剤と収量増強剤 | |
| JP3132195B2 (ja) | 新規微生物および植物病害防除剤 | |
| CS212526B1 (cs) | Způsob přípravy antibakteriálního a antifungálního antibiotika z kloboukaté stopkovýtrusné houby | |
| RU2413707C2 (ru) | ШТАММ КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ ВИДА Sinorhizobium fredii КБ-11 ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ ПОД СОЮ | |
| JP3898343B2 (ja) | 新規微生物及びそれを用いたコガネムシ科昆虫の防除方法 | |
| US20120202692A1 (en) | Plant growing agent, plant disease resistance inducer, and plant disease control method | |
| RU2551968C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ | |
| CN1227979C (zh) | 一种高效生物除草菌及其选育方法 | |
| KR101108830B1 (ko) | 사상균 포자의 제조 방법 및 식물 병해 방제 방법 | |
| Min et al. | Burkholderia pyrrocinia JK-SH007 enhanced seed germination, cucumber seedling growth and tomato fruit via catecholate-siderophore-mediation. | |
| RU2787586C1 (ru) | Средство для защиты от болезней и стимуляции роста томатов и огурцов в условиях защищенного грунта | |
| RU2757123C1 (ru) | Штамм бактерий Pantoea agglomerans Ф19 для повышения урожайности зерновых культур | |
| KR20180131397A (ko) | 2s,3s-부탄디올 처리에 의한 병원성 세균의 병원성 조절 방법 | |
| KR20010038285A (ko) | 신규의 항진균성 활성을 갖는 슈도모나스 에루지노사 비5 및 이 균주로부터 생산되는 항생물질의 제조방법 |