CN1872094A - 海参活性物质作为药物或保健品的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病及认知损伤的药物或保健品中的应用。所述药物是指通过注射、口服、腔肠或粘膜途径的方式给药的制剂。所述保健品是食品、饮品、化妆品之一。本发明为预防和治疗神经退行性疾病及认知损害提供了有效的活性物质，为海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病及认知损伤的药物或保健品中的应用提供了科学依据和产品制备方法。

Description

海参活性物质作为药物或保健品的应用

(一)技术领域

本发明涉及海参活性物质在制备药物或保健品中的应用，尤其涉及海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病及认知损伤的药物或保健品中的应用。

(二)背景技术

海参(Holothurian，sea cucumber)素有“海中人参”之称，归属无脊椎动物棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothurioider)。在我国海参一向被视为药食两用的海产佳品。明代以后，海参收入本草，列为补益药。《本草从新》评价海参能“补肾益精，壮阳疗痿”。《本草纲目拾遗》记载有海参治出血性疾病的实例，这也是世界上最早的海参药用记载。全世界海参约有1200种，均属海洋种类。在我国海域分布的有140多种，其中以黄、渤海的海参品质最佳。

海参的重要药用价值及其生物活性物质的研究工作已有许多报道。目前报道的有关活性物质主要有多糖、蛋白多糖及海参皂苷等；这些活性物质的功效主要有抗凝和止血作用，抗肿瘤作用，增强免疫力，延缓衰老，降血糖，抗辐射，抗炎等。但是从海参中提取的多糖等活性物质在促进神经干细胞增殖，促进神经损伤的修复方面的研究尚未见报道，临床上也未见海参提取物进行神经退行性疾病和认知损伤的治疗。

神经退行性疾病(又称神经变性疾病)是指由于中枢神经系统过早出现衰变性损伤而导致脑功能障碍的一系列疾病，包括老年痴呆、帕金森病和亨廷顿病等。这些疾病以慢性进展性的记忆、语言、运动障碍为特征，给社会和家庭带来了沉重的负担，其患病率随着年龄增长逐年增高。我国己进入老龄化社会，对这些疾病的预防与治疗，减少其危害，具有十分重要的意义。而这些疾病的预防和治疗都与神经干细胞的增殖及防止神经细胞的损伤及对受损神经细胞的修复密切相关。

(三)发明内容

针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种海参活性物质的新用途，即海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病及认知损伤的药物或保健品中的应用。

本发明所述海参活性物质是采用酶解、醇沉、柱层析、冷冻干燥等方法制备的海参提取物，其成分包括多糖、多肽、糖肽中的一种或几种的联合，其中的主要活性成分为糖肽。所述海参提取物的该成分可以从野生或养殖的刺参等海参属多种动物中提取分离纯化而得，海参活性物质的活性组分以具有促进神经干细胞增殖和对神经细胞损伤的保护及修复作用为活性检测指标来收集。

本发明所述的海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病的药物中的应用。

本发明所述的海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病的保健品中的应用。

其中：所述神经退行性疾病是一系列以神经元凋亡为特征的神经疾病；优选的是：肌萎缩侧索硬化、阿尔兹海默症(老年痴呆症)、帕金森氏症、享廷顿氏症、脊-小脑共济失调III疾病中的一种或多种。

本发明所述的海参活性物质在制备治疗和预防认知损伤的药物中的应用。

本发明所述的海参活性物质在制备治疗和预防认知损伤的保健品中的应用。

其中：所述认知损伤是指由遗传、疾病、药物、医疗、外伤、社会和心理的一种或多种因素造成的心理和生理损伤。

在上述的应用中：所述药物是指通过腔肠或粘膜途径的方式给药的制剂。

其中：所述制剂是注射剂、口服制剂、外用制剂、喷雾剂、透皮制剂之一。

其中：所述制剂优选是片剂、胶囊剂、注射剂之一。

在上述的应用中：所述保健品是食品、饮品、化妆品之一。

本发明所述的海参活性物质可以以一定量的海参提取物作为活性成分制备成各种药物组合物，可接受药学上的各种载体，这些药学可接受的载体可以是在现有技术中广泛用于药物中的各种载体。所述的药物组合物可以按现有技术已知的方法如混合、制粒、压片来制备。所述的药物组合物还可以包括各种药学使用的任选辅助组分，如香味剂、着色剂、甜味剂等。

为了更好地理解本发明的实质及本发明所述海参活性物质的作用效果，申请人利用海参活性物质进行了细胞和动物试验，药理实验及结果表明：本发明所述的海参活性物质对于正常神经干细胞有明显的增殖作用，并有利于神经元细胞间突触的联结和建立及修复；对谷氨酸等外界因素导致的神经细胞损伤具有良好的保护和修复作用。这些发现从机理上表明，海参活性物质对于老年痴呆、帕金森病和亨廷顿病等神经退行性疾病的病理、病理生理变化具有良好的改善作用，对各类神经细胞的损伤具有良好的保护和修复作用。预示海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病及认知损伤的药物或保健品中有很大的开发应用前景。

(四)具体实施方式

实施例1：

海参活性物质的提取。

新鲜刺参，去除内脏，洗净，破碎成1cm³的左右的小块，加入5-15倍水匀浆。

匀浆液分别经胃蛋白酶(酶量为海参湿重的0.4％，pH2.0-2.5，温度50℃，时间5h)、胰蛋白酶(酶量为海参湿重的0.45％，pH8.0-8.5，温度50℃，时间5h)酶解，酶解完后，煮沸灭酶活，离心(10000r/min，10min)取上清液。

上清液醇沉，离心(6000r/min，15min)得沉淀物，再用蒸馏水溶解，经DEAE纤维素柱分离，210nm检测吸收峰，收集活性组分(以对神经细胞的活性为指标)，并冻干。

将冻干的海参活性物质再用蒸馏水溶解，经凝胶柱分离，210nm检测吸收峰，收集活性组分(以对神经细胞的活性为指标)。

活性物质经sephadexG-25脱盐后冻干，得纯海参活性物质。

实施例2：

海参活性物质对神经干细胞的增殖作用。

取孕13.5～14天的Wistar大鼠，颈椎脱臼处死。

无菌条件下分离、取出胚胎，在无菌培养皿中，于解剖显微镜下分离，获取神经细胞。置于二氧化碳培养箱中，37℃，5％二氧化碳饱和湿度培养48h后进行分组实验。

神经细胞在96孔板中培养48小时后，分别加入5mg/ml实施例1制备的刺参提取物，使刺参提取物的终浓度分别为100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml，设正常对照组，37℃，5％二氧化碳饱和湿度培养48小时，后进行MTT测定。

        表1刺参提取物对神经细胞的作用

剂量/(μg·ml-1)	吸光度	增值率/％
			阴性对照100200300400	0.3730.3980.4430.4880.504	06.7018.7730.8335.12

从表1中可以看出，刺参提取物对神经细胞具有明显增殖作用。显微镜观察发现，加入刺参提取物的神经细胞，神经元之间连接紧密，神经突触明显，有大量神经球出现，而且各个神经球之间有明显的神经纤维连接建立，与未加入刺参提取物的对照样本相比显著不同。神经细胞在体外不增殖，如果在体外有增殖现象，一般应是神经干细胞的增殖。因此可以推测，海参提取物对神经系统尤其是神经干细胞增殖有显著促进作用。

实施例3：

海参活性物质对神经细胞氧化性损伤的保护作用。

取孕13.5-14天的Wistar大鼠，颈椎脱臼处死。

无菌条件下分离、取出胚胎，在无菌培养皿中，于解剖显微镜下分离，获取神经细胞。置于二氧化碳培养箱中，37℃，5％二氧化碳饱和湿度培养48h后进行分组实验。

神经细胞在96孔板中培养48小时后，分别加入5mg/ml实施例1制备的刺参提取物，使刺参提取物的终浓度分别为100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml，设正常对照组。

培养12小时后，每孔加入谷氨酸培养液，使谷氨酸的终浓度为2mmol/ml，37℃，5％二氧化碳饱和湿度培养36小时后，进行MTT测定。

 表2刺参提取物对神经细胞谷氨酸氧化性损伤的保护作用

剂量/(μg·ml-1)	吸光度	相对存活率％
			正常对照阴性对照100200300400	0.2050.0780.1430.1980.2230.234	10038.0569.7696.59108.78114.15

从表2所示结果可以看出，海参提取物对神经细胞谷氨酸氧化性损伤有明显保护作用，其保护作用随作用浓度的增大而增大，300μg/ml以上甚至可以完全拮抗谷氨酸对神经细胞的损伤作用。谷氨酸损伤在多种神经退行性疾病发挥着重要作用，海参提取物对这种损伤的保护作用表明，海参提取物可以有效用于神经退行性疾病的预防和治疗。

实施例4：

海参活性物质注射剂的制备。

处方：以重量百分比计，海参活性物质40％，甘露醇60％。

制备方法：

(1)安瓿洗涤干净，干燥灭菌；

(2)称取海参活性物质40克，甘露醇60克，搅拌溶解；

(3)补加注射用水至处方量，用0.22μm微孔滤膜过滤；

(4)中间品检验；

(5)灌装，每支2ml，熔封；

(6)100℃流通蒸汽灭菌30分钟；

(7)全检。

本发明中，海参活性物质是预防/治疗神经退行性疾病的活性成分，甘露醇基本无药理作用，它仅起着冻干骨架的作用。该针剂具有活性强，安全性好的优点。

实施例5：

海参活性物质口服片剂制备。

上述片剂主要有海参活性物质及辅料组成，其中辅料可以是填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂中的部分或全部，辅料的用量不超过海参活性物质总重量的8倍。

优选的制片处方：以重量份计，

海参活性物质        100份

填充剂              100份

速崩剂              90份

粘合剂              80份

润滑剂              6份

其中：填充剂可以是磷酸氢钙、糊精或乳糖；速崩剂可以是L-HPC或干淀粉；粘合剂可以是PVP溶液或淀粉浆；润滑剂是硬脂酸镁。

片剂的生产工艺是：按处方量，称取海参活性物质，加入填充剂、速崩剂，混合均匀，然后加入处方量的粘合剂混合制成湿粒，低温40-65℃干燥，再加入润滑剂混合均匀，压片，最后用高分子衣料(如HPMC、EC、MC)包薄膜衣。

实施例6：

海参活性物质胶囊剂制备。

上述胶囊剂主要有海参活性物质及辅料组成，其中辅料可以是填充剂、崩解剂、粘合剂中的部分或全部，辅料的用量不超过海参活性物质总重量的5倍。

优选的制片处方：以重量份计，

海参活性物质           100份

填充剂                 80份

速崩剂                 80份

粘合剂                 60份

其中：填充剂可以是磷酸氢钙、糊精或乳糖；速崩剂可以是L-HPC或干淀粉；粘合剂可以是PVP溶液或淀粉浆。

上述胶囊剂的生产工艺是：按处方量，称取海参活性物质，加入填充剂、速崩剂，混合均匀，然后加入处方量的粘合剂混合制成湿粒，低温40-65℃干燥，粉碎后，以处方量用胶囊装料，得海参活性物质胶囊剂。

实施例7：

海参活性物质饮料制备。

处方：以重量百分比计，海参活性物质40％，蒸馏水60％。制备方法：

以常规饮料制备工艺，将上述重量百分比的海参活性物质与蒸馏水混合，以市场供应对象不同，分别添加常规量的香味剂、着色剂、甜味剂，制成500ml、1250ml、2000ml包装的饮料。

Claims (10)

1.海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病的药物中的应用。

2.海参活性物质在制备治疗和预防神经退行性疾病的保健品中的应用。

3.海参活性物质在制备治疗和预防认知损伤的药物中的应用。

4.海参活性物质在制备治疗和预防认知损伤的保健品中的应用。

5.如权利要求1或2所述的应用，其特征是：所述神经退行性疾病以神经元凋亡为特征，是肌萎缩侧索硬化、阿尔兹海默症、帕金森氏症、享廷顿氏症、脊一小脑共济失调III疾病中的一种或多种。

6.如权利要求3或4所述的应用，其特征是：所述认知损伤是指由遗传、疾病、药物、医疗、外伤、社会和心理的一种或多种因素造成的心理和生理损伤。

7.如权利要求1或3所述的应用，其特征是：所述药物是指通过腔肠或粘膜途径的方式给药的制剂。

8.如权利要求7所述的应用，其特征是：所述制剂是注射剂、口服制剂、外用制剂、喷雾剂、透皮制剂之一。

9.如权利要求8所述的应用，其特征是：所述制剂是片剂、胶囊剂、注射剂之一。

10.如权利要求2或4所述的应用，其特征是：所述保健品是食品、饮品、化妆品之一。