CN117143737A - 一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 - Google Patents
一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117143737A CN117143737A CN202311109252.3A CN202311109252A CN117143737A CN 117143737 A CN117143737 A CN 117143737A CN 202311109252 A CN202311109252 A CN 202311109252A CN 117143737 A CN117143737 A CN 117143737A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- algae
- culture medium
- double
- wastewater
- eyebrow
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 title claims abstract description 45
- 241000219198 Brassica Species 0.000 title claims abstract description 42
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 title claims abstract description 40
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 title claims abstract description 40
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 40
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 title claims abstract description 40
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000010865 sewage Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 16
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 10
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 4
- 208000014451 palmoplantar keratoderma and congenital alopecia 2 Diseases 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims description 2
- 235000021110 pickles Nutrition 0.000 claims 2
- 241000206744 Phaeodactylum tricornutum Species 0.000 claims 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 abstract description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 abstract 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 abstract 1
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 abstract 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000005554 pickling Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000004065 wastewater treatment Methods 0.000 description 4
- 240000005865 Brassica juncea var. tumida Species 0.000 description 3
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 2
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 241000143060 Americamysis bahia Species 0.000 description 1
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] Chemical compound [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000009388 chemical precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- 235000020639 clam Nutrition 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007269 microbial metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000001546 nitrifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000003403 water pollutant Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
- C02F2103/32—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from the food or foodstuff industry, e.g. brewery waste waters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/89—Algae ; Processes using algae
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用，按照如下步骤培养：1)配制f培养基，加入琼脂粉，高压灭菌器中灭菌后取出冷却；2)待培养基冷却至40‑50℃后，将其分装至培养皿中，冷却凝固；3)取涪陵榨菜集团污水处理厂厌氧池内的藻液，梯度稀释，各取0.1ml稀释液分别加入凝固的培养基中，每个稀释度三个重复，用封口膜封口后倒置放置在培养箱中培养至长出单藻落；4)挑取双眉藻单藻落划线接种于固体培养基上，获得纯化双眉藻落后，挑取单藻落接种至液体培养基。本发明在榨菜废水中原位提取双眉藻，用于榨菜废水的处理，不仅具有很强的生长鞥那里和水质净化能力，得到的双眉藻能用于虾贝的养殖，真正达到废水利用的目的，处理成本低。
Description
技术领域
本发明属于水处理技术领域，具体涉及一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用。
背景技术
榨菜是一种以芥菜科植物为原料，通过多级酸洗并在盐溶液中多次浸泡，压榨出卤水等方式获得，是中国三峡库区的支柱产业。榨菜腌制第一阶段水量最大，约占总水量的50％以上，具有高盐(1％-15％)、高有机物(5000-60000mg/L)、高氨氮(150-300mg/L)、高磷(20-100mg/L)和低pH(＜6.0)等特征。高盐废水直接排放会对环境造成严重损害，具体包括： (1)迫使非嗜盐微生物脱水，导致细胞质壁分离；(2)破坏微生物酶活性，抑制微生物正常生长，降低微生物代谢能力；(3)造成土壤盐渍化、板结等问题，降低土壤肥力和农作物产量；(4)危及人类饮用水安全和健康，增加水处理成本和难度。目前，关于榨菜废水处理所采用的方法主要包括物理化学沉淀法(混凝沉淀、电渗析、膜过滤等)，该方法主要用于榨菜废水的预处理环节，能够有效缓解高盐对微生物的抑制，但存在处理成本高、易饱和等特点。生物处理方法(传统活性污泥、接触氧化等)具有经济、高效等优点，但在高盐条件下，硝化和反硝化细菌会受到一定的抑制。物理-化学组合工艺处理榨菜废水虽然能满足中国重庆市榨菜行业水污染物排放标准的要求，但处理费用及成本较高，尾水还需经过化学除磷等方式深度处理。因此，寻找经济、高效、环境友好的榨菜废水处理技术具有重要意义。
微藻废水处理是一种高效、经济且可持续性的处理技术，已在啤酒废水、苯酚废水、重金属污染废水、抗生素、生活污水等方面得到广泛应用，是微藻培养基的廉价替代品。微藻通过利用废水中的氮、磷、有机物等营养物质，实现自身增殖，用于动物饵料、高附加值生物活性物质等的开发，具有良好的应用前景。榨菜腌制第一阶段产生的废水盐度为3％-6％之间，与海水盐度接近，利用榨菜一腌阶段产废水中丰富的营养物质和适宜的盐度作为培养基替代物，选取典型的海洋微藻作为研究对象，探索利用微藻处理榨菜废水具有重要意义。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的第一目的在于提供一种榨菜废水培养双眉藻的方法，第二目的在于提供该双眉藻，第三目的在于提供该双眉藻在高盐榨菜废水处理中的应用。
为了实现上述第一目的，本发明的技术方案为：一种榨菜废水培养双眉藻的方法，其特征在于，按照如下步骤培养：
1)配制f培养基，加入琼脂粉装入蓝盖瓶中，将培养基、培养皿在高压灭菌器中灭菌后取出冷却；
2)待培养基冷却至40-50℃后，将其分装至培养皿中，待培养基冷却凝固；
3)取涪陵榨菜集团污水处理厂CASS池内的藻液，梯度稀释至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，各取0.1ml稀释液分别加入凝固的培养基中，用涂布棒涂抹均匀，每个稀释度三个重复，写上编号，用封口膜封口后倒置放置在培养箱中培养至长出单藻落；
4)挑取双眉藻单藻落划线接种于固体培养基上，重复3次，获得纯化双眉藻落后，挑取单藻落接种至液体培养基；
5)藻培养温度为25±2℃，光强为80umol/m2·S，光暗比为16：8，持续曝气，同时每天定时摇晃三次，每次30秒，避免微藻沉淀或团聚；收集对数生长期的微藻细胞，在5000g条件下离心10min，并用0.85％无菌氯化钠洗涤3次以去除残余培养基以及破碎藻体。
上述方案中：步骤4)中，初始接种密度为1.0×106cfu/mL～3.0×106cfu/mL之间。
上述方案中：培养箱温度30℃，光照4000-6000lux，光暗比12：12。
所述榨菜废水中培养双眉藻的方法培养的双眉藻。
所述的双眉藻在高盐榨菜废水处理中的应用。
上述方案中在双眉藻沼液中加入10％灭菌或不灭菌的榨菜原水，曝气反应15天。
灭菌的方法为：将含氯消毒片加入榨菜废水中，充分搅拌后加入硫代硫酸钠进行还原，至余氯试纸检测不出氯。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明在榨菜废水中原位提取双眉藻，用于榨菜废水的处理，不仅具有很强的生长鞥那里和水质净化能力，得到的双眉藻能用于虾贝的养殖，真正达到废水利用的目的，处理成本低。
