CN88102943A - 保护 - Google Patents

Abstract

一种适用于动物如家禽口服免疫的组合物，其包括干燥、自由流动的颗粒，每个颗粒均由一在滑移点为35至45℃的脂质如硬化棕榈仁油中约含有25％至50％(重量)水的脂质连续乳胶的固体小球所构成，每个小球均具有大约2至3毫米的平均直径并至少包含1个包有被囊的活的原生动物如对家禽有感染性之已形成孢子的活球虫卵囊，每个小球均有一动物饲料、水泥和/或石膏材料的保护性包衣，且保护性包衣的厚度平均约0.2至2mm。

Description

本发明涉及将敏感性材料截留于相对不能透过的包衣中以保护敏感性材料的方法。

本发明特别适于保护那些对人或动物口服给药的感敏性材料，尤其是适于保护如活的微生物等口服疫苗成分。尽管下面将以保护活的包有被囊的寄生性原虫如球虫卵囊作为特例来阐述本发明，但本领域内的技术人员将会根据以下描述理解到本发明在更广范围内的实用性。

美国专利4544548号的说明书中描述了一种提高家禽抗球虫病之免疫力的方法，该方法是定期给家禽饲以含有已形成孢子的球虫活卵囊;且其投予量只足以诱导亚临床感染。该美国专利中所描述的发明特征是将卵囊封装于熔点为大约30到60℃的脂肪或蜡质包囊材料中。这种包囊作用可有助于防止卵囊失水，而已知卵囊对水份丢失是很敏感的。球虫疫苗的效能取决于当其被家禽摄取后其中的生物体仍是存活的。

本发明涉及进一步提高掺入这种组合物中之卵囊的存活力的方法。

本发明提供了一种含有脂质连续乳胶之固体颗粒的组合物，其中熔点为30至55℃的脂质中水重量至少为1%，且组合物中的每个颗粒平均至少含有1个活的包有被囊的寄生原虫。

本发明还提供了一种制备可口服之组合物的方法，所说的组合物包含截留于脂质被膜内的包有被囊的寄生原虫，该方法包括：

a）使包有被囊的寄生原虫分散于脂质连续乳胶中，其中脂质的熔点为30至55℃，乳胶保持液体状态并且其温度不超过60℃;以及

b）经冷却以使乳胶凝固。

通常使用的脂质是脂肪或蜡。必要时可使用脂肪和/或蜡的掺合物。

乳胶中水的比例不能高过当乳胶凝固时不能保持脂质连续性质，否则便将失去脂肪或蜡的保护作用。乳胶的含水量一般不超过70%（重量），最好不超过约50%（重量）。水含量在大约1%以上即可使用，但更为理想的是乳胶中水含量范围约为25%至50%。使用这样的乳胶既确立了脂肪和蜡的保护性质，同时提供了能使卵囊在其中长期存活的水份。

最好使用熔点不超过50℃的脂肪或蜡。

为了有利于乳胶的加工处理，当其处于液体状态时应是稳定的。这种稳定性应至少保持5分钟，最好至少保持30分钟。基于这一要求，应使用高速混合装置使卵囊分散于乳胶中。用于加工许多普通油包水型乳胶的装置，如用于人造奶油工业中的旋转式交换器是不适用的，因为它们最初是设计用于处理固态乳胶的。

可将适度稀释的卵囊水悬浮液与熔化的脂肪或蜡混合以制备所需的乳胶，或将相对更浓的卵囊悬浮液与熔化的脂肪或蜡合并，并再加入足够的水以得到最终所需的组合物。为了避免因延长混合时间而使卵囊暴露（这样可导致对敏感生物体的热损伤），最好先制备水悬液，然后再在第二混合阶段中加入卵囊。

在制备含卵囊液态乳胶后，可使乳胶凝固以提供固态组合物。可以使乳胶以大块形式凝固并将所得固体块分成小块，如用低压挤压成型法制得颗粒形式的组合物。

但最好在乳胶凝固之前使之细分成小部分后再由液态乳胶制备颗粒组合物。用这种方法可大有利于生产出颗粒均匀、外观好看的颗粒形式的组合物。

在本发明的一个实施方案中包括喷雾冷却（“喷雾干燥”）熔化的乳胶，借以产生适于与其他饲料成分混合和加工的极小颗粒，以进一步提供复合饲料配方。

如果要将本发明的颗粒组合物加到颗粒状饲料组合物如家禽饲料中，则最好生产稍大的颗粒。

作为优先实施方案，本发明提供一种生产固态组合物的方法，其包括使熔化的乳胶暴露于相对冷的环境，以提供最小直径至少为2mm的凝固蜡或脂肪的固体颗粒或“面条”。

可根据需要将所得呈颗粒形成的固体组合物制成近于球形的。这种颗粒的最大直径最好不超过10mm，更理想的是在2至5mm范围内。将这样的颗粒掺合到家禽粒状饲料中时，它们最好是球形的，因为这样在处理和储存期间就不会从大批量饲料中分离出来。就这个意义上说应避免使用最大直径大多小于2mm的颗粒，因为这样它们很容易从普通颗粒状饲料中分离出来。

