CN118021869A - 一种强肾中药提取物的制备方法、产品和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种强肾中药提取物的制备方法、产品和应用,属于中药提取物技术领域。该提取物的制备方法包括:S1、将刺蒺藜进行粉碎过筛,得刺蒺藜粉;S2、取新鲜肉苁蓉、氯化钠,共同捣烂、研磨,氮气保护下加热,再加入甲醇、浓盐酸、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,回流,过滤,得粗提取液;S3、将步骤S2中得到的粗提取液浓缩,调节pH,得浓缩液;S4、将步骤S3中得到的浓缩液柱层析分离,洗脱液浓缩干燥,得强肾中药提取物。本发明还提供了一种补肾强肾的组合物,由上述强肾中药提取物和肉豆蔻、远志、桑椹子、炙甘草制成。该组合物君臣佐使得当,补肾效果好,具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于中药组合物技术领域,具体涉及一种强肾中药提取物的制备方法、产品和应用。
背景技术
近年来,随着人们的工作压力逐年增大,有肾虚肾亏问题的患者也呈现逐年增多的态势。临床上,肾阳亏虚症见面色苍白或黝黑、腰膝酸软、精神不振、手足冰凉、畏寒怕风、便溏腹泻、失眠心烦、男子阳痿早泄、性欲低下、尿频梦遗、女子宫寒不孕、月经紊乱等。现有补肾壮阳产品主要分为中药和西药。西药中,以枸橼酸西地那非为代表的化学合成药物能够一定程度上解决男子性功能障碍的问题,但难以从人体整体的角度进行周身调养,从而从根本上解决问题。中医药具有疗效可靠、毒副作用小、临床应用安全等特点,对此类症状的改善与预防具有独到优势。
刺蒺藜Fructus Tribuli,主产于我国河南、河北、山东、安徽、江苏、四川、陕西等地,其中药药用基原为果实部分。刺蒺藜复果多由5分果瓣组成,放射状排列呈棱状球形。商品果皮坚硬、木制,内含种子3-4粒。种子卵圆形,稍扁,有油性。气微,味苦。刺蒺藜果实含有刺蒺藜苷、山奈酚、山奈酚-3-葡萄糖苷、山奈酚-3-芸香糖苷、槲皮素等成分,种子油中含有蒺藜酰胺、N-反式对羟基苯乙基咖啡酰胺、大黄素甲醚等成分。现代药理学研究显示,刺蒺藜具有降压、抗心肌缺血、延缓衰老及性强壮作用。
肉苁蓉Herba Cistanches,主产于内蒙古、宁夏、甘肃、新疆等地,其中药药用基原为肉质茎。肉苁蓉的肉质茎呈扁圆柱形,稍弯曲,表面棕褐色或灰棕色,密被覆瓦状排列的肉质鳞叶,鳞叶菱形或三角形。肉苁蓉气微,味甜、微苦。肉苁蓉的肉质茎中含有肉苁蓉苷A、B、C、H,洋丁香酚苷、2’-乙酰基洋丁香酚苷、海胆苷、(2,5-二氧代-4-咪唑烷基)氨基甲酸、甜菜碱、胡萝卜苷、8-表马钱子苷酸、β-谷甾醇、N,N-二甲基甘氨酸甲酯等成分,还含有多种氨基酸、多糖等营养物质。现代药理学研究显示,肉苁蓉具有增强免疫、调整内分泌、促进代谢、延缓衰老及通便等作用。
中国专利CN103405617B公开了一种补肾壮阳的中药组合物及其制备方法,原料药由淫羊藿、牛鞭、补骨脂、巴戟天、红参、黄芪、肉桂、韭菜子、核桃仁、熟地黄、枸杞子、地黄、桑螵蛸、当归、大枣、川木通组成,并将其通过一定的工艺方法进行纯化,得到中药组合物。然而,该组合物的原料药组方庞大,含有动物性药物牛鞭、桑螵蛸成本较高。
中国专利105497496B公开了一种具有提高男性性功能作用的中药组合物及其制备方法和用途,原料药由人参、五味子、麦冬、枸杞子和丹参组成。该组方构成简单成本相对交底,然而动物实验显示其提高性功能的效果相对有限。
另一方面,中药提取技术有助于从富集中药有效成分的角度出发提升中药效果,同时可以去除中药材中不必要的未知成分,是中药及中药组合物实现更好应用效果的必由之路。
中国专利102441040A公开了一种肉苁蓉苯乙醇总苷的制备方法,由肉苁蓉粉碎、浸提、吸附树脂吸附、洗脱、浓缩等步骤完成。该方法可以避免肉苁蓉苯乙醇苷类物质的分解与氧化。然而该方法未公开该提取方法的提取物强肾、改善男性性功能的效果。
中国专利116966213A公开了一种从刺蒺藜中提取刺蒺藜皂甙的方法及应用,以解决现有提取方式单一、刺蒺藜皂甙纯度不佳的问题。包括刺蒺藜烘干、粉碎、醇提、混合溶剂提取、重结晶等步骤。然而,该方法未公开该提取方法的提取物强肾、改善男性性功能的效果。
综上,现有技术难以提供一种从刺蒺藜、肉苁蓉的中药原料中同时对有效成分进行提取、并使得获得的中药提取物具有更好的补肾强肾功效的制备方法。
发明内容
有鉴于此,针对现有技术难以提供一种从刺蒺藜、肉苁蓉的中药原料中同时对有效成分进行提取、并使得获得的中药提取物具有更好的补肾强肾功效的制备方法的问题,本发明的目的是提供一种强肾中药提取物的制备方法、产品和应用。
为实现本发明的目的,一方面,本发明提供了一种强肾中药提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、将刺蒺藜进行粉碎过筛,得刺蒺藜粉;
S2、取新鲜肉苁蓉、颗粒状氯化钠,共同捣烂、研磨,氮气保护下加热,再加入甲醇、浓盐酸、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,回流,过滤,得粗提取液;
S3、将步骤S2中得到的粗提取液浓缩,调节pH,得浓缩液;
S4、将步骤S3中得到的浓缩液柱层析分离,洗脱液浓缩干燥,得强肾中药提取物。
优选地,按质量份,步骤S1中,所述刺蒺藜为23-32份。
更优选地,按质量份,步骤S1中,所述刺蒺藜为28份。
优选地,按质量份,步骤S2中,所述新鲜肉苁蓉为100-120份。
更优选地,按质量份,步骤S2中,所述新鲜肉苁蓉为110份。
优选地,按质量份,步骤S2中,所述氯化钠为45-55份。
更优选地,按质量份,步骤S2中,所述氯化钠为50份。
优选地,按质量份,步骤S2中,所述甲醇为150-250份。
更优选地,按质量份,步骤S2中,所述甲醇为200份。
其中,步骤S2中,所述浓盐酸为氯化氢质量分数36%-38%的市售浓盐酸。
优选地,按质量份,步骤S2中,所述浓盐酸为0.8-1.5份。
更优选地,按质量份,步骤S2中,所述浓盐酸为1份。
优选地,步骤S2中,所述氯化钠为颗粒状氯化钠。
更优选地,所述颗粒状氯化钠的粒径大于等于1mm。
再优选地,且作为本发明的实例,所述颗粒状氯化钠的粒径为2-2.8mm。
优选地,步骤S2中,所述研磨的时间为10-45min。
更优选地,步骤S2中,所述研磨的时间为30min。
优选地,步骤S2中,所述氮气保护下加热的温度为65-85℃。
更优选地,步骤S2中,所述氮气保护下加热的温度为75℃。
优选地,步骤S2中,所述氮气保护下加热的时间为20-50min。
更优选地,步骤S2中,所述氮气保护下加热的时间为30min。
另一方面,本发明提供了上述制备方法制得的强肾中药提取物。
再一方面,本发明提供了一种补肾强肾的组合物,由上述强肾中药提取物、肉豆蔻、远志、桑椹子、炙甘草制成;其中所述强肾中药提取物由上述强肾中药提取物的制备方法制得。
优选地,所述组合物由强肾中药提取物、肉豆蔻14-23质量份、远志10-20质量份、桑椹子5-9质量份、炙甘草3-8质量份制成;其中所述强肾中药提取物的原料药为刺蒺藜23-32质量份、新鲜肉苁蓉100-120质量份。
更优选地,所述组合物由强肾中药提取物、肉豆蔻19质量份、远志15质量份、桑椹子7质量份、炙甘草5质量份制成;其中所述强肾中药提取物的原料药为刺蒺藜28质量份、新鲜肉苁蓉110质量份。
再一方面,本发明提供了上述组合物的制备方法,包括以下步骤:
T1、将肉豆蔻与有机溶剂混合,加热回流,过滤取滤液,浓缩,干燥,得肉豆蔻提取物;
T2、将远志、桑椹子、炙甘草干燥、煎煮,过滤、合并滤液,得总滤液;
T3、将强肾中药提取物、步骤T1中得到的肉豆蔻提取物、步骤T2得到的总滤液混合,浓缩,得组合物。
优选地,步骤T1中,所述有机溶剂选自正己烷、环己烷、丙酮、乙醇中的至少一种。
更优选地,步骤T1中,所述有机溶剂为乙醇、环己烷的混合物。
再优选地,且作为本发明的实例,所述乙醇、环己烷的混合物具体为乙醇、环己烷体积比2.5:1的混合物。
优选地,步骤T1中,所述有机溶剂与所述肉豆蔻的质量比为100:17-23。
优选地,步骤T1中,所述浓缩具体为旋蒸。
优选地,步骤T1中,所述干燥具体为将所述有机溶剂通过干燥除去。
优选地,步骤T2中,所述煎煮具体为加入远志、桑椹子、炙甘草3-8倍质量水,煎煮3-5小时。
还一方面,本发明提供了一种药物,其原料为上述制备方法制得的强肾中药提取物或/和上述组合物或/和上述制备方法制得的组合物。
所述药物可制备成丸剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、粉剂、片剂、锭剂、糖锭剂等给药剂型,针对不同的剂型可选择本领域合适的辅料。
