CN115154501B - 用于口腔修护的组合物及制备的凝胶制剂和应用 - Google Patents

Abstract

用于口腔修护的组合物及制备的凝胶制剂和应用。所述组合物包含有以下活性成分：三七提取物、美洲大蠊提取物以及厚朴提取物。制备的凝胶制剂，包含有所述药物组合物及凝胶粘附剂和添加剂；所述凝胶粘附剂包括以下质量份数的组分：低分子量透明质酸钠0.02‑1份，高分子量透明质酸钠0.02‑1份，银耳提取物0.06‑1份。本发明的凝胶制剂用于制备牙膏产品、治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的产品、牙周止血的产品以及抑制口腔有害菌的产品，具有抑制口腔有害菌、抗炎止血、组织修复等功效，在口腔粘膜组织炎症及溃疡预防和修复方面具有良好的效果。

Description

用于口腔修护的组合物及制备的凝胶制剂和应用

技术领域

本发明涉及口腔护理技术领域，具体涉及用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物及其凝胶制剂的制备和应用。

背景技术

根据居民口腔健康状况，口腔健康流行病学调查报告显示：35-44岁年龄组牙龈出血检出率为 87.4% ，粘膜异常检出率约4.2% ；55-64岁年龄组牙龈出血的检出率为88.4%，粘膜异常检出率约6.8%。65-74岁年龄组牙龈出血的检出率为 82.6%，粘膜异常检出率约6.8%。牙龈出血检出率均高于80%，上述数据说明口腔粘膜和牙龈护理仍是口腔健康护理中必须加以高度重视的关键环节。

牙龈出血是牙龈炎的主要症状之一，引发牙龈出血的因素主要包括以下两种：（1）局部因素：牙菌斑的聚集、结石沉积、食物嵌塞等外界的刺激下，引发局部炎症，导致轻触牙龈而出血，局部组织过敏。（2）全身因素：免疫功能低下，牙周组织表现为对局部致病因子抵抗力下降，感染机会增高，破坏加重、加速，引发局部自发出血，此时多是身体疾病导致，需要到专业的医院进行治疗。针对局部因素引起的牙龈炎，目前主流是牙菌斑学说，即随着牙齿表面菌斑的加厚，为厌氧菌生长创造了条件，革兰氏阳性菌让位革兰氏阴性菌，龈下的环境有利菌斑中革兰氏阴性厌氧菌及螺旋体等的繁殖，而后者是致病菌，对软组织( 如牙龈)有诱发炎症的毒性，致使牙龈上皮角化层消失、形成溃疡, 龈组织水肿, 血管增生充血,通透性增加, 以致破裂出血。因此抑制菌斑形成可以预防、降低牙龈炎的发生。牙龈炎如果不及时护理、治疗，任其发展会导致口臭的现象，影响社交，严重的还会导致牙周炎，牙齿松动，有的甚至牙齿会脱落，使牙齿丧失咀嚼的能力。牙龈炎久治不愈，还会导致心脏病，中风，胃溃疡等其它全身疾病的发生。因此，预防、减轻牙龈炎对维护牙齿健康、身体健康都有重要意义。

目前有关抑菌类口腔护理的产品报道较多，例如中国专利CN112569154A公开的一种植物抑菌口腔护理用品，通过中药组合物（牡丹皮提取物、两面针提取物、甘草提取物、葛根提取物、金银花提取物、断血流提取物、三七提取物和升麻提取物）来达到抑菌的目的，该组合对口腔抑菌效果好，但未看到对牙龈炎各指标是否有改善。中国专利CN114028327A公开了一种含依克多因和氯化锶口腔用中药抑菌凝胶及其制备、使用方法，通过添加黄芩苷提取物、金银花提取物、三七提取物、依克多因和氯化锶来实现抑菌抗炎的目的，但该产品的使用方式是“在常规牙周治疗术后将该抑菌凝胶涂膜注入牙龈沟治疗区的牙周袋内”，其使用需要专业医生操作，不便于患者自行操作，因而限制了其日常使用。

