CN1206239C - 环己肽及其混合物,其制备方法及其用途 - Google Patents

环己肽及其混合物,其制备方法及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN1206239C
CN1206239C CNB951205870A CN95120587A CN1206239C CN 1206239 C CN1206239 C CN 1206239C CN B951205870 A CNB951205870 A CN B951205870A CN 95120587 A CN95120587 A CN 95120587A CN 1206239 C CN1206239 C CN 1206239C
Authority
CN
China
Prior art keywords
val
tyr
ala
ring
xaa
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB951205870A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1132210A (zh
Inventor
S·亨克
B·乔丹
J·诺尔
L·劳夫尔
S·夫尔塔格
H·H·威斯穆勒
G·朱恩格
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Original Assignee
Aventis Pharma Deutschland GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aventis Pharma Deutschland GmbH filed Critical Aventis Pharma Deutschland GmbH
Publication of CN1132210A publication Critical patent/CN1132210A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1206239C publication Critical patent/CN1206239C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及式I化合物，其混合物及其药用盐：环(A-B-C-E-F-(D)-Ala) (I)式中，A、B、C、E和F各自独立，相同或不相同，可为除半胱氨酸(Cys)和色氨酸(Trp)以外的天然氨基酸残基，制备方法，以及其用于制备过敏症和感染的诊断试剂、治疗药和预防药、以及用于抑制白介素-4(IL-4)与IL-4受体结合的科学工具。

Description

环己肽及其混合物，其制备方法及其用途
技术领域
本发明涉及环己肽及其混合物，其制备方法及其用途。
发明内容
本发明涉及式I化合物及其药用盐
      环(A-B-C-E-F-(D)-Ala)                       (I)
其中
A、B、C、E和F相互独立，相同或不相同，为除半胱氨酸(Cys)、色氨酸(Trp)以外的天然氨基酸残基，为丙氨酸(Ala)，精氨酸(Arg)，天冬酰胺(Asn)，天冬氨酸(Asp)，谷氨酰胺(Gln)，谷氨酸(Glu)，甘氨酸(Gly)，组氨酸(His)，异亮氨酸(Ile)，亮氨酸(Leu)，赖氨酸(Lys)，蛋氨酸(Met)，苯丙氨酸(Phe)，脯氨酸(Pro)，丝氨酸(Ser)，苏氨酸(Thr)，酪氨酸(Tyr)或缬氨酸(Val)。
式I化合物优选为：A和B相互独立，相同或不相同，为Ile、Leu、Val、Phe和Tyr，且C、E和F相互独立，相同或不同，可以是除半胱氨酸和色氨酸以外的天然氨基酸残基。
式I化合物更为优选的化合物是有如下肽顺序：
环(Val-Val-Xaa-Val-Val-(D)-Ala)，或
环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)，
环(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)，
其中Xaa代表除Cys及Trp以外的天然氨基酸残基。
天然氨基酸可认为是如在Bell(FEBS-Letters 64(1976)29-35)所述的所有天然存在的游离的或作为蛋白质的结构单元的α-氨基酸。
天然存在的蛋白质中的氨基酸认为是L-氨基酸(甘氨酸除外)，(D)-Ala相当于氨基酸丙氨酸D-构型的残基。
肽可以认为是相互以肽键相连的氨基酸序列，其中肽还有N-端和C-端。
用括弧括起的氨基酸序列是指环状肽，即第1个氨基酸的N-端(氨基)与最后氨基酸的C-端(羧基)相连结。
1.式I化合物的药用盐既可认为是无机盐也可是有机盐，如用于Remington’s Pharmaceutical Sciences(17版，1418页(1985))中所述。适宜的盐尤其为碱金属盐和碱土金属盐，生理可容性胺盐，以及无机酸或有机酸盐如HCl，HBr，H2SO4，马来酸或富马酸。
上述的式I化合物为环己肽，它可按皆知的、于肽化学中常规用的方法加以合成。该环己肽的合成方法例如可按如下进行：
a)将适当保护的氨基酸衍生物偶联到固体载体上；
b)在保留侧键的保护基条件下解离出线型肽；
c)于溶液中使肽环合；
d)去掉侧键上的保护基。
作为氨基酸保护基的是用于肽合成中常规用的保护基团，例如在Kontakte Merck 3/79，14-22页和1/80、23-35页中所述。用于氨基保护的尿烷基的实例有：Pyoc，Fmoc，Fcboc，Z，Boc，Ddz，Bpoc，Z-(NO2)，Dobz，Moc，Mboc，Iboc，Adoc，Adpoc，Msc或Pioc。用酸、碱或还原方法可除去这些氨基酸保护基。
胍基的保护基例如是NO2，甲苯磺酰基，Boc，Z，三苯甲基-2-磺酰基(Mts)，等等。裂解方法可用水解或氢解法。
羧基侧链功能可作为酯基而被保护，优选为甲酯、乙酯或叔丁酯，或苄酯或改性过的苄酯(P-NO2，P-Cl，P-Br等)。去保护基可用碱性或酸性皂化法或氢化法。
羟基保护基例如是叔丁基或苄基。
本发明还涉及通式I的环己肽的混合物。
上述环己肽的混合物的合成可用所谓的“组合合成方法”。借助组合合成方法以简单的方式可合成“肽库”，公布于PCT申请WO92/000091。
制备式I化合物的混合物可按上述a-d步骤实现。然而在应用组合成技术时，不一定要有针对性地合成出所有可能的式I环己肽(在此处所述的环己肽情况下，总共几乎有1.9百万(185)个不同的化合物，即1.9百万个合成)。而是通过在每一个合成周期时同时加入所有不同的18个氨基酸，可制备式I的环己肽混合物。该方法与常规的合成方法相比较，其优点是显而易见的。例如只经过5次合成周期的操作，每次都加入所有所需的氨基酸，接着对合成肽混合物仅一次环合反应，得到的环己肽混合物中实际上含有1.9百万个可能的环己肽。
然而，与上述方法不同的另一种方法是，无需在所有的合成周期中加入氨基的混合物。例如，在一次合成周期后，可将在其上己合成了肽混合物的载体材料分级分离，并于后面的单独合成反应中于特定的部位引入所需之氨基酸。
按上述方法制备了肽混合物之后，须检测生物活性肽，并鉴定肽的序列。这可用反复再合成法。这用下面的一个混合物的例子加以说明，该混合物中含有式A的环己肽。
环(O1-O2-X-X-X-(D)-Ala)                (A)
该混合物中含有的环己肽中有三个可变位置(X)，其可被所有的天然氨基酸(Cys和Trp除外)占据。其余的部位被指定的氨基酸(O)(也是天然氨基酸，但Cys和Trp除外)占据，一个位置永远是D-Ala。
环己肽A的混合物可按上述方法制备，经在使用所有18个氨基酸混合物条件下的3次合成周期之后，载体材料和结合在载体上的肽混合物一起被分级分离，接着在324(18×18)个单独的合成中制出式A的环己肽混合物，324种混合物中的每一种又含有大约5800(183)个不同的肽。
该324种混合物中的每一种若在生物试验(见下面)中证明是有活性时，则将其挑选出来，并通过反复地再合成，对进一步确定的位置重新嵌入，以限制其复杂性。反复再合成的每一阶段都需要18次新的合成步骤。最后得到的有确定结构的环己肽的作用用生物测定加以确定。下面的图解对上述程序加以阐明。
含有三个确定位置的肽：
环(O1-O2-X-X-X-(D)-Ala)
1.特定的生物测定(324次试验)
2.鉴别活性混合物
3.含有4个确定位置的肽的合成(18)
含有4个确定位置的肽：
环(O1-O2-O3-X-X-(D)-Ala)
1.特定的生物测定(18次试验)
2.鉴别活性混合物
3.含有5个确定位置的肽的合成(18)
含有5个确定位置的肽：
环(O1-O2-O3-O4-X-(D)-Ala)
1.特定的生物测定(18次试验)
2.鉴别活性混合物
3.含有6个确定位置的肽的合成(18)
含有6个确定位置的肽：
环(O1-O2-O3-O4-O5-(D)-Ala)
1.特定的生物测定(18次试验)
2.鉴别活性肽。
环肽混合物原则上也可用常规分析方法进行分离或纯化，如用制备型HPLC或其它色谱方法。
现在发现，通式I的环己肽或其混合物特异性地抑制白介素-4(IL)与白介素-4受体的结合，并抑制了IL-4的活性。因此，本发明物质具有IL-4的抑制剂作用。
本发明化合物或其混合物的IL-4抑制作用既可用无细胞的结合试验，也可用细胞生物试验加以测定。
自德国专利DE 4322330 A1得知，通过抑制IL-4活性可诊断、治疗或(或)处理那些以TH2-型T-辅助细胞的出现增高为特征的疾病。
许多过敏性、病毒性、寄生虫的和细菌性疾病的治疗和预防仍存在很大的问题。在一些寄生虫性、病毒性和细菌性疾病的发病过程中，淋巴细胞和单核细胞的亚群会发生变化。这涉及例如所谓的2型T-助细胞的增加(后面称作TH2细胞)。T细胞通常根据其表面标识和功能可区分成亚型。例如T-助啉巴细胞带有CD4-表面分子，激活后可分泌细胞因子(Cytokine)。
由健康小鼠或由异源细胞刺激的小鼠克隆出的T-助细胞中的细胞因子模式经分析得出，这些细胞产生白介素-2，白介素-4，γ-干扰素，白介素-5，白介素-6，白介素-10和淋巴毒素(由所谓THO型的T助细产生)。
T-助细胞在例如被细菌抗原牛布鲁氏菌或结核分枝杆菌感染后的小鼠内克隆后，大多数克隆被证明会分泌淋巴毒素，γ-干拢素和白介素-2，但很少有或没有白介素-4，-5，-6或-10(所谓TH1型T-助细胞)。
T-助细胞在寄生病源体如大型利什曼原虫(Leishmania major)感染的敏感小鼠体内克隆后，所产生的大部分克隆产生更多的白介素-4，-5和-10，而白介素-2和γ-干扰素量降低或未被检出(TH2型T-助细胞)(Mosmann等Immunological Review 1991，No.123，209-229；S.Romagnani，Immunology Today，256-257，Vol.12，No.8，1991)。
在动物和人的一些感染性疾病中已证明TH-2淋巴细胞增多(Else and Grenic，Parasitology Today，Vol.7，No.11，1991，pp.313-316；parasitology Today，Vol.7，No.10，1991，P.261)，并且也在次级参数中反映了出来。被大型利什曼原虫感染的小鼠一般γ-干扰素的产生降低了，而血清中IgE扣嗜曙红细胞大大地增多了。
人体例如患结节性麻疯、利什曼病，血吸虫病和结核分枝杆菌感染后，通常该患者血清中IgE浓度与正常人血清相比大大地增高了。在寄生虫感染过程中常常观测到有嗜曙红细胞。
即时型IgE介导的过敏反应如特应性皮炎和哮喘的一个特征也是这一类型的调节障碍。例如，从特应性皮炎患者的皮肤的皮肤活检而得到的抗原特异性T细胞克隆主要是TH2-型(Kapsenberg等，Immunology Today，vol 12，No.11，1991，392-395)。
本发明化合物及混合物既适于过敏症和感染的治疗和预防，也适于诊断用，特别是病毒性、细菌性以及寄生虫及真菌性感染。优选人体免疫缺陷病毒(HIV)，分枝杆菌(尤其是麻疯分枝杆菌)、李斯特菌、原虫(尤其是利什曼体和疟原虫)、蠕虫(尤其是血吸虫，日本圆线虫和卷虫、鞭虫、毛线虫、螩虫(囊尾蚴)、含珠菌、曲霉的感染。但是，即时型过敏反应，特别是IgE介导的反应也可被诊断、治疗和预防。这些尤其包括特应性皮炎和哮喘。
给药方式通常因不同疾病而异。例如某些疾病以局部应用为宜。例如治疗哮喘用吸入方法，结膜炎用滴眼剂，过敏性皮炎以皮肤或皮内用药为宜，因为病理的TH2-细胞尤其可在局部检查出。
本发明肽或其混合物通常也可作为科研工具，用来抑制白介素4(IL-4)与IL-4-受体的结合作用。
本发明还涉及含有式I的化合物或其混合物的药物剂型。例如该药品可以口服药物制剂形式而被应用，如片剂、包衣剂、硬-或软明胶胶囊剂，溶液剂、乳剂或悬浮剂。药物包结在脂质体内，该脂质体必要时可含其它成分如蛋白质，这也是种适宜的用药形式。也可直肠用药例如用栓剂，或非肠胃给药如注射液。为了制备药物剂型，可将这些化合物与治疗用的惰性有机或无机载体相混合。适用于片剂、包衣剂及硬明胶胶囊剂的载体实例有乳糖、玉米淀粉或其的衍生物，滑石粉、硬脂酸或其盐。制备溶液用的适宜的载体有水、多元醇、蔗糖、转化糖和葡萄糖。用于注射液的适宜载体有水、醇、多元醇、甘油和植物油。栓剂的适宜载体有植物油、硬化油、蜡、脂肪和半流动聚醇。药物制剂也可含有防腐剂、溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、色素、调味剂，改变渗透压的盐、缓冲剂、包衣剂、抗氧化剂以及必要时的其它有疗效的活性物质。
本发明还涉及制备本发明药物的方法，其特征是，将至少1种式I化合物与适宜的药用和生理相容载体和必要时的其它适宜的有效物质、添加剂或助剂，制成适宜的用药形式。
优选的用药剂型是口服和局部用药，局部用药例如用导管法或注射法。
实验部分
下面的制备实施例是对本发明作进一步说明，但无意对本发明之范围加以限制。所用的编写含义如下：
AS              氨基酸
BSA             牛血清白蛋白
DC              薄层色谱
DCM             二氯甲烷
DIC             二异丙基碳二亚胺
DIPEA           二异丙基乙胺
DMF             二甲基甲酰胺
DMSO            二甲基亚砜
ELISA           酶连结的免疫吸附试验
Fmoc            9-芴基甲氧羰基
HOBt            1-羟基苯并三唑
HPLC            高效液相色谱
huIL            人体白细胞介素
IL              白细胞介素
muIL            鼠白细胞介素
PBS             磷酸盐缓冲食盐液
PBSA            磷酸盐缓冲食盐液中的牛血清白蛋白
TBTU            苯并三唑基-四甲基脲鎓-四氟硼酸盐
TFA             三氟乙酸
图例如下：
附图说明：
图1：
竞争性hu IL-4结合试验
▲ hu IL-4，    ● K0021，    ■ K0022，    ◆ K5933
图2：
竞争性mu IL-4结合试验
▲ mu IL-4，    ● K0021，    ■ K0022，    ◆ K5933
图3：
竞争性hu IL-1ra结合试验
▲ hu IL-1ra，    ● K0021，    ■ K0022，    ◆ K5933
图4：
依赖于hu IL-4生物测定中肽的试验
a)hu IL-4标准曲线(滴定)，■ hu IL-4
b)加入肽(滴定)到1ng/ml hu IL-4(恒定)
  × K5993，    ◆ K0021，    ▲ K0022
图5：
依赖于mu IL-4生物测定中肽的试验
a)mu IL-4标准曲线(滴定)，■ mu IL-4
b)加入肽(滴定)到1ng/ml mu IL-4(恒定)
  × K5993，    ◆ K0021，    ▲ K0022
图6：
依赖于hu IL-1β生物测定中肽的试验
a)hu IL-1β标准曲线(滴定)，■ hu IL-1β
b)加入肽(滴定)到0.5U/ml hu IL-1β中(恒定)
  × K5993，    ◆ K0021，    ▲ K0022
环己肽的合成
所述的环肽可以以单个肽或是混合物制备，合成方法为：
a)将适当保护的氨基酸衍生物偶联到固体载体上，
b)在保留侧链保护基情况下解离去线型肽，
c)肽于溶液中环化
d)除掉侧链上的保护基
a)线型肽或肽混合物的合成
13.1g Fmoc-D-Ala-三苯甲基树脂悬浮于131ml二氯甲烷/二甲基甲酰胺(DCM/DMF)(2∶1)中，取该树脂悬浮液0.4ml(40mg，0.032mmol)转移到制备用反应容器中。反应容器是埃贲道夫管尖(Eppendorfspitzen)，其上以玻璃纤维堵塞，并放入到多重肽自动合成仪的合成组块中(Syntheseblocke)，加入0.7M需要的Fmoc-氨基酸溶液，在用二异丙基碳化二亚胺(DIC)就地活化之后，其中DIC是作为1.5M在DMF/DCM(1∶2)中的溶液以5倍过量加入的，偶联是用五倍过量的Fmoc-氨基酸进行，偶联反应需时50分钟。
用单个的肽复盖的载体物质(聚合珠)混合可得到规定的肽混合物。
在SYRO-自动合成仪上合成周期的记录如下：
    操作   试剂/溶剂 时间[μl] 体积
1.膨润 DMF  400  2×1分钟
2.去保护 40％哌啶/DMF  250  1×15分钟
3.洗涤 DMF  400  7×0.8分钟
4.偶联 Fmoc-AS/HOBT(0.7M)DIC(1.7M)  220100  50分钟
5.洗涤 DMF  230/250/300  3×0.8分钟
b)将线型肽或肽混合物自树脂上解离
自树脂上(每1g)解离肽或肽混合物在所谓的FalconsR中用30ml乙酸/甲醇/DCM(2∶2∶6)于室温振荡3小时来进行。树脂自解离液中滤除，滤液于真空浓缩器中于300毫巴/40℃除去DCM/甲醇、1毫巴/40℃除去乙酸。剩余物溶解于叔丁醇/水(4∶1)中，与2当量的0.2N HCl(以氨基计)混合，再于真空浓缩器中浓缩。
c)线型肽或肽混合物的环合
0.4mmol肽或肽混合物于聚丙烯容器中溶解于250ml DMF(0.0016M)，与4当量的二异丙基乙胺(DIPEA)混合。在振摇下，每个情况下慢慢滴加入3ml 0.4M HOBt/TBTU于DMF的溶液(3当量，1.2mmol)，用DC控制反应过程，5小时后反应终止。于1毫巴/40℃真空浓缩器中过夜蒸除溶剂(15小时)，干燥的剩余物溶解于DCM中，且用5％KHSO4、5％NaHCO3溶液和水振摇萃取(每种3X)。有机相用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。剩余物溶解于叔丁醇/水(4∶1)，冻干。
d)侧链保护基的解离
于室温下，每100-200mg环肽或环肽混合物用5或10ml解离液(TFA/硫代茴香醚/硫代甲酚，0.95∶0.25∶0.25)处理4小时，以除掉侧链保护基。然后将环肽于乙醚/正庚烷(1∶1)中析出，离心，再用乙醚/正庚烷洗涤2次，溶解于叔丁醇/水(4∶1)，冻干。
具体实施方式
实施例1
环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)(K0021)的合成
a)合成线型肽混合物环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)
为了合成由下面18个组分构成的线型肽混合物(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)，这些单个的肽是在聚合物载体上借助多重肽合成自动仪而制备的：(Val-Tyr-Ala-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Arg-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Asn-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Asp-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Gln-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Glu-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Gly-Val-Tyr-(DI-Ala；Val-Tyr-His-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Ile-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Leu-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Lys-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Met-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Phe-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Pro-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Ser-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Thr-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Tyr-Val-Tyr-(D)-Ala；Val-Tyr-Val-Val-Tyr-(D)-Ala)作为反应容器的聚丙烯过滤柱每次用40mg(＝0.032mmol)Fmoc-D-Ala-2-氯三苯甲基树脂填充。树脂量的配量或用称量干树脂方法或用量液管量取树脂在二氯甲烷/二甲基甲酰胺(2∶1)的悬浮液方法。将0.7M必需的Fmoc-氨基酸溶液和等当量N-羟基苯并三唑(HOBt)于二甲基甲酰胺中的溶液一起加入，该偶联反应是用5倍过量的Fmoc-氨基酸通过用DIC就地活化而进行，DIC作为1.5M的二氯甲烷/二甲基甲酰胺(2∶1)溶液也是5倍过量应用，偶联反应时间50分钟。
b)线型肽混合物从树脂上解离
18个单个己肽-树脂于肽从树脂上解离之前合并成肽混合物(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)(18×40mg＝0.72g肽树脂)，总量共0.72g的肽树脂构成的肽混合物的解离反应是用20ml乙酸/甲醇/二氯甲烷(2∶2∶6)于室温振摇3小时完成的。解离液过滤分离掉树脂，于真空旋转蒸发器(β-RVC，Christ，Osterode)中于200毫巴/40℃(DCM/甲醇)或1毫巴/40℃(乙酸)下去除溶剂。剩余物溶解于叔丁醇/水(4∶1)中，加入2当量0.2N HCl(以氨基计)，于旋转真空浓缩器中浓缩至干。
c)环合
将0.4mmol肽混合物(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)于聚丙烯容器中溶解于250mm DMF(0.0016M)，加入4当量二异丙基乙胺(DIPEA)，混合物于冷冻箱内放置1小时。振摇下慢慢滴加3ml0.4M HOBt/TBTU/DMF溶液(＝3当量，1.2mmol)。用TLC控制反应进程(流动相：氯仿/甲醇/冰醋酸85∶15∶2，Rf(产物)＝0.59)。反应于3小时后终止。于旋转真空浓缩器中于1毫巴/40℃蒸除溶剂，干燥的剩余物溶解于二氯甲烷中，用5％KHSO4溶液和水振摇萃取。Na2SO4干燥有机相，真空蒸除溶剂，剩余物溶解于叔丁醇/水(4∶1)，冻干。
d)侧链保护基的解离
室温下将环肽混合物(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)(100-200mg)用10ml解离液(TFA/硫代茴香醚/硫代甲酚，0.95∶0.025∶0.025)中处理4小时。搅拌下将解离液慢慢加到乙醚/正庚烷(1∶1)混合液中，离心收集析出的沉淀，沉淀用乙醚/正庚烷通过超声处理洗涤2次，沉淀溶解于叔丁醇/水(4∶1)中，冻干。
e)环肽混合物的分析
环肽混合物用HPLC和离子喷雾质谱法分析，MS(FAB)：环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)；Xaa＝Gly：653,8(M+H)；Xaa＝Ala：667,8(M+H)；Xaa＝Ser：683,8(M+H)；Xaa＝Pro：693,9(M+H)；Xaa＝Val：695,9(M+H)；Xaa＝Thr：697,9(M+H)；Xaa＝Leu：709,9(M+H)；Xaa＝Ile：709,9(M+H)；Xaa＝Asn：710,9(M+H)；Xaa＝Asp：711,8(M+H)；Xaa＝Lys：724,9(M+H)；Xaa＝Gln：724,9(M+H)；Xaa＝Glu：725,9(M+H)；Xaa＝Met：728(M+H)；Xaa＝His：733,9(M+H)；Xaa＝Phe：743,9(M+H)；Xaa＝Arg：752,9(M+H)：Xaa＝Tyr：759.9(M+H).
实施例2
环(Val-Val-Xaa-Val-Val-(D)-Ala)(K5993)的合成
用相应的氨基酸按实施例1的方法合成环肽混合物环(Val-Val-Xaa-Val-Val-(D)-Ala)。Xaa＝Gly：525,7(M+H)；Xaa＝Ala：539,7(M+H)；Xaa＝Ser：555,7(M+H)；Xaa＝Pro：565,8(M+H)；Xaa＝Val：567,8(M+H)；Xaa＝Thr：569,8(M+H)；Xaa＝Leu：581,8(M+H)；Xaa＝Ile：581.8(M+H)；Xaa＝Asn：582,8(M+H)；Xaa＝Asp：583,7(M+H)；Xaa＝Lys：596,8(M+H)；Xaa＝Gln：596,8(M+H)；Xaa＝Glu：597,8(M+H)；Xaa＝Met：599,9(M+H)；Xaa＝His：605,8(M+H)；Xaa＝Phe：615,8(M+H)；Xaa＝Arg：624,8(M+H)；Xaa＝Tyr：631,8(M+H).
实施例3
环(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)(K0022)的合成
用相应的氨基酸按实施例1的方法合成环肽混合物环(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)MS(FAB)：cyclo(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)；Xaa＝Gly：653,8(M+H)；Xaa＝Ala：667,8(M+H)；Xaa＝Ser：683,8(M+H)；Xaa＝Pro：693,9(M+H)；Xaa＝Val：695,9(M+H)；Xaa＝Thr：697,9(M+H)；Xaa＝Leu：709,9(M+H)；Xaa＝Ile：709,9(M+H)；Xaa＝Asn：710,9(M+H)；Xaa＝Asp：711,8(M+H)；Xaa＝Lys：724,9(M+H)；Xaa＝Gln：724,9(M+H)；Xaa＝Glu：725,9(M+H)；Xaa＝Met：728(M+H)；Xaa＝His：733,9(M+H)；Xaa＝Phe：743,9(M+H)；Xaa＝Arg：752,9(M+H)；Xaa＝Tyr：759,9(M+H).
实施例4
用类似方法制备如下的环肽或环肽混合物
环(Val-Tyr-Ala-Val-Tyr-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Hyp-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Gly-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Gln-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Lys-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Asn-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Ile-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Leu-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Pro-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Phe-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-His-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Ala-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ala-Tyr-Xaa-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Gln-Tyr-Val-(D)-Ala).
环(Tyr-Val-Lys-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Glu-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Asp-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Phe-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Gly-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-His-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ile-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Leu-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Asn-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Pro-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Arg-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Ser-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Thr-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Val-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Tyr-Tyr-Val-(D)-Ala)
环(Tyr-Val-Met-Tyr-Val-(D)-Ala)
Hyp代表羟基脯氨酸
生物测定中生物活性的测定
实施例5
在无细胞结合试验中对IL-4结合的特异性抑制作用
无细胞结合试验已叙述于EP488 170A1中，为了进行该试验，用重组体嵌合蛋白，该蛋由通常是膜定位受体的细胞外区组成，并在其羧基末端融合由绞链-、CH2-和CH3区段构成的免疫球蛋白重链的Fc区。这些所谓的受体/Fc融合蛋白在保持特异的受体结合活性的情况下，可结合于预先被例如针对Fc片段的单克隆抗体所复盖的固相上。本实施例所使用的固体相是Nunc型B ELISA板。将受体/Fc融合蛋白溶解于含有10mg/ml BSA的PBS(PBSA)中，然后键合于这些经预处理的板上(huIL-4R/Fc，500ng/ml；muIL-4R/Fc：250ng/ml；huIl-1R/Fc：125ng/ml；室温反应1小时)。洗涤后，肽或各个特异的未标记的配体(hmIL-4R/Fc：huIL-4；muIL-4R/Fc：muIL-4；huIL-1R/Fc：huIL-1ra)以不同的浓度加入后，加入固定浓度(100ng/ml)的生物素标记的(biotinylierender)特异配体。温育在含有PBSA的5％DMSO中于室温进行1小时。冲洗后，该检测板与抗生蛋白链菌素/过氧化物酶(Amersham，1∶2000于PBSA中)室温温育20分钟。检测板在四甲基联苯胺底物溶液(Behringwerke)中反复洗涤后，检测被结合的过氧化物酶。检测板温育30分钟，测定在450nm的吸光度，该吸光度直接反映了与受体结合的生物素标记的(biotinylierter)配体量。图1-3是测得的吸光信号与竞争剂浓度的关系图，是以没有竞争剂存在下的吸光度测定值为100％计算的。
图1表明，在huIL-4结合试验中，未标记的huIL-4与生物素标记的huIL-4竞争与人IL-4受体的结合。同样适用于muIL-4与小鼠IL-4受体的结合试验(图2)，及huIL-lra与人IL-1受体的结合(图3)。然而，肽混合物K5993，K0021和K0022则抑制生物素标记的huIL-和muIL-4与它们相应受体的结合作用(图1和2)，而在IL-1ra的结合试验则无显著性影响(图3)。下面是测定的IC50值：
                                         IC50[μg/ml]
环(Val-Val-Xaa-Val-Val-(D)-Ala)  (K 5993)        37
环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)  (K 0021)        68
环(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)  (K 0022)        220
环(Val-Tyr-Ala-Val-Tyr-(D)-Ala)                  16.7
环(Tyr-Val-Ala-Tyr-Val-(D)-Ala)                  8.3
环(Tyr-Val-Hyp-Tyr-Val-(D)-Ala)                  17.4
环(Tyr-Val-Ile-Tyr-Val-(D)-Ala)                  62.5
环(Tyr-Val-Leu-Tyr-Val-(D)-Ala)                  41.3
环(Tyr-Val-Arg-Tyr-Val-(D)-Ala)                  96.6
环(Tyr-Val-Thr-Tyr-Val-(D)-Ala)                  92.0
Xaa＝除Cys和Trp外的天然氨基酸残基。
实施例6
对IL-4诱导的增生的影响
式I的环己肽或其混合物的生物活性用生物测定法测定。IL-4以种属特异方式结合于IL-4受体上。基于此，使用来源于小鼠的且在其膜上带有小鼠IL-4受体的细胞谱系，该细胞系用对人白介素-4受体的完整基因进行转染。该细胞系同时在功能上表达了小鼠和人的膜定位的受体，该细胞系的增生与小鼠和人的IL-4都有关系(Mpsley等：Cell，Vol.59，335-348，10月20日，1989)。在所有的培养基中都加入1％DMSO，可改善肽的溶解度。
a)对通过人IL-4诱导的增生的影响
图4表示了细胞系的增生与人的IL-4(huIL-4)有关(标准曲线)。当使用恒定浓度的huIL-4时，通过每种给定的单独滴定加进的肽混合物对细胞系增生产生依赖于肽浓度的抑制作用(图4)。
b)对通过小鼠IL-4诱导的增生的影响。
图5表示了细胞系增生与小鼠的IL-4(muIL-4)有关(标准曲线)，当使用恒定浓度的muIL-4时，通过每种给定的单独滴定加进的肽混合物对细胞系增生产生依赖于肽浓度的抑制作用(图5)。
实施例7
对IL-1诱导的增生的影响
使用IL-1依赖的T细胞克隆(D10(N4)M，Hopkins等，J.ofImm.Methods，120，271-276(1989)。培养基中加入1％DMSO以改善肽的溶解度。该细胞的增生与人IL-1β(huIL-1β)相关(图6，标准曲线)。在使用恒定浓度的huIL-1β时，通过上述单独滴定加入的给定肽混合物在给定浓度范围内均末呈现对该细胞系增生的抑制作用。

Claims (19)

1.式I化合物及其药用盐
环(A-B-C-E-F-(D)-Ala)       (I)
式中
A和B相互独立，相同或不相同，代表Ile，Leu，Val，Phe或Tyr，且C、E和F相互独立，相同或不相同，为除半胱氨酸和色氨酸以外的天然氨基酸残基。
2.权利要求1的式I化合物及其药用盐，其中A和B相同或不同并且是Ile，Leu，Val，Phe或Tyr，C、E和F相同或不同并且是Ala，Arg，Asp，Asn，Gln，Glu，Gly，His，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Tyr或Val。
3.权利要求1的式I化合物及其药用盐，其中该化合物是
环(Val-Val-Xaa-Val-Val-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Xaa-Val-Tyr-(D)-Ala)或
环(Tyr-Val-Xaa-Tyr-Val-(D)-Ala)；
其中Xaa是除半胱氨酸和色氨酸以外的天然氨基酸残基。
4.权利要求1的式I化合物及其药用盐，其中该化合物是
环(Tyr-Val-Ala-Gly-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Gln-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Lys-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Asn-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Ile-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Leu-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Pro-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Phe-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-His-Xaa-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ala-Ala-Xaa-(D)-Ala)或
环(Tyr-Val-Ala-Tyr-Xaa-(D)-Ala)；
其中Xaa是除半胱氨酸和色氨酸以外的天然氨基酸残基。
5.权利要求1或2的式I化合物及其药用盐，其中该化合物是
环(Val-Tyr-Ala-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Arg-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Asn-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Asp-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Gln-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Glu-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Gly-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-His-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Ile-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Leu-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Lys-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Met-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Phe-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Pro-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Ser-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Thr-Val-Tyr-(D)-Ala)；
环(Val-Tyr-Tyr-Val-Tyr-(D)-Ala)或
环(Val-Tyr-Val-Val-Tyr-(D)-Ala)；
6.权利要求1或2的式I化合物及其药用盐，其中该化合物是
环(Tyr-Val-Ala-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Hyp-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Gln-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Lys-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Glu-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Asp-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Phe-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Gly-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-His-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ile-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Leu-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Asn-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Pro-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Arg-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Ser-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Thr-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Val-Tyr-Val-(D)-Ala)；
环(Tyr-Val-Tyr-Tyr-Val-(D)-Ala)或
环(Tyr-Val-Met-Tyr-Val-(D)-Ala)；
7.根据权利要求1-6中的一项的式I化合物的制备方法，其特征是，
a)将适当保护的氨基酸衍生物偶联到固体载体上，
b)在保持侧链保护基的条件下，将生成的线型肽自载体上解离，
c)线型肽在溶液中环合，
d)解离去掉侧链的保护基，并且非必需地
e)转变成药用盐。
8.含有根据权利要求1-6中的一项的化合物的混合物。
9.制备权利要求8的混合物的方法，其特征是，
a)将适当保护的氨基酸衍生物偶联到固体载体上，为了引入到不同的位置，或者加入所有所需氨基酸的混合物，或者将载体与偶联在载体的寡肽一起分成若干份且将每份单独与特定的氨基酸偶联，然后再把各份合并在一起，
b)在保持侧链上的保护基的情况下，在载体上形成的线型肽的混合物被解离下来，
c)在溶液中将线型肽混合物环合，
d)除掉侧链上的保护基，并且非必需地，
e)转变成药用盐。
10.根据权利要求1-6中的一项的化合物用于制备治疗或预防过敏性疾病和感染的药物。
11.根据权利要求1-6中的一项的式I的化合物用于制备诊断试剂，所述诊断试剂用作IL-4活性抑制剂。
12.根据权利要求1-6中的一项的式I化合物用于制备抑制IL-4与IL-4受体结合的试剂。
13.含有有效量的根据权利要求1-6中的一项的式I化合物的、用作IL-4活性抑制剂的药物或诊断试剂。
14.制备药物或诊断试剂的方法，其特征是，根据权利要求1-6中的一项的至少一种化合物与药用载体以及非必需的添加剂和/或助剂相混合。
15.根据权利要求8的混合物用于制备治疗或预防过敏性疾病和感染的药物。
16.根据权利要求8的混合物用于制备诊断试剂，所述诊断试剂用作IL-4活性抑制剂。
17.根据权利要求8的混合物用于制备抑制IL-4与IL-4受体结合的试剂。
18.含有有效量的根据权利要求8的混合物的、用作IL-4活性抑制剂的药物和诊断试剂。
19.制备药物或诊断试剂的方法，其特征是，根据权利要求8的一种或多种混合物与药用载体以及非必需的添加剂和/或助剂相混合。
CNB951205870A 1994-12-13 1995-12-11 环己肽及其混合物,其制备方法及其用途 Expired - Fee Related CN1206239C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4444260A DE4444260A1 (de) 1994-12-13 1994-12-13 Cyclohexapeptide und deren Mischungen, Verfahren zur Herstellung sowie deren Verwendung
DEP4444260.2 1994-12-13

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1132210A CN1132210A (zh) 1996-10-02
CN1206239C true CN1206239C (zh) 2005-06-15

Family

ID=6535622

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB951205870A Expired - Fee Related CN1206239C (zh) 1994-12-13 1995-12-11 环己肽及其混合物,其制备方法及其用途

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5869447A (zh)
EP (1) EP0717048B1 (zh)
JP (1) JP3825491B2 (zh)
CN (1) CN1206239C (zh)
AT (1) ATE171711T1 (zh)
AU (1) AU709360B2 (zh)
CA (1) CA2165039C (zh)
DE (2) DE4444260A1 (zh)
DK (1) DK0717048T3 (zh)
ES (1) ES2124954T3 (zh)
RU (1) RU2163242C2 (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6080719A (en) * 1996-02-23 2000-06-27 Hoechst Aktiengesellschaft Cyclohexapeptides and their mixtures, a process for preparing them, and their use
AUPP616498A0 (en) 1998-09-25 1998-10-15 University Of Queensland, The Synthesis of cyclic peptides
US8628750B2 (en) * 2006-02-27 2014-01-14 Technische Universitat Munchen Cancer imaging and treatment
US9168156B2 (en) * 2006-04-04 2015-10-27 Smith & Nephew, Inc. Trial coupler systems and methods
WO2013054329A1 (en) * 2011-10-10 2013-04-18 Yeda Research And Development Co. Ltd. Toll-like receptor 4 (tlr-4) agonist peptides for modulating tlr-4 mediated immune response
ES2648882T3 (es) 2010-07-19 2018-01-08 Yeda Research And Development Co. Ltd. Péptidos basados en el dominio de transmembrana de un receptor tipo toll (TLR) para el tratamiento de enfermedades mediadas por TLR