所使用的辅料可以是固体、液体或气体。固体辅料示例包括乳糖、白陶土、蔗糖、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁和硬脂酸。液体辅料的例子包括糖浆、花生油、橄榄油和水。气体辅料的例子包括二氧化碳和氮气。
在制备口服剂型的组合物时,可以使用任何方便的药物介质。例如,水、乙醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等可用于形成口服液体制剂,如混悬剂、乳剂和溶液;而载体,如淀粉、糖类、微晶纤维素、稀释剂、制粒剂、乳化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂可用于形成口服固体制剂,如粉剂、胶囊剂和片剂。由于其易于给药,片剂和胶囊是使用固体药物载体的优选口服剂量单位。可选择使用标准水性或非水性技术对片剂进行包衣。
含有本发明组合物的片剂可以通过压片或模塑制备,可选择使用一种或多种辅助成分或佐剂。可通过在适当的机器中以自由流动的形式(如粉末或颗粒)压片活性成分,可选择与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性物质或分散剂混合来制备压片。模制片剂可在适当的机器中模制,即用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物混合物。每片优选含有约0.05mg至约5g活性成分,每个小袋或胶囊优选含有约0.05mg至约5g活性成分。例如,拟用于人体口服给药的制剂可能含有约0.5mg至约5g活性药物,与适量且方便的载体材料混合,其可能约占总组成的5%至95%。单位剂型通常含有约1mg至约2g活性成分,通常为25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
本发明中适用于胃肠外给药的药物组合物可制备为活性化合物的水溶液或混悬液。可以包括适当的表面活性剂,例如羟丙基纤维素。也可以在甘油、液体聚乙二醇和其油混合物中制备分散体。此外,可以加入防腐剂以防止微生物的有害生长。
本发明的药物可以是适合局部使用的形式,例如气雾剂、乳膏、软膏、洗剂、粉剂或类似物。此外,组合物可以是适当的形式用于透皮给药装置。可以使用本发明的中药组合物,通过常规处理方法制备这些处方。例如,通过混合亲水性材料和水,以及约5wt%至约10wt%的化合物,制备具有所需稠度的乳膏或软膏。
本发明的药物可以是适用于直肠给药的形式,其中载体是固体。最好将混合物制成单位剂量栓剂。合适的载体包括可可脂和其他本领域中常用的材料。栓剂可通过首先形成混合含有软化或熔化载体的组合物,随后在模具中冷却和塑形。
除上述载体成分外,上述药物制剂可能包括(如适用)一种或多种额外的载体成分,如稀释剂、缓冲液、矫味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等。此外,可加入其它辅料,例如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等、着色剂和矫味剂等。使制剂与预期受体的血液等渗。还可以粉末或浓缩液形式制备含有本发明中药组合物的组分。
优选地,所述药物的剂型包括膏剂、丸剂、颗粒剂、口服液、片剂、锭剂、胶囊剂、散剂、糖浆剂、酊剂。
还一方面,本发明提供了上述强肾中药提取物及其制备方法、上述组合物及其制备方法和上述强肾药物在生产补肾强肾产品中的应用。
优选地,所述补肾强肾产品为补肾强肾药物。
本发明采用的中药组分的性能作进一步解释如下。
刺蒺藜:
【异名】茨(《诗经》),蒺藜(《毛诗传》)蒺藜子、旁通、屈人、止行、豺羽、升推(《本经》),即黎(《别录》),白蒺藜子(《药性论》),杜蒺藜(《圣惠方》),土蒺藜(《御药院方》),白蒺藜(《医学入门》),旱草(《本草经解》),三角蒺藜(《本草求真》),三角刺(《中国药用植物志》),八角刺(《青海药材》),蒺骨子、野菱角、地菱(《江苏省植物药材志》),硬蒺藜(《中药材品种论述》),蒺藜蓇葖(《山东中药》)。
【基源】蒺藜科蒺藜属植物蒺藜和大花蒺藜的果实。
【原植物】1.蒺藜Tribulus terrestris L.
2.大花蒺藜T.cistoides L.。
【采收加工】8-9月果实由绿色变成黄白色,大部分已成熟时,割取全株,晒几天,脱粒,再晒干。
【药性】苦、辛,平。归肝、肺经。
【功能主治】平肝,解郁,明目,祛风。主治头痛,眩晕,胸胁胀痛,乳房胀痛,癥瘕,目赤翳障,风疹瘙痒,白癜风,痈疽瘰疬。
肉苁蓉:
【异名】肉松蓉、黑司令(《吴普本草》),纵蓉(《本草经集注》、地精(《石药尔雅》),马足、马芝(《宝庆本草折衷》),苁蓉、大芸(《中药志》),寸芸(《全国中草药汇编》)。
【基源】列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉和管花肉苁蓉的肉质茎。
【原植物】肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma。此外《中华人民共和国药典》2005年版记载,同属植物管花肉苁蓉C.tubulosa(Schrenk)Wightr带鳞叶的肉质茎也作本品入药。
【采收加工】4-5月上旬采挖刚出土的肉苁蓉,留小采大。去掉花序或苁蓉头,晾晒于干净沙滩上或房顶上,1个多月后由黄白色变成肉质棕褐色,即为甜大芸。秋季采收者因水分大,不易干燥,故把肥大者投入盐湖中,腌1-3年,用时洗去盐分,叫盐大芸。
【药性】甘、咸,温。归肾、大肠经。
【功用主治】补肾阳,益精血,润肠道。主治肾阳虚衰、精血不足之阳痿,遗精,白浊,尿频余沥,腰痛脚弱,耳鸣目花,月经衍期,宫寒不孕,肠燥便秘。
肉豆蔻:
【异名】迦拘勒(《开宝本草》),豆蔻(《续传信方》),肉果(《纲目》),顶头肉、玉果(《全国中草药汇编》),扎地(藏名),麻尖(傣语)。
【基源】肉豆蔻科肉豆蔻属植物肉豆蔻的种仁。
【原植物】肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.。
【采收加工】定植后6-7年开花结果,10年后产量增多,25年达盛果期。结果期为60-70年,每年盛果期有两次,即5-7月及10-12月。采摘成熟果实,除去果皮,剥去假种皮,将种仁用45℃低温慢慢烤于,经常翻动,当种仁摇之作响时即可。若高于45℃,脂肪溶解,失去香味,质量下降。
【药性】辛,微苦,温。归脾、胃、大肠经。
【功用主治】温中涩肠,行气消食。主治虚泻,冷痢,脘腹胀痛,食少呕吐,宿食不消。
远志:
【异名】葽绕、蕀蒬(《尔雅》),棘菀、细草(《本经》),小鸡腿、小鸡眼(《全国中草药汇编》),小草根(《中药材品种论述》)。
【基源】远志科远志属植物远志和西伯利亚远志的根。
【原植物】1.远志Polygala tenuifolia Willd.;
2.西伯利亚远志P.sibirica L.。
【采收加工】栽种后第三、第四年秋季返苗后或春季出苗前挖取根部,用木棒敲打,使其松软,抽出木心,晒干即“远志肉”、“远志筒”;如采收后不去木心,直接晒干者,称“远志棍”。
【药性】辛、苦,微温。归心、肺、肾经。
《纲目》记载:“远志,入足少阴肾经,非心经药也。其功专于强志易精,治善忘。盖精与志皆肾经之所藏也。”
【功用主治】宁心安神,祛痰开窍,解毒消肿。主治心神不安,惊悸失眠,健忘,惊痫,咳嗽痰多,痈疽发背,乳房肿痛。
桑椹子:
【异名】桑实(《五十二病方》),葚(《尔雅》),乌椹(《本草衍义》),文武实(《保命集》),黑椹(《本草蒙筌》),桑枣(《生草药性备要》),桑椹子子(《本草再新》),桑粒(《东北药用植物志》),桑藨(《四川中药志》),桑果(江苏)。
【基源】桑科桑属植物桑的干燥果穗。
【原植物】原植物桑Morus alba L.,又名:家桑(《日华子》),桑椹树(《救荒本草》)。
【采收加工】5-6月当桑的果穗变红色时采收,晒干或蒸后晒干。
【药性】甘、酸,寒。归肝、肾经。
【功用主治】滋阴养血,生津润肠。主治肝肾不足和血虚精亏的头晕目眩,耳鸣,须发早白,失眠,消渴,腰酸,肠燥便秘,秃疮。
甘草:
【异名】美草、蜜甘(《本经》),蜜草、黑根草(《别录》),国老(《本草经集注》),灵通(《记事珠》),粉草(《群芳谱》),甜草(《中国药用植物志》),甜根子(《中药志》),棒草(《黑龙江中药》)。
【基源】豆科甘草属植物甘草、光果甘草、胀果甘草的根及根茎。
【原植物】1.甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.。
2.光果甘草G.glabra L.。
3.胀果甘草G.inflata Batal.。
【采收加工】8-9月采挖,除去芦头,茎基、须根,截成适当长短的段,晒至半干,打成小捆,再晒至全干。
【炮制】本发明使用的甘草为炮制后的炙甘草。炙甘草又称蜜甘草,炮制方法如下:
取炼蜜用适量开水稀释后,加入甘草片拌匀,闷润片刻,置热锅内,用文火炒至表面显深黄色,不粘手为度,取出放凉。每100kg的甘草片用炼蜜25kg。蜜甘草形如甘草,表面深黄色略有光泽,略带黏性,味甜,用于补中益气,缓急止痛。据《药性微蕴》记载,“(甘草)甘温能除大热,故生用则气平,补脾胃不足,而大泻心火。炙之则气温,补三焦元气而散表寒,除邪热,去咽痛,缓正气,养阴血”。
【药性】甘、平。归脾、胃、心、肺经。
【功用主治】和中缓急,润肺解毒,调和诸药。炙用治脾胃虚弱,倦怠食少,腹痛便溏,四肢挛急疼痛,心悸脏躁,肺痿咳嗽;生用治咽喉肿痛,痈疮肿毒,小儿胎毒,及药物、食物中毒。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明提供的强肾中药提取物的制备方法能够高效提取刺蒺藜、肉苁蓉两种中药材中具有强肾功能的有效成分,且相较于常规提取方法,该方法提取的中药提取物具有良好的强肾效果。
(2)本发明提供的补肾强肾组合物的原料中药材中,肉苁蓉填补肾阳,增益精血,为君药;远志攻专心肾,壮阳易精,肉豆蔻行中下二焦,除寒燥湿,温补脾胃以温肾,刺蒺藜平肝益精,凉血养血,益善补阴,为臣药;桑椹子滋阴养血,益肾固精,清虚火,息虚风,为佐药;炙甘草和中缓急,平和药性兼而为使药。全方助补肾阳,兼行补血养阴、散寒化虚之效。
(3)本发明所述组合物经动物实验证实,具有显著的补肾强肾和提升性功能的效果,具有广阔的应用前景。
具体实施方式
以下非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面的理解本发明,但不以任何方式限制本发明。下述内容仅仅是对本发明要求保护的范围的示例性说明,本领域技术人员可以根据所公开的内容对本发明的发明作出多种改变和修饰,而其也应当属于本发明要求保护的范围之中。
下面以具体实施例的方式对本发明作进一步的说明。本发明实施例中所使用的各种化学试剂如无特殊说明均通过常规商业途径获得。若无特殊说明,下文中所述含量均为质量含量,所述原料份数均为质量份。若无特殊说明,理解为在室温下进行。
实施例1
1、中药提取物的制备。
S1、使用高通量粉碎机将干燥刺蒺藜28份进行粉碎,过药典3号筛,得刺蒺藜粉。
S2、取新鲜肉苁蓉110份、颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)50份,共同捣烂至糊状,然后研磨30min,转入烧瓶中。氮气保护下,加热至75℃维持30min,再加入甲醇200份、浓盐酸1份、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,加热维持回流,回流3小时。降至室温后,抽滤取滤液为粗提取液。
S3、将步骤S2中制备的粗提取液进行室温减压蒸馏,浓缩至体积减小为原来的0.2倍,使用碳酸氢钠调节pH至6-8,得浓缩液。
S4、将步骤S3中制备的浓缩液进行柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。使用的层析柱为D101大孔树脂层析柱。
2、组合物的制备。
T1、将19质量份肉豆蔻与100质量份有机溶剂混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。所述有机溶剂为乙醇、环己烷体积比2.5:1的混合物。
T2、将15份远志、7份桑椹子、5份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过药典3号筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物(110份鲜肉豆蔻、28份干燥刺蒺藜制成)与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
实施例2
1、中药提取物的制备。
S1、使用高通量粉碎机将干燥刺蒺藜23份进行粉碎,过药典3号筛,得刺蒺藜粉。
S2、取新鲜肉苁蓉120份,粗食盐(平均粒径大于等于1mm)55份,共同捣烂至糊状,研磨30min,转入烧瓶中。氮气保护下,加热至75℃维持30min,再加入甲醇200份、浓盐酸1份、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,加热维持回流,回流3小时。降至室温后,抽滤取滤液为粗提取液。
S3、将步骤S2中制备的粗提取液进行室温减压蒸馏,浓缩至体积减小为原来的0.1-0.35倍,使用碳酸氢钠调节pH至6.5-8,得浓缩液。
S4、将步骤S3中制备的浓缩液进行柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。
2、组合物的制备。
T1、将23质量份肉豆蔻与100质量份有机溶剂混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。所述有机溶剂为乙醇、环己烷体积比2.5:1的混合物。
T2、将10份远志、5份桑椹子、8份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过药典3号筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物(120份鲜肉豆蔻、23份干燥刺蒺藜制成)与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
与实施例1相比,调整了刺蒺藜、肉苁蓉、肉豆蔻、远志、桑椹子、炙甘草的用量。
实施例3
1、中药提取物的制备。
S1、使用高通量粉碎机将干燥刺蒺藜32份进行粉碎,过药典3号筛,得刺蒺藜粉。
S2、取新鲜肉苁蓉100份,粗食盐(平均粒径大于等于1mm)45份,共同捣烂至糊状,研磨30min,转入烧瓶中。氮气保护下,加热至75℃维持30min,再加入甲醇200份、浓盐酸1份、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,加热维持回流,回流3小时。降至室温后,抽滤取滤液为粗提取液。
