CN116121078A - 一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于食用菌加工领域，具体涉及一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法。本发明选择诱变后的高产牛排菇GXGD‑EF‑8‑1作为发酵菌种，以液体发酵技术快速高效获得菌丝体为原料，通过改良发酵培养基，采用气升式半连续发酵工艺，对发酵后的菌体进行乙醇溶液去脂和胶体磨破壁后再酶解等方式，联合生产制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体。其中，所述的高蛋白粉，其粗蛋白含量为85％(w/w)以上；所述的高核酸破壁菌丝体，其核酸含量为20％(w/w)以上，实现了牛排菇的高价值转化和产物附加值最大化的同时，提高了发酵效率和酶解效率。

Description

一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法
技术领域
本发明属于属于食用菌加工领域，具体涉及一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法。
背景技术
食用菌具有极高的营养价值，富含蛋白、多糖和维生素等营养成分，其中蛋白质中氨基酸种类丰富，必需氨基酸占比远超植物蛋白和动物蛋白。此外，其还含有微量元素及其它功能性成分等具有一定药效的生理活性物质，能促进人体新陈代谢和提高免疫力。因此，被人们誉为“保健食品”，越来越受到重视。
牛排菇是一种珍稀食用菌，又称肝脏茸，短柄、褐色伞盖，菇肉质松软，口感比白蘑菇更细嫩鲜美，香味比香菇更加浓郁适口，蛋白含量40％左右，必须氨基酸50％以上，核酸含量约10％，具有极高的营养保健价值。但目前关于牛排菇深加工的文献或者产业几乎没有。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法，包括如下步骤：
(1)将牛排菇菌种涂布在PDA平板培养基上培养获得菌皮，再将菌皮接种于种子培养基中培养获得种子液；
(2)将步骤(1)获得的种子液接种于气升式发酵罐中进行半连续发酵获得发酵液；
(3)将步骤(2)获得的发酵液经固液分离得到的固体部分，经水清洗、乙醇溶液去脂和胶体磨破壁后，获得处理菌液；
(4)将步骤(3)获得的处理菌液经固液分离，得到固相菌体和液相菌液；
(5)将步骤(4)获得的固相菌体制成悬浮液进行酶解后再固液分离获得固相湿菌渣和液相清液；
(6)将步骤(5)获得的液相清液与步骤(4)获得的液相菌液混合后，经微滤处理，微滤透过液进行超滤处理，将超滤透过液进行纳滤处理；
(7)将步骤(6)纳滤处理获得的纳滤浓缩液通过喷干工艺制备得到高蛋白粉，将步骤(6)获得的超滤浓缩液和纳滤透过液混合后经旋蒸浓缩获得旋蒸浓缩液，将旋蒸浓缩液与步骤(5)获得的固相湿菌渣混合采用喷干工艺制备得到高核酸破壁菌丝体。
其中，步骤(1)中，所述的牛排菇菌种为经ARTP诱变选育得到的突变菌株，分类命名为牛排菇Fistulln hepatica，菌株号：GXGD-EF-8-1，已于2022年08月09日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20221254，保藏地址为中国武汉，武汉大学。
具体的，所述的牛排菇GXGD-EF-8-1的ARTP诱变选育的方法已公开在专利202211251730X中。
其中，步骤(1)中，所述的接种，具体为：将边长1cm的菌皮接种于种子培养基。
其中，步骤(2)中，所述的接种，具体为：按5-20％v/v的接种量接种于装有改良发酵培养基的气升式发酵罐中，装液量60-75％v/v。优选的接种量为10％v/v，优选的装液量为70％v/v。
具体的，所述的改良发酵培养基得配方为：豆粕粉8g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁0.4g/L，磷酸1.0g/L，VB1 0.02g/L，玉米液化液50g/L，玉米糖化液20-100g/L，pH 5.8。
其中，步骤(2)中，所述的半连续发酵，其发酵条件为：培养温度25℃，通气量1-1.6vvm，罐压力0.05-0.1Mpa，溶氧控制在10％相对溶氧，即绝对溶氧为0.025mmol/L以上，通过氨水调控pH至5.8，当发酵残糖至1.5-3g/L时，排出部分发酵液，留液比例为10-90％v/v发酵液，并连续流加新的改良发酵培养基至原体积，当发酵残糖再次至1.5-3g/L时，依次重复上述排出和流加操作。优选的留液比例为40-60％v/v，最优选的留液比例为40％v/v。
其中，步骤(3)的具体操作为：将步骤(2)获得的发酵液经第一次固液分离得到的固体部分，经水清洗后进行第二次固液分离得固体部分，置于乙醇溶液中去脂，经水清洗后进行第三次固液分离得固体部分，置于胶体磨破壁后，经水清洗后进行第四次固液分离得液体部分即为处理菌液。
其中，步骤(3)中，所述的乙醇溶液去脂，其去脂条件为：温度50℃、含量40％(v/v)的乙醇溶液中，搅拌2小时进行脱脂。
其中，步骤(3)中，所述的胶体磨破壁，其处理条件为：转速2900r/min，循环处理15分钟。
其中，步骤(5)中，所述的酶解，其酶解条件为：0.2M的盐酸调pH至5.0，升温至52℃，加入20u/g纤维素酶和16u/g果胶酶，搅拌转速450r/min，水解12小时，升温至65℃，加入3000u/g核酸酶P1，水解10小时。
其中，步骤(6)中，所述的微滤，其所用微滤膜膜孔径为0.1-20um，其微滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；所述的超滤，其所用超滤膜膜孔径为2500-8000Da，其超滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；所述的纳滤，其所用纳滤膜膜孔径为500-1000Da，其纳滤条件为：压力0.25MPa，流量20L/h。优选的超滤膜膜孔径为5000Da，纳滤膜膜孔径为1000Da。
其中，步骤(6)中，所述的旋蒸浓缩液，其固形物含量为40％-50％，即400-500g/L。
其中，步骤(6)中，所述的旋蒸浓缩液与固相湿菌渣，其混合比例为5:1。
其中，步骤(6)中，所述的喷干，其设定参数为：进料温度25-30℃，进风温度145-155℃，压力20-25mmHg，入料流量55-60ml/min。
具体的，所述的高蛋白粉的喷干，其设定参数为：进料温度28℃，进风温度145℃，压力22mmHg，入料流量55ml/min。
具体的，所述的高核酸破壁菌丝体的喷干，其设定参数为：进料温度25-30℃，进风温度155℃，压力22mmHg，入料流量60ml/min。
上述方法制备得到的高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体也在本发明所保护的范围之内。
具体的，所述的高蛋白粉，其粗蛋白含量为85％(w/w)以上；所述的高核酸破壁菌丝体，其核酸含量为20％(w/w)以上。
有益效果：
(1)本发明选择诱变后的高产牛排菇作为发酵菌种，以液体发酵技术快速高效获得菌丝体为原料，联合生产制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体，实现了牛排菇的高价值转化和产物附加值最大化。
(2)本发明通过改良发酵培养基配方以豆粕、磷酸为氮磷源，可以有效降低成本，提高了蛋白和核酸含量；通过采用气升式半连续发酵工艺，大幅提升了发酵速率。
(3)本发明通过将乙醇溶液去脂、胶体磨破壁处理后的菌液，经固液分离获得的菌渣再酶解，有利于提高酶解效率。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明，本发明的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。
图1为胶体磨破壁处理过程图。
图2为乙醇溶液去脂+豆浆机破壁处理样品(左侧)和乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理样品(右侧)图。
具体实施方式
下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
下述实施例中，所述的粗蛋白含量采用凯氏定氮法测定，所述的总糖含量采用苯酚硫酸法测定，所述的核酸含量采用定磷法测定，所述的脂肪含量采用国标法GB/T6433-2006测定，所述的灰分含量采用灼烧法测定，所述的水分含量采用水分测定仪测定。
实施例1牛排菇菌株的选育
将出发菌株牛排菇D-15的子实体段用75％v/v酒精消毒后，用无菌水反复浸洗，切除子实体外层组织，在子实体心部切取米粒大小组织接种于改良PDA平板上，于26℃避光培养3-5d后，将生长出的白色菌丝体进行转接分纯，获得纯种牛排菇菌丝体。
将获得的纯种牛排菇菌丝体，按照5-6块/瓶，接入种子液中，26℃、150rpm培养2-3d；然后经振荡过滤收集菌丝体悬液，10000rpm、4℃离心10min后，收集菌丝体，用稳定剂(试剂A与试剂B按照1:1混合制得的稳定剂，其中试剂A：10mM NaH2PO4、0.8M NaCl，pH 6.0，溶剂是水；试剂B：0.6-0.8mol/L的甘露醇，pH 6.0，溶剂是水)冲洗1-2遍，再用酶解液(8000U/mL纤维素酶，400U/mL蜗牛酶，其余为稳定剂)重悬制备菌丝体悬液。
将制备得到的菌丝体悬液，置于30℃，200rpm条件下，酶解3h制备原生质体悬液。调整原生质体悬液浓度到106个/mL，取0.1mL原生质体悬浮液涂布于再生培养基上，观察、计算原生质体的再生率，并将原生质体再生菌株分纯复壮，发现EF-8的生长速度为13.65mm/d，蛋白产量为35.52％，其与出发菌株(D-15)蛋白含量无显著变化。因此将筛选得到的再生菌株EF-8作为下一步诱变的出发菌株。
将筛选得到的再生菌株EF-8制备原生质体悬液，调整原生质体的数量在105-106CFU/mL。取10μL调整后的悬液均匀涂布在灭菌载片表面，液层厚度为0.2-0.4cm，在工作功率100W、工作气流10SLM、照射距离2mm条件下照射120s进行ARTP诱变。待ARTP诱变处理完毕，将带菌载片置于装有生理盐水的EP管中充分混匀，并稀释菌丝体含量至50-100CFU/mL后，涂布于再生培养基上，26℃培养2-3d，待再生培养基上长出单菌落后，以菌落直径、生长速率为依据初筛得到6株突变菌株，分别命名为EF-8-1、EF-8-2、EF-8-3、EF-8-4、EF-8-5、EF-8-6。
将初筛得到的6株突变菌株，分别接种于装有200mL种子液的三角瓶中，于26℃、150rpm条件下培养2-3d，按10％v/v接种量接入二级种子液中摇瓶培养，26℃、150rpm条件下静置发酵3d后，以固渣的湿重、灰分、干重、有机物含量、蛋白含量为指标复筛，选育出了一株突变菌株EF-8-1，其生长速度最快，有机物含量最高且蛋白产量最高。将突变菌株EF-8-1，于2022年08月09日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为牛排菇Fistullnhepatica，菌株号：GXGD-EF-8-1，保藏编号为CCTCC NO:M 20221254。
实施例2：牛排菇GXGD-EF-8-1菌种发酵培养基发酵
将牛排菇GXGD-EF-8-1菌种涂布在PDA平板培养基上生长一周左右的时间，培养温度25℃。然后刮取1块1×1cm的平板菌皮至装有150mL种子培养基的三角瓶中，25℃培养4天，菌体湿重达13.2％(w/v，即132g/L)。培养好的种子液按10％v/v的接种量分别转接到另外装有150mL改良发酵培养基或对照发酵培养基的三角瓶中培养，220r/min，25℃培养2.5天，检测菌体量(称重)、粗蛋白(凯氏定氮法)和核酸含量(定磷法)。
其中，PDA平板培养基配方为：土豆洗净去皮，再称取220g切成小块，加水煮沸25分钟，用6层纱布过滤，加入20g琼脂和10g葡萄糖，继续加热搅拌混匀，定容至1L，PH＝5.8，待溶解后，分装至三角瓶，包扎后121℃灭菌15分钟。冷却至50-60℃在超净台中倒平板冷却备用。
其中，种子培养基配方为：玉米糖化清液(稀释至总糖15-35g/L)，玉米浆20-40g/L，硫酸铵4-8g/L，VB1 0.01-0.05g/L，生物素0.002-0.02g/L，pH5.5-6.8。
其中，改良发酵培养基配方为：豆粕粉8g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁0.4g/L，磷酸1.0g/L，VB1 0.02g/L，玉米液化液50g/L，剩余用玉米糖化液(即折算到配制好的发酵液总糖浓度为25g/L左右)配料，pH 5.8。
其中，对照发酵培养基为专利《一株牛排菇高产菌株及其选育方法》，申请号：202211251730X中所使用的培养基，配方为：玉米粉糖化液120mL/L(即折算到配制好的发酵液总糖浓度为25g/L左右)，玉米浆20g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁0.5g/L，七水合硫酸亚铁0.08g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，VB1 0.02g/L，pH 5.0。
上述发酵培养基和对照发酵培养基中玉米糖化液处理方法：玉米粉(80目筛下物)与水按1:2.5混合，调pH5.5，升温至90℃，加液化酶(规格7万/mL)16u/g(玉米粉质量)，搅拌转速400r/min，保温1.5小时，降温至55℃，此时为玉米液化液。然后调节pH至4.5左右，加糖化酶(规格4万/mL)180u/g，保温6小时。降温至常温，用管式离心机进行固液分离，清液部分则为玉米清液，清液总糖为220g/L左右。
表1牛排菇GXGD-EF-8-1菌种在不同发酵培养基中营养成分表
配方 菌体干重浓度g/L 粗蛋白含量％ 核酸含量％
改良发酵培养基 19.89±0.87 46.27±1.87 11.71±0.68
对照发酵培养基 16.23±0.63 41.82±1.46 10.24±0.29
相对提高水平％ 22.55 10.64 14.36
结果如上表1所述，通过改善配方，发酵后的菌体干重浓度、粗蛋白含量以及核酸含量得到显著提升。
实施例3：牛排菇GXGD-EF-8-1菌种气升式发酵罐发酵
参照实施例2种子培养方法，将牛排菇GXGD-EF-8-1菌种的种子液按10％v/v的接种量转接至装有改良发酵培养基的15L气升式发酵罐中，装液量70％v/v，培养温度25℃，通气量1-1.6vvm，罐压力0.05-0.1Mpa，溶氧控制在10％相对溶氧，即绝对溶氧为0.025mmol/L以上，通过流加氨水调控pH5.8，发酵残糖至1.5-3g/L时，排出部分发酵液，留液比例为10-90％v/v发酵液，并连续流加新的发酵液，每个留液比例重复3批次。结果如下表所示：
表2不同留液比例对各营养组分的影响
留液比％ 粗蛋白含量％ 核酸含量％ 比生长速率g/L/d 糖菌转化率％
90 44.12±2.15 10.73±0.24 13.23±0.34 58.32±2.18
80 43.94±2.26 11.36±0.45 16.78±1.22 65.87±3.25
60 45.51±0.33 12.18±0.37 17.89±0.86 68.76±1.96
40 46.12±1.97 12.39±0.62 16.34±1.07 70.20±2.19
20 46.32±2.53 11.64±0.44 14.15±0.82 70.65±3.23
10 45.17±1.77 11.71±0.58 11.23±0.34 69.24±2.07
从表2可以看出，当留液比例过高时，菌体浓度过大，菌丝体对发酵传质有不利影响；当留液比例过低时，菌体浓度过低，发酵初期菌体生长缓慢，影响整个发酵周期。因此，较优的留液比例范围为40-60％v/v，此时菌体对糖的转化率也较高。
实施例4：不同预处理工艺对菌体破壁的影响
对采用实施例3留液比例40％v/v发酵工艺获得的湿菌体进行预处理，将预处理方式分为3个实验组：(1)乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理；(2)乙醇溶液去脂+豆浆机破壁处理；(3)不用乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理。
具体操作过程如下：通过管式离心机(14000r/min)连续进料，进行第一次固液分离，分离后的湿菌体用4倍的45℃左右的纯水悬浮，搅拌30分钟。若需乙醇溶液去脂，则再次通过同样方式进行第二次固液分离，清洗后的湿菌体，加入到温度为50℃、含量40％(v/v)的乙醇溶液中，搅拌2小时进行脱脂，然后再次以同样离心条件进行第三次固液分离。去脂(或不去脂)后的菌体加水悬浮，通过胶体磨(或豆浆机)进行破壁，胶体磨处理条件：品牌为石家庄奥北电机厂，型号YL-90L2，转速2900r/min，循环处理15分钟。豆浆机处理条件：品牌SUPOR，型号JP03D-800，转速20000r/min，打浆6分钟。再次用管式离心机进行第四次固液分离，固相为未完全破壁的湿菌渣；液相为胞内溶出物，冷藏备用。
表3不同工艺对破壁率影响
实验组 去脂+胶体磨 去脂+豆浆机 不去脂+胶体磨
破壁率％ 42.52±1.48 31.25±0.54 38.63±1.29
菌渣脂肪含量％ 2.45±0.11 3.74±0.16 9.20±0.35
处理过程和效果如图1和图2所示，从图2处理效果和表3可以看出，通过胶体磨预处理菌体，菌液离心后的湿菌体量明显减少，破壁率相比于豆浆机也有明显提升。用乙醇溶液去脂后，对菌体破壁有一定的促进作用。说明，乙醇溶液去脂+胶体磨破壁的预处理工艺对菌体破壁有显著影响。
实施例5：菌体水解与膜过滤
以实施例4中乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理后的菌液为对照组，以实施例4中乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理后菌液经10000r/min离心、菌体加5倍于湿菌体质量的水再悬浮为实验组，分别用0.2M的盐酸调pH至5.0，升温至52℃，加20u/g纤维素酶和16u/g果胶酶(纤维素酶和果胶酶分别购买自诺维信(中国)生物技术有限公司和夏盛(上海)生物科技有限公司)，搅拌转速450r/min，水解12小时，升温至65℃，加入3000u/g同凯生物的核酸酶P1，水解10小时，然后用同样的管式离心机10000r/min进行固液分离。离心得到含水率为89.6％的湿菌渣冷藏备用，获得的清液部分与实施例4乙醇溶液去脂+胶体磨破壁离心后的液相进行混合得到混合液。通过测定菌渣质量，计算菌体水解率，即水解率＝终菌渣质量/初始投加的菌体质量*100％。
结果发现，采用乙醇溶液去脂+胶体磨破壁处理的菌液，再次固液分离后，将湿菌渣制成悬浮液进行酶解，其酶解效果显著提升，菌体水解率为71.25％，而对照组菌体水解率为60.87％，实验组水解率比对照组提高了10个点以上。
将上述实验组的混合液先通过孔径为0.1-20um的微滤膜进行微滤进一步去除杂质。然后将微滤透过液用膜孔径为5000Da超滤膜进行超滤，获得超滤浓缩液和超滤透过液。最后将超滤透过液用膜孔径为1000Da的纳滤膜进行纳滤，收集纳滤浓缩液(固形物含量50％以上，w/v(即500g/L))和纳滤透过液。其中，微滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；超滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；纳滤条件为：压力0.25MPa，流量20L/h。
实施例6：喷干工艺制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体
将实施例5收集的纳滤浓缩液直接入喷雾干燥机进行干燥，设定参数为：进料温度28℃，进风温度145℃，压力22mmHg，入料流量55ml/min，获得高蛋白粉。测得喷干获得的高蛋白粉：粗蛋白含量87.4％，水分7.4％，其他5.2％。
将实施例5中获得的超滤浓缩液和纳滤透过液混合后，通过旋蒸浓缩获得旋蒸浓缩液，其固形物40-50％w/v(即400-500g/L)，加入实施例5得到的含水率为89.6％的湿菌渣20％(w/v，即200g/L)，搅匀后用压力为75Mpa的高压匀浆机进行乳化，乳化液进入喷雾干燥塔喷干。设定参数为：进料温度25-30℃，进风温度155℃，压力22mmHg，入料流量60ml/min，获得高核酸破壁菌丝体。测得加了湿菌渣后喷干获得的高核酸破壁菌丝体：核酸含量24.7％，粗蛋白含量18.2％，总糖含量22.8％，灰分16.5％，水分7.3％，其他10.5％。
本发明提供了一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

Claims (15)

1.一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将牛排菇菌种涂布在PDA平板培养基上培养获得菌皮，再将菌皮接种于种子培养基中培养获得种子液；
(2)将步骤(1)获得的种子液接种于气升式发酵罐中进行半连续发酵获得发酵液；
(3)将步骤(2)获得的发酵液经固液分离得到的固体部分，经水清洗、乙醇溶液去脂和胶体磨破壁后，获得处理菌液；
(4)将步骤(3)获得的处理菌液经固液分离，得到固相菌体和液相菌液；
(5)将步骤(4)获得的固相菌体制成悬浮液进行酶解后再固液分离获得固相湿菌渣和液相清液；
(6)将步骤(5)获得的液相清液与步骤(4)获得的液相菌液混合后，经微滤处理，微滤透过液进行超滤处理，将超滤透过液进行纳滤处理；
(7)将步骤(6)纳滤处理获得的纳滤浓缩液通过喷干工艺制备得到高蛋白粉，将步骤(6)获得的超滤浓缩液和纳滤透过液混合后经旋蒸浓缩获得旋蒸浓缩液，将旋蒸浓缩液与步骤(5)获得的固相湿菌渣混合采用喷干工艺制备得到高核酸破壁菌丝体。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的牛排菇菌种为经ARTP诱变选育得到的突变菌株，分类命名为牛排菇Fistulln hepatica，菌株号：GXGD-EF-8-1，已于2022年08月09日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20221254。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的接种，具体为：将边长1cm的菌皮接种于种子培养基。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的接种，具体为：按5-20％v/v的接种量接种于装有改良发酵培养基的气升式发酵罐中，装液量60-75％v/v；其中，所述的改良发酵培养基，其配方为：豆粕粉8g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁0.4g/L，磷酸1.0g/L，VB10.02g/L，玉米液化液50g/L，玉米糖化液20-100g/L，pH 5.8。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的半连续发酵，其发酵条件为：培养温度25℃，通气量1-1.6vvm，罐压力0.05-0.1Mpa，溶氧控制在10％相对溶氧，即绝对溶氧为0.025mmol/L以上，通过氨水调控pH至5.8，当发酵残糖至1.5-3g/L时，排出部分发酵液，留液比例为10-90％v/v发酵液，并连续流加新的改良发酵培养基至原体积，当发酵残糖再次至1.5-3g/L时，依次重复上述排出和流加操作。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)具体操作为：将步骤(2)获得的发酵液经第一次固液分离得到的固体部分，经水清洗后进行第二次固液分离得固体部分，置于乙醇溶液中去脂，经水清洗后进行第三次固液分离得固体部分，置于胶体磨破壁后，经水清洗后进行第四次固液分离得液体部分即为处理菌液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的乙醇溶液去脂，其去脂条件为：温度50℃、含量40％(v/v)的乙醇溶液中，搅拌2小时进行脱脂。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的胶体磨破壁，其处理条件为：转速2900r/min，循环处理15分钟。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的酶解，其酶解条件为：0.2M的盐酸调pH至5.0，升温至52℃，加入20u/g纤维素酶和16u/g果胶酶，搅拌转速450r/min，水解12小时，升温至65℃，加入3000u/g核酸酶P1，水解10小时。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，所述的微滤，其所用微滤膜膜孔径为0.1-20um，其微滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；所述的超滤，其所用超滤膜膜孔径为2500-8000Da，其超滤条件为：压力0.3MPa，流量50L/h；所述的纳滤，其所用纳滤膜膜孔径为500-1000Da，其纳滤条件为：压力0.25MPa，流量20L/h。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，所述的旋蒸浓缩液，其固形物含量为40％-50％，即400-500g/L。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，所述的旋蒸浓缩液与固相湿菌渣，其混合比例5:1。
13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，所述的喷干，其设定参数为：进料温度25-30℃，进风温度145-155℃，压力20-25mmHg，入料流量55-60ml/min。
14.权利要求1-13中任意一项所述的方法制备得到的高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体。
15.根据权利要求14所述的高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体，其特征在于，所述的高蛋白粉，其粗蛋白含量为85％(w/w)以上；所述的高核酸破壁菌丝体，其核酸含量为20％(w/w)以上。
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