CN117979942A

CN117979942A - 用于递送化妆品剂的多体脂质囊泡

Info

Publication number: CN117979942A
Application number: CN202280037469.5A
Authority: CN
Inventors: 玛丽安娜·佛尔德瓦里
Original assignee: Gro Pharmaceutical Co
Current assignee: Gro Pharmaceutical Co
Priority date: 2021-03-24
Filing date: 2022-03-23
Publication date: 2024-05-03

Abstract

本发明涉及包含用于递送化妆品剂的制剂的组合物和用于递送化妆品剂的制剂的使用方法，包括阴离子聚合物诸如具有化妆品活性的透明质酸。它们可用于例如预防或改善包括皱纹在内的不良皮肤特征的外观或增强唇部丰满度的化妆品和药品中。

Description

用于递送化妆品剂的多体脂质囊泡

交叉引用

本申请要求于2021年10月25日提交的美国临时申请号63/271,645和于2021年3月24日提交的美国临时申请号63/165,603的权益，其中每一项申请均通过引用全文并入本文。

背景技术

某些化妆品剂期望递送至皮肤表面以下。存在改善对于用于各种化妆品和药物目的此类化妆品剂的递送方法和组合物的需要，包括预防、减少或消除皱纹。

发明内容

本发明涉及用于递送化妆品剂的组合物。在一些实施方案中，组合物是化妆品剂的脂质囊泡制剂，其允许在局部应用时将化妆品剂递送至皮肤表面以下。在一些实施方案中，化妆品剂是阴离子聚合物材料，诸如透明质酸，其有益于皮肤(诸如对象的唇部的皮肤)的外观。在一些实施方案中，化妆品剂是肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。在一些实施方案中，将化妆品剂递送至皮肤或周围组织的优选或预选层，诸如表皮、真皮、皮下组织或肌肉组织。

在一方面，本文提供了一种脂质囊泡组合物，包含；(a)脂质囊泡，每个所述脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层，(b)水包油乳剂，所述水包油乳剂包埋在脂质囊泡中，并通过一种或多种表面活性剂稳定；(c)阴离子聚合物材料，所述阴离子聚合物材料包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中；以及(d)一种或多种渗透增强剂，所述一种或多种渗透增强剂包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中。在一些实施方案中，所述一种或多种渗透增强剂包括具有约10或更低的亲水亲脂平衡(HLB)的一种或多种非离子表面活性剂。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包括阴离子多糖。在一些实施方案中，阴离子聚合物以约0.1mg/mL至约10mg/mL的组合物的量存在。在一些实施方案中，阴离子多糖包括透明质酸或其盐。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约500kDa的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料具有50kDa的分子量，并且其中第二阴离子聚合物材料具有从约250kDa的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物的比率是约10:1、9:1.8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、3:2、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物的比率是约1:2。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包括第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料，每种阴离子聚合物材料具有不同的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料是相同材料。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料具有不超过约75kDa的分子量并且第二阴离子聚合物材料具有大于约75kDa的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约50kDa的分子量，并且其中第二阴离子聚合物材料具有从约100kDa至约500kDa的分子量。在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括磷脂、糖脂、卵磷脂、神经酰胺、溶血卵磷脂、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、心磷脂、磷脂酸、脑苷脂或其任何组合。在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括磷脂。在一些实施方案中，组合物包含从约0.5％至约25％(w/w)的组合物的量的囊泡形成脂质。在一些实施方案中，水包油乳剂包含油组分中的甘油三酯。在一些实施方案中，甘油三酯包括中链甘油三酯。在一些实施方案中，甘油三酯以从约1％至约35％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，组合物包含固醇。在一些实施方案中，固醇以从约1％至约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，组合物包含丙二醇。在一些实施方案中，丙二醇以从约1％至约25％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，组合物包含一种或多种黏度增强剂。在一些实施方案中，一种或多种黏度增强剂以从约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，非离子表面活性剂选自脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯、聚山梨酸酯、脱水山梨糖醇酯和聚乙二醇脂肪酸酯及其组合。在一些实施方案中，脂肪醇的聚乙二醇醚包含C₈-C₂₂脂肪醇和具有从约2个至约8个乙二醇亚基的聚乙二醇基团。在一些实施方案中，脂肪醇的聚乙二醇醚包括二甘醇十六烷基醚、2-(2-十八烷氧基乙氧基)乙醇、二甘醇单油醚、聚氧乙烯(3)油醚或聚氧乙烯(5)油醚或其任何组合。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇三油酸酯、脱水山梨糖醇倍半油酸酯或脱水山梨糖醇异硬脂酸酯或其任何组合。在一些实施方案中，聚乙二醇脂肪酸酯包括PEG-8二月桂酸酯、PEG-4二月桂酸酯、PEG-4月桂酸酯、PEG-8二油酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-7椰油酸甘油酯和PEG-20杏仁甘油酯或其任何组合。在一些实施方案中，聚山梨酸酯包括聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯21、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯80、聚山梨酸酯85或其任何组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂以从约0.5％至约至约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，组合物包含阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂是单阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂包括脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂以从约1％至约20％的量存在。在一些实施方案中，阳离子渗透增强剂包括二阳离子渗透增强剂。在一些实施方案中，二阳离子渗透增强剂是双子阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，阳离子渗透剂包括阳离子聚合物。在一些实施方案中，阳离子渗透增强剂以从约0.01％至约1％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，渗透增强剂包括水杨酸酯或烟酸酯。在一些实施方案中，酯是C₁-C₆烷基酯或苄酯。在一些实施方案中，渗透增强剂包括水杨酸甲酯或烟酸苄酯。在一些实施方案中，组合物进一步包含一种或多种添加剂。在一些实施方案中，添加剂包括一种或多种的增稠剂、防腐剂、保湿剂、软化剂、湿润剂、抗菌剂或其任何组合。在一些实施方案中，组合物被配制用于局部应用于对象的皮肤。在一些实施方案中，组合物被配制为将阴离子聚合物递送至对象的皮肤的指定层。在一些实施方案中，组合物被配制为乳膏、洗剂、悬浮液或乳剂。

在一方面，本文提供了一种制备本文所提供的脂质囊泡组合物的方法，包括：a)通过将水包油乳剂的油组分与水包油乳剂的水性组分混合，制备包含阴离子聚合物材料的水包油乳剂，其中水包油乳剂的油组分和/或水性组分包含一种或多种表面活性剂；b)在水以外的可接受溶剂中溶解囊泡形成脂质；c)将水包油乳剂加入溶解的囊泡形成脂质中；以及d)在有效地形成脂质囊泡的混合条件下，将水包油乳剂与溶解的囊泡形成脂质混合，所述脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层和包埋在脂质囊泡中的水包油乳剂。

在一方面，本文提供了一种通过将化妆品剂递送至对象的皮肤表面以下来产生一种或多种化妆品效应的方法，包括向皮肤表面施用本文所提供的脂质囊泡组合物。在一些实施方案中，化妆品剂是聚阴离子填充材料。在一些实施方案中，将化妆品剂递送至对象的真皮。在一些实施方案中，一种或多种化妆品效应包括唇部丰满度、唇部体积、唇部平滑度、唇色或其组合的增强。在一些实施方案中，化妆品剂是肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。在一些实施方案中，将化妆品剂递送至对象的肌肉或皮下组织。在一些实施方案中，一种或多种化妆品效应包括预防或暂时改善一种或多种皮肤皱纹的外观。在一些实施方案中，一种或多种皮肤皱纹包括与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)、或与额肌活动相关的中度至重度前额纹。

在一方面，本文提供了一种增强个体中的唇部特征的方法，包括将组合物应用于个体的唇部，其中组合物包含含有水包油乳剂和阴离子聚合物材料的脂质囊泡。在一些实施方案中，组合物包含含有水包油乳剂和阴离子聚合物材料的多个脂质囊泡。在一些实施方案中，根据本文所描述的方法配制脂质囊泡。在一些实施方案中，脂质囊泡包含磷脂、表面活性剂、聚合物、乳化剂、渗透增强剂、甘油三酯、固醇或任何其他本文所描述的材料。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包括阴离子多糖。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料是透明质酸。在一些实施方案中，唇部特征包括唇部丰满度、唇部体积、唇部平滑度、唇色或其组合。在一些实施方案中，组合物被配制用于局部使用。在一些实施方案中，将组合物递送至个体的皮肤表面以下。在一些实施方案中，将组合物递送至个体的唇部的皮肤表面以下。

援引并入

本说明书中所提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度犹如具体地且单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请均通过引用而并入。

附图说明

本发明的新颖特征在所附权利要求中具有特殊性地阐述。通过参考以下阐述了其中使用了本发明的原理的说明性实施方案的详细描述和附图，将获得对本发明的特征和优点的更好理解，附图中：

图1A-图1C示出了多体制剂F1、F2和F3的物理化学表征。小图A示出了含有罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K的多体制剂F1、F2和F3的共聚焦显微图像；FI示踪示出囊泡中两个标记的共定位。图1B示出了多体制剂F1、F2和F3的光学显微图像。图1C示出了多体制剂F1、F2和F3的粒径分布。

图2示出了用阳离子多体制剂处理人体皮肤的共聚焦显微图像。用罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K制备阳离子多体制剂。FI示踪示出从皮肤表面到真皮上部的皮肤层中罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K的水平。每个显微照片上都示出了示踪方向的平面。

图3示出了用多体制剂处理人体皮肤的共聚焦显微图像。用罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K制备多体制剂。FI示踪示出从皮肤表面到真皮上部的皮肤层中罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K的水平。每个显微照片上都示出了示踪方向的平面。

图4示出了用多体制剂处理人体皮肤的共聚焦显微图像。用罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K制备多体制剂。FI示踪示出从皮肤表面到真皮上部的皮肤层中罗丹明红色标记的HA250K和绿色FITC-HA10K或FITC-HA50K的水平。每个显微照片上都示出了示踪方向的平面。

图5示出了用C7肽制备的多相囊泡系统和他们各自的空白(无肽)制剂的光学显微图像。棒：10μm。

图6A示出了C7肽多相囊泡递送系统的粒径分布(左三图)和ζ电位(右三图)。

图6B示出了空白多相囊泡递送系统的粒径分布(左三图)和ζ电位(右三图)。

图7示出了用于制备本文所提供的脂质囊泡的示例性的图示工作流程。

图8示出了用于制备如本文所提供的包含透明质酸(HA)的脂质囊泡的示例性的工作流程。

图9示出了将包含HA的脂质囊泡局部应用到对象唇部的结果。

具体实施方式

定义

如本文所用的，术语“包含”或其变化形式如“包括”或“含有”应理解为指示包含任何列举的特征，但不排除其他任何特征。因此，如本文所用的，术语“包含”是包含性的，并且不排除其他的、未列举的特征。在本文提供的任何组合物和方法的一些实施方案中，“包含”可以用“基本上由......组成”或“由......组成”代替。本文使用短语“基本上由......组成”来表示需要指定的特征以及实质上不影响请求保护的发明的特性或功能的那些特征。如本文所用的，术语“组成”用来指示单独存在所列举的特征。

如在本说明书及所附权利要求书中所使用的，除非指出意思相反，否则下列术语具有以下所述的含义。

“药学上可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐。任一种本文所述化合物的药学上可接受的盐意在包括任意的和所有的药学上合适的盐形式。本文所述化合物的优选的药学上可接受的盐是药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的碱加成盐。在本公开内容的某些药物实施方案中，可能利用“药学上可接受的盐”。

如本文所用的，“治疗”或“处理”或“减轻”或“改善”可互换使用。这些术语是指获得有益的或所需结果(包括但不限于治疗益处和/或预防益处)的途径。所谓“治疗益处”是指所治疗的潜在病症的消除或改善。另外，治疗益处也可以如下实现：一种或多种与该潜在病症相关的生理学症状得到根除或改善，使得在患者中观察到起色，虽然该患者仍受该潜在病症的折磨。对于预防益处，在一些实施方案中，将所述组合物施用于处于发生特定疾病的风险中的患者，或报告疾病的一种或多种生理学症状的患者，即便尚未做出该疾病的诊断。在本公开内容的某些药物实施方案中，可能利用术语“治疗”或“处理”、“应用”、“减轻”或“改善”。

如本文所用的，“保守取代”意为将一种氨基酸交换为另一种具有相似性质(诸如大小、电荷和极性)的氨基酸。取代可以是用于天然或修饰的(例如，非天然的)氨基酸。可以在保守取代中互换的非限制性实例包括以下分组：大型疏水性的(缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯基丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸)、小型非极性的(丙氨酸、甘氨酸)、极性的(丝氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、半胱氨酸、组氨酸)、带正电的(赖氨酸、精氨酸)和带负电的(谷氨酸、天冬氨酸)。

当本文中使用的％指代组分的量时，除非另有指定，否则％意在％w/w。

术语“渗透增强剂”和“渗透增强物”在本文中可互换使用。如本文所用的，它指的是一种或多种成分，其促进或增加一种或多种活性成分(例如，阴离子聚合物材料诸如透明质酸或肽拮抗剂)渗透穿过对象的一层或多层的皮肤。在一些实施方案中，渗透增强剂是表面活性剂，包括，例如，具有约10或更低的亲水亲脂平衡(HLB)的非离子表面活性剂、阳离子基团或另一种药剂(诸如萜烯、生物碱、水杨酸衍生物、烟酸盐衍生物)或其任何组合。

如本文所用的术语“多体”是指脂质囊泡(诸如双相脂质囊泡)，其包含一种或多种渗透增强剂，其在优选的实施方案中包括以协同方式工作的多种渗透增强剂。在一些实施方案中，多体包括囊泡，其中心核区室被由水性连续相和分散疏水相、亲水相或油相组成的水包油乳剂占据。在一个实施方案中，脂质囊泡的相邻的双层之间的空间还可以被乳剂占据。

如本文所用的术语“脂质囊泡组合物”是指包含一个或多个脂质囊泡(例如，多体脂质囊泡、脂质双层囊泡等)的组合物。当脂质囊泡组合物被描述为“包含”一种或多种附加组分(例如，本文所提供的阴离子聚合物材料或肽拮抗剂)时，该组合物意在以任何方式在组合物内包含该附加组分(例如，封装在脂质囊泡内)。例如，包含阴离子聚合物材料的脂质囊泡组合物可以包含封装在脂质囊泡组合物的脂质双层内的阴离子聚合物材料。

如本文所用的术语“乳剂”是指两种不混溶物质的混合物。

本文所用的术语“双层”是指由排列在两个分子层中的两亲性脂质分子组成的结构，其疏水尾位于内部并且极性头基团位于外表面上。

如本文所用的术语“局部施用”或“局部递送”意为通过向皮肤和/或经粘膜施用包含化合物的组合物或化合物来皮内、透皮和/或穿粘膜递送化合物。

如本文所用的术语“双子表面活性剂”是指含有多于一个疏水尾的表面活性剂分子，并且每个疏水尾具有亲水头，其中疏水尾或亲水头通过间隔部分连接到一起。疏水尾可以完全相同或不同。同样，亲水头可以完全相同或不同。亲水头可以是阴离子、阳离子或中性的。

术语“HLB”或“亲水亲脂平衡”值是指根据Griffin,J.Soc.Cosm.Chem.,卷5,249(1954)的标准HLB，其指示表面活性剂的亲水性和亲脂性程度。

用于皮内递送的阴离子聚合物材料诸如透明质酸的脂质囊泡组合物

在一方面，本文提供了脂质囊泡组合物，其包含阴离子聚合物材料。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含脂质囊泡，每个脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含包埋在脂质囊泡中的水包油乳剂。在一些实施方案中，水包油乳剂通过一种或多种表面活性剂稳定。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包埋在脂质双层内。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包埋在水包油乳剂中。

阴离子聚合物材料

在一些方面，本文所提供的脂质囊泡组合物包含阴离子聚合物材料。阴离子聚合物材料期望地是与对象的皮肤表面下方的递送相容的材料。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料是在递送皮肤表面下方之后充当丰盈剂或填充剂的材料。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料充当另一层皮肤(例如，表皮)的支撑物，以便校正皮肤的凹陷或恢复面部体积。

在一些实施方案中，阴离子聚合物材料包括阴离子多糖。在一些实施方案中，阴离子多糖是非硫酸化的糖胺聚糖。在一些实施方案中，阴离子聚合材料是天然存在的物质。在一些实施方案中，阴离子聚合材料天然存在于人体中。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料天然存在于人体中的结缔组织或上皮组织中。在一些实施方案中，阴离子聚合材料是透明质酸或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料可能不交联于如本文所描述的脂质囊泡组合物中。

在一些实施方案中，透明质酸是透明质酸的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，盐是钠盐、钾盐、镁盐或其任何组合。在一些实施方案中，盐是钠盐。

在一些实施方案中，阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约500kDa的分子量。在一些实施方案中，分子量是重量平均分子量。在一些实施方案中，阴离子聚合材料具有约5kDa至约500kDa的分子量。在一些实施方案中，阴离子聚合材料具有约5kDa至约10kDa、约5kDa至约20kDa、约5kDa至约50kDa、约5kDa至约100kDa、约5kDa至约200kDa、约5kDa至约250kDa、约5kDa至约300kDa、约5kDa至约400kDa、约5kDa至约500kDa、约10kDa至约20kDa、约10kDa至约50kDa、约10kDa至约100kDa、约10kDa至约200kDa、约10kDa至约250kDa、约10kDa至约300kDa、约10kDa至约400kDa、约10kDa至约500kDa、约20kDa至约50kDa、约20kDa至约100kDa、约20kDa至约200kDa、约20kDa至约250kDa、约20kDa至约300kDa、约20kDa至约400kDa、约20kDa至约500kDa、约50kDa至约100kDa、约50kDa至约200kDa、约50kDa至约250kDa、约50kDa至约300kDa、约50kDa至约400kDa、约50kDa至约500kDa、约100kDa至约200kDa、约100kDa至约250kDa、约100kDa至约300kDa、约100kDa至约400kDa、约100kDa至约500kDa、约200kDa至约250kDa、约200kDa至约300kDa、约200kDa至约400kDa、约200kDa至约500kDa、约250kDa至约300kDa、约250kDa至约400kDa、约250kDa至约500kDa、约300kDa至约400kDa、约300kDa至约500kDa或约400kDa至约500kDa的分子量。在一些实施方案中，阴离子聚合材料具有约5kDa、约10kDa、约20kDa、约50kDa、约100kDa、约200kDa、约250kDa、约300kDa、约400kDa或约500kDa的分子量。在一些实施方案中，阴离子聚合材料具有至少约5kDa、约10kDa、约20kDa、约50kDa、约100kDa、约200kDa、约250kDa、约300kDa或约400kDa的分子量。在一些实施方案中，阴离子聚合材料具有至多约10kDa、约20kDa、约50kDa、约100kDa、约200kDa、约250kDa、约300kDa、约400kDa或约500kDa的分子量。

在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以约0.01wt％至约1wt％的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以约0.01wt％至约0.02wt％、约0.01wt％至约0.05wt％、约0.01wt％至约0.08wt％、约0.01wt％至约0.1wt％、约0.01wt％至约0.15wt％、约0.01wt％至约0.2wt％、约0.01wt％至约0.25wt％、约0.01wt％至约0.3wt％、约0.01wt％至约0.4wt％、约0.01wt％至约0.5wt％、约0.01wt％至约1wt％、约0.02wt％至约0.05wt％、约0.02wt％至约0.08wt％、约0.02wt％至约0.1wt％、约0.02wt％至约0.15wt％、约0.02wt％至约0.2wt％、约0.02wt％至约0.25wt％、约0.02wt％至约0.3wt％、约0.02wt％至约0.4wt％、约0.02wt％至约0.5wt％、约0.02wt％至约1wt％、约0.05wt％至约0.08wt％、约0.05wt％至约0.1wt％、约0.05wt％至约0.15wt％、约0.05wt％至约0.2wt％、约0.05wt％至约0.25wt％、约0.05wt％至约0.3wt％、约0.05wt％至约0.4wt％、约0.05wt％至约0.5wt％、约0.05wt％至约1wt％、约0.08wt％至约0.1wt％、约0.08wt％至约0.15wt％、约0.08wt％至约0.2wt％、约0.08wt％至约0.25wt％、约0.08wt％至约0.3wt％、约0.08wt％至约0.4wt％、约0.08wt％至约0.5wt％、约0.08wt％至约1wt％、约0.1wt％至约0.15wt％、约0.1wt％至约0.2wt％、约0.1wt％至约0.25wt％、约0.1wt％至约0.3wt％、约0.1wt％至约0.4wt％、约0.1wt％至约0.5wt％、约0.1wt％至约1wt％、约0.15wt％至约0.2wt％、约0.15wt％至约0.25wt％、约0.15wt％至约0.3wt％、约0.15wt％至约0.4wt％、约0.15wt％至约0.5wt％、约0.15wt％至约1wt％、约0.2wt％至约0.25wt％、约0.2wt％至约0.3wt％、约0.2wt％至约0.4wt％、约0.2wt％至约0.5wt％、约0.2wt％至约1wt％、约0.25wt％至约0.3wt％、约0.25wt％至约0.4wt％、约0.25wt％至约0.5wt％、约0.25wt％至约1wt％、约0.3wt％至约0.4wt％、约0.3wt％至约0.5wt％、约0.3wt％至约1wt％、约0.4wt％至约0.5wt％、约0.4wt％至约1wt％或约0.5wt％至约1wt％的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以约0.01wt％、约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％、约0.5wt％或约1wt％的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以至少约0.01wt％、约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％或约0.5wt％的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以至多约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％、约0.5wt％或约1wt％的量存在。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含第三阴离子聚合物材料。

在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料是相同类型。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料的每种是阴离子多糖。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物各自是透明质酸。

在第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料是相同类型的情况下，每种阴离子聚合物材料具有不同的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料具有不超过约75kDa的分子量并且第二阴离子聚合物材料具有大于约75kDa的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料具有不超过约75kDa的分子量并且第二阴离子聚合物材料具有大于约75kDa的分子量。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物包含具有50kDa的分子量的透明质酸钠并且第二阴离子聚合物包含具有250kDa的分子量的透明质酸钠。

在脂质囊泡包含第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料的情况下，每种组分可能以不同的量包含在内。在一些实施方案中，第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料以约相同的量存在。在一些实施方案中，第一阴离子材料和第二阴离子材料的比率是约10:1、9:1.8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、3:2、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，分别包含具有50kDa和250kDa的分子量的透明质酸钠的第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物以约1:2的比率存在。在一些情况下，具有250kDa的分子量的透明质酸钠以0.1wt％存在，并且具有50kDa的分子量的透明质酸钠以0.05wt％存在。在一些实施方案中，分别包含具有50kDa和250kDa的分子量的透明质酸钠的第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物以约1:1的比率存在。在一些情况下，具有250kDa的分子量的透明质酸钠以0.1wt％存在，并且具有50kDa的分子量的透明质酸钠以0.1wt％存在。

在一些实施方案中，第一阴离子聚合物和第二阴离子聚合物的组合以约0.01wt％至约1wt％的量存在。在一些实施方案中，组合以约0.01wt％至约0.02wt％、约0.01wt％至约0.05wt％、约0.01wt％至约0.08wt％、约0.01wt％至约0.1wt％、约0.01wt％至约0.15wt％、约0.01wt％至约0.2wt％、约0.01wt％至约0.25wt％、约0.01wt％至约0.3wt％、约0.01wt％至约0.4wt％、约0.01wt％至约0.5wt％、约0.01wt％至约1wt％、约0.02wt％至约0.05wt％、约0.02wt％至约0.08wt％、约0.02wt％至约0.1wt％、约0.02wt％至约0.15wt％、约0.02wt％至约0.2wt％、约0.02wt％至约0.25wt％、约0.02wt％至约0.3wt％、约0.02wt％至约0.4wt％、约0.02wt％至约0.5wt％、约0.02wt％至约1wt％、约0.05wt％至约0.08wt％、约0.05wt％至约0.1wt％、约0.05wt％至约0.15wt％、约0.05wt％至约0.2wt％、约0.05wt％至约0.25wt％、约0.05wt％至约0.3wt％、约0.05wt％至约0.4wt％、约0.05wt％至约0.5wt％、约0.05wt％至约1wt％、约0.08wt％至约0.1wt％、约0.08wt％至约0.15wt％、约0.08wt％至约0.2wt％、约0.08wt％至约0.25wt％、约0.08wt％至约0.3wt％、约0.08wt％至约0.4wt％、约0.08wt％至约0.5wt％、约0.08wt％至约1wt％、约0.1wt％至约0.15wt％、约0.1wt％至约0.2wt％、约0.1wt％至约0.25wt％、约0.1wt％至约0.3wt％、约0.1wt％至约0.4wt％、约0.1wt％至约0.5wt％、约0.1wt％至约1wt％、约0.15wt％至约0.2wt％、约0.15wt％至约0.25wt％、约0.15wt％至约0.3wt％、约0.15wt％至约0.4wt％、约0.15wt％至约0.5wt％、约0.15wt％至约1wt％、约0.2wt％至约0.25wt％、约0.2wt％至约0.3wt％、约0.2wt％至约0.4wt％、约0.2wt％至约0.5wt％、约0.2wt％至约1wt％、约0.25wt％至约0.3wt％、约0.25wt％至约0.4wt％、约0.25wt％至约0.5wt％、约0.25wt％至约1wt％、约0.3wt％至约0.4wt％、约0.3wt％至约0.5wt％、约0.3wt％至约1wt％、约0.4wt％至约0.5wt％、约0.4wt％至约1wt％或约0.5wt％至约1wt％的量存在。在一些实施方案中，组合以约0.01wt％、约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％、约0.5wt％或约1wt％的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以至少约0.01wt％、约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％或约0.5wt％的量存在。在一些实施方案中，组合以至多约0.02wt％、约0.05wt％、约0.08wt％、约0.1wt％、约0.15wt％、约0.2wt％、约0.25wt％、约0.3wt％、约0.4wt％、约0.5wt％或约1wt％的量存在。

在一些实施方案中，其中组合物包含第一阴离子聚合物材料、第二阴离子聚合物材料和第三阴离子聚合物材料，每种阴离子聚合物材料可以是相同类型(例如，三种不同的分子量的透明质酸)。在一些实施方案中，组合物包含第一阴离子聚合物材料、第二阴离子聚合物材料和第三阴离子聚合物材料，其中第一阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约20kDa的分子量，第二阴离子聚合物具有从约20kDa至约75kDa的分子量，并且第三阴离子聚合物材料具有大于约75kDa的分子量。在一些实施方案中，三种阴离子聚合物材料中的每一种均以约相同的量存在。

在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以从约0.01mg/mL至约10mg/mL的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以约0.01mg/mL至约0.05mg/mL、约0.01mg/mL至约0.1mg/mL、约0.01mg/mL至约0.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1mg/mL、约0.01mg/mL至约1.25mg/mL、约0.01mg/mL至约1.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1.75mg/mL、约0.01mg/mL至约2mg/mL、约0.01mg/mL至约5mg/mL、约0.01mg/mL至约10mg/mL、约0.05mg/mL至约0.1mg/mL、约0.05mg/mL至约0.5mg/mL、约0.05mg/mL至约1mg/mL、约0.05mg/mL至约1.25mg/mL、约0.05mg/mL至约1.5mg/mL、约0.05mg/mL至约1.75mg/mL、约0.05mg/mL至约2mg/mL、约0.05mg/mL至约5mg/mL、约0.05mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约1.25mg/mL、约0.1mg/mL至约1.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1.75mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.5mg/mL至约1mg/mL、约0.5mg/mL至约1.25mg/mL、约0.5mg/mL至约1.5mg/mL、约0.5mg/mL至约1.75mg/mL、约0.5mg/mL至约2mg/mL、约0.5mg/mL至约5mg/mL、约0.5mg/mL至约10mg/mL、约1mg/mL至约1.25mg/mL、约1mg/mL至约1.5mg/mL、约1mg/mL至约1.75mg/mL、约1mg/mL至约2mg/mL、约1mg/mL至约5mg/mL、约1mg/mL至约10mg/mL、约1.25mg/mL至约1.5mg/mL、约1.25mg/mL至约1.75mg/mL、约1.25mg/mL至约2mg/mL、约1.25mg/mL至约5mg/mL、约1.25mg/mL至约10mg/mL、约1.5mg/mL至约1.75mg/mL、约1.5mg/mL至约2mg/mL、约1.5mg/mL至约5mg/mL、约1.5mg/mL至约10mg/mL、约1.75mg/mL至约2mg/mL、约1.75mg/mL至约5mg/mL、约1.75mg/mL至约10mg/mL、约2mg/mL至约5mg/mL、约2mg/mL至约10mg/mL或约5mg/mL至约10mg/mL的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以约0.01mg/mL、约0.05mg/mL、约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约1.25mg/mL、约1.5mg/mL、约1.75mg/mL、约2mg/mL、约5mg/mL或约10mg/mL的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以至少约0.01mg/mL、约0.05mg/mL、约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约1.25mg/mL、约1.5mg/mL、约1.75mg/mL、约2mg/mL或约5mg/mL的量存在。在一些实施方案中，阴离子聚合物材料以至多约0.05mg/mL、约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约1.25mg/mL、约1.5mg/mL、约1.75mg/mL、约2mg/mL、约5mg/mL或约10mg/mL的量存在。

囊泡形成脂质

在一些实施方案中，囊泡组合物包含一种或多种囊泡形成脂质。囊泡形成脂质作用于封装水包油乳剂的部分。在一些实施方案中，这允许水包油乳剂在一段时间内保持稳定。

囊泡形成脂质可以是任何适合此类目的的脂质。在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括磷脂、糖脂、卵磷脂、神经酰胺、溶血卵磷脂、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、心磷脂、磷脂酸、脑苷脂或其任何组合。在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括脂质的组合。

在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括磷脂。在一些实施方案中，磷脂是天然存在的、半合成或合成制备或其混合。在一个实施方案中，磷脂是甘油的一种或多种酯，具有脂肪添加物和磷酸的一个或两个(相等或不同)残基，其中磷酸残基又与亲水基团结合，诸如，例如，胆碱(磷脂酰胆碱--PC)、丝氨酸(磷脂酰丝氨酸--PS)、甘油(磷脂酰甘油--PG)、乙醇胺(磷脂酰乙醇胺--PE)或肌醇(磷脂酰肌醇)。仅具有一个脂肪酸残基的磷脂的酯在本领域通常被称为磷脂的“溶血”形式或“溶血磷脂”。磷脂中存在的脂肪酸残基一般是长链脂肪族酸，一般含有12至24个碳原子或14至22个碳原子；脂肪族链可以含有一个或多个不饱和或完全饱和。阴离子聚合物材料中包含的合适脂肪酸的实例是，例如，月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸、油酸、亚油酸和亚麻酸。可以采用饱和脂肪酸诸如肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和花生酸。

在一些实施方案中，磷脂包含一种或多种天然磷脂。在一些实施方案中，磷脂包含一种或多种半合成磷脂。在一些实施方案中，半合成磷脂是天然存在的卵磷脂的部分或完全氢化衍生物。在一些实施方案中，磷脂包括磷脂酰胆碱、乙基磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸或鞘磷脂的脂肪酸二酯。在一些实施方案中，磷脂包括氢化磷脂酰胆碱(例如，Sunlipon 90H)。在一些实施方案中，磷脂是，例如，二月桂酰基-磷脂酰胆碱(DLPC)、二肉豆蔻酰基-磷脂酰胆碱(DMPC)、二棕榈酰基-磷脂酰胆碱(DPPC)、二花生酰基-磷脂酰胆碱(DAPC)、二硬脂酰基-磷脂酰胆碱(DSPC)、二油酰基-磷脂酰胆碱(DOPC)、1,2二硬脂酰基-sn-丙三基-3-乙基磷酸胆碱(乙基-DSPC)、二十五烷酰基-磷脂酰胆碱(DPDPC)、1-十四酰基-2-十六烷酰基-磷脂酰胆碱(MPPC)、1-十六烷酰基-2-十四酰基-磷脂酰胆碱(PMPC)、1-十六烷酰基-2-十八烷酰基-磷脂酰胆碱(PSPC)、1-十八烷酰基-2-十六烷酰基-磷脂酰胆碱(SPPC)、1-十六烷酰基-2-油烯基磷脂酰胆碱(POPC)、1-油烯基-2-十六烷酰基-磷脂酰胆碱(OPPC)、二月桂酰基磷脂酰甘油(DLPG)及其碱金属盐、二花生酰基磷脂酰甘油(DAPG)及其碱金属盐、二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油(DMPG)及其碱金属盐、二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)及其碱金属盐、二硬脂酰基磷脂酰甘油(DSPG)及其碱金属盐、二油酰基-磷脂酰甘油(DOPG)及其碱金属盐、二肉豆蔻酰基磷脂酸(DMPA)及其碱金属盐、二棕榈酰基磷脂酸(DPPA)及其碱金属盐、二硬脂酰基磷脂酸(DSPA)、二花生酰基磷脂酸(DAPA)及其碱金属盐、二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酰基磷脂酰-乙醇胺(DSPE)、二油稀基磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二花生酰基磷脂酰乙醇胺(DAPE)、二亚油烯基磷脂酰乙醇胺(DLPE)、二肉豆蔻酰基磷脂酰丝氨酸(DMPS)、二花生酰基磷脂酰丝氨酸(DAPS)、二棕榈酰基磷脂酰丝氨酸(DPPS)、二硬脂酰基磷脂酰丝氨酸(DSPS)、二油酰基磷脂酰丝氨酸(DOPS)、二棕榈酰基鞘磷脂(DPSP)和二硬脂酰基鞘磷脂(DSSP)、二月桂酰基-磷脂酰肌醇(DLPI)、二花生酰基磷脂酰肌醇(DAPI)、二肉豆蔻酰基磷脂酰肌醇(DMPI)、二棕榈酰基磷脂酰肌醇(DPPI)、二硬脂酰基磷脂酰肌醇(DSPI)、二油酰基-磷脂酰肌醇(DOPI)。

在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约0.5％至约25％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约0.5％至约2％、约0.5％至约5％、约0.5％至约8％、约0.5％至约10％、约0.5％至约12％、约0.5％至约15％、约0.5％至约20％、约0.5％至约25％、约2％至约5％、约2％至约8％、约2％至约10％、约2％至约12％、约2％至约15％、约2％至约20％、约2％至约25％、约5％至约8％、约5％至约10％、约5％至约12％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约8％至约10％、约8％至约12％、约8％至约15％、约8％至约20％、约8％至约25％、约10％至约12％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约12％至约15％、约12％至约20％、约12％至约25％、约15％至约20％、约15％至约25％或约20％至约25％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以至少约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％或约20％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以至多约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％(w/w)的组合物的量存在。

在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约5％至约15％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约5％至约8％、约5％至约9％、约5％至约10％、约5％至约11％、约5％至约12％、约5％至约13％、约5％至约14％、约5％至约15％、约8％至约9％、约8％至约10％、约8％至约11％、约8％至约12％、约8％至约13％、约8％至约14％、约8％至约15％、约9％至约10％、约9％至约11％、约9％至约12％、约9％至约13％、约9％至约14％、约9％至约15％、约10％至约11％、约10％至约12％、约10％至约13％、约10％至约14％、约10％至约15％、约11％至约12％、约11％至约13％、约11％至约14％、约11％至约15％、约12％至约13％、约12％至约14％、约12％至约15％、约13％至约14％、约13％至约15％或约14％至约15％的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以约5％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％或约15％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以至少约5％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％或约14％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，囊泡形成脂质以至多约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％或约15％(w/w)的组合物的量存在。

在一些实施方案中，组合物包含短链多元醇。在一些实施方案中，短链多元醇作用于增强所得脂质囊泡的稳定性。在一些实施方案中，短链多元醇是包含两个或三个醇基基团的C₂-C₄多元醇。在一些实施方案中，短链多元醇是丙二醇。在一些实施方案中，组合物包含丙二醇。

在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％至约25％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％至约2％、约0.5％至约5％、约0.5％至约8％、约0.5％至约10％、约0.5％至约12％、约0.5％至约15％、约0.5％至约20％、约0.5％至约25％、约2％至约5％、约2％至约8％、约2％至约10％、约2％至约12％、约2％至约15％、约2％至约20％、约2％至约25％、约5％至约8％、约5％至约10％、约5％至约12％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约8％至约10％、约8％至约12％、约8％至约15％、约8％至约20％、约8％至约25％、约10％至约12％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约12％至约15％、约12％至约20％、约12％至约25％、约15％至约20％、约15％至约25％或约20％至约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至少约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％或约20％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至多约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％至约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％至约2％、约1％至约4％、约1％至约6％、约1％至约8％、约1％至约10％、约2％至约4％、约2％至约6％、约2％至约8％、约2％至约10％、约4％至约6％、约4％至约8％、约4％至约10％、约6％至约8％、约6％至约10％或约8％至约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％、约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至少约1％、约2％、约4％、约6％或约8％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至多约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以与囊泡形成脂质约相同的量存在。在一些实施方案中，组合物中丙二醇与囊泡形成脂质泡的比率为约2:1至约1:2(w/w)。

油相

本文所提供的脂质囊泡组合物包含水包油乳剂。选择油组分使得材料在操作温度(例如，室温)下是液体并且与水不混溶。

任何合适的油都可以被用作油相。在一些实施方案中，油包含天然存在的油。在一些实施方案中，天然存在的油衍生自一种或多种植物或植物部位(例如，种子或坚果)。在一些实施方案中，油是天然存在的油诸如橄榄油、蔬菜油、葵花籽油或其他相似的植物衍生的油。

在一些实施方案中，油相选自蔬菜油、甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯、硅酮流体、矿物油及其组合。

在一些实施方案中，油包含硅油或衍生物，诸如二甲聚硅氧烷。在一些实施方案中，硅油包含硅氧烷聚合物。在一些实施方案中，硅氧烷聚合物包含C₁-C₃取代基。在一些实施方案中，硅氧烷是聚二甲基硅氧烷(PDMS)。在一些实施方案中，油是包含硅油(例如，二甲聚硅氧烷)作为较小组分的混合物。在一些实施方案中，掺入硅油以便增强所得的组合物的触感或作为保湿剂。在一些实施方案中，油包含不超过约5％、不超过约4％、不超过约3％、不超过约2％或不超过约1％(w/w)的组合物的量的硅油。在一些实施方案中，硅油以从约0.1％至约2％的量存在。在一些实施方案中，硅油以从约0.1％至约0.5％、0.1％至约0.7％、0.1％至约1％、0.1％至约1.5％、0.15％至约2％、0.5％至约0.7％、0.5％至约1％、0.5％至约1.5％、0.5％至约2％、0.7％至约1％、0.7％至约1.5％、0.7％至约2％、1％至约1.5％或1％至约2％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，硅油以约0.1％、0.5％、0.7％、1％、1.5％或2％的组合物的量存在。

在一些实施方案中，油以约1％至约35％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，油以约1％至约5％、约1％至约10％、约1％至约15％、约1％至约20％、约1％至约25％、约1％至约30％、约1％至约35％、约5％至约10％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约5％至约30％、约5％至约35％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约10％至约30％、约10％至约35％、约15％至约20％、约15％至约25％、约15％至约30％、约15％至约35％、约20％至约25％、约20％至约30％、约20％至约35％、约25％至约30％、约25％至约35％或约30％至约35％的量存在。在一些实施方案中，油以约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。在一些实施方案中，油以至少约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％或约30％的量存在。在一些实施方案中，油以至多约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。在一些实施方案中，油以约5％至约15％的量存在。在一些实施方案中，油以约5％至约8％、约5％至约9％、约5％至约10％、约5％至约11％、约5％至约12％、约5％至约13％、约5％至约14％、约5％至约15％、约8％至约9％、约8％至约10％、约8％至约11％、约8％至约12％、约8％至约13％、约8％至约14％、约8％至约15％、约9％至约10％、约9％至约11％、约9％至约12％、约9％至约13％、约9％至约14％、约9％至约15％、约10％至约11％、约10％至约12％、约10％至约13％、约10％至约14％、约10％至约15％、约11％至约12％、约11％至约13％、约11％至约14％、约11％至约15％、约12％至约13％、约12％至约14％、约12％至约15％、约13％至约14％、约13％至约15％或约14％至约15％的量存在。在一些实施方案中，油以约5％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％或约15％的量存在。在一些实施方案中，油以至少约5％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％或约14％的量存在。在一些实施方案中，油以至多约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％或约15％的量存在。