使熔化的乳胶凝固最好通过使之与凉水接触来完成。可将熔化乳胶的细流加入一定体积的冷水中，或将熔化乳胶作为一定大小的小滴加入一定体积的冷水中。

必要时可在冷水中加入某种表面活性剂（如非离子表面活性剂）以降低表面张力，并使熔化乳胶本身形成有均一大小和形状的小滴，当其凝固时便构成更为均匀而且外观好看的产品。

脂肪和蜡最好能在50℃以下就完全熔化，这样才不致于损伤包有被囊的寄生原虫。脂肪和蜡在室温（如20至30℃）下应是固态的，这样将有利产品的储存和使用。脂肪和蜡的滑移点最好在35至45℃间。滑移点应尽可能陡。硬化的棕榈仁油是一种很适用的材料，其可在市场上买到并具有一定的滑移点范围，如约39℃到42℃。

当依据本发明制备用于家禽的含球虫卵囊之口服组合物（其可以是与饲料混合的或是作为单独组合物）时，重要的是所使用的卵囊数目应能诱导有效的免疫性。如此配制的组合物，应能使食入这种组合物的家禽从第一次进食便能摄入卵囊。组合物的每个颗粒平均应至少含有一个活卵囊。但根据给药方式及所用卵囊的毒力等多种因素，可在每个颗粒中掺入更多的卵囊。因此不可能规定一个绝对的上限。但纯粹作为一种指南，我们说当将其用作口服疫苗给药时，平均每个颗粒应含有1至约10，000个卵囊。一般说来，作为口服疫苗使用时每个颗粒应包含1至约2，000个卵囊。这些数字是指组合物中存在单一种球虫，而使用含有多种球虫的组合物将赋予家禽以更广泛的免疫性。

如果为了便于储存和处理卵囊，甚至可根据需要掺入更多数目的卵囊。这种形式的组合物可能并不适于对动物进行免疫，但可在检验动物的免疫性时用作大剂量卵囊对动物进行攻击，或者作为传代途径的一部分给动物服用大剂量卵囊。

一般实践中，卵囊是作为一种水悬浮液储存的，并将这一悬浮液用于制备乳胶。条件是不能长时间以高速混合，但我们发现这样并不能对卵囊造成明显损伤，因此这种处理方法也就不能使卵囊明显地丧失存活性。

必要时可用干粉末包被脂肪或蜡颗粒，以提高其流动性质。适用的材料包括粉碎的动物饲料、面粉和粉碎的可食用无机物质。当湿化并干燥时能形成硬固组合物的无机粉末是适用的。水泥便是一种极好的包衣材料。石膏（硫酸钙）也是很适用的。还可以使用包衣材料的混合物。其中优点的是无机包衣材料，因为这样可减少储存期间腐败的危险。水泥和石膏等无机材料可在乳胶颗粒的外面形成一个坚硬的保护层，从而提供了一种非常坚硬、自由流动的颗粒产品。尽管这种衣壳有很好的硬度，但我们发现依靠家禽的正常消化过程则很容易使卵囊由组合物中释放出来。这类材料通常是白色的，但亦可根据需要加入可食染料或色素等着色剂或糖蜜等天然有色饲料成分。应使用足够量的包衣材料，以在每个脂肪乳胶颗粒上提供厚度至少约0.1mm的保护层。包衣的厚度最好在约0.2mm至2mm范围内。如所用包衣材料是水泥或石膏，其厚度最好为大约0.2至0.5mm。依据本发明的最适组合物将包含由平均厚度为大约0.5mm的衣壳保护着的平均直径为大约2-3mm的固体脂肪乳胶颗粒。为了提供一种牢固粘附在颗粒上的包衣，可使用麦芽糊精或糖蜜等粘结剂，但在许多情况下单独用水效果也很好。

可在一开口容器内经转涂法使包衣材料粘附在脂肪颗粒上，将水或粘结剂溶液喷在滚动的颗粒上同时加入粉末材料，直到形成有足够厚度的粉末材料包衣。为了使包衣干燥而须进行干燥处理。在衣壳包被过程中可使用特别适用的球粒团成机。该装置包括一个能绕着水平轴以高速度旋转并由一静止的漏斗环绕的园盘。借助园盘的高速旋转，置于球粒团成机内部的颗粒被抛向不动的内壁。将水或粘结剂溶液喷洒到颗粒上并加入干的包衣粉末时，装置内部产生的高剪切力可阻止颗粒间团聚。

本发明的一个重要的优选实施方案是制备含下列规格之干燥、自由流动颗粒的组合物：即每个颗粒均由在滑移点为35至45℃的脂质中含水量为大约25%至50%的脂质连续乳胶的固体小球构成，每个小球的平均直径约2至3毫米并至少包含1个已形成孢子的可感染家禽的球虫活卵囊，且每个小球均有一个平均厚度为大约0.2至0.5mm的水泥和/或石膏形成的保护性衣壳。

在本发明的一个实施方案中，该组合物含有活的形成被囊的寄生原虫及某种在原生动物生活周期的中间阶段能有效地阻止其生长的化学治疗剂，其使用量是可在宿主摄入组合物后阻止原生动物的充分发育。因此寄生原虫能够在被寄主摄入后完成短期发育，进而诱导宿主的免疫反应，而化学治疗剂则阻止了原生动物完成整个生活史致使感染性原动生物释放到球境中。例如，如果原生动物是球虫，则该实施方案最好使用确认为在球虫生活史的后期，特别是在裂殖生殖后期有最佳效果的抗球虫药物。适用的抗球虫药包括nicarbazin、furazolidone、nitrofurazone、nihydrazone、sulphaquinoxalene、sulphanitran、dinsed、ormetroprim、sulphadimethoxine和ethopabate。给服含有化学治疗剂的疫苗可防止寄生虫传播到其他宿主体内，同时不会产生抗药品系。化学治疗剂的存在提供了进一步的安全保障，使服用感染性原生动物的宿主免于在不寻常环境中造成临床感染。必要时可将有充分毒性的原生动物和/或减毒的原生动物与化学治疗剂一起联合使用。

可按下述多种方式投服本发明的疫苗，如：

a）在制造饲料过程中使之与营养物质混合以掺入宿主的饲料中。必要时可将呈颗粒形式的本发明之组合物预混合到饲料中，以利于含原生动物的颗粒分布于整个大批量饲料中。

b）在给宿主喂饲饲料的同时将组合物简单地加入饲料中，如将本发明的组合物颗粒喷洒到家禽饲料上。

c）对宿主动物如新近孵出来的小鸡进行个别给药。

本发明的疫苗可以是以单一品系或种原生动物为基础的，但为了获得更广泛的宿主特异性免疫，可在单一疫苗配方中选择使用几个品系或种的原生动物。所用原生动物可以是有全毒力的“野生”品系、减毒品系（如胚胎适应性品系或早熟品系）、杂种品系（目前可得到的是某些球虫的杂种品系如Eimeria    maxima）或已借助遗传操作技术修饰了的品系。可根据需要在单一疫苗配方中联合加入几个不同品系的原生动物。

本发明中主要描述控制球虫，但本领域内技术人员将会理解到，依据本发明的方法亦可生产出能诱导抗其他胞囊形成之寄生原虫的免疫性的组合物。

本发明可适于控制任何种属易患球虫病之宿主体内的球虫。虽然长期来一直认为球虫病主要与鸟类的某些种特别是家禽有关，但现已认识到更广泛种系动物患球虫病是一个很严重的问题。集约经营方法使球虫病的传播范围及危害性的日益增大。目前患球虫病已成为一个问题的非鸟类宿主有猪、反刍动物（特别是牛、绵羊和山羊）以及兔。该病对成年动物的健康一般没有严重影响，但对于生活于已被亲代严重污染了的环境中的新生动物却危害很大。

已对家禽中发生球虫病作过广泛研究，但至今仍很少注意到其他种属动物。例如，虽然文献中已对感染猪的几种球虫有所记载，但尚未见有更详细的研究报告。如在猪体内观察到的有下列一些球虫：Eimeria    debliecki、E·scabra、E·suis、E·spinosa、E·perminuta、E·neodebliecki、E·Porci、E·cerdonis、E·Polita及Isospora    Suis。已鉴定出的特异性感染牛的球虫有：Eimeria    bovis、E·zuernii、E·ellipsoidalis、E·auburnersis、E·cylindrica、E·alabamensis及E·bukidnone-nsis。感染绵羊的球虫有：E·minakohlyakimovae、E·ovina、E·intricate及E·ahsate。感染山羊的有E·arloingi。已发现感染兔的球虫有：E·intestinalis、E·flavesens、E·magna、E·irresidua、E·periformis、E·stiedai、E·Perforans、E·neoleposis及E·media。

然而，本发明将更具体地描述与家禽有关的球虫病。本说明书中所说的“家禽”是指鸡形目鸟类，如普通家鸡或小鸡（Gallusdomesticus）、火鸡（Meleagris）、雏（Phasianus）、鹧鸪（perdix）、松鸡（Lagopus）、珍珠鸡（Numida）和孔雀（pavo），以及雁行目鸟类如鸭（Anas）和鹅（Anser）。

家鸡（Gallus    domestricus）可被Eimeria    tenella、E·necatrix、E·brunetti、E·maxima、E·acerrulina和E·Praecox中的任何一种球虫所感染。可感染火鸡的球虫有：E·melagrimitis、E·dispersa、E·meleagridis、E·gallopavonis、E·adenoides、E·innocua和E·subrotunda。家鸭可被Tyzzeria    Perniciosa感染，而且一般认为感染野鸭的Eimeria    anatis也可感染家鸭。E·anseris、E·nocens和E·parvula可感染鹅，此外有人认为感染加拿大鹅的E·hermani、E·striata和E·fulva也感染家鹅。其他家禽则可分别被前已确定了特征的球虫感染，且本发明在控制由已定性的球虫引起的其他种家禽感染方面是同样适用和有效的。本说明书中所提到的所有卵囊水平均应解释为每一种球虫的卵囊数。

人工饲养的各种家禽都可遭受球虫感染。如这些感染发生于现代集约饲养条件下饲养的家禽群体中，将会造成极大麻烦。感染可能迅速地传播到整个群体，并至少要引起发育不良。感染严重时则可导致家禽死亡。因此多年来已作出大量努力，试图找到对抗这类感染的可靠的预防措施，特别是期望找到可有效地免疫家禽以对抗这类感染发生的方法。任何有效免疫技术的实际好处都应是促进已获得免疫力之家禽的生长，这样从某种意义上说至少可由此而抵消球虫感染对生长造成的不利影响。

定期在家禽饲养中提供卵囊，便可使家禽有效地进行可控制的累进性自身免疫接种。每天摄入的卵囊量是由每只家禽的进食量决定的，而饲料中所含卵囊的水平则由饲料制造者使用精细的质量控制设备进行调节，从而能容易地确保不会造成过量。此外，因为正常饮食中就有卵囊，这样便有可能确保小鸡在刚刚开始摄取固体食物时就进食适当水平的卵囊，从而在它们刚孵出不久即可开始免疫过程。

可特意感染宿主动物如供体家禽集群并由其粪便中收集卵囊，以获得已形成孢子的活卵囊。获得已形成孢子之活球虫卵囊的技术是本领域中已知的，此不作为本发明的内容。美国专利3147186号的说明书中详细描述了一种适用方法。

关于施用卵囊的水平（如通过饲料），每公斤饲料中最好不超过大约2，500个形成孢子的活卵囊。虽然将已形成孢子的卵囊加入饲料中饲予处于任何生长阶段的家禽均可获得积极效果，但对于刚孵出并开始进食的禽类，则宁可提供含较少形成孢子之卵囊的饲养。随着禽类的生长，它们的每日食物需要量将急剧增加。例如就家鸡（Gallus    domesticus）来说，在“最初喂饲”阶段小鸡每天至少消耗2g饲养。10天后增加到每天至少约10g，而30天后每天差不多要进食80g或更多。禽类的营养需求将随着其发育而改变，市售的家禽饲料是根据家禽发育的不同阶段而有一系列不同配方。典型的系列将包括“开口饲料”、“生长饲料”和“饲养/产蛋饲料”。为了确保禽类在其发育的各阶段每天都能摄入适当量已形成孢子的球虫卵囊，可在其发育的不同阶段给予每公斤含不同数目卵囊的饲料。

为了达到最适免疫，我们认为新孵出的小鸡每天应摄入大约1至20个已形成孢子的活卵囊。在生长的前10天，应增加到每天约2至50个卵囊。到第30天，每天摄入的卵囊量应为5至200个。

