CN118633514A - 一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法 - Google Patents

一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法 Download PDF

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CN118633514A CN202410892346.0A CN202410892346A CN118633514A CN 118633514 A CN118633514 A CN 118633514A CN 202410892346 A CN202410892346 A CN 202410892346A CN 118633514 A CN118633514 A CN 118633514A
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王芳
曾莉莎
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Abstract

本发明涉及一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法，属于杂交育种技术领域。本发明通过亲本选择、适当的授粉方法提高杂交的结籽率，同时结合胚胎离体培养，提高杂种胚胎成株系率，进而提高杂种的成活率；本发明的方法，可以将二倍体栽培蕉杂交从得种率几乎为零，提高到平均单果种子数0.72粒，具有操作简单、杂交效率高、结籽率高、种子成株系率高等特点，克服了二倍体栽培蕉高度不育难题，解决了二倍体栽培蕉杂交亲和性差、结籽难、种子的萌发率低等问题，对香蕉杂交育种技术具有重要意义。本发明通过解决基因型AA的二倍体栽培蕉杂交难题，为贡蕉(AA)、香牙蕉(AAA)、龙牙蕉(AAB)等类型新品种培育开辟新的方法、途径和技术支持。

Description

一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法
技术领域
本发明涉及杂交育种技术领域，尤其涉及一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法。
背景技术
香蕉(Musa spp.)是全球进出口鲜果贸易量最大的水果，同时也是热带和亚热带发展中国家重要的粮食作物。中国是世界上栽培香蕉的古老国家之一，是仅次于印度的世界第二大香蕉生产国和消费国。据报道，我国香蕉的种质资源丰富，种类繁多，栽培蕉主要有香牙蕉、粉蕉、粉大蕉、大蕉、龙牙蕉、贡蕉等类型。野生资源主要有尖苞片蕉(M.acuminata，AA)、长梗蕉(M.balbisiana，BB)、阿宽蕉(M.itinerans)、芭蕉(M.basjoo)、粉芭蕉(M.nagensium)、红花蕉(M.coccinea)等野生蕉。香蕉栽培种主要是由尖苞片蕉(记为A基因组)和长梗蕉(记为B基因组)这两个原始野蕉种内或种间杂交后代演化发展而来。多数栽培蕉是三倍体，高度不育，少数为无籽二倍体或四倍体。二倍体栽培蕉为亚种间杂种，具有高度不育、单性结实、无性繁殖等特性，使香蕉的杂交育种工作十分困难，研究发现少量二倍体的栽培品种具有较弱的可育性，跟野生蕉杂交可少量结籽。
在香蕉远缘杂交中，不同香蕉杂交组合差异较大，粉蕉(ABB)、大蕉能收获较多种子，且有少量种子可以萌发并正常生长，但是香牙蕉(AAA)、龙牙蕉(AAB)、贡蕉(或称皇帝蕉，AA)型均几乎无法结籽，其中基因型AA的二倍体栽培蕉‘玫瑰蕉’仅有个别植株可收获个别种子，但没有萌发成功(李伟明等，2021)。可见，二倍体栽培蕉杂交存在结籽率极低，种子发育不正常，萌发率极低的问题。针对基因型AA的二倍体栽培蕉杂交育种极其困难的问题，国内尚无该方面成功报道。
通过选择适当的杂交组合和改良杂交授粉方法可提高香蕉结籽率(赵明等，2019)。如专利CN109924123A《一种提高香蕉结籽率的杂交授粉方法》，该专利是以三倍体粉蕉(ABB)为母本，野生蕉为父本，其中粉蕉‘金粉1号’作为母本材料，选择野生蕉‘LW’作为父本材料，通过重复授粉，增加受精几率；选择母本雌花中间梳位进行授粉；选择在雌花苞片已明显开放，苞片与穗轴间开张角度10°至80°，柱头裸露的阶段进行授粉等改良杂交授粉方法，得到的平均单果种子数可达1.98粒，对粉蕉杂交育种及粉蕉等类型新品种培育提供了技术支持，但是并不适用于二倍体栽培蕉的杂交育种。
鉴于此，十分有必要研究出一种能够提高二倍体栽培蕉杂交结籽率，以及后代植株成苗率、成株率的方法，进而解决二倍体栽培蕉杂交结籽难、种子的萌发率低等问题。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种杂交效率高、结籽率高、胚胎成株系率高的二倍体栽培蕉杂交育种的方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法，包括以下步骤：
S1、选择具有可育花粉的二倍体栽培蕉作为母本，选择野生蕉或具可育花粉的二倍体栽培蕉作为父本；
S2、对选择的母本与父本进行人工杂交，人工授粉后喷施花粉萌发培养基，待果实成熟，收获杂交种子；
S3、取杂交种子的胚胎进行离体培养，离体培养得到的生根苗经过移栽练苗，即可得到杂交植株；
所述花粉萌发培养基的组成为：含有0.01g/L H3BO3、0.25g/L MgSO4·7H2O、0.25g/L KNO3、0.4g/L Ca(NO3)2、质量百分比为12％～18％葡萄糖的水溶液，pH值为5.8。
本发明通过特定亲本的选择、结合喷施花粉萌发培养基的授粉方法提高杂交的结籽率，同时结合胚胎离体培养，提高杂种胚胎成株系率，进而提高杂种的成活率。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述可育花粉为雄花产生的成熟的，且具有活力，可萌发的花粉。花粉活力的检测利用常规花粉活力检测方法即可，比如MTT染色法或TTC染色法，可被MTT(2,5-二苯基四氮唑溴盐，噻唑蓝)或TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染成深色的花粉表示具有活力。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述二倍体栽培蕉为染色体倍性为二倍体、基因型为AA的栽培蕉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述具有可育花粉的二倍体栽培蕉为玫瑰蕉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述野生蕉野生蕉为尖叶蕉；优选地，所述尖叶蕉包括Calcutta 4(M.acuminata ssp.burmannicoides)或热科小果野蕉。所述热科小果野蕉为从中国热带农业科学院引进的小果野蕉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述尖叶蕉为热科小果野蕉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤S1中，选择野生蕉作为父本。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述步骤S1中，选择尖叶蕉作为父本。优选地，选择热科小果野蕉作为父本。所述热科小果野蕉为从中国热带农业科学院引进的小果野蕉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述人工授粉是在3-6月或8月中旬-10月温暖、湿度较高的季节进行人工授粉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述人工授粉为晚上或早上雄花张开，花药成熟、裂开、露出花粉时，采集花粉；于晚上或早上雌花苞片张开、雌花露出柱头时，将花粉涂抹在柱头上，完成人工授粉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述人工授粉为于晚上雌花苞片张开、雌花露出柱头时，将花粉涂抹在柱头上，完成人工授粉。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述人工授粉的授粉果梳为第1～3梳。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述人工授粉的授粉果梳为第1梳。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述果实成熟为果实具有5成以上肉度，大部分种子种壳变黑。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述杂交种子的收获方法为：果实成熟变软后，去除果肉，然后将种子置于密闭空间发酵后，充分去除种子表皮的果肉，去除空瘪种子后晾干。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述杂交种子的胚胎的获取方法为：种子消毒后，用挤压法破裂种壳，剥离胚胎。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述种子消毒为利用酒精、次氯酸钠对种子表面灭菌。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述种子消毒的具体方法为：超净工作台内，种子于70-75％酒精中浸泡30-60秒，再转移到2-3％次氯酸钠中消毒15-20分钟，后用无菌水清洗3-5遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述剥离胚胎为在超净工作台内，用无菌镊子夹住种子固定在无菌指甲钳的空隙中，稍微用力按压钳末端，指甲钳挤压种子破裂种壳，将种子一分为二，取出胚胎。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述离体培养具体为：将杂交种子的胚胎接种到诱导培养基暗培养得到芽，然后将芽接种到增殖培养基扩繁得到丛芽，接着将丛芽接种到生根培养基生根，得到生根苗。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述暗培养的时间为至少一周。
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述诱导培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2-3mg/L、KT激动素(6-糠基氨基嘌呤)1-2mg/L，腺嘌呤(Adenine)2.5-5mg/L、琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8-6；
所述增殖培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2.5-5mg/L、萘乙酸(NAA)0.1-0.2mg/L，琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8-6；
所述生根培养基的组成为：1/2MS培养基、吲哚丁酸(IBA)0.5-2mg/L、萘乙酸(NAA)0.1-0.2mg/L，0.5％活性炭、琼脂4g/L，pH为5.8-6；
作为本发明所述方法的优选实施方式，所述诱导培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)3mg/L、KT激动素(6-糠基氨基嘌呤)2mg/L，腺嘌呤(Adenine)2.5mg/L、琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为6.0；
所述增殖培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4mg/L、萘乙酸(NAA)0.1mg/L，琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为6.0；
所述生根培养基的组成为：1/2MS培养基、吲哚丁酸(IBA)1mg/L、萘乙酸(NAA)0.2mg/L，0.5％活性炭、琼脂4g/L，pH为6.0。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明提供了一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法，通过亲本选择、适当的授粉方法提高杂交的结籽率，同时结合胚胎离体培养，提高杂种胚胎成株系率，进而提高杂种的成活率；本发明提供的二倍体栽培蕉杂交育种的方法，可以将二倍体栽培蕉杂交从得种率几乎为零，提高到平均单果种子数0.72粒，杂交种子成苗率达2％，具有操作简单、杂交效率高、结籽率高、种子成株系率高等特点，克服了二倍体栽培蕉高度不育难题，解决了二倍体栽培蕉杂交亲和性差、结籽难、种子的萌发率低等问题，对香蕉杂交育种技术具有重要意义。本发明通过解决基因型AA的二倍体栽培蕉杂交难题，为贡蕉(AA)、香牙蕉(AAA)、龙牙蕉(AAB)等类型新品种培育开辟新的方法、途径和技术支持。
附图说明
图1为本发明实施例7中玫瑰蕉的雄花(A)、其花粉MTT染色情况(B)以及其花粉在含12％葡萄糖的PGM液体培养基萌发情况(C)；
图2为本发明实施例7中‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得的种子；
图3为本发明实施例7中‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得种子的胚胎在诱导培养基上分化成芽的情况(A)、芽在增殖培养基上扩繁得到的丛芽情况(B)以及丛芽在生根培养基上生根形成生根苗的情况(C)；
图4为本发明实施例7中玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得种子离体培养生根苗移栽后得到的二级苗的情况。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例所用的其他材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
在雄花开花期间，观察二倍体栽培蕉雄花花药是否能自然开裂，产生成熟花粉，然后通过应用MTT或TTC染色法测定花粉活力，应用离体萌发法测定花粉萌发情况，花粉具有活力、能够萌发的为可育花粉。
果实成熟为果实具有5成以上肉度，大部分种子种壳变黑。
热科小果野蕉：从中国热带农业科学院引进的小果野蕉；云南小果野蕉：来源于云南西双版纳的小果野蕉。
实施例1花粉萌发培养基的筛选
花粉离体萌发：
利用含有不同浓度葡萄糖的花粉萌发培养基(PGM液体培养基)对‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)的花粉分别进行离体培养。
花粉萌发培养基1(含6％葡萄糖的PGM液体培养基)：0.01g H3BO3、0.25gMgSO4·7H2O、0.25g KNO3、0.4g Ca(NO3)2、6％葡萄糖、水1L，pH5.8。
花粉萌发培养基2(含12％葡萄糖的PGM液体培养基)：0.01g H3BO3、0.25gMgSO4·7H2O、0.25g KNO3、0.4g Ca(NO3)2、12％葡萄糖、水1L，pH5.8。
花粉萌发培养基3(含18％葡萄糖的PGM液体培养基)：0.01g H3BO3、0.25gMgSO4·7H2O、0.25g KNO3、0.4g Ca(NO3)2、18％葡萄糖、水1L，pH5.8。
花粉萌发培养基4(含24％葡萄糖的PGM液体培养基)：0.01g H3BO3、0.25gMgSO4·7H2O、0.25g KNO3、0.4g Ca(NO3)2、24％葡萄糖、水1L，pH5.8。
将四种花粉萌发培养基分别喷洒于‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)的花粉上，30℃恒温培养12h，于40×10倍光学显微镜下观测花粉的萌发率，以花粉管生长长度超过花粉粒直径2倍作为萌发标准，记录已萌发花粉数量，并按照以下公式计算花粉萌发率：
花粉萌发率(％)＝视野内已萌发花粉数量/视野内花粉总数*100％。
含有不同浓度葡萄糖的花粉萌发培养基对花粉萌发的影响结果如下表1所示，
表1
表1结果显示，含有葡萄糖浓度为12％、18％的花粉萌发培养基上的‘热科小果野蕉’、‘那坡野蕉’花粉的萌发率最高，更有利于花粉的萌发。
实施例2
以‘佳丽’(Musa acuminata,AA)香蕉为母本，分别以‘Calcutta 4’(M.acuminatassp.burmannicoides,AA)、‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)为父本，在8-10月晚上苞片张开时，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1的含12％葡萄糖的PGM液体培养基，待果实成熟。待果实成熟、果肉变软后，去除香蕉果皮，切开或手扒开果肉，获得夹带果肉的种子，置于密封塑料袋内自然发酵2-3天，再放入网袋内搓洗种子，将种子和果肉完全分离，用水浮选法去除空瘪种子，置通风处，晾干表面水分，对种子进行计数。
观察发现‘佳丽’香蕉无成熟的可育的花粉，果实成熟时没收获到种子。
实施例3
以‘海贡’(海贡蕉)为母本，分别以‘Calcutta 4’(M.acuminatassp.burmannicoides,AA)、‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)为父本，在8-10月晚上苞片张开时，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基，待果实成熟。种子的获得方法同实施例2。
观察发现‘海贡’(海贡蕉)无成熟的可育的花粉，果实成熟时没收获到种子。
实施例4
以‘补蚌美人蕉’(美人蕉)为母本，分别以‘Calcutta 4’(M.acuminatassp.burmannicoides,AA)、‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)为父本，在8-9月晚上苞片张开时，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基，待果实成熟。种子的获得方法同实施例2。
观察发现补蚌美人蕉无成熟的可育的花粉，果实成熟时没收获到种子。
实施例5
以‘勐仑美人蕉’(美人蕉)为母本，分别以‘Calcutta 4’(M.acuminatassp.burmannicoides,AA)、‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘那坡野蕉’(长梗蕉)为父本，在4月和8-10月晚上苞片张开时，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基，待果实成熟。种子的获得方法同实施例2。
观察发现‘勐仑美人蕉’无成熟的可育的花粉，果实成熟时没收获到种子。
实施例6
以‘佛手蕉’(牛角蕉)为母本，分别以‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)为父本，在10月份早上，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基，待果实成熟。种子的获得方法同实施例2。
观察发现‘佛手蕉’可产生成熟的花粉，果实成熟时，可收获到种子。
实施例7
以‘玫瑰蕉’为母本，分别以‘Calcutta 4’(M.acuminata ssp.burmannicoides,AA，尖叶蕉)、‘热科小果野蕉’(尖叶蕉)、‘云南小果野蕉’(尖叶蕉)、‘玫瑰蕉’、‘那坡野蕉’(长梗蕉)、‘Pisang Klutuk Wulung野蕉’(简称‘PKW’，BB)为父本，在4月和9-10月晚上或早上，对整串蕉果进行人工杂交授粉，授粉后立即喷施实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基，作为试验组；‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合以及‘玫瑰蕉’与‘玫瑰蕉’的杂交组合设置不喷实施例1含12％葡萄糖的PGM液体培养基的对照组处理，待果实成熟。种子的获得方法同实施例2。根据获得的种子数结合一下公式计算平均单果结籽数：
平均单果结籽数＝种子数/授粉果指数*100。
观察发现‘玫瑰蕉’产生成熟的可育的花粉，玫瑰蕉的雄花(A)、其花粉MTT染色情况(B)以及其花粉在含12％葡萄糖的PGM液体培养基萌发情况(C)如图1所示。
果实成熟时，试验组均获得种子，对照组中‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得种子，‘玫瑰蕉’与‘玫瑰蕉’的杂交组合未获得种子。
‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得的种子如图2所示。
效果例胚胎离体培养
取实施例6、7采收的种子，剥离胚胎，进行胚胎离体培养。
(1)胚胎剥离
取晾干表面水分的种子备用，如不能及时后续处理，需晾干3-5天，种子干燥后，置于低温干燥环境下保存。
在超净工作台，种子于70-75％酒精中浸泡30-60秒，再转移到2-3％次氯酸钠中消毒15-20分钟，后用无菌水清洗3-5遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分；然后用无菌镊子夹住种子固定在无菌指甲钳的空隙中，稍微用力按压钳末端，指甲钳挤压种子破裂种壳，将种子一分为二，取出种子胚胎。并根据公式：获胚率(％)＝胚胎数/种子数*100计算获胚率。
(2)胚胎离体培养
诱导培养基：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)3mg/L、KT激动素(6-糠基氨基嘌呤)2mg/L，腺嘌呤(Adenine)2.5mg/L、琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH6.0，121℃灭菌20-30分钟。
增殖培养基：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4mg/L、萘乙酸(NAA)0.1mg/L，琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH6.0，121℃灭菌20-30分钟。
生根培养基：1/2MS培养基、吲哚丁酸(IBA)1.0mg/L、萘乙酸(NAA)0.2(0.1-0.2)mg/L，0.5％活性炭、琼脂4g/L，pH6.0，121℃灭菌20-30分钟。
将胚胎接种到诱导培养基进行培养，暗培养15-20天，胚胎分化成芽，然后将芽接种到增殖培养基扩繁得到丛芽，接着将丛芽接种到生根培养基生根，得到生根苗(杂交植株苗)。‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得种子的胚胎在诱导培养基上分化成芽的情况(A)、芽在增殖培养基上扩繁得到的丛芽情况(B)以及丛芽在生根培养基上生根形成生根苗的情况(C)如图3所示。
将生根苗转到日光温室大棚练苗一周后，移栽至营养杯中，种植约2个月，获得具有7-8片叶的二级苗，可移栽至大田、或者用于抗病性鉴定等实验。玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合获得种子离体培养生根苗移栽后得到的二级苗的情况如图4所示。
胚成活率(％)＝成活胚胎数/胚胎数*100；
胚胎成株系率(％)＝株系数/成活胚胎数*100；
成活胚胎数：在诱导培养基上能发生膨大、呈绒毛状、长芽、长根、出现愈伤组织等现象，具有生命力的胚胎数目；株系数：能够获得二级苗的一个胚胎得到的所有二级苗称为一个株系。
实施例6以及实施例7的不同杂交组合对应的平均单果结籽数、获胚率、胚成活率、胚胎成株系率的情况如下表2所示，
表2
注：均对整串蕉果进行人工杂交授粉，统计结果为包含整串蕉果的结果。
表2结果显示，‘佛手蕉’与‘热科小果野蕉’杂交组合，平均单果结籽数为0.14粒，但种子获胚率为0，没获得植株。