S3、将步骤S2中制备的粗提取液进行室温减压蒸馏,浓缩至体积减小为原来的0.1-0.35倍,使用碳酸氢钠调节pH至6.5-8,得浓缩液。
S4、将步骤S3中制备的浓缩液进行柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。
2、组合物的制备。
T1、将17质量份肉豆蔻与100质量份有机溶剂混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。所述有机溶剂为乙醇、环己烷体积比2.5:1的混合物。
T2、将20份远志、5份桑椹子、8份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过400目筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物(100份鲜肉豆蔻、32份干燥刺蒺藜制成)与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
与实施例1、实施例2相比,调整了刺蒺藜、肉苁蓉、肉豆蔻、远志、桑椹子、炙甘草的用量。
实施例4
1、中药提取物的制备。
S1、使用高通量粉碎机将干燥刺蒺藜28份进行粉碎,过药典3号筛,得刺蒺藜粉。
S2、取新鲜肉苁蓉110份,颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)50份,共同捣烂至糊状,然后研磨10min,转入烧瓶中。氮气保护下,加热至85℃维持20min,再加入甲醇250份、浓盐酸1.5份、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,加热维持回流,回流3小时。降至室温后,抽滤取滤液为粗提取液。
S3、将步骤S2中制备的粗提取液进行室温减压蒸馏,浓缩至体积减小为原来的0.2倍,使用碳酸氢钠调节pH至6-8,得浓缩液。
S4、将步骤S3中制备的浓缩液进行柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。使用的层析柱为D101大孔树脂层析柱。
2、组合物的制备。
T1、将19质量份肉豆蔻与100质量份正己烷混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。
T2、将15份远志、7份桑椹子、5份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过400目筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物(110份鲜肉豆蔻、28份干燥刺蒺藜制成)与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
实施例5
1、中药提取物的制备。
S1、使用高通量粉碎机将干燥刺蒺藜28份进行粉碎,过药典3号筛,得刺蒺藜粉。
S2、取新鲜肉苁蓉110份,颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)50份,共同捣烂至糊状,然后研磨45min,转入烧瓶中。氮气保护下,加热至65℃维持50分钟,再加入甲醇150份、浓盐酸0.8份、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,加热维持回流,回流3小时。降至室温后,抽滤取滤液为粗提取液。
S3、将步骤S2中制备的粗提取液进行室温减压蒸馏,浓缩至体积减小为原来的0.2倍,使用碳酸氢钠调节pH至6-8,得浓缩液。
S4、将步骤S3中制备的浓缩液进行柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。使用的层析柱为D101大孔树脂层析柱。
2、组合物的制备。
T1、将19质量份肉豆蔻与100质量份丙酮混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。
T2、将15份远志、7份桑椹子、5份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过400目筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物(110份鲜肉豆蔻、28份干燥刺蒺藜制成)与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
对比例1
与实施例1相比,步骤S1中,所述颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)改为使用等质量份的石英砂(平均粒径2.5mm),其余皆相同。
对比例2
与实施例1相比,步骤S1中,所述颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)改为使用粉末状氯化钠(粒径低于300μm),其余皆相同。
对比例3
与实施例1相比,步骤S1中,所述颗粒状氯化钠(平均粒径2-2.8mm)改为使用10份,其余皆相同。
对比例4
与实施例1相比,步骤S2中,所述氮气保护下改为在空气中,其余皆相同。
对比例5
与实施例1相比,步骤S2中,所述加入甲醇200份、浓盐酸2份改为加入甲醇200份、冰醋酸2份,其余皆相同。
对比例6
与实施例1相比,步骤T2中所述远志改为等质量份麦冬,其余皆相同。
对比例7
1、中药提取物的制备。
将干燥刺蒺藜28份进行粉碎,过药典3号筛,与新鲜肉苁蓉110份、水202份混合,加热煎煮。降至室温后,抽滤取滤液。滤渣再重复煎煮2次,每次煎煮用水量为固体物质质量的5倍。合并滤液,浓缩,柱层析分离,采用乙醇-水溶液进行洗脱,收集洗脱液,洗脱液通过旋蒸仪30℃浓缩,15℃干燥,得中药提取物。使用的层析柱为D101大孔树脂层析柱。
2、组合物的制备。
T1、将19份肉豆蔻与100份环己烷混合,加热回流8小时,过滤取滤液,50℃旋蒸,干燥,获得肉豆蔻提取物。
T2、将15份远志、7份桑椹子、5份炙甘草在45℃下真空干燥12小时,粉碎机粉碎过400目筛,与8倍质量水进行混合煎煮5小时,抽滤取滤液。滤渣再次与5倍质量水进行混合煎煮4小时,抽滤取滤液。进一步地,滤渣再次与3倍质量水进行混合煎煮3小时,抽滤取滤液。合并三次煎煮所得滤液,得总滤液。
T3、将1、中药提取物的制备中所述步骤S4获得的中药提取物与步骤T1得到的肉豆蔻提取物、步骤T2中得到的总滤液混合,浓缩至相对密度1.4,得清膏,即为组合物。
效果例1
补肾效果实验。
参考发明专利CN103405617B实验例中“4.1补肾实验”中所述方法,对本发明各实施例、对比例提供的组合物补肾效果进行评价。
1、实验方法:
取体重为120-150g的雄性SD大鼠,用12.5%乌拉坦0.6mL/只注射使其进入浅麻醉,背位固定,消毒阴囊皮肤,摘去双侧睾丸。术后肌注20000U/kg体重的青霉素钠防止感染,连续3日。3日后,将大鼠随机分组,每组五只。具体地,各组的给药剂量及处理方式如下:
①未处理组:5只未摘除睾丸的健康雄性SD大鼠,体重120-150g。每日灌胃生理盐水。
②模型组:上述方法手术摘除睾丸的SD大鼠,每日灌胃生理盐水。
③丙酸睾丸素组:上述方法手术摘除睾丸的SD大鼠,每日皮下注射2mg/kg的丙酸睾丸素。
④各实施例、对比例组:取各实施例1-5、对比例1-7制备的组合物经适当稀释,每日以生药量1g/kg体重分别对每只大鼠进行灌胃给药。
注:本发明各实施例、对比例中使用的新鲜肉苁蓉的含水量高达70%-85%,故生药量的计算公式如下:
生药量(g)=新鲜肉苁蓉用量(g)×20%+其他原料药用量(g)
上述各组连续灌胃30天后,在末次给药24h之后,分别处死并解剖各组大鼠,立即称取包皮腺、精囊腺、前列腺、提肛肌的质量,计算脏器系数,结果见下表:
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注:1、实验结果为平均值±标准差;2、*代表相较模型组显著性差异<0.05,**代表相较模型组显著性差异<0.01,检验方式为t检验。
由上表所述实验结果可知,实施例1-5的组合物具有显著提高大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能。
对比例1与实施例1-5相比,中药提取物的制备中使用了石英砂而非颗粒状氯化钠。石英砂无法起到颗粒状氯化钠提升混合物盐度,从而降低植物酶活性来保护新鲜肉苁蓉中有效成分的作用,仅作为助磨剂。对比例2与实施例1-5相比,使用超细氯化钠粉末,虽然可以提升混合物盐度,但难以提供实施例1-5中颗粒状氯化钠(2-2.8mm)的助磨剂的效果。对比例3与实施例1-5相比,使用的氯化钠质量份过少,无法提供足够的提升盐度和助磨作用。由实验结果可知,对比例1-3的方法制备的中药提取物组成组合物,提升大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能不如实施例1-5提供的组合物。
对比例4与实施例1-5相比,肉苁蓉制备过程不使用氮气保护而是暴露于空气中,制备的中药提取物受到空气氧化。由实验结果可知,对比例4的方法制备的中药提取物组成组合物,提升大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能不如实施例1-5提供的组合物。
对比例5与实施例1-5相比,改用冰醋酸作为酸性物质,其对新鲜肉苁蓉和刺蒺藜粉末混合物的处理效果不如盐酸,无法做到充分提取。由实验结果可知,对比例5的方法制备的中药提取物组成组合物,提升大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能不如实施例1-5提供的组合物。
对比例6与实施例1-5相比,组合物中远志改为麦冬,其提升大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能不如实施例1-5提供的组合物。可见不是任意选择的组合物种类均可达到实施例1-5中提供的组合物的补肾强肾效果。
对比例7与实施例1-5相比,中药提取物的提取方法改为常规的水提法,由实验结果可知,对比例7的方法制备的中药提取物组成组合物,提升大鼠包皮腺、精囊腺+前列腺、提肛肌的脏器系数的功能不如实施例1-5提供的组合物。这说明,不是任意选择的中药提取物提取方式均可实现本发明实施例1-5提供的中药提取物的效果。
效果例2
提高肾阳虚雄性小鼠性功能效果的实验。
1、肾阳虚雄性小鼠动物模型的建立
体重20-25g的雄性ICR小鼠,肌肉注射氢化可的松25mg/kg体重,每天1次连续14天,即得肾阳虚雄性ICR小鼠。正常对照组的体重20-25g的雄性ICR小鼠10只每日肌肉注射0.9%的氯化钠注射液。
