CN116615196A - 真皮再生促进剂 - Google Patents

真皮再生促进剂 Download PDF

Info

Publication number
CN116615196A
CN116615196A CN202180076715.3A CN202180076715A CN116615196A CN 116615196 A CN116615196 A CN 116615196A CN 202180076715 A CN202180076715 A CN 202180076715A CN 116615196 A CN116615196 A CN 116615196A
Authority
CN
China
Prior art keywords
dermal
hydroxyethyl
ltbp2
imidazolidone
derivative
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180076715.3A
Other languages
English (en)
Inventor
入山俊介
丹野纱织
上田有纪
细井纯一
天野聪
常长诚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shiseido Co Ltd
Original Assignee
Shiseido Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shiseido Co Ltd filed Critical Shiseido Co Ltd
Publication of CN116615196A publication Critical patent/CN116615196A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本公开从健康/美容两个方面中的生活品质(QOL)维持或提高的观点考虑，涉及对皮肤的弹力的改善、皱纹的改善有效的物质和组合物。更具体而言，本公开涉及包含1‑(2‑羟基乙基)‑2‑咪唑烷酮或其衍生物等成分的组合物，该组合物促进成纤维细胞中的LTBP2和/或原纤蛋白1的产生，可以为了获得真皮弹力改善效果、真皮皱纹改善效果、真皮乳头层纤维增大促进效果、和真皮乳头层纤维稳定化效果而使用。

Description

真皮再生促进剂
技术领域
本发明涉及真皮弹力改善剂、真皮皱纹改善剂、真皮乳头层纤维增大促进剂、真皮乳头层纤维稳定剂、以及LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂，更详细而言，涉及以含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分作为特征的真皮弹力改善剂、真皮皱纹改善剂、真皮乳头层纤维增大促进剂、真皮乳头层纤维稳定剂、以及LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂。
背景技术
迎来真正的高龄化社会，与老化机制有关的研究/开发活跃化。其中皮肤形成人体的最外层，不仅担负对于生物体保护重要的作用，而且外观在视觉上被捕捉，因此在美容上是特别重要的脏器。从健康/美容两个方面中的生活品质(QOL)维持或提高的观点考虑对皮肤老化防止的关心近年来日益变高。
以皮肤老化的防止作为目的，从以前起在化妆料等皮肤外用剂中就混配了被期待皮肤水分保持能力提高的保湿剂、被期待抗氧化的维生素E、C等。进而，近年来的研究的结果表明，皮肤中的基质成分的减少、变性与伴随老化的皱纹、松弛、紧致的降低等密切相关。
特别是作为基质的主要成分的胶原的减少与皮肤的松弛、紧致的降低有关，此外通过弹性蛋白分解酶的表达而发生的弹性蛋白的分解变性被认为是弹性降低的原因，胶原产生增强作用剂、胶原分解酶抑制剂、弹性蛋白分解酶抑制剂等作为抗老化剂而被混配。然而，这些药剂虽然显示一定的效果，但是不显示充分的效果。
在专利文献1中，作为对皮肤的紧致、弹力的恢复/保持、皱纹/松弛的减轻、色素沉着的减轻有效，可以恢复并维持年轻的肌肤状态的抗老化用皮肤外用剂，公开了以含有烟酸和泛醌作为特征的抗老化用皮肤外用剂。
在专利文献2中，从乙酰肝素酶与皮肤老化的关系的观点考虑，作为新的对皮肤老化的预防、抑制有效的药剂、对斑点、雀斑、暗沉这样的色素沉着的预防、抑制有效的美白剂的成分，公开了具有特定的结构的环状羧酰胺衍生物。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2005-298370
专利文献2：日本特开2014-111640
非专利文献1：Vlodavsky I.,et.al.,Semin Cancer Biol.,2002；12(2):121-129
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的课题是从健康/美容两个方面中的生活品质(QOL)维持或提高的观点考虑，发现对皮肤的弹力的改善、皱纹的改善有效的物质和组合物。
用于解决课题的方法
本发明人进行了深入研究，结果发现了，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物等乙酰肝素酶活性抑制剂促进成纤维细胞中的LTBP2和/或原纤蛋白1的产生，显示真皮弹力改善效果、真皮皱纹改善效果、真皮乳头层纤维增大促进效果、和真皮乳头层纤维稳定化效果。
因此，本公开提供以下实施方式。
(1)一种真皮弹力改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
(2)一种真皮皱纹改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
(3)一种真皮乳头层纤维增大促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
(4)一种真皮乳头层纤维稳定剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
(5)根据(3)或(4)所述的剂，真皮乳头层纤维为真皮乳头层耐酸水解性纤维。
(6)一种LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
(7)根据(1)～(6)中任一项所述的剂，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物为下述通式(I)所示的环状羧酰胺衍生物。
(在通式(I)中，n为1～3的整数，R1为氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基，X为-CH2-、或-N(R2)-所示的基团，R2是指氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基。)
(8)一种改善真皮的弹力的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增大。
(9)一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增大。
(10)一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，进行LTBP2和/或原纤蛋白1的局部存在稳定化。
(11)一种真皮弹力改善剂的筛选方法，以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标。
(12)一种真皮皱纹改善剂的筛选方法，以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标。
(13)一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，使PDGF-BB的表达增大。
(14)一种真皮弹力改善剂的筛选方法，以PDGF-BB的表达作为指标。
(15)一种真皮皱纹改善剂的筛选方法，以PDGF-BB的表达作为指标。
发明的效果
本公开涉及的剂通过促进LTBP2和/或原纤蛋白1的产生，从而使真皮乳头层纤维增大和/或稳定化，因此例如，可以作为对真皮弹力和/或真皮皱纹的改善有效的化妆品等美容用组合物而适合地使用。
附图说明
图1为显示将人工皮肤模型(皮肤三维模型)的表皮中的PDGFB基因表达量利用定量PCR分析进行了调查的结果的图。显示以左侧的对照(Cont)作为基准，采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)的组合的处置的结果。
图2为显示由PDGF-BB引起的成纤维细胞的基因表达变化的图。从左起，对于对照(cont)和采用10ng/mL的PDGF-BB的处置各自而显示LTBP2、V型胶原(COL5A1)、III型胶原(COL3A1)、I型胶原(COL1A1)、原纤蛋白1(FBLN1)的结果。
图3A为显示采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2的局部存在变化的图像。显示出调查了器官培养模型中的LTBP2局部存在的变化的结果。从上起，显示出对照(Cont)、采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)的组合的处置、采用S-173(HEI)的处置的结果。
图3B为显示采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2的局部存在变化的图像。显示出调查了皮肤三维模型中的LTBP2局部存在的变化的结果。从上起，显示对照(Cont)、采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)的组合的处置、采用S-173(HEI)的处置的结果。
图4A为显示采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2和原纤蛋白1的局部存在变化的图像。显示出调查了器官培养模型中的LTBP2与原纤蛋白1的局部存在的变化的结果。从上起，显示对照(Cont)、采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)的组合的处置、采用S-173(HEI)的处置的结果。
图4B为显示采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2和原纤蛋白1的局部存在变化的图像。显示出调查了皮肤三维模型中的LTBP2与原纤蛋白1的局部存在的变化的结果。从上起，显示对照(Cont)、采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)的组合的处置、采用S-173(HEI)的处置的结果。
图5为作为对于硫酸乙酰肝素与LTBP2的结合进行了调查的结果，显示LTBP2与硫酸乙酰肝素浓度依赖性地结合的图。
图6为显示将受检者的两颊的水分丢失量用Vapometer(デルフィン社)测定3次，将角层水分量用Corneometer(MPA580，Courage+Khazaka electronic GmbH)测定5次，将肌肤的弹力用Cutometer测定3次的结果的图。
图7为显示将真皮乳头层的厚度利用声学显微镜进行了测定的结果的图。
图8为显示由包含1.5％ HEI的霜制剂(Active)/不包含1.5％ HEI的霜制剂(Placebo)的使用引起的皱纹面积率(％)的变化的图。显示出从应用开始起0个月后(0M)、1个月后(1M)、2个月后(2M)的时间点的结果。
具体实施方式
真皮弹力改善剂
本公开的一个实施方式涉及真皮弹力改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮(HEI)或其衍生物作为有效成分。另外，在本说明书中，也有时将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮(HEI)表述为S-173或S173。
1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮(HEI)为具有以下结构的化合物。
1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮的衍生物例如可以为以下通式(I)所示的化合物：
(在通式(I)中，n为1～3的整数，R1为氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基，X为-CH2-、或-N(R2)-所示的基团，R2是指氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基。)
已知1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮及其衍生物作为乙酰肝素酶活性抑制剂起作用(参照日本特开2014-111640(专利文献2))。乙酰肝素酶是存在于各种细胞，将各种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的硫酸乙酰肝素链特异性分解的酶。在皮肤中，构成表皮的表皮角质形成细胞和真皮的成纤维细胞、血管内皮细胞等产生。已知在各种癌细胞中产生也提高，也提示了与癌的恶性度的相关。已知如果在癌细胞中乙酰肝素酶的产生高则转移性高，血管新生的诱导能力也高(参照Vlodavsky I.,et.al.,Semin Cancer Biol.,2002；12(2):121-129(非专利文献1))。
硫酸乙酰肝素蛋白聚糖发挥使硫酸乙酰肝素结合性生长因子(bFGF，HGF，VEGF，HB-EGF等)蓄积在细胞外的作用。作为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的1种的串珠蛋白聚糖也存在于在表皮与真皮的边界部存在的表皮基底膜中，在皮肤中，通过使硫酸乙酰肝素结合性生长因子与表皮基底膜结合，从而控制了表皮、真皮间的生长因子的移动。此外，明确了存在于表皮基底膜的串珠蛋白聚糖也控制生长因子对结合于基底膜的表皮基底细胞的作用，对于表皮的良好的生长/分化是必需的。
此外，已知1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮(HEI)也作为MMP(基质金属蛋白酶，matrix metalloproteinase)的抑制剂起作用。HEI例如虽然抑制MMP-9，但对MMP-1和MMP-2的活性不带来影响。
如在实施例栏中详述的那样，本发明人这次发现了1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮具有使人的肌肤弹力改善的效果。肌肤弹力例如可以使用Cutometer(商标)等皮肤计测设备进行测定。
本公开涉及的真皮弹力改善剂换句话说，也可以表达为含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分的、用于真皮弹力改善的组合物。这样的组合物特别是能够用于非治疗的美容用途。此外，从其它观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮弹力改善中的使用。在这样使用时，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以以与其它成分组合了的组合物的形式使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮弹力改善剂的制造中的使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及包括将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物施与对象(例如人)的真皮弹力改善方法。
LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂
本公开的一个实施方式涉及LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。如在实施例栏中详述的那样，本发明人这次发现了，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮具有使人成纤维细胞中的LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进的效果。LTBP2和/或原纤蛋白1的产生量的增减例如可以通过进行定量PCR分析来调查。
本公开涉及的LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂换句话说，也可以表达为含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分的、用于LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进的组合物。这样的组合物特别是能够用于非治疗的美容用途。此外，从其它观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进中的使用。在这样使用时，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以以与其它成分组合了的组合物的形式使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂的制造中的使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及包括将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物施与对象(例如人)的、LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进方法。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及一种改善真皮的弹力的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增大。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增大。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及防止或改善皱纹(特别是真皮皱纹)的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的基底膜紧下方的局部存在稳定化。此外，如在本申请的实施例中所示，由于PDGF-BB促进LTBP2、原纤蛋白1的产生，因此本公开的一个实施方式也涉及防止或改善皱纹(特别是真皮皱纹)的美容方法，其特征在于，使PDGF-BB的表达增大。另外，本公开涉及的美容方法为非治疗的方法，不包含所谓的医疗行为。
真皮乳头层纤维增大促进剂
本公开的一个实施方式涉及真皮乳头层纤维增大促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。如在实施例栏中详述的那样，本发明人这次发现了1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮具有使真皮乳头层纤维的增大促进的效果。真皮乳头层纤维的增大例如可以通过将真皮乳头层的厚度利用声学显微镜(例如，本田电子株式会社制的AMS-50SI)进行测定来评价。
若干实施方式涉及真皮乳头层纤维增大促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分，并且真皮乳头层纤维为真皮乳头层耐酸水解性纤维。
本公开涉及的真皮乳头层纤维增大促进剂换句话说，也可以表达为含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分的、用于真皮乳头层纤维增大促进的组合物。这样的组合物特别是能够用于非治疗的美容用途。此外，从其它观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮乳头层纤维增大促进中的使用。在这样使用时，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以以与其它成分组合了的组合物的形式使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮乳头层纤维增大促进剂的制造中的使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及包括将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物施与对象(例如人)的、真皮乳头层纤维增大促进方法。
真皮乳头层纤维稳定剂
本公开的一个实施方式涉及真皮乳头层纤维稳定剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。如在实施例栏中详述的那样，本发明人这次发现了，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮具有使真皮乳头层纤维的增大促进的效果。真皮乳头层纤维的稳定化例如可以通过将真皮乳头层的厚度利用声学显微镜(例如，本田电子株式会社制的AMS-50SI)进行测定来评价。
若干实施方式涉及真皮乳头层纤维增大促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分，并且真皮乳头层纤维为真皮乳头层耐酸水解性纤维。
本公开涉及的真皮乳头层纤维稳定剂换句话说，也可以表达为含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分的、用于真皮乳头层纤维稳定化的组合物。这样的组合物特别是能够用于非治疗的美容用途。此外，从其它观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮乳头层纤维稳定化中的使用。在这样使用时，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以以与其它成分组合了的组合物的形式使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮乳头层纤维稳定剂的制造中的使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及包括将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物施与对象(例如人)的、真皮乳头层纤维稳定化方法。
真皮皱纹改善剂
本公开的一个实施方式涉及真皮皱纹改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。如在实施例栏中详述的那样，本发明人这次发现了，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮具有使人的真皮皱纹改善的效果。由干燥引起的小皱纹被俗称为表皮性的皱纹，另一方面眼梢的深皱纹被定义为伴随真皮、脂肪层的变化的深皱纹。本申请中公开的技术在除了表皮性的小皱纹以外，还通过促进乳头层(乳头层的弹性蛋白纤维)的再生而带来真皮性的深皱纹的改善方面是划时代的。迄今为止，对于真皮性的皱纹，通过真皮的胶原、弹性蛋白、透明质酸等这样的一般的基质的分解抑制而达到改善、或单纯地称为胶原、弹性蛋白、透明质酸产生促进是本领域技术人员间的理论。对于本申请中公开的技术，通过用1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮进行处置从而从表皮产生PDGF-BB，作用于乳头层的PDGFRβ阳性的成纤维细胞，从而提高胶原、弹性蛋白的产生。另一方面1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮通过抑制基底膜的分解从而使良好的基底膜微细结构的再生促进。重要的点在于通过该PDGF-BB而被产生促进了的基质、与通过分解抑制而被形成了的基底膜相互作用，从而可以在乳头层构建正常的基质的方面。另外，真皮皱纹的改善例如可以使用图像分析装置等进行评价。
本公开涉及的真皮皱纹改善剂换句话说，也可以表达为含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分的、用于真皮皱纹的改善的组合物。这样的组合物特别是能够用于非治疗的美容用途。此外，从其它观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮皱纹的改善中的使用。在这样使用时，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以以与其它成分组合了的组合物的形式使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物在真皮皱纹改善剂的制造中的使用。从进一步其它的观点考虑，本公开的一个实施方式涉及包括将1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物施与对象(例如人)的、真皮皱纹改善方法。
筛选方法
本公开的一个实施方式涉及以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标的、真皮弹力改善剂的筛选方法。此外，本公开的一个实施方式涉及以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标的、真皮皱纹改善剂的筛选方法。这样的筛选方法例如包括下述工序：使细胞与试验化合物接触的工序；测定LTBP2和/或原纤蛋白1的表达的工序；确定由该化合物的有无引起的LTBP2和/或原纤蛋白1的表达的增加的有无的工序。LTBP2和/或原纤蛋白1的表达的增加可以通过利用已知的方法测定mRNA量、蛋白质量来评价。成为筛选的对象的化合物例如可以使用化合物库、微生物/动植物等的提取物的库所包含的物质。
此外，本公开的一个实施方式涉及以PDGF-BB的表达作为指标的、真皮弹力改善剂和筛选方法。这样的筛选方法例如包括下述工序：使细胞与试验化合物接触的工序；测定PDGF-BB的表达的工序；确定由该化合物的有无引起的PDGF-BB的表达的增加的有无的工序。PDGF-BB的表达的增加可以通过利用已知的方法测定mRNA量、蛋白质量来评价。成为筛选的对象的化合物例如可以使用化合物库、微生物/动植物等的提取物的库所包含的物质。
进一步，本公开的一个实施方式涉及以PDGF-BB的表达作为指标的真皮皱纹改善剂的筛选方法。这样的筛选方法例如包括下述工序：使细胞与试验化合物接触的工序；测定PDGF-BB的表达的工序；确定由该化合物的有无引起的PDGF-BB的表达的增加的有无的工序。PDGF-BB的表达的增加可以通过利用已知的方法测定mRNA量、蛋白质量来评价。成为筛选的对象的化合物例如可以使用化合物库、微生物/动植物等的提取物的库所包含的物质。
调制
1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以通过公知的方法合成，或可以容易购入市售品。
此外，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物可以通过公知的方法而制成无机盐或有机盐。作为在本公开涉及的实施方式中使用的盐，没有特别限定，例如，作为无机盐，可举出盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铵盐等。作为有机盐，可举出乙酸盐、乳酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、三乙醇胺盐、二乙醇胺盐、氨基酸盐等。
在本公开涉及的剂中，能够适合使用具有乙酰肝素酶活性抑制效果和/或MMP抑制效果的1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮及其衍生物、特别是具有乙酰肝素酶活性抑制效果与MMP抑制效果(特别是MMP-9抑制效果)的两种效果的物质。本公开涉及的剂可以单独包含仅1种1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物，但也可以以任意的组合和比率包含2种以上上述化合物或其盐。
本公开涉及的剂中的1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐的含量只要是对于有效地发挥所希望的效果而言充分的量，就没有特别限定，只要根据剂的用途来适当选择即可。然而一般而言，优选使1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐相对于剂整体的比率通常为0.0001质量％以上，尤其是0.0001质量％以上，此外，通常为5质量％以下，尤其是1.5质量％以下。在使用2种以上的1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐的情况下，只要它们的合计量满足上述范围即可。
此外，本公开涉及的剂只要实质上不损害由1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐带来的作用，则除了1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐以外，还可以含有其它任意的成分。作为其它成分，可举出具有乙酰肝素酶活性的抑制作用、其它活性(MMP抑制活性、特别是MMP-9抑制活性等)的其它化合物(CGS27023A，BIPBIPU等)、医药上能够被容许的载体和/或辅助剂。其它成分的例子可举出缬草提取物、百合提取物、滨海前胡提取物、无患子提取物、陈皮提取物等作为乙酰肝素酶抑制药剂起作用的生药(参照日本特愿2014-165586)、莽吉柿提取物、姜黄提取物、(洋委陵菜提取物)等作为MMP抑制剂起作用的生药(参照特愿2018-545781)，但不限定于它们。这样的其它成分可以单独使用1种，也可以以任意的组合和比率使用2种以上。因此，本发明的一部分方案涉及包含兼具了乙酰肝素酶抑制活性与MMP(特别是MMP-9)抑制活性的化合物、以及/或者乙酰肝素酶抑制剂与MMP(特别是MMP-9)抑制剂的组合作为有效成分的真皮弹力改善剂、真皮皱纹改善剂、真皮乳头层纤维增大促进剂、真皮乳头层纤维稳定剂、LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂等剂。
本公开涉及的剂可以按照常规方法来制造，此外作为构成皮肤外用剂的成分，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐的1种或2种以上也可以单独调制，但通常可以根据需要适当混配能够在包含医药部外品在内的的化妆品、药品等皮肤外用剂等中使用的成分，例如油分、表面活性剂、粉末、色料、水、醇类、增稠剂、螯合剂、有机硅类、抗氧化剂、紫外线吸收剂、保湿剂、香料、各种药效成分、防腐剂、pH调节剂、中和剂等。
本公开涉及的剂的施与途径和剂型都没有限定，只要根据其用途来适当选择即可。作为施与途径的例子，可举出局部施与(皮肤外用等)、经口施与、非经口施与(静脉施与、腹腔内施与等)等，在作为真皮再生促进剂等本公开涉及的剂而使用的情况下，优选作为皮肤外用剂而使用。作为剂型，在局部施与(皮肤外用材料)的情况下，可举出将溶液系、增溶系、乳化系、粉末分散系、水-油二层系、水-油-粉末三层系等制成了贴片剂、软膏、霜、乳液、化妆水、凝胶、气雾剂等的形态。在经口施与的情况下，可举出片剂、包衣片、糖衣片、颗粒剂、散剂、胶囊剂(例如硬或软明胶胶囊)等固体制剂、内服液体制剂、糖浆剂等液体制剂(溶液、悬浮液)等形态。在非经口施与的情况下，可举出注射液等形态。
此外，在本公开涉及的剂中，只要实质上不损害由1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐带来的作用，则除了本公开涉及的1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物或其盐以外，还可以混配载体和/或辅助剂等其它1种或2种以上任意成分。其它成分没有特别限定，只要根据药物组合物的用途、剂型、施与形态等来适当选择即可，作为例子，可举出医药上能够被容许的载体和/或辅助剂。作为辅助剂，可举出例如稀释剂、粘合剂、崩解剂、增稠剂、分散剂、再吸收促进剂、矫味剂、缓冲剂、表面活性剂、助溶剂、保存剂、乳化剂、等渗剂、稳定剂、pH调整剂等。
作为具体例，在将本公开涉及的剂制成皮肤外用剂的情况下，可以根据需要适当混配外用剂所通常使用的成分，例如，美白剂、保湿剂、抗氧化剂、油性成分、紫外线吸收剂、表面活性剂、增稠剂、醇类、粉末成分、色剂、水性成分、水、各种皮肤营养剂等。进一步，也可以适当混配乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、柠檬酸钠、多磷酸钠、偏磷酸钠、葡糖酸等金属离子封锁剂、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯等防腐剂、咖啡因、丹宁、维拉帕米、凝血酸及其衍生物、甘草提取物、光甘草定、木瓜的果实的热水提取物、各种生药、生育酚乙酸酯、甘草酸及其衍生物或其盐等药剂、维生素C、抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸等美白剂、葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖等糖类、视黄酸、视黄醇、乙酸视黄醇酯、棕榈酸视黄醇酯等维生素A衍生物类等。
上述成分为例示，不限定于它们。此外这些成分按照与所希望的形态对应的处方，能够适当组合混配。
本公开涉及的皮肤外用剂的剂型没有特别限定，例如，可以采用溶液系、增溶系、乳化系、粉末分散系、水-油二层系、水-油-粉末三层系、软膏、凝胶、气雾剂等任意的剂型。此外，使用形态也没有特别限定，例如，可以采用化妆水、乳液、霜、精华、胶冻、凝胶、软膏、面膜(pack)、面膜(mask)、粉底等任意的形态。
本公开涉及的剂通过应用于肌肤，从而可以利用于为了谋求真皮皱纹的形成的预防和/或形成了的真皮皱纹的减轻/消失的美容方法。这样的美容方法中的本公开涉及的皮肤外用剂的用法、用量也没有特别限定，根据剂型、进行处置的真皮皱纹的状态来适当确定，但典型地，每1天多次例如1次～5次、适量例如每1平方cm2为0.1ml～1ml，直接擦上肌肤、或在使其适量渗透到纱布等后粘贴到肌肤。
以上，举出具体例对本发明进行了说明，但以上具体例到底是例示，本发明在不脱离权利要求书的范围中，能够加入任意的变更而实施。上述各处提及的本发明的各种特征和实施方式也可以适当加入必要的变更而被应用于其它部分的记载。因此，在某实施方式中被特定的特征可以适当与在其它实施方式中被特定的功能组合。专利、专利申请、论文、教科书、和包含序列登记号的在本说明书中被引用的全部参考文献、和在其中被引用了的参考文献通过参照而其整体被并入到本说明书中。被并入了的文献和同样的资料的1个或多个包含被定义了的术语、术语的使用法、被说明了的技法等，但不限定于它们，在与本申请不同、或矛盾的情况下，优先本申请的记载。
以下，举出实施例更具体地说明本发明，但本发明不限定于下述实施例。
实施例
1.材料和方法
皮肤模型的培养
将从MatTeK社购入了的皮肤三维模型(EFT-400)在添加了作为MMP-9抑制剂的CGS27023A(参考文献1)(终浓度10-5M)、作为乙酰肝素酶抑制剂的BIPBIPU(参考文献2)(终浓度10-5M)、具有抑制MMP-9与乙酰肝素酶两者的效果的独特开发成分1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮(参考文献3)(以下HEI，最终浓度0.01％)的专用培养基(EFT400-ASY)中进行了培养。对照用不包含这些抑制剂的等量加入了DMSO溶剂的培养基进行了培养。2天进行1次培养基交换，在第4天、第7天回收了组织片。
新鲜人皮肤的培养
从株式会社KAC购入取得了进行了知情同意的受检者(20几岁～30几岁)的腹部的新鲜皮肤样品。利用与参考文献4所记载的方法相同方法，向所取得的样品照射50mJ/cm2的UVB，用包含CGS27023A(终浓度10-5M)、BIPBIPU(终浓度10-5M)、HEI(最终浓度0.01％)的William’s E培养基(Thermo Fisher Science，Waltham，MA)进行了培养。对照不添加CGS27023A、BIPBIPU、HEI，使用等量加入了DMSO溶剂的培养基进行了培养。每天进行培养基交换，在第5天回收了皮肤片。
石蜡块、切片制作
将回收了的皮肤模型、新鲜人皮肤按照AMeX法，使用冷丙酮进行了脱水固定后，按照丙酮、苯甲酸甲酯、二甲苯的顺序置换，包埋于石蜡。以3μm的厚度制作切片，制作出组织染色用的切片。
各种免疫染色
将以3μm的厚度制作出的石蜡切片用二甲苯脱石蜡后，使用EtOH进行了水合化。使用针对V型胶原的抗体(Acris，AM10159PU-N，V13F6，mouse monoclonal antibody)和针对细胞角蛋白14(K-14)的抗体(Fitzgerald，20R-CP002，guniea pig polyclonalantibody)、针对原纤蛋白-1的抗体(Abcam，11C 1.3，mouse monoclonal antibody)、针对α6整联蛋白的抗体(Santa Cruz，GOH-3，sc-19622，rat monoclonal antibody)、针对LTBP2的抗体(Protein-tech Group，17708-1-AP，rabbit polyclonal antibody)进行了荧光免疫染色。
PDGFB(PDGF-BB)的基因表达
仅将回收了的皮肤模型的表皮用镊子剥落，在加入了氧化锆球的1mL Trizol溶液中放入表皮，利用组织破碎机使其振动3分钟而将表皮破碎了。使用氯仿、异丙醇提取RNA，使用RNeasy mini kit(QIAGEN)将RNA精制，利用NanoDrop测定RNA浓度后，使用SuperScript VILO(Invitrogen)合成出cDNA。然后使用合成出的cDNA，使用platinumSYBER green(invitrogen)进行了定量PCR分析。将所使用的基因的引物示于表１中。
表1
引物名 序列 序列号
PDGFB forward 5′-CCTGGCATGCAAGTGTGA-3′ 1
PDGFB reverse 5′-CGAATGGTCACCCGAGTTT-3′ 2
LTBP2的基因表达
从株式会社KAC购入取得了来源于进行了知情同意的受检者(20～30几岁、50几岁～60几岁)腹部皮肤的成纤维细胞。利用包含10％血清的DMEM培养基进行了培养。在6孔板中以25万细胞/孔接种，在2天后使用RNeasy mini kit(QUIAGEN)提取mRNA，使用SuperScript VILO(invitrogen)而合成出cDNA。然后使用合成出的cDNA，使用platinumSYBER green(invitrogen)进行了定量PCR分析。将所使用的基因的引物示于表2中。
表2
引物名 序列 序列号
LTBP2 forward CGGGCACTTGGTCATCTCCT 3
LTBP2 reverse GTGATCAGGTCTGGGGAAAA 4
GAPDH forward GAAGGTGAAGGTCGGAGTC 5
GAPD H reverse GAAGATGGTGATGGGATTTC 6
LTBP2与硫酸乙酰肝素的结合测定法
使从生化学工业购入了的硫酸乙酰肝素利用次碘酸钠而进行开环反应，添加于カルボバインド板(コ一ニング)，从而将硫酸乙酰肝素固相化了(关于将生物素化硫酸乙酰肝素对板固相化的方法，通过与参考文献5所记载的方法相同方法实施)。在该硫酸乙酰肝素板中添加各种浓度的重组人LTBP2(abcam)，在室温下使其反应2小时。用PBS洗涤3次后，添加HRP标记-抗-LTBP2抗体，在室温下使其反应2小时后用PBS进行了3次洗涤。在用TMB进行了显色反应后用1N HCl使反应停止，测定OD475nm，从而算出了结合LTBP2量。
使PDGF-BB作用了的成纤维细胞的基因表达分堑
从株式会社KAC购入取得了进行了知情同意的受检者(14个月)的成纤维细胞。利用包含10％血清的DMEM培养基进行了培养。在6孔板中以25万细胞/孔接种，在1天后，添加10ng/mL的重组人PDGF-BB(R&D sysytems社)，在1天后使用RNeasy mini kit(QUIAGEN)提取mRNA，使用SuperScript VILO(invitrogen)合成出cDNA。然后使用合成出的cDNA，使用platinum SYBER green(invitrogen)进行了定量PCR分析。将所使用的基因的引物示于表3中。
表3
引物名 序列 序列号
COL5A1 forward GTGGCACAGAATTGCTCTCA 7
COL5A1 reverse TCACCCTCAAACACCTCCTC 8
LTBP2 forward CGGGCACTTGGTCATCTCCT 9
LTBP2 reverse GTGATCAGGTCTGGGGAAAA 10
COL3A1 forward TCCGGGTGAGAAAGGTGA 11
COL3A1 reverse GCAGGTCCAGAACCTCCAG 12
COL1A1 forward CTCGAGGTGGACACCACCCT 13
COL1A1 reverSe CAGCTGGATGGCCACATCGG 14
FBLN1 forward GAGACCTGCTTCAACATCCAG 15
FBLN1 reverse GATTCTCATGGCAAGGCAAG 16
GAPDH fprward GAAGGTGAAGGTCGGAGTC 17
GAPDH reverse GAAGATGGTGATGGGATTTC 18
与肌肤弹力有关的效果验证的人试验
对30几岁～50几岁的健康的日本人女性30名，将包含1.5％HEI的美容液/不包含1.5％HEI的美容液在半边脸使用了4周。在从应用开始起0周后、2周后、4周后使她们来到试验设施，在恒温恒湿室中使她们适应后，将两颊的水分丢失量用Vapometer(デルフイン社)测定了3次，将角层水分量用Corneometer(MPA580，Courage+Khazaka electronic GmbH)测定了5次，将肌肤的弹力用Cutometer测定了3次，利用声学显微镜AMS-50SI(本田电子株式会社)测定了真皮乳头层的厚度。
与皱纹改善有关的效果验证的人试验
对30几岁～50几岁的健康的日本人女性34名，将包含1.5％HEI的霜制剂/不包含1.5％HEI的霜制剂对眼梢以1天2次、每次各0.1mL使用了2个月。在从应用开始起0个月后、1个月后、2个月后使她们来到试验设施，在恒温恒湿室中使她们适应后，将复型(replica)剂(SILFLO(Flexico，England))从外眼角向外侧涂抹为一边4cm的圆形而获得了复型。将所取得的复型使用反射用复型分析系统ASA-03RXD和反射型三维皮肤分析软件，以从外眼角向面部的外侧相距5mm的点作为基点而以1边10mm的正方形作为分析区域，算出了皱纹面积率(％)。在算出了0个月、1个月、2个月的左右的皱纹面积率(％)后，基于分配表，分成有效、安慰剂，比较了有效、安慰剂的使用前(0个月)、1个月后、2个月后的测定值。
2.结果和考察
采用乙酰肝素酶抑制剂和MMP抑制剂的PDGF-BB产生促进
将人工皮肤模型(皮肤三维模型)的表皮中的PDGFB基因表达量利用定量PCR分析进行了调查的结果示于图1中。图1的结果显示出通过采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)和MMP抑制剂(CGS27023A)的处置从而PDGFB的产生量增加。
采用PDGF-BB的成纤维细胞的基因表达变化
通过用乙酰肝素酶抑制剂和MMP抑制剂进行处置从而表皮中的PDGFB基因量增加了，因此推测在表皮中PDGF-BB蛋白质量增加了。由于PDGF-BB通过基底膜而对真皮的成纤维细胞作用，因此接下来研究了PDGF-BB对成纤维细胞带来的影响。迄今为止，如果使PDGF-BB作用于成纤维细胞，则明确了V型胶原的产生增强，但对与弹性蛋白纤维形成有关的原纤蛋白1、LTBP2的表达带来的影响并未明确。因此，将使PDGF-BB作用于成纤维细胞，调查了对原纤蛋白、LTBP2的基因表达带来的影响的结果示于图2中。图2的结果显示出PDGF-BB也促进LTBP2、原纤蛋白1的产生。
采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2局部存在变化
根据上述结果，考虑在使乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)与MMP抑制剂(CGS27023A)同时作用了的情况下，或在使具有同时抑制乙酰肝素酶与MMP两者的酶活性的效果的抑制剂HEI作用了的情况下，表皮中的PDGF-BB量增加，真皮乳头层的成纤维细胞的原纤蛋白、LTBP2的产生量提高的可能性。此外考虑通过使乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU，HEI)作用，从而基底膜成分串珠蛋白聚糖的硫酸乙酰肝素链的分解被抑制，具有硫酸乙酰肝素结合区域的LTBP2与基底膜粘接的假说。因此，将调查了器官培养人皮肤模型和皮肤三维模型中的LTBP2局部存在的变化的结果示于图3A和3B中。图3A和3B的结果显示出，通过采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)、MMP抑制剂(CGS27023A)、具有MMP与乙酰肝素酶两酶的抑制效果的化合物(HEI)的处置，从而LTBP2的产生量提高，通过与硫酸乙酰肝素结合，从而可以稳定地局部存在于基底膜。
采用乙酰肝素酶抑制剂的LTBP2/原纤蛋白-1局部存在变化
将调查了器官培养人皮肤模型和皮肤三维模型中的原纤蛋白1与LTBP2局部存在的变化的结果示于图4A和4B中。图4A和4B的结果显示出，通过采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU)、MMP抑制剂(CGS27023A)、或抑制乙酰肝素酶与MMP两酶的化合物(HEI)的处置，从而经由LTBP2而原纤蛋白1能够稳定地局部存在于基底膜紧下方。此外，该结果显示出，采用乙酰肝素酶抑制剂(BIPBIPU，HEI)的处置对真皮乳头层耐酸水解性纤维带来影响。
硫酸乙酰肝素与LTBP2的结合
关于硫酸乙酰肝素与LTBP2的结合，将使用固相化有硫酸乙酰肝素的板而调查了的结果示于图5中。图5的结果显示出LTBP2与硫酸乙酰肝素浓度依赖性地结合。
与肌肤弹力有关的效果验证的人试验
对30几岁～50几岁的健康的日本人女性30名，将包含1.5％ HEI的美容液/不包含1.5％ HEI的美容液在半边脸使用了4周。在从应用开始起0周后、2周后、4周后使她们来到试验设施，在恒温恒湿室中使她们适应后，将两颊的水分丢失量用Vapometer(デルフィン社)测定了3次，将角层水分量用Corneometer(MPA580，Courage+Khazaka electronicGmbH)测定了5次，将肌肤的弹力用Cutometer测定了3次。将结果示于图6中。图6的结果显示出，通过包含抑制乙酰肝素酶与MMP两酶的活性的化合物HEI 1.5％的美容液的处置，从而显示出真皮的弹力改善。此外，利用声学显微镜AMS-50SI(本田电子株式会社)测定了真皮乳头层的厚度。将结果示于图7中。图7的结果显示出，通过采用HEI的处置，从而真皮乳头层纤维的增大被促进，真皮乳头层纤维稳定化。
与皱纹改善有关的效果验证的人试验
对30几岁～50几岁的健康的日本人女性34名，将包含1.5％ HEI的霜制剂(有效)/不包含1.5％ HEI的霜制剂(安慰剂)使用于眼梢，获取复型，算出了皱纹面积率(％)。将结果示于图8中。图8的结果显示出，通过包含HEI的有效制剂和处置，从而皱纹面积率(％)显著降低了。另一方面，对于用安慰剂制剂进行了处置的组，未见变化。对于有效侧，在使用前后确认了减少，因此进行了曼惠特尼U检验，结果有效侧的皱纹面积率(％)在使用前后确认了显著减少。
参考文献
1)Pan W,Miao HQ,Xu YJ,Navarro EC,Tonra JR,Corcoran E,et al.1-[4-(1H-Benzoimidazol-2-yl)-phenyl]-3-[4-(1H-benzoimidazol-2-yl)-phenyl]-ureaderivatives as small molecule heparanase inhibitors.Bioorganic&medicinalchemistry letters.2006；16(2):409-12.
2)MacPherson LJ,Bayburt EK,Capparelli MP,Carroll BJ,Goldstein R,Justice MR,et al.Discovery of CGS 27023A,a non-peptidic,potent,and orallyactive stromelysin inhibitor that blocks cartilage degradation inrabbits.Journal of medicinal chemistry.1997；40(16):2525-32.
3)Iriyama S,Yamanishi H,Kunizawa N,Hirao T,Amano S.1-(2-Hydroxyethyl)-2-imidazolidinone,a heparanase and matrix metalloproteinaseinhibitor,improves epidermal basement membrane structure and epidermalbarrier function.Experimental dermatology.2019；28(3):247-53.
4)Iriyama S,Yasuda M,Nishikawa S,Takai E,Hosoi J,Amano S.Decrease oflaminin-511in the basement membrane due to photoaging reduces epidermal stem/progenitor cells.Scientific reports.2020；10(1):12592.
5)Farhad Behzad,Paul E C Brenchley.A multiwell format assay forheparinase.Anal Biochem.2003Sep 15；320(2):207-13.
产业可利用性
本公开涉及的剂通过促进PDGF-BB、LTBP2和/或原纤蛋白1的产生，从而使真皮乳头层纤维增大和/或稳定化，因此可以作为对真皮弹力和/或真皮皱纹的改善有效的化妆品等美容用组合物而适合地使用。
序列表
<110> 株式会社资生堂
<120> 真皮再生促进剂
<130> FP21-815-PCT
<150> JP2020-207599
<151> 2020-12-15
<160> 18
<170> PatentIn 版本 3.5
<210> 1
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 1
cctggcatgc aagtgtga 18
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 2
cgaatggtca cccgagttt 19
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 3
cgggcacttg gtcatctcct 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 4
gtgatcaggt ctggggaaaa 20
<210> 5
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 5
gaaggtgaag gtcggagtc 19
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 6
gaagatggtg atgggatttc 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 7
gtggcacaga attgctctca 20
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 8
tcaccctcaa acacctcctc 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 9
cgggcacttg gtcatctcct 20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 10
gtgatcaggt ctggggaaaa 20
<210> 11
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 11
tccgggtgag aaaggtga 18
<210> 12
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 12
gcaggtccag aacctccag 19
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 13
ctcgaggtgg acaccaccct 20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 14
cagctggatg gccacatcgg 20
<210> 15
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 15
gagacctgct tcaacatcca g 21
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 16
gattctcatg gcaaggcaag 20
<210> 17
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 17
gaaggtgaag gtcggagtc 19
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 18
gaagatggtg atgggatttc 20

Claims (15)

1.一种真皮弹力改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
2.一种真皮皱纹改善剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
3.一种真皮乳头层纤维增大促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
4.一种真皮乳头层纤维稳定剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
5.根据权利要求3或4所述的剂，真皮乳头层纤维为真皮乳头层耐酸水解性纤维。
6.一种LTBP2和/或原纤蛋白1的产生促进剂，其特征在于，含有1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物作为有效成分。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的剂，1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮或其衍生物为下述通式(I)所示的环状羧酰胺衍生物，
在通式(I)中，n为1～3的整数，R1为氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基，X为-CH2-、或-N(R2)-所示的基团，R2是指氢原子、或可以被羟基取代的碳原子数1～6的烃基。
8.一种改善真皮的弹力的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增加。
9.一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，使LTBP2和/或原纤蛋白1的产生增加。
10.一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，进行LTBP2和/或原纤蛋白1的局部存在稳定化。
11.一种真皮弹力改善剂的筛选方法，以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标。
12.一种真皮皱纹改善剂的筛选方法，以LTBP2和/或原纤蛋白1的表达作为指标。
13.一种防止或改善皱纹的美容方法，其特征在于，使PDGF-BB的表达增加。
14.一种真皮弹力改善剂的筛选方法，以PDGF-BB的表达作为指标。
15.一种真皮皱纹改善剂的筛选方法，以PDGF-BB的表达作为指标。
CN202180076715.3A 2020-12-15 2021-12-09 真皮再生促进剂 Pending CN116615196A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2020207599 2020-12-15
JP2020-207599 2020-12-15
PCT/JP2021/045233 WO2022131108A1 (ja) 2020-12-15 2021-12-09 真皮再生促進剤

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116615196A true CN116615196A (zh) 2023-08-18

Family

ID=82059109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180076715.3A Pending CN116615196A (zh) 2020-12-15 2021-12-09 真皮再生促进剂

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JPWO2022131108A1 (zh)
CN (1) CN116615196A (zh)
WO (1) WO2022131108A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024095793A1 (ja) * 2022-11-02 2024-05-10 株式会社 資生堂 組成物

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2608747C (en) * 2005-05-17 2013-01-22 Human Matrix Sciences, Llc Elastin producing fibroblast formulations and methods of using the same
JP5105962B2 (ja) * 2007-06-08 2012-12-26 株式会社 資生堂 コーニファイドエンベロープ形成・成熟化促進剤
US8609075B2 (en) * 2009-09-30 2013-12-17 Shiseido Company, Ltd. Heparanase activity inhibitor
JP6032734B2 (ja) * 2012-08-24 2016-11-30 株式会社ナリス化粧品 しわ改善剤
JP6671894B2 (ja) * 2015-08-28 2020-03-25 北海道三井化学株式会社 皮膚外用剤
KR20190066001A (ko) * 2016-10-21 2019-06-12 가부시키가이샤 시세이도 라미닌 511 생성 촉진제, 표피 기저막 안정화제 및/또는 표피 줄기 세포 감소 억제 또는 증가 촉진제의 스크리닝 방법

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2022131108A1 (zh) 2022-06-23
WO2022131108A1 (ja) 2022-06-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5593323B2 (ja) ヘパラナーゼ活性阻害剤
KR100978545B1 (ko) 박하 추출물의 화장 용도
EP3288531B1 (en) Method of improving skin health and compositions therefor
EP3403673B1 (en) Composition for preventing or ameliorating loss of hair and graying of hair, and use thereof
US20090036545A1 (en) Skin appearance through gene manipulation
EP3978020A1 (en) Skin composition
US6962712B2 (en) Cosmetic or dermatological composition comprising of a combination of an elastase inhibitor of the N-acylaminoamide family and at least one antifungal agent or at least one antibacterial agent
JP5787246B2 (ja) 角化細胞遊走・増殖促進剤を含む、創傷治癒剤および褥瘡（床ずれ）治療薬
US9084744B1 (en) Use of Tiliacora triandra in cosmetics and compositions thereof
CN116615196A (zh) 真皮再生促进剂
WO2011108304A1 (ja) 皮膚外用剤
JP2009298752A (ja) 皮膚外用剤組成物
EP4146669A1 (en) Compositions and methods for modulating inflammation and wound healing
US20240041746A1 (en) Skin Care Composition and Method of Using the Same
EP3130332A1 (en) Anti-aging external skin preparation
EP4230192A1 (en) Epidermal stem cell proliferation-promoting agent
EP2510112B1 (en) Method for screening active agents that stimulate the expression of cert to improve the skin&#39;s barrier function
WO2023100691A1 (ja) 幹細胞増殖促進剤
TW201924673A (zh) 膽固醇合成促進劑
Bai et al. Enzymatically modified isoquercitrin and its protective effects against photoaging: In‐vitro and clinical studies
JP2013512937A (ja) 皮膚のバリア機能を改善するための、ａｒｎｔ２の発現を刺激する活性剤のスクリーニング方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination