CN114957401B - 一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用。本发明提供的肽类化合物的结构式如式1所示，是从海洋真菌Penicillium sp.JX‑2‑1的发酵液中分离获得的肽类化合物。本发明提供的肽类化合物，对多种肠道微生物在内的革兰阳性及阴性细菌均有较强的杀灭作用，可用于饲料添加剂，应用前景广阔。

Description

一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及饲料添加剂技术领域，特别涉及一种海洋真菌来源的肽类化合物及其制备方法与应用。
背景技术
腹泻是畜禽养殖过程中最常见的一类疾病，其主要原因是机体受到细菌(大肠杆菌、沙门氏菌等)、病毒(流行性腹泻、轮状病毒等)的感染而引起的。目前，主要治疗方法是使用抗生素直接或间接抑制或杀灭病原(细菌或病毒)。
为实现畜禽养殖行业的健康发展，动物营养学家将目光转向饲料添加剂--无抗饲料。饲料添加剂是为满足特殊需要而加入饲料中的少量或微量营养性或非营养性物质。其主要作用功能：一是抗菌、保健，提高存活率；二是促生长、增产量、提高饲料转换效率。
目前，国内对于饲料添加剂主要研究集中于替代抗生素抗菌作用及促生长作用，包括中药植物提取物、益生菌等。但存在药效远远低于抗生素，导致经济成本高；存在品种稀少，产品粗糙；大量高效、低毒、无残留的饲料添加剂全靠进口等缺点。
抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，拥有广谱的抗细菌活性，高效的抗真菌、病毒和原虫的活性，分子量小、热稳定性好(高温水煮不变性)，不易产生抗药性等优点。由于其作为饲料添加剂的众多优点，吸引着众多动物营养学家的目光，最希望替代抗生素的产品之一。
目前，针对畜禽腹泻类肠道疾病主要治疗方法是使用抗生素，直接或间接抑制或杀灭病原。但长期应用抗生素，能使某些菌株发生耐药性变异并传递耐药因子，给用这些药物预防和治疗动物疾病带来困难，并造成药物在动物体内蓄积，畜禽产品中的药物残留将对人类健康产生危害。
发明内容
针对现有技术中存在的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种海洋真菌来源的肽类化合物。
本发明的另一目的在于提供上述海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述海洋真菌来源的肽类化合物的应用。
一种海洋真菌来源的肽类化合物，所述肽类化合物的结构式如式1所示：
Figure BDA0002920905530000021
所述肽类化合物是从海洋真菌Penicillium sp.JX-2-1的发酵液中分离获得的；海洋真菌Penicillium sp.JX-2-1于2019年1月10日保藏在位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC 60525，并于2019年05月28日公开的中国发明专利申请201910045112.1中公开过。
上述海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，包括如下操作步骤：
S1.将海洋真菌Penicillium sp.JX-2-1接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；
S2.将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养，获得发酵产物；
S3.将发酵产物过滤得到菌体，菌体用甲醇提取三次，浓缩提取液得到浸膏，，再采用柱层析分离技术，得到结构式如式Ⅰ所示的肽类化合物。
优选地，步骤S1中所述种子培养基平均每升包括以下组分：马铃薯300克，葡萄糖20克，氯化钠33.3克，水1L。
优选地，步骤S1中所述摇床培养的条件为摇床转速200rpm，25～30℃培养3～7天。
优选地，步骤S2中所述发酵培养基平均每升包括以下组分：胰蛋白胨10克；酵母提取物5克；氯化钠33.3克，水1L。
优选地，步骤S2中所述静置培养的条件为25～30℃静置25～50天。
优选地，步骤S3中所述柱层析分离技术包括硅胶柱层析、凝胶柱层析和C-18反相柱层析。
优选地，步骤S3中所述柱层析分离的具体操作为：
(i)将浓缩后所得浸膏用硅胶柱进行柱层析分离，分别以乙酸乙酯的体积分数为3％、40％、75％、100％的乙酸乙酯-石油醚为洗脱剂进行梯度洗脱；
(ii)收集步骤(i)中的40％洗脱液，再用C-18反相柱进行柱层析分离，以甲醇的体积分数为75％的甲醇-水为洗脱剂进行洗脱；
(iii)收集步骤(ii)中的洗脱液，再以葡聚糖Sephadex LH-20凝胶柱进行层析分离，以体积比为2:1的甲醇-氯仿为洗脱剂进行洗脱；
(iv)收集步骤(iii)中的洗脱液，再用硅胶柱进行柱层析分离，以乙酸乙酯的体积分数为30％的乙酸乙酯-石油醚为洗脱剂进行洗脱，获得化合物1。
上述海洋真菌来源的肽类化合物在制备抗菌药物中的应用。
优选地，所述的菌包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；
所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的一种或多种组合；
所述的革兰氏阴性菌为大肠杆菌(Escherchia coli)、沙门菌(Salmonellaenteritidis)、副伤寒沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、志贺氏菌(Shigelladysenteria)、副溶血性狐菌(Vibrio parahaemolyticus)中的一种或多种组合。
优选地，所述的金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌ATCC 6538。
所述的大肠杆菌为大肠杆菌CICC 10389。
所述的绿脓杆菌为绿脓杆菌ATCC 14442。
所述的沙门菌为沙门菌CICC 21482。
所述的副伤寒沙门氏菌为副伤寒沙门氏菌ATCC 13076。
所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌ATCC 6633。
上述海洋真菌来源的肽类化合物作为饲料添加剂的应用。
本发明相较于现有技术具有如下有益效果：
本发明提供的海洋真菌来源的新型肽类化合物，对肠道微生物中的多种革兰阳性及阴性细菌均有较强的杀灭作用，可用于饲料添加剂，应用前景广阔。
本发明提供的海洋真菌来源的新型肽类化合物，是一种具有生物活性的小分子多肽，拥有的抗细菌活性，分子量小、热稳定性好(高温水煮不变性)，不易产生抗药性等优点。
本发明还提供了海洋真菌来源的新型肽类化合物的制备方法，该方法反应条件温和，副产物少，收率高，成本低。其制备原料可以来源于海洋真菌，海洋真菌种类繁多、数量庞大，从真菌提取的方法简单，使得所述新型肽类化合物的来源丰富、稳定、成本低廉。
附图说明
图1为本发明提供的肽类化合物的结构式示意图。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。
实施例1：真菌Penicillium sp.JX-2-1的分离与鉴定
1、材料：从广州市南沙区海滨公园采集的红树林海桑树叶子的内生真菌样品。
2、经过菌株的培养、分离、鉴定，获得纯的内生真菌菌株，经过鉴定为青霉真菌Penicillium sp.JX-2-1。青霉真菌Penicillium sp.JX-2-1于2019年1月10日保藏在位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC 60525，分类命名为Penicillium sp.。
实施例2：新型肽类化合物的制备
1、从青霉真菌Penicillium sp.JX-2-1代谢产物中分离制备新型肽类化合物，步骤如下：
(1)青霉真菌Penicillium sp.JX-2-1的种子培养：
种子培养基组成：马铃薯300克，葡萄糖20克，氯化钠33.3克，水1L(具体制作方法：将300克马铃薯洗净，去皮，切碎放入锅中，加入1000mL水，煮沸20～30分钟左右至马铃薯软而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至1000mL，加入葡萄糖20克，氯化钠33.3克，溶解摇匀)。
培养基经高温灭菌后，用接种环挑取菌株接入，25℃恒温摇床培养3天，得种子培养液。
(2)青霉真菌Penicillium sp.JX-2-1的发酵培养：
发酵培养基配方为胰蛋白胨10g；酵母提取物5克，氯化钠33.3克，加入1L去离子水搅拌至完全溶解，分装到500ml三角瓶中，121℃高温高压灭菌20min。
将种子液中的菌株转接入装好培养基的三角瓶中，接种量为8ml，始终控制温度25～30℃，培养时间25～50天。
(3)将上述培养好的真菌菌丝用甲醇提取三次，浓缩提取液，将获得的浓缩浸膏利用柱层析色谱分离，分离时分别用3％、40％、75％、100％的乙酸乙酯-石油醚梯度洗脱，将40％的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱液合并收集；收集到的40％洗脱液，再用C-18反相柱进行柱层析分离，以甲醇的体积分数为75％的甲醇-水为洗脱剂进行洗脱；收集碘化铋钾生物碱显色剂(碱式硝酸铋0.85g，冰醋酸10ml，水40ml)显示阳性反应的洗脱液，再以葡聚糖Sephadex LH-20凝胶柱进行层析分离，以体积比为2:1的甲醇-氯仿为洗脱剂进行洗脱；再用硅胶柱进行柱层析分离，以乙酸乙酯的体积分数为30％的乙酸乙酯-石油醚为洗脱剂进行洗脱，获得化合物1。
2、化合物1的结构测试解析
对上述得到的化合物1进行结构测试解析，得到以下试验数据：
化合物1：C34H51N6O6，白色粉末，HR-ESI-MS m/z 639.3881(理论计算值639.3883)。一维核磁共振数据:1H NMR 0.89(d,J＝5.8,3H,16,17),0.94(d,J＝7.0,3H,11),0.97(d,J＝6.4,6H,17,25),0.99(d,J＝6.5,3H,26),1.06(d,J＝7.0,3H,10,11),1.29(d,J＝7.3,3H,20),1.50–1.69(m,1H,24,31β),1.74–1.80(m,2H,14β,15),1.94(ddd,J＝14.2,9.0,5.1,1H,23β),1.98–2.05(m,1H,14α,30β),2.05–2.12(m,2H,30α,31α),2.20(ddd,J＝14.1,9.1,4.7,1H,23α),2.69(td,J＝7.0,3.3,1H,9),3.16(t,J＝12.7,1H,33β),3.20(s,3H,27),3.48(dd,J＝9.0,4.7,1H,22),3.69(dd,J＝11.4,2.6,1H,29),4.14(d,J＝13.5,1H,33α),4.32(dd,J＝7.3,3.2,1H,8),4.54–4.60(m,1H,13),4.82(dt,J＝9.3,7.2,1H,19),7.12(dd,J＝8.0,6.9,1H,5),7.19(dd,J＝7.7,1.6,1H,6),7.42(d,J＝8.4,1H,12NH),7.46(t,J＝8.2,1H,4),7.63(d,J＝9.7,1H,21NH),8.00(d,J＝7.9,1H,18NH),8.30(d,J＝8.3,1H,3),9.41(s,1H,7NH)；13C NMR 16.3(11),18.6(20),19.9(10),21.9(16),22.2(26),23.3(17),23.5(25),24.6(31),24.6(15),25.7(24),27.5(32),28.3(30),30.1(9),36.4(14),37.9(23),38.0(27),48.0(19),51.1(13),52.7(33),59.4(8),61.7(29),65.3(22),122.9(1),123.4(5),124.1(3),127.2(6),131.8(4),137.2(2),169.0(28),169.4(21),170.3(34),170.8(7),174.3(12),174.4(18)。
经过鉴定，化合物1为新型肽类化合物，其结构式如下式1所示：
Figure BDA0002920905530000051
实施例3：新型肽类化合物的抑菌实验
化合物1对细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门菌、副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、志贺氏菌、副溶血性狐菌)进行抑制活性实验：
1.材料：
培养基：葡萄糖蛋白胨培养基(蛋白胨5.0g；葡萄糖20.0g；酵母浸粉2.5g；磷酸氢二钾1.0g；MgSO4.7H2O 0.5g；琼脂0.4g；去离子水1L)；
样品：化合物1溶液(0.1mg/ml，1mg/ml，10mg/ml)；山梨酸溶液(0.1mg/ml，10mg/ml，50mg/ml，100mg/ml)；
菌种：细菌(金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureus ATCC 6538、大肠杆菌Escherchia coli，CICC 10389、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 14442、沙门菌Salmonella enteritidis，CICC 21482、副伤寒沙门氏菌Salmonella enteritidis ATCC13076、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ATCC 6633、志贺氏菌Shigella dysenteria、副溶血性狐菌Vibrio parahaemolyticus，以上菌株均来源于美国典型生物资源保藏中心(ATCC)或中国工业微生物菌种保藏中心(CICC))；
其它实验器具：生物安全柜，微量移液枪，37摄氏度恒温箱，27摄氏度恒温箱等。
阳性对照化合物：山梨酸
2.试验方法
本试验采用琼脂稀释法将不同浓度的化合物混合溶解在琼脂培养基中，然后点种细菌，通过细菌的生长与否，确定化合物抑制受试菌生长的最低浓度，即最小抑菌浓度(MIC)。菌落生长被完全抑制的最低抑菌浓度为该样品对受试菌的MIC。具体操作如下：
用微量移液器取2μl(含菌量约为107cfu/ml)菌悬液点均种于不含抑菌剂、单倍浓度化合物1的MH琼脂平板(培养基配方：牛肉粉6.0g；可溶性淀粉1.5g；酸水解酪蛋白17.5g；琼脂17.0g)和SDA平板(麦芽糖40g；蛋白胨10g；琼脂20g；去离子水1L)，作为样品组。
用微量移液器取2μl(含菌量约为107cfu/ml)菌悬液点均种于不含抑菌剂、单倍浓度山梨酸的MH琼脂平板(培养基配方：牛肉粉6.0g；可溶性淀粉1.5g；酸水解酪蛋白17.5g；琼脂17.0g)和SDA平板(麦芽糖40g；蛋白胨10g；琼脂20g；去离子水1L)，作为阳性对照。
将接种后的细菌平板放置37℃培养箱中，倒置培养24h，观察结果。
3.试验结果
结果如表1所示。结果显示测得化合物1对抑菌具有显著活性，且明显优于山梨酸的活性，可用于制备新型饲料添加剂。
表1抑菌试验结果(MIC50，mg/ml)
Figure BDA0002920905530000061
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：所述肽类化合物的结构式如式1所示
Figure QLYQS_1
式1；
所述的制备方法包括如下操作步骤：
S1.将海洋真菌Penicillium sp. JX-2-1接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；
S2.将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养，获得发酵产物；
S3.将发酵产物过滤得到菌体，菌体用甲醇提取三次，浓缩提取液得到浸膏，再采用柱层析分离技术，得到结构式如式Ⅰ所示的肽类化合物；
步骤S3中所述柱层析分离的具体操作为：
（
Figure QLYQS_2
）将浓缩后所得浸膏用硅胶柱进行柱层析分离，分别以乙酸乙酯的体积分数为3%、40%、75%、100%的乙酸乙酯-石油醚为洗脱剂进行梯度洗脱；
（
Figure QLYQS_3
）收集步骤（
Figure QLYQS_4
）中的40%洗脱液，再用C-18反相柱进行柱层析分离，以甲醇的体积分数为75%的甲醇-水为洗脱剂进行洗脱；
（
Figure QLYQS_5
）收集步骤（
Figure QLYQS_6
）中的洗脱液，再以葡聚糖Sephadex LH-20凝胶柱进行层析分离，以体积比为2:1的甲醇-氯仿为洗脱剂进行洗脱；
（
Figure QLYQS_7
）收集步骤（
Figure QLYQS_8
）中的洗脱液，再用硅胶柱进行柱层析分离，以乙酸乙酯的体积分数为30%的乙酸乙酯-石油醚为洗脱剂进行洗脱，获得目标产物。
2.根据权利要求1所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述种子培养液平均每升包括以下组分：马铃薯300克，葡萄糖20克，氯化钠33.3克，水1L；
步骤S2中所述发酵培养基平均每升包括以下组分：胰蛋白胨10克，酵母提取物5克，氯化钠33.3克，水1L。
3.根据权利要求1所述的海洋真菌来源的肽类化合物的制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述摇床培养的条件为摇床转速200 rpm，25～30℃培养3～7天；
步骤S2中所述静置培养的条件为25～30℃静置25～50天。
4.一种海洋真菌来源的肽类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述肽类化合物的结构式如式1所示
Figure QLYQS_9
式1；
所述的菌为如下菌中的一种或多种组合：金黄色葡萄球菌Staphyloccocus aureusATCC 6538、大肠杆菌Escherchia coli，CICC 10389、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosaATCC 14442、沙门菌Salmonella enteritidis，CICC 21482、副伤寒沙门氏菌Salmonellaenteritidis ATCC 13076、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ATCC 6633、志贺氏菌Shigella dysenteria、副溶血性狐菌Vibrio parahaemolyticus。
5.一种海洋真菌来源的肽类化合物在制备饲料添加剂中的应用，其特征在于：所述肽类化合物的结构式如式1所示
Figure QLYQS_10
式1。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1121297A (ja) * 1997-06-27 1999-01-26 Meiji Seika Kaisha Ltd 新規環状ペプチドｐｆ１１７１ａ物質，ｐｆ１１７１ｂ物質，ｐｆ１１７１ｃ物質，ｐｆ１１７１ｄ物質またはｐｆ１１７１ｅ物質およびその製造法
WO2011095082A1 (zh) * 2010-02-08 2011-08-11 华东理工大学 环脂肽化合物及其制备和应用
CN102516368A (zh) * 2011-12-21 2012-06-27 中国科学院南海海洋研究所 环七肽类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN109776550A (zh) * 2019-01-17 2019-05-21 广东轻工职业技术学院 一种海洋真菌来源的新型生物碱化合物及其在制备食品防腐剂中的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1121297A (ja) * 1997-06-27 1999-01-26 Meiji Seika Kaisha Ltd 新規環状ペプチドｐｆ１１７１ａ物質，ｐｆ１１７１ｂ物質，ｐｆ１１７１ｃ物質，ｐｆ１１７１ｄ物質またはｐｆ１１７１ｅ物質およびその製造法
WO2011095082A1 (zh) * 2010-02-08 2011-08-11 华东理工大学 环脂肽化合物及其制备和应用
CN102516368A (zh) * 2011-12-21 2012-06-27 中国科学院南海海洋研究所 环七肽类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN109776550A (zh) * 2019-01-17 2019-05-21 广东轻工职业技术学院 一种海洋真菌来源的新型生物碱化合物及其在制备食品防腐剂中的应用

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