CN1985875B - 玉屏风总多糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种玉屏风总多糖的制备方法，旨在提供一种能够保持玉屏风中药的整体性，能产业化生产，产品纯度高的玉屏风多糖的制备方法。将玉屏风混合物中加入水浸提，之后过滤收集浸提液；在浸提液中加入澄清剂溶液，过滤或离心后取上清液；将上清液用滤膜过滤，收集分子量小于50000的滤液，将收集的滤液进行浓缩，之后进行醇沉；取醇沉后的沉淀物，经水洗醇沉后干燥，即得玉屏风总多糖提取物。本发明的方法保持了复方中药的整体性，同时减少了非多糖组分的混入，提高了产品的纯度，能够进行产业化生产。并对浸提液作了加澄清剂的处理，减少了蛋白质等杂质对滤膜的污染，提高了膜过滤的效率及效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种从玉屏风中提取总多糖的方法。
背景技术
复方中药“玉屏风散”是扶正祛邪的代表方，源自元代《丹溪心法》，具有益气固表、健脾止汗的作用。中医“扶正祛邪”理论用于传染病防治已有悠久历史。
“玉屏风散”由黄芪、白术和防风组成。该方对人体犹如抵御外邪的屏障，故称玉屏风。经现代研究证明，玉屏风散活性成分中的重要组分多糖类物质，具有提高人体免疫功能的良好作用。
根据近年来的报道，黄芪多糖、白术多糖及防风多糖均具有增强免疫功能、抗肿瘤等多种生物活性，而由于不同的多糖之间在免疫调节方面存在协同效应，因此复合多糖比单一多糖对于免疫功能的增强作用更大。根据张磊等人的报道(玉屏风散多糖类成分对免疫功能的影响，中药药理与临床，2006，22(1)：2～4)，玉屏风总多糖也具有增强机体免疫力及抗肿瘤的作用。而目前，玉屏风多糖大多处于研究阶段，还没有进行产业化生产，市场上缺少与玉屏风总多糖相关的药品或保健品。
现有的提取多糖的方法以传统的水煮醇沉为主，而水煮温度多为100℃，由于水煮温度偏高，提取物中的非多糖成分较多，会对产品的质量造成影响。而且，多为浸提液未经适当的处理就进行超滤等膜过滤步骤，这样浸提液中的蛋白质等一些杂质会对滤膜造成一定程度的污染，降低滤膜的使用效率及过滤效果。
现有的对于黄芪、白术和防风中多糖等活性成分的提取，都是对单味药材进行提取，这样既浪费了能源和资源，又破坏了复方中药的整体性。此外现有的玉屏风产品，如玉屏风口服液，只是将药材水煮醇沉后的上清液进行加工并制成相关产品，这样作既浪费了资源降低了中药的利用率，又加大了后期对废料处理的负担，并可能会对环境造成一定的污染。
发明内容
本发明是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种能够保持玉屏风中药的整体性，能产业化生产，产品纯度高的玉屏风多糖的制备方法。
本发明通过下述技术方案实现：
一种玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
步骤一：将由黄芪、白术和防风组成的玉屏风混合物中加入水浸提，之后过滤，收集浸提液；
步骤二：在上述浸提液中加入澄清剂溶液，过滤或离心后取上清液；
步骤三：将上述上清液用滤膜过滤，收集分子量小于50000的滤液；
步骤四：将收集的滤液进行浓缩，之后进行醇沉；
步骤五：取醇沉后的沉淀物，经水洗醇沉后干燥，即得玉屏风总多糖提取物。
所述玉屏风混合物中按质量份数制成活性成分的原料组成为：黄芪1-3，白术1-2，防风1-2。本发明黄芪、白术、防风的配比除2005版药典所述的3∶1∶1之外，三味药的质量份数还可以为：2∶2∶1、1∶2∶1、1∶1∶2、1∶1∶1等。
为了进一步提高玉屏风多糖的纯度及质量，步骤一中加水量为药物混合物总质量的5～10倍，浸泡时间为0.5～12小时，浸提温度为60～85℃，浸提时间为2～5小时。最好按上述方法浸提三次，以达到最佳效果。
步骤二中所用的澄清剂溶液为ZTC澄清剂溶液或壳聚糖澄清剂溶液或101果汁澄清剂溶液。
在制备之前，首先配制澄清剂溶液。也可以直接使用配制好的澄清剂溶液。配制澄清剂溶液的方法参考澄清剂产品的使用说明书。
配制ZTC澄清剂溶液：
A澄清剂溶液：用蒸馏水与A组分配成含A组份1％浓度的溶液，溶胀24小时，得到A澄清剂溶液。
B澄清剂溶液：用1％的醋酸溶液与B组分配成含B组份1％浓度的溶液，溶胀24小时，得到B澄清剂溶液。
配制壳聚糖澄清剂溶液：用1％的醋酸溶液与壳聚糖澄清剂配成含壳聚糖澄清剂2％浓度的壳聚糖澄清剂溶液。
配制101果汁澄清剂溶液：用蒸馏水与101果汁澄清剂配制成含101果汁澄清剂5％的101果汁澄清剂溶液，充分搅拌放置过夜，得到101果汁澄清剂溶液备用。将101果汁澄清剂的配套用粉末助剂用蒸馏水配成含101果汁澄清剂粉末助剂5％浓度的101果汁澄清剂助剂溶液，搅拌均匀后静置8～12小时备用。
当加入的澄清剂溶液为ZTC澄清剂溶液时，首先加入B澄清剂溶液，加入量为每升浸提液加入B澄清剂溶液0.8～1.8g，在80℃条件下保温2小时；之后加入A澄清剂溶液，加入量为每升浸提液加入A澄清剂溶液0.4～0.9g，80℃条件下保温2小时。
当加入的澄清剂溶液为壳聚糖澄清剂溶液时，其加入量为浸提液总体积的1～10％，在40～50℃的条件下充分搅拌0.5小时，静置2小时后离心或过滤。
当加入的澄清剂溶液为101果汁澄清剂溶液时，首先加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂助剂溶液，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，之后所得滤液再按照上述方法处理一次。
醇沉所用浓度为95％的食用酒精与浓缩液的体积比为5～10∶1。
浓缩后浓缩液的相对密度为1.1～1.4。
本发明具有下述技术效果：
1.本发明改每味药材单独浸提为合并浸提，既保持了复方中药的整体性，又降低了对能源的消耗。
2.本发明通过将浸提温度由传统的100℃降为60～85℃，减少了非多糖组分的浸出，提高了产品的纯度，能够进行产业化生产。
3.本发明在膜过滤步骤之前对浸提液作了加澄清剂的处理，减少了蛋白质等杂质对滤膜的污染，提高了膜过滤的效率及效果。
4.应用本发明所述方法生产玉屏风多糖所用的是醇沉后的沉淀，醇沉后的上清液依然可以加工成其他玉屏风制剂，这样既提高了中药的整体利用率，又减少了废物的排放，大大降低了生产对环境所造成的污染。
5.本发明的方法中由于澄清剂的应用，膜过滤的应用，以及降低了浸提温度，产物中总多糖含量得到了提高。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明详细说明。
玉屏风总多糖的制备方法如下：
将黄芪、白术和防风这三味药分别切片并粉碎成末，按质量份数黄芪1-3，白术1-2，防风1-2的比例，将三种药粉进行混合，将混合均匀的三味药粉的混合物置于三颈瓶中，加入5～10倍质量的水，浸泡0.5～12小时，之后于60～85℃下浸提2～5小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次，合并滤液后得到浸提液，可用以下三种方法中的任意一种进行处理：
(1)向合并后的浸提液中加入0.8～1.8g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的B澄清剂溶液。在80℃条件下保温2小时后再加入0.4～0.9g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的A澄清剂溶液，80℃条件下保温2小时。离心或过滤，取上清液。
(2)向合并后的浸提液中加入体积为浸提液总体积1～10％的壳聚糖澄清剂溶液，在40～50℃的条件下充分搅拌0.5小时，静置2小时后离心或过滤，取上清液。
(3)向合并后的浸提液中加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂助剂溶液，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，滤液再按照上述方法处理一次，离心或过滤，取上清液。
将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到浓缩液，浓缩液相对密度为1.1～1.4。将上述浓缩液逐渐滴入到大量的95％食用酒精中沉淀，浓缩液与95％食用酒精的体积比为1∶5～10，静置24小时，离心或过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液，浓缩液相对密度为1.1～1.4，再将所得浓缩液滴入到大量95％食用酒精中沉淀，浓缩液与95％食用酒精的体积比1∶5～10，静置24小时，离心或过滤后得沉淀。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖，产率为5.3～7.2％，总多糖含量为83～92％。
实施例1
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末600g，白术及防风粉末各200g，置于三颈瓶中，加入5000ml的水，浸泡0.5小时，之后于60℃下浸提2小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向其中加入0.8g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的B澄清剂溶液。在80℃条件下保温2小时后再加入0.4g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的A澄清剂溶液，80℃条件下保温2小时。离心，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.1的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶5，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。离心后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.1，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶5，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，离心后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖67g，产率6.7％，总多糖含量92％。
实施例2
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末400g，白术粉末400g，防风粉末200g，置于三颈瓶中，加入6000ml的水，浸泡2小时，之后于65℃下浸提3小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向其中加入1.8g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的B澄清剂溶液。在80℃条件下保温2小时后再加入0.9g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的A澄清剂溶液，80℃条件下保温2小时。过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.2的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶6，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.2，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶6，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，离心后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖53g，产率5.3％，总多糖含量89％。
实施例3
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末250g，白术粉末500g，防风粉末250g，置于三颈瓶中，加入8000ml的水，浸泡4小时，之后于70℃下浸提3.5小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积1％的壳聚糖澄清剂溶液，在40℃的条件下充分搅拌0.5小时，静置2小时后离心，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.4的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶7，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。离心后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.4，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶7，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，离心后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖71g，产率7.1％，总多糖含量83％。
实施例4
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末250g，白术粉末250g，防风粉末500g，置于三颈瓶中，加入9000ml的水，浸泡8小时，之后于80℃下浸提4小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积10％的壳聚糖澄清剂溶液，在50℃的条件下充分搅拌0.5小时，静置2小时后过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.2的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.2，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为9 5％食用酒精中沉淀，静置24小时，过滤后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖69g，产率6.9％，总多糖含量87％。
实施例5
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪、白术及防风粉末各350g，置于三颈瓶中，加入10000ml的水，浸泡12小时，之后于85℃下浸提5小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积10％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为滤液总体积10％的101果汁澄清剂助剂溶液(101果汁澄清剂的配套用助剂)，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，滤液再按照上述方法处理一次，过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.1的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶10，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.1，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶10，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，过滤后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖65g，产率6.2％，总多糖含量90％。
实施例6
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末400g、白术粉末400g、防风粉末200g，置于三颈瓶中，加入8000ml的水，浸泡10小时，之后于75℃下浸提4.5小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积8％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为滤液总体积8％的101果汁澄清剂助剂溶液(101果汁澄清剂的配套用助剂)，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，滤液再按照上述方法处理一次，过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.2的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶6，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.2，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶6，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，过滤后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖65g，产率6.5％，总多糖含量86％。
实施例7
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末600g、白术粉末200g、防风粉末200g，置于三颈瓶中，加入10000ml的水，浸泡6小时，之后于65℃下浸提3小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积12％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为滤液总体积12％的101果汁澄清剂助剂溶液(101果汁澄清剂的配套用助剂)，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，滤液再按照上述方法处理一次，离心，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.4的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。离心后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.4，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，离心后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖72g，产率7.2％，总多糖含量84％。
实施例8
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末600g，白术粉末200g，防风粉末200g，置于三颈瓶中，加入6000ml的水，浸泡6小时，之后于60℃下浸提4小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向滤液中加入体积为滤液总体积5％的壳聚糖澄清剂溶液，在45℃的条件下充分搅拌0.5小时，静置2小时后过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.4的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶10，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.4，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶10，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，过滤后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖68g，产率6.8％，总多糖含量88％。
实施例9
将黄芪、白术、防风三味药分别切片并粉碎成末，分别取黄芪粉末250g，白术粉末250及防风粉末500g，置于三颈瓶中，加入8000ml的水，浸泡10小时，之后于80℃下浸提4小时。冷却至室温后，过滤，将滤饼用水按照上述方法再浸提两次。合并滤液，向其中加入1.8g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的B澄清剂溶液。在80℃条件下保温2小时后再加入0.9g/L(每升浸提液加入澄清剂溶液的量)的A澄清剂溶液，80℃条件下保温2小时。过滤，取上清液。将上述步骤中所得的上清液用膜过滤，收集分子量小于50000的滤液并浓缩，得到相对密度为1.4的浓缩液。按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时。过滤后得沉淀，然后将沉淀溶解于水中，浓缩该溶液至浓缩液相对密度为1.4，再按照浓缩液与浓度为95％的食用酒精的体积比为1∶8，将上述浓缩液逐渐滴入到浓度为95％食用酒精中沉淀，静置24小时，过滤后所得沉淀即为混合多糖。将得到的混合多糖沉淀溶于水，蒸出残余乙醇，将其冷冻后，用冷冻干燥机冻结干燥，得到玉屏风总多糖71g，产率7.1％，总多糖含量85％。
尽管参照实施例对所公开的涉及一种玉屏风总多糖的制备方法进行了特别描述，以上描述的实施例是说明性的而不是限制性的，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，所有的变化和修改都在本发明的范围之内。
Claims (9)
1.一种玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
步骤一：将由黄芪、白术和防风组成的玉屏风混合物中加入水浸提，之后过滤，收集浸提液；其中，加水量为药物混合物总质量的5～10倍，浸泡时间为0.5～12小时，浸提温度为60～85℃，浸提时间为2～5小时；
步骤二：在上述浸提液中加入澄清剂溶液，过滤或离心后取上清液；
步骤三：将上述上清液用滤膜过滤，收集分子量小于50000的滤液；
步骤四：将收集的滤液进行浓缩，之后进行醇沉；
步骤五：取醇沉后的沉淀物，经水洗醇沉后干燥，即得玉屏风总多糖提取物。
2.根据权利要求1所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，所述玉屏风混合物中按质量份数制成活性成分的原料组成为：黄芪1-3，白术1-2，防风1-2。
3.根据权利要求1所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，所述澄清剂溶液为ZTC澄清剂溶液或壳聚糖澄清剂溶液或101果汁澄清剂溶液。
4.根据权利要求3所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，当加入的澄清剂溶液为ZTC澄清剂溶液时，首先加入B澄清剂溶液，加入量为每升浸提液加入B澄清剂溶液0.8～1.8g，在80℃条件下保温2小时；之后加入A澄清剂溶液，加入量为每升浸提液加入A澄清剂溶液0.4～0.9g，80℃条件下保温2小时。
5.根据权利要求3所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，当加入的澄清剂溶液为壳聚糖澄清剂溶液时，其加入量为浸提液总体积的1～10％，在40～50℃的条件下充分搅拌，静置2小时后离心或过滤。
6.根据权利要求3所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，当加入的澄清剂溶液为101果汁澄清剂溶液时，首先加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂溶液，在室温条件下充分搅拌，静置10分钟后，再加入体积为浸提液总体积8～12％的101果汁澄清剂助剂溶液，充分搅拌，室温静置24小时后过滤，之后所得滤液再按照上述方法处理一次。
7.根据权利要求1所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，醇沉所用浓度为95％的食用酒精与浓缩液的体积比为5～10∶1。
8.根据权利要求1所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，步骤一中浸提总次数为三次。
9.根据权利要求1所述的玉屏风总多糖的制备方法，其特征在于，浓缩后浓缩液的相对密度为1.1～1.4。
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| 戴述诚等.用101-澄清剂提取黄芪多糖溶液.中国动物保健 10.2004,(10),47. |
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