在一些实施方案中，油包含一种或多种甘油三酯。在一些实施方案中甘油三酯是中链甘油三酯。在一些实施方案中，中链甘油三酯包括具有C₆-C₁₂的链长的脂肪酸酯。

在一些实施方案中，甘油三酯以约1％至约35％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以约1％至约5％、约1％至约10％、约1％至约15％、约1％至约20％、约1％至约25％、约1％至约30％、约1％至约35％、约5％至约10％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约5％至约30％、约5％至约35％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约10％至约30％、约10％至约35％、约15％至约20％、约15％至约25％、约15％至约30％、约15％至约35％、约20％至约25％、约20％至约30％、约20％至约35％、约25％至约30％、约25％至约35％或约30％至约35％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以至少约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％或约30％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以至多约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。

在一些实施方案中，组合物的脂质囊泡的油相和/或脂质囊泡部分包含固醇。在一些实施方案中，固醇是胆固醇。在一些实施方案中，胆固醇可以是植物衍生的胆固醇。在一些实施方案中，植物衍生的胆固醇可以是或任何其他植物衍生的胆固醇(例如，Avanti#700100)或其任何组合。在一些实施方案中，固醇可以是植物固醇或其衍生物。在一些实施方案中，植物固醇或其衍生物可以是植物固醇MM、Advasterol^TM 90 IP或95 IP F、NET固醇-ISO、油菜固醇、谷固醇700095、羊毛固醇-95、菜子固醇或其任何组合。

在一些实施方案中，固醇以约1％至约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，固醇以约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1％至约3％、约1％至约4％、约1％至约5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％、约1.5％至约3％、约1.5％至约4％、约1.5％至约5％、约2％至约2.5％、约2％至约3％、约2％至约4％、约2％至约5％、约2.5％至约3％、约2.5％至约4％、约2.5％至约5％、约3％至约4％、约3％至约5％或约4％至约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，固醇以约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约4％或约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，固醇以至少约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％或约4％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，固醇以至多约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约4％或约5％(w/w)的组合物的量存在。

渗透增强剂

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含一种或多种渗透增强剂。当应用于个体的皮肤时，渗透增强剂作用于增加阴离子聚合物材料渗透穿过一层或多层皮肤的量。

在一些实施方案中，渗透增强剂包含在组合物的水包油乳剂中。在一些实施方案中，渗透增强剂包含在组合物的脂质双层中。

可以采用许多类型的渗透增强剂。在一些实施方案中，渗透增强剂包括离子表面活性剂、非离子表面活性剂或其组合。

在一些实施方案中，渗透增强剂包括非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是单一非离子表面活性剂。在一些实施方案中，渗透增强剂是至少2种、3种、4种或更多种非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是2种非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是3种非离子表面活性剂的组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合选自脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯、聚山梨酸酯、脱水山梨糖醇酯和聚乙二醇脂肪酸酯及其组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含脂肪醇的聚乙二醇(PEG)醚。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚包含从约2个至约8个PEG基团和C₁₂-C₂₂脂肪醇。在一些实施方案中，脂肪醇的聚乙二醇醚包括二甘醇十六烷基醚、2-(2-十八烷氧基乙氧基)乙醇、二甘醇单油醚、聚氧乙烯(2)油醚、聚氧乙烯(3)油醚或聚氧乙烯(5)油醚或其任何组合。在一些实施方案中，脂肪醇的聚乙二醇醚包含2-(2-十八烷氧基乙氧基)乙醇。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚是超精炼的O2或其衍生物。

在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以从约0.5％至约10％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％或约0.05％至约3％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含脱水山梨糖醇酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯是脂肪酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯是C₁₂-C₂₂脂肪酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇三油酸酯、脱水山梨糖醇倍半油酸酯或脱水山梨糖醇异硬脂酸酯或其任何组合。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单棕榈酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单硬脂酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇三油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇倍半油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇异硬脂酸酯。

在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以不超过约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以从约0.5％至约5％、约0.5％至约4％或约0.5％至约3％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含聚山梨酸酯。在一些实施方案中，聚山梨酸酯包含聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯21、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯80、聚山梨酸酯85或其任何组合。在一些实施方案中，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯80。在一些实施方案中，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯20。

在一些实施方案中，聚山梨酸酯以不超过约5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以从约0.5％至约5％、约0.5％至约4％或约0.5％至约3％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含聚乙二醇(PEG)脂肪酸酯。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯是约2-8个亚基的PEG链，该亚基包含附着到每个末端羟基的C₈-C₂₂脂肪酸以形成脂肪酸酯。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯包含PEG-8二月桂酸酯、PEG-4二月桂酸酯、PEG-4月桂酸酯、PEG-8二油酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-7甘油椰油酸酯和PEG-20杏仁甘油酯或其任何组合。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯是PEG-4二月桂酸酯。

在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以不超过约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以从约0.5％至约5％、约0.5％至约4％或约0.5％至约3％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以约0.5％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂具有约10或更少的疏水亲脂平衡(HLB)。在一些实施方案中，非离子表面活性剂可以是聚乙二醇脂肪酸酯GMS 40。在一些实施方案中，组合物包含多种非离子表面活性剂，每种具有约10或更少的HLB。在一些实施方案中，具有10或更少的HLB的非离子表面活性剂选自下表1或其任何组合。

表1

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在一些实施方案中，非离子表面活性剂具有约10或更多的疏水亲脂平衡(HLB)。在一些实施方案中，组合物包含多种非离子表面活性剂，每种具有约10或更多的HLB。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合以约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合以约0.5％至约1％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约3％、约0.5％至约4％、约0.5％至约5％、约0.5％至约6％、约0.5％至约7％、约0.5％至约8％、约0.5％至约10％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约3％、约1％至约4％、约1％至约5％、约1％至约6％、约1％至约7％、约1％至约8％、约1％至约10％、约1.5％至约2％、约1.5％至约3％、约1.5％至约4％、约1.5％至约5％、约1.5％至约6％、约1.5％至约7％、约1.5％至约8％、约1.5％至约10％、约2％至约3％、约2％至约4％、约2％至约5％、约2％至约6％、约2％至约7％、约2％至约8％、约2％至约10％、约3％至约4％、约3％至约5％、约3％至约6％、约3％至约7％、约3％至约8％、约3％至约10％、约4％至约5％、约4％至约6％、约4％至约7％、约4％至约8％、约4％至约10％、约5％至约6％、约5％至约7％、约5％至约8％、约5％至约10％、约6％至约7％、约6％至约8％、约6％至约10％、约7％至约8％、约7％至约10％或约8％至约10％的量存在。在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合以约0.5％、约0.7％、约1％、约1.5％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合以至少约0.5％、约0.7％、约1％、约1.5％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％的量存在。在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合以至多约0.7％、约1％、约1.5％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％或约10％的量存在。

在一些实施方案中，组合物包含水包油乳剂、脂质双层或两者中的非离子表面活性剂。在一些实施方案中，组合物包含水包油乳剂中的非离子表面活性剂。在一些实施方案中，组合物包含脂质双层中的非离子表面活性剂。在一些实施方案中，组合物包含水包油乳剂和脂质双层中的非离子表面活性剂，其中组合物包含两种或更多不同的非离子表面活性剂。

在一些实施方案中，渗透增强剂包括水杨酸酯或烟酸酯。在一些实施方案中，酯是C₁-C₆烷基酯或苄酯。在一些实施方案中，渗透增强剂包括水杨酸甲酯或烟酸苄酯。在一些实施方案中，渗透增强剂是烟酸酯，其以不超过约0.1％、0.5％、1％、2％或3％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，烟酸酯以从约0.1％至约3％、约0.1％至约2％或约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，烟酸苄酯以约0.5％的量存在。

阳离子表面活性剂

在一些实施方案中，组合物包含离子表面活性剂。在一些实施方案中，离子表面活性剂是阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂是单阳离子表面活性剂、二阳离子表面活性剂或多阳离子表面活性剂。

在一些实施方案中，在形成本文所提供的最终脂质囊泡组合物之前(例如，在加入囊泡形成脂质前)，在组合物中使用单阳离子表面活性剂以形成亚微米乳剂。在一些实施方案中，单阳离子表面活性剂是净单阳离子(例如，包含两个侧链的磷酸盐，每个侧链具有单一阳离子官能度，其通过磷酸阴离子部分地中和)。

在一些实施方案中，单阳离子表面活性剂是脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯。脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯是磷脂，该磷脂包含至少一个连接到季铵基团的丙二醇磷酸酯，该季铵基团又与脂肪酸酰胺连接。脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯的一个非限制性实例是亚油酰胺丙基PG-二甲基氯化铵磷酸酯。与不同的脂肪酸胺基团相连的相似化合物也是已知的。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯具有结构：

其中n是从1至3的整数，m是从0至2的整数，其中m和n的和是3；

X是选自质子、钠、钾、镁和钙的阳离子；以及R是C₈-C₃₀脂肪酸的酰基基团。

在一些实施方案中，脂肪酸是C₁₂-C₂₄脂肪酸。在一些实施方案中，脂肪酸是不饱和脂肪酸。在一些实施方案中，脂肪酸是亚油酸。在一些实施方案中，单阳离子渗透增强剂是亚有酰胺丙基PG-二甲基氯化铵磷酸酯(例如，Arlasilk^TM PTM，Arlasilk^TM EFA)。

在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％至约2％、约1％至约3％、约1％至约4％、约1％至约5％、约1％至约6％、约1％至约7％、约1％至约8％、约1％至约9％、约1％至约10％、约2％至约3％、约2％至约4％、约2％至约5％、约2％至约6％、约2％至约7％、约2％至约8％、约2％至约9％、约2％至约10％、约3％至约4％、约3％至约5％、约3％至约6％、约3％至约7％、约3％至约8％、约3％至约9％、约3％至约10％、约4％至约5％、约4％至约6％、约4％至约7％、约4％至约8％、约4％至约9％、约4％至约10％、约5％至约6％、约5％至约7％、约5％至约8％、约5％至约9％、约5％至约10％、约6％至约7％、约6％至约8％、约6％至约9％、约6％至约10％、约7％至约8％、约7％至约9％、约7％至约10％、约8％至约9％、约8％至约10％或约9％至约10％的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％、约9.5％或约10％的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以至少约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％或约9.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以至多约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％、约9.5％或约10％的量存在。

在一些实施方案中，阳离子表面活性剂是二阳离子渗透增强剂。在一些实施方案中，二阳离子表面活性剂是双子表面活性剂。在一些实施方案中，双子表面活性剂是包含由式A-N(R)₂-B-N(R)₂-C表示的两个季胺的表面活性剂，其中A和C中的每个独立地是任选地取代的C₆-C₂₄烷基基团，每个R独立地是任选地取代的C₁-C₆烷基并且B是任选地取代的C₂-C₁₀亚烷基链。在一些实施方案中，A和C中的每个是C₆-C₂₄饱和或不饱和烃。在一些实施方案中，A和C中的每个是C₆-C₂₄饱和烃。在一些实施方案中，每个R是甲基。在一些实施方案中，B是饱和C₂-C₁₀亚烷基链。在一些情况下，双子表面活性剂遵循命名法X-Y-Z，其中X、Y和Z中的每个是代表每个取代基的碳原子数的整数，并且Y是两个季胺之间的间隔物。因此，例如，12-3-12双子表面活性剂具有式CH₃(CH₂)₁₁-[N⁺(CH₃)₂]-(CH₂)₃-[N⁺(CH₃)₂]-(CH₂)₁₁CH₃。在一些实施方案中，双子表面活性剂是10-2-10、12-2-12、14-2-14、10-3-10、12-3-12、14-3-14、10-4-10、12-4-12或14-4-14双子表面活性剂。在一些实施方案中，双子表面活性剂是12-3-12双子表面活性剂。

在一些实施方案中，双子表面活性剂以约0.1％至约1.5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，双子表面活性剂以约0.1％至约0.2％、约0.1％至约0.3％、约0.1％至约0.5％、约0.1％至约0.7％、约0.1％至约0.9％、约0.1％至约1％、约0.1％至约1.2％、约0.1％至约1.5％、约0.2％至约0.3％、约0.2％至约0.5％、约0.2％至约0.7％、约0.2％至约0.9％、约0.2％至约1％、约0.2％至约1.2％、约0.2％至约1.5％、约0.3％至约0.5％、约0.3％至约0.7％、约0.3％至约0.9％、约0.3％至约1％、约0.3％至约1.2％、约0.3％至约1.5％、约0.5％至约0.7％、约0.5％至约0.9％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.7％至约0.9％、约0.7％至约1％、约0.7％至约1.2％、约0.7％至约1.5％、约0.9％至约1％、约0.9％至约1.2％、约0.9％至约1.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％或约1.2％至约1.5％的量存在。在一些实施方案中，双子表面活性剂以约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.5％、约0.7％、约0.9％、约1％、约1.2％或约1.5％的量存在。在一些实施方案中，双子表面活性剂以至少约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.5％、约0.7％、约0.9％、约1％或约1.2％的量存在。在一些实施方案中，双子表面活性剂以至多约0.2％、约0.3％、约0.5％、约0.7％、约0.9％、约1％、约1.2％或约1.5％的量存在。

在一些实施方案中，阳离子表面活性剂包含多阳离子基团。在一些实施方案中，多阳离子基团是聚合物，其中聚合物的每个单元结构包含带电基团(例如，氨基基团)。在一些实施方案中，多阳离子基团是聚赖氨酸。在一些实施方案中，多阳离子基团是聚精氨酸。

在一些实施方案中，聚赖氨酸具有从约1kDa至约10kDa、从约1kDa至约5kDa或从约3kDa至约5kDa的分子量。在一些实施方案中，聚赖氨酸以从约0.01％至约1％、从约0.01％至约0.5％、从约0.01％至约0.2％、从约0.05％至约1％、从约0.05％至约0.5％或从约0.05％至约0.2％(w/w)的组合物的量存在。

附加组分

在一些实施方案中，囊泡组合物包含附加组分。在一些实施方案中，这些附加组分改善囊泡的一种或多种性质，而没有明显改变阴离子聚合物材料的递送。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含一种或多种黏度增强剂。在一些实施方案中，黏度增强剂使组合物增稠，用于增加囊泡组合物的稳定性和/或使用者的触感。在一些实施方案中，黏度增强剂还充当表面活性剂。在一些实施方案中，黏度增强剂包含脂肪醇、蜡、甘油的脂肪酯中的一种或多种或其任何组合。在一些实施方案中，脂肪醇是C₈-C₂₀脂肪醇。在一些实施方案中，脂肪醇是鲸蜡醇。在一些实施方案中，鲸蜡醇是十八烷醇C95。在一些实施方案中，蜡是天然存在的或合成的蜡。在一些实施方案中，蜡是蜂蜡。在一些实施方案中，蜡是合成蜂蜡。在一些实施方案中，合成蜂蜡是syncrowax^TM BB4。在一些实施方案中，合成蜂蜡是非动物衍生的蜂蜡。在一些实施方案中非动物衍生的蜂蜡是syncrowax^TMSB1。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯是单酯。在一些实施方案中，单酯是C₈-C₂₄脂肪酸的酯。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯是单硬脂酸甘油酯。

在一些实施方案中，黏度增强剂以从约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，黏度增强剂以从约0.5％至约5％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％、约0.5％至约3％或从约0.5％至约2％的量存在。在一些实施方案中，黏度增强剂包含不超过约2％的量的脂肪醇、不超过约2％的量的蜡和不超过约5％的量的甘油的脂肪酯。在一些实施方案中，脂肪醇以从约0.1至约1.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇以约0.4％的量存在。在一些实施方案中，蜡以从约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，蜡以约0.2％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以从约0.5％至约2％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以约0.8％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以约0.9％的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含一种或多种的增稠剂、防腐剂、保湿剂、软化剂、湿润剂或其任何组合。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含增稠剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含防腐剂。在一些实施方案中，防腐剂是化妆品防腐剂，诸如PE 9010或/>在一些实施方案中，防腐剂包含苯氧乙醇/乙基己基甘油混合物。在一些实施方案中，防腐剂包含辛酰异羟肟酸、辛甘醇和甘油的混合物。在一些实施方案中，防腐剂以不超过约2％、不超过约1.5％或不超过约1％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以从约0.1％至约2％、从约0.1％至约1.5％或从约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％或1.5％的量存在。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含保湿剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含软化剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含湿润剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含香精(例如，欧薄荷)。在一些实施方案中，香精(例如，欧薄荷)以约0.01％至约0.1％的量存在。在一些实施方案中，香精(例如，欧薄荷)以约0.05％的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含抗菌剂。在一些实施方案中，抗菌剂是对羟基苯甲酸酯。在一些实施方案中，抗菌剂是对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或其组合。在一些实施方案中，抗菌剂以不超过约1％、不超过约0.9％、不超过约0.8％、不超过约0.7％、不超过约0.6％、不超过约0.5％、不超过约0.4％、不超过约0.3％、不超过约0.2％(w/w)的组合物的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含增稠剂。在一些实施方案中，增稠剂是惰性聚合物材料。在一些实施方案中，增稠剂是硅氧烷聚合物。在一些实施方案中，增稠剂是聚二甲基硅氧烷(PDMS)。在一些实施方案中，PDMS以不超过约5％、不超过约4％、不超过约3％、不超过约2％或不超过约1％的量存在。在一些实施方案中，PDMS以从约0.1％至约2％(w/w)的组合物的量存在。

在一些实施方案中，组合物进一步包含湿润剂。在一些实施方案中，组合物包含甘油。在一些实施方案中，甘油以从约0.5％至约25％、约0.5％至约20％、约0.5％至约15％或约0.5％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％至约2％、约1％至约4％、约1％至约6％、约1％至约8％、约1％至约10％、约2％至约4％、约2％至约6％、约2％至约8％、约2％至约10％、约4％至约6％、约4％至约8％、约4％至约10％、约6％至约8％、约6％至约10％或约8％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％、约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以至少约1％、约2％、约4％、约6％或约8％的量存在。在一些实施方案中，甘油以至多约2％、约4％、约6％、约8％或约10％(w/w)的组合物的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物包含防腐剂。在一些实施方案中，防腐剂包含苯氧乙醇/乙基己基甘油混合物。在一些实施方案中，防腐剂包含辛酰异羟肟酸、辛甘醇和甘油的混合物。在一些实施方案中，防腐剂是化妆品防腐剂，诸如PE 9010或在一些实施方案中，防腐剂以不超过约2％、不超过约1.5％或不超过约1％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以从约0.1％至约2％、从约0.1％至约1.5％或从约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％或1.5％的量存在。

在一些实施方案中，附加组分包含纯化水。在一些实施方案中，纯化水以约50％至80％(w/w)的量存在。在一些实施方案中，纯化水以约50％至约55％、约50％至约60％、约50％至约65％、约50％至约70％、约50％至约75％、约50％至约80％、约55％至约60％、约55％至约65％、约55％至约70％、约55％至约75％、约55％至约80％、约60％至约65％、约60％至约70％、约60％至约75％、约60％至约80％、约65％至约70％、约65％至约75％、约65％至约80％、约70％至约75％、约70％至约80％或约75％至约80％的量存在。在一些实施方案中，纯化水以约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％或约80％的量存在。在一些实施方案中，纯化水以至少约50％、约55％、约60％、约65％、约70％或约75％的量存在。在一些实施方案中，纯化水以至多约55％、约60％、约65％、约70％、约75％或约80％的量存在。

用于递送阴离子聚合物材料的示例性组合物

下面提供了用于递送阴离子聚合物材料的示例性组合物。下面的实施方案可以额外包含本文所提供的任何其他成分或组分。

透明质酸组合物1：在一方面，本文提供了一种脂质囊泡组合物，其包含

(a)脂质囊泡，每个脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层，其中囊泡形成脂质以从约5％至约20％的量存在；

(b)水包油乳剂，其包埋在脂质囊泡中，并通过一种或多种表面活性剂稳定，其中一种或多种表面活性剂包括阳离子表面活性剂；

(c)透明质酸，其以从约0.1mg/mL至约10mg/mL的量包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中。

在一些实施方案中，油组分以从约2.5％至约20％的量存在。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.01mg/mL至约0.05mg/mL、约0.01mg/mL至约0.1mg/mL、约0.01mg/mL至约0.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1mg/mL、约0.01mg/mL至约1.25mg/mL、约0.01mg/mL至约1.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1.75mg/mL、约0.01mg/mL至约2mg/mL、约0.01mg/mL至约5mg/mL、约0.01mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约1.25mg/mL、约0.1mg/mL至约1.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1.75mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.5mg/mL至约1mg/mL、约1mg/mL至约1.5mg/mL、约1mg/mL至约1.75mg/mL、约1mg/mL至约2mg/mL、约1mg/mL至约5mg/mL、约1mg/mL至约10mg/mL的量的透明质酸。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.01mg/mL、约0.05mg/mL、约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约1.25mg/mL、约1.5mg/mL、约1.75mg/mL、约2mg/mL、约5mg/mL或约10mg/mL的量的透明质酸。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含从约0.5％至约5％的量的黏度增强剂。在一些实施方案中，黏度增强剂包含脂肪醇、蜡、甘油的脂肪酯中的一种或多种或其任何组合。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含从约0.1％至约3％的量的非离子表面活性剂。在一些实施方案中，非离子表面活性剂是脂肪醇的PEG醚。

在一些实施方案中，阳离子表面活性剂是脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂以从约1％至约10％的量存在。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中的从约0.1mg/mL至约50mg/mL的量的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约3mg/mL、约0.1mg/mL至约4mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约20mg/mL、约0.1mg/mL至约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL或约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL或约5mg/mL的量的肽拮抗剂。

透明质酸组合物2：在一方面，本文提供了一种脂质囊泡组合物，其包含

(a)脂质囊泡，每个脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层，其中囊泡形成脂质以从约2％至约20％的量存在；

(b)水包油乳剂，其包埋在脂质囊泡中并通过一种或多种表面活性剂稳定；

(c)透明质酸，其以从约0.1mg/mL至约10mg/mL的量包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中，

其中组合物进一步包含：

从约0.01％至约0.5％的量的双子表面活性剂；以及

从约0.1％至约2％的量的聚山梨酸酯。

在一些实施方案中，油组分以从约2.5％至约20％的量存在。

在一些实施方案中，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯80。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中的约从约0.1mg/mL至约50mg/mL的量的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约3mg/mL、约0.1mg/mL至约4mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约20mg/mL、约0.1mg/mL至约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL或约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL或约5mg/mL的量的肽拮抗剂。

用于皮内递送的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体拮抗剂肽的脂质囊泡组合物

在一方面，本文提供了脂质囊泡组合物，其包含肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含脂质囊泡，每个脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含包埋在脂质囊泡中的水包油乳剂。在一些实施方案中，水包油乳剂通过一种或多种表面活性剂稳定。在一些实施方案中，肽拮抗剂包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中。在一些实施方案中，肽拮抗剂包埋在脂质双层中。在一些实施方案中，肽拮抗剂包埋在水包油乳剂中。

肌肉型烟碱乙酰胆碱受体

在一方面，本公开内容涉及包含肌肉型烟碱乙酰胆碱受体(也称为肌肉nAChR)的肽拮抗剂的脂质囊泡组合物。

肌肉nAChR是一种配体激活的离子通道受体，其结构通常被描述为四个相关的、但在遗传学和免疫学上不同的亚单位的异五聚体。亚单位围绕膜中的中心孔组织化，化学计量为两个α亚单位以及β、δ和γ各一个。肌肉nAChR被神经肌肉接头处的神经释放的内源性神经递质乙酰胆碱(ACh，天然受体激动剂)激活。ACh与受体结合，导致通道激活或门控信号的传递。

本公开内容的肽拮抗剂在肌肉nAChR的活性位点中结合，抑制ACh与受体的结合。这导致神经肌肉突触后膜的非去极化阻断，使得来自神经的信号(ACh释放)不再有效刺激肌肉收缩。参见，例如，Albuquerque等人,2009,“Mammalian Nicotinic AcetylcholineReceptors:From Structure to Function,”Physiol.Rev.89(1):73-120，和Kalamida等人,2007,“Muscle and neuronal nicotinic acetylcholine receptors,”The FEBSJournal 274:3799-3845，各自通过引用全文并入本文。

使用以下抗胆碱能肉毒杆菌毒素产品已经实现意向性肌肉去神经支配：onabotulinumtoxinA(BTX-A，销售名为)、abobotulinumtoxin Aincobotulinumtoxin A/>rimabotulinumtoxinB和prabotulinumtoxinA-xvfs/>BTX-A阻止存在于神经细胞囊泡中的Ach从突触处的神经细胞分泌。这导致了突触处不存在ACh，并且无法对肌肉细胞进行神经支配。因此，这些毒素的作用机制是突触前的。肉毒杆菌毒素指示用于例如，预防或改善例如面部中的皮肤皱纹、皮肤松弛、与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)、与额肌活动相关的中度至重度前额纹的外观；治疗膀胱过度活动症(OAB)；治疗尿失禁；预防患有慢性偏头痛的成人患者的头痛；预防或治疗阵发性偏头痛；治疗上下肢痉挛；治疗颈肌张力障碍；治疗多涎(也称为涎分泌过多或流涎)；治疗与肌张力障碍相关的眼睑痉挛；或治疗和处理斜视。(参见，例如，Botox Cosmetic BLA 103000，2018年5月修订的Botox Cosmetic的产品标签，2017年4月修订的Botox的产品标签，Dysport BLA125274，2017年6月修订的Dysport的产品标签，XeominBLA 125360，2018年7月修订的Xeomin的产品标签，2019年8月修订的Myobloc的产品标签，和2019年7月修订的Jeuveau BLA 761085的产品标签，各自通过引用并入本文)。

相反，本公开内容的肽拮抗剂占据肌肉细胞AChR中的ACh活性位点(突触后)。当结合时，本公开内容的肽拮抗剂阻断从神经细胞分泌的ACh的结合。

肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂

本公开内容提供了脂质囊泡组合物，其包含包括人肌肉nAChR在内的哺乳动物肌肉nAChR的肽拮抗剂。在一些实施方案中，本文所提供的肽拮抗剂具有所需性质，或相对于本领域已知的肌肉nAChR拮抗剂改进的性质。这样的性质可包括，例如，药代动力学性质(包括但不限于吸收、生物利用度、分布、代谢和排泄)、药效学性质(包括但不限于：受体结合特征，例如结合半衰期；受体后效应；和化学相互作用)、增强的活性(例如，由IC₅₀表示)、稳定性(例如，由半衰期表示)、可溶性(例如，在制剂中)或渗透性(例如，含有肽拮抗剂的制剂对皮肤的穿透性)。在一些实施方案中，含有本公开内容的肽拮抗剂的制剂具有所需性质，或相对于含有本领域已知的肌肉nAChR拮抗剂的制剂改进的性质。在一些实施方案中，本公开内容的制剂的所需或改进的性质是与该制剂用于如本文别处所述的适应症的用途有关的性质，例如用于减少或改善皮肤皱纹外观的用途。

肽拮抗剂

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物的肽拮抗剂包含芋螺毒素肽。在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与SEQ ID NO：1-52或60-99中任何一个氨基酸序列至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于任何一个SEQ ID NO：1-52或60-99，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：1-52或60-99中任何一个，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂包含与SEQ ID NO：1-52或60-99中任何一个氨基酸序列完全相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：1-52或60-99中任何一个的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：1至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列的同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：1，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：1，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：1的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：3至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：3，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：3，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：3的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：60至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：60，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：60，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：60的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：61至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：61，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：61，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：61的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：73至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：73，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：73，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：73的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：78至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：78，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：78，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：78的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：82至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：82，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：82，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：82的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：85至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：85，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：85，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：85的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：91至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：91，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：91，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：91的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有与氨基酸序列SEQ ID NO：95至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％的序列同源性。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：95，肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，一个或多个氨基酸取代选自限定为Xaa1-Xaa14的氨基酸。在一些实施方案中，相对于SEQ ID NO：95，肽拮抗剂包含1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代。在一些实施方案中，1个、2个、3个、4个或5个氨基酸取代的至少1个、2个或3个是保守取代。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有由SEQ ID NO：95的完全相同序列组成的氨基酸序列。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含不超过约20个氨基酸、不超过约18个氨基酸、不超过约16个氨基酸或不超过约14个氨基酸。在一些实施方案中，肽拮抗剂具有不超过约2500Da、不超过约2200Da、不超过约2000Da、不超过约1800Da、不超过约1700Da、不超过约至约1600Da或不超过约1500Da的分子量。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体肽拮抗剂具有12-14个残基，并且包含氨基酸序列：

Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa13-Xaa14

其中：

Xaa1不存在或选自Ala、Gly、Val、Leu、Ile和Ala、Gly、Val、Leu或Ile的衍生物；

Xaa2不存在或选自：Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His、Lys、Phe、Trp、Tyr、Ala、Gly、Val、Leu、Ile和Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His、Lys、Phe、Trp、Tyr、Ala、Gly、Val、Leu或Ile的衍生物；

Xaa3和Xaa8形成连接单元(linkage)Xaa3-Xaa8：

Xaa4和Xaa14形成连接单元Xaa4-Xaa14：

Xaa5选自：Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His、Lys和Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His或Lys的衍生物；

Xaa6选自：Pro及其衍生物；

Xaa7选自：Ala、Gly、Val、Leu、Ile和Ala、Gly、Val、Leu或Ile的衍生物；

Xaa9选自：Ala、Gly、Val、Leu、Ile和Ala、Gly、Val、Leu或Ile的衍生物；

Xaa10选自：Arg、His、Lys和Arg、His或Lys的衍生物；

Xaa11选自：Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His、Lys和Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His或Lys的衍生物；

Xaa12选自：Phe、Trp、Tyr和Phe、Trp或Tyr的衍生物；

Xaa13选自：Cys、Met、Sec、Ser、Thr、Arg、His、Lys和Cys、Met、Sec、Ser、Thr、Arg、His或Lys的衍生物；

N末端任选地被修饰；并且

C末端任选地被修饰。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体肽拮抗剂具有12-14个残基并包含氨基酸序列：

Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa13-Xaa14

其中：

Xaa1不存在；

Xaa2不存在；

Xaa3和Xaa8形成连接单元Xaa3-Xaa8；

Xaa4和Xaa14形成连接单元Xaa4-Xaa14；

Xaa5选自：Asp、Gln、Glu、Arg、His和Lys；

Xaa6选自：Pro和羟脯氨酸；

Xaa7选自：Ala、Gly、Val、Leu和Ile；

Xaa9选自：Ala、Gly、Val、Leu和Ile；

Xaa10选自：Arg和His；

Xaa11选自：Asn、Asp、Gln、Glu、Arg、His和Lys；

Xaa12选自：Trp和Tyr；

Xaa13选自：Cys、Met、Sec、Ser、Thr、Arg、His和Lys；

N末端任选地被修饰；并且

C末端任选地被修饰。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂不由以下氨基酸序列组成：

Glu-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Gly-Arg-His-Tyr-Ser-Cys(SEQ ID NO:1)

其中第一个和第三个半胱氨酸残基(Xaa3-Xaa8)连接并且第二个和第四个半胱氨酸残基(Xaa4-Xaa14)连接(α-芋螺毒素GI，或CGI)。

Glu-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Gly-Lys-His-Phe-Ser-Cys(SEQ ID NO:2)

其中第一个和第三个半胱氨酸残基(Xaa3-Xaa8)连接并且第二个和第四个半胱氨酸残基(Xaa4-Xaa14)连接。

Glu-Cys-Cys-His-Pro-Ala-Cys-Gly-Lys-His-Phe-Ser-Cys(SEQ ID NO:56)

其中第一个和第三个半胱氨酸残基(Xaa3-Xaa8)连接并且第二个和第四个半胱氨酸残基(Xaa4-Xaa14)连接(α-芋螺毒素GII序列)。

Gly-Arg-Cys-Cys-His-Pro-Ala-Cys-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys(SEQ ID NO:3)

其中第一个和第三个半胱氨酸残基(Xaa3-Xaa8)连接并且第二个和第四个半胱氨酸残基(Xaa4-Xaa14)连接(α-芋螺毒素MI，或CMI)。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂中氨基酸残基的数目不超过12个、不超过13个或不超过14个。在实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂由12、13或14个氨基酸残基组成。

本公开内容的肽拮抗剂的非限制性实例如表2所示。

表2.肽拮抗剂实例

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¹在(Xaa3-Xaa8)处包含胱硫醚(Cyt-Cyt)连接单元；²在(Xaa4-Xaa14)处包含胱硫醚(Cyt-Cyt)连接单元；³在(Xaa3-Xaa8)处包含二硫化物(Cys-Cys)连接单元；⁴在(Xaa4-Xaa14)处包含二硫化物(Cys-Cys)连接单元；⁵在(Xaa3-Xaa8)处包含Sec-Sec连接单元；⁶在(Xaa4-Xaa14)处包含Sec-Sec连接单元；均指本文提供的Xaal-Xaa14编号。

除非在表格中另有说明，否则表1中列出的肽可包含所有L-氨基酸或所有D-氨基酸。

约束结构(Constraining Structures)

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂包含约束结构，包括但不限于两个位置处的残基之间的连接单元、桥接或任何连接单元方式。在一些实施方案中，肽受到其末端或在肽内的位置处或两者的限制。在一些实施方案中，约束结构影响肽拮抗剂性质，例如，药代动力学性质(包括但不限于吸收、生物利用度、分布、代谢和排泄)、药效学性质(包括但不限于：受体结合特征，例如结合半衰期；受体后效应；和化学相互作用)、增强的活性(例如，由IC₅₀表示)、稳定性(例如，由半衰期表示)、可溶性(例如，在制剂中)或渗透性(例如，含有肽拮抗剂的制剂对皮肤的穿透性)。在某些实施方案中，约束结构增强肽拮抗剂的稳定性。在某些实施方案中，约束结构增强肽拮抗剂通过皮肤的渗透性。在某些实施方案中，约束结构增强肽拮抗剂在制剂例如局部制剂中的可溶性。

在实施方案中，如本文所述被约束的肽拮抗剂被称为大环肽或结构。大环肽是指由肽中两个位置之间的连接单元在分子内形成的线性肽的闭环结构，称为连接单元氨基酸、连接单元氨基酸衍生物、连接单元分子、连接单元部分、连接单元残基、连接单元实体等，视情况而定。两个连接单元氨基酸、连接单元氨基酸衍生物、连接单元分子、连接单元部分、连接单元残基或连接单元实体彼此被两个或更多个氨基酸残基隔开、彼此直接结合、通过接头结合，等等。

在实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的连接单元由通过例如二硫键、肽键、烷基键、烯基键、酯键、硫酯键、醚键、硫醚键、膦酸酯醚键、偶氮键、C--S--C键、C＝N--C键、C＝N--C键、酰胺键、内酰胺桥接、氨基甲酰基键、脲键、硫脲键、胺键、硫代酰胺键等彼此结合的两个连接单元氨基酸、连接单元氨基酸衍生物、连接单元分子、连接单元部分、连接单元残基或连接单元实体形成。大环化可以由肽的N末端氨基酸与C末端氨基酸之间的键、末端氨基酸与非末端氨基酸之间的键或非末端氨基酸之间的键形成。

为方便起见，提及连接单元中涉及的特定氨基酸可以使用未连接的氨基酸的命名法(例如，在连接单元形成之前它可能具有的结构)。还应理解，某些连接单元，例如合成连接单元，可能不是通过连接本领域中通常提及的两个氨基酸或衍生物而形成的。因此，在此提及连接的氨基酸可以使用最接近的语言来描述肽拮抗剂中给定残基位置处的每个涉及的化学实体。相应地，肽序列中的连接的实体，例如Xaa3、Xaa4、Xaa8和Xaa14，可被称为连接的氨基酸，尽管他们不是本领域中通常提及的氨基酸。在一些实施方案中，Xaa3和Xaa8，以及Xaa4和Xaa14，当为连接的实体(例如，形成Xaa3-Xaa8连接单元和Xaa4-Xaa14连接单元)时，可以备选地被称为连接的(或连接单元形成)氨基酸、连接的(或连接单元形成)氨基酸衍生物、连接的(或连接单元形成)分子、连接的(或连接单元形成)部分、连接的(或连接单元形成)残基或连接的(或连接单元形成)实体。备选地，这些术语可用来指代存在于Xaa3、Xaa4、Xaa8或Xaa14中任一个处的氨基酸、分子、部分、残基或实体(当连接单元或未连接单元时)。例如，当在本公开内容的肽拮抗剂中未连接单元但打算连接单元时，两个连接单元氨基酸也可以备选地被称为连接的(或连接单元形成)氨基酸、连接的(或连接单元形成)氨基酸衍生物、连接的(或连接单元形成)分子、连接的(或连接单元形成)部分、连接的(或连接单元形成)残基或连接的(或连接单元形成)实体。当连接单元时，两个连接单元氨基酸可以备选地被称为连接的(或连接单元形成)氨基酸、连接的(或连接单元形成)氨基酸衍生物、连接的(或连接单元形成)分子、连接的(或连接单元形成)部分、连接的(或连接单元形成)残基或连接的(或连接单元形成)实体。当未连接单元并且不打算连接单元时，两个氨基酸可称为未连接的(或非连接单元形成)氨基酸、未连接的(或非连接单元形成)氨基酸衍生物、未连接的分子、未连接的部分、未连接的残基或未连接的实体。在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂中非连接单元氨基酸位置处的每个残基可称为氨基酸、氨基酸衍生物、分子、部分、残基或实体，或称为未连接的(或非连接单元形成)氨基酸、未连接的(或非连接单元形成)氨基酸衍生物、未连接的(或非连接单元形成)分子、未连接的(或非连接单元形成)部分、未连接的(或非连接单元形成)残基或未连接的(或非连接单元形成)实体。

本领域技术人员已知的任何约束结构都被考虑用于连接单元残基。约束结构及其各自的连接单元残基的实例包括但不限于选自以下的连接单元或桥接：二硫键(例如，Cys-Cys连接单元，其中每个连接单元氨基酸是Cys)；Sec-Sec连接单元(硒代半胱氨酸连接单元，其中每个连接单元氨基酸是硒代半胱氨酸)；胱硫醚连接单元或桥接(例如，Ser-同型半胱氨酸连接单元)，在本文中也称为Cyt-Cyt(例如，CH₂-CH₂-S-CH₂)；内酰胺桥接(例如，Asp-Lys或Glu-Lys连接单元)、硫醚连接单元(例如，羊毛硫氨酸连接单元，包括但不限于Cys-脱氢丙氨酸或甲基变体)和二碳连接单元(例如，含烯烃的氨基酸例如烯丙基甘氨酸或异戊二烯基甘氨酸的连接单元)。在一些实施方案中，连接单元选自：具有连接单元残基Cys-Cys的二硫键；具有连接单元残基Sec-Sec的硒代半胱氨酸连接单元；具有连接单元残基Ser-同型半胱氨酸的胱硫醚连接单元；具有残基Asp-Lys或Glu-Lys的内酰胺桥接；具有连接单元残基Cys-脱氢丙氨酸或甲基变体的羊毛硫氨酸连接单元，和具有连接单元残基烯丙基甘氨酸或异戊二烯基甘氨酸的二碳连接单元。在实施方案中，连接单元氨基酸、连接单元氨基酸衍生物、连接单元分子、连接单元部分、连接单元残基或连接单元实体选自Cys、Sec、Ser、同型半胱氨酸、Asp、Lys、Glu、脱氢丙氨酸或含烯烃的氨基酸(例如，烯丙基甘氨酸或异戊二烯基甘氨酸)。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的Xaa3-Xaa8和Xaa4-Xaa14连接单元中的每一个是独立地选自以下的连接单元：由两个Cys连接单元残基形成的二硫键，由两个硒代半胱氨酸连接单元残基形成的Sec-Sec连接单元，由Ser和同型半胱氨酸连接单元残基形成的胱硫醚连接单元，由Asp和Lys连接单元残基或Glu和Lys连接单元残基形成的内酰胺桥接，作为由Cys和脱氢丙氨酸或甲基变体残基形成的羊毛硫氨酸连接的硫醚连接单元，由含烯烃的连接单元残基例如烯丙基甘氨酸或异戊二烯基甘氨酸连接单元残基形成的二碳连接单元，或由本领域已知和描述的连接单元残基形成的任何这些连接单元。在一些实施方案中，Xaa3-Xaa8或Xaa4-Xaa14连接单元彼此相同或不同。

(参见，例如，Knerr等人,2011,“Synthesis and activity of thioether-containing analogues of the complement inhibitor compstatin,”ACS Chem Biol.6(7):753–760；DiMarco等人,2006,“Discovery of novel,highly potent and selectiveb-hairpin mimetic CXCR4 inhibitors with excellent anti-HIV activity andpharmacokinetic profiles,”Bioorganic&Medicinal Chemistry 14:8396–8404；Dekan等人,2011,“α-Conotoxin ImI incorporating stable cystathionine bridges maintainsfull potency and identical three-dimensional structure,”J.Am.Chem.Soc.2011,133:15866–15869；Nguyen和Wong,2017,“Making circles:recent advance in chemicaland enzymatic approaches in peptide macrocyclization,”Journal of Biochemistryand Chemical Sciences1(1):1-13；Tam和Wong,2012,“Chemical Synthesis of CircularProteins,”The Journal of Biological Chemistry 287(32):27020–27025，各自通过引用全文并入本文。)在一些实施方案中，考虑由使用本领域已知的连接单元残基产生的任何合适的约束结构用于本公开内容的肽拮抗剂中。

在一些实施方案中，基于其对降解(例如，由二硫键约束结构的还原引起的降解)的抵抗力来选择特定的约束结构。在一些实施方案中，肽拮抗剂包含抵抗通过还原的降解的约束结构。例如，在还原环境中，二硫键可能易于降解并导致活性或其他所需肽拮抗剂性质的丧失。在一些实施方案中，胱硫醚连接单元或至少两个C₁-C₆杂环烷基环的连接单元赋予相对于二硫键增加的稳定性。

在一些实施方案中，链中的两个氨基酸通过连接单元接合在一起以产生大环结构。在一些实施方案中，连接单元模拟肽中的发夹转角。在一些实施方案中，连接单元包含规范或非规范氨基酸之间的共价键，如胱硫醚连接单元、内酰胺桥接或硫醚桥接(例如，羊毛硫氨酸连接单元)。在一些实施方案中，连接单元包含二肽。在一些实施方案中，连接单元包含规范或非规范氨基酸之间的共价键，如羊毛硫氨酸或甲基羊毛硫氨酸连接单元。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个芳族或非芳族环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个杂环。在一些实施方案中，连接单元包含至少两个杂环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个含氮杂环烷基环。

在一些实施方案中，连接单元包含结构其中A和B是杂环。在一些实施方案中，连接单元包含结构/>其中A和B是杂环。

在一些实施方案中，连接单元包含吡咯烷、哌啶、脱氢吡咯烷、脱氢哌啶、氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、噁唑烷或噻唑烷。在一些实施方案中，连接单元包含两个C₁-C₆杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个五元杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个六元杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含两个五元杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含两个五元杂环烷基环，其中每个环包含至少一个氮原子。在一些实施方案中，连接单元包含两个五元杂环烷基环，其中至少一个环包含至少一个氮原子。在一些实施方案中，连接单元包含两个六元杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含通过酰胺键连接的两个C₁-C₆杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含通过–C(＝O)NH-连接的两个C₁-C₆杂环烷基环。在一些实施方案中，连接单元包含两个吡咯烷环。在一些实施方案中，连接单元包含至少一个非规范氨基(非天然)酸残基。在一些实施方案中，连接单元包含两个氨基酸(规范或非规范的)，其中第一个氨基酸在α位具有(S)构型，而第二个氨基酸在α位具有(R)构型。在一些实施方案中，连接单元包含通过肽键连接的两个氨基酸(规范或非规范的)。在一些实施方案中，连接单元包含两个脯氨酸残基(二脯氨酸连接单元)。在一些实施方案中，连接单元包含通过肽键连接的两个脯氨酸残基。在一些实施方案中，连接单元包含D-脯氨酸和L-脯氨酸(D-脯氨酸-L-脯氨酸或L-脯氨酸-D-脯氨酸)。

在一些实施方案中，连接单元包含D-脯氨酸和L-脯氨酸，或其衍生物。在一些实施方案中，此类衍生物包含脯氨酸的吡咯烷环的取代。在一些实施方案中，连接单元包含选自3-氟脯氨酸、4-氟脯氨酸、3-羟脯氨酸、4-羟脯氨酸、3-氨基脯氨酸、4-氨基脯氨酸、3,4-脱氢脯氨酸、氮杂环丙烷-2-羧酸、氮杂环丁烷-2-羧酸、哌可酸(pipecolic acid)、4-氧杂-脯氨酸、3-硫杂脯氨酸或4-硫杂脯氨酸的非规范氨基酸残基。在一些实施方案中，连接单元包含两个选自脯氨酸、3-氟脯氨酸、4-氟脯氨酸、3-羟脯氨酸、4-羟脯氨酸、3-氨基脯氨酸、4-氨基脯氨酸、3,4-脱氢脯氨酸、氮杂环丙烷-2-羧酸、氮杂环丁烷-2-羧酸、哌可酸、4-氧杂-脯氨酸、3-硫杂脯氨酸或4-硫杂脯氨酸的氨基酸。

在一些实施方案中，连接单元包含规范或非规范氨基酸内酰胺桥接之间的共价键。在一些实施方案中，连接单元包含结构：

在一些实施方案中，连接单元包含规范或非规范氨基酸硫醚桥接之间的共价键。在一些实施方案中，连接单元包含结构

这些和类似的约束结构可用来连接单元肽中末端和/或非末端位置的残基。在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的Xaa3和Xaa8连接单元在一起。在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的Xaa4和Xaa14连接单元在一起。在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的Xaa3和Xaa8以及Xaa4和Xaa14连接单元在一起。

连接单元间距

在一些实施方案中，基于所得到的受约束残基之间的空间间隔来选择本文所述的约束结构。在一些实施方案中，空间间隔影响如上所述的肽拮抗剂性质。本公开内容的肽拮抗剂可包含约束结构，其在两个连接的氨基酸残基的α-碳之间或两个连接的残基(例如氨基酸衍生物)的几何中心之间赋予约3.5至约10埃的空间间隔。在一些实施方案中，两个连接的氨基酸残基的α-碳之间的空间间隔，或两个连接的残基的几何中心之间的空间间隔为约3.5埃至约10埃。在一些实施方案中，两个连接的氨基酸残基的α-碳之间的空间间隔，或两个连接的残基的几何中心之间的空间间隔为至少约3.5埃。在一些实施方案中，两个连接的氨基酸残基的α-碳之间的空间间隔，或两个连接的残基的几何中心之间的空间间隔为至多约10埃。在一些实施方案中，两个连接的氨基酸残基的α-碳之间的空间间隔，或两个连接的残基的几何中心之间的空间间隔为约3.5埃至约4.5埃、约3.5埃至约5埃、约3.5埃至约5.5埃、约3.5埃至约6埃、约3.5埃至约6.5埃、约3.5埃至约7埃、约3.5埃至约7.5埃、约3.5埃至约8埃、约3.5埃至约8.5埃、约3.5埃至约9埃、约3.5埃至约10埃、约4.5埃至约5埃、约4.5埃至约5.5埃、约4.5埃至约6埃、约4.5埃至约6.5埃、约4.5埃至约7埃、约4.5埃至约7.5埃、约4.5埃至约8埃、约4.5埃至约8.5埃、约4.5埃至约9埃、约4.5埃至约10埃、约5埃至约5.5埃、约5埃至约6埃、约5埃至约6.5埃、约5埃至约7埃、约5埃至约7.5埃、约5埃至约8埃、约5埃至约8.5埃、约5埃至约9埃、约5埃至约10埃、约5.5埃至约6埃、约5.5埃至约6.5埃、约5.5埃至约7埃、约5.5埃至约7.5埃、约5.5埃至约8埃、约5.5埃至约8.5埃、约5.5埃至约9埃、约5.5埃至约10埃、约6埃至约6.5埃、约6埃至约7埃、约6埃至约7.5埃、约6埃至约8埃、约6埃至约8.5埃、约6埃至约9埃、约6埃至约10埃、约6.5埃至约7埃、约6.5埃至约7.5埃、约6.5埃至约8埃、约6.5埃至约8.5埃、约6.5埃至约9埃、约6.5埃至约10埃、约7埃至约7.5埃、约7埃至约8埃、约7埃至约8.5埃、约7埃至约9埃、约7埃至约10埃、约7.5埃至约8埃、约7.5埃至约8.5埃、约7.5埃至约9埃、约7.5埃至约10埃、约8埃至约8.5埃、约8埃至约9埃、约8埃至约10埃、约8.5埃至约9埃、约8.5埃至约10埃或约9埃至约10埃。在一些实施方案中，两个连接的氨基酸残基的α-碳之间的空间间隔，或两个连接的残基的几何中心之间的空间间隔为约3.5埃、约4.5埃、约5埃、约5.5埃、约6埃、约6.5埃、约7埃、约7.5埃、约8埃、约8.5埃、约9埃或约10埃。在实施方案中，使用本领域已知的接头或间隔分子实现特定的空间间隔。

氨基酸衍生物

本公开内容考虑在本公开内容的任何肽拮抗剂中使用任何氨基酸的氨基酸衍生物或类似物。在一些实施方案中，可以使用任何已知方法化学地进行氨基酸修饰。选择性的蛋白质修饰在文献中有所描述，例如，Spicer和Davis,2014,“Selective chemicalprotein modification,”Nature Communications 5:4740，通过引用并入本文。

在一些实施方案中，氨基酸衍生物是非规范氨基酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸在α位置处具有(S)构型。在一些实施方案中，非规范氨基酸在α位置处具有(R)构型。在一些实施方案中，非规范氨基酸是α氨基酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸是β或γ氨基酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸选自：芳族侧链氨基酸；非芳族侧链氨基酸；脂肪族侧链氨基酸；侧链酰胺氨基酸；侧链酯氨基酸；杂芳族侧链氨基酸；侧链硫醇氨基酸；β氨基酸；和骨架修饰的氨基酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸是酪氨酸、组氨酸、色氨酸或苯丙氨酸的衍生物。在一些实施方案中，氨基酸的衍生物包含该氨基酸的酯、酰胺、二硫化物、氨基甲酸酯、脲、磷酸酯、醚。在一些实施方案中，非芳族侧链氨基酸是丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸或亮氨酸的衍生物。在一些实施方案中，非规范氨基酸选自2-氨基己二酸；3-氨基己二酸；β-丙氨酸；β-氨基丙酸；2-氨基丁酸；4-氨基丁酸；哌啶酸；6-氨基己酸；2-氨基庚酸；2-氨基异丁酸；3-氨基异丁酸；2-氨基庚二酸；2,4-二氨基丁酸；锁链素；2,2'-二氨基庚二酸；2,3-二氨基丙酸；N-乙基甘氨酸；N-乙基天冬酰胺；羟赖氨酸；别羟赖氨酸；3-羟脯氨酸；4-羟脯氨酸；异锁链素；别异亮氨酸；N-甲基甘氨酸；肌氨酸；n-甲基异亮氨酸；6-N-甲基赖氨酸；N-甲基缬氨酸；正缬氨酸；正亮氨酸；和鸟氨酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸是脯氨酸衍生物。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物是3-氟脯氨酸、4-氟脯氨酸、3-羟脯氨酸、4-羟脯氨酸、3-氨基脯氨酸、4-氨基脯氨酸、3,4-脱氢脯氨酸、氮杂环丙烷-2-羧酸、氮杂环丁烷-2-羧酸、哌可酸、4-氧杂-脯氨酸、3-硫杂脯氨酸或4-硫杂脯氨酸。在一些实施方案中，非规范氨基酸包含脂质。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂包含一个或多个氨基酸衍生物或类似物，例如本领域技术人员已知的和文献或本文中描述的。在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7、1-8、1-9、1-10、1-11、1-12或1-13个氨基酸衍生物。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂中存在的每种氨基酸衍生物为独立地选自以下的非规范氨基酸：芳族侧链氨基酸；非芳族侧链氨基酸；脂肪族侧链氨基酸；侧链酰胺氨基酸；侧链酯氨基酸；杂芳族侧链氨基酸；侧链硫醇氨基酸；β氨基酸；和骨架修饰的氨基酸，选自例如本文所述的或本领域已知的以及在发表的文献中描述的非规范氨基酸。

在一些实施方案中，肽拮抗剂包含具有D-氨基酸构型的一个或多个氨基酸，并且所述肽中的其余氨基酸具有L-氨基酸构型。

在一些实施方案中，非规范氨基酸是脯氨酸衍生物。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代，其中该取代包含卤素、烷氧基、氨基、羟基、烷基(甲基、乙基)、巯基或烷硫基。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代，其中该取代包含卤素或烷基(甲基、乙基)。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代，其中该取代包含卤素。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代，其中该取代包含烷氧基、羟基、氨基。在一些实施方案中，脯氨酸衍生物在吡咯烷环上包含一个或多个取代，其中该取代包含卤素、烷氧基、烷基(甲基、乙基)、巯基或烷硫基。

肽拮抗剂的N末端修饰

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的N末端氨基被修饰(N末端修饰)。在一些实施方案中，肽拮抗剂的N末端没有用另外的氨基酸或氨基酸衍生物修饰。在一些实施方案中，未修饰的N末端包含氢。在一些实施方案中，N末端修饰包含C₁-C₆酰基、C₁-C₈烷基、C₆-C₁₂芳烷基、C₅-C₁₀芳基、C₄-C₈杂芳基、甲酰基或脂质。在一些实施方案中，N末端修饰包含C₆-C₁₂芳烷基。在一些实施方案中，N末端修饰包含C₁-C₆酰基。在一些实施方案中，N末端修饰包含乙酰基(Ac)。在一些实施方案中，N末端修饰包含C₁-C₆烷基。在一些实施方案中，N末端修饰包含甲基、乙基、丙基或叔丁基。在一些实施方案中，N末端修饰包含C₁-C₆芳烷基。在一些实施方案中，N末端修饰包含苄基。在一些实施方案中，N末端修饰包含甲酰基。在一些实施方案中，本文所述的肽，例如具有表2中所列氨基酸序列的任何肽(不考虑表中所示的N末端)，具有这些N末端修饰中任一个或未修饰的N末端。

肽拮抗剂的C末端修饰

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的C末端酸基团被修饰(C末端修饰)。在一些实施方案中，C末端没有用另外的氨基酸或氨基酸衍生物修饰。在一些实施方案中，C末端没有用甘氨酸残基修饰。在一些实施方案中，未修饰的C末端包含-OH。在一些实施方案中，C末端修饰包含氨基，其中该氨基任选地被取代。在一些实施方案中，C末端修饰包含氨基，其中该氨基是未取代的(-NH₂)。在一些实施方案中，C末端修饰包含氨基，其中该氨基被取代。在一些实施方案中，C末端修饰包含-NH₂、-氨基-酰基、-氨基-C₁-C₈烷基、-氨基-C₆-C₁₂-芳烷基、-氨基-C₅-C₁₀芳基或-氨基-C₄-C₈杂芳基、-氨基-C₄-C₈杂芳基或-O-(C₁-C₈烷基)。在一些实施方案中，C末端修饰包含-氨基-C₆-C₁₂-芳烷基。在一些实施方案中，C末端修饰包含-O-(C₁-C₈烷基)。在一些实施方案中，C末端修饰包括-氨基-C₆-C₁₂-芳烷基。在一些实施方案中，C末端修饰包含–NH-CH₂苯基。在一些实施方案中，C末端修饰包含-OEt。在一些实施方案中，C末端修饰包含-OMe。在一些实施方案中，本文所述的肽，例如具有表2中所列氨基酸序列的任何肽(不考虑表中所示的C末端)，具有任何这些C末端修饰中任一个或未修饰的C末端。

在一些实施方案中，本公开内容的肽拮抗剂的N末端氨基和C末端酸基团都被修饰。在一些实施方案中，本文所述的肽，例如具有表2中所列氨基酸序列的任何肽(不考虑表中所示的N末端和C末端)，具有独立地选自本文所述的任何N和C末端。在一些实施方案中，本文所述的肽，例如具有表2中所列氨基酸序列的任何肽(不考虑表中所示的N末端和C末端)，具有独立地选自Ac、NH₂和H的N末端和C末端。

组合物中肽拮抗剂的浓度

在一些实施方案中，肽拮抗剂以约0.1mg/mL至约50mg/mL的量存在于囊泡组合物中。在一些实施方案中，肽拮抗剂以约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约3mg/mL、约0.1mg/mL至约4mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约20mg/mL、约0.1mg/mL至约50mg/mL、约0.5mg/mL至约1mg/mL、约0.5mg/mL至约2mg/mL、约0.5mg/mL至约3mg/mL、约0.5mg/mL至约4mg/mL、约0.5mg/mL至约5mg/mL、约0.5mg/mL至约10mg/mL、约0.5mg/mL至约20mg/mL、约0.5mg/mL至约50mg/mL、约1mg/mL至约2mg/mL、约1mg/mL至约3mg/mL、约1mg/mL至约4mg/mL、约1mg/mL至约5mg/mL、约1mg/mL至约10mg/mL、约1mg/mL至约20mg/mL、约1mg/mL至约50mg/mL、约2mg/mL至约3mg/mL、约2mg/mL至约4mg/mL、约2mg/mL至约5mg/mL、约2mg/mL至约10mg/mL、约2mg/mL至约20mg/mL、约2mg/mL至约50mg/mL、约3mg/mL至约4mg/mL、约3mg/mL至约5mg/mL、约3mg/mL至约10mg/mL、约3mg/mL至约20mg/mL、约3mg/mL至约50mg/mL、约4mg/mL至约5mg/mL、约4mg/mL至约10mg/mL、约4mg/mL至约20mg/mL、约4mg/mL至约50mg/mL、约5mg/mL至约10mg/mL、约5mg/mL至约20mg/mL、约5mg/mL至约50mg/mL、约10mg/mL至约20mg/mL、约10mg/mL至约50mg/mL或约20mg/mL至约50mg/mL的量存在于囊泡组合物中。在一些实施方案中，肽拮抗剂以约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL或约50mg/mL的量存在于囊泡组合物中。在一些实施方案中，肽拮抗剂以至少约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL或约20mg/mL的量存在于囊泡组合物中。在一些实施方案中，肽拮抗剂以至多约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL或约50mg/mL的量存在于囊泡组合物中。在一些实施方案中，肽拮抗剂以约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL或约5mg/mL的量存在于组合物中。

囊泡形成脂质

在一些实施方案中，囊泡形成脂质包括磷脂。在一些实施方案中，磷脂是天然存在的、半合成或合成制备或其混合。在一个实施方案中，磷脂是甘油的一种或多种酯，具有脂肪添加物和磷酸的一个或两个(相等或不同)残基，其中磷酸残基又与亲水基团结合，诸如，例如，胆碱(磷脂酰胆碱--PC)、丝氨酸(磷脂酰丝氨酸--PS)、甘油(磷脂酰甘油--PG)、乙醇胺(磷脂酰乙醇胺--PE)或肌醇(磷脂酰肌醇)。仅具有一个脂肪酸残基的磷脂的酯在本领域通常被称为磷脂的“溶血”形式或“溶血磷脂”。磷脂中存在的脂肪酸残基一般是长链脂肪族酸，一般含有12至24个碳原子或14至22个碳原子；脂肪族链可以含有一个或多个不饱和或完全饱和。磷脂中包含的合适脂肪酸的实例是，例如，月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸、油酸、亚油酸和亚麻酸。可以采用饱和脂肪酸诸如肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和花生酸。

在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％至约25％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％至约2％、约0.5％至约5％、约0.5％至约8％、约0.5％至约10％、约0.5％至约12％、约0.5％至约15％、约0.5％至约20％、约0.5％至约25％、约2％至约5％、约2％至约8％、约2％至约10％、约2％至约12％、约2％至约15％、约2％至约20％、约2％至约25％、约5％至约8％、约5％至约10％、约5％至约12％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约8％至约10％、约8％至约12％、约8％至约15％、约8％至约20％、约8％至约25％、约10％至约12％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约12％至约15％、约12％至约20％、约12％至约25％、约15％至约20％、约15％至约25％或约20％至约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至少约0.5％、约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％或约20％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至多约2％、约5％、约8％、约10％、约12％、约15％、约20％或约25％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％至约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％至约2％、约1％至约4％、约1％至约6％、约1％至约8％、约1％至约10％、约2％至约4％、约2％至约6％、约2％至约8％、约2％至约10％、约4％至约6％、约4％至约8％、约4％至约10％、约6％至约8％、约6％至约10％或约8％至约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以约1％、约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至少约1％、约2％、约4％、约6％或约8％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以至多约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，丙二醇以与形囊泡成脂质约相同的量存在。在一些实施方案中，组合物中丙二醇与囊泡形成脂质泡的比率为约2:1至约1:2(w/w)。

油相

在一些实施方案中，油包含硅油或衍生物，诸如二甲聚硅氧烷。在一些实施方案中，油硅油包含硅氧烷聚合物。在一些实施方案中，硅氧烷聚合物包含C1-C3取代基。在一些实施方案中，硅氧烷是聚二甲基硅氧烷(PDMS)。在一些实施方案中，油是包含硅油(例如，二甲聚硅氧烷)作为较小组分的混合物。在一些实施方案中，掺入硅油以便增强所得的组合物的触感或作为保湿剂。在一些实施方案中，油包含不超过约5％、不超过约4％、不超过约3％、不超过约2％或不超过约1％的量的硅油。在一些实施方案中，硅油以从约0.1％至约2％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，硅油以从约0.1％至约0.5％、0.1％至约0.7％、0.1％至约1％、0.1％至约1.5％、0.15％至约2％、0.5％至约0.7％、0.5％至约1％、0.5％至约1.5％、0.5％至约2％、0.7％至约1％、0.7％至约1.5％、0.7％至约2％、1％至约1.5％或1％至约2％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，硅油以约0.1％、0.5％、0.7％、1％、1.5％或2％的组合物的量存在。

在一些实施方案中，甘油三酯以约1％至约35％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以约1％至约5％、约1％至约10％、约1％至约15％、约1％至约20％、约1％至约25％、约1％至约30％、约1％至约35％、约5％至约10％、约5％至约15％、约5％至约20％、约5％至约25％、约5％至约30％、约5％至约35％、约10％至约15％、约10％至约20％、约10％至约25％、约10％至约30％、约10％至约35％、约15％至约20％、约15％至约25％、约15％至约30％、约15％至约35％、约20％至约25％、约20％至约30％、约20％至约35％、约25％至约30％、约25％至约35％或约30％至约35％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以至少约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％或约30％的量存在。在一些实施方案中，甘油三酯以至多约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％或约35％的量存在。在一些实施方案中，组合物的脂质囊泡的油相和/或脂质囊泡部分包含固醇。在一些实施方案中，固醇是胆固醇。在一些实施方案中，胆固醇可以是植物衍生的胆固醇。在一些实施方案中，植物衍生的胆固醇可以是或任何其他植物衍生的胆固醇(例如，Avanti#700100)或其任何组合。在一些实施方案中，固醇可以是植物固醇或其衍生物。在一些实施方案中，植物固醇或其衍生物可以是植物固醇MM、Advasterol^TM 90 IP或95 IP F、NET固醇-ISO、油菜固醇、谷固醇700095、羊毛固醇-95、菜子固醇或其任何组合。

渗透增强剂

在一些实施方案中，渗透增强剂包括非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是单一非离子表面活性剂。在一些实施方案中，渗透增强剂是至少2种、3种、4或更多种非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是2种非离子表面活性剂的组合。在一些实施方案中，渗透增强剂是3种非离子表面活性剂的组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂或非离子表面活性剂的组合选自脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯、聚山梨酸酯和聚乙二醇脂肪酸酯及其组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚和脱水山梨糖醇酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚和聚山梨酸酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚和脱水山梨糖醇酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚和聚乙二醇脂肪酸酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯和聚山梨酸酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯和聚乙二醇脂肪酸酯的组合。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是脂肪醇的聚乙二醇醚、聚山梨酸酯和聚乙二醇脂肪酸酯的组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合包含聚乙二醇脂肪酸酯和脱水山梨糖醇酯。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合包含聚乙二醇脂肪酸酯和聚山梨酸酯。在一些实施方案中，非离子表面活性剂的组合是聚乙二醇脂肪酸酯、聚山梨酸酯和脱水山梨糖醇酯的组合。

在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以从约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含脱水山梨糖醇酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯是脂肪酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯是C₁₂-C₂₂脂肪酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇三油酸酯、脱水山梨糖醇倍半油酸酯或脱水山梨糖醇异硬脂酸酯或其任何组合。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单棕榈酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单硬脂酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇三油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括水山梨糖醇倍半油酸酯。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇异硬脂酸酯。

在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％至约2.5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，脱水山梨糖醇酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％至约2.5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，聚山梨酸酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以约0.5％至约2.5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以约0.5％至约0.8％、约0.5％至约1％、约0.5％至约1.2％、约0.5％至约1.5％、约0.5％至约2％、约0.5％至约2.5％、约0.8％至约1％、约0.8％至约1.2％、约0.8％至约1.5％、约0.8％至约2％、约0.8％至约2.5％、约1％至约1.2％、约1％至约1.5％、约1％至约2％、约1％至约2.5％、约1.2％至约1.5％、约1.2％至约2％、约1.2％至约2.5％、约1.5％至约2％、约1.5％至约2.5％或约2％至约2.5％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酯以至少约0.5％、约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％或约2％的量存在。在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯以至多约0.8％、约1％、约1.2％、约1.5％、约2％或约2.5％的量存在。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂具有约10或更少的疏水亲脂平衡(HLB)。在一些实施方案中，非离子表面活性剂可以是聚乙二醇脂肪酸酯GMS 40。在一些实施方案中，组合物包含多种非离子表面活性剂，每种具有约10或更少的HLB。在一些实施方案中，具有10或更少的HLB非离子表面活性剂选自表1或其任何组合。

在一些实施方案中，渗透增强剂包括脂肪酸酰化氨基酸。在一些实施方案中，脂肪酸酰化氨基酸是赖氨酸。在一些实施方案中，赖氨酸是与脂肪酸单酰化的。在一些实施方案中，渗透增强剂是单月桂酰赖氨酸。在一些实施方案中，赖氨酸是二酰化的。在一些实施方案中，渗透增强剂是二棕榈酰赖氨酸。在一些实施方案中，脂肪酰化氨基酸以不超过约1％、不超过约2％、不超过约3％、不超过约4％或不超过约5％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰化氨基酸以从约0.1％至约5％、从约0.1％至约4％、从约0.1％至约3％、从约0.1％至约2％、从约0.5％至约5％、从约0.5％至约4％、从约0.5％至约3％、从约0.5％至约2％、从约1％至约5％、从约1％至约4％、从约1％至约3％、从约1％至约2％或从约1.5％至约2.5％的量存在。

阳离子表面活性剂

在一些实施方案中，组合物进一步包含阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，将阳离子表面活性剂用于稳定油包水乳剂(例如，在脂质囊泡形成之前的亚微米乳剂阶段)。在一些实施方案中，阳离子表面活性剂是单阳离子表面活性剂。在一些实施方案中，单阳离子表面活性剂是净单阳离子(例如，包含两个侧链磷酸盐，每个侧链具有单一阳离子官能度，其通过磷酸阴离子部分地中和)。

在一些实施方案中，单阳离子表面活性剂是脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯。在一些实施方案中，单阳离子表面活性剂是亚油酰胺丙基PG-二甲基氯化铵磷酸酯。

在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％至约2％、约1％至约3％、约1％至约4％、约1％至约5％、约1％至约6％、约1％至约7％、约1％至约8％、约1％至约9％、约1％至约10％、约2％至约3％、约2％至约4％、约2％至约5％、约2％至约6％、约2％至约7％、约2％至约8％、约2％至约9％、约2％至约10％、约3％至约4％、约3％至约5％、约3％至约6％、约3％至约7％、约3％至约8％、约3％至约9％、约3％至约10％、约4％至约5％、约4％至约6％、约4％至约7％、约4％至约8％、约4％至约9％、约4％至约10％、约5％至约6％、约5％至约7％、约5％至约8％、约5％至约9％、约5％至约10％、约6％至约7％、约6％至约8％、约6％至约9％、约6％至约10％、约7％至约8％、约7％至约9％、约7％至约10％、约8％至约9％、约8％至约10％或约9％至约10％的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％、约9.5％或约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以至少约1％、约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％或约9.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯以至多约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％、约9.5％或约10％的量存在。

附加组分

在一些实施方案中，黏度增强剂以从约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，黏度增强剂以从约0.5％至约5％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％、约0.5％至约3％或从约0.5％至约2％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，黏度增强剂包含不超过约2％的量的脂肪醇、不超过约2％的量的蜡和不超过约5％的量的甘油的脂肪酯。在一些实施方案中，脂肪醇以从约0.1至约1.5％的量存在。在一些实施方案中，脂肪醇以约0.4％的量存在。在一些实施方案中，蜡以从约0.1％至约1％的量存在。在一些实施方案中，蜡以约0.2％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以从约0.5％至约2％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以约0.8％的量存在。在一些实施方案中，甘油的脂肪酯以约0.9％的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含一种或多种的增稠剂、防腐剂、保湿剂、软化剂、湿润剂或其任何组合。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含增稠剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含防腐剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含保湿剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含软化剂。在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含湿润剂。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含湿润剂。在一些实施方案中，组合物包含甘油。在一些实施方案中，甘油以从约0.5％至约25％、约0.5％至约20％、约0.5％至约15％或约0.5％至约10％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％至约2％、约1％至约4％、约1％至约6％、约1％至约8％、约1％至约10％、约2％至约4％、约2％至约6％、约2％至约8％、约2％至约10％、约4％至约6％、约4％至约8％、约4％至约10％、约6％至约8％、约6％至约10％或约8％至约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以约1％、约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。在一些实施方案中，甘油以至少约1％、约2％、约4％、约6％或约8％的量存在。在一些实施方案中，甘油以至多约2％、约4％、约6％、约8％或约10％的量存在。

在一些实施方案中，囊泡组合物进一步包含防腐剂。在一些实施方案中，防腐剂是对羟基苯甲酸酯。在一些实施方案中，防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或其组合。在一些实施方案中，防腐剂包含苯氧乙醇/乙基己基甘油混合物。在一些实施方案中，防腐剂包含辛酰异羟肟酸、辛甘醇和甘油的混合物。在一些实施方案中，防腐剂是化妆品防腐剂，诸如PE 9010或/>在一些实施方案中，防腐剂以不超过约1％、不超过约0.9％、不超过约0.8％、不超过约0.7％、不超过约0.6％、不超过约0.5％、不超过约0.4％、不超过约0.3％、不超过约0.2％(w/w)的组合物的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％或1.5％的量存在。

用于递送肽拮抗剂的示例性组合物

下面提供了用于递送肽拮抗剂的示例性组合物。下面的实施方案可以额外包含本文所提供的任何其他成分或组分。

肽组合物1：在一方面，本文提供了脂质囊泡组合物，其包含

(b)水包油乳剂，其包埋在脂质囊泡中、通过一种或多种表面活性剂稳定；

(c)肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂，其以从约0.1mg/mL至约50mg/mL的量包埋在脂质双层和/或水包油乳剂中，

其中组合物进一步包含：

从约1％至约10％的量的脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯；以及

从约0.1％至约3％的量的非离子表面活性剂。

在一些实施方案中，油组分以从约2.5％至约20％的量存在。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约3mg/mL、约0.1mg/mL至约4mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约20mg/mL、约0.1mg/mL至约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中脂质囊泡组合物包含约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约10mg/mL、约20mg/mL或约50mg/mL的量的肽拮抗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL或约5mg/mL的量的肽拮抗剂。

在一些实施方案中，组合物进一步包含从约0.5％至约3％的量的脂肪酰化氨基酸。在一些实施方案中，脂肪酰化氨基酸是单月桂酰赖氨酸。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含从约0.5％至约5％的量的黏度增强剂。在一些实施方案中，黏度增强剂包括脂肪醇、蜡、甘油的脂肪酯中的一种或多种或其任何组合。

在一些实施方案中，非离子表面活性剂包含脂肪醇的PEG醚。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物进一步包含包埋在脂质双层、水包油乳剂或其组合中的从约0.01mg/mL至约10mg/mL的量的阴离子聚合物材料。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.01mg/mL至约0.05mg/mL、约0.01mg/mL至约0.1mg/mL、约0.01mg/mL至约0.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1mg/mL、约0.01mg/mL至约1.25mg/mL、约0.01mg/mL至约1.5mg/mL、约0.01mg/mL至约1.75mg/mL、约0.01mg/mL至约2mg/mL、约0.01mg/mL至约5mg/mL、约0.01mg/mL至约10mg/mL、约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1mg/mL、约0.1mg/mL至约1.25mg/mL、约0.1mg/mL至约1.5mg/mL、约0.1mg/mL至约1.75mg/mL、约0.1mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约5mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.5mg/mL至约1mg/mL、约1mg/mL至约1.5mg/mL、约1mg/mL至约1.75mg/mL、约1mg/mL至约2mg/mL、约1mg/mL至约5mg/mL、约1mg/mL至约10mg/mL的量的阴离子聚合物材料。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物包含约0.01mg/mL、约0.05mg/mL、约0.1mg/mL、约0.5mg/mL、约1mg/mL、约1.25mg/mL、约1.5mg/mL、约1.75mg/mL、约2mg/mL、约5mg/mL或约10mg/mL的量的阴离子聚合物材料。

肽组合物2：在一方面，本文提供了脂质囊泡组合物，其包含

其中组合物进一步包含：

从约0.1％至约2％的量的PEG脂肪酸酯；

从约0.5％至约3％的量的聚山梨酸酯；以及

从约0.1％至约2％的量的山梨酸酯。

在一些实施方案中，油组分以从约2.5％至约20％的量存在。

在一些实施方案中，PEG脂肪酸酯包含PEG4-二月桂酸酯。在一些实施方案中，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯80。在一些实施方案中，山梨酸酯是脱水山梨糖醇棕榈酸酯。

肽组合物3：在一方面，本文提供了脂质囊泡组合物，其包含

其中组合物进一步包含：以及

从约1％至约10％的量的脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯；

从约0.1％至约3％的量的脂肪醇的PEG醚；

从约0.5％至约3％的量的聚山梨酸酯；以及

从约0.1％至约2％的量的山梨酸酯。

在一些实施方案中，油组分以从约2.5％至约20％的量存在。

在一些实施方案中，聚山梨酸酯是聚山梨酸酯80。在一些实施方案中，山梨酸酯是脱水山梨糖醇棕榈酸酯。在一些实施方案中，脂肪醇的PEG醚是二甘醇单油醚。

本文所提供的脂质囊泡组合物的使用方法

考虑将本文所提供的脂质囊泡组合物用于对象的化妆品用途，其适应症包括但不限于：预防或暂时改善皮肤皱纹；皮肤松弛；与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹；与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)；以及与额肌活动相关的中度至重度前额纹中的一种或多种的外观。

在某些实施方案中，包括药物实施方案，考虑将本文所提供的脂质囊泡组合物用于对象中的药物用途，其适应症包括但不限于：预防或暂时改善例如面部中的皮肤皱纹、皮肤松弛、与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)，和与额肌活动相关的中度至重度前额纹中的一种或多种的外观；

在一些实施方案中，对象是哺乳动物。在特定实施方案中，该哺乳动物是人。在一些实施方案中，该人对象是任何年龄的儿科或成年对象。

使用化妆品或药物组合物的方法

在某些实施方案中，包括药物实施方案，本公开内容还涉及使用包含肽拮抗剂或阴离子聚合物材料诸如透明质酸的化妆品或药物组合物的方法。在一些实施方案中，本公开内容涉及使用所述化妆品或药物组合物预防或暂时改善对象例如面部中的皮肤皱纹、皮肤松弛、与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)，以及与额肌活动相关的中度至重度前额纹中的一种或多种的外观的方法，其包括向所述对象的皮肤应用有效量的所述化妆品或药物组合物。在一些实施方案中，本公开内容涉及使用化妆品或药物组合物的方法，以改善对象的唇部的外观，例如，通过使唇部看起来更饱满。在一些实施方案中，将化妆品或药物组合物用于增强唇部丰满度、唇部体积、唇部平滑度、唇色或其组合。在一些实施方案中，化妆品或药物组合物为对象提供更饱满和/或天然外观的唇部。在一些实施方案中，将化妆品或药物组合物用于恢复对象的唇部的体积、清晰度、柔软度或丰满度的任何一种。在一些实施方案中，将化妆品或药物组合物用于减少或可见去除对象的唇部上的细纹或皱纹。在一些实施方案中，化妆品或药物组合物造成唇部中的增强的颜色(例如，玫瑰红)。在一些实施方案中，化妆品或药物组合物向对象的唇部提供体积、柔软度和清晰度的一种或多种。

在一些实施方案中，将所述脂质囊泡组合物局部应用于对象。本文提及的局部应用可指应用到一个或多个表面上，例如，角质组织上。在一些实施方案中，将局部组合物施用于对象的皮肤。在一些实施方案中，皮肤是对象的面部皮肤。在一些实施方案中，皮肤包含对象的唇部。局部应用可涉及直接应用到所需区域。在某些实施方案中，包括药物实施方案，当作为液体或气雾剂组合物存在时，局部化妆品或药物组合物或制品可以通过例如倾倒、滴落或喷雾来应用；当作为软膏、洗剂、乳膏、凝胶或类似组合物的形式时，通过抹平、刮擦、涂抹等来应用；当作为粉末时，通过喷粉来应用；或者通过其他任何适当的手段来应用。

在一些实施方案中，脂质囊泡组合物被配制为适用于局部应用的形式。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物被配制为乳膏、洗剂、悬浮液或乳剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物被配制为乳膏。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物被配制为洗剂。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物被配制为悬浮液。

在一些实施方案中，在使用或治疗过程中，对象一次或多次使用或用局部应用(包含有效量的脂质囊泡组合物)治疗，例如每天1-3次、每周1-21次、每天1次、每天2次或每天3次。在一些实施方案中，对象使用或用有效量的脂质囊泡组合物治疗约1次/周至约12次/周。在一些实施方案中，对象使用或用有效量的脂质囊泡组合物治疗至少约1次/周。在一些实施方案中，对象使用或用有效量的脂质囊泡组合物治疗至多约12次/周。在一些实施方案中，对象使用或用有效量的脂质囊泡组合物治疗约1次/周至约2次/周、约1次/周至约3次/周、约1次/周至约4次/周、约1次/周至约5次/周、约1次/周至约6次/周、约1次/周至约7次/周、约1次/周至约8次/周、约1次/周至约9次/周、约1次/周至约10次/周、约1次/周至约11次/周、约1次/周至约12次/周、约2次/周至约3次/周、约2次/周至约4次/周、约2次/周至约5次/周、约2次/周至约6次/周、约2次/周至约7次/周、约2次/周至约8次/周、约2次/周至约9次/周、约2次/周至约10次/周、约2次/周至约11次/周、约2次/周至约12次/周、约3次/周至约4次/周、约3次/周至约5次/周、约3次/周至约6次/周、约3次/周至约7次/周、约3次/周至约8次/周、约3次/周至约9次/周、约3次/周至约10次/周、约3次/周至约11次/周、约3次/周至约12次/周、约4次/周至约5次/周、约4次/周至约6次/周、约4次/周至约7次/周、约4次/周至约8次/周、约4次/周至约9次/周、约4次/周至约10次/周、约4次/周至约11次/周、约4次/周至约12次/周、约5次/周至约6次/周、约5次/周至约7次/周、约5次/周至约8次/周、约5次/周至约9次/周、约5次/周至约10次/周、约5次/周至约11次/周、约5次/周至约12次/周、约6次/周至约7次/周、约6次/周至约8次/周、约6次/周至约9次/周、约6次/周至约10次/周、约6次/周至约11次/周、约6次/周至约12次/周、约7次/周至约8次/周、约7次/周至约9次/周、约7次/周至约10次/周、约7次/周至约11次/周、约7次/周至约12次/周、约8次/周至约9次/周、约8次/周至约10次/周、约8次/周至约11次/周、约8次/周至约12次/周、约9次/周至约10次/周、约9次/周至约11次/周、约9次/周至约12次/周、约10次/周至约11次/周、约10次/周至约12次/周或约11次/周至约12次/周。在一些实施方案中，对象使用或用有效量的脂质囊泡组合物治疗约1次/周、约2次/周、约3次/周、约4次/周、约5次/周、约6次/周、约7次/周、约8次/周、约9次/周、约10次/周、约11次/周、约12次/周、约13次/周或约14次/周。

在一些实施方案中，将本公开内容的一层或多层的脂质囊泡组合物在给定时间应用于对象的皮肤。在一些实施方案中，在前一层的脂质囊泡组合物被完全吸收到对象的皮肤中之后，可以应用后一层。在一些实施方案中，脂质囊泡组合物可以用几秒(例如，一秒、两秒、三秒、五秒、十秒、十五秒、三十秒等)完全吸收到对象的皮肤中。在一些实施方案中，在给定时间将一层、二层、三层、四层、五层、六层或七层的脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤。在一些实施方案中，将脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤一天一次或多次(例如，1-3次/天、1次/天、2次/天、3次/天等)。在一些实施方案中，将脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤一周一次或多次(例如，1-21次/周、1-14次/周、1-7次/周等)。在一些实施方案中，将脂质囊泡组合物每天应用于对象的皮肤。在一些实施方案中，将一层或多层的脂质囊泡组合物一天一次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将两层或更多层的脂质囊泡组合物一天一次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将三层或更多层的脂质囊泡组合物一天一次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将一层或多层的脂质囊泡组合物一天两次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将两层或更多层的脂质囊泡组合物一天两次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将三层或更多层的脂质囊泡组合物一天两次应用于对象的皮肤持续一天或多天。在一些实施方案中，将脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤持续至少一天、两天、三天、四天、五天、六天、一周、两周、三周、一个月、两个月、三个月、六个月、一年。在一些实施方案中，将脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤持续超过一天、两天、三天、四天、五天、六天、一周、两周、三周、一个月、两个月、三个月、六个月、九个月或一年。在一些实施方案中，将一层或多层的脂质囊泡组合物一天两次应用于对象的皮肤持续数天，并且此后一天应用三次。在一些实施方案中，将五层的脂质囊泡组合物一天两次应用于对象的皮肤持续五天(例如，早晨和晚上)，并且此后将一至三层的脂质囊泡组合物应用于对象的皮肤一天三次(例如，早晨、中午和晚上)。

在一些实施方案中，将本公开内容的脂质囊泡组合物施用于对象，用于适应症包括但不限于：预防或暂时改善例如面部中的皮肤皱纹、皮肤松弛、与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)、和与额肌活动相关的中度至重度前额纹中的一种或多种的外观。

在一些实施方案中，将本公开内容的脂质囊泡组合物施用于对象，用于适应症包括但不限于：暂时改善唇部丰满度的外观。在一些实施方案中，本公开内容的脂质囊泡组合物与其他产品一起使用，包括，但不限于，凡士林、润唇膏、口红、唇彩、唇釉、唇部保湿剂、唇部护理、防晒霜等。

在一些实施方案中，本公开内容的局部化妆品组合物是自应用的或由对象施用。在某些实施方案中，包括药物实施方案，本公开内容的化妆品或药物组合物由医学专业人员例如在医疗办公室环境中应用或施用。本文提供的脂质囊泡组合物的制造方法

本文还提供了制造脂质囊泡组合物的方法。在一些实施方案中，如上所描述的本公开内容的组合物是通过将水包油乳剂的油组分与水包油乳剂的水性组分混合来制备的，其中水包油乳剂的油组分或水性组分包含一种或多种表面活性剂用于将水包油乳剂的油组分与水性组分乳化。在一个实施方案中，将表面活性剂与水性组分混合并加入到油中以形成乳剂。在混合条件下，然后将水包油乳剂与溶解的囊泡形成脂质和其他脂质组分(如果加入)混合，以有效形成脂质囊泡(例如，多体)。

在一些实施方案中，将一种或多种渗透增强剂和一种或多种化合物(例如，阴离子聚合物材料、一种或多种肽等)加入到水包油乳剂的油组分、水包油乳剂的水性组分或两者中。替代地，或除此之外，可以将一种或多种渗透增强剂和/或一种或多种化合物加入到脂质组分中。

在一方面，本文提供了制备本文所提供的脂质囊泡组合物的方法，其包含：a)通过将水包油乳剂的油组分与水包油乳剂的水性组分混合，制备包含活性成分的水包油乳剂；b)在除了水以外的可接受溶剂中溶解囊泡形成脂质；c)将水包油乳剂加入到溶解的囊泡形成脂质中；以及d)在混合条件下，将水包油乳剂与溶解的囊泡形成脂质混合以有效形成脂质囊泡，所述脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层和包埋在脂质囊泡中的水包油乳剂。在一些实施方案中，活性成分是本文所提供的肽。在一些实施方案中，活性成分是本文所提供的阴离子聚合物材料。

在一些实施方案中，方法进一步包含加入本文所提供的一种或多种附加组分(例如，渗透增强剂、黏度增强剂等)

在一些实施方案中，步骤a)的囊泡的将水包油乳剂的油组分与水包油乳剂水性组分混合和/或步骤e)的混合条件包含使用诸如均质化或乳化的搅拌、或不涉及搅拌的微乳剂技术。在一个实施方案中，混合包含高压均质。高压均质提供了对脂质囊泡的组合物的相对精确的控制。高压均质适用于耐剪切的小分子和肽或蛋白质。在一个实施方案中，形成的组合物是本文所描述的脂质囊泡组合物中的任何一种。

在一些实施方案中，在任一步骤中加入其他脂质组分。

实施例

实施例1.透明质酸的多体脂质囊泡组合物的制备

用三种不同分子量的透明质酸250K、50K和10K(Creative PEGWorks，ChapelHill，NC)以1mg/mL或1.5mg/mL浓度配制具有多种/协同渗透增强剂的双相囊泡(多体)。对于制剂开发，使用了未标记的HA。对于扩散池实验，用标记的HA(罗丹明-HA250K、FITC-HA50K和FITC-HA-10K；Creative PEGWorks)制备囊泡。

多体制备的一般步骤如下：

1)将油相和水相成分在分别的在烧杯中称出。

2)将两个烧杯加热至～70℃以完全融化并掺入所有组分。

3)将水相加入到油相中，同时用刮刀剧烈搅拌以形成o/w粗乳剂，在70℃水浴中有效产生均质的乳状溶液(～2至6min)。溶液的温度为～55至65℃。

4)使用LV1微流化器或具有Z5模块的纳米DeBee均质机在～20,000psi下将制剂进行三次批量处理。

囊泡构成步骤(应用于所有制剂)：

1)将脂质相组分称量到20mL玻璃小瓶中。

2)将小瓶在水浴中加热至～70℃，以完全融化并掺入所有组分。

3)将水相(系统A)加入液相中，同时剧烈搅拌～10至20min，直到溶液的温度为～60℃。

在一些情况下，将混合物间歇性涡旋并加热5秒/5秒持续8-10个循环，直到形成均匀的乳膏状洗剂。

该过程的示意图如图7所示。该示例性过程的流程图如图8所示。

整体实验中使用的各种脂质相描述于表A中，并且水相描述于下表B中。

表A-制剂中使用的脂质相

表B-制剂中使用的水相

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实施例2.分析和表征方法

使用以下方法来表征以下实施例中所描述的制剂以及制剂的性能。

物理化学表征-进行感官观察、光学显微镜和共聚焦显微镜(Zeiss710共聚焦激光扫描显微镜(CLSM))对制剂表征。使用Zeiss LSM 710CLSM(使用氩激光488和HeNe激光543线用于FITC(495/525)和罗丹明(570/590))以及平场复消色差20x/0.80干式物镜或63x/1.40油浸物镜获得制剂的共聚焦显微镜图像。在选定情况下应用光学变焦选择。样品组之间的激光强度、针孔和增益设置保持一致，以便能够比较样品之间的相对荧光强度测量值。使用Zen 2009软件捕获和处理图像。

使用Nano ZS Zetasizer(Malvern Instruments，Worcestershire，UK)对制剂进行大小(流体动力学直径)、多分散指数以及zeta(ζ)电位测量，其使用动态光散射(DLS)测量颗粒的流体动力学直径。将制剂的等分试样在水中稀释20倍，并分别制备每种制剂的100L和1000L用于大小和ζ电位测量。测量以一式三份进行。

体外扩散池研究-从萨斯喀彻温大学皇家大学医院(Saskatoon，SK，Canada)经受选择性乳房成形术手术的女性捐赠者获得全厚人类乳房皮肤。萨斯喀彻温大学人类伦理委员会授权了皮肤采集批准。在手术后2h内收集皮肤，修剪皮下脂肪，并在-20℃下储存直至使用。将9mm孔直径(0.63cm2)的直排Bronaugh流通扩散池安装在水隔热池加热器(PermeGear,Inc.，Hellertown，PA)上，并设定为32℃的恒定温度。将预切的1cm2皮肤切片放置在扩散池中，使角质层面朝上。使用蠕动泵以1mL/h的速率在37℃下使灌注缓冲液(含0.05％叠氮化钠的100mM磷酸盐缓冲液)流通通过扩散池的下半部。向皮肤表面给药0.1mL的制剂。温育24小时后，从池中移取皮肤样品，清洗并处理以进行分析。

皮肤分析-从扩散池中移取皮肤样品后，首先，去除剩余在皮肤表面的制剂。如下对每个皮肤样品进行清洁方案和胶带剥离方案，以去除残留的结合乳膏和角质层：用3x10mL的水洗涤皮肤样品，用kimwipe拍干并分成两半；将一半的皮肤用胶带剥离两次(去除表面结合制剂)，在干冰上包埋到OCT化合物中并冷冻切片。通过共聚焦显微镜检查冷冻切片。

用Leica CM1850低温恒温器将皮肤样品冷冻切片为10μm的切片。载玻片上的切片未染色。使用Zeiss LSM 710 CLSM(使用氩激光488和HeNe激光543线用于FITC(495/525)和罗丹明(570/590))以及平场复消色差20x/0.80干式物镜或63x/1.40油浸物镜获得皮肤切片的共焦显微镜图像。在选定情况下应用光学变焦选择。样品组之间的激光强度、针孔和增益设置保持一致，以便能够比较不同的处理之间的相对荧光强度测量值。使用Zen 2009软件捕获和处理图像。

在分析后续处理样品之前，使用“未处理”皮肤样品以确认增益和针孔设置，以排除噪声和自发荧光背景

实施例3.阳离子渗透增强剂的评价

配制HA250K+HA10K 1mg/mL组合的第一个策略是将他们掺入到具有单阳离子、二阳离子或多阳离子构建单元的多体中，即下一代双相囊泡(协同增强剂型)，以增强带负电的透明质酸到皮肤层中的封装和递送。这些制剂的组分如下表C所示。

表C-使用阳离子赋形剂递送HA250+10(1mg/mL)的制剂的组合物

制剂	脂质相	系统A
			F1	F1SunL	F4M
F2	F1SunL	F2G12312
			F3	F1SunL	F3Plys1-5K

示出Rho-HA250K(红色)和FITC-HA10K(绿色)荧光在制剂中的分布的多体的共聚焦显微镜研究，用于分析囊泡中的HA封装(图1小图A图像)。这些样品中HA的最终浓度为1mg/mL。共聚焦显微轮廓示踪确认了红色Rho-HA250K和绿色FITC-HA10K与制剂F1、F2和F3囊泡的关联(图1，小图A迹线)。沿所选平面示踪囊泡的荧光强度(FI)曲线示出了红色和绿色荧光的共定位，指示两种不同分子量HA的共封装。对制剂拍摄的光学显微图像指示每种类型的制剂的多体(下一代双相囊泡)的形成(图1小图B)。对系统A(亚微米乳剂组分)和双相囊泡进行了Zetasizer研究(图1小图C)。该制剂被证明是多分散的，具有通常在0.3-10μm之间的囊泡大小。Zetasizer数据示出的结果与显微镜观察(图1小图B)结果一致。这是典型的多体。F1、F2和F3的ζ电位分别是+33.6±0.6、+13.0±0.71和-5.78±0.31。对以下实施例所描述的其他制剂观察到了相似数据(数据未示出)。

对多体制剂的物理化学性质进行了颜色、稠度和同质性评估。所有制剂均为适用于局部应用的洗剂或乳膏稠度。在4℃下储存＞3个月时，这些制剂物理稳定，显示没有分离、沉积或其他稳定性问题的迹象。显微镜观察确认了多体在储存期间保持完整且均匀分布。对以下实施例所描述的其他制剂做了相似观察(数据未示出)。

将在扩散池中用含有荧光标记HA的局部制剂进行体外处理的人体皮肤样品的冷冻切片来评价荧光蛋白的存在。利用三种阳离子囊泡构建单元的三种基本囊泡制剂示出了(带负电的)HA化合物递送的增强(表C)。

这些研究指示所有三种阳离子制剂都增加了HA递送(表D，图2)。增强顺序遵循二阳离子＞单阳离子＞多阳离子制剂的顺序。

表D-用F1、F2和F3制剂处理的皮肤切片的荧光强度(FI)分析。

实施例4.评价透明质酸浓度和附加化妆品组分的存在

接着，评价在基本囊泡制剂中HA浓度的效应。为了评估这种效应，在表E中提供的制剂中制备了1mg/mL和1.5mg/mL的250kDa和10kDa透明质酸(组合HA的总重量，每个分子量的等质量)1mg/mL和1.5mg/mL的250kDa和50kDa透明质酸(组合HA的总重量，每个分子量的等质量)。还根据表E的由1％羟丙基甲基纤维素(HPMC)凝胶制成的制剂E11和E12制备了HA的溶液或凝胶制剂。

表E-用于递送HA250+10和HA250+50组合的制剂的组合物

在如实施例2中提供的施用于人体皮肤时，获得如下表F所示的结果。如比较制剂E1与E2以及制剂E4与E5所示，HA250/10K或HA250/50K总浓度从1mg/mL到1.5mg/mL的增加的浓度，囊泡制剂增加了递送(表F)，从HA250K组分的增加中尤其明显。以获得化妆品囊泡制剂的进一步优化指示这些变化不影响递送，参见制剂E2 vs E3和E5vs E6(表F)。

比较制剂E7、E8、E9和E10(表F)指示了与其他制剂相比，这些组合物未实现递送增强。在制剂E7和E10(表7)中，相比于单独使用单阳离子剂，一起使用多阳离子和单阳离子剂的策略减少了递送。以“游离”(未封装)形式掺入HA250/10K或250/50K的凝胶制剂(表F的制剂E11和E12)示出了非常低/可忽略不计的递送水平。

相比于在溶液或凝胶制剂中的HA，所有多相囊泡制剂均增强了递送。多相囊泡的制剂设计差异指示HA递送是可以调节的。

表F-用HA制剂处理的皮肤切片的荧光强度(FI)分析

还评估了具有附加化妆品性质的多体组合物，包括Lipovol GBT(山萮酸甲酯)或烟酸苄酯的制剂。评估了对具有250/10kDa和250/50kDa的组合分子量的透明质酸的这些组分的透皮渗透的效应。测试的制剂如下表G所示。

表G-用于递送具有优化化妆品性质的HA250+10和HA250+50组合(总HA浓度1.5mg/mL)的制剂的组合物

如实施例2中所提供的施用于体皮肤时，获得如下表H所示的结果。

表H

比较组合物与为药妆效应而添加的成分的递送效率指示了山萮酸甲酯和烟酸苄酯(BN)影响递送。例如，对于HA250/10K制剂G1与G2(表H)和制剂G3和G4(表H和图4)的递送指示了无论T存在或不存在，BN均增强了递送。

当比较制剂G5和G7(表H)以及制剂G6和G8(表H和图4)时，指示了单独存在或不存在山萮酸甲酯(无BN)不影响递送，但是当不存在山萮酸甲酯时BN增强递送，其可能意为山萮酸甲酯抑制BN增强递送的效应。在比较制剂G7和G8(表H和图3)时，这也是显而易见的，其指示了在没有山萮酸甲酯的情况下，BN增加了递送。

当比较制剂G4和G8(表H和图4)时，注意到使用BN但没有山萮酸甲酯是递送HA250/10K或250/50K组合的优选制剂，具有增加了200％的总体效率。

当磷脂组分被另一种类型的磷脂取代时，经过测试但发现在递送HA250/50K方面效果较差的另一种制剂组合物是制剂G9(表H和图4)。此外，还发现脂质相组分的浓度的增加以及包含250kDa、50kDa和10kDa MW透明质酸(分子式G10；表H)的效果较差。例如，将表H的G10与表F的E2和E5进行比较。

此外，来自具有相同总组成的等效制剂的不同组的两种不同的HA mwt组合250/10K或250/50K的递送没有实质性差异。例如，参见G1vs.G5和G3 vs.G7。

在表F和H中，还示出了用各种制剂处理的皮肤样品的Ch1/Ch2荧光值的比率。相似的比率指示FITC-HA10或FITC-HA50K和Rho-HA250K的递送与多体制剂中这两种活性物质的原始递送比率相似，即他们以相同程度同时递送。较低的比率指示HA250K组分的递送相对于较小的聚合物进一步增强。

实施例5.评价增强烟碱乙酰胆碱受体肽拮抗剂(芋螺毒素肽类似物)渗透的多体制剂

该工作的目的是探索来自下一代双相囊泡制剂(多体)的芋螺毒素肽类似物(以下称为“C7肽”；Glo Pharma)的皮肤渗透性质。C7肽具有相似于SEQ ID NO：3的氨基酸序列，其是天然存在的肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的芋螺毒素肽拮抗剂。与本文所提供的所有肽(例如，SEQ ID NO：1-52和60-99)一样，用于配制脂质囊泡递送组合物的目的，C7肽具有与SEQID NO：3的天然芋螺毒素相似的性质(例如，相似的大小、构象、电荷等)。因此，预计为C7肽工作的脂质囊泡组合物将同样为本文提供的其它肽工作。

用2mg/mL的负载浓度的C7肽配制三种多体型囊泡(F6A-C7、F1B-C7、F1C-C7)，并且与C7肽溶液进行比较。对制剂的物理化学性质进行了表征。

用多相囊泡制剂F6A-C7、F1B-C7、F1C-C7进行体外扩散池研究，并且收集透皮级分用于在Climax实验室通过质谱法进一步分析。

总体而言，结果示出可以制备含有多相囊泡乳膏制剂的合适的C7肽用于皮肤内/透皮递送。

这些实验的具体目的是从以下开发的各种制剂中评估C7肽的皮肤递送：1)在使用Bronaugh型直排扩散池和人乳房皮肤的实验中评价C7肽通过人体皮肤的摄取。用含有C7肽的制剂处理皮肤样品，并通过质谱法评价透皮级分中通过皮肤的渗透；2)作为参考，使用无C7肽溶液进行比较，并使用空白载体作为对照3)每小时收集透皮级分进行分析4)通过Pall过滤将级分合并并浓缩，并运送用于在Climax Laboratories，Inc.(San Jose，CA)进行分析。

材料和方法

制剂：具有多种/协同渗透增强剂的双相囊泡(多体)-配制了五种不同的囊泡。从中选择了三种制剂进行测试。对于制剂开发，使用了C7肽(Anaspec，代码：74337，批号1958617)。对于扩散池实验，使用不含肽和带有2mg/mL的C7肽的多体。扩散池剂量为0.1g制剂与0.2mg肽。制剂的pH值在6.2-6.7之间。

物理化学表征-进行感官观察、光学显微镜和共聚焦显微镜(Zeiss710共聚焦激光扫描显微镜(CLSM；Carl Zeiss GmH，Germany)对制剂表征。

使用Zetasizer NanoZS(Malvern Instruments，Worcestershire，UK)对用未标记的C7肽制备的制剂F6A-C7、F1B-C7和F1C-C7进行大小(流体动力学直径)、多分散指数以及的zeta(ζ)电位测量，其使用动态光散射(DLS)测量颗粒的流体动力学直径。评估80uL制剂的等分试样的粒径分布，并随后用水稀释10倍以进行ζ电位测量。测量以一式三份进行。

体外扩散池研究-在允许下从萨斯喀彻温大学皇家大学医院(Saskatoon，SK，Canada)经受选择性乳房成形术手术的女性捐赠者获得全厚人类乳房皮肤。萨斯喀彻温大学人类伦理委员会授权了批准了皮肤采集批准。在手术后2小时内收集皮肤，修剪皮下脂肪，并在-20℃下储存直至使用。

使用带有暴露表面积为0.636cm²的9mm直径Bronaugh型特氟龙流通扩散池(PermeGear,Inc.，Hellertown，PA)评价从制剂到离体的人皮肤的体外的C7肽吸收。通过循环水浴加热器将池座保持在32℃。将保持在37℃的pH 7.2的含0.05％叠氮化钠脱气磷酸盐缓冲液(PBS)缓冲液用作流速为1mL/h的灌注流体。将皮肤样品从冰箱中取出并切成约1cmx1cm的正方形碎片，并表皮朝上安装到的扩散池中。将含有C7肽的F6A-C7、F1B-C7、F1C-C7多体制剂或对照空白制剂(每个细胞100μL)在t＝0时应用于皮肤，并用特氟龙帽覆将池盖住以提供闭塞。处理进行24小时。使用编程级分收集器将透皮级分收集到3mL组织培养管中，以收集每小时总共24x 1mL/池的级分。

透皮级分分析-每小时收集透皮级分进行分析持续24h。对于每个池，收集24个1mL级分并标记1/1h、1/2h、1/3h……1/24h等。将样品送到Glo/Climax分析实验室进行分析。

将来自扩散池研究的皮肤样品按通常的方案清洁以除去残留的结合乳膏，即在将皮肤样品从扩散池中取出后并用3x 10mL水洗涤，并用kimwipe拍干。清洁的皮肤盘在-20℃下储存。

结果和讨论

多体制剂优化与表征

表I和表J示出了含和不含C7肽开发的制剂的组合物。最初使用Phospholipon 90H(大豆磷脂酰胆碱)制备制剂。然后随后，基于感官和物理化学观察，它被Sunlipon 90H(向日葵磷脂酰胆碱)(SunL)取代。所得的脂质囊泡制剂的光学显微镜图像如图5所示。

表I-用于递送C7肽的制剂组合物

表J-制剂组成

表K总结了感官性质、物理稳定性粒径范围和物理稳定性。所有制剂均为适用于局部应用的洗剂或乳膏稠度。在4℃下储存＞1个月时，制剂物理稳定，显示没有分离、沉积或其他稳定性问题的迹象。

表K-囊泡制剂的感官性质

这些制剂被证明是多分散的，其囊泡大小范围通常在0.3-5μm之间，如光学显微镜图像所示(图1和表4)。显微镜观察确认了具有典型双相囊泡形态的多体的形成，并且囊泡在整体制剂中均匀分布，无论是含C7肽还是空白(无肽)制剂。

相比于他们各自的空白制剂，每种含C7肽制剂的大小分布相似，但总体上，相比于肽制剂，空白制剂具有更窄的大小分布(图6A和图6B)

电位分析仪数据示出的结果与显微镜观察结果一致(图6B)。这是典型的多体。F6A-C7的ζ电位为正，另外两个F1B-C7和F1C-C7带负电(表L和图6A和图6B)

表L-用未标记的C7制成的多相囊泡制剂的粒径分析和ζ电位

^用系统A F4M制备：177.0±8.255nm；+27.3±3.13mV

*用系统A F1制备：160.3±6.038；-5.70±0.295

脂质囊泡制剂用C7浓度为2mg/mL制备，并以200微克皮肤样品施用于皮肤样品。制备每种制剂的空白版本作为对照，并制备C7肽在水中的mg/mL溶液作为附加对照。每种制剂一式三份和空白制剂进行测试，未处理的皮肤和C7肽溶液作为游离的未封装的肽用于分析的背景级分进行分析。

扩散池研究-C7的透皮递送

在该研究中，由Climax分析实验室收集透皮级分用于通过质谱进一步分析。

这些研究指示所有三种多体制剂在体外将C7肽深深地递送到人体皮肤中并通过人体皮肤。在这些多体制剂中，公式F6A-C7和F1B-C7递送的C7肽量是F1C-C7的两倍。

对于F6A-C7、F1B-C7和F1C-C7，通过处理的9mm直径皮肤盘递送的C7肽的总量(Qt(24h))分别为599.62±265.62、600.46±402.77和276.56±111.47ng/24h，对应于每种制剂的0.3、0.3和0.14％递送率。皮肤每单位表面积的Qt，即ng/cm²和C7肽递送的百分比如表M所示。

表M-来自多体制剂的C7肽的透皮递送

这些实验指示对于C7肽，与协同组分的增强水平如下：PEFA/油醇聚醚-2＝吐温80/司盘40/PEG-4-二月桂酸盐＞吐温80/司盘40/油醇聚醚-2。

实施例6.与安慰剂相比，肌肉型nAChR肽拮抗剂治疗面部皱纹的安全性和有效性评价

在一项随机、双盲人类临床试验中，与安慰剂相比，测试本公开内容的肌肉型nAChR肽拮抗剂的脂质囊泡制剂在治疗面部皱纹(皮肤皱纹)和眉间皱眉纹方面的安全性和有效性。患者(每组50名)在第1天使用应用于双侧前额和皱眉纹区域的一定量的肌肉型nAChR肽拮抗剂或安慰剂(空白脂质囊泡)进行治疗。

主要结局指标：在最大眉毛抬高时，前额纹通过使用Photonumeric Guide(FWS)的面部皱纹量表的研究者评估获得无或轻度评分的参与者的百分比。

在第30天，使用采用Photonumeric Guide(FWS)的4分面部皱纹量表：0＝无，1＝轻度，2＝中度，或3＝重度，评估患者前额纹在最大眉毛抬高时的严重程度。确定评分为无或轻度的参与者的百分比。

主要结局指标：在最大眉毛抬高时，前额纹通过使用Photonumeric Guide(FWS)的面部皱纹量表的对象评估获得无或轻度评分的参与者的百分比。

同样在第30天，患者使用采用Photonumeric Guide(FWS)的4分面部皱纹量表：0＝无，1＝轻度，2＝中度，或3＝重度，评估其前额纹在最大眉毛抬高时的严重程度，并确定评分为无或轻度的参与者的百分比。

次要结局指标：通过对象对前额纹外观满意度的评估(参与者评估)，获得满意或非常满意的参与者的百分比。

在第30天，参与者使用5分量表：1＝非常不满意，2＝不满意，3＝一般，4＝满意，或5＝非常满意，对其前额纹区域外观的总体满意度进行评级。确定评级为满意或非常满意的参与者的百分比。

次要结局指标：研究者评估的静止时前额纹FWS比基线改善＝1级的参与者的百分比。

在基线时和第30天，研究者使用4分FWS：0＝无，1＝轻度，2＝中度，或3＝重度，评估患者静止时前额纹的严重程度。确定比基线时改善＝1级的参与者的百分比。

次要结局指标：对象评估的静止时前额纹FWS比基线改善＝1级的参与者的百分比。

在基线时和第30天，参与者使用4分FWS：0＝无，1＝轻度，2＝中度，或3＝重度，评估其静止时前额纹的严重程度。确定比基线时改善＝1级的参与者的百分比。

实施例7.相比于安慰剂，评估局部应用包含透明质酸的脂质囊泡组合物以增强唇部特征的安全性和有效性

在随机、双盲人体临床试验中，与安慰剂相比，公开的透明质酸脂质囊泡制剂在应用于唇部方面进行了安全性和有效性测试。在第1天将一定量的含有透明质酸的脂质囊泡制剂或安慰剂(空白脂质囊泡)应用于对象(每组50个)的上唇和下唇。

主要结果：在使用后14天和30天，在Medicis唇部丰满度表(MLFS)上，唇部丰满度至少增加一个等级。MLFS由独立的皮肤科医生确定：MLFS是经过验证的5分唇丰满量表(1＝非常薄；2＝薄；3＝中等；4＝饱满；5＝非常饱满)。

在第14天，对象唇部的丰满度使用5分MLFS：1＝很薄；2＝薄；3＝中等；4＝满；5＝评估非常满并与基线进行比较(在与脂质囊泡制剂一起使用之前)。确定了至少改善1MLFS水平的对象数量。

在第30天，使用MLFS再次评估对象唇部的丰满度，以确定使用后效应的寿命。将MLFS分数与基线和第14天结果进行比较。确定了至少改善1MLFS水平的对象数量。

次要结果：通过对象对唇部外观满意度的评估(参与者评估)实现满意或非常满意的参与者的百分比。

在第30天，参与者使用5分制对唇部外观的总体满意度进行评分：1＝非常不满意，2＝不满意，3＝中性，4＝满意或5＝非常满意。确定评级为满意或非常满意的参与者的百分比。

次要结果：由皮肤科医生评估填充剂的功效和耐久性：使用5点研究者全球评估(IGA)量表评估皮肤科医生关于填充剂效应的有效性和耐久性的意见：1＝更差，2＝轻度改善，3＝改善，4＝较大改善，5＝非常改善。

独立的皮肤科医生比较在第0天(使用前)，第14天和第30天拍摄的对象唇部的图像。在第14天和第30天评估显示“改进”、“较大改善”或“非常改善”评级的对象数量并进行比较。

实施例8.评估局部应用包含透明质酸的脂质囊泡组合物以增强唇部特征的安全性和有效性

在人体临床试验中测试了本文所描述的透明质酸脂质囊泡制剂(例如，如实施例1中所描述的透明质酸脂质囊泡制剂)应用于唇部的安全性和有效性。将一定量的包含透明质酸的脂质囊泡制剂施用于对象的上唇和下唇(共55个)五天。对象年龄为35岁及以上，包括各种种族背景和皮肤类型。

对象每天两次(早晚)应用五层制剂。一旦前一层完全吸收到对象的上唇和下唇中，就重新涂抹每一层制剂。从上下唇之间的基线测量每个对象的上唇和下唇高度的增加，在五天之前和之后测量。

图9示出了应用五天后的结果，其中对象在不同种族和皮肤类型中表现出明显更丰满的唇部。如图所示，从基线测量，对象的上唇高度增加了2.7％至45％，从基线测量的下唇高度增加了3.6％至85％。此外，对象在涂抹制剂五天后体验到更光滑、更富有颜色的唇部。

虽然本文已经显示并描述了本发明的优选实施方案，但是对于本领域技术人员明显的是，这些实施方案仅以示例的方式提供。在不脱离本发明的情况下，本领域技术人员现将构想到许多变化、改变和替换。应当理解，在实施本发明的过程中可以采用本文所述的本发明实施方案的各种替代方案。旨在以所附权利要求书限定本发明的范围，由此涵盖在这些权利要求范围内的方法和结构及其等同物。

Claims

1.一种脂质囊泡组合物，包含：

(a)脂质囊泡，每个所述脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层，

(b)水包油乳剂，所述水包油乳剂包埋在所述脂质囊泡中，并通过一种或多种表面活性剂稳定；

(c)阴离子聚合物材料，所述阴离子聚合物材料包埋在所述脂质双层和/或所述水包油乳剂中；以及

(d)一种或多种渗透增强剂，所述一种或多种渗透增强剂包埋在所述脂质双层和/或所述水包油乳剂中，

其中所述一种或多种渗透增强剂包括具有约10或更低的亲水亲脂平衡(HLB)的一种或多种非离子表面活性剂。

2.如权利要求1所述的脂质囊泡组合物，其中所述阴离子聚合物材料包括阴离子多糖。

3.如权利要求2所述的脂质囊泡组合物，其中所述阴离子聚合物以约0.1mg/mL至约10mg/mL的所述组合物的量存在。

4.如权利要求2或3所述的脂质囊泡组合物，其中所述阴离子多糖包括透明质酸或其盐。

5.如权利要求1-4中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约500kDa的分子量。

6.如权利要求1-5中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述阴离子聚合物材料包括第一阴离子聚合物材料和第二阴离子聚合物材料，每种阴离子聚合物材料具有不同的分子量。

7.如权利要求6所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物材料和所述第二阴离子聚合物材料是相同材料。

8.如权利要求6或7所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物材料具有不超过约75kDa的分子量并且所述第二阴离子聚合物材料具有大于约75kDa的分子量。

9.如权利要求6-8中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物材料具有从约5kDa至约50kDa的分子量，并且其中所述第二阴离子聚合物材料具有从约100kDa至约500kDa的分子量。

10.如权利要求6-9中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物材料具有50kDa的分子量，并且其中所述第二阴离子聚合物材料具有从约250kDa的分子量。

11.如权利要求6-10中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物和所述第二阴离子聚合物的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、3:2、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。

12.如权利要求11所述的脂质囊泡组合物，其中所述第一阴离子聚合物和所述第二阴离子聚合物的所述比率是约1:2。

13.如权利要求1-12中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述囊泡形成脂质包括磷脂、糖脂、卵磷脂、神经酰胺、溶血卵磷脂、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、心磷脂、磷脂酸、脑苷脂，或其任何组合。

14.如权利要求1-13中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述囊泡形成脂质包括磷脂。

15.如权利要求1-14中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物包含从约0.5％至约25％(w/w)的组合物的量的囊泡形成脂质。

16.如权利要求1-15中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述水包油乳剂包含油组分中的甘油三酯。

17.如权利要求16所述的脂质囊泡组合物，其中所述甘油三酯包括中链甘油三酯。

18.如权利要求16或17所述的脂质囊泡组合物，其中所述甘油三酯以从约1％至约35％(w/w)的所述组合物的量存在。

19.如权利要求1-18中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物包含固醇。

20.如权利要求19所述的脂质囊泡组合物，其中所述固醇以从约1％至约5％(w/w)的所述组合物的量存在。

21.如权利要求1-20中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物包含丙二醇。

22.如权利要求21所述的脂质囊泡组合物，其中所述丙二醇以从约1％至约25％(w/w)的所述组合物的量存在。

23.如权利要求1-22中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物包含一种或多种黏度增强剂。

24.如权利要求1-23中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述一种或多种黏度增强剂以从约0.5％至约10％(w/w)的所述组合物的量存在。

25.如权利要求1-24中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述非离子表面活性剂选自脂肪醇的聚乙二醇醚、脱水山梨糖醇酯、聚山梨酸酯、脱水山梨糖醇酯和聚乙二醇脂肪酸酯及其组合。

26.如权利要求25所述的脂质囊泡组合物，其中所述脂肪醇的聚乙二醇醚包含C₈-C₂₂脂肪醇和具有从约2个至约8个乙二醇亚基的聚乙二醇基团。

27.如权利要求25或26所述的脂质囊泡组合物，其中所述脂肪醇的聚乙二醇醚包括二甘醇十六烷基醚、2-(2-十八烷氧基乙氧基)乙醇、二甘醇单油醚、聚氧乙烯(3)油醚或聚氧乙烯(5)油醚或其任何组合。

28.如权利要求25-27中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述脱水山梨糖醇酯包括脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇三油酸酯、脱水山梨糖醇倍半油酸酯或脱水山梨糖醇异硬脂酸酯或其任何组合。

29.如权利要求25-28中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述聚乙二醇脂肪酸酯包括PEG-8二月桂酸酯、PEG-4二月桂酸酯、PEG-4月桂酸酯、PEG-8二油酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-8二硬脂酸酯、PEG-7椰油酸甘油酯和PEG-20杏仁甘油酯或其任何组合。

30.如权利要求25-29中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述聚山梨酸酯包括聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯21、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯80、聚山梨酸酯85或其任何组合。

31.如权利要求1-30中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述非离子表面活性剂具有约10或更少的疏水亲脂平衡(HLB)。

32.如权利要求1-30中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述非离子表面活性剂以从约0.5％至约5％(w/w)的所述组合物的量存在。

33.如权利要求1-32中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物包含阳离子表面活性剂。

34.如权利要求33所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子表面活性剂是单阳离子表面活性剂。

35.如权利要求33或34所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子表面活性剂包括脂肪酰胺衍生的丙二醇-磷酸二铵酯。

36.如权利要求33-35中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子表面活性剂以从约1％至约20％(w/w)的所述组合物的量存在。

37.如权利要求33所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子渗透增强剂包括二阳离子渗透增强剂。

38.如权利要求37所述的脂质囊泡组合物，其中所述二阳离子渗透增强剂是双子阳离子表面活性剂。

39.如权利要求37或38所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子渗透剂包括阳离子聚合物。

40.如权利要求37-39中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述阳离子渗透增强剂以从约0.01％至约1％(w/w)的所述组合物的量存在。

41.如权利要求1-40中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述渗透增强剂包括水杨酸酯或烟酸酯。

42.如权利要求41所述的脂质囊泡组合物，其中所述酯是C₁-C₆烷基酯或苄酯。

43.如权利要求41或42所述的脂质囊泡组合物，其中所述渗透增强剂包括水杨酸甲酯或烟酸苄酯。

44.如权利要求1-43中任一项所述的脂质囊泡组合物，进一步包含一种或多种添加剂。

45.如权利要求44所述的脂质囊泡组合物，其中所述添加剂包括一种或多种的增稠剂、防腐剂、保湿剂、软化剂、润湿剂、抗菌剂或其任何组合。

46.如权利要求1-45中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物被配制用于局部应用于对象的皮肤。

47.如权利要求1-46中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物被配制为将所述阴离子聚合物递送至对象的皮肤的指定层。

48.如权利要求1-47中任一项所述的脂质囊泡组合物，其中所述组合物被配制为乳膏、洗剂、悬浮液或乳剂。

49.一种制备如权利要求1-48中任一项所述的脂质囊泡组合物的方法，包括

a)通过将水包油乳剂的油组分与所述水包油乳剂的水性组分混合，

制备包含所述阴离子聚合物材料的所述水包油乳剂，其中所述水包油乳剂的所述油组分和/或所述水性组分包含所述一种或多种表面活性剂；

b)在水以外的可接受溶剂中溶解囊泡形成脂质；

c)将所述水包油乳剂加入溶解的所述囊泡形成脂质中；以及

d)在有效地形成所述脂质囊泡的混合条件下，将所述水包油乳剂与溶解的所述囊泡形成脂质混合，所述脂质囊泡包含含有囊泡形成脂质的脂质双层和包埋在所述脂质囊泡中的水包油乳剂。

50.一种通过将化妆品剂递送至对象的皮肤表面以下来产生一种或多种化妆品效应的方法，包括向所述皮肤表面施用如权利要求1-48中任一项所述的脂质囊泡组合物。

51.如权利要求50所述的方法，其中所述化妆品剂是聚阴离子填充材料。

52.如权利要求50或51所述的方法，其中将所述化妆品剂递送至所述对象的真皮。

53.如权利要求50-52所述的方法，其中所述一种或多种化妆品效应包括唇部丰满度、唇部体积、唇部平滑度、唇色或其组合的增强。

54.如权利要求50所述的方法，其中所述化妆品剂是肌肉型烟碱乙酰胆碱受体的肽拮抗剂。

55.如权利要求54所述的方法，其中将所述化妆品剂递送至所述对象的肌肉或皮下组织。

56.如权利要求54或55所述的方法，其中所述一种或多种化妆品效应包括预防或暂时改善一种或多种皮肤皱纹的外观。

57.如权利要求56所述的方法，其中所述一种或多种皮肤皱纹包括与皱眉肌和/或降眉间肌活动相关的中度至重度眉间纹、与眼轮匝肌活动相关的中度至重度外眦纹(鱼尾纹)、或与额肌活动相关的中度至重度前额纹。

58.一种增强个体中的唇部特征的方法，包括将组合物应用于所述个体的唇部，其中所述组合物包含含有水包油乳剂和阴离子聚合物材料的脂质囊泡。

59.如权利要求58所述的方法，其中所述唇部特征包括唇部丰满度、唇部体积、唇部平滑度、唇色或其组合。

60.如权利要求58所述的方法，其中所述组合物被配制用于局部使用。

61.如权利要求58所述的方法，其中将所述组合物递送至所述个体的皮肤表面以下。