附图说明
图1榨菜废水中培养得到的双眉藻的显微镜放大照片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的描述。
实施例1
双眉藻分离纯化步骤：
1.配制f培养基，加入1.2％琼脂粉装入蓝盖瓶中。将培养基、蒸馏水、100μL和1mL移液枪头放入高压灭菌器中灭菌30min(121℃)后取出，放置在超净工作台中冷却。
2.将酒精灯、培养皿、涂布棒、EP管、移液枪、试管架、封口膜、记号笔、标签纸、废液盒等材料放入超净工作台，打开紫外灯照射灭菌30min。
3.待培养基冷却至40-50℃后，将其分装至培养皿中(高度不超过1/2)，待培养基冷却凝固。(所有操作均在超净工作台中进行)。
4.取0.1ml藻液(取自涪陵榨菜集团污水处理厂CASS池，涪陵榨菜集团污水处理厂污水处理的步骤为：榨菜浓盐水经收集到浓水池，经过预处理池预处理后，进入调节池，稀水经过格栅井拦截后进入调节池，调节池的水经过除磷沉淀池，除磷沉淀池加入碱、除磷剂、PAM，然后进入水解酸化池，再紧固脉冲式厌氧池，再进入CASS池，再到缓冲池，最后进入末端除磷池后达标排放)，梯度稀释至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，各取0.1ml稀释液加入凝固的培养基中，用涂布棒涂抹均匀，每个稀释度两个重复，写上编号，用封口膜封口后倒置放置在培养箱(温度30℃，光照4000-6000lux，光暗比12：12)中培养至长出单藻落。
5.最后在10-5组(其余组的培养基上，由于浓度大，菌藻团聚现象严重，不利于菌藻的挑选)挑取单藻落划线接种于固体培养基上，重复3次，获得纯化藻落后，挑取单藻落接种至液体培养基(f/2培养基)中，初始接种密度为1.0×106cfu/mL～3.0×106cfu/mL之间，微藻培养温度为25±2℃，光强为80umol/m2·S，光暗比为16：8，持续曝气，同时每天定时摇晃三次，每次30秒，避免微藻沉淀或团聚。收集对数生长期的微藻细胞，在5000g条件下离心10min，并用0.85％无菌氯化钠洗涤3次以去除残余培养基以及破碎藻体。f/2培养基为现有技术，具体成分参考下表
f/2培养基成分
基础培养基(f/2)可加缓冲液或用酸碱调pH7.6-7.8，再将灭菌后的储备液，微量元素及维生素按要求加入。维生素不能高温灭菌，可用0.22μm膜过滤，此为现有技术。
实施例2
2.1高盐榨菜废水的灭菌
灭菌采用含氯消毒片进行，按照施威尔牌含氯消毒片的使用要求，加入1片至500mL的榨菜废水(原水)中，充分搅拌15min后加入硫代硫酸钠进行还原，并用余氯试纸检验，直至余氯未检出。榨菜原水灭菌后，硝态氮、总磷、TOC无明显变化。
2.2榨菜废水处理
按照微藻双眉藻养殖水体的10％加入灭菌/不灭菌的榨菜原水，榨菜原水稀释到10％以后其氨氮、磷、总氮的含量与f/2培养基相当，因此，榨菜废水按照10％加入双眉藻水体中。稀释前后废水水质如下表：
曝气反应，15天后，污染物质的浓度及叶绿素情况见下表：
由常规理化指标的变化可知，灭菌条件下，微藻在前7d快速增殖，降解效率显著高于不灭菌条件下的微藻生长速率，叶绿素a在第7d可达到2.71mg/L，随着培养时间的继续增加，常规理化指标的变化不明显，甚至会出现增加的现象，这与培养后期微藻死亡，生物体内的营养物质再次释放到培养液中有关。不灭菌条件下，随着培养时间的增加，理化指标降解率逐渐增加，在第15d时，降解率和叶绿素a累积量均高于灭菌组。灭菌/不灭菌显示的结果为后续微藻的开发利用提供了参考。即，若以微藻回收利用为目标，则采用灭菌榨菜废水开展研究，在第7d时即可回收微藻。若以污染物降解为目标，水力停留时间设置为15d较为适合。
Claims (7)
1.一种榨菜废水培养双眉藻的方法，其特征在于，按照如下步骤培养：
1)配制f培养基，加入琼脂粉装入蓝盖瓶中，将培养基、培养皿在高压灭菌器中灭菌后取出冷却；
2)待培养基冷却至40-50℃后，将其分装至培养皿中，待培养基冷却凝固；
3)取涪陵榨菜集团污水处理厂CASS池内的藻液，梯度稀释至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，各取0.1ml稀释液分别加入凝固的培养基中，用涂布棒涂抹均匀，每个稀释度三个重复，写上编号，用封口膜封口后倒置放置在培养箱中培养至长出单藻落；
4)挑取双眉藻单藻落划线接种于固体培养基上，重复3次，获得纯化双眉藻落后，挑取单藻落接种至f/2液体培养基；
5)藻培养温度为25±2℃，光强为80umol/m2·S，光暗比为16：8，持续曝气，同时每天定时摇晃三次，每次30秒，避免微藻沉淀或团聚；收集对数生长期的微藻细胞，在5000g条件下离心10min，并用0.85％无菌氯化钠洗涤3次以去除残余培养基以及破碎藻体。
2.根据权利要求1所述榨菜废水培养双眉藻的方法，其特征在于：步骤4)中，初始接种密度为1.0×106cfu/mL～3.0×106cfu/mL之间。
3.根据权利要求1所述榨菜废水培养双眉藻的方法，其特征在于：培养箱温度30℃，光照4000-6000lux，光暗比12：12。
4.权利要求1-3任一项所述榨菜废水中培养双眉藻的方法培养的双眉藻。
5.权利要求4所述的双眉藻在高盐榨菜废水处理中的应用。