目前用于口腔粘膜护理的产品较少，市面较多的口腔护理产品，如牙膏、漱口水类产品大部分功能以清洁为主，部分具有清洁+护理功能的产品，由于其产品的使用方式为非滞留型，致使产品中的护理成分（活性成分）与护理部位接触、滞留时间有限，不能很好发挥其作用。如中国专利CN105476947A公开的含有美洲大蠊的牙膏，其预防口腔溃疡和牙龈出血的功效有限，并且抑菌功能较差。中国专利CN108578336A公开的含有美洲大蠊提取物的含漱液不仅修复口腔溃疡、清洁口腔的功效有限，且止血消炎功能较差。

综上所述，亟待研发一种具有抗菌消炎愈伤，且能延长其作用时间的组合物及制剂，以便更好地应用于牙龈等口腔粘膜护理，预防、减轻牙龈炎症。

发明内容

本发明目的是解决上述现有技术存在的不足，提供一种用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物、凝胶制剂及应用。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

用于口腔修护的组合物，所述组合物包含有以下活性成分：三七提取物、美洲大蠊提取物以及厚朴提取物；各成分的质量份数为三七提取物0.1-1份、美洲大蠊提取物0.1-2份、厚朴提取物0.2-1份。

本发明所述用于口腔修护的组合物制备的凝胶制剂，包含有所述组合物及凝胶粘附剂和添加剂；所述凝胶粘附剂包括以下质量份数的组分：低分子量透明质酸钠0.02-1份，高分子量透明质酸钠0.02-1份，银耳提取物0.06-1份。

进一步地，所述添加剂为增稠剂、甘油、山梨糖醇、pH调节剂、甜味剂、乳化剂、防腐剂或香精中的一种或几种。

进一步地，所述增稠剂选自黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶或卡波姆中的一种或几种；所述甜味剂为木糖醇、赤藓糖醇、甘露醇中的一种或几种；所述乳化剂为单，双甘油脂肪酸酯和/或PEG-40氢化蓖麻油；所述防腐剂为苯甲酸钠和/或山梨酸钾。

制备本发明所述凝胶制剂的方法如下：

（1）将低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物、增稠剂、甘油混合均匀，得到混合物A。低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠和银耳提取物组合，可以使得制备的制剂产品具有较好的粘附性能和稳定性，且易于涂抹和安全无毒，且涂抹后能延长药物滞留时间，用于口腔护理可有效延长护理成分的作用时间，以达到对牙龈及口腔粘膜更好的修护；

（2）向所述混合物A中加入山梨糖醇、去离子水，搅拌混合均匀，得到混合物B；

（3）向所述混合物B中加入pH调节剂、甜味剂、防腐剂、三七提取物、美洲大蠊提取物、香精，混合均匀，得到混合物C；

（4）向所述混合物C中加入乳化剂和厚朴提取物，混合均匀，获得凝胶状制剂。

本发明所述组合物应用于制备口腔护理产品，所述口腔护理产品为牙膏、牙粉、漱口水中的一种。

所述组合物还应用于制备治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的产品。

所述组合物还应用于制备牙周止血的产品。

所述组合物还应用于制备抑制口腔有害菌的产品，所述有害菌为牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌。

本发明所述凝胶制剂应用于制备口腔护理产品，所述口腔护理产品为牙膏、牙粉、漱口水中的一种。

所述凝胶制剂还应用于制备治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的产品。

所述凝胶制剂还应用于制备牙周止血的产品。

所述凝胶制剂还应用于制备抑制口腔有害菌的产品，所述有害菌为牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌。

本发明具有如下优点：

本发明提供的组合物，其活性成分包括三七提取物、美洲大蠊提取物、厚朴提取物，三七提取物主要起到止血消炎的作用，美洲大蠊提取物起到较好的修复作用，可提高牙龈细胞和粘膜细胞免疫力，厚朴提取物可以有效抑制口腔有害菌。

三七提取物、美洲大蠊提取物、厚朴提取物在发挥各自药效的时候均有最低的起效量，过低添加不能起效，而过高添加，不仅药效不随着添加量成正比，同时添加过多还会给体系造成负担，并导致浪费和成本增加。试验证明，本发明的组合物具有抑制口腔有害菌、抗炎止血、组织修复特点，在口腔粘膜组织炎症及溃疡预防和修复方面具有较好的效果。

本发明利用透明质酸钠和银耳提取物等大分子多糖进行组合提升产品粘附性能，制备得到凝胶状制剂，使其易于涂抹，易于粘附，可以有效延长药物在使用部位的滞留时间。本发明的凝胶制剂用于制备牙膏产品、治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的产品、牙周止血的产品以及抑制口腔有害菌的产品，具有抑制口腔有害菌、抗炎止血、组织修复等功效，在口腔粘膜组织炎症及溃疡预防和修复方面具有良好的效果。

附图说明

图1为本发明实施例5的低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物混合调配的凝胶粘附剂对大鼠牙龈炎模型牙龈上皮组织中促炎因子表达水平的影响；

图2为本发明实施例7提供的抗菌消炎愈伤凝胶制剂对牙龈炎大鼠牙龈组织病理学的影响，HE 染色；

图3为本发明实施例5和实施例6的低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物混合调配的凝胶粘附剂在口腔粘膜上的粘附百分率；

图4为实施例7的凝胶制剂对三株有害菌的抑制率。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明的内容及现有技术中的技术方案，下面结合附图和实施例对本发明做进一步的阐述。显而易见地，所述实施例仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据实施例提供的信息引伸获得其它的实施方案，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，这些实施方案均应属于本发明的保护范围。

实施例 1、用于口腔修护的组合物

本实施例提供可用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物，其包含以下质量份数的成分：三七提取物0.5份、美洲大蠊提取物2份、厚朴提取物0.3份。

其中，三七提取物的制备方法如下：

将符合药典标准的三七与3-5倍三七重量的60％乙醇混合，于70℃加热回流提取，提取液减压浓缩得到浓缩液；将浓缩液以大孔吸附树脂为吸附剂，进行柱层析，先用水洗脱，再用60％乙醇洗脱有效成分，以大孔吸附树脂去除杂质，将有效成分溶液减压浓缩，喷雾干燥，得干燥粉末，即为三七提取物。

美洲大蠊提取物的制备方法如下：

将美洲大蠊干燥虫体粉碎成粉末，用虫体重量10倍量的60％乙醇浸泡3-4小时进行提取，提取液过滤，同样步骤再提取3次，合并滤液，回收乙醇后得粗浸膏；向粗浸膏中加入5-8倍体积量的水，加热搅拌使之充分混合均匀后，冷却至室温，用油水分离器进行离心分离，将水相经过滤器过滤，将过滤液减压浓缩，得到美洲大蠊提取物。

厚朴提取物的制备方法如下：

取厚朴药材粗粉碎，加4~6倍量60%乙醇回流提取3次，提取液减压浓缩后，加柱层析硅胶拌匀并干燥成粉末，用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯溶液，减压浓缩得到浸膏，浸膏用60%乙醇溶解，经聚酰胺柱吸附，纯水洗至无醇，用0.4%~0.8%的NaOH溶液洗脱，收集洗脱液，加1%盐酸溶液调节pH 7，抽滤，水洗，滤饼用环己烷重结晶，得到厚朴提取物。

实施例 2、用于口腔修护的组合物

本实施例提供用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物，其包含以下质量份数的成分：三七提取物0.4份、美洲大蠊提取物1份、厚朴提取物0.5份。

本实施例中，三七提取物、美洲大蠊提取物、厚朴提取物的制备方法与实施例1中制备方法相同。

实施例3、用于口腔修护的组合物

本实施例提供用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物，其包含以下质量份数的成分：三七提取物0.1份、美洲大蠊提取物0.5份、厚朴提取物0.2份。

三七提取物、美洲大蠊提取物、厚朴提取物的制备方法与实施例1中制备方法相同。

实施例4、用于口腔修护的组合物

本实施例提供用于口腔抗菌消炎愈伤的组合物，其包含以下质量份数的成分：三七提取物1份、美洲大蠊提取物0.1份、厚朴提取物1份。

三七提取物、美洲大蠊提取物、厚朴提取物的制备方法与实施例1中制备方法相同。

实施例5、用于口腔护理愈伤的凝胶制剂及其制备方法

本实施例提供用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂，其包括以下质量百分含量的成分：甘油10%、山梨糖醇20%、作为pH调节剂的柠檬酸0.05%、木糖醇1%、单，双甘油脂肪酸酯1%、苯甲酸钠0.5%、山梨酸钾0.3%、香精0.5%、低分子量透明质酸钠0.5%、高分子量透明质酸钠0.5%、银耳提取物0.5%、三七提取物0.1%、美洲大蠊提取物 0.4%、厚朴提取物 0.2%、黄原胶1.5%，余量为去离子水。

本实施例的银耳提取物的制备方法如下：

取干燥的银耳子实体粉碎成粉末，用粉末重量8倍量95%的酒精浸泡4小时提取，脱脂，提取液过滤，同样步骤再提取3次，合并滤液，回收乙醇后得粗浸膏。粗浸膏加入30倍沸水提取2h，离心过滤，重复提取3次，合并滤液，减压蒸发浓缩，浓缩液搅拌缓慢加入95%乙醇并进行浓缩至20%，离心收集沉淀再以无水乙醇洗涤后，冷冻干燥即得银耳提取物。

所述低分子量透明质酸钠和高分子量透明质酸钠购自山东华熙福瑞达公司。

所述用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂的制备方法如下：

（1）将低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物、黄原胶、甘油混合均匀，得到A混合物；

（2）向A混合物中加入山梨糖醇搅拌3min，加入去离子水，45℃以下搅拌1 h混合均匀，得到B混合物；

（3）向B混合物中加入柠檬酸、木糖醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、三七提取物、美洲大蠊提取物、香精，搅拌10min，混合均匀，得到C混合物；

（4）向C混合物中加入单,双甘油脂肪酸酯和厚朴提取物，用乳化剂增溶厚朴提取物，慢速搅拌10-20min混合均匀，获得用于抗菌消炎愈伤的凝胶制剂。

实施例6、用于口腔护理愈伤的凝胶制剂及其制备方法

本实施例提供用于抗菌消炎愈伤的凝胶制剂，其包括以下质量百分含量的成分：甘油10%、山梨糖醇20%、柠檬酸0.05%、木糖醇1%、单，双甘油脂肪酸酯1%、苯甲酸钠0.5%、山梨酸钾0.3%、香精0.5%、低分子量透明质酸钠1%、高分子量透明质酸钠0.02%、银耳提取物0.1%、三七提取物0.2%、美洲大蠊提取物 0.1%、厚朴提取物 0.5%、黄原胶1.5%，余量为去离子水。

所述用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂的制备方法如下：

（1）将低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物、黄原胶、甘油混合均匀，得到A混合物；

（2）向A混合物中加入山梨糖醇搅拌5 min，加入去离子水，45℃以下,搅拌1.5 h混合均匀，得到B混合物；

（3）向B混合物中加入柠檬酸、木糖醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、三七提取物、美洲大蠊提取物、香精，搅拌15 min，混合均匀，得到C混合物；

（4）向C混合物中加入单，双甘油脂肪酸酯和厚朴提取物混合物，慢速搅拌15 min混合均匀，获得用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂。

实施例7、用于口腔护理愈伤的凝胶制剂及其制备方法

本实施例提供用于抗菌消炎愈伤的凝胶制剂，其包括以下质量百分含量的成分：甘油10%、山梨糖醇20%、作为pH调节剂的氢氧化钠0.1%、赤藓糖醇1%、PEG-40氢化蓖麻油3%、苯甲酸钠0.5%、山梨酸钾0.3%、香精0.5%、低分子量透明质酸钠0.1%、高分子量透明质酸钠0.2%、银耳提取物0.06%、三七提取物0.1%、美洲大蠊提取物 0.5%、厚朴提取物0.5%、卡波姆1.5%，余量去离子水。

所述用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂的制备方法如下：

（1）将低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物、卡波姆、甘油混合均匀，得到A混合物；

（2）向A混合物中加入山梨糖醇搅拌5 min，加入去离子水，45℃以下搅拌2 h混合均匀，得到B混合物；

（3）向B混合物中加入氢氧化钠、赤藓糖醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、三七提取物、美洲大蠊提取物、香精搅拌20 min，混合均匀，得到C混合物；

（4）向C混合物中加入PEG-40氢化蓖麻油和厚朴提取物混合物，慢速搅拌20 min混合均匀，获得用于口腔抗菌消炎愈伤的凝胶制剂。

实施例8、用于口腔护理愈伤的凝胶制剂

本实施例提供用于抗菌消炎愈伤的凝胶制剂，其包括以下质量百分含量的成分：甘油8%、山梨糖醇15%、氢氧化钠0.15%、甘露醇1.5%、单，双甘油脂肪酸酯3.5%、苯甲酸钠0.3%、山梨酸钾0.3%、香精0.5%、低分子量透明质酸钠0.02%、高分子量透明质酸钠1%、银耳提取物1%、三七提取物0.5%、美洲大蠊提取物 2%、厚朴提取物 1%、瓜尔胶或卡拉胶1.5%，余量去离子水。

下面结合动物试验对本发明提供的组合物级凝胶药用效果进行评价

在下述实验例中，受试药物为本发明实施例1和实施例2提供的组合物，临用前用生理盐水配制成一定浓度的溶液备用。

以下通过验证试验进一步证实本发明的技术效果。

试验例1、抗菌消炎愈伤的组合物对二甲苯所致ICR小鼠耳壳急性炎症反应的影响

雄性小鼠，禁食12小时后称重，挑选体重26～30g合格动物，按体重随机分组，随机均分为4组：空白正常组、模型组（给予刺激造成炎症，模型组的给药是生理盐水）、样品1号给药组（实施例1的组合物），样品2号给药组（实施例2的组合物），每组12只。除正常组小鼠右耳给予50 μl/只生理盐水外，其余各组小鼠右耳在给予50 μl/只二甲苯刺激后，分别于15分钟、30分钟、45分钟耳廓局部给予不同受试品溶液70 μl/只，模型组给予等体积生理盐水，60分钟时颈椎脱臼处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，盲法用打孔器(直径7mm)分别在相同部位打下圆耳片、1/万电子天秤称重。以左右两耳片重量之差作为耳肿胀度。

肿胀抑制率＝（模型组肿胀度－给药组肿胀度）/模型组肿胀度×100％

实验结果用均数±标准差表示，采用SPSS19.0软件One-Way ANOVA分析进行组间差异的显著性检验。结果见表1，样品对二甲苯所致ICR小鼠耳壳急性炎症的影响。

表1．样品对二甲苯所致ICR小鼠耳壳急性炎症的影响

与模型组对照比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

用SPSS等专业统计软件进行假设检验，计算获得P值。

统计学根据显著性检验方法所得到的P 值，一般以P < 0.05 为有统计学差异， P<0.01 为有显著统计学差异，P<0.001为有极其显著的统计学差异。其含义是样本间的差异由抽样误差所致的概率小于0.05 、0.01、0.001。

*表示具有统计学差异，**表示具有显著统计学差异。

由表1可见，在本实验条件下，二甲苯作用1小时后，肉眼可见模型组小鼠右耳红肿、增厚明显；在二甲苯作用1小时期间，间隔三次给药后，与模型组（给予生理盐水）比较，1～2号样品对二甲苯所致小鼠耳壳炎性肿胀均有大于30％的抑制作用，其中样品1的耳壳皮肤急性炎症反应减轻明显、与模型对照组比较有显著统计学差异（P<0.01）。

试验例2、抗菌消炎愈伤的组合物对小鼠断尾出血的止血作用

取雄性ICR种小鼠，挑选体重22～25g合格动物，按体重随机分组，随机均分为3组：空白对照组、样品1号给药组(实施例1)，样品2号给药组(实施例2)，每组11～12只。

以尾部浸泡接触法给药，将小鼠固定于小鼠筒中，尾尖部2cm浸泡于400μl的受试品溶液或生理盐水中，给药时间30分钟，间隔4小时后，重复给药1次。末次给药30分钟后，以利剪在小鼠距尾尖1.5cm处剪断，待血液自然流出时开始计录出血时间，每隔10s用事先已称重的棉球吸取血滴，直至出血自然停止（棉球吸时无血），1/万天平上称量带血棉球重量。按下式计算各组动物出血量：

出血量＝带血棉球重量-初始棉球重量（毫克）

实验结果用均数±标准差表示，采用SPSS19软件One-Way ANOVA分析进行组间差异的显著性检验。结果见表2，不同样品对小鼠断尾的止血作用。

表2．不同样品对小鼠断尾的止血作用

与溶媒对照组比较，*p＜0.05，**P＜0.01。

由表2可见，与空白溶媒对照组比较，样品1、2号的清醒小鼠断尾出血时间均明显缩短（P<0.01），样品1、2号的清醒小鼠断尾出血量均值明显减少（P<0.05）。

试验例3、抗菌消炎愈伤凝胶制剂对家兔口腔溃疡模型的抗口腔溃疡作用

取雄性新西兰家兔，体重 2.0 ~ 2.4 kg ，在乙醚麻醉下，将玻璃管棉球端置于家兔左侧口腔黏膜处，灼烧 30 秒建立实验性家兔口腔溃疡。实验组每次给药时称量凝胶0.1 g/只，将凝胶直接涂抹在动物口腔溃疡局部，模型组不做处理。

具体见表3，凝胶制剂对家兔口腔溃疡愈合时间的影响。

表3．凝胶对家兔口腔溃疡愈合时间的影响（均数±标准差）

与溶媒对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

由表3可见，采用实施例6的凝胶制剂后1～4天期间，凝胶组口腔溃疡面积与模型对照组比较均有明显减小（P<0.05或P<0.01）；口腔溃疡完全愈合时间也明显小于模型对照组（P<0.05或P<0.01）。结果表明凝胶对家兔口腔溃疡具有明显的治疗作用。

试验例4、抗菌消炎愈伤凝胶制剂对大鼠牙龈炎治疗作用

取雄性大鼠，体重 200 ~ 220 g采用钢丝结扎法构建牙龈炎模型。造模后即开始每天给予大鼠 10% 高糖水浸饲料。在实验过程中每天检查大鼠牙齿钢丝结扎状态，确保钢丝无脱落。

建模 2 周后，在牙医指导下，每周动态观测每只大鼠牙龈炎相关指标：牙龈颜色、质地及形态，（2）探诊深度（PD），（3）牙龈指数（GI）挑选牙龈炎模型成功大鼠，解除结扎钢丝，将牙龈炎大鼠随机分为三组：模型对照组、凝胶制剂给药组（实施例7凝胶制剂），同步设置正常对照组，每组14只。每天给药两次，每次量取 0.3 g 凝胶制剂直接涂抹在大鼠牙龈炎病灶处。给药后30分钟内禁食禁水。给药7天后，同前在牙医指导下盲法检查每只大鼠牙龈炎指标。如表4所示，给药1周后各组大鼠牙龈炎指标变化。

表4. 给药 1 周后各组大鼠牙龈炎指标变化 ( X ± s，n = 14)

给药后，与模型组比较:* P < 0.05，** P < 0.01。

抗菌消炎愈伤凝胶制剂对大鼠牙龈组织中促炎因子表达的影响，研究表明 IL-1β、IL-6 等细胞因子是牙龈炎中的重要促炎因子。 由图1可见，与正常对照组比较，牙龈炎模型组大鼠的牙龈上皮组织 中 IL-1β、IL-6 的 mRNA 水平有非常显著升高(P < 0.01)。实施例5的低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物混合调配得到凝胶粘附剂给药一周后，凝胶制剂组大鼠牙龈上皮组织的 IL-1β和 IL-6的基因表达水平与模型组相比均有显著性差异（P < 0.05 或 P < 0.01）

抗菌消炎愈伤凝胶制剂对大鼠牙龈炎病理组织学的影响，末次给药 24 小时后，每组随机抽取 7 只动物，处死取左上颌 M2 磨牙及周围牙龈组织，切片5 μm，常规 HE 染色，TC-S-SR 光学显微镜下检查每只大鼠牙龈组织病理学改变并拍照，结果见图2。抗菌消炎愈伤凝胶制剂组给药组大鼠组织学观察可见牙龈结缔组织水肿明显减轻，中性粒细胞浸润减少，毛细血管数目减少，上皮钉突数目下降、缩短。上述实验结果表明，受试品对牙周炎大鼠，牙周探诊深度、牙龈指数均有良好的改善效果，说明该凝胶对牙周炎的缓解和治疗是有效的。

试验例5、粘附剂组合的生物粘附性作用

对比测定不同粘附剂在粘膜组织上的留存量。

取大鼠口腔粘膜，固定在支撑物玻片上，分别将实施例5、实施例6中的低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物混合调配成凝胶粘附剂，将凝胶粘附剂2g均匀涂抹在大鼠口腔粘膜组织上，将玻片倾斜45°放置，以人工唾液10ml进行淋洗，以输液管淋洗已经涂抹粘附剂组合的粘膜组织，控制流速2ml/min，淋洗液收集于一已知重量的烧杯中，在70℃烘干，称重。

粘膜组织粘附百分率=[M-(G-g-m)]/M*100%；

M-药物重量，

g-空烧杯重，

G-烧杯与烘干后残渣总重，

m- 同体积冲洗液所含固体物质的量。

测定结果见图3。实验结果表明，实施例5和6相比单纯黄原胶会增加在大鼠口腔粘膜组织上的粘附性能。

试验例6、抗菌消炎愈伤凝胶制剂对口腔有害菌的抑制作用

以实施例7制得抗菌消炎愈伤凝胶制剂与体外抑制口腔有害菌（牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌、具核梭杆菌）进行共培养，以水作为对照，获得凝胶制剂对三株有害菌的抑制率如图4所示，分别是87.8%，88.5%，77.6%，参照QB/T 2738-2012 日化产品抗菌抑菌效果的评价方法 ，抑菌率≥50%，证明凝胶制剂对口腔中牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌、具核梭杆菌具有较好的抑制作用。

通过试验证明，本发明提供的口腔修护组合物及其凝胶制剂，可以有效抑制口腔有害菌，预防和改善牙龈炎症、牙周炎症、口腔溃疡。在牙龈炎的初期阶段对病情的发生和发展可以有效进行预防和修复，从而减少和降低牙周病的发病率；同时在抑制口腔溃疡的发生和促进口腔溃疡的愈合方面具有良好的效果。

应用本发明的在口腔修护方面的良好效果，可将本发明所述组合物应用于制备口腔护理产品，如牙膏、牙粉、漱口水等。所述组合物还可应用于制备治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的药品，以及应用于制备牙周止血的药品。所述组合物还可应用于制备抑制口腔有害菌的药品，所述有害菌为牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌。

本发明的凝胶制剂同样可应用于制备牙膏、牙粉、漱口水等口腔护理产品，以及应用于制备治疗口腔溃疡或牙龈炎或牙周炎的药品、制备牙周止血的药品、制备抑制口腔有害菌如牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌等的药品。

Claims (7)

1.一种用于口腔修护的凝胶制剂，其特征在于，所述凝胶制剂包含口腔修护组合物及凝胶粘附剂和添加剂；所述口腔修护组合物由以下质量份数的活性成分组成：三七提取物0.1-1份、美洲大蠊提取物0.1-2份以及厚朴提取物0.2-1份；所述凝胶粘附剂由以下质量份数的组分组成：低分子量透明质酸钠0.02-1份，高分子量透明质酸钠0.02-1份，银耳提取物0.06-1份；

所述三七提取物的制备方法如下：将符合药典标准的三七与3-5倍三七重量的60％乙醇混合，于70℃加热回流提取，提取液减压浓缩得到浓缩液；将浓缩液以大孔吸附树脂为吸附剂，进行柱层析，先用水洗脱，再用60％乙醇洗脱有效成分，以大孔吸附树脂去除杂质，将有效成分溶液减压浓缩，喷雾干燥，得干燥粉末，即为三七提取物；

所述美洲大蠊提取物的制备方法如下：将美洲大蠊干燥虫体粉碎成粉末，用虫体重量10倍量的60％乙醇浸泡3-4小时进行提取，提取液过滤，同样步骤再提取3次，合并滤液，回收乙醇后得粗浸膏；向粗浸膏中加入5-8倍体积量的水，加热搅拌使之充分混合均匀后，冷却至室温，用油水分离器进行离心分离，将水相经过滤器过滤，将过滤液减压浓缩，得到美洲大蠊提取物；

所述厚朴提取物的制备方法如下：取厚朴药材粗粉碎，加4～6倍量60％乙醇回流提取3次，提取液减压浓缩后，加柱层析硅胶拌匀并干燥成粉末，用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯溶液，减压浓缩得到浸膏，浸膏用60％乙醇溶解，经聚酰胺柱吸附，纯水洗至无醇，用0.4％～0.8％的NaOH溶液洗脱，收集洗脱液，加1％盐酸溶液调节pH7，抽滤，水洗，滤饼用环己烷重结晶，得到厚朴提取物；

所述银耳提取物的制备方法如下：取干燥的银耳子实体粉碎成粉末，用粉末重量8倍量95％的酒精浸泡4小时提取，脱脂，提取液过滤，同样步骤再提取3次，合并滤液，回收乙醇后得粗浸膏；粗浸膏加入30倍沸水提取2h，离心过滤，重复提取3次，合并滤液，减压蒸发浓缩，浓缩液搅拌缓慢加入95％乙醇并进行浓缩至20％，离心收集沉淀再以无水乙醇洗涤后，冷冻干燥即得银耳提取物。

2.如权利要求1所述的一种用于口腔修护的凝胶制剂，其特征在于，所述添加剂为增稠剂、甘油、山梨糖醇、pH调节剂、甜味剂、乳化剂、防腐剂或香精中的一种或几种。

3.如权利要求2所述的一种用于口腔修护的凝胶制剂，其特征在于，所述增稠剂选自黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶或卡波姆中的一种或几种；所述甜味剂为木糖醇、赤藓糖醇、甘露醇、糖精钠、三氯蔗糖中的一种或几种；所述乳化剂为单，双甘油脂肪酸酯和/或PEG-40氢化蓖麻油；所述防腐剂为苯甲酸钠和/或山梨酸钾。

4.制备如权利要求1或2或3所述凝胶制剂的方法，其特征在于，方法如下：

(1)将低分子量透明质酸钠、高分子量透明质酸钠、银耳提取物、增稠剂、甘油混合均匀，得到混合物A；

(2)向所述混合物A中加入山梨糖醇、去离子水，搅拌混合均匀，得到混合物B；

(3)向所述混合物B中加入pH调节剂、甜味剂、防腐剂、三七提取物、美洲大蠊提取物、香精，混合均匀，得到混合物C；

(4)向所述混合物C中加入乳化剂和厚朴提取物，混合均匀，获得凝胶状制剂。

5.权利要求1或2或3所述凝胶制剂在制备口腔护理产品中的应用，所述口腔护理产品为牙膏。

6.权利要求1或2或3所述凝胶制剂在制备治疗口腔溃疡或牙龈炎的产品中的应用。

7.权利要求1或2或3所述凝胶制剂在制备抑制口腔有害菌的产品中的应用，所述有害菌为牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌和具核梭杆菌。

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