CN115369132A - 一种中长链甘油三酯的酶法合成方法 - Google Patents

一种中长链甘油三酯的酶法合成方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种中长链甘油三酯的酶法合成方法,本发明对所需长链甘油三酯和中链甘油三酯进行降过氧化值处理,维持反应中所用脂肪酶的活性,增加脂肪酶利用次数。具体的,先将富含长链甘油三酯的油脂进行降过氧化值处理;取处理后的富含长链甘油三酯油脂与另一底物A进行混合,在脂肪酶催化下进行反应,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的油脂混合物,其中,所述脂肪酶为具有酯交换活性的脂肪酶;所述底物A包括富含中链脂肪酸的甘油三酯或者游离脂肪酸。本发明提供了一种高效合理、低成本、高产量的酶法合成MLCT的方法,避免了酶利用率低以及连续化生产效率低等的弊端,具有一定发展潜力。

Description

一种中长链甘油三酯的酶法合成方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域,具体涉及到一种中长链甘油三酯的酶法合成方法。
背景技术
中链脂肪酸一般为C6~C12长度的脂肪酸。中长链甘油三酯(Medium and longchain triglycerides,MLCT)是既含有中链脂肪酸也含有长链脂肪酸的甘油三酯,根据中、长链脂肪酸个数的分布,可以将MLCT分为单中链甘油三酯和双中链甘油三酯两种类型,如图1所示。
甘油三酯在人体内的代谢会先经过十二指肠,被胰脂肪酶水解成游离脂肪酸和2-单甘酯,水解得到的中链脂肪酸以及单甘酯继而被转运至肝脏为人体供能;而长链脂肪酸不能经由门静脉运输,会在脂肪酶作用下重新合成甘油三酯,存储于脂肪等组织中。中链脂肪酸能被人体快速消化吸收,而长链脂肪酸中含有人体必需脂肪酸,因此,MLCT同时具有上述两者的优点,但也与两者功能的简单叠加有所不同,MLCT还能有效降低胆固醇和血脂水平。
母乳脂中含有近20%的MLCT,有助于婴幼儿消化吸收,具有特殊的生理功能和营养价值。但目前市售婴幼儿配方奶粉,无论是进口还是国产产品,大多数是由植物油混合调配而来的,少数产品是植物油与牛乳或羊乳复合调配的,其与母乳脂相似的MLCT成分均很少。因此,仅靠添加天然油脂来模拟与母乳脂相似的MLCT是明显不够的,需要合成相应的MLCT加入母乳替代脂中,进一步实现“母乳化”。
MLCT的工业化生产大体分为化学法和酶法合成。化学法生产的MLCT伴随有许多复杂的副产物,且反应条件剧烈,缺少特异性反应,在制备结构脂方面局限性很大。而酶法催化合成具有反应条件温和,特异性强的优点,但酶的造价昂贵,对于大规模的生产而言成本太高。
因此,本领域亟需一种在酶法合成MLCT过程中提高酶利用率的方法,来降低所需成本,提高MLCT产量。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有技术中存在的酶法合成MLCT过程中脂肪酶酶的成本高、利用率低的问题,提出了本发明。
本发明的其中一个目的是提供一种中长链甘油三酯的酶法合成方法,通过将原料富含长链甘油三酯的油脂进行降过氧化值处理,能够有效的增加酶的重复利用率,并保证一定产量,克服了MLCT工业化生产中脂肪酶成本高、利用率低的弊端。
为解决上述技术问题,本发明提供了如下技术方案:一种中长链甘油三酯的酶法合成方法,包括,
原料处理:将富含长链甘油三酯的油脂进行降过氧化值处理;
中长链甘油三酯(MLCT)的合成:取处理后的富含长链甘油三酯油脂与另一底物A进行混合,在脂肪酶催化下进行反应,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的油脂混合物;
其中,所述脂肪酶为具有酯交换活性的脂肪酶;所述底物A包括富含中链脂肪酸的甘油三酯或者富含中链脂肪酸的游离脂肪酸。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:当所述底物A为富含中链脂肪酸的甘油三酯时,需进行降过氧化值处理。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述降过氧化值处理包括蒸馏法和吸附法中的任一种或几种。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述蒸馏法包括脱臭和分子蒸馏中的任一种或几种。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述脱臭方法的反应温度为230~265℃,时间为40min~120min,操作压力小于7mbar。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述分子蒸馏方法的蒸发面温度为235~270℃。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述吸附法使用的吸附剂包括但不限于硅胶、活性白土、活性炭、沸石、二氧化硅、硅藻土和凹凸棒土中的一种或几种,优选硅胶、活性炭。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述吸附法选用的吸附时间为45min以下。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述富含长链甘油三酯的油脂来源于天然油脂,包括但不限于大豆油、葵花籽油、鱼油、牡丹籽油、亚麻籽油、花生油、棕榈油、油茶籽油和菜籽油中的任一种或几种。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述富含长链甘油三酯的油脂是各天然油脂的毛油并经过脱胶处理。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:当底物A为富含中链脂肪酸的甘油三酯时,所述富含长链甘油三酯油脂与底物A质量比为1:(0.5~2);当底物A为富含中链脂肪酸的游离脂肪酸时,所述富含长链甘油三酯油脂与底物A质量比为1:(5~8)。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述富含中链脂肪酸的甘油三酯来源于天然油脂或者人工合成的油脂。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述富含中链脂肪酸的甘油三酯的天然油脂包括但不限于山苍籽油、棕榈仁油、樟树籽油和椰子油中的任一种或几种。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述反应温度为45~80℃。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述反应时间为2~12h。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述S2步骤的酶包括以南极假丝酵母(Candida antarctica)为来源、以米黑根霉菌(Rhizomucormiehei)为来源、以疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)为来源、以葱伯克霍尔德菌(Burkaholderia cepacia)为来源、以米根霉(Rhizopus oryzae)为来源中的任一种或几种。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述酶包括来源于南极假丝酵母(Candida antarctica)的Lipase CL“Amano”IM、Novozym 435和Lipozyme 435、来源于米黑根霉菌(Rhizomucor miehei)的Lipozyme RM IM和LipozymeRM、来源于疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)的Lipozyme TL IM、LipozymeTL 100L、来源于洋葱伯克霍尔德菌(Burkaholderia cepacia)的Lipase PS、来源于米根霉(Rhizopus oryzae)的Lipase DF“Amano”IM和Lipase DF“Amano”。
作为本发明中长链甘油三酯的酶法合成方法的一种优选方案,其中:所述酶的加入量为2~14%,优选为7~12%。
本发明的另一个目的是提供上述方法在制备配方奶粉、结构脂领域的应用。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明对酶法合成MLCT所需的原料进行降过氧化值处理,不仅能很好的保留反应过程中脂肪酶的活性,有效增加酶的重复利用率,还能保证一定产量,克服了MLCT工业化生产中脂肪酶成本高、利用率低的弊端。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其它的附图。其中:
图1为两种MLCT类型。
图2为实施例3中脂肪酶在未经处理的原料中使用5次得到的MLCT液相色谱图(蒸发光检测器)。
图3为实施例3中脂肪酶在经脱臭处理的原料中使用5次得到的MLCT液相色谱图(蒸发光检测器)。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次,此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例,也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
1.MLCT检测方法及参数:
RP-HPLC-ELSD方法检测MLCT。
RP-HPLC检测参数:20mg油样完全溶解于2mL色谱纯正己烷,过0.22μm有机滤膜,制得浓度约为10mg/mL样品溶液。采用C18色谱柱为HederaODS-2C18(250mm×4.6mm×5μm),柱温30℃,进样量10μL。流动相A(乙腈),流动性B(异丙醇/正己烷=1:1,v/v),流速1.0mL/min,梯度洗脱程序为(min/A%)0/90,20/70,24/55,35/60,40/70,50/90。
ELSD检测器条件:流速1.8mL/min,漂移管温度55℃,增益1。采用面积归一化法定量。
2.MLCT含量的计算:参考文献(陆继源.酶法酯交换合成中长碳链结构甘三酯[D].江南大学,2017.)的方法计算MLCT含量。
甘油酯定量分析:MLCT结构脂包含MLM,LMM,LLM和LML四种构型甘三酯,在液相图中将所有MLCT甘三酯的峰面积占比相加,即为产物中MLCT的含量。
Figure BDA0003859044630000051
3.过氧化值分析方法:参照《GB5009.227-2016食品安全国家标准食品中过氧化值的测定》的方法测定过氧化值。
4.TAG检测方法及参数:通过HPLC-RID方法检测TAG含量。
HPLC-RID检测参数:参考Wang 等(Wang W F,Li,T,Qin,X L,et al.Productionof lipase SMG1 and its application in synthesizing diacylglyecrol[J].Journalof Molecular Catalysis B-Enzymatic,2012,77(6):87-91.)的方法,利用HPLC-RID对反应后体系中的脂质成分进行定量分析。色谱条件为:色谱柱Sepax HP-Silica(4.6mm×250mm×5μm),柱温30℃;样品浓度为10mg/mL,进样量为15μL;流动相正己烷:异丙醇:甲酸之比为15:1:0.03(v/v/v),流速为1mL/min。各脂质组分通过标准品定性,样品浓度与峰面积呈线性关系,各物质的相对组成通过面积归一法表示(%)。
5.反式脂肪酸检测方法:参照《NY/T 2005-2011动植物油脂中反式脂肪酸含量的测定气相色谱法》。
实施例1
原料油的获取
大豆油:从油脂工厂浸出车间获得浸出大豆毛油,并进行脱胶处理,脱胶处理步骤是:先将毛油泵入水化罐内,预热到80℃,然后加入普通热水,开始加水时,以间接蒸汽缓慢升温,搅拌速度为65转/分,加水量为胶质含量的3.5倍。停止加水时,关闭加热蒸汽,并将搅拌速度降到20转/分,使胶粒在慢速搅拌下絮凝,完成水化过程。静置沉降,分离油脚,上层澄清油由管道输送至真空脱水罐进行脱水处理,油脚由罐底截门排出。
菜籽油:从油脂工厂压榨车间获得压榨菜籽毛油,并进行脱胶处理,与大豆油的脱胶处理方法相同。
油茶籽油:从油脂工厂压榨车间获得油茶籽毛油,并进行脱胶处理,与大豆油的脱胶处理方法相同。
鱼油:从巴沙鱼肉中提出巴沙鱼油,鱼油提取方法参照黄磊等(黄磊,邹孝强,郑莉等.淡水鱼油性质测定及其在人乳替代脂市场的应用研究[J].中国油脂,2018,43(1):131-135.),并进行脱胶处理,脱胶处理步骤是:将毛油泵入水化罐内,向换热装置通入冷水冷却油脂,并配合中速搅拌,使胶质均匀分布在油中。待油温降到20℃左右时,搅拌速度调至65转/分,按毛油胶质含量0.5倍的量加入同油温的水进行水化,在8分钟内将添加的水均匀淋入油中,搅拌25分钟,然后停止搅拌,静置沉降12小时,分离水化净油和油脚,上层水化净油转入真空脱水罐脱水。
各原料油的物化性质如表1所示。
表1
Figure BDA0003859044630000061
Figure BDA0003859044630000071
实施例2
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的脱胶大豆油分别采用分子蒸馏、脱臭、吸附进行降过氧化值处理,分子蒸馏处理是采用安研AYAN-F80玻璃分子蒸馏仪进行,脱臭处理是采用郑州四维YDXT40组合式脱臭塔进行,吸附处理是向原料油中直接添加吸附剂;具体的工艺条件参见表2;未进行降过氧化值处理则作为对照组。
(2)MLCT合成:取步骤(1)的大豆油与樟树籽油(质量比1:1)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中,重复使用8次后检测并计算MLCT含量。
探究不同的降过氧化值处理方法对酶重复利用效果的影响:酶均使用8次,得到的粗产物MLCT含量见表2。
表2
Figure BDA0003859044630000072
Figure BDA0003859044630000081
Figure BDA0003859044630000091
由表2中数据可以看出,经过不同的降过氧化值处理,大豆油的过氧化值均有大幅下降。此外,经过不同处理方式处理后的大豆油被用于酶法合成MLCT,体系所用的酶共回收使用8次,对比酶使用第1次和使用8次后MLCT含量的变化。大豆油经过分子蒸馏、脱臭或吸附处理后,体系里的酶在使用第1次和使用8次后得到的MLCT含量均比对照组的高。其中,分子蒸馏最佳条件为250℃,6mbar;脱臭最佳条件为4mbar,90min,250℃;吸附最佳条件为室温,添加2%活性炭。
实施例3
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与樟树籽油(质量比1:1)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candidaantarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中,使用5次后检测并计算MLCT含量。
探究原料经或不经脱臭处理对脂肪酶重复利用效果的影响:脂肪酶使用5次后,粗产物MLCT含量见表3。
表3
脂质含量 原料未处理(图2) 原料经脱臭处理(图3)
MLCT含量 58.53% 69.74%
如图2~3所示,图2为实施例3原料未经处理的脂肪酶使用5次后得到的MLCT液相色谱图,图3为实施例3原料经脱臭处理的脂肪酶使用5次后得到的MLCT液相色谱图,数据见表2。由此可见,原料经处理的脂肪酶合成的MLCT含量高于原料不经处理的脂肪酶合成的MLCT含量约10%,说明原料的过氧化值降的越低,酶活性维持越久,可增加合成MLCT的次数,在实际工业化生产中能有效提高脂肪酶的利用率。
实施例4
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的不同的富含长链甘油三酯的脱胶油脂进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理,处理前后各原料的过氧化值见表4。
(2)MLCT合成:取不同的富含长链甘油三酯的油脂与樟树籽油(质量比1:1)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中。
探究不同的富含长链甘油三酯的油脂酶法合成MLCT的含量差异,见表4。
表4
Figure BDA0003859044630000101
由表4中数据可以看出,本实施例列举的富含长链甘油三酯的油脂在经过脱臭处理后过氧化值均有不同程度的降低。同时,使用脱臭处理过的油脂酶法合成MLCT,得到的MLCT含量高于未经过脱臭处理的对照组。
实施例5
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与不同来源底物A(一定质量比)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中。
探究另一底物A对酶法合成的MLCT含量的影响,见表5。
表5
Figure BDA0003859044630000111
由表5的数据可以看出,另一底物A的添加量也会影响产物中MLCT的含量,根据各底物的组成特性来调整其添加量,例如人工合成的辛癸酸甘油三酯里中链脂肪酸含量比天然癸酸或椰子油中的要高,因此添加量可以适当的减少。
实施例6
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与癸酸(一定质量比)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candidaantarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,去除多余的游离脂肪酸,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中(使用8次)。
探究大豆油与癸酸的质量比对粗产物MLCT含量的影响,见表6。
表6
Figure BDA0003859044630000112
Figure BDA0003859044630000121
由表6中数据可以看出,经过脱臭处理后的大豆油与癸酸的质量比在1:5左右时,反应得到的MLCT含量较高,且在酶使用8次后也能保持不错的MLCT含量。
实施例7
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与辛癸酸甘油三酯(一定质量比)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中。
探究大豆油与辛癸酸甘油三酯的质量比对粗产物MLCT含量的影响,见表7。
表7
Figure BDA0003859044630000122
由表7中数据可以看出,经过脱臭处理后的大豆油与辛癸酸甘油三酯的质量比在1:0.7左右时,反应得到的MLCT含量较高。
实施例8
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与辛癸酸甘油三酯(质量比1:0.7)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的不同种脂肪酶,在70℃下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中。
探究不同的脂肪酶对粗产物MLCT含量的影响,见表8。
表8
Figure BDA0003859044630000131
由表8中数据可以看出,酶法合成MLCT的体系选用不同的脂肪酶会有不同的结果,当反应体系由Lipozyme435酶催化时得到的MLCT含量较高,有73.47%。
实施例9
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与辛癸酸甘油三酯(质量比1:0.7)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在70℃下反应一定时间,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中(使用8次)。
探究不同的反应时间对粗产物MLCT含量的影响,见表9。
表9
Figure BDA0003859044630000132
由表9中数据可以看出,在脱臭处理过的大豆油和辛癸酸甘油三酯酶法合成MLCT的体系中,不同的反应时间会得到不同的MLCT含量。在反应时间为6h时,MLCT含量可观,且酶使用8次后MLCT含量依旧较高。
实施例10
(1)降过氧化值处理:对实施例1提供的大豆油进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。
(2)MLCT合成:取大豆油与辛癸酸甘油三酯(质量比1:0.7)于50ml间歇式夹层酶反应器中混合,在无溶剂体系下加入体系质量8%的Lipozyme 435脂肪酶(以南极假丝酵母Candida antarctica为来源),在一定温度下反应6h,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的产物,使用RP-HPLC-ELSD检测并计算MLCT含量。将回收的脂肪酶加入下一次MLCT的合成反应中。
探究不同的反应温度对粗产物MLCT含量的影响,见表10。
表10
Figure BDA0003859044630000141
由表10中数据可以看出,在脱臭处理过的大豆油和辛癸酸甘油三酯酶法合成MLCT的体系中,不同的反应温度会得到不同的MLCT含量。在反应温度为70℃时,MLCT含量较高。
对比例1
实施例6使用的大豆油原料是经过脱臭降过氧化值处理的,对比例1使用的大豆油原料不做任何降过氧化值处理,其余条件与实施例6一致,脂肪酶均为第8次使用。
探究对比例1条件下大豆油与癸酸的质量比对粗产物MLCT含量的影响,见表11。
表11
Figure BDA0003859044630000142
对比例2
实施例9使用的大豆油原料是经过脱臭降过氧化值处理的,对比例2使用的大豆油原料不做任何降过氧化值处理,其余条件与实施例9一致,脂肪酶均为第8次使用。
探究对比例2条件下不同反应时间对粗产物MLCT含量的影响,见表12。
表12
Figure BDA0003859044630000143
Figure BDA0003859044630000151
由对比例1与实施例6、对比例2和实施例9两组对比可以看出,在非最佳反应条件下,同一种脂肪酶在降过氧化值处理的原料中使用8次后得到的MLCT含量仍然大于在未处理的原料中使用8次后得到的MLCT含量。
对比例3
实施例4使用的原料油是脱胶处理过的,对比例3使用的是未脱胶的原料油,均进行脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。脱臭处理后用于合成MLCT,合成条件与实施例4一致。
未脱胶原料油经过脱臭处理前后过氧化值和MLCT含量的变化见表13。
表13
Figure BDA0003859044630000152
从表13中可以看出,未经脱胶的油脂在经过脱臭处理后过氧化值还有升高的趋势,脱臭处理没有提高酶催化效率的效果。
对比例4
对比例4使用的是未脱胶的原料油,均进行吸附(添加2%活性炭,室温)处理。吸附处理后用于合成MLCT,合成条件与实施例4一致。
未脱胶原料油经过吸附处理前后过氧化值和MLCT含量的变化见表14。
表14
Figure BDA0003859044630000153
Figure BDA0003859044630000161
从表14中可以看出,未经脱胶的油脂在经过吸附处理后过氧化值有升高的趋势,吸附处理并没有提高酶催化效率的效果。
对比例5
(1)对比例5使用的是实施例1提供的大豆油,也对其进行了脱臭处理。不同点在于,对比例5的脱臭温度高于实施例2中的脱臭温度,考察温度对大豆油品质的影响。MLCT合成条件与实施例2相同。
(2)大豆油经过脱臭处理后,采用HPLC-RID检测大豆油中甘油三酯(TAG)含量;再用气相色谱仪测定反式脂肪酸含量。
表15
Figure BDA0003859044630000162
从表15中可以看出,对比例5选用的脱臭温度均高于实施例2中的脱臭温度,并且随着温度升高,大豆油得率逐步减少,反式脂肪酸含量增加。
对比例6
对实施例1中脱胶后的巴沙鱼油分别进行吸附(2%活性炭,室温)处理和脱臭(250℃,4mbar,90min)处理。将处理后的巴沙鱼油分别与樟树籽油合成MLCT,合成条件与实施例4相同。
表16
Figure BDA0003859044630000163
Figure BDA0003859044630000171
从表16中可以看出,巴沙鱼油采用脱臭处理,过氧化值反而升高,并没有提高酶催化效率的效果。
应说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (10)

1.一种中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:包括,
原料处理:将富含长链甘油三酯的油脂进行降过氧化值处理;
中长链甘油三酯MLCT的合成:取处理后的富含长链甘油三酯油脂与另一底物A进行混合,在脂肪酶催化下进行反应,反应结束后回收脂肪酶,得到富含MLCT的油脂混合物;
其中,所述脂肪酶为具有酯交换活性的脂肪酶;所述底物A包括富含中链脂肪酸的甘油三酯或者富含中链脂肪酸的游离脂肪酸。
2.如权利要求1所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述降过氧化值处理包括蒸馏法和吸附法中的任一种或几种。
3.如权利要求2所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述蒸馏法包括脱臭和分子蒸馏中的任一种或几种;
其中,所述脱臭方法的反应温度为230~265℃,时间为40min~120min,操作压力小于7mbar;所述分子蒸馏方法的蒸发面温度为235~270℃。
4.如权利要求2或3所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述吸附法使用的吸附剂包括硅胶、活性白土、活性炭、沸石、二氧化硅、硅藻土和凹凸棒土中的一种或几种。
5.如权利要求4所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述吸附法选用的吸附时间为45min以下。
6.如权利要求1~3、5中任一项所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述富含长链甘油三酯的油脂来源于天然油脂,包括大豆油、葵花籽油、花生油、鱼油、牡丹籽油、亚麻籽油、棕榈油、油茶籽油和菜籽油中的任一种或几种。
7.如权利要求6所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:当底物A为富含中链脂肪酸的甘油三酯时,所述富含长链甘油三酯油脂与底物A质量比为1:(0.5~2);
当底物A为富含中链脂肪酸的游离脂肪酸时,所述富含长链甘油三酯油脂与底物A质量比为1:(5~8)。
8.如权利要求1~3、5、7中任一项所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述富含中链脂肪酸的甘油三酯来源于天然油脂或者人工合成的油脂;
其中,所述天然油脂包括山苍籽油、棕榈仁油、樟树籽油和椰子油中的任一种或几种。
9.如权利要求1~3、5、7中任一项所述的中长链甘油三酯的酶法合成方法,其特征在于:所述在脂肪酶催化下进行反应,反应温度为45~80℃,反应时间为2~12h。
10.权利要求1~9任一项所述的制备方法在制备结构脂领域中的应用。
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