2、组合物对肾阳虚雄性小鼠性功能的影响
对正常对照组小鼠(肌注0.9%氯化钠注射液的小鼠)给与10mL/kg体重的去离子水灌胃。将肾阳虚雄性ICR小鼠随机进行分组,每组10只,肾阳虚组给与10mL/kg体重的去离子水灌胃;阳性对照组给与1mg/kg体重的甲基睾酮片灌胃;实施例1-5、对比例1-7组分别以生药量1g/kg体重的计量将对应的组合物或中成药颗粒(对比例3)进行灌胃给药。每日1次,连续20日,最后一次给药后进行交配能力检测。
注:本发明各实施例、对比例中使用的新鲜肉苁蓉的含水量高达70%-85%,故生药量的计算公式如下:
生药量(g)=新鲜肉苁蓉用量(g)×20%+其他原料药用量(g)
取18-22g雌性ICR小鼠,于交配实验开始前3天给每只雌鼠灌胃0.4mg/kg的己烯雌酚悬浮液,每日1次。将发情时间与交配时间同步。在最后一次给药后,选择进入发情期的雌性小鼠进行实验。夜间进行交配实验,每笼放入1只雄鼠适应环境5min,然后放入一只雌性小鼠。用红外摄像机录像20min,以测定捕捉潜伏期(雌鼠投入到第一次雄鼠捕捉次数的时间)、捕捉次数(自雌鼠投入20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数)及捕捉率(组中发生捕捉行为的雄性小鼠占组中雄性小鼠总量n的比例)。
其中,平均捕捉次数=20min内总捕捉次数÷发生捕捉行为的雄性小鼠数。实验结果见下表:
注:1、捕捉潜伏期实验结果为平均值±标准差;2、*代表相较肾阳虚组显著性差异<0.05,检验方式为t检验。
由上表实验结果可知,实施例1-5提供的组合物能够显著降低小鼠的捕捉潜伏期,提高捕捉率及平均捕捉次数,有效提升雄性小鼠的性功能。
最后应当说明的是,以上内容仅用以说明本发明的技术方案,而非对本发明保护范围的限制,本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换,均不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (12)
1.一种强肾中药提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将刺蒺藜进行粉碎过筛,得刺蒺藜粉;
S2、取新鲜肉苁蓉、氯化钠,共同捣烂、研磨,氮气保护下加热,再加入甲醇、浓盐酸、步骤S1中得到的刺蒺藜粉,回流,过滤,得粗提取液;
S3、将步骤S2中得到的粗提取液浓缩,调节pH,得浓缩液;
S4、将步骤S3中得到的浓缩液柱层析分离,洗脱液浓缩干燥,得强肾中药提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,按质量份,步骤S1中所述刺蒺藜为23-32份;步骤S2中所述新鲜肉苁蓉为100-120份。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,按质量份,步骤S2中,所述氯化钠为45-55份,所述甲醇为150-250份,所述浓盐酸为0.8-1.5份。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤S2中所述氯化钠为颗粒状氯化钠。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤S2中所述研磨的时间为10-45min,所述氮气保护下加热的温度为65-85℃,时间为20-50min。
6.权利要求1-5中任意一项所述的制备方法制得的强肾中药提取物。
7.一种补肾强肾的组合物,其特征在于,由强肾中药提取物、肉豆蔻、远志、桑椹子、炙甘草制成;
其中,所述强肾中药提取物由权利要求1-5中任意一项所述的制备方法制得。
8.根据权利要求7所述的组合物,其特征在于,由强肾中药提取物、肉豆蔻14-23质量份、远志10-20质量份、桑椹子5-9质量份、炙甘草3-8质量份制成;
其中,所述强肾中药提取物的原料药为刺蒺藜23-32质量份、新鲜肉苁蓉100-120质量份。
9.权利要求7或权利要求8中任意一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
T1、将肉豆蔻与有机溶剂混合,加热回流,过滤取滤液,浓缩,干燥,得肉豆蔻提取物;
T2、将远志、桑椹子、炙甘草干燥、煎煮,过滤、合并滤液,得总滤液;
T3、将强肾中药提取物、步骤T1中得到的肉豆蔻提取物、步骤T2得到的总滤液混合,浓缩,得组合物。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,步骤T1中,所述有机溶剂选自正己烷、环己烷、丙酮、乙醇中的至少一种。
11.一种强肾药物,其特征在于,其原料为权利要求1-5中任意一项所述制备方法制得的强肾中药提取物或者权利要求7-8中任意一项所述组合物或者权利要求9-10中任意一项所述制备方法制得的组合物。
12.权利要求1-5中任意一项所述制备方法或者权利要求6所述强肾中药提取物或者权利要求7-8中任意一项所述组合物或者权利要求9-10中任意一项所述制备方法或者权利要求11所述强肾药物在生产补肾强肾产品中的应用。
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