CN115128189A

CN115128189A - 一种动物毛发样品中β-受体激动剂药物残留检测的处理、确认方法及应用

Info

Publication number: CN115128189A
Application number: CN202210823539.1A
Authority: CN
Inventors: 李文辉; 于寒冰; 方芳; 孙志文
Original assignee: Beijing Agricultural Products Quality And Safety Center
Current assignee: Beijing Agricultural Products Quality And Safety Center
Priority date: 2022-07-14
Filing date: 2022-07-14
Publication date: 2022-09-30

Abstract

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种动物毛发样品中β‑受体激动剂药物残留检测的处理、确认方法及应用，处理方法包括将动物毛发经清洗和干燥磨碎，得到待测样品；将待测样品与盐酸溶液混合后水浴处理，离心后上清液备用；将上清液加入净化管和净化剂中，净化洗脱，过膜后所得溶液为待测溶液。确认检测方法是通过高效液相色谱仪和质谱仪连用技术，实现了18种β‑受体激动剂类药物的定性定量分析检测。动物毛发中兴奋剂类药物代谢活性低、稳定，采集不引起动物伤害，处理方法得当简单，准确度、灵敏度和精密度高，为动物性产品中β‑受体激动剂类药物残留量测定提供高通量检测方法参考依据。

Description

一种动物毛发样品中β-受体激动剂药物残留检测的处理、确认方法及应用

技术领域

本发明涉及食品安全检测领域，具体而言，涉及一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法、确认检测方法及其应用。

背景技术

克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等是最常见的β-受体激动剂类药物，具有促进动物生长、降低脂肪含量、提高瘦肉率的作用，因而常被违规作为生长添加剂被广泛关注,但一受体激动剂在动物体内有一定的残留时间,通过食物链进入人体后会使一些易感人群产生明显的如肌肉震颤、心悸、精神紧张、恶心、头晕等中毒症状，危害人类健康。我国早在1997年明令禁止克伦特罗作饲料添加剂，根据农业农村部250号公告《食品动物禁止使用的药物及其他化合物清单》中已经对克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等β-受体激动剂类药物在可食用动物组织中做出禁用规定。但现实养殖过程中，不法商户受经济利益驱使,在畜禽生产上β-受体激动剂类药物的使用仍然屡禁不止，因此，制定残留检测方法对于保障食品安全具有重要现实意义。

由于兽药残留检测的时滞性，兽药在生物组织中代谢快容易被清除，所以追溯困难，动物毛发是一种易于采集、转运、贮存和提取的样本，采集方法是非破坏性的，不会引起动物的任何伤害和疼痛，多项研究表明动物毛发中可以蓄积多种兽药，包括β-受体激动剂类、激素类、磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类等药物，同时动物毛发中兴奋剂类药物在代谢活性低、稳定，因此动物毛发可作为评价动物性产品中β-受体激动剂类药物残留量的重要参考组织。

关于动物毛发中β-受体激动剂类的检测方法鲜有报道，公告号为CN 103675145 A的中国发明专利，公开了猪毛发中西马特罗残留量的检测方法，然而，这种方法存在以下问题：方法中适用组织和检测药物种类范围有限，方法处理的水解方式易造成药物损失，检测结果准确性不高。公告号为CN 107179358 A的中国发明专利，公开了动物毛发中瘦肉精的残留的检测方法，然而，这种方法存在以下问题：清洗试剂和水解方法不合理，方法中未对灵敏度等参数进行评价，β-受体激动剂类检测限高，灵敏度低，需要进行方法确认分析评价从而避免出现漏检情况。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其目的在于提供一种利用动物毛发无需宰杀动物，实现活体检测β-受体激动剂类药物的方法，动物毛发中兴奋剂类药物代谢活性低、稳定，采集不引起动物伤害，处理方法得当简单，改善现有处理方法操作过程中清洗和水解方式选择不当造成的检测准确性不高的问题。

在本发明另一个方面中，提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法，其目的在于，实现多种β-受体激动剂类药物（克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗）的同时测定，能在短时间内快速准确地完成多种药物的定性定量分析，满足实际检测的时效性要求，准确度、灵敏度和精密度高，为动物性产品中β-受体激动剂类药物残留量测定提供痕量检测方法参考依据。

在本发明另一个方面中，提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法在检测克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗中的应用。

本发明是采用以下技术方案实现的：

在第一方面，本发明提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其包括：

S1将动物毛发样品进行处理和制备，选取、清洗、干燥、研磨，制备待测样品；

S2将待测样品进行提取处理，待测样品与盐酸溶液进行混合，得到混合溶液，水浴水解，离心后上清液备用；

S3将提取后上清液、净化剂加入到净化管中进行混合、离心，得到净化的提取物上清液过滤膜后，得到待测溶液。

其中，净化管为EMR-Lipids净化管，净化剂为GCB，过滤滤膜孔径为0.22 μm。

进一步地，在本申请较佳实施例中，动物毛发为猪、牛和羊的毛发。

进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S1包括：

选取动物毛发样品，取 2 g 加入 50 mL 烧杯中；加入十二烷基磺酸钠溶液，超声清洗，水洗毛发；置于电热干燥箱中烘干；用球磨机将其粉碎至粉末，取试料0.5 g于10 mL离心管内，保存备用；

其中，动物毛发选取脖颈处皮肤的毛发，十二烷基磺酸钠溶液的浓度为0.01g/ml，体积为20 mL ，超声清洗时间为30-60min，优选为30min，电热干燥箱温度为40 -50℃，优选为 40 ℃，称取试样选择精度为0.001g的天平，试样保存温度为-18℃。

进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S2包括：

将待测样品与盐酸溶液混合，涡旋混匀；水浴水解，高速离心，取上清液备用；

其中，所述盐酸溶液浓度为0.1-0.6mol/L，优选为0.1mol/L，盐酸溶液体积为5mL，水浴温度为40-70℃，优选为60℃，水解时间为4h，离心温度为4-6℃，优选为4℃，离心转速为6000-8000 r/min，优选为7000r/min，离心时间为10min。

进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S3包括：

S31将超纯水加入净化管中进行活化处理，得到活化的净化管；

S32将提取物上清液加入活化的净化管与净化剂混合，得到净化混合溶液；

S33将净化混合溶液进行离心处理，得到净化的提取物上清液；

其中，GCB用量为25-50mg，优选为50mg，离心温度为0-8℃，优选为4-6℃，离心速度为7000-10000r/min，优选为8000-9000r/min，离心时间为5-15min，优选为8-10min。

在第二方面，本发明提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法，包括：采用液相色谱-质谱联用法对动物毛发样品进行检测；

其中，按照上述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法处理所述动物毛发样品，将待测溶液注入高效液相色谱-串联质谱仪进行检测，所述液相色谱串联质谱联用法采用多反应监测模式对目标化合物的进行监测，以化合物保留时间、母离子/子离子特征离子对目标药物的碎片离子进行定性和定量分析。

进一步地，在本申请较佳实施例中，液相色谱条件为：

a) 色谱柱：C18柱，柱长 100 mm，内径 2.1 mm，粒径 1.7 μm,或性能相当者;

b) 柱温：40 ℃;

c) 进样量：10 μL;

d) 流动相：A：乙腈,B：0.1%甲酸溶液。

进一步地，在本申请较佳实施例中，质谱条件为：

a) 电离方式：电喷雾电离，正离子模式（ESI+）；

b) 检测方式：多反应监测（MRM）；

c) 电离电压：3.00kv ；源温：150 ℃ ；雾化温度：400 ℃ ；雾化气流速：800L/hr；锥孔气流速：150L/hr。

在第三方面，本发明提供了一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法在β-受体激动剂类药物中至少一种的应用。

进一步地，在本申请较佳实施例中，β-受体激动剂类药物为18种β-受体激动剂类药物的一种或几种。

与现有技术相比，本发明的有益效果包括：

1.本发明中提供的一种动物毛发样品的处理方法，采取动物毛发作为检测样品，使用十二烷基磺酸钠清洗剂可以在保障样品清理彻底的前提下，减少残留；采用酸水解方式，可以使毛发中的药物充分释放进而提高药物检测的准确性和回收率；

2.本发明中样品前处理方法操作简便，无需经过液-液萃取，采用强化除杂质技术，回收率稳定，灵敏度和准确度高，本方法对猪、牛和羊毛发中兴奋剂类药物的检测限为0.5 μg/kg，定量限为 1 μg/kg,在 1 µg/kg～100 µg/kg 添加浓度范围内线性关系良好，大于0.99。

附图说明

图1为本发明的动物毛发样品的处理方法流程图；

图2为实施例1标准溶液中3种β-受体激动剂和内标的离子色谱图；

图3为实施例1猪毛发中添加3种β-受体激动剂和内标的离子色谱图。

具体实施方式

为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行描述。

以下实施例中，所用试剂及仪器包括：

试剂：乙腈（色谱纯）、甲酸（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、十二烷基磺酸钠（分析纯）、盐酸（分析纯）、水为符合GB/T 6682规定的一级水。

溶液配制 :

十二烷基磺酸钠溶液：称取十二烷基磺酸钠 10 g，加水溶解并稀释至 1000 mL，混匀；

0.1 mol/L 盐酸溶液：取盐酸 8.3 mL，加水稀释至 1000 mL，混匀；

0.1%甲酸溶液：取甲酸 1 mL，加水稀释至 1000 mL，混匀。

标准品:

盐酸克仑特罗、盐酸莱克多巴胺、沙丁胺醇，含量均≥98.0 % ，克仑特罗-D9、盐酸莱克多巴胺-D3、沙丁胺醇-D3，含量均≥98.0%。

标准溶液的制备:

标准储备液：取约 10 mg 标准品（精密称定，分别置于 10 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度为 1 mg/mL 的标准储备液，-18℃以下保存，有效期 12个月；

混合标准工作液：吸取混合标准中间液 0.10 mL，置于 10 mL 棕色容量瓶中，用0.1%甲酸溶液溶解并稀释至刻度，配成浓度为 100 ng/mL 混合标准工作液，现配现用。

仪器设备和耗材:

Waters Xevo TQ-S高效液相色谱串联质谱仪; PB602-N电子天平; 氮吹仪;CF16RN高速冷冻离心机; MS 3 basic涡旋混合器水平振荡器; Milli-Q academic超纯水仪; 微量加样器；超声波清洗器；电热干燥箱；球磨机；恒温水浴；EMR-Lipids净化管，石墨化炭黑GCB；溶剂过滤器（孔径 0.22 μm）。

实施例1

本实施例提供一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留的检测和确认方法，具体步骤如下。

1 试料的制备与保存

1.1 样品采集

选取动物脖颈处皮肤毛发，从根部剪断，保存备用。采集毛发的量应不少于 4 g；

1.2 样品制备和保存

取 2 g 毛发加入 50 mL 烧杯中，加入 20 mL 十二烷基磺酸钠溶液，于超声波清洗器上超声清洗 30 min，再用水洗净毛发，置于 40 ℃电热干燥箱中烘干，用球磨机将其粉碎至粉末。取均质的供试毛发样品，作为供试试料；取均质的空白毛发样品，作为空白试料；取均质的空白毛发样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料；置于干燥器中保存。

2 测定步骤。

2.1 提取

取试料0.5 g（精确至0.001g），于10 mL离心管内，依次加入混合内标工作液25 μL、0.1 mol/L盐酸溶液5 mL，涡旋混匀。于60 ℃水浴中水解4 h，7000 r/min离心10 min，取上清液备用。

2.2 净化

向EMR-Lipids净化管中加入5mL超纯水，涡旋10s，弃去水，将全部上清液加至EMR-Lipids净化管中，加入50mgGCB，涡旋1min，得到净的提取物上清液，然后在4℃、9000r/min条件下离心10min，得到净化的上清溶液；过0.22 μm微孔滤膜，得到待测样品溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。

2.3 测定

2.3.1 液相色谱参考条件

色谱柱：C18柱，柱长 100 mm，内径 2.1 mm，粒径 1.7 μm；柱温：40 ℃；进样量：10 μL；流动相：A：0.1%甲酸溶液；B：乙腈，梯度洗脱程序见表 1；

表1 梯度洗脱程序

2.3.2 串联质谱参考条件

质谱条件为：电离方式：电喷雾电离，正离子模式（ESI+）；检测方式：多反应监测（MRM）；电离电压：3.00kv ；源温：150 ；雾化温度：400 ；雾化气流速：800L/hr ；锥孔气流速：150L/hr；定性离子对、定量离子对、锥孔电压及碰撞能量的参考值见表 2；

表 2 定性离子对、定量离子对、锥孔电压及碰撞能量的参考值

2.4标准曲线的制备

精密量取混合标准工作液、混合内标工作液适量，用流动相稀释成浓度为0.10ng/mL、0.50 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL的系列标准工作液（含内标溶液均为5 ng/mL），供液相色谱-串联质谱仪测定。以待测分析物特征离子质量色谱峰的峰面积与内标物特征离子质量色谱峰的峰面积比值为纵坐标，相应的浓度为横坐标，绘制标准曲线；求回归方程和相关系数。可以看出，在0.1～100ng/ml的浓度范围内3种β-受体激动剂类药物色谱峰面积与浓度呈良好线性相关, 且相关系数均大于0.99，具体见表3；

表3 猪毛基质标准曲线线性回归方程及相关系数

名称	线性方程	r2
			克仑特罗	Y=21.0728X+76.9783	0.9974
莱克多巴胺	Y=5.55794X+11.064096	0.9998
			沙丁胺醇	Y=100.7812X+408.6456	0.9996

2.5 测定方法

2.5.1定性测定

通过样品的保留时间与标准品的保留时间、色谱峰的特征离子与相应浓度标准品色谱峰的特征离子进行对比对照定性。样品与标准品的保留时间的相对偏差不大于2.5%；样品特征离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差符合表3的要求，则可判断样品中存在相应的被测物，具体允许偏差范围见表4；

表 4 试样溶液中离子相对丰度的允许偏差范围

相对离子丰度%	>50%	20%～50%	10%～20%	≤10%
					允许的相对偏差%	±20%	±25%	±30%	±50%

2.5.2定量测定

取试样溶液和标准工作液，作单点或多点校准，按内标法定量。标准工作液及试样溶液中目标物的响应值均应在线性范围内。如超出线性范围、应将试样溶液重新稀释至适当的浓度。在上述液相色谱-串联质谱条件下，标准溶液及对应的同位素内标溶液特征离子质量色谱图见附录B。取空白试料，除不添加待测分析物外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。

3结果计算和表述

计算公式： X=

×

............(1)

X-供试试料中兴奋剂类药物残留量，单位为微克每千克（µg/kg）；

A —试样溶液中兴奋剂类药物的峰面积；

As —标准溶液中兴奋剂类药物的峰面积；

Ais —试样溶液中兴奋剂类药物对应内标的峰面积；

A’is—标准溶液中兴奋剂类药物对应内标的峰面积；

Cs —标准溶液中兴奋剂类药物浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；

Cis—试样溶液中兴奋剂类药物内标浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；

C’is—标准溶液中兴奋剂类药物内标浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；

V—最终残余物体积，单位为毫升（mL）；

m —供试试料的质量，单位为克（g）；

注：测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。

4方法的灵敏度、准确度和精密度。

4.1灵敏度

采用空白基质中添加目标化合物的方法, 依据特征离子质量色谱峰信噪比S/N≥3的浓度为方法的检出限, S/N≥10的浓度为方法的定量限,在5g空白试样中添加适量标准混合溶液,制备得到一定浓度的添加样品, 经前处理过程后上机检测, 在相应的保留时间, 空白试样对所测药物无干扰,以考察方法的灵敏度；图2和图3分别为本发明中的标准溶液和猪毛发中添加中3种β-受体激动剂和内标的离子色谱图；

本方法对猪、牛和羊毛发中β-受体激动剂类药物的检测限为0.2 μg/kg，定量限为0.5μg/kg。

4.2准确度和精密度

采用标准添加法,分别准确称取空白样品1 g, 添加一定体积的标准工作溶液,使猪毛中β-受体激动剂类药物浓度分别为50、100和200μg/kg, 按上述样品前处理方法处理后进行测定, 一日内每种药物的每个添加浓度取5个平行样品分别进行测定, 每个添加浓度设6个平行, 重复测定3 d, 内标基质标准曲线法定量，计算回收率和计算批内、批间相对标准偏差（RSD）以考察方法的准确度和精密度；

本方法对于猪毛中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇在 1 µg/kg～100 µg/kg 添加浓度范围内的回收率为 60%～120%。本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。从结果看出β-受体激动剂类药物的添加回收率及相对标准偏差均满足残留检测的相关要求，方法具有良好的稳定性和重现性，表明方法准确度和精密度高，猪毛基质添加回收率和相对标准偏差结果如表5；

表5 猪毛基质添加回收率和相对标准偏差试验结果

实施例1

猪毛发样品的处理过程如下：

S1 将动物毛发样品进行处理和制备，选取动物脖颈处皮肤的毛发，取 2 g 毛发加入 50 mL 烧杯中，加入 20 mL 十二烷基磺酸钠溶液，于超声波清洗器上超声清洗 30min，再用水洗净毛发，置于 40 ℃电热干燥箱中烘干，用球磨机将其粉碎至粉末，置于干燥器中保存；

S2取试料0.5 g（精确至0.001g），于10 mL离心管内，依次加入混合内标工作液25μL、 0.1 mol/L盐酸溶液5 mL，涡旋混匀。于60 ℃水浴中水解4 h，7000 r/min离心10 min，取上清液备用；

S3向EMR-Lipids净化管中加入5mL超纯水，涡旋10s，弃去水，将全部上清液加至EMR-Lipids净化管中，加入50mgGCB，涡旋1min，得到净的提取物上清液，然后在4℃、9000r/min条件下离心10min，得到净化的上清溶液；过0.22μm微孔滤膜，得到待测样品溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。

对比例1

毛发中样品的处理步骤同实施例1，区别在于，S2水解过程中不使用盐酸溶液，而使用碱溶液，同等条件下前处理上分析仪器，结果发现碱溶液水解后，测得药物回收率低，经查阅文献发现，碱溶液虽然能够充分水解毛发，但碱溶液极易造成药物降解损失，本发明采用盐酸溶液提取后回收率明显高，准确度高。

对比例2

毛发中样品的处理步骤同实施例1，区别在于，S3不选取EMR-Lipids净化管和GCB净化剂，而选用常规的固相萃取柱，比较常用的C₁₈、HLB、MAX、WCX固相萃取柱，但经过比较过柱时间长，回收率明显偏低。其中MCX回收率稳定，克服传统硅胶基质混合型固相萃取吸附剂的局限性，但同等处理条件下，需要试剂种类多，过程繁琐，使用EMR-Lipids净化管和GCB净化剂明显对脂质类物质和色素作用效果明显，目标药物的准确度和灵敏度高，线性关系好。

以上所述仅为本申请的一部分实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的

技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何

修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims

1.一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，其包括：

S1 将动物毛发样品进行处理和制备，选取、清洗、干燥、研磨，制备待测样品；

S2 将待测样品进行提取处理，待测样品与盐酸溶液进行混合，得到混合溶液，水浴水解，离心后上清液备用；

2.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，所述动物毛发为猪、牛和羊的毛发。

3.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，所述β-受体激动剂类药物为克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，步骤S1包括：

其中，动物毛发选取脖颈处皮肤的毛发，十二烷基磺酸钠溶液的浓度为0.01g/ml，体积为20 mL ，超声清洗时间为30 min，电热干燥箱温度为 40 ℃，称取试样选择精度为0.001g的天平，试样保存温度为-18℃。

5.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，步骤S2所述的提取过程为：

其中，所述盐酸溶液浓度为0.1mol/L，盐酸溶液体积为5 mL，水浴温度为60℃，水解时间为4h，离心温度为4℃，离心转速为7000 r/min，离心时间为10min。

6.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药残留检测的处理方法，其特征在于，S3所述的净化过程为：

S33将净化混合溶液进行离心处理，得到净化的提取物上清液，过滤膜后得到待测溶液；

其中，净化管为EMR-Lipids净化管，净化剂为GCB，滤膜孔径为0.22 μm。

7.一种动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法，其特征在于，其包括：

按照权利要求1-6中所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的处理方法处理所述动物毛发样品，将待测溶液注入高效液相色谱-串联质谱仪进行检测，所述液相色谱串联质谱联用法采用多反应监测模式对目标化合物的进行监测，以化合物保留时间、母离子/子离子特征离子对目标药物的碎片离子进行定性和定量分析。

8.根据权利要求7所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法，其特征在于，液相色谱条件为：

b) 柱温：40 ℃;

c) 进样量：10 μL;

d) 流动相：A：乙腈,B：0.1%甲酸溶液。

9.根据权利要求7所述的动物毛发样品中β-受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法，其特征在于，质谱条件为：

a) 电离方式：电喷雾电离，正离子模式（ESI+）；

b) 检测方式：多反应监测（MRM）；

c) 电离电压：3.00kv ；源温：150 ；雾化温度：400 ；雾化气流速：800L/hr ；锥孔气流速：150L/hr。

10.一种如权利要求7~9任一项所述的动物毛发中β-受体激动剂类药物残留的确认检测方法在检测克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗中的应用。