“开口”饲料最好每公斤至少约含有50个形成孢子的活卵囊。卵囊的最高水平一般为每公斤约5，000个，最好是每公斤不超过约2，000个。“生长”饲料中已形成孢子的活卵囊的最低水平最好为每公斤约50个。卵囊含量的上限最好为每公斤约2，000个，更理想的是每公斤不超过约500个。“饲养/产蛋”饲料中已形成孢子的活卵囊的最低水平为每公斤约10个。卵囊含量的上限最好是每公斤不超过1，000个，更理想的是每公斤不超过100个。

对于家禽以外的其他宿主，每天摄入球虫卵囊的量将根据生物体的相对毒力及有关动物的大小和易感性等因素而有所不同。例如已断奶的小牛，每日摄入1-100个已形成孢子的活卵囊可能是足够的。

某些寄生原虫在其传播期具有“囊内囊”。例如球虫的外囊（卵囊）内就有孢子囊。虽然为实用目的使用完整卵囊作为疫苗成分更为方便，但在脂肪乳胶中掺入被释出的孢子囊也是可行的。虽然优选的是普通正常卵囊，但我们也注意在本发明的疫苗中使用孢子囊。

应理解到，亦可以使用本发明的组合物来帮助在饲料中加入其他必需的微量成分，如矿物质添加剂（其在促进产蛋禽类的蛋壳形成中尤为重要的）、生长促进剂、维生素和氨基酸（如赖氨酸），以及通常用来影响卵黄颜色的类胡萝卜素。可根据需要将一种或多种上述微量成分连同卵囊一起包函于一种复合的组合物中。

可使用简单的混合方法将本发明的组合物掺入饲料中，每单位重量饲料中所选定的组合物的比例，将根据存在于组合物中之卵囊的浓度以及饲养中所需卵囊的浓度而定。在实施本发明中，除了有关含有已形成孢子之活卵囊的组合物以外，改变饲料的组成或物理形式对于本发明的目的无关重要。可以使用任何当前标准的“完全”或营养平衡的商品饲料配方，而且饲料中的营养物质可包括任何通常见于这类饲料中的蛋白质、糖和脂肪成分。这些标准成分如各种鱼肉、磨碎的谷物和其他植物材料、矿物质添加剂以及最低量维生素、氨基酸和微量元素等营养必需物质的性质都是本领域内已知的，并在技术文献中有所记载，这里均不再详细介绍。

仅通过实施例介绍下列技术，旨在说明如何制备本发明的组合物。

实施例1

附图1和2图解说明了用于制备本发明之产品的装置。

参见附图1，该装置包括一个直立的顶部开口的园柱形水容器100，其下面接有一个园锥形基部101，一冷水入口102通入它的中心。溢流通道103由容器顶部105的边缘处点104伸出，并导向上面装有筛网107的排水管106，以截留由容器100溢出的水所携带的任何颗粒物质。用于储存熔化之脂肪乳胶的带水套的储存容器的位置高于水容器的顶部水平，供应管109由储存容器108的基部110导入水容器100之园锥形基部101的较低部位，并终止于许多个尖端向上的喷嘴111。可借助供应管109中的阀112来控制储存容器108内熔化乳胶向喷嘴111的流动。

图2为水容器之顶部的俯视图。并显示了溢流系统103以切线方向离开容器的侧壁。

工作时，连续的冷水流导向水容器100的底部，这样一个平稳的小水流便流过流出管103并通过筛网107落入排水管106。将含有已分散之被囊寄生原虫的熔化脂肪乳胶置于贮存容器108中。调整高度X和Y，以便当打开控制阀112时液态乳胶能流向喷嘴111。由喷嘴111出来的液态乳胶流正好足以提供有稳定产量之在喷嘴111形成并通过水上升至水容器100顶部的小脂肪滴113。当通过冷水浮起时，脂肪小滴113将固化并得到本发明的包有被囊的产品。当到达水面时，固化的小滴将被溢流系统带走并收集到筛网中。如图2所示，在水表面上施加一空气流可使达到容器垂直轴附近水表面的小滴绕着容器周壁环流，直至进入溢流系统。

对本方法的所作的某些改进（可根据需要结合使用之）是：

a）使用泵压乳胶的输送系统，而不是简单的重力进料。

b）使用加热的喷嘴，并可有助于离散所形成的脂肪乳胶小滴。

c）在脂肪乳胶传输管109上施加脉冲，如借助振荡器振荡，此亦可有助于离散小滴形成。

d）容器101中的水基本上是静止的，但在容器的顶部加水则可形成溢流，以将脂肪颗粒带入溢流系统。

实施例2

附图3和4图解显示了可用于本发明的另一种装置。

图3所示的装置包括一个直立顶部开口的园柱形水容器200，其有一尖端向下的园锥形基部201，后者的中心201通向冷水入口203。溢流系统204由水容器200之顶部的边缘205导出，并通过筛网207流入排水管206。表面活性剂溶液的储存容积208位于容器200顶部上方，且有一供料管209由储存容器的基部210通过控制阀211导入相邻于进水口203之水容器的下部。

装有熔化脂肪乳胶的带水套的储存罐212位于水容器200顶部的上方。出口213从乳胶储存罐212的基部214导出，向下通过控制阀215止于多头喷嘴216，喷嘴216与水容器200之水表面217距离较短并与水容器200的边缘部205相接近。

图4为水容器200顶部的俯视图，并显了溢流204以切线方向由水容器周边205上一点伸出。图4中图解显示了由液体乳胶储存罐212导出的供料管213，同时有一终止于一连串水平喷气口212的增压空气管路218，由喷气口出来的气流直接吹到水容器200中水的表面217上。该气流吹过脂肪乳胶喷嘴216使水流在水容器顶部离开喷嘴形成环流，并绕着容器周边进入溢流系统204。

工作时，冷水流被导向水容器200的基部，这样一小水流便被携带流过溢流系统204，并通过筛网207向下进入排水管206。一表面活性剂溶液的缓慢渗流将导入水容器200的较低部位并将与流入的冷水混合。含有已扩散之被囊寄生原虫的熔化脂肪乳胶将置于储存罐212中。适当调整高度Z，使该乳胶能通过控制阀215流入喷嘴216并作为小滴220出现，然而落于水的表面上。水中存在表面活性剂将确保这些小滴保持聚集性并不会在水表面上扩散形成连续的层或膜。落在水面上之后，小滴将被外加气流产生的循环流带离喷嘴。从喷嘴到溢流系统的途中，熔化的乳胶小滴将在冷水中固化，并在离开溢流后收集到筛网中。

实施例3

附图5图解显示了用于制造本发明之产品的另一种装置。

该装置包括一个直立顶部开口的园柱形水容器300，其具有一向下突出的园锥形基部301，该基部中心302通入冷水入口303。一水平输送槽304从水容器300顶部306的凸缘305的侧面延伸出来。凸缘305比水容器300之顶部306的残留部分低，所以来自水容器的水的溢流必须越过凸缘并进入输送槽。远离容器300之输送槽末端307附近有一伸向槽底层309的开口308，水可流经该开口通过筛网310进入排水管311。在出口处被一伸向上方但还不到输送槽顶部的穿孔挡板312所环绕。槽内水中的任何颗粒状物质必须在水通过出口流出之前越过该挡板。

管路313以稍微向下倾斜的角度由凸缘305伸向槽304中并终止于环绕水出口308之挡板312的附近。管道313的安装应在凸缘末端开始部分高于和部分低于容器和槽中的水平面，而相邻于槽312的管道的另一端则全部浸没在水中。因此由水容器流过凸缘的水被迫在冒出挡板附近之前通过管道向下流。

该装置还包括一个位于水容器上方的管道314，表面活性剂溶液可由该管道加到容器300内的水中。

最后，在直接邻近凸缘305的输送槽304末端之上方有一引导熔化脂肪乳胶的管道315，这样由管道315出来的脂肪乳胶的小滴便直接被从水容器300溢出的水带入导管313并由此向下流向输送槽中的挡板312处。

操作过程中，稳定的冷水流被导向水容器300的基部，这样一水溢流的缓水流便通过导管313进入槽304中。将表面活性剂溶液的小滴加入水容器的顶端使之与水混合，从而得到流过凸缘305进入输送槽的稀释的表面活性剂溶液。将含有已扩散有被囊寄生原虫的熔化脂肪乳胶小滴加到离导管313最近的水中，使之通过导管被水流带走。当这些小滴通过导管时便将在冷水中固化。由导管末端出来后，固化的小滴随水流越过挡板312落下并被收集到筛网310上。

实施例4

附图6图解显示对图5所示装置的改进。这一改进中，装置仍按图5中所描述的同样方式运转，但不同的是熔化的乳胶通过一个管或一个通过小孔402穿透导管401的针400被注射到水平面以下。管道400底端的管嘴403处于由水容器（未标出）流入导管401之水的水面以下。

使用这一改良装置，很容易制得均匀的硬化乳胶的球形颗粒，并很容易通过改变水和液体乳胶的流速来调节这些颗粒的大小。

实施例5

使用实施例2所述的技术，制备本发明的含有已形成孢子之禽艾美球虫（E·tenella）活卵囊的呈油包水型乳胶之固体小球形式的组合物。

所用脂肪是市售的滑移点为39℃的硬化棕榈仁油。使之与水乳化形成分别含8%和16%（重量）水的两种乳胶（组合物A和B）。向各乳胶内加入0.6%（重量）每毫升约含26，000个卵囊的卵囊水悬浮液。由此得到分别含有约8.5%和16.5%水（重量）之两种乳胶的最终组合物，且两种乳胶每100毫升均含大约15，600个卵囊。作为对照组合物，是将0.6%同样的卵囊水悬浮液加到市售棕榈仁油中，由此得到约含0.5%水和每100毫升约含15，600个卵囊的乳胶。下表中将该对照组合物称为组合物C。

初始乳化是在常规乳胶混合器（Turox）中完成的。使用0.5%Admul    WOL稳定剂来稳定乳胶。使用同一装置，在45-50℃下使含卵囊的水悬浮液与所得乳胶混合约20分钟。

将内径为0.8mm的针伸进含300ppm非离子表面活性剂（Synperonic    7EO）的冷水（15℃）深1cm，使熔化乳胶由针端滴出形成含卵囊的小球。水的流速保持在7.2升/分钟。由水中回收后，于室温下将小球干燥过夜。得到直径约4mm且平均各含约5个卵囊的小球。

将小球于4℃保存2周，然后与市售家禽饲料混合并再于室温下保存4周。在于4℃储存期之末以及喂饲后两周和四周时检验卵囊的存活率。在免疫攻击条件下给家禽投服组合物（小球或含小球的饲料）并监测继后十天内卵囊排出数以估计存活率。

下列表1中给出了以每只家禽排出的总卵囊数表示的试验结果。表中还给出了繁殖指数（RI），即每服一个卵囊所产生的卵囊的数目。从这些结果中可以看出，尽管存活率有所下降，但由含8%和16%水的乳胶制备的小球在拌入饲料中室温储存四周后，仍有很高的存活率。相比之下，虽然由纯脂肪制得的对照组合物中的卵囊掺入饲料后于室温下储存2周仍显示有较高存活率，但如再储存两周则其存活率明显下降。

实施例6

使用实施例4中所述的技术，制备本发明的含已形成孢子之禽艾美球虫（Eimeria    tenella）活卵囊的、呈油包水型乳胶之固体小球形式的其他组合物。

使用蒸馏水和1%Admul    WOL乳化剂，由市售的熔点为60℃的硬化棕榈仁油PK39制备乳胶。当乳胶冷却到50℃以下时加入卵囊水悬浮液。整个操作均在标准实验室高速混合器中进行。实践中，所用混合装置的种类并不是关键的。计算加入到混合物中的水及卵囊水悬浮液的量，以最后制得分别含8%和25%水的两种组合物（组合物D和E）。

将45-50℃的乳胶以每小时800g通过一内径为1mm的针注入19℃水中（流速约每秒10cm），制得含卵囊的小球。在这些条件下可生产出直径约4mm的小球。组合物D中每个小球平均含214个卵囊，组合物A中的小球平均各含183个卵囊。

将含卵囊的小球置于室温下水上储存于干燥器（desiccators）中（相对湿度100%）几周。并于同样条件下置于家禽饲料上（相对湿度约65%）。在此期间每隔一周给家禽服用一次小球，以检测卵囊的存活率。各实验组中，每组5只2周令家禽各给予10个小球。就卵囊剂量来说，这个量代表了一次强烈的免疫攻击，然后计数由感染的家禽体内排出的卵囊数。下列表2中给出了以每只家禽5天内所排出的总卵囊数（×10⁶）表示的实验结果。这些结果表明，在至少3周内卵囊存活率保持在一个很高的水平，而且5周后仍有大量的卵囊存活。

实施例7

使用实施例1中所述的技术，制备本发明的含有已形成孢子之禽艾美球虫（Eimeria    tenella）活卵囊的、呈油包水型乳胶之固体小球形式的其他组合物。

使用蒸馏水和1%Admul    WOL乳化剂由市售的硬化棕榈仁油（PK39）（熔点为60℃）制备乳胶。使乳胶冷却至50℃以下后，加入卵囊水悬浮液。整个操作过程均在标准实验室高速混合器中完成。实践中，所用混合器种类与型号并不是关键的。计算加到混合物中的水和卵囊水悬浮液的量，以最终制得各含25%的水，但含不同数目卵囊的两种组合物，这样在直径为2mm的小球（组合物F）和直径为4mm的小球（组合物G）中均应含有大约100个卵囊。

将45-50℃的乳胶通过一内径为0.5mm的喷嘴泵入4℃的水中，制得含卵囊的小球。

对于组合物F，泵向喷嘴的乳胶流速为每小时0.5公斤。这样致使乳胶在喷流条件下由喷嘴排出，并借助泵产生的自然振荡以每秒钟约30个的速率形成直径约2mm的小球。

对于组合物G，乳胶流速为0.4公斤/小时，条件是喷嘴处不形成喷流，结果以每秒钟大约3个的速率形成直径约为4mm的小球。

于4℃和20℃下，将含有卵囊的小球置于家禽饲料上储存于干燥器中（相对湿度约65%）。储存期间经每周给家禽服用一次小球，以检测卵囊的存活率。在各实验组中，每组5只2周令家禽各给予10个小球。就卵囊剂量来说，这个量代表了一次强烈的免疫攻击;然后计数由被感染家禽体内排出的卵囊数。下列表3中给出了以每只家禽5天内排出的总卵囊数（×10⁶）表示的试验结果。这些结果表明至少6周内卵囊存活率保持在一个很高水平，而且14周后仍有大量卵囊存活。

Claims (17)

1、一种含有脂质连续乳胶之固体颗体的组合物，其中熔点为30至55℃的脂质中至少有1%但不超过70%(重量)的水，该组合物的每个颗粒平均至少包含1个包有被囊的活的寄生原虫。

2、根据权利要求1的组合物，其中脂质的滑移点为35至45℃。

3、根据权利要求2的组合物，其中脂质是硬化的棕榈仁油。

4、根据上述权利要求中之任一项的组合物，其中乳胶含有25至50%（重量）的水。

5、根据上述权利要求中之任一项的组合物，其中每个颗粒平均至少含有1个形成孢子的活的球虫卵囊。

6、根据上述权利要求中之任一项的组合物，其中颗粒是分别地被保护在干燥包衣内的。

7、根据权利要求6的组合物，其中包衣是由当其润湿并干燥后可形成一坚硬组合物的无机粉末制成的。

8、根据权利要求7的组合物，其中包衣材料是水泥和/或石膏。

9、根据上述权利要求中之任一项的组合物，其中脂肪乳胶颗粒的最大径为2至5mm。

10、根据权利要求6至9中任一项的组合物，其中保护性包衣包括一厚度至少约0.1mm，最好约0.2mm至2mm的包被层。

11、一种包含干燥、自由流动之颗粒的组合物，其中每个颗粒均由一在滑移点为35至45℃的脂质中含有大约25%至50%（重量）水的脂质连续乳胶的固体小球构成，每个小球的平均直径约为2至3毫米并至少包含1个对家禽有感染性之已形成孢子的活的球虫卵囊，每个小球均有一水泥和/或石膏的保护性包衣，保护性包衣的平均厚度约为0.2至0.5mm。

12、根据权利要求1至11中任一项的组合物，其另外还掺入了一种可有效地抗处于其生命周期中间阶段之原虫的化学治疗剂。

13、一种掺入了根据权利要求1至12中任一项之颗粒组合物的家禽饲料。

14、一种制备权利要求1之组合物的方法，其包括使包有被囊的寄生原虫分散于脂质连续乳胶中、其中乳胶呈液态并于不超60℃的温度下制备上述分散系，并经冷却或最好与冷水接触而使乳胶凝固。

15、根据权利要求14的方法，其中是使熔化的乳胶流释放到一定体积的冷水中。

16、根据权利要求14或15的方法，其中先制备最初的脂质含水乳胶，并在第二混合阶段中将寄生原虫加到预制乳胶中。

17、根据权利要求14至16中任一项的方法，其中在一开口容器内使颗粒滚动，将水或粘结剂喷洒到滚动的颗粒上同时加入一种粉末包衣材料以使包衣附于固态脂质乳胶颗粒上，连续进行这一操作直到在颗粒上形成有足够厚度的粉末材料的包衣。

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