6.根据权利要求5所述应用，其特征在于：在双眉藻沼液中加入10％灭菌或不灭菌的榨菜原水，曝气反应15天。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，灭菌的方法为：将含氯消毒片加入榨菜废水中，充分搅拌后加入硫代硫酸钠进行还原，至余氯试纸检测不出氯。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311109252.3A CN117143737A (zh) | 2023-08-31 | 2023-08-31 | 一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311109252.3A CN117143737A (zh) | 2023-08-31 | 2023-08-31 | 一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117143737A true CN117143737A (zh) | 2023-12-01 |
Family
ID=88886198
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311109252.3A Pending CN117143737A (zh) | 2023-08-31 | 2023-08-31 | 一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117143737A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN119111384A (zh) * | 2024-09-20 | 2024-12-13 | 中国科学院海洋研究所 | 一种利用海水菌培养废液促进条斑紫菜快速生殖和附着的方法 |
-
2023
- 2023-08-31 CN CN202311109252.3A patent/CN117143737A/zh active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN119111384A (zh) * | 2024-09-20 | 2024-12-13 | 中国科学院海洋研究所 | 一种利用海水菌培养废液促进条斑紫菜快速生殖和附着的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Shi et al. | Pretreatment of saline antibiotic wastewater using marine microalga | |
| Pahazri et al. | Production and harvesting of microalgae biomass from wastewater: a critical review | |
| CN111793575A (zh) | 一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用 | |
| CN105754860A (zh) | 一种利用复合微藻高效净化猪场沼液的方法 | |
| CN105347513B (zh) | 一种微生态制剂的制备方法及其应用 | |
| CN111170571B (zh) | 一种家畜粪尿的液肥化处理工艺 | |
| Huang et al. | A review of biogas slurry treatment technology based on microalgae cultivation | |
| CN103695353A (zh) | 一株具有氨氮降解能力的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN105582890A (zh) | 一种复合纳米生物质炭材料的制备方法及其应用 | |
| CN105776745A (zh) | 一种高氨氮养猪沼液的生物处理方法 | |
| CN106430820A (zh) | 一种高氨氮养猪沼液的生物处理装置及其工艺 | |
| CN105130013A (zh) | 一种利用复合光合细菌处理猪场沼液的方法 | |
| CN115403156A (zh) | 一种两阶段处理体系对高氨氮畜禽废水脱除氮磷的方法 | |
| CN113307377A (zh) | 一种利用活性微藻耦合处理发酵排放废气与废水的方法 | |
| CN117865335B (zh) | 一种利用混合藻膜处理高氨氮废水的方法 | |
| CN108477388A (zh) | 一种利用微藻处理红曲霉发酵废水及联产微藻蛋白饲料的方法 | |
| Sun et al. | Synergistic treatment of digested wastewater with high ammonia nitrogen concentration using straw and microalgae | |
| CN117143737A (zh) | 一种榨菜废水培养双眉藻的方法及双眉藻和应用 | |
| CN106630483A (zh) | 一种基于藻菌共生的高效净化沼液的方法 | |
| CN205061800U (zh) | 规模化养猪场废水深度处理系统 | |
| CN108408921A (zh) | 一种提升养殖水体透明度的微生态制剂及其制备方法 | |
| CN111635073A (zh) | 一种基于经济微藻培养高效净化紫菜加工废水的方法 | |
| CN117023891B (zh) | 一种高盐榨菜废水虾贝藻处理系统 | |
| WO2025112477A1 (zh) | 一种基于微藻的粉丝废水处理工艺 | |
| CN105753092A (zh) | 一种垂钓水体改良的水体澄清剂 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |