CN116769682B - 缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 - Google Patents
缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116769682B CN116769682B CN202311055492.XA CN202311055492A CN116769682B CN 116769682 B CN116769682 B CN 116769682B CN 202311055492 A CN202311055492 A CN 202311055492A CN 116769682 B CN116769682 B CN 116769682B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus paracasei
- food allergy
- ultrasonic
- mice
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 title claims abstract description 66
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 title claims abstract description 43
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 title claims abstract description 43
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 26
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000005457 ice water Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 74
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 10
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 claims description 9
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 7
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 6
- 102000000591 Tight Junction Proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 108010002321 Tight Junction Proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 claims description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 210000001578 tight junction Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract 2
- 241001052560 Thallis Species 0.000 abstract 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 29
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 17
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 17
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 17
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 17
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 15
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 6
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 6
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 6
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 5
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 5
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 5
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 5
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 5
- 108010008705 Mucin-2 Proteins 0.000 description 5
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 5
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 5
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 5
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 102000004162 Claudin-1 Human genes 0.000 description 4
- 108090000600 Claudin-1 Proteins 0.000 description 4
- 102000003940 Occludin Human genes 0.000 description 4
- 108090000304 Occludin Proteins 0.000 description 4
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 4
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 3
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 3
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 208000031636 Body Temperature Changes Diseases 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 description 2
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- -1 diamine hydrogen citrate Chemical class 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 2
- 210000005027 intestinal barrier Anatomy 0.000 description 2
- 230000007358 intestinal barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 2
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 2
- ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate monohydrate Chemical compound O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O ISPYRSDWRDQNSW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 206010014025 Ear swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 102100025255 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 238000011841 epidemiological investigation Methods 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 238000003305 oral gavage Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 108010027843 zonulin Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元及其应用，属于微生物制剂技术领域。本发明将5%副干酪乳杆菌JY56接种于发酵培养基中培养18h获得发酵液，收集菌体，并用无菌PBS洗涤，重悬成菌悬液，调整菌浓度为5×109CFU/mL，将菌悬液进行热处理85℃，30min后，获得灭活副干酪乳杆菌JY56；准备冰水混合物作为超声介质，使超声处理时超声介质温度维持在4℃±2℃；在520W功率下处理10min，频率为25kHz，超声探头于水面下4cm进行工作5s、间歇5s的超声处理，获得副干酪乳杆菌JY56的后生元。本发明的后生元在制备缓解食物过敏相关疾病的产品中，具有巨大的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元及其应用，属于微生物制剂技术领域。
背景技术
食物过敏是指机体摄入特定食物后产生的免疫系统反应，通常由各种食物来源中发现的蛋白质抗原引起。食物过敏会引起多种临床症状，包括口腔或耳朵瘙痒、鼻炎、哮喘、呕吐、腹泻、呼吸困难等，严重者甚至导致休克、死亡。近年来，全球食物过敏发生率显著增加。据世界过敏组织（World Allergy Organization，WAO）白皮书报告全球大约有2.5亿人患有食物过敏。美国流行病学调查显示，1岁以下婴儿的FA患病率为2.8%，2岁时患病率达到10%，14-17岁青少年的FA患病率为7.1%，成人FA患病率则高达10.8%。调查数据说明，食物过敏在不同国家、不同年龄阶段普遍发生且患病率逐年升高，已经成为一个全球性公共健康问题。
食物过敏是一种复杂的免疫性疾病，目前没有完全治愈的方法，最主要、最有效的预防手段仍是避免接触和摄入被确定为过敏原的食物。但由于膳食的复杂性，仅对患者进行饮食管理，不能完全避免食物过敏的发生，仍需要通过其他治疗手段对食物过敏进行治疗。目前针对食物过敏的治疗方法主要包括过敏原特异性免疫疗法和非特异性免疫疗法两类。过敏原特异性免疫疗法在脱敏方面具有显著的功效，但是可能引起过敏反应及胃肠道症状等全身性副作用。非特异性免疫疗法包括抗过敏药物、单克隆抗体、天然生物活性物质等。抗过敏药物主要包括抗组胺药物、肾上腺素和糖皮质激素等，其作用效果迅速，但可能会产生耐药性和药物副作用。单克隆抗体主要包括单克隆抗IgE抗体和抗IL-5单克隆抗体等，均已成功用于食物过敏的治疗中，但需要有资质的医疗机构才可以实施。天然生物活性物质包括海藻或非藻类来源的多糖、中药和药用植物等，其功效已得到了广泛的研究，是预防或治疗各种免疫疾病的重要来源。
因此，仍需继续寻找一种药物或治疗方式，既能够用于预防和/或治疗食物过敏，也不会给患者带来副作用，并且还能够应用于各类别的患者，对患者具有良好的耐受性。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元，该后生元的透明质酸酶抑制率高，抗食物过敏效果好。
同时，本发明的目的是为了提供一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元在制备治疗/缓解或辅助治疗/缓解食物过敏的药品中的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌（Lacticaseibacillus Paracasei）JY56后生元，5%副干酪乳杆菌JY56接种于发酵培养基中培养18h获得发酵液，将发酵液在6000r/min的条件下，离心5min，弃去上清液，收集菌体，并用无菌PBS洗涤，重悬成菌悬液，调整菌浓度为5×109CFU/mL，将菌悬液进行热处理85℃，30min后，获得灭活副干酪乳杆菌JY56；准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的超声介质温度维持在4℃±2℃；将灭活副干酪乳杆菌JY56在520W功率下处理10min，频率为25kHz，超声探头于水面下4cm进行工作5s、间歇5s的超声处理，超声处理后获得副干酪乳杆菌JY56的后生元。
灭活副干酪乳杆菌JY56中含有的菌细胞的数量是5×109个/mL。
无菌PBS洗涤3次；超声介质的深度为9cm。
超声探头直径为15mm，超声探头的变幅杆直径为3mm。
发酵培养基为MRS液体培养基。
一种副干酪乳杆菌JY56的后生元在制备治疗/缓解或辅助治疗/缓解食物过敏的药品中的应用。
食物过敏是卵清蛋白OVA诱导引发的。
治疗/缓解食物过敏是降低血清中特异性抗体、过敏介质、炎症因子；促进过肠道紧密连接相关因子的表达；促进小鼠肠道短链脂肪酸的生成。
短链脂肪酸包括乙酸、丙酸和丁酸。
药品的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
本发明具有以下有益效果：
本发明筛选得到了一株副干酪乳杆菌JY56，此副干酪乳杆菌JY56制备的后生元具有缓解食物过敏的作用，具体体现在：
(1)显著改善小鼠临床过敏症状；
(2)显著降低血清中的特异性抗体、过敏介质及炎症因子水平；
(3)促进过敏小鼠肠道紧密连接相关因子的表达；
(4)显著促进小鼠肠道短链脂肪酸的生成。
因此，副干酪乳杆菌JY6制备的后生元在制备缓解食物过敏相关的疾病的产品中，具有巨大的应用前景。
附图说明
图1为不同超声功率处理后的后生元的透明质酸酶抑制率对比图；
图2为连续超声工作和间歇超声工作的后生元的透明质酸酶抑制率对比图；
图3为不同超声位置处理后的后生元的透明质酸酶抑制率对比图；
图4为不同超声温度处理后的后生元的透明质酸酶抑制率对比图；
图5为OVA诱导后各组小鼠体重变化图；
图6为OVA诱导后各组小鼠直肠温度变化图；
图7为OVA诱导后各组小鼠过敏症状评分图；
图8为OVA诱导后各组小鼠血清中OVA-sIgE抗体（卵清蛋白特异性IgE抗体）的含量变化图；
图9为OVA诱导后各组小鼠血清中OVA-sIgG抗体（卵清蛋白特异性lgG抗体）的含量变化图；
图10为OVA诱导后各组小鼠血清中组胺（HIS）的含量变化图；
图11为OVA诱导后各组小鼠血清中小鼠肥大细胞蛋白酶（MMCP-1）的含量变化图；
图12为OVA诱导后各组小鼠血清中促炎因子IL-4（白细胞介素-4）的含量变化图；
图13为OVA诱导后各组小鼠血清中促炎因子IFN-γ（干扰素-γ）的含量变化图；
图14为OVA诱导后各组小鼠血清中促炎因子IL-17A（白细胞介素-17A）的含量变化图；
图15为OVA诱导后各组小鼠血清中促炎因子TNF-α（肿瘤坏死因子-α）的含量变化图；
图16为各组小鼠空肠组织中紧密连接蛋白Claudin-1的含量变化图；
图17为各组小鼠空肠组织中紧密连接蛋白Occludin的含量变化图；
图18为各组小鼠空肠组织中紧密连接蛋白ZO-1的含量变化图；
图19为各组小鼠空肠组织中黏蛋白MUC-2的含量变化图；
图20为各组小鼠盲肠内容物乙酸的含量变化图；
图21为各组小鼠盲肠内容物丙酸的含量变化图；
图22为各组小鼠盲肠内容物丁酸的含量变化图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作更进一步的说明。
本发明中，副干酪乳杆菌（Lacticaseibacillus Paracasei）JY56保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2022年11月21日，保藏号是GDMCC NO.62988，保藏地址是：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，发明人通过菌种保藏中心购买得到。
下述实施例中涉及的BALB/c小鼠购自北京维通利华公司。
下述实施例中涉及的培养基如下：
MRS液体培养基：酵母粉5.0g/L、牛肉膏10.0g/L、蛋白胨10.0g/L、葡萄糖20.0g/L、无水乙酸钠2.0g/L、柠檬酸氢二胺2.0g/L、磷酸氢二钾2.6g/L、一水合硫酸锰0.25g/L、七水合硫酸镁0.5g/L、吐温-80 1mL/L，加水至1L。
MRS固体培养基：酵母粉5.0g/L、牛肉膏10.0g/L、蛋白胨10.0g/L、葡萄糖20.0g/L、无水乙酸钠2.0g/L、柠檬酸氢二胺2.0g/L、磷酸氢二钾2.6g/L、一水合硫酸锰0.25g/L、七水合硫酸镁0.5g/L、吐温-80 1mL/L以及琼脂20.0g/L，溶剂为水（测定菌浓度使用固体培养基）。
一、副干酪乳杆菌JY56灭活前培养
副干酪乳杆菌JY56灭活前培养的方法是：5%副干酪乳杆菌JY56接种于发酵培养基（即MRS液体培养基）中培养18h获得发酵液，将发酵液在6000r/min的条件下，离心5min，弃去上清液，收集菌体，并用无菌PBS洗涤3次，重悬成菌悬液，调整菌浓度为 5×109CFU/mL，将菌悬液进行热处理（85℃，30min的热处理）后，获得灭活副干酪乳杆菌JY56，灭活副干酪乳杆菌JY56中含有的菌细胞的数量是：5×109个/mL。
二、灭活副干酪乳杆菌JY56制备后生元
准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的介质温度维持在4℃±2℃。分别在130、260、390、520、650W功率下处理10min，频率为25kHz，超声探头直径为15mm，变幅杆直径为3mm，无超声处理组（即灭活副干酪乳杆菌JY56）为对照组。超声探头于水面下4cm进行工作5s、间歇5s的不同功率超声处理（水深为9cm），超声处理后获得副干酪乳杆菌JY56的后生元。测定不同超声处理条件下的后生元透明质酸酶抑制率。
后生元透明质酸酶抑制率测定方法：
根据后生元样品数量对试管进行标记，不同超声功率处理后的后生元样品均进行如下操作：向A、C试管中加入0.5mL、800U/mL的透明质酸酶溶液，B、D试管中加入pH=5.6的醋酸缓冲液，同时向A、B、C、D试管中分别加入0.1mL、2.5mmol/L的氯化钙溶液，37℃处理20min。取后生元样品0.5mL于A、B试管，蒸馏水0.5mL于C、D试管，37℃处理20min。向A、C试管中加入0.5mL、0.4mg/mL的透明质酸钠溶液，B、D试管中加入pH=5.6的醋酸缓冲液，37℃处理40min，室温静置10min。同时向四只试管中分别加入0.5mL乙酰丙酮溶液和0.1mL、0.4mol/mL 的氢氧化钠溶液，振荡混匀，沸水浴15min后，立即冰浴10min，冷却至室温。向四只试管中分别缓慢加入1mL的Ehrlich试剂，振荡混匀，室温静置显色30min，在530nm波长下测定各试管吸光度，以L. rhamnosus GG作为对照菌株（L. rhamnosus GG对照菌株的处理方式为：用无菌PBS将L. rhamnosus GG重悬成菌悬液，调整菌浓度为 5×109CFU/mL，再热灭活（85℃，30min的热处理））。根据下述式（1）计算样品透明质酸酶抑制率。
透明质酸酶抑制率（%）=[（C-D）-（A-B）]/（C-D）×100 （1）
式（1）中：A-实验组吸光度（透明质酸酶溶液+试样+透明质酸钠溶液）；
B-试样空白组吸光度（醋酸缓冲液+试样+醋酸缓冲液）；C-对照组吸光度（透明质酸酶溶液+蒸馏水+透明质酸钠溶液）；D-空白组吸光度（醋酸缓冲液+蒸馏水+醋酸缓冲液）。
如图1所示，520W功率的超声条件下，后生元的透明质酸酶抑制率最高，达到55.61%，L. rhamnosus GG对照菌株的透明质酸酶抑制率为45.68%，无超声处理组（即灭活副干酪乳杆菌JY56）的透明质酸酶抑制率为43.47%。准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的介质温度维持在4℃±2℃。在520W功率下超声处理副干酪乳杆菌JY56后生元，频率为25kHz，超声探头直径为15mm，变幅杆直径为3mm，超声探头位于水面下4cm。改变工作方式（1）连续工作10min，（2）工作5s、间歇5s，工作10min。
如图2所示，连续超声工作的后生元的透明质酸酶抑制率显著低于间歇超声工作的透明质酸酶抑制率。
准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的介质温度维持在4℃±2℃。在520W功率下超声处理副干酪乳杆菌JY56后生元，频率为25kHz，超声探头直径为15mm，变幅杆直径为3mm，超声探头分别位于水面下3、4、5cm。
如图3所示，超声探头位于水面下4cm时，透明质酸酶抑制率最高。
在520W功率下超声处理副干酪乳杆菌JY56后生元，频率为25kHz，超声探头直径为15mm，变幅杆直径为3mm，超声探头分别位于水面下4cm。（1）在室温下工作，水为超声介质（23℃±2℃）；（2）在低温下工作，准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的介质温度维持在4℃±2℃；（3）在高温下工作，准备80℃水作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的介质温度维持在80℃±2℃；
如图4所示，低温（4℃±2℃）下超声获得的后生元的透明质酸酶抑制率最高。
结果表明，在低温（4℃±2℃）下工作，520W功率超声处理副干酪乳杆菌JY56后生元，频率为25kHz，超声探头直径为15mm，变幅杆直径为3mm，超声探头位于水面下4cm，副干酪乳杆菌JY56后生元的透明质酸酶抑制率最高，为55.61%，具有最高的抗过敏活性。
三、副干酪乳杆菌JY56后生元对食物过敏小鼠的缓解作用
实验动物选用56只雌性BALB/c小鼠（5周龄），以22±2℃的温度和55±5%的湿度喂养，12h昼夜交替，小鼠自由采食和饮水。适应喂养一周后，将小鼠随机分成7组（n=8只/组）：正常组（NC）、OVA致敏组（OVA）、低剂量超声处理后生元组（LLP，1×107个/d）、中剂量超声处理后生元组（MLP，1×108个/d）、高剂量超声处理后生元组（HLP，1×109个/d）、未超声处理后生元组（LP，1×109个/d）、对照组（LGG，1×109个/d）。正常组小鼠在第0天和第14天腹腔注射200μL的PBS，其余各组小鼠分别在第0天和第14天腹腔注射50μg OVA和2mg氢氧化铝佐剂（溶于200μL的PBS中）。除正常组外，各组小鼠分别在第28、31、34、37、40、43天口服灌胃50mgOVA进行激发，共6次。除正常组（NC）和OVA致敏组（OVA）外，其余各组小鼠每天（即0~43天）灌胃200μL不同剂量的菌液。
在第0、14、28、31、34、37、40、43天测定各组小鼠体重并记录，共测定8次。最后一次刺激时，用肛温温度计测量并记录刺激前后小鼠的直肠温度，计算各组小鼠在刺激前后体温的变化，每组选取3只进行测定。灌胃1h内观察各组小鼠过敏症状，进行评分。共分为5级：0分=无症状；1分=抓耳朵、鼻子；2分=眼睛、耳朵肿，呼吸急促，不活跃；3分=嘴巴、尾巴出现疹子，哮喘，呼吸困难；4分=灌胃后不动，肌肉收缩，抽筋；5分=死亡，休克。
结果如图5所示，为OVA诱导后各组小鼠体重变化，可以看出从第2次口服灌胃激发后部分处理组小鼠体重出现下降趋势，最后一次激发后，副干酪乳杆菌JY56后生元干预组小鼠体重均高于模型组，其中OVA组小鼠体重较NC组和HLP组均具有显著性差异（P＜0.05）。如图6所示，为OVA诱导后各组小鼠直肠温度变化，用肛温温度计测量OVA激发1h后各组小鼠的体温，OVA组小鼠体温下降最为显著，下降0.92±0.040℃，灌胃副干酪乳杆菌JY56后生元后各组小鼠体温均显著高于模型组，且呈现剂量趋势，其中MLP组、HLP组体温变化均趋于正常组，无显著性差异（P＜0.05）。如图7所示，为OVA诱导后各组小鼠过敏症状评分，NC组无明显的过敏反应，OVA组小鼠在灌胃激发后表现出挠鼻、抽搐、哮喘等过敏症状，而在灌胃副干酪乳杆菌JY56后生元后过敏症状有所缓解，且呈现剂量趋势。
在实验第44天，小鼠隔夜禁食不禁水12h后断颈处死，取出脾脏、结肠、空肠等组织，并在生理盐水中漂洗、过滤。部分脾脏、空肠组织用4%的多聚甲醛溶液固定，常温保存，用于病理学分析。其余组织均用无酶管收集编号，迅速冻存于-80℃冰箱保存。血清样本4℃下3000r/min离心20min，收集上层血清并冻存于-80℃冰箱。
取小鼠血清，使用酶联免疫试剂盒进行特异性抗体、炎症介质及细胞因子的测定，所测指标包括：卵清蛋白特异性IgE抗体（OVA-sIgE）、卵清蛋白特异性IgG抗体（OVA-sIgG）、组胺（HIS）、小鼠肥大细胞蛋白酶（MMCP-1）、IL-4、IFN-γ、IL-17A和TNF-α，结果如图8~图15。
实验结果如图8所示。图8为OVA诱导后各组小鼠血清中OVA-sIgE抗体的含量变化，OVA组的OVA-sIgE抗体水平显著高于NC组，与OVA组相比灌胃不同剂量副干酪乳杆菌JY56后生元均可以显著降低小鼠血清中OVA-sIgE抗体水平（P＜0.05）。图9为OVA诱导后各组小鼠血清中OVA-sIgG抗体的含量变化，OVA干预后显著增加了食物过敏小鼠血清中OVA-sIgG抗体的含量（P＜0.05）。与OVA组相比，LLP组、MLP组和HLP组显著降低了食物过敏小鼠血清中OVA-sIgG抗体的含量（P＜0.05）。以上结果表明副干酪乳杆菌JY56后生元可以减少小鼠血清中过敏相关的特异性抗体，从而缓解食物过敏症状。
实验结果如图10~图11所示。与NC组相比，OVA组小鼠的炎症介质组胺和肥大细胞蛋白酶均显著升高（P＜0.05），表明OVA引起小鼠食物过敏，并诱导了多种炎症介质的释放。与OVA组相比，灌胃低、中、高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元的小鼠的组胺和肥大细胞蛋白酶的含量均有不同程度的降低。其中，与对照组相比，灌胃中、高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠血清中的组胺的含量均显著下降（P<0.05）；灌胃低、中、高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠血清的肥大细胞蛋白酶的含量均显著下降（P<0.05）。结果表明，副干酪乳杆菌JY56后生元干预食物过敏小鼠可以在不同程度上下调炎症介质的分泌，进而缓解食物过敏反应，且具有一定的剂量依赖性。
实验结果如图12~图15所示，与NC组相比，OVA组小鼠的促炎因子IL-4、IL-17A、IFN-γ和TNF-α水平均显著升高（P＜0.05）。与OVA组相比，灌胃低、中、高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠血清的IL-4和IL-17A的含量均显著下降（P<0.05）。不同的是，灌胃低剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠相较OVA组小鼠而言，TNF-α的含量没有显著性差异，但灌胃中、高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠TNF-α的含量相对OVA组小鼠出现显著性差异（P<0.05）。灌胃低、中剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠血清的IFN-γ含量下降，但无显著性差异。灌胃高剂量副干酪乳杆菌JY56后生元组小鼠IFN-γ含量相较于OVA组小鼠出现显著下降（P<0.05）。上述结果表明副干酪乳杆菌JY56后生元干预食物过敏小鼠可以在不同程度上调节细胞因子的分泌，进而对食物过敏小鼠进行免疫调节，且具有一定的剂量依赖性。
取小鼠空肠组织，采用RT-PCR测定肠道屏障相关基因mRNA的表达，所测指标包括：肠道中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1和黏蛋白MUC-2，结果如图16~图19。
结果如图16~图19所示，与NC组相比，OVA组小鼠中的紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1和黏蛋白MUC-2的基因表达量均显著下降（P<0.05）。与OVA组相比，灌胃低、中、高剂量的副干酪乳杆菌JY56后生元均不同程度上调了紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1和黏蛋白MUC-2的基因表达量，且具有剂量依赖性。结果表明，副干酪乳杆菌JY56后生元干预后可以增加小鼠肠道中紧密连接蛋白的表达量，增加黏蛋白MUC-2的转录水平，改善结肠紧密连接结构，提高肠道屏障的完整性以缓解食物过敏症状。
取小鼠盲肠内容物，使用气相色谱测定乙酸，丙酸和丁酸的含量，结果如图20~图22。
结果如图20~图22所示，与NC组小鼠相比，OVA组小鼠盲肠内容物中所测定的乙酸，丙酸和丁酸含量显著降低（P＜0.05）。与OVA组相比，在LLP、MLP、HLP组中鼠盲肠内容物中所测定的乙酸，丙酸和丁酸含量均有不同程度的升高，其中HLP组效果最好，与OVA组含量具有显著性差异（P＜0.05），乙酸，丙酸和丁酸含量分别升高了67.78%，51.71%，140.84%（P＜0.05），且显著高于对照组LP及LGG组（P＜0.05）。上述结果表明，副干酪乳杆菌JY56后生元可通过促进短链脂肪酸的生成来发挥其益生调节作用，进而缓解食物过敏症状。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌（Lacticaseibacillus Paracasei）JY56后生元的制法，其特征在于，5%副干酪乳杆菌JY56接种于发酵培养基中培养18h获得发酵液，将发酵液在6000r/min的条件下，离心5min，弃去上清液，收集菌体，并用无菌PBS洗涤，重悬成菌悬液，调整菌浓度为5×109CFU/mL，将菌悬液进行热处理85℃，30min后，获得灭活副干酪乳杆菌JY56；准备冰水混合物作为超声介质，通过添加冰块的方式，使超声处理时的超声介质温度维持在4℃±2℃；将灭活副干酪乳杆菌JY56在520W功率下处理10min，频率为25kHz，超声探头于水面下4cm进行工作5s、间歇5s的超声处理，超声处理后获得副干酪乳杆菌JY56的后生元；
所述副干酪乳杆菌（Lacticaseibacillus Paracasei）JY56的保藏号是GDMCCNO.62988。
2.根据权利要求1所述的一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元的制法，其特征在于，灭活副干酪乳杆菌JY56中含有的菌细胞的数量是5×109个/mL。
3.根据权利要求1所述的一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元的制法，其特征在于，无菌PBS洗涤3次；超声介质的深度为9cm。
4.根据权利要求1所述的一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元的制法，其特征在于，超声探头直径为15mm，超声探头的变幅杆直径为3mm。
5.根据权利要求1所述的一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元的制法，其特征在于，发酵培养基为MRS液体培养基。
6.根据权利要求1~5任意一项所述的一种缓解食物过敏的副干酪乳杆菌JY56后生元的制法获得的后生元在制备治疗/缓解或辅助治疗/缓解食物过敏的药品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，食物过敏是卵清蛋白OVA诱导引发的。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，治疗/缓解食物过敏是降低血清中特异性抗体、过敏介质、炎症因子；促进肠道紧密连接相关因子的表达；促进小鼠肠道短链脂肪酸的生成。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，短链脂肪酸包括乙酸、丙酸和丁酸。
10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，药品的剂型包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311055492.XA CN116769682B (zh) | 2023-08-22 | 2023-08-22 | 缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311055492.XA CN116769682B (zh) | 2023-08-22 | 2023-08-22 | 缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116769682A CN116769682A (zh) | 2023-09-19 |
| CN116769682B true CN116769682B (zh) | 2023-11-21 |
Family
ID=87986240
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311055492.XA Active CN116769682B (zh) | 2023-08-22 | 2023-08-22 | 缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116769682B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117586926B (zh) * | 2024-01-18 | 2024-04-16 | 东北农业大学 | 副干酪乳杆菌lp-116、lp-116后生元组合物及其制备方法与应用 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117603885B (zh) * | 2024-01-18 | 2024-04-05 | 东北农业大学 | 一种副干酪乳杆菌lp-116及其在制备调节肠道屏障受损产品中的应用 |
Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20060096851A (ko) * | 2005-03-04 | 2006-09-13 | 백경수 | 알레르기 질환 예방 및 치료 기능을 가진 유산균 락토바실러스 프랜타룸 |
| JP2006288290A (ja) * | 2005-04-11 | 2006-10-26 | Genmont Biotech Inc | ラクトバチルス・パラカゼイの新規微生物株ｇｍ−０８０及びアレルギー関連疾患を処置するためのその使用 |
| CN101772571A (zh) * | 2007-03-30 | 2010-07-07 | 麒麟控股株式会社 | 具有高抗过敏活性的乳酸菌组合物和该乳酸菌的制造方法 |
| CN110643541A (zh) * | 2019-10-25 | 2020-01-03 | 江南大学 | 一株可调节过敏性哮喘Th2/Th1平衡的干酪乳杆菌及其应用 |
| CN111575204A (zh) * | 2020-05-20 | 2020-08-25 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一株可缓解或治疗过敏性疾病的副干酪乳杆菌及其应用 |
| CN113201467A (zh) * | 2020-06-05 | 2021-08-03 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种副干酪乳杆菌Lc19和包含其的微生物制剂 |
| WO2022208458A1 (en) * | 2021-04-01 | 2022-10-06 | Bll Invest S.R.L. | Inactivated strains of bacteria, such as viable but non-culturable bacteria, compositions and use thereof |
| CN115927122A (zh) * | 2023-01-17 | 2023-04-07 | 江南大学 | 副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主ha合成并增强ha应用效果的后生元 |
| CN116019224A (zh) * | 2023-01-05 | 2023-04-28 | 青岛农业大学 | 一种具有防腐和肠胃调节功能的后生元、其制备方法及应用 |
| CN116042477A (zh) * | 2023-01-05 | 2023-05-02 | 东北农业大学 | 植物乳杆菌j26组合物、制法和在减肥产品中的应用 |
| CN116121120A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-05-16 | 天津小薇生物科技有限公司 | 具有抑菌作用的副干酪乳杆菌gf009、其后生元制备方法及其应用 |
| CN116531413A (zh) * | 2023-05-19 | 2023-08-04 | 西南医科大学附属医院 | 乳酸菌类后生元在制备预防和/或治疗酒精性肝病的药物中的应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6994848B2 (en) * | 2004-03-25 | 2006-02-07 | Genmont Biotech Inc. | Lactobacillus paracasei strain GM-080 for treating allergy related diseases |
-
2023
- 2023-08-22 CN CN202311055492.XA patent/CN116769682B/zh active Active
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20060096851A (ko) * | 2005-03-04 | 2006-09-13 | 백경수 | 알레르기 질환 예방 및 치료 기능을 가진 유산균 락토바실러스 프랜타룸 |
| JP2006288290A (ja) * | 2005-04-11 | 2006-10-26 | Genmont Biotech Inc | ラクトバチルス・パラカゼイの新規微生物株ｇｍ−０８０及びアレルギー関連疾患を処置するためのその使用 |
| CN101772571A (zh) * | 2007-03-30 | 2010-07-07 | 麒麟控股株式会社 | 具有高抗过敏活性的乳酸菌组合物和该乳酸菌的制造方法 |
| CN110643541A (zh) * | 2019-10-25 | 2020-01-03 | 江南大学 | 一株可调节过敏性哮喘Th2/Th1平衡的干酪乳杆菌及其应用 |
| CN111575204A (zh) * | 2020-05-20 | 2020-08-25 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一株可缓解或治疗过敏性疾病的副干酪乳杆菌及其应用 |
| CN113201467A (zh) * | 2020-06-05 | 2021-08-03 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种副干酪乳杆菌Lc19和包含其的微生物制剂 |
| WO2022208458A1 (en) * | 2021-04-01 | 2022-10-06 | Bll Invest S.R.L. | Inactivated strains of bacteria, such as viable but non-culturable bacteria, compositions and use thereof |
| CN116121120A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-05-16 | 天津小薇生物科技有限公司 | 具有抑菌作用的副干酪乳杆菌gf009、其后生元制备方法及其应用 |
| CN116019224A (zh) * | 2023-01-05 | 2023-04-28 | 青岛农业大学 | 一种具有防腐和肠胃调节功能的后生元、其制备方法及应用 |
| CN116042477A (zh) * | 2023-01-05 | 2023-05-02 | 东北农业大学 | 植物乳杆菌j26组合物、制法和在减肥产品中的应用 |
| CN115927122A (zh) * | 2023-01-17 | 2023-04-07 | 江南大学 | 副干酪乳酪杆菌制备的具有促进宿主ha合成并增强ha应用效果的后生元 |
| CN116531413A (zh) * | 2023-05-19 | 2023-08-04 | 西南医科大学附属医院 | 乳酸菌类后生元在制备预防和/或治疗酒精性肝病的药物中的应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| Postbiotics: An overview of concepts, inactivation technologies, health effects, and driver trends;Tatiana Colombo Pimentel et al.;《Trends in Food Science & Technology》;第138卷;199-214 * |
| The efficacy and safety of heat-killed Lactobacillus paracasei for treatment of perennial allergic rhinitis induced by house-dust mite;Peng G-C et al.;《Pediatr Allergy Immunol》;第16卷;433–438 * |
| 副干酪乳杆菌L9对小鼠牛乳蛋白过敏的缓解作用及机制研究;杨景;《中国博士学位论文全文数据库 基础科学辑》(第4期);1-95 * |
| 后生元研究进展及应用现状;刘红霞等;《食品科学》;1-13 * |
| 后生元调节肥胖的研究进展;汪玲娥 等;《食品科学》;1-18 * |
| 益生菌、益生元和后生元对食物过敏的影响和作用机制;黄福青等;《微生物学报》;第62卷(第3期);848–857 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117586926B (zh) * | 2024-01-18 | 2024-04-16 | 东北农业大学 | 副干酪乳杆菌lp-116、lp-116后生元组合物及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116769682A (zh) | 2023-09-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN116769682B (zh) | 缓解食物过敏的副干酪乳杆菌jy56后生元及其应用 | |
| EP2114423B2 (en) | Inactivated lactobacillus rhammosus gg for treating systemic inflammation in infants | |
| US20150037286A1 (en) | Use of roseburia in the prevention and treatment for obesity related diseases | |
| TW200944215A (en) | Lactobacillus isolates having anti-inflammatory activities and uses of the same | |
| JP7492584B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・ラクティスｂｌ－９９の腸管炎症の抑制における新規な用途 | |
| CN111004733B (zh) | 一种具有缓解便秘功能的凝结芽孢杆菌复合微生态制剂 | |
| CN111575204B (zh) | 一株可缓解或治疗过敏性疾病的副干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN110613738B (zh) | 一种能够缓解类风湿性关节炎的罗伊氏乳杆菌组合物 | |
| TW201917205A (zh) | 一種胚芽乳酸桿菌、組合物、培養方法及排除體脂肪、降低肝腫大及／或抗發炎的用途 | |
| CN115074274A (zh) | 含乳酸菌的组合物及其用途 | |
| TW201917206A (zh) | 一種胚芽乳酸桿菌、組合物、培養方法及降尿酸、改善過敏及／或降血糖的用途 | |
| WO2023070512A1 (zh) | 一种益生元和益生菌的组合物及其应用 | |
| CN101328468A (zh) | 抗过敏的乳酸菌 | |
| JP2020074751A (ja) | ビフィドバクテリウム ラクティス ｇｋｋ２、それを含む組成物、およびアレルギー性喘息改善のためのその使用 | |
| TWI636134B (zh) | 一種胚芽乳酸桿菌、組合物、培養方法及降血脂及／或降低肝功能指數的用途 | |
| CN113005067A (zh) | 多功能复合益生菌制剂及其制备方法 | |
| CN117887643B (zh) | 一种抗过敏的益生菌剂及其应用 | |
| EP2510932A1 (en) | Lactobacillus paracasei NCC2461 (ST11) for use by perinatal maternal administration in the reduction and prevention of allergies in progeny | |
| CN117883487B (zh) | 一种治疗放化疗引起的口腔粘膜炎的组合物及其制备方法 | |
| CN115119940A (zh) | 嗜酸乳杆菌LA85和乳双歧杆菌BLa80在抑制幽门螺旋杆菌上的应用 | |
| CN113913330B (zh) | 一株调节OVA特异性IgE的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN113005066B (zh) | 抗过敏、增加免疫力、降血糖、降脂减肥的复合双歧杆菌制剂及其制备方法 | |
| CN111450125B (zh) | 罗伊氏乳杆菌ccfm8631的新应用 | |
| CN102028224A (zh) | 抗过敏的乳酸菌 | |
| CN117987329B (zh) | 一种可缓解过敏反应的罗伊氏粘液乳杆菌Glory LR15组合物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |