CN1646096A - 将细菌输入阴道的装置和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种阴道感染的治疗，该治疗不会促进人工输入细菌例如乳酸杆菌的定居。有益菌置于阴道插入物的外覆盖物里，这种阴道插入物不允许细菌与阴道组织接触，外覆盖物允许有益菌产生的代谢副产物通过并进入阴道建立一种不利于致病性微生物生存的环境。阴道插入物由使用者用手或用某种器械如棉球涂覆器置于阴道内。当治疗期结束后，取出阴道插入物。

Description

将细菌输入阴道的装置和方法
技术领域
本发明涉及一种输送有益菌和有益菌代谢副产物进入阴道的阴道插入物。有益菌包含在阴道插入物里，只有这种细菌的副产物能够脱离此插入物，从而允许阴道接受这些细菌的益处而不会造成人工输入细菌在阴道内的定居。
背景技术
人类泌尿生殖系统含有天然存在的非致病性细菌。一个正常的阴道含有非致病菌和少量的酵母菌。但是，在正常、健康的阴道内，微生物菌丛的正常平衡通常被来自于胃肠系统的生物体、使用抗生素、各种健康问题、甚至是过多的性行为所破坏。
细菌性阴道炎和酵母菌感染是由于阴道内细菌平衡紊乱所致的两个可能结果，其症状表现为有臭味的分泌物和有时的轻微搔痒感。细菌性阴道炎和酵母菌感染通常发生于怀孕期间，当这些情况困扰于非孕妇女时，通常认为它们增加早产儿和低出生体重婴儿的风险。
一种治疗阴道的致病性微生物感染的方法是引入和/或促进天然存在微生物的定居。使用乳酸杆菌如Lactobacillus acidophilus治疗阴道感染是众所周知的。乳酸杆菌是革兰氏阳性菌，是阴道以及口腔和消化系统中正常、健康微生物菌丛的一部分，乳酸杆菌通过产生代谢副产物如过氧化氢(H2O2)和创造酸性环境而有助于治疗阴道感染。
典型的乳酸杆菌治疗是人为地将乳酸杆菌或其它有益菌引入阴道，目的是这些引入的细菌将粘附于阴道组织并导致新的有益菌菌落。这种细菌治疗方法的实施通常是口服补充剂、使用阴道霜剂或阴道栓剂。这种乳酸杆菌是在治疗载体中无活性、而在进入人体中时活化的。
这种治疗的成功依赖于乳酸杆菌的定居，由于现存的不利环境，乳酸杆菌的定居会难以获得。延长治疗期可能是必需的，由于已知这种治疗产品的本质，因而可能导致潜在使用者的忧虑。此外，现在许多人也对使用太多医药表示关注。在某些情况下，正是使用药品如抗生素可能引起阴道感染。因此，对于那些喜欢鼓励阴道感染自然治愈进程的人来说，需要一种不引入乳酸杆菌人为定居的阴道治疗方法。
发明内容
本发明涉及一种阴道致病菌和/或酵母菌感染的治疗方法，这种治疗方法不会促进有益菌例如乳酸杆菌在阴道组织上的人为定居。这种有益菌包含于一种阴道插入物的外覆盖物里，该阴道插入物不允许这些细菌与阴道组织接触，该外覆盖物允许有益菌产生的代谢副产物通过并进入阴道内，创造一种不利于致病性微生物的环境。
细菌源通过冻干法(冷冻干燥)或其它已知方法失活。这种冻干细菌可以呈粉末状置于外覆盖物内或封装于水凝胶微球里。该外覆盖物的材质是代谢副产物可渗透，而游离菌和封装菌不可渗透的。如果细菌源呈粉末状，该外覆盖物将是由各种材质例如纤维素制成的多微孔膜；如果细菌呈封装状，则外覆盖物可以有较大的孔径，这使得能使用其它材质，包括天然织物。
失活细菌源可以与一种干燥食物源混合，以促进临使用前或使用期间活化时细菌的生长，代谢过程.该食物源可以呈溶液状并储存于一种塑料泡状物包装中，这种塑料泡状物包装要么置于外覆盖物里要么包装得与阴道插入物相关连，使得当该泡状物在临使用前受到挤压时，细菌源能被再水化/再活化，而且代谢开始。
阴道插入物由使用者用手或使用一种棉球涂覆器置于阴道内。当治疗时间结束时取出阴道插入物。在外覆盖物上可以连接一段线绳以有助于插入物的取出。
附图简单说明
图1是按照本发明一种实施方案的阴道插入物的横截面视图，
图2是按照本发明一种实施方案的阴道插入物的横截面视图，
图3是按照本发明一种实施方案的阴道插入物的横截面视图，
术语定义
在本说明书范围内，下列每一个术语或短语包括如下一种或多种含义。
“有益菌”是指自然存在于人类机体内的细菌。但是对一种机体系统如胃肠系统有益的细菌可能并非有益于另一机体系统如泌尿生殖系统。在本发明中，有用的有益菌是指自然存在于阴道内的细菌。“有益菌”还包括非自然存在的细菌，这种细菌能够在阴部或阴道内产生一种有助于消除致病菌和/或促进自然存在的细菌生长的环境。
“泡状包装”或“泡状物”是一种包装器件，其中，要包装的物品至少部分地被塑料包围。这种塑料封闭物象一个水泡。泡状包装通常用于包装消费药品例如减充血药或止痛药。
“乳酸杆菌”系指分类于乳酸杆菌属下的菌种。乳酸杆菌有许多菌种和菌株。乳酸杆菌一般代谢糖类例如乳糖并产生副产物包括乳酸和过氧化氢。本发明可依据使用者的需要使用任何菌种/菌株的乳酸杆菌。
“微球”是指一种作为胶体系统的分散相形成的胶体凝集体。微球是通过将适于形成分散相的细菌溶液滴入一种分散介质溶液(连续相)中而作为一种水凝胶形成的。
“致病菌”或“致病性微生物”系指不是健康机体系统的一个自然部分的微生物。致病性生物体导致感染、疾病和其它通常需要治疗的严重疾患。生物在第一机体系统例如胃肠系统中可能是自然存在的，而在第二机体系统例如泌尿生殖系统是致病性的。
“非织造织物”是指不借助于纺织品织造或针织工艺而形成的材料。
这些术语会在说明书的剩余部分以附加的语言定义。
具体实施方式
图1显示可用于治疗阴道感染的一种阴道插入物10。阴道插入物10包括一个细菌源14，由一个外覆盖物12包围。外覆盖物12对于细菌源14是不可渗透的，但对于细菌源14所产生的有益代谢副产物则是可渗透的。外覆盖物12典型地是一种多孔膜，孔的大小相当于细菌源14的大小，从而不允许细菌从细菌源14渗透外覆盖物12。
图1显示一种游离形式细菌粉末的细菌源14。当细菌源14呈一种粉末状时，外覆盖物12为一种多微孔膜。可用于本发明的多微孔膜，其孔的大小理想地小于细菌细胞的直径，从而对于细菌源14是不可渗透的。例如大多数乳酸杆菌细胞的直径是约1-3微米，因而使用孔径小于约1微米的膜就足以对细菌源14不可渗透。在本发明的一种实施方案中，理想地是外覆盖物12对于实质上全部细菌源14是不可渗透的，尽管少数个体菌细胞可能穿透外覆盖物12。可用于本发明的多微孔膜的孔径和渗透性的一种测试方法是ASTM测试方法E 1294-89(1999)“使用自动液体孔度计的膜滤器孔径大小特征的标准测试方法”，该文列为本文参考文献。
在本发明的一种实施方案中，多微孔膜是由纤维素制成的。各种类型的纤维素包括木浆纤维、棉纤维以及其它可以成形为多孔非织造纤维网的植物纤维。其它非织造纤维网也可以用于外覆盖物12的多微孔膜，包括纺粘纤维网、熔喷纤维网、梳理纤维网、气流法纤维网等，这些是由热塑性材料例如聚烯烃(如聚乙烯和聚丙烯均聚物和共聚物)、聚酯、聚胺、聚四氟乙烯等制成的。由这些热塑性材料制成的多微孔膜也可以采用。由纤维素、乙酸纤维素、苯甲酰化纤维素、聚丙烯腈和其它材料制成的渗析膜也可以形成外覆盖物12的多微孔膜，多微孔膜的材质和结构通常是业内已知的。
在本发明的一种实施方案中，外覆盖物12是由一种在其施用、使用和从阴道中取出期间能保持其结构完整性的坚韧材料制成的.纤维素外覆盖物通常能提供所希望的特性。在本发明的另一种实施方案中，阴道插入物10可以使用一种对阴道插入物有进一步的支撑作用的支撑膜(没有图示)。图1是一个套管形阴道插入物10，但是对阴道插入物10的实际形状没有限制。例如圆形或椭圆形阴道插入物也可以使用。业内人士在了解本公开文书之后将会知道，可以根据需要和用途改变阴道插入物10的大小和形状。
一条线20附着在外覆盖物12上，用于在治疗结束后取出阴道插入物10。线20的使用和结构是业内众所周知的，其操作方式同其它妇女用品例如止血塞相同。
在本发明的一种实施方案中，细菌源14在阴道插入物10内呈失活状态，而且可以在临使用前活化。细菌源14可以通过业内已知的方法例如冻干法(冷冻干燥)或孢子形成法失活。业内已知的各种冷冻干燥法均可用来使细菌源14失活。一种这样的冷冻干燥法包括在液氮里闪急冷冻细菌，随后用冷冻干燥机进行真空升华。孢子形成法是业内人士普遍知道的，通常只能用于会形成孢子的细菌。
图2显示按照本发明的阴道插入物10的另一种实施方案。在图2中，细菌源14封装于细菌微球里。“封装”是指有比粉末状个体细菌细胞大的尺寸的细菌细胞微球体。在本发明的一种实施方案中，将细菌源14封装于一种凝胶或聚合物微粒里。本发明的微粒可以使用但不限制于藻酸盐、凝胶和其它水凝胶形成物质、并通过用聚甲基丙烯酸羟乙酯等聚合物形成聚合物壳来形成。封装细菌在失活状态和为使用而再活化之后都保持微球状。
在一种实施方案中，封装是这样实现的：将游离形式细菌或细菌肉汤与1.5重量％藻酸盐溶液混合，这样的藻酸钠盐可购自FlukaBioChemika公司(瑞士)，产品号为71238。然后将藻酸盐溶液滴入1.5重量％碳酸钙溶液中。当滴入1.5重量％碳酸钙溶液中时，藻酸盐溶液形成了微球体，然后过滤从碳酸钙溶液中除去藻酸盐微球体。然后通过冷冻干燥法或其它失活工艺使细菌藻酸盐微球体失活。
在本发明的一种实施方案中，细菌源14是封装的，外覆盖物12是一种布样覆盖物。封装细菌源14形成有比个体细菌细胞大的尺寸的微球体，因为这种封装微球体通常在整个使用期间维持结构的完整性，因而可以将范围更广泛的覆盖材料用于外覆盖物12。对于封装细菌，由天然纤维、非织造纤维及其组合制成的有较大孔径的布都可以使用。当然微孔膜也可以与封装菌源一起使用。
细菌源14优选含有有益菌。“有益菌”是指人类消化系统或泌尿生殖系统的天然存在细菌，或其副产物能防止致病性细菌、真菌和/或酵母菌生长的其它细菌。在本发明的一种实施方案中，细菌源14包含对阴道有益的细菌。在阴道内，细菌源14产生的代谢副产物导致一种能杀灭和/或抑制致病性微生物生长的阴道环境。代谢副产物例如乳酸和过氧化氢从细菌源14经由外覆盖物12扩散到阴道中，限制致病菌的生长并允许阴道内正常存在的天然、有益的微生物繁殖。
在本发明的一种实施方案中，细菌源14包含来自于乳酸杆菌属、双岐杆菌属或其组合的细菌，在本发明的一种实施方案中，嗜酸性乳酸杆菌用于细菌源14。因所希望的治疗和代谢副产物的需要而异，可以使用其它菌属和不同的菌种。
在本发明的一种实施方案中，一旦将阴道插入物10放置在阴道内，失活的细菌源14就会被阴道液再活化，该细菌源14也可以在阴道外用水或各种溶液再水合。细菌源14理想地是在临插入阴道之前进行活化。一种干粉状的食物源可以在外覆盖物12内与细菌源14混合，或者一种食物源可以呈溶液状用于再水合和刺激代谢生产。食物源的实例包括但不限于果糖寡糖、糖原及其组合物。在本发明的一种实施方案中，食物源也不刺激阴道内感染性病原剂。
在本发明的一种实施方案中，食物源与失活的冻干细菌源14在外覆盖物12内互相混合。当阴道插入物10在使用前或使用期间再水合时，细菌源14在食物源上摄食，从而产生所希望的代谢副产物。食物源也可以在溶液，并与细菌源分开放置。在本发明的一种实施方案中，食物源就在密封于外覆盖物12内小塑料泡中的溶液中。在使用前，该泡状物通过触摸定位并用使用者的手指挤压。使含有食物源的溶液释放到细菌源14中，从而使失活的细菌再水合和摄食。在另一种实施方案中，一种干食物源与失活的细菌源14容纳在一起，塑料泡仅含有一种水合液体例如但不限于水或0.9重量％氯化钠溶液。
图3显示一种泡状包30，用于贮存和活化本发明的阴道插入物10。在本发明的一种实施方案中，泡状包30有一个含有阴道插入物10的第一泡32。一个第二泡34含有水合溶液36。第二泡还可以含有其它所希望的添加剂例如湿润剂。第一泡32和第二泡34通过一个泡通道38相连。通道密封40使两个泡中的物质不能彼此接触。在阴道插入物10使用前，使用者应挤压第二泡34，使水合溶液36突破通道密封40并进入第一泡32中。水合溶液36接触细菌源14，使其中的冻干细菌再水合。然后将阴道插入物10插入使用者的阴道，开始治疗。水合溶液36也可以包含食物源例如果糖寡糖。
湿度剂也可以包含在阴道插入物10中或水合源36中。湿度剂是能赋予干燥阴道组织以水分的添加剂。阴道干燥通常伴随阴道酵母菌或致病菌的感染。湿度剂的实例包括但不限于湿润剂，例如丙二醇、丙三醇、亲水性聚合物例如聚乙烯醇。通常在局部洗剂中使用的化合物适宜作为湿度剂，湿度剂也可以密封在外覆盖物12下的泡中，或在临使用前导入阴道插入物10中。
实施例
为证实本发明在治疗阴道感染中的用途，进行了以下实验。冻干的嗜酸性乳酸杆菌(ATCC4356)在ATCC推荐的生长培养基中生长，该培养基含有100克脱脂乳、100毫升过滤番茄汁、5克酵母提取物、和使总量为1升的蒸馏水。24小时后，将5微升生长培养基稀释至100微升然后涂到相同组成+1.5重量％琼脂的培养基上。24小时后，挑取1个菌落在6毫升生长培养基中生长36小时，通过血细胞计数器计数确定的浓度为1.37×108个细菌/毫升。
制备一种浓藻酸盐溶液，其组成为3重量％藻酸钠(名称为Fluka71238，购自瑞士的Fluka BioChemika公司)和蒸馏水。一种购自美国加利福尼亚州Spectrum Laboratories的SPECTRA/POR渗析膜(分子量截止为3,500、直径为11.5毫米)用无菌水水合。
在实验开始时，将250微升细菌悬浮液置于3支各含2毫升生长培养基的试管中用来作为阳性对照组。另一些只含有生长培养基的试管用来作为阴性对照组。将750微升悬浮液与750微升藻酸盐溶液混合，形成1.5重量％藻酸盐溶液。将此溶液滴加到机械搅拌的1.5重量％氯化钙溶液中，氯化钙是Sigma-Aldrich公司的产品Aldrich23，922-4，用无菌蒸馏水配制。生成的微粒实测直径大约为1.5毫米，收集于无菌过滤器上。这些微粒分装于3支各含2毫升生长培养基的试管中，因此，在这些阳性对照组中初始细菌数是相同的。用无菌生长培养基代替细菌悬浮液，以相同方式制备空白微粒。将这些添加到3支各含2毫升生长培养基作为阴性对照组的试管中。
体积为750微升的每个样品置于密封的渗析膜内，将其浸入无菌培养基瓶内的30毫升生长培养基中。样品和对照组均放置在37℃的摇动恒温箱中。8小时后，样品从每个试管和渗析膜外的培养基取出，经由0.22微米的抽吸滤器过滤，在-70℃冷冻。
用另一份750微升细菌悬浮液和750微升3重量％藻酸盐溶液重复微粒形成过程。形成的微粒在液氮中闪急冷冻。微粒从液氮中取出、置于包埋在干冰内的冻干瓶中。将冻干瓶与广口瓶相连，使该微粒冷冻干燥过夜。第二天，将干燥的微粒分置于3支试管中，每支试管含有2毫升生长培养基。试管在37℃摇动恒温箱中放置8小时，取出样品、过滤、于-70℃冷冻。
在随后的一天，样品解冻、分析其过氧化氢的含量，所用分析方法见Fontaine，E.A.，和D.Taylor-Robinson，人类阴道乳酸杆菌菌株产生的过氧化氢的定量和定性检测方法比较，Journal of AppliedBacteriology，1990(69)326-331，该文列为本文参考文献。过氧化氢浓度是从一条校正曲线计算的，并减去适当空白的值。结果用初始细菌数和培养基体积归一化并表达为“毫克H2O2/1×108个细菌”。结果显示：阳性对照组产生了0.0148±0.0024毫克H2O2，封装在微粒中的细菌产生了0.0133±0.0028毫克H2O2，封装并冻干的细菌产生了0.0044±0.0022毫克H2O2，渗析膜上的细菌产生了0.0127毫克H2O2。结果指出乳酸杆菌的封装和冷冻干燥是一种可以用于阴道用途的、有前景的过氧化氢产生技术。
虽然本文中所述的本发明实施方案是目前较好的，但只要不背离本发明的精神和范围就可以做各种修饰和改进。本发明的范围由所附权利要求书指出，属于等效物的含义和范围内的所有变化均意在涵盖于其中。

Claims (51)

1、一种用于阴道治疗的装置，包含一个细菌源，和围绕该细菌源的外覆盖物。
2、如权利要求1所述装置，其中外覆盖物对于细菌源是不可渗透的，而对于该细菌源的代谢副产物是可渗透的。
3、如权利要求2所述的装置，其中该细菌源包含失活的细菌。
4、如权利要求3所述的装置，其中该失活的细菌包含冻干的细菌。
5、如权利要求3所述的装置，其中该细菌源包含一种粉末。
6、如权利要求3所述的装置，其中该细菌源包含封装细菌。
7、如权利要求5所述的装置，其中该外覆盖物包含一种微多孔膜。
8、如权利要求7所述的装置，其中该外覆盖物含有纤维素、热塑性非织造纤维网、热塑性薄膜、渗析膜和它们的组合中至少一种。
9、如权利要求6所述的装置，其中该外覆盖物包含一种布覆盖物。
10、如权利要求9所述的装置，其中该布覆盖物包含选自天然纤维、非织造纤维及其组合组成的一组的纤维。
11、如权利要求1所述的装置，在该外覆盖物里进一步包含一种食物源。
12、如权利要求1所述的装置，在该外覆盖物里进一步包含一种湿度剂。
13、如权利要求11所述的装置，其中该食物源包含一种选自果糖寡糖、糖原及其组合组成的一组的化合物。
14、如权利要求13所述的装置，其中该食物源是密封的且不与细菌源接触。
15、如权利要求12所述的装置，其中该湿度剂包含选自丙二醇、甘油、聚乙烯醇及其组合组成的一组的化合物。
16、如权利要求15所述的装置，其中该湿度剂是密封的且不与细菌源接触。
17、如权利要求1所述的装置，其中该细菌源包含选自乳酸杆菌属、双歧杆菌及其组合组成的一组的细菌。
18、如权利要求17所述的装置，其中该细菌源包含嗜酸性乳酸杆菌。
19、如权利要求1所述的装置，进一步包含一条附着到外覆盖物上的线。
20、一种阴道治疗装置，包含一种封装在藻酸盐微球内的细菌源；一种围绕该封装细菌源的外覆盖物，其中该外覆盖物对该封装细菌源是不可渗透的，而对该细菌源的代谢副产物是可渗透的。
21、如权利要求20所述的装置，其中该细菌源包含失活冻干细菌。
22、如权利要求20所述的装置，其中该外覆盖物包含一种布覆盖物。
23、如权利要求22所述的装置，其中该布覆盖物包含选自天然纤维、非织造纤维及其组合组成的一组的纤维。
24、如权利要求20所述的装置，在外覆盖物里进一步包含一种食物源。
25、如权利要求24所述的装置，其中该食物源包含选自果糖寡糖、糖原及其组合组成的一组的化合物。
26、如权利要求24所述的装置，其中该食物源是密封的且不与细菌源接触。
27、如权利要求20所述的装置，在外覆盖物里进一步包含一种湿度剂。
28、如权利要求27所述的装置，其中该湿度剂包含选自丙二醇、甘油、聚乙烯醇及其组合组成的一组的化合物。
29、如权利要求20所述的装置，其中该细菌源包含选自乳酸杆菌属、双歧杆菌及其组合组成的一组的细菌。
30、如权利要求29所述的装置，其中该细菌源包含嗜酸性乳酸杆菌。
31、一种阴道治疗方法，包含使细菌源失活；将该细菌源放置在一种阴道插入物的外覆盖物里，其中该外覆盖物对细菌源是不可渗透的，而对该细菌源的有益代谢副产物是可渗透的；使该细菌源活化；和将该阴道插入物插入阴道内。
32、如权利要求31所述的方法，其中用冻干法和孢子形成法之一使该细菌源失活。
33、如权利要求31所述的方法，进一步包含在失活之前将该细菌源封装。
34、如权利要求31所述的方法，其中该外覆盖物包含一种微多孔膜。
35、如权利要求35所述的方法，其中该外覆盖物包含纤维素、热塑性非织造纤维网、热塑性薄膜、渗析膜和它们的组合中至少一种。
36、如权利要求33所述的方法，其中该外覆盖物包含一种布覆盖物。
37、如权利要求36所述的方法，其中该布覆盖物包含选自天然纤维、非织造纤维及其组合组成的一组的纤维。
38、如权利要求31所述的方法，进一步包含与该细菌源一起放置一种食物源。
39、如权利要求38所述的方法，其中该食物源包含选自果糖寡糖、糖原及其组合组成的一组的化合物。
40、如权利要求31所述的方法，进一步包含与该细菌源一起放置一种湿度剂。
41、如权利要求40所述的方法，其中该湿度剂包含选自丙二醇、甘油、聚乙烯醇及其组合组成的一组的化合物。
42、如权利要求41所述的方法，其中该湿度剂是密封的且不与该细菌源接触。
43、如权利要求31所述的方法，进一步包含在插入阴道插入物之前导入一种湿度剂。
44、如权利要求31所述的方法，其中该细菌源包含选自乳酸杆菌属、双歧杆菌及其组合组成的一组的细菌。
45、如权利要求44所述的方法，其中该细菌源包含嗜酸性乳酸杆菌。
46、如权利要求31所述的方法，其中该阴道插入物是用一种棉球涂覆器插入的。
47、如权利要求31所述的方法，进一步包含将阴道插入物取出。
48、如权利要求47所述的方法，其中该阴道插入物包含一条附着到外覆盖物上的线。
49、如权利要求31所述的方法，进一步包含在临插入之前使该细菌源活化。
50、如权利要求31所述的方法，进一步包含将该阴道插入物和一种活化液体包装在一种泡状包内，该泡状包包含一个第一泡用于包装阴道插入物；和一个第二泡用于包装活化液体，其中第一泡和第二泡在活化之前由密封泡通道连接。
51、如权利要求50所述的方法，其中该细菌源的活化是通过挤压第二泡和打通该泡通道密封来完成的。
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