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1101843A (en) * 1976-08-02 1981-05-26 Daniel F. Veber Cyclic hexapeptides useful for increasing feed efficiency
US4659691A (en) * 1985-02-08 1987-04-21 Merck & Co., Inc. Novel cyclic Hexapeptide LHRH antagonists
US5650489A (en) * 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
IL102168A (en) * 1991-06-18 1998-12-06 Lilly Co Eli Rapid synthesis and filtration of peptide mimetics
DE4322330A1 (de) * 1992-08-31 1994-03-03 Behringwerke Ag Verwendung des IL-4-Rezeptors zur Therapie, Prophylaxe und Diagnose von allergischen, viralen, parasitären und bakteriellen Erkrankungen sowie von Pilzinfektionen
UA43823C2 (uk) * 1992-07-06 2002-01-15 Мерк Патент Геселлшафт Міт Бесшренктер Хафтунг ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ ДЛЯ ІНГІБУВАННЯ ІНТЕГРИН <font face="Symbol">a</font><sub>V</sub><font face="Symbol">b</font><sub>3</sub>-ОПОСЕРЕДКОВАНОЇ КЛІТИННОЇ АДГЕЗІЇ КЛІТИН ССАВЦІВ, СПОСІБ ЛІКУВАННЯ ТА ПРОФІЛАКТИКИ ЗАХВОРЮВАННЯ, АСОЦІЙОВАНОГО З ПОРУШЕННЯМ АДГЕЗІЇ КЛІТИН, СПОСІБ БЛОКУВАННЯ ЗВ'ЯЗУВАННЯ ФІБРИНОГЕНОМ ІНТЕГРИНУ, КОМПОЗИЦІЯ ДЛЯ ЗАГОЄННЯ РАН
JPH09500625A (ja) * 1993-07-09 1997-01-21 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 環状セミランダムペプチドライブラリー

Also Published As

Publication number Publication date
CA2165039C (en) 2008-02-05
DK0717048T3 (da) 1999-06-21
CA2165039A1 (en) 1996-06-14
EP0717048B1 (de) 1998-09-30
RU2163242C2 (ru) 2001-02-20
DE4444260A1 (de) 1996-06-20
DE59503776D1 (de) 1998-11-05
EP0717048A1 (de) 1996-06-19
CN1132210A (zh) 1996-10-02
ES2124954T3 (es) 1999-02-16
US5869447A (en) 1999-02-09
AU709360B2 (en) 1999-08-26
AU4034095A (en) 1996-06-20
JPH08208694A (ja) 1996-08-13
ATE171711T1 (de) 1998-10-15
JP3825491B2 (ja) 2006-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1037711A (zh) 具有t细胞辅助活性的肽类
CN1942202A (zh) 与自身免疫疾病相关的自身和非－自身抗原的识别
RU2007146137A (ru) Иммуногенные композиции на основе chlamydia trachomatis
Kurup et al. Immunodominant peptide epitopes of allergen, Asp f 1 from the fungus Aspergillus fumigatus
CN1206239C (zh) 环己肽及其混合物,其制备方法及其用途
IE49289B1 (en) Tripeptides,process for their preparation,therapeutic compositions containing them and methods for their use
EP0344006A2 (en) Peptides that block the binding of hiv-1 to th CD4 receptor protein
US4215111A (en) Peptides having ubiquitin-like activity
US5639852A (en) Immunostimulatory agents
CN1602352A (zh) 用作甲酰化肽受体样1受体的配体的组合物及其用法
CN1675241A (zh) 免疫偶联物
CN1245533A (zh) 哺乳动物趋化因子
CA1105925A (en) Pentapeptide compositions and methods
CN1379786A (zh) 用于免疫治疗的修饰肽和肽类似物
CN1041366A (zh) 具有t细胞抑制基因活性的肽的合成方法
EP1104768B1 (en) Peptide sequences from aspergillus fumigatus for the diagnosis of aspergillosis
Rosloniec et al. Second-generation peptidomimetic inhibitors of antigen presentation effectively treat autoimmune diseases in HLA-DR-transgenic mouse models
CN1183784A (zh) 肽和用于自身免疫性疾病的含所述肽的治疗剂
CN1155617C (zh) 用于治疗自身免疫病中由t-细胞介导的软骨损伤的新肽
CN1133563A (zh) 在免疫和中枢神经系统(cns)治疗中有用的新的三肽
CN1313494C (zh) 一种具有促增长作用的融合蛋白及其编码基因与应用
CN1158623A (zh) 新的免疫避孕肽
CN1634978A (zh) Sars病毒hla－a2限制性表位多肽及其应用
US4258152A (en) Pentapeptide modified resin
CN1068334A (zh) 适用于调节免疫系统及神经系统的肽

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C53 Correction of patent of invention or patent application
CB02 Change of applicant information

Applicant after: Awentis Medicines Deutschland GmbH

Applicant before: Hechester JSC

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: APPLICANT; FROM: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT (DE) TO: AVENTIS PHARMACY (GERMANY)INTERNATIONAL CO., LTD.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: SANOFI- AVENTIS GERMAN CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME OR ADDRESS: AVENTIS PHARMACY (GERMANY)INTERNATIONAL CO., LTD.

CP03 Change of name, title or address

Address after: Frankfurt, Germany

Patentee after: Aventis Pharma GmbH

Address before: Frankfurt, Federal Republic of Germany

Patentee before: Awentis Medicines Deutschland GmbH

C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20050615

Termination date: 20111211