以‘玫瑰蕉’为母本，以‘热科小果野蕉’、‘云南小果野蕉’、‘玫瑰蕉’、‘那坡野蕉’为父本的组合结籽数较高。以‘Calcutta 4’、‘热科小果野蕉’、‘玫瑰蕉’为父本的组合的杂交种子获得胚胎；‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’杂交组合的获胚率最高，并获得杂交植株，胚成活率为5.56％，胚胎成株系率达100％，并计算得到杂交种子成苗率达2.27％。与不喷施含12％葡萄糖的PGM液体培养基相比，授粉后立即喷施更有利于提高结籽数和获胚率。
3、对‘玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’杂交组合不同梳序号蕉果杂交种子分布情况进行统计，结果如下表3所示，
表3
表3结果显示，以第1梳蕉果结籽数较高，第1梳蕉果平均单果种子数达0.72粒，其它果梳结籽数较低，平均单果种子数介于0-0.06粒。
综上可知，只有可产生有成熟花粉、可育花粉的二倍体栽培蕉品种作母本可获得较高结籽数，第1梳蕉果易获得较高结籽数，授粉后立即喷施含12％葡萄糖的PGM液体培养基有利于提高结籽数和获胚率，以玫瑰蕉’与‘热科小果野蕉’的杂交组合结合胚胎离体培养获得杂交株系成功率最高。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种二倍体栽培蕉杂交育种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选择具有可育花粉的二倍体栽培蕉作为母本，选择野生蕉或具可育花粉的二倍体栽培蕉作为父本；
S2、对选择的母本与父本进行人工杂交，人工授粉后喷施花粉萌发培养基，待果实成熟，收获杂交种子；
S3、取杂交种子的胚胎进行离体培养，离体培养得到的生根苗经过移栽练苗，即可得到杂交植株；
所述花粉萌发培养基的组成为：含有0.01g/L H3BO3、0.25g/L MgSO4·7H2O、0.25g/LKNO3、0.4g/L Ca(NO3)2、质量百分比为12％～18％葡萄糖的水溶液，pH值为5.8。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二倍体栽培蕉为染色体倍性为二倍体、基因型为AA的栽培蕉。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述具有可育花粉的二倍体栽培蕉为玫瑰蕉。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S1中，选择野生蕉作为父本。
5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述野生蕉为尖叶蕉。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人工授粉是在3-6月或8月中旬-10月温暖、湿度较高的季节进行人工授粉；
和/或，所述人工授粉为晚上或早上雄花张开，花药成熟、裂开、露出花粉时，采集花粉；于晚上或早上雌花苞片张开、雌花露出柱头时，将花粉涂抹在柱头上，完成人工授粉；
和/或，所述人工授粉的授粉果梳为第1～3梳。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述杂交种子的胚胎的获取方法为：种子消毒后，用挤压法破裂种壳，剥离胚胎。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离体培养具体为：将杂交种子的胚胎接种到诱导培养基暗培养得到芽，然后将芽接种到增殖培养基扩繁得到丛芽，接着将丛芽接种到生根培养基生根，得到生根苗。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述暗培养的时间为至少一周。
10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述诱导培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤2-3mg/L、KT激动素1-2mg/L，腺嘌呤2.5-5mg/L、琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8-6；
和/或，所述增殖培养基的组成为：MS培养基、6-苄氨基腺嘌呤2.5-5mg/L、萘乙酸0.1-0.2mg/L，琼脂4g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8-6；
和/或，所述生根培养基的组成为：1/2MS培养基、吲哚丁酸0.5-2mg/L、萘乙酸0.1-0.2mg/L，0.5％活性炭、琼脂4g/L，pH为5